BIOAGRO S.A.

Mara Auxiliadora 721 San Miguel

Santiago- Chile
Tel 56.2.552-8300 Fax: 56.2.552-8931
timaukel@entelchile.net
E-Mail

ANTECEDENTES TECNICOS DE BIOREND

Induccin de resistencia en plantas a
enfermedades, insectos, nemtodos y al stress a travs de una
formulacin de Quitosano.
Introduccin
El ataque de hongos, bacterias, virus, insectos y nemtodos a plantas cultivadas
representa una prdida anual superior al 37% de la produccin total, y el combate a travs
de mtodos qumicos y genticos (mejoramiento varietal), tiene algunas limitaciones
importantes, las que se han expresado en alteraciones del medio ambiente, fenmenos de
resistencia, mutaciones peligrosas, efecto en depredadores naturales, poca efectividad y
selectividad, estrecha cobertura e intensa relacin entre organismos, genotipos, estructura
qumica y resistencia esperada. En vista de lo anterior se ha venido tratando de inducir en
las plantas mecanismos de defensa propios, aprovechando algunas alternativas existentes.
Una de las mejores alternativas de resistencia natural a patgenos y stress lo constituye la
pared celular de los vegetales, conformada, entre otros elementos, por lignina, taninos,
fenoles y celulosa, todos los cuales inhiben la penetracin de patgenos a su interior
cuando estn fortalecidos. La activacin de ciertos genes de defensa de las plantas frente a
ataques externos es una opcin que se ha explorado consistentemente, provocando cambios
fsicos y bioqumicos en las plantas huspedes, hacindolas ms resistentes a ataques
microbianos.
Entre los cambios fsicos de la pared celular ms deseados para lograr esta defensa, se
encuentran los que directamente afectan la acumulacin de glicoproteinas ricas en
hidroxiprolina ( 1,2), la lignificacin y suberizacin (3,4), la sedimentacin calosa (5,6), y la
acumulacin de compuestos fenlicos (7,8).
A continuacin tenemos ejemplos de ensayos respecto a lo explicado anteriormente:

Formacin de Calosa Elicitada por Quitosano

H.Kauss, W. Jeblick, A.Domard. Universitat Kaiserlautern Fachbereich Biologie y Universite Claude

Bernard, Laboratoire des materiaux plastiques et des biomateriaux. Planta(1989) Vol 178, Pag 385-392

Esta investigacin evala las formaciones de calosas elicitadas en cultivos de clulas y

protoplasma de Catharanthus roseus. Se encontr que los oligomeros de Quitosano
producen una baja formacin de calosa, la que aumenta grandemente con el Quitosano
normal(Poli d Glucosamina) y con su grado de polimerizacion, alcanzando su mximo
para Quitosanos de peso molecular cercano a 1 milln de Dalton y Desacetilizacion alta.

Elicitacin de cinamil-hidrogenasa en la lignificacion de hojas de trigo

H.J.Mitchell, J.L.Hall, M.S.Barber. American Society of Plant Physiologists. Febrero 1994 Pag 551-556

Se estudio la induccin de Cinamil-hidrogenasa en relacin a su papel en la regulacin de

la composicin de lignina inducida en los mrgenes de las heridas de las hojas de trigo. El
tratamiento de estas heridas se efecto con un Quitosano hidrolizado, parcialmente
desacetilizado, el cual elicit la lignificaron en los mrgenes de las heridas y produjo un
aumento significativo en la actividad de phenylalanine ammonia-lyase, peroxidase y
cinamil hidrogenasa. El aumento mas destacado ocurri con la actividad de la Cinamilhidrogenasa, que aumento a valores aproximadamente 10 veces respecto del Testigo. Los
resultados mostraron que la induccin del Cinamil-hidrogenasa en los tejidos lignificantes
del trigo es predominantemente atribuible a los aumentos altamente localizados de esta en
los bordes de las heridas.
Algunos de los principales cambios bioqumicos en la pared celular, relacionados con
resistencias, son aquellos referidos a la biosntesis y acumulacin de fitoalexinas,
compuestos que no se presentan en las plantas sanas y que son txicos para bacterias y
hongos (9 - 12), la acumulacin de inhibidores de proteinasas (9,13,14), y la liberacin de
generadores oligosacridos de origen vegetal (15). Adems, las plantas acumulan una nueva
clase de protenas denominadas protenas patgenamente relacionadas o protenas PR,
en respuesta a los ataques de agentes patgenos (16 - 19).
Resistencia a Patgenos Por Quitinasa
Una de las protenas relacionadas con resistencia a patgenos que ms se ha estudiado, son
las enzimas lticas de Quitinasa, que juegan un importante y crtico papel en la defensa de
las plantas en contra de ataques de organismos externos. La razn de esta resistencia
obedece a la capacidad que tienen estas enzimas de digerir quitina y gluconasa -3 -1,
ambos componentes bsicos de la pared celular de varios agentes patgenos de importancia
agrcola ( 17 - 19). Como tambin la quitina y gluconasa forman parte del exoesqueleto de los
insectos (y de algunos nemtodos), estas mismas enzimas lticas tienen tambin un efecto
inductivo de resistencia de las plantas contra estos organismos.
Adems del efecto directo de las enzimas mencionadas en la digestin de la pared celular de
los patgenos, los fragmentos glicosdicos liberados, debido a esta degradacin, actan
como generadores de la biosntesis de metabolitos anti stress en el husped (20). Por lo
tanto, la quitinasa y la gluconasa -3 -1, parecen participar en la identificacin de huspedes
durante el ataque de agentes patgenos (21 -22).
Las enzimas de quitinasa catalizan la hidrlisis de la quitina
detectado tres tipos en las plantas.(26):

(23 -25),

de las que se han

 Las quitinasas Clase I, son polipptidos bsicos y actan como la quitina en las plantas,
presentando dos molculas de lecitina con unin de quitina y un pequeo sector rico en
glicina (27).
 Las quitinasas Clase II, similares a la de Clase I, pero sin el sector rico en glicina.

 Las quitinasas Clase III, que incluyen las lizosimas (papaya, pepino, etc.), y no
contienen el sector rico en glicina y no tienen la unin de quitina (28,30).
Las propiedades antifungosas de las quitinasas vegetales han sido ampliamente demostradas
a travs de varios bioensayos in vitro (31), demostrando esta propiedad en frejol a
concentraciones tan bajas como 2 microgramos. Tambin, Mausch et al. (32) demostraron
que la combinacin de quitina purificada inhibi a 15 de 18 hongos testeados. Adems se
han determinado efectos similares con las quitinasas de la avena, maz y trigo (33), del
chamico, tabaco y trigo (34) y de la goma arbica (35), las que inhibieron el desarrollo de
varios hongos.
Adicionalmente la incorporacin de quitinasa del frejol purificada en el cultivo de
Rhizoctonia, origina zonas de inhibicin prximas al punto de aplicacin de la quitina (36).
Se descubri que esta inhibicin del crecimiento de los hongos aument mientras mayor fue
la concentracin de quitina. La inhibicin del crecimiento del hongo surge de la hidrlisis
con enzimas catalizadas de quitina recin formadas y ello resulta en la interrupcin de los
pices hifales del hongo (37). Un examen microscpico de las hifas del hongo Rhizoctonia
olani, al enfrentarlas con cierta dosis de quitina, mostr clulas lticas y abultadas,
retraccin del plasmalema, disolucin de la pared y filtraciones de protoplasma (38),
validando de esta manera el modo de accin de las quitinas descrito anteriormente. Estos
resultados permitiran concluir tambin que la quitinasa, por si sola, est lista para el ataque
de las hifas y presumiblemente ello es ms efectivo, al estar presente en la periferia de las
clulas, causando la muerte de clulas de hifas de ciertos hongos.
As como los estudios in vitro en las plantas superiores han demostrado las propiedades
antifungales de la quitina, recientes estudios, tambin in vitro, pero usando plantas
transgnicas, han entregado mayores antecedentes sobre el rol defensivo de este tipo de
compuestos en las plantas. Broglie & Broglie (39) demostraron que las plantas transgnicas
de tabaco con el gen de la quitinasa del frejol fueron resistentes al ataque del hongo
Rhizoctonia olani, que es un hongo del suelo sumamente patgeno y que produce la
descomposicin de tallos y races provocando la cada de plantas o dumping off en
diferentes especies cultivadas de las familias de las leguminosas y solanceas
especialmente. Las plantas de tabaco, con quitinasa originaria del frejol, presentaron un
superior crecimiento, races ms vigorosas y menor dao causado por el hongo que las
plantas testigo. Asimismo, se encontro el mismo efecto positivo ante la presencia del hongo
Phytium, de caractersticas tanto o ms patgenas que el anterior. Para un mejor
conocimiento se presenta a continuacin ensayo efectuado por A. El Ghaoth.

Efecto de la aplicacin de Quitosano para controlar Pythium e Inducir reacciones de
Defensa en Pepinos
Ahmed El Ghaouth, Joseph Arul, Jean Grenier, Nicole Benhamou, Aalin Asselin and Richard Belanger
USDA-ARS Appalachian Fruit Research Station, Kearneysville, WV, USA Departement de Science et
Tecnologie des aliments et Centre de Recherche, en Horticulture, Departement de Phytologie, Universite
Laval, Quebec , Canada, Publicado en The American Phytopathological Society en Marzo 1994, Vol 84,
Paginas 313-320

Esta investigacin fue efectuada haciendo crecer una planta de Pepino contaminada con
Pythium aphanidermatum en una solucin con nutrientes a la cual se le agrego Quitosano.
Como resultado se logro controlar la putrefaccin de las races y accionar una serie de
respuestas defensivas, incluyendo la induccin de barreras estructurales en los tejidos
radiculares y la estimulacin de enzimas antifungicas(Chitinase, Chitosanase y B-1,3glucanase) tanto en las races como en las hojas, sin producir ningn efecto txico en las
plantas.
Tambin se han detectado resultados similares en la variedad de raps (canola) Westar, cuyas
plantas transgnicas procedentes de un gen de frejol, se defendieron exitosamente de
ataques del hongo Rhizoctonia (39).
Un trabajo reciente, realizado por Melchers et al. (40), demostr que las plantas de tomate
con la incorporacin del gen con quitinasa presentaron un aumento significativo de
resistencia frente al hongo Fusarium xysporum, causante de la cada de plantas en almcigo,
concluyndose nuevamente que la quitinasa inhibe el crecimiento del hongo. Otros trabajos
ms completos son los siguientes:

Efecto de la aplicacin de Quitosano para el Control de Fusarium en Tomate

Nicole Benhamou and George Theriault. Departement de Phytologie, Faculte des Sciences de lagriculture
et de lalimentation, Universite Laval, Saint-Foy, Quebec, Canada
Publicado Physiological and Molecular Plant Pathology en 1992 Pag 33-52

Esta investigacin fue efectuada aplicando Quitosano a plantas de Tomate en forma previa
a su inoculacin con el patgeno radicular Fusarium oxysporum f. Sp. Radicis-Iycopersici.
La aplicacin fue va pulverizacin a las hojas y tratamiento va Bao de races. En
ambos casos redujo en forma importante el numero de lesiones radiculares causadas por el
hongo y aumento drsticamente la formacin de barreras fsicas en tejidos infectados de
las races. Esta investigacin demostr que el Quitosano protegio efectivamente a la planta
contra la pudricin del cuello y de la raz. Tambin indica que no solo es til estimulando
el sistema general de defensa de las plantas sino tambin en reducir el efecto de los
patgenos predominantes del suelo tales como Fusarium. La proteccin contra el ataque
fungal a las races se pudo observar por mas de 6 das.

Induccin de Resistencia Sistemica a pudricin de cuello y raz por efectos de
Fusarium en plantas de Tomate cuyas semillas fueron tratadas con Quitosano
N. Benhamou, P.J. Lafontaine and M. Nicole
Publicado en American Phytophatology 84, PAG 1432-1444, Septiembre 1994

Esta investigacin fue efectuada revistiendo la semilla y tratando el sustrato con Quitosano
en forma previa a infestar con Fusarium oxysporum f.sp. radicis-lycopersici. Se utilizo ya
sea una mezcla de Turba, Perlita y Vermiculita o placas petri con Agar. En ambos casos la
combinacin del tratamiento de semilla y la enmienda al sustrato redujo significativamente
la incidencia de la enfermedad evaluada por la disminucin en las lesiones de las races y
una apariencia mas sana del sistema radicular. El anlisis de los tejidos de las races por
donde penetro el hongo revelaron que el tratamiento previo con Quitosano estuvo siempre
4

asociado por las reacciones de defensa de la planta. En la epidermis, las clulas mostraron
tpicos signos de necrosis caracterizada por una marcada desorganizacin del citoplasma.
El crecimiento de hongos fue reducido en el interior pero no estuvo restringido solo a esta
rea de reaccin. Aun mas, el patgeno fue detectado en la corteza. El anlisis de los
tejidos de las races por donde penetro el hongo revelaron que el tratamiento previo con
Quitosano estuvo siempre asociado con las reacciones de defensa de la planta. En la
epidermis, las clulas mostraron tpicos signos de necrosis caracterizada por una marcada
desorganizacin del citoplasma. El crecimiento de hongos fue reducido en el interior pero
no estuvo restringido solo a esta rea de reaccin. Aun mas, el patgeno fue detectado en
la corteza exterior en la cual su desarrollo fue frenado.
Estructura de los Genes que Codifican la Produccin de Quitinasa.
El anlisis de secuencias de nucletidos de clones aislados de cADN indic que al menos
dos de los genes de quitinasa (CH5A y CH5B) se transcriben en respuesta al tratamiento
con etileno (61). La expresin de estos genes, en plantas trangnicas de tabaco, se determin
dependiente de la aplicacin de etileno exgeno o de promotores de oligosacridos.
El anlisis de las deleciones promotoras de CH5B sugiere la presencia de una secuencia de
43 pares de bases que se encuentra precisamente entre los genes CH5A y CH5B, los que
pueden jugar un rol en la regulacin transcripcional de la expresin gnica inducida por la
fitohormona etileno.
Se ha estudiado adems la induccin del gen CH5B (39,61) en respuesta al ataque de varios
hongos patgenos. Se estim el patrn temporal y espacial de la expresin del gene CH5B
durante la infeccin fungal, usando - glucoronidasa como gen informante. Se constituy
un gen quimrico fusionando un fragmento de 1 - 7 kb, que llevaba las secuencias
anteriores de CH5B, a la region codificante de - glucoronidasa , seguida por los signos de
termino del gen de sntesis de sintasa nopalina.
Se demostr que la expresin del gen CH5B est fuertemente inducida en respuesta al
ataque fungal.
Preutilizacin de las Propiedades de la Quitinasa.
Estudios realizados en los aos 80 en la universidad de Washington (50,61) observaron el
incremento de la resistencia de Pisum ativum al ataque de Fusarium olani, como respuesta
a la aplicacin exgena de quitina. La ampliacin de esta investigacin a otras especies
determin que los polmeros hexosaminas de quitosano (un derivado natural de la quitina)
inhiban la germinacin y el crecimiento de uresdosporas de Puccinia triiformis en trigo, y
que la acumulacin de quitosano poda estar involucrada tanto en la detencin del
crecimiento de las esporas como en la resistencia del husped a la enfermedad (50).
Al aplicarse quitosano exgeno a semillas de numerosas especies anuales, se supuso
correctamente que este induca una respuesta de defensa al ataque de un hongo que no
estaba presente, en forma de cambios bioqumicos, citogenticos y estructurales, tales como
sistemas radiculares mayores, tallos ms gruesos y acumulacin de lignina.

La aplicacin de quitosano ha demostrado ser efectiva tanto para las races de las plantas
como para sus partes areas. Existen ensayos muy interesantes realizados por Ahmed El
Gaouth y otros respecto a estos ltimos efectos.

Efecto de la aplicacin de Quitosano para controlar Botrytis en Pimentn

Ahmed El Ghaouth, Joseph Arul, C.Wilson, Nicole Benhamou USDA-ARS Appalachian Fruit Research
Station, Kearneysville, WV, USA Departement de Science et Tecnologie des aliments et Centre de Recherche,
en Horticulture, Departement de Phytologie, Universite Laval, Quebec , Canada, Publicado en Physiological
and Molecular Plant Pathology en Junio 1994, Vol 44, Pag 417-432

Esta investigacin fue efectuada tratando los cortes en los Pednculos de Pimentones con
una solucin de Quitosano, para luego posteriormente infectarlos con esporas de Botrytis
cinerea. Como resultado se logro observar que en los frutos tratados con Quitosano no fue
visible la enfermedad hasta 7 das despus de la inoculacin, en cambio en el testigo la
enfermedad fue visible a las 24 horas. En la evaluacin efectuada a los 14 das todos los
testigos estaban infectados, en cambio en los frutos tratados con Quitosano solo el 25% lo
estaba. Adems cabe mencionar que dichas infecciones en los frutos no tratados era
generalizada, en cambio en los frutos tratados estaba restringida principalmente a
cavidades de los cortes y clulas epidermales rotas.

Efecto de la aplicacin de Quitosano in vitro a hongos patgenos

Ahmed El Ghaouth, Joseph Arul, C.Wilson, Nicole Benhamou USDA-ARS Appalachian Fruit Research
Station, Kearneysville, WV, USA Departement de Science et Tecnologie des aliments et Centre de Recherche,
en Horticulture, Departement de Phytologie, Universite Laval, Quebec , Canada.

El efecto antifungico del Quitosano en el crecimiento in-vitro de hongos patgenos

comunes en frutillas post-cosecha fue estudiado por El Ghaouth et al. De acuerdo a este
estudio el Quitosano reduce apreciablemente el crecimiento radial de la botrytis cirenea y
del rhizopus stonolifer con un gran efecto en concentraciones altas. Estos autores
confirmaron posteriormente la importancia de la cantidad de los grupos de cargas
positivas a lo largo de la cadena del polmero, porque una baja actividad antifungica fue
observada usando el N. O. Carboxymetylquitosano en comparacin con el Quitosano slo.
Muchos otros cientificos han estudiado y patentado formas de aplicacin de sales de
quitosano al suelo, semillas, races, etc. Entre ellos destacan Hadwiger, Freepons y los
laboratorios Bentech, ampliamente conocidos y autores de patentes al respecto.
Tambien consideramos trabajos como el de K. D. Kim y otros que estimamos interesante
conocer y los entregamos a continuacin:

Efectos de Compost y Enmiendas del suelo para el Control de Phytophthora Capsici

K.D.Kim, S. Nemec, G.Musson. Crop Protection Kidlington, Oxford, U.K.

Elsevier Science Limited Publicado en Marzo de 1997 Vol 16, Paginas 165-172

Esta investigacin evala los efectos de varios productos para el mejoramiento de suelos
plantados con Pimentn. Para ello se hicieron 3 Tests de Campo, a fin de comprobar la
eficacia de distintos productos naturales comnmente utilizados para el Control de Hongos
6

en especial Phytophthora Capsici que produce pudriciones en races y cuellos de las

Plantas. Se evaluaron 2 plantaciones en cada Test. Los resultados indicaron que el
Quitosano utilizado como enmienda redujo la incidencia de la Plaga y su severidad en
comparacin con los Controles.
Efecto de la aplicacin de Quitosano para Inducir resistencia contra enfermedades
causadas por Phythophtora en frutillas
H. Eikemo, A. Stensvand and A. M. Tronsmo
Instituto de Investigacin Agrcola, Centro de Proteccin para las Plantas, Kogskoleveien 7, N-1432 As, Noruega, 2003.

Dos supuestos elicitores de resistencia a enfermedades (acibenzolar-S-methyl y quitosano) fueron

estudiados por su efecto en la pudricin de la corona en frutillas producida por accin de
Phythophtora cactorum. El efecto de ambos compuestos aument cuando el tiempo entre el
tratamiento y la inoculacin se ampli de 2 a 20 das. No hubo diferencias significativas entre
ambos tratamientos cuando la concentracin de acibenzolar-S-methyl se aument desde 10 a 1000
mg a.i./planta. La concentracin ms baja de quitosano estudiada de 10 a 50 mg. a.i./planta result
ms efectiva comparada con concentraciones mayores de 250 o 1000 mg a.i./planta. No hubo
diferencia significativas en los tratamientos con fosetyl-Al, acibenzolar-S-methyl o quitosano,
cuando se aplicaron de 5 a 15 das antes de la inoculacin. Finalmente, se ensay el efecto de
acibenzola-S-methyl y quitosano contra Phythophtora cactorum y Phythophtora fragariae
var.fragariae en placas Petri. Slo el quitosano a concentraciones de 50 a 500 mgr a.i./ml tubo
un efecto retardador del crecimiento en Phythophtora cactorum. Por otra parte ambos
elicitores, a una concentracin de 500 mgr a.i./ml, redujeron el crecimiento de Phythophtora
fragariae var.fragariae.

ACCION NEMOSTATICA
El Quitosano se ha transformado en una importante herramienta para el Control de
Nematodos Fitoparsitos ya sea como complemento a los Nematicidas Quimicos o
como preventivo y protector de raices.
Existen un sinnumero de trabajos que incluso muestran un efecto nematicida tales como
los siguientes:

Efecto Nematicida de la Quitina, en comparacin con otros pesticidas, contra los

nematodos fitoparsitos, Heterodera avenae y Tylenchulus semipenetrans.
Y.Spiegel, E. Cohn, y I.Chet. Journal of Nematology 21(3):419-422, 1989. La Sociedad de Nematologos, 1989.

El efecto nematicida de la quitina, en relacin a otros pesticidas, para control de los nematodos
fitoparsitos Heterodera avenae y Tylenchulus semipenetrans. Plntulas de trigo, cultivadas en
suelo, artificialmente o naturalmente infestadas con Heterodera avenae, fueron tratadas con 0.4%
(w/w) de Quitina fabricado a partir de quitina de cscara de crustceos, con aldicarb (Temik 15G), y
con ethylene dibromide (EDB 90EC). El Tratamiento con Quitina aumento significativamente la
paja, espiga y peso promedio seco de granos del trigo de las plantas infectadas con nematodos
respecto de los otros 2 tratamientos. En un experimento que cubra 2 temporadas consecutivas los
3 tratamientos redujeron el nmero de nematodos en el suelo en un 60%. En un experimento de
una temporada, la Quitina redujo el nmero de nematodos en un 51%, y aldicarb or EDB redujeron
en un 40%. Una reduccin del 50 al 90% en la densidad de poblacin de Tylenchulus
Semipenetrans en las races de 2 ctricos patrones fue medida luego de aplicar 0.2% (w/w) de
Quitina al suelo.

Los Nematodos en la produccin de semilla de papa

Alberto Gonzlez \ Javier Franco S. Fasciculo 3.9 - 97 1 CENTRO INTERNACIONAL DE LA PAPA (CIP)

El estircol de ave (gallinaza) y vacuno constituyen la fuente de materia orgnica con mayores
posibilidades para incrementar el rendimiento de los tubrculos de papa en cultivares susceptibles
como Revolucin y tolerantes como Yungay, pero elevan la tasa de multiplicacin del
nematodo. En los cultivares resistentes como Mara Huanca, las enmiendas orgnicas tienen
poco efecto en la elevacin de los rendimientos pero reducen la reproduccin de G. pallida. El
estircol de gallina debe aplicarse antes o al momento de la siembra y como mnimo 10 t/ha.
Normalmente la incorporacin de enmiendas orgnicas al suelo y la descomposicin de sus
componentes contribuyen al buen desarrollo de la planta y en consecuencia a tolerar el ataque del
nematodo. Asimismo, la enmienda orgnica contribuye a la produccin de compuestos txicos y
proporciona las condiciones adecuadas para el desarrollo de nematodos predatores y
microorganismos que, de alguna forma, tienen un efecto biocontrolador sobre los nematodos.
Algunas enmiendas como la quitina pueden facilitar el desarrollo de una microflora
antagnica capaz de degradar estos polmeros y en consecuencia destruir la capa
quitinoltica de los huevos de Meloidogyne, Globodera y Heterodera.

Accion Bioquimica del Quitosano

Las clulas de una planta que existe en suelo contaminado tiene probabilidades de estar
sujetas a infecciones con bacterias patgenas, invasin de nematodos, y de ser comida por
insectos, las cuales resultan en desordenes en las funciones fisiolgicas, falta de nutricin y
bajo crecimiento de la planta. Eventualmente, la planta se marchita o muere. Por otro lado,
los siguientes cuatro fenmenos o reacciones ocurren en una tierra activa a la cul se aplica
Quitosano.
Primero, el Quitosano aplicado es hidrolizado por coexistencia con los microorganismos, y
se degrada a molculas de peso molecular bajo, oligosacaridos de agua soluble de
quitosanos , que se introducen en las clulas de la planta para promover la transcripcin del
ADN a RNA. Este es el primer fenmeno.
Como resultado de este primer fenmeno, las clulas de la planta realizan vigorosamente la
sntesis de la protena, que a su vez promueve la biosntesis de enzimas tal como
quitosanasa y quitinasa, y substancias antibacteriales tal como phytoalexinas. Esto es el
segundo fenmeno.
Entonces, estas enzimas disuelven o desintegran las clulas o descomponen las paredes de
las clulas de las bacterias patgenas, y las phytoalexinas, oligosacaridos de Quitosano y
otras substancias entran a las clulas de las bacterias patgenas para prevenir la
transcripcin del ADN a RNA y la proliferacin de las bacterias patgenas. Esto es el tercer
fenmeno.
Como resultado del tercer fenmeno, en otras palabras, disolver o desintegrar por medio de
lisinas las paredes de la clulas de las bacterias patgenas, all se forman nuevamente
oligosacaridos de quitosano, cuya funcin es promover la activacin de las clulas de la
planta. El oligosacarido de Quitosano y varias enzimas se supone atacan nematodos para
prevenir su crecimiento. Esto es el cuarto fenmeno.
8

Mientras la serie de reacciones descritas anteriormente ocurren con la presencia de

quitosano, que es el iniciador, el papel mayor para permitir estas reacciones est dado por la
coexistencia de microorganismos en la tierra, que cooperan uno con el otro para
descomponer quitosano en oligosacaridos de quitosano.
Sin la presencia de estos microorganismos la presencia de Quitosano tiene un efecto
mnimo o nulo.
(Referencia: Matsuda et al. Patent USA 5.139.949 1992)
CARACTERISTICAS DE LA QUITINA UTILIZADA PARA LA FABRICACION DE
LOS PRODUCTOS BIOREND
La molcula de quitosano es una larga cadena (polmero) de unidades de
azcar constituida por dos tipos de monmeros diferentes: la glucosamina y
la N-acetilglucosamina.
Una de las propiedades funcionales ms dependientes del peso molecular promedio del
quitosano es la bioactividad frente a hongos. (Agull et al., 2004)
Por lo tanto, el quitosano ejerce un eficaz efecto fungicida y bactericida sobre una
importante cantidad de microorganismos patgenos para las plantas.
La quitina y el quitosano activan genes en plantas para que se defiendan sobre a
organismos patgenos. Adems, el quitosano inhibe la sntesis de RNA de algunos hongos
patgenos, impidiendo que estos se reproduzcan. (Hadwiger et al., 1986) Por lo tanto esta
familia de biopolmeros ejercen un efecto similar al de:
una vacuna para las plantas, predisponindolas a defenderse de agresores externos
produciendo quitinasas (efecto bioestimulante).
Un fungicida, impidiendo el crecimiento y proliferacin de hongos patgenos para las
plantas.
Se ha comprobado que el grado de desacetilacin (GD) influye sobre la
biodegradabilidad del quitosano. (Chatelet et al., 2001)
Por lo tanto, un quitosano de bajo grado de desacetilacin ofrece un mayor
efecto residual en el tiempo sobre races y tallos.
El contenido proteicos de plantas se ha visto fuertemente favorecido por la presencia de
quitosano en el terreno de cultivo. (WO 89/07395)
Usado en una proporcin del 0,1% como suplemento de suelo permiti una buena
modulacin y fijacin de nitrgeno despus de la etapa e crecimiento.
La fuente de la que se obtiene la quitina y posteriormente el quitosano tiene
influencia en la facilidad para desacetilar la quitina y en el tamao del
biopolmero(Chatelet et al., 2001)
Es as que las quitinas desacetiladas obtenidas de las caparazones de
Centolla y Centolln en las aguas australes de Chile tienen un peso
9

molecular medio y bajo, lo que facilita su solubilizacin como un quitosano

de bajo porcentaje de desacetilacin.
Estas quitina desacetiladas proveniente de la regin ms austral de Chile a
partir de caparazones de Centolla y Centolln:
Al poseer un peso molecular medio de 5 mil daltons favorece su rpida
solubilizacin en forma natural como si se tratara de un quitosano altamente
desacetilado, conservando las ventajas de la quitina como estimulante de
las defensas de las pantas.
Al provenir de fuentes de las aguas ms puras del mundo, libres de metales
pesados, pesticidas y contaminantes, nuestras quitinas desacetiladas no
aportan estos contaminantes a las plantas permitiendo el cultivo de
productos orgnicos.
El uso de quitina y quitosanos en el recubrimiento de semillas mejora su germinacin y
produce altos rendimientos en la cosecha (Hadwinger et al., 1984)
Es posible conseguir una excelente preservacin de frutos, cuando soluciones de quitosano
son aplicadas sobre stos en la etapa previa a su maduracin.(Kungsuwan, et al., 1996)
El quitosano interfiere en la generacin de lesiones inducidas por infecciones virales en
plantas, actuando como un inhibidor viral (Struszczyk, 1989)
Usando soluciones de 0,1% sobre hojas de Plaseolus vulgaris, se logr reducir casi 100%
de lesiones al inocularse posteriormente el virus del mosaico de alfalfa.
Biorend
Durante los ltimos 15 aos la empresa Bioagro S.A. ha estado dedicada al desarrollo de
varias formulaciones de quitosano, denominadas Biorend, en que utiliza exclusivamente
Quitina de Centolla y Centollon de la Zona mas Austral del mundo, que lo hacen un
producto Unico y mas efectivo, que cuando se aplican a la semilla, races, tallos y hojas
producen un aumento significativo en la resistencia a ataques de los hongos descritos, as
como tambin a todos los hongos que presenten quitina en su estructura celular perimetral,
la que es intensamente atacada y degradada por la quitinasa inducida por estas
formulaciones, produciendo una inhibicin en la capacidad de ataque del hongo.
El mecanismo de accin de ellas se explica sobre la base de la actividad de la quitinasa, que
disuelve la quitina presente en las paredes celulares de hongos y otros organismos
patgenos (43). El principio activo del Biorend es el quitosano, que es un gran activador de
la sntesis de calosa, una enzima que cataliza la formacin de gluconasa -3 - 1. El papel de
esta enzima es sumamente rpido, localizado y efectivo frente a la invasin de algn
patgeno o tambin frente a dao mecnico sufrido por las plantas tratadas. (44,45).

10

El Biorend tambin, a travs del quitosano, puede actuar como un inductor de protenas
que combaten microorganismos, tales como las lecitinas en las plantas. De estos resultados,
se ha inducido que las lecitinas de las plantas, por su similitud bioqumica con los
anticuerpos animales, poseen una funcin antimicrobiana de tipo anticuerpo (47,48).
Biorend y su Resistencia a familias de Insectos y Hongos patognicos.
Tambin se ha sealado que el quitosano puede generar pistina fitoalexina en los tejidos de
las vainas de arveja ( 49,50), que son compuestos de bajo peso molecular que se sintetizan
una vez que las plantas han sido expuestas a ataques de microorganismos (51). La
acumulacin de fitoalexinas en el rea de infeccin es uno de los mecanismos a travs de
los cuales resisten ataques de patgenos y estos compuestos inhiben el crecimiento de los
hongos y protegen los tejidos de ciertos cultivos frente a ataques severos de Fusarium Spp.,
hongo que ataca a muchos cultivos (50). Wagoner et al. (53), han demostrado que el
quitosano induce la sntesis de fenilalanina (Pal), una enzima muy efectiva en el combate
de hongos de diferentes tipos (50). Adems el quitosano es un potente inductor de
acumulacin del inhibidor de proteinasa en los cotiledones de tomate (50). Estos
compuestos nuevamente juegan un importante rol en el combate de microorganismos,
pero tambin tienen efecto sobre algunos rdenes de insectos tales como Lepidpteros
Colepteros y Ortpteros, algunos de cuyos representantes tienen un importante papel como
plagas silvoagropecuarias y de granos almacenados.
En otro tipo de resultados, se ha demostrado que el quitosano participa de la reduccin de
enzimas hidrolticas que se sintetizan en respuesta a los agentes patgenos, permitiendo, en
el cultivo del tabaco, una sistemtica resistencia frente al hongo Phytophtora nicotiana (57).
Sobresale en este caso el gran nmero de protenas que son inducidas, las que incluyen
quitinasas y gluconasas - 3 -1, que hidrolizan los polmeros del azcar, que son los
componentes principales de las paredes celulares de muchos hongos.
Por otro lado, se han sealado algunas evidencias que demuestran la actividad fungicida del
quitosano, lo que parece estar inversamente correlacionado con el tamao de las partculas
y en concentraciones cercanas a los 100 microgramos por mililitro. En general, el quitosano
tiene una mayor actividad fungicida que la quitina, y es as que de 46 hongos ensayados, el
quitosano inhibi a 32 de ellos, mientras que la quitina inhibi solamente a 6 de ellos (19).
A pesar que las paredes celulares de las plantas son una barrera frente a compuestos de alto
peso molecular, como lo es el quitosano, los tejidos de las plantas tienen enzimas capaces
de dividir el quitosano en pequeas mleculas que podran atravesar las barreras de las
paredes celulares. Un anlisis histoqumico, usando una solucin especfica de hexosamina
(49), demostr que existe una acumulacin significativa de quitosano en las esporas de los
hongos inoculados en arveja, especialmente en el conducto germinal, donde el crecimiento
ha sido finalizado despus del contacto con el tejido de la planta. Tambin se detect
quitosano en las clulas de las plantas adyacentes a la germinacin de la espora del hongo.
Hadwiger et al. (43), utilizando tcnicas de inmunoqumica, han examinado la ubicacin del
quitosano y otros componentes de la pared celular de hongos en plantas de arveja despus
11

de la inoculacin con el hongo Fusarium solani y los resultados han evidenciado que esta
prueba inmunoqumica sirve para determinar la ubicacin de los componentes fungales en
la interaccin arveja - Fusarium. Entonces, los componentes de la pared celular del hongo
entran a las clulas de la planta y se acumulan dentro de ellas, mientras que el crecimiento
del hongo es inhibido. Los patrones de acumulacin de quitosano y de todos los
componentes con polmeros de hexosamina, se asemejaron a los de los componentes de la
pared fungal. El quitosano se encuentra presente en la superficie externa de la pared de la
espora fungal y el potencial de traslocacin del quitosano entre las esporas de Fusarium
spp. y las clulas de la planta sugiere que este compuesto tiene un papel preponderante en la
interaccin huesped - parsito.
Factores de efectividad del uso del Biorend en el sector silvoagropecuario.
Parodi, Nebrada y colaboradores (61) condujeron durante cinco aos, en Chile y Argentina,
numerosos experimentos destinados a cuantificar el efecto sobre especies cultivadas
anuales, destinados a determinar las dosis ms efectivas para la maximizacin de
rendimiento en cada especie y, en una segunda etapa, para cuantificar dicho incremento. El
rango geogrfico de este estudio incluy, en Chile, desde la IV a la X Regin, y en
Argentina a la Provincia de Buenos Aires. Este estudio incluy trigo, cebada, avena,
triticale, maz, maravilla, remolacha y canola. Los resultados obtenidos en esta
investigacin muestran un aumento de rendimiento de entre un 10 y un 20%, dependiendo
de la especie, no detectndose respuestas negativas a la aplicacin del Biorend. Un efecto
adicional sealado por esta investigacin apunta a la economa de nitrgeno como
fertilizante qumico, destacando adems que el Biorend no constituye riesgo ambiental
alguno, por ser de origen orgnico, no txico y biodegradable.
Este estudio ha sido ampliado por otros investigadores, que incluyen especies hortcolas,
frutcolas y forestales, continundose hasta hoy.
Por ltimo debemos considerar que el quitosano tiene un efecto nematostatico y nematicida,
al aumentar la flora microbiana quitinoltica antagonista de nemtodos fitoparsitos del
gnero Meloidogyne sp., Heterodera sp., Globodera sp., etc. Destacando a su vez, el
aumento significativo de nemtodos entomopatogenos del gnero Steinernema feltiae sp,
Steirnernema carpocapsae sp, y Heterorabdhitis sp. controladores de varias plagas de
lepidpteros y colepteros, fundamentalmente al inducir a la multiplicacin de bacterias
Simbiontes asociadas al gnero Xenorhabdus y Photorhabdus.
Uso de Biorend en especies hortcolas y fruticolas
Bioagro S.A. ha seguido estudiando la accin del quitosano en variadas especies, buscando
distintos tipos de aplicaciones de acuerdo a la especie a tratar. Para ello, se ha basado en los
cuatro grandes efectos que produce el quitosano al estar en contacto con las plantas o su
entorno:
 Efecto Bioestimulante
Aumento del desarrollo del sistema radicular(raices y raicillas) y fortalecimiento del vigor y
grado de lignificacin de las plantas mediante el mecanismo SAR(Resistencia Sistemica
Adquirida).
12

 Efecto Fungistatico
Incita una respuesta de defensa al ataque de los hongos por lo que acta como proteccin de
los ataques producidos a las races por el complejo fungico del suelo.
 Efecto Nemosttico
Control natural de los nematodos Fitoparasitos al aumentar la flora quitinolitica antagonista
de ellos y efecto protector sobre las raices.
 Proteccin Enfermedades Areas
El Quitosano, por su efecto fungicida y capacidad de recubrir con una Pelcula Protectora
acta mejorando la calidad y el calibre de los frutos.

De acuerdo a la especie, los tratamientos se pueden hacer por medio de tratamientos de

mejoras de suelos, semilla, bao de races al transplante, riego comn o tecnificado y
aplicacin foliar.
Los efectos en el suelo y races de las plantas se han esbozado en los parrafos precedentes.
Las aplicaciones foliares, de gran importancia al crecimiento, floracin, fructificacin y
post cosecha, merecen ser tratadas en forma especial, lo que se hara al final de este escrito.
Como se ha visto, los diferentes mecanismos de accin del quitosano, fundamentadas
anteriormente, son los siguientes:
1.- El quitosano, al favorecer el engrosamiento de la pared celular en plantas cultivadas y
mejorar la resistencia al crecimiento de algunos hongos en el suelo sobre las plantas
tratadas, confiere un mecanismo de resistencia al ataque de hongos que atacan
preferentemente al cuello y races de las plantas cultivadas. Este efecto permite suponer una
positiva accin en las plantas susceptibles a este tipo de ataques, como son las especies de
las familias Solancea (tomate, papa, pimentn y tabaco, entre otras), Leguminosas (frejol,
arveja, etc.) y otras familias menos representativas.
Sin embargo, tambin presenta una buena alternativa de uso en rboles forestales (pino y
eucaliptus), Ctricos, Vides, Paltos, Carozo, Pepita, Olivo, etc. con la consiguiente
proteccin contra enfermedades del cuello y la raz en almacigueras y durante los primeros
estados de desarrollo de las plantaciones comerciales, mejorando la sobrevivencia despus
del transplante o injerto. Entre los gneros de hongos del suelo que son atacados por este
producto estn Rhizoctonia, Fusarium y otros hongos perteneciente al complejo de hongos
que provocan la cada de plantas o dumping off . Tambin es posible observar una
proteccin de races y tallos contra el hongo Phytophthora, que ataca cultivos de
solanceas, algunas leguminosas y muchos rboles frutales, principalmente.

13

2.- El quitosano, al formar un film en la pared celular de las plantas cultivadas, permite
una mayor y mejor proteccin de races al momento del transplante de cualquier especie,
ya que impide la penetracin de hongos y bacterias saprfitas y parsitas al interior de las
heridas o daos de races, que siempre ocurren al momento del transplante. Como una
manera de visualizar un uso para este tipo de accin, debemos mencionar que en Chile una
prctica comn consiste en el transplante de todos los frutales (con excepcin de los
injertados), plantaciones forestales, hortalizas tales como lechuga, tomate, pimentn,
cebolla, puerro, brsicas, frutales menores, etc.
3.- El quitosano, al inducir la acumulacin de inhibidores de proteinasas y afectar la
presencia de quitina en el exoesqueleto de los insectos, se presenta como una buena
alternativa para resistir ataques de insectos de las familias Lepidptera, Coleptera y
Ortptera, tanto en el campo como especialmente en grano almacenado, aprovechando la
ventaja de la muy baja toxicidad de este producto para el hombre.
4.- El quitosano, al conferir resistencia a la pared celular vegetal, permite a las plantas
tratadas resistir en mejor forma el stress hdrico, tanto el exceso como la falta de agua y, por
tal motivo, se han observado buenos resultados en arroz y en plantas creciendo bajo
condiciones de sequa, en plantaciones y cultivos en suelos rojo-arcillosos, en plantas
creciendo en suelos con poca disponibilidad de agua, etc. En este mismo sentido, el
quitosano protege a las races de las plantas tratadas de las prdidas de agua o
deshidrataciones normales al momento del transplante, permitiendo un mejor y rpido
crecimiento radicular de las plantas tratadas en suelos con bajo nivel de agua. El uso
potencial est, entonces, en ciertas zonas de inferior condicin de suelo destinadas al
desarrollo silvoagropecuario y en sectores de poca disponibilidad de agua de riego.
Tambin se han observado ciertos mecanismos de defensa de las plantas tratadas con
quitosano en condiciones de bajas temperaturas, confirindole a las clulas vegetales una
mejor proteccin debido al engrosamiento de sus paredes celulares.
5.- El Quitosano, por su efecto nematicida, permite controlar eficazmente una variedad de
nemtodos.
Sin embargo, an nos quedan los mecanismos inherentes a los que se producen por
aplicacin foliar. Ellos son:
1.- Por su efecto fungistatico permite tanto a la parte area de las plantas como a sus frutos
protegerse de Hongos tales como Botrytis. En este aspecto son muy importantes las
aplicaciones previas a la cosecha.
2.- Por la caracterstica del Quitosano como Filtrante de Rayos Ultravioletas acta como
protector solar, produciendo un film que cubre hojas y frutos. La luz ultravioleta
produce estrs en las plantas y sus frutos. Para ello, en las plantas se ha descubierto que
existe la elicitacion de un compuesto llamado cido jasmonico o jasmonatos como
producto final. Estos jasmonatos alivian en algo el estrs producido por UV pero se ha
demostrado que ellos, entregados a las plantas por medios externos, afectan o producen
14

inhibicin de la inflorescencia, en la maduracin de los frutos y en su almacenaje,

afectando el crecimiento y produciendo senectud en las plantas.
Los jasmonatos, por otro lado, si son producidos internamente por las plantas, lo que
ocurre como defensa al dao producido por insectos, ayudan en el control de dichos
insectos y adems producen cierta resistencia a las sequas. Esto, siempre que sean
elicitados por las plantas.
El film de Quitosano produce exactamente los mismos efectos positivos y no tiene
contraefectos que daen o desmejoren las plantas. Es mas, la pelcula de Quitosano
sirve como filtrante de las radiaciones UV, aminorndolas en gran medida. Si adems,
consideramos sus propiedades antifungicas, encontramos que la planta estar mucho
ms protegida que si se utilizaren o no otros medios artificiales.
Esta proteccin solar acta por ejemplo en la Uva protegindola del golpe de sol
dejndola lo ms cristalina posible y uniformemente bronceada. En los ctricos los
protege contra la decoloracin y en otros frutos acta de manera similar.
3.- La maduracin de los frutos aumenta la susceptibilidad de ellos frente a los patgenos,
principalmente hongos e insectos. Esto porque se producen evaporaciones de gases en
los frutos, principalmente vapor de agua y etileno. El vapor de agua, condensado en las
temperaturas fras de la maana, reproduce con el calor posterior las condiciones
ideales para los Hongos.
El etileno es el principal responsable de la maduracin de los frutos. Es producido y a
la vez absorbido por frutos adyacentes. El film de Quitosano nuevamente acta como
una barrera natural y permite controlar el escape de etileno y su posterior recepcin por
otros frutos. Por lo tanto controla la velocidad de maduracin. Esto es importante para
la Cosecha y Post Cosecha.
4.- El film de Quitosano al no permitir con fluidez el paso del vapor de agua protege a los
frutos de la evaporacin brusca y adems ayuda a la planta a tener menos
requerimientos hdricos.
5.- Dada la flexibilidad y firmeza de la pelcula de Quitosano en el caso de frutos delicados
tales como Uva de Mesa, el recubrimiento la protege del manejo durante la cosecha y
almacenamiento post-cosecha.
6.- Dado las caractersticas del Quitosano como compuesto regenerador de tejidos daados,
permite rpidamente la cicatrizacin de las heridas producidas en la planta durante la
cosecha.
7.- Finalmente se ha demostrado que en los Frutos tales como la Uva se produce un
aumento del grado brix de Azcar, lo que permite obtener Frutos mas dulces.

15

8.- Las propiedades antes citadas son validas para cualquier tipo de frutos.
De estos ltimos mecanismos entregamos finalmente algunos ensayos:

Actividad Fungicida del Quitosano y su efecto preservativo en Naranjas Confitadas

Shao W. Fang, Chin F. LI, and DANIEL Y.C.SHIH Division of Food Microbiology, National Laboratories of
Foods and Drugs, Taipei, Taiwan, Republic of China

Esta investigacin consisti en demostrar el efecto preservativo del Quitosano en Naranjas

Chinas confitadas(Low-Sugar Candied Kumquat). El efecto inhibitorio del Quitosano
contra el hongo Aspergillus niger aumento a medida que se aumento la concentracin de
Quitosano de 0.1 a 5.0 mg/ml con pH 5.4. El mayor efecto inhibitorio del Quitosano contra
el Aspergillus parasiticus se encontr entre 3.0 y 5.0 mg/ml. Adems el Quitosano pudo
prevenir completamente la produccin de aflatoxina por el Aspergillus parasiticus con una
concentracin de 4.0 a 5.0 mg/ml. En comparacin al sorbato de potasio permitido como
preservativo en frutas confitadas en Taiwan se demostr que el Quitosano era ms efectivo.

Uso de un Film de Quitosano para reducir perdidas de agua y mantener calidad en
Pepinos y Pimentones
Ahmed El Ghaouth et al. Food and Nutrition press, December 1991 Vol 15 Pag 359-368
El efecto de la pelcula de Quitosano(1,0 a 1,5% p/v) en el almacenamiento de pimentones
y pepinos guardados a 13 y 20C (humedad relativa 85%) fue determinada monitoreando
la perdida de peso, su respiracin y calidad. La pelcula de Quitosano redujo
significativamente la perdida de peso tanto en Pimentn como en Pepino a ambas
temperaturas. Un aumento de la concentracin de Quitosano de 1,0 a 1,5% p/v dio como
resultado una marcada mayor retencin de peso en ambos frutos. Adicionalmente el film de
Quitosano, tanto en pepino como en pimentn, redujo la tasa de respiracin, perdida de
color e infeccin fungosa. El mecanismo por el cual la pelcula de Quitosano retraso la
senectud en el pepino y el pimentn fue probablemente debido a su habilidad para aliviar
el estrs hdrico.

Aplicacin de film de Quitosano en paltas variedad Hass

Leticia Salvador, Susana Miranda, Nidia Aragon y Virginia Lara

Universidad Nacional autonoma de Mexico
Publicado en la Revista de la Sociedad Quimica de Mexico, Vol 43, N1 1999, Pag 18 a 23

La Palta Hass es susceptible de perder su calidad al verse alterada por el ataque de

microorganismos y por las condiciones Post-Cosecha a las que se ve sujeta. Teniendo
como antecedentes las caractersticas Antifungicas del Quitosano, en el desarrollo del
trabajo se probo dicha actividad para lo cual se aislaron e identificaron de Paltas
enfermas las cepas Colletrotrichum sp y Diplodia sp causantes de la antracnosis y
pudricin del pedunculo respectivamente. El objetivo especifico de esta investigacion fue
de aplicar distintos tipos de film de Quitosano a la PALTA e investigar sus efectos en la
calidad y apariencia externa. Los resultados demostraron que el Quitosano acta como
inhibidor del crecimiento de los microorganismos que causan la antracnosis y la pudricin
16

del pednculo, lo protege de la deshidratacin, y produce un aumento en la preservacin

del fruto hasta por 24 das a temperaturas de almacenamiento entre 3 y 10 grados Celcius,
y hasta 6 das entre 27 y 29 grados Celcius.

Las propiedades antifungicas del Quitosano en jugo de manzana en laboratorio.
S. Roller, N. Covill. Escuela de Ciencias Aplicadas, South Bank University, Londres, U.K.
Internacional Journal of Food Microbiology 47 (1999) pg. 67-77.
Mucho del inters de las actividades antimicrobiales del Quitosano se han enfocado en su
posible rol como protector de plantas. Concentraciones inhibitorias mnimas tan bajas
como 0.075g/l para un Quitosano particulado y 0.018g/l para Quitosano soluble usadas
contra algunos hongos patognicos en un medio de cultivo han sido reportados (Allan and
Hadwiger, 1979; Kendra y Hadwiger, 1989). Sin embargo, otros autores han encontrado
que niveles tan altos como 10 g/l fueron necesarios para inhibir el crecimiento de algunas
cepas fungicas (Stossel y Leuba, 1984). El Quitosano a una concentracin de 1g/l se ha
encontrado que reduce el crecimiento de hasta un 50% en placas de agar a 25C de varios
hongos fitopatogenos importantes en la destruccin post-cosecha de frutas y vegetales,
incluyendo a la Botrytis cinerea (Hirano 1997). El uso de soluciones cidas de Quitosano
(conteniendo 0.1% de quitosano como agente activo) como agente desinfectante baando
Frutillas inoculadas con B. Sinerea y almacenadas a 13C han demostrado que reducen la
perdida a niveles similares como las tratadas con el fungicida convencional qumico
iprodione (El Ghaouth et al. 1991).
 Control Biologico
Por ultimo cabe mencionar que BIOAGRO se encuentra desarrollando nuevas
alternativas de Control Biolgico, a travs de la combinacin de agentes
biocontroladores(Trichodermas,
Hongos
Entomopatogenos
y
Nematodos
Entomopatogenos) con Biorend.
El modo de accin y espectro de actividad de ambos ingredientes se fundamenta en que
se complementan de una forma sinrgica consiguiendo conjuntamente una alta y doble
eficacia, por lo que adems de controlar las plagas, se mejora la resistencia de los cultivos
frente a enfermedades, aumentando as su capacidad de supervivencia en condiciones
ambientales adversas, y obteniendo mejoras en el crecimiento y rendimiento de dichos
cultivos.

17

18

REFERENCIAS
1.- Esquerre-Tugaye, M.T.;Lafitte, C.;Mazau, D.;Topan, A;& Touze, A. Cell surfaces in plant
microorganism interaction. II.-Evidence for the accumulation of hydroxyproline rich glycoproteins
in the cellwall of diseased plant as a defense mechanism Plant Physiol. 64, 320 - 326 (1979).
2.- Showalter, A.M., Bell, J.N., Cramer, C. L. Bailey , J.A., Varner, J.E. & Lamb, C.J. Proc.
Natl.Acad. Sci., USA 82, 6551 - 6555 (1985).
3.- Vance, C.P.;Kirk,T.K.&Sherwood,R.T.Lignification as a mechanism of disease resistance.
4.- Espelie, K.E. ; Francheschi, V. R. & Kolattukudy, P.E. Inmunochemical localization and time
- course of appearance of an anionic peroxidase associated with suberization in wound healing
potato tuber tissue Plant Physiol. 81, 487 - 492 (1986).
5.- Ride , J.P. Cell walls and other structural barriers in defense.
In Biochemical Plant
Pathology ( ED. J.A. Callow ), John Wiley & Sons, New York , pp. 215 - 236 (1983).
6.- Bonhoff, A.; Reith, B.; Golecky, J. & Grisebach, H. Race cultivar - specific differences in
callose deposition in soybean roots followed infection with Phytophtora megasperma. Planta 172
, 101 - 105 (1987).
7.- Matta, A. , Gentile, U. & Giai, I. I. - Accumulation of phenols in tomato plants infected with
dIfferent forms of Fusarium oxysporum. Phytopathology 59, 512-513 (1969).
8.- Hunter, R.E. Inactivation of pectic enzimes by polyphenols in cotton seedlings of different
ages infected with Rhizoctonia solani. Physiol.Plant, Pathol, 4 151 - 159 (1974)
9.- Bell, A.A. Biochemical mechanism of disease resisteance . Ann. Rev. Plant Physiol. 32, 21 81 (1981)
10.- Darwill, A, G. & Albersheim , P. Phytoalexins and their elicitors. A defense against
microbial infections in plants Ann. Rev. Plant Physiol. 35 , 243 - 275 (1984).
11.- Hahlbrock , K. & Grisebach, H Enzymic controls in the biosynthesis of lignins and
flavonoids . Ann. Rev. Plant Physiol. 30 105 - 130 (1979).
12.- Dixon, R. A. , Day , P.M. & Lamb , C.J. Phytoalexins : Enzymology and
biology Adv. Enzymol. 55, 1 - 136 (1983).

molecular

13.- Ryan, C.A. Proteolytic enzimes and their inhibitor activity in plants Ann . Rev Plant Physiol
. 24, 173 -196 (1973).
14.- Peng, F. H.&Black, L.L.Increased proteinase inhibitor activity in reponse to infection of
resistant tomato palnts by Phytophtora infectants Phytopathology 66,958-963 (1976).
15.- Albersheim, P. Complex carbohydrates in active defense. In Active Defense mechanism in
plants. Nato ASI Series, Springer Verlag, p. 380 (1981).
19

16.- Van Loon, L.C. Pathogenesis- related proteins Plant Molec. Biol. 4 ,111-116 (1985).
17.- Bol, J. , Linthorst, H. & Cornelissen. Pathogenesis - related proteins induced by virus
infection. Ann. Rev. Plant Phytophatol. 28 , 113 - 138 (1990).
18.- Linthorst, H. Pathogenesis - related proteins of plants . Critical Reviews in Plant Sciences
10, 123 - 150 (1991)
19.- Bowles, D. J. Defense-Related proteins in higher plants. Ann Rev. Biochem. 59, 873 - 907
(1990).
20.- Ryan, C. A. Ann Rev. Cell Biol. 3, 295 - 317 (1987)
21.- Mauch, F. & Staehelin, L. A. Functional implication of the subcellular localization of
ethylene-reduced chitinase and B-1 3- glucanase in bean leaves Plant Cell. 1,447-456 (1989).
22.- Lamb,CJ.,Lawton,M.A.;Dron,M.&.Dixon,R.A. Signals and transduction mechanisms for
activation of plant defenses against microbial atack Cell 56, 215-220(1989).
23.- Roby, D& Esquerre-Tugaye, M. Induction of chitinases and translatable in RNA for these
enzymes in melon plants infected with Colletotrichum lagenarum .Plant Sci. 52 , 175-185(1982).
24.- Kurosaki, F.; Nobuhiko, T.&Arasuke, N. Induction, Purification and possible funtion of a
chitinase in culture carrot cells. Physiol. Molec. Plant Pathol. 31, 211-216(1987).
25.- Martin, M.N. The latex of Hevea brasilensis contains high level of both chitinases and
chitinase / lizozymes. Plant Physiol. 95 , 469 - 476 (1991).
26.- Shinshi, H.; Neuhaus, J:M.;Ryals,J. & Meins, F. Jr. Structure of tobacco
endochitinase
genes can arise by transposition of sequences encoding a cysteine - rich domain . Plant Molec.
Biol. 14, 357 -368 (1990).
27.- Raikhel, n.V.; Lee, H.I. & broeckaert, W. F. structural and Function of chitin - binding
proteins . Ann . Rev. Plant Physiol. Plant Molec. Biol. 44, 591 - 615 (1993).
28.- Bernasconi, P.; Locher, R. ; Pilet, R.E.; Jolles, J. & Jolles , P. Purification and N - terminal
amino acid sequence of a basic lisozyme from Parthenocissus quinquifolia cultured in vitro .
Biochem. Biophys. Acta 915 , 254 - 260 (1987).
29.- Metraux, J.P.; Burkhart, W.; Moyer , M. et al. Isolation of a complementary DNA encoding a
chitinase with structural homology to a bifunctional lisozyme / chitinase . proc. Natl. Acad. Sci.
USA 86, 896 - 900 ( 1989).
30.- Samac, D.A. & Shah, D.M. Developmental and pathogen - induced activation of the
arabidopsis acidic chitinase promoter . Plant Cell 3, 1063 - 1072 (1991).
31.- Schlumbaum, A.; Mauch, F.; Vogeli, U. & Boller , T. plant chitinase are potent inhibitors of
fungal growth . Nature 324, 265 - 367 (1986).
20

32.- Mauch, F.; Mauch - Mani, B. & Boller, T. Antifungal hydrolases in pea tissue. II.- Inhibition
of fungal growth by a combination of chitinase and B-1, 3 - gluconase . Plant Physiol. 88, 936 942 (1988).
33.- Roberts, W.K. & Selitrennikoff, C.P. Plant and bacterial chitinases deffer in antifungal
activity. J. Gen. Microbiol. 134 , 169 - 176 (1988).
34.- Broeckaert, W. F. ; Van Parricjs, J. ; Allen, A. K. & Peumans, W.J.
Comparison of
some molecular, enzymatic and antifungal properties of chitinase from thornapple, tobaco and
wheat . Physiol. Mol. Plant Pathol. 33, 319 - 331 (1988).
35.- Verburg, J,G.. & Huynh, C. H. Purification and characterization of an
chitinase from Arabidopsis Thaliana Plant Physiol. 95, 450 - 455 (1991).

antifungal

36.- Broglie, K.E.; Chet, I.;Holliday, M.J.et al. Transgenic plants with enhanced resistance to the
fungal pathogen Rhizoctonia solani Science 254, 1194 - 1197 (1991).
37.- Molano, J.; Polachek, I.;Duran, A. & calib, E. An endochitinase from wheat germ. J. Biol.
Chem. 254, 4901 -4907 (1979).
38.- Benhamiou, N.; broglie, K.E.; Broglie R. M. & chet, I. Antifungal effects of bean
endochitinase on Rhizoctonia solani: Ultrastructural changes and cytochemical aspects of chitin
breakdown. Can. J. Microbiol. 39, 318 - 328 (1993).
39.- Jach, G.; Logermann, S. Wolf, G.; Oppenheim, A.; chet, Y.; Schell, J. & Logermann, J. J.
Biopractice 1, 33 - 40 (1992).
40.- Melchers, L S. Tigelaar, H.; Van rockel, J. S.C. et al. Syneristic activIty of chitinases and B 1, 3 - gluconases enhances fungal resistance in transgenic tomato plants . Submitted (1993).
41.- Sela- Buurlage, M. B.; Ponstein, A:S:; Vloemans, S.A.; Melchers, L.S.; Van der Elzen, P.J.M.
& Cornelissen, B.J.C: Only specific chitinases and -1, 3- glucanases exhibit antifungal activity .
Plant Physiol. 101, 857 - 863 (1993).
42.- Kohle,H;Jeblick,W;Poten,F; Blascheck,W&Kauss, H.Plant Physiol. 77,544-551(1985)
43.- Hadwiger, L.; Beckman. J M. & Adams, M:J: Plant Physiol. 67, 170 175 (1985).
44.- Kauss, H. Ann Rev. Plant Physiol. 38,447,472 (1987).
45.- Kauss, H. In The Plant Plasma Membrane Structure, Function and Molecular Biology, Ed. C.
H. Larsson, M. Moller Berlin , Springer (1990).
46.- Kauss, H.; Jeblick, W. & Domard, A planta 178, 385 - 392(1989)
47.- Mirelman, D; Galum E.; Sharon, N & Lotan, R. Nature 256, 414-416(1975)
48.- Sequeira. L.A. Rev Physiol. 16, 453 - 481 (1978).
21

49.- Etzler, M.E.A. Rev. Plant Physiol. 36, 209 - 234 (1985).
50.- Hadwiger , L.A: & Beckman, J.M. Plant Physiol. 66, 205 - 211 (1980)
51.- Walker - Simmons , M.; Hardwinger , L. & Ryan, C.A. Biochem. Biophys Res. Comm. 110,
194 - 199 (1983).
52.- Paxton;J.D. Phytoalexins:A working redefinition Phytopathol Z.101 ,106-109(1981)
53.- Darwill, A. & Albersheim, P. Phytoalexins and their elicitors. A defense against microbial
infection in plants. Ann Rev. Plant Physiol. 35, 243 - 275 (1984).
54.- Wagner, W.; Hadwiger, L.A. & loschke, D.C. Plant Physiol. 69 Suppl. 6 (1982).
55.- Hahlbrock, K.; Lamb , C.J.; Purwin, C.; Ebel , J.; Fautz, E. & Schaefer, E. Plant Physiol. 67 ,
768- 773 (1981).
56.- Schroeder, J. Arch. Biochem. Biophys. 182, 488 - 496 (1976)
57.- Hilder, V.A.; Gatehouse , A.M,.R.; Sheerman , S.E.; Barker. R.F. & Boulter, D. Nature 330 ,
160 - 163 ( 1987).
58.- Van der Elzen, P:J:M ;Jongedijk, E.; Melchers, L.. & Cornelissen, B.J:C: Virus and fungal
resistance:From laboratory to field Phil.Trans.R.Soc.Lond.B. 342, 271-278(1993).
59.- Allan, C.R. & Hadwiger, L:A: The fugicidal effect of chitosan on fungi of varyng cell wall
composition Experim. Mycol. 3, 285 - 287 (1979).
60.- Nichols, E.J.; Beckman, A. J. & Hadwiger, L.A. Glycosidic enzyme activity in pea tissue and
pea - Fusarium interaccions. Plant Physiol. 66, 205 - 211 (1980).
61.- Parodi, P.C:La quitina y su accin sobre la quitinasa en la expresin del rendimiento
Pontific. Universidad Catlica de Chile, Fac. Agron. y Ing.Forestal (1996).

22