Biotecnologia

O que ? Para que serve?

BIO: Biologia; Processos biolgicos
TECNOLOGIA: resoluo de problemas; gerar produtos teis
Termo abrangente usado para descrever o uso da Biologia em processos
industriais -todo o uso prtico de um organismo vivo
Baseia-se nas propriedades das clulas, sobretudo na sua capacidade de
manufactura

Quando que surgiu a Biotecnologia?

6000 a.C. Primeiro processo biotecnolgico: FERMENTAO
4000 2000 a.C. Fabrico de po, vinho e queijo.
Inicio da Biotecnologia Tradicional: apuramento de raas animais;
culturas mais produtivas e fceis de cultivar.
1600s: Hooke descobre a clulas; Von Leewenhoek faz as primeiras
observaes microscpicas - descoberta das bactrias.
1800s: Teoria celular; Teoria de Darwin; Nascimento da Microbiologia
PASTEUR; Nascimento da Gentica MENDEL; Nascimento da Bioqumica
BUCHNER; Descoberta do DNA MEISCHER
1928 Alexander Fleming descobre a penicilina
1953 Watson e Crick elucidam estrutura do DNA Biologia Molecular
1972 Berg institui a Engenharia Gentica.
1976 - Sequenciou-se um gene pela primeira vez.
1986 Produo da primeira vacina para humanos por Engenharia
Gentica.
1990 Inicio do Projecto Genoma Humano
1997 Dolly: clonagem de um animal a partir de uma clula adulta
Biotecnologia Tradicional -> Biotecnologia Moderna Biotecnologia de 3
gerao
Hoje a Biotecnologia : Especfica, Precisa, Previsvel
Engenharia gentica:

Aplicao em cura de doenas Terapia Gnica

Melhorar determinadas caractersticas Melhoramento Gentico

Tcnicas tradicionais de Biotecnologia: organismo como um todo

Nova Biotecnologia Engenharia gentica: 2 ou 3 genes-maior
controlo
Biotecnologia de 3 gerao: Utiliza conhecimentos de diversas cincias:
Biologia, Qumica, Fsica, Gentica, Engenharia, Medicina, Tecnologia de
informao e computacional e Microbiologia, Bioqumica.
Na Biotecnologia faz-se a aplicao dos princpios de Biologia e de
Engenharia ao processamento de materiais
Agentes biolgicos - microrganismos, animais, plantas ou suas
molculas (enzimas, anticorpos, DNA, e outros).
Cores/Area de aplicao:
vermelho - sade, mdicos, diagnsticos
amarelo- biotecnologia de alimentos, cincia da nutrio
azul - aquacultura, costeiro e marinho de biotecnologia
verde - agrcola, biotecnologia ambiental - biocombustveis, biofertilizantes,
biorremediao, geomicrobiologia
marrom - zona rida e deserta biotecnologia
escuro - o bioterrorismo, a guerra biolgica, biocrimes, guerra anticrop
roxo - patentes, publicaes, invenes, direitos de propriedade intelectual
branco- bioindstrias baseadas em genes
ouro - bioinformtica, nanobiotecnologia
cinza - fermentao clssica e tecnologia de bioprocessos
Biotecnologia/Medicina
O que j se faz:
Produo de medicamentos, vacinas, hormonas
Interfero -tratamento da hepatite C e cancro
Insulina
Testes de diagnstico clnico
Mais sensveis e fiveis
Predisposio gentica para determinada doena
O que se pretende fazer:
Eliminao do problema de rejeio dos rgos
Plantas transgnicas como produtoras de vacinas
Batata, bananas, planta do tabaco
Descodificao do genoma de bactrias, vrus e outros organismos
causadores de doenas
Ajuda no combate s doenas

Biotecnologia/Ambiente
O que j se faz:
Biorremediao de terrenos
Criao de plantas capazes de reter o azoto do ar, tornando
desnecessrio o recurso a fertilizantes altamente poluentes.
Tratamento de guas contaminadas e de lixo
Processos microbiolgicos que reduzem o uso de qumicos
Recuperao de petrleo
Modificao gentica de bactrias de modo a estas serem
capazes de usar o petrleo
O que se pretende fazer:
Desenvolvimento de energias alternativas
Biogs, etanol
Desenvolvimento de novos materiais
Plsticos vegetais biodegradveis

Equilbrio do
Ecossistema

Biotecnologia/Nutrio
O que j se faz:
Alterao do processo de fermentao de modo a produzir alimentos
mais saborosos e nutritivos
Queijos, iogurtes, vinhos, cervejas
Produo de aditivos usados na indstria alimentar
Alimentos que podem ser conservados durante mais tempo
Tomate transgnico que se mantm firme e fresco por mais
tempo
Alimentos transgnicos
Soja, milho, batata, cana do acar
O que se pretende fazer:
Aumento do teor de vitaminas e menores taxas de gordura nos
alimentos
Remoo de substncias alergnicas e outras toxinas
Gros de caf com baixo teor de cafena
Introduo de genes que codifiquem para substncias benficas
Ideal para preveno de doenas crnicas
Modificao de animais para produo de leite sem lactose
Ovelhas, vacas
Produo de leite semelhante ao leite materno

Biotecnologia/Agricultura
O que j se faz:

 Plantas resistentes a pragas e doenas

Milho, algodo
Desenvolvimento de culturas com maior produtividade
Milho selvagem 2 cm milho atual 30cm
Culturas resistentes a herbicidas
Produtos hortcolas que podem amadurecer ao sol durante mais
tempo Melhor sabor(tomate Calgene)
Espcie/Caractersticas:

Soja: tolerncia salinidade, seca e a herbicidas; resistncia a

insetos
Milho: tolerncia seca, salinidade e a herbicidas; resistncia a
insetos; colorao das sementes
Algodo: melhor qualidade da fibra; resistncia a insetos;
tolerncia a herbicidas
Tomate: qualidade nutricional e do fruto; resistncia a insetos e a
doenas; tolerncia ao calor
Caf: baixo teor de cafena
Eucalipto: baixo teor de lignina

O que se pretende fazer:

Desenvolvimento de plantas resistentes a condies ambientais
extremas
Altas e prolongadas temperaturas Aumentar a produo em
certas regies do planeta
Algodo de cor
Desnecessria a utilizao de tinturaria Cara e polui
Plantas capazes de crescer sem precisarem do solo para se
desenvolverem
Alimentos capazes de prevenir doenas graves Cancro

Contributo da Biologia Marinha

Biotecnologia/Medicina frmacos anti-cancergenos

Biotecnologia/Nutrio aditivos alimentares; aquacultura
Biotecnologia/Ambiente biossensores, bioindicadores;
biodiversidade
Biotecnologia/Agricultura biopesticidas

Biologia Marinha Biotecnologia/Medicina

60% dos frmacos anti-cancergenos so de origem natural Intensa
procura de produtos provenientes de organismos marinhos
Esponjas: anti-inflamatrios, anti-cancergenos
Esponja das Carabas citarabina (leucemias e linfomas)
Analgsicos, anti-malria, anti-fngicos
Ex: Algas, bactrias, fungos, dinoflagelados, briozorios

Biologia Marinha Biotecnologia/Nutrio

Aditivos alimentares
Genes responsveis pela sntese de um polissacrido marinho
introduzidos em bactrias para produo em larga escala
Peixes transgnicos
Introduo de um gene para a hormona do crescimento
Maior produo em aquacultura
Aquacultura
Adio de hormonas de peixes, produzidas em bactrias
Avanos na Biotecnologia podem ajudar a melhorar a frescura, cor,
sabor, textura, odor e tempo de vida dos alimentos provenientes do
mar
Biologia Marinha Biotecnologia/Ambiente
Ecologia
Identificao e caracterizao de espcies ameaadas de extino
Anlise e estudos de genomas
Estudar a adaptao dos organismos a novos ambientes
Perturbaes e mudanas causadas por diferentes impactos
Manuteno de espcies, populaes e stocks
Entender molecularmente o que determina a expresso e
regulao de genes (ex. determinao do sexo dos peixes)
Acelerar, com o uso de tcnicas de Biotecnologia, a descoberta de
novos microorganismos marinhos
Novos Produtos
Polmeros biodegradveis provenientes das conchas dos moluscos
Biocermicas originrias de estuturas mineralizadas de organismos
marinhos
Aplicaes: implantes mdicos, eletrnica, etc.
Dertergentes eficientes e biodegradveis compostos extracelulares
produzidos por organismos marinhos
Aplicaes: cascos dos navios, detergentes da roupa
Biologia Marinha Biotecnologia/Agricultura
Biopesticidas
Padan TM
Toxina produzida por um organismo marinho combate a larva
do arroz entre outras pestes
Esponjas marinhas
Atividade inseticida contra gafanhotos e larva da planta do
tabaco

Biologia Marinha Biotecnologia

Enzimas de bactrias marinhas
Resistentes ao sal, ou altas/baixas temperaturas til em
processos industriais
Protenas de peixes de guas frias
Protenas anti-congelao possveis de utilizar em alimentos
Protenas naturalmente fluorescentes
Presentes em anmonas e medusas Usadas em estudos
bioqumicos (ex. marcao de clulas)

Biotecnologia Alimentar
Histria e Fundamentos
Alimentos Fermentados
Antes de 1865 O uso da Biotecnologia teve o seu incio com os processos
fermentativos.
Produo de bebidas alcolicas pela fermentao de gros de cereais
- antes de 6.000 a.C.
2.000 a. C - utilizavam o fermento para fabricar cerveja e po.
Outras aplicaes: produo de vinagre, iogurte e queijos h muito
utilizadas pelo ser humano
De 1865 a 1940
Fermentaes - ao de microrganismos (no um processo
puramente qumico).
Eduard Buchner, demonstrou ser possvel a converso de acar em
lcool, utilizando clulas de levedura maceradas, ou seja, na ausncia
de organismos vivos.
Grandes guerras mundiais - produo em escala industrial de
produtos fermentativos (acetona, butanol, glicerol, etc.).
Seguiu-se uma fase de produo industrial de produo de
antibiticos (1940-1960).
De 1960 a 1975 - Avano dos conhecimentos a nvel do metabolismo
microbiano:

Produo de vitaminas (B2 e B12)

Produo de aminocidos
Produo de enzimas para uso na indstria (detergentes, xaropes)
1974 - Crise do petrleo e consequente produo de etanol para
utilizao como combustvel.

Biotecnologia Alimentar:
Ocupa-se do estudo das aplicaes a nvel alimentar da biotecnologia
Microbiologia Alimentar:
Estuda os microorganismos associados aos alimentos (principalmente
a nvel da segurana alimentar)
Biotecnologia Industrial:
Ocupa-se do estudo das aplicaes industriais da biotecnologia
Indstria Alimentar:
Produo e conservao de alimentos;
Produo de bebidas;
Produo de aditivos alimentares (aromas, corantes,
espessantes,emulsionantes, conservantes, e outros);
Produo de alimentos funcionais (nutracuticos, probiticos).
Quando um componente originrio de um organismo vivo,
ou o prprio organismo, includo no desenvolvimento e
produo de um produto para aumentar a sua qualidade
estamos a aplicar princpios da Biotecnologia.
Se esse produto se destinar a alimentao
Biotecnologia Alimentar.

As transformaes biotecnolgicas dos alimentos podem dividir-se em 3

grupos:
Transformaes por catlise microbiana (requer microorganismos
viveis)

Transformaes por catlise enzimtica (requer a interveno de

enzimas produzidas por organismos vivos)
Transformao gentica (implica alteraes deliberadas dos cidos
nucleicos das clulas do prprio alimento ou de microorganismos a
adicionar ao alimento)

ALIMENTOS OBTIDOS ATRAVS DE CATLISE POR MICROORGANISMOS

VIVEIS:
ALIMENTOS FERMENTADOS
Os alimentos fermentados fazem parte obrigatria de uma
dieta equilibrada.
A fermentao dos alimentos aumenta a sua vida til e
melhora as suas propriedades sensoriais.

Do ponto de vista bioqumico, o termo

fermentao descreve as alteraes qumicas
a nvel molecular que ocorrem durante a
degradao anaerbia de glcidos (acares).
Fermentao
Juntamente com a salga e a secagem, um dos mtodos mais
utilizados na preservao de alimentos perecveis.
Nos alimentos fermentados consegue-se manter a qualidade em
condies ambientais adversas.
As duas principais vias fermentativas na produo de alimentos so:
Lctica (pickles, queijo, leites fermentados, produtos crneos, etc.)
Alcolica (vinho, cerveja, sumos de frutas fermentados, licores,
etc...)
Tipos de alimentos fermentados
Transformao de produtos horto-frutcolas
Fermentao com produo de cido (chucrute, pickles)
Fermentao com produo de lcool (vinho de mesa)
Transformao microbiana de cereais
Fermentao com produo de cido (po cido)
Fermentao com produo de lcool (cerveja, whisky, po)
Transformao de leite
Fermentao com produo de cido (nata cida, iogurte,
queijo)
Fermentao com produo de cido e lcool (kefir)
Transformao microbiana de carnes
Fermentao com produo de cido (chourio)
A chucrute ou couve cida um produto fermentado obtido a partir de
couve branca, que resulta da atividade de bactrias cido lcticas.

H produo de cidos e consequente inibio do crescimento

de outras bactrias que iriam provocar a degradao da couve.

O pickle ou conserva de vinagre provavelmente o vegetal fermentado

mais popular do mundo.

Microrganismos envolvidos: Leuconostoc mesenteroides;

Lactobacillus brevis e Lactobacillus fermentum; Lactobacillus
plantarum.
O processo dura algumas semanas.

A cerveja composta por gua, malte (cevada germinada), lpulo (planta

aromtica) e levedura, sendo obtida a partir da fermentao natural da

cevada, na qual o acar existente nos prprios ingredientes transformado

em lcool.

Cerveja: Economia do processo poder ser melhorada

substituir malte por (enzimas industriais + gros de cereais
no maltados)
Cervejas de baixas calorias - reduzido nvel de acares no
fermentados.

Whisky
bebida alcolica - teor mnimo de 40% de lcool
resulta da destilao de malte, ou de outros cereais, que foram
previamente fermentados por ao de leveduras.
estgio mnimo de 3 anos em cascos de carvalho de caractersticas
organolticas (cor, aroma, sabor) especficas.
O whisky pode ser fabricado a partir de cevada maltada, ou de uma
mistura de vrios cereais tais como o milho, trigo, aveia, centeio,
cevada no maltada.
Sak
Bebida tradicional japonesa produzida a partir de arroz e gua.
No sak, o arroz por si s, no inicia a fermentao sendo necessrio
a adio de koji (preparao enzimtica fabricada a partir de arroz
cozido fermentado por Aspergillus oryzae).
Leite
A fermentao do leite origina uma gama de produtos muito diversa
sendo o leite acidificado, a nata cida, os iogurtes e o queijo os mais
importantes e de maior valor comercial.
Leite Acidificado
fabrico industrial pasteurizao de leite, seguida de fermentao
por Lactobacillus acidophilus
Incubao 18-24 horas a 38C.
O Lactobacillus acidophilus um agente conservante do leite, e um
habitante nativo do intestino, pelo que a incluso de quantidades
suficientes destes leites na dieta (500-1000 ml)) permite a
recolonizao intestinal durante o tratamento de colites e enterites
crnicas.
Segundo a legislao, o iogurte deve conter duas bactrias lcteas
denominadas Streptococus thermophilus e Lactobacillus bulgaricus.
No leite acidificado est presente apenas uma destas bactrias
(Streptococus thermofilus), enquanto a outra foi substituda (por ex.
por Lactobacillus acidophillus La1). Assim, este alimento um leite
fermentado e no um iogurte.
Iogurte
fermentao termfila, a 40-43C.

ao fermentativa especfica de duas bactrias lcticas:

Streptococcus thermophilus e Lactobacillus bulgaricus.
As bactrias usadas na produo do iogurte permanecem vivas,
ajudando a equilibrar a flora bacteriana intestinal e a potenciar as
defesas do organismo alimento probitico.
O termo probitico foi inicialmente utilizado em 1965 e referia-se a
substncias ou organismos que contribuam para o balano
microbiano intestinal, inicialmente sendo utilizados em nutrio
animal.
Atualmente um probitico definido como um organismo vivo, que
ingerido em determinado nmero ou quantidade, pode exercer efeitos
benficos em termos nutricionais e de sade e bem-estar.

Iogurte vs Leites fermentados

Leites fermentados com bifidobactrias:
Alm de conter as bactrias do iogurte (Lactobacillus
bulgaricus e Streptococcus termophilus), este leite fermentado
contm uma terceira bactria ativa, a bifidobactria, que atua
a nvel intestinal, minimizando situaes de mau
funcionamento, como o caso da obstipao.
O iogurte faz parte da famlia dos leites fermentados.
Leites fermentados com Lactobacillus casei:
Contm uma terceira bactria ativa, o Lactobacillus casei presente na flora intestinal humana, comprovada resistncia
aos cidos gstricos equilbrio da flora intestinal e reforo da
proteo do organismo.
Outras utilizaes de microrganismos na indstria alimentar
Para alm de intervirem nas fermentaes vrios microrganismos
podem ser utilizados como fonte de ENZIMAS de aplicao como
aditivos alimentares.
Os aditivos so substncias qumicas estranhas a um alimento (no
fazem parte dos ingredientes base), cuja adio tem como finalidade
melhorar as qualidades organolticas, o aspeto ou o perodo de
conservao.
Aditivos Alimentares
Corantes de origem natural
Caroteno
caroteno pigmento responsvel pela cor alaranjada
das cenouras e outros vegetais.
A maior parte do caroteno utilizado industrialmente
provm do processo fermentativo de Blakeslea trispora,
ou de algas como Dunaliella salina em aquacultura.
A produo total de carotenides na natureza foi
estimada em 100.000.000 toneladas/ano, tendo a
procura de -caroteno atingido um valor comercial que
ronda os 40.000.000 USD/ano.

 Todas as algas produzem pequenas quantidades de

caroteno de modo a assegurarem a manuteno da sua
integridade durante a fotossntese.
A microalga Dunaliella acumula elevadas quantidades
de -caroteno. Esta microalga produz cerca de 10 a 100
vezes mais -caroteno do que a sua segunda fonte mais
importante, a cenoura.

Indstria de lacticnios
Enzimas de origem Animal
Fonte
Pncreas

Estmagos de
ruminantes
Enzimas de origem vegetal
Fonte
Cynara cardunculus
Enzimas de origem microbiana
Fonte
Aspergillus niger
Aspergillus oryzae

Mucor sp.
Aspergillus niger
Candida sp.
Aspergillus niger

Enzima
Lipase

Protease

Aplicao
Desenvolvimento de
sabor em produtos
lcteos
Fabrico de queijo

Enzima
Protease

Aplicao
Fabrico de queijo

Enzima
Lactase

Aplicao
Leite com lactose
hidrolisada
Pastilhas para
intolerantes lactose
Xaropes adoantes
Fabrico de queijo

Protease
Catalase

Remoo de perxido
de hidrognio
usado na esterilizao
de leite

Indstria de Produo de Sumos e Vinhos

Enzimas de origem microbiana
Fonte
Enzima
Aspergillus niger
Pectinases
Aspergillus flavus

Aplicao
Aumento do
rendimento e

Aspergillus oryzae
Sclerotina libertina
Coniothyrium
diplodiella

clarificao do produto,
remoo de pectinas

Indstria de Produo Xaropes Edulcorantes e Glucose

Enzimas de origem Vegetal
Fonte
Malte de cevada

Enzima
Amilase

Aplicao
Fabrico de Xarope
edulcorante

Enzima
Amilase

Amiloglucosidase

Aplicao
Fabrico de Xarope
edulcorante
Fabrico de glucose
Fabrico de glucose

Glucose
isomerase

Converso de glucose a
frutose

Enzimas de origem Microbiana

Fonte
Aspergillus oryzae
Bacillus subtilis
Rhizopus niveus
Aspergillus niger
Endomycopis fibuliger
Lactobacillus brevis
Bacillus coagulans
Arthrobacter simplex
Actinoplanes
missourensis

Alimentos Funcionais
O papel de uma alimentao equilibrada na manuteno da sade tem
despertado interesse pela comunidade cientfica, originando inmeros
estudos que pretendem comprovar o papel de certos alimentos na
preveno de doenas.
Na dcada de 80, foram estudados no Japo, alimentos que alm de
satisfazerem as necessidades nutricionais bsicas desempenhavam efeitos
fisiolgicos benficos.
Esta categoria de alimentos foi regulamentada recebendo a denominao
de "Foods for Specified Health Use" (FOSHU).

Alimentos Funcionais = Nutracuticos

Os alimentos funcionais so aqueles que na totalidade, ou apenas numa

parte do alimento, tm a capacidade comprovada de proporcionar
benefcios sade.
Os alimentos funcionais so definidos como produtos contendo na sua
composio uma, ou vrias substncias, biologicamente ativas, que ao
serem includas numa dieta, modulam processos metablicos ou
fisiolgicos, resultando em benefcios para a sade.

Alimentos Funcionais Requisitos

O alimento, ou ingrediente, que se diz possuir propriedades funcionais tem:
atuar em funes nutricionais bsicas
desencadear efeitos benficos sade
dever ser tambm seguro para o consumo sem superviso mdica.
Principais fontes para o processamento de novos produtos:
peixes, vegetais, frutas, fungos e cereais.
Os constituintes normais desses alimentos que despertam interesse so as
fibras e os antioxidantes (ex. vitamina E, C, betacaroteno), podendo depois
estes serem adicionados de forma a modificar as propriedades originais dos
produtos industrializados (leite fermentado, biscoitos vitaminados, cereais
matinais ricos em fibras, leites enriquecidos com minerais), ou os
microrganismos vivos.

Os lacticnios so tradicionalmente considerados alimentos funcionais.

Uma das melhores fontes de clcio nutriente essencial para a
formao do esqueleto pode prevenir a osteoporose e
possivelmente o cancro do clon.
Alm do clcio, as pesquisas recentes tm-se concentrado especificamente
sobre outros componentes, particularmente dos lacticnios fermentados,
conhecidos como probiticos.
Os probiticos so definidos como "micrbios vivos (> 107 UFC) ingeridos
como suplementos e que afetam beneficamente o hospedeiro ao melhorar
as propriedades da microflora intestinal" (Fuller, 1994; FAO, 2001).
As culturas probiticas aumentam de maneira significativa o valor nutritivo
e teraputico dos alimentos.
Destacam-se:

Bifidobacterium - 30 espcies
Lactobacillus (Lactobacillus acidophilus) - 56 espcies

probitico (Grego) significa para a vida

Microrganismos viveis (o que inclui bactrias lcticas e leveduras na forma
de clulas liofilizadas ou de produto fermentado) que exibem um efeito
benfico sobre a sade do hospedeiro aps ingesto, devido melhoria das
propriedades da microflora indgena.
Bifidobactrias : B. infantis, B. breve, B. longum; B. adolescentis, B. longum;
B. longum

Fatores bifidognicos
compostos que resistem ao metabolismo direto do hospedeiro e que,
por isso, atingem o intestino onde so metabolizados
preferencialmente pelas bifidobactrias.

Prebiticos
Ingredientes no digerveis que afetam de modo benfico o
hospedeiro, atravs da promoo do crescimento e/ou
atividade de um tipo especfico de bactrias benficas para a
sade.

Fatores de Crescimento
promovem a multiplicao das bifidobactrias in vitro, mas no
podem ser transportados para o intestino por vias naturais.
Caso tal fosse possvel tambm promoveriam seletivamente a
proliferao de bifidobactrias
Fatores bifidognicos mais utilizados: frutooligossacridos (trigo, soja,
milho, cebola, espargos)
Fatores de crescimento mais utilizados: derivados do leite bovino (a
partir do prprio leite ou de casenas)
Outros prebiticos presentes na alimentao:

fculas, fibras dietticas, acares no absorvveis eoligossacridos.

Onde:

frutas e vegetais: banana, alho, cebola, leite, mel, alcachofra.

O conceito de prebitico foi posteriormente estendido para englobar o

conceito de simbitico, uma mistura de pro e prebiticos.
Muitos produtos simbiticos so atualmente comercializados a nvel
mundial.

Alimentos funcionais Definio

Produtos contendo na sua composio uma, ou vrias substncias,
biologicamente ativas, que ao serem includas numa dieta, modulam
processos metablicos ou fisiolgicos, resultando em benefcios para a
sade.
Antes do produto ser autorizado para consumo humano deve demonstrar:
sua eficcia e segurana de uso
O fabricante deve apresentar provas cientficas que
comprovem as propriedades funcionais referidas no rtulo e se
o consumo do produto em questo no implica qualquer risco
para a sade da populao.
Ingrediente funcional ideal:

Seguro
No gerar odores ou sabores desagradveis
Ser eficaz em doses baixas
Manter actividade a altas temperaturas
Fcil incorporao
Baixo custo para o consumidor

Alimentos funcionais Prebiticos

So ingredientes alimentares no-digerveis que so benficos para o
hospedeiro por estimularem selectivamente o crescimento e/ou a actividade
de um nmero limitado de bactrias no clon.
Devem cumprir 3 critrios:
no serem hidrolisados, nem absorvidos na parte superior do sistema
gastro-intestinal
serem um substrato preferencial para um nmero limitado de gneros
de bactias existentes no clon
possurem a capacidade de induzir efeitos locais e/ou sistemticos
benficos.
Alimentos funcionais Probiticos
Microorganismos viveis (o que inclui bactrias lcticas e leveduras na
forma de clulas liofilizadas ou de produto fermentado) que exibem um
efeito benfico sobre a sade do hospedeiro aps ingesto, devido
melhoria das propriedades da microflora indgena.
Devem apresentar trs caractersticas:
elevada resistncia digesto por enzimas entricas e pancreticas,
elevada resistncia a cidos e blis,

 diminuir a capacidade de aderncia, colonizao, replicao ou

actividade de enteropatognicos.
Como atuam?
1. Competem com a restante microbiota do clon por nutrientes e para
a adeso mucosa intestinal
2. Produzem cidos que inibem o crescimento de outras bactrias que
podem ser agentes patognicos,
3. Produzem bacteriocinas e metabolitos inibitrios,
4. Actuam na estimulao do sistema imunitrio.
Os probiticos mais comuns so bactrias dos gneros Bifidobacterium
(bifidos) e Lactobacillus.

ORGANISMOS GENETICAMENTE MODIFICADOS

O que um OGM?
Os organismos geneticamente modificados (OGM), tambm
denominados transgnicos, so organismos nos quais o
material gentico (DNA) foi alterado de um modo que no
ocorre naturalmente atravs de cruzamento ou recombinao
natural
So organismos que contm um ou mais genes que lhes foram
inseridos artificialmente e que no fazem parte do genoma
original do organismo.
A alterao do material gentico (DNA), num OGM,
normalmente feita atravs de tcnicas de engenharia gentica.
O objetivo final conseguir a transferncia artificial de genes
que conferem determinadas caractersticas desejveis, e que
provm de espcies no relacionadas com a que sofre
modificao (bactrias, vrus, plantas, animais).
A partir de 1860 melhoramento vegetal direcionado utilizando
a polinizao cruzada.
A maioria dos alimentos arroz, cevada, batatas, milho, trigo e
tomate so produtos do melhoramento e seleo tradicional
que continua a ser feito.

Limitaes do melhoramento tradicional:

S ocorre na mesma espcie ou entre espcies estreitamente

relacionadas recursos genticos limitados.
Em cada cruzamento h mistura de inmeros genes, sendo o processo
de seleo muito moroso.

A engenharia gentica consegue isolar genes de determinados

organismos e identificar a caracterstica que eles transmitem,
para depois a introduzir num outro organismo.
O gene manipulado tambm pode ser produzido em laboratrio.
Engenharia gentica:
Acelera o processo natural de mutao, permitindo alcanar os
resultados desejveis de um modo rpido e previsvel.
Permite ultrapassar a barreira entre espcies.
Caractersticas alvo de melhoramento
Crescimento mais rpido de plantas e animais.
Plantas e animais resistentes a doenas, pesticidas, stress, etc.
Aumento da produtibilidade e rentabilidade das exploraes
(agrcolas e /ou animais).
Tipos de OGMs comercializados atualmente:
Mais de 90% de todas as plantas transgnicas cultivadas para fins
comerciais pertencem a trs espcies: soja, milho e algodo. A colza
uma outra espcie que tambm apresenta variedades transgnicas.

 As plantas transgnicas comercializadas foram desenvolvidas

principalmente pelas indstrias de biotecnologia, com o objetivo de
resistirem a herbicidas e /ou para matar insetos.
A maior parte dos transgnicos cultivados atualmente so resistentes
a herbicidas (73%), isto , o produto para o qual o OGM resistente
pode ser aplicado na cultura, que todas as plantas morrero, exceto a
cultura transgnica.
Outros 18% dos transgnicos so as chamadas culturas Bt, por terem
inseridos, no seu cdigo gentico, genes de uma bactria, o Bacillus
thuringiensis, que produz toxinas com ao inseticida.
Distribuio Geogrfica de OGM
A maioria das culturas transgnicas foi introduzida em 1996 e
imediatamente adotadas pelos agricultores norte-americanos.
Atualmente, as culturas GM so cultivadas por 7 milhes de
agricultores em 18 pases.
A rea plantada com OGM, em relao rea mundial cultivada, de
cerca de 10%

Aumentar a produo de alimentos

Resistncia a pragas e doenas especificas, incluindo as

causadas por vrus

Menor necessidade de utilizao de pesticidas

qumicos
Reduo do risco de perda de colheitas
Aumento da produtividade

Adaptabilidade a condies de stress, como seca,

salinidade e temperaturas extremas.
Reduo do risco de perda de colheitas
Aumento da produtividade

Tolerncia a herbicidas menos agressivos do ponto de vista

ambiental, que destroem as infestantes sem danificar as
colheitas.
Reduo da frequncia da mobilizao do solo com
consequente reduo da eroso e menos gasto de
combustveis.
Reduo da quantidade de herbicidas aplicados.

Caractersticas funcionais desejveis: menor toxicidade ou

alergenicidade, maturao tardia, aumento do teor de
amido, prazo de validade dilatado.
Suprir deficincias nutricionais.
Fornecer o aporte correto de nutrientes chave.

Resistncia Broca do Milho

Um gene de Bacillus thuringiensis foi introduzido em milho, o qual passa
ento a produzir a toxina, tornando-se resistente s larvas de broca de
milho.
Desvantagens da Biotecnologia Agrcola:
Possvel aumento da alergenicidade de alguns alimentos.
Propagao de genes de resistncia a pesticidas e antibiticos
Eliminao de populaes benficas como abelhas, minhocas e
espcies de plantas
Empobrecimento da biodiversidade

Arroz
Base de alimentao em muitos pases asiticos cultivado e selecionado
centenas de anos. A China, India e Sudoeste Asitico produzem 90% do
arroz a nvel mundial, principalmente em sistema de agricultura tradicional
e de pequena escala.
O melhoramento tem procurado criar variedades mais resistentes a
doenas, a herbicidas e nutricionalmente mais rico.
Golden Rice
um dos exemplos clssicos de alimento transgnico. Sendo o
arroz muito pobre em ferro e vitamina A, em regies onde
constitui a base da alimentao surgem problemas de
insuficincia, que no limite conduzem cegueira.

Biotecnologia Ambiental
Biotecnologia

Biotecnologia Ambiental

Qumica
Biomedicina
Farmacutica

Sustentabilidade

Biorremediao

Engenharia Gentica

Bioenergia

Tecnologia de
Processamento

Agricultura

Tratamento de Efluentes

Alimentao

Recursos Hdricos

Fermentao

Monitorizao Ambiental

Recuperao de matriaprima

Protemica
Genmica

Em Biotecnologia Ambiental podemos:

Identificar e seleccionar microrganismos, enzimas e plantas intervenientes
em processos ambientais especficos.
Desenvolver processos de produo de bioenergia
Desenvolver tcnicas de biorremediao para a minimizao ou eliminao
de poluio em ecossistemas
Seleccionar biomarcadores e bioindicadores
Desenvolver processos ou etapas tecnolgicas para obteno de produtos
com menor impacte ambiental.
Implementar e monitorizar processos de tratamento biolgico de efluentes
lquidos e gasosos, lamas e tambm de resduos.

Poluentes Ambientais:
Tipo de Poluente
Inorgnicos
Metais, Nitratos, nitritos, fosfatos,
cianetos, amianto
Orgnicos
Biodegradveis
Petroqumicos,
Sintticos
Biolgicos
Patognicos
Gasosos
Gases
Volteis
Partculas

Exemplos
Cd, HG, Ag, Co, Pb, Cu, Cr, Fe

Efluentes Domsticos, industriais e agrcolas

Diesel, Benzeno, Tolueno, Etilbenzeno, Xileno
Pesticidas, organo-halogenados,
hidrocarbonetos aromticos policclicos.
Bactrias e vrus

Dixido de enxofre, dixido de carbono, xidos

nitrosos, metano
Compostos orgnicos volteis
PM10 (<10 m, como: cimentos, fungos,
aerossis, cinzas)

Compostos orgnicos sintticos

Exemplo relao estrutura molecular - biodegradabilidade:
Detergentes aninicos sintticos
No biodegradveis
ex. alquilbenzeno sulfonato (ABS) cadeia lateral
ramificada
difcil ataque enzimtico
Biodegradveis
ex. alquilbenzeno sulfonato linear (LAS) cadeia lateral linear
degradao por mecanismo de oxidao
(metabolismo dos lpidos- lcool c. Carboxlicooxidao
quebra do anel benznico).

BOD
carncia bioqumica de oxignio (CBO) ou, em ingls, biological oxygen
demand (BOD)
Uma das medidas mais utilizadas para estimar o nvel de poluio que uma
determinada quantidade de efluente poder causar numa gua
Trata-se de uma medida da quantidade de oxignio necessria pelas
bactrias para oxidar aerobicamente o efluente a CO2 e H2O.

Teste BOD 5

Determinao ao fim de cinco dias e a 20C, da quantidade de oxignio

consumida por uma cultura mista de microorganismos inoculada no lquido
a testar.
O processo de oxidao relativamente lento e no de completa nos cinco
dias.

COD
Carncia qumica de oxignio (CQO) ou, em ingls, chemical oxygen
demand (COD)
Avaliao da quantidade de matria orgnica mediante uma oxidao
qumica.
Reagentes utilizados nos testes: dicromato de potssio e cido sulfrico
concentrado, a quente.
Em geral, o valor do COD ser superior ao BOD5, que representa a uma
oxidao parcial da matria orgnica.

Monitorizao da poluio
Mtodos fsicos e qumicos.
Mtodos alternativos in situ avaliao do efeito real da poluio
Biomarcadores efeito dos poluentes nas caractersticas fisiologicas,
bioqumicas e moleculares de organismos dos ecossistemas
Ao longo de um intervalo de tempo; indicam risco de exposio especfica;
informao toxicolgica.
Bioqumicos, imuno-qumicos e indicadores genticos
Bioindicadores efeito dos poluentes em organismos representativos do
ecossistema
permitem identificao e quantificao do efeitos dos poluentes
Distribuio vasta, abundantes e fixos, disponibilidade ao longo de todo o
ano, fcil colheita, factor de concentrao elevado de um poluente
especfico e sensveis ao poluente
Abelhas (metais, extrados de abelhas e mel); bivalves (metais
bioacumulao nos tecidos).
Contaminantes orgnicos e
inorgnicos

Origem:
- Efluentes industriais
- Fugas de fuel
- Exausto de gases
- Fugas lixeiras e aterros
- Aplicao excessiva de pesticidas
- Derrames acidentais

Biorremediao

Origem:
Solventes Clorofrmio, tetracloreto de
carbono
Pesticidas DDT, lindano
Herbicidas Atrazina
Petroqumicos Benzeno, Tolueno,
PAHs, Xileno
Explosivos Trinitrotolueno (TNT)
Metais Pesados CD, Pb, HG

Uso de microorganismos (indgenas ou introduzidos em meios

contaminados) e plantas com capacidade de degradar os poluentes em
produtos de menor toxicidade ambiental.

Biorremediao vs outras tecnologias para tratamento de gua e

solo
Vantagens:
Custos reduzidos
Elevada aplicabilidade
Processo in situ impacte
ambiental minimo
Tecnologia limpa
Sem produo de resduos

Desvantagens:
Baixas concentraes de poluentes limitaes impostas pela cintica
microbiana
Elevadas concentraes toxicidade
para microorganismos
Poluentes no biodegradveis
Processo in situ lentos, dificil
monitorizao
Processo Ex situ ocupao de
grandes reas e emisses de
compostos volteis
Estatgias de biorremediao
Microorganismos endgenos
Estimulao de populao endgena
Bioaugmentao
Microorganismos geneticamente modificados
Fitorremediao.

Bioarejamento
Fornecimento de ar + extraco de vapor
Aplicao de vcuo em profundidade
Contaminantes volteis e solos permeveis

Biodisperso
Maior actividade biolgica - maior fornecimento de oxignio por disperso
de ar ou oxignio no solo
Solos com nvel de contaminao elevada

Fitorremediao
Utilizao de plantas para a remoo ou para diminuio da toxicidade de
contaminantes de solo e gua.
-Melhor opo ponto de vista esttico
-Eficiente para baixas nveis de contaminao mista
-Possibilidade de recuperao de metais
-Barato
Desvantagens:
- mais lento que outros processos de biorremediao (vrias fases de
crescimento)
- Os contaminantes podem afectar o crescimento das plantas que
acumulam poluentes

- Contaminantes constituem um perigo para vida selvagem e cadeia

alimentar

Requisitos para as plantas utilizadas em fitorremediao:

- ser tolerantes ao poluente
- crescimento rpido com elevado rendimento por rea
- acumulao de metais nas partes colectveis
- sistema de razes profundo
- factor de bioconverso elevado

Planta hiperacumuladores
50-100 vezes

Concentrao de poluente na planta

comparativamente com o meio
ambiente

Hiperacumulao adsoro, transporte e translocao de grandes

quantidades de metais.

Fases operacionais de um sistema de Tratamento de Efl uentes

Tratamento preliminar
(fase de preparao)
operaes fsicas de separao de slidos
gradagem/tamizao;igualizao; triturao; remoo de
leos/flotao; decantao primria
remoo de slidos (< 1cm) e partculas de areia - desarenamento.
Tratamento primrio
Decantao primria
sedimentao dos slidos leva formao de lamas
base do processo a reduo da velocidade da corrente
tempo de residncia no decantador primrio de 1-3 horas
sedimentao da maioria dos slidos em suspenso
eliminao de 50-60% das matrias em suspenso do efluente
sada efluente constitudo por partculas coloidais, partculas em
suspenso de pequenas dimenses e matria orgnica dissolvida.
Tratamento secundrio
fase de tratamento biolgico
emoo das culturas de microorganismos que crescem custa da
matria orgnica
bioreactor (vrios tipos)
+ decantao (ou processo de sedimentao secundrio lamas
secundrias)
Microorganismos

Aerbios
Anaerbios

Suspenso
Imobilizados

Exemplos de processos:
amas activadas e sistemas de lagunagem (de oxidao ou
fotossintticas- aerbias; lagoas anaerbias ) biomassa activa em
suspenso
filtros de percolao, discos biolgicos (aerbios) e leito fluidizado
(anaerbios) biomassa agregada sob a forma de biofilmes, imobilizados
em partculas slidas ou superfcies.
Tratamento tercirio
( ou de afinao ou tratamento avanado de guas residuais)
remoo de microorganismos, fosfatos e nitratos aplicao de
processos de filtrao tratamento com cloro (eliminao de coliformes).

Classifi cao dos processos biolgicos

Processos aerbicos em suspenso:

Lamas activadas
Lagoas arejadas
Digesto aerbica
Lagoas fotossintticas

Processos aerbicos em suporte:

Filtros de percolao
Discos biolgicos
Processos anxicos:
Desnitrificao em suspenso
Desnitrificao em filme fixo
Processos anaerbicos:
Em suspenso digesto anaerbica
Em suportes filtros anaerbicos.
Processos Biolgicos Sistemas de lagunagem
Aerbia predomina zona aerbia <1m ; DO mantido em
toda a profundidade principalmente devido fotossntese

Lago
as

Facultativas existncia simultnea de zona aerbia e

anaerbia; 1-2.5m
Anaerbias predomina zona anaerbia; cargas orgnicas
elevadas
Maturao ou tercirias afinao de outros processos
biolgicos; DO por fotossntese e rearejamento superficial

 Lagoas arejadas - oxigenao forada

-Sistemas sequenciais
A utilizao de um sistema de lagoas em srie, aumenta a eficincia do
processo;
Tipos especiais de lagoas:
Lagoas de macrfitas
Lagoas de macrfitas com razes
Lagoas de macrfitas flutuantes
Lagoas de piscicultura (peixes herbvoros)
Lagoas fotossintticas de alta carga
Lagoas arejadas mecanicamente

Tratamento de lamas activadas convencional

Recirculao contnua de lamas sedimentadas para o bioreactor.
Para manuteno de biomassa elevada no tanque 20% das lamas activadas
so recirculada.

Processos Biolgicos de Tratamento

Efluentes Lquidos Matria orgnica + compostos azotados e fosfatados
Amnia
Protenas
Aminocidos

1/3 para o
crescimento
de biomassa

Nitrificao/Desnitrificao
Processos integrados na operao normal das lamas activadas
Tambm podem ser aplicados processos fsicos e qumicos
Trocas inicas
Osmose inversa
Precipitao qumica.

Amnia - Efluente domstico 25mg/L

Efluente industrial at 5g/L
Txico para vida aqutica (<0.5mg/L)
Aumenta necessidade de tratamento de gua com concentraes
elevadas de cloro
Oxidao amnia a nitrato Nitrificao
Nitrato a Azoto molecular Desnitrificao

Processo de crescimento em suportes

Biofilme
microorganismos + partculas + polmeros extracelulares
espessura entre 100m e 10mm
condies de crescimento e hidrodinmica do sistema
Suporte
Plstico
Rocha ou gravilha, entre outros materiais
Camada de Lquido camada de difuso separa do meio lquido
Processo limitado por difuso

Filtros de Percolao (Trickling filters)

Processo de tratamento biolgico de crescimento aerbio sobre suportes.

Objectivos:
remoo de matria orgnica das guas residuais.
tambm utilizados em processo de nitrificao.

Discos Biolgicos (Rotating biological contactor)

Discos rotativos parcialmente imersos no efluente.
Perodo de rotao no submerso permite manuteno de populao
aerbia.

Tratamento e Destino Final das Lamas

Tratamento Avanado de guas Residuais

Critrios de seleco:
Destino das guas residuais tratadas
Natureza do efluente
Compatibilidade operacional e processual
Disponibilidade para deposio final dos contaminantes
Meios econmicos e disponibilidade para implementao dos
sistemas

Regime Geral da Gesto de Resduos

Definies
Princpios gerais de gesto de resduos
Regulao
Registo de informao e acompanhamento
Regime econmico e financeiro
Regime contra-ordenacional
Resduo - Qualquer substncia ou objeto de que o detentor se desfaz ou
tem a inteno ou a obrigao de se desfazer, nomeadamente os
identificados na Lista Europeia de Resduos.
Valorizao - qualquer operao, nomeadamente as constantes no anexo II
do presente decreto -lei, cujo resultado principal seja a transformao dos
resduos de modo a servirem um fim til, substituindo outros materiais que,
caso contrrio, teriam sido utilizados para um fim especfico ou a
preparao dos resduos para esse fim na instalao ou conjunto da
economia.
-Utilizao principal como combustvel ou outros meios de produo
de energia.
Eliminao - qualquer operao que no seja de valorizao,
nomeadamente as includas no anexo I do presente decreto -lei, ainda que
se verifique como consequncia secundria a recuperao de substncias
ou de energia;
- Deposio sobre o solo ou no seu interior, por exemplo em aterro
sanitrio.

Princpio da Hierarquia dos Resduos

Valorizao e Eliminao

Biotecnologia Farmacutica
Introduo; Conceitos bsicos
Red Biotechnology Interface com outras reas da Biotecnologia

Interfaces
DNA (genmica, farmacogentica, engenharia gentica, etc)
Protenas e molculas (engenharia de protenas, protemica,
hormonas e fatores de crescimento, etc)
Cultura e engenharia de clulas e tecidos (cultura de clulas e
tecidos, vacinas, manipulao de embries)
Tecnologia de Bioprocessos (biorreatores, bioprocessamentos, etc)
Organismos subcelulares (terapia gnica e vetores virais)
Associada a avanos nas terapias utilizadas no tratamento de:

Diabetes
Hepatite B e Hepatite C
Cancro
Artrite
Hemofilia
Fraturas sseas
Esclerose mltipla
Doenas cardiovasculares ()

Agente Biolgico

Podem ser microrganismos celulares, animais ou plantas ou ainda as

suas molculas (enzimas, anticorpos, DNA, etc)

A Biotecnologia Farmacutica um campo de trabalho multidisciplinar; as

bases so da Biotecnologia e muitos dos restantes conhecimentos so
provenientes da Medicina e da Engenharia.

Produtos farmacuticos tradicionais

Molculas qumicas pequenas
Alvo especfico
Tratam os sintomas de determinada doena
Uma molcula com um nico alvo

Produtos Biofarmacuticos
Molculas grandes de natureza proteica
Permitem atingir fins inacessveis para as drogas tradicionais
Alvo so os mecanismos de desenvolvimento da doena

Molculas Qumicas Pequenas

Sntese por via qumica

Molculas Grandes Proteicas

Criadas por via de clulas vivas
Biotecnologia Farmacutica
Uso de microrganismos (leveduras, E.coli)
Produo de insulina
Produo de antibiticos

Boom da Produo de Antibiticos

1928 Alexander Fleming descobre a Penicilina
Na dcada de 40 os antibiticos passam a ser produzidos
industrialmente (processos industriais fermentativos processos de
separao e purificao muito complexos) nos Estados Unidos
penicilina e estreptomicina
Atualmente os antibiticos so produzidos por vias semi-sintticas.

Biofarmacuticos
Produtos farmacuticos de origem biolgica extrao direta de fontes
biolgicas (e.g. sangue no caso da insulina, fontes alternativas);
glndulas pituitrias no caso da hormona de crescimento humano
(HGH)
Desvantagens:
Escassez quantidades diminutas comprometem a
comercializao destes agentes.
Contaminaes transmisso de HIV em hemoflicos,
transmisso de Creutzfeldt-Jakob em pacientes tratados
com HGH (extrada de glndulas pituitrias)
Soluo: Biotecnolgia
Tecnologias desenvolvidas nos anos 70-80 permitiram a produo em larga
escala de centenas de protenas com potencial teraputico:
Tecnologias de DNA recombinante (Eng. Gentica)
Anticorpos monoclonais (Tecnologia do hibridoma)

 Primeiro produto biofarmacutico comercializado: insulina humana

recombinante (E.coli) Humulin (1982)
Desenvolvido pela Gentech e produzido pela Lilly
Produtos farmacuticos mais recentes:
Clulas CHO (chinese hamster ovary)
Provenientes de mamferos
Clulas vegetais

Fontes de Biofarmacuticos
E.coli Bactria mais utilizada na expresso de protenas recombinantes
Porqu?
Modelo tpico em estudos genticos biologia molecular bem
caracterizada
Altos nveis de expresso so conseguidos
Crescimento rpido em meios relativamente baratos
Porque no?
Acumulao intracelular de protenas heterlogas (protenas de
outro organismo expressas no sistema de expresso com o
auxlio de eng. gentica) complica isolamento e purificao
Procariotas so incapazes de processar glicolisao ps
transcricional opo: clulas animais (em aplicao)
Clulas animais como sistemas de expresso de protenas recombinantes
Vantagens: efectuam glicolisao das protenas
Desvantagens: crescimento lento, meios caros

Futuro
Muitos ensaios clnicos em curso (terapia gnica, anticorpos
nonoclonais)
Aumento do nmero de biofarmacuticos no proteicos no
mercado.
Cristalografia de raio X+ NMR+ protemica
Melhor entendimento da relao estrutura-funo das
protenas
Design racional de biofarmacutico

Biofarmacuticos

Antibiticos
Citoquinas - interferes
Factores de crescimento
Hormonas de interesse teraputico
Enzimas teraputicas
Anticorpos monoclonais
Vacinas de DNA
Terapia gnica

Produtos primrios:
fase primria (exponencial) do crescimento

Produtos secundrios:
fase secundria do crescimento (final da exponencial e estacionria)

Aplicaes da Biotecnologia a

Molculas com actividade teraputica

Diagnstico
Sistemas de drug delivery
Engenharia de tecidos
Terapia gnica

Medicina

 grande parte do investimento em Biotecnologia est centrado na rea

dos cuidados de sade, especialmente na descoberta de novos
agentes teraputicos.

Antibiticos e Quimioterpicos
Antibitico: substncia de origem biolgica ou sinttica, que actua
especificamente sobre uma etapa essencial do metabolismo de bactrias
(anti-bacteriano) ou fungos (antifngico).
Agente Quimioterpico: agente qumico, natural ou sinttico, usado no
tratamento de doenas. Actua matando ou inibindo o desenvolvimento dos
microorganismos, em concentraes baixas o suficiente para evitar efeitos
danosos ao paciente.

Antibiticos Modo de sntese

Sntese Microbiana: fungos filamentosos e algumas (poucas) bactrias
Sntese Qumica: Sulfamidas, Cloranfenicol, Antivirais e
Antiprotozorios
Sntese Semi-sinttica: antibiticos naturais modificados pela adio
de grupos qumicos; ampicilina, carbencilina, meticilina.

Antibiticos Modo de Ao

Os antibiticos actuam sobre uma (?)

bacteriano principalmente sobre as
reaces de sntese de:

Protenas (ex. tetraciclina)

Peptidoglicano (ex. ampicilina)
cidos nucleicos (ex. rifampicina)
Folatos (metabolismo de aas, reaces enzim.)(ex. sulfonamidas)

polimixinas alteram a estrutura da

membrana provocando a ruptura
celular. (?)
Antibiticos Estudo da sua atividade in vitro
O efeito de um antibitico baseia-se em estudos experimentais.
Coloca-se a bactria em contacto com o anti-microbiano e estudasse
a sua sobrevivncia em funo do tempo, fazendo variar a
concentrao de antibitico.

Concentrao Mnima Inibitria (CMI)- A mais baixa concentrao de

antibitico que inibe a multiplicao das bactrias, em 18-24h.
Concentrao Mnima Bactericida (CMB)- A mais baixa concentrao de
antibitico capaz de matar, aps 18 horas de contacto a 37C, uma
populao bacteriana.

Antibiticos Contribuio da Biotecnologia

Aumento do rendimento da fermentao.

Melhores processos de recuperao.
Novos mtodos de purificao
A produo continua a aumentar e o preo de custo a diminuir.
Novos conhecimentos sobre as vias biossintticas: genes, enzimas,
melhoramento de estirpes, etc..

Produo de Antibiticos Melhoramento de Estirpes

Os antibiticos so tipicamente metabolitos secundrios.
So normalmente produzidos em grupos de compostos, com
estruturas relacionadas.
A maioria corresponde a molculas orgnicas complexas.

Produo de Penicilina
Exemplo Clssico da Aplicao de Biotecnologia
A penicilina produzida por fermentao, com o fungo Penicillium
chrysogenum.
O estudo comeou na Europa antes da 2 Guerra Mundial, tendo
depois sido interrompido e continuado nos EUA.

 Fez-se investigao clandestina na Espanha e na Holanda.

Fermentao de Penicilinas
Inculo inicial: 100 ml de meio com esporos de P. crysogenum, 4 dias a 25C
Bales de 2 litros
Tanque com 100 litros, com arejamento, agitao, arrefecimento e controlo
do pH, 2 dias
Tanque com 500 litros, com arejamento, agitao, arrefecimento e controlo
do pH, 3 dias
Tanques com 200 000 litros24

Biotecnologia Farmacutica III

Vrus
Entidades potencialmente patognicas cujos genomas so cidos nucleicos
que se replicam no interior de clulas vivas, usando a maquinaria sinttica
celular, e que causam a sntese de partculas que podem transferir o
genoma para outras clulas.
Caractersticas gerais/fundamentais dos Vrus
Estrutura no celular
Parasitas intracelulares obrigatrios
Contm um nico tipo de cido nucleico, que pode ser DNA ou RNA
Possuem um revestimento proteico
Multiplicam-se atravs da manipulao da maquinaria do
hospedeiro
Estrutura Viral
Virio - refere-se a uma nica partcula viral, a qual pode ser composta
por:
Nucleide
Capsdeo: capa proteica de estrutura repetitiva (capsmeros)
Envelope: s existe em alguns tipos de vrus, e usualmente deriva
da membrana plasmtica do hospedeiro.

Vacinas

Viso geral da resposta imune

(1) Imunidade inespecfica os fagcitos engolfam e destroem
os organismos patognicos;
(2) Imunidade mediada por anticorpos os patogenes, ou os
seus produtos, so reconhecidos especificamente por protenas
(anticorpos) produzidas pelos linfocitos
(3) Imunidade mediada por clulas - os patogenes, ou os seus
produtos, so reconhecidos especificamente pelos linfcitos
Imunidade Especfica

O que uma Vacina?

uma substncia derivada, ou quimicamente semelhante, a um
agente infeccioso particular, causador de doenca.
a substncia reconhecida pelo sistema imunitrio;
induz o sistema imunitrio a reagir como se tivesse
realmente sido infectado pelo agente.
O que se entende por imunidade?
Atravs da memria imunolgica, estima-se que o sistema
imunitrio consiga reconhecer e combater com eficcia dezenas de milhar,
ou mesmo milhes, de organismos diferentes.
Em termos gerais, a reaco individual a uma vacina depende,
tambm, da gentica subjacente s caractersticas do sistema imunitrio do
individuo e do seu estado geral de sade.

Tipos de Vacinas
1. Vacinas inactivadas ou inertes
1. Inteiras: o agente viral ou bacteriano e inactivado e incapaz de se
multiplicar
2. Fraccionadas: fraces ou subunidades do agente infeccioso
2. Vacinas vivas atenuadas
O agente patognico e inactivado atravs da passagem por um
hospedeiro no-natural, ou por um meio desfavorvel.
3. Vacinas combinadas ou polivalentes
Produzidas por recombinao gentica, funcionam contra vrios
agentes.
Vacinas Virais
As partculas virais destinadas ao fabrico de vacinas so regra geral
propagadas em sistemas de culturas de clulas animais ou em ovos
fertilizados ou culturas de tecidos embriognicos de galinha.
Novas Vacinas
Vacinas Bacterianas:
Baseiam-se em preparacoes vivas ou inactivadas.
Vacinas vivas inactivadas extractos celulares, sobrenadantes de culturas
celulares, extractos ou clulas inactivadas por calor.
Vacinas vivas atenuadas - baseadas em bactrias patognicas vivas, mas
atenuadas, ou seja que sofreram um processo de eliminao ou reduo da
virulncia, perdendo a capacidade de causar doena clinica. Ex. Vacina da
BCG

Novas Vacinas
Vacinas de ADN
Define-se terapia gentica em animais como: "A transferncia
intencional de material gentico para clulas somticas para fins diferentes
das que influenciam o sistema imunolgico".
A Terapia gentica muitas vezes pretende atingir a expresso do gene
de forma duradoura, sem activar o sistema imunolgico..
Em contraste, a vacinao de ADN definida como a transferncia
intencional de material gentico para clulas somticas com efeitos no
sistema imunolgico. Para a vacinao de ADN, a expresso a curto prazo
suficiente para evocar uma resposta imune.
Vantagens:
Expresso sustentada ao longo do tempo, no sendo necessrios
reforos de vacinao;
Sntese de antignios in vivo sem recurso a infeco ;
Estveis a nvel trmico, qumico e biolgico (no requerendo
refrigerao);
O DNA livre pode ser injectado no msculo, pulverizado ou ingerido
por via oral;
Resposta do sistema imunitrio pode ser muito forte.
Particulas Semelhantes a Virus
Tem estruturas multimricas tornando a produo complexa e
dispendiosa.
Obriga a utilizao de clulas eucariotas (insecto, mamfero,
leveduras).
O principal exemplo deste tipo de vacinas e a Vacina da Hepatite B
Normalmente no induzem uma resposta eterna, sendo necessria
a revacinao ao longo da vida.
Vacina da Hepatite B
A hepatite B e provocada pelo Virus da Hepatite B (VHB).
O vrus transmite-se atravs do contacto com o sangue e fluidos
corporais.
O VHB e um hepadnavrus, possui cido desoxirribonucleico sendo o
nico vrus da
hepatite a possuir DNA como material gentico.
Foram encontrados anticorpos contra os antignios de superfcie
(HBsAg) no soro de indivduos afectados com HBV.
Foi desenvolvido um processo de produo em leveduras das
partculas de HBsAg.
As VLP formadas na levedura tm cerca de 100 monmeros de
HBsAg e conferem imunizao.

Teoricamente um vacina deve ter as seguintes propriedades:

1) Segurana para as pessoas incluindo as imunizadas
2) Administrao fcil, de preferncia por via oral
3) Induo de uma larga gama de respostas imunolgicas
4) Efeito de longa durao numa dose nica
5) Simples de produzir e de baixo custo
6) Com controlo e avaliao de qualidade simples, mas rigoroso
7) Termicamente estvel

Terapia Gnica
Terapia gnica a insero de genes nas clulas e tecidos de um indivduo
para o tratamento de uma doena; em especial, doenas hereditrias.
Alvo Principal doenas que se devem expresso de protenas
deficientes:
Protenas de oncogenes
Formas proteicas no funcionais
Tratamento: expresso da protena apropriada na clula
Em teoria a doena mais fcil de tratar seria uma doena monognica
recessiva hereditria (ex. hemofilia)
inserir a forma funcional do gene.

O conceito - terapia gnica - pode ser aplicado a qualquer

procedimento teraputico em que sequncias nucleotdicas so
intencionalmente introduzidas ou modificadas em clulas/tecidos humanos.
Em geral, as sequncias nucleotdicas introduzidas so molculas de
cDNA de genes normais que iro repor a funcionalidade de genes
correspondentes que se encontram mutados nas clulas/tecidos a serem
tratados.
Terapia Gnica
O tratamento da doena feito ao nvel molecular, elimina-se o
foco da doena.
O conceito de terapia gnica tem vindo a alargar-se para responder
a novas doenas e diferentes estratgias.
Pode o gene no estar em falta, mas o seu emprego ser
teraputico, ou no ser possvel o tratamento por aplicao do produto do
gene.
PRODUO IN VIVO DE PROTENAS TERAPUTICAS
Terapia Gnica
Ex Vivo - as clulas alvo so geneticamente modificadas fora do organismo
e, s depois, transplantadas para o indivduo.
In Vivo - os genes so introduzidos directamente nas clulas alvo.

Futuro: Introduzir um gene teraputico na corrente sangunea e este

encontrar a clula/tecido alvo.

Terapia Gnica
absolutamente determinante para o sucesso da TG:
a escala de tempo de produo do produto codificado pelo gene;
que se atinja o local certo para a insero do gene;
a quantidade produzida dever ser suficiente para funcionar
terapeuticamente.
O protocolo a usar tem que assegurar segurana e inocuidade.
1. Cultura de clulas e tecidos
2. Animais
3. Indivduos

O material gentico dos vrus usado como

vectores alterado:
Os genes virais ou potencialmente
patognicos so removidos;
depois clonado o gene de interesse
(teraputico);
So retirados outros genes acessrios
que evitam que o vrus se torne
patognico;
Por vezes so alteradas protenas do
envelope para que as partculas virais
no sejam destrudas pelo sistema
imunitrio.

Vectores No-Virais:
Lipossomas: esferas de lpidos que no interior possuem DNA
Sistemas no-lipdicos: polmeros de aas (DNA no interior)
Micro-injeco: s pode ser aplicada clula a clula
Gene gun: pouco controlo do local de insero.

Terapia Gnica PROBLEMAS / DESVANTAGENS

Curta durao efectiva (obriga a vrios ciclos de TG)
Resposta imunitria
Problemas com vectores virais (toxicidade, resposta imunolgica e
inflamatria)
Doenas multi-gnicas
Maior probabilidade de induo de tumores
Factores envolvidos na activao de Oncogenes:
Radiao Ultravioleta
Radiaes
Vrus

Anticorpos
Juntamente com as vacinas e seus adjuvantes, os anticorpos representam
um grupo de agentes imunolgicos de larga aplicao mdica.
Utilizados primordialmente no tratamento / preveno de doenas
infecciosas.
Anticorpos
parte integrante do sistema imunitrio
constitudos por glicoprotenas que se denominam imunoglobulinas.
um anticorpo contm 4 polipptidos duas cadeias leves e duas pesadas,
unidas formando uma molcula em Y.
As sequncias de aminocidos das pontas do Y variam enormemente com
o tipo de anticorpo. Estas regies variveis, compostas por 110-130
aminocidos conferem ao anticorpo a especificidade na ligao ao
antignio.
Anticorpos policlonais tradicionais
Utilizados para induo de imunizao passiva contra doenas infecciosas
e outros agentes (particularmente toxinas).
Proteo imunolgica imediata, mas de curta durao (2-3 semanas).
Modo profilctico (prevenir um episdio futuro de doena) ou teraputico
(tratar uma condio j existente).
Exemplo: administrao de anticorpos antitoxina de cobra a indivduos que
vo viajar para zonas onde tais cobras so comuns ou a administrao de
anticorpos contra a toxina da cobra aps uma mordedura.

Anticorpos policlonais
Os anticorpos policlonais so produzidos como resultado da
estimulao de vrios clones de linfcitos B, em resposta a um determinado
antignio.
Apresentam especificidade para cada um dos diferentes
determinantes antignicos.
A contaminao do organismo por um agente patognico conduz,
naturalmente, produo de anticorpos policlonais.
Os anticorpos extrados do soro de animais inoculados com antignios
so policlonais.
Dada a diversidade lomecular do seu contedo, este soro,
tradicionalmente utilizado em processos de imunizao passiva, envolve
riscos de rejeio e ataque imunitrio por parte do receptor.
Anticorpos policlonais tradicionais
As imunoglobulinas purificadas de soro (ou plasma) humano provm de
sangue de indivduos que recentemente foram imunizados contra o
antigene de interesse ou esto em recuperao de uma infeco causada
pelo antigene de interesse.
Anticorpos monoclonais
Nas ltimas
dcadas as teraputicas
baseadas em anticorpos
tm tido por base a
aplicao de anticorpos
monoclonais.
A tecnologia de
produo de anticorpos
monoclonais foi
desenvolvida da dcada
de 70 por Kohler e
Milstein que
conseguiram a fuso
de clulas do
mieloma imortais
com linfcitos-B
produtores de
anticorpos.
Uma parte dos hbridos obtidos, denominados hibridomas, era
estvel, cancergena e capaz de produzir anticorpos, representando uma
fonte inesgotvel de anticorpos especficos (ditos monoclonais).
Aplicaes dos Anticorpos Monoclonais
Tratamento do cancro
Deteco de antignios especficos para fins de diagnstico de
doenas ou condies especficas ex, testes de gravidez, diagnstico de
DST
Purificao de antignios a purificao de enzimas ou interfero
pode ser feita com recurso a anticorpos monoclonais

 Manufactura de vacinas
Transplantes (prevenindo a rejeio)
Deteco e tratamento de doenas cardiovasculares ou agentes
infecciosos.
Tratamento de doenas auto-imunes incluindo artrite reumatide.