Anda di halaman 1dari 50

Pengertian Aglutinasi

Oleh: Sridianti | Diperbaharui: 31 March, 2016


Dalam biologi, aglutinasi mengacu pada penyatuan bersama-sama partikel. Proses ini sangat
penting sebagai bagian dari sistem kekebalan tubuh, proses respon yang menggunakan
organisme untuk melawan penyakit.
Hemaglutinasi, penggumpalan sel darah merah, memiliki aplikasi khusus dalam kedokteran, di mana ia
digunakan untuk menentukan jenis darah dan menemukan konsentrasi menginfeksi virus atau bakteri
dalam aliran darah.
Bakteri asing atau virus memasuki tubuh mengandung komponen khusus yang disebut antigen, dimana
memicu respon imun dalam host. Sel darah putih dalam tubuh memproduksi protein yang dikenal sebagai
antibodi dalam menanggapi adanya antigen. Antibodi mengikat dengan antigen melalui mekanisme
struktural mirip dengan kunci dan gembok, dan dapat juga menetralisir antigen secara langsung atau
menandainya untuk dihancurkan oleh sistem kekebalan tubuh.
Aglutinasi adalah salah satu cara di mana antibodi menandai antigen untuk dihancurkan. Antibodi
memiliki setidaknya dua lokasi di mana antigen dapat mengikat, sehingga mereka mampu mengikat
dengan lebih dari satu bakteri atau virus. Ketika ini terjadi, partikel menyerang mulai menggumpalkan,
atau membentuk gumpalan, melalui jaringan antibodi. Gumpalan akhirnya menjadi terlalu besar untuk
tetap dalam larutan dalam aliran darah, dan mengendap dari larutan.
Setelah gumpalan partikel yang cukup besar, mereka menjadi mangsa mudah bagi fagosit sejenis sel
darah putih yang mencerna bahan asing. Fagosit menelan dan memecah gumpalan, menetralkan ancaman
penyakit. Dengan cara ini, aglutinasi memungkinkan tubuh untuk melucuti dan menghapus partikel
berbahaya yang menyerang.
Hemaglutinasi, sebaliknya, bukanlah proses yang terjadi secara alami dalam tubuh, tetapi malah
digunakan untuk melakukan tes dan prosedur pengujian dalam biologi molekuler. Golongan darah
ditentukan melalui proses ini. Dalam golongan darah, antibodi spesifik ditambahkan yang mengikat jenis
tertentu dari sel darah merah. Jika antibodi berikatan dengan sel darah merah dalam sampel, aglutinasi
terjadi, dan golongan darah dapat dipastikan yang didasarkan pada antibodi yang digunakan.
Konsentrasi bakteri atau virus dalam sampel kadang-kadang dapat ditentukan dengan menggunakan tes
yang disebut uji hemaglutinasi. Bakteri tertentu dan virus mengandung senyawa yang memungkinkan
mereka untuk mengikat sel-sel darah merah, menciptakan jaringan gumpalan.

Dalam uji tersebut, sampel diencerkan virus ditambahkan ke sampel sel darah encer, dan aglutinasi
diperbolehkan terjadi selama sekitar 30 menit. Konsentrasi virus dapat ditentukan dengan menghitung
jumlah gumpalan atau kisi terbentuk pada sampel campuran.
http://www.sridianti.com/pengertian-aglutinasi.html

Proses Inaktivasi Antigen yang Diperantarai Antibodi


Pengikatan antibodi dengan antigen untuk membentuk kompleks antigen-antibodi merupakan dasar dari
beberapa mekanisme pembuangan antigen. Yang paling sederhana adalah netralisasi dimana antibodi berikatan
dengan menghambat aktifitas antigen tersebut. Sebagai contoh antibodi menetralkan suatu virus dengan
melekat pada molekul yang harus digunakan oleh virus untuk menginfeksi sel inang. Dengan cara serupa
antibodi bisa berikatan dengan permukaan bakteri patogenik. Mikroba ini, sekarang dilapisi dengan antibodi,
dengan mudah dilenyapkan oleh fagositosis. Dalam suatu proses yang disebut opsonisasi, antibodi yang terikat
itu meningkattkan pertautan makrofaga ke mikroba tersebut sehingga juga meningkatkan fagositosis.
Aglutinasi (penggumpalan) bakteri atau virus yang diperantarai oleh antibodi secara efektif menetralkan dan
mengosonisasi mikroba tersebut. Aglutinasi mungkin terjadi karena masing-masing molekul antibodi
mempunyai paling tidak 2 tempat pengikatan antigen. IgG, misalnya dapat berikatan dengan epitop identik
pada dua sel bakteri atau partikel virus, yang mengikatkan mereka bersama-sama. IgM dapat mengikatkan
bersama lima atau lebih virus atau bakteri. Kompleks besar ini dengan mudah difagositosis oleh makrofaga.
Mekanisme serupa adalah presipitasi (pengendapan), yaitu pengikatan silang molekul-molekul antigen yang
terlarut (yitu molekul terlarut dalam cairan tubuh) untuk membentuk endapan atau presiipitat yang lalu
dikeluarkan dan di buang oleh fagositosis. Mekanisme yang terakhir yaitu fiksasi komplemen merupakan
aktivasi sistem komplemen oleh kompleks antigen antibodi. Komplemen ini terdiri dari sekitarr 20 protein
serum yang berbeda, yang tanpa adanya infeksi berada dalam keadaan inaktif. Akan tetapi, saat terjadi infeksi
protein yang pertama dalam rentetan protein komplemen itu diaktifkan, sehingga memicu rentetan langkahlangkah aktivasi dimana masing-masing komponen mengaktifkan langkah berikutnya dalam rentetan reaksi
itu. Penyelesaian rentetan reaksi komplemen itu menyebabkan lisisnya banyak jenis virus dan sel-sel pathogen.
Selengkapnya : http://www.kompasiana.com/ikpj/proses-inaktivasi-antigen-yang-diperantaraiantibodi_54ffc063a33311874a5113b3

Pembentukan Antigen dan Antibodi

Pembentukan Antigen dan Antibodi : Mekanisme / Proses - Di dalam tubuh manusia, antibodi dihasilkan oleh
organ limfoid sentral yang terdiri atas sumsum tulang dan kelenjar timus, terutama oleh sel-sel limfosit. Ada dua
macam sel limfosit, yaitu sel limfosit B dan sel limfosit T. Kedua sel ini bekerja sama untuk menghasilkan antibodi
dalam tubuh. Baik antibodi maupun antigen keduanya mempunyai hubungan spesifi k yang sangat khas. Keadaan ini
terlihat sewaktu antigen masuk ke dalam tubuh. Saat itu, dengan seketika sel limfosit T mendeteksi karakteristik dan
jenis antigen. Kemudian sel limfosit T bereaksi cepat dengan cara mengikat antigen tersebut melalui

permukaan reseptornya. Setelah itu, sel limfosit T membelah dan membentuk klon. Sementara pada
permukaan membrannya menghasilkan immunoglobulin monomerik.
Berikutnya, molekul antigen dan molekul antibodi saling berikat an dan ikatan kedua molekul ini ditempatkan pada
makrofaga. Secara berurutan, makrofaga menghadirkan antigen pada sel limfosit B. Lantas, sel limfosit B
berpoliferasi dan menjadi dewasa, sehingga mampu membentuk antibodi untuk masing-masing antigen. Akan lebih
jelas kalian simak Gambar 1.

Gambar 1. Reaksi antigen dan antibodi

Sementara itu, pembuangan antigen setelah diikat antibodi dapat menggunakan berbagai cara, yakni netralisasi,
aglutinasi, presipitasi, dan fiksasi komplemen. Perhatikan Gambar 2.

Gambar 2. Mekanisme pelenyapan antigen

Netralisasi merupakan cara yang digunakan antibodi untuk berikatan dengan antigen supaya aktivitasnya terhambat.
Sebagai contoh, antibodi melekat pada molekul yang akan digunakan virus untuk menginfeksi inangnya. Pada
proses ini, antibodi dan antigen dapat mengalami proses opsonisasi, yakni proses pelenyapan bakteri yang diikat
antibodi oleh makrofaga melalui fagositosis.

Cara pelenyapan antigen berikutnya adalah aglutinasi. Aglutinasi atau penggumpalan merupakan proses pengikatan
antibodi terhadap bakteri atau virus sehingga mudah dinetralkan dan diopsonisasi. Misalnya, IgG yang berikatan
dengan dua sel bakteri atau virus secara bersama-sama. Mekanisme yang sama juga terjadi pada cara berikutnya
yakni presipitasi. Presipitasi atau pengendapan merupakan pengikatan silang molekul-molekul antigen yang terlarut
dalam cairan tubuh. Setelah diendapkan, antigen tersebut dikeluarkan dan dibuang melalui fagositosis. Selain
berbagai cara tersebut, pembuangan antigen dapat melalui fiksasi komplemen. Fiksasi komplemen merupakan
pengaktifan rentetan molekul protein komplemen karena adanya infeksi. Prosesnya menyebabkan virus dan sel-sel
patogen yang menginfeksi bagian tubuh menjadi lisis.

DAFTAR ISI
Daftar isi
IMUNOKROMATOGRAFI
1.

Pengertian

Jenis-jenis Imunokromatografi Assay

2.
3.

Kelemahan dan Kekurangan

IMUNOASSAY PADA PENYAKIT INFEKSI BAKTERIAL


1.

Imunoassay untuk Demam typoid


A.1. Pemeriksaan widal metode kualitatif

A.2. Pemeriksaan widal metod semikuantitatif


A.3. Pemeriksaan widal metode tubex TF
2.

Immunoassay untuk penyakit Sifilis


B.1. Pemeriksaan VDRL metode kualitatif

B.2. Pemeriksaan VDRL metode semikuantitatif

B.3. Pemeriksaan TPHA metode kualittatif diluen


B.4 Pemeriksaan TPHA metode kuantitatif
B.5. Pemeriksaan RPR
IMUNOASSAY UNTUK PENYAKIT INFEKSI JASAD RENIK
Imunoassay untuk penyakit Rheumatoid Factor

1.

A.1. Uji ASO metode kualitatif


A.2. Pemeriksaan RF/RA metode kuantitatif
A.3. Pemeriksaan RF metode kualitatif
A.4. Pemeriksaan RF metode semikuantitatif
IMUNOASSAY UNTUK PENYAKIT INFEKSI VIRAL
Imunoassay untuk Penyakit Hepatitis

1.

A.1. Tes HBsAg Metode Imunokromatografi


A.2. Tes anti HCV Metode Imunokromatografi
A.3. Tes anti HBS Metode Imunokromatografi
A.4. Tes anti HAV
Imunoassay untuk penyakit infeksi HIV/AIDS

2.

B.1. Tes HIV Metode imunokromatografi


B.2. Tes HIV Metode Elisa
Imunoassayy untuk Demam Berdarah Dengue

3.

C.1. Tes Dengue Metode Imunokromatografi


IMUNOASSAY UNTUK PENYAKKIT LAINNYA
Imunoassay untuk Pemeriksaan Narkoba

1.

A.1. Tes Narkoba Metode Imunokromatografi


2.

Imunoassay untuk Tes Kehamilan

B.1. Pemeriksaan Plano Tes Metode Imunikromatografi


B.2. Pemeriksaan HCG Metode langsung
3.
4.

Imunoassay untuk Tes Golongan Darah


A.1. Tes Golongan Darah Metode Aglutinasi

Daftar Pustaka

IMUNOKROMATOGRAFI
Pengertian
Imunokromatografi ASSAY (ICA) atau disebut juga aliran samping (lateral flow
test) atau dengan singkat disebut uji strip (strip test) tergolong dalam kelompok imuno ASSAY
berlabel sampel seperti imunofluerens (IF) danimuno enzim (EIA).
Imunokromatografi assay (ICA) merupakan perluasan yang logis dari teknologi uji
aglutinasi latex yang berwarna yaitu uji serologi yang telah dikembangkan sejak tahun 1957
singes dan piots untuk penyakit Arthritisrheumatoid.
Disamping itu imunokromatografi assay (ICA) merupakan uji laboratorium yang handal
sehingga amat dibutuhkan dinegara sedang berkembang. Imunokrimatografi assay tidak
membuktikan alat canggih (mikroskop kliorogens dan radio conts) untuk membacanya cukup
hanya dengan melihat adanya perubahan warna memakai mata telanjang sehingga jauh lebih
pratktis.
1.

Jejnis-jenis Imunokromatografi ASSAY

HbsAg

Plano test

Narkoba

Pemeriksaan dengue

Pemeriksaan widal

Pemeriksaan HIV

Pemeriksaan HCV

Pemeriksaan Anti HbsAg

2.

3.

Kelemahan dan kekurangan

Format yang disukai oleh pemakai (teknisy laboratorium)


Waktu yang dibutuhkan untuk mendapatkan hasil tes amat singkat
Stabil untuk jangka panjang dan dalam tantangan iklim yang luas

Kerjanya amat praktis


Baru dalam pemeriksan kualitatif belum kuantitatif

IMMUNOASSAY TERAPAN
PADA PENYAKIT INFEKSI BAKTERIAL

DEMAM TIPOID
1.

IMUNOASSAY UNTUK PENYAKIT DEMAM TIPOID

Demam tifoid (typoid fever) atau yang lebih terkenal dengan penyakit tifus ini
merupakan suatu penyakit pada saluran pencernaan yang sering menyeran anak-anak bahkan
orang dewasa. Penyabab penyakit tersebut adalah bakteri salmonella typhi.

Gejalah-gejalah yang kerap terjadi antara lain seperti nyeri pada perut, mual, muntah,
demam tinggi, sakit kepala dan diare kadang-kadang bercampur darah.
Penularan penyakit tifus ini, pada umumnya itu di sebabkan oleh karena melaui makanan
ataupun minuman yang sudah tercemar oleh agen penyakit tersebut. Biasa juga, karena
penanganan yan kurang begitu higenis ataupun juga disebabkan dari sumber air yang sering
digunakan yang digunakan untuk menggunakan untuk sehari-hari.
Salmonella merupakan kuman berbentuk batang gram negatif yang umumnya bererak
dengan flagel dan bersifat aerobic. Salmonella memiliki sedikitnya 5 macam anti gen, yaitu :
1.
Antigen o (antigen somatik), yang terletak pada lapisan luar pada tubuh kuman. Bagian
ini tahan terhadap panas dan alcohol tetapi tidak terhadap formaldehid.
Lipopolisakarida dari antigen O terdiri dari 3 regio sebagai berukut :
1.
Region I, mengandung antigen O spesifik atau antigen dinding sel dan merupakan
polimer dari unit oligosakarida yang berulang-ulang. Antigen O ini berguna untuk
pengelompokan serologis.
2.
Region II, terikat pada antigen O dan terdiri dari core polysaccharide serta merupakan
sifat yan konstan dalam suatu genus Enterobacteriaceace tetapi berbeda antara genera.
3.
Region III, mengandung lipid yang terikat pada core polysaccharide yang merupakan
bagian yang toksik dari molekul. Lipid A menempelkan lipopolisakarida pada membran
permukaan sel.
2.
Antigen H (antigen flagela), yang terletak pada flagella, fimbrie atau pili dari kuman.
Antigen ini mempunyai struktur kimia suatu protein dan tahan terhadap formaldehid tetapi tidak
tahan terhadap panas dan alcohol.
3.
Antigen Vi, yang terletak pada kapsel (envelope) dari kuman yang dapat melindungi
kuman terhadap fagositosis. Ketiga macam antigen tersebut diatas, didalam tubuh penderita akan
menimbulkan pula pembentukan 3 macam antibody yang lazim tersebut agglutinin.
4.
Outer membrane protein (OMP), antige n OMP S.typhi merupakan bagian dari didin sel
yang terletak di luar membrane sitoplasma lapisan peptidoglikan yang membatasi sel terhadap
lingkungan sekitarnya. OMP berfungsi sebagai barier fisik yang mengendalikan masuknya zat
dan cairan kedalam membrane sitoplasma, dan berfungsi sebagai reseptor untuk bakteriofag dan
bakterisin.
5.
Heat hock protein (HSP) atau stress protein
Heat hock protein adalah protein yang memproduksi oleh jasad renik dalam lingkungan yang
terus berubah, terutama yang menimbulkan stress pada jasad renik tersebut dalam usahanya
mempertahankan hidupnya.
Sarana laboratorium untuk membantu menegakan diagnosis demam tifoid dalam garis besarnya
dapat digolongkan dalam tiga komponen, yaitu :
1.
Isolasi kuman menyebabkan S. typhi, dari specimen klinis, seperti darah, sum-sum tulang,
urin, tinja dan cairan duodenum.
2.
Imunoasay untuk malacak kenaikan kadar antibody terhadap antigen.S typhi menentukan
adanya antigen spesifik dari S. typhi.
3.
Uji polymerase chain reaction (pcr) untuk melacak DNA spesifik dari S.typhi.

Pemeriksaan laboratorium meliputi pemeriksaan hematologi,urinalis, kimia klinik .


imunoserologi, dan biologi molekuler. Pemeriksaan m,enunjukan untuk membantu menegakkan
diagnosis (adalkalanya bahkan menjadi penentu diagnosis), menetapkan prognosis, memantau
perjalanan penyakit dan hasi pengobatan serta timbulnya penyulit.
Usaha yang tertua untuk melacak adanya kenaikan titer kadar antibody terhadap S.typi yaitu
dengan cara penentuan titer agglutinii O dan II dengan uji widal yang telah di pakai sejak tahun
1896. Uji widal yang menggunakan suspensi basil s.typhi atau paratyphi untuk menentukan titer
agglutinin dalam serum penderita demam tifoid atau paratifoid, walaupun banyak mempunyai
kelemahan, sampai sekarang ini masih merupakan imunoasay yang paling banyak dipakai untuk
menunjang diagnosis demam typhoid di klinik.
Antigen dari uji widal :
1.
Antigen H (antigen flagella)
Di buat dari S. typhi yang motil dengan permukaan koloni yang licin.
Kuman dimatikan dengan larutan formalin 0,1%
2.
Antigen O (antigen somatic)
Di buat dari strain S. typhi yang tidak motil. Untuk membunuh kuman dipakai alkohol
absolute dan sebagai pengawet di pakai larutan phenol 0,5%. Sebelum dipakai konsentrasi
alcohol harus di encerkan sampai menjadi 12%.
3.
Antigen PA (S.paratyphi A)
Di buat dari strain S.paratyphi A. untuk membunuh kuman dipakai formalin 0,1%.
4.
Antigen PB (S. paratyphi B
Dibuat dari strain S.paratyphi B. untuk membunuh kuman di pakai formalin 0,1%.
Sebelum dipakai, suspense beberapa antigen tersebut diatas harus diencerkan lebih dahulu
dengan larutan salin normal steril sampai mencapai kekeruhan sama dengan tabung nomor 3 dari
Mc. Forland (3 unit Mc.farland yang sesuai dengan 9 x 10 kuman/ml).
Dalam memilih antigen untuk uji widal, di anjurkan untuk memakai yang dibuat sendiri dari
beberapa strain atau faga salmonella yang ada didaerah endemis yang bersangkutan daripada
beberapa antigen baku yang dijual dipasaran dan dibuat dari beberapa strain dan faga salmonella
yang berasal dari Negara lain, sebab kurang sensitive dan spesifik serta sering memberikan hasil
negatif maupun positif semu. Sebaiknya untuk satu provinsi dipakai satu jenis antigen yang
dibuat dari beberapa strain salmonella yang ditemukan diprovinsi yang bersangkutan. Untuk
menurangi hasil yang negative semu dipakai anigen yang multistrain daripada antigen
yang monostrain sebab antigen yang multistrainmempunyai spectrum yang lebih luas.
TES LBORATORIUM
1.
Pemeriksaan widal (kualitatif)

PRA ANALITIK
Judul : pemeriksaan widal
Tujuan : untuk mengetahui ada tidaknya antibody spesifik terhadap antigen salmonella SP dalam serum.
Metode : slide

nya antibody salmonella typhi dan salmonella paratyphi dalam serum sampel akan bereaksi dengan antigen yang
terdapat dalam reagen widal. Reaksi dengan adanya aglutinasi.
ecara antigenis salmonella typosa di bagi menjadi: antigen somatic atau antigen O, antigen flageller atau antigen
H, dan antigen Vi. Kegunaan pemeriksaan widal adalah mencari ada tidaknya zat anti dan
mengukur titer zat anti trehadap kuman salmonella Sp dalam serum penderita tersangka. Typus
abdominalis, antigen yang digunakan adalah suspense kuman salmonella Sp dan proteus Sp yang
telah dimatikan dan diolah menjadi antigen O (antigen somatik) dan antigen H (antigen flagella).
Jika salmonella masuk kedalam tubuh maka anti O lebih cepat muncul dan membeeri respon dari
pada anti H, dan anti O lebi cepat hilang dari pada anti H.

Persiapan/alat dan bahan:


Serum
2.
Reagen Widal
3.
Rotator atau batang pengaduk
4.
Pipet tetes
5.
Slide

ANALITIK
Cara kerja
1.
Siapkan alat dan bahan yang akan digunakan
2.
Pipet satu tets serum (20) keadaan lingkaran yang terdapat dalam slide dengan kode
O,H,HA dan CP dan CN
3.
Tambakan masing-masing satu tetes reagen widal sesuia dengan kode slide, begitu pula
pada CN dan Cp
4.
Campur antigen dan serum dengan batang pengaduk berbeda dan lebarkan kemudian
goyang-goyangkan selama satu menit
5.
Amati reaksi yang terjadi.

PASCA ANALITIK
Interpretasi Hasil :bi

Posotif : Bila terjadi aglutinasi

Negative : Bila tidak terjadi aglutinasi


2.
Pemeriksaan Widal (Semikuantitaif)

PRA ANALITIK
Judul : pemeriksaan widalv
Tujuan : Untuk mengetahui ada tidaknya antibody spesoifik terhadap antigen salmonella Sp dalam serum
Metode : Tabung
Prinsip : adanya antibody salmonella typhi dan salmonella paratyphi dalam serum sampel akan bereaksi
dengan antigen yang terdapat dalam reagen widal. Reaksi dilihat dengan adanya aglutinasi
1.

Alat Dan Bahan


1.
Sampel serum

Reagen widal
NaCl 0,9%
4.
Tabung Reaksi
5.
Klinipet 100 ul + tips
6.
Pipet 1 ml
7.
Rak tabung

ANALITIK
Cara Kerja :
1.
Siapkan alat dan bahan yang akan di gunakan
2.
Susun 8 tabung reaksi di atas tabung untuk satu baris
3.
Tabung pertama diisi NaCl 0,9% ml
Tabung kedua sampai pada tabung kedelapan diisi masing-masing 1 ml NaCl 0,9%
Pipet 100 ul serum masukan kedalam tabung pertama tabung pertama dan homogenkan
Pindahkan 1 ml isi tabung pertama kedalam tabung kedua ke tabung dan seterusnya
sampai tabung ke tujuh
7.
Buang 1 ml isi tabung ketujuh
Tambahkan 1 tetes reagen widal yang positif pada masing-masing tabung, sedangakan
tabung kedelapan ditambakan 1 tetes control positif
9.
Inkubasi selama 24 jam pada suhu kamar
10.
Amati hasil reaksi.

PASCA ANALITIK
Interpretasi Hasil

Positif : terjadi aglutinasi

Negative : tidak terjadi aglutinasi


2.
3.

4.
5.
6.

8.

Pemeriksaan Widal (Tubex TF)

PRA ANALITIK
Judul : pemeriksaan widal
Tujuan : untuk mendeteksi demam typoid akut yang disebabkan oleh salmonella typhi melalui deteksi
spesifik adanya serum antibody Ig M
Metode : invitro semikuantitatif
Prinsip : Tes diagnosis in-vitro semikuantitatif untuk mendeteksi demam typhoid terhadap antigen S. typoid
og lopopolisakarida denan cara mengukur kemampuan serum antibody IgM tersebut dalam
menghambat reaksi antara antigen berlabel partikel latex magnetic, tingkat inhibisi yang
dihasilkan setara dengan konsentrasi antibody IgM dalam label skala warna
Persiapan

Alat
1.
Klinipet / pipet tetes
2.
Lempeng sumur
3.

Timer
4.
Pembanding warna

Bahan
1.
Serum
2.
Specimen control
3.
Reagen coklat
4.
Reagen biru

ANALITIK
Cara kerja
Masukan 50 ul reagen coklat pada sumur 1 untuk control (-) sumur 2 untuk control (+)
sumusr 3 unutk sampel
Tekan control (-) pada sumur 1, control (+) pada sumur 2 dan sampel serum pada sumur 3
3.
Kocok selama 2 menit
4.
Tambakan reagen biru pada masing-masing sumur sebanyak 100 ul
5.
Homogenkan dengan cara sedot sumur 10 X
6.
Kocok dengan rotentor selama 2 menit
Tungu selama 2 jam untuk mengendap (bias di bantu dengan menggunakan magnet)
8.
Amati warna yang terjadi

PASCA ANALITIK
Iterpretasi Hasil
Warna alkan terbentuk biru, sampel coklat, hasil di bandingkan dengan skala warna yang
tersedia.
3.

1.
2.

7.

Sifiis
B. IMUNOASSAY UNTUK PENYAKIT SIFILIS

Immunoassay untuk sifilis memegang peranan yang penting dalam diagnosis laboratories
dari penyakit sifilis ,sebab perjalanan penyakit lama dan sampai dewasa ini T. pallidum belum
berhasil untuk dibenihkan pada suatu media perbenihan . sedangkan pemeriksaan secara
langsung (mikroskopis) hanya dapat dikerjakan pada bahan yang diambil dari lesi lues (ulcus

durum,condylomata lata,dan reseola) yang seringkali hanya muncul dalam waktu yang relative
singkat dan sering member hasil yang negative semu.
Suatu infeksi dengan suatu kuman,umumnya akan membangkitkan pembentukan
antibody pada tubuh penderita.Demikian juga halnya pada infeksi dengan T.pallidum .
pembentukan antibody pada penderita sifilis baru terjadi setelah agak lama penderita menderita
penyakit tersebut,yaitu dimulai pada akhir stadium pertama atau permulaan stadium kedua.
Hal ini terutama disebabkan oleh karena kuman ini diliputi oleh suatu selaput mucoid
yang menyebabkan kuman ini menjadi kebal terhadap fagositosis. Baru setelah kuman ini agak
lama berada dalam tubuh atau telah menyebar ke kelenjar lemfe regional(akhir stadium pertama),
pembentukan antibody humoral yang nyata mulai terjadi.
Dari segi imunoassai ,suatu infeksi dengan T .pallida.yang dikenal sebagai penyebab dari
sifilis akan menimbulkan 2 jenis antibody sebagai berikut :
1.
Antibody nontreponemal atau regain sebagai akibat dari sifilis atau penyakit infeksi yang
lain. Antibody ini baru terbentuk setelah penyakit menyebar ke kelenjar limfe regional dan
menyebabkan kerusakan jaringan. Antibody ini memberikan reaksi silang dengan beberapa
antigen dari jaringan lain seperti misalnya dengan antigen lipoid dari ekstrak otot jantung.
2.
Antibody treponemal yang bereaksi dengan T.pallida. dan closelyrelatedstrains. Dalam
golongan antibody ini dapat dibedakan 2 jenis antibody,yaitu:

Group treponemal antibody, yaitu antibody terhadap antigen somatic yang dimiliki oleh
semua Treponema.

Antibody treponemal yang spesifik,yaitu antibody terhadap antigen spesifik dari


T.Pallidum.
Macam Imunoassai untuk sifilis
Berdasarkan kenyataan tersebut di atas maka imunoassai untuk sifilis dapat dibagi
menjadi 3 golongan besar,yaitu :
1.
USS yang menggunakan regain sebagai antibody dan lipoid sebagai antigen. Termasuk di
sini yaitu:
1.
VDRL(Veneraal Disease Research Laboratory);merupakan uji presipitasi.
2.
RPR(Rapid Plasma Reagin);merupakan uji flokulasi.
3.
CWR(Cardiolipin Wassermann);merupakan uji faksasi komplemen.
2.
Imunoassai yang mempergunakan beberapa strain saprofitik dari treponema. Reiter
Protein Complement Fixation(RPCF);merupakan uji fiksasi complement.
3.
Imunoassai yang menggunakan T.pallid sebagai antigen. Termasuk disini adalah :
1.
Treponema pallidum Complement Fixation
2.
Treponema Wasserman (T-WR)
3.
Treponama pallidum immobilization (TPI)
4.
Treponema pallidum immobilization Lyzozym (TPIL)
5.
Treponema pallidum immobilization-Symplification
6.
Flurorescence Troponemal antibody-5 (FTA-5)
7.
FTA-200
8.
FTA-absorption

FTAiinhibitori
10.
Treponema pallidum Hamagglutination (TPHA);merupakan uji aglutinasi
11.
Treponema pallidum immunoaneadhrence (TPIA)
12.
ELISA-Treponema pallidum
Sensitifitas dari immunoassai untuk sifilis tidaklah sama dalam setiap stadium dari sifilis
seperti tampak dalam table berikut;
Sensitifitas pelbagai immunoassai untuk sifilis pada pelbagai stadium dari penyakit
sifilis(Olansky,1971)
9.

Stadium
penyakit

Uji serologis
non

Uji serelogi
Treponemal

Treponemal
VDRL

CWR

TPI

FTAAbs

ELISA

Lues I

76%

65%

53%

86%

1005

Lues II

100%

100%

98%

100%

100%

Laten dini

95%

95%

94%

99%

100%

Laten lanjut

72%

65%

89%

96%

100%

Lanjut (tertiary)

70%

60%

93%

92%

98-100%

TES LABORATORIUM
1.
PEMERIKSAAN VDRL
(Veneral Disease Research Laboratory)

PRA ANALITIK
Judul : pemeriksaan VDRL(Veneral Disease Research Laboratory)
Metode : kualitatif
Tujuan : untuk menentukan ada tidaknya reaksi antara serum penderita dengan antigen
lipoid
Prinsip : adanya antibody regain (antibody non treponema) dalam serum penderita akan
bereaksi dengan antigen lipoid yang terkandung dalam reagen VDRL membentuk presipitan.
Dasar teori : ada tiga jenis pemeriksaan sipilis yaitu VDRL (Veneral Disease Reseach
Laboratory) , RPR (Rapiud Plasma Reagin) , dan TPHA (Treponema phalid hemaglutination).
Untuk VDRL dan RPR mendeteksi antibody non tropenema,sedangkan TPHA untuk mendeteksi

antibody troponema phalida. Pemeriksaan VDRL , yaitu pemeriksaan yang di pakai untuk
penyakit sifilis.

2.
3.

Alat dan Bahan :


1.
Slide
2.
Clinipet
3.
Batang pengaduk
4.
Centrifuge
5.
Tips
6.
Tissue
7.
Reagen VDRL
8.
Serum

ANALITIK
Cara kerja:
1.
Siapkan alat dan bahan yang akan digunakan
Pipet pada tempat berbeda 1 tetes serum sampel , control positif dan control negative
Tambahkan masing-masing reagen VDRL lebarkan dan goyang-goyangkan 8 menit

PASCA ANALITIK
Interpretasi Hasil
Reaktif (+) : jika terbentuk agregan besar ditengah dengan dipinggirlungkaran

Weak (positif lemah) : jika agregatnya halus pada pinggir lingkaran

Non Reaktif : jika terbentuk agregat

PEMERIKSAAN VDRL
(Veneral Disease Reseach Laboratory)

PRA ANALITIK
Judul : pemeriksaan VDRL (veneral Disease Reseach Laboratory)
Metode : semikuantitatif
Alat dan Bahan :
1.
Slide putih dengan 7 lingkaran
2.
Tips kuning
3.
Clinipet 50 ul
4.
Serum sampel
5.
NaCl 0,9%

ANALITIK
Cara kerja :
1.
Siapkan alat dan bahan yang akan digunakan
2.
Isilah NaCl 0,9% sebanyak 50 ul dari lingkaran 1-6
2.

Tambahkan pada lingkaran 1 dan 7 serum sampel sebanyak 50 ul,homogenkan lingkaran


pertama dan pindahkan isi lingkaran pertama ke lingkaran ke-2n sebanyak 50ul,ddan seterusnya
sampai pada lingkaran ke-6.
4.
Buang isi lingkaran ke-6 sebanyak 50ul
5.
Tambahkan masing-masing lingkaran dengan reagen VDRL ,sebanyak 1 tetes,goyanggoyangkan selama 8 menit dan baca hasilnya.

PASCA ANALITIK
Intrepetasi hasil:

Reaktif(+) : jika terbentuk agregan besar ditengah dan dipinggir lingkaran.

Weak (positif lemah) : jika agregatnya halus pada pinggir lingkaran

Non reaktif (-) : jika terbentuk agregat

3.

PEMERIKSAAN TPHA
(Treponema phaliuda Hemaglutinasion)

PRA ANALITIK
Judul : pemeriksaan TPHA(Treponema phaliuda Hemaglutination)
Metode : kualitatif diluen
Tujuan : untuk mengetahui adanya treponema phalidium dalam serum
Prinsip : adanya antibody spesifik dalam serum penderita akan bereaksi dengan antigen
T.palidium yang dilapiskan pada sel darah merah. Reaksi positif(reaktif) ditandai dengan adanya
aglutinasi
Dasar teori : shipilis merupakan penyakit infeksi yang disebabkan oleh T.palidum dan dapat
menyerang semua organ yang ada dalam tubuh manusia terutama kordiopaskuler,otak dan
susunan saraf. Infeksi pada manusia biasanya disebabkan oleh kontak seksual.
T.Palidum dalam tubuh berkembang dalam 3 tahap:
1.
Muncul bintik-bintik jerawat yang tidak sakit(chancer)atau borok,pada laki-laki
dizakar,pada perempuan dileher rahim/payudara,2-6 minggu setelah infeksi
2.
Timbul bintik-bintik merah dikulit,telapak kaki,tangan dan selaput membrane,kurang
enak badan,napsu makan berkurang,sakit kepala dan demam.
3.
Tahap laten (penyakit menjadi pasif dalam waktu tertentu),menyerang otak dan jantung
menyebabkan kematian,bias ditularkan melalui plasenta.
Alat dan Bahan
1.
Tabung reaksi
2.
Clinipet 10 ul,50 ul,dan 100 ul
3.
Tips kuning
4.
Diluents
5.
Control cells
6.
Control reaktif
7.
Control non reaktif
8.
Serum sampel
3.

ANALITIK
Cara kerja :
1.
Siapkan alat dan bahan yang akan digunakan
2.
Siapkan 3 buah tabung reaksi untuk 1 baris
3.
Pipet 190 ul diluent kedalam tabung 1 (baris datar)
4.
Tambahkan 10 ul serum sampel/control positif dan control negative
5.
Pindahkan 25 ul kedalam tabung 2 dan 3
Tambahkan 75 ul control cells pada tabung 2 dan 75 ul tes cells pada tabung 3 dan
campur
7.
Diamkan selama 450-600C pada suhu ruangan.

6.

PASCA ANALITIK
Interpretasi hasil :
Reaktif (+) : jika terjadi aglutinasi
Non reaktif (-) : tidak terjadi aglutinasi

catatan jika hasil reaktif maka hasil reaksi dilanjutkan ke kuantitatif


4.

PEMERIKSAAN TPHA(Treponema phaliuda Hemaglutinasion)

PRA ANALITIK
Judul : pemeriksaan TPHA(Treponema phaliuda Hemaglutinatinasion)
Metode : kuantitatif
Alat dan bahan
1.
Tabung reaksi 5 buah + rak tabung
2.
Klinipet 10 ul,50 ul dan 100 ul
3.
Tips kuning
4.
Diluents
5.
Tes cell
6.
Control reaktif

ANALITIK
Cara Kerja :
1.
Siapkan alat dan bahan yang akan digunakan
2.
Siapkan 5 buah tabung dalam rak
Ambil tabung serum sampel 10 ul + 190 ul diluents pada kualitatif tadi yang volumenya
tinggal 150 ul (tabung 1)
4.
Isi tabung ke-2 dengan 6 sebanyak 25 ul dan campur
5.
Transfer dari tabung 1 ke tabung ke 2 sebanyak 25 ul dan campur
6.
Transfer lagi dari tabung 2 ke tabung 3 seterusnya hingga tabung ke-5
7.
Tambahkan masing-masing 75 ul tes cells dari tabung 1 sampai tabung 5

3.

Inkubasi pada suhu ruangan 45-600C

8.

PASCA ANALITIK
Interprestasi Hasil :
Positif (+) : terjadi aglutinasi
Negative (-) : tidak terjadi aglutinasi

Pemeriksaan RPR (Rapid Plasma Reagin)

PRA ANALITIK
Judul : pemeriksaan RPR (Rapid Plasma Reagin)
Metode : semikuantitatif
Prinsip : Adanya antibody Reagin (antibody non troponema)dalam serum penderita akan
bereaksi dengan antigen lipoid terdiri dari mikro partikel charcoal (carbon) membentuk
presipitasi.
5.

3.

Alat dan Bahan :


1.
Serum sampel
2.
NaCl 0,9%
Slide putih dengan 7 lingkaran (pakai 2 slide putih)
4.
Klinipet 50ul
5.
Tips kuning

ANALITIK
Cara kerja :
1.
Siapkan alat dan bahan yang akan digunakan
2.
Siapkan slide putih
3.
Pipet NaCl 0,9% sebanyak 50ul dari lingkaran 1-6
4.
Tambahkan serum sebanyak 50ul pada lingkaran 1-7
Campur isi lingkaran 1a dan pindahkan ke lingkaran ke-2 dan seterusnya sampai
lingkaran ke-6 sebanyak 50ul
Tambahkan reagen RPR pada masing-masing lingkaran sebanyak 1 tetes
7.
Rotator selama 8 menit,baca hasilnya

PASCA ANALITIK
Interpretasi Hasil
Reaktif (positif +) jika terbentuk agregat besar ditengah dan dipinggir lingkaran.
Weak (positif lemah)jika agregatnya halus pada pinggir lingkaran

Non reaktif(negative -)jika tidak terbentuk agregat


Penulisan hasil
Amati lingkaran yang terjadi aglutinasi dengan memperhatikan titernya:

5.
6.

Lingkaran

Titer

/8

/16
/32
/64

/128

Tulis hasil dengan menentukan lingkaran paling akhir yang menunjukkan adanya aglutinasi.

IMUNOASSAY
UNTUK PENYAKIT YANG BERKAITAN
DENGAN INFEKSI JASAD RENIK

DEMAM REMATIK
1.

IMUNOASSAY UNTUK MELACAK RHEUMATOID FACTOR (RF)

Factor rematoid (RF) petama kali ditemukan oleh Wolker (1940), dan Rose et.al (1948),
sebagai immunoglobulin dalam sera penderita dengan arthritis trematoid yang dapat
mengaglutinasi sel darah merah domba yang di lapisi IgG kelinci.

Factor rematoid adalah suatu antibody (IgG,atau IgA) yang ditunjukan terhadap IgG (anti
IgG), dan berbentuk dalam stadia yang agak lanjut daroi penyakit arthritis rematoid; biasanya
setelah penderita penyakit lebih dari stengah tahun.
Pathogenesis dari penyakit arthritis rematoid, dan mekanisme pembentukan factor
rematoid masih belum diketahui dengan tepat (masih merupakan hipotensis).
Arthritis rematoid adalah suatu penyakit radang sendi yang di timbulkan oleh suatu
kelainan pada proses regulasi imun (immune regulation) yang kelainan imunopatologisnya
disebabkan oleh kegagalan dalam koordinasi dari beberapa fungsi imunitas mediasi seluler (cell
mediated immunity) terhadap suatu antigen di dalam sendi(intra-arthicular) yang berasal dari
luar. Antigen penyakit ini sampai sekarang belum diketahui dengan tepat, dan oleh karena itu
sering di sebut antigen x.
Akhir-akhir ini sering-sering dikemukakan bahwa ada hubungan yang positif, antara
arthritis rematoid dan infeksi dengan virus Epstein-Barr(EBV). Antigen x yang masuk kedalam
sendi akan diproses oleh beberapa sel imunokompeten dari sinovia sendi sehingga merangsang
pembentukan anti bodi terhadap antigen x tersebut. Antibody yang dibentuk dalam beberapa
sendi ini terutama dari kelas lgG walaupun kelas dari Ab yang lain juga terbentuk.
Pada beberapa penderita dengan arthritis rematoid, secara genetic, didapatkan adanya
kelainan dari sel liimfosit T-Suppressor-nya sehingga tidak dapat menekan sel limposit T-Helper.
Dengan akibat timbulnya rangsangan yang berlebihan pada sel plasma sehingga terjadi
pembentukan antibody yang berlebihan pula. Dalam jangkka waktu yang lama hal ini akan
menyebabkan gangguan glikosilsi lgG sehingga terbentuk lgG yang abnormal, dan menimbulkan
pembentukan otoantibodi yang dikenal sebagai factor rematoid (lgG,lgA, lgE, lgM, dan anti
lgG)lgG yang abnormal tersebu akan difagositosis oleh magrofag atau APC yang lain. Didalam
APC ,lgG tersebut akan diproses namun pada orang normal tidak menimbulkan respon imun
sebab bahan yang berasal dari tubuh sendiri tidak dapat membangkitkan molekul kostimulatoris
B7 pada permukaan APC sehingga tidak dapat terikat pada molekul CD28. Pada penderita
rematoid arthritis,oleh karena HLA-nya terjadi peningkatan kadar molekul kostimulatoris B7-1
dan B7-2, sehingga dapat mengikat molekul CD-28 dan menimbulkan respon imun CD4 Th 2
yang menghasilkan otoantibodi ,yaitu anti-lgG atau factor rematoid.
Umumnya factor rematoid baru terbentuk setelah penderita menderita penyakit lebih dari
6 bulan , tetapi dapat pula terjadi lebih awal atau sesudah waktu yang lama. Dalam tahap
selanjunya antibody tersebut (terutama lgG) akan mengadakan ikatan dengan antigen x dalam
bentuk kompleks imun lgG. Kompleks imun ya ng terjadi akan mengaktifkan komplomen dan
menimbulkan kemotaksin yang menarik leukosit polimorfonukleat (PMN) ke tempat
proses.PMN ini akan menadakan fagositosis kompleks imun tersebut, dan mengalami kerusakan
atau mati dengan akibat pengeluaran enzim lysozim yang dapat merusak tulang rawan sendi.
Pengendapan kompleks imun disertai komplomen pada dinding sendi juga dapat
menyebabkan kerusakan sendi. Beberapa peneliti melaporkan bahwa jaringan sinovia sendi (sel
dendritik abnormal) yang mengalami artrutis rematoid mengeluarkan enzim collagenase dalam
jumlah yang cukup besar sehingga dapat menyebabkaan kerusakn tulang rawan sendi yang tak
dapat pulih lagi(irreversible).

TES LABORATORIUM
UJI ASO (Anti Streptolisin O)

PRA ANALITIK
Judul : UJi ASO (ANti Streptolisin O)
Metode : kualitatif
Tujuan : untuk mengetahui adanya antibody streptolisin dalam serum
Prinsip : partikel latex polystyrene yan dilapisi streptolisin O sebagai antigen akan bereaksi secara imunologis
dengan antibody anti streptolisin O yang terdapat dalam serum sampel. Reaksi ini ditunjukan
dengan adanya aglutinasi dari partikel latex.
Dasar Teori : sterptococus adalah bakteri yang terdiri dari kokus gram positf yang berdiameter 0,5 dalam bentuk
rantai yang khas kokus agak memanjang pada arah sumbu rantai. Streptococcus bakteri ini
menghasilkan zat ekstraseluler dan enzim-enzim. Lebih dari 20 ekstra seluler yang bersifat
antigen dihasilkan oleh streptococcus golongan A (streptococcus pyogenes) yang berhubungan
dengan invasi lokal dan sistemik dan kehilangan pasca sterptococus disebabkan oleh reaksireaksi imunologi.
Zat-zat ekstra seluler terdiri dari streptolisin, hialuronidase streptokinase dan NA dase. Zat-zat yang paling
penting/spesifik adalah streptolisin adalah enzim hemoltik yang dibentuk oleh streptococcus grup
A beta hemolytcus yang terdiri dari O dan streptolisin S, Streptolisin O adalah suatu toksin yang
terdiri protein dengan berat molekul 60.000 dalton aktif dalam suasana anaerob dan dalam
tereduksi melisiskan sel darah merah dan dengan cepat tidak aktif bila teroksidasi. Toksin ini
menyebabkan dibentuknya zat anti streptolisin O (ASO), streptolisin S adalah suatu toksin yang
mempunyai berat molekul 20.000 dalton, bersifat antigen lemah karena didalamnya hanya
mengandung polipaptida dengan berat molekul 2,800 dalton.
1.

1.
2.
3.
4.
5.

Alat dan Bahan


Centrifuge
Slide test
Pipet tetes
Batang pengaduk
Serum

Reagen latex
Control positif
8.
Control negative

ANALITIK
Cara kerja
1.
Siapkan alat dan bahan yang akan digunakan
Ambil darah vena pasien kemudian buat serum dengan cara putar pada sentrifuge dengan
kecepatan 3000 rpm selama 3 menit
Pada slide test yang telah diberi tanda masing-masing, teteskan control posotif, control
negatif dan serum
4.
Tanbahkan masing-masing reagen latex
Masing-masing dihomogenkan dan ratakan sampai garis tanda seperti pada gambar
dibawah ini
Control (-) serum Control (+)
6.
7.

2.
3.

5.

Latex latex latex


Homogenkan
PASCA ANALITIK
Interpretasi Hasil

Positif : terjadi aglutinasi

Negative : tidak terjadi aglutinasi


2.
pemeriksaan Rf (Rematoid Factor) / RA (Rheumatoid Arthritis)

PRA ANALITIK
Judul : pemeriksaan rematoid factor
Metode : untuk mengetahui adanya RF dalam serum yaitu immunoglobulin antibody yang dapat mengikat
antibodi lainnya.
Prinsip : antibody RF (serum) + Reagen latex (anti-antibodi) = aglutinasi
Dasar teori : rematoid factor adalah immunoglobulin antibody yang dapat mengikat antibodi lainnya. Penyakit
ini merupakan penyakit auto imun dan salah satu penyebabnya adalah rematoid arthritis, dimana
sel T supresor tidak menekan pembentukan antibodi dan terjadi glikolisasi (kerusakan struktur)

sehingga terbentuk antigen dan dan merespon antibodi baru sehingga terjadi pengendapan dan
pengaktifan komponen dan kemudian memancing terjadinya enzim dan merusak tulang.
Penyakit ini adalah penyakit auto imun non organ spesifik karena kegagalan ototoleransi
ditunjukan terhadap elemen jaringan tubuh.
Alat dan Bahan
1.
Slide
2.
Klinipet
3.
Tips
4.
Sentrifuge
5.
Batang pengaduk
6.
Serum
7.
Reagen latex
8.
Control positf
9.
Control negatif

ANALITIK
Cara Kerja
1.
Siapkan alat dan bahan
Dengan menggunakan klinipet pipet 40 ul dari tiap-tiap tabung pengenceran kemudian
teteskan pada slide dengan latar hitam
3.
Tambahkan masing-masing reagen latex sama banyak
Pada slide yang lain buat control positif dan control negatif sebagai pembanding dengan
cara
Slide 1 control positif + reagen latex
Slide 2 control negatif + reagen latex

2.

4.

Latex latex 2/4 (40 ul) 1/8 (40 ul) latex

5.

/16 (40 ul) 1/32 (40 ul)


Campur dengan gerakan memurat beberapa detik hingga campuran tersebut menyebar
keseluruh tubuh arah lingkaran

Putar perlahan selama 1 menit dan amati aglutinasi yang terjadi

6.

PASC ANALITIK
Interpretasi Hasil
Positif : terjadi aglutinasi
Negatif : tidak terjadi aglutinasi

Pemeriksaan RF (Rematoid factor) / RA (Rheumatoid)

PRA ANALITIK
Judul : pemeriksaan rematoid factor
Metode : kualitatif
Prinsip : adanya reaksi antara rheumatoid factor yang terdapat dalam serum penderita denga II uman
Imunoglobulin G (IgG) yang dilapiskan pada partikel latex polystyrene reaksi positif dilanjutkan
dengan adanya aglutinasi pada partikel latex.
3.

Alat Dan Bahan


1.
Slide
2.
Pipet tetes
3.
RA latex
4.
Serum
5.
Batang pengaduk

ANALITIK
Cara kerja
1.
Siapkan alat dan bahan yang akan dugunakan
2.
Pipet pada tempat berbeda kedalam slide

Sampel serum 1 tetes

Control positif 1 tetes

Control negative 1 tetes


3.
Tambahkan masing-masing 1 tetes RA latex
Campur menggunakan batang pengaduk dan goyang-goyang selama 2 menit
5.
Amati reaksi yang terjadi

4.

PASCA ANALITIK
Interpretasi Hasil

Positif : terjadi aglutinasi

Negative : tidak terjadi aglutinasi


Pemeriksaan RF (Rematoid Factor)/ RA (Rheumatoid Arthritis)

PRA ANALITIK
Judul : pemeriksaan rematoid factor

4.

Metode : semikuantitatif

3.
4.

Alat dan Bahan


1.
Tabung reaksi
2.
Rak tabung
3.
Pipet tetes
4.
Batang pengaduk
5.
Klinipet 100 ul
6.
Tips kuning
7.
RA latex
8.
Buffer Glisine
9.
Serum

ANALITIK
Cara kerja
1.
Siapkan alat dan bahan yang digunakan
2.
Encerkan buffer glisisne dengan aquadest 1 : 9
Susun 5 tabung reaksi dan isi masing-masing tabung dengan buffer glisine sebanyak 100
ul
Tabung kedua ditambahkan 100 ul, homogenkan lalau pindahkan 100 ul ketabung kedua
homogenkan dan seterusnya sampai pada tabung kelima
5.
Amati reaksi yang terjadi

PASCA ANALITIK
Interpretasi Hasil
Untuk mendapatkan konsentrasi RF, Kalikan titer dengan factor konfersi yaitu 8 IU/ml.

HEPATITIS
1.

IMUNOASSAY UNTUK PENYAKIT INFEKSI HEPATITIS

Hepatitis adalah suatu proses peradangan pada jaringan hati yang memberikan lemah badan, mual
,kencing, seperti air the disusul dengan mata dan badan menjadi kuning. Tidak semua penyakit hepatitis
mempunyai bentuk yang klasik seperti ini. Ada hepatitis yang tidak nyata (inapparent hepatitis), ada yang
tanpa ikterik,ada bentuk yang jiank(bening)dan ada yang ganas (fulminan). Hepatitis dapat disebabkan oleh
virus (penyebab terbanyak), bakteri (salmonella typhy), obat-obatan racun(hepatotoksik)dan alcohol.
Kini telah dikenal beberapa virus penyebab peradangan hati yaitu : virus hepatitis A (VHA), Virus
hepatitis B(VHB),virus hepatitis C(VHC,non A non B),virus hepatitis D(VHD),Virus hepatitis E(VHE)dan
virus hepatitis G(VHG).
Hepatitis virus yang banyak dikenal oleh para klinisi adalah hepatitis A,B,dan C oleh karena itu akan
dibahas lebih rinci dari aspek serologi.
1.
Virus hepatitis A(VHA)
Hepatitis A merupakan penyakit hepatitis akut yang sering dijumpai pada beberapa usia muda.
Penularan penyakit ini terjadi secara oral melalui makanan dan minuman yang tercemar(oral-faecal)
Penyakit ini umumnya member gejala klinis yang akut,dan jelas namun hamper semuanya akan
sembuh tanpa bekas.

Struktur antigen Virus Hepatitis A

Virus hepatitis A merupakan virus RNA yang tergolong dalam virus picorna. Virus hepatitis A
merupakan partikel dengan diameter 27 nm, berbentuk okosahedral dan tidak berbungkus. RNA dari virus ini
diliputi oleh kapsid yang terdiri dari polipeptida virus : VPI sampai dengan VP4.
Dibawah mikroskop electron tampak penuhatau kosong. Lipid bukan merupakan komponen
integral dari virus Hepatitis A yang stabil dengan pengelohan eter, asam dan panas (56 0C selama 30 menit).
Infektifitanya dapat dipertahankan selama bertahun-tahun pada suhu 20 0C.
HAV mengandung 3 polipeptida utama dengan berat molekul 34.000,25.000 dan 23.000 sama seperti

yang dimiliki oleh virus Entero.


Imunopatogenesis

Infeksi dari virus Hepatitis A terjadi secara oral-faecal dengan waktu inkubasi 2-6 minggu. Virus
hepatitis A sudah dapat ditemukan dalam tinja penderita yang terinfeksi sejak masa inkubasi, dan baru
menghilang pada minggu ketiga setelah sakit.
Dari mukosa usus virus tersebut masuk ke dalam sirkulasi darah ,namun stadium viremia ini hanya
berlangsung selama kurun waktu yang amat pendek. Selanjutnya virus tersebut akan menginfeksi sel hepar,dan
menyebabkan beberapa gejala klinis dari Hepatitis A.Hampir semua penderita dengan Hepatitis A akan sembuh
sempurna tanpa komplikasi yang berarti.
Masuknya virus Hepatitis ini kedalam tubuh penderita akan merangsang beberapa sel imunokompeten
dari tubuh untuk membentuk antibody.
Antibody yang pertama dibuat ,dan amat patogmonik untuk Hepatitis A aialah lgM anti-HAV. Titer
dari lgM anti-HAV akan terus meningkat, dan mencapai puncaknya satu minggu setelah timbulnya gejala
penyakit, kemudian titer akan turun secara perlahan-lahan dan mencapai negative setelah minggu kedelapan
,dan diganti oleh lgG anti-HAV.
LgG anti-HAV mulai timbul setelah fase akut dari Hepatitis A lewat. Titernya umumnya meningkat
dalam 3-6 bulan setelah infeksi, dan mencapai puncaknya 1-2 bulan setelah timbulnya gejala penyakit.
Antibody ini bertahan lama sampai bertahun-tahun, bahkan sampai seumur hidup.
Dari segi diagnostic adanya lgG anti-HAV tidak memegang peranan yang berartiuntuk menyatakan
adanya penyakit yang akut, namun mempunyai arti yang penting sebagai petunjuk timbulnya kekebalan.
2.
Virus Hepatitis B
Hepatitis virus B merupakan radang hati yang disebabkan oleh infeksi dengan virus Hepatitis B(VHB
atau HBV) , yaitu suatu virus hepadna. Marka serologic pertama ditemukan pada penduduk asli Australia oleh
Blumberg dan kawan-kawan pada tahun 1965 dan disebut sebagai Australian antigen (Au Ag).
Pada tahun 1968, prince kemudian melaporkan adanya hepatitis B surface antigen (HBsAg) pada
penderita serum hepatitis yang akhirnya dikenal sebagai virus hepatitis B yang identik dengan Australian
antigen. Ada beberapa macam subtype HBsAg yaitu: adw ,ayw, adr dan ayz yang amat penting untuk
epidemologi penyakit. Hepatitis B masih merupakan masalah kesehatan masyarakat di Indonesia.
Perubahan serologi pada VHB di mulai dengan timbulnya HBsAg / H beAg / HBV-DNA dalam
darah/serum yang sering mendahului peningkatan aktvitas transaminase, kemudian berturut-turut disusul
dengan timbulnya lgM anti HBc dan anti HBs. Perubahan biokimiawi maupun serologic adanya infeksi VHB,
umumnya akan kembali normal dalam 6 bulan. Dikatakan kronis bila perubahan biokimiawi dan serologic

menetap >6 bulan.


Struktur Antigen Virus Hepatitis B

Virus Hepatitis B (VHB) yang dikenal sebagai partikel Dane (diameter 42nm), termasuk dalam family
Hepadana. Virus ini hanya dapat menimbulkan infeksi pada manusia dan Champanse saja.
Dalam darah individu yang terinfeksi dengan VHB terhadap partikel Dane dan dua buah partikel
berbentuk lain, yang satu berbentuk tubular dan yang lain berbentuk bulat dengan diameter 22nm.
Partikel Dane terdiri beberapa bagian yang amsing-masing memiliki antigenitas tersendiri.
Bagian paling luar yang merupakan selubung dikenal sebagai Hepatitis B surface antigen
(HBaAg). Bagian sebelah dalamnya yang merupakan inti atau core dari virus mengandung hepatitis core
antigen (HBcAg), dan Hepatitis Be antigen (HBeAg), partially double stranded DNA, DNApolimerase (DNAp) dan suatu aktifitas polymerase.

Imunopatogenesis

Penularan VHB dapat terjadi melalui 2 pola,yaitu pola vertical dan pola horizontal. Pada pola vertival
infeksi terjadi dari ibi hamil dengan HBsAg positif pada anak yang dilahirkannya pada saat persalinan
(penularan perinatal).
Masuknya VHB kedalam tubuh anak biasanya terjadi melalui abrasi kulit bayi akibat trauma
kehamilan atau dapat juga melalui air ketuban yang masuk dalam mulut anak.
Pada pola horizontal infeksi VHB dapat melalui luka dikulit atau selaput lender, misalnya melalui
suntikan, trnsfusi darah, alat operasi ,tusuk jarum, pembuatan tattoo,tindik,luka pada selaput lender mulut,
hidung, saluran pencernaan makanan bagian bawah ,mata atau genitalia (hubungan intim).
VHB dapat ditemukan pada beberapa cairan tubuh seperti saliva, ASI, cairan amnion, keringat,secret
vagina dan air mata.
Setelah VHB masuk ke dalam tubuh penderita yang tidak memiliki kekebalan terhadap VHB, polyhuman serum albumin receptor (PAR) yang terdapat pada permukaan HBsAg akan mengikat poly-human
serum albumin (poly HSA) yang disebut oleh hepatosit. Dalam tahap selanjutnya poly-HAS yang sudah diikat
oleh PAR dari VHB dari suatu kutubnya akan diikat oleh PAR yang terdapat dipermukaan hepatosit pada
kutubnya yang lain. Setelah itu VHB masuk ke dalam sitosol dari hepatosit.
Didalam sitosol dari hepatositt ,protein VHB yang diproduksi oleh sel hepatosit yang terinfeksi akan
dipecah menjadi peptide yang akan diambil oleh reticulum endoplasma, yaitu tempat molekul MHC kelas 1
dibuat, dan mengikat serta mengangkut fragmen peptide tersebut ke permukaan hepatosit.
Bila ada limposit T CD8 yang lewat maka kompleks antigen-MHC kelas 1 akan dianggap oleh
reseptor yang ada dipermukaan limposit CD8 dan menimbulkan signal pada sel limposit tersebut sehingga sel
tersebut menjadi aktif, dan melepaskan sitokin yang dapat menghancurkan seluruh sel yang terinfeksi beserta
isinya. Beberapa sel hepatosit yang rusak tersebut akan melepaskan enzimnya sehingga kadar SGOT,SGPT,
bilirubin dan gamma-GT dalam serum meningkat.

Waktu inkubasi VHB terentang antara 6 minggu sampai 6 bulan. Bila seseorang individu mengalami
infeksi VHB maka ada tiga kemungkinan utama yang dapat terjadi, yaitu:
Hepatitis akut (20% dengan gejala hepataitis akut yang nyata dan 80% berjalan subklinis)

Hepatitis menahun

Pengidap VHB sehat

HBsAg biasanya positif selama beberapa gejala klinis dari penyakit masih ada, dan baru menghilang
beberapa minggu (1-12 minggu) kemudian HBsAg yang menetap lebih dari 6 bulan merupakan petunjuk dari
infeksi HBV yang menahun atau penderita akan menjadi VHB (carrier) yang sehat.
Pada orang dewasa sekitar 10% akan menjadi pengidap menahun,sebaiknya pada golongan anak,8595% akan menjadi pengidap menahun. Dari pengidap VHB yang menahun, 67% akan berrkembang menjadi
serosis hati,dan sebagian besar menjadi kanker hati.

3.
Virus Hepatitis C(VHC)
Hepatitis C adalah hepatitis viral yang disebabkan oleh virus Hepatitis C (vhc=hcv), dan tergolong
dalam kelompok hepatitis non-A ,non-B(NANB). Hepatitis viral inoi sering terjadi setelah transfuse darah atau

pemberian komponen darah sehingga pada masa yang lalu hepatitis C ini disebut sebagai post transfusion
NANB hepatitis.
Dibeberapa daerah didapatkan hepatitis non-A non-B yang tidak mempunyai riwayat transfuse, dan
disebut sebagai hepatitis sporadic atauu acquired community. Dari penelitian selanjutnya ternyata 40-50% dari
penderita hepatitis ini menunjukkan antibody anti-HCV yang positif.
Pada umunya hepatitis C member gejala klinis yang relative ringan bahkan sering tanpa gejala namun
mempunyai kecenderungan untuk menjadi menahun atau serosis hati yang lebih besar bila dibandingkan
dengan hepatitis viral yang lain.

Stuktur Antigen Virus Hepatitis C


Virus hepatitis C merupakan virus RNA dengan genom berantai tunggal, dengan polaritas positif,
diameter 30-60nm, dan panjang sekitar 10kb. VCH merupakan virus yang peka terhadap pelarut organic
seeperti kloroform, terbungkus oleh envelop lipid dan termasuk dalam family antara flavivirus dan pestivirus.
Genom VHC terdiri dari sekitar 9413 nukleotida dan mengkode sekitar 3010 asam amino.
Menurut beberapa peneliti terdapat enam genotip strain VHC. Di Indonesia genotip yang sering dijumpai
adalah subtype 1b, dan subtype 1 baru yang tidak didapatkan di Negara lain. Genotipe VHC yang sering
dijumpai di Surabaya adalah subtype 1b, subtype 1 baru, 2a dan subtype baru dari tipe 3.
1.
2.
3.

Genom VHC terdiri dari 3 bagian utama sebagai berikut :


Region non-coding ,terdiri dari 340 nukleotida dan belum banyak diketahui funggsinya,
Region structural, terdiri dari region nukleokapsid atau core (c), dan region envelope(surface=s),dan
Region non structural (NS), terdiri dari NS 1-NS5 dan sebagian fungsi NS 2-NS5 tiddak diketahui.

Imunopatogenesis
Masa inkubasi dari Hepatitis C berkisar antara 2-20 minggu dengan puncaknya antara 6-12 minggu
dan rerata sekitar 7-8 minggu.
Respon imun yang terjadi setel;ah masuknya VHC kedalam hepatosit, sama dengan respons imun

penyakit yang lain, yaitu respons imun terhadap jasad renik intraseluler dalam sitosol dari sel yang terinfeksi.
Antigen dari virus yang dibuat di dalam sitosol hepatosit akan merangsang MHC kelas 1 untuk membuat
polipeptida yang mengangkut antigen tersebut ke permukaan sel untukdiikat oleh reseptor ddari limposit T
CD8 sehingga sel ini teraktivasi.
Limposit TCD8 yang teraktivitas tersebut akan mengeluarkan sitokin yang menghancurkan sel hepar,
dan virus yang berada didepannya. Akibatnya akan terjadi peningkatan kadar ALT dalam serum penderita yang
sering kali disertai oleh viremia. Beberapa menduga bahwa VHC dapat merusak sel hati secara lansung
(directly cytopathic) sebab ada kaitan antara beratnya kerusakan sel hati dengan banyaknya virus.
Pola fluktuasi ALT serum pada hepatitis C khas periode peningkatan ALT di selingi oleh periode ALT
yang normal atau mendekati normal. VHC atau beberapa bagian virus yang berada ekstraseluler dapat
ditangkap oleh beberapa reseptor pada permukaan limfosit B, dimasukan kedalam vokuol, dan diproses, lalu
dipaparkan pada permukaan limfosit B dan ditangkap oleh reseptor limfosit T CD4 Th2. Sel CD4 Th2 yang
teraktivitasi akan mengalami transformasi blas menjadi sel plasma yang mensekresi antibody spesifik terhadap
antigen VHC. Serenkonversi sel plasma yang mensekresi antibody spesifik terhadap antigen VHC.
Serekonversi biasanya terjadi 11-12 minggu setelah infeksi, behkan dengan uji anti-HCV generasi II, antibody
tersebut dapat dilacak 7-8 minggu setelah infeksi. Namun pada beberapa kasus, antibody tersebut baru timbul
setelah infeksi berjalan setelah 6-12 bulan.

Antibody pertama yang biasa timbul adalah antibody terhadap core, dan biasanya dapat dilacak sesaat
sebelum atau bersamaan dengan peningkatan ALT serum.
Antibody terhadap NS 3 biasanya timbul bersamaan atau sesaat setelah antibodi terhadap protein core,
namun kadang kala (anti-C33c) dapat juga timbul sebelum anti-core, dapatdideteks.
Anti C 100-3 (NS4) baru timbul 10-15 minggu setelah peninghktan ALT. Hepatitis Cdikatakan
menjadi menahun bila kenaikan kadar ALT serum dan anti-HCV positif terjadi lebih dari 6 bulan atau 1 tahun
Factor yang berperan dalam perubahan hepatitis C akut menuju menahun yaitu tingginya kadar ALT,
sifat polifaksin, usia lanjut dan gangguan imunologis.

TES LABORATORIUM
1.

Pemeriksaan HbsAg
PRA ANALITIK
Judul : pemeriksaan HbzAg Rapid test

Metode : imunokromatografi
Tujuan : untuk mengetahui adanya virus hepatitis B dalam serum penderita
Prinsip : imunokromatografi dengan prinsip serum yang diteteskan pada bantalan sampel bereaksi dengan
partikel yeng telah dilapisi dengan anti HBs (antibodi). Campuran ini selanjutnya akan bergerak sepanjang
strip membran untuk berikatan dengan antibody spesifik. Pada daerah tes, sehingga akan menghasilkan garis
warna.
Dasar teori : HBsAg merupakan suatu tahap secara kualitatif yang menggunakan serum atau plasma dimana
bertujuan untuk mendeteksi adanya HBsAg dalam serum atau plasma membrane yang dilapisi dengan anti
HBsAg antibody pada daerah garis test selama proses pemeriksaan, sampel serum atau plasma bereksi dengan
partikel yang ditutupi dengan anti HBsAg antibodi, campuran tersebut akan meresap sepanjang membrane
kromatografi dengan anti HBsAg, anti pada membrane dan menghasilkan suatu hasil posotif pada daerah test,
jika tidak menghasilkan garis yang berwarna pada daerah test menunjukan hasil yang negatif.

Alat dan Bahan


1.

2.
Serum
Strip HBsAg atau strip ACON

3.

ANALITIK

Cara kerja
Siapkan alat dan bahan yang akan digunakan

1.
2.
3.
4.

Tabung reaksi

Siapkan serum dalam tabung reaksi


Keluarkan strip HBsAg dari kemasannya
Celupkan kedalam seru, biarkan selama 15 menit
5.
Amati hasil test yang terjadi

PASCA ANALITIK

Interpretasi Hasil
Positif (+) : terdapat 2 garis pada daerah control dan test
Invalid : tidak terjadi garis merah pada control test

Negatif (-) : terdapat satu garis pada kontrol


Negatif ( -) posotf (+) invalif

H
B
S
A
G

2.

PEMERIKSAAN ANTI HCV


PRA ANALITIK

Judul : Pemeriksaan anti HCV


Metode : Imunokromatografi
Tujuan : Untuk mengetahui adanya virus hepatitis C dalam serum
Dasar teori : Tes human anti HCV lgG antibody dikembangkan untuk mendeteksi sirkulasi anti
HCV lgG antibody dinyatakan sebagai petunjuk infeksi hepatitis C virus, tes ini berdasarkan
prinsip yang menggunakan rekombinan HCV protein sebagai viral antigen. Pada langkah
pertama anti HCV lgG dalam specimen bila ada akan terikat pada protein rekombin;an HCV
yang dilabel pada permukaan sumur microtitir.
Setelah inkubasi bagian specimen yang tidak terikat akan dipisahkan melalui pencucian,
pada pencucian ke dua anti human lgG konjugat ditambahkan akan mengikat antibody spesifik
manusia anti HCV lgG pada permukaan sumur akan membentuk sandwich complex.

Alat dan bahan :


1.
Pipet tetes
2.
Strip Anti HCV
3.
Tabung reaksi
4.
Serum sampel
Reagen HCV / buffer HCV

5.

ANALITIK
Cara kerja :
1.
Siapkan alat dan bahan yang akan digunakan
2.
Tempatkan kemasan strip pada temperature ruangan sebelum dibaca
Siapkan serum dalam tabung reaksi kemudian diambil kurang lebih satu tetes serum, lalu
masukan strip HCV setelah itu masukan buffer HCV kurang lebih 2 tetes.
4.
Tunggu sampai muncul garis merah pada strip

3.

PASCA ANALITIK
Interpretasi Hasil :
(+) : terdapat 2 garis pada daerah control dan tes
(-) : terbentuk satu garis pada daerah control
Invalid : tidak terdapat garis pada daerah control dan tes

PEMERIKSAAN ANTI HBs

PRA ANALITIK
Judul : pemeriksaan anti HBs
Metode : imunokromatografi
Tujuan : untuk mengetahui adanya antibody dalam serum.
Prinsip : serum diteteskan kedalam wadah dan reaksi yang terjadi akan memberikan hasil dengan
tanda garis
Dasar teori : viral hepatitis adalah penyakit infeksi yang umumnya seing disebabkan oleh virus
hepatitis B (HBV) yang menjangkit hampir 5% dari populasi dunia dengan beberapa variasi
setempat, penyakit ini dapat timbul tanpa gejala, akut(dengan kasus berat dan kematian) atau
hepatitis kronik yang akan memburuk ke erisis dan atau hepatocalullar carcinoma dan kematian.
Penyakit ini biasanya ditularkan melalui pertikaran cairan tubuh antara seseorang yang sehat
dengan orang yang sakit.
Alat dan Bahan :
1.
Strip anti HBs
2.
Tabung reaksi
3.
Tips
4.
Tissue
5.
Serum
3.

ANALITIK
Cara kerja :
1.
Siapkan alat dan bahan yang akan digunakan
2.
Darah dicentrifuge dengan kecepatan 3000 rpm selama 10 menit
3.
Buka strip anti HBs dari kemasannya
4.
Celupka strip tersebut kedalam tabung yang berisi serum
5.
Biarkan selama 15 menit , angkat dan baca hasilnya

PASCA ANALITIK
Interpretasi Hasil :
(+) : terdapat 2 garis pada daerah control dan tes
(-) : hanya terdapat 1 garis pada daerah control
Invalid : tidak terdapat garis pada daerah control dan tes

PEMERIKSAAN ANTI HAV

PRA ANALITIK
Metode : manual / semi autometik dan autometik
Prinsip : enzim immunoassay yang berdasarkan pada prinsip pengikatan antibody untuk
mendeteksi antibody virus hepatitis A
Alat dan Bahan :

Alat
1.
Cara manual/ semi autometik
1.
Rak dan tabung reaksi yang dilengkapi adhesive foil
2.
Instrument cobas EIA : incubato, washer , fotometer ( 450 nm)
3.
Pipet volumetric
4.
Dispenser manic-manik.
2.
Cara autometik
1.
Instrument cobas corer
2.
Rak dan tabung mikro
3.
Tabung volumetric

Bahan
1.
Sampel : serum/plasma 500 ul
2.
Manik-manik dengan kompleks anti-HAV dan HAV antigen
3.
Konyugat anti HAV
4.
Control negative
5.
Control positif
6.
Larutan pengencer
7.
Asam sulfat 5%
8.
Aquadest
4.

ANALITIK

Cara kerja:
1.
Cara manual/semi automatic
1.
Siapkan empat tabung reaksi masing-masing reagen blanko (RB),negetif control
(NC),positif control (PC), dan sampel (S).Masing-masing diberi label.
2.
Pada tabung NC,PC,dan S masing-masing diisi samel sebanyak 50ul.
3.
Kemudian tambahkan konyugat anti HAV sebanyak 25 ul pada ketiga tabung tadi
4.
Tambahkan pengencer sebanyak 250 ul pada tabung NC, PC, dan S. serta tambahkan
manik-manik masing-masing 1ul
5.
Tutplah tabung dengan seld adhesive foil dan inkubasi selama 15 menit pada suhu 370C
dengan pengocokan permanen (hindari dari sinar terang). Kemudian dicuci dengan aquadest
(washer EIA)
6.
Kemudian tambahkan konyugat anti HAV sebanyak 250ul kedalam ketiga tabung
tersebut.
7.
Tutup kemudian inkubasi selama 30 menit pada suhu 370C kemudian dicuci lagi
dengan washer EIA
8.
Tambahkan larutan kerja TBM kedalam tabung RB ,NC, PC, dan S sebanyak 250ul.
9.
Tambahkan sebanyak 1ul asam sulfat 5% kedalam masing-masing tabung kemudian baca
fotometer dengan 450 nm.
Cara autometik
1.
Masukkan 500 ul serum penderita kedalam tabung mikro.
2.
Letakkan tabung mikro pada tempatnya di cobas core.
3.
Tekan tombol anti HAV Cobas Core (jalankan sesuai prosedur).
4.
Hasil secara autometik,berupa lembar print out.
2.

PASCA ANALITIK
Interpretasi Hasil
Sampel dengan absorbansi dibawah gray zone (nilai cut off-10%)dinyatakan sebagai
negative. Sampel didaerah gray zone , tes harus diulangi, tanda +/- akan tercetak dikertas. Hasil
diatas gray zone dinyatakan positif

HIV / AIDS
IMUNOASSAY UNTUK PENYAKIT INFEKSI / AIDS
HIV adalah singkatan dari Human Immunodeficiency Virus yang dapat
penyebab AIDS dengan cara menyerang sel darah putih yang bersama sel CD4
sehingga dapat nerusak system kekebalan tubuh manusia yang pada akhirnya tidak
dapat bertahan dari gangguan penyakit walaupun yang sangat ringan sekalipun.
Virus HIV menyerang sel CD4 dan merubahnya menjadi tempat berkembang
biak virus HIV baru kemudian merusaknya sehingga tidak dapat digunakan lagi. Sel
darah putih sangat diperlukan untuk system kekebalan tubuh. Tampa kekebalan tunuh
1.

maka ketika diserang penyakit maka tubuh kita tidak memiliki pelindung. Dampaknya
adalah kita dapat meninggal dunia terkena pilek biasa.
Istilah HIV telah digunakan sejak 1986 (coffin et al.,1986) sebagai nama untuk
retrovirus yan diususlkan pertama kali sebagai penyebab AIDS oleh Luc Montegnier
dari Prancis, yang awalnya menamakannya LAV (Lymphadenopathy Associated
Virus) adan oleh Robert Gallo dari AS, yang awalnya menamakannya HTLV-III
( Human T Lymphotropic Virus Type III ).
AIDS adalah singkatan dari Acquired Immune Deficiency Syndrome yang
merupakan dampak atau efek dari perkembangbiakan virus hiv dalam tubuh mahluk
hidup. Virus HIV membuuhkan waktu untuk menyebabkan sindrom AIDS yang
mematikan dan sangat berbahaya. Penyakit AIDS disebabkan oleh melemah atau
menghilangnya system kekebalan tubuh yang tadinya dimiliki karena sel darah putih
yang banyak dirusak oleh Virus HIV.
Ketika kita terkena Virus HIV kita tidak langsung terkena AIDS. Untuk
menjadi AIDS dibutuhkan waktu yang lama, yaitu beberapa tahun untuk dapat
menjadi AIDS yang mematikan. Seseprang dapat menjadi HIV positf. Saat ini tidak
ada obat, serum maupun vaksin yang dpat menyembuhkan manusia dari Virus HIV
penyebab penyakit AIDS.
HIV adalah anggota dari genus Lentivirus, bagian dari keluarga retrovididae yang ditandai
dengan periode latensi yang panjang dan sebuah sampul lipid dari sel host awal yang
mengelilingi sebuah pusat protein/RNA. Dua spesies HIV menginfeksi manusia: HIV-1 dan HIV2. HIV-1 adalah yang lebihvirulen dan lebih mudah menular dan merupakan sumber dari
kebanyakan infeksi HIV di seluruh dunia. HIV-1 telah berevolusi dari sebuah simian
immunodeficiency virus (SIVcpz) yang ditemukan dalam sub-spesies simpanse, pan troglodyte.
HIV-1 memiliki 3 kelompok atau grup yang telah berhasil didentifikasi berdasarkan perbedaan
pada envelope-nya yaitu M,N dan O. Kelompok M yang paling besar prevalensinya dan dibagi
ke dalam 8 sub type berdasarkan seluruh genumnya, yang masing-masing berbeda secara
geografis. Sub type yang paling besar prevalensinya adalah sub type B (banyak ditemukan di
Asia dan Afrika), type sub A dan D (banyak di temukan di Afrika) dan C (banyak ditemukan di
Afrika dan Asia). Sub type ini merupakan bagian dari kelompok M dari HIV-1. Koinfeksi dengan
sub type yang berbeda meningkatkan sirkulasi bentuk rekombinan(CRFs).
Sedangkan HIV-2 kebanyakan masih terkurung di Afrika Barat. Kedua spesies berawal di Afrika
Barat dan Tengah berpindah dari spesies primate ke manusia dalam sebuah proses yang dikenal
sebagai zoonosis.

2.
3.
4.

Aspek Virologi AIDS :


Sifat virus HIV-1
1.
RNA VIRUS
Termasuk kelompok retroviridae
Terdapat 2 jenis : HIV 1 dan HIV II
Core berbentuk silindris

Memiliki envelop
Memiliki enzim reverse Transcriptase, enzim-Integrase, protease dan RNAase.
7.
Memiliki Sembilan macam gen dan tiga regulatory gen

Sifat virus HIV-2


1.
Peka terhadap jalan lahir atau Luka Lecet.
Musnah pada pemaanasan 560C selama 10-20 menit, sedangkan Lyophilized virus
musnah pada 600C (30 menit), musnah dengan cepat pada 1000C.
3.
Cepat mati dengan desinfektansia alcohol, fenol, iodium, chlorin.
4.
Tidak dapat menembus kulit yang utuh
Cepat mati dengan desinfektansia, alcohol, phenol, iodium, chlorin dan lain-lain.
6.
Musnah dengan cepat pada 1000C.
7.
Tak dapat menembus kulit yang utuh
Tahan lama dalam suhu kamar sampai beberapa hari dalam kedalam basah atau kering
9.
Masa inkubasi dapat mulai dari 6 bulan sampai lebih 6 tahun.
5.

6.

2.

5.

8.

TES LABORATORIUM
1.
Pemeriksaan HIV

PRA ANALITIK
Judul : pemeriksaan HIV
Metode : Imunokromatografi
Tujuan : Untuk Mengetahui Adanya Human Imuno Defisiensi Virusnpada Serum Pasien
sip : ultra rapid test device (serum/plasma) adalah bersifat kualitatif selaputnya memiliki kekebalan
dengan system antigen ganda untuk mendeteksi antibody terhadap antibody HIV
dalam serum atau plasma
DasarTeori : HIV adalah agen penyebab acquired immunedefisiency syndrome (AIDS) virus ini
berkembang lewat lapisan luar lipid yang dibawah dari membrane sel inang. Beberapa
virus gliko protein menepati lapisan luar tersebut, setiap virus memiliki 2 salinan anti
positif genomic RNA. HIV 1 terisolasi dari pasien denan AIDS dan AIDS hubungan
kompleks dan dari orang sehat potensi resiko yang tinggi untuk mengembangkan
AIDS. HIV 2 terisolasi dari pasien-pasien AIDS di afrika barat dan dari individuindividu yang tidak memiliki gejala sero positif. Keduanya HIV 1 dan HIV 2
mndatangkan suatu respon kekebalan. Pemeriksaan antibody HIV dalam serum atau
plasma merupakan cara yang umum yang lebih efisien untuk menentukan apakah
seseorang tak terlindungi dari HIV fan melindungi darah dan elemen-elemen yang
dihasilkan darah untuk HIV. Perbedaan dalam sifat-sifat biologis,aktifitas serologis,
dan deretan genom, HIV 1 dan 2 positif sera dapat diidentifikasi dengan menggunakan
tes serologis dasar HIV.
Alat dan Bahan :
1.

Pipet tetes

2.

Strip HIV
Tabung reaksi

3.
4.

Serum

5.

Reagen HIV/Buffer HIV

ANALITIK
Cara Kerja
1.
Siapkan alat dan bahan yang akan digunakan
Pindahkan tes device dari kantung pembungkus dan gunakan sesegera mungkin. Hasil
terbaik akan didapatkan jika pengujiannya dikerjakan dalam satu jam
Tempatkan tes device pada permukaan yan bersih dan bermutu atau permukaan yang
tinggi
Pegeng penetes secara partikel teteskan 1 tetes serum/plasma (sekitar 25 ul), kemudian
tanbahkan satu tetes larutan beffer sekitar 40 ul.
5.
Tunggu sampai garis merah terlihat. Hasil akan terbaca dalam 10 menit.

2.
3.
4.

PASCA ANALITIK
Interpretasi Hasil
Intesitas dari warna merah garis daerah test (T) akan berubah tergantung dari konsentrasi
antibody HIV yang ada pada sampel. Oleh k]arena itu adanya beberapa bayangan merah
didaerah test dapat diperiksa positif.
2.
Pemeriksaan HIV (Human Immunodeficiency Virus)

PRA ANALITIK
Judul : pemeriksaan HIV
Metode : ELISA (Enzim-Linked Immunosorbent Assay)
Tujuan : untuk melacak antigen gp 24.
Indikasi pemeriksaan.
1.
Diagnosis dini infeksi HIV pada neonates, dan orang yang seronegatif tetapi amat
dicurigai terinfeksi HIV.
2.
Menentukan orang yang seropositif tetapi asimptomatik.
3.
Memantau hasil pengebotan dengan antivirus.
prinsip dasar uji ELISA-Ag HIV adalah double antibody sandwich antiglobulin (indirect sandwich) ELISA.
Alat dan Bahan
1.
Sampel
2.
Butiran polisteren yang dilapisi IgG anti-HIV manusia
3.
IgG anti-HIV poliklonal dari kelinci
4.
Goat antrabbit IgG berlabel horse-radish peroxidase
5.
PBS-T
6.
O-phenylenediamine dihydrochloride
7.
Sulfuric acid
8.
Klinipet dan tipsnya
9.
Incubator
10.
Timer

ANALITIK
Prosedur kerja
Sampel (200 ul) dicampur dengan butiran polisteren yang dilapisi IgG anti-HIV manusia,
dan diinkubasikan selama semalam pada suhu ruangan.
2.
Setelah tahap pencucian, ditambahkan IgG anti-HIV poliklonal dari kelinci, dan
diinkubasi selama 4 jam pada suhu 40 C.
3.
Setelah dicuci, untuk memisahkan bagian yang terikat dari yang bebas, di
tambahkan goat antirabbit IgG berlabel horse-radish peroxidase, dan diinkubasi selama 2 jam
pada suhu 240 C.
Setelah itu, beats dicuci dengan PBS-T
4.
Selanjutnya ditambahkan subtract O-phenylenediamine dihydrochloride, dan
diinkubasikan selama 30 menit pada suhu ruangan. Reaksi dihentikan dengan penambahan 1
M sulfuric acid.
5.
Pembacaan dilakukan dengan microELISA reader pada 1.492 nm.

PASCA ANALITIK
Interpretasi Hasil
Kadar antigen dalam sampel ditentukan dengan mengeluarkan absorban padakurva baku yang
dibuat dari berbagai serum standar yang mengandung antigen gp 24dengan konsentrasi yang
diketahui

1.

Catatan
Kelemahan tes
Tes ini tidak mampu untuk menentukan antigen bila terdapat titer antibodi terhadap p 24 yang
tinggi sehingga membentuk kompleks imun.

Karakteristik tes
Menurut schochetman (1990), daya lacak uji ELISA-Ag HIV terentang antara 50-100pg/ml
antigen p 24 yang bebas (tak terikat Ab).

DEMAM BERDARAH
DENGUE
IMUNOASSAY UNTUK DEMAM BERDARAH DENGUE(DBD)
Demam berdarah dengue masih merupakan masalah kesehatan yang penting di Indonesia,
sebab prevalensinya maupun angka kematiannya tergolong tinggi.
Penyakit ini disebabkan oleh virus dengue yang termasuk virus Arbo.
Manifestasi klinis dari penyakit in I amat bervariasi, mulai dari penyakit yang paling
ringan , demam dengue (DF) ,demam berdarah dengue (DHF), dan dengue shock
syndrome (DSS).
Beratnya manisfestasi klinis dari penyakit dengue dipengaruhi baik factor hostnya seperti
ras, HLA, usia, dan sekresi sitokin dari monosit, dan sel T, maupun oleh factor variasi.
Peningkatan IL-6 sejalan dengan peningkatan beratnya penyakit pada penderita anak, dan
dewasa, sedangkan peningkatan titer IL-1 sejalan dengan beratnya penyakit pada orang dewasa
saja.
Virus dengue ditularkan melalui gigitan nyamuk A. aegypt atau A. albopictus yang
mengandung virus dengue.
Dalam rangka pemberantasan penyakit, di samping pemberantasan vektornya, perlu
dilakukan pencarian kasus. Untuk keperrluan pencarian kasus ini diperlukan sarana diagnostic
yang andal,dan praktis.
Hasil pemeriksaan laboratorium hematologi klinis walaupun dapat memberi pengarahan
dalam menentukan diagnosis klinis, namun penggunaan sarana seroimunodiagnostik akan
memberikan andil dalam menentukan diagnosis pasti dari penyakit.
3.

Struktur Antigen Virus Dengue


Virus dengue tergolong virus Arbo,dan termasuk dalam family virus Flavi bersama-sama
dengan virus japanase encephalitis.
Virus dengue terdiri dari 4 serotipe, yaitu DEN-1,DEN-2, DEN-3, dan DEN-4. Struktur
antigen dari ke-4 serotipe ini sangat mirip satu dengan yang lain, namun antibody terhadap
masing-masing serotype tidak dapat saling memberikan perlindungan silang.
Serotype DEN-2 lebih sering menyebabkan DHF, dan DSS sedangkan DEN-3 biasanya
memberikan gejL klinis yang ringan (DF) dibeberapa Negara Amerika sebaiknya di Jakarta
diduga serotype DEN-3 lebih berperan dalam terjadinya DHF.

Virus dengue mempunyai ukuran yang amat kecil ,diametnya sekitar 50 nm. Struktur
morfologinya relative sederhana ,terdiri dari beberapa protein E pada selubung luarnya, protein
C, dan M pada selubung dalamnya (kapsid),dan RNA untai tunggal pada genomnya. Beberapa
protein secara biologis penting karena dapat bertindak sebagai hemalugtinin ataupun dapat juga
mengaktifkan sel limposit T sehingga menghasilkan sitokin, dan menyebabkan sitolisis dari sel
target atau merangsang sel limposit B untuk menjadi sel plasma, dan memproduksi antibody.
RNA genome dikode untuk 3 protein structural ,yaitu :
1.
Kapsid (C)
2.
Membrane (M),dan
3.
7 protein nonstructural ,yaitu NS 1,NS 2a, NS 2b, NS3, NS 4a, NS 4b, dan NS 5
Immunopatogenesis Demam Dengue
Target utama dari virus dengueadalah beberapa sel monosit atau makrofag. Walaupun
beberapa sel yang lain seperti sel Kupffer dari hepar dapat juga terkena.
Diduga bahwa kebocoran kapiler pada DHF disebabkan oleh pelepasan sitokin (IL-, dan
TNF- ) serta plasminogen activar inhibitor oleh monosit (Chang dan Shaio,1994;
Iyngkaran,1995), dan pelepasan IL-2,IFN- serta TNF- oleh limposit T yang teraktivitas oleh
infeksi virus tersebut (Kurane let al., 1989, dan Rothman et al.,1993).
Infeksi dengan virus dengue akan merangsang beberapa sel imunokompeten untuk
memproduksi antibody.
Antibody terhadap virus dengue dapat dibagi menjadi 2 kelompok:
1.
Neutralizing antibody; serotype-specific, dan crossreactive.
Antibody pertama yang dibentuk adalah neutralizing antibody yang dimulai sejak hari
kelima dari penyakit.
Titer antibody ini mengikat amat cepat, lalu menurun secara lambat dalam waktu yang lama, dan
biasanya bertahan seumur hidup.
Neutralizing antibody ini merupakan antibody yang spessifik.
2.
Non-neutralizing antibody
Di samping neutralizing antibody dibentuk juga antibody yang tidak dapat menetralkan
atau non-neutralizing antibody.
Anti-NS-1 atau Pre-M pada sel limposit T sitotoksis mengikat antigen dalam sel target, dan
menyebabkan sitolisis sel target yang tergantung pada adanya antibody (ADCC= antibody
dependent cell cytolysis).
Infeksin sekunder pada penderita yang telah mempunyai non-neutralizing antibody akan
membangkitkan iimunisasi booster, dan menyebabkan peningkatan kadar abtibody yang amat
tinggi.
Anti-NS 1(serotype crossreactive)
Antibody ini akan berkaitan dengan virus yang memaparkan antigen dengue pada
permukaannya, dan membentuk kompleks virus-antibody yang akan mengktifkan komplemen,
sehingga menimbulkan sitolisis (CMC= complement mediated cytolysis), dan mengeluarkan C

3a ,dan C 5a yang mengakibatkan kebocoran vaskuler ,merangsang agregasi trombosit,dan


mengaktivasi proses koagulasi dengan segala akibatnya seperti renjatan(DHF atau DSS) atau
DIC.
Bayi kurang dari satu tahun(neonates) dapat menderita demam berdarah dengue, dan
sindroma renjatan dengue, walaupun infeksi baru pertama kali terjadi. Hal ini disebabkan oleh
karena bayi tersebut telah mempunyai antibody dalam darahnya yang didapatkan secara pasif
dari ibunya melalui plasenta.
Menurut Guzman (1987) infeksi primer dengan virus dengue pada anak usia 1-3 tahun
tidak menimbulkan DHF tau DSS di Cuba. Antibody yang terikat pada partikel virus akan diikat
oleh reseptor Fcy sel target , dan menyebabkan peningkatan infeksi yang tergantung pada
antibody (ADE= antibody dependent enchancement). Akibatnya produksi sitokin dari sel target
meningkat, dan menyebabkan terjadinya DHF dan DSS.
Pada infeksi virus dengue primer, titer antibody meningkat perlahan-lahan, dan mencapai
suatu tingkatan dengan pola tertentu.
Sebaliknya pada infeksi sekunder dengan virus tersebut, antibody meningkat cepat
mencapai suatu titer yang amat tinggi, dan pada kondisi biasanya terjadi reaksi dengan berbagai
antigen virus flavi. Titer antibody yang biasanya hanya dijumpai pada sera penderita yang
mendapat infeksi sekunder.
Seperti halnya pada infeksi jasad renik yang lain, maka pada infeksi primer dengan virus
dengue kadar lgM akan meningkat lebih dahulu, dan mencapai kadar yang lebih tinggi daripada
lgM.
Sebaliknya pada infeksi sekunder, lgG akan timbul lebih cepat, dan dalam kadar yang
lebih tinggi daripada lgG.
Menurut beberapa peneliti,lgM anti-dengue dapat dipakai sebagai tolak ukur untuk
konfirmasi demam berdarah dengue terutama pada beberapa kasus fatal yang hanya mungkin
bias diperoleh serum tunggal untuk pemeriksaan. Menurut Samsi titer lgG anti-dengue>1280
dengan cara emagglutibation inhibition test(HI) timbul lebih cepat dengan kadar yang lebih
tinggi daripada lgM, sesuai dengan reaksi sekunder.sebaiknya titer lgG anti-dengue(tes HI)<640
timbulnya lebih lambat,dan dalam kadar lebih rendah daripada lgM, lebih sesuai dengan reaksi
primer.

TES LABORATORIUM
1.
PEMERIKSAAN DENGUE

PRA ANALITIK
Judul : pemeriksaan dengue
Metode : Imunokromatografi
Tujuan : untuk mengetahui adanya virus Dengue dalam tubuh

Prinsip : bilas antibody lgM dan lgG dari virus dengue dalam sampel akan ditemukan secara
spesifik oleh antibody anti human lgM dan lgG yang terikat pada membrane netro selulosa
sebagai fase padat, kemudian berikatan dengan anti dengue yang telah membentuk kompleks
dengan gold babelled anti dengue monokorald antibody dan member warba pink pada garis test.

1.
2.
3.

Alat dan bahan :


Tabung reaksi
Tees acon
Serum

ANALITIK
Cara kerja :
1.
Siapkan alat dan bahan yang akan digunakan.
Teteskan serum atau plasma pada strip acon sebanyak 10 tetes
3.
Tambahkan larutan buffer sebanyak 3 tetes
4.
Baca hasil setelah 5-15 menit

2.

PASCA ANALITIK
Interpretasi Hasil :
Positif (+) : terrdapat2 garis warna pada daerah control dan test
Negative (-) : hanya terbentuk satu garus pada daerah control

Invalid : tidak terbentuk garis warna

Pembacaan Hasil :
MMMM
GGGG
CCCC
Dengue primer Dengue sekunder Dengue sekunder Negative
(infeksi primer) (infeksi Sekunder) diduga/tersangka
MMMM
GGGG
CCCC

Keterangan :

Garis M = lgM

Garis G = lgG

Garis C = control
Dinyatakan Batal bila tidak tampak garis control

NARKOBA
1.

IMUNOASSAY UNTUK PEMERIKSAAN NARKOBA

Narkoba atau Narkotika dan obat terlarang lainnya, saat ini penggunaannya menjadi masalah
medis, hokum, social dan ekonomi di Negara maju maupun Negara berkembang.
Penyalahgunaan narkoba dari tahun ke tahun semakin meningkat Menurut UU RI Nomor 5
Tahun 1997 yang termasuk kelompok Psikotropika adalah Amfetamin dan derivatnya yaitu MA
(Methamfetamin) dan MDMA (Methylene-Dioxyy-Meth-Amvetamin). LSD ( Lysergic Acid
Diethylamide), obat tidur, anti depresi dan anti psikosis.

Dalam UU RI Nomor 22 tahun 1997,Narkotika meliputi golongan Opiat(Morfin,


Heroin),golongan Kanabis(Ganja, Marijuana, Hahis) dan golongan koka(Kokain/Coke/Crack).
Heroin (Diacetyl Morphine) atau putau adalah analgesic dan narkotik golongan 1, biasanya
digunakan dengan cara suntikan,dihirup atau melalui oral.
Ganja atau Marijuana/Hashis yang metabolitnya dalam urin sebagai THC (Tetra Hidro
Cannabinol) atau 11-nor-- tetrahydrocannabinol-9-carboxylic acid (asam karboksilat yang
berkonjugasi yang berkonjugasi dengan asam Glukoronat), merupakan jenis narkoba dari
kelompok halusinogeen dan narkoba golongan 1. Umumnya ganja digunakan melalui rokok.
Kokain (ecgonine methyl ster-benzoylecgonine) adalah stimulat jenis narkotika golingan 1.
Kokain dikomsumsi melalui suntikan, dihirup dan dimasukkan dalam rokok.
Amfetamin dan derivatnya yaitu MA (dikenal sebagai shabu-shabu)dan MDMA (sebagai
ekstansi/inex) termasuk golongan psiko-stimulansia. MDMA biasanya dikomsumsi melalui oral
sedangkan MA digunakan secara suntikan, dihirup dan dicampur dengan tembakau rokok
kemudian dihisap.
Melalui sirkulasi darah, zat narkoba akan dibawa ke otak, hati, ginjal, dan organ lainnya,
kemudian mengalami metabolism serta melalui ginjal dieksresi dan dikeluarkan melalui urin.
Efek dari zat narkoba dapat mempengaruhi susunan saraf pusat dan merusak organ-organ dalam
tubuh.
Heroin, Ginjal, Kokain, dan A, fetamin tidak digunakan dalam ilmu kedokteran melainkan
sebagai designed substranceyaitu sengaja dibuat untuk tujuan bersenang-senang.
Golongan Opiat dan Amfetamin masih dapat dideteksi dalam urin 1 sampai 4 hari setelah
penggunaan obat. Golongan kokain dalam 1 sampai 3 hati. THC masih dapat dideteksi dalam
urin 2-7 hari setelah penggunaan obat. Bahkan dalam urin pecandu berat, THC masih dapat
dideteksi 46-77 hari setelah penggunaan obat.
Zat narkoba dapat dideteksi dalam darah atau serum,urin dan cairan tubuh.
TES LABORATORIUM
1.
PEMERIKSAAN TEST NARKOBA

PRA ANALITIK
Judul : pemeriksaan Test Narkoba
Metode : Imunokromatografi
Tujuan : untuk mengetahui ada tidaknya narkoba pada pasien
Prinsip : berdasarkan prinsip pemeriksaan Imunokromatografi methamphetamine akan terbentuk
garis merah jika terdapat narkoba jenis mertham pethamin
Dasar Teori : berdasarkan reaksi imunokromatografi di mana urine yang mengandung narkoba
berkaitan dengan obatconjugate untuk mengikat antibody dalam strip. Urine yang mengandung
obat(narkoba) akan memberikan satu garis warna pada strip, sedangkan urine yang tidak
mengandung narkoba akan memberikan 2 garis warna pada strip.
Alat dan Bahan :
1.
Strip test narkoba
2.
Pipet tetes

3.
4.
5.

Tabung reaksi
Timer
Urine

ANALITIKC
Cara kerja:
1.
Siapkan alat dan bahan yang akan digunakan
2.
Pipet sebanyak 100ul dalam tabung reaksi
Celupkan strip kedalam tabung tersebut yang berisi urine
4.
Keluarkan kemudian baca hasilnya.

3.

PASCA ANALITIK
Interpretasi Hasil :

Positif : jika terbantuk satu garis

Negative : jika terbentuk 2 garis


Invalid : tidak terbentuk garis warna pada control dan test

TES KEHAMILAN
IMUNOASSAY UNTUK TES KEHAMILAN
Plasenta memiliki kapasitas besar untuk menhasilkan sejumlah hormone peptide dan steroid
yang esensial untuk memelihara kehamilan. Hormone yang terpenting adalah Human Chorionic
Gonodotropin, estrogen dan progresteron. Plasenta sebagai organ endokrin utama pada
kehamilan, bersifat untuk dibandingkan dengan jaringan endokrin lain dalam dua aspek. Jenis
dan kecepatan sekresi hormon plasenta terutama bergantung pada stadium kehamilan.
Salah satu kejadian pertama setelah implamantasi adalah sekresi (HCG), suatu hormone peptide
yang terjadi yang memperpanjang lama kehidupan korpus luteum oleh krion yang sedang
berkembang. Jika terjadi fertilisasi, blastokista yang tertanam menyelamatkan dirinya dan tidak
1.

tersapu keluar bersama darah haid dengan membuat HCG. stimulasi oleh HCG diperlukan untuk
memelihara korpus luteum selama fase luteal normal pada siklus ovarium, tertekan akibat umpan
balik negative oleh progresteron kadar tinggi. Kelangsungan kehamilan secara normal
bergantung pada kadar estrogen dan progreson yang tinggi. Dengan demikian pembentukan
HCG selama trimester pertama sangat penting unutk mempertahankan pembentukan hormonehormon tersebut oleh ovarium. Pada janin laki-laki, HCG juga merangsang prekursor sel-sel
leyding di testis janin untuk mengeluarkan testoteron yang menyebabkan maskulinisasi saluran
reproduksi.
Hormone HCG dapat dideteksi diurin sampai sedini bulan pertama kehamilan, sekitar 2 minggu
setelah terlambat haid, karena waktu ini adalah saat keaga mudiga belum dapat dideteksi dengan
pemeriksaan fisik, uji diagnostik ini memungkinkan konfirmasi kehamilan secara dini.

TES LABORATORIUM

2.

PEMERIKSAAN PLANO TES

PRA ANALITIK
Judul : pemeriksaan plano test
Metode : imunokromatografi
Tujuan : HCG merupakan suatu tahap tes yang menggunakan urine secara imunokromatografi untuk
mendeteksi adanya human karionik gonadotropin dalam urine dan juga mendeteksi adanya
kehamilan
Dasar teori : HCG (hormone charionoc Gonadotronpin) merupakan hormone yang dihasilkan oleh plasenta
yang mencapai puncaknya pada 8 minggu kehamilan kemudian untuk kembali keminggu-mingu
berikutnya hormone ini adalah hormone yang disekresi oleh sel-sel troboflas kedalam cairan ibu
Negara setelah nidasi terjadi. HCG dalam urin dapat digunakan untuk penentuan kehamilan
dengan cara sederhana penentuan kehamilan dengan menggunkan urin dapat dilakukan dengan
dua cara yaitu cara biologis dan cara immunologic.Percobaan biologic dengan 3 cara yaitu
cara ascheim zondek, cara friendam, dan caragali mainini.Sedangkan pemeriksaan secara
imunologic dapat dilakukan secara langsung dengan cara direct latex aglutination (DLA) atau
cara tidak langsung dengan latex aglutination inhibitor serta dengan carahemaglutination
inhibitiom (HAI).

1.
2.

Alat dan Bahan


Tabung reaksi
Test strip

3.

Urine

ANALITIK
Cara kerja :
Siapkan alat dan bahan yang akan digunakan
celupkan strip kedalam urine selama 10-15 detik
keluarkan kemudian baca hasilnya setelah 3 detik

PASCA ANALITIK
Iterpretasi Hasil :
Positif : jika ada dua garis pada daerah control dan test
Negatif : jika terdapat satu garis pada daerah control

1.
2.
3.

Pemeriksaan HCG

PRA ANALITTIK
Metode : langsung
Prinsip : HCG yang terdapat dalam urine bereaksi dengan anti HCG yang terikat pada partikel latex. Reaksi
ini ditunjukan dengan adanya aglutinasi pada partikel latex.
Alat dan Bahan
1.
Slide
2.
Klinipet
3.
Urine
4.
kontrol positif
5.
kontrol negatif
6.
Reagen latex
7.
Batang pengaduk

ANALITIK
Cara kerja
1.
Siapkan alat dan bahan yang akan digunakan
2.
Pipet pada tempat berbeda sampel urine sebanyak 1 tetes (3 tempat)
3.
Tambahkan masing-masing 1 tetes control positif, control negatif dan reagen latex
4.
Campur dengan batang pengaduk yang berbeda
5.
Amati reaksi yang terjadi

PASCA ANALITIK
Interpretasi hasil :
Positif : Terjadi aglutinasi
Negatif : Tidak terjadi aglutinasi

TES GOLONGAN DARAH


IMUNOASSAY UNTUK TES GOLONGAN DARAH
Darah adalah suatu suspensi yang terdiri atas plasma dan sel-sel darah. Antigen (aglutinogen)
olongan darah rerikat pada sel darah merah sedangkan antibodi (aglutinin) terdapat salam plasma
darah. Sifat golongan drah adalah diturunkan, terikat somatic kromosom dan bersifat abadi
(kebakaan).
Baik antigen maupun antibodi dari golobgab darah terdapat dalam darah kita dalam bentuk
ketidak sesuaian. Pada golongan darah system ABO dibagi menjadi 4 golongan darah yaitu A, B,
AB dan O. golongan A terdapat antigen A dan anti B; golongan B terdapat antigen B dan anti A;
golongan AB terdapat antigen AB dan tidak terdapat antibody ; golongan O tidak terdapat
antigen dan terdapt anti-A dan anti-B.
1.

TES LABORATORIUM

1.

PEMERIKSAAN GOLONGAN DARAH

PRA ANALITIK
Judul : pemeriksaan golongan darah
Metode : Aglutinasi
Tujuan : untuk menentukan golongan darah seseorang dengan mereaksikan antibodi yang terdapat dalam
serum dan antigen A,B,AB dan O dalam reagen.
Prinsip : Antigen pada darah akan bereaksi dengan antisera pada reagen yang akan menimbulkan aglutinasi.

2.

Alat dan Bahan


1.
Objek gelas
2.
Blood lancet
3.
Darah kapiler dan darah vena
4.
Serum anti A
5.
Serum anti B
6.
Serum anti AB

ANALITIK
Prosedur kerja
1.
Jari pasien yang akan ditusuk didesinfeksi dengan alcohol 70%
Di tusuk denan lancet, tetesan pertama dihapus dengan kapas kering, tetsan kedua
selanjutnya ditaruh diobjek glass dengan 3 bagian.
3.
Kemudian ditetesi dengan anti sera A, anti sera B, anti sera AB.
4.
Dicampur dengan baik kemudian digoyang-goyangkan.
PASCA ANALITIK

Pembacaan hasil
Apabila terjadi antigulasi pada anti serum A.
---------- golongan darah A
Apalagi terjadi antigulasi pada anti serum B
----------golongan darah B.
Apabila terjadi antigulasi pada anti serum AB.
------------golongan darah AB.
Apabila terjadi antigulasi pada serum A,B,AB.
-------------Golongan darah O.

DAFTAR PUSTAKA
Handojo, Indo. 2004. Imunoassay Terapan Pada Beberapa Penyakit Infeksi. Surabaya: Airlangga
University Press.
Hardjoeno. 2007. Interpretasi Hasil Tes Laboratorium Diaggnostik. Cet 5. Makassar : Hasanuddin
University Press.
http://www.indpretest.com/IVD_tests_kits_pic/Medical_diagnostics_samples/IVD_HCT_tests
Manaba Faizin. 2001. Buku Ajar Patologi Umum. Edisi IV .Makassar
Diposkan 5th November 2012 oleh ahmad ihwan

Anda mungkin juga menyukai