OBJETIVO
Verificar o efeito da adio de polietilenoglicol sobre a solubilidade da
albumina modulada pelo pH do meio (abaixo, igual e acima de seu pI), em
condies de baixa e alta fora inica, para tanto, ajustaremos o pH da
soluo de protena com KOH.
TERICA
Ao se fazer a titulao de um aminocido com uma base forte na escala de
pH de zero a 14, o aminocido atua como um tampo e apresenta
alteraes de carga lquida de sua estrutura.
Quando os aminocidos estabelecem as ligaes peptdicas, suas cadeias
laterais no perdem as propriedades de ionizao, porm, podem ter seus
valores de pKa bastante alterados devido vizinhana de outros grupos
carregados.
No ponto isoeltrico, uma protena apresenta carga lquida igual a zero e
essa propriedade pode ser utilizada para separar e purificar protenas.
01
Eletroforese bidimensional
Uma estratgia bastante usada em protemica a eletrofocalizao na
qual uma mistura de protenas colocada em uma matriz (fita) que
apresenta diferentes valores de pH ao longo de sua extenso.
Ao submeter a amostra, nesse meio, a uma diferena de potencial, as
protenas migram para o polo oposto ao de sua carga lquida no pH da
regio de partida e estacionaram na regio da fita no qual o pH igual
ao seu pI.
Em seguida, efetua-se a separao das protenas de mesmo pI e massas
moleculares diferentes submetendo a amostra a uma eletroforese em
sentido perpendicular.
A precipitao de protenas pode ser induzida por: adio de sais
(Precipitao salina),adio de solventes, variao de pH (Precipitao
isoeltrica) e adio de polmeros sintticos.