QMix irrigante reduce los niveles de lipopolisacrido (LPS) en un in vitro modelo

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INTRODUCCIN
Los microorganismos desempean un papel importante en la induccin y mantenimiento de enfermedades periapicales 15 . Tienen
factores de virulencia nicas, como fimbrias, pilli, receptores de membrana y endotoxinas. Lipopolisacrido (LPS) es una
endotoxina que est presente en las capas externas de las paredes celulares de las bacterias Gram-negativas, por lo general
detectados en las infecciones del conducto radicular, provocando respuestas biolgicas asociadas con la inflamacin
periapical 25y la resorcin sea 10 . Existe una correlacin positiva entre la concentracin de LPS en canales de la raz y el
desarrollo de infecciones sintomticas 19 .
Tratamiento endodntico tiene como objetivo el control de la infeccin, lo que permite la curacin periapical. Varias sustancias
qumicas se han utilizado como adyuvante para la preparacin mecnica del conducto radicular. El hipoclorito de sodio (NaOCl)
ha sido el irrigante canal de la raz ms ampliamente utilizado. NaOCl disuelve los tejidos orgnicos y tiene una fuerte actividad
antimicrobiana 27 . Por otro lado, la clorhexidina (CHX) es un agente biocompatible que tiene la accin antimicrobiana asociada
con sustantividad 29 . cido etilendiaminotetraactico (EDTA) es un agente quelante, lo que permite la eliminacin de la capa de
frotis 16 . EDTA favorece la accin de otros irrigantes en los tbulos dentinarios y ramificaciones del conducto radicular 3 .
QMix (Dentsply Tulsa Dental Specialties, Johnson City, TN, EE.UU.) es una novela de irrigacin que puede ser utilizada como
un enjuague final. Se supone combinar las propiedades antimicrobianas y de sustantividad de CHX con la capa de barrillo
eliminacin de propiedades de EDTA 8 . Por otra parte, QMix contiene un detergente que disminuye la tensin superficial y
aumenta la capacidad de humectacin en soluciones 1 . Estudios recientes demostraron que QMix es eficaz contra Enterococcus
faecalis 28 .
Estudios anteriores han demostrado que la canal de la raz preparacin mecnica desempea un papel importante en la reduccin
de la carga de endotoxina 21 . El efecto de irrigantes endodnticos Tambin se ha establecido al entrar en contacto directo con
LPS 4 . Sin embargo, no se sabe si este efecto es similar cuando endotoxinas estn dentro del sistema de conductos
radiculares. Por lo tanto, la presente in vitro estudio investig los efectos de los productos qumicos y auxiliares QMix sustancias
de endotoxinas dentro del espacio del conducto radicular.
MATERIAL Y MTODOS
Este estudio fue aprobado por el Consejo de Investigacin y el Comit de tica de Investigacin de la Universidad Catlica de Rio
Grande do Sul (PUCRS) (nmeros de protocolo 0017/13 y 310.698, respectivamente).
Muestra de seleccin y preparacin de los conductos radiculares
Se seleccionaron cincuenta (50) dientes de una sola raz. Las races fueron seccionadas en unin cemento-esmalte, con un disco de
diamante (Dhpro, Paranagu, PR, Brasil) bajo refrigeracin por agua. Se estableci visualmente la longitud de trabajo (WL), con
un instrumento mano # 10 (Dentsply-Maillefer, Ballaigues, Jura-Nord Vaudois, Suiza) que se inserta en el canal hasta que su punta
alcanza el foramen apical. El WL se determin 1 mm ms cortos hasta el pice. Los conductos radiculares se prepararon usando el
estndar de la serie-limas K (Dentsply-Maillefer, Ballaigues, Jura-Nord Vaudois, Suiza), a partir de un archivo-K # 10 a un
archivo-K # 60 en todo el WL, para facilitar el LPS introduccin y recogida. En cada cambio de instrumento, los canales se
lavaron con 2 ml de NaOCl al 1% (biodinmica, Ibipor, PR, Brasil). Despus de la preparacin, los canales se llenaron con
EDTA 17% (Biodinamica, Ibipor, PR, Brasil) durante 3 minutos y se riegan con 5 ml de solucin salina estril. Los canales se
secaron con puntas de papel (Dentsply, Ro de Janeiro, RJ, Brasil). Cada muestra se fij en resina epoxi (Loctite, Sao Paulo, SP,
Brasil) en un pozo, en placas de cultivo celular de 12 pocillos (Kasvi, Curitiba, PR, Brasil).
La esterilizacin y la desintoxicacin
Las muestras se irradiaron con Co-60 rayos gamma (EMBRARAD; Empresa Brasileira de Radiaes, Cotia, SP, Brasil) para la
degradacin de LPS preexistente 26 . La esterilizacin y la desintoxicacin de los instrumentos utilizados en el experimento se
realizaron en un horno a 250 C, durante 30 minutos.
La contaminacin con endotoxina
El proceso de la contaminacin de las muestras con endotoxinas se realiz como se ha descrito previamente 26 . Dentro de una
cmara de flujo laminar, 20 l (1.000.000 UE / ml) de una solucin que contiene Escherichia coli 055: B5 endotoxina (Lonza,
Walkersville, MD, EE.UU.) se inocul en los conductos radiculares de 45 muestras utilizando una micropipeta. Cinco dientes no
estaban contaminados (muestras de control). Bolitas de algodn libre de pirgenos se colocaron en la parte cervical de los canales
en todas las muestras. Las placas que contienen las muestras se cerraron y se incubaron a 37 C bajo una atmsfera humidificada
durante 24 horas.
Los grupos experimentales
Despus del perodo de incubacin, las muestras se dividieron en los siguientes grupos, de acuerdo con la solucin de riego:
QMix , el 17% de EDTA (biodinmica, Ibipor, PR, Brasil), 2% CHX (Maquira, Maring, PR, Brasil), 3% NaOCl (Farmcia
Marcela, Porto Alegre, RS, Brasil) (n = 9 porgrupo). Se determin el recuento inicial (ICO) de endotoxinas despus de la
contaminacin (n = 4), sin irrigacin. Como grupos de control, los dientes no contaminada (control negativo nctrl, n = 5) y
muestras contaminadas enjuagados con agua apirgena (el control de lavado - PCTRL control positivo, n = 5).

Con jeringas desechables (Descapack, Sao Paulo, SP, Brasil), los conductos radiculares se llenaron de cada solucin. Despus de 3
minutos y 28 , el contenido del canal se aspir con una nueva jeringa de plstico desechable. A continuacin, el canal de la raz se
llen con agua no pirgena. El contenido del canal radicular se recogi con tres puntas de papel # 45, las cuales fueron
transferidas inmediatamente a tubos de vidrio, cerrado, y se mantiene a -20 C hasta el anlisis. Para todos los grupos de control,
los conductos radiculares se llenaron con agua no pirgeno, y se recogi la muestra. Con el fin de certificar la exactitud de
recuento LPS, se determin la cuantificacin de los niveles de endotoxinas en el agua no pirgena y en las puntas de papel
utilizados para el muestreo.
Los tubos que contienen puntas de papel se llenaron con 1 ml de agua apirgena, se calienta (37 C 1 C) durante 1 hora y se
agit (Phoenix, Araraquara, SP, Brasil) durante 1 minuto. El protocolo descrito anteriormente20 se aplic por endotoxinas
cuantificacin. Brevemente, el PYROGENT 5000 (Lonza, Walkersville, MD, EE.UU.) es un, ensayo cintico cuantitativo para la
deteccin de la endotoxina bacteriana Gram-negativa. La muestra se mezcla con el reactivo LAL reconstituido, colocado en el
fotmetro, y automticamente monitoreado en el tiempo para la aparicin de turbidez. La concentracin de endotoxina en las
muestras desconocidas se puede calcular a partir de una curva estndar 19 . Se us agua de reactivo LAL (en blanco) como control
negativo. Todas las reacciones se llevaron a cabo por duplicado para validar la prueba. 100 l del reactivo LAL agua en blanco, los
estndares de endotoxina, muestras de productos, controles positivos de productos (PPC: una parte alcuota de la muestra de
ensayo se trataron con una cantidad conocida de endotoxina) se dispensaron cuidadosamente en los pocillos apropiados de una
microplaca de 96 pocillos (Corning Costar , Tewksbury, MA, EE.UU.). La placa de llenado se coloc en la microplaca Kinetic
QCL-Reader y pre-incub durante 10 minutos a 37 C 1 C. Despus del perodo de incubacin, 100 l de la PYROGENT 5000 Reactivo se dispens en todos los pocillos de la microplaca y se inici la prueba.
De acuerdo con el control positivo del producto (PPC), las muestras de los grupos de ensayo necesitan una dilucin de 100 veces
para evitar la interferencia de los irrigantes para el ensayo de cuantificacin. Las muestras del grupo ICO y PCTRL necesitan una
dilucin de 10 veces. Se requiere dilucin de las muestras del grupo nctrl.
anlisis estadstico
Los datos obtenidos fueron transformados log, y se aplic anlisis de varianza de una sola va en estos datos, seguido de
Tukey post hoc de prueba. El nivel de significacin se fij en p <0,001. Los datos fueron analizados con el programa SPSS
versin 17.0 (SPSS, Chicago, IL, EE.UU.).
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RESULTADOS
Las endotoxinas en el agua, as como en los puntos de papel utilizados durante el experimento, se cuantificaron como <0,01 UE /
mL.
Tabla 1 yla Figura 1 muestran la carga de endotoxina para ambos grupos control y de prueba. QMix alcanz los niveles ms
bajos de endotoxinas entre todas las soluciones de ensayo (p <0,001). No hubo diferencia significativa entre las muestras NaOCl,
CHX y de grupo PCTRL. Los niveles ms altos se encontraron con EDTA, en comparacin con el PCTRL (p <0,001). No hubo
diferencia estadsticamente significativa entre el contenido de endotoxina para los grupos de EDTA, NaOCl y CHX. El grupo nctrl
presenta niveles inferiores estadsticamente significativos de endotoxinas en comparacin con todos los grupos de prueba (p
<0,001).
DISCUSIN
La presencia de endotoxina en el canal de la raz se ha asociado con la inflamacin periapical 25 , la resorcin sea 10 y las
infecciones sintomticas19 . Su eliminacin / neutralizacin de los conductos radiculares infectados durante el tratamiento
endodntico parece ser importante para el proceso de curacin de los tejidos periapicales. Este estudio evalu el efecto de las
sustancias qumicas auxiliares en canales de la raz infectados con endotoxinas, especialmente para sustancias de aclarado finales
tales como EDTA y QMix .
LPS de la mayora de especies bacterianas se compone de tres regiones distintas: la regin del antgeno O, un ncleo de
oligosacridos, y lpido A 18. En un ambiente acuoso, molculas anfiflicas como lpido A forma estructuras de agregados
supramoleculares, el cambio de la estructura fsica de LPS a partir de molculas monomricas a agregados multimricos. LPS en
una estructura agregada ha tenido una actividad biolgica ms alta que LPS monomerized 24 . El ensayo LAL no es capaz de
detectar LPS monomerized24 . Por lo tanto, la falta de deteccin de LPS a travs del ensayo no debe ser considerada como la
ausencia de endotoxina. Se podra estar asociada con la presencia de los LPS monomerized txicos bajos.
Algunas soluciones, como NaOCl y EDTA, pueden interferir en la reaccin LAL debido a las variaciones de pH y la actividad
quelante 7 . En el presente estudio, se diluyeron las muestras para evitar la interferencia de los irrigantes en los procedimientos
analticos. Adems, se determin la ausencia de interferencias a travs de los resultados observados en el PPC, que detecta la
inhibicin o mejora de LAL a travs de la adicin de una concentracin conocida de E. coli endotoxinas a su muestra, tal como se
recomienda por el fabricante (procedimiento de pico). Segn las recomendaciones de LAL de ensayo manufacturer's, la
endotoxina se recuper en PPC debe ser igual a la concentracin conocida de la espiga dentro de 50% a 200%. Para inactivar los
LPS de los dientes antes de su contaminacin, se ha empleado la irradiacin con Co-60. El material empleado en el experimento
se desintoxica por el calor seco (250 C, durante 30 minutos). La ausencia de endotoxinas se determin antes del anlisis, y todos
los materiales mostraron resultados negativos para la presencia de endotoxinas en los procedimientos de control.
Mtodos para estudiar el conducto radicular de las comunidades microbianas de muestreo se han discutido en la literatura
actual 2 , 22 . Sus limitaciones tambin pueden afectar a los procedimientos de toma de muestras de endotoxinas. En el presente

estudio, el muestreo de canal de la raz se realiz con puntas de papel, como se inform anteriormente 10 , 20 , para simular las
limitaciones clnicas que se imponen durante el muestreo. Debe hacerse hincapi en que los puntos de papel no fueron capaces de
eliminar por completo las endotoxinas que se encuentran en los tbulos de la dentina e irregularidades del conducto radicular. En
este estudio, se inocularon 20 ml de una solucin 1.000.000 UE / ml que contena Escherichia coli endotoxina en los canales de la
raz. Se observ que un valor medio de 33,75 UE / ml se recuper en el muestreo inicial (ICO). Por lo tanto, las endotoxinas
pueden ser distribuidos en todo el sistema de conductos radiculares. Se podra sugerir que las endotoxinas pueden quedar
atrapados en las capas profundas de la dentina, istmo y las irregularidades. Mtodos de muestreo similares y de amplio cubriendo
deben desarrollarse para permitir una amplia recuperacin de endotoxinas a partir de canales de la raz, por tanto in vitro y in
vivoestudios.
Debido a la alta toxicidad de la endotoxina, algunas sustancias han sido probados para obtener su inactivacin. El hipoclorito de
sodio se ha utilizado ampliamente como una sustancia qumica auxiliar. Adems de sus blanqueadores, desodorantes y disolucin
del tejido efectos, hipoclorito de sodio se ha demostrado como un desinfectante eficaz 27 . Por otro lado, la clorhexidina es un
agente biocompatible que tiene la accin antimicrobiana asociada con sustantividad 29 . Sin embargo, un estudio clnico concluido
que NaOCl y CHX no tienen ningn efecto desintoxicante en endotoxinas, y que la eliminacin de ms de 47% del contenido de
LPS que est relacionada con la accin mecnica de los instrumentos en las paredes de dentina realizadas por el flujo y reflujo de
la irrigantes 11 . De la misma manera, los resultados del presente estudio han demostrado que el hipoclorito de sodio y
clorhexidina no son capaces de desintoxicar canales de la raz infectados con LPS. Estos resultados son consistentes con los
hallazgos de estudios previos que evaluaron diferentes irrigantes en contacto directo con LPS, y se observ el mismo
comportamiento 4 , 6 .
cido etilendiaminotetraactico es un agente quelante que promueva la eliminacin de la capa de frotis 16 . Favorece la accin de
otros irrigantes en los tbulos dentinarios y ramificaciones del conducto radicular 3 . Cuando una solucin acuosa de LPS se
mezcl con EDTA, haba poca descomposicin de LPS 4 . Por otra parte, en el presente estudio, no hubo un alto nivel de
endotoxinas para el grupo de EDTA en comparacin con el grupo de control positivo. Un estudio anterior 5 observ que el EDTA
puede ejercer una accin quelante en la presente calcio en la parte de lpido A de las molculas de endotoxina. Por lo tanto, la
accin del EDTA sobre la exposicin de las capas profundas de la dentina contaminada puede mejorar la liberacin de LPS por
dentina, lo que aumenta sus tasas de recuperacin.Adems, EDTA puede mejorar la liberacin de endotoxinas por E. coliclulas
despus de una breve exposicin sin cambiar su actividad biolgica17 . En el presente estudio, aislado endotoxina se ha empleado
para contaminar las muestras. Por lo tanto, este efecto puede ser determinante especialmente para estudios clnicos que evalan el
contenido de endotoxinas dentro de canales de la raz infectados con LPS y las bacterias libres.
QMix ha sido empleada despus de la preparacin del conducto radicular como un enjuague final para mejorar la raz de
limpieza y desinfeccin del canal 28 . Se compone de una solucin acuosa de EDTA, clorhexidina y N-cetil-N, N, Ntrimetilamonio bromuro 13 . Un estudio previo 28 emplea un perodo de 3 minutos para evaluar el efecto antimicrobiano de
QMix en una prueba de exposicin directa. Adems, se demostr que QMix promovi accin antimicrobiana adicional,
especialmente en perodos ms largos (> 1 minuto) 23 . No hay ningn estudio que inform el efecto de QMix sobre el
contenido endotxico dentro de los conductos radiculares. De acuerdo con los resultados, QMix tena el potencial de reducir el
contenido de LPS del conducto radicular en comparacin con los otros irrigantes. La presencia de una alta cantidad de agente
tensioactivo y EDTA en QMix composicin puede explicar la gran capacidad de esta solucin para eliminar las clulas del
biofilm partir de un sustrato 12 . Por lo tanto, la presencia de EDTA puede mejorar la eliminacin de LPS de las muestras, debido
a su capacidad para exponer el interior de dentina infectada y su potencial para unirse al calcio presente en el lpido A. Adems,
los agentes tensioactivos pueden favorecer la eliminacin LPS, emulsionantes endotoxinas, y favoreciendo la accin fsica de
soluciones Irrigante en su retirada 9 , 14 . Adems, cetrimida, como un detergente catinico, interacta con la endotoxina, que
tiene una carga negativa 18 . Tambin en este sentido, las interacciones no polares se producen entre el lpido A de la endotoxina y
el detergente 18 . Por lo tanto, las caractersticas de carga y de la interaccin del detergente con la endotoxina parecen ser
importantes en la reduccin de los niveles de LPS.
CONCLUSIONES
Con base en los resultados, es posible concluir que la accin qumica de NaOCl, CHX y EDTA no ha sido capaz de reducir la
carga de LPS en el interior del sistema de conductos radiculares. La accin fsica de irrigantes asociadas con instrumentacin
mecnica puede ser necesario para lograr la reduccin LPS. QMix pareca reducir la carga de LPS en el interior del sistema de
conductos radiculares. Nuevos estudios deben llevarse a cabo para determinar si este QMix caracterstica puede mejorar la
capacidad de la preparacin quimio-mecnica para reducir la carga endotxico total a partir de los conductos radiculares.
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El seguimiento de la eficacia de los procedimientos de conductos radiculares en los niveles de endotoxina

que se encuentra en los dientes con periodontitis apical crnica
INTRODUCCIN
Los lipopolisacridos (LPS), tambin conocidas como endotoxinas, presentes en las capas externas de la membrana de las
especies de bacterias Gram-negativas, se han detectado en 100% de los canales de la raz con infeccin endodntico. Los niveles
ms altos se han relacionado con la gravedad de la destruccin sea en los tejidos periapicales, as como para el desarrollo de las
caractersticas clnicas de la enfermedad de endodoncia 5 - 9 , 13 - 14 , 21 , 25.

Desde hace tiempo se sabe que las endotoxinas se encuentran en espacios de pulpa y reas periapicales son altamente
inmunoestimulante, incluso a bajas concentraciones de 2 , 5 . Esta molcula es reconocido por el husped humano como un
exterior 3 , provocar una respuesta inmune potente que da como resultado la liberacin de diferentes citoquinas pro-inflamatorias
comnmente implicados en la patognesis de la periodontitis apical 9 - 11 . A la luz de esta actividad antignica, la desintoxicacin
de endotoxinas de conductos radiculares durante el tratamiento endodntico puede facilitar el proceso de curacin de los tejidos
periapicales 9 , 11 - 13 de .
Teniendo en cuenta que los dientes necrticos asociados con lesiones periapicales contienen una mayor cantidad de
endotoxinas 2 , 22 , hay un gran esfuerzo en la bsqueda de procedimientos clnicos eficaces para su eliminacin.
Los estudios clnicos han demostrado que la preparacin quimio-mecnica (CMP) utilizando mano K-archivos para la preparacin
apical 1 mm del pice radiogrfico junto con cualquiera de hipoclorito de sodio (NaOCl) o clorhexidina (CHX), utilizado como
sustancia qumica auxiliar, tiene poco o ningn efecto sobre LPS presente en canales de la raz 6 , 12 , 14 , contribuyendo as a una
reduccin de slo 50% de la carga LPS. Por el contrario, la preparacin del canal radicular con instrumentos rotatorios en la
extensin completa del canal radicular era capaz de lograr una eliminacin de 90% del contenido de LPS 11 , 13 , 25 . Sin
embargo, este factor de virulencia todava se puede detectar en 100% de las muestras del canal de la raz despus de la
instrumentacin.
Debido a la actividad desintoxicante de hidrxido de calcio [Ca (OH) 2 ], su uso como medicamento intracanal en canales de la
raz infectados se ha investigado 12 - 13 , 16 - 21 , 23 - 26 , 28 . Vianna, et al. 29 (2007) reportaron que vestirse de conducto radicular
durante 7 das contribuye a una reduccin de endotoxina en slo un 1,4% en comparacin con la reduccin observada despus de
la instrumentacin del conducto radicular. Adems, la aplicacin de Ca (OH) 2 para 14 das contribuy a mejorar la eliminacin de
endotoxinas en un 12% 30 . Este hallazgo sugiere que un perodo prolongado de medicamentos intracanal podra contribuir a una
mejor eliminacin de endotoxinas de conductos radiculares infectados. Recientemente, Sousa, et al.25 (2014) han demostrado que
el Ca (OH) 2 + 2% en gel de CHX como medicamento canal de la raz por un perodo de 30 das fue capaz de reducir
significativamente endotoxinas de conductos radiculares asociados con abscesos apicales agudas. Sin embargo, no existe un
estudio clnico publicado actualmente el seguimiento de la eficacia de los procedimientos de conducto radicular, que implica tanto
la preparacin quimio-mecnica con diferentes sustancias qumicas auxiliares y el uso de Ca (OH) 2 como medicacin de
conducto radicular durante un perodo prolongado de 30 das, con miras a la la reduccin de endotoxinas de conductos radiculares
de los dientes con periodontitis apical crnica.
Por lo tanto, este estudio se realiz para supervisar la eficacia de los procedimientos de conducto radicular mediante el uso de
diferentes irrigantes y medicacin intracanal en la eliminacin de la endotoxina de conductos radiculares de los dientes con
periodontitis apical crnica.
MATERIAL Y MTODOS
seleccin de los pacientes
Treinta pacientes que asistieron a la Facultad de Odontologa de Piracicaba (SP, Brasil) para el tratamiento de endodoncia primaria
se incluyeron en este estudio. Una historia dental detallada se obtuvo de cada paciente. Los pacientes que haban recibido
tratamiento con antibiticos durante los 3 meses anteriores o que tenan una enfermedad en general fueron excluidos del
estudio. Los dientes seleccionados mostraron ausencia de bolsillos periodontales profundos de 4 mm. Su cmara pulpar exhibi
ninguna comunicacin visual con el fluido oral. El Comit de tica de Investigacin Humana de la Facultad de Odontologa de
Piracicaba aprob un protocolo que describe la recoleccin de la muestra para esta investigaci
n, y todos los pacientes firmaron un consentimiento informado para su participacin en esta investigacin.
Todos los dientes seleccionados fueron mostrando la presencia de canal de una raz con necrosis de la pulpa y evidencia
radiogrfica de la periodontitis apical sola raz. Un rea radiolcida> 4 mm estaba presente en 11/30 pacientes. Ninguno de los
pacientes inform de dolor espontneo.
procedimiento de muestreo
Para la degradacin de las endotoxinas preexistentes, todos los materiales utilizados en el experimento fueron esterilizados por
radiacin gamma con cobalto 60 (20 KGy para 6 horas) 4 . El mtodo utilizado para la desinfeccin del campo operatorio se ha
publicado previamente 5 - 6 , 9 , 13 , 14 .Inicialmente, los dientes fueron aislados con un dique de goma. Las estructuras de coronas
y de los alrededores fueron desinfectados con un 30% de H 2 O 2 (volumen / volumen [V / V]) durante 30 segundos, seguido de
NaOCl al 2,5% en el mismo perodo de tiempo y luego inactivados con tiosulfato de sodio al 5%.
Con respecto a la preparacin de la cavidad de acceso, se utiliz una fresa estril / apirgena de alta velocidad de diamante (KGSorensen, Barueri, SP, Brasil), en relacin con el riego manual con solucin salina estril. Antes de entrar en la cmara de la
pulpa, la cavidad de acceso fue desinfectado de acuerdo con el protocolo descrito anteriormente. Una nueva fresa estril /
apirgena se utiliza para acceder al canal.
longitud del conducto radicular se determin mediante radiografa preoperatoria y, a continuacin, la muestra primero endotoxina
(S1) fue tomada por la introduccin de un apirgena punto estril / papel # 15 (Dentsply-Maillefer, Ballaigues, Suiza) en toda la
longitud del canal y deja all durante 1 minuto. A continuacin, la muestra se coloc en un vaso de apirgena e inmediatamente
suspendido en ml Limulus lisado de amebocitos (LAL) de agua 1 para una mayor cuantificacin de endotoxinas.
Despus de la toma de muestras primera endotoxina (S1), la longitud del conducto radicular fue confirmada por el pice de
localizacin (Novapex; Tecnologas del foro, Rishon Le-Zion, Israel) y los dientes fueron divididos aleatoriamente en 3 grupos de

acuerdo con el irrigante utilizado para CMP: GI - 2.5 % NaOCl (n = 10), GII - 2% de gel de CHX (n = 10), y GIII - solucin
salina (n = 10).
Los conductos radiculares A continuacin se prepararon con los instrumentos Mtwo (VDW, Mnich, Alemania) con rotacin
permanente a una velocidad de 300 rpm 13 . Instrumentos Mtwo (10 / .04, 15 / .05, 20 / .06, 25 / .06, 30 / .05, 35 / .04 y 40 / .04)
se han utilizado a su mxima longitud del conducto radicular utilizando una tcnica de una sola longitud, con los movimientos de
entrada y salida suaves mientras le abre gradualmente hacia apical 13 . El uso de cada instrumento fue seguido por el irrigante
seleccionado utilizado para CMP.
En GI, la irrigacin del conducto radicular se realiz con 5 ml de solucin de NaOCl al 2,5%, se retiran simultneamente por
succin. En el GII, 1 ml de gel de CHX 2% se introdujo en el conducto radicular con una jeringa de 3 ml y una aguja de calibre 27
(productos Ultradent, South Jordan, UT, EE.UU.) e, inmediatamente despus del uso de cada instrumento, 5 ml de solucin salina
estril / apirgena se utilizaron para lavar el canal. En GIII, la irrigacin del conducto radicular se realiz con 5 ml de solucin
salina, se retiran simultneamente por succin. Todos los procedimientos se realizaron de riego con una aguja de calibre 27.
Despus de la preparacin del conducto radicular, NaOCl se inactiv con 5 ml de tiosulfato de sodio estril al 5% durante 1
minuto, que luego se elimin con 5 ml de solucin salina estril / apirgena. La actividad qumica de CHX se inactiv con 5 ml de
una solucin que contiene 5% de Tween 80 y 0,07% (v / v) lecitina de 1 minuto, que luego se elimin con 5 ml de solucin salina
estril / apirgena.
Despus de la neutralizacin de las sustancias qumicas auxiliares, una muestra segundo endotoxina (s2) se tom de los canales de
la raz. La eliminacin de la capa de barrillo se realiz con 3 ml de solucin de 17% de cido etilendiaminotetraactico (EDTA)
durante 3 minutos, seguido de un lavado final con 5 ml de solucin salina estril / apirgena. A continuacin, se tom la muestra
tercera endotoxina (s3).
Posteriormente, los canales se llenaron con pasta recin preparada de Ca (OH) 2 en solucin salina (1: 1). La pasta se introduce en
los canales mediante el uso de una fresa estril apirgena / Lentulo (Dentsply-Maillefer, Ballaigues, Suiza). Se prest especial
atencin a completar llenar el conducto radicular con el medicamento. Una torunda de algodn se utiliz para condensar la pasta
en el nivel de entrada del conducto y se realiz una radiografa periapical para asegurar la calidad del relleno del canal radicular.A
continuacin, las cavidades de acceso se sellaron con compuestos de resina fotopolimerizable (3M Dental Products, St. Paul, MN,
USA). Despus de 30 das de medicacin intracanal, los canales se accede aspticamente bajo aislamiento dique de goma de
acuerdo con el protocolo para la desinfeccin, como se describe anteriormente. El medicamento fue retirado con un tamao de
archivo de 45 aos, 0,02 cnica contra las paredes laterales del canal de la raz y la irrigacin copiosa con 10 ml de solucin
salina. Posteriormente, se realiz un muestreo de canal de la raz final (s4).
Determinacin de la concentracin de endotoxina
El ensayo turbidimtrico (Pyrogent 5000 Lonza, BioWhitaker, Inc, Walkersville, MD, EE.UU.) se utiliz para medir las
concentraciones de endotoxina en los canales de la raz de acuerdo con la tcnica de LAL, tal como se public previamente por los
autores 11 , 13 , 14 . Como parmetro para el clculo de la cantidad de endotoxinas en las muestras de canal de la raz, una curva
estndar se represent mediante el uso de la endotoxina de concentracin conocida suministrada por el kit (100 UE / ml), con sus
diluciones alcanzan concentraciones finales (0,01, 0,1, 1, 10 EU / ml) segn las instrucciones del fabricante. En primer lugar, las
muestras de endotoxinas se suspendieron en 1 ml de LAL agua suministrada por el kit y se agitaron en vrtice durante 60
segundos. A continuacin, 100 ml del blanco, seguido por el mismo volumen de las soluciones patrn de endotoxina (0,01, 0,1, 1,
10 UE / ml) y 100 ml de las muestras, se aadieron inmediatamente por duplicado a una microplaca de 96 pocillos con su los
controles positivos, respectivamente. Para evitar la inhibicin o mejora de LAL, una concentracin conocida de Escherichia
coli se aadi endotoxina de las muestras clnicas, como se recomienda en las instrucciones del fabricante (Procedimiento de
pico). Tanto las muestras no enriquecido y pinchos (control positivo) tuvieron sus concentraciones de endotoxina calculan
automticamente. La cantidad de endotoxinas recuperado era igual a la concentracin pico conocido, que van desde 50% a
200%. Una microplaca de 96 pocillos (Corning Costar, Cambridge, MA, EE.UU.) se coloc en un bloque de calentamiento a 37
C y se mantiene a esta temperatura durante todo el ensayo. El procedimiento de ensayo se realiz de acuerdo con las instrucciones
del fabricante. La absorbancia de endotoxinas se midi de forma individual mediante el uso de un lector de placa de ensayo de
inmunoabsorcin ligado a enzimas (Ultramark, Bio-Rad Laboratories, Inc, Hercules, CA, EE.UU.). Durante el clculo de la
concentracin de endotoxinas, el lector de microplacas monitoriza la absorbancia de cada pocillo de la microplaca continuamente
a 340 nm por medio del software WinKQCL (Biowittaker, Cambrex Co, Walkersville, MD, EE.UU.). El software WinKQCL
realiza automticamente un registro / log correlacin lineal del tiempo de reaccin de cada curva estndar con su concentracin de
endotoxina correspondiente, incluyendo la impresin de los parmetros de la curva estndar. Si el valor absoluto del coeficiente de
correlacin es 0,980, un modelo polinomial se puede utilizar para construir una curva estndar y, a su vez, predecir
concentraciones de endotoxina de las muestras.
anlisis estadstico
Los datos obtenidos con el ensayo LAL se analizaron estadsticamente utilizando el software SAS, versin 9.1 (SAS Institute,
Cary, NC, EE.UU.).La prueba de Kolmogorov-Smirnov El demostr que las distribuciones de las variables estudiadas se
desviaron de la normalidad. Se realiz la prueba de Friedman para comparar los niveles de endotoxina en diferentes momentos de
muestreo. Se utiliz la prueba de Wilcoxon cuando se encontraron diferencias significativas. La comparacin entre los grupos
experimentales (GI, GII y GIII) se realiz utilizando la prueba de Kruskal-Wallis. El nivel de significacin se fij en 5% (p
<0,05).

Ir:
RESULTADOS
La Tabla 1 proporciona una visin general de los valores medios individuales de la UE / ml que se encuentran en los conductos
radiculares de los dientes con periodontitis apical crnica en diferentes momentos de muestreo. La informacin particular de los
valores de la mediana porcentaje de reduccin de endotoxina en los diferentes tiempos de muestreo se muestra en laTabla 2 .Para
la validacin del ensayo LAL, la curva estndar cumpla los criterios de linealidad (r = 1) para todos los ensayos, segn lo
informado por las directrices. El ensayo LAL se indica que las endotoxinas estaban presentes en 100% de los canales de la raz
investigadas (30/30), con un valor medio de 18,7 UE / mL, que van desde 0,16 hasta 82,1 UE / mL.
Despus de la instrumentacin del conducto radicular (s2), se observ una mediana significativo porcentaje de reduccin en todos
los grupos, con independencia del irrigante probado: 2,5% NaOCl (99,65%) (GI), 2% CHX (94,27%) (GII) y SS ( 96,79%) (GIII)
(todos p <0,05) ( Tabla 2 ). No se encontraron diferencias entre los irrigantes utilizados.
Raz de enjuague canal con EDTA al 17% (S3) por un perodo de 3 minutos no logr disminuir los niveles de endotoxina en el
GI. Sin embargo, despus de su uso, haba una ligera reduccin de endotoxinas en en el GII (59%) y GIII (61,1%) (todos p> 0,05)
medicamentos intracanal durante 30 das (S4) fue capaz de reducir significativamente las endotoxinas residuales: 2,5% NaOCl
(90%) (GI), 2% CHX (88,8%) (GII) y SS (85,7%) (GIII, p <0,05 ) en comparacin con s3.Sin embargo, no se encontraron
diferencias en la reduccin de endotoxinas cuando se comparan con s2 s4.
La comparacin de los resultados obtenidos despus de la medicacin intracanal con los encontrados en la lnea de base (S1), un
mayor porcentaje de eliminacin de endotoxina se logr de la siguiente manera: 2.5% NaOCl (99,9%) (GI), 2% CHX (99,4%)
(GII), y SS (99,9%) (GIII) ( Tabla 2 ).
Ir:
DISCUSIN
El presente estudio supervisada en los mismos dientes los niveles de endotoxinas despus de cada procedimiento de endodoncia,
el suministro de informacin particular sobre la eficacia de todas las fases de la terapia de conducto radicular. Por otra parte, los
resultados permitir un mayor desarrollo de protocolos clnicos para mejorar la desintoxicacin.
Para este propsito, el ensayo LAL se utiliz para medir los niveles de endotoxinas y para evaluar el efecto de los procedimientos
de canal de la raz en su eliminacin. Entre los mtodos LAL, el mtodo turbidimtrico (Pyrogent-5000 ), que presenta una
amplia gama de deteccin (0,01 a 100 UE / ml), demostr ser sensible y eficaz en la recuperacin de endotoxina a partir de
muestras de endodoncia incluso a concentraciones muy bajas.
En nuestro estudio, la endotoxina fue recuperado de todas las muestras recogidas de conducto radicular conductos radiculares
infectados, segn lo informado en estudios anteriores 6 - 9 , 13 - 14 , 21 , 25 . En las muestras de referencia, se detect endotoxina en
un valor medio de 18,7 UE / mL.Despus de la preparacin quimio-mecnica, los valores de porcentaje estadsticamente
significativos de reduccin de endotoxina se lograron mediante la instrumentacin del conducto radicular con archivos Mtwo
rotativos realizados por 2,5% NaOCl (99,65%), 2% de gel de CHX (94,27%), as como una solucin salina (96,79%). Hay que
destacar que la preparacin del canal radicular con un irrigante inerte (solucin salina) obtuvo un gran porcentaje de reduccin sin
diferencias entre las sustancias antimicrobianos analizados. En la cara con la capacidad de "no-desintoxicante" de NaOCl y CHX,
parece razonable suponer que la accin qumica de estos irrigantes es crtico para la eliminacin de bacterias intracanal 14 , 29 ,
pero no es un factor relevante en relacin con la eliminacin de endotoxinas. De acuerdo con estudios previos 6 , 11 , 13 , 15 , 25 ,
nuestros resultados mostraron que la accin mecnica de los instrumentos de endodoncia asociados con la accin fsica de la
irrigacin del conducto radicular parece jugar un papel en la eliminacin de endotoxina a partir de canales de la raz infectados.
Vale la pena mencionar que el lmite apical de la instrumentacin del conducto radicular ejerce una influencia directa en la
eliminacin de la endotoxina 11 . Particularmente en los casos de necrosis pulpar asociada con una lesin periapical, segn se
evalu en este estudio, el establecimiento de la longitud de trabajo hasta la extensin completa del canal radicular, en lugar de 1
mm desde el foramen apical, podra haber asegurado un mejor desbridamiento por la accin mecnica de los instrumentos en
comparacin con las investigaciones anteriores 6 , 14 , 29 .
Durante y despus de la raz instrumentacin del canal es necesario eliminar tanto los restos orgnicos e inorgnicos por el uso de
agentes quelantes [es decir, cido etilendiaminotetraactico (EDTA)] 17 . EDTA quela fuertemente con Ca2 + y otros cationes
divalentes 1 , desmineraliza dentina y penetra en las capas ms profundas (130 m) de la dentina no preparadas
chemomechanically 25 . Debido a sus propiedades, la hiptesis de que el EDTA podra contribuir a la eliminacin de la
endotoxina de las paredes del conducto radicular durante el tratamiento endodntico. Sin embargo, no se observaron diferencias
significativas en los valores de porcentaje de la reduccin de endotoxinas despus de la utilizacin de 17% de EDTA en
comparacin con la reduccin obtenida despus de la instrumentacin canal de la raz, de acuerdo con los hallazgos de Sousa, et
al. 25 (2014).
Se ha informado de que el uso de EDTA por s sola no es eficaz para la eliminacin completa de la capa de barrillo, tanto en
dentina jvenes y viejos, pero la combinacin con NaOCl parece ser el mejor mtodo de limpieza 17 .Sorprendentemente,
nuestros resultados mostraron que 17% de EDTA no para disminuir los niveles de endotoxina en el grupo de NaOCl despus de la
eliminacin barrillo dentinario. Se sabe que la eficacia de descalcificacin de los cidos y agentes quelantes depende en gran
medida el tiempo de aplicacin, el pH y la concentracin de la solucin, y la dureza de la dentina18 . Adems, la esclerosis de la
dentina es otro factor importante que afecta a la eficiencia de los agentes de desmineralizacin 27 .

En este estudio, la preparacin del conducto radicular fue capaz de reducir drsticamente las endotoxinas, a pesar de no eliminar
todo el contenido. Se sabe que cantidades mnimas de endotoxinas pueden expresar potente bioactividad y por lo tanto mantener
un proceso inflamatorio 9 , 11 - 13 . El hidrxido de calcio es posiblemente la medicacin intracanal ms comnmente usado y
parece ser clnicamente beneficiosa cuando se sospecha de endotoxina en un canal 2 . Debido a su pH muy alcalino de 10 a 12, Ca
(OH) 2 neutraliza LPS por hidrlisis de los enlaces ster en las cadenas de lpido A. La ms mnima variacin de las cadenas de
cidos grasos de la parte de lpido A de la molcula bioactiva hace que toda la molcula biolgicamente inactivo 2 .
La capacidad de la medicacin hidrxido de calcio durante 30 das para mejorar la reduccin de la endotoxina de conductos
radiculares de los dientes con periodontitis apical crnica fue demostrado por el presente estudio.Despus de 30 das de Ca
(OH) 2 medicamentos, los niveles de endotoxinas se redujeron a un valor porcentual media de 99,9% (NaOCl y SS) y 99,4%
(CHX), sin diferencias entre la reduccin de endotoxinas alcanzarse inmediatamente despus de la preparacin del conducto
radicular. Sin embargo, un uso prolongado de la medicacin intracanal durante 30 das en casos crnicos, como se muestra en el
presente estudio y en los casos agudos como evaluado por Sousa, et al. 25 (2014), en comparacin con un medicamento 7-da por
Vianna, et al. 29 (2007), pareca ser importante para una mejor in vivo actividad de endotoxina reduccin de Ca (OH) 2 .
Ir:
CONCLUSIN
En conclusin, nuestros resultados demostraron la eficacia de la accin mecnica de instrumentos junto con el flujo y reflujo de
irrigante duradera instrumentacin canal de la raz para la eliminacin de endotoxina de los canales radiculares de dientes con
periodontitis apical crnica. Por otra parte, el uso de medicamentos intracanal durante 30 das contribuy para la mejora de la
reduccin de endotoxinas.
Ir:
Un estudio de los sistemas de microfiltracin / real de auto-grabado Resilon gutapercha / AH Plus y despus
de diferentes protocolos de riego
INTRODUCCIN
El principal objetivo de la terapia de conducto radicular es prevenir y tratar la inflamacin perirradicular mediante la eliminacin
de los microorganismos del sistema de conductos radiculares. Los mtodos comnmente usados para este propsito incluyen la
preparacin del canal radicular utilizando diferentes instrumentos y irrigantes, llenado adecuado, y la restauracin coronal 1 , 14 .
Irrigantes qumicos son esenciales para el desbridamiento xito de los conductos radiculares durante la limpieza y conformacin
de procedimientos11 . Se utilizan durante los procedimientos quimio-mecnica no slo como agentes antimicrobianos, sino
tambin para lubricar las paredes de la dentina, ahuyentar a los escombros y se disuelven los componentes orgnicos e inorgnicos
de la capa de barrillo, as limpiar la superficie de la dentina 2 , 17 .Diferentes irrigantes se han propuesto y utilizado, incluyendo:
hipoclorito 5,25% de sodio, 2% de clorhexidina, 17% de EDTA, cido ctrico al 10% y solucin de cido fosfrico al 37% 17 , 18 , 20 .
La clorhexidina se ha utilizado como irrigante durante la terapia de canal de la raz debido a sus efectos antibacterianos,
sustantividad y relativa ausencia de citotoxicidad, a pesar de que esta solucin no es capaz de disolver el tejido. Adems, la
clorhexidina se ha sugerido como un irrigante definitiva 30. En cuanto a su uso como irrigante final, un final enrasado con
clorhexidina al 2% favorece la humectabilidad de AH Plus y el Real Sello de Se selladores en la superficie de la dentina. Adems,
se comprob que la resistencia de unin de Activ GP, un sistema basado ionmero de vidrio, se ha mejorado mediante el uso de
clorhexidina al 2% en el riego final despus de 17% de EDTA.
El desarrollo y mantenimiento de la estanqueidad del sistema de conductos radiculares es la clave para el xito del tratamiento del
conducto radicular. El material adhesivo a base de resina tiene el potencial de reducir la microfiltracin del canal de la raz debido
a sus propiedades adhesivas y la penetracin en las paredes dentinales 25 . Por otra parte, los protocolos de riego pueden tener una
influencia en la adherencia de los selladores con base de resina para erradicar la dentina 8 .
Una variedad de modelos experimentales se utilizan para detectar y medir cualquier fuga a lo largo de los rellenos de endodoncia,
como penetracin del colorante, la limpieza de los dientes, las pruebas de radioistopos, la penetracin de bacterias, ensayos
electroqumicos, la filtracin de lquidos, y la glucosa modelo de penetracin 12 , 24 .
El objetivo del presente estudio fue evaluar el efecto de diferentes protocolos Irrigante en la microfiltracin bacteriana coronal de
los sistemas de gutapercha / AH Plus y Resilon / sello real de auto-grabado.
MATERIAL Y MTODOS
preparacin de la muestra
Ciento noventa premolares unirradiculares con races rectas, pices de races maduras y las caractersticas anatmicas similares se
utilizaron en este estudio. Todos los instrumentos utilizados en la preparacin del canal radicular fueron esterilizados previamente
al procedimiento. Los dientes fueron colocados en un aparato metlico que permita para todos los procedimientos que se llevan a
cabo sin contacto manual con las races. El acceso convencional se realiz con fresas de diamante de alta velocidad. Un tamao de
10 Klos canales y para determinar la longitud total del canal de la raz, es decir, la longitud de trabajo. Esto se observ cuando el
instrumento alcanz el foramen apical. A continuacin, los agujeros se estandarizaron mediante el uso de un archivo de tamao K20 y los conductos radiculares se forma mediante el uso de Mtwo NiTi sistema rotatorio (VDW, Munich, Baviera, Alemania). La

secuencia empleada fue la siguiente: 10 / .04, 15 / .05, 20 / .06, 25 / .06, 30 / .05, 35 / .04, 40 / .04, y 25 / .07. Los dientes fueron
divididos en grupos de diez acuerdo con el rgimen de riego ( Figura 1 ) y la obturacin del conducto radicular.
Los protocolos para el riego
Antes de la insercin de cada archivo, el 2% de clorhexidina (CHX) gel (Drogal, Piracicaba, Sao Paulo, Brasil) o hipoclorito
sdico al 5,25% (NaOCl) (Drogal, Piracicaba, Sao Paulo, Brasil) se utilizaron como sustancia qumica auxiliar. Una vez que se
termin la preparacin, 10 ml de agua destilada (DW) se utiliza para eliminar la sustancia qumica auxiliar. A continuacin, EDTA
al 17% o una solucin de cido fosfrico al 37% (Drogal, Piracicaba, Sao Paulo, Brasil) fue utilizado durante 3 minutos para
eliminar la capa de barrillo, con cambios cada 1 minuto (1 ml por minuto).Una vez ms, DW se utiliza para eliminar la solucin
remanente. Por ltimo, la solucin de clorhexidina al 2% (Drogal, Piracicaba, Sao Paulo, Brasil) fue utilizado para el rubor
final. Durante la preparacin de quimio-mecnica, todos los dientes tenan sus pices selladas con cera de utilidad (Technew, Ro
de Janeiro, Ro de Janeiro, Brasil) para evitar el flujo a travs de ellos.
Los conductos radiculares se secaron con puntas de papel de tamao medio esterilizado (endopoints, Paraba do Sul, Ro de
Janeiro, Brasil). Los grupos 1 a 9 tenan los canales llenos de conos de gutapercha (odous, Belo Horizonte, Minas Gerais, Brasil)
asociados con AH Plus sellador (Dentsply, Petrpolis, Ro de Janeiro, Brasil), mientras que los grupos de 10 a 18 se haba llenado
los canales con Resilon asociado con el real Sello Se (SybronEndo, Orange, California, EE.UU.). Los paquetes de conos se
abrieron y se utilizaron inmediatamente, y los selladores fueron manipulados en placas estriles de acuerdo con las
recomendaciones del fabricante.
Una unidad de fuente de calor Sistema de endodoncia-B (SybronEndo, Orange, California, EE.UU.) se utiliz para abajo-pack y
Sistema Obtura (J Morita, Sao Paulo, Sao Paulo, Brasil) para rellenar. Todos los procedimientos se llevaron a cabo en la cabina de
flujo laminar. Posteriormente, los dientes fueron radiographed mesiodistal y bucolingual para evaluar la calidad del relleno.
Todas las races se mantuvieron en gasas a 37 C y 100% de humedad durante 2 semanas antes de la medicin de fugas con el fin
de permitir que los materiales para establecer correctamente.
A continuacin, la superficie externa de la raz de todas las muestras fue sellado con dos capas de barniz de uas rojo (Revlon,
Nueva York, Nueva York, EE.UU.), excepto el ltimo 1 mm del pice.
Anlisis de la microfiltracin bacteriana coronal
La Figura 2a ilustra el aparato utilizado para evaluar la fuga coronal 10 . Los viales de vidrio con tapn de goma se ajustaron para
su uso. Mediante el uso de una cizalla, un agujero se hizo en el centro de cada tapn de goma (figura 2b ), a travs del cual se
insert cada diente bajo presin hasta la unin cemento-esmalte, de manera que su corona estaba fuera del vial y su raz en el
interior (figura 2c ). Pegamento de cianoacrilato (CG) se aplic en la interfaz entre el diente y el tapn para el sellado 15 . Cilindros
preparados a partir de 10 ml jeringas de plstico se adaptan a la superficie exterior de los tapones para crear una cmara alrededor
de la corona del diente (figura 2d ).Una vez ms, CG se utiliz en la interfaz entre las jeringas y tapones, seguida de una capa de
Parafilm (National CanTM Americana, Menasha, Wisconsin, EE.UU.) para ayudar en el sellado. Las jeringas / tapn / juegos de
dientes fueron sometidos a esterilizacin por rayos gamma (embrarad, Sao Paulo, Sao Paulo, Brasil). Los frascos de vidrio se
trataron en autoclave a 121 C durante 15 minutos.
Figura 2
El aparato usado para evaluar la fuga coronal (a). Mediante el uso de una cizalla, un agujero se hizo en el centro del tapn de
caucho (b), a travs del cual se inserta el diente (c). Un cilindro preparado a partir de una jeringa de plstico de 10 ml se adapta a
la superficie exterior ...
Los frascos de vidrio esterilizados se llenaron a continuacin con caldo de Infusin Cerebro Corazn esterilizada (BHI; Oxoid,
Sao Paulo, Sao Paulo, Brasil), de modo que una longitud de 2 mm del pice de la raz se sumerge en el caldo. CG y Parafilm se
utilizaron para sellar la interfaz entre el tapn y el frasco ( Figura 2e ). En todas las muestras, con el fin de asegurar la eficacia de
la junta, 2 ml de 1% de colorante azul de metileno estril se coloc en el tubo hasta que se alcanz la porcin coronal de la
muestra 15 . Los matraces se incubaron a continuacin a 37 C durante 3 das para asegurar la esterilizacin. Despus del tercer
da, el azul de metileno se elimin con agua destilada estril mediante el uso de una pipeta. Cuando se observ un medio verde se
descart la muestra. El color verde era debido a la asociacin de tinte azul con el medio de color amarillo.
Para la preparacin de agentes microbianos medio 28 , Enterococcus faecalis(ATCC 29212) se cultiv en placas de agar BHI
(Infusin de Cerebro Corazn agar; Oxoid, Sao Paulo, Sao Paulo, Brasil) y suplementado con sangre de carnero al 5% durante 24
horas a 37 C en CO 2 . A continuacin, el Enterococcus faecalis se inocul en tubos que contenan 5 ml de suspensin BHI
estril, que se ajusta por espectrofotometra a 800 nm (OD800) a una turbidez de 1.5x10 8 unidades formadoras de colonias
(CFU) / ml. Con la ayuda de una pipeta, 5 ml de las suspensiones se colocan en los aparatos de jeringa (en la regin superior, la
eliminacin de la parada de gasa), que se dej a 37 C durante 90 das en CO 2 y comprobarse diariamente para turbidez en el
caldo BHI. Cuando la turbidez ( Figura 2f se observ), se registr el da.
Cada 2 das, 3 ml de la suspensin (microorganismos BHI +) se retiraron de la cmara y sustituidos por 3 ml de BHI para evitar la
saturacin y para confirmar el crecimiento de Enterococcus faecalis 5 .
Despus de este perodo, todos los aparatos se abrieron para evaluar la campana estril. Los cultivos positivos se confirmaron
mediante tincin de Gram (gram-positivos), morfologa de las colonias en placas de agar sangre (cocos), los kits de identificacin
bioqumica (Rapid ID 32 Strep, BioMrieux SA, Marcyl'etoile, Charbonnieres-les-Bains, Francia).

Diez muestras se utilizaron como controles positivos (n = 5) y negativo (n = 5). Los controles positivos consisten en dientes
instrumentados sin obturacin, mientras que los controles negativos consistieron en dientes de sonido, tanto sin contaminacin.
Los resultados se analizaron con la prueba de supervivencia de Kaplan-Meier, Kruskal-Wallis y Mann-Whitney (p <0,05).
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RESULTADOS
No se encontraron diferencias tras el uso de clorhexidina o NaOCl asociado con EDTA o cido fosfrico para la eliminacin de la
capa de frotis. Sin embargo, se observ claramente que los grupos que reciben un color final con clorhexidina mostraron un menor
nmero de muestras contaminadas.
La Figura 3 muestra el nmero de muestras contaminadas segn el protocolo de riego.
Grfico que muestra el nmero de muestras contaminadas segn el protocolo de riego
En relacin con el sistema de obturacin del conducto radicular (gutapercha / AH Plus y Resilon Sello / real Se), no hubo
diferencias estadsticamente significativas en relacin con la microfiltracin coronal.
La Figura 4 muestra el nmero de muestras contaminadas en relacin con el tiempo. El anlisis estadstico de los das de
contaminacin diferencia en los grupos que recibieron la descarga final con clorhexidina reveladas.Clorhexidina grupos
comenzaron a contaminar slo en el 6 semana, mientras que en los otros el crecimiento microbiano se verific en el 1 st o
2 semana. Los aparatos de control mostraron turbidez caldo dentro de 1 da de incubacin en todas las muestras, mientras que no
se encontr el crecimiento microbiano en el control negativo durante todo el experimento.
DISCUSIN
La fuga del conducto radicular se ha definido como el paso de bacterias, fluidos y sustancias qumicas entre la pared de la dentina
y el material de obturacin del conducto radicular, y los resultados de la presencia del espacio en la interfase del material de
relleno y la pared del conducto radicular. Este espacio puede ser el resultado de la adaptacin deficiente del material de relleno a
la dentina de la raz, la solubilidad del sellador, o expansin sellador o la contraccin. Hay 2 posibilidades de fugas: en la interfase
entre el material de relleno principal y sellador, o entre el sellador y la pared del conducto radicular 26 .
En el presente estudio, se utiliz la microfiltracin bacteriana coronal. Esta metodologa es reproducible y tiene relevancia clnica,
la presentacin de datos fiables y la simulacin de condiciones clnicas 7 , 13 , 16 . Esta metodologa permite la observacin del da
exacto de la contaminacin de la muestra, mostr por la turbidez caldo.
El cido fosfrico al 37% se evalu en comparacin con EDTA, porque esta solucin es eficaz para la eliminacin de la capa de
frotis, que muestra mejores resultados que el EDTA en el tercio apical durante 3 minutos y 19 .Adems, los protocolos que asocian
NaOCl con cido fosfrico mostraron valores de adhesin ms altos en comparacin con NaOCl asociado con EDTA 20 . Aunque
el cido fosfrico haba mostrado un mejor rendimiento en la eliminacin de la capa de barrillo desde el tercio apical 19 , que no
influy en los resultados de la filtracin coronal.
La clorhexidina al 2%, una bisbiguanida catinico, se utiliz aqu para el final enrasado despus de retirar la capa de frotis. Esta
sustancia tiene un efecto inhibidor de MMP-de amplio espectro que mejora la integridad de la capa hbrida 6 y la estabilidad enlace
de la resina-dentina 23 . Adems, el uso de CHX aumenta la humectabilidad de los selladores endodnticos sobre dentina3 , que
puede explicarse por la presencia de tensioactivo superficie en CHX, el aumento de la energa superficial y la promocin de
mayor capacidad de humectacin a la dentina. Nuestros resultados muestran que un lavado final con clorhexidina redujo
significativamente la microfiltracin coronal, en comparacin con los dems grupos experimentales. Se podra explicarse por el
hecho de que la clorhexidina se adsorbe sobre la dentina y evitar la colonizacin microbiana 21 , aumentando el tiempo requerido
para la recontaminacin de la raz de llenado 23 hasta 12 semanas, debido a su sustantividad 21 .
En cuanto al efecto de un lavado final con clorhexidina en la adhesin, estudios anteriores mostraron que esta solucin no afecta a
la resistencia de la unin de los selladores con base de resina 17 , 20 y la mejora de la adhesin de materiales unidos hidrfilos tales
como Activ GP y Reyes 23 .
NaOCl no se utiliz como un irrigante final porque un estudio previo demostr que esta solucin se redujo la resistencia de la
unin entre la resina epoxi y la dentina y el aumento de la fuga 17 .
En cuanto al sistema de obturacin del conducto radicular (gutapercha / AH Plus y Resilon Sello / real Se), no hubo diferencias
estadsticamente significativas en relacin con la microfiltracin coronal, estando de acuerdo con los resultados
anteriores 4 , 9 , 26 . Sin embargo, algunos estudios informaron que Resilon / sellador de Reyes fue ms eficiente que la gutapercha /
AH Plus 12 , 29 , mientras que otros encontraron lo opuesto 22 ,27 .
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CONCLUSIN
En conclusin, un color final con clorhexidina al 2% despus de la eliminacin capa de barrillo reduce la microfiltracin coronal
de los dientes obturados con gutapercha / AH Plus o Resilon / real El sello auto-grabado. La metodologa de filtracin bacteriana
utilizada hizo posible la verificacin de este comportamiento.
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Accin antimicrobiana sinrgica de clorhexidina y el ozono en el tratamiento de endodoncia

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1. Introduccin
Muchos estudios [ 1 - 6 ] han demostrado claramente el importante papel de los microorganismos en la etiopatogenia de pulpar y
lesin periapical.Eliminacin de microorganismos y sus productos derivados a partir del sistema de conductos radiculares es un
objetivo principal del tratamiento de endodoncia, aunque no siempre se logra [ 7 , 8 ]. La infeccin secundaria (despus del
tratamiento) es causada por microorganismos que resistieron procedimientos antimicrobianos intracanal y los perodos de
privacin, en conductos tratados [ 9 , 10 ]. Enterococcus faecalis ( E. faecalis ), un organismo persistente que puede sobrevivir
como un monocultivo en los conductos radiculares [ 9 , 10 ], y de la levadura Candida albicans ( C. albicans ) estn con
frecuencia se recuper de los dientes de raz llenas con lesiones periapicales persistentes [ 6 , 8 , 11 ]. Aunque las tcnicas y los
materiales han mejorado a lo largo del tiempo, no parecen haber mejorado mucho en el ltimo siglo [las tasas de xito de estos
tratamientos 12 ].
Aunque el hipoclorito de sodio es el irrigante ms utilizada, clorhexidina recientemente se ha introducido como una solucin de
irrigacin alternativa.Sin embargo, no se describe cualquier posible efecto de la asociacin entre ellos.
La clorhexidina es una molcula catinica, que se puede usar durante el tratamiento. Cuenta con una amplia gama de actividad
antimicrobiana.Adems, debido a su estructura catinico, la clorhexidina tiene una propiedad nica sustantividad llamado [ 13 ].
El ozono se presenta como un posible agente antisptico alternativa debido a su poder antimicrobiano [ 14 ] y baja citotoxicidad
[ 15 ]; Sin embargo, existe poca informacin sobre el tiempo y la concentracin de usar.
La citometra de flujo se ha demostrado como una herramienta excelente en el campo de la microbiologa para demostrar
rpidamente la actividad antimicrobiana, as como para aclarar sobre el mecanismo de accin / resistencia [ 16 ].
Nuestros fines de estudio un nuevo enfoque para ser utilizados en el tratamiento de endodoncia, el aprovechamiento de la sinergia
lograda entre dos productos con accin antibacteriana que es eficaz contra E. faecalis y C. albicans .
2. Materiales y mtodos
2.1. Seleccin y preparacin de los Dientes
220 extrados los dientes de una sola raz humanos fueron seleccionados para este estudio. Longitud de trabajo se determin
usando un tamao de 15 K-archivo (Maillefer Inc.), hasta que su punta se hizo visible desde el foramen apical, 1 mm del foramen
apical. Los dientes se prepararon hasta un tamao de archivo de K-40 (Maillefer Inc.). Los dientes fueron irrigados con 2 ml de
solucin salina en cada cambio de archivo. Capa de barrillo se elimin con una solucin de 10% de cido ctrico (10 ml) y una
irrigacin final de la solucin salina fue hecha de acuerdo con el mtodo de Schfer y Bossmann [17 ]. Los vrtices se sellaron
con compuesto. Dos capas de barniz de uas se aplicaron a la superficie externa de las races. Los dientes fueron entonces
esterilizados con perxido de hidrgeno plasma (Sterrad ASP).
2.2. La contaminacin del conducto radicular
E. faecalis ATCC2912 y C. albicans ATCC90028 se cultivaron durante 24 horas a 37 C en agar cerebro corazn (Liofilchem,
Italia) y agar de dextrosa Sabouraud (Liofilchem, Italia), respectivamente. Una suspensin de clulas de 1 x 10 8 clulas / ml se
prepar en caldo de infusin de cerebro y corazn (Liofilchem, Italia) para cada microorganismo. Posteriormente, los dientes se
incubaron aerbicamente a 37 C durante 3 das. El inculo se actualiza despus de 48 horas.
2.3. La eficacia de los tratamientos de conducto de raz contaminada
Los dientes fueron asignados aleatoriamente a cuatro grupos experimentales de E. faecalis o C. albicans , sometidos a diferentes
tratamientos.
En el grupo de control, los canales de la raz contaminadas de 10 dientes se regaron con 10 ml de 0,9% (w / v) de solucin salina
estril.
En el grupo de hipoclorito de sodio (NaOCl), los dientes se dividieron en tres subgrupos de 10 dientes cada uno. Los conductos
radiculares se regaron con 10 ml de 1%, 3%, o solucin de NaOCl al 5%.
En el grupo de clorhexidina (CHx), los dientes se dividieron en dos subgrupos de 10 dientes cada uno. Los conductos radiculares
se regaron con 10 ml de 0,2% o solucin CHx 2%.
En el grupo de ozono, los dientes fueron divididos en cuatro subgrupos de 10 dientes cada uno. El ozono gaseoso se aplic con un
generador de ozono (Prozone, W & H) durante 24, 60, 120, y 180 segundos.
Tras el tratamiento, todos los dientes se lavaron con 10 ml de solucin salina estril. Con el fin de evaluar el nmero de
microorganismos viables, los canales de la raz se incubaron con caldo de infusin de cerebro-corazn a 37 C durante 24 h, ya
que si no inmediatamente untado crecimiento fue visible.Microorganismos viables se cuantificaron por determinacin del nmero
de unidades formadoras de colonias (UFC) en agar cerebro corazn o agar de dextrosa Sabouraud para E. faecalis y C. albicans ,
respectivamente.
2.4. Combinatoria efecto del ozono gaseoso con hipoclorito de sodio o clorhexidina

La asociacin entre NaOCl o clorhexidina y el ozono se evalu en 20 dientes (10 infectados con E. faecalis y 10 infectados con C.
albicans ). Por lo tanto, los conductos radiculares se regaron con 10 ml de NaOCl al 5% o solucin de 2% CHx seguido de la
aplicacin de ozono gaseoso para 24, 60, 120, y 180 segundos. UFC se determin como se ha descrito anteriormente.
2.5. Aclaracin de Mecanismo de accin
Con el fin de aclarar los mecanismos de accin de CHx y el ozono, los agentes ms eficaces, se utilizaron los siguientes
marcadores fluorescentes diferentes: yoduro de propidio (PI) se une al ADN, pero slo si la membrana citoplasmtica de clulas
est daado, es decir, la muerte (Molecular Probes europe BV, Leiden, Pases Bajos) y de bis- (cido 1,3-dibutylbarbituric)
trimetina oxonol (BOX) es una mancha fluorescente lipoflica y aninicos intracelular que se acumula cuando la membrana
citoplasmtica se despolariza (Molecular Probes) y, adems, slo en cuanto a la levadura FUN- 1, una sonda fluorescente que se
convierte solamente por las clulas metablicamente activas. La adquisicin se realiz con CellQuest TM Pro Software y en base
a las seales de dispersin de luz y fluorescencia resultante de iluminacin lser de 15 mW a 488 nm y 635 nm. Seales
correspondientes a dispersin frontal y lateral (FSC y SSC) y la fluorescencia se acumula en FLI (530/30 nm) para DiBAC, FL2
(620 nm) de FUN-1 y FL3 (> 670 nm) para el PI. Para la preparacin de muestras, 1 10 6 clulas / ml de cada cepa se incub con
cada sonda fluorescente durante 30 minutos en la oscuridad a 1 g / ml para DiBAC y PI y 0,5 M de FUN-1. Una suspensin
de control, no expuestas a ningn tratamiento o la tincin, se utiliz como autofluorescencia y otros teidas con las diferentes
sondas se utilizaron como control viable. Al menos 30 000 clulas se analizaron en un FACSCalibur BD Biosciences.
E. faecalis y C. albicans se trataron durante 24 s, 60 s, 120 s, y 180 s con ozono y con 0,2% y 2% de CHx de 1, 2, 3, y 4 minutos y
se tieron con diferentes fluorocromos, en para comprender su mecanismo de accin principal que podra explicar el efecto
sinrgico.
2.6. Anlisis de los datos
El anlisis estadstico se realiz utilizando un paquete estadstico para Ciencias Sociales (SPSS) versin 19.0 (IBM, Armonk,
Nueva York, EE.UU.).
En la descripcin de la base de datos de los porcentajes (%) y el valor absoluto (N) fueron usados, ya que las variables
dependientes fueron dicotmica (presencia o ausencia de microorganismos y eficacia o ineficacia de las formulaciones
ensayadas). El anlisis comparativo de las diferentes soluciones de riego y entre las diferentes concentraciones dentro de la misma
solucin se realiz mediante la prueba de chi-cuadrado. El nivel de significacin ( ) para rechazar la hiptesis nula se fij en
0,05, con un intervalo de confianza (IC) del 95%.
Ir:
3. resultados
3.1. La eficacia de tratamientos de conductos
Todas las concentraciones probadas de NaOCl fueron ineficaces para desinfectar completamente las races, siendo el porcentaje de
dientes fracaso inversamente relacionada con la concentracin. Con respecto a C. albicans5% NaOCl fue significativamente ms
eficaz que el 1% ( 2 = 4,0, P <0,05) (Figura 1 ), mientras que 3% NaOCl no fue significativamente mejor que 1% NaOCl ( 2 =
0,9, P = 0,343 ). La tasa de xito para E. faecalis erradicacin fue slo el 9% (91% de los dientes fracaso) incluso con NaOCl al
5%. En cuanto a la irrigacin con CHx, la concentracin de 0,2% tenan actividad antimicrobiana mnima contra ambos
microorganismos. 2% CHx era muy eficaz para C. albicans , siendo la tasa de xito de 90%, lo que fue significativamente mejor
que 0.2% ( P <0,001). Para E. faecalis 2% CHx era totalmente ineficaz ( Figura 1 ). La aplicacin de ozono gaseoso durante
perodos cortos (24 y 60 segundos) no fue suficiente para eliminar ni C. albicans ni E. faecalis ( Figura 1 ). Perodos superiores
(120 s y 180 s), aunque no del todo eficiente, fueron significativamente mejores que las dosis ms bajas ( chi 2 = 16,58; P = 0.001,
por C. albicans y chi 2 = 10,58; P = 0,014, por E. faecalis ) .
3.2. Combinatoria efecto del ozono gaseoso con hipoclorito de sodio o clorhexidina
El 5% de NaOCl combina con el ozono, incluso en el tiempo mximo (180 s), no mostraron diferencias significativas respecto a
los tratamientos aislados ( Figura 1 ). Sin embargo, los resultados indican una gran actividad antimicrobiana con 2% CHx seguido
de ozono gaseoso incluso solamente durante 24 s ( Figura 1 ), con una eliminacin completa de ambos C. albicansy E. faecalis .
3.3. Mecanismo de accin
E. faecalis y C. albicans eran permeables a PI despus de 120 o 180 s de ozono, pero no despus de CHx, incluso a las 2% durante
4 minutos (figuras (cifras22 y y3).3 ). CAJA tincin mostr un aumento de la fluorescencia despus de que ambos tratamientos de
una manera dosis / dependiente del tiempo para ambos microorganismos (Figuras (cifras22 y y3).3 ). FUN-1 tincin aument
despus de que ambos tratamientos con respecto a C. albicans ( Figura 3 ).
In vitro de evaluacin de la actividad antimicrobiana de ozono (A) y clorhexidina (B) contra C. albicans mediante citometra de
flujo. Distribucin de la intensidad de fluorescencia de clulas de levadura tratadas con ozono (A) para los 30, 60, 120, y 180
segundos ((b), (c), (d), y ...
In vitro de evaluacin de la actividad antimicrobiana de ozono (A) y clorhexidina (B) contra E. faecalis por citometra de
flujo.Distribucin de la intensidad de fluorescencia de las clulas bacterianas tratadas con ozono (A) para los 24, 60, 120, y 180
segundos ((b), (c), (d), ...
4. Discusin

Los principales resultados del presente estudio indican que la irrigacin con 2% CHx y 24 s de ozono gaseoso puede ser
ventajoso, en particular para el tratamiento postdisease. Este protocolo que implica el sinergismo entre el gas ozono y la solucin
CHx 2%, nunca se ha descrito antes, que parece ser eficaz y tiene potencial para ser utilizado en la prctica clnica. Adems, es
uno de los pocos protocolos descritos con la eliminacin completa de los microorganismos normalmente resistentes a tratamiento
de endodoncia, particularmente en el modelo de diente, contaminados con un cultivo puro.Adems, citometra de flujo se
demuestra que es una herramienta excelente para aclarar el efecto antimicrobiano de los frmacos [ 16 ].
En el presente estudio las soluciones de irrigacin probados, hipoclorito y CHx, mostraron actividad antimicrobiana sobre todo
en C. albicans . Con respecto a diferentes concentraciones, hipoclorito de sodio al 5% fue significativamente ms eficaz que el
1%. La tasa de xito para E. faecaliserradicacin fue mucho ms baja, incluso con hipoclorito de sodio al 5%.
De manera similar, 2% CHx era muy eficaz para C. albicans y casi ineficaz para E. faecalis . Sin embargo, incluso las soluciones
de irrigacin ms eficientes no fueron capaces de inhibir completamente los microorganismos estudiados.
Solucin de cido ctrico al 10% se utiliz para terminar la preparacin quimio-mecnica con el fin de eliminar la capa de frotis
formado durante la preparacin del canal radicular [ 18 ].
La aplicacin de ozono gaseoso en perodos cortos de tiempo como 24 s y 60 s, no era completamente eficaz para cualquiera de
los microorganismos.
Estudios anteriores mostraron resultados similares. Gomes et al. 2001 [ 19 ] probar varias concentraciones de NaOCl y CHx
durante diferentes perodos, en suspensiones de clulas de E. faecalis , encontr que a pesar de que todos los irrigantes probados
fueron eficaces para matar E. faecalis , el tiempo requerido depende de la concentracin y tipo de irrigante utilizado . En este
estudio [ 19 ] la actividad antimicrobiana de CHx y NaOCl se llev a cabo a travs del contacto con E. faecalis suspensin. En
nuestro estudio hemos utilizado el modelo de diente infectado que puede explicar la menor actividad de las sustancias
antimicrobianas, en comparacin con los estudios de incubacin de caldos de cultivo [ 19 , 20 ]. Sin embargo, el modelo de diente
es una forma de la simulacin de la infeccin " in vivo ". Los diferentes metodologas pueden explicar resultados diferentes. Los
irrigantes directamente en contacto con las clulas bacterianas ejercen una accin inmediatamente, como en los canales de la raz
contacto directo entre las bacterias y irrigantes se puede prevenir.
E. faecalis y C. albicans son dos cepas resistentes conocidos implicados en las lesiones periapicales resistentes al tratamiento
endodntico. En ese sentido se han utilizado en muchos estudios sobre la eficacia antibacteriana de irrigantes canal de la raz o
apsitos intracanal y se incluyen aqu.
El ozono se presenta como un posible agente antisptico alternativa debido a su poder antimicrobiano [ 15 , 21 ] y baja
citotoxicidad [ 15 ]. Sin embargo, existe poca informacin sobre el tiempo y la concentracin de usar. En este estudio, el gas
ozono solo, aplicado durante periodos cortos (24 s y 60 s), no mostr eficacia en cualquiera de los agentes antimicrobianos
probados. Con respecto a C. albicans gas ozono durante 180 segundos tena una actividad significativamente ms alta en
comparacin con tiempos ms cortos. Para E. faecalis mayores tiempos de exposicin de ozono no eran completamente eficaces,
pero mostraron una actividad mayor que la obtenida por NaOCl o CHx en cualquiera de las concentraciones. Del mismo modo,
Estrela et al. [21 ] indic que la aplicacin de gas ozono durante 20 minutos en los conductos radiculares infectados humanos no
fue suficiente para inactivar E. faecalis . Hems et al. [ 22 ] encontraron una reduccin significativa en el nmero de clulas
bacterianas, pero slo detect despus de 240 s de aplicacin. La duracin de la accin puede ser, por lo tanto, una consideracin
importante en la capa de ozono efecto antibacteriano.
En el presente estudio, a pesar de los periodos ms altas (120 s, 180 s), el ozono no era del todo eficiente.
Se investig la posible sinergia entre el gas ozono y las soluciones de irrigacin de hipoclorito de sodio al 5% y 2% CHx. Se
seleccionaron estas soluciones, ya que fueron los que tuvieron una mayor actividad antimicrobiana, por s mismos. Una
eliminacin completa de ambos C. albicans y E. faecalis se obtuvo con 2% CHx y 24 s de gas ozono.
El sinergismo obtenido puede explicarse por el modo distinto de accin.Tanto el ozono y clorhexidina despolarizan las clulas de
forma dependiente de la dosis.
En conclusin, slo la accin combinada de 2% CHx y gas ozono durante un perodo corto promueve la eliminacin completa de
ambos microorganismos ensayados en el modelo de diente. Los resultados de este estudio podran conducir a reorientar los
esfuerzos hacia nuevos protocolos para reducir la carga microbiana en los conductos radiculares infectados en busca de sinergias
entre los productos antimicrobianos nuevos o ya conocidos.
Evaluacin de la formacin de precipitado en la interaccin de los irrigantes utilizado en diferentes
combinaciones: Un in vitro estudio

Abstracto
Introduccin: Los irrigantes juegan un papel esencial en el desbridamiento xito y desinfeccin de espacio
pulpar. Varios combinacin de irrigantes utilizados durante el tratamiento del conducto radicular mejorar su eficacia,
pero algunos se forman precipitados que afecta a la difusin de medicamentos intracanal y el sello del conducto
radicular
obturado.
Objetivo: Evaluar la combinacin de varios irrigantes si se forma el precipitado y tambin para cuantificar la
cantidad
de
precipitado
formado.
Materiales y Mtodos: Cinco irrigantes diferentes se tomaron en diez tubos de ensayo cada uno que tiene la
combinacin de dos irrigantes y se observaron durante 2 min para la formacin de precipitado.
Resultados: la prueba de una va ANOVA revel ms cantidad de precipitado con 2% de clorhexidina (CHX) 5%
Tulsi seguido de 2% CHX, 5% de Neem y el 3% de hipoclorito de sodio al 2% CHX.
Conclusin: la formacin de precipitado se ve ms con el 2% de CHX-5 Neem%, seguido de 2% CHX-5% Tulsi en
comparacin con el grupo control. Cuando se utilizaron estas combinaciones de irrigantes, sofocos intermedios de
solucin salina o agua destilada reducen la cantidad de precipitado.
Palabras clave: Anova, Neem, precipitar, hipoclorito de sodio, Tulsi
El tratamiento de conducto tiene un objetivo principal, que es para prevenir o curar la periodontitis apical causadas
por bacterias en los conductos radiculares que pueden iniciar y causar lesiones inflamatorias periapicales. [1] Por
otra parte, por la limpieza, conformacin y obturacin de la compleja anatoma del sistema de canal de la raz se
puede obtener un sello en tres dimensiones con el fin de facilitar la curacin en el rea peri-radicular.
El xito en el tratamiento endodntico depende de lo bien que se forma y se limpi el espacio pulpar. La limpieza
incluye el desbridamiento completo del espacio de pulpa a partir de bacterias, escombros, barro dentinario y otros
tejidos
orgnicos
e
inorgnicos
en
el
espacio
pulpar.
La limpieza se puede hacer ya sea mecnicamente utilizando instrumentos manuales y giratorios o qumicamente
utilizando varias combinaciones de irrigantes. Sin embargo, la anatoma del sistema de conductos radiculares es
tan complejo, el desbridamiento completo utilizando instrumentos mecnicos no puede ser posible. [2] En estos
dientes con la anatoma compleja, tales como aletas u otras irregularidades que pueden perderse por la
instrumentacin, el desbridamiento qumico facilita la limpieza adecuada del espacio del conducto radicular y es
importante
para
el
tratamiento
de
conducto
xito. [3]
Se han realizado varios estudios para un irrigante que cumple con cuatro requisitos principales:

Actividad antimicrobiana

No toxicidad para los tejidos periapicales

Solubilidad del agua

Capacidad para disolver la materia orgnica

Dado que no se irrigante tiene todas las propiedades ideales, que tiene el mandato de utilizar combinaciones de
irrigantes de manera secuencial para aumentar su efecto antimicrobiano y la disolucin de los tejidos orgnicos e
inorgnicos. Irrigantes de endodoncia se han caracterizado bien de forma individual; pero su uso combinado no
est bien entendido. Individualmente, no hay formas Irrigante precipitan pero cuando se combinan
irrigantes; debido a la reaccin cido-base formar una sustancia neutra y insoluble se refiere como precipitado.
[4]
Es difcil separar el precipitado de los canales de la raz, ya que ocluye los tbulos dentinarios, lo que impide la
penetracin medicamento intracanal en los tbulos dentinarios y por lo tanto compromete el sello del conducto
radicular
obturado. [5]
Los irrigantes ms comnmente utilizados son clorhexidina (CHX), hipoclorito de sodio (NaOCl) y cido ctrico
(CA). El aumento constante de cepas resistentes a los antibiticos y los efectos secundarios causados por las
drogas sintticas ha llevado a los investigadores a buscar alternativas a base de hierbas o naturales. Irrigantes
naturales como el neem y Tulsi se utilizan para el desbridamiento qumico recientemente debido a su
biocompatibilidad y el efecto anti-bacteriano. No existen estudios relacionados con la interaccin entre estas
combinaciones Irrigante; Por lo tanto, el objetivo de este estudio fue evaluar si precipitado se forma combinando
varios
irrigantes
y
tambin
para
determinar
la
cantidad
de
precipitado
formado.

Materiales y mtodos

Cinco diferentes tipos de irrigantes es decir 2% CHX gluconato, 3% de NaOCl, 17% de Ca, 5% Neem, y 5% Tulsi
se
utilizaron
en
este
estudio.
Los irrigantes acuosas de Neem y Tulsi se obtuvieron mediante la colocacin de las soluciones en un aparato de
soxhet durante 24 horas para obtener un extracto acuoso 100%. Estos se diluyeron con agua destilada para
obtener la concentracin de 5% en lugar de las concentraciones de 4% para nuestra conveniencia. Estos cinco
irrigantes se agruparon en 10 de las diversas combinaciones. En cada grupo, diferentes combinaciones de
irrigantes se prepararon para la fabricacin de 10 grupos de prueba de 10 cada [Figura 1] y [Tabla 1] .Dos
irrigantes, 1 ml de cada uno, en todos los grupos se mezclaron en un tubo de ensayo y se observaron durante 2
min para la formacin de precipitado.
El precipitado formado se filtr; aire seca y se pesa utilizando un peso de balanza electrnica (Keryo, Laboratorio,
India). Los datos obtenidos fueron analizados estadsticamente utilizando una va de prueba de ANOVA.

Resultado

Que contiene 1 ml 2% CHX + 1 ml 5% Neem Group-2 [Figura 2] y el grupo-3 que contiene 1 ml 2% CHX + 1 ml 5%
Tulsi [Figura 3] y el grupo de control 1 ml 2% CHX + 1 ml 3% NaOCl [Figura 4] mostr la formacin de precipitado
inmediatamente.
Se llev a cabo la prueba ANOVA de un factor para los pesos del precipitado obtenido con una diferencia
significativa ( P <0,5) que revel que ms cantidad de precipitado de un peso medio de 30 mg se observa con el
grupo-3 (1 ml 2% CHX - 1 ml 5% Tulsi), seguido por el grupo-2 (1 ml 2% CHX - 1 ml 5% Neem) con un peso medio
de 12 mg que se compar con un grupo control positivo-1 (1 ml 2% CHX - 1 ml 3 % NaOCl) que muestra un peso
medio de 4 mg. [Tabla 2] importancia estaba en P <0,05.
ANOVA de un factor: 1 ml 2% CHX + 1 ml de 3% de NaOCl, 1 ml de 2% CHX + 1 ml de 5%
de Neem, 1 ml 2% CHX + 1 ml 5% Tulsi [Grfico 1] [archivo adicional 1] muestra el peso de
precipitado de los 3 grupos.
Discusin
Desinfeccin eficaz en endodoncia solamente se logra mediante la preparacin mecnica en presencia de agentes
qumicos antimicrobianos y esto es debido a la gran complejidad de todo el sistema de canal de la raz. Los
agentes qumicos que se utilizan para el riego pueden mejorar desbridamiento mecnico por el lavado de los
desechos, la disolucin de los tejidos, la desinfeccin del sistema de conductos radiculares, as como eliminar la
capa
residual
formado
durante
la
conformacin
del
conducto
radicular. [6]
Durante la seleccin de cualquier solucin de irrigacin o la medicacin, el conocimiento de su mecanismo de
accin en las que predominan la microflora bacteriana es de gran valor. La informacin adecuada sobre la
morfologa, estructura y fisiologa de los microorganismos que son responsables del dolor y la destruccin de los
tejidos periapicales dado lugar a varias tendencias teraputicas.El conocimiento de la interrelacin entre los
microorganismos y anfitrin, junto con la dinmica qumicas y biolgicas de los medicamentos antimicrobianos
constituye
el
primer
paso
en
el
tratamiento
de
endodoncia.
El uso de NaOCl acuoso como irrigante principal en endodoncia se hizo popular desde 1920 y esto se bas en
estudios minuciosos de H. Dakin en la eficacia de diferentes soluciones en el tejido necrtico infectado durante la
Primera
Guerra
Mundial
NaOCl tiene disolucin del tejido y propiedades antimicrobianas. [7] La formacin de cido hipocloroso al entrar en
contacto con los desechos orgnicos es la razn de su actividad germicida. 3% y 6% NaOCl elimina e interrumpe
biofilms donde como 1% NaOCl solamente perturba biofilms. En altas concentraciones, es txico y provoca la
inflamacin periapical, [8] mientras que a bajas concentraciones, es ineficaz contra microorganismos especficos. El
efecto
de
NaOCl
es
corta,
y
no
imparte
sustantividad
antimicrobiana.
El riego con un pauelo de papel disolver solucin anti-bacteriana es un pre-requisito para un tratamiento de
conductos xito, pero todava no garantiza la ausencia de bacterias viables en el continuo de la dentina del
conducto radicular. [9] As CHX con propiedades anti-bacterianas se utiliza en combinacin con NaOCl.
CHX como irrigante se ha utilizado como una alternativa a o en combinacin con NaOCl. Esto es debido a su
menor toxicidad y sustantividad. Tiene una afinidad a los tejidos dentales duros. Una vez unido a una superficie

que
CHX

ha

mostrado

carece

de

actividad
disolucin

antimicrobiana
de

tejidos

prolongada,
frotis

un

fenmeno

propiedades

de

llamado

eliminacin

sustantividad.
de

la

capa.

[10]

[11]

La limpieza completa del sistema de conductos radiculares requiere soluciones que se disuelven ambos tejidos
orgnicos e inorgnicos riego. Como hipoclorito es activa slo contra el orgnico, otras sustancias deben ser
utilizados para completar la eliminacin de la capa de frotis y los escombros dentina. [12] , [13] , [14]
cido actico tetra etileno di-amina (EDTA) y CA disuelve eficazmente material inorgnico, incluyendo
hidroxiapatita. [15] , [16] , [17] Ellos tienen poco o ningn efecto sobre los tejidos orgnicos y cuando se usan solos no
tienen ninguna actividad antimicrobiana. EDTA es ms comnmente utilizado como una solucin neutralizada 17%
y CA como una solucin al 10%. La eliminacin de la capa de frotis por EDTA o CA mejora el efecto antimicrobiano
localmente y mejora la accin de agentes desinfectantes en capas ms profundas de la dentina. [18]
EDTA y CA reducirn la cantidad de cloro en la solucin de NaOCl hacer instantneamente hipoclorito irrigante
ineficaces en bacterias y tejidos necrticos. Por lo tanto, EDTA y CA no se deben mezclar con NaOCl. [19]
Mezcla de CHX y EDTA produce inmediatamente un precipitado blanco.
se
utiliza
en
combinacin
con
los

[20]

Por lo tanto en este estudio 10% de Ca

grupos
de
ensayo.

Debido a las reacciones citotxicas de la mayor parte de los irrigantes comerciales y su completa incapacidad para
eliminar las bacterias de tbulos de la dentina tendencia reciente es el uso de medicamentos biolgicos extrados
de
plantas
naturales
como
irrigantes. [21]
Tulsi, cientficamente conocido como Ocimum sanctum, es un tiempo de prueba hierba medicinal primer nivel. En
la India es adorado por los hindes y se utiliza en la medicina ayurvdica desde la antigedad. Contiene enormes
sustancias antimicrobianas y se utiliza en una variedad de enfermedades que van desde la diabetes mellitus, la
artritis,
bronquitis,
enfermedades
de
la
piel
etc. [22]
Neem (Azadirachta indica) tambin conocido como indio Neem rbol / margosa es tambin una de las plantas
medicinales ms verstiles sabe que tienen una actividad de amplio espectro anti-bacteriano. En snscrito, se le
llama "aristha", que significa mitigador de la enfermedad. En odontologa, se ha mirado como alternativa altamente
eficaz
para
CHX
en
los
casos
de
trastornos
periodontales. [23]
sus propiedades antioxidantes y antimicrobianas lo convierte en un agente potencial para la irrigacin del conducto
radicular
como
una
alternativa
a
NaOCl. [23]
Como hay una nica solucin de irrigacin tiene todos los requisitos ideales, las combinaciones de irrigantes se
utiliza de forma secuencial para aumentar su efecto antimicrobiano. Sin embargo, al hacerlo, hay posibilidades de
formacin de precipitados que dificultarn su efecto antimicrobiano, y si precipitado se deja atrs, plantea posibles
preocupaciones con respecto a la lixiviacin del precipitado en los tejidos circundantes y el sello del conducto
radicular. [4]
En el presente estudio, los irrigantes, a saber, 2% CHX, 3% de NaOCl, 10% de Ca, 5% Neem y 5% Tulsi se
utilizaron como combinaciones de dos y se evaluaron para la formacin y la cantidad de precipitado. En este
estudio, la CHX 2% con 5% de Neem, 2% CHX con 5% Tulsi, y el grupo de control, es decir, 2% CHX con 3%
NaOCl
precipitado
formado.
Ms cantidad de precipitado con un peso medio de 30 mg se observ con 2% de CHX + 5% Tulsi (precipitado
verde) seguido de 2% CHX + 5% Neem (precipitado verde) con un peso medio de 12 mg y 2% CHX + 3% NaOCl
(rojizo precipitado de color marrn que contiene la sospecha que es carcingeno p-cloroanilina) [24] con un peso
medio
de
4
mg.

Conclusin

Como esperamos que las combinaciones de irrigantes sinrgicamente aumentan sus propiedades en lugar cuando
slo se utiliza uno de los irrigantes, que no siempre es cierto. Debido a la reaccin cido-base a veces la
combinacin de irrigantes conduce a la formacin de precipitado que muestra propiedades desfavorables.
En este estudio, la formacin de precipitado fue visto con 1 ml de 2% de CHX en combinacin con 1 ml de 5%
Neem, 1 ml de 2% CHX + 1 ml de 5% Tulsi y 1 ml de 2% CHX + 1 ml de 3 % NaOCl.

Sin embargo, estos irrigantes naturales mostrar eficacia en la limpieza similar a los irrigantes qumicos, ms
estudios tienen que ser llevado a cabo sobre la citotoxicidad de estos irrigantes naturales y sus productos de
combinacin. Dentro de las limitaciones de este estudio nos gustara llegar a la conclusin de que antes de utilizar
una combinacin de irrigantes debemos comprobar su compatibilidad.