21 Biologia Celular Aplicaciones Practicas Bio Pilas

Biologa Celular:
Aplicaciones Prcticas
Adriana Lam Vivanco, Marisela Segura Osorio, Carlos Garca Gonzlez
Universidad Tcnica de Machala
Biologa Celular: Aplicaciones Prcticas
Ing. Csar Quezada Abad, MBA

Rector
Ing. Amarilis Borja Herrera, Mg. Sc.
Vicerrectora Acadmica
Soc. Ramiro Ordez Morejn, Mg. Sc.
Vicerrector Administrativo
COORDINACIN EDITORIAL
VICERRECTORADO ACADMICO
Toms Fontaines-Ruiz, PhD.
Investigador Becario Prometeo-Utmach
Asesor Del Programa De Reingeniera
Ing. Karina Lozano Zambrano
Coordinadora Editorial
Ing. Jorge Maza Crdova, Ms.
Ing. Cyndi Aguilar
Equipo de Publicaciones
Biologa Celular: Aplicaciones

Prcticas
Adriana Lam Vivanco

Marisela Segura Osorio
Carlos Garca Gonzlez
UNIVERSIDAD TCNICA DE MACHALA

2015
Primera edicin 2015

ISBN: 978-9978-316-75-7
D.R. 2015, universidad tcnica
Ediciones utmach
Km. 5 1/2 Va Machala Pasaje
www.utmachala.edu.ec
Este
de machala
texto ha sido sometido a un proceso de evaluacin por pares externos
con base en la normativa editorial de la utmach.
Portada:
Concepto editorial: Jorge Maza Crdova
Samanta Cabezas (est. Comunicacin Social)
Diseo, montaje y produccin editorial: UTMACH
Impreso y hecho en Ecuador
Printed and made in Ecuador
Advertencia: Se prohbe la reproduccin, el

registro o la transmisin parcial o total de esta
obra por cualquier sistema de recuperacin
de informacin, sea mecnico, fotoqumico,
electrnico, magntico, electroptico, por
fotocopia o cualquier otro, existente o por existir,
sin el permiso previo por escrito del titular de los
derechos correspondientes.
ndice
Prlogo........................................................................................ 13
Objetivo....................................................................................... 15
Presentacin............................................................................... 17
Manual de Prcticas de Biologa Celular................................. 19
Introduccin............................................................................ 19
Manejo del Microscopio............................................................. 19

Introduccin............................................................................ 21
Manejo del Microscopio............................................................ 24
Cuidado del Microscopio.......................................................... 27
Objetivo General...................................................................... 27
Objetivos Especficos................................................................ 28
Materiales................................................................................ 28
Equipos................................................................................... 28
Actividad 1............................................................................... 28
Actividad 2............................................................................... 30
Actividad 3............................................................................... 31
Conclucin............................................................................... 32
Recomendaciones..................................................................... 32
Bibliografa.............................................................................. 33
Estructura de la Clula............................................................. 35
Introduccin............................................................................ 35
Clula Eucariota Animal.......................................................... 35
Objetivo Especfico................................................................... 40
Materiales................................................................................ 40
Reactivos................................................................................. 41
Equipos................................................................................... 41
Actividad 1............................................................................... 41
Actividad 2............................................................................... 42
Actividad 3............................................................................... 42
Conclusin............................................................................... 44
Bibliografa.............................................................................. 45
Observacin de Clulas de la Mucosa Bucal Humana........... 47

Introduccin............................................................................ 47
Tipos de Organizacin Celular.................................................. 49
Clulas Eucariotas................................................................... 49
Mambrana Plasmtica.............................................................. 50
Citoplasma............................................................................... 50
Citoesqueleto........................................................................... 51
Ncleo Ceular.......................................................................... 51
Centriolos................................................................................ 51
Retculo Endoplasmtico.......................................................... 51
Aparato de Golgi...................................................................... 51
Lisosomas................................................................................ 52
Mitocondrias............................................................................ 52
Vacuolas.................................................................................. 52
Ribosomas............................................................................... 52
Peroxisomas............................................................................. 53
Clulas Procariotas.................................................................. 53
Membrana Celular................................................................... 53
Flagelos................................................................................... 53
Materiales................................................................................ 55
Equipos................................................................................... 55
Reactivos................................................................................. 55
Actividad 1............................................................................... 55
Actividad 2............................................................................... 56
Actividad 3............................................................................... 57
Conclusin............................................................................... 58
Bibliografa.............................................................................. 59
Recuento de Leucocitos....................................................... 61
Introduccin............................................................................ 61
Funciones de la Sangre............................................................ 61
Glbulos Rojos o Eritrocitos..................................................... 62
Plaquetas o Trombocitos.......................................................... 62
Glbulos Blancos o Leucocitos................................................. 63
Neutrfilos............................................................................... 64
Eosinfilo................................................................................. 64
Basfilo.................................................................................... 65
Linfocitos................................................................................. 65
Linfocitos T.............................................................................. 65
Linfocitos T Cd4........................................................................ 65
Linfocitos T Cd8....................................................................... 66
Linfocitos B.............................................................................. 66
Inmunoglobulinas.................................................................... 66
Monocitos................................................................................ 67
Materiales................................................................................ 68
Equipos................................................................................... 68
Reactivos................................................................................. 68
Sustancias............................................................................... 68
Actividad 1............................................................................... 69
Actividad 2............................................................................... 70
Actividad 3............................................................................... 71
Bibliografa.............................................................................. 73
Extraccin de ADN.............................................................. 75
Introduccin............................................................................ 75
Grupos Fosfato........................................................................ 76
Pentosa.................................................................................... 77
Bases Nitrogenadas.................................................................. 77
Propiedades del ADN................................................................ 78
Desnaturalizacin y Renaturalizacin....................................... 78
Materiales................................................................................ 79
Sustancias............................................................................... 79
Actividad 1............................................................................... 80
Materiales................................................................................ 80
Actividad 2............................................................................... 81
Actividad 3............................................................................... 81
Conclusin............................................................................... 81
Bibliografa.............................................................................. 83
Mitosis de Clulas Vegetales................................................ 85

Introduccin............................................................................ 85
Fase G1................................................................................... 85
Fase S...................................................................................... 85
Fase G2................................................................................... 86
Profase..................................................................................... 86
Metafase.................................................................................. 86
Anafase.................................................................................... 86
Telofase................................................................................... 87
Materiales................................................................................ 87
Reactivos................................................................................. 88
Equipos................................................................................... 88
Actividad 1............................................................................... 88
Actividad 2............................................................................... 91
Actividad 3............................................................................... 91
Conclusin............................................................................... 92
Bibliografa.............................................................................. 93
Meiosis de Clulas Vegetales............................................... 95

Introduccin............................................................................ 95
Mecanismo de la Meiosis.......................................................... 95
Segunda Dicisin Meitica....................................................... 97
Materiales................................................................................ 98
Equipos................................................................................... 98
Reactivos................................................................................. 98
Actividad 1............................................................................... 98
Actividad 2............................................................................... 99
Actividad 3............................................................................... 100
Conclusin............................................................................... 100
Bibliografa.............................................................................. 101
Preparacin de Colorantes.................................................. 103
Prlogo
El presente texto de Biologa ha sido estructurado para facilitar el

aprendizaje a los estudiantes que se inician en el campo de estudio del
fascinante mundo de la Bioqumica Farmacutica, comprendiendo los
conceptos ms generales de Biologa Celular complementando as la
programacin terica que recibe el estudiante.
El contenido de texto pedaggico condesa informacin muy
importante para el desarrollo de la asignatura de Biologa Celular,
mejorando el aprendizaje de dicha asignatura, esta produccin es
una revisin minuciosa de la bibliografa universal en el campo de
la biologa celular permitiendo sintetizar aspectos fundamentales, y
el desarrollo de actividades, y mejorar las tcnicas correctas del uso
del microscopio, constituyendo una pieza fundamentalmente en la
formacin acadmica de los futuros Bioqumicos Farmacuticos.
Este documento une aspectos conceptuales, actividades, tcnicas
y normativas orientadas al desarrollo ptimo y desempeo de las
prcticas de laboratorio de Biologa Celular.
Para que el estudiante evale su aprendizaje, se han incluido
conceptos bsicos, literatura apropiada, actividades y cuestionarios de
autoevaluacin en cada una de las prcticas.
[13]
Objetivo
Introducir al estudiante universitario en la observacin directa de

estructuras biolgicas, fases del ciclo celular a travs del mtodo
experimental y consolidar los conocimientos de la teora de un curso
introductorio de Biologa Celular, de tal manera que sea capaz de
aplicar conceptos e identificar cada una de las estructuras celulares y
las diferentes fases del ciclo celular, adems de facilitar la integracin
del conocimiento y despertar el inters del estudiante en esta ciencia.
[15]
Presentacin
Los recursos en la enseanza-aprendizaje de la Biologa destacan la

aplicacin de fundamentos tericos y el manejo de instrumentos y
equipos de laboratorio en las actividades prcticas, que responden a
una metodologa con activa participacin de los estudiantes, facilitando
el desarrollo de aprendizaje y mayor eficacia para alcanzar los objetivos
formativos.
En el texto, se expone detalladamente en cada una de los temas
los principios bsicos de la biologa celular, stas aunque son sencillas,
son representativas y estn de acuerdo con el tiempo y recursos de la
asignatura de Biologa Celular. Cada tema ha sido rediseado y revisado
en lo que respecta a forma y contenido, basado en la revisin de varias
las referencias bibliogrficas utilizadas en cada de las actividades.
[17]
Manual de Prcticas de Biologa Celular
Introduccin
El presente texto de Laboratorio de Biologa celular fusiona las
prcticas que se desarrolla en las horas acadmicas de laboratorio de
la asignatura, recopila la informacin necesaria para su realizacin e
indica los pasos principales de la experimentacin, de tal manera que los
estudiantes cuentan una herramienta terica bsica para la realizacin
de las prcticas. Este material de apoyo didctico ha sido diseado
para servir a los alumnos como para los instructores, el proceso de
experimentacin dentro del laboratorio es fundamental para relacionar
y aplicar los conocimientos adquiridos en clase y reforzar el proceso de
enseanza aprendizaje.
Las clulas y sus estructuras son demasiado pequeas para
observarlas, a pesar de esta enorme dificultad, las clulas son el tema
de miles de publicaciones cada ao y siendo su estructura objetivo
clave de la investigacin. De tal manera, el estudio de la biologa celular
persistir como tributo a la curiosidad humana por investigar, descubrir,
y a la imaginacin humana para disear tcnicas permitiendo llevar a
cabo el realizar tales descubrimientos.
Presenta una serie de trabajos de laboratorio que permitirn
reforzar los conocimientos tericos en las horas de docencia, en donde
el estudiante tendr la capacidad de poner en prcticas pruebas
analticas, la identificacin de estructuras celular, desarrollando la
aptitud investigativa sobre los temas en estudio.
[19]
Manejo del Microscopio
Introduccin
El microscopio deriva su nombre del griego: mikrs=pequeo,
skopo=observar. Dicho trmino se designa a todo instrumento utilizado
para amplificar la imagen de objetos que, por su tamao, no son
observables a simple vista. El origen del microscopio es desconocido;
en Holanda, en la ciudad de Middelburg entre 1590 y 1610, varios
personajes relacionados con el mundo del espectculo inventaron tanto
el microscopio compuesto como el telescopio como por ejemplo: Hans
Janssen y su hijo Zacharias, fabricantes de anteojos, se les otorga
como los inventores, sin embargo, algunos atribuyen a Galileo Galilei
gracias a que l difundi el microscopio y su uso, en la primera mitad
del siglo xvii.
El impulsor de la Microscopa fue, el holands Antn Van
Leeuwenhoek, (1632-1723). Parker, G. (1933). Construy microscopios
simples, con lentes muy convexas que l mismo pula y en el cual
realiz observaciones muy diversas en los que se destacan: estudi
la composicin de la sangre, fue el primero en observar y dibujar
los protozoos, descubri las bacterias, etc. Sus trabajos fueron
publicados por la Real Sociedad de Londres (1683). En la actualidad
se considera a los holandeses Hans y Zacharias Janssen, padre e hijo,
como constructores del primer microscopio compuesto en 1590. El
microscopio compuesto no ha cesado de perfeccionarse, incorporndole mejoras, revolver porta objetivos, visin binocular, iluminacin
[21]
22
Lam, A / Segura, M / Garca, C
halgena de gran rendimiento, filtros polarizadores, equipo de contraste

de fase, microscopio de contraste interferencial, microscopio de luz
ultravioleta, etc.
El microscopio ptico presenta una serie de limitaciones, que le
impone la naturaleza de la propia luz, por encima de los 1500-2000
aumentos, las equivocaciones que origina la luz impiden hacer
observaciones con nitidez. Motivo por el cuales los investigadores
realizaron una serie de estudio mejorando la idea de utilizar haces de
electrones en lugar de rayos luminosos y potentes electroimanes, en
lugar de lentes. Con este principio naci el microscopio electrnico,
permitiendo la visin ms clara de la muestra en estudio.
Las partes que conforma el microscopio:
1. ocular
Sistema de lentes que queda prximo al ojo. En este grupo de
lentes del microscopio es donde se va se va observar el aumento de la
imagen formada por el objetivo.
2. anillo de correccin diptrica
Corrige las diferencias de visin entre ambos ojos. Slo se presenta
en los microscopios binoculares y triloculares.
3. tubo
Es un tubo hueco que separa los dos grupos de lentes (ocular y
objetivo).
4. charnela
Es el punto de articulacin entre el brazo y el pie. Permite inclinar
el microscopio para hacer ms cmoda la observacin.
5. revlver portaobjetivos
Permite colocar en posicin de trabajo a los distintos objetivos
con que cuenta el microscopio. Presenta unas ranuras que facilitan la
fijacin del objetivo en la posicin correcta
6. Objetivos
Son los grupos de lentes principales, considerados con componentes
pticos que quedan prximos al objetivo de ah se atribuye su nombre,
los que determinan realmente el aumento mximo y el poder de
resolucin del microscopio.
Cada uno contiene un delicado sistema de lentes, en los cuales se
suministran cuatro objetivos: 4x, 10x, 40x y 100x. Los tres primeros
trabajan en seco, el cuarto, que generalmente se observa un anillo negro
23
en su parte baja, este lente requiere el empleo de un aceite especial,

disponible en el comercio, aceite de inmersin, el ndice de refraccin
es muy similar al vidrio de las lentes (n=1,515).
7. platina
Plataforma que sostiene la preparacin. En casi todos los diseos
actuales, presenta movimiento de elevacin-descenso para el enfoque.
Tiene un orificio en su centro para permitir el paso de la luz.
8. pinzas
Sirven de sujecin de la preparacin sobre la platina.
9. condensador
Es un sistema de lentes situado debajo de la platina que concentra
la luz sobre la preparacin, consiguindose as una iluminacin ms
intensa.
10. diafragma
Es un sistema mecnico formado por varias laminillas dispuestas
en forma radial delimitando un orificio de abertura variable, que regula
la cantidad de luz que entra al condensador. Se acciona mediante una
palanca de fcil acceso. Su correcto uso es de vital en la observacin,
slo la prctica nos permitir comprobarlo, permitiendo mejorar la
visin de la muestra en anlisis.
11. porta filtros
Contiene, normalmente, un filtro de vidrio azul, dado que la luz de
longitud de onda corta mejora el poder de resolucin del microscopio.
Por otra parte, si el foco de luz no es plano o uniforme (bombilla
blanca-mate o luz da) colocaremos en el anillo un filtro de vidrio
esmerilado, blanco o azul.
12. espejo
Sirve como fuente de luz al reflejar la de un foco externo. Tiene
dos caras, una plana y otra cncava para concentrar ms la luz. En
algunos microscopios es sustituido por una lmpara que se conecta a
la red.
13. tornillo del condensador
Permite subir o bajar el condensador respecto a la platina para
mejorar la iluminacin.
14. corrector de la distancia interpupilar
Imprescindible en los modelos binoculares, ya que la distancia
entre nuestros ojos vara de una persona a otra.
24
15. tornillo elevador del condensador

Permite bajar el condensador para cambio o limpieza del mismo y
para trabajar con aumentos dbiles.
16. tornillo de enfoque (macromtrico)
Acerca o aleja rpidamente el objetivo a la preparacin para
hacer un enfoque aproximado. Se usa slo con los objetivos de menor
aumento.
17. tornillo micromtrico
Permite enfocar con precisin, moviendo muy lentamente el objetivo.
18. carro mvil porta-preparados
Accesorio que sujeta la preparacin y permite moverla en direccin
frontal y lateral, para su exploracin. Presenta una pieza fija y otra
mvil entre las cuales se ancla el porta. Suele ir provisto de dos escalas
con nonius, perpendiculares entre s para tomar las coordenadas de
zonas interesantes de la preparacin.
19. brazo
Sirve de soporte a los otros elementos del microscopio. Est
articulado con el pie para poder inclinarlo y hacer as ms cmoda la
observacin.
20. pie
Soporte sobre el cual se apoya el microscopio.

Es muy importante tener en consideracin todos los pasos que se
detallan a continuacin, para poder realizar un correcto manejo del
microscopio.
Retirar la funda de plstico (con cuidado de no coger el ocular, al
mismo tiempo)
Conectar el microscopio al toma corriente teniendo en considera el
voltaje del mismo.
Separar objetivo y platina, colocar la preparacin en sta y centrar
la zona en anlisis sobre la lente superior del condensador.
Abrir poco el diafragma y colocar el condensador en posicin alta.
25
Colocar el objetivo de menor aumento (10x). Observando

lateralmente el microscopio, aproximar el objetivo a la preparacin
(subiendo platina) hasta que queden lo ms juntos posible, teniendo
cuidado que no se trice el cubre u porta objeto.
Observando a travs del ocular, levantar lentamente el objetivo
(o bajar platina) con el macromtrico, hasta que aparezca un imagen
ntida.
Una vez encontrada la imagen, con el micromtrico vamos
aclarando la imagen para que sea tmida y poder observar y diferenciar
la estructura y morfologa que se est analizando.
Explorar la preparacin, utilizando los mandos del carro, lentamente
de izquierda a derecha y de arriba a abajo, procurando no pasar varias
veces por la misma zona, como observamos en la figura 1.
Figura 1. Exploracin de una muestra con la utilizacin del macro y micromtrico
Puede ser conveniente tomar las coordenadas de las zonas ms

interesantes, para ello nos ayudaremos del nonius o vernier (permite la
medicin del tamao de muestra), que estn dispuestos perpendicularmente entre s, sobre la platina. Pedir indicaciones al profesor.
Pasar al objetivo siguiente (40x), reenfocar con el micromtrico,
ser conveniente modificar la altura del condensador hasta su posicin
ms alta as como la abertura del diafragma.
Slo si est previsto en el guion de prcticas, pasaremos al objetivo
de 100x inmersin, como observamos en la figura 2, en el cual se
coloca una gota de aceite, que nos proporcionar el profesor, sobre
la preparacin. Bajar el objetivo de 100x, mirando lateralmente el
microscopio, hasta tocar la gota de aceite, observaremos la formacin
de un menisco, esto se realizar con mucho cuidado, permitindonos
as observar las muestras que necesitarn ser teidas.
26
Figura 1. Lente de 100x inmersin
El aceite impide la dispersin de los rayos de luz, mejorando

notablemente la nitidez de la imagen y la luminosidad del objetivo.
Mirando a travs del ocular, se realiza el enfoque con el micrmetro
y explore la preparacin lentamente
Terminada la observacin, levantar el objetivo (o bajar platina).
Retirar la preparacin y apagar la lmpara. No olvidar limpiar el objetivo
un el papel que puede ser lens claning tissues (papel limpiadora de
objetivos), el mismo que va rayas los objetivos y mantenerlos en ptimas
condiciones para posteriores observaciones.
Si se ha empleado aceite de inmersin, debe limpiarse el objetivo
100x con un pauelo suave de celulosa, y papel siliconado para limpieza
de lentes. Si esto resulta insuficiente, se utilizar xilol o una mezcla de
alcohol-ter, impregnando levemente el pauelo o papel limpia-gafas
En el funcionamiento del microscopio ptico se producen dos
ampliaciones de la imagen, una en el objetivo y otra en el ocular,
llamadas ampliacin primaria y ampliacin secundaria respectivamente. La multiplicacin de ambas ampliaciones da el poder de aumento
total del microscopio. El objetivo siempre produce un aumento mucho
mayor que el ocular, para poder observar los objetos ms pequeos.
Adems, el ocular suele ser fijo y los objetivos intercambiables para
conseguir diferentes aumentos segn la necesidad. Por ejemplo, un
ocular estndar suele tener 10x aumentos, si se combina con un
objetivo de 40x, se obtendr un aumento total de 400x.
El Microscopio electrnico tiene una alta resolucin y capacidad de
aumentos que permite analizar muestras muy variadas tanto respecto
a la morfologa externa de plantas, animales, microorganismos y virus,
como los detalles ultra estructurales internos de estos organismos.
27
Cuidado del Microscopio

El microscopio un aparato de precisin y, por lo tanto, delicado, es muy
conveniente asegurar un buen funcionamiento atendiendo siempre a
las siguientes normas:
Para transportar el microscopio deben utilizarse siempre las dos
manos, sujetndolo por el brazo con una mano y por el pie con la palma
de la otra.
El microscopio una vez colocado en su sitio, no debe moverse hasta
que se finalice la prctica. Cuando se vaya a cambiar de observador no
se debe mover el microscopio.
Debe ser trasladado de un sitio a otro con mucho cuidado, sin
movimientos bruscos y colocarlo suavemente sobre la superficie del
mesn.
Nunca colocar los dedos en las lentes del ocular ni del objetivo, si
se llegaran a ensuciar dichas lentes estas deben ser limpiadas con un
pao suave de algodn, sin utilizar ningn disolvente.
No retirar de su sitio el ocular ni los objetivos, a no ser que vayan
a ser sustituidos, en cuyo caso el reemplazo se debe hacer lo ms
rpidamente posible, para evitar la entrada de polvo.
Verificar que el portaobjetos est bien seco cuando va a ser
colocado sobre la platina.
Cuando se utilicen los objetivos de mayor aumento es necesario
tener en cuenta el enfoque, para evitar que el extremo del objetivo tope
la preparacin.
Una vez terminada la prctica, separar el objetivo y la platina,
retirar la preparacin y apagar la lmpara.
Cubrir bien el microscopio con su funda y, si no se va a usar a
corto plazo, guardarlo en su estuche.
Objetivo General
Observar las muestra en estudio, mediante el uso apropiado del
microscopio, para conocer funciones y las partes que cumplen dicho
equipo.
28

objetivos especificos
1- Sealar cada una de las partes del microscopio ptico y explicar

la funcin de cada uno de sus componentes
2- Observar una muestra al microscopio y determinar el movimiento
de la misma cuando se mueve el carro del microscopio.
3- Calcular el aumento al cual se est observando una muestra
problema.
4- Discutir sobre los diferentes tipos de microscopios y sus
funciones.
materiales
123456-
Placas portaobjetos
Papel de peridico y fotocopia
Muestra 1. Ptalo de geranio fijado por squash
Muestra 2. Cabello humano en fresco
Muestra 3. Clula fngica
Muestra 4. Placa teida con la tcnica de tincin de Wright
equipos
Microscopio ptico
actividad 1.
1- Identifica las partes del microscopio que aparecen en el esquema,
aprenda sus nombres y la funcin que cumplen para que le resulten
conocidas cuando ms adelante nos refiramos a ellas.
2- Realiza la preparacin de la muestra.
3- Corte un trozo de peridico (ms o menos cuadrado de 1 cm de
lado) en el que se encuentre alguna letra para su debida observacin.
4- Coloca un par de gotas de agua en el centro de la porta y sobre
ellas deposite el trozo de peridico sin que se arrugue.
5- Sobre la muestra previamente preparada coloca el cubre con
cuidado de que no se formen burbujas. Para ello debemos bajarlo
gradualmente.
6- Coloca la preparacin sobre la platina sujetndola con las pinzas
y observando que la letra est derecha.
7- Observar de la preparacin
8- Elegir el objetivo de menor aumento (10x) girando el revlver para
colocar el objetivo.
9- Mirando el ocular gira el macromtrico para subir la platina lo
ms posible; pero sin que llegue a tocar la preparacin al objetivo.
29
10- Observa por el ocular, mover el mismo tornillo, hasta obtener

una visin suficientemente destacada de la muestra.
11- Una vez realizado ste enfoque aproximado, utilizar el tornillo
micromtrico para un ajuste perfecto.
responda
Observa en el microscopio las letras del peridico previamente

recortadas, utilizando los diferentes objetivos desde el menor a mayor
aumento y responda las siguientes actividades:
Indique la posicin donde se observa la letra
_________________________________________________________________
____________________________________________________________________
____________________________________________________________________
__________________________________________________________________
Gire la platina que contiene la muestra hacia la derecha. Hacia
qu lado se mueve la letra?
_________________________________________________________________
____________________________________________________________________
____________________________________________________________________
__________________________________________________________________
Coloque la preparacin hacia la izquierda hacia dnde se mueve
la letra?
_________________________________________________________________
____________________________________________________________________
____________________________________________________________________
__________________________________________________________________
Con este segundo objetivo de mayor aumento Cmo observa la
letra?
_________________________________________________________________
____________________________________________________________________
____________________________________________________________________
__________________________________________________________________
En ste ejercicio Cmo es el rea de observacin mayor o menor?
_________________________________________________________________
____________________________________________________________________
____________________________________________________________________
__________________________________________________________________
30
2.
Resultados de muestras identificadas mediante la observacin al
microscopio
acitividad
Objetivo
10x
20x
40x
100x
Aumento
Muestra 1
Muestra 2
muestra 3
Muestra 4
31
3.
Grafica el microscopio y coloca las partes con sus respectivas
funciones:
actividad
Nombre Estructura
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
11
12
13
14
15
Funcin
32
Determina el aumento total con el que ests observando, si

empleas la combinacin de ocular y objetivo que aparece en el dibujo
siguiente:
Aumento del ocular: _____________

Aumento del objetivo: ____________
Aumento total: __________________
Conclusin
____________________________________________________________________
____________________________________________________________________
____________________________________________________________________
____________________________________________________________________
_______________________________________________
Recomendaciones
____________________________________________________________________
____________________________________________________________________
____________________________________________________________________
____________________________________________________________________
______________________________________________
Bibliografa
Paniagua Ricardo, Nistal Manuel, Sesma Pilar, lvarez Manuel Ura,

Ramn Benito Fraile A. Sez Francisco J. Biologa Celular, editorial
Mc Graw Hill 3 era edicin.
Parker, G. (1933). Anthony van Leeuwenhoek and his Microscopes. The
Scientific Monthly, 37 (5), 434-441
[33]
Estructura de la Clula
Introduccin
La clula se deriva del latn cellula, diminutivo de cella, hueco es
considerada como la unidad morfolgica y funcional de los seres vivos.
La clula es considerada como la estructura de menor tamao. La
clula es la unidad anatmica, funcional y gentica de todos los seres
vivos.
clula eucariota animal:
Entre las caractersticas significativas podemos mencionar el
exterior y el interior celular estn separados por una membrana
plasmtica que influye en los procesos de intercambio de sustancias,
la regulacin hdrica y osmtica, el reconocimiento celular.
Las clulas animales tienen en su estructura un esqueleto flexible
interno, llamado citoesqueleto, que colabora en dar forma a la clula
y en mantener un orden interno, en su interior consta con orgnulos
no membranosos llamados centriolos, encargados de la regulacin del
citoesqueleto e implicados en la divisin celular.
La nutricin de la clula es un tipo de hetertrofa, es decir obtienen
materia y energa a partir de sustancias orgnicas que han producido
otros organismos.
Entre los organelos presentes en las clulas eucariotas animal
podemos mencionar:
1. ncleo (con nuclolo)
Es considerado como el centro donde se dirige las actividades de
la clula y en el cual contiene la informacin gentica (adn), tiene la
principal funcin de la biosntesis de las protenas de cada organismo.
[35]
36
2. retculo endoplasmtico rugoso

El retculo endoplsmico rugoso est formado por sculos
aplastados comunicados entre s. Su funcin bsica es la sntesis de
protenas con la ayuda de los ribosomas.
3. retculo endoplasmtico liso
El retculo endoplsmico liso, est constituido por una red de
tbulos unidos al retculo endoplsmico rugoso y que se expande por
todo el citoplasma. Esta membrana posee gran cantidad de enzimas
cuya principal actividad es la sntesis de lpidos. (Galvn y Bojrques,
2002; Jimeno et al, 2003; Velsquez, 2005).
4. ribosoma
Este organelo celular cumple con las instrucciones genticas
contenidas en el cido ribonucleico mensajero (arnm) para enlazar
con el cido ribonucleico de transferencia las secuencias especficas (o
conocido como triple de nucletidos codones) para formar los enlaces
polipeptdicos de aminocidos y formar as protenas esta funcin se lo
realiza en la estructura del ribosoma.
5. aparato de golgi
La unidad bsica del orgnulo es una vescula, que encierran
sacos y tbulos (cisternas) asociados con vesculas de secrecin y de
transicin. Esta subdividido en tres regiones o fases: la regin cis: se
orienta hacia el ncleo celular es un proceso continuo de formacin
de cisternas con material procedente de la fusin de compartimentos
tbulo vesiculares denominados ergic, la regin intermedia y la regin
trans; fase de maduracin donde las cisternas con las molculas
procesadas se deshacen en vesculas que se dirigen a otros compartimentos celulares. (Vildanova ms, Wang W, Smirnova ea. 2015).
6. mitocondria
Las mitocondrias son los orgnulos celulares responsable de
abastecer la mayor parte de la energa requerida para la actividad de
la celular, por lo tanto es considerada como centrales de energtica
de la clula es capaz de sintetizar atp a expensas de los combustibles
metablicos (glucosa, cidos grasos y aminocidos).
7. lisosomas
Los lisosomas son orgnulos donde se produce la degradacin
de molculas la cual es llevada a cabo por enzimas denominadas
hidrolasas cidas que tienen una alta actividad a pH cido.
37
8. vacuolas
Las clulas animales, son de pequeo tamao, su funcin no es solo
almacenar agua, sino que se encarga de regular el agua el intercambio
de agua entre la clula y el medio asegurndose de la clula tiene
siempre los niveles de agua adecuados para su actividad.
9. centrosoma (con centriolos)
El centrosoma tiene otras actividades en las clulas animales
adems de tener un conjunto de funciones o actividades intrnsecas
entre las cuales podemos mencionar: duplicacin del centrosoma,
nucleacin y anclaje de microtbulos, formacin de cilios y flagelos,
formacin huso mittico.
clula eucariota vegetal
Son generalmente de mayor tamao que las clulas eucariotas

animales, se encuentran recubiertas por una estructura rgida de
aspecto poligonal, cuyo principal componente es la celulosa en las
plantas y la quitina en los hongos, y que se la conoce como pared
vegetal, podemos mencionar que no cuenta con centriolos, aunque si
presentan fibras del citoesqueleto.
La nutricin de la clula vegetal es auttrofa es decir realiza la
fotosntesis la cual se realiza en un orgnulos especializados llamados
cloroplastos, los mismo que contienen clorofila, pudiendo obtener la
materia y la energa a partir de la luz y materia inorgnica (CO2 y agua).
Las caractersticas bsicas podemos mencionar la presencia de:
Membrana plasmtica
Citoplasma
Citoesqueleto
En la clula eucariota vegetal consta de los siguientes organelos:
Ncleo (con nuclolo)
Es un corpsculo de forma esfrico, redondo u ovoide pero
generalmente su forma vara en relacin con la forma de la clula, que
se encuentra en el citoplasma, la funcin ms importante en la sntesis
de protenas
retculo endoplasmtico rugoso
El retculo endoplasmtico rugoso contiene ribosomas adheridos

en la superficie externa, los mismos que se encuentran en forma de
polisomas. La funcin principal de este organelos es la secrecin, almacenamiento y sntesis de protenas.
38

retculo endoplasmtico liso
Posee forma tubular y est encargado de en la sntesis de lpidos,

la detoxificacin.
ribosomas
Los ribosomas que estn encargados de la sntesis de protenas

se encuentran en grupos llamados polisomas o poliribosomas, estos
generalmente se encuentran adheridos a la membrana nuclear.
aparato de golgi (dictiosomas)
Los dictiosomas es el trmino que se utiliza para asignar a todos
cuerpos de Golgi conformados en la clula, estn compuestos de sacos
que tiene la apreciacin de discos (cisternas) agrupados entre si y se
ramifican en una serie compleja de tbulos. Su funcin principal es
sntesis de algunos hidratos de carbono ms complejos como celulosa,
participa formacin del fragmoplasto en la divisin de clulas vegetales.
mitocondria
Es el organelo responsable de respiracin, existe un dato curioso

en la clula la cantidad de mitocondria vara dependiendo de la
demanda por atp de la clula, est siempre se encuentran en constante
movimiento dentro de la clula, para as proveer el atp necesario en el
sitio necesario a la clula.
lisosomas
El lisosoma es una vescula membranosa que contiene enzimas

hidrolticas que permiten la digestin intracelular de macromolculas.
Son organelos esfricas u ovalados que se localizan en el citosol, de
tamao relativamente grande, los lisosomas son formados por el retculo
endoplasmtico rugoso (rer) y luego empaquetados por el complejo de
Golgi, permitiendo la degradacin de dichas molculas.
vacuola central (con tonoplasto)
Las vacuolas centrales son caractersticas principales de las
clulas vegetales, se encuentran rodeadas por una membrana llamada
tonoplasto y llena de un lquido llamado savia celular. El agua es
el componente principal de la savia celular, pero adems contiene
sales, azcares y protenas. La vacuola tiene la principal funcin de
desarrollar la presin de Turgor permitiendo dar la presin necesaria
que ejerce el movimiento del agua dentro de la clula, es importante
para mantener la rigidez de la clula. El tonoplasto juega un papel
39
importante en el transporte activo de ciertos iones hacia el interior de

la vacuola retenindolos all, otorgndole a la vacuolala la funcin de
almacenar grandes cantidades de iones. Las vacuolas tienden a ser
cidas, por ejemplo, las vacuolas ctricas son cidas y responsables del
sabor amargo de la fruta. Las funciones de las vacuolas son: almacenar
productos del metabolismo (por ejemplo, protenas de reserva en
semillas), remover productos secundarios txicos (ejemplo la nicotina),
almacenar pigmentos solubles en agua como las antocianinas (color
azul, violeta y rojo) que son responsables del color azul y rojo en muchos
vegetales, frutas y flores; adems las vacuolas estn envueltas en el
rompimiento de macromolculas y el reciclaje de sus componentes
dentro de la clula.
En las clulas vegetales es frecuente que presenten una nica o unas
pocas vacuolas de gran tamao, dependiendo el grado de madurez de
la vacuola. Las vacuolas son sacos limitados por membrana, llenos de
agua con varios azcares, sales, protenas, y otros nutrientes disueltos
en ella.
plastos
Los plastos son estructuras claramente diferenciados de forma

esfrica o elipsoidal, limitados por una doble membrana, almacenan
pigmentos, sustancias de reserva o llevan a cabo la fotosntesis, siendo
los plastos son tpicos organelos de las clulas vegetales.
protoplastos.
Son plastos inmaduros, tpicos de las clulas meristemticas,
en general son pequeos y carecen de pigmentos o reservas, y son
precursores de los plastos.
Los plastos maduros son de tres tipos, mismos que difieren por
su color y por la funcin. Se llaman cloroplastos a los de color verde;
cromoplastos a los que tiene colores rojo, amarillo, naranja o prpura;
y leucoplastos a los que no tienen color
microcuerpos (peroxisomas, glioxisomas)
peroxisomas
Son considerados como microcuerpos que cumplen con un papel

importante en el metabolismo de cido gliclico asociado con fotorespiracin de la clula.
40
Entre las estructuras adicionales en las clulas eucariotas tenemos:

flagelo y cilios
Son estructuras en forma de finos filamentos encontradas en las

clulas eucariticas. Son estructuras alargadas y estrechas que varan
en tamao, los ms largos son llamados flagelos y los ms cortos cilios.
Y en las clulas vegetales tenemos:
flagelo (solo en gametos)
La funcin de stos en las clulas vegetales es la locomocin
pared celular
Es la caracterstica ms distintiva de las clulas vegetales, cumple

la funcin de limitar el tamao de la clula, evitando su ruptura debido
a la obtencin de agua por la vacuola, permite la absorcin, transporte
y secrecin de sustancias y sirve de lugar para la actividad lisosomal o
digestiva de la clula vegetal.
plasmodesmos
Son canales especializados y no pasivos, que facilitan regular la

comunicacin y el transporte de sustancias como agua, nutrientes,
metabolitos y macromolculas entre las clulas vegetales.
Objetivo General
Observar las clulas de la epidermis de cebolla (allium cepa), mediante
el uso correcto del microscpico para identificar la estructura celular
de la misma.
objetivo especfico
1- Conocer la estructura de la clula vegetal.

2- Observar la estructura de la clula vegetal al microscopio
y determinar las caractersticas que presentan en la tincin que se
realiza.
materiales
12345-
Frasco lavador
Papel de filtro
Cubreobjetos
Portaobjetos
Bistur
6789-
41
Pinzas de diseccin
Trozo de cebolla
Cuentagotas
Caja de Petri
reactivos
Colorante: Verde metilo

equipos
Microscopio
actividad 1
1- Colocar un trozo de cebolla y marcar con incisiones del bistur
una pequea cuadrcula en la parte interior del trozo de cebolla.
2- Extraer con ayuda de la pinza un trozo de la fina pelcula que
hay entre las hojas de la cebolla.
3- Aplicar una gota de agua en el portaobjetos y colocar encima la
fina piel extrada de la cebolla. Procurar que no se envuelva. Colocar un
cubreobjetos encima de la muestra para analizar.
4- Trasladar el portaobjetos con la muestra ya preparada al
microscopio. Empezar siempre enfocando el mnimo aumento del
objetivo que este caso correspondera al objetivo de 10x.
5- Girar el revlver del microscopio al aumento medio para utilizar
los diferentes objetivos (10x, 20x, 40x) y dibujar lo observado, observar
la preparacin en fresco.
6- Retirar el portaobjetos del microscopio, levantar el cubreobjetos
y colocar el portaobjetos encima de una placa de Petri.
7- Colocar unas gotas de verde de metilo. Esperar 5 minutos.
8- Con unas pinzas sujeta el porta y separar el exceso de colorante
vertiendo agua con el frasco lavador encima de la muestra. Secar los
alrededores de la muestra con papel filtro.
9- Aadir unas gotas de agua y procurar que no se formen burbujas
de aire.
10- Disponer el cubre sobre el portaobjetos y colocar la preparacin
en el microscopio y observar con los objetivos de 20x-40x aumentos
para describir el resultado.
42
2
Protocolo de resultados de observacin de la clula vegetal.
actividad
objetivo
muestra en fresco
muestra teida con verde metilo
3
1. Cules son las partes de la clula que has observado claramente?
actividad
Fuente: pixshark.com-450 302

1
10
11
12
13
14
13~~~
12 ~~=#~i
11 ---!~~
10__~~~
9
8
1
10
11
12
13
14
2.- Escriba 5 diferencias entre clulas animal y vegetal

Clula Animal
1
2
3
4
5
Clula Vegetal
43
44
Conclusin
____________________________________________________________________
____________________________________________________________________
____________________________________________________________________
____________________________________________________________________
____________________________________________________________________
______________________________________________________________
Recomendaciones
____________________________________________________________________
____________________________________________________________________
____________________________________________________________________
____________________________________________________________________
_______________________________________________
Bibliografa
Albert, Bray, Hopkin, Johnson, Lewis, Raff, Roberts, Walter, 2011.

Introduccin a la Biologa Celular, Editorial Mdica Panamericana.
Alonso Pea Jos Romn, 2011. Manual de Histologa Vegetal, Madrid
- Mxico Edicin Mundi- Premis.
Biggs Alton, Hagins Crispen; Holliday William, Kapicka Chris, Lundgren
Linda, Haley Ann Mackenzie, Rogers William, Sewer Marion, Zike
Dinah, 2012. Biologa. Editorial McGrawHill.
Galvn Silvia y Bojrquez Castro Luis. 2002. Biologa. Santillana. p.
70, 71, 74, 107, 108.
generalidades, c. e. la clula eucariota
http://personal.globered.com/cienciaabiertacom/categoria.
asp?idcat=23 enero 1 de 2013.
http://www.bionova.org.es/biocast/tema10.htm
Jimeno Antonio, Ballesteros Manuel y Ucedo Luis. (2003) Biologa.
Santillana. P: 149- 150.
Molist, P., Pombal, M. A., Megas, M., & de la Salud, C. (2011) Atlas
de histologa vegetal y animal. Tcnicas Histolgicas. Depto. de
Biologa Funcional y Ciencias de la Salud Facultad de Biologa
Universidad de Vigo.
Mader Silvanna S., (2008), Biologa 9 ed. Mc Graw Hill, Mxico 153-159
Gerald Karp (2013) Biologa Celular y Molecular Conceptos y
Experimentos, 7 ed. Mc. Grew Hill Ecuation, 279-318
Ramn Benito Fraile A. Sez Francisco J. Biologa Celular, editorial
Mc Graw Hill 3 era edicin
Velsquez Ocampo Martha Patricia (2005) Biologa 1. ST Editorial.
Mxico. p. 106-108, 115, 117, 119, 120, 123.
[45]
46
Vildanova MS, Wang W, Smirnova EA. (2015) Specific organization of

Golgi apparatus in plant cells. Biochemistry (Moscow). 79: 894-906.
doi: 10.1134/S0006297914090065.
Observacin de Clulas de la Mucosa Bucal

Humana
Introduccin
Un organismo realiza varias funciones para mantener su integridad,
la cuales son llevadas a cabo por varios tipos de clulas con diferente
funcin extremadamente complejas y variadas coordinadamente
entre s, entre estas funciones podemos mencionar la detoxificacin,
el movimiento, la reproduccin, el soporte, o la defensa frente a
patgenos, hasta las relacionadas con el pensamiento, las emociones o
la consciencia, las clulas especializadas que cumplen estas funciones
son las del epitelio digestivo, las hepticas, las musculares, las clulas
germinales, las seas, los linfocitos o las neuronas, respectivamente.
Molist, P., Pombal, M. A., Megas, M., & de la Salud, C. (2011).
Fuente: https://biocia.files.wordpress.com/2012/08/celula2.pdf
Robert Hooke public los resultados de sus observaciones sobre

tejidos vegetales, en el ao de 1665, las mismas que realizo en un
microscopio de 50 aumentos. Este investigador fue el primero observar
tejidos de unidades que se repetan a modo de celdillas de un panal,
[47]
48
dicha observacin se bas en una muestra de corcho las misma que

recibieron el nombre de clulas, siendo este el primer hallazgo y el
inicio de una trayectoria para muchos investigadores, permitiendo
realizar futuras investigaciones en el campo de biologa.
Se detalla a continuacin como va evolucionando el descubrimiento
de la clula, observando hasta su estructura celular.
Dcada de 1670: Anton van Leeuwenhoek, observ diversas
clulas eucariotas (como protozoos y espermatozoides) y procariotas
(bacterias).
1745: John Needham describi la presencia de animlculos o
infusorios; se trataba de organismos unicelulares.
Dcada de 1830: Theodor Schwann estudi la clula animal; junto
con Matthias Schleiden postularon que las clulas son las unidades
elementales en la formacin de las plantas y animales, y que son la
base fundamental del proceso vital.
1831: Robert Brown descubri el ncleo celular.
1839: Purkinje observ el citoplasma celular.
Pocos aos ms tarde, en 1855, se concluy definitivamente una
dura polmica acerca del origen de las clulas, descartndose la
generacin espontnea y aceptndose de manera generalizada que
toda clula procede, por divisin, de otra clula preexistente, lo que
qued plasmado en el clebre aforismo de Virchow: Omnis cellulla ex
cellulla. Esta afirmacin fue inmediatamente incorporada a la teora
celular, que en la actualidad es considerada la ms amplia de las generalizaciones que se han hecho en Biologa.
Existe una excepcin a la teora celular constituida por los virus,
parsitos intracelulares obligados, que, si bien son organismos vivos,
tienen un grado de organizacin inferior al celular. De todos modos, se
acepta que los virus descienden evolutivamente de organismos que s
posean tal grado de organizacin.
1857: Klliker identific las mitocondrias.
1858: Rudolf Virchow postul que todas las clulas provienen de
otras clulas.
1860: Pasteur realiz multitud de estudios sobre el metabolismo
de levaduras y sobre la asepsia.
1880: August Weismann descubri que las clulas actuales comparten
similitud estructural y molecular con clulas de tiempos remotos.
Observacin de Clulas de la Mucosa Bucal Humana
49
Se puede mencionar una serie de caractersticas importantes de la

clula como por ejemplo:
La clula es la unidad fisiolgica de la vida.
Todos los seres vivos estn compuestos por clulas o por
segregaciones de las mismas, los organismos pueden ser de una sola
clula (unicelulares) o de varias (pluricelulares) dependiendo de la
cantidad de segregacin celular, estn constituidos por varios tipos
celulares, cada uno de los cuales realiza determinadas funciones especializadas
Todas las funciones vitales giran en torno a las clulas o su
contacto inmediato.
Cada clula es un sistema abierto, que intercambia materia y
energa con su medio.
Las clulas contienen el material hereditario y tambin son una
unidad gentica. Esto permite la transmisin hereditaria de generacin
a generacin.
Tipos de Organizacin Celular.

Se diferencia dos tipos de organizacin celular que estn representados
en dos grandes linaje celulares: las clulas procariotas en el cual
proviene del griego pro = antes, y carin = ncleo y las clulas
eucariotas se deriva del griego que significa eu = verdadero, y carin =
ncleo.
clulas eucariotas
La caracterstica principal que se les designa a esta clula es la

presencia del ncleo rodeado por una membrana doble, el material
gentico se halla separado del resto del contenido celular en el mismo
que se encuentra el adn y arn en el citoplasma, en donde encontramos
organoides complejos denominados organelos.
La presencia de una membrana plasmtica que delimita el contenido
celular, del medio que la rodea.
El citosol est compuesto por una solucin de protenas,
electrolitos y carbohidratos, en la que est presente un sistema de
endomembranas que delimitan: compartimentos en los cuales se
desarrolla el metabolismo celular y sus productos (inclusiones).
50
La presencia en la matriz citoplasmtica de estructuras proteicas

filamentosas (microtbulos, microfilamentos y filamentos intermedios),
que constituyen el citoesqueleto.
La matriz citoplasmtica con los componentes del citoesqueleto,
los organitos, las inclusiones y el citosol, constituyen el citoplasma que
observamos en las clulas con una tcnica de tincin donde se utiliza la
coloracin de rutina que se emplea en histologa es decir HematoxilinaEosina.
Los organitos membranosos son:
Retculo endoplasmtico liso y rugoso.
Aparato de Golgi.
Mitocondrias.
Lisosomas.
Peroxisomas
Los organitos no membranosos incluyen:
Ribosomas
Centrolos
El lmite de la clula est determinado por la membrana
plasmtica. Los organitos son: retculo endoplasmtico, aparato de
Golgi, mitocondrias, ribosomas, lisosomas, peroxisomas y centriolos.
Las inclusiones son lpidos, glucgeno, caroteno, melanina y otros.
A continuacin describiremos la estructura presente en las clulas
eucariotas y mencionaremos aquellas que le son particulares slo a
alguno de estos tipos.
membrana plasmtica
La membrana plasmtica es el lmite externo de la clula, encargada

de controlar el paso de todas las sustancias y compuestos que ingresan
o salen de la clula, transmisin de informacin, produccin de atp
necesarios para la realizacin del transporte selectivo de molculas,
posee receptores y enzimas.
La membrana plasmtica est constituida por una doble capa de
fosfolpidos en el cual se encuentra protenas (integrales y perifricas)
incrustadas en ella.
citoplasma
Es la parte del protoplasma que se ubica entre las membranas

nuclear y plasmtica. Es un medio coloidal de aspecto viscoso en el
cual se encuentran sobrenadando distintas estructuras y organoides.
51
citoesqueleto
Es un conjunto variado de filamentos que forman un esqueleto

celular, necesario para mantener la forma de la clula y sostener a las
organelos en sus posiciones. Es una estructura muy dinmica pues
constantemente se est organizando y desorganizando y esto le permite
a la clula cambiar de forma (por ejemplo para aquellas clulas que
deben desplazarse) o permitir el movimiento de las organelos en el
interior del citoplasma.
ncleo celular
El ncleo contiene el material gentico de la clula es decir adn,

en este sitio es donde dirigen todas las funciones celulares. Est
separado del citoplasma por una membrana nuclear que es doble. Esta
interrumpida por orificios o poros nucleares permitiendo el intercambio
de molculas entre el citoplasma y el interior nuclear. Una zona interna
del ncleo, que se distingue del resto, se denomina nuclolo, se lo
asocia con la fabricacin de los componentes que forman parte de los
ribosomas.
centriolos
Son dos estructuras formadas por filamentos que pueden observarse

en el citoplasma de las clulas animales, su principal participacin
ocurre durante la divisin de la clula (mitosis y meiosis).
Retculo endoplasmtico
Est formado por un sistema complejo de membranas distribuidas
por todo el citoplasma. Se distingue una zona del retculo asociada a
los ribosomas que tiene la funcin de fabricar protenas denominada
retculo endoplasmtico rugoso o granular (rer o reg). La porcin de
retculo libre de ribosomas se denomina retculo endoplasmtico liso
(rel) y tiene la funcin de fabricar lpidos, el que cumple la funcin de
suministro de enzimas para la sntesis de esteroides, la detoxificacin,
y la degradacin del glicgeno.
aparato de golgi
Es un organelo que consta de una forma de sacos membranosos

apilados y tbulos (cisternas) asociados con vesculas de secrecin y de
transicin. Aqu llegan y se modifican algunas protenas fabricadas en
el rer. Los productos son dirigidos hacia diferentes destinos: Golgi es el
director de trnsito de las protenas que fabrica la clula. El aparato de
Golgi esta subdividido en tres regiones o fases: la regin cis: orientada
52
hacia el ncleo celular, la regin intermedia y la regin trans; fase de

maduracin.
Dentro de las funciones que cumple el aparato de Golgi se
encuentran la glicosilacin de las protenas y lpidos para producir glucoprotenas y glucolpidos, seleccin (sorting), destinacin (targeting) y
la sntesis de polisacridos de la matriz extracelular.
lisosomas
Son un tipo especial de vesculas formadas en el complejo de Golgi

que contiene en su interior enzimas que actan en la degradacin de
las molculas orgnicas que ingresan a la clula. A este proceso se lo
denomina digestin celular.
Adems parece ser que la membrana de dichas lisosomas contiene
una protena de transporte especial que utiliza la energa de hidrlisis
del atp para bombear H+ hacia el interior del lisosoma, manteniendo
as el pH de su matriz cercano a 5, que marcan a un lisosoma para la
fusin con vesculas celulares especficas de transporte.
mitocondrias
Este organelo se encuentra rodeado de una doble membrana. En

las mitocondrias se realizan las reacciones qumicas que permiten
generar energa qumica a partir de molculas orgnicas en presencia
de oxgeno. Esta energa es la que mantiene todos los procesos vitales
de la clula, permitiendo llevar a cabo una de las funciones vitales de
la clula que es la respiracin celular.
vacuolas
Son vesculas membranosos presentes en las clulas animales y

vegetales. Sin embargo son mucho ms importantes en las clulas
vegetales y pueden ocupar hasta el 70-90% del citoplasma, su funcin
es la de almacenamiento.
ribosomas
Son organelos formadas por dos subunidades (mayor y menor)

que se originan en el nuclolo y luego se localiza en el citoplasma. Los
ribosomas estn a cargo de la fabricacin o sntesis de las protenas, ya
que en su estructura tiene sitios especficos que permite llevar a cabo
la biosntesis de protenas, tal como se detalla a continuacin:
Sitio E: sitio de unin del arnt
Sitio P: sitio de unin del peptidil arnt
Sitio A: sitio de unin del aminoacil arnt
53
Estos sitios del ribosoma permitirn realizar la traduccin del cdigo

gentico y as formar cada uno de aminocidos con sus respectivos
enlaces polipeptdicos.
peroxisomas
Son orgnulos pequeos, limitados por membranas que se parecen

mucho a los lisosomas, tanto en el tamao como en morfologa y se
distinguen porque tienen una dotacin de enzimas totalmente diferente
ya que contienen oxidasas, como la peroxidasa y la catalasa, que
producen o utilizan perxido de hidrgeno (agua oxigenada, H2O2).
clula procariotas
Se llama procariota o procarionte a las clulas sin ncleo celular

definido, es decir, cuyo material gentico se encuentra disperso en el
citoplasma, reunido en una zona denominada nucleoide.
A continuacin detallaremos la estructura de la clula procariota:
membrana celular
Se refiere a como las clulas eucariticas, excepto en el caso de

las arqueobacterias, estn estructuradas por una bicapa (doble
capa) de lpidos con protenas, pero ms fluida y permeable por no
tener colesterol, propiedad que le permite resistir a los cambios de
temperatura del medio, las bacterias varan la longitud y el grado de
saturacin de las cadenas apolares de los lpidos de la bicapa con el fin
de mantener la fluidez.
En la membrana se encuentran asociadas muchas enzimas, como
las que intervienen en los procesos de utilizacin del oxgeno, cuando
las bacterias realizan la respiracin celular necesitan aumentar la
superficie de su membrana, por lo que presentan pliegues hacia el
interior, los mesosomas.
flagelos
Algunas bacterias tienen uno o ms flagelos bacterianos que sirven

para el movimiento de la clula, muchas especies tienen tambin
fimbrias o pelos (pili), protenas filamentosas cortas que arrojan por
fuera de la pared celular, algunos pili ayudan a las bacterias a adherirse
a las superficies; otros facilitan la unin a otras bacterias para que se
pueda producir la conjugacin, esto es, una transmisin de genes entre
ellas.
54
En el interior celular, dispersos en el plasma, se encuentran una

gran cantidad de ribosomas, un poco ms pequeos que los ribosomas
eucariticos (70S en lugar de 80S), pero con la misma configuracin
general, permitiendo la biosntesis de las protenas.
El nucleoide o zona en que est situado el cromosoma bacteriano
est formado por una nica molcula de adn circular de doble cadena,
unidas con protenas no histnicas. Esta molcula permanece unida
en un punto de la membrana plasmtica. Las bacterias pueden tener
uno o ms plsmidos, pequeos crculos adn autorreplicantes. Ciertos
plsmidos pueden entrar y salir del cromosoma bacteriano; cuando
estn incorporados se llaman episomas siendo un plsmido capaz debe
existir integrado o no integrado en el cromosoma bacteriano, este tiene
la propiedad de replicarse en forma autnoma pero tambin pueden
integrarse al cromosoma bacteriano y duplicarse junto con el resto de
los genes cromosmicos.
La mucosa bucal constituye un tejido epitelial o de revestimiento
de clula. Es de tipo pluriestratificado de descamacin, por lo que es
sencillo obtener muestras de sus clulas para llevar acabo la prctica
de laboratorio, la misma que consiste en realizar la debida tincin para
facilitar la observacin en el microscopio, se destacan por que son
clulas transparentes, y la presencia del ncleo redondeado y central
necesitando dicha tincin.
Objetivo General
Observar las clulas de la mucosa bucal (tejido epitelial o revestimiento
de clula), mediante el uso correcto del microscopio para identificar la
estructura celular de la misma.
objetivo especfico
1- Observar la estructura de la clula de la mucosa bucal al

microscopio y determinar el movimiento de la misma cuando mueve el
carro del microscopio.
2- Identificar y describir la estructura de la mucosa bucal
55
materiales
123456-
Cubeta
Mechero
Porta y cubreobjetos
Pocillo de montar
Cuentagotas
Soporte de Tincin
equipos
1- Microscopio
reactivos
1- Azul de metileno
actividad 1
1- Con la ayuda de un hisopo introducimos en la cara interna de la
mejilla, para realizar la extraccin de la muestra, tratando de extraer la
mayor cantidad de clula del epitelio escamoso.
2- Depositar la muestra sobre una gotita de agua en un portaobjetos.
Hacer suavemente una extensin frotando con el hisopo sobre la porta.
3- Calentar hasta la desecacin, con la ayuda de la llama del mechero,
sin que llegue a quemar, verificar la temperatura del portaobjeto sobre
el dorso de la mano, con el objetivo de no daar la muestra.
4- Colocar el porta sobre el soporte de tincin.
5- Agregar unas gotas de azul de metileno sobre toda el rea de
extensin realizada.
6- Dejar actuar el colorante un par de minutos. Inclinando el objeto,
verter el colorante en la cubeta.
7- Con la ayuda del cuenta gotas, lavamos la preparacin hasta que
no suelte color.
8- Agregar unas gotas de aceite de inmersin en el centro de la
preparacin.
9- Colocar un cubreobjetos, evitando que queden burbujas de aire
entre el porta y el cubre.
10- Fijar la preparacin sobre la platina haciendo uso de las pinzas
de presin.
11- Para la observacin al microscopio comenzamos con el objetivo
de mnimo aumento, que corresponde al objetivo de 10x, seguidamente
utilizaremos con el objetivo de 100x
56
12- La mayora son clulas muertas o clulas en degeneracin,

con la ayuda del azul de metileno teir intensamente el ncleo, y con
menos color el citoplasma, que suele ser algo granuloso.
2
Resultados de observacin de la clula.
actividad
Objetivo
Muestra en fresco
Muestra Teida con Azul de Metileno
Nota:
Adems de clulas de la mucosa es posible observar bacterias de la
mucosa bucal (Streptococos).
57
3
1.- Cules son las partes de la clula que has observado
claramente?
actividad
10
organelo
funcin
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
11
12
2.- Escriba 5 diferencias entre clulas eucariotas y procariotas

celula procariota
1
2
3
4
5
ceula eucariota
58
Conclusin
____________________________________________________________________
____________________________________________________________________
____________________________________________________________________
____________________________________________________________________
_______________________________________________
Recomendaciones
____________________________________________________________________
____________________________________________________________________
____________________________________________________________________
____________________________________________________________________
_______________________________________________
Bibliografa
Megas Manuel, Molist Pilar, Pombal Manuel A., Departamento de

Biologa Funcional y Ciencias de la Salud. Facultad de Biologa.
Universidad de Vigo. 2014
Ramn Benito Fraile A. Sez Francisco J. biologa celular, editorial
Mc Graw Hill 3 er edicin
Biggs Alton, Hagins Crispen; Holliday William, Kapicka Chris, Lundgren
Linda, Haley Ann Mackenzie, Rogers William, Sewer Marion, Zike
Dinah, 2012, Biologa, editorial McGrawHill.
Albert, Bray, Hopkin, Johnson, Lewis, Raff, Roberts, Walter (2011).
Introduccin a la Biologa Celular, Editorial Mdica Panamericana.
Molist, P., Pombal, M. A., Megas, M., & de la Salud, C. (2011). Atlas
de histologa vegetal y animal. Tcnicas Histolgicas. Depto. de
Biologa Funcional y Ciencias de la Salud Facultad de Biologa
Universidad de Vigo.
Robetis Eduardo D.P. (2005), Biologa Celular Molecular de Robertis, 1
ed. Grupo ilmsa s.a. Buenos Aires Argentina 445-458
[59]
Recuento de Leucocitos
Introduccin
La sangre es un lquido biolgico que tiene gran importancia fisiolgica
ya que en ella se encuentran clulas y sustancia importantes para la
vida.
Este lquido es de color rojo brillante en las arterias por la presencia
de oxgeno y de color rojo oscuro en las venas por la gran concentracin
de CO2
La sangre es bombeada por el corazn a travs de una compleja red
de venas y arterias.
Funciones de la Sangre
La sangre puede cumplir las siguientes funciones:
Transporta el oxgeno desde los pulmones al resto del organismo,
vehiculizado por la hemoglobina contenida en los glbulos rojos.
Transporta el anhdrido carbnico desde todas las clulas del
cuerpo hasta los pulmones.
Transporta los nutrientes contenidos en el plasma sanguneo,
como glucosa, aminocidos, lpidos y sales minerales desde el hgado,
procedentes del aparato digestivo a todas las clulas del cuerpo.
Transporta mensajeros qumicos, como las hormonas.
Defiende el cuerpo de las infecciones, gracias a las clulas de
defensa o glbulo blanco.
[61]
62
Responde a las lesiones que producen inflamacin, por medio de

tipos especiales de leucocitos y otras clulas.
Coagulacin de la sangre y hemostasia: Gracias a las plaquetas y
a los factores de coagulacin.
Rechaza el trasplante de rganos ajenos y alergias, como respuesta
del sistema inmunitario.
Homeostasis en el transporte del lquido extracelular, es decir en
el lquido intravascular. Jimnez Tapia, G. A. (2012).
La sangre est compuesta por muchos tipos de corpsculos; estos
elementos constituyen alrededor de un 45% de la sangre, lo que se
conoce con el nombre de hematocrito.
Hombre adulto: 40 a 54 %
Mujer adulta: 37 a 47 %
El otro 55% es plasma sanguneo, un fluido amarillento que
conforma el medio liquido de la sangre compuesto por agua y sales.
Las caractersticas que posee la sangre se detallan a continuacin:
El pH normal de la sangre arterial humana es aproximadamente
de 7,40.
La sangre es alrededor del 7% del peso del cuerpo humano
promedio, por lo tanto, un adulto tiene un volumen de sangre de
aproximadamente cinco litros, de los cuales 2,7-3 litros son plasma.
El tejido sanguneo se encuentra conformado por una porcin
que recibe el nombre de elementos formes, que estn constituidos por
eritrocitos, glbulos blancos, plaquetas:
glbulos rojos o eritrocitos
En los mamferos, estos corpsculos carecen de ncleo y orgnulos,

por lo cual no son clulas estrictamente hablando.
Contienen la hemoglobina de la sangre y son los encargados de
distribuir el oxgeno.
Los glbulos rojos poseen protenas que definen los distintos tipos
de sangre.
Los glbulos rojos tambin pueden llamarse hemates o eritrocitos.
Su valor normal est entre 4.300.000 y 5.900.000 por mililitro. Se
forman en la mdula sea roja.
plaquetas o trombocitos
Son las responsables de la cicatrizacin de las heridas (coagulacin).

Las plaquetas tambin se llaman trombocitos. Su valor normal se
63
encuentra entre 130.000 y 450.000 por mililitro. Son clulas encargadas

de cerrar los vasos sanguneos cuando se produce una herida formando
un cogulo en el lugar de la lesin encerrando glbulos rojos en una
red, y ayudan as a su cicatrizacin.
glbulos blancos o leucocitos
Los glbulos blancos o tambin llamados leucocitos, circulan por

la sangre para combatir las infecciones o cuerpos extraos, aunque
al tratarse de una parte fundamental de las defensas inmunitarias
de nuestro organismo, en algunas ocasiones pueden tambin atacar
los tejidos normales del propio cuerpo, dando como resultados las
enfermedades autoinmune perjudiciales para el organismo.
Fuente: www.ciencia1.com400 356
El origen de las diferentes formas de leucocitos se produce a partir

de clulas madre de la mdula sea, aunque tambin se originan en el
tejido linftico.
Forman parte del sistema inmunolgico; son los encargados de
destruir los agentes infecciosos.
Los glbulos blancos tambin pueden llamarse leucocitos. Su
valor normal est entre 3.500 y 10.000 por mililitro.
Tienen como funcin principal defender al organismo contra las
infecciones.
El aumento en sangre se denomina leucocitosis y su baja,
leucopenias expresan estados patolgicos.
64
Se clasifican en dos grupos

Granulocitos polimorfonucleares (pmn)
Tienen grnulos especficos en su citoplasma
Neutrfilos (60-70%)
Eosinfilos (4%)
Basfilos (-1%)
agranulocitos
Linfocitos (20-25%)
Monocitos (3-8%)
Carecen de grnulos especficos.
Los granulocitos como los agranulocitos poseen grnulos
inespecficos (azurfilos), que hoy en da se sabe que son lisosomas
permitiendo cumplir con la degradacin de material extrao que invade
el organismo.
neutrfilos
Los neutrfilos son considerados de tipo granulocito, en el mismo

que se encuentra en porcentaje de 50-60% en un paciente sano, tiene
como funcin principal fagocitar a bacterias y hongos. La propiedad
de locomocin (por seudpodos) por la cual los neutrfilos atraviesan
el endotelio vascular y membrana basal migrando a los tejidos por
factores quimiotcticos producidas por las bacterias o el dao tisular,
permitiendo atraer a los neutrfilos para combatir dicho dao celular
o tisular.
eosinfilo
Es un leucocito granulocito pmn semejante al neutrfilos, el mismo

que tambin responde a factores quimiotcticos, reconocen e ingieren el
mismo tipo de partculas, poseen movimientos ameboides, permitiendo
la locomocin del mismo.
La funcin de los eosinfilos est ligada a los procesos parasitarios
y alrgicos, siendo pieza fundamental al momento de un diagnstico de
laboratorio al momento de encontrarse elevados porcentajes los mismo
que se encuentra en un organismo sano entre 1 5%.
Presenta ncleo bilobulado, citoplasma con grandes grnulos color
naranja, permitiendo la diferenciacin al momento de realizar la tincin
de Wright.
65
basfilo
Es un leucocito granulocito pmn, se encuentra en escasas

proporciones entre 0 1% en la sangre perifrica, tienen capacidad
fagocitica poco potente, se desplazan en piel y cavidades, intervienen en
la respuesta inmunitaria liberando histamina (mediador quimiotctico)
en lo cual se activa en el estado de alergia.
Presenta un ncleo lobulado poco visible por los grnulos gruesos del
citoplasma con grandes grnulos densos color negro purpura.
Leucocitos mononucleares agranulocitos:
Se clasifican en dos grandes grupos: Linfocitos y Monocitos.
linfocitos
Los linfocitos ms abundantes despus de los neutrfilos en sangre

perifrica entre el 30- 45%, de los cuales podremos decir que el 70
75% son linfocitos T y 15-20% linfocitos B, y las clulas nk seran el
resto. Son responsable de la inmunidad adaptativa o adquirida de tipo
especfico. Tienen receptores para antgenos (tcr) para el reconocimiento de los antgenos sustancias extraas para el organismo.
Los linfocitos se encargan de la produccin de anticuerpos y de
la destruccin de clulas anormales, para llevar a cabo esta valiosa
funcin deben interactan con los macrfagos destruyendo del antgeno
invasor. Los linfocitos poseen grupos de diferenciacin denominados
cd, siendo molculas de membrana que los diferencian del resto.
Citoplasma azul claro con borde azulado Ncleo redondo y grande
color violeta-azul, ocupa casi toda la clula Su elevacin en sangre se
denomina linfocitosis Su disminucin en sangre se denomina linfopenia
linfocito t
Es el encargado de los fenmenos que caracteriza la inmunidad

celular, su origen es en el Timo, detectan antgenos proticos asociados
a molculas del complejo mayor de histocompatibilidad (cmh). Segn
los cd se dividen en:
linfocitos t cd4
Reconocen antgenos presentados por el mhc- II. Tambin se les

llama linfocitos helper o ayudantes que participan en las sinapsis
inmunitarias. Cuando se activan los linfocitos cd4, diferencindose a su
vez en linfocitos efectores, que se distinguen por el tipo de citoquinas
entre estos tenemos:
66
Th1, que migran a los tejidos infectados y colaboran en la

activacin de los macrfagos, son importantes en la defensa frente a
los microorganismos intracelulares y la inflamacin;
Th2, que permanecen sobre todo en los tejidos linfoides y colaboran
en la activacin de los linfocitos B; segregan principalmente IL-4 (que
estimula la secrecin de Ig-E, que a su vez activa los mastocitos) e IL-5
(que activa los eosinfilos); son importantes en las reacciones alrgicas
y en la defensa frente a parsitos.
Th17, segregan IL-17, adems de IL-22; es el principal mediador
en algunas reacciones alrgicas, en investigaciones realizadas est
implicado en el desarrollo de enfermedades como la esclerosis mltiple,
la artritis reumatoide y la enfermedad inflamatoria intestinal.
linfocitos t cd8
Este grupo de linfocitos se dividen en Citotxicos y Supresores:
Los Citotxicos son responsables de eliminar clulas infectadas
con virus y clulas tumorales. Su activacin se la debe a la interleuquina
IL2.
Las Supresoras tienen la funcin de controlar y parar la respuesta
inmune. Actan sobre los linfocitos t cd4, linfocitos B y en algunas
ocasiones en los macrfagos. Gerald Karp ( 2013)
linfocitos b
Son los responsables de la inmunidad Humoral, es decir la

produccin de anticuerpos que neutralizan un antgeno especifico. Son
activados por los Linfocitos t cd4 para la produccin de inmunoglobulinas con actividad de anticuerpos con alta afinidad por el antgeno que
lo est afectando, entre estos anticuerpos o conocidos como inmunoglobulinas detallamos a continuacin
inmunoglobulinas
Se clasifican en cinco clases:

Inmunoglobulina G (IgG): El anticuerpo de mayor concentracin
en sangre, teniendo la capacidad de atravesar la placenta y confiere
inmunidad al feto. Como respuesta frente a ataques de virus, bacterias
y hongos es sintetizada por el organismo.
Inmunoglobulina A (IgA): Anticuerpos localizados en las mucosas
externas e internas.
Inmunoglobulina M (IgM): Este anticuerpo es el de respuesta
inmune primaria frente a una infeccin o un ataque de agente extrao.
67
Inmunoglobulina D (IgD): se encuentra en muy baja concentracin,

se la considera que es receptor de los linfocitos B.
Inmunoglobulina E (IgE): Es un anticuerpo que se pieza
fundamental en los procesos alrgicos, con respuesta inmune efectiva
contra parsitos. Sylvia S. Mader (2008)
monocitos
Son leucocitos agranulocitos mononucleares que encuentran

entre el (1-6) %. Es el leucocito de mayor tamao. Los Monocitos son
clulas fagocticas poseen gran capacidad bactericida, frente estmulos
de sustancias qumicas seguidos de los neutrfilos en la reaccin
inflamatoria. Cumple funcin de la fagocitosis aumentan de tamao
y pueden fijarse a los tejidos del bazo, hgado y pulmn, dando lugar
a los macrfagos tisulares que forman el sistema retculo endotelial
encargado de remover el material extrao que circula en la sangre.
Tienen un ncleo arrionado de color violeta-azulado, citoplasma
abundante de color gris azulado.
Para el conteo de leucocitos, se usan mtodos sistemticos que son
ms rpidos y precisos, y los mtodos manuales.
Todo mtodo manual de recuento celular incluye 3 pasos:
1- Dilucin de la sangre
2- Muestreo de la sangre diluida en un volumen
3- Recuento de clulas en ese volumen
Para el recuento de leucocitos se cuentan los 4 cuadrados de las
esquinas, que corresponden a los campos 1, 3,6 y 9 en la cmara de
Neubauer
Para las prcticas utilizaremos diluciones, la solucin que
obtenemos es de 1/20. Se utiliza como diluyente el lquido de Turk. El
lquido de Turk es hipotnico de modo que se destruyen los hemates y
as no entorpecen en el recuento.
Es un poco difcil distinguir los leucocitos de los restos de
membranas de los hemates hemolizados. Se debe tener en cuenta
que los leucocitos son ms refringentes esto quiere decir que son ms
brillantes al moverlo con el microscopio que los restos de hemates.
Se debe observar la presencia de la membrana citoplasmtica y de la
membrana nuclear como lneas finas y brillantes.
68
Objetivo General
Realizar el recuento de leucocitos por milmetro cbico de mediante
aplicacin de la metodologa para un recuento para interpretar el
resultado.
objetivos especficos
1. Manipular correctamente el microscopio.

2. Determinar del nmero de leucocitos presentes en un volumen
determinado de sangre analizada.
materiales
Tubos de ensayo de 10ml y 5ml

Lpiz graso
Equipo para venopuncin (Tubo edta)
Papel parafilm
Pipeta automtica de 20ul, 50ul, 500ul
Cmara de Neubauer
Gasas
equipos
Microscopio
reactivos
Lquido de Turk
sustancias
1 Alcohol al 70%
2 Sangre venosa
69
1
1. Realizamos a la puncin venoso para debida extraccin de la
muestra la misma que se depositar en un tubo de ensayo de contenga
edta, o si utilizamos la tcnica de vacutiner necesitaremos el tubo de
ensayo de color lila.
2. Con la ayuda de la pipeta automtica de 500 l y otra de 20
l, realizamos una dilucin 500l de lquido Turk con 20l de sangre
mezclamos con mucho cuidado.
actividad
/
;--:~~/
3. Llevamos con la pipeta automtica de 50l a la cmara de
Neubauer.
4. Dejar reposar 3 minutos hasta que los leucocitos se sedimenten.
Colocar en la platina del microscopio y enfocar la cuadricula a 10x,
y contar en los 4 cuadrados angulares.
En el recuento se incluyen las clulas que cubren o tocan por
dentro o por fuera las lneas limitantes superior e izquierda en el cuadro
pequeo de recuento y no se consideran las clulas que se encuentran
en los lmites inferior y derecho. La exploracin se la realizar como se
muestra en la figura explicativa que continuacin se detalla:
70

resultados
Los recuentos de leucocitos, se expresan como concentraciones,

que en este caso seran nmero de clulas por unidad de volumen de
sangre, que es 1mm3
Despus de contar los glbulos blancos de los 4 cuadrados
angulares, se suman el total de ellos y con dicha cantidad de hace el
siguiente clculo:
--+..,.-...~
.........,,..,. .......... H- ............

....,,:::-+..,...."'"'"""~-+----
1-~.....-.....................-'-'~HTitrr=i~l-rtr=-r---T--.-'-'f"--:~1
1-~+:::........,::-'-'.~-=-~~
....... f"-'i~'"'='""~""-=,....._-:-+----1
1
1--
Frmula para recuento de leucocitos:

Part. por ul volumen (Partculas contadas)
Sup Cont.(mm2) x Pr of Cmara (mm)
Ejemplo:
Clulas recontadas: 161 leucocitos
Superficies recontada 4 cuadrados (= 4x 1mm2)= 4mm2
Profundidad de la cmara: 0,1mm
actividad 2
Resultados de observacin de los leucocitos.
RECUENTO LEUCOCITARIO
71
Conclusin
____________________________________________________________________
____________________________________________________________________
____________________________________________________________________
____________________________________________________________________
_______________________________________________
Recomendaciones
____________________________________________________________________
____________________________________________________________________
____________________________________________________________________
____________________________________________________________________
_______________________________________________
3
Calcular el nmero de glbulos blancos, en la muestra en estudio,
aplicando la muestra descrita anteriormente.
actividad
Bibliografa
Campuzano Maya, G. (2008). Utilidad del extendido de sangre perifrica:

los leucocitos. Med. Lab, 14(9/10), 411-455.
Maya, G. C. (2007). Del hemograma manual al hemograma de cuarta
generacin. Medicina & Laboratorio, 13: 511-50.
Ortiz ngel (2011), Manual de Laboratorio de Hematologa y Morfologa
Celular.
Soliz Dennis, Jerves Teodoro, Encalada Vernica, Guerrero Andrea y
Chacn Karla (2012) Manual de Prcticas de Biologa.
Eldra P. Solomon, Linda R. Berg, Diana W. Martin (2013), Biologa, 9
Ed. cengage Learning, Mxico, pg. 978 -979.
Sylvia S. Mader (2008), Biologa, 9 ed. Mc. Graw Hill, Mxico 638-643
Gerald Karp (2013) Biologa Celular y Molecular 7 ed. Mc. Graw Hill
Ecuation
Eduardo D.P. de Robertis 8 20059 Biologa Celular Molecular de
Roberts 1. Ed. Grupo ILMSA S.A. Buenos Aires Argentina
Cecie Starr/ Raplh Taggart. (2009) Biologa la Unidad y diversidad de
la vida, 10 ed. Copy Right, Mexico pag. 696
[73]
Extraccin de
adn
Introduccin
En periodo entre los aos de 1869 -1943, fue la era que se abri con
el descubrimiento de un nuevo compuesto fosfrico orgnico, en las
clulas ricas en materia nuclear. Su primera designacin es nucleina
y luego cromatina, se demostr luego que este compuesto constaba de
cido desoxirribonucleico.
En 1953, James Watson (1928) y Francis Crick (1916-2004)
combinaron los datos qumicos y fsicos del dna, y propusieron un
modelo estructural del dna que publicaron en la revista Nature. Piro,
O. E. (2012). Hay que reconocerles el mrito de estos grandes investigadores sin hacer ningn experimento, analizaron la estructura
y permitieron conocer la complejidad de las bases nitrogenadas, los
enlaces de puentes de hidrgenos con la pentosa, bases nitrogenadas y
grupo fosfatos, dando como resultado la magnfica estructura del adn.
Estos hallazgos fueron importantes para los futuros estudio genticos.
Los cidos nucleicos son grandes polmeros formados por la
repeticin de monmeros conocidas como nucletidos, unidos mediante
enlaces fosfodister. Se forman, as, largas cadenas; algunas molculas
de cidos nucleicos llegan a tener un tamao extremadamente grande.
Los cidos nucleicos almacenan la informacin gentica de los
organismos vivos y son los responsables de la transmisin hereditaria.
Los nucletidos tienen funciones, entre ellas:
El transporte de tomos en la cadena respiratoria mitocondrial
[75]
76
Intervenir en el proceso de fotosntesis, transporte de energa

principalmente en forma de adenosin trifosfato (atp)
Transmisin de los caracteres hereditarios.
Replicacin de su propia molcula
Sntesis de arn (transcripcin)
Transferencia de la informacin gentica.
Los cromosomas poseen muchos genes que corresponden a
las unidades de herencia, esta informacin gentica se encuentra
codificada en trozos de la molcula de adn. El cido desoxirribonucleico
es una molcula simple y de aspecto semejante a una escalera doblada
en forma de hlice. Chomali, F., Madrid, R., Reppeto, G., Rigotti, A. R.
E., Santos, M., & Vicua, R. (2000).
El cido desoxirribonucleico est estructurado por:
a) Un azcar (desoxirribosa) que tiene 5 tomos de carbono
enumerados del 1 al 5, y que en el carbono 3 tiene un grupo hidroxilo
(oh).
b) Un grupo fosfato (P), unido al azcar por el carbono 5.
c) Una base nitrogenada, unida al azcar por el carbono 1. Las
hebras de adn son como una cuerda o un cable de telfono. Esta
espiral es una caracterstica central del adn. adn puede estar en un
ambiente relajado o un estado en espiral, tambin como son dos
cadena enrolladas en forma de hlice, vamos a diferencia una cadena
que comienza una en sentido 5 3 y la complementaria en el sentido
inverso, que corresponde a la anti paralela.
grupos fosfato
H
1
1p-0
o
H-0-
!
1
ACICIOf'O1 f"OltCO
Son los que dan la caracterstica cida al nucletido, al tener

nucletidos con un solo radical (monofosfato) son estables. Cuando
el nucletido contiene ms grupos fosfato (difosfato, trifosfato) se
vuelve inestable, como sucede con el adenosin trifosfato o atp. En
consecuencia, se rompe un enlace fosfato y se libera la energa que lo
Extraccin de ADN
77
une al nucletido. Los grupos fosfato forman parte de la bicapa lipdica

de las membranas celulares.
pentosa
En el caso del cido desoxirribonucleico (adn) es la 2-desoxi-Dribosa y en el caso del cidos ribonucleicos (arn) es la D-ribosa.
OH1
"::C-H
O OHr
"
Ot1
2..oOt OU...().n.OO
"
bases nitrogenadas
Tambin constituyendo la estructura del adn encontramos las bases

nitrogenadas que se encuentran clasificadas en pirimidnas y pricas.
...
1
.:o[) cr 0..
e
CI
.IDfll ..
W.UCWl..
''I
o
D
e
'"
CUAJfllA
;'
'CI
......
MfnOl.QO
r' .
1
...............
CllOI ..
NC.A
NllllOC-l!OIOllllJIMA
PIRIMIDCAS
PRICAS
Las bases presentes en el.!i.,ON son: adeuiua [A]. rimina [T},citosina (q y guanina
(G). Para recordar como aparean
e nrre si las bases podernos pensar en las
iniciales de dos grandes pe rsonaies del tango: .:..ntbal Trolo (adenina es la base
complementaria de timina] y Carlos Card el ( clrosina es la coruplemenrarla a
guanina).
78
Se debe considerar la parte fundamental de la complementariedad

de bases nitrogenadas, lo que quiere decir:
La Adenina siempre va ir enlazada con doble enlace de hidrogeno
con la timina; la Guanina con tres enlaces de hidrogeno enlazada con
la Citosina. Solomon, Berg, Martin (2013)
La forma en que se disponen las cuatro bases nitrogenadas a lo largo
de toda la cadena es la responsable de codificar la informacin gentica de
la clula, con instrucciones para controlar el desarrollo y las funciones del
individuo. Algunas protenas como las histonas y factores de transcripcin
se adosan a la molcula de adn con el fin de regular su expresin.
H
<NxS
-;--O----
HO-r..b 0 ---"N
l._.),
1
~'H~
+
H,O
CNH,
) ..
H,O
:,
V~I
t
0
N C'llidilrlI'
H
l!'
OH
u.tdll'llfMf-
OH OH
'i'"
1~.v.~ H
HO-P-0
llOUlMA
H
J
Ott
O -P-0
_,
NH,
~N
'"~'o
~>]
0Wl1.
OH
Formacin de un fngm.nto 6- ARN constituido por tttS nudetklos 1,11nl6os en la se-
cuenci AU C:. e A = adnlna. U uradJo. C
dtosln.a..)
propiedad del adn

desnaturalizacin y renaturalizacin
La estructura en doble hlice del adn es slida, la estabilidad de

la doble hebra se la brinda dos tipos de fuerzas qumicas: los enlaces
de hidrgeno y los enlaces fosfodiester, as como en la distribucin
espacial de las componentes.
El proceso biolgico por el cual se rompen los enlaces de hidrgeno
de una doble hebra dando lugar a dos cadenas simples de adn, se
denomina desnaturalizacin (melting o reannealing). Este proceso se
puede simular en el laboratorio calentando la solucin en la que estn
Extraccin de ADN
79
las dobles hebras de adn, hasta una temperatura comprendida entre 85

y 94 grados centgrados. Eduardo D.P. deRobertis ( 2005)
El proceso inverso, denominado renaturalizacin (annealing), se
consigue sometiendo la solucin con cadenas simples complementarias
a un enfriado lento hasta aproximadamente los 55 grados centgrados,
a fin de permitir que las bases nitrogenadas complementarias se vayan
uniendo a travs de los correspondientes enlaces de hidrgeno.
La desnaturalizacin del adn puede ocurrir, tambin, por variaciones
en el pH, llevando a una solucin con un pH mayor a 13, para que de
la rotura de los puentes de hidrogeno, este proceso depende de pares
Citosina Guanina, puede ser reversible, proceso conocido como renaturalizacin. Geard Karp ( 2013)
Objetivo General
Obtener los filamentos de adn de una muestra en anlisis, mediante la
desnaturalizacin del adn, para comprender importante propiedad que
se le atribuye.
objetivos especificos
1) Utilizar una sencilla tcnica para extraer el adn de un producto

natural en este caso de la frutilla.
2) Observar la estructura del adn
3) Comprender cmo se lleva a cabo la desnaturalizacin del adn,
siendo una de las propiedades ms importante de este cadena
materiales
Tubos de ensayo
2 Pipetas de 10 ml
Erlenmeyer 100ml
Vaso de precipitacin de 100ml
sustancias
Etanol 70% o Isopropanol 95%

Agua mineral
Bicarbonato de Sodio
Detergente
Agua destilada
Cloruro de Sodio
80
1.
1) Colocar 1ml de agua destilada y 6 frutillas, procedemos a licuar
para romper las membranas de la clula para liberar el adn contenido
en el ncleo, cloroplasto, mitocondrias
2) Preparar el tapn de Lisis
actividad
materiales
a) de litro agua mineral

b) 2 cucharaditas rasas de sal de mesa (cloruro de sodio)
c) 6 cucharadas rasas de Bicarbonatos de Sodio
d) 2 chorritos de detergente
e) Coloca agua mineral en un Erlenmeyer, 2 cucharadas de Cloruro
de sodio, para neutralizar la carga negativa del grupo fosfato del adn
mezclamos.
f) Luego agregamos 6 cucharadas de bicarbonato de sodio, para
evitar que el pH se vuelva muy bajo.
g) A continuacin colocamos detergente para romper la membrana
de fosfolpidos.
h) Mezcla 10ml de Extracto de frutilla + 20ml de tapn de lisis,
agitamos por 2 minutos, con la finalidad que actu y disuelva la
membrana para obtener el adn del ncleo mitocondrias y cloroplasto,
filtramos.
i) Vierte 5ml de la solucin en un tubo de ensayo y a continuacin
colocamos el alcohol del 95% inclinados los tubos muy despacio para
se desplace por la pared del tubo.
j) Observa en la interfase entre la frutilla y el alcohol, la presencia
de unos filamentos que corresponde a adn.
k) Con una pinza extrae el adn.
Extraccin de ADN
2.
Resultados de observacin de las cadenas de
81
actividad
adn.
Extraccin del ADN
3.
1) Dibuje y detalle la estructura del cido desorribonucleico y del
cido ribonucleico
2) Realice un cuadro de comparaciones entre el cido desorribonucleico y del cido ribonucleico
actividad
Conclusin
____________________________________________________________________
____________________________________________________________________
____________________________________________________________________
____________________________________________________________________
_______________________________________________
Recomendaciones
____________________________________________________________________
____________________________________________________________________
____________________________________________________________________
____________________________________________________________________
_______________________________________________
Bibliografa
adn, m. m. b. e.
4. Estructura y procesamiento del adn.

Chomali, F., Madrid, R., Reppeto, G., Rigotti, a. r. e., Santos, M., &
Vicua, R. (2000). Proyecto del genoma humano. Medicina y tica,
11, 121.
Claros, g. o. n. z. a. l. o., Saladrigas, m. v., & Gonzlez-Halphen, D.
(2004). Vocabulario ingls-espaol de bioqumica y biologa
molecular. Revista de Educacin Bioqumica, 23, 42-54.
Fierro, A. (2001). Breve historia del descubrimiento de la estructura del
DNA. Revista Mdica. Abril, 12(2).
Eldra P. Solomon, Linda R. Berg, Diana W. Martin (2013), Biologa, 9
Ed. cengage Learning, Mxico, pg. 263-281.
Gonzlez-Beltrn, F., Mercader-Martnez, J., Jimnez-Moguel, J. M., &
Morales-Ramrez, P. La cintica de desnaturalizacin como mtodo
para estimar rupturas radio-inducidas al adn.
Partida, j. n., & Enrquez, m. m. (2011). cidos nucleicos. Biologa
molecular, 25.
Piro, o. e. (2012). Breve historia del adn, su estructura y funcin. Dpto.
de Fsica e Instituto iflp.
Trivio, j. e. o., & Rojas, c. c. (2011). Fundamentos de computacion
con adn. Ingeniera e investigacin
Watson James D. (1980). The Double Helix. A personal Account of the
Discovery of the Structure of dna. A Norton Critical Edition. Norton.
New York, London.
Watson jd and Crick fhc (1953). A structure for Deoxiribose Nucleic
Acid. Nature April
[83]
84
Sylvia S. Mader (2008), Biologa, 9 ed. Mc. Graw Hill, Mxico pg.
224-229
Ecuation pg. 400
Eduardo D.P. de Robertis 8 20059 Biologa Celular Molecular de Roberts
1. Ed. Grupo ILMSA S.A. Buenos Aires Argentina pg. 23-27
Cecie Starr/ Raplh Taggart. (2009) Biologa la Unidad y diversidad de
la vida, 10 ed. Copy Right, Mexico pg. 216-223
Mitosis de Clulas Vegetales
Introduccin
Todos los organismos vivos utilizan la divisin celular, bien como
mecanismo de reproduccin, o como mecanismo de crecimiento del
individuo.
Todas las clulas, segn estableci Virchow en 1858, se forman
por divisin de otra ya existente. Esta afirmacin constituye uno de
los postulados de la teora celular. Todas las clulas, desde que surgen
por divisin de otra hasta que se dividen y dan lugar a dos clulas
hijas pasan por una serie de etapas que constituyen el ciclo celular. Su
duracin vara de unas clulas a otras.
En la interfase del ciclo de divisin celular podemos distinguir tres
perodos:
fase g1
Es un estado en el cual se caracteriza por ser activo genticamente,
el adn se transcribe y se traduce, dando lugar a protenas necesarias
para la vida celular y sintetizando las enzimas y la maquinaria necesaria
para la sntesis del adn.
fase s
Es la fase en la cual se duplica por entero el material hereditarios, el

cromosoma pasa de tener un cromatidio a tener dos, cada uno de ellos
compuesto por una doble hlice de adn producto de la duplicacin de la
original, como la replicacin del adn es semiconservativa, las dos dobles
hlices hijas sern exactamente iguales, y por tanto los cromatidios
hermanos, genticamente idnticos.
[85]
86

fase g2
En esta fase se realiza la preparacin de todos los componentes

de la divisin celular, al final de esta fase, se produce una seal que
dispara todo el proceso de la divisin celular.
La divisin celular se compone de dos partes, la divisin del ncleo
(cariocinesis, o mitosis) y la del citoplasma (citocinesis). La divisin del
ncleo es exacta, se reparte equitativamente el material hereditario,
mientras que la citocinesis puede no serlo, es decir el reparto de
orgnulos citoplsmicos y el tamao de las dos clulas puede no ser
equitativo ni igual. Curtis (2007).
Durante la mitosis el adn va a estar totalmente empaquetado y
supernrollado, inaccesible a polimerasas y transcriptasas, es por ello
que toda la actividad funcional del adn ha de realizarse en la interfase
previa a la cariocinesis.
Al final de la mitosis, la clula entra en interfase, si esa clula ya no
se va a dividir ms, entra en lo que se denomina perodo G0, si por el
contrario esa clula va a volver a dividirse entra de nuevo en el perodo
G1 previo a la sntesis del adn, e inicindose un nuevo ciclo de divisin
celular.
Las etapas de la mitosis en dividen en:
profase
La clula prxima a dividirse muestra cambios en los cromosomas,

antes de la divisin celular, los cromosomas son tan finos que son
prcticamente imposibles de ver; los cromosomas en una clula madura
para la divisin ya se han duplicado antes de engrosarse y volverse
espinales. Al mismo tiempo, la membrana celular y el ncleo parecen
desintegrarse y ya no se pueden ver. De los materiales nucleares y
citoplasmticos se organizan fibras que luego se ordenan para formar
la estructura conocida como huso.
Metafase
Es cuando la membrana nuclear y el nuclolo ya no son visibles,
los cromosomas se acercan al huso, aqu se disponen ms o menos
en un solo plano y casi en ngulos rectos con respecto a las fibras del
huso.
anafase
En esta etapa an los cromosomas que son estructuras dobles y que

cada mitad se conoce como una cromtica permanecen alineadas en el
87
centro de la clula solamente por poco tiempo, cuando las dos cromtidas
de cada par se separan cada una hacia los extremos opuestos de las
clulas una fibra del uso parece estar unida a un determinado punto de
cada cromtida, las fibras parecen contraerse y alejarse del centro a las
cromtidas, finalmente las cromtidas llegan a los extremos expuestos
de las clulas y se separan de las fibras del huso.
telofase
Los cromosomas nuevos se agrupan en los extremos opuestos de

la clula y la membrana nuclear y el nuclolo comienza a formarse
nuevamente. Mientras la ltima fase de la mitosis tiene lugar en el
ncleo, en el citoplasma se realiza el otro proceso.
citocinesis
La citocinesis es el proceso por el cual el citoplasma de la

clula madre queda distribuido entre las 2 clulas hijas y estas se
independizan por la formacin de la membrana celular. La separacin
de las 2 clulas hijas es diferente en clulas animales y vegetales. Cecie
Starr, Christiane A. Evers, Lisa Starr (2013).
Objetivo General
Observar la mitosis en clulas vegetales mediante la utilizacin de
tejidos meristemticos, en los que las clulas se multiplican constantemente, por lo que ser fcil sorprender algunas clulas en distintas
fases mitticas.
objetivo especifico
1) Analizar los eventos morfolgicos ocurridos durante los procesos

de divisin celular.
2) Identificar en qu fase del ciclo celular de la mitosis se encuentra
la muestra analizada.
materiales
1)
2)
3)
4)
5)
6)
Races de cebolla/Alubias, garbanzos o lentejas

Vaso de precipitado
Palillos de dientes
Placa de Petri
Papel de filtro
Estufa
[87]
88
7) Cuchilla
8) Vidrio reloj
9) Aguja enmangada
10) Mechero
11) Portaobjetos
12) Cubreobjetos
reactivos
Orcena actica
ClH 1N
equipos
Microscopio
actividad 1.
Previamente de la prctica, conseguir races en crecimiento se
coloca el bulbo de cebolla (eliminado las races secas) sobre un vaso de
precipitado (si es necesario se sujeta mediante unos palillos). Se llena
el vaso con agua hasta que toque superficialmente la zona donde van a
crecer las raicillas. Despus de 2 o 3 das empezarn a crecer las races.
Como material biolgico se utilizar semillas de diversas especies:
alubias, garbanzos, lentejas, etc., para que se lleve a cabo la germinacin
de las semillas, colocaremos en una placa de Petri con papel de filtro
empapado de agua. Las placas las llevamos a la estufa a 23-25C para
que se produzca la germinacin. En caso de no disponer de estufa
en el laboratorio, se proceder de la siguiente manera: una vez listas
las semillas en la placa de Petri las introducimos la refrigeradora 48
horas y despus las dejaremos a temperatura ambiente. Gracias al
choque trmico aceleraremos el proceso de germinacin. Cuando las
races tengan 1 cm se retiran de la placa teniendo en cuenta utilizar las
semillas no contaminadas por hongos.
1. Empieza observando el proceso de divisin celular o mitosis. Para
esta prctica utilizaremos como material biolgico raicillas de cebolla,
aunque tambin se podran utilizar las races obtenidas a partir de
otros bulbos (ajos, puerros, jacintos, tulipanes, etc).
2. Elegir una raz joven (de unos 2 cm), lvala con agua y corta la
punta a 5 mm del extremo.
3. Colocar la punta de la raz en un vidrio de reloj. Para ablandar
los tejidos e iniciar la tincin, se cubre la raz con orcena actica y
clorhdrico 1N en dilucin de 9:1, es decir, 9 gotas de orcena por cada
89
gota de hcl. Si estas realizando la tincin en races de semillas en

el caso de no tener el reactivo de Orcina se utilizar carmn actico,
hematoxilina o Colchicina.
4. La hidrlisis se realiza en caliente, a unos 60C. Para esta parte
de prcticas, vamos a calentar el vidrio de reloj a la llama del mechero,
justo hasta que empiecen a desprenderse tenues vapores, teniendo
mucho cuidado de que no hierva. Retralo para que se enfre durante
8 minutos y repite esta operacin 3 veces, aadiendo ms orcena, de
modo que el lquido cubra en todo momento la punta de la raz.
5. Sacar la raicilla con la aguja enmangada y colocar sobre el
portaobjetos. Con la ayuda de un bistur, corte el pice a unos 2 mm.
El resto se descarta porque contiene las clulas meristemticas se
encuentran en el extremo, bajo la cofia.
6. Aplicar unas gotas de cido actico al 45% (orcena B) para
terminar de ablandar los tejidos.
7. Limpiar con papel de filtro los posibles residuos del colorante.
8. Colocar el cubreobjetos y realizar un squash o aplastamiento.
Para ello sitar la preparacin del papel de filtro doblado y presiona con
el dedo pulgar para aplastar el tejido y eliminar el exceso de colorante.
Si al retirar el papel filtro se ve que la muestra no queda suficientemente aplastada, se puede presionar el cubre en la zona donde est
la raicilla con la parte posterior de la aguja enmangada. En cualquier
caso hay que evitar que el cubreobjetos se deslice sobre el portaobjetos
en el curso de la presin, y se debe obtener una monocapa de clulas a
travs de la que pase la luz.
9. Observar al microscopio, primero partimos con el objetivo de
menor aumento que corresponde al de 10x, para localizar las clulas
meristemticas mejor teidas y en un solo plano, y por ltimo
utilizaremos el lente de 100x para observar y diferenciar en qu fase
del ciclo se encuentra.
10. Realizar el conteo de clulas en varios campos observados, para
obtener el ndice mittico, para la cual se utiliza la siguiente formula.
Indice mittico=
Nmero de clulas en mitosis

Nmero total de clulas contadas
x 100
90
Nota:
En el caso de no tener el reactivo de orceina, utilizaremos
Hematoxilina:
Primero vamos etiquetar y envasar los reactivos para realizar la
prctica:
Para ello utilizaremos 7 frascos de 250 cc donde colocan los
colorantes y otros lquidos necesarios
a) Hematoxilina liquida hasta la mitad
b) Agua
c) Eosina hasta la mitad
d) Agua
e) Alcohol de 98
f) Alcohol absoluto 100
g) Xilol
1) Seleccionar la muestra (la raz que va ser analizada), primero se
procede a cortar los pices de las raicillas (unos 2 mm) y colocamos
en una solucin de cido actico al 45%, calentar hasta ebullicin,
enfriar y repetir la operacin. Observaremos que las raicillas se ponen
bastante transparentes.
2) Colocar el material biolgico sobre un porta, en el extremo del
mismo y hacemos un scquash, esto es colocar sobre el material un
cubreobjetos y envolver con servilleta de papel luego apoyar en porta
sobre una superficie plana y con el pulgar hacer presin sobre el lugar
donde est el cubre, presionar para que se disgregue el material.
3) Retirar el cubre con cuidado tratando que quede la mayor parte
del material en el porta, con el cubre que siempre queda con material,
se puede repetir la operacin en el porta un poco ms arriba de donde
la hicimos la primera, para obtener un poco ms de muestra.
4) Dejar secar al aire y realizamos el proceso de tincin que se
detalla:
10 minutos
Hematoxilina
5 minutos
Agua
5 minutos
eosina
Enjuagar el preparado con el Agua cambiando dos o 3 veces el agua

2 minutos
Alcohol 95
2 minutos
Alcohol absoluto 100
5 minutos
Xilol
91
5) Observar en el microscopio, primero con el objetivo de menor

aumento, para localizar las clulas meristemticas mejor teidas y en
un solo plano. Luego, con mayor aumento, y por ltimo utilizaremos
el lente de 100x para observar y diferenciar en qu fase del ciclo se
encuentra.
actividades 2.
Resultados de observacin de la muestra e identificar en qu fase
del ciclo celular se encuentra.
muestra
fase que se encuentra la muestra
3.
1) Dibuja con cierto detalle, una clula en cada una de las fases
de la mitosis: profase, metafase, anafase y telofase.
2) Contesta a las siguientes preguntas:
a) Por qu es ms fcil encontrar mitosis en las clulas que se
encuentran en el extremo de las raicillas y no aparecen en las zonas
ms alejadas?
b) En qu momento de la mitosis se identifican mejor los
cromosomas para su recuento?
actividades
92
Conclusin
____________________________________________________________________
____________________________________________________________________
____________________________________________________________________
____________________________________________________________________
_______________________________________________
Recomendaciones
____________________________________________________________________
____________________________________________________________________
____________________________________________________________________
____________________________________________________________________
_______________________________________________
Bibliografa
Cecie Starr, Christine A. Evers, Lisa Starr (2013) Biologa Conceptos y

Aplicaciones, 8 ed. cengage Learning, Mxico pg. 164-167.
Ortiz, l. b., Arroyo, v. s., Puertos, v. g., Arreortua, n. s., & Hernndez, e.
c. (2014). manual de prcticas estructura y funcin celular ii.
Rodrguez Alfredo- Gmez, Sara Fras- Vsquez, Mitosis y su regulacin,
2014, http://www.actapediatricademexico.org/
Sylvia S. Mader (2008), Biologa, 9 ed. Mc. Graw Hill, Mxico 153
Ecuation pg. 581-601
Cecie Starr/ Raplh Taggart. (2009) Biologa la Unidad y Diversidad de
la Vida, 10 ed. Copy Right, Mexico pg. 150-157
[93]
Meiosis de Clulas Vegetales
Introduccin
Es un proceso celular que permite la obtencin a partir de clulas diploides
(2n) de clulas haploides (n) con diferentes combinaciones de genes.
La meiosis no es un tipo de divisin celular diferente de la mitosis
o una alternativa a sta. La meiosis tiene objetivos diferentes. Uno de
estos objetivos es la reduccin del nmero de cromosomas. Otro de
sus objetivos es el de establecer reestructuraciones en los cromosomas
homlogos mediante intercambios de material gentico. Por lo tanto, la
meiosis no es una simple divisin celular. La meiosis est directamente
relacionada con la sexualidad.
Para observar clulas en proceso de meiosis, se debe recurrir a
los rganos reproductores: estambres o carpelos, donde se producen
los gametos. Los capullos florales de diversas especies de las familias
liliceas o compuestas son especialmente adecuados, por el nmero y
tamao de sus cromosomas.
La meiosis consigue mantener constante el nmero de cromosomas
de las clulas de la especie para mantener la informacin gentica.
Mecanismo de la Meiosis
meiosis i (divisin reduccional)
Consiste en la segregacin de cada uno de los cromosomas

homlogos, dividiendo posteriormente la clula 2n 4c en dos clulas
haploides con cromosomas de 2 cromtides (1n2c).
[95]
96

profase i
Es la etapa ms compleja y prolongada, en ella se lleva a cabo el

apareamiento de los cromosomas homlogos y frecuentes entrecruzamientos. Esta etapa se divide en 5 subetapas, que son las siguientes:
Leptoteno: los cromosomas individuales comienzan a condensarse
en filamentos largos dentro del ncleo, aparecen pequeos engrosamientos denominados crommeros.
Zigoteno: los cromosomas homlogos se aparean (sinapsan) en toda
su longitud, formando los llamados bivalentes, gracias a la formacin
del complejo sinaptonmico constituido por tres elementos paralelos,
electrodensos, uno central y dos laterales llamados sinaptmeros.
La secuencia gnica de los cromosomas es la que determina si
ocurre o no el apareamiento entre los cromosomas.
Paquiteno: los cromosomas se acercan y cada uno aparece formado
por dos cromtides, por lo cual el bivalente presenta cuatro filamentos
(ttrada) en ntima asociacin. En esta fase el fenmeno de entrecruzamiento o crossing-over, en el cual, las cromtidas homlogas
intercambian material gentico.
Diploteno: comienza la separacin de los bivalentes quedando
unidos en determinados puntos, llamados quiasmas, que son manifestaciones citolgicas del intercambio de material gentico. Este
mecanismo permite que cada cromosoma de un gameto de un individuo
pueda llevar genes de ambos progenitores, en la formacin de los
gametos femeninos ocurre una etapa de pausa en ste momento de
la meiosis, de esta manera, la lnea germinal de los vulos humanos,
se detienen en el sptimo mes de desarrollo embrionario y su proceso
meitico se contina hasta que se alcanza la madurez, a esta etapa de
latencia se le llama dictioteno.
Diacinesis: Los cromosomas se han contrado an ms y los
quiasmas se han desplazado completamente hacia sus extremos (terminalizacin), contina el ciclo celular, teniendo lugar la metafase I,
anafase I y telofase I.
metafase i
En esta etapa el huso cromtico aparece totalmente desarrollado

y los cromosomas se sitan en el plano ecuatorial, unidos por sus
centrmeros a los filamentos del huso.
97
anafase i
Durante esta etapa, cada par de cromosomas homlogos se

direcciona a un polo.
telofase i
Cada clula hija ahora tiene la mitad del nmero de cromosomas,

pero cada cromosoma consiste en un par de cromtidas. Los
microtbulos que componen la red del huso mittico desaparecen, y
una membrana nuclear nueva rodea cada sistema haploide (clulas
que contienen solo un ejemplar de cada tipo de cromosoma). Adems,
los cromosomas se descondensan nuevamente.
Seguido a esto, puede o no ocurrir citocinesis en esta etapa, o bien,
ocurrir recin al final de la segunda divisin meiotica
El proceso de gametognesis o formacin de gametos, se realiza
mediando dos divisiones meiticas sucesivas:
Primera divisin meitica, la clula inicial o germinal diploide (2 n)
se divide en dos clulas hijas haploides (n).
segunda divisin meitica
Las dos clulas haploides (n) procedentes de la primera fase se

dividen originando cada una de ellas dos clulas hijas haploides (n).
profase ii
Se forman los cromosomas y se rompe el ncleo.

metafase ii
Los cromosomas se colocan en el centro celular y se fijan al huso

acromtico.
anafase ii
Los cromosomas se separan y son llevados a los polos de la clula.

telofase ii
Se forman los ncleos, los cromosomas se convierten en cromatina

y se forman las clulas hijas, cada una con una informacin gentica
distinta.
En los individuos machos, la gametognesis recibe el nombre de espermatognesis y tiene lugar en los rganos reproductores masculinos.
En los individuos hembras, la gametognesis recibe el nombre de
ovognesis y se realiza en los rganos reproductores femeninos.
98
Objetivo General
Observar la meiosis en clulas vegetales, en los que las clulas realizarn
su divisin celular para la formacin de los gametos vegetales.
objetivo especfico
1) Analizar los eventos morfolgicos ocurridos durante los procesos

de divisin celular
2) Identificar en qu fase del ciclo celular de la meiosis se encuentra
la muestra analizada.
3) Establecer las diferencias entre los dos ciclos celulares.
materiales
Capullos florales
Tubos de ensayo
Portaobjetos
equipos
Microscopio
reactivos
Etanol
cido actico
Cloroformo
Orcena actica
actividad 1.
1) Se eligen botones florales todava en un estado de desarrollo
incipiente, antes de que se llegue a abrir la flor.
2) Para interrumpir la meiosis se deben fijar las clulas, para ello se
sumergen en tubos de ensayo con una mezclas de seis partes de etanol,
tres partes de cido actico y una parte de cloroformo (fijador Camoir),
es este estado se puede conservar el material de estudio durante meses
e incluso aos. (Es preferible mantenerlo en fro).
3) Lavar el material de estudio con agua y extraer las anteras.
4) Colocar las anteras directamente en un portaobjetos y proceder a
ablandar los tejidos y a teir siguiendo el mismo mtodo que en la raz
de cebolla (Orcena actica).
5) Observar al microscopio, para ver con nitidez en qu fase de
la divisin celular se encuentra ser necesario utilizar el objetivo de
inmersin.
99
6) A partir de una clula en la que se diferencien estadios de la

meiosis, se procede a contar el nmero de clulas en meiosis, para
obtener el ndice meitico.
Determinar el ndice meitico:
ndice meitico=
Nmero de clulas en meiosis

Nmero total de clulas contadas
x 100
2.
Resultados de observacin de la muestra, identificar en qu fase
del ciclo celular se encuentra.
actividad
muestra
fase que se encuentra la muestra
100
3.
Cuadro comparativo: Meiosis I y II, en el siguiente cuadro marque con
una X, a que divisin celular se corresponde las caractersticas expuestas:
actividad
Caractersticas del proceso
Meiosis I
Meiosis II
Las fases son: profase, metafase,

anafase y telofase.
El resultado son dos clulas
diploides.
Se produce el apareamiento
y separacin de cromosomas
homlogos.
Ocurre el crossing over
Se produce la separacin de las
cromtidas hermanas.
Ocurre la cariocinesis.
Se duplica el material gentico.
Se separan los cromosomas
homlogos
Ocurre la segregacin al azar de
las cromtidas hermanas.
El resultado son 4 clulas
haploides.
Cada cromosoma est
conformado por dos cromtidas
hermanas.
Fuentes: H. Curtis, S. N. Barnes, A. Schnek, A. Massarini (2008).
Conclusin
____________________________________________________________________
____________________________________________________________________
____________________________________________________________________
_______________________________________________
Recomendaciones
____________________________________________________________________
____________________________________________________________________
____________________________________________________________________
________________________________________________
Bibliografa
Bruce Alberts, Alexander Johnson, Julian Lewis, Biologa molecular de

la clula, ed. Omega, 2002 Pp.1135-1136
Carlson e. m. Francisco E. lvarez B. y e. l. i. b. b. Marlon de Ita.
Revisado por Dra. Ma. Del Carmen Mndez H., meiosis, 2010
Embriologa Clnica Moore 6ta Ed. Pp. 15-20, Embriologa mdica con
orientacin clnica Langman 9 Ed. Pp. 7-29, Embriologa humana
y biologa del desarrollo Carlson 3 Ed. Pp.5-8 y 36.
H. Curtis, S. N. Barnes, A. Schnek, A. Massarini (2008). Biologa.
Buenos Aires, Editorial Panamericana.
J.L. Snchez Guilln, La informacin celular, http://www.iespando.
com/web/departamentos/biogeo/web/departamento/2 bch /
pdfs/20Meiosis.pdf.
Ortiz, l. b., Arroyo, v. s., Puertos, v. g., Arreortua, n. s., & Hernndez, e.
c. (2014). manual de prcticas estructura y funcin celular ii
Raisman Jorge S., Gonzlez Ana Mara, Febrero 2000 http://www.
biosci.uga.edu/almanac/bio_103/notes/apr_3.html.
Sylvia S. Mader (2008), Biologa, 9 ed. Mc. Graw Hill, Mxico 168-177
Ecuation pg. 602-605
Cecie Starr/ Raplh Taggart. (2009) Biologa la Unidad y Diversidad de
la Vida, 10 ed. Copy Right, Mexico pg. 162-175
[101]
Preparacin de Colorantes
a. azul de metileno
Colorante de contraste para tincin de flagelos.

Azul de metileno
1g
Agua destilada
100 ml
b. eosina
Para observacin de clulas sanguneas.

Eosina
0,3 g
cido actico glacial
0,025 ml
Agua destilada
100 ml
c. hematoxilina
Para observacin de clulas sanguneas.

Hematoxilina
2g
Agua destilada
1l
d. lugol
Solucin de yodo para tincin Gram.

Yodo
1g
Yoduro potsico
2g
Agua destilada
300 m
[103]
104

e. orcena a
orceina acetica)
Orcena
2g
cido actico
45,8 ml o
cido clorhdrico 1 mol/l
8,3 ml
Agua
45,8 ml
f. orcena b
Orcena
2g
cido actico
55ml
Agua
55 ml
g. verde de metilo actico

Igual composicin que la eosina
h. tapn de lisis
Agua mineral
de litro
cucharaditas rasas de sal de mesa
cucharadas rasas de Bicarbonatos de Sodio
chorritos de detergente
i. el lquido de turk
cido actico glaciar
2 ml
Violeta de genciana disolucin de 1%
1ml
Agua destilada en cantidad suficiente para
Biografa
Adriana Mercedes Lam Vivanco

Docente de la Universidad Tcnica de Machala, Unidad Acadmica de
Ciencias Qumica y de la Salud, con un perfil profesinal Bioqumico
Farmacutica, Magister en Bioqumica Clnica. Con la participacin
en varias investigaciones cientficas en el rea de salud, programas
de vinculacin con la comunidad, permitiendo tener un enfoque a
nuevas investigaciones para insertar a los estudiantes en bsquedas
de herramienta que contribuyen a su vida profesional.
Marisela Brigitte Segura Osorio

Bioqumica Farmacutica. Magster en Medicina Forense de la
Universidad de Guayaquil-Ecuador, Investigadora Nivel IV. Actualmente
Investigador asociado de la Universidad Tcnica de Machala. Es
Docente de la Unidad Acadmica de Ciencias Qumicas y de la Salud
de la universidad tcnica de machala.
Carlos Garca Gonzlez.

Ecuatoriano, Bioqumico. Master en Qumica Farmacutica por la
Universidad de la Habana Cuba, Actualmente Investigador de
principios activos para el desarrollo de Frmacos, Biotecnologa
Avanzada, est realizando un Doctorado en La Corua Espaa. Es
Docente de la Unidad Acadmica de Ciencias Qumicas y de la Salud
de la universidad tcnica de machala
Biologa Celular: Aplicaciones prcticas

Se termin de imprimir en marzo de 2016 en la
imprenta de la UTMACH, calle Loja y 25 de Junio
(campus Machala)
Esta edicin consta de 300 ejemplares.
www.utmachala.edu.ec
ISBN:
978-9978-316-75-7
9 789978
316757

21 Biologia Celular Aplicaciones Practicas Bio Pilas

Diunggah oleh

Informasi Dokumen

Hak Cipta

Format Tersedia

Bagikan dokumen Ini

Bagikan atau Tanam Dokumen

Opsi Berbagi

Apakah menurut Anda dokumen ini bermanfaat?

Apakah konten ini tidak pantas?

Hak Cipta:

Format Tersedia

21 Biologia Celular Aplicaciones Practicas Bio Pilas

Diunggah oleh

Hak Cipta:

Format Tersedia

Biologa Celular:

Universidad Tcnica de Machala

Biologa Celular: Aplicaciones Prcticas

Ing. Csar Quezada Abad, MBA

Biologa Celular: Aplicaciones

Adriana Lam Vivanco

UNIVERSIDAD TCNICA DE MACHALA

Primera edicin 2015

texto ha sido sometido a un proceso de evaluacin por pares externos

con base en la normativa editorial de la utmach.

Advertencia: Se prohbe la reproduccin, el

Manejo del Microscopio............................................................. 19

Observacin de Clulas de la Mucosa Bucal Humana........... 47

Mitosis de Clulas Vegetales................................................ 85

Meiosis de Clulas Vegetales............................................... 95

Preparacin de Colorantes.................................................. 103

El presente texto de Biologa ha sido estructurado para facilitar el

Introducir al estudiante universitario en la observacin directa de

Los recursos en la enseanza-aprendizaje de la Biologa destacan la

Manual de Prcticas de Biologa Celular

Manejo del Microscopio

Lam, A / Segura, M / Garca, C

halgena de gran rendimiento, filtros polarizadores, equipo de contraste

Manejo del Microscopio

en su parte baja, este lente requiere el empleo de un aceite especial,

Lam, A / Segura, M / Garca, C

15. tornillo elevador del condensador

Manejo del Microscopio

Manejo del Microscopio

Colocar el objetivo de menor aumento (10x). Observando

Figura 1. Exploracin de una muestra con la utilizacin del macro y micromtrico

Puede ser conveniente tomar las coordenadas de las zonas ms

Lam, A / Segura, M / Garca, C

Figura 1. Lente de 100x inmersin

El aceite impide la dispersin de los rayos de luz, mejorando

Manejo del Microscopio

Cuidado del Microscopio

Lam, A / Segura, M / Garca, C

1- Sealar cada una de las partes del microscopio ptico y explicar

Manejo del Microscopio

10- Observa por el ocular, mover el mismo tornillo, hasta obtener

Observa en el microscopio las letras del peridico previamente

Lam, A / Segura, M / Garca, C

Manejo del Microscopio

Lam, A / Segura, M / Garca, C

Determina el aumento total con el que ests observando, si

Aumento del ocular: _____________

Paniagua Ricardo, Nistal Manuel, Sesma Pilar, lvarez Manuel Ura,

Lam, A / Segura, M / Garca, C

2. retculo endoplasmtico rugoso

Son generalmente de mayor tamao que las clulas eucariotas

El retculo endoplasmtico rugoso contiene ribosomas adheridos

Lam, A / Segura, M / Garca, C

Posee forma tubular y est encargado de en la sntesis de lpidos,

Los ribosomas que estn encargados de la sntesis de protenas

Es el organelo responsable de respiracin, existe un dato curioso

El lisosoma es una vescula membranosa que contiene enzimas

importante en el transporte activo de ciertos iones hacia el interior de

Los plastos son estructuras claramente diferenciados de forma

Son considerados como microcuerpos que cumplen con un papel

Lam, A / Segura, M / Garca, C

Entre las estructuras adicionales en las clulas eucariotas tenemos:

Son estructuras en forma de finos filamentos encontradas en las

Es la caracterstica ms distintiva de las clulas vegetales, cumple