PENDAHULUAN Medium adalah suatu bahan yang terdiri atas campuran nutrisi yang dipakai untuk menumbuhkan mikroba. Selain untuk pembuatan mikroba, medium dapat pula digunakan untuk melakukan isolasi, memperbanyak,
pengujian
sifatsifat
fisiologi
dan
perhitungan
mikroba. Sehingga pembuatan medium itu harus sesuai komposisi
dan tujuan penanamannya, serta cara pembuatan medium iru harus dengan baik agar medium yang dihasilkan sesuai dengan yang diingikan. Semua makhluk hidup membutuhkan nutrien untuk pertumbuhan dan reproduksinya. Nutrien merupakan bahan baku yang digunakan untuk membangun komponen-komponen baru dan untuk
menghasilkan
kehidupan mikroba
sel.
Untuk
energi
diperlukan
yang dibutuhkan
menumbuhkan suatu
substrat
dalam
proses
dan mengembangbiakkan yang
disebut
medium.
Sedangkan medium itu sendiri sebelum digunakan harus dalam
keadaan steril, artinya tidak ditumbuhi oleh mikroba lain yang tidak diharapkan. Agar mikroba dapat tumbuh dan berkembang dengan baik didalam medium, maka diperlukan persyaratan tertentu yaitu diantaranya bahwa di dalam medium harus terkandung semua unsur hara yang diperlukan untuk pertumbuhan dan perkembangan mikroba. Oleh karena hal tersebut, maka diadakan praktikum ini guna menambah keterampilan dan pengetahuan mengenai pembuatan medium pertumbuhan mikroba. Selain itu, media tumbuh mikroba juga dibedakan berdasar sifat fisik yaitu media padat, setengah padat dan cair. Media padat yaitu media yang mengandung agar 15% sehingga setelah dingin media menjadi padat, media setengah padat yaitu media yang mengandung agar 0,3-0,4% sehingga menjadi sedikit kenyal, media cair yaitu media yang tidak mengandung agar, contohnya adalah NB (Nutrient Broth), LB (Lactose Broth). Media tumbuh
mikroba juga dibedakan menjadi media sintesis yaitu media yang
komposisinya diketahui jenis dan takarannya secara pasti, misalnya Glucose Agar, Mac Conkey Agar. Media semi sintesis yaitu media yang sebagian komposisinya diketahui secara pasti, misanya PDA. Media non sintesis yaitu media komposisinya tidak dapat diketahui secara pasti dan biasanya langsung diekstrak dari bahan dasarnya, misalnya Tomato Juice Agar. Media dibedakan menjadi dua menurut komposisi kimiawinya yaitu medium sintetik dan medium non-sintetik atau
kompleks.
Medium sintetik dibuat dari bahan kimia dengan kemurnian tinggi
dan ditentukan dengan tepat, sedangkan medium non-sintetik tidak diketahui dengan pasti (Hadioetomo, 2010). Media pertumbuhan mikroorganisme adalah suatu bahan yang terdiri dari campuran zat-zat makananan (nutrisi) yang diperlukan mikroorganisme
untuk
pertumbuhannya.
Mikrooorganisme
memanfaatkan nutrisi media berupa molekulmolekul
dirakit
untuk
pertumbuhan kultur
menyusun dapat
murni
komponen
dilakukan dan
juga
isolat
sel.
kecil
Dengan
mikroorganisme
memanipulasi
yang media
menjadi
komposisi
media
pertumbuhannya (Indra, 2008).
Berdasarkan konsistennya atau kepadatannya, medium dibagi menjadi tiga jenis , yaitu : medium cair/broth/liquid medium, medium setengah padat (semi solid medium) dan medium padat (solid medium) (Anonimous, 2008). Untuk menelaah mikroorganisme dilaboratorium, kita harus dapat menumbuhkan mereka. Mikroorganisme dapat berkembang biak dengan alami atau dengan bantuan manusia. Mikroorganisme yang dikembangkan oleh manusia dilaboratorium melalui substrat yang disebut media. Untuk melakukan hal ini haruslah dimengerti jenis-jenis nutrien yang disyaratkan oleh bakteri dan juga macam lingkungan
fisik
yang
menyediakan
kondisi
optimum
bagi
pertumbuhannya (Label, 2008).
Nutrien Agar (NA) digunakan untuk budidaya bakteri dan untuk pencegahan organisme dalam air, limbah, kotoran dan
lainnya. Komposisinya terdiri dari ekstrak daging, pepton, agar dan
aquades (Ruly, 2009). III.
TUJUAN Memahami cara-cara pembuatan media padat dan cair, cara menimbang, melakukan sterilisasi dan menaruh media yang dibuat tersebut dalam jumlah yang dikehendaki, ke dalam wadah-wadah yang sesuai
IV.
V.
VI.
ALAT N
Nama Alat
Jumlah
o 1 2 3 4 5 6 7 8 9
Neraca Labu Erlenmeyer 1000 ml Labu Erlenmeyer 250 ml Penangas air Panci Autoklaf Gelas ukur Botol You C 1000 Bunsen
1 buah 1 buah 1 buah 1 buah 1 buah 1 buah 1 buah 2 botol 1 buah
CARA KERJA A. Pembuatan Media NA 1. Menyiapkan alat dan bahan 2. Menyiapkan penutup dari alumunium foil untuk menutup labu erlenmeyer 3. Mengatur neraca analitik agar posisinya 0 (nol)
4. Menimbang nutrient agar (NA) sebanyak 14 gram
5. Memasukkan NA yang telah ditimbang ke dalam labu erlenmeyer 1000 ml 6. Menambahkan air pada labu erlenmeyer sampai 500 ml 7. Menggoyangkan labu erlenmeyer sampai agar NA dan air tercampur 8. Mengisi panci dengan air sebanyak nya 9. Meletakkan panci diatas penangas air 10. Masukkan labu erlenmeyer NA kedalam panci 11. Menghidupkan penangas air 12. Menunggu hingga NA benar-benar larut sambil menggoyang labu erlenmeyer agar tidak gosong 13. Setelah bahan NA sudah tercampur secara homogen baru diangkat diangkat dari penangas 14. Membagi bahan NA menggunakan gelas ukur sebanyak 45 ml 15. Memanaskan ujung botol You C 1000 dengan api dari bunsen agar botol tetap steril 16. Memasukkan 45 ml dari gelas ukur ke dalam botol You C 1000 17. Menutup botol You C 1000 dengan kapas lalu dilapisi dengan alumunium foil agar udara tidak masuk 18. Memberi label pada botol You C 1000 dengan nama kelompok dan B. 1. 2. 3. 4. 5.
NA Pembuatan Media NB Menyiapkan alat dan bahan Menyiapkan alas dari alumunium foil Mengatur neraca analitik agar posisinya nol (0) Menimbang NB sebanyak 1,2 gram Memasukkan NB yang telah ditimbang kedalam labu erlenmeyer
250 ml 6. Menambahkan air pada labu erlenmeyer sampai 150 ml 7. Menggoyangkan labu erlenmeyer agar NB dan air tercampur 8. Mengisi panci dengan air sebanyak nya 9. Meletakkan panci diatas penangas air 10. Memasukkan labu erlenmeyer NB ke dalam panci 11. Menghidupkan penangas air 12. Menunggu hingga NB benar-benar larut sambil menggoyangkan labu erlenmeyer agar tidak gosong 13. Setelah bahan NB sudah tercampur secara homogen baru diangkat dari penangas 14. Membagi bahan NB menggunakan gelas ukur sebanyak 15 ml 15. Memanaskan ujung botol You C 1000 dengan api dari bunsen agar botol tetap steril 16. Memasukkan 15 ml dari gelas ukur ke dalam botol You C 1000
17. Menutup botol You C 1000 dengan kapas lalu dilapisi dengan alumunium foil agar udara tidak masuk 18. Memberi label pada botol You C 1000 dengan nama kelompok dan NB
VII.
HASIL PENGAMATAN N
Gambar hasil pengamatan
o 1
NA
Keterangan 1. Alumunium foil dan 1
kapas 2. Labu
erlenmeyar
1000 ml 3. Nutrien Agar
NB
1. Alumunium foil dan
kapas 2. Labu erlenmeyar 250
ml 3. Nutrient Broth 3
VIII.
PEMBAHASAN Media adalah substrat dimana mikroorganisme dapat tumbuh dan
sesuai dengan lingkungannya. Kehidupan mikroorganisme
tergantung pada nutrisi dalam substrat/medium
lingkungan
yang
baik,
karena
tidak
semua
dan
faktor
medium untuk
pertumbuhan mikroorganisme sangat bervariasi, tergantung dari apa
yang dijadikan dasar penanaman. Mikroba dapat tumbuh dengan baik jika dalam suatu medium tersebut memenuhi syarat-syarat, yaitu harus mengandung semua zat hara yang mudah digunakan oleh mikroba, harus mempunyai tekanan osmosis, tegangan permukaan dan pH yang sesuai dengan kebutuhan mikroba yang ditumbuhkan, tidak mengandung mikroba,
dan
zat-zat harus
yang berada
dapat dalam
menghambat kondisi
pertumbuhan steril
sebelum
digunakan (Hafrah, 2009).
Berdasarkan komposisi kimianya dikenal medium sintetik dan medium nonsintetik atau medium kompleks. Komposisi kimia medium sintetik diketahui dengan pasti dan biasanya dibuat dari bahan-bahan kimia yang kemurniannya tinggi dan ditentukan dengan tepat. Diantara medium yang dibuat dalam percobaan ini yang termasuk dalam medium sintetik adalah medium yang mengandung agar, seperti halnya medium nutrient agar yang digunakan untuk mempelajari kebutuhan makanan mikroba. Di pihak lain komposisi kimia nonsintetik tidak diketahui dengan pasti. Seperti bahan-bahan yang terdapat dalam kaldu nutrient yaitu ekstrak daging dan pepton.
Medium Nutrien Agar (NA) berdasarkan susunan kimianya
merupakan medium
non-sintetik/semi
alamiah,
berdasarkan
konsistensinya merupakan medium padat. NA digolongkan pada
medium
umum
sebab
dapat
digunakan
untuk menumbuhkan
beberapa jenis bakteri. Nutrien Agar (NA) merupakan suatu
medium yang berbentuk padat, yang merupakan perpaduan antara bahan alamiah dan senyawa-senyawa kimia. NA dibuat dari campuran ekstrak daging dan pepton dengan
menggunakan
agar
sebagai
pemadat, karena sifatnya yang mudah membeku dan mengandung
karbohidrat yang berupa galaktan sehingga tidak mudah diuraikan oleh mikroorganisme. Dalam hal ini ekstrak daging dan pepton digunakan sebagai bahan dasar karena merupakan sumber protein, nitrogen, vitamin serta karbohidrat yang sangat dibutuhkan oleh mikroorganisme untuk tumbuh dan berkembang. Aquades berfungsi sebagai pelarut dan untuk menghomogenkan larutan. Nutrien Agar (NA) merupakan medium untuk menumbuhkan bakteri (Waluyo, 2007). Nutrient Broth (NB) adalah medium yang berbentuk cair dengan bahan dasar adalah ekstrak beef dan peptone. Perbedaan konsentris antara Nutrient Agar dengan Nutrient Broth yaitu nutrient agar berbentuk padat dan Nutrient Broth berbentuk cair. Susunan kimia sama-sama sintetik. Fungsi kimia dari nutrient agar dan nutrient broth sebagai medium umum. Medium Nutrient Broth (NB)merupakan medium yang berwarna coklat yang memiliki konsistensi yang cair dimana medium ini berasal dari sintetik dan memiliki kegunaan sebagai medium untuk menumbuhkan bakteri sama seperti medium NA.
IX.
KESIMPULAN Berdasarkan hasil pengamatan dan pembahasan, maka dapat ditarik beberapa kesimpulan sebagai berikut : 1. Mikroba dapat tumbuh dengan baik jika dalam suatu media tersebut memenuhi
syarat-syarat,
yaitu
harus
mengandung
semua zat hara yang mudah digunakan oleh mikroba, harus
mempunyai tekanan osmosa, tegangan permukaan dan pH yang sesuai dengan kebutuhan mikroba yang ditumbuhakan 2. Nutrien Agar (NA) merupakan medium untuk menumbuhkan bakteri 3. Medium Nutrien Agar (NA) berdasarkan susunan kimianya merupakan medium
non-sintetik/semi
alamiah,
berdasarkan
konsistensinya merupakan medium padat
4. Nutrient Broth (NB) adalah medium yang berbentuk cair dengan bahan dasar adalah ekstrak beef dan peptone 5. Perbedaan konsentris antara Nutrient Agar dengan Nutrient Broth yaitu nutrient agar berbentuk padat dan Nutrient Broth berbentuk cair
X.
DAFTAR PUSTAKA Annonim.2010.Media
NA
NB
PDA.
https://id.scribd.com/doc/137236788/Media-NA-NB-PDA. diakses 20 Oktober 2016 Alauddin.2015.Praktikum
Mikrobiologi.http://bio.fst.uin-
alauddin.ac.id/file/bio_file/PETUNJUK%20PRAKTIKUM %20MIKROBIOLOGI%202015.pdf. diakses 20 Oktober 2016 Dwidjoseputro, D.1989.Dasar-Dasar Mikrobiologi.Malang:Djambatan Neneng,
