EGAS MONIZ
Novembro de 2014
AGRADECIMENTOS
3
Segurana Alimentar na Restaurao de Eventos: Avaliao Microbiolgica de Preparaes Culinrias em Diferentes
Tempos de Exposio
RESUMO
A implementao de Sistemas de Gesto da Segurana Alimentar na restaurao de
eventos complexa pelas prprias caractersticas da atividade, pelo que estabelecer e
validar um tempo mximo de exposio a temperatura no controlada dos alimentos na
restaurao de eventos, simplificaria em muito a mesma. Este foi o objetivo principal
deste estudo.
Aps seleo das preparaes culinrias de risco, foram recolhidas amostras das
mesmas durante a realizao de eventos, em diferentes tempos de exposio. De
seguida, no laboratrio, a qualidade microbiolgica destas amostras foi avaliada
relativamente aos seguintes critrios: contagem de mesfilos a 30C (CAM), contagem
de Enterobacteriaceae e contagem de E. coli.
De um modo geral, encontrmos uma elevada percentagem de unidades amostrais no
satisfatrias para as contagens de mesfilos (77,7%) e para as contagens de
Enterobacteriaceae (43,6%). Para o parmetro contagem de E. coli que encontrmos
uma elevada percentagem (94,3%) de unidades amostrais satisfatrias.
Ao longo do tempo de exposio, no geral, no se observaram progresses quantitativas
bacterianas estatisticamente significativas, contudo, podemos concluir que o que afeta
mais a qualidade microbiolgica das preparaes culinrias na restaurao de eventos
a sua qualidade inicial.
De fato, os resultados obtidos para as contagens microbiolgicas neste estudo indicam a
necessidade de analisar o Sistema de Gesto da Segurana Alimentar implementado na
cozinha central da empresa de catering, de modo a detetar e corrigir as suas falhas,
pois obtivemos um elevado nmero de unidades amostrais no satisfatrias no incio da
exposio a temperatura no controlada (T0) para as contagens de mesfilos e de
Enterobacteriaceae.
4
ABSTRACT
5
Segurana Alimentar na Restaurao de Eventos: Avaliao Microbiolgica de Preparaes Culinrias em Diferentes
Tempos de Exposio
NDICE
Resumo......................................................................................................................... 4
Abstract......................................................................................................................... 5
Lista de Tabelas............................................................................................................ 8
Lista de Figuras............................................................................................................ 9
Lista de Abreviaturas.................................................................................................... 10
I- INTRODUO........................................................................................................ 11
I.1. Enquadramento................................................................................................... 11
I.2. Caraterizao da atividade de catering / tipos de catering.......................... 11
I.2.1. Caraterizao dos servios de restaurao de eventos e conceito de
catering.................................................................................................................. 11
I.2.2- Tipo de sistemas de distribuio de refeies na restaurao de eventos.. 12
I.2.3- Sistemas de produo utilizados no catering........................................... 13
I.2.3.1. Cook-chill...... 16
I.2.3.2. Cook-freeze... 18
I.2.3.3. Sous-vide........................................................................................... 18
I.3. Perigos veiculados pelos alimentos.................................................................... 19
I.4. Doenas de origem alimentar (DOA)................................................................ 21
I.4.1. Fatores associados ocorrncia de DOA na restaurao............................ 23
I.4.2. Incidncia das DOA nos EUA e na Europa................................................. 25
I.4.3. Doenas de origem alimentar em Portugal.................................................. 26
I.5. Conceitos de segurana alimentar e higiene alimentar...................................... 27
I.5.1. HACCP........................................................................................................ 28
I.5.2. Monitorizao de PCCs na restaurao de eventos.................................... 29
I.6. Microrganismos indicadores de Qualidade e Higiene alimentar....................... 29
I.7. Objetivos do estudo............................................................................................ 30
I.7.1- Evoluo da flora microbiana ao longo do tempo de exposio................. 31
II- MATERIAIS E MTODOS.................................................................................... 35
II.1. Materiais......................................................................................................... 35
II.2. Mtodos.......................................................................................................... 35
II.2.1. Definio do plano de amostragem........................................................ 35
II.2.1.1. Seleo dos locais e do ms de realizao dos eventos.................. 35
6
II.2.1.2. Seleo das preparaes culinrias................................................ 35
II.2.1.3. Classificao das amostras............................................................. 36
II.2.2. Avaliao microbiolgica...................................................................... 36
II.2.3. Colheita das amostras............................................................................. 37
II.2.3.1. Tempos de recolha......................................................................... 37
II.2.3.2. Condies de recolha e transporte.................................................. 38
II.2.3.2.1. Colheita das amostras.............................................................. 39
II.2.3.2.2. Transporte das amostras para anlise microbiolgica............. 39
II.2.4. Preparao das amostras para anlise..................................................... 39
II.2.5. Realizao das anlises microbiolgicas................................................ 40
II.2.5.1. Contagem de microrganismos a 30C............................................ 40
II.2.5.2. Contagem de Enterobacteriaceae.................................................. 40
II.2.5.3. Contagem de Escherichia coli......................................................... 40
II.2.6. Tratamento dos resultados...................................................................... 41
III. RESULTADOS...................................................................................................... 43
III.1. Estatstica descritiva: caraterizao da amostra em estudo........................... 43
III.2. Relao entre as variveis resposta e a temperatura ambiente..................... 46
III.3. Comparao das variveis resposta nos diferentes subgrupos de
alimentos................................................................................................................ 48
III.4. Variveis resposta categorizadas ao longo do tempo de exposio.............. 53
III.5. Avaliao da Qualidade Microbiolgica das Preparaes culinrias........... 56
III.6. Anlise da preparao culinria carpaccio................................................ 57
IV- DISCUSSO DOS RESULTADOS...................................................................... 60
CONCLUSES........ 67
BIBLIOGRAFIA...................................... 69
ANEXOS.. 77
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Tempos de Exposio
LISTA DE TABELAS
8
LISTA DE FIGURAS
Figura 10 Distribuio das amostras de cada grupo de alimentos para cada parmetro
analisado...................................................................................................................45
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Tempos de Exposio
LISTA DE ABREVIATURAS
C: Grau Celsius
10
Introduo
I. INTRODUO
I.1. Enquadramento
O setor da hotelaria e do Catering, que engloba hotis, restaurantes, estabelecimentos
de fast-food, empresas de Catering, cafs e bares uma importante fonte de
emprego no setor dos servios e contribui para o crescimento da economia portuguesa
(OSHA, 2008). A importncia do mesmo setor na Europa confirmada por um volume
anual de negcios de 24 mil milhes de euros e a garantia de 600.000 postos de
trabalho, mais do que uma refeio ingerida fora de casa por cada quatro refeies
consumidas e 67 milhes de consumidores servidos todos os dias (FERCO, 2014).
Os problemas de sade e segurana sempre ocuparam um lugar de destaque nas
preocupaes dos seres humanos, como se pode ver olhando para a escala de
necessidades humanas de Maslow (Matias, Fonseca, Barata e Brojo, 2013). No sector
alimentar estes problemas assumem um papel de destaque uma vez que a alimentao
humana est diretamente relacionada com a sua sade e o seu bem-estar.
A segurana alimentar fundamental no Catering devido ao elevado nmero de
refeies servidas todos os dias (Rosset, Cornu, Nol, Morelli e Poumeyrol, 2004). Por
outro lado, nas recentes dcadas a sociedade tem aumentado a vigilncia em tudo o que
diz respeito segurana alimentar e ao controlo da sade pelas autoridades, o que
ajudou a aumentar a conscincia da importncia das condies de produo dos
alimentos a colocar na mesa dos consumidores e da melhoria do setor da hotelaria e do
Catering (Matias, Fonseca, Barata & Brojo, 2013).
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Introduo
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Introduo
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ser mantida entre -1C e 5C, e a temperatura do alimento em si deve ser mantida 3C
durante a distribuio (National Standards Authority of Ireland, 1994).
I.2.3.1. Cook-chill
O mtodo cook-chill consiste em confecionar os alimentos, em seguida arrefec-los
rapidamente e armazen-los a uma temperatura acima do ponto de congelao (0 a
3C), at regenerao e/ ou servio (FSAI, 2006). Surge assim a necessidade de
transportar refeies refrigeradas, o que implica ter um cuidado redobrado com a
temperatura para que no haja comprometimento da segurana alimentar (Rybka-
Rodgers, 2001).
A figura 1 descreve o fluxograma tpico de um alimento preparado pelo mtodo cook-
chill:
Figura 1 - Fluxograma do mtodo cook-chill (adaptado de FSAI, 2006)
16
Introduo
uma confeo ligeira garante que o produto mantenha a sua qualidade organoltica
praticamente inalterada (Holdsworth, 2004).
Segundo a FSAI (2006), os seguintes componentes so necessrios para assegurar a
segurana dos alimentos produzidos pelo sistema cook-chill:
a) As matrias-primas devem ser de boa qualidade microbiolgica e fornecidas por
fornecedores aprovados. As condies de armazenamento, incluindo tempos e
temperaturas de todas as matrias-primas, devem ser monitorizadas e
controladas;
b) A confeo deve assegurar a destruio de qualquer uma das formas vegetativas
dos microrganismos patognicos presentes;
c) O arrefecimento rpido controlado deve ser imediatamente aps a confeo, de
modo a controlar o crescimento dos microrganismos;
d) A contaminao cruzada deve ser evitada em todas as etapas, particularmente
entre alimentos crus e alimentos confecionados;
e) As condies de armazenamento e de distribuio dos alimentos produzidos no
sistema cook-chill devem assegurar a sua segurana microbiolgica;
f) Todos os procedimentos de regenerao e do servio devem assegurar que a sua
segurana microbiolgica mantida at ao consumo;
g) Um sistema de gesto de segurana alimentar incorporando o HACCP.
Neste sistema, ainda segundo a FSAI (2006), na etapa de confeo, a temperatura em
todo o alimento deve ser mantida acima dos 70C durante pelo menos por 2 minutos.
Existem vrias recomendaes para o arrefecimento rpido na bibliografia. O
Departamento de Sade (Department of Health) do Reino Unido (UK) refere que o
alimento seja pr-arrefecido durante 30 minutos e depois refrigerado entre 0C e 3C
num mximo de 90 minutos, conferindo ao produto 5 dias de validade incluindo o dia
da produo. J a Food and Drug Administration (FDA) (USA) estabelece 2 horas para
arrefecer de 60C para 21C ou um total de 6 horas para arrefecer de 60C para 5C,
conferindo ao produto um perodo de validade de 7 dias quando conservado a 5C ou
menos (FDA, 2013).
A distribuio das refeies deve comear no mximo 15 minutos aps a regenerao
(Department of Health of England, 1989; FSAI, 2006) e as refeies devem ser
regeneradas entre 63C e 70C e durante o tempo ideal, para que a qualidade nutricional
e sensorial dos alimentos no seja prejudicada pelo seu sobreaquecimento. As refeies
que forem regeneradas e deixadas arrefecer devem ser rejeitadas. Alimentos destinados
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I.2.3.2. Cook-freeze
O mtodo cook-freeze em tudo semelhante ao mtodo cook-chill, no entanto
alguns parmetros processuais so diferentes.
Neste mtodo pretende-se a reduo da temperatura das refeies para -18C em menos
de 90 minutos (Fennema, Powrie & Marth, 1973; Brown, Evans, James, James &
Swain, 2006), logo aps a confeo.
Aps a ultracongelao o alimento poder ser conservado entre -18C e -20C at 12
meses. Uma vez que a temperaturas inferiores a -18C no existe desenvolvimento
microbiano, esta temperatura , em muitos pases, especificada para a conservao de
alimentos ultracongelados (Henriques, 2008).
Antes da regenerao o alimento dever ser completamente descongelado, isto , no
devero existir cristais de gelo no alimento. Aps a descongelao, o alimento poder
ser regenerado do mesmo modo que um alimento cook-chill (Brown et al., 2006).
Contudo, se a descongelao no ocorrer na totalidade, certas reas do alimento
continuam congeladas e na regenerao, a temperatura nestas zonas do alimento poder
no ser suficiente para a destruio dos microrganismos patognicos que possam
eventualmente existir (Barrie, 1996, citado por Brown et al., 2006).
A congelao rpida (ultracongelao) altamente recomendvel por questes ligadas
qualidade do produto (Geiges, 1996).
I.2.3.3. Sous-vide
Segundo Baldwin (2014) sous-vide o termo francs para sob vcuo e refere-se a
um mtodo de cozinhar alimentos acondicionados em sacos de plstico sob vcuo num
banho de gua ou num ambiente com vapor a temperatura controlada por um tempo
superior ao usado nos mtodos de confeo tradicionais. O tempo pode variar entre 2
horas e 72 horas e a temperatura precisa de ser estvel, normalmente entre 40C e 70C,
dependendo do que se cozinha. O objetivo da tcnica manter a integridade do
alimento, evitando a perda de humidade e sabor.
O mtodo de confeo sous-vide difere dos mtodos tradicionais de confeo de dois
modos fundamentais: os alimentos crus so acondicionados sob vcuo em sacos
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Introduo
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Tabela 2 Associaes comuns entre agentes patognicos e alimentos (adaptado de FSAI 2006b)
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Introduo
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Tempos de Exposio
A presena de perigos nos alimentos decorre de vrios fatores: desde novos mtodos de
produo animal e vegetal, com recurso a produtos cujos resduos podem ser perigosos
nos alimentos at aos novos hbitos de consumo. As alteraes nos hbitos de consumo
incluem o recurso a alimentos pr-cozinhados ou prontos a cozinhar, a toma de
refeies em unidades de restaurao, o aumento do consumo de carne e de aves, o
aumento do intervalo entre a preparao e o consumo dos alimentos e o aumento do
consumo de alimentos preparados fora de casa, todos eles contribuindo para o aumento
da incidncia de toxi-infeces devidas a microrganismos (WHO/FAO, 2002a;
Bernardo, 2006). Outros fatores a concorrerem para o aumento das ocorrncias de toxi-
infeces alimentares por agentes microbiolgicos incluem as alteraes dos perfis
demogrficos, com aumento da parte da populao mais suscetvel aos agentes nos
alimentos, e as alteraes nas prticas de produo dos alimentos e dos sistemas de
distribuio de alimentos. Tambm os sistemas de produo agro-pecurios intensivos
com a consequente alterao dos sistemas ecolgicos, levam emergncia de zoonoses
e os resduos e contaminantes resultantes da produo pecuria podem constituir uma
fonte de contaminao devido aos microrganismos patognicos eventualmente presentes
(WHO/FAO, 2002a; Jones et al., 2013).
As DOA tm consequncias diretas na sade humana, que se manifestam de vrias
formas, desde o desconforto ou incapacidade temporria (FDA, 2013), sendo a diarreia
o sintoma mais frequente, at ocorrncia de insuficincias renal e heptica, disfunes
no sistema nervoso e mesmo morte (WHO/FAO, 2002a). A estas consequncias podem
juntar-se outras como as perdas econmicas, o desperdcio de matrias-primas
alimentares e os efeitos nas transaes comerciais, com consequncias econmicas
importantes e efeitos nefastos na confiana do consumidor (WHO/FAO, 2003; Wesley,
2009).
As DOA afetam de modo mais grave certos grupos da populao como crianas,
grvidas, idosos, utentes em instituies de sade e pessoas com outras doenas
concomitantes ou imunodeprimidas (WHO/FAO, 2002a; FDA, 2013; Forsythe, 2010).
Para que ocorra uma doena transmitida por alimentos, por ao de agentes biolgicos,
os microrganismos patognicos ou as suas toxinas tm que estar presentes. Para alm
disso, ainda necessrio que o microrganismo patognico se encontre em quantidade
suficiente para causar a infeco ou para produzir toxinas; que o alimento suporte o
crescimento do microrganismo; que o alimento permanea na zona de perigo de
temperaturas tempo suficiente para a multiplicao microbiana ou produo de toxinas
22
Introduo
ocorrer e, ainda, que seja ingerida uma quantidade suficiente, de modo a ultrapassar o
limiar de suscetibilidade de quem o ingeriu (Baptista & Antunes, 2005).
Tem sido reconhecido o papel cada vez mais predominante da restaurao na incidncia
de casos de doena alimentar, principalmente devido s modificaes socioeconmicas
que levaram um nmero crescente de pessoas a comer fora de casa. A dificuldade em
produzir um alimento seguro baseia-se no facto da populao de consumidores ser
bastante diversificada, com vrios graus de sensibilidade e estilos de vida. Para alm
disso, existe uma procura crescente por parte dos consumidores de alimentos frescos e
minimamente processados que possuam uma garantia de segurana absoluta. No
entanto, este conceito pode ter vrias definies, dependendo do que se considera um
risco significativo. O pblico em geral pode considerar que os alimentos seguros
correspondem a um risco igual a zero, enquanto que um produtor de alimentos deve
considerar o que um risco aceitvel. Um risco nulo impraticvel dada a quantidade
de produtos alimentares disponveis, a complexidade da cadeia de produo e
distribuio e a natureza humana (Jouve et al., 1998; Forsythe, 2002). No obstante, os
riscos de ocorrncia de doenas de origem alimentar devem ser reduzidos para nveis
aceitveis na restaurao de eventos, como em qualquer outra atividade do sector
alimentar.
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Introduo
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Introduo
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I.5.1. HACCP
O sistema HACCP constitui numa abordagem sistemtica na identificao, avaliao e
controlo dos perigos que podem intervir com a segurana alimentar e consiste num
sistema de garantia da qualidade (FDA, 2013).
De acordo com a FDA (2013), um Ponto Crtico de Controlo (PCC) refere-se a uma
etapa ou procedimento no qual a perda de controlo pode resultar num risco inaceitvel
para a sade, sendo que o controlo aplicado a essa etapa essencial para prevenir ou
eliminar o perigo alimentar ou reduzi-lo para um nvel aceitvel.
O estabelecimento de limites crticos define os parmetros que tm que ser verificados
e assegurados em cada PCC. A monitorizao e verificao so os passos subsequentes
que asseguram o controlo e a eficcia do processo. O HACCP constitui assim uma
importante ferramenta na segurana alimentar, suportada por Programas de Pr-
requisitos (PPRs) que, quando implementados, permitem a manuteno do controlo
dos perigos associados aos alimentos (CAC, 2003).
Os PPRs constituem a base para a aplicao efetiva do HACCP e devem ser definidos
previamente implementao do prprio sistema (Bolton e Maunsell, 2004; Novais,
2006). A ISO 22000 (2005) define PPRs como o conjunto das medidas de controlo
necessrias para assegurar uma produo, um manuseamento e um ambiente higinicos,
no tendo como objetivo controlar perigos especficos. Alis a ISO 22000 (2005)
introduz um novo grupo de medida de controlo - os Programas de Pr-requisitos
Operacionais (PPROs) e que define como um conjunto de medidas de controlo que a
anlise de perigos considera necessrias para controlar perigos identificados mas que
no so geridos pelo Plano HACCP, ou seja, que no so um PCC (Naturlink, 2014).
O Regulamento 852/2004 define aspetos gerais de higiene dos gneros alimentcios que
correspondem aos PPRs de um sistema HACCP, onde se incluem instalaes e
equipamentos, controlo de fornecedores, manipulao segura (embalagem e transporte),
controlo de pragas e resduos, limpeza e desinfeo, controlo da gua, manuteno da
cadeia de frio, sade e higiene do pessoal e formao (Novais, 2006).
Segundo Bolton & Maunsell (2004) importa que sejam selecionados os PCC
efetivamente necessrios ao controlo dos perigos significativos, existentes no
estabelecimento, e que no sejam controlados atravs dos PPRs.
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Introduo
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Introduo
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Tempos de Exposio
consumidor. Para tal, teramos que avaliar a evoluo da flora microbiana a partir do
momento de produo e ao longo do tempo de exposio temperatura ambiente das
preparaes culinrias durante a realizao dos eventos, de modo a validar esses limites
crticos.
Em 2005 foram publicados pelo INSA valores-guia para a apreciao dos resultados de
anlises microbiolgicas quantitativas e qualitativas em alimentos prontos a consumir
servidos na restaurao (Santos et al., 2005). As anlises microbiolgicas realizadas
neste estudo tiveram em conta os critrios microbiolgicos dos valores-guia elaborados
pelo INSA e encontram-se explicitados na Tabela seguinte.
32
Introduo
Ainda de acordo com estes valores-guia, os alimentos prontos a consumir podem ser
divididos em trs (3) grupos, de acordo com o tipo de ingredientes que entram na sua
composio, o tratamento trmico ou outro procedimento que lhe seja aplicado (Tabela
5).
33
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Tempos de Exposio
Alface
Tomate
Cenoura
III Saladas / Vegetais / Frutos crus Couve roxa
Salada de frutas
Fruta ao natural laminada
Morangos
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Materiais e Mtodos
II.1- MATERIAIS
No que diz respeito aos meios de cultura, foram utilizados os discriminados na tabela
seguinte:
Morfologia das colnias
Meio de cultura Pesquisa
caractersticas
(Diluente para crescimento e pr-
APT: gua Peptonada Tamponada --
enriquecimento)
PCA: Plate Count Agar
Contagem de mesfilos --
(Biokar Diagnostics BK144HA)
TBX: Triptona Bile Glucurondeo
Contagem de Escherichia coli Colnias azuis
(Biokar Diagnostics BK146HM)
Colnias ligeiramente
VRBGA: Violet Red Bile Glucose
vermelhas/cor-de-rosa com
Agar Contagem de Enterobacteriaceae
ou sem halo de precipitao,
(Biokar Diagnostics BK011HA)
translcidas ou baas
Tabela 6 Meios de cultura usados nas anlises microbiolgicas
II.2- MTODOS
II.2.1- Definio do plano de amostragem
II.2.1.1- Seleo dos locais de recolha e ms de realizao dos eventos
A recolha das amostras foi efetuada nos meses geralmente mais quentes do ano (Julho a
Setembro) para ter as preparaes culinrias sujeitas s piores condies de exposio,
mas, por questes relacionadas com a atividade da empresa de Catering, as recolhas
prolongaram-se at Outubro e no houve recolhas em Agosto.
As amostras foram ainda, prioritariamente, colhidas em eventos onde estivessem
sujeitas a tempos de exposio mais prolongados e a temperaturas ambiente mais
elevadas ou onde no existissem equipamentos frigorficos suficientes para manter os
alimentos refrigerados/congelados aps o empratamento e at serem servidos ao cliente.
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Tempos de Exposio
Tabela 7 Distribuio das preparaes culinrias analisadas pelos Grupos dos Valores Guia do INSA
(Instituto Nacional de Sade Dr. Ricardo Jorge)
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Materiais e Mtodos
No caso das preparaes culinrias servidas quentes (tais como almndegas, bacalhau
com broa, bacalhau com frutos do mar) a exposio a temperatura no controlada
refere-se manuteno da preparao culinria, aps reaquecimento/ confeo, nas
estufas at ao empratamento ou em rechaud aquecido por lamparina ou temperatura
ambiente at ser servido ao cliente (ver Figura 2), com exceo dos rissis de
camaro, que eram regenerados no local do evento e depois mantidos temperatura
ambiente at serem consumidos pelo cliente quer fosse na cozinha de apoio ao evento
quer na mesa de buffet.
Para preparaes culinrias servidas frias (saladas, canaps, sobremesas, etc.) a
exposio a temperatura no controlada refere-se a todo o tempo a que est
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Tempos de Exposio
temperatura ambiente desde que chega da cozinha central na carrinha de frio (onde veio
transportada at ao local do evento).
ainda importante realar que, no caso de preparaes culinrias que se alteram muito
rapidamente em termos organolticos (no nosso estudo temos a preparao culinria
carpaccio de salmo) optmos por fazer recolha com intervalos de 1 hora at um
mximo de 3 horas de exposio (T0, T1, T2 e T3), pois o seu tempo de exposio nunca
ultrapassa as 2 horas.
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Materiais e Mtodos
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Tempos de Exposio
Figura 4 Fluxograma que resume o procedimento para a pesquisa Contagem de microrganismos a 30C
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Materiais e Mtodos
7 Julho
Ms Ms do evento em que se fez a recolha 9 Setembro Nominal
10 - Outubro
1 0 horas
2 2 horas
3 4 horas
Tempo Tempo de exposio
4 6 horas
Ordinal
5 8 horas
6 10 horas
Temperatura ambiente a que estava sujeita a
Ta preparao culinria quando foi efetuada a -- Escalar
colheita
Temperatura do produto quando efetuada a
Tp colheita
-- Escalar
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Tempos de Exposio
Logaritmo da contagem de
LogEnterobactrias -- Escalar
enterobactrias (varivel resposta)
Para facilitar o nosso tratamento dos resultados, tivemos ainda que categorizar as
variveis resposta de acordo com os critrios do INSA, surgindo assim 3 novas
variveis de acordo com a Tabela 11.
Satisfatrio 1
Contagens de mesfilos
MesCat Aceitvel 2 Ordinal
categorizadas (varivel resposta)
No satisfatrio - 3
Satisfatrio 1
Contagens de enterobactrias
EntCat Aceitvel 2 Ordinal
categorizadas (varivel resposta)
No satisfatrio - 3
42
Resultados
III- RESULTADOS
Para a varivel Grupo e pelo grfico (Figura 8) podemos afirmar que 46% das
anlises foram efetuadas em preparaes culinrias do grupo II, 28% do grupo I e 26%
do grupo III.
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Tempos de Exposio
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Resultados
Figura 10 Distribuio das amostras de cada grupo de alimentos para cada parmetro analisado
Desvio CV1
Mnimo Mximo Mdia Mediana
Microrganismos Produto Padro (%)
(ufc/g) (ufc/g) (ufc/g) (ufc/g)
(ufc/g)
12 10 6
Total 0,00 3,10x10 2,02x10 7,30x10 2,00x1011 990
45
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Tempos de Exposio
so, respetivamente 2,02x1010 ufc/g e 7,30x106 ufc/g, 6,31x1010 ufc/g e 3,6x105 ufc/g,
1,96x108 ufc/g e 1,55x107 ufc/g e 1,04x1010 ufc/g 3 3,00x107 ufc/g.
Os valores apresentados para cada um dos grupos so relativamente prximos, sendo de
referir que a disperso dos resultados para os grupos I e III muito grande (valores de
desvio padro e coeficiente de variao (CV) muito elevados). Para os resultados do
grupo II a disperso bastante menor (valores de desvio padro e CV bastante menores)
o que tambm pode ser visualizado atravs do diagrama de extremos e quartis (Figura
10) onde a dimenso das caixas muito menor no grupo II.
Em relao aos resultados obtidos para a contagem de Escherichia coli observa-se que
no grupo III no se obteve qualquer valor de contagem, no grupo I apenas uma amostra
obteve uma contagem no T0 (unidade amostral da preparao culinria parfait de
manga) e no grupo II encontrmos valores de contagem mais elevados e num maior
nmero de unidades amostrais (3 preparaes culinrias deste grupo apresentaram
contagens de E. coli: canap de pat de aves com coulli de framboesa, canap de
queijo chvre com pistcio e sapateira recheada).
Nesta fase, separmos os dados por grupo e analismos separadamente cada grupo
no que respeita relao existente entre as variveis resposta e a temperatura ambiente
para cada uma das variveis resposta.
Mesfilos
Primeiro verificmos se cada grupo alimentar apresentava distribuio normal para as
variveis logmesfilos e temperatura ambiente atravs do teste de Kolmogorov-
46
Resultados
Smirnov e constatmos que o grupo I sim (p < 0,05), mas os grupos II e III no (p >
0,05). Aplicou-se ento o teste de Pearson ao grupo I e o teste de Spearmann aos grupos
II e III. Constatmos que:
- no Grupo I existe uma relao significativa (p = 0,026 < 0,05) entre o crescimento de
mesfilos e a temperatura ambiente, mas a correlao fraca, pois R = 0,244 (< 0,50);
- no Grupo II no se encontra evidncia da relao entre a temperatura ambiente e o
crescimento de mesfilos (p = 0,393 > 0,05);
- no grupo III encontra-se evidncia estatisticamente significativa (p = 0,000 < 0,05)
mas inversa (R = - 0,489) entre o crescimento de mesfilos e a temperatura ambiente,
ou seja, medida que a temperatura ambiente aumenta o crescimento de mesfilos
diminui, mas esta correlao no chega a ser forte (R = 0,489 < 0,50).
Estas concluses podem ser observadas atravs da observao das Figuras 11, 12 e 13,
pois no se observa qualquer padro nos grficos de disperso.
Figura 11 Grfico de disperso para a varivel Figura 12 - Grfico de disperso para a varivel
logmesfilos e para o Grupo I logmesfilos e para o Grupo II
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Tempos de Exposio
Enterobacteriaceae
Fizemos a mesma anlise para a relao entre as contagens de enterobactrias e a
temperatura ambiente e constatmos que nos 3 grupos no existe qualquer correlao
entre a contagem de enterobactrias e a temperatura ambiente (p > 0,05 em todos os
grupos no teste de Spermann).
Escherichia coli
Apenas faz sentido fazer esta anlise para o Grupo II, pois no Gupo III no obtivemos
qualquer contagem e no Grupo I apenas temos 1 resultado diferente de 0,00 ufc/g, mas
constatmos que tambm no existe relao estatisticamente significativa entre a
temperatura ambiente e as contagens de Escherichia coli (p = 0,176 > 0,05 no teste de
Spearmann).
Grupo I
Depois, tentmos ainda verificar a relao entre os meses e a varivel resposta
logmesofilos. Inicialmente testmos se as trs amostras (Julho, Setembro e Outubro)
eram provenientes de uma populao com distribuio normal atravs dos testes de
Kolmogorov-Smirnov e de Shapiro-Wilk, mas no se verificando a hiptese de
normalidade (p < 0,05), tivemos que usar o teste no paramtrico de Kruskal-Wallis e
obtivemos diferenas significativas, pois o p-value era inferior a 0,05.
Por tal facto, rejeitamos a igualdade nos trs meses e fomos ento comparar os
resultados dos meses dois a dois, atravs do teste de Mann-Whitney e obtivemos os
seguintes resultados:
- comparando Julho e Setembro obtivemos um p = 0,001 (< 0,05 : diferentes);
- comparando Julho e Outubro obtivemos um p = 0,012 (< 0,05 : diferentes);
- comparando Setembro e Outubro obtivemos um p = 0,795 (> 0,05 : iguais).
Deste modo, constatamos que a contagem de mesfilos nas amostras do grupo I
significativamente diferente nos meses de Julho e Setembro e de Julho e Outubro. No
entanto, ao comparar os meses de Setembro e Outubro conclumos que a contagem de
mesfilos nas preparaes culinrias do Grupo I no difere significativamente entre
estes dois meses.
Ainda no grupo I, para a varivel logenterobactrias fizemos a mesma anlise, mas
como no teste de Kruskal-Wallis o p-value deu 0,081 (> 0,05) no existem diferenas
48
Resultados
Grupo II
Repetindo a mesma anlise para o grupo II constatmos o seguinte:
- pelo teste de Kruskal-Wallis no existem diferenas significativas (p > 0,05) nas
contagens de mesfilos, Enterobacteriaceae e E. coli entre os 3 meses.
Grupo III
Neste grupo, para as contagens de mesfilos, encontrmos diferenas significativas
entre os meses pelo teste de Kruskal-Wallis (p = 0,000 < 0,05) e ao fazer a comparao
dois a dois atravs do teste de Mann-Whitney verificmos o seguinte:
- no temos recolhas de alimentos deste grupo em Setembro;
- comparando Julho e Outubro obtivemos um p = 0,000 (< 0,05 : diferentes).
Para a contagem de enterobactrias, no grupo III, encontrmos diferenas significativas
entre os meses pelo teste de Kruskal-Wallis (p = 0,001 < 0,05) e ao fazer a comparao
dois a dois atravs do teste de Mann-Whitney verificmos o seguinte:
- no temos recolhas de alimentos deste grupo em Setembro;
- comparando Julho e Outubro obtivemos um p = 0,001 (< 0,05 : diferentes).
Para a contagem de E. coli no vale a pena fazer a anlise, pois no obtivemos
contagens.
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Tempos de Exposio
Figura 14 Grfico que compara as mdias da varivel logmesfilos entre subgrupos de alimentos
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Resultados
Fruta ---
laminada/PAC
0,178 0,009* 0,019* 0,005* 0,005*
Analisando os resultados obtidos na Tabela 13, sempre que p < 0,05 (valores a negrito
com *) significa que h diferenas entre os 2 subgrupos (hiptese nula rejeitada) e
sempre que p > 0,05 os 2 subgrupos so semelhantes (hiptese nula verdadeira). Deste
modo, podemos afirmar com 95% de certeza que:
- no existem diferenas significativas entre as contagens de mesfilos do subgrupo
fruta laminada/PAC e do subgrupo frios/GII (p = 0,178), e estes dois subgrupos
constituem uma classe homognea;
- no existem diferenas significativas entre as contagens de mesfilos do subgrupo
fruta laminada/DLE, do subgrupo frios/GI e do subgrupo saladas (p > 0,478), e
estes trs subgrupos constituem uma classe homognea;
- o subgrupo quentes encontra-se no meio destes dois conjuntos homogneos
aproximando-se mais do segundo do que do primeiro. Assim o subgrupo quentes no
apresenta diferenas significativas em relao ao subgrupo fruta laminada/DLE(p =
0,190), e ao subgrupo frios/GI(p = 0,138) mas apresenta diferenas significativas nas
contagens de mesfilos em relao ao subgrupo saladas (p = 0,042);
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Tempos de Exposio
Figura 15 - Grfico que compara as mdias da varivel logenterobactrias entre subgrupos de alimentos
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Resultados
Numa segunda fase, aps leitura e interpretao dos resultados as unidades amostrais
foram classificadas em satisfatrio, aceitvel e no satisfatrio de acordo com os
valores-guia do INSA descriminados na Tabela 4 (captulo Introduo).
Assim, da anlise das replicadas das amostras totais verifica-se que a percentagem de
unidades amostrais satisfatrias muito reduzida sendo de apenas 10,3% quanto aos
mesfilos e de 40,7% nas enterobactrias. Apenas para a varivel contagem de E. coli
encontrmos 94,5% de unidades amostrais satisfatrias.
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Tempos de Exposio
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Resultados
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Tempos de Exposio
Nesta fase procurmos avaliar cada amostra recolhida tendo em conta os parmetros
microbiolgicos avaliados e os valores-guia do INSA.
Para que uma amostra seja considerada satisfatria na globalidade, ter que ser
satisfatria nos 3 parmetros avaliados.
56
Resultados
De acordo com a tabela acima, verificmos que a amostra total obteve 42,54% das
amostras com 1 parmetro no satisfatrio, destes 17,02% so da amostra de
preparaes culinrias do grupo I, 14,53% do grupo II e 10,99% do grupo III.
Quando analisadas as amostras para dois parmetros no satisfatrios observmos uma
ligeira diminuio na percentagem total (39,01%), com um aumento nas preparaes
culinrias do grupo II (24,83%) e uma diminuio nas do grupo I (4,61%). As
preparaes culinrias do grupo III quase mantiveram (9,57%).
Relativamente a amostras com trs parmetros no satisfatrios, observmos uma
grande diminuio na percentagem total (2,13%), que ficou distribuda pelos grupos I
(0,36%) e II (1,77%), pois o grupo III no obteve nenhuma amostra com 3 parmetros
no satisfatrios.
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Tempos de Exposio
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Resultados
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Tempos de Exposio
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Discusso dos Resultados
magnitude logartmica em relao aos estudos acima mencionados para o Grupo III de
alimentos.
Estas diferenas podem justificar-se pela m lavagem e desinfeo das frutas e legumes.
Segundo Soriano, Rico, Molt & Maez (2000), a lavagem com hipoclorito de sdio
(70 ppm) ou permanganato de potssio (25 ppm) poderia diminuir a quantidade de
populao microbiana em duas ordens de magnitude logartmica. Podem igualmente
justificar-se estes resultados pela baixa qualidade do ar dos locais de processamento e
de exposio (Salustiano, Andrade, Brando, Azevedo & Lima, 2003), o que no caso de
eventos em tendas ou ar livre, como ocorreram no nosso estudo perfeitamente
expectvel.
No caso do parmetro Enterobacteriaceae, obtivemos no nosso estudo valores de
contagens entre 0,00 ufc/g e 1,7x108 ufc/g para o Grupo I, entre 0,00 ufc/g e 3,10x107
ufc/g para o Grupo II e entre 0,00 ufc/g e 2,4x1010 ufc/g para o Grupo III.
No estudo de Legnani et al. (2004) apenas tm resultados para coliformes totais e
para alimentos do Grupo I, tendo obtido contagens entre 0,00 ufc/g e 7,59x105 ufc/g.
Relativamente ao critrio E. coli e para o Grupo II, obtivemos contagens entre 0,00
ufc/g e 2,80x102 ufc/g, resultados com diferena de apenas uma ordem de magnitude
logartmica em relao aos obtidos no estudo de Legnagi et al. (2004), que variaram
entre 0,00 ufc/g e 2,00x103 ufc/g.
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Discusso dos Resultados
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Discusso dos Resultados
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Tempos de Exposio
produto fica livre de parasitas e com uma melhor qualidade microbiolgica e, portanto,
com um prazo de validade maior, e, por outro lado, os produtos adquirem novas
caratersticas sensoriais que podem ser muito apreciadas pelos consumidores.
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Concluses
V- CONCLUSES
No existem muito trabalhos desta natureza, pelo que achamos que as concluses
retiradas sero bastante vlidas para ajudar na implementao de Sistemas de Gesto da
Segurana Alimentar na restaurao de eventos e dar o mote a estudos futuros.
No nosso estudo no obtivemos uma relao linear entre a temperatura ambiente (Ta)
e as contagens de mesfilos e de enterobactrias, tal como seria de esperar partida,
embora haja diferenas significativas entre as contagens obtidas no ms de Julho e as
contagens obtidas nos meses de Setembro e Outubro, que tiveram temperatura mdia
ambiente mais elevada no ano civil em que ocorreu a recolha das amostras.
Encontraram-se ainda diferenas significativas na quantidade de mesfilos detetados
nos subgrupos de alimentos do estudo e, ao contrrio do que seria de esperar, os
"quentes" no tm os valores de contagens mais baixos em mdia, sendo os subgrupos
com menores contagens de mesfilos em mdia a "fruta laminada/DLE", "frios/GI" e
as "saladas". tambm interessante verificar que as contagens do subgrupo "fruta
laminada/PAC" e do subgrupo "frios/GII" foram similares e que h uma diferena
significativa entre as contagens do subgrupo fruta laminada/PAC e do subgrupo fruta
laminada/DLE.
De um modo geral, encontrmos uma elevada percentagem de unidades amostrais no
satisfatrias para as contagens de mesfilos (77,7%, 219 em 282) e para as contagens de
Enterobacteriaceae (43,6%, 123 em 282). Para o parmetro contagem de E. coli que
encontrmos uma elevada percentagem (94,3%, 266 em 282) de unidades amostrais
satisfatrias.
Relativamente evoluo da qualidade microbiolgica ao longo do tempo de exposio,
obtivemos uma percentagem de unidades amostrais no satisfatrias muito elevada em
quase todos os grupos para a contagem de mesfilos e para a contagem de
enterobactrias no incio do empratamento (T0), mas a percentagem de unidades
amostrais satisfatrias para o parmetro E. coli muito elevada no incio (95% no
Grupo I, 85,3% no Grupo II e 100% no Grupo III) e ao longo do tempo de exposio.
De uma maneira geral no se observaram degradaes estatisticamente significativas ao
longo do tempo de exposio, contudo, podemos concluir que o que afeta mais a
qualidade microbiolgica das preparaes culinrias na restaurao de eventos a sua
qualidade inicial. Conclumos tambm que o tempo de exposio a temperatura no
controlada afetou mais as preparaes culinrias do grupo I, pois, para as contagens de
mesfilos, existiu uma degradao (nico aumento significativo das unidades amostrais
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Tempos de Exposio
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Anexos
Prato: ________________________________________________________________
Histrico/Caractersticas do Produto
Manipulao: ___________________________________________________________
______________________________________________________________________
______________________________________________________________________
Proteo do Produto:_____________________________________________________
Etiquetagem: ___________________________________________________________
______________________________________________________________________
______________________________________________________________________
Instalaes: ____________________________________________________________
______________________________________________________________________
Chegada Incio do
Aps 2h Aps 4h Aps 6h Sada
ao evento Empratamento
Hora
Temperatura
do alimento
Temperatura
ambiente
77
Referncias Bibliogrficas
78
Anexos
79
Referncias Bibliogrficas
80
Anexos
81
Referncias Bibliogrficas
82
Anexos
83