BAB III

METODE PRAKTIKUM
3.1 Waktu dan Tempat
3.1.1 Waktu
Praktikum ini dilaksanakan pada hari senin pada tanggal 06 Oktober 2014 dan pada hari
selasa pada tanggl 07 Oktober 2014 pada pukul 08.50 10.30 WIB.
3.1.2 Tempat
Praktikum ini pada hari pertama dilaksanakan di ruang 226 dan 227, dan hari kedua
bertempat di Laboratorium Mikrobiologi 223 Fakultas Sains dan Teknologi Universitas
Airlangga.
3.2 Alat dan Bahan
3.2.1 Alat
a. Tabung Fotokolorimeter
b. Pipet steril
c. Cawan Petri Steril
d. Tabung reaksi
e. Waterbath
f. Spektrofotometer spectronik 20
3.2.2 Bahan
a. Kultur E. Coli dalam NB
b. Media NB steril
c. Media NA cair
d. Medium NB steril dalam tabung reaksi
e. Akuades
f. Api bunsen/spiritus
g. Alkohol
h. Kapas
i. Aluminium foil

3.3 Skema Kerja

1. Mengamati Karakteristik Mikroorganisme Secara Mikroskopik
Persiapan
-

Mikroskop cahaya disiapkan di meja praktikum

Mikroorganisme yang akan diamati di siapkan

Pengamatan
Bentuk
Warna
Bagian-bagian dari mikroorganisme
-

Hasil Data

Tepi

2. Pengamatan Makroskopis
Persiapan
-

Mikroorganisme yang terdapat pada cawan Petri disiapkan di meja

praktikum

Pengamatan
-

Bentuk
Warna
Media

Tepi

Elevasi

Hasil Data

1. Mengencerkan biakan Bacillus

Persiapan
-

Mempersiapkan alat dan bahan

Mengencerkan biakan
Memindahkan biakan dari tabung fotokolorimeter ke botol kaca
Mengambil biakan sebanyak 1 mL menggunakan pipet dan dipindahkan ke
-

tabung berisi media NB

Mengocok tabung berisi biakan atau merupakan pengenceran pertama 10-1
sampai homogen
Mengambil biakan sebanyak 1 mL dari tabung pengenceran pertama dan
dipindahkan ke tabung kedua atau pengenceran 10-2
Mengocok tabung berisi biakan sampai homogen
Melakukan prosedur seperti point ke 4 dan 5 dan menakan tabung
selanjutnya sebagai pengenceran ketiga, keempat sampai ke-n.
Memberi label pada tabung satu sampai n berdasar banyak pengenceran

Laporan
2. Meremajakan biakan Bacillus
Persiapan
-

Menyiapkan alat dan bahan

Meremajakan biakan
Mengambil tiga terakhir tabung pengenceran (10n-2, 10n-1, 10n)
Mengambil biakan sebanyak 1 mL menggunakan pipet dan dimasukkan ke
-

Laporan

dalam tiga cawan petri kosong

Menuangkan media NA cair sampai volume tertentu
Memutar cawan petri berisi biakan dan media membentuk angka 8
sebanyak duapuluh kali lalu memberi label
Menyimpan cawan petri di inkubator selama 24 jam

3. Penghitungan jumlah koloni

Persiapan
-

Menyiapkan alat dan bahan

Menghitung jumlah koloni

Mengambil cawan petri yang telah diinkubasi
Meletakkan cawan diatas lampu pada colony counter
Memberi titik pada koloni yang terlihat menggunakan spidol warna hitam
-

sampai berbunyi biip yang berarti bahwa titik tersebut sudah terhitung.
Membaca jumlah titik pada counter di ujung alat

Laporan
Pada penghitungan ini, nilai pengenceran tertinggi memiliki jumlah koloni yang tak
terhingga, sehingga pada penghitungannya, cawan petri dibagi menjadi 4 kuadran, dan
hasil penghitgan pada salah satu kuadran dikalikan 4.