HEMOGLOBINA

La hemoglobina es una protena conjugada que sirve para el transporte de

oxgeno y dixido de carbono. La masa total de eritrocitos de un adulto
contiene unos 600gr. De hemoglobina capaces de transportar 800ml de
oxgeno.

Existen varios tipos de hb. en el ser humano se pueden encontrar las

siguientes hemoglobinas normales:

Hemoglobina A: consat de 2 cadenas y 2 cadenas en un adulto normal

corresponde a mas del 95% del total.

Hemoglobina A: consat de 2 cadenas y 2 cadenas en un adulto sano esta

en porcin menor de 3%.

Hemoglobina F (fetal): consa de 2 cadenas y 2 cadenas . Es la

hemoglobina principal en el feto desde el 4 mes del embarazo hasta
aproximadamente los 6 meses de edad. La Hb F tiene mayor afinaidad por el
oxigeno.

Hemoglobina Gower: consa de 2 cadenas y 2 cadenas . Desaparece casi

por completo en el tercer mes de embarazo y empieza a aparecer la Hb fetal.

MTODO DE CIANOMETAHEMOGLOBINA.

Es el ms empleado, debido a que es colorimtrico, es barato y permite

medir todas las hemoglobinas presentes en la sangre

(Hb-O2, Hb-CO2, Hb-H a excepcin de la Hb-S).

FUNDAMENTO:

Para convertir la Hb-O2 en Hb-CN se utiliza el Reactivo de Drabkin, el cual

contiene ferricianuro de potasio K3Fe(CN)6 que convierte el Fe++ en Fe+++
convirtindose en metahemoglobina. Luego el KCN del mismo reactivo se
combina para formar la Cianometahemoglobina, cuyo pico mximo de
absorcin es de 540nm con un rango de 530 a 550 nm.

PROCEDIMIENTO:

1) Se marcan 2 tubos de ensayo, uno como blanco (B) y otro como

problema (P) y se colocan 5 ml. del Reactivo de Drabkin en cada uno.

2) Con la pipeta de Shali, se toma 0.02 ml (20ml) de sangre limpiando

perfectamente la pipeta por fuera con un segmento de papel desechable
humedecido con solucin salina, se pasan al tubo, lavando la pipeta 2 o 3
veces, por aspiracin y expulsin del reactivo dentro de la misma.
3) Se mezcla vigorosamente con cuidado. Dejar reposar la mezcla por 5
minutos. Pasar a las celdas.

4) Ajustar el espectrofotmetro a cero de absorbancia con el blanco de

reactivo (B) a 540 nm. y se lee la absorbancia del tubo problema.

5) Calcular la concentracin de la Hemoglobina, a partir de la Ley de Beer

o bien extrapolando en la Curva de calibracin.

VENTAJAS.

1. El mtodo de Cianometahemoglobina posee ciertas ventajas, ya que la

mayora de las formas de hemoglobina que se puedan encontrar en la
sangre (a excepcin de Hb S) se convierten a cianometahemoglobina con la
adicin del reactivo de Drabkin.

2. La mxima absorcin de la cianometahemoglobina a 540 nm, permite

la utilizacin de fotmetros con rangos de lectura cortos.

DESVENTAJAS.

1. La nica desventaja es que se trabaja con pequeos volmenes de

sangre (20 l) por lo que aumenta la probabilidad de error.