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Violeta Rojo y Bilis Agar


Uso Enfriar y distribuir en placas de Petri estriles.
Este es un medio selectivo para la investigacin presuntiva y re-
cuento de coliformes en alimentos, productos lcteos y otros ma- Caractersticas del producto
teriales de importancia sanitaria. Medio de cultivo deshidratado: color beige amarronado, homog-
neo, libre deslizamiento.
Fundamento Medio de cultivo preparado: color prpura rojizo.
En el medio de cultivo, la peptona y el extracto de levadura aportan
los nutrientes necesarios para el crecimiento bacteriano, las sales Almacenamiento
biliares y el cristal violeta inhiben el desarrollo de la flora Gram Medio de cultivo deshidratado a 10-35 C.
positiva, la lactosa es el hidrato de carbono fermentable, y el rojo Medio de cultivo preparado a 2-8 C.
neutro es el indicador de pH. El agar es el agente solidificante.
Los coliformes son bacterias que fermentan la lactosa, acidifican el Procedimiento
medio y producen un viraje del indicador de pH al color rojo inten- Siembra
so. Debido a esto, se observan como colonias de color rojo prpura, - Para propsitos generales: estriar directamente sobre la super-
de 1 a 2 mm de dimetro, rodeadas, generalmente, de una zona ficie del medio de cultivo.
rojiza de bilis precipitada. - Para recuento bacteriano:
- En superficie: sembrar hasta 0,1 ml de la muestra directa o de la
Contenido y composicin dilucin apropiada y esparcirla en el medio de cultivo.
Cdigo B0214305: envase x 100 g. - En profundidad: inocular hasta 1 ml de la muestra directa o de la
Cdigo B0214306: envase x 500 g. dilucin. Verter un volumen del medio de cultivo fundido y enfriado
a 40-45C. Homogeneizar mediante movimientos de vaivn y rota-
cin. Dejar solidificar.
FRMULA (en gramos por litro) Luego, si se desea, agregar una sobrecapa de medio de cultivo
Extracto de levadura............................................................................................ 3.0. para crear condiciones anaerbicas de manera que se evite el cre-
Peptona.........................................................................................................................................7.0. cimiento de microorganismos Gram negativos no fermentadores de
Sales biliares...................................................................................................................... 1.5. azcares y el crecimiento en forma invasiva de Proteus spp.
Lactosa......................................................................................................................................10.0.
Cloruro de sodio.......................................................................................................... 5.0. Incubacin
Rojo neutro.......................................................................................................................0.03. En aerobiosis, a 35-37 C durante 18-24 horas. Las placas pue-
Cristal violeta............................................................................................................ 0.002. den ser reincubadas durante 24 horas adicionales.
Agar................................................................................................................................................15.0.
pH final: 7.4 0.2 Interpretacin de los resultados
Bacterias que fermentan la lactosa: colonias rojo prpura, ro-
Instrucciones deadas por un halo de precipitacin rojizo.
Suspender 41,5 g del polvo en 1 litro de agua purificada. Reposar Bacterias que no fermentan la lactosa: colonias del color del
5 minutos. Calentar con agitacin frecuente y llevar a ebullicin du- medio, incoloras.
rante 1 minuto para disolucin total. No esterilizar en autoclave.

HOJA 1 DE 2
Violeta Rojo y Bilis Agar

Control de Calidad calidad, reactivos y medios de cultivo adicionales segn requeri-


miento.
Microorganismos Crecimiento Caractersticas
de las colonias Precauciones
Escherichia coli Satisfactorio Rojas, de 1 a 2 mm de dimetro, con - Solamente para uso diagnstico in vitro. Uso profesional exclu-
ATCC 8739 halo de precipitacin rojizo sivo.
Escherichia coli Satisfactorio Rojas, de 1 a 2 mm de dimetro, con - No utilizar el producto si al recibirlo su envase est abierto o da-
ATCC 25922 halo de precipitacin rojizo ado.
Klebsiella pneumoniae Satisfactorio Rojas, de 1 a 2 mm de dimetro, con - No utilizar el producto si existen signos de contaminacin o dete-
ATCC 700603 halo de precipitacin rojizo rioro, as como tampoco si ha expirado su fecha de vencimiento.
Salmonella typhimurium Satisfactorio Incoloras - Utilizar guantes y ropa protectora cuando se manipula el produc-
ATCC 14028 to.
Proteus mirabilis Satisfactorio Incoloras - Considerar las muestras como potencialmente infecciosas y ma-
ATCC 43071 nipularlas apropiadamente siguiendo las normas de bioseguridad
Pseudomonas aeruginosa Satisfactorio Incoloras establecidas por el laboratorio.
ATCC 9027 - Las caractersticas del producto pueden alterarse si no se conser-
Enterococcus faecalis Escaso Rosadas, pequeas, puntiformes va apropiadamente.
ATCC 29212 - Descartar el producto que no ha sido utilizado y los desechos del
Staphylococcus aureus Inhibido __ mismo segn reglamentaciones vigentes.
ATCC 6538
Referencias
- Mossel D.A. A., Mengerink, W.H.J., and Scholts, H.H.A. 1962. Use
CONTROL DE ESTERILIDAD RESULTADO of a modified Mac Conkey Agar Medium for the selective growth
Medio sin inocular Sin cambios and enumeration of all Enterobacteriaceae. J. Bacteriol., 84, 391.
- Hausler, W.J. (ed.). Standard Methods for the Examination of Dairy
Products, 13th ed., Washington, D.C.: American Public Health As-
Limitaciones sociation, 1972.
- Las cepas de Enterococcus pueden desarrollar en este medio de - Speck, M.L. (ed.). Compendium of Methods for the Microbiological
cultivo como colonias pequeas, puntiformes, rosadas. Examination of Foods. Washington, D.C.: American Public Health
- El medio de cultivo no es especfico para enterobacterias ya que Association, 1976.
pueden crecer otros microorganismos (Aeromonas spp.). Es ne- - MacFaddin. 1985. Media for isolation-cultivation-identification-
cesario realizar pruebas bioqumicas adicionales de identificacin maintenance of medical bacteria, vol. 1. Williams & Wilkins, Balti-
microbiana. more, Md.
- La selectividad del medio de cultivo disminuye luego de 24 horas
de incubacin y los microorganismos inicialmente inhibidos pueden Indicaciones al consumidor
desarrollar. Utilizar el producto hasta su fecha de vencimiento.
Conservar el producto segn las indicaciones del rtulo.
Materiales necesarios no provistos
Equipos y material de laboratorio, microorganismos para control de
11/2015 - rEv .01

SMBOLOS UTILIZADOS

DIAGNSTICO CDIGO N ELABORADOR ESTRIL N DE LOTE N FECHA DE LMITE DE INSTRUCCIONES


IN VITRO DETERMINACINES VENCIMIENTO TEMPERATURA DE USO
HOJA 2 DE 2

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