INTRODUCCIN

Durante toda su historia, la humanidad ha utilizado las plantas aromticas y sus

componentes por sus propiedades medicinales y por su grata fragancia. Este
uso ha evolucionado en la actual agroindustria de plantas aromticas y aceites
esenciales (AEs), la cual tiene muchas aplicaciones en las industrias
perfumstica, cosmtica, de alimentos, aromaterapia, farmacolgica, etc. A
pesar de la riqueza en flora, Colombia, curiosamente, no ha sido un pas con
tradicin en la industria esenciera. La Universidad Industrial de Santander se
ha destacado por realizar algunos estudios acerca de la composicin y
extraccin de AEs.
Actualmente, las cscaras de naranja son producto de desecho en los lugares
donde se procesa el fruto para la obtencin de jugos. Este aceite tiene un bajo
costo en el mercado comparado con las dems esencias; algunos de sus
componentes son inestables y poco solubles en alcohol y agua. La
desterpenacin del Aceite Esenciales de naranja permite obtener un aceite ms
estable, con mejores caractersticas organolpticas y con un valor comercial
ms alto. Adems, luego de la desterpenacin, se encuentran en el producto
final nuevos compuestos que antes no eran detectados debido a su baja
concentracin.
El aceite esencial es una mezcla de componentes voltiles, producto del
metabolismo secundario de las plantas. Se forman en las partes verdes (con
clorofila) del vegetal y al crecer la planta son transportadas a otros tejidos, en
concreto a los brotes en flor. Es uno de los ingredientes bsicos en la industria
de los perfumes, alimenticia y en medicina. El objetivo general es obtener el
aceite esencial a partir del la corteza del limn (citrus limonium) como aditivo en
la industria cosmtica y alimenticia, a travs los procesos de expresin a mano
utilizando una esponja, desterpenacin y destilacin al vaco, de los cuales se
obtiene un aceite alta calidad, siendo estos procesos una va ms accesible
para las personas interesadas en producir este tipo de aceites, debido a su
practicidad y a la carencia de equipos complicados y relativamente costosos.

GENERALIDADES DE LOS ACEITES ESENCIALES

Definicin. Un aceite esencial (AE) o una esencia se puede definir como una
mezcla compleja de sustancias qumicas que hacen parte del metabolismo de
un vegetal, compuesta generalmente, por terpenos, que estn asociados o no a
otras sustancias, tales como alcoholes, aldehdos, cetonas, ceras, resinas y
pigmentos, entre otros, que en conjunto proporcionan a las esencias el olor que
las caracteriza. Generalmente, los AEs se extraen de las llamadas plantas
aromticas, ya que aunque la mayora de los vegetales las contienen, son
stas ltimas las que los poseen en mayor cantidad [5, 30, 57].

Los AEs se clasifican con base en diferentes criterios. Segn la consistencia de

las esencias, stas se dividen en fluidas, blsamos y oleorresinas. Por su
origen, se clasifican como naturales, artificiales y sintticas, y de acuerdo con la
naturaleza de sus componentes mayoritarios se clasifican en aceites tipo
monoterpenoides, sesquiterpenoides y compuestos oxigenados [5, 57].

Una misma planta puede aportar diferentes tipos de AE, dependiendo de

diversos factores, algunos intrnsecos a la especie vegetal, como en el caso del
naranjo, donde la composicin del Aceite Esenciales depende de la parte de la
planta que sea utilizada (hojas, flores o cscaras del fruto) [5, 11], y otros
extrnsecos, dependen de las condiciones ambientales (clima, calidad del
suelo, exposicin a la luz, hora de recolecta del material vegetal, etc.). En
algunas investigaciones se estudi la variacin de la composicin del Aceite
Esenciales en funcin de la exposicin de la planta a diferentes niveles de
sombra (Lippia alba) [15], la poca del ao (mandarina) [24], la maduracin de
la flor y el pH de extraccin (Ylang ylang) [64].

Propiedades fisicoqumicas de los aceites esenciales. En general, los AEs son

voltiles, lquidos a temperatura ambiente, translcidos y de color amarillo.
Cuando se exponen al aire, se tornan espesos y se colorean intensamente.
Poseen una densidad normalmente menor que la del agua, excepto algunas
esencias como la del clavo. Los AEs refractan la luz polarizada, tambin
presentan un poder rotatorio caracterstico, debido a que en su composicin
existen numerosos productos pticamente activos. Estas dos propiedades son
de gran importancia en la deteccin de adulteraciones en las esencias [5, 30,
57].
En cuanto a sus solubilidades, tienen la particularidad de que, si bien son
solubles en medio no polar, suelen tener una solubilidad alta en etanol y, en
algunos casos, tambin en agua, lo que es ampliamente explotado en la
elaboracin de fragancias y soluciones hidroalcohlicas para la industria
farmacutica y cosmtica [5].
Mtodos de obtencin de los aceites esenciales. El mtodo a utilizar para el
aislamiento de las esencias es funcin, entre otros factores, del tipo de material
vegetal (MV) a procesar [5, 30]. Los siguientes, son algunos de los mtodos
empleados en laboratorios y a nivel industrial:

Expresin: Este mtodo es muy comn en la obtencin de esencias de

los ctricos. Presenta la ventaja de manejar temperaturas bajas. Consiste en la

ruptura de las glndulas que contienen el Aceite Esenciales y, luego, en la
recoleccin inmediata de la esencia, para evitar que sea reabsorbida por la
corteza esponjosa resultante [5, 30].

Destilacin: La destilacin puede realizarse de tres formas: llevando al

estado

de

ebullicin

una

suspensin

acuosa

de

material

vegetal

(hidrodestilacin), poniendo el MV sobre un falso fondo que impide el contacto

con el medio lquido en ebullicin (destilacin con agua y vapor) o aplicando
vapor directo al MV (destilacin con vapor), que por su sencillez, bajo costo y
altos rendimientos es la tcnica ms aplicada en la industria de AEs [5, 57].

Control de calidad de los aceites esenciales. El control de los AEs tiene

como objetivo garantizar que el Aceite Esenciales posee unas determinadas
caractersticas analticas, y que stas se mantienen de un lote de produccin a
otro. El control es herramienta clave en la evaluacin del cumplimiento de
normas de calidad, para diferenciar las calidades, determinar el origen del
producto y posibles adulteraciones en ste, e.g. el Aceite Esenciales de naranja
frecuentemente es adulterado con limoneno (sinttico o aislado) o con una
mezcla de hidrocarburos terpnicos de diferentes fuentes [5, 42].
En la actualidad, los mtodos modernos de anlisis de la composicin de los
AEs estn fundamentados en la cromatografa de gases capilar, usando
detectores convencionales, principalmente, de ionizacin en llama (FID) y
selectivo de masas (MSD) [5,6].
Aplicaciones de los aceites esenciales. Los AEs tienen un amplio campo de
aplicaciones en diversas ramas de la industria. Por ejemplo, son utilizados para
otorgar un olor agradable a los productos en la industria perfumstica
(perfumes, aguas de tocador, colonias, etc.), en la industria cosmtica se usan
para hacer ms agradable o impartir identidad a un producto (jabones,
desodorantes, pasta de dientes, etc), tambin son usados para otorgar
fragancias a productos de aseo (limpieza de pisos, aromatizantes del ambiente,
etc.). Los AEs se utilizan en la industria del papel para impregnar de fragancias
cuadernos, tarjetas, papel higinico, toallas faciales y sanitarias, etc., y en la en
la industria del plstico, textil y de pinturas, son usados como enmascaradores
de olores [5, 30, 33, 57, 67].

Su sabor tambin es utilizado por varios sectores de la industria de alimentos,

e.g. en confitera, en lcteos, en productos crnicos, en licores, en
condimentos, en bebidas, en medicamentos y en la industria tabacalera [33].
La rectificacin o fraccionamiento es una operacin a contracorriente en varias
etapas, lo cual permite aumentar el grado de pureza de los componentes de la
mezcla. En una columna de rectificacin, cada etapa representa una destilacin
sencilla (vase Figura 1).

El gas sube desde el rehervidor y el lquido desciende desde el condensador. A

medida que el gas asciende se va enriqueciendo con los componentes ms
voltiles. Lo contrario le ocurre al lquido, el cual a medida que desciende se
enriquece con los compuestos menos voltiles. La parte superior de la torre se
denomina seccin de enriquecimiento y la parte inferior de la torre seccin de
empobrecimiento. Parte del vapor condensado es devuelto a la torre (reflujo) y
otra parte se recoge como destilado. La relacin entre el reflujo y el destilado
que sale de la torre se denomina relacin de reflujo externo. El tiempo de
operacin para alcanzar cierto grado de pureza depende de esta relacin [26,
31, 32, 39, 52, 63].
Para facilitar el contacto gas-lquido, en las torres se instalan platos o stas se
rellenan con material de empaque (anillos Rasching, anillos Pall, etc.). La
pureza final de cada componente depende, entre otros factores, del diseo del
plato o del tipo de empaque escogido [52, 54, 56].

En las columnas batch, generalmente, al inicio del proceso todo el vapor, que
se condensa, es devuelto a la torre hasta alcanzar el estado estable. Luego, se
da salida al condensado de la torre y, finalmente, se escoge la relacin de
reflujo dependiendo del grado de pureza deseado [9, 39, 52].
1.2

EL ACEITE ESENCIAL DE NARANJA

El naranjo, es un arbusto, o ms exactamente, un rbol, del cual se pueden

obtener distintos productos aromticos, segn la parte que sea utilizada. De
sus flores se obtiene la esencia de nerol o azahar, de sus hojas se obtiene la
esencia de petit-grain y de la cscara de sus frutos se obtiene la esencia o el
aceite esencial de naranja. Estas esencias tienen una variedad de aplicaciones
en la industria de sabores y fragancias, tambin son diferentes en cuanto a sus
caractersticas fisicoqumicas, organolpticas y costos [5, 11]. El Aceite
Esenciales de naranja se encuentra en glndulas ubicadas en el flavedo
(Vase Figura 2). La composicin del Aceite Esenciales de naranja vara
dependiendo del grado de maduracin de los frutos [11].

Aplicaciones del aceite esencial de naranja. El Aceite Esenciales de naranja

tiene aplicaciones en la industria de cosmticos, perfumes y alimentos, entre
otras. Esta esencia exhibe numerosas actividades farmacolgicas, tales como,
antibacterial, antifngica y antimicrobial, entre otras [13]. Pero tambin se ha
reportado, que esta esencia es causante de algunas enfermedades, e.g. su
contacto con la piel, puede causar dermatitis. En alimentos la mxima
concentracin reportada es de 0.043% para el Aceite Esenciales de naranja

amarga, 75% para el Aceite Esenciales de naranja dulce y 0.01% para el Aceite
Esenciales desterpenado de naranja [44]. Se ha demostrado el efecto lipoltico
(reduccin de grasas) de los AEs de ctricos [10] y su propiedad como calmante
de la ansiedad [43].
Composicin qumica del aceite esencial de naranja. La composicin
qumica del Aceite Esenciales de naranja est representada principalmente por
monoterpenos (M), sesquiterpenos (S) y compuestos oxigenados (CO) [11, 30,
42]. Los monoterpenos son hidrocarburos que tienen en su estructura dos
unidades isoprnicas (C5H8), y los sesquiterpenos poseen tres de estas
unidades. Los compuestos oxigenados son los mayores contribuyentes en el
olor y el sabor caracterstico de los aceites esenciales, sin embargo, los
monoterpenos y sesquiterpenos tambin contribuyen pero en una pequea
proporcin [22, 30]. Por ejemplo, en el caso de los ctricos, el butirato de etilo
da una nota a fruta madura, el trans-2-hexanal aporta un olor a hojas verdes,
el 1,8-cineol a eucalipto, el borneol a tierra y los aldehdos n-octanal y citral
(mezcla de los ismeros neral y geranial), son los responsables del olor
caracterstico a naranja intensa y limn, respectivamente [22].
Es

caracterstico

de

muchos

monoterpenos

su

inestabilidad

fcil

reordenamiento intramolecular debido al oxgeno, luz o calor. Como resultado

de estas transformaciones se producen olores desagradables en los aceites
almacenados [30, 61]. Adems, los monoterpenos, a diferencia de sus
derivados oxgenados son poco solubles en agua, lo que limita mucho su uso
en productos perfumsticos. Por lo tanto, es conveniente remover parcial o
totalmente estos compuestos para aumentar la vida til del producto [5, 30, 33].
Desterpenacin del aceite esencial de naranja. El proceso de remocin de
terpenos,

llamado

compuestos

desterpenacin

oxigenados

(aldehdos,

holding,
alcoholes,

permite
steres

concentrar
y

los

cetonas),

conduciendo a un producto final ms estable y mucho ms soluble en agua. A

un Aceite Esenciales crudo se le puede agregar valor a medida que su calidad
y su pureza aumentan [30, 33].

De acuerdo con el proceso aplicado y la concentracin deseada, se puede

obtener aceites esenciales de diferentes calidades. Si se parte de un Aceite
Esenciales crudo o single fold, luego, se obtiene un Aceite Esenciales dos fold,
el cual es un Aceite Esenciales single fold que se le ha retirado el 50% de los
terpenos, un Aceite Esenciales 3 fold es un Aceite Esenciales dos fold al cual
se le ha retirado el 50% de los terpenos, y as, sucesivamente, se tienen
aceites cuatro, cinco, seis, siete, ocho, nueve fold. Por ltimo, se obtiene el
Aceite Esenciales diez fold, considerado como un Aceite Esenciales libre de
terpenos, que supera varias veces en calidad organolptica, estabilidad y
precio al Aceite Esenciales crudo [33]. En algunos casos, se denomina fold a
las veces que se concentran los compuestos oxigenados [14].
El limon. En el proceso de la desterpenacin del Aceite Esenciales de naranja
se obtiene una fraccin rica en limoneno, el cual es comercializado por las
industrias que realizan la desterpenacin de ctricos [21, 62]. El limoneno, es un
monoterpeno cclico con dos enlaces dobles aislados. Es incoloro y posee un
ligero olor a ctrico. Es el componente mayoritario de los AEs extrados de la
corteza de los frutos ctricos [11, 30, 57].

III. OBJETIVOS
Objetivo general
Evaluar y comparar la efectividad del aceite esencial de cscara de naranja y
de limn, mediante generacin de vapores y por adicin directa, como agente
antimicrobiano contra el crecimiento de Aspergillus flavus.
Objetivos especficos
Extraer el aceite esencial de cscara de naranja mediante la tcnica de
destilacin

con

arrastre

de

vapor,

as

como

determinar

sus

caractersticas fsicas y qumicas.

Determinar los efectos de la concentracin y la concentracin mnima
inhibitoria del aceite esencial de cscara de naranja para el crecimiento
de Aspergillus flavus, utilizando la metodologa de dilucin en agar.
Determinar los efectos de la concentracin y la concentracin mnima
inhibitoria del aceite esencial de cscara de naranja para el crecimiento

de Aspergillus flavus, utilizando como metodologa la generacin de

vapores. Comparar estos efectos con los del aceite esencial diluido en
agar.
Caracterizar el Cultivo del Limn (citrus limonium).
Identificar los Procesos Qumicos implcitos en la obtencin del Aceite
Esencial del Limn.
Disear el procedimiento experimental para la obtencin del Aceite
Esencial del Limn.

IV. MARCO TERICO

4.1

Naranja

La naranja es un fruto ctrico de nombre cientfico Citrus sinensis, que consta

de varios carpelos o gajos fciles de separar, cada uno de los cuales contiene
una pulpa de color variable entre el anaranjado y el rojo, jugosa y suculenta;
adems posee varias semillas y numerosas clulas jugosas, cubiertas por un
exocarpo coriceo o cscara de color anaranjado cuyo interior es blanco, que
contiene numerosas glndulas llenas de aceites esenciales. Se consume como
fruta fresca, en jugo y enlatados; igualmente se utiliza para elaborar mermelada
y para la obtencin de aceites esenciales de la cscara (SAGARPA, 2009).
La naranja es la fruta que ms se produce en el mundo, alcanzando volmenes
cercanos a 80,000,000 toneladas (Siller, 1998). De acuerdo con la FAO (2009)
la naranja ocupa el quinto lugar en produccin en Mxico, ubicando a este pas
en la cuarta posicin a nivel mundial en produccin de dicho ctrico, ya que en
2008 se produjeron 4,306,633 toneladas. Los principales estados productores
de Naranja en orden de importancia: Veracruz, que representa una
participacin del casi el 50% de la produccin nacional, San Luis Potos,
Tamaulipas y Puebla (SAGARPA, 2009).
Como se ha dicho, la naranja se produce de manera abundante en Mxico y
por ende, su consumo dentro del mismo es elevado. Por otro lado, se ha
especificado que el aceite esencial que se extrae de la cscara de la misma
posee ciertos niveles de actividad antimicrobiana (Viuda-Martos et al., 2008;
Fisher y Phillips, 2008), lo que la hace atractiva para la extraccin y estudio de
dicho aceite, pudiendo incluso dar lugar a un mayor aprovechamiento del
abundante desecho que significa la cscara de la naranja.

4.2

Mohos en alimentos

Los mohos son hongos filamentosos que estn ampliamente distribuidos en la

naturaleza y se ven frecuentemente sobre pan viejo, queso o frutas. Cada
filamento, denominado hifa, crece fundamentalmente en el extremo por un
mecanismo de extensin celular. Las hifas crecen en masa en lo que se
denomina micelio, que puede verse fcilmente sin ayuda del microscopio
(Madigan et al., 1999).

La produccin de esporas es caracterstica de los hongos en general. Una

espora es una unidad diminuta y simple, que se propaga sin un embrin y que
sirve para la produccin de un nuevo individuo de la misma especie (Jay,
1996). Estas pueden transportarse por agua, aire o insectos y proporcionan al
moho el color que se aprecia (USDA, 2005).
Las paredes celulares de los mohos maduros son extremadamente rgidas,
resistiendo los ataques enzimticos y protegiendo al protoplasto del dao por
condiciones extracelulares. Pueden tolerar grandes diferencias en presiones
osmticas (Moreno, 2002).
Los mohos, al igual que otros organismos, absorben los materiales externos a
travs de sus membranas, transportndolos a los sitios metablicos dentro del
micelio, donde los transforman en energa para los procesos biosintticos y de
conservacin. Se consideran tres regiones importantes: la pared celular, la
membrana citoplsmica y la regin comprendida entre ellas. Dichas regiones
juegan un papel muy importante en el transporte de nutrientes que algunas
veces pueden favorecer al moho y otras perjudicarlo, causando dao a la clula
(Burnett, 1976).
De acuerdo con Frazier y Westhoff (1988) existen varios medios que pueden
ser tiles para el cultivo de mohos, presentndose el crecimiento siempre en
las siguientes fases:

1.

Fase inicial o lag. El nmero de microorganismos permanece constante

o puede disminuir. Esto puede deberse a un ajuste en su medio ambiente.

2.

Fase logartmica. Los microorganismos aumentan en nmero debido a

un abundante suministro de alimento.

3.

Fase de crecimiento negativo. La multiplicacin comienza a decrecer a

causa de la disminucin en el suministro de nutrientes y la acumulacin de

productos de desecho, que pueden ser txicos para el organismo.
4.

Fase estacionaria. Aqu la tasa de mortalidad se encuentra en equilibrio

con la tasa de natalidad, lo cual se debe a la disminucin de nutrientes y la

acumulacin de productos de desecho.
5.

Fase de mortalidad acelerada. La tasa de mortalidad es mucho mayor;

va en aumento conforme se agotan los nutrientes y la acumulacin de

productos de desecho es muy grande.
4.2.1 Importancia de los mohos en alimentos
Existen varios mohos que deterioran a los alimentos. Esto se debe en gran
parte a su amplio intervalo de crecimiento, tanto de pH (2 a 8.5), como de
temperaturas (10 a 35C). Asimismo, los requerimientos de humedad para los
mohos son relativamente bajos, ya que la mayora de las especies pueden
crecer a una aw de 0.85 o menor (Moreno, 2002).
Los mohos crecen en los alimentos con

una apariencia aterciopelada y

algodonosa, algunas veces coloreada, siendo notorios a simple vista y dando

as, un aspecto desagradable a los alimentos (Frazier y Westhoff, 1988). El
moho presente en algunos alimentos puede ser parte del proceso de
elaboracin de los mismos, como en ciertos tipos de quesos; sin embargo, en
otros casos, el alimento enmohecido es desechado por ser inadecuado para el
consumo humano, ya que puede causar alergias o enfermedades.
Algunos hongos que crecen sobre materiales vegetales producen toxinas con
efectos indeseables para plantas y animales. Las micotoxinas son metabolitos
secundarios txicos con diferentes propiedades qumicas, biolgicas y
toxicolgicas, producidas por hongos toxignicos que se desarrollan en

productos vegetales. Estas sustancias provocan intoxicaciones conocidas

como micotoxicosis (Ruiz y Front, 2007).
Elevados niveles de micotoxinas en la dieta pueden causar efectos adversos
agudos y crnicos sobre la salud del hombre y de una gran variedad de
especies animales, pudiendo afectar a distintos rganos, aparatos o sistemas;
especialmente al hgado, rin, sistema nervioso, endcrino o inmunitario (Ruiz
y Front, 2007).
Debido a su bajo peso molecular, las micotoxinas suelen ser muy
termorresistentes y pueden difundirse a grandes distancias en los alimentos
(Martnez, 2008).
4.2.2 Aspergillus flavus
Dentro de los mohos de importancia en los alimentos se encuentran los del
gnero Aspergillus; siendo de particular inters Aspergillus flavus, causante del
deterioro de una amplia variedad de productos alimenticios como frutas y
hortalizas, semillas, granos, etc.

Aspergillus flavus es un moho mesfilo que tiene un aspecto aterciopelado,

algodonoso y de color verde (figura 1). Su temperatura ptima de crecimiento
es 37C, es capaz de crecer en un rango de pH de 3.0 a 6.8 y su actividad de
agua mnima vara de 0.8 a 0.9 (Banwart et al., 1982).
Bajo condiciones favorables de temperatura y humedad, estos mohos crecen
en ciertos alimentos, dando como resultado la produccin de micotoxinas,
conocidas para este gnero como aflatoxinas; son compuestos txicos y
cancergenos. La contaminacin ms enunciada se ha encontrado en nueces,
cacahuates y otras semillas oleaginosas, incluyendo maz y algodn
(Walderhaug, 2007).
4.3

Agentes antimicrobianos

Los agentes antimicrobianos son sustancias usadas para conservar los

alimentos, previniendo el crecimiento de microorganismos y el subsecuente

deterioro. Su funcin tradicional es prolongar la vida de anaquel y preservar la

calidad a travs de la inhibicin de microorganismos deteriorativos. Sin
embargo, los antimicrobianos se han utilizado de manera creciente, como
intervencin primaria para la inhibicin o inactivacin de microorganismos
patgenos en alimentos (Davidson et al., 2005).
Los antimicrobianos se pueden clasificar en los compuestos presentes de
manera natural en el producto o alimentos y los que son aadidos
intencionalmente. Entre los aditivos antimicrobianos directos aprobados para
ser incorporados en los alimentos estn los cidos orgnicos y sus derivados,
steres, nitritos, nitratos, entre algunos otros. Mientras que los antimicrobianos
indirectos son sustancias que se aaden con otros objetivos a los de inhibir
algn microorganismo en particular, pero que por su condicin qumica inhiben
a algn microorganismo; entre ellos se encuentran los fosfatos, antioxidantes
fenlicos o el EDTA (Davidson et al., 2005).
4.3.1 Modo general de accin de los agentes antimicrobianos
Los antimicrobianos usados en alimentos inhiben el metabolismo y por lo tanto,
el crecimiento de bacterias, mohos y levaduras. La accin de stos puede ser
inhibitoria o letal, dependiendo de las concentraciones en que se utilicen (Lck
y Jager, 1997).
Aunque los mecanismos de accin de los agentes antimicrobianos son distintos
y no todos son conocidos, se sabe que la muerte de los microorganismos se
basa en una serie de acontecimientos altamente selectivos. Junto a
mecanismos fsicos y fisicoqumicos, interfieren reacciones puramente
bioqumicas. La actividad se debe principalmente a que atacan la pared
celular, membrana celular, enzimas metablicas, la sntesis de protenas y el
sistema gentico. Siendo que cada uno de estos puntos es esencial para el
desarrollo celular, si uno es atacado o inactivado, la velocidad de crecimiento
del microorganismo se ve minimizada (Davidson et al., 2005).
4.3.2 Antimicrobianos naturales
La estabilidad de algunos alimentos contra el ataque por microorganismos se
debe a la presencia de ciertas sustancias de manera natural, las cuales, se ha
demostrado que tienen actividad antimicrobiana (Jay, 1996).

Se ha desarrollado un amplio rango de antimicrobianos naturales a partir de

microorganismos, animales y plantas. Un gran nmero de ellos ya se emplean
en la conservacin de alimentos, mientras que muchos otros an son
estudiados para su uso como conservadores, como los extractos de plantas y
frutos.
Matamoros (1998) menciona la existencia de una gran cantidad de plantas
como recurso potencial de compuestos antimicrobianos; stos incluyen
numerosas sustancias de bajo peso molecular, como los compuestos fenlicos,
que son los ms predominantes. Particularmente, se han encontrado en
diversas plantas, compuestos con actividad antifngica, pertenecientes a
grupos

qumicamente

diversos

como

alcaloides,

flavonoides,

fenoles,

cumarinas y terpenoides (Ben-Yehoshua et al., 1995).

4.4 Aceites esenciales
Los aceites esenciales (tambin llamados aceites voltiles o etreos) son
mezclas complejas de sustancias, de olor aromtico intenso, generalmente
lquidos voltiles arrastrables por el vapor del agua, contenidos en los
vegetales. Poseen una alta volatilidad a temperatura ambiente, la cual no se
observa en otros agentes antimicrobianos; esta caracterstica, junto con sus
propiedades

antivirales,

antimicticas,

antioxignicas,

antiparasticas

insecticidas, han incrementado su inters por ellos (Ortuo, 2006; Prez, 2006).
La actividad antimicrobiana de los aceites esenciales se debe a la presencia de
sustancias bioactivas como flavonoides, terpenos, coumarinas y carotenos
(Viuda-Martos et al., 2008).
De los millones de plantas existentes en nuestro planeta, se conocen alrededor
de 4000 aceites esenciales distintos. Las plantas aromticas son las que
concentran una mayor cantidad de esencias y por tanto, constituyen la materia
prima para su obtencin, bien sea empleando toda la planta, slo sus hojas,
flores, frutos o races, dependiendo de la planta concreta de que se trate
(Ortuo, 2006).
En una misma especie, la composicin tanto cuali como cuantitativa de la
esencia puede variar segn la parte considerada, las condiciones del medio en

que se hayan desarrollado, la poca del ao, su dotacin gentica particular,

etc. (Fisher y Phillips, 2008).
La principal ventaja de los aceites esenciales es que pueden utilizarse en
cualquier alimento y la FDA las ha considerado como sustancias GRAS
(Generally Regarded as Safe), siempre y cuando su efecto se logre con el
mnimo cambio en las propiedades organolpticas del alimento (Viuda-Martos
et al., 2008; Burt, 2004).
V.- FUNDAMENTO
En este trabajo, se utilizaron las cscaras de tres variedades de naranja (Citrus
sinensis) ofrecidas en el mercado de la ciudad de Bucaramanga, a saber:
naranja comn en estado medio de maduracin (naranja comn A, NCA), y
maduras (naranja comn B, NCB), naranja tangelo (NTG) y naranja grey
(NGR). Las cscaras de naranja comn se consiguieron en los puestos de
venta de frutas ubicados en las afueras de la Universidad Industrial de
Santander (NCA) y en
Almacenes de Mercados para Familias, MERCADEFAM (NCB). Estas
cscaras fueron productos de desecho, resultantes de la obtencin de jugos.
Para el caso de naranja grey (NGR) y naranja tangelo (NTG) se adquirieron
frutos completos en MERCADEFAM.
5.1. TRATAMIENTO DE LA MATERIA PRIMA
Antes de la extraccin del AE, las cscaras se sometieron a los siguientes
procesos:

Separacin de la pulpa y la cscara utilizando un elemento afilado como;

tijeras o un cuchillo (slo en el caso de las cscaras de naranja comn).

Pelado del fruto (naranja tangelo y naranja grey);

Lavado de la cscara;

Pesado de las cscaras: se utiliz una balanza marca Mettler Toledo, ref.

PB1502-5;

Picado de las cscaras en trozos de tamao aproximado de 3 cm2;

Remojo en agua de las cscaras durante 2 horas.

5.2. EXTRACCIN DEL ACEITE ESENCIAL DE NARANJA

La extraccin se llev a cabo por el mtodo de hidrodestilacin asistida por la
radiacin de microondas (MWHD), descrito en [58]. Se utiliz un equipo de
destilacin tipo Clevenger [19], con reservorio de destilacin Dean-Stark y
adaptacin para calentamiento por radiacin de microondas, a travs de un
horno convencional marca LG, con una potencia de salida de 800 V (se utiliz
el 50% de potencia) y frecuencia de radiacin de 2.5 GHz.
En cada extraccin, se usaron entre 700 y 750 g de material vegetal (cscaras
picadas) y 300 mL de agua destilada. Al final del proceso se agreg sulfato de
sodio al AE, para secar el agua residual. En total, se utilizaron unos 35 kg de
cscaras. Las extracciones se realizaron por triplicado.

5.3. DESTERPENACIN DEL ACEITE ESENCIAL DE NARANJA

La desterpenacin del Aceite Esenciales de naranja se llev a cabo en un
sistema de destilacin al vaco con las siguientes especificaciones: Bchi,
rotavapor R-205 (cuerpo del equipo), bomba Bchi VAC V-502, controlador de
vaco V-800 y un bao de calentamiento Bchi B-49.

Se fijaron tres valores diferentes de presin de vaco, a saber: 35, 70 y 105

mbar; cada una con un P de 5 mbar. Las pruebas se realizaron por triplicado y
en cada una se utilizaron 15 mL de Aceite Esenciales de naranja (mezcla de
Aceite Esenciales de naranja comn y tangelo). Al cabo de 30 min, tiempo de
duracin de cada destilacin, se pesaron el Aceite Esenciales destilado
(concentrado, rico en monoterpenos) y el Aceite Esenciales residual
(concentrado, rico en compuestos oxigenados).
Controlador de presin

5.4. ANLISIS CUALITATIVO DEL ACEITE ESENCIAL DE NARANJA

Para cada prueba se tomaron 50 L de Aceite Esenciales y se diluyeron en
diclorometano hasta completar 1 mL. Luego, 1 L de la solucin se inyect al
equipo descrito a continuacin, para su anlisis cromatogrfico. Los anlisis de
los AEs crudos y desterpenados; as como de las fracciones ricas en
monoterpenos, se llevaron a cabo mediante cromatografa de gasesespectrometra de masas (GC-MS) en un equipo Agilent Tecnologies 6890 Plus
(HP, Palo Alto, California, EE.UU.), acoplado a un detector selectivo de masas
Agilent Tecnologies MSD 5973, equipado con un puerto de inyeccin
split/splitless (relacion split 1:50), un inyector automtico Agilent Tecnologies
7863, un sistema de datos HP-MS ChemStation G17001DA (Versin
D.00.01.27, 2002), incluyendo las bases de datos Adams, NBS 75K, WILEY
138K y NIST 2002.

5.5.

DETERMINACIN DE LAS PROPIEDADES FSICAS DEL ACEITE

ESENCIAL DE NARANJA
Se determinaron el ndice de refraccin (20C) de los AEs y la densidad (25C),
segn el procedimiento descrito en [30, 67]. Los valores se compararon con los
reportados en la literatura [11, 30, 45].

5.6.

CUANTIFICACIN DEL LIMONENO EN EL Aceite Esenciales DE

NARANJA.
La cuantificacin del limoneno en los AEs crudos y los resultantes de la
desterpenacin, se llev a cabo empleando la tcnica de patrn externo,
utilizando limoneno (C10H16, Sigma, 97% de pureza) como patrn. Se
prepararon soluciones de limoneno en diferentes concentraciones (500, 600,
700 y 800 mg/mL) y stas analizaron bajo las mismas condiciones
cromatogrficas que las muestras de los AEs.
Se obtuvieron las reas correspondientes a estas concentraciones, se
graficaron lo datos obtenidos y con base en una curva de calibracin se calcul
el factor de respuesta (Rf) del limoneno. Utilizando el factor de respuesta (Rf),
se corrigi el valor de las reas obtenidas para el limoneno en los anlisis de
los AES y se determin la concentracin de ste en todas las muestras (Ver
Anexo B).

5.7.

DETERMINACIN

DEL

NMERO

DE

PLATOS

TERICOS,

NECESARIOS PARA LA DESTERPENACION DEL Aceite Esenciales DE

NARANJA.
La determinacin del nmero de platos tericos (NPT) se realiz con la ayuda
del Software PRO/II v. 7.0. Se simul el proceso de la desterpenacin del
Aceite Esenciales de naranja en una columna de rectificacin batch, con una
presin de vaco de 35 mbar. La concentracin inicial del limoneno en
el

Aceite Esenciales

se

determin experimentalmente. El modelo

termodinmico UNIFAC fue escogido para el clculo de los coeficientes de

actividad. Se determin la relacin de reflujo y el NTP, con el cual se alcanzar
la pureza deseada en el menor tiempo (menos gasto energtico).

Debido a la gran cantidad de compuestos encontrados en el Aceite Esenciales

de naranja y a la ausencia de muchos de stos en la base de datos del
software usado, se escogieron 6 compuestos que representan la fraccin
liviana (-pineno, - felandreno, n-octanal, -felandreno, -terpineno y
limoneno) y 9 compuestos que representan la fraccin pesada (n-octanol,
nonanal, nonanol, decanal, decanol, undecanal, dodecanal, dodecanol y cido
dodecanoico); a continuacin aparecen caractersticas fisicoqumicas bsicas
de estos compuestos:
Compuesto

Frmula

Peso molecular

-pineno

C10H16

155

n-octanal
-felandreno
limoneno
-felandreno
-terpineno
n-octanol
nonanal
nonanol
decanal
decanol
undecanal
dodecanal
dodecanol
cido dodecanoico

C8H16O
C10H16
C10H16
C10H16
C10H16
C8H18O
C9H18O
C9H20O
C10H20O
C10H22O
C11H22O
C11H24O
C12H26O
C12H24O2

1
3
1
2
1
3
1
3
1
3
1
3
1
3
1
4
1
4
1
5
1
5
1
7
1
8
2
8

171
171
175
178
183
195
191
213
208
231
272
238
259
308

teb

CONCLUSIONES
Se observaron cambios tanto cuantitativos como cualitativos en la composicin
qumica de los aceites esenciales, extrados de diferentes variedades de
naranja. El limoneno fue el componente mayoritario (72-86,2%) en las esencias
analizadas y los monoterpenos formaron la familia principal de compuestos (7490,6%). El contenido total de aldehdos determinado en el aceite esencial de
naranja comn, el cual es de gran importancia para la determinacin de su
calidad, fue de 3,4 a 8,7%, que super el contenido de las esencias producidas
industrialmente en Italia y Estados Unidos (0,47-1,6%).

A travs del proceso de desterpenacin por destilacin sencilla al vaco, se

obtuvo un aceite con el contenido de limones 50% ms bajo; la concentracin
alta de limoneno en la esencia limita su uso en perfumera, puesto que este
monoterpeno es muy poco soluble en agua y etanol. En el producto
desterpenado se identificaron 72 compuestos nuevos, de ellos 35 son
compuestos oxigenados, que no se detectaron en el aceite crudo, por
encontrarse en concentraciones muy bajas. stos ltimos tienen olor ms rico,
son ms solubles en agua y etanol, lo que amplia mucho el espectro de las
aplicaciones industriales del aceite esencial desterpenado. Las fracciones
terpnicas resultantes del proceso de la desterpenacin de la esencia de
naranja desterpenada, pueden ser excelente materia prima para la obtencin
de limoneno, importante producto en la industria qumica. La presin (35-105
mbar) y la temperatura de trabajo (90- 130C), no conllevaron la degradacin
trmica del aceite esencial de naranja.
En los sistemas vivos los aceites esenciales probablemente se relacionan con
el metabolismo, fertilizacin o proteccin de los enemigos. Estos se encuentran
en brotes, flores, corteza, hojas, tallos, frutos, semillas, madera races y
rizomas, y en algunos rboles en exudados oleorresinosos.
Ningn aceite esencial ha sido reproducido con xito. Sin embargo, los
mtodos sintticos han logrado la produccin comercial de componentes
importantes de los aceites esenciales como linalol, acetato de linalilo, nerodilol

y citral. Hay que tener muy en cuenta sobre cual proceso es el ms adecuado
para obtener un aceite de mayor calidad. La mayor parte de los aceites se
obtienen por destilacin, generalmente con vapor, pero ciertos aceites se
pueden daar con altas temperaturas. De los procesos de exprimir a mano, el
proceso de esponja es el ms importante, ya que produce el aceite de mayor
calidad. Este proceso es aplicado generalmente para la obtencin de aceites
ctricos.
A partir de la corteza del limn se obtiene la esencia, que es empleada en
perfumera. El aceite esencial del limn es uno de los aceites ms ricos en
vitaminas, contienen sobre todo vitamina C y caroteno, que es una forma de
vitamina A. Tambin tienen importancia en medicina, por su sabor como por su
efecto calmante del dolor y su valor fisiolgico. En caso de utilizarlo como
aditivo, es combinado con los alimentos para producir ciertas modificaciones
que impliquen conservacin, color, reforzamiento del sabor y estabilizacin, los
cuales van a ayudar a efectuar una mejora sorprendente en nuestros
suministros alimenticios, as como a disminuir el trabajo en la cocina.
El mtodo empleado para la extraccin del aceite esencial del limn aunque
muy tedioso, es efectivo ya que se logra la obtencin del producto de la corteza
del limn.
Para la separacin del aceite del limn del solvente, no se logr una buena
separacin, pus la destilacin al vaco fue imposible efectuarla completamente
por fallas en la bomba de vaco por lo que tuvo que hacerse una destilacin
simple a baja presin

RECOMENDACIONES
Realizar un estudio tcnico-econmico de la posibilidad de producir y
comercializar en Colombia, el aceite esencial de naranja desterpenado, as
como las fracciones ricas en compuestos monoterpnicos, resultantes del
proceso de la desterpenacin.

Estudiar el proceso de la desterpenacin mediante el uso de otras tcnicas,

e.g., fluidos supercrticos, solventes, lquidos inicos y/o la combinacin de
stas.
A continuacin se muestran ciertas recomendaciones para obtener un aceite
esencial de limn de ptima calidad:
Disminuir mejor la presin durante la destilacin para poder separa eficazmente
el d limoneno de la solucin alcohlica.
Utilizar limones de concha gruesa para poder extraer ms fcilmente el aceite
esencial.
Determinar la pureza del aceite esencial para poder definir la eficacia del
mtodo.
El disolvente seleccionado debe tener las siguientes condiciones:
Debe ser selectivo, esto es disolver rpida y totalmente los componentes
odorferos, con solo una parte mnima de materia inerte.
Tener un bajo punto de ebullicin.
Ser qumicamente inerte al aceite.
Evaporarse completamente sin dejar cualquier residuo odorfero.
De ser posible, no inflamable.

BIBLIOGRAFA

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