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Mecnica nucleares y Mecanotransduccin en Salud y Enfermedad

Abstracto
El ncleo es la caracterstica definitoria de las clulas eucariotas y, a menudo
representa la mayor orgnulo. Durante la ltima dcada, se ha hecho evidente
que el ncleo est estrechamente integrado en la red estructural de la clula a
travs de la llamada LINC (Enlazador de los nucleoesqueleto y el citoesqueleto)
complejos, que permiten la transmisin de fuerzas entre el ncleo y el
citoesqueleto. Esta conexin fsica entre el ncleo y el citoesqueleto es esencial
para una amplia gama de funciones celulares, incluyendo el movimiento
intracelular nuclear y posicionamiento, la organizacin del citoesqueleto, la
polarizacin celular y la migracin celular. Informes recientes indican adems
que las fuerzas transmitidas desde la matriz extracelular al ncleo a travs de
ellos citoesqueleto tambin pueden contribuir directamente a la capacidad de
la clula para probar su entorno mecnico mediante la activacin de los
cambios inducidos por la fuerza-en estructuras nucleares. Adems, est
emergiendo que las propiedades fsicas del ncleo juegan un papel crucial
durante la migracin de clulas en tres dimensiones ambientes (3-D), donde
las clulas a menudo tienen que trnsito a travs de constricciones estrechas
menor que el dimetro nuclear, como por ejemplo, durante el desarrollo, la
curacin de heridas, o la metstasis del cncer. En esta revisin, se
proporciona una breve descripcin de cmo las protenas y las laminas
complejos LINC facilitar el acoplamiento ncleo-citoesqueleto, resaltar los
hallazgos recientes sobre el papel del ncleo en mechanotransduction celular y
la motilidad celular en entornos 3-D, y discutir cmo las mutaciones y / o los
cambios en la expresin de estas protenas de la envoltura nuclear puede dar
lugar a una amplia gama de enfermedades humanas, incluyendo la distrofia
muscular, la cardiomiopata dilatada, y envejecimiento prematuro.
Introduccin
Mecanotransduccin define el proceso por el cual las clulas `traducir
'estmulos mecnicos en seales bioqumicas, lo que permite las clulas para
detectar su ambiente fsico y ajustar su estructura y funcin en consecuencia.
Mientras mechanotransduction se estudi por primera vez en las clulas
sensoriales especializadas, tales como las clulas ciliadas internas involucrados
en la audicin, ahora sabemos que prcticamente todas las clulas responden
a la estimulacin mecnica. Un creciente cuerpo de trabajo durante las ltimas
dos dcadas sugiere que en lugar de depender de un solo centro de
`MechanoSensor ', las clulas utilizan una variedad de elementos
mechanosensitive, que van desde los canales inicos activados por
estiramiento en la membrana plasmtica, cambios conformacionales en
protenas en las adhesiones focales y dentro del citoesqueleto a la fuerza
inducida por el desdoblamiento de las protenas de la matriz extracelular, para
detectar appliedforces y la rigidez del sustrato [1-3]. Hallazgos recientes han
alimentado an ms la especulacin de que el propio ncleo puede actuar
como un MechanoSensor celular, sin pasar por mecano-sealizacin basado

difusin a travs del citoplasma de modular directamente la expresin de


genes mechanosensitive [3].
Un papel central en este proceso se ha atribuido a las laminas, Tipo V
filamentos intermedios nucleares que constituyen los componentes principales
de la lmina nuclear, una red de protenas densa subyacente a la membrana
nuclear interna, y que tambin forman estructuras estables dentro del
nucleoplasma [4]. Las laminas se pueden separar en de tipo A y de tipo B
laminas, con las laminas A y C como las principales isoformas de tipo A, y
lamininas B1 y B2, las principales isoformas de tipo B en clulas somticas [4].
Las laminas interactan con una variedad de protenas de la envoltura nuclear,
incluyendo emerin, receptor lamin B (LBR), y el nesprin y familias de protenas
SUN [5], as como numerosos reguladores transcripcionales [4, 5]. Las laminas
tambin pueden interactuar directamente con la cromatina [6] y la ayuda de
sujecin regiones de cromatina especficos conocidos como dominios de
lmina-asociado (los LADs) a la periferia nuclear [7]; prdida de resultados
lamininas en los cambios en la organizacin de la cromatina, incluyendo la
prdida de la heterocromatina perifrica [8]. Las laminas, en particular, las
laminas A y C, proporcionan soporte estructural al ncleo [9, 10] y
desempean un papel importante en la conexin fsica del ncleo al
citoesqueleto, permitiendo de ese modo las fuerzas a transmitir desde el
citoesqueleto y la matriz extracelular al interior nuclear [11-14].
Las laminas son una parte ampliada de la LINC (Enlazador de nucleoesqueleto
y el citoesqueleto) complejo [15], que permite la transmisin de la fuerza a
travs de la envoltura nuclear. El complejo en s LINC se compone de dos
familias de protenas, protenas de sol en la membrana nuclear interna y KASHdominio que contiene protenas en la membrana nuclear externa, que se
acoplan a travs del espacio luminal a travs de sus dominios conservados
SUN y KASH (Fig. 1). protenas SUN interactan con la lmina nuclear, las
protenas de poro nucleares y otras protenas nucleares en el interior nuclear;
en el citoplasma, KASH-dominio que contiene protenas se puede unir a todas
las principales redes de filamentos del citoesqueleto, incluyendo los filamentos
de actina (a travs del dominio de unin a actina de las isoformas gigantes de
nesprins -1 y-2), filamentos intermedios (a travs de la interaccin de nesprin-3
con la plectina citoesqueleto enlazador), y los microtbulos (a travs de
protenas kinesin y de motor dinena de unin a nesprins-1, -2, -4 y KASH5)
[16]. Remitimos al lector a excelentes crticas recientes en cuanto a la
organizacin molecular detallada del LINC complejo [16], su historia evolutiva
conservada [17], y el papel diverso de laminas y otras protenas de la envoltura
nuclear en otras funciones celulares [18].

La importancia de la mecnica nucleares y acoplamiento ncleo-citoesqueleto


en la funcin celular se ha convertido sorprendentemente evidente durante la
ltima dcada por la identificacin de un nmero creciente de enfermedades
que resultan de mutaciones en las laminas y componentes complejos LINC. En

particular, las mutaciones en el gen LMNA, que codifica la envoltura nuclear


protenas lamina A y C, causan una variedad de enfermedades humanas
(laminopathies) que incluyen la distrofia de Emery-Dreifuss muscular,
miocardiopata dilatada, la distrofia muscular del anillo seo, y la progeria
Hutchinson-Gilford sndrome [18]. Para muchas de estas enfermedades, el
mecanismo de la enfermedad molecular se conoce por completo, pero los
informes recientes demuestran que las mutaciones en las laminas A / C puede
interrumpir LINC funcin compleja y causar defectos en el msculo esqueltico
y cardaco [16, 19, 20]. Adems de su papel en las clulas del msculo y el
tejido, de acoplamiento adecuado ncleo-citoesqueleto es tambin esencial en
la migracin celular, por ejemplo, durante la cicatrizacin de heridas, la
inflamacin, la metstasis del cncer, y desarrollo [13, 16, 21]. Se requieren
fuerzas citoesqueleto de posicionar dinmicamente el ncleo durante la
migracin en sustratos 2-D [21]. En entornos 3-D, la clula y el ncleo se
enfrentan a desafos adicionales, como la red de la matriz extracelular fibroso
denso y apretado espacios intersticiales a menudo crean constricciones ms
pequeas que el tamao del ncleo, de modo que la deformacin del ncleo
tpicamente grandes y relativamente rgido puede convertirse un paso
limitante de la velocidad [22].
A continuacin, ofrecemos una visin general de los conocimientos actuales
sobre el papel del ncleo y la envoltura nuclear y en la sealizacin
mechanosensing mechanotransduction celular y discutir cmo los cambios en
la estructura nuclear y perturbado ncleo-citoesqueleto de acoplamiento
pueden contribuir a la enfermedad humana. Concluimos con un breve
panorama en nuevas direcciones en este campo de investigacin apasionante
y cmo mejorar la visin en el acoplamiento del ncleo-citoesqueleto y
mechanosensing nuclear eventualmente puede apuntar a nuevos enfoques
teraputicos para las diversas envelopathies nucleares.
El papel del ncleo en mechanotransduction

En su definicin literal, mechanotransduction se refiere slo a los procesos


celulares inmediatos en los que los estmulos mecnicos son transducidas en
seales bioqumicas; sin embargo, el trmino se aplica a menudo
mechanotransduction ms ampliamente para describir la respuesta celular en
general a los cambios en su entorno mecnico, por ejemplo, la activacin de
genes o cambios en la estructura y organizacin celular especficos. En lo que
sigue, se utiliza el trmino `mechanosensing 'para describir los eventos que
inician mechanotransduction, mientras que denota la sealizacin aguas abajo
y los cambios en la expresin gnica como` mechanotransduction de
sealizacin'.

Dado el papel central del ncleo en la regulacin transcripcional, se ha


especulado mucho tiempo que el ncleo podra actuar como un

MechanoSensor celular que puede modular directamente la expresin de genes


en respuesta a perturbaciones mecnicas. Est bien establecido que las
fuerzas externas aplicadas a una clula se transmiten desde la membrana
plasmtica a travs del citoesqueleto al ncleo, dando como resultado (intra)
deformaciones nucleares [23-25]. Estas deformaciones pueden alterar la
estructura de la cromatina o inducir cambios conformacionales en las protenas
nucleares, por ejemplo, liberacin de reguladores transcripcionales o la
translocacin de los segmentos de la cromatina lejos de las regiones
transcripcionalmente represivas, activando de este modo (o represora) genes
mechanosensitive (Fig. 2). El apoyo a esta idea proviene de tres estudios
recientes. Dahl et al [26] encontr que la tensin de cizallamiento del fluido y
el aumento de la aplicacin de tensin a la compresin intranuclear
movimiento de protenas de fusin fluorescentes de unin al ADN ribosomal y
ARN en un nmero de lneas celulares, lo que indica que las fuerzas aplicadas
externamente de hecho pueden alterar organizacin de la cromatina y la
accesibilidad. Yendo un paso ms all, Wang y compaeros de trabajo [27]
inform de que la aplicacin de fuerzas nanonewton aproximadamente a la
superficie de las clulas HeLa mediante microesferas resultados magnticos de
disociacin rpida (menos de 1 s) de las dos principales protenas estructurales
del cuerpo Cajal, coilin y SMN (protena de la supervivencia de neuronas
motoras), y que la alteracin del citoesqueleto de actina o el agotamiento de
las laminas A / C suprime esta respuesta. Ms recientemente, Discher y colegas
[28] revel un mecanismo adicional por el cual la deformacin nuclear inducida
fuerza podra iniciar respuestas bioqumicas, centrndose en el papel de las
lminas nucleares. La aplicacin de la tensin de cizallamiento de fluido a
ncleos aislados caus el dominio de Ig de la lamina A se despliegue, la
exposicin de un residuo de cistena previamente enterrada [28]. Si bien estos
resultados indican que la lmina nuclear podra funcionar como un sensor de
fuerza nuclear, en su estudio, los autores no observaron ningn cistenas
expuestas en clulas intactas, lo que puede indicar que las fuerzas que actan
sobre el ncleo en condiciones fisiolgicas no son suficientes para causar
( parcial) desplegamiento de la protena. Por otra parte, queda por ver si algn
parcial despliegue de las laminas podra alterar la interaccin con sus diversas
parejas de unin para iniciar nuevos cambios en la regulacin transcripcional.
Curiosamente, el mismo estudio tambin investig el nivel de expresin y la
fosforilacin de estado de las laminas en respuesta a cambios en el entorno
mecnico celular, revelando que la expresin de las laminas A y C (en relacin
con las laminas de tipo B) se escala con la rigidez sustrato in vitro y in vivo
[28]. Adems, los sustratos ms blandos, que corresponden a la reduccin de
la tensin del citoesqueleto, se asociaron con niveles ms altos de lamin A / C
fosforilacin [28], indicativo de una red lamin ms soluble y mecnicamente
ms dbil. Como las laminas A y C son los principales contribuyentes a la
rigidez nuclear y la estabilidad, es fcilmente concebible que cellsadapt la
expresin y la organizacin de las laminas a su entorno mecnico, por ejemplo,
dando como resultado altos niveles de las laminas A / C en los tejidos
estresados mecnicamente tales como msculo esqueltico y cardaco y los

niveles bajos de las laminas a / C en el cerebro o el tejido adiposo,


normalizando de ese modo la tensin mecnica que acta sobre la red lamin.
Sin embargo, en el momento actual, queda por ver si esta correlacin
intrigante es causada por una funcin directa de las laminas en
mechanosensing y un circuito de retroalimentacin correspondiente a controlar
los niveles de lamina, o si la regulacin transcripcional de las laminas en
respuesta al sustrato rigidez est aguas abajo de otras vas de sealizacin
mechanotransduction.

Discusin de (al menos en parte) en contra de la idea de que las deformaciones


nucleares inducidas son esenciales para mechanosensing celular y sealizacin
mechanotransduction es un estudio reciente que encontr que la interrupcin
de protenas complejas LINC por nesprin dominante negativo y dom construye
suprime casi completamente la deformacin nuclear cuando se someten
clulas al sustrato de deformacin, sin embargo, los genes mechanoresponsive
probados por los autores se activa normalmente [24]. Si bien estos
experimentos no excluyen la posibilidad de que existan algunos genes
mechanosensitive que responden directamente a la deformacin nuclear, que
sugiere que mechanosensors en la membrana plasmtica y / o el citoesqueleto
pueden ser suficientes para iniciar vas mechanotransduction que se
transmiten a continuacin, a travs de seales bioqumicas para el ncleo .

Por otra parte, las protenas de la envoltura nuclear, sin duda, juegan un papel
importante en la sealizacin celular mechanotransduction. LINC interrupcin
complejo perjudica la transmisin de fuerza intracelular del citoesqueleto al
ncleo, y al menos en mioblastos C2C12, LINC interrupcin complejo puede
interferir con la proliferacin tramo inducida por [29]. En las clulas
endoteliales, nesprins juegan un papel importante en la respuesta al estrs de
cizalla de fluidos, con agotamiento de nesprin-3 causando alteracin de la
morfologa celular y la alteracin de la polarizacin celular y la migracin en la
direccin del flujo de fluido [30]. cambios an ms dramtica se observan en
clulas que carecen de las laminas A / C o emerin, que padecen de trastornos
de activacin de genes mecano-sensible in vitro e in vivo [10, 31-33]. Los
detalles moleculares que subyacen a la activacin del factor de transcripcin
mechanosensitive MRTF-A deteriorados (factor de transcripcin-A-relacionados
miocardina, tambin conocido como MKL1 o MAL), se dilucidado recientemente
[32]. MRTF-A, que desempea un papel crtico en el desarrollo y la funcin
cardaca, es secuestrado normalmente en el citoplasma por la interaccin con
la actina monomrica; la estimulacin por estrs mecnico o suero induce el
ensamblaje de los filamentos de actina, lo que resulta en la liberacin de MRTFA y su translocacin al ncleo, donde sirve como co-activador para el factor de
transcripcin SRF (factor de respuesta a suero) para iniciar la expresin de
genes con un elemento de respuesta a suero (SRE) que incluyen vinculina,
actina, y SRF misma [34]. La actividad nuclear y exportacin de MRTF-A se

modulan adems por polimerizacin de actina nuclear [34, 35]. Desde emerin,
que puede unirse directamente actina y promover su polimerizacin [36],
requiere lamin A / C para su localizacin en la membrana nuclear interna, la
prdida funcional de las laminas A / C o emerin reduce la dinmica de actina
nucleares y del citoesqueleto y los resultados en la translocacin alteracin y la
activacin de MRTF-A [32], lo que demuestra cmo los cambios estructurales
mediadas por la lamina A / C y emerina pueden afectar la regulacin de genes.

Es importante destacar que las laminas y otras protenas implicadas en el


acoplamiento de ncleo-citoesqueleto tambin interactan directamente con la
cromatina y numerosos reguladores de la transcripcin, incluyendo la protena
retinoblastoma (pRb), c-Fos, y ERK1 / 2 para las laminas A / C, -catenina y
ERK1 / 2 para nesprin2, y -catenina, BAF, GCL y el empalme asociada a factor
de YT521-B para emerin [4, 5, 37]. Por consiguiente, los defectos en
mechanotransduction de sealizacin en la lamina A / C o emerin deficientes
en clulas tambin pueden atribuirse a la interaccin de las laminas o emerin
con estos moduladores de la transcripcin, en lugar de su papel en
acoplamiento ncleo-citoesqueleto y deformabilidad nuclear, aunque la
evidencia experimental ms que se necesita para distinguir entre estas
hiptesis (no mutuamente excluyentes).
Como estos resultados demuestran, la estructura nuclear y deformabilidad, as
como la transmisin de fuerza entre el citoesqueleto y el ncleo desempear
papeles cruciales en la activacin o modulacin de la sealizacin
mechanotransduction celular. Al mismo tiempo, la mecnica nucleares y
acoplamiento ncleo-citoesqueleto tambin pueden afectar directamente a
otras funciones celulares que requieren el movimiento fsico y el
posicionamiento / anclaje del ncleo dentro de la clula. Los ejemplos incluyen
la posicin hacia atrs nuclear en (la mayora) de clulas que migran, la
colocacin nuclear perifrica en las clulas musculares estriadas, o de la
posicin nuclear basal en las clulas madre asimtricamente dividiendo en su
nicho [16].
Posicionamiento nuclear en la migracin de clulas 2-D

Muchas clulas cultivadas sobre sustratos planos muestran una reorientacin


celular caracterstico (polarizacin) antes de iniciar la migracin [38]. los
ensayos de cero de la herida revelan que durante el proceso de polarizacin, el
ncleo se mueve hacia atrs, lejos del borde de la herida, lo que resulta en el
centrosoma cntrico para ser colocado por delante del ncleo, hacia el borde
de la herida (Fig. 3). Este proceso requiere de acoplamiento ncleocitoesqueleto intacto, como la interrupcin o el agotamiento de las laminas
complejo LINC impide el movimiento hacia atrs nuclear [12, 21, 24].

Un estudio seminal por Luxton y colegas [21] revel que el reposicionamiento


nuclear durante la polarizacin celular es mediada por el acoplamiento del
ncleo de los cables de actina dorsal que- impulsados por Cdc42 y actinamiosina II interacciones se originan cerca de la cabecera de la clula y
movimiento hacia atrs, arrastrando con ello el ncleo hacia atrs (Fig. 3) [21].
Estos llamados (nuclear asociada a actina transmembrana) lneas de
bronceado estn formados por filamentos de actina, nesprin-2 gigante en la
membrana nuclear externa, y Sun2 en la membrana nuclear interna [21], y,
como se ha descubierto recientemente, SAMP1 [39]. La movilidad de nesprins
que forman parte de las lneas de bronceado es significativamente menor que
en otras partes del ncleo, lo que indica que son parte de un complejo estable
[21]. Esta formacin de complejos puede ser mediada por SAMP1, como
agotamiento de SAMP1 resulta en falla para volver a colocar el ncleo [39]. Del
mismo modo, cuando el complejo LINC es interrumpido por RNAi mediada por
el agotamiento de la lamina A o Sun2, las lneas de bronceado deriva a travs
de la envoltura nuclear sin llegar a ser suficientemente anclado, resultando en
la falta de movimiento nuclear y los defectos en la polarizacin celular y la
migracin [21]. En los ensayos de migracin de clulas individuales, LINC
interrupcin complejo provoca la migracin de velocidad reducida y la
disminucin de la persistencia de direccin [24], lo que demuestra an ms la
importancia de acoplamiento ncleo-citoesqueleto intacto. Remitimos al lector
a una revisin reciente [16] para una discusin ms detallada de acoplamiento
nucleocytoskeletal en la migracin celular en 2-D.

La migracin celular en entornos 3-D

La mayora de los ensayos in vitro de migracin se llevan a cabo en las


superficies 2-D; Por el contrario, la motilidad celular in vivo, por ejemplo, la
migracin celular durante el desarrollo temprano, la infiltracin de clulas
inmunes en sitios de infeccin, o la invasin de las clulas cancerosas en los
tejidos adyacentes-tiene lugar tpicamente en entornos 3-D. Un campo
emergente de la investigacin sugiere que la migracin celular en entornos 3-D
difiere sustancialmente de la migracin 2-D (discutido en [40]).
Deformabilidad nuclear como tasa de limitacin de paso en la
migracin celular en 3-D

Si bien gran parte de la investigacin en la migracin celular, tanto en 2-D y 3D entornos se ha centrado en los procesos en la vanguardia, en particular la
dinmica del citoesqueleto de actina, que es ahora cada vez ms evidente que
las propiedades mecnicas de la clula ncleo y su conexin con el
citoesqueleto desempean un papel esencial en 3-D de migracin [22, 41].
Cuando las clulas se encuentran con constricciones en el espacio intersticial
que son ms pequeos que su dimetro nuclear, las clulas o bien pueden

degradar proteolticamente la matriz extracelular de constriccin o intentar


pasar a travs de la abertura estrecha, lo que requiere la deformacin celular
sustancial. Durante la migracin no proteoltico, el citoesqueleto y plasma
altamente adaptable y dinmica membranecan penetran espacios de menos
de 1 micra de dimetro [22], pero el ncleo grande y rgido es mucho ms
resistente a grandes deformaciones e impone un paso limitante de la velocidad
durante la migracin a travs de constricciones estrechas [22, 42]. Los
resultados de estudios recientes con clulas que migran a travs de las
matrices de colgeno en 3D, filtros de policarbonato, o canales microfabricado
con tamaos de poro bien definidos demuestran que la disminucin del tamao
de los poros ms all de 20 micras reduce gradualmente la velocidad de
migracin [22, 43]. El movimiento del cuerpo de la clula y el ncleo puestos
completamente cuando se enfrentan a constricciones ms pequeo que ~ 10%
del dimetro nuclear inicial [22], lo que sugiere un lmite finito de la
compresibilidad del ncleo [22, 44].

Teniendo en cuenta el importante papel de las protenas de la envoltura


nuclear, en particular las laminas A y C, en la determinacin de la
deformabilidad nuclear, es intrigante especular sobre lo que la composicin
envoltura nuclear medida puede afectar a la migracin celular en entornos 3-D.
Las clulas que expresan una lamina A mutacin que aumenta la rigidez
nuclear [45, 46] tienen dificultades de navegacin a travs de 6 m de ancho
constricciones, a pesar de que tienen velocidades de migracin similares en
espacios confinados como las clulas de control [47]. Por el contrario, los
neutrfilos han evolucionado ncleos altamente lobuladas que carecen casi por
completo las laminas A / C, lo que los hace muy adecuado para pasar a travs
de los capilares estrechos y constricciones estrechas durante la extravasacin
y migracin intersticial [48]. La expresin ectpica de la lamina A en clulas
diferenciadas de neutrfilos causa ncleos redondos y un deterioro de la
capacidad de pasar a travs de las constricciones estrechas durante la
perfusin y la migracin [42], que ilustra adems la importancia de la
capacidad de deformacin nuclear en la motilidad celular 3-D.

Arrastrar o empujar? Cmo funciona el citoesqueleto mover el ncleo


durante la migracin 3-D?

La deformacin nuclear durante el paso de clulas a travs de constricciones


estrechas requiere fuerzas del citoesqueleto sustanciales que actan sobre el
ncleo. Uno puede imaginar varias posibilidades exclusivos no mutuos que
explican cmo las fuerzas podran aplicarse al ncleo para moverlo a travs de
constricciones estrechos. El citoesqueleto podra ejercer fuerzas desde la parte
frontal de clulas, que tira en el ncleo, o podra aplicar fuerzas contrctiles de
la parte trasera, empujando y apretando el ncleo a travs de la constriccin

(Fig. 4). fuerzas de traccin podran resultar de motores moleculares tales


como dinena unido a la superficie nuclear a travs de protenas complejas
LINC, moviendo el ncleo a lo largo de la red de microtbulos hacia el
centrosoma en el otro lado de la constriccin. interacciones actina-miosina
pueden ejercer fuerzas de contraccin entre las adhesiones focales basados
prospectivas y el lado nuclear anterior. Contribucin de fuerzas de traccin se
apoya en el hallazgo de que se requiere la integrina y la generacin de fuerza
actomyosin dependiente para la migracin de clulas no proteoltica a travs
de matrices densas de colgeno [22] y observaciones de las hernias de la
membrana nuclear en el borde anterior del ncleo en lamina B1 -mutant
neuronas durante la migracin y el desprendimiento de la cromatina de la
envoltura nuclear [49].

Al mismo tiempo, la contraccin generada actomyosin tambin puede servir


como la fuerza de empuje para el ncleo, como se ve en la migracin nuclear
interkinetic de las neuronas en la retina de pez cebra [50]. A diferencia de las
clulas de mamferos, donde el movimiento nuclear interkinetic est impulsado
principalmente por motores asociadas a los microtbulos [51], las neuronas de
pez cebra se basan en la actividad de la miosina II en la parte trasera del
ncleo para empujar el ncleo hacia adelante [50], lo que posiblemente refleja
en especies o celular de la forma diferencias dependientes [51]. Si bien no
msculo miosina-IIa est situado cerca del borde de ataque de las clulas [5254], no msculo miosina-IIb est presente en la red de actina que rodea el
ncleo [55]. La idea de una red contrctil que consiste en F-actina y miosina-II
en el lado y la parte trasera de la clula responsable de empujar el ncleo a
travs de la constriccin es consistente con los datos observados por Wolf et al.
[22] y apoyado por el hallazgo de que las clulas del cncer de mama en la
invasin de Matrigel andamios, basada en la contraccin del citoesqueleto de
actomiosina se limita a la parte posterior de las clulas, y la inhibicin de la
contraccin actomyosin suprime la invasin [56].
Como apretando el ncleo lleno de lquido desde la parte posterior puede
producir protuberancias nucleares similares en la constriccin como se espera
en un modelo de traccin (Fig. 4B), es difcil distinguir entre los dos modos
principales, es decir, tirar o empujar el ncleo a travs de la constriccin, por la
observacin de las deformaciones nuclear por s sola. Se necesita ms
investigacin para dilucidar los detalles moleculares implicados en la
superacin de la resistencia nuclear durante la migracin celular en entornos 3D. Es importante destacar que, an queda por ver en qu medida estos
procesos requieren acoplamiento ncleo-citoesqueleto a travs del complejo
LINC. Mientras que al menos un estudio inform de que la interrupcin LINC
complejo deteriora la migracin de las clulas en entornos 3-D [57], una red de
actomiosina contrctil en la parte trasera del ncleo no puede necesariamente
requerir funcin compleja LINC para transmitir fuerzas al ncleo. Adems, un
complejo mecanismo de posicionamiento nuclear independiente LINC se ha
observado en la migracin de los ncleos en los ovocitos de Drosophila, donde

los microtbulos de polimerizacin en la parte trasera del ncleo propulsan el


ncleo hacia adelante [58].

En vista de la creciente importancia de la mecnica nucleares durante la


migracin celular en entornos 3-D, es intrigante especular si las clulas son
capaces de ajustar dinmicamente las propiedades mecnicas del ncleo. Un
ejemplo de ajuste a largo plazo se puede ver durante la granulopoyesis,
cuando las clulas regulan negativamente la expresin de las laminas tiempo
que aumenta la expresin de LBR, resultando en ncleos altamente lobuladas y
deformables en los granulocitos que promueven paso a travs de espacios
reducidos [42, 59]. Dado el reciente hallazgo de los cambios en la expresin de
la lamina y la fosforilacin en respuesta al sustrato rigidez [28], que no es
demasiado descabellado imaginar que las clulas pueden reducir de forma
dinmica o despolimerizar la red lmina nuclear parcialmente para aumentar
transitoriamente deformabilidad nuclear, similar a la proceso de rotura de la
envuelta nuclear durante la mitosis. Alternativamente, las clulas podran
mejorar la migracin a travs de constricciones estrechas mediante el aumento
de la tensin del citoesqueleto, ejerciendo de este modo ms fuerzas en el
ncleo. Esto podra ser especialmente relevante en la propagacin de las
clulas cancerosas, como las clulas con mayor potencial metastsico han sido
recientemente presentados para generar mayores fuerzas del citoesqueleto
[60].

Enfermedades relacionadas con el complejo LINC

Dado el amplio papel de las funciones celulares que requieren acoplamiento


ncleo-citoesqueleto intacto, que no es ninguna sorpresa que las mutaciones
en las protenas complejas asociadas a LINC pueden dar lugar a un gran
nmero de enfermedades humanas (Tabla 1). La mayora de las enfermedades
son causadas por mutaciones en el gen LMNA, que codifica las laminas A / C.
Estos laminopathies van desde enfermedades altamente especfica de tejido
que afectan el msculo estriado, tejido adiposo o los nervios perifricos a
trastornos sistmicos e incluyen la distrofia de Emery-Dreifuss muscular,
distrofia muscular del anillo seo, miocardiopata dilatada, la lipodistrofia
familiar parcial, de Charcot-Marie-Tooth y la acelerado de envejecimiento
trastorno de Hutchinson-Gilford sndrome de progeria (revisado en [18]).
Curiosamente, las enfermedades que afectan el msculo estriado, es decir, la
distrofia muscular de Emery-Dreifuss y miocardiopata dilatada, pueden
tambin ser causados por mutaciones en emerin (STA o gen EMD), nesprin-1
(SYNE1), y nesprin-2 (SYNE2), lo que sugiere una mecanismo de la enfermedad
asociada al complejo LINC [16]. Adems de estos fenotipos musculares,
nesprin-1 mutaciones tambin son responsables de autosmica recesiva ataxia
cerebelosa [61] y artrogriposis [62], que se caracteriza por contracturas

articulares congnitas resultantes de los movimientos fetales reducidos. Las


mutaciones en nesprin-4, para el que la expresin se limita a las clulas
epiteliales secretoras y clulas ciliadas del odo interno [63], dan lugar a la
prdida de audicin de alta frecuencia progresiva, un fenotipo que puede ser
recapitulado en ratones que carecen ya sea nesprin-4 o Sun1 [64]. Por el
contrario, no hay mutaciones causantes de la enfermedad han sido reportados
para cualquiera de las protenas sol, a pesar de una nueva mutacin en Sun2
se ha descrito recientemente en un paciente con distrofia muscular de EmeryDreifuss, que tambin llevaba una mutacin en nesprin-11, que por s solo se
considera [65] no patgena. Curiosamente, el mismo estudio tambin identific
un paciente con distrofia muscular de Duchenne causada por una mutacin en
el gen de la distrofina (DMD) que lleva una mutacin nesprin-12, lo que
sugiere que las mutaciones en protenas complejas LINC pueden actuar como
genes modificadores en otras distrofias musculares. Las mutaciones y
duplicaciones de genes tambin se han descrito para las laminas de tipo B
[18]. La duplicacin de los resultados LMNB1 en leucodistrofia inicio adulto
[66], que se caracteriza por la desmielinizacin en el sistema nervioso central.
Las mutaciones en causas LMNB2 adquirieron lipodistrofia parcial, lo que
implica una prdida progresiva de tejido graso subcutneo [67, 68].

La etiologa de la enfermedad para el amplio espectro de envelopathies


nucleares se conoce por completo. las clulas del paciente se caracterizan a
menudo por la morfologa nuclear anormal y alteracin de la distribucin de las
protenas de la envoltura nuclear, incluyendo mislocalization de lamininas,
nesprins y protenas SUN [16], y las mutaciones lamina vinculados a
enfermedades musculares estriadas producira una merma de transmisin de
fuerza nucleocytoskeletal y reducen la estabilidad nuclear [ 11, 20]. Estos
hallazgos sugieren que al menos para las enfermedades que afectan el
msculo cardaco y esqueltico, que estn expuestos a niveles particularmente
altos de estrs mecnico, defectos en el acoplamiento y la mecnica nucleares
ncleo-citoesqueleto podra contribuir directamente al fenotipo de la
enfermedad. No obstante, es probable que los mecanismos adicionales, tales
como alteracin de la sealizacin de mechanotransduction, regulacin
transcripcional perturbado, o funcin de clulas madre alterada, contribuyen
adicionalmente al desarrollo de la enfermedad y son responsables de la amplia
gama de enfermedades humanas [18].

Uno de los mecanismos de la enfermedad interesante e inesperado surgi de la


reciente cruce de la lamina A Sun1 modelos de ratones deficientes / Cdeficiente y. Los ratones que carecen de las laminas A y C desarrollan distrofia
muscular severa y miocardiopata dilatada y mueren a las 4-8 semanas de
edad [69]. Sorprendentemente, cuando se cruzan con ratones deficientes en
Sun1, que carecen de un fenotipo manifiesto, la doble eliminacin resultante
de lamin A / C y Sun1 ampla la vida de los animales, posiblemente mediante la

prevencin de la acumulacin txica de Sun1 en el aparato de Golgi [70]. Del


mismo modo se observ aumento de la supervivencia en ratones que carecen
del exn 9 del gen LMNA, que causa una progeria como fenotipo cuando se
cruzan con ratones deficientes en Sun1 [70]. Estos hallazgos sugieren que,
adems de la interrupcin de su funcin habitual en el acoplamiento de ncleocitoesqueleto, el desplazamiento de protenas de la envoltura nuclear puede
causar defectos celulares an ms mediante la induccin de estrs Golgi y
comprometer la funcionalidad de Golgi.

Recientemente, la expresin alterada de las protenas de la envoltura nuclear,


en particular, las laminas se ha informado en varios tipos de cncer. Por
ejemplo, las laminas A / C se downregulated en el cncer de mama, leucemias,
linfomas, cncer de colon y carcinoma gstrico, mientras que la expresin de
las laminas de tipo A se regula positivamente en la prstata, piel y cncer de
ovario [4, 71, 72]. Por otra parte, un reciente anlisis de todo el genoma de 100
pacientes con cncer identificado mutaciones en las laminas A / C, nesprin-1, y
nesprin-2, que, aunque poco probables mutaciones conductor de mantener,
podra representar moduladores de la progresin del cncer [73]. En las clulas
cancerosas, la funcin alterada lamina podra afectar directamente a la
deformabilidad nuclear necesario para la migracin intersticial o actuar a
travs de diversas vas de sealizacin que promueven la motilidad celular [72,
74]. Estos cambios en la composicin de la envoltura nuclear, que pueden
proporcionar una explicacin de la forma nuclear anormal a menudo graves en
las clulas cancerosas, pueden contribuir directamente a la progresin de la
enfermedad, ya sea mediante la alteracin de las propiedades mecnicas del
ncleo de la clula [41] o mediante la modulacin de las vas de sealizacin y
la organizacin del citoesqueleto asociado con cambios en la expresin lamin
[75].

Panorama

Durante la ltima dcada, se han identificado numerosas nuevas protenas


implicadas en la envoltura nuclear y la fuerza de acoplamiento de transmisin
de ncleo-citoesqueleto al ncleo, incluyendo nesprins y protenas sol, los
componentes bsicos del complejo LINC. No obstante, an quedan muchas
preguntas sin respuesta. Cul es el papel de las protenas de la envoltura
nuclear en mechanotransduction celular? Pueden estas protenas actan como
mechanosensors nucleares, o hacer que servir principalmente como centros de
procesamiento en la red de sealizacin celular mechanotransduction? En el
contexto de la transmisin de la fuerza intracelular, dada la amplia distribucin
de nesprins y protenas sol a lo largo de la superficie nuclear, cmo es la
interaccin de las protenas del complejo LINC regulada para promover
(dinmico) de anclaje a las estructuras del citoesqueleto especficos, evitando

`bloquear 'el ncleo por interaccin no deseada con otros elementos del
citoesqueleto? El que las protenas estn involucradas en esta regulacin? De
dnde viene la regulacin tiene lugar - en el citoplasma, el nucleoplasma, o la
interaccin entre los dominios luminal SUN y KASH? Hay otras protenas, an
no se ha caracterizado involucrados en la vinculacin del ncleo al
citoesqueleto independiente de las protenas del complejo LINC?

La respuesta a estas preguntas no slo avanzar en nuestra comprensin de los


procesos celulares normales, sino tambin ayudar en el desarrollo de enfoques
teraputicos, la orientacin de las muchas enfermedades que resultan de
mutaciones en las protenas de LINC-complejos asociados. A partir de ahora, no
est claro en qu medida directa defectos como el deterioro de anclaje nuclear
en contraposicin a la alteracin de la regulacin transcripcional o vstago
disfuncin de las clulas contribuyen a los mecanismos de la enfermedad, y si
estos defectos estn relacionados entre s mecnica [11, 18]. El tratamiento de
la sealizacin alterada proporciona un objetivo ms rpidamente posible y ya
ha producido algunos prometedor en laminopathies cardaco [76], pero puede
ser insuficiente para superar los defectos estructurales.

Dentro de veinte aos, es probable que mirar hacia atrs con una sonrisa en
las limitaciones de nuestro conocimiento actual de acoplamiento-nucleo del
citoesqueleto y mechanotransduction nuclear. El concepto de conexiones
transmembrana entre el citoesqueleto de actina y la matriz extracelular, que
condujo al descubrimiento de las integrinas, es casi 40 aos de edad [77]. Ese
trabajo se ha convertido en un campo de investigacin de gran xito la
migracin de clulas de expansin, diferenciacin de clulas madre y las
terapias contra el cncer. Es acoplamiento ncleo-citoesqueleto en la misma
va? No vamos a averiguar por un tiempo, pero sin duda es un viaje
emocionante, donde quiera que nos lleve.

Figura 1. visin esquemtica de LINC protenas complejas y sus conexiones


con el citoesqueleto y el interior nuclear. Las protenas se unen sol en la
membrana nuclear interna de la lmina nuclear y otras protenas
nucleoplasmic mientras interacta con KASH-dominio que contienen protenas
en la membrana nuclear externa. KASH-dominio que contiene protenas directa
o indirectamente interactuar con los filamentos del citoesqueleto, formando de
ese modo una conexin fsica entre el interior nuclear y el citoesqueleto. Tenga
en cuenta que las protenas de dominio del sol y KASH pueden existir en
mltiples isoformas codificadas por varios genes. En las clulas somticas
humanas, las protenas KASH-de dominio ms predominantes son nesprin-1, -2,

y -3 y sus diversas isoformas, y Sun1 y Sun2 como las protenas predominantes


SUN [16]. Se ilustran solamente las ms grandes isoformas de nesprins1-4;
clulas expresan muchas isoformas ms cortas nesprin adicionales, incluyendo
algunos que carece del dominio KASH. Ms pequeo isoforma nesprin tambin
puede estar situado en la membrana nuclear interna. Tenga en cuenta que
nesprin-1, -2, -4 y KASH5 tambin puede interactuar con la quinesina y / o
dinena. SAMP1 y torsinA estn involucrados en la regulacin del complejo
LINC. No representado son KASH5 y las isoformas de la protena SUN Sun3-5,
ya que su expresin est restringida a las clulas germinales. La lmina nuclear
comprende de tipo A y de tipo B laminas. Tenga en cuenta que torsinA puede
ser localizada en el retculo endoplasmtico y el espacio perinuclear, con la
distribucin variable en funcin de los niveles de expresin.
Figura 2. Los posibles mecanismos de mechanosensing nuclear. Ilustracin
esquemtica de cmo la deformacin nuclear inducida fuerza podra modular la
expresin de los genes mecano-sensible. (A) Este ejemplo muestra una clula
expuesta a un tramo uniaxial, lo que resulta en la deformacin nuclear por las
fuerzas transmitidas desde las adhesiones focales a travs de la (actina)
citoesqueleto al ncleo. (B) mecanismos moleculares potenciales para
mechanosensing nuclear: (i) de apertura de estructuras de la cromatina por la
fuerza, lo que permite el acceso de los reguladores transcripcionales a la
cromatina. (Ii) La cromatina desprendimiento de la lmina, liberando a los
genes de la periferia nuclear menudo transcriptionally represivo. Este proceso
tambin podra dar lugar a nuevos cambios de estructura de la cromatina, la
promocin del acceso a transcripcional reguladores. (Iii) El estiramiento de la
lmina podra dar lugar a cambios conformacionales o despliegue parcial de las
laminas, alterando su interaccin con los reguladores de la transcripcin. Aqu
se muestra la liberacin de factores de transcripcin, que a su vez pueden
tener interacciones con sus genes diana. La fosforilacin y otras modificaciones
post-traduccionales de protenas de la envoltura nuclear podran contribuir ms
a mechanosensing nuclear.
Figura 3. posicionamiento nuclear durante la polarizacin de las clulas a
travs de las lneas de bronceado. Representacin esquemtica del movimiento
retrgrado nuclear durante la polarizacin temprana en un ensayo de cero
herida. (A) El ncleo se mueve hasta el extremo posterior de la clula, lo que
resulta en el centrosoma (verde, con la red de microtbulos) para convertirse
situado hacia el borde de ataque (es decir, el borde de la herida) de la clula.
translocacin nuclear est mediada por atrs se mueven los cables de actina
dorsal (rojo), que forman conexiones estables a los complejos de nesprin2,
Sun2 y SAMP1 (amarillo), conocidas como lneas de bronceado. (B) Vista lateral
esquemtica del proceso por el cual se mueve hacia atrs los cables de actina
mover el ncleo hacia la parte posterior de la clula. El recuadro muestra un
primer plano de la estructura molecular de las lneas de bronceado: los cables
de actina F interactan con el dominio de unin a actina de nesprin 2molculas, que se unen a homotrmeros Sun2 a travs del espacio perinuclear.
Sun2 tambin interacta con SAMP1 y la lmina nuclear subyacente y la
cromatina.

Figura 4. deformacin Nuclear durante la migracin celular a travs de


constricciones apretados
(A) Representacin esquemtica de una seccin transversal de una clula de la
migracin a travs de una constriccin en la matriz extracelular densa (fibras
oscuras) que es ms pequeo que el dimetro nuclear. La flecha blanco denota
la direccin de la migracin celular. El ncleo se representa en marrn. (B)
Sideview de una clula de la migracin a travs de un filtro de policarbonato o
dispositivo microfabricado utilizado para estudiar la deformacin nuclear
durante la migracin celular a travs de los poros definidos con precisin.
Ilustrado en rojo son actinmyosin redes, la aplicacin de fuerzas contrctiles
(flechas negras) en el ncleo, ya sea posterior al ncleo, lo que resulta en una
fuerza de empuje, o anterior, tirando del ncleo. Los motores moleculares en la
red de microtbulos (verde, con centrosoma) pueden aplicar fuerzas
adicionales para el ncleo, en particular durante la migracin neuronal. La
flecha blanca indica la direccin de la migracin.
Tabla 1:
Lista de protenas / genes implicados en el acoplamiento de ncleocitoesqueleto y las enfermedades asociadas con mutaciones especficas. No se
incluyen aqu son mutaciones en las protenas del citoesqueleto y de motor, lo
cual puede resultar en las distrofias musculares, cardiomiopatas, y lisencefalia
debido a la alteracin de la migracin neuronal [16].