Escola Secundria c/ 3 Ciclo Joo Gonalves Zarco

Ano Lectivo 2008/2009

Biologia/Geologia (ano 2)

Ficha de Apoio Terico: Replicao do DNA

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Introduo

Uma das caractersticas mais pertinentes de todos os organismos vivos a sua capacidade de
reproduo, atravs da qual transmitem descendncia as suas caractersticas prprias. A capacidade de se
reproduzir a chave da sobrevivncia e evoluo das espcies. O conjunto de caractersticas transmitidas
pelos progenitores aos seus descendentes constitui a sua herana gentica. Assim, todas as clulas vivas
provm de outras preexistentes que, em cada diviso celular, transmitem o material gentico s clulas-filhas,
assegurando que as funes que executam sero perpetuadas na sua descendncia. No final da diviso
celular, as clulas-filhas herdam as mesmas informaes genticas contidas na clula progenitora. Como
essas informaes se encontram no DNA, cada uma das suas molculas deve produzir previamente duas
molculas de DNA idnticas do DNA original para serem repartidas de forma equitativa entre as duas
clulas-filhas. Esta duplicao, graas qual o DNA se propaga nas
clulas de gerao em gerao, denomina-se replicao.
Para que se possam formar duas molculas de DNA a partir de uma
molcula, primeiro devem ser separadas as cadeias da dupla hlice do
DNA preexistente, as quais servem de molde para a construo de
cadeias complementares. Atendendo a que as cadeias recentemente
construdas permanecem com as cadeias-moldes, formam-se duas
novas hlices de DNA (figura 1).
Figura 1: Replicao de uma molcula de DNA. Note-se que a sntese das
novas cadeias se realiza unicamente na direco 5
3.

A vida das clulas passa por duas etapas que se alternam ciclicamente, conhecidas pelos nomes de
interfase e mitose. A interfase subdivide-se em trs perodos, chamados G1, S e G2 (figura 2). Na fase G1
ocorrem as diferentes actividades da clula (secreo, conduo, contraco, endocitose, etc.). Em seguida
ocorre a fase S, em cujo transcurso se produz a replicao do

DNA. Depois a vez da fase G2, que se estende at o comeo

(mitose)

G2

da fase M (chamada mitose ou diviso celular), ao final da qual

as molculas de DNA duplicadas so segregadas entre as

G1

clulas-filhas.

Ciclo celular

S
(sntese
de
DNA)

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Clulas
que
terminam
a diviso

Figura 2: Ciclo vital de uma clula, que compreende a interfase e a

mitose. A primeira inclui as fases G1, S e G2. A replicao do DNA
ocorre durante a fase S.

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Mecanismo da replicao do DNA

O DNA sintetizado na direco 5
3 e utiliza como molde uma cadeia de DNA preexistente. Neste
processo intervm enzimas. A enzima helicase separa as duas cadeias de DNA. Estas enzimas desenrolam
as duas cadeias que compem a dupla hlice, quebrando as ligaes hidrognio estabelecidas entre as
bases azotadas complementares de cada cadeia. De modo a aliviar a tenso de toro das cadeias durante o
seu desenrolar pela helicase, enzimas do tipo topoisomerase vo igualmente actuar neste processo. Estas
enzimas associam-se com a cadeia dupla parental a montante de cada uma das helicases e removem a
tenso provocada pela toro da cadeia dupla, atravs de uma srie de cortes pontuais nas ligaes
fosfodiester, reformadas de seguida pela mesma enzima.
As DNA polimerases agregam os sucessivos nucleotdeos na extremidade 3 da cadeia em crescimento.
As DNA polimerases catalizam as ligaes fosfodister entre o grupo OH no C3 da desoxirribose de um
nucleotdeo e o grupo fosfato no C5do nucleotdeo recm-adicionado. As DNA polimerases possuem duas
caractersticas fundamentais:

Molcula
original

Todas sintetizam DNA apenas no sentido 5
3;

Nenhuma capaz de uiniciar a sntese de novo de uma

cadeia de DNA, o que implica a necessidade de
formao de sequncias iniciadoras da cadeia-filha
(RNA iniciador).

Na replicao as duas cadeias do DNA separam-se totalmente,

Molculas-filhas
(1 gerao)

ambas so usadas como molde e, j que as cadeias-filhas ficam

junto das progenitoras, estas obviamente no se tornam a juntar.
Consequentemente, a partir da dupla hlice de uma molcula de
DNA originam-se duas molculas de DNA duas duplas hlices
ambas compostas por uma cadeia herdada do DNA progenitor e
uma cadeia recm-sintetizada. Como no final da mitose, cada

Molculas-filhas
(2 gerao)

clula-filha recebe molculas de DNA cujas duplas hlices esto

integradas por uma cadeia original (preexistente) e uma cadeia
nova (recm-sintetizada), diz-se que o mecanismo da replicao
do DNA semiconservador (figura 3).

Figura 3: Replicao semiconservadora do DNA.

A duplicao do DNA produzida a partir de vrias origens da replicao

Se o DNA comeasse a sua replicao por uma das extremidades da molcula e avanasse
uniformemente ao longo desta, o processo de sntese demoraria, at estar concludo, pelo menos 30 dias. No
entanto, a durao da fase S, isto , o tempo que o DNA demora para se duplicar de aproximadamente 7
horas. A rapidez com que o faz, deve-se ao aparecimento, ao longo do DNA, de vrias origens da replicao.
Cada origem de replicao formada quando se separam localmente as duas cadeias do DNA, evento que
ocorre em vrios pontos da molcula ao mesmo tempo. Todavia, nem todas as origens surgem
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simultaneamente, j que o momento da sua apario depende das caractersticas da cromatina nos diversos
sectores do cromossoma.
Uma origem de replicao apresenta trs caractersticas bsicas:

So constitudas por mltiplas sequncias repetitivas;

Estas unidades repetitivas so reconhecidas por complexos multiproteicos, envolvidos no

recrutamento da maquinaria de replicao da clula para a zona da origem de replicao;

A origem de replicao em geral flaqueada por sequncias ricas em adeninas e timinas, o que
dever facilitar o desenrolar e a separao das duas cadeias, dado o menor nmero de ligaes de
hidrognio envolvidas na estabilizao da hlice.

A replicao do DNA um processo bidireccional

Quando a dupla hlice se abre, forma-se uma estrutura chamada bolha de replicao (figura 4), cujo
tamanho aumenta medida que avana a separao das duas cadeias de DNA, fenmeno que se produz
simultaneamente nos dois extremos da bolha.

Figura 4: Bolhas de replicao distribudas ao longo do DNA.

Estabelece-se, desta forma, em cada um destes extremos, uma estrutura em forma de Y chamada
forquilha de replicao cujos dois braos representam as cadeias do DNA j separadas e o tronco
representa a dupla hlice em vias de separao (figura 5). Deste modo, cada bolha tem duas forquilhas de
replicao que, a partir de um ponto de origem comum, avanam em direces opostas. As forquilhas
desaparecem quando se integram com as suas similares nas bolhas contguas, ao colidirem, aps
aproximao progressiva. Relativamente s forquilhas que percorrem o ltimo segmento dos telmeros (em
ambos os extremos do cromossoma), estas extinguem-se quando se produz a separao do ltimo par de
nucleotdeos.

Figura 5: Forquilha de replicao.

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O segmento do DNA que sintetizado a partir de uma origem da replicao (com as suas duas forquilhas)
chama-se replico. A replicao est concluda quando se conectam entre si os replices sucessivos. A
aco cooperativa de milhares de replices permite que o DNA se sintetize num tempo relativamente curto
para o ciclo de vida da clula.
Existem diferenas no modo como so sintetizadas as duas novas cadeias de DNA

As cadeias de DNA so antiparalelas, o que cria uma primeira dificuldade durante a sntese de novas
molculas de DNA.
Ao nvel de cada forquilha de replicao, conforme a separao das duas cadeias progride, uma apresenta
os seus nucletidos na direco 5
3 e a outra na diraco 3
5, de modo que a primeira, ao ser
copiada, deveria gerar uma cadeia-filha que crescesse na direco 3
5, algo que nenhuma DNA
polimerase pode fazer.
A clula resolve esta situao usando estratgias distintas na construo das duas novas cadeias. A
cadeia-filha que adopta como molde a cadeia progenitora que corre na direco 3
5 construda, ao
crescer na direco 5
3, de forma contnua, por intermdio da agregao de nucleotdeos na sua
extremidade 3, medida que avana a forquilha de replicao. Por outro lado, a outra cadeia-filha cujo molde
a cadeia progenitora que corre na direco 5
3, sintetizada de um modo singular, j que, para crescer
nesta direco, a sua sntese deve ocorrer na direco oposta ao avano da forquilha de replicao. O
problema supera-se fazendo com que a sntese seja descontnua, o que implica que a nova cadeia seja
construda em pequenos segmentos fragmentos de Okazaki que se ligam entre si, medida que so
produzidos (figura 6).
A cadeia sintetizada de forma contnua conhecida pelo nome de adiantada e a descontnua
denominada atrasada.

Figura 6: Replicao do DNA.

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A replicao do DNA um processo bidireccional no s porque se produz em duas direces

divergentes, a partir de uma mesma bolha de replicao, mas tambm, porque as cadeias da dupla hlice so
sintetizadas em direces opostas. Alm disso, assimtrica, j que, tomando como referncia uma das
duas cadeias do DNA, de um lado da bolha a replicao contnua, enquanto, no outro lado, descontnua.
A sntese contnua avana na mesma direco em que o faz a forquilha de replicao, enquanto a
descontnua avana na direco contrria.
A cadeia de DNA sintetizada de forma contnua comea a replicar-se a partir de um primer

Para iniciar a sntese de uma cadeia complementar de DNA, alm da cadeia-molde, a DNA polimerase
necessita de um primer ( RNA iniciador). O RNA iniciador produzido pela enzima DNA primase e fica
associado ao segmento de DNA que copia. Tem como funo permitir a ligao cadeia nascente, da DNA
polimerase, para que esta continue a sntese da cadeia-filha na direco 5
3.
A cadeia de DNA sintetizada de forma descontnua exige muitos primers

A cadeia descontnua necessita de vrios primers, um para cada fragmento de Okazaki.

O processo de juno de dois fragmentos de Okazaki implica a remoo do RNA iniciador por uma
nuclease reparadora. Os dois fragmentos de DNA so finalmente ligados um ao outro pela DNA ligase.

Replicao das extremidades dos cromossomas: funo da telomerase

As extremidades 3 dos cromossomas so mais compridos do que as extremidades 5 e so mais ricas em

resduos de guanina, contendo entre 12 a 16 nucleotdeos a mais. Esta estrutura particular est associada a
protenas que reconhecem as guaninas e se ligam de modo a estabilizar as extremidades dos cromossomas
e impedir a sua degradao.
As extremidades dos cromossomas lineares tm um sistema prprio de replicao no qual uma enzima
especfica a telomerase adiciona extremidade 3 de cada cromossoma sequncias repetitivas
(sequncias telomricas), iguais para todos os cromossomas de uma mesma espcie.

Deteco e correco de erros

A manuteno da hereditariedade implica que a passagem da informao gentica descendncia se faa

sem erros, o que exige uma capacidade de deteco e correco da quase totalidade dos erros que possam
ocorrer durante este processo por parte das enzimas envolvidas.
Este processo complementado por mecanismos complexos de reparao que ocorrem aps a replicao
e ao longo da vida da clula.

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