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Ministrio da Sade
Todos os direitos reservados. permitida a reproduo parcial ou total desta obra, desde que citada a fonte e que no seja para
venda ou qualquer fim comercial. A responsabilidade pelos direitos autorais de textos e imagens desta obra da rea tcnica.
Pode ser acessada na ntegra na Biblioteca Virtual em Sade do Ministrio da Sade: http://www.saude.gov/bvs.
Tiragem: 1a Edio - 2012 - 5.000 exemplares
Elaborao, distribuio, informaes:
MINISTRIO DA SADE
Secretaria de Gesto do Trabalho e da Educao na Sade
Departamento de Gesto da Educao na Sade
Esplanada dos Ministrios, bloco G, sala 725
CEP: 70058-900, Braslia - DF
Telefones: (61) 3315 2858 / 3315 3848 - Fax: (061) 3315 2862
E-mails: sgtes@saude.gov.br / deges@saude.gov.br
Homepage: www.saude.gov.br/sgtes
Coordenao:
Maria Auxiliadora Crdova Christfaro
Mnica Sampaio de Carvalho
Mozart Julio Tabosa Sales
Autores:
Ftima Regina Gomes Pinto
Letcia Maria Correia Katz
Reviso tcnica:
Catarina de Oliveira Neves
Coordenao editorial:
La Simone Carvalho
Mario Correia da Silva
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SUMRIO
Apresentao............................................................................................................................... 7
1 Tcnicas de coleta em citopatologia geral.............................................................................
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Apresentao
A Secretaria de Gesto do Trabalho e da Educao na Sade (SGTES) do Ministrio da Sade
(MS), por meio da Coordenao-Geral de Aes Tcnicas em Educao na Sade do Departamento de
Gesto da Educao na Sade (DEGES), desenvolve polticas e programas com o propsito finalstico
de ordenar recursos humanos para a sade, como determina o Art. 200 da Constituio Federal, e, nesta
perspectiva:
Atender ao que dispe a Lei N 8080/90, especificamente no seu Art. 6;
Contribuir para a adequada formao, alocao, qualificao dos profissionais e valorizao e
democratizao das relaes do trabalho;
Ampliar as oportunidades de formao profissional e de qualificao tcnica para trabalhadores
do nvel mdio, tendo como propsito a qualidade das Redes de Ateno Sade do SUS;
Consolidar, nos planos poltico, pedaggico e administrativo, as Escolas Tcnicas do SUS
(ETSUS).
A efetividade, o atendimento oportuno e a qualidade dos servios de sade guardam intrnseca
relao com a formao e a qualificao profissional. Portanto, imprescindvel que os acordos e
respectivos contratos de colaborao entre os entes federativos, objetivando a organizao da rede de
ateno sade, assegurem recursos para o cumprimento e efetivao dos processos de formao e de
qualificao tcnica para o grupo de trabalhadores. Profissionais estes que formam o maior segmento da
fora de trabalho da rea da sade, os tcnicos de nvel mdio.
A efetivao dos objetivos do Programa de Formao de Profissionais de Nvel Mdio para a
Sade (PROFAPS) implica a definio de diretrizes e prioridades para a rea de formao profissional e
de qualificao tcnica com foco nos trabalhadores de nvel mdio do SUS.
Entre essas prioridades est a formao do Tcnico em Citopatologia. Para tanto, foi definido plano
de trabalho cuja execuo resultou no estabelecimento das Diretrizes e Orientaes para a Formao,
fundamentadas nas diretrizes e princpios das polticas nacionais da educao e da sade, publicadas em
2011.
Nessa linha, a SGTES/DEGES investiu na aquisio e produo de recursos e material didtico
especfico para os cursos de formao profissional tcnica, prioritrios no PROFAPS e que esto sendo
desenvolvidos pelas ETSUS.
Para o curso tcnico em citopatologia, a Coordenao-Geral de Aes Tcnicas em Educao
na Sade, junto com as ETSUS e especialistas da rea, definiu e coordenou o processo de elaborao e
produo de material didtico especfico, o que traduz a relevncia da formao profissional tcnica de
nvel mdio na poltica nacional de sade. Este atlas (impresso e digital) um desses recursos.
Organizado tendo como referncia as diretrizes para a formao do tcnico em citopatologia,
seguramente, base tanto para a elaborao e definio do projeto poltico-pedaggico como para o
desenvolvimento do curso.
A produo de material bibliogrfico para o Curso Tcnico em Citopatologia inclui:
Atlas de Citopatologia Ginecolgica (verso impressa e digital)
Caderno de Referncia 1: Citopatologia Ginecolgica
Caderno de Referncia 2: Citopatologia No Ginecolgica
Caderno de Referncia 3: Tcnicas de Histopatologia
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Caderno de Referncia 2
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1 Tcnicas de coleta em
citopatologia geral
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Historicamente, o primeiro relato da utilizao do exame citolgico foi no ano de 1838, por Johannes
Mller, que descreveu a imagem microscpica de clulas malignas obtidas por raspado superficial de
tumores excisados cirurgicamente. Posteriormente, o patologista francs Lebert avaliou citologicamente
espcimes provenientes de efuses, secrees traqueobrnquicas e urina. Mas foi no incio do sculo
XX, precisamente no ano de 1920, que houve um avano importante no diagnstico citolgico com a
utilizao da citologia esfoliativa e aspirativa pelos patologistas Aurel Babes, George Papanicolaou e
James Ewing. Na dcada de 1930, o exame citolgico passou a ser utilizado no diagnstico de tumores
dos vrios stios anatmicos. Neste perodo, Ewing e seus colaboradores popularizaram o uso da agulha
fina para o diagnstico de leses superficiais e profundas, difundindo ainda mais o uso da citologia geral.
Reconhecidamente, a avaliao citolgica apresenta uma srie de vantagens quando comparada
a outros mtodos diagnsticos como, por exemplo, a bipsia. um procedimento com menor grau
de invaso, dispensa o uso de anestesia na maioria das vezes, possui menores taxas de complicaes,
durante e aps a coleta, e fornece resultados rpidos e de baixo custo. No entanto, temos que levar em
considerao a possibilidade de maior nmero de resultados inconclusivos em amostras escassas ou com
artefatos, m interpretao diagnstica pela ausncia da arquitetura tecidual, dificuldade de acesso a
certos rgos e na obteno de espcimes representativos em algumas leses, alm de obscurecimento dos
elementos celulares pela presena de sangue. A quantidade e qualidade do material citolgico so fatores
determinantes na preciso diagnstica e esto diretamente relacionados ao uso de tcnicas adequadas de
amostragem e ao processamento apropriado dos espcimes.
Podemos dividir os espcimes citopatolgicos em dois grandes grupos, dependendo da tcnica
empregada na coleta das amostras:
Obtidos atravs da puno aspirativa com agulha fina (PAAF) ou por capilaridade.
Obtidos a partir da raspagem de uma leso ou de clulas que descamam naturalmente
compreendem os imprints, raspados, escovados, lavados e tambm as anlises de escarro, urina,
secreo mamilar e lquidos cavitrios.
1.1 Puno
um mtodo simples, rpido e seguro que confere boa preciso diagnstica. Pode ser realizado
ambulatorialmente. Complicaes como sangramento, hematomas, processos inflamatrios e pneumotrax,
so raras.
Algumas etapas preliminares e cuidados especficos so necessrios na realizao do procedimento,
como o preparo fsico e psicolgico do paciente, a antissepsia do local a ser puncionado e um pequeno
curativo oclusivo aps a puno. indicado o uso de anestsico na puno de rgos profundos.
Contraindicaes para puno
Presena de distrbios de coagulao.
Tosse (nos casos de puno de tireoide ou transtorcica).
Cisto hidtico (fgado).
Tumor do corpo carotdeo (pelo risco de hemorragia).
Uso de anticoagulantes.
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Figura 1 - Portaseringa.
Instrumento utilizado para
apoiar o conjunto de seringa
e agulha.
Para a realizao da PAAF, devemos colocar o paciente em posio adequada, identificar a leso
por palpao, fazer a antissepsia local, acoplar a agulha seringa e fixar a leso entre o dedo indicador e
o mdio. Em seguida, proceder puno de acordo com a tcnica descrita na figura abaixo.
Figura 2 - Posicionamento do
paciente para a realizao da
PAAF de ndulo da tireoide.
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Materiais lquidos, puncionados de ndulos csticos, necessitam de centrifugao prvia a fim
de utilizar o sobrenadante na confeco do esfregao. Em tais casos, as amostras so encaminhadas ao
laboratrio em recipiente limpo ou na prpria seringa (sem a agulha, fechada com a tampa desta e vedada
com esparadrapo), mantendo-as em geladeira se no puderem ser encaminhadas imediatamente. No
preciso fixao prvia do material nem o uso de anticoagulante.
Nos espcimes predominantemente celulares dos ndulos slidos, remover a agulha da seringa
e puxar o mbolo para trs, a fim de permitir a entrada de ar na seringa. Acoplar novamente a agulha e,
com o orifcio do bisel tocando levemente a superfcie de uma lmina, empurrar o mbolo da seringa a
fim de depositar uma gota do material, com 2 mm a 3 mm de dimetro, diretamente sobre a lmina para a
preparao dos esfregaos.
A tcnica de confeco dos esfregaos varia de acordo com o tipo de amostra obtida e com a
familiaridade do profissional por determinado mtodo. Em se tratando de material hemorrgico
e semisslido, utilizar a extremidade de outra lmina inclinada em 45 para estender o espcime
delicadamente, em movimento nico, rpido e uniforme, semelhante ao que feito no esfregao para
hematologia. Para espcimes excessivamente fluidos, inclinar a lmina para baixo e remover, com papel
absorvente, o excesso de lquido que se deslocou por gravidade, utilizando a parte mais consistente que
restou na lmina para confeccionar o esfregao. Quando a amostra for constituda por coloide ou outro
tipo de substncia semelhante, deve-se comprimi-la entre duas lminas, puxando-as horizontalmente em
direes opostas, suavemente. Quando o material for colhido no prprio laboratrio, aps confeco dos
esfregaos (em torno de seis por puno), deve-se lavar a agulha e a seringa com 10 ml de soluo salina,
colocar o lavado em um tubo limpo devidamente identificado e centrifug-lo a fim de obter esfregaos
adicionais com o material sedimentado.
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Pele
Agulha
Ndulo
1.2 Imprints
Os materiais citolgicos so obtidos a partir de amostras de bipsia, da superfcie de corte de um
rgo ou de leses midas. A tcnica consiste na remoo de clulas superficiais atravs do contato ou toque
direto da lmina sobre o material que se quer examinar. Esta tcnica oferece informaes diagnsticas
complementares nos estudos das leses da mama, de rgos do aparelho digestivo, pele, medula ssea etc.
Os imprints so de grande valia no exame intraoperatrio como mtodo auxiliar da congelao,
podendo, inclusive, substitu-la quando o material escasso ou quando se pretende evitar as alteraes
artefatuais decorrentes do processo de congelamento do tecido. Tambm so utilizados em salas de
necropsia para confirmao diagnstica rpida de suspeitas levantadas na macroscopia.
O esfregao preparado pressionando-se o material direta e suavemente sobre uma lmina limpa
por duas ou trs vezes, em vrios locais, devendo ser imediatamente fixado para evitar o dessecamento.
Para retirar o excesso de sangue e fluido do material, deve-se previamente secar a superfcie de corte com
uma toalha de papel ou gaze.
Esta tcnica possui algumas limitaes, uma delas a obteno de amostras com escassa
celularidade quando realizada em tumores de textura fibrosa, como os fibromas, fibrossarcomas e
inflamaes cicatriciais. Alm disso, quando realizada em leses ulceradas, a amostra pode conter restos
celulares, bactrias e clulas inflamatrias, que podero ocultar a etiologia da leso ou mascarar processos
tumorais. Nesses casos, se houver alguma rea slida, recomenda-se a utilizao concomitante de outros
mtodos, como a citologia aspirativa ou o raspado superficial da leso, para aumentar o nmero de clulas
esfoliadas.
1. 3 Raspados
Obtemos raspados de superfcies cutneas ou mucosas, como pele, boca, uretra, canal anal etc.,
utilizando-se lminas de bisturi, swabs, esptulas ou escovas apropriadas. recomendvel no lavar a leso
previamente nem usar medicaes tpicas, para no prejudicar a qualidade das amostras. Rotineiramente,
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so feitas duas a trs raspagens da leso ou da rea que se pretende examinar, de forma suave para evitar
sangramentos. O material colhido deve ser uniforme e suavemente estendido sobre uma lmina de vidro
limpa, em uma fina camada, e imediatamente fixado em lcool a 95% ou com spray fixador.
Em caso de leses vesiculares, estas devem ser rompidas com uma pequena inciso fazendo a
raspagem de suas margens, pois o material existente na base, por ser mal preservado, dificulta o diagnstico.
Em leses no ulceradas ou no vesiculares, aconselha-se aplicar previamente uma compressa de soluo
fisiolgica por alguns minutos, a fim de propiciar maior descamao e melhor preservao celular.
1.4 Escovados
Atravs de aparelhos endoscpicos que possibilitam a visualizao direta da leso a ser estudada,
os escovados permitem adquirir espcimes brnquicos, esofgicos, gstricos e intestinais, principalmente.
Muitas vezes, este mtodo mais eficaz em detectar neoplasias malignas do que a biopsia brnquica, por
exemplo. Nesse caso, aplica-se uma escova na superfcie da leso endobrnquica, atravs do broncoscpio
de fibra ptica, espalhando o material colhido numa lmina para a confeco dos esfregaos ou coloca-se
em um meio lquido de coleta para a realizao de cell block.
O procedimento pode ser feito ambulatorialmente sob sedao leve e com anestesia tpica. O
paciente deve estar em jejum de pelo menos quatro a seis horas e com acesso venoso perifrico. Uma
pequena escova introduzida juntamente com a sonda de um fibroscpio pela cavidade oral, nasal ou anal,
dependendo da localizao do tumor, e suavemente deslizada por cima da leso para efetuar a raspagem.
Posteriormente, a escova retrada para o interior da sonda e retirada junto com esta. Recomenda-se
efetuar o escovado antes de biopsiar a leso, para evitar amostras hemorrgicas. O material escovado
deve ser transferido rolando-se a escova sobre uma lmina de vidro limpa, espalhando-o uniformemente e
fixando-o imediatamente em lcool a 95% ou spray, visando preservar os detalhes da morfologia celular.
Aps a realizao dos escovados aconselha-se fazer, ainda, um lavado da escova, agitando-a em soluo
salina a fim de se examinar tambm o sedimento centrifugado.
1.5 Lavados
Consistem na instilao de soluo salina tamponada na rea da leso, preferencialmente sob
viso endoscpica direta, seguida da aspirao do material. Em geral, so realizados ambulatorialmente,
mediante sedao leve. Os lavados so acondicionados em recipientes limpos com a indicao do local
da coleta. Quando provenientes de diferentes localizaes anatmicas, devem ser colocados em frascos
distintos. Para evitar sua deteriorao, o material deve ser enviado imediatamente ao laboratrio para
processamento ou ser devidamente preservado segundo o tipo de lavado.
1.5.1 Lavado brnquico
Mtodo alternativo e mais comum do que o aspirado, consiste em lavar a mucosa com a instilao
de 3 ml a 10 ml de soluo salina e, em seguida, aspirar o lquido que dever ser centrifugado, utilizandose o concentrado para fazer esfregaos e cell blocks. Armazenar o material aspirado em geladeira at no
mximo 24 horas aps a coleta, sem usar anticoagulante ou fixador. Na impossibilidade de processamento
laboratorial imediato, preservar o material adicionando quantidade idntica de etanol a 50% (ou 70%) ou
Carbowax (a 2% em lcool a 50%).
1.5.2 Lavados broncoalveolares (LBA)
Permitem que as vias areas distais sejam lavadas com vrias alquotas de soluo salina estril.
A primeira alquota mais representativa de material das vias areas mais largas e as seguintes representam
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eliminando a secreo diretamente em um recipiente de boca larga, seco e limpo. Caso haja dificuldade
em conseguir escarro espontneo, pode-se fazer nebulizao simples ou inalao com indutores da tosse.
O material deve ser levado imediatamente ao laboratrio ou conservado na geladeira por no mximo 12
horas. Os esfregaos devem ser preparados a partir de reas que contm fragmentos teciduais, sangue ou
ambos, e devem ser imediatamente fixados em etanol a 95%. Quando a preparao imediata no possvel, deve-se fazer uma pr-fixao do escarro na diluio de 1:1 com etanol a 50% ou 70%, ou utilizar
soluo de polietilenoglicol a 2% (Carbowax) em etanol a 50%. Uma vez utilizado o polietilenoglicol,
este dever ser removido em banho de lcool, antes da colorao.
1.7.2 Urina
Com este espcime possvel detectar leses pr-cancerosas e patologias da pelve renal, bexiga,
ureter e uretra. Antes da coleta o paciente deve esvaziar a bexiga (a primeira urina da manh no
adequada para o exame) e fazer uma hidratao bebendo um copo de gua a cada 30 minutos, durante
o perdo de uma hora e meia a duas horas. Colher a prxima urina espontnea da manh diretamente no
recipiente coletor, de preferncia no laboratrio que ir processar o material, aps asseio da genitlia com
gua e sabo. Para promover a mobilizao de urina no interior da bexiga e facilitar a descamao celular,
alguns autores aconselham 15 minutos de exerccios fsicos (correr, pular) antes da coleta. Volumes entre
25 e 100 ml de urina espontnea ou cateterizada so suficientes e o processamento deve ser imediato ou
realizado em at seis horas aps a coleta. Durante esse perodo, manter a urina refrigerada ou preservada
em etanol a 50% (em partes iguais) ou a 70% (na proporo de duas partes de urina para uma de lcool).
1.7.3 Secreo mamria
Objetivando auxiliar o diagnstico de infeces agudas, papiloma ductal, dilatao cstica ductal
e, mais raramente, o diagnstico de neoplasias, a avaliao citolgica de descargas papilares geralmente
utilizada em pacientes que no apresentam massas palpveis nem anormalidades na mamografia e naquelas
com secreo sanguinolenta.
Para coletar o material, comprimir delicadamente a rea subareolar e o mamilo entre os dedos
polegar e indicador. Sem pressionar, colocar a secreo diretamente na lmina, prxima extremidade
fosca, estendendo o material com o auxlio de outra lmina. Fixar imediatamente em lcool a 95% ou
deixar secando ao ar.
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2 Processamento tcnico e
laboratorial dos espcimes
citolgicos: adequabilidade
das amostras
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A qualidade do diagnstico citolgico depende de vrios fatores operacionais, sobretudo da adequabilidade, tanto da coleta quanto dos esfregaos quanto do processamento laboratorial dos espcimes.
Os materiais encaminhados ao laboratrio so obtidos pelo mdico assistente durante o exame clnico e
geralmente chegam como esfregaos fixados ou a fresco. Aps o registro de entrada do material, se j
devidamente fixados, os esfregaos podem ser corados. Espcimes mucoides ou lquidos, normalmente
a fresco, necessitam de etapas complementares antes da colorao: se lquidos, submet-los centrifugao, confeccionar os esfregaos a partir do sedimento e fixar em seguida; se mucoides, precisam ser
pr-tratados ou homogeneizados antes da centrifugao, fixando-os aps secar ao ar.
Alguns procedimentos especficos descritos abaixo so necessrios para a obteno de material
citolgico de qualidade, diretamente relacionados com a adequabilidade da amostra.
2.1 Pr-fixao
Tcnica que garante a preservao de espcimes lquidos (do trato urinrio, gastrointestinal ou respiratrio, sobretudo escarro) por dias ou mesmo meses, se necessrio, mantendo a morfologia celular at a
confeco do esfregao. Esta tcnica possui algumas desvantagens, tais como: a coagulao de protenas,
a condensao da cromatina, menor adeso celular e limitao ao uso de certas tcnicas de colorao. As
solues mais comumente utilizadas para este fim so: etanol a 50%, o fixador de Saccomano ou os preparados comerciais especficos.
Dentre eles, o etanol a 50% o melhor e deve ser adicionado coleo lquida em partes iguais,
misturando-se bem. Com exceo do escarro, concentraes maiores no so recomendadas, especialmente em materiais ricos em protenas, porque endurecem a amostra impossibilitando a confeco do esfregao. Para a preservao de escarro, excepcionalmente, utiliza-se o etanol a 70%. O fixador de Saccomano,
inicialmente utilizado na pr-fixao de escarro, teve seu uso estendido para a preservao de lquidos
durante a citocentrifugao, pois evita o colapso celular causado pelo ressecamento do material quando
seco ao ar. constitudo de etanol a 50% com aproximadamente 2% de polietilenoglicol (Carbowax). O
Carbowax slido temperatura ambiente mas pode ser mantido em soluo estoque se adicionarmos
500 ml de etanol a 50% a 500 ml de Carbowax derretido. Para obter um litro de fixador de Saccomano,
misturar 434 ml de gua destilada, 526 ml de etanol a 95% e 40 ml de soluo estoque. Recomenda-se
adicionar quatro gotas do fixador aos fluidos corporais e duas gotas para amostras de urina. Uma vez que
o fixador de Saccomano contm polietilenoglicol, este deve ser removido com um banho de lcool antes
da colorao, para que o material se mantenha adequado avaliao citolgica.
2.2 Centrifugao
O processamento de lquidos de qualquer espcie comea com a centrifugao, visando concentrar
os elementos celulares no sedimento que se forma no fundo do tubo da centrfuga. A centrifugao pode
ser feita com a centrfuga convencional ou com a citocentrfuga, dependendo do tipo de material, ambas
com regulagem de tempo e velocidade de rotao (cronmetro e tacmetro, respectivamente). A quantidade do sedimento obtido aps a centrifugao inicial decide a prxima etapa do processamento: sedimentos
escassos ou invisveis devero ser citocentrifugados, enquanto que os de maior volume fornecem material
propcio para a confeco dos esfregaos ou dos cell blocks.
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2.2.2 Citocentrifugao
Recomendada no processamento de lquor, aspirados de leses csticas, lavados das agulhas
utilizadas em PAAF e em outros espcimes lquidos de pequeno volume ou que produzam escasso
sedimento na centrifugao convencional. A citocentrifugao tem a vantagem de processar rapidamente
pores lquidas de apenas 0,5 ml ou menos, alm de promover excelente recuperao celular e conferir
maior rapidez e facilidade na interpretao citolgica. Amostras com sedimento espesso devem ser
cuidadosamente diludas antes do processamento, a fim de produzir material em monocamada e evitar
esfregaos inadequados com superposio celular.
Tcnica
Centrifugar inicialmente o material pelo mtodo convencional e decantar o sobrenadante.
Encaixar a lmina e o papel de filtro no suporte da lmina e colocar na centrfuga previamente
balanceada.
Pipetar uma gota ou 0,5 ml do sedimento e colocar no coletor, adicionando duas a trs gotas do
fixador de Saccomano.
Centrifugar a 1.000 rpm (ou a 1.500 rpm, dependendo do fabricante) por cinco a seis minutos,
removendo as unidades com lmina e papel de filtro logo aps.
Levantar cuidadosamente o papel de filtro para separ-lo da lmina, evitando contato com
o sedimento. Antes de descartar o papel de filtro, ele deve ser inspecionado, pois algumas vezes
apresenta sobrenadante aderido que pode ser processado a fim de fornecer informaes adicionais.
Fixar a lmina imediatamente em lcool ou spray. recomendvel usar spray fixador, deixando-a
secar por 10 a 15 minutos antes de mergulhar em lcool a 95%.
Para evitar a perda e facilitar a aderncia celular em lquidos aquosos como amostras de urina e
lquor, recomenda-se usar lminas albuminizadas ou acrescentar duas a trs gotas de albumina ao lquido
antes da centrifugao. Outra opo utilizar lminas foscas ou pr-tratadas com o adesivo Poli-D-lisina.
Figura 8 - Citocentrfuga.
Tubos acoplados com as lminas.
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a
b
Figura 10 - Cell Block.
a - Aps centrifugao e fixao do material,
faz-se o corte.
b - As metades so separadas.
c; d - As metades so colocadas num cassete
para processamento idntico ao da biopsia.
c
d
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A fixao pode ser feita a seco ou atravs de substncias fixadoras aplicadas imediatamente aps
a confeco do esfregao. Assim, classificamos as tcnicas de fixao em: mida, de cobertura, mista ou
a seco.
2.5.1 Fixao mida
Recomendada para todo tipo de espcime citolgico, consiste na imerso imediata do esfregao
ainda mido na soluo fixadora, a permanecendo at o processamento laboratorial. As clulas no sofrem
ressecamento e com isso evitam-se artefatos celulares, como o aumento da eosinofilia citoplasmtica, do
tamanho nuclear e o borramento da cromatina, que poderiam induzir a erros diagnsticos ou at mesmo
tornar a amostra inadequada.
O fixador mais utilizado atualmente o etanol a 95%, em virtude da sua eficincia, baixo custo
e ausncia de toxidade. Outra vantagem que ele oferece a de poder ser reaproveitado, bastando filtrlo adequadamente antes de um novo uso para minimizar a contaminao do material com resduos
celulares. Outros lcoois, como o isopropanol ou propanol a 80% e o metanol a 100%, tambm podem
ser empregados como fixadores em citologia. A soluo de lcool-ter em partes iguais, preconizada por
Papanicolaou, quase no mais utilizada nos dias de hoje, pois o ter altamente voltil e inflamvel.
O lcool desnatura as protenas e os cidos nucleicos das clulas, tornando-os insolveis e
estveis. tambm um agente desidratante que causa retrao celular e define melhor o detalhe nuclear
das preparaes citolgicas. O tempo de permanncia da amostra no fixador varia entre 10 e 30 minutos,
podendo nele continuar por, no mximo, uma ou duas semanas. Se for necessrio um tempo mais
prolongado, as lminas devem ser estocadas no refrigerador, a fim de garantir melhor preservao celular
e diminuir o risco de evaporao. O recipiente contendo o fixador, geralmente de plstico ou vidro, deve
ter boca larga, vedao satisfatria (de rosca, de preferncia) e tamanho suficiente para garantir que o
esfregao fique totalmente submerso na soluo. Quando vrias lminas so colocadas no mesmo frasco,
deve-se colocar um clipe de metal na extremidade fosca de cada uma delas para evitar a transferncia de
material de umas para as outras e prevenir a aderncia entre elas.
Se, por acaso, ocorrer defeito na fixao e o material ressecar, as clulas escamosas podero ser
recuperadas antes da colorao reidratando-as em soluo de glicerina e gua destilada em partes iguais
por, no mnimo, uma hora. A seguir, mergulham-se as lminas em dois banhos de lcool a 95% deixando-as fixar por dez minutos para, ento, encaminh-las colorao.
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A permanncia do fixador sobre o esfregao causa de inadequao da amostra. Assim sendo, antes
de iniciar a colorao fundamental remover o polietilenoglicol para permitir a penetrao apropriada dos
corantes, especialmente a hematoxilina e o EA. Com essa finalidade, as amostras so submetidas a dois
banhos sucessivos, de cinco a dez minutos cada, em etanol a 95%.
2.5.3 Fixao mista
Associa a fixao mida com subsequente exposio ao ar e recomendada para o envio de esfregaos a laboratrios distantes. Aps a confeco dos esfregaos, colocar imediatamente as lminas em
fixador lquido, de preferncia o etanol a 95%, retirando-as depois de, pelo menos, 15 minutos. Deixar
secar ao ar e em seguida acondicion-las apropriadamente para o transporte at o laboratrio. Recomenda-se utilizar o mtodo de Ayre e Dakin (1946), que consiste em pingar uma a duas gotas de glicerina sobre
os esfregaos retirados do lcool, cobrir com uma lmina ou lamnula (de 24x60 mm) e envolver em papel
manteiga para o transporte. Ao chegar no laboratrio, o esfregao deve ser novamente colocado em etanol
a 95% antes da colorao.
2.5.4 Fixao a seco
Tambm conhecida como fixao a fresco, geralmente utilizada para coloraes hematolgicas,
como Diff-Quick ou Pantico, e para Giemsa. Os esfregaos devem ser secos o mais rapidamente
possvel, temperatura ambiente ou realizando-se movimentos ao ar para acelerar a secagem. S colocar
os esfregaos em recipientes para transporte depois de completamente secos.
2.5.5 Fixao de esfregaos hemorrgicos
A fim de evitar que o excesso de sangue obscurea os elementos celulares e dificulte ou impea a
interpretao diagnstica, pode-se lanar mo de uma das seguintes opes:
Colocar a lmina em etanol a 50 ou 70%, desidratando depois em etanol a 95%.
Colocar a lmina em etanol a 95% por cinco minutos, depois em soluo de ureia (120 g de ureia
em p dissolvida em 1 litro de gua destilada) por 20 a 30 minutos e, por fim, em etanol a 95%.
Colocar a lmina durante trs a cindo minutos em uma soluo de etanol a 95% (500 ml) com
uma gota de cido hidroclordico e depois mergulh-la em etanol a 95%.
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Colocar uma gota de cido actico glacial em 100 ml de etanol a 95% e mergulhar a lmina na
mistura.
Colocar os esfregaos hemorrgicos no fixador de Carnoy (60 ml de metanol a 95%, 30 ml de
clorofrmio e 10 ml de cido actico glacial) por trs a cinco minutos, at que o sedimento se torne
menos vermelho. Depois transferir as amostras para etanol a 95%. O fixador de Carnoy deve ser
preparado no momento do uso e descartado logo aps. Ao empregar esta tcnica no se esquecer
de reduzir o tempo de permanncia na hematoxilina a fim de evitar que os ncleos se tornem
hipercorados, pois geralmente a retrao nuclear mais intensa que a causada pelo etanol a 95%.
Pode-se utilizar o fixador de Carnoy modificado (soluo com sete partes de etanol a 95% para
meia parte de cido actico glacial) seguido de etanol a 95%.
Esfregaos hemorrgicos provenientes de espcimes lquidos, secos ao ar, podem ser reidratados
mergulhando-os em soluo salina por 30 minutos. Em seguida, fixar em etanol a 95% e corar pelo
Papanicolaou.
Figura 14 - Espcime
hemorrgico e com artefatos de dessecamento.
100x.
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gua destilada
Hematoxilina
gua corrente
Carbonato de ltio
gua corrente
Etanol absoluto
Etanol absoluto
Orange
Etanol absoluto
Etanol absoluto
EA
Etanol absoluto
Etanol absoluto
Xilol
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Na tcnica de Papanicolaou, os banhos aps os corantes so realizados no solvente de cada um
deles. Assim, depois da hematoxilina, que aquosa, as lminas so lavadas em gua e aps o orange G e
o EA, corantes alcolicos, so lavadas em lcool. A gua utilizada depois da hematoxilina tem a funo
de remover o corante que no foi ligado ao ncleo, ao complementada com a aplicao de cido clordrico (diferenciao). Como o citoplasma das clulas fica totalmente descorado, as lminas passam pelo
orange G e pelo EA a fim de cor-los, respectivamente, em laranja intenso e brilhante e em rosa, verde
ou azul. A poro dos corantes que no se ligou ao citoplasma removida pelos banhos de lcool que se
seguem. Os ltimos banhos em lcool absoluto eliminam totalmente a gua dos esfregaos (desidratao),
preparando-os para o clareamento com xilol, responsvel por tornar as clulas transparentes.
Fatores que influenciam na reao de colorao
Tipo de fixador usado.
Frmula dos corantes.
Durao dos banhos nos corantes.
Caractersticas da gua corrente usada.
Qualidade da preparao das amostras pelo clnico.
O pH do espcime.
Ncleos plidos so vistos em espcimes dessecados, com restos de fixadores de cobertura, que
passaram tempo excessivo no cido clordrico (ou na gua) ou que no permaneceram o tempo suficiente
na hematoxilina. Fixao em lcool com concentrao superior a indicada, tempo prolongado nos corantes ou uso de corantes muito concentrados ou novos podem deixar os ncleos fortemente corados dando
uma falsa ideia de hipercromasia. Se a hematoxilina no filtrada diariamente, depsitos do corante sobre
o esfregao podem dificultar a leitura.
Quando a bateria de colorao checada diariamente fazendo-se as correes necessrias, muitos
problemas podem ser minimizados. Aconselha-se trocar os corantes depois da colorao de aproximadamente duas mil lminas ou aps um perodo de seis a oito semanas. Os lcoois devem ser trocados quando
mudarem de cor e o xilol ao tornar-se leitoso.
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15 mergulhos
2 min
1 min
2 a 3 mergulhos
30s
1 min
15 mergulhos
15 mergulhos
20s
1 min
15 mergulhos
15 mergulhos
15 mergulhos
1 min
15 mergulhos
15 mergulhos
5 a 10 min
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Hematoxilina de Harris
gua corrente
Eosina
gua corrente
Etanol absoluto
Etanol absoluto-xilol
Xilol
Montagem
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2.6.8 Pantico
Tambm uma tcnica rpida aplicada no estudo imediato de amostras obtidas por PAAF e que
estabelece no s um diagnstico de urgncia, mas tambm avalia a celularidade do material. Os esfregaos devem ser secos ao ar antes de serem submetidos colorao. Apesar de utilizar trs solues de
corantes (Instant Prov I, II e III), o tempo de processamento de apenas 15 segundos. As lminas podero
ser arquivadas permanentemente.
2.6.9 Colorao de Shorr
Apesar de considerada uma tcnica simples, pois confere boa colorao diferencial entre as clulas epiteliais escamosas superficiais e profundas, est em desuso por conta da perda dos detalhes nucleares
e da transparncia citoplasmtica, quando comparada com a tcnica de Papanicolaou.
2.6.10 Coloraes especiais
Correspondem a mtodos selecionados de colorao que permitem a visualizao de determinadas
substncias ou estruturas, auxiliando no diagnstico de certas condies patolgicas.
Alcian Blue: utilizado para colorao de carboidratos. Auxilia na identificao de coloide, glicognio, mucina e cpsulas de fungos. Cora os ncleos em azul claro.
PAS (cido Peridico de Schiff): tambm cora carboidratos e fungos, conferindo-lhes a cor
magenta. Os ncleos coram-se em preto e o fundo do esfregao em verde.
Prata Metanamina (Mtodo de Grocott): permite identificar fungos e Pneumocystis carinii os
quais se coram em preto. Glicognio e mucina so corados em rosa a cinza e o fundo em verde.
Azul da Prssia (Mtodo de Perls): demonstra depsitos de hemossiderina, corando-os em
azul. O ncleo e outras estruturas se coram em vermelho.
GRAM: permite a especificao da flora bacteriana em Gram positiva ou negativa.
Ziehl-Neelsen: serve para identificar bacilos lcool-cido-resistentes (BAAR).
2.7 Montagem
Tem a finalidade de proteger o material celular contra o dessecamento e a retrao celulares, alm
de prevenir o desbotamento dos corantes nas clulas. Tambm possui a funo adicional de proteger a
amostra para o armazenamento adequado. Por aumentar o ndice de refrao do esfregao, possibilita
melhor visualizao dos detalhes celulares. O material usado na montagem permite a ligao entre a
lmina e a lamnula e representado por uma resina sinttica dissolvida em um solvente, frequentemente
o xilol. Os mais utilizados so o Blsamo do Canad e o Entellan, embora alguns laboratrios usem
tambm o verniz.
Tcnica
Depois de retirar a lmina do xilol, colocar de uma a duas gotas do meio de montagem
sobre a lamnula.
Colocar suavemente a lamnula sobre a lmina exercendo uma leve presso.
Escorrer o excesso do meio de montagem e limpar com xilol.
Afastar as bolhas que se formaram com basto de vidro ou pina.
Deixar secar por alguns minutos antes de iniciar a leitura microscpica.
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Figura 18 - Artefatos de
montagem
(cornflakes),
400x. Os artefatos (setas)
ocorrem quando a montagem demorada, surgindo
pigmentos marrons.
Com o passar do tempo o blsamo pode tornar-se espesso, em virtude da evaporao do solvente,
e interferir na adequabilidade da amostra, no devendo portanto ser utilizado nessas condies. O uso de
lamnulas (ou lminas) mofadas tambm dificulta a leitura do esfregao. Para limpar o mofo, dissolver
40 g de bicromato de potssio em um litro de gua corrente at ficar homogneo. Acrescentar 200 ml de
cido sulfrico aos poucos, mantendo o recipiente em uma vasilha com gua durante esse processo para
minimizar o aquecimento que ocorre com a mistura. Deixar as lamnulas nessa soluo por 48 horas,
lavando-as depois com bastante gua e sabo. Recomenda-se um banho de cinco minutos em lcool
absoluto, colocando-as para secar em estufa posteriormente.
2.8 Adequabilidade das amostras
Para se obter preparaes citolgicas satisfatrias deve-se empregar a tcnica apropriada para os
diversos espcimes. Um exame insatisfatrio no significa que o resultado negativo, mas to somente
que no foi possvel estabelecer nenhum diagnstico, seja de benignidade ou de malignidade.
Recomendaes para os diversos tipos de amostras objetivando a adequabilidade do material:
Aparelho respiratrio
O processamento varia segundo o tipo de amostra.
Escarro: colocar o material em uma placa de Petri e examinar sob fundo escuro (papel embaixo
da placa) e com iluminao direta para selecionar amostras das reas com sangue ou com
partculas slidas e escuras, acinzentadas ou opacas. Confeccionar os esfregaos pelo mtodo do
esmagamento, fixar com spray ou lcool e corar pelo Papanicolaou. Separar esfregaos extras para
coloraes especiais.
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Lavados: enviar a fresco. Remover qualquer fragmento visvel para processar em cell block.
Centrifugar o lquido e fazer esfregaos com o sedimento pela tcnica do esmagamento, fixando
em lcool ou spray. Corar pelo Papanicolaou. Pode ser necessrio citocentrifug-lo.
Escovados: fazer esfregaos aps a coleta e fixar em lcool ou spray. So corados pelo mtodo
de Papanicolaou. Durante a coleta, proceder s tcnicas de colorao rpida em esfregaos fixados
ao ar para avaliar a satisfatoriedade do material. Mergulhar a escova em suspenso salina, para
retirar as clulas aderidas, centrifugar ou citocentrifugar esse material e preparar cell block .
Aparelho digestivo
As amostras so obtidas de lavados ou escovados e se faz imprints em fragmentos de bipsia. O
processamento tem que ser imediato e semelhante aos de outros lavados e escovados. Processar os cell
blocks em gar para evitar degenerao enzimtica. A adio de fixadores ou preservativos aos espcimes
e a presena de alimentos comprometem a adequabilidade do material.
Aparelho urinrio
Colher urina fresca ou cateterizada, processando-a rapidamente (at seis horas). A primeira
da manh no deve ser utilizada. Se houver demora no processamento, aconselha-se a pr-fixao do
material. Pode-se optar por um dos mtodos a seguir:
Homogenizar delicadamente e centrifugar. Em sedimentos abundantes, colocar duas a trs gotas
do material em lminas albuminizadas e realizar esfregaos pelo mtodo de presso. Fixar em
lcool ou spray. Se o sedimento escasso, citocentrifug-lo.
Centrifugar 50 ml de urina e recentrifugar no mesmo tubo. Acrescentar duas a trs gotas de
albumina ou Carbowax no sedimento, agitando-o no agitador. Aspirar com pipeta e colocar na
lmina, fazendo esfregaos por presso. Deixar secar ao ar. Antes de corar, coloc-los em lcool
a 95% por dez minutos. As amostras com fixadores ou anticoagulantes, congeladas e dessecadas
so inadequadas para o processamento.
Lquor
Devem ser encaminhados a fresco, imediatamente. Centrifugar o material, decantar o sobrenadante
e citocentrifug-lo. Corar em Papanicolaou. Process-lo separadamente para evitar contaminao cruzada.
Os materiais podem ser contaminados com talco tornando-os insatisfatrios. s vezes, os materiais so
contaminados com o talco das luvas utilizadas no processamento de coleta, tornando-os insatisfatrios.
Lquidos csticos
Os materiais geralmente so de pequeno volume (1 ml ou menos) e devem ser enviados a fresco em
recipientes apropriados ou na prpria seringa. O processamento realizado de imediato por centrifugao
e, se necessrio, citocentrifugar. Corar pelo Papanicolaou.
Efuses
Geralmente so recebidas a fresco. Devem ser centrifugadas, removendo-se previamente cogulos
ou grumos presentes na amostra para process-los em cell block. Fazer esfregaos com o sedimento,
separando dois deles para fixao em lcool a 95 %, corando-os em Papanicolaou e em HE. Deixar
outro esfregao secar ar e cor-lo por um dos mtodos de colorao rpida, geralmente o DQ. Espcimes
congelados e dessecados so insatisfatrios para avaliao.
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PAAF
Os esfregaos geralmente so fixados em lcool a 95% ou a seco, embora o lcool absoluto
tambm possa ser utilizado. Corar pelo Papanicolaou ou HE e os secos ao ar por DQ ou pantico.
Centrifugar o material e citocentrifugar o lavado da agulha e da seringa com soluo salina para fazer cell
block. Amostras insatisfatrias podem resultar de falhas tcnicas como suco reduzida ou excessiva na
coleta, esfregaos espessos, fixao inadequada ou colorao defeituosa. Abscessos e leses fibrticas,
calcificadas, necrticas ou com degenerao cstica podem dificultar a obteno de material adequado
por escassez ou ausncia de clulas. Materiais puncionados de reas fora da leso originam diagnsticos
falso-negativos por erro de amostragem.
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3 Padres citopatolgicos
gerais em condies
benignas e malignas
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Citologia definida como o estudo das clulas, suas estruturas e funes. O ncleo, o citoplasma,
a membrana e a matriz extracelular constituem os quatro elementos bsicos para o estudo do diagnstico
citolgico.
3.1 Clula
O princpio geral do diagnstico citolgico que o ncleo reflete o estado de sade da clula
(normal, inflamao, degenerao, bem como hiperplasia, metaplasia ou neoplasia), enquanto o citoplasma
reflete a origem e a sua diferenciao funcional (exemplo: clulas glandulares produtoras de muco,
clula escamosa protetora). Quando devidamente analisados, o ncleo e o citoplasma revelam riqueza de
informaes sobre a clula.
3.1.1 Ncleo
As informaes contidas no ncleo das clulas no apenas determinam a atividade celular atual,
bem como repassam essas informaes s clulas futuras atravs da reproduo celular. A informao
gentica da clula encontra-se no cido desoxirribonucleico (DNA), presente preferencialmente no ncleo
e, em menor parte, nas mitocndrias.
No ncleo ocorre:
Armazenamento e replicao do DNA.
Sntese (transcrio) do cido ribonucleico (RNA).
Transporte deste RNA para o citoplasma onde os ribossomos traduzem o cdigo gentico em
protenas, determinando a funo celular.
A membrana nuclear , na realidade, a condensao ou marginao da cromatina. A cromatina
um complexo formado por um tipo de reao fsico-qumica do tipo cidobsico entre DNA (cidos
nucleicos), histonas (nucleoprotenas bsicas) e outras protenas cidas no histonas.
Existem dois tipos de cromatina: a heterocromatina inativa (fios condensados), a qual se cora
pela hematoxilina, e a eucromatina ativa representada por reas claras. Este o motivo pelo qual clulas
discariticas ou malignas podem ocasionalmente apresentar ncleos plidos ao invs de hipercromticos,
como descrito frequentemente.
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Eucromatina
Heterocromatina
Classificao da cromatina
Fios delgados (parte ativa)
Fios condensados (parte inativa)
As protenas nucleares podem ser classificadas em histonas e no histonas. Histonas so protenas
cilndricas que protegem o DNA e participam da condensao da cromatina formando a heterocromatina.
A heterocromatina e as protenas no histonas so cidas, por isso coram-se basofilicamente na colorao
de Papanicolaou visto que cido tem predileo por base. Juntas so as responsveis pelas caractersticas
tpicas da colorao nuclear. Os cromocentros so partculas de heterocromatina relativamente largas
tendo como exemplo o Corpsculo de Baar que um cromossomo X inativo. Algumas doenas so conhecidas pela ausncia de corpsculos de Barr, como a Sndrome de Turner (XO), e outras com corpsculos de Baar extras, a exemplo da Sndrome de Klinefelter (47XXY). Estes corpsculos podem ser vistos
ocasionalmente em clulas malignas sendo indicativos de cromatina anormal.
A eucromatina se encontra ativa na sntese de RNA correspondendo aos espaos vazios, sendo
conhecida como paracromatina. Portanto, no ncleo hipercromtico encontra-se mais heterocromatina
(inativa) e no ncleo hipocromtico mais eucromatina (ativa).
A intensidade da basofilia do ncleo proporcional a quantidade de DNA presente, no entanto
a hiper ou a hipocromasia dependem de trs fatores: quantidade do corante, tamanho do ncleo (quanto
maior o volume, maior a atividade celular) e da lei de Beer, que relaciona a absoro de luz com as propriedades do material atravessado por esta.
A condensao da cromatina um achado citolgico importante podendo ser fina ou grosseira,
regular ou irregularmente distribuda.
a
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Fina
Geralmente normal
Adenocarcinoma
Grosseira
Plasmcitos, Carcinoma in situ
Carcinoma de Clulas Escamosas
Por um lado, a cromatina pode estar dissolvida (carilise) como uma escama anucleada ou por
outro, como uma massa compacta (picnose), observada nas clulas superficiais. Outra possibilidade de
apresentao da cromatina a sua homogeneizao (aparncia de vidro de relgio), como visto nas infeces virais. Na degenerao, a cromatina encontra-se como partculas redondas, mltiplas e regulares,
podendo variar de tamanho. J no cncer, sua condensao ocorre irregularmente em forma, tamanho e
distribuio. Se dividirmos o ncleo em quadrantes e essa diviso for desigual significa que a cromatina
est irregularmente distribuda, como acontece nos casos de cncer.
As alteraes nucleares tambm variam de clula para clula e esta, quando intensa, fortemente
sugestiva de malignidade. Outra caracterstica peculiar e frequente a colorao da paracromatina. A
hipercromasia e a cor azulada associadas ao aumento nuclear, so sugestivos de malignidade, enquanto a
cor avermelhada sugere processos infecciosos. Particularmente comum aps radioterapia, a vacuolizao
nuclear pode ser pequena, redonda, nica ou mltipla, s vezes comprimindo a cromatina.
Nos processos degenerativos o aumento nuclear pequeno e sem hipercromasia diferentemente
dos processos malignos. Nos casos de radiao e m fixao do material (dessecamento) tambm ocorre
aumento do ncleo, mas a cromatina plida, homognea, difusa e sem partculas distintas.
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As modificaes nucleares ocorridas na morte celular so picnose (completa aglutinao da cromatina em um nico ponto), cariorrex (o material picntico quebra-se em partculas com a dissoluo da
membrana nuclear), e carilise ou cromatlise (material nuclear completamente dissolvido, deixando
um espao vazio e plido).
Anormalidades no nmero de cromossomos (poliploidia e aneuploidia) tambm esto associadas
ao cncer. Figuras de mitose anormais esto relacionadas com aneuploidia, mas elas tambm podem ser
vistas nas clulas mesoteliais benignas e efuses serosas.
Na prtica, nenhum critrio patognomnico (caracterstico) de cncer, mas a combinao de
critrios deve ser usada para fazer um diagnstico de malignidade.
3.1.2 Nuclolo
Os nuclolos podem ser a principal estrutura nuclear proeminente em muitas clulas. Eles variam
em tamanho, nmero e forma, mas usualmente so pequenos, escassos, redondos ou ovais. So compostos
de protenas (em sua maioria), RNA e DNA (em menor quantidade). Podemos diferenciar cromocentro de
nuclolo utilizando como parmetro a colorao dos cidos nucleicos, que mostra nuclolo acidoflico e
cromocentro basoflico.
A funo do nuclolo a sntese do RNA ribossomal. Os ribossomos esto envolvidos com a
sntese de protenas numa relao direta entre o tamanho do nuclolo e a quantidade de protena produzida
pela clula. Nuclolos grandes, mltiplos e irregulares so indicativos de cncer, mas tambm podem ser
observados em condies benignas a exemplo dos processos reparativos. Em geral, mais de seis nuclolos
por ncleo so considerados anormais. Quando o aumento celular atinge um determinado tamanho, em
geral duas vezes o tamanho normal, sinal de que a clula ir se dividir, ou seja, ocorrer mitose de acordo
com os passos abaixo:
Prfase - Dissoluo da membrana nuclear
Metfase - Alinhamento mediano dos cromossomos
Anfase - Separao dos cromossomos
Telfase - Diviso da clula
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Aumento da atividade mittica e particularmente figuras de mitose atpicas esto associadas
malignidade. No cncer a diviso celular est fora de controle e o ncleo, caso se divida precocemente em
relao ao citoplasma, poder alterar a relao nucleocitoplasmtica. Normalmente o nuclolo involui em
clulas maduras e diferenciadas, mas no cncer ele pode permanecer ativo, como um nuclolo proeminente
ou um macronuclolo.
Em resposta a inflamao ou particularmente a radiao, multinucleao e clulas gigantes
multinucleadas podem ser vistas. Multinucleao pode ser resultado de uma endomitose ou de uma fuso
celular. Na endomitose a diviso nuclear ocorre sem a diviso citoplasmtica e, portanto os ncleos
tendem a ser semelhantes. J na fuso celular os ncleos podem variar em forma e tamanho. Temos como
exemplos de clulas gigantes multinucleadas: clulas do tipo corpo estranho, clulas de Langerhans,
osteoclastos, megacaricitos, clulas malignas, infeco pelo herpes, sinciciotrofoblastos, condiloma e o
carcinoma in situ.
Quando as clulas perdem o citoplasma muitas alteraes podem ocorrer na sua aparncia. Portanto,
um diagnstico de cncer no deve ser embasado apenas nas caractersticas de um ncleo desnudo.
a
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3.1.3 Citoplasma
O citoplasma de uma clula corresponde ao contedo que est fora do ncleo e dentro dos limites
da membrana celular, incluindo as organelas e a matriz citoplasmtica (ou citosol). Esta ltima que
corresponde ao maior volume celular, composta por um gel coloidal constitudo principalmente por gua,
no qual as organelas e as incluses esto suspensas. Muitas reaes celulares como a gliclise anaerbica
so catalisadas por enzimas suspensas na matriz citoplasmtica. O citosol altamente organizado, mas
suas estruturas no podem ser observadas ao microscpio ptico.
As organelas, tais como retculo endoplasmtico, mitocndrias e rea de Golgi, no so visveis
nos preparados citolgicos, exceto em certas circunstncias. Por exemplo, as mitocndrias, essenciais
para a respirao celular, so abundantes nos hepatcitos, em clulas apcrinas e tambm em tumores
oncocticos acarretando um aumento da eosinofilia. Produtos de secreo como mucina, em clulas
endocervicais ou em clulas tumorais e glicognio em clulas escamosas intermedirias da crvice podem
ser evidenciados pelo cido peridico de Schiff (periodic-acid Schiff PAS).
Pigmentos e outros materiais intracelulares podem ser facilmente detectados no material citolgico,
a exemplo da melanina no melanoma maligno, da hemosiderina em macrfagos nas reas de hemorragia
e da queratina no carcinoma escamoso queratinizante.
O citoesqueleto o maior componente estrutural da matriz celular, visvel apenas microscopia
eletrnica, sendo o responsvel pela manuteno da forma e pelo movimento celular.
3.1.4 Membrana celular
A membrana celular tem funes bsicas de limite e barreira, alm de contribuir para a homeostase.
semipermevel, facilitando ou impedindo movimentos de vrias substncias atravs dela. Pregas
profundas permitem a expanso celular como ocorre no epitlio transicional da bexiga. Podem apresentar
microvilosidades que lhe conferem um aspecto de borda rendilhada a exemplo das clulas mesoteliais.
Tambm possui a capacidade de incorporar materiais estranhos, tais como bactrias ou produtos de
catabolismo de outras clulas, fenmeno conhecido por endocitose. Este decorre da invaginao da
membrana e englobamento da partcula a ser fagocitada.
A maioria das clulas cresce at preencher seus espaos e esse crescimento inibido pelo contato
com as clulas vizinhas, ou seja, existe um reconhecimento intercelular atravs de suas membranas. Nos
casos de cncer, esta caracterstica perdida e favorece um crescimento contnuo (perda da inibio do
contato) podendo levar a invaso e metstase. Nos preparados citolgicos, a membrana celular poder ser
ntida e bem definida (nas clulas escamosas), ou mal definida (nos histicitos)
3.1.5 Matriz extracelular
Num preparado citolgico o material extracelular representado como o fundo do esfregao
(background) podendo refletir um processo normal, inflamatrio, displsico ou neoplsico. A presena
de hemcias intactas um achado inespecfico, enquanto que clulas inflamatrias em geral indicam um
processo inflamatrio. A resposta do hospedeiro invaso do tumor representada pela ditese tumoral
indicando a ocorrncia de um processo destrutivo tecidual. Caracteriza-se pela presena de hemcias
ntegras ou degeneradas, fibrina e debris celulares necrticos. No entanto, condies outras que no o
cncer podem provocar essas respostas, como a estenose do canal cervical levando ao piometra.
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Cncer
Pouco coesos, desordenados, sobrepostos
Clulas
Citoplasma
Hipocromtico,
fino.
Hipercromtico,
grosseiro.
Grupo
Ncleo
plido,
escuro,
Hipocromtica e regular.
Hipercromtica e
irregular.
Fundo do
Esfragao
Ditese.
Nuclolo
Cromatina
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4 Padres citopatolgicos
em rgos especficos
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4.1 Mama
A mama humana normalmente localizada na parede anterior do trax apresentando na sua regio
central uma arola e uma papila. Ela dividida em 15 a 20 lobos mamrios independentes, separados por
tecido fibroso. Cada lobo tem a sua via de drenagem, que converge para a papila, atravs do sistema ductal. Portanto, a mama formada de um lbulo (ou unidade lobular ductal terminal) e de um grande sistema
ductal. Tm como funo principal a produo do leite para a amamentao.
a
b
c
d
e
f
g
h
Doenas fibrocsticas, fibroadenomas, cistos e a maioria dos cnceres se originam frequentemente
dos lbulos. Os grandes ductos podem ser os stios de origem dos papilomas solitrios, carcinoma papilar,
ectasia ductal e possivelmente Doena de Paget.
Embriologicamente, a mama uma glndula sudorpara apcrina modificada, derivada do ectoderma e suspensa pelos ligamentos suspensores de Cooper. Quando esses ligamentos so acometidos por
fibrose (nos casos de cncer) d origem imagem de casca de laranja. Durante a primeira fase do ciclo
menstrual os lbulos tornam-se proliferativos em virtude da presena do efeito estrognico. Nesta fase
pr-ovulatria, as clulas ductais aspiradas se apresentam em monocamada e com citoplasma distinto. Os
ncleos so pequenos, compactos e com nuclolos discretos. J na segunda fase do ciclo (ps ovulatria
ou ltea) o lbulo continua a se proliferar e o estroma, em resposta ao do hormnio progesterona,
torna-se edemaciado. Sendo assim, as clulas se apresentam em vrias camadas com citoplasma indistinto, marginao da cromatina levando ao aparecimento de uma rea clara ao redor do nuclolo, agora
proeminente. Na mama, em contraste com o endomtrio, o maior nmero de mitoses encontrado na
segunda fase do ciclo. Durante a menstruao, em decorrncia da diminuio dos hormnios estrognio
e progesterona, os lbulos voltam s caractersticas normais. Na ps-menopausa o tecido conjuntivo e o
tecido glandular atrofiam e ocorre a substituio gordurosa (liposubstituio).
As doenas que afetam a mama podem ser divididas em trs grupos: inflamao (incluindo aguda,
crnica e mastite granulomatosa), hiperplasia (incluindo doena fibrocstica, alteraes da gestao e a
maioria das neoplasias benignas) e cncer.
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Figura 27 - Fibroadenoma,
200x. Clulas ductais.
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Clulas mioepiteliais
A presena de clulas mioepiteliais ou de ncleos desnudos bipolares indicativa de benignidade. Esses so ovais ou alongados, escuros, suaves e desprovidos de citoplasma. Em geral tm tamanho
equivalente ao dimetro de uma hemcia e podem ser encontrados espalhados no fundo do esfregao ou
sobrepostos a grupos de clulas ductais. Devemos ser extremamente cautelosos com o diagnstico de malignidade na presena desses ncleos desnudos, pois sua presena no patognomnica de benignidade,
apenas refora o cuidado que se deve ter ao sugerir malignidade. Grupamentos de clulas benignas podem
ser identificados em meio a grupamentos de clulas malignas. A presena das clulas ductais e mioepiteliais um forte indicativo de benignidade em contraste com as neoplasias malignas que se caracterizam
pela ausncia de clulas mioepiteliais.
Figura 28 - Fibroadenoma,
100x. Ao fundo h clulas
mioepiteliais soltas (setas).
Clulas Espumosas
A origem dessas clulas incerta podendo ser originrias dos ductos (clulas ductais), de moncitos da medula ssea (histicitos ou macrfagos) ou de ambos. So encontradas isoladamente ou em grupos, tm citoplasma abundante, multivacuolado e bordos celulares relativamente distintos. O citoplasma
muitas vezes contm vrios pigmentos ou incluses. Os ncleos so brandos ou reativos, redondos ou
ovais. Clulas espumosas gigantes multinucleadas podem estar associadas a leses benignas e aos cistos
bem como aos casos de cncer.
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Caderno de Referncia 2
Clulas apcrinas
Representam metaplasia das clulas do epitlio lobular. So frequentemente encontradas em aspirados benignos tais como: doena fibrocstica, fibroadenomas e cistos. Elas se apresentam de forma coesa,
regular, plana, porm diferentemente das clulas ductais, essas clulas podem se apresentar tanto isoladamente como em grupos papilares. Sua principal caracterstica o citoplasma abundante e ligeiramente
granular, decorrente da presena de numerosas mitocndrias (semelhantes aos onccitos). Algumas vezes
o citoplasma pode ser denso e com bordos celulares distintos conferindo-lhes aparncia escamoide. Os
ncleos so excntricos e podem variar em tamanho e forma, mas so usualmente uniformes. A membrana
nuclear suave, a cromatina finamente granular e uniformemente distribuda. Nuclolos nicos, redondos
e proeminentes so comuns. A sua presena sugere benignidade estando frequentemente associadas a cistos. Nos processos inflamatrios estas clulas podem ser confundidas com clulas malignas.
Os resultados citopatolgicos de materiais obtidos atravs de Puno Aspirativa por Agulha Fina
(PAAF) da mama ou por descarga mamilar so descritos de acordo com a probabilidade de malignidade
indo at o diagnstico especfico. A reprodutibilidade entre observadores excelente para a categoria positiva para malignidade, pobre para os casos atpicos e bons para as demais categorias.
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diagnstico definitivo de maligno, ou ainda quando os achados sugerem um cncer de atipias mnimas
como o carcinoma lobular, tubular ou papilar. A bipsia ento se impe. Diagnsticos positivos para malignidade esto reservados para os casos com caractersticas inequvocas de malignidade.
Trs aspectos no diagnstico so importantes:
A celularidade;
Os arranjos celulares;
O fundo do esfregao (background).
Aspirados hipocelulares podem ser encontrados nos casos de fibroadenoma, alteraes fibrocsticas, necrose gordurosa, alteraes secundrias a radiao, gravidez, lactao e carcinomas in situ ou invasivos (particularmente os tipos tubulares e lobulares). A celularidade moderada comum na gravidez ou
na lactao e nas alteraes fibrocsticas. Nos fibroadenomas, Tumor Phyllodes e carcinomas, incluindo
os invasivos, a celularidade varia de moderada a acentuada. Os arranjos celulares podem ser planos, frouxos, coesos, tridimensionais, ramificados, papilares ou ainda constitudos predominantemente por clulas
isoladas. Dentre os elementos que podemos encontrar no fundo do esfregao destacamos: clulas inflamatrias, detritos amorfos, sangue e mucina. As clulas inflamatrias agudas so comuns nas mastites e nos
carcinomas necrotizantes; as clulas inflamatrias crnicas nas hiperplasias, nas desordens proliferativas
e no carcinoma medular; o sangue pode ser um indicativo de papiloma, carcinoma papilar ou outros carcinomas; mucina ou material mixoide nos fibroadenomas, carcinoma mucinoso ou mucocele.
4.1.2 Caractersticas de benignidade
Dois aspectos so fundamentais no diagnstico de benignidade: presena de clulas ductais coesas
e de clulas mioepiteliais. Outro aspecto a ser considerado a escassa celularidade (embora haja numerosas excees, tais como, fibroadenoma, papiloma, gravidez e mastites). As clulas so relativamente
uniformes (nos casos de proliferao epitelial podem apresentar variaes), esto coesas formando arranjos em lenis ordenados, rara a presena de clulas isoladas e algumas podem exibir sobreposio.
O ncleo pode variar de tamanho, em geral no maior que duas vezes o tamanho de uma hemcia. Sua
forma pode ser redonda a oval e o contorno nuclear suave, quando irregular sugere malignidade. O ncleo pode ser levemente hipercromtico com a cromatina fina e pequeno nuclolo. O citoplasma varia de
escasso e delicado a abundante e apcrino. Vacolos de gordura intracitoplasmtica so mais comuns nos
carcinomas, mas tambm os encontramos em casos benignos a exemplo das alteraes da lactao. As
leses benignas caracterizam-se por uma grande variedade de tipos celulares incluindo clulas apcrinas,
ductais, espumosas, mioepiteliais e histicitos.
Figura 31 - Fibroadenoma,
100x. Clulas ductais e mioepiteliais coesas.
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Quadro comparativo dos padres de benignidade e malignidade dos aspirados (PAAF) da mama
Benignidade
Malignidade
Pobre a moderada (fibroadenoElevada
Celularidade
mas so celulares)
Dissociao celular
Grupos celulares
Limite denteado
Tamanho da clula
Pequeno
Usualmente grande
Tamanho do ncleo
Tamanho de um eritrcito
Maiores
Pleomorfismo
Nenhum
Comum
Ncleo
Contorno liso
Contorno irregular
Cromatina
Vesicular ou finamente
granular
Em grumos
Necrose
Ausente
Clulas mioepiteliais
Muitas
Raras
Comuns
Raras
Fragmentos do estroma
Comuns
Raros
Vacolos citoplasmticos
Incomuns
Incluses intranucleares
Incomuns
Mucina
Rara
Comum
Clulas inflamatrias
Macrfagos espumosos
No geral presentes
s vezes presentes
Ausentes
Calcificao
Clulas apcrinas
Comuns
Raras
Mitoses
Incomuns
Comuns
Padro cribiforme
Ocasional em fibroadenoma
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Figura 37 - Fibroadenoma,
100x. direita (seta verde)
o componente estromal e
a esquerda (seta preta) o
componente epitelial.
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4.2 Tireoide
A funo da glndula tireoide produzir e armazenar hormnios tireoideanos responsveis pelo
metabolismo do organismo. Ela constituda por dois lobos laterais ligados por um istmo e a sua unidade
funcional o folculo que composto centralmente por coloide e circundado por um epitlio folicular. Os
folculos variam de tamanho tendo em mdia 200 de dimetro.
cartilagem
tireoidea
tireoide
traqueia
esterno
clavcula
Figura 39 - Topografia
da tireoide.
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Pigmentos/ cristais
Hemossiderina - associada a sangramento corando-se de dourado na colorao de Papanicolaou
e azul escuro em Diff-Quick.
Melanina - relacionada ao uso de medicamentos como a tetraciclina. O carcinoma medular tambm pode produzir melanina.
Cristais de oxalato - podem ser identificados em tecido tireoideano normal, inflamatrio ou neoplsico.
Amiloide
Pode ocorrer no carcinoma medular, no bcio amiloide, na amiloidose e tambm no plasmocitoma
da tireoide. Na colorao de Papanicolaou o amiloide assemelha-se a um coloide denso.
Coloide
Representa os hormnios tireoideanos. uma glicoprotena PAS + que se cora com mucicarmim.
Est presente em muitas patologias particularmente nas leses foliculares (bcios e neoplasias foliculares). A sua quantidade varia de acordo com o estado funcional da glndula, quando abundante est
relacionado a folculos grandes ou macrofolculos, quando escasso relaciona-se a folculos pequenos ou
microfolculos. Em relao a atividade da glndula quanto mais fino e plido, maior a sua atividade e
quanto mais denso, menor a atividade glandular. Microscopicamente o coloide tem ampla variedade de
aparncias, mas na essncia apenas duas: aquoso ou fluido (difuso) e denso (slido).
Em 2007 na cidade de Bethesda, Maryland, EUA, ocorreu a conferncia para discusso e concluses sobre a terminologia e critrios morfolgicos a serem utilizados nos diagnsticos de PAAF da
tireoide e baseado nesses critrios, descreveremos um pouco sobre os achados mais comuns.
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Amostra insatisfatria
Classe II
Ndulo benigno
Classe III
Classe IV
Classe V
Classe VI
Ndulo maligno
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Benignos
Dentre os diagnsticos benignos os mais comuns so os ndulos foliculares. A maioria dos ndulos
foliculares encontrados so proliferaes das clulas foliculares, ou seja, bcio multinodular ou adenoma
folicular. Com menor frequncia, encontram-se ndulos benignos ou pseudondulos em pacientes com
doenas inflamatrias como Tireoidite de Hashimoto e Tireoidite sub aguda. Muitas condies benignas
no causam ndulos, mas produzem alteraes celulares benignas (alteraes por radiao) que podem ser
confundidas com malignidade. Ndulos foliculares benignos so caracterizados por quantidade varivel
de coloide, clulas foliculares com aparncia de benignidade, clulas de Hrtle e macrfagos.
a
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d
Figura 45 - Carcinoma
papilfero.
a - Grupamentos celulares em arranjo papilar (setas), 100x.
b - Micronuclolo (seta
verde) e fenda (seta
preta), 400x.
c - Pseudoincluses
intranucleares (setas),
200x.
d - Corpo de psmamoma (seta), 400x.
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Bcio coloide
Varivel
Neoplasma folicular
Usualmente celular
Coloide
Abundante
Pequenas quantidades
Grupos celulares
Grandes folhetos
Grupos microfoliculares
Folculos intactos
Presentes
Ncleos isolados
Comuns
Incomuns
Clulas epiteliais
Incomuns
Clulas de Hrtle
Comuns, pleomorfas
Feixes de estroma
Incomum
Histicitos
Abundantes
Muito ocasionais
Siderfagos
Abundantes
Incomuns
Histicitos multinucleados
Comuns
Incomuns
Cristais de colesterol
No so raros
Incomuns
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4.3 Pulmo
Anatomia e histologia do trato respiratrio
O aparelho respiratrio pode ser dividido em dois compartimentos, o trato respiratrio superior,
constitudo pela regio sinonasal indo at a traqueia, e o trato respiratrio inferior que se estende da
traqueia aos pulmes. Os pulmes so rgos duplos que ocupam quase toda a cavidade torcica, tendo
como funes primordiais a ventilao e a troca de gases. Cada pulmo pesa em mdia 600g e divide-se
em lobos. O pulmo direito tem dois (o superior e o inferior) e o pulmo esquerdo tem trs (o superior, o
mdio e o inferior). No hilo (entrada) de cada pulmo, o brnquio principal se divide em dois brnquios
lobares esquerda e trs direita. O brnquio lobar apresenta inmeras subdivises, de dimetros cada
vez menores, produzindo os bronquolos respiratrios. Estes se abrem nos alvolos dando origem s
unidades respiratrias ou cinos pulmonares que constituem o territrio de trocas gasosas. Um conjunto
de trs a cinco bronquolos terminais e seus cinos forma o lbulo pulmonar que bem delimitado por
septos finos de tecido conjuntivo, podendo ser reconhecido macroscopicamente. A superfcie pulmonar
recoberta pela pleura que consiste de tecido conjuntivo e camada nica de clulas mesoteliais planas. A
drenagem pulmonar feita pelos vasos linfticos que drenam para os linfonodos hilares.
O brnquio principal revestido por epitlio colunar pseudo-estratificado ciliado com clulas
mucosas de permeio e clulas pequenas basais (ou de reserva) intercaladas entre as clulas colunares.
Clulas endcrinas, neurossecretoras, tambm chamadas de clulas de Kulchitsky esto presentes no epitlio dos brnquios. A lmina prpria dos brnquios maiores contm glndulas produtoras de muco e suas
paredes so constitudas por tecido conjuntivo, msculo liso e lminas de cartilagem. Os bronquolos so
revestidos por clulas colunares ou cubides ciliadas baixas e possuem paredes finas, sem glndulas ou
cartilagem. J os bronquolos respiratrios so revestidos por epitlio no ciliado com ocasionais clulas
secretoras claras, conhecidas como clulas de claras. Os alvolos so revestidos por pneumcitos tipo
I e tipo II e suas paredes so formadas por capilares sanguneos e estroma de sustentao rico em fibras
elsticas.
4.3.1 Clulas do pulmo
Os principais componentes do tecido pulmonar, vistos nos preparados citolgicos, so as clulas
do epitlio respiratrio e os macrfagos.
Clulas colunares ciliadas
So muito especializadas, esto presentes na traqueia e nos brnquios, possuem ncleos basais,
cromatina fina e uma barra terminal marcada com clios.
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Macrfagos alveolares
Originam-se dos prprios pulmes ou dos moncitos circulantes, sendo tambm conhecidos como
pneumcitos tipo III. Cada alvolo possui de dois a trs macrfagos residentes livres que representam a
primeira linha de defesa alveolar e so frequentemente identificados contendo pigmento de carbono no
seu citoplasma. A presena de hemossiderina no seu citoplasma indicativa de sangramento antigo que
pode estar associado s leses benignas como infartos, ou s neoplasias malignas. Sua forma depende do
tipo e da quantidade do material fagocitado. Geralmente apresentam um ou mais ncleos redondos ou
ovais e o citoplasma vacuolado.
Clulas mesoteliais
So frequentemente vistas nas bipsias aspirativas, particularmente nas leses da pleura. Em geral formam lenis planos com espaos ou janelas entre elas ou podem ser vistas isoladamente. Seus
ncleos so redondos ou ovalados, podendo apresentar fendas, a cromatina fina e uniforme, o nuclolo
pequeno e o citoplasma delicado. Quando reativas, podem ser confundidas com clulas malignas, pois
apresentam citoplasma denso, pleomorfismo nuclear e nuclolo proeminente.
4.3.2 Constituintes no nelulares
Podem ser inalados, produzidos pelo hospedeiro ou formados como reposta a material estranho ou ainda
introduzidos como contaminantes laboratoriais. Os mais frequentes so:
Espirais de Cushmann
So filamentos enrolados de muco que se coram em prpura pelo Papanicolaou. So achados inespecficos e no devem ser relatados no laudo.
Cristais de Charcot-Leyden
So derivados da degenerao dos eosinfilos em pacientes com doenas alrgicas graves como a
asma. Sua estrutura romboide e eosinoflica.
Corpos de Psamoma
Estruturas constitudas de calcificao concentricamente laminadas, vistas tanto em tumores malignos com arquitetura papilar (carcinoma papilfero da tireide e carcinoma do ovrio entre outros) como
em leses benignas como a tuberculose pulmonar e a microlitase alveolar.
4.3.3 Tipos de amostras
A interpretao dos espcimes citolgicos do trato respiratrio requer familiaridade com o tipo de
amostra, ou seja, como o espcime foi obtido e de como foi preparado do ponto de vista tcnico, pois a
citomorfologia e a acurcia diagnstica variam com eles. As amostras podem ser classificadas em escarro
e espcimes brnquicos, j descritos no Captulo 1. Neste captulo, descreveremos apenas as amostras de
Puno aspirativa por agulha fina (PAAF), que pode ser classificada nos seguintes tipos:
Puno aspirativa transbrnquica
til para o diagnstico de leses primrias localizadas abaixo da superfcie brnquica e para o
estadiamento de cncer pulmonar pela amostra de linfonodos do mediastino. A leso aspirada com agulha retrtil que passa atravs de um cateter flexvel adaptado ao broncoscpio. um mtodo bom para
distinguir carcinoma de pequenas clulas dos carcinomas de no-pequenas clulas.
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principais sintomas. Em alguns pacientes assintomticos, no entanto, os carcinomas podem ser diagnosticados incidentalmente em exames de imagem
Histologicamente, os carcinomas pulmonares podem ser agrupados nos seguintes tipos: carcinoma escamoso, adenocarcinoma, carcinoma de grandes clulas e carcinoma de pequenas clulas
Estes carcinomas frequentemente apresentam heterogeneidade histolgica, ou seja, em uma leso,
podem ser identificados mais de um tipo histolgico.
a
Figura 48 a - Adenocarcinoma bem diferenciado do pulmo, 200x. Lavado brnquico. Ncleo grande (seta preta) e nuclolo
proeminente (seta vermelha).
b - Adenocarcinoma bronquolo alveolar, 200x. Discreta atipia nuclear (seta preta) e citoplasma delicado (seta verde).
a
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O escrutnio dos esfregaos deve considerar que a presena de abundante celularidade e de
grupamentos grandes com clulas apresentando ncleos maiores que o ncleo das clulas brnquicas, ainda
que uniformes, deve levantar a suspeita de malignidade. A anlise citolgica deve ser bastante criteriosa
sempre considerando a heterogeneidade destes tumores, para que se faa uma correta classificao.
Do ponto de vista clnico, a classificao em carcinoma de pequenas clulas e em carcinoma
de no-pequenas clulas fundamental para o planejamento teraputico, uma vez que os carcinomas
de pequenas clulas apresentam comportamento mais agressivo, pois crescem rapidamente e no so
ressecveis cirurgicamente. Com o desenvolvimento de novas terapias para tipos especficos de carcinoma
pulmonar, a distino histolgica e mesmo molecular est se tornando a cada dia mais importante para o
tratamento.
Padres comparativos de benignidade e malignidade dos aspirados (PAAF) do pulmo
Benignidade
Poucas
Muitas
Arranjos
Relao ncleo/citoplasma
Dentro da normalidade
Aumento nuclear
Membrana nuclear
Suave
Irregular
Cromatina
Irregular e grosseira
Clios
Presentes
Ausentes
Malignidade
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4.4 Lquidos
A pleura uma delicada membrana serosa que reveste o pulmo (pleura visceral) e a parte interna
da parede torcica (pleura parietal). A pleura visceral e a parietal esto em continuidade e formam um
espao virtual entre elas. Uma pequena quantidade de lquido est presente no espao pleural que age
como lubrificante para facilitar os movimentos respiratrios. A pleura normal possui uma camada nica
de clulas mesoteliais com uma pseudomembrana que repousa num tecido conjuntivo. Neste tecido
conjuntivo podemos encontrar arterolas, vnulas e nervos (perifricos, simpticos e parassimpticos). A
estrutura, a funo e as doenas do pericrdio e peritnio so similares as da pleura.
Clulas mesoteliais
muito importante saber reconhecer as clulas mesoteliais benignas, pois elas podem ser
confundidas com malignidade (particularmente adenocarcinoma), especialmente quando so reativas ou
aparentemente atpicas, como frequentemente se apresentam. As clulas mesoteliais so clulas epiteliais
derivadas do mesoderma. Quando normais ou no reativas, so vistas na PAAF como arranjos planos e
ordenados, apresentando citoplasma e bordos celulares definidos com espaos ou janelas proeminentes
entre elas. Os ncleos no reativos so paracentrais, usualmente uniformes, redondos a ovais, com
cromatina fina e delicada e nuclolos infrequentes. Alteraes reativas das clulas mesoteliais so comuns.
Alm dos arranjos planos e clulas isoladas, grupos tridimensionais com contornos em rosetas ou grupos
papilares podem ser vistos. As clulas reativas apresentam variaes pleomrficas (forma e tamanho). O
citoplasma dessas clulas denso na parte central e delicado e claro na borda. Os ncleos so centrais ou
paracentrais com contorno irregular e nuclolo proeminente. As doenas mais frequentes do mesotlio so
infeces e neoplasias.
Mesoteliomas benignos
So raros na pleura e mais comuns no peritnio. Em geral o tumor cresce como um processo papilar recoberto por uma ou mais camadas de clulas mesoteliais. Na PAAF a celularidade abundante com
arranjos de clulas mesoteliais reativas ou atpicas. Os mesoteliomas benignos fibrosos so mais comuns
na pleura (visceral) que no peritnio e uma das principais caractersticas o predomnio dos fibroblastos
em relao s clulas mesoteliais. A celularidade varivel. Algumas leses so muito vascularizadas
resultando num aspirado hemorrgico. As clulas so fusiformes, lembrando fibroblastos e ncleos desnudos podem ser vistos. Fragmentos de estroma metacromtico frequentemente esto presentes. Mitoses
no so vistas. Em alguns casos a celularidade pode ser maior, com clulas moderadamente pleomrficas
e com cromatina grosseira.
Mesoteliomas malignos
A pleura o local mais frequente dos mesoteliomas malignos, mas estes tambm podem ocorrer
no pericrdio e peritnio. Na PAAF as amostras so usualmente celulares, e os achados citolgicos podem mostrar alteraes puramente epiteliais, bifsicas (epiteliais e clulas fusiformes) at anaplsicas.
O padro bifsico muito caracterstico, mas nem sempre est presente. Alta celularidade com papilas
abundantes e achados clnicos favorveis ajudam no diagnstico. O tipo mais comum do mesotelioma
maligno o carcinomatoso. Os aspectos celulares podem ser mnimos ou inequvocos de malignidade. As
clulas formam agrupamentos planos ou tridimensionais, papilares ou do tipo tbulo acinares, mas podem
ser pouco coesas sob a forma de clulas isoladas. O contorno celular varia de redondo a poligonal ou angular e pequeno componente de clulas fusiformes comum. O citoplasma abundante com bordos bem
definidos. Vacuolizao pode estar presente e ser decorrente de natureza degenerativa ou conter mucina
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