En la produccin biotecnolgica de n-butanol a partir de materias primas renovables se han empleado

microorganismo del gnero Clostridium, de las especies: acetobutylicum(es reconocido como productor de
altas de Butanol), beijerinckii, saccharaperbutylacetonium y saccharobutylicu. Estas bacterias generalmente
son: gram positivas, estrictamente anaerobias, su crecimiento se favorece a pH ligeramente cidos y a una
temperatura de 37C. Pueden metabolizar una gran variedad de sustratos como monosacridos
(principalmente Glucosa) y polisacridos que son convertidos en acetona, n-butanol y etanol. [154190]
La temperatura ptima para la fermentacin ABE mediante clostridium est en el rango de 30-40!. La
fermentacin anaerobia de estos microorganismos consta de dos etapas: primero la fase acidogenica y, a
continuacin la fase solventognia.[FTG-I-440 pag 19]
Acidognesis: en esta fase las clulas crecen exponencialmente, la glucosa o fuente de carbono se
metaboliza para formar hidrogeno, dixido de carbono y cidos actico, butrico y lctico. Como consecuencia
de la produccin de los cidos se libera ATP y disminuye el pH del cultivo celular.
Solventognesis: inicia al trmino del crecimiento exponencial y contina hasta la fase de crecimiento
estacionario. [154190 pag 20]
Durante la fermentacin ABE variables como el pH, temperatura, concentracin del sustrato y la concentracin
de productos finales, pueden afectar la produccin de butanol. Un pH de 5 y una temperatura de 37C,
favorecen el crecimiento de C. acetobutylicum y mayor obtencin de butanol; concentraciones inciales de
glucosa mayores a 60 80 g/L causan inhibicin por sustrato y valores superiores a 14 g/L de butanol
presentan inhibicin celular debido a la toxicidad del producto (9). [Medina pag 14].
Los niveles de solventes generados durante la fermentacin ABE dependen de la cepa utilizada, de la
composicin del medio de cultivo y de las condiciones fisicoqumicas del sistema
MICROORGANISMO: clostridium acetobutylicum DSM 1732
Hay varias razones por las cuales con el medio II se logra la mayor produccin de solventes, una de ellas es
que la melaza es una fuente de carbohidratos con un alto contenido de nutrientes (minerales, vitaminas y
aminocidos) que favorecen el desarrollo de la fermentacin ABE, en segundo lugar, con el medio II el
microrganismo crece ms lentamente, lo cual esta inversamente correlacionado con la produccin de
solventes, a menos velocidad de crecimiento mayor produccin de solventes. [pag 3 Articulo Daniela]

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RESULTADOS
Pruebas de lotes
La Figura 3 reporta los perfiles resueltos en el tiempo de la concentracin de clulas de C. acetobutylicum (X), De
lactosa (CL) y de metabolitos (cido actico, cido butrico, etanol, acetona y butanol) como As como del pH, medido
durante un cultivo discontinuo realizado a 50 g / L de lactosa inicial Concentracin (CL, 0). Es posible identificar dos
fases: acidognesis y solvognesis.
El inicio de la produccin de disolventes marca el inicio de la fase de solvognesis (tA22 h).
Despus de un intervalo de tiempo de aproximadamente 8 horas, la fase de acidognesis se caracteriza por: i)Aumento
de la concentracin de clulas y cidos; Ii) un perfil de concentracin celular vs. tiempo que refleja Consumo de lactosa;
Iii) la disminucin del pH; Iv) una relacin molar entre cidos (butrico / actico) Constante e igual a 1,5. La fase de la
disolvenognesis se activa mediante el establecimiento de PH = 4, de acuerdo con resultados anteriores (Jones y
Woods, 1986). La disolvente Fase se caracteriza por: i) la disminucin gradual de la concentracin de lactosa que se
aproxima a una Valor estacionario; Ii) la relacin molar de cido constante e igual a 1,5; Iii) la disminucin gradual de La
concentracin celular como consecuencia de la lisis celular (Mutschlechner et al., 2000, Ezeji et al.,
2007).

Proceso

PRETRATAMIENTOS Y CONDICIONES DE OPERACION

El medio de cultivo adoptado consisti en Extracto de Levadura (YE) a 5 g / L y de DLactosa a una concentracin entre 2 y 100 g / L. El medio se esteriliz en autoclave.

Los cultivos reactivados se almacenaron a 4C en el medio de reserva hecho de 50 g / L de

medio de cultivo de DLactosa suplementado con CaCO 3(18 g / L).

Condiciones y procedimientos operativos Todos los ensayos se realizaron a 35 C en

condiciones anaerobias y no se adopt ningn control del pH. Se prepararon precolturas
inoculando 2 ml del cultivo de reserva en 5 ml de medio sinttico suplementado con lactosa y se
incubaron durante dos das.

El pH se midi fuera de lnea en muestras de 3 ml mediante un pHmetro. El anlisis de las

muestras de cultivo se llev a cabo despus de la centrifugacin a 11.000 rpm durante 10 min.
EN EL REACTOR


El anlisis de las muestras de cultivo se llev a cabo despus de la centrifugacin a 11.000
rpm durante 10 min.A 35 C
BIOMASA

La fase slida se caracteriz para determinar la concentracin de biomasa. La fase lquida

se caracteriz por determinar concentraciones de lactosa y metabolitos y carbono orgnico total
(TOC). La densidad celular se determin midiendo la absorbancia a 600 nm (espectrofotmetro
UV-VIS de Cary-Varian mod 50).
Fase de separacin
FASE DE SEPARACION

Cuando se ingresa la mezcla, acetona, butanol y etanol, a una columna de destilacin

se espera que el componente de volatilidad intermedia se reparta entre las corrientes de
destilado y fondos y que adems presente un mximo de concentracin dentro de la torre. Este
fenmeno permite seleccionar de qu etapa de la columna se debe extraer una corriente lateral
con la mayor cantidad posible de etanol. La influencia del porcentaje de lquido que se extrae en
la corriente lateral sobre los perfiles de concentracin dentro de la columna de destilacin

COMERCIALIZACION