Abstrak

Secara luasnya obat mengikat protein plasma, ditentukan dengan mengukur fraksi aktif
bebas, memiliki dampak yang signifikan terhadap farmakokinetik dan farmakodinamik dari
obat. Oleh karena itu sangat penting untuk memperkirakan kemampuan obat dalam mengikat
makromolekul dalam tahap awal penemuan obat dan dalam praktek klinis. Secara tradisional,
digunakan keseimbangan dialisis dan disajikan sebagai metode referensi, tetapi menderita
banyak kekurangan. Dalam upaya untuk menghindari ini, sejumlah metode yang berbeda
telah dikembangkan. Ulasan ini berfokus pada pendekatan yang paling penting yang
digunakan untuk mengkarakterisasi obat-binding protein dan protein hadir dalam berbagai
cairan tubuh.
PENGANTAR:
Protein Binding mengacu pada pengikatan obat dengan protein. Protein umum yang terlibat
dalam mengikat adalah Lipoprotein, albumin dan glikoprotein. The Aliran darah mengandung
bentuk terikat dan bentuk terikat obat. Biasanya dalam darah, banyak obat mengikat protein
plasma reversibel,
[Obat Unbound] + Protein [Protein-Drug Complex]
Obat apakah diberikan secara oral, intravena, sublingual, sub-cutaneously atau intramuskular,
obat yang dibawa oleh darah dan pertama masuk tidak hanya untuk berbagai komponen
seluler dan senyawa dengan berat molekul rendah tetapi juga dengan protein plasma. Fraksi
bebas dari obat berdifusi membran biologis dan menghasilkan efek terapi dan kemudian
menghilangkan dari tubuh. Luasnya protein mengikat dinyatakan sebagai Persentase obat
terikat. Dengan mengukur fraksi bebas dari narkoba, kita dapat menentukan sejauh mana obat
terikat pada protein plasma, yang memiliki efek pada farmakokinetik dan farmakodinamik
dari obat. Protein obat pengaruh Binding yang Bioavailabilitas, obat Metabolisme, obat
Ekskresi dan obat Konsentrasi dalam cairan jaringan. Protein Binding mungkin intraseluler
atau ekstraseluler mengikat. Dalam obat mengikat intraseluler mengikat protein sel, mungkin
reseptor obat dan menunjukkan respon farmakologi, reseptor-reseptor reseptor dan dalam
obat mengikat ekstraselular mengikat protein ekstraseluler tetapi tidak menunjukkan respon
farmakologi dan reseptor ini disebut sebagai reseptor sekunder atau Diam reseptor.
PROTEIN PRESENT DALAM CAIRAN TUBUH
Plasma Protein: Protein adalah senyawa kimia biokimia terdiri dari satu atau lebih polipeptida
mengurangi fungsi biologis. Protein darah disebut sebagai Plasma atau Protein serum darah.
Ada berbagai macam teknik untuk menentukan protein mereka mikroskop, immunostaining
protein, Protein immunoprecipitation, immunoelectrophoresis, Immunobloiting, BCA Protein

Assay (untuk mengevaluasi konsentrasi protein), Western blot, Spektrofotometri, enzim

assay. Protein perbaikan bisa dilakukan dalam metode serbaguna seperti teknik kromatografi:
pertukaran Ion, kromatografi Ukuran-pengecualian atau Gel filtrasi, kromatografi Affinity,
Ekstraksi protein dan Solubilisasi, metode penentuan protein Konsentrasi adalah Bradford uji
protein, Berkonsentrasi protein Solusi, Gel elektroforesis, Gel Elecdsis Dalam kondisi
denaturasi, Gel Elektroforesis dalam kondisi non-denaturasi, 2D Gel Elektroforesis,
Electrofocusing. Ada protein plasma beragam seperti Albumin (60%), Immunoglobulin ini,
fibrinogen, alpha 1- antitrypsin, alpha 2-macroglobulin, Globulin (, , ) - (35%),
Lipoprotein, transferrin, Prothrombin, Protein Regulatory seperti enzim , zymogens,
hormones- (1%). Protein plasma terutama pekerjaan Albumin terdiri menciptakan tekanan
osmotik yang membantu transportasi hormon steroid dan lipid. Fungsi globulin adalah untuk
membawa ion, hormon dan lipid membantu dalam fungsi tahan. The koagulasi garis darah
dikaitkan dengan fibrinogen. Situs utama untuk konstitusi fibrinogen, albumin dan globulin
plasma adalah hati dan protein plasma baru dapat tumbuh dari hati saja. Protein plasma
dioksidasi menyaksikan oleh teknik blotting barat dengan-DNP anti antibodi pada pasien
selama penyakit Alzheimer dan protein teroksidasi terdiri isoform dari fibrinogen Y-rantai
pelopor dan dari-1-antitrypsin prekursor. Protein plasma albumin sama dan fraksi gamma
globulin, beta protein pencampuran logam dan beta lipoprotein dipastikan untuk mematuhi
kation trivalen kromium dan kromium radioaktif (cr51) dengan waktu paruh 26,5 hari,
biologis menguraikan baru terdeteksi ke proteins12 label plasma. Protein CXCL4 ada dalam
plasma pasien tercemar, melarang HIV dari memulai menjadi sehat menjadi sel-sel manusia.
Ada beragam berserat Protein mereka adalah protein sitoskeletal seperti aktin, Arp2 / 3,
Coronin, distrofin, FtsZ%, Keratin, Myosin, spectrin, Tau (protein), Tubulin, Kolagen dan
protein substansi dasar ekstraseluler seperti kolagen, elastin, F -spondin, Pikachurin. Ada
Protein globular seperti serum darah amiloid P Komponen, serum albumin darah. Plasma
selain terdiri Cadherin, Ependymin, integrin, NCAM, Selectin, protein C-reaktif, dan
hemoproteins. Ada Transkripsi protein regulatif yang berada di segmen reseptor, mereka Cmyc, FOXP2, FOXP3, MyoD, dan P53. Protein DNA mengikuti seperti Histones yang ada di
plasma.Proteins dalam cairan lainnya: Cystatin-D adalah protein yang ditemukan dalam air
liur dan air mata dan fungsinya adalah PI. Laktoferin (Lactotransferrin) hadir dalam susu, air
liur, air mata dan sekresi hidung yang memiliki aktivitas antimikroba. Antibodi Auto (sejenis
protein) yang ditemukan dalam jaringan urine, air mani, air mata, keringat, darah, serum, air
liur dan tubuh. Immunoglobulin A yang ditemukan dalam air liur, air mata, ASI, keringat dan
cairan usus. Thrombomodulin diisolasi dari plasma dan urin, yang merupakan protein

membran sel endotel digunakan untuk aktivasi cepat protein plasma C (Vitamin tergantung k
glikoprotein dalam plasma manusia). Dalam banteng empat protein plasma mani hadir
mereka 26KDa (PI 6.2) dan 55KDa (PI 4,5), 16KDa (PI4.1 dan 6,7) masing-masing, dan
empat tersebut diidentifikasi dengan menggunakan dua dimensi elektroforesis gel
poliakrilamid dan protein plasma mani yang digunakan untuk memprediksi kesuburan.
Dalam sapi protein plasma seminal diidentifikasi mereka osteopontin dan lipocalin-jenis
prostaglandin-D synthase. CSF mengandung albumin dan protein globular di mana mereka
lebih rendah di ventrikel CSF daripada di lumbal atau cairan cisternal. Dalam CSF ada
protein amiloid beta seperti (Abeta); Total (t-tau) dan tau phorphorylated (p-tau) yang hadir
dan mereka digunakan untuk membedakan Alzheimer pasien yang sakit dari pasien yang
normal yaitu Pada pasien AD akan ada peningkatan kadar tau dan penurunan tingkat Abeta42.
Ada banyak metode untuk menentukan kemih / protein CSF mereka turbidimetri,
elektroforesis, metode kalorimetrik. Protein hadir dalam cairan retina Sub adalah Alpha-2
globulin digunakan oleh jaringan sebagai sumber asam amino, Apoprotein Emempertahankan

struktur

chylomicron,

berpartisipasi

dalam

pengakuan

sel

atau

penyembuhan jaringan saraf, Fibronektin terlibat dalam adhesi selular dan proses migrasi.
Plasmin terlibat dalam proses penghancuran inflamasi dan jaringan. Lysozomal enzim
proteinase mampu menurunkan segmen luar dan rhodopsin, Butyrylcholin Asam esterase
phosphatase- dephosphorylation-merangsang enzim, Lacticode hydrogease dan menggunakan
malicodehydrogenase- sebagai penanda kerusakan sel, Protein kinase- fosforilasi-merangsang
enzim, Amines- dopamin terlibat dalam transmisi sinaptik dalam retina, retina S-antigen yang
dikenal untuk auto-antigen sifat-sifatnya, paratiroid hormon mengatur homeostasis dan
kalsium compartmentalisation, Interstitial retina-binding protein (IRBP) - protein dominan di
fotoreseptor. Fungsinya untuk mengangkut retina dari PE ke retina, Opsin- prekursor pigmen
visual, dan Interleukin 6 dan gamma interferon prekursor peradangan. Albumin, alpha1antitrypsin, orosomucoid, alpha2-haptoglobin, rantai gamma, alpha2-macroglobulin, betalipoprotein, seruloplasmin dan imunoglobulin G, A, dan M hadir dalam cairan vagina.
Sebagian besar Albumin, 2u-globulin yang hadir dalam urin. Protein dalam air liur
digunakan sebagai Penanda klinis. Plasma CSF Saliva Urine, albumin serum, albumin Serum,
Amilase alpha 1A, Apo lipoprotein A-IV, Fibrinogen, Melengkapi faktor B, Melengkapi
faktor 9, Immunoglobulin G, Alpha-1-mikroglobulin, Pelengkap C3, Vitronectin hadir dalam
air liur. Serum albumin, Uromodulin, haptoglobin, Cytokeratin, protein AMBP, Alpha-1mikroglobulin, faktor pertumbuhan epidermal, Apo lipoprotein D, Melengkapi komponen C4,
Alpha-1-acid glycoprotein 1, Protein Z, Prostaglandin D2 synthase, Alpha-2-HS glikoprotein

adalah protein hadir dalam urin. Ada berbagai protein yang hadir dalam cerebrospinalfluid
(CSF) mereka albumin Serum, transferrin, Cystatin C, Immunoglobulin G, Perlecan, Alpha1-antitrypsin, Melengkapi faktor C4, Prostaglandin D sintase, Alpha-1-acid glycoprotein 1,
Fibulin 1 isoform D aktin gamma, Alpha-1-antichymotrypsin.
PLASMA PROTEIN MENGIKAT BERBAGAI OBAT: Dalam plasma jumlah obat terikat
adalah tergantung pada konsentrasi protein, jumlah situs pada protein, afinitas situs mengikat
obat, dan konsentrasi obat keseluruhan. Protein Binding obat menunjukkan efek pada hepatik
Metabolisme Rate, ginjal Ekskresi, Biomembrane Permeation Rate, Steady State Volume
Distribusi dan farmakodinamik. Obat-obatan yang mengikat protein plasma memiliki lebih
pendek paruh. Pengikatan obat melibatkan ikatan lemah. Obat akan memiliki volume jelas
kecil distribusi ketika mengikat protein plasma. Ada berbagai faktor yang mempengaruhi
plasma-obat yang mengikat mereka adalah faktor Obat terkait, faktor Protein terkait, Interaksi
Obat dan Pasien terkait faktor. Protein Binding dapat ditentukan dengan teknik Langsung dan
Tidak Langsung. Teknik tidak langsung yang diterapkan dalam sampel biologis seperti
serum, darah, plasma. Berbagai metode analisis tidak langsung meliputi dialisis dinamis,
dialisis ekuilibrium, ultrafiltrasi, diafilteration, ultrasentrifugasi, gel filteration. Teknik
spektroskopi UV langsung termasuk, Uranium dan elektroda selektif ion. Urutan pengikatan
obat dengan protein plasma adalah:
Albumin> 1-Acid Glycoprotein> Lipoprotein> Globulin.
Banyak obat berikatan dengan Human Serum Albumin. Obat-obatan seperti Imipramine,
Lidocaine, dan Quinidine yang dasar terutama mengikat 1-Acid Glycoprotein.
Klorpromazin yang obat dasar dan lipofilik terutama mengikat Lipoprotein. Steroid seperti
kortikosteron, tiroksin dan vit B12 mengikat 1Globulin. Ion tembaga dan beberapa vitamin
A, D, E, dan K untuk mengikat 2Globulin dan Obat-obatan seperti fenitoin, pentobarbital
dan fenotiazin mengikat Heamoglobulin. Trimetoprim, sulfadiazin dan Sulphamethoxazoleplasma-protein pengikatan dipelajari dan menegaskan bahwa trimetoprim adalah 50% terikat,
sulfadiazin adalah 56,2% dan 76,9% sulphamethoxazole adalah terikat. Kehadiran
peningkatan konsentrasi asam salisilat seperti obat secara bersamaan kekurangan gizi, ginjal
dan penyakit hati dapat mempengaruhi protein yang mengikat. Konsentrasi plasma albumin
berkurang akibat penuaan. Senyawa asam sebagian besar mengikat albumin plasma dan
senyawa dasar mengikat 1-acidglycoprotein dan lipoprotein. Umumnya banyak fenotiazin
mengikat 1-acidglycoprotein. Dalam kondisi patologis seperti peradangan, infeksi, infark
miokard dan kanker, 1-acidglycoprotein menunjukkan peningkatan konsentrasi. Dengan
menggunakan keseimbangan dialisis, kita dapat mempelajari pengikatan klorpromazin,

trifluoperazine, perphenazine, desipramine, propranolol dan asam salisilat untuk protein

plasma manusia. Protein plasma mengikat menurun dalam beberapa obat seperti
pentobarbital,

difenil

hydantoin

(Ehrnebo

dan

odar-

Cederlof,

1975), agen antimikroba (Craig dan Wagnild, 1974), digitoksin (Shoeman dan Azarnoff,
1972), Digoxin (Stor stein, 1976), Phenylbutazone dan thiopentone (Andreason, 1973) pada
pasien uremik. Protein plasma total protein dapat diukur dengan Teknik Auto Analyzer dan
Bromocresol teknik hijau digunakan untuk menganalisis albumin (Nisbet et al., 1973).
Pengikatan obat dengan protein plasma menentukan respon farmakologi obat itu. Dengan
Teknik eritrosit Partisi, pengikatan etretinate dan acitertin protein plasma pada persentase> 99
diselidiki. Dengan menggunakan spektroskopi Cair Kilau dan keseimbangan dialisis, kita
dapat menentukan protein plasma mengikat diphenylhydantoin. Salisilat (Sturman dan Smith,
1967), Warfarin (O'Reilly, 1967), Thiopental (Dayton dan Perel, 1971), Diphenylhydantoin,
di obat ini mengikat protein berbanding terbalik dengan konsentrasi obat, tetapi beberapa
obat yang konsentrasi independen ( misalnya:. Amphetamine (Baggot dan Lainnya 1972),
desmethylimiprimanine (Borga, Azarnoff, Plym Forshell dan Sjoqvist, 1969), Morfin (Baggot
dan Davis, 1973) dan Metadon (Olsen, 1972) Protein plasma mengikat anticoagulantsPhenprocoumon, warfarin , acenocoumarol diukur dengan keseimbangan dialisis, flourimetry,
penghitungan Kilau dari phenprocoumon53 3H-label, ultrafiltrasi terus menerus dengan
deteksi UV. Plasma Protein Pengikatan antideprassants dipelajari dengan teknik ultrafiltrasi
menggunakan senyawa berlabel. Protein mengikat antibiotik moksifloksasin, gatifloksasin,
linezolid dan telitromisin untuk albumin manusia serum (HSA) dan Bovine serum albumin
(BSA) dan protein pengikatan l-metil-3-propylxanthine, dan 3-propylxanthine (enprofylline),
ditentukan dengan metode ultrafiltrasi terus menerus otomatis. Sebuah protein obat rasemat
mengikat berpotensi berbeda antara enantiomer, yang menunjukkan perbedaan karakter
farmakokinetik mereka. Kinerja tinggi Analisis Frontal berguna untuk studi mengikat protein
plasma obat hidrofobik dan metode ini cepat dan reversible.Clozapine mengikat Human
Serum Albumin (fraksi terikat -9,1%) dan protein plasma lainnya, rata-rata fraksi terikat
dalam plasma ditemukan menjadi 84 % 60. Tolbutamid, agen hipoglikemik yang sangat
terikat dengan plasma proteinuria albumin. Mengikat Semotiadil dan levosemotiadil untuk
serum albumin manusia upto 99% dan ditentukan oleh metode analisis yang sensitif.
Menggunakan analisis berkinerja tinggi frontal (HPFA), protein plasma mengikat oxybutynin
(OXY) diselidiki secara kuantitatif dan enantioselectively
BEBERAPA

PENYAKIT

YANG

ALTER

THE

PROTEIN

MENGIKAT

PENYAKIT JANTUNG: Sebuah peningkatan konsentrasi -Glycoprotein terjadi setelah

infarction65 miokard. belajar bahwa ada perubahan dalam protein serum ketika obat antiarrhythmic seperti flecainide dan Disopiramid mengikat setelah infark miokard, flekainid
mengikat serum pada persentase 61% sampai 53% seperti yang lemah terikat obat dimana
Disopiramid yang merupakan obat kuat terikat mengikat protein serum pada persentase 80%
menjadi 87%. Dalam obat gagal parah kronis jantung seperti diazepam, digitoksin, warfarin
dan fenitoin mengikat serum albumin dan obat-obatan seperti propranolol dan imipramine
mengikat

a-Glycoprotein.

GINJAL PENYAKIT: organ utama untuk eliminasi dan detoksifikasi ginjal; karena protein
fungsi ginjal yang buruk mengikat obat dalam plasma bervariasi limbah endogen .zomepirac
non-narkotika menunjukkan analgesik menurun protein plasma mengikat dalam kondisi
uremia upto 4% dibandingkan kondisi normal itu menunjukkan protein plasma 98%
mengikat. protein plasma mengikat prednisolon bervariasi dalam sindrom nefrotik, Di
penyakit ginjal, obat asam Tolfenamic% bebas meningkat menjadi 0,17 dari dalam tahap
normal

seperti

obat

ini

mengikat

upto

99,9%

dengan

protein

plasma.

Penyakit hati: Obat-obatan seperti fenilbutazon, salisilat dan sulfadiazin mengikat berkurang
selama penyakit hati seperti sirosis dan hepatitis. Verapamil mengikat juga menurun selama
hati disease68.but ada beberapa konflik mengenai pernyataan ini yaitu, Echizen dan
Eichelbaum (1986) 69 melaporkan bahwa tidak ada perubahan dalam pengikatan verapamil
selama

penyakit

hati.

DIABETES MELLITUS: Seperti yang kita ketahui bahwa pasien dengan diabetes mellitus
memiliki kadar glukosa yang tinggi menyebabkan glikosilasi non-enzimatik dari berbagai
protein yang ditunjukkan oleh Ruiz-Cabello dan Erill (1984) 70. Asam valproik kapasitas
untuk serum mengikat berkurang untuk Insulin pasien tergantung Diabetes Mellitus, yang
ditunjukkan

dengan

(Grainger-Rousseau,

1988).

PENYAKIT MENULAR LAINNYA: Pasien dengan penyakit paru obstruktif kronik (PPOK)
di mana protein teofilin mengikat bisa berubah yang dilaporkan oleh Zarowitz dkk. (1985).
Dalam cystic fibrosis (CF), Antibiotik seperti flukloksasilin, penisilin akan mengubah protein
yang mengikat .Due ke tingkat penyakit yang disebabkan dari -Glycoprotein, protein plasma
mengikat beberapa obat seperti propranolol dan dasar klorpromazin meningkat yang
ditunjukkan oleh Piafsky et al . (1978). Akhirnya dapat disimpulkan bahwa protein plasma
meningkat pengikatan -Glycoprotein di negara-negara yang sakit menurunkan volume jelas
distribusi dan jumlah konsentrasi plasma obat