Anda di halaman 1dari 6

Zika virus (ZIKV) adalah arbovirus golongan famili flaviviridae yang ditularkan ke

manusia oleh nyamuk Aedes. ZIKV pertama kali diisolasi dari monyet hutan dari
Uganda pada tahun 1947 dan kemudian akhirnya ditemukan pada nyamuk dan
manusia.[1]

ZIKV dikaitkan sebagai penyebab terjadinya mikrosefali pada janin, perhambatan


pertumbuhan intrauterine, dan cacat lahir pada bayi. WHO menyatakan bahwa
mikrosefali dan gangguan neurologis yang berkaitan dengan ZIKV akan menjadi
masalah kesehatan secara global. ZIKV dipercaya menyebabkan neuropatologi pada
[2]
perkembangan janin dengan cara melewati plasenta

Dalam dekade terakhir, ZIKV telah muncul sebagai penyebab tidak jelas terjadinya
wabah besar di Mikronesia, Polinesia Prancis, Amerika Selatan dan Amerika Tengah.
Dalam beberapa kasus infeksi ZIKV ditemukan penyakit yang dapat sembuh dengan
sendirinya seperti ruam dan konjungtivis akan tetapi penyakit fenotip neurologis
yang berat juga bisa ditemukan seperti sindrom Guillain-Barre dan
Meningoencephalitis. Infeksi ZIKV pada wanita hamil menjadi perhatian utama
karena terkait dengan kelainan janin seperti mikrosefali, aborsi spontan, dan
pembatasan pertumbuhan intrauterine (IUGR) karena insufisiensi plasenta. Karena
masyarakat yang berkembang saat ini diperlukan hewan model yang terinfeksi ZIKV
intrauterine agar dapat menjadi pengujian terapi dan vaksin

Pada tahun 2015, Brazil mengalami kenaikan tajam dalam jumlah kasus kehamilan
terkait mikrosefali pada janin dan berhubungan dengan terjadinya wabah infeksi
ZIKV di negara tersebut. Adanya bukti menunjukkan bahwa infeksi ZIKV pada
wanita hamil menyebabkan kelainan kongenital dan kematian janin. Deskripsi awal
dari mikrosefali dan aborsi spontan pada janin telah didukung oleh bukti RNA virus
dan antigen yang ada di dalam otak janin dan bayi batu lahir yang terinfeksi.
Temuan ini diperkuat oleh sebuah penelitian kohort yang menyatakan bahwa ibu
hamil yang terinfeksi ZIKV menunjukkan 29% janin mengalami perkembangan
abnormal seperti mikrosefali dan pembatasan pertumbuhan intrauterine (IUGR)
mengalami kematian dalam kandungan ataupun lahir dalam keadaan mati. Kelainan
pada janin yang terinfeksi ZIKV dapat terjadi pada semua trimester kehamilan
walaupun manifestasi yang paling parah terjadi pada trimester pertama dan kedua.

Vaksin telanh dikembangkan untuk golongan flaviviridae lain seperti virus demam
kuning, virus dengue dsb. Akan tetapi vaksin untuk ZIKV belum ditemukan. Untuk
mengembangkan vaksin utnuk ZIKV diperoleh bagian dari virus zika dari timur laut
Brasil dan Puerto Rico yang disebut masing-masing ZIKV-BR dan ZIKV-PR. Strain
ZIKV dari lineage16 di Asia berbeda satu sama lain dikarenakan 5 asam amino di
lipoprotein tersebut.

Vaksin telah dikembangkan untuk flaviviruses lainnya, termasuk


virus demam kuning, virus ensefalitis Jepang, tick-borne ensefalitis
virus, dan virus dengue, tetapi tidak ada vaksin saat ini ada untuk ZIKV.
Untuk mengembangkan model tantangan praklinis untuk vaksin kandidat ZIKV,
kami memperoleh rendah bagian ZIKV isolat dari timur laut Brazil (Brazil /
ZKV2015; University of So Paulo) 11 dan Puerto Rico (PRVABC59; AS
Pusat Pengendalian dan Pencegahan Penyakit) (Extended data Gbr. 1).
Kami memperluas virus ini dalam sel Vero untuk menghasilkan tantangan praklinis
saham, yang kita disebut ZIKV-BR dan ZIKV-PR, masing-masing.
strain ZIKV ini adalah bagian dari lineage16 ZIKV Asia dan berbeda
dari satu sama lain dengan 5 asam amino di poliprotein tersebut (Extended data
Ara. 2). Brasil / ZKV2015 regangan juga baru-baru dilaporkan
rekapitulasi manifestasi klinis utama, termasuk microcephaly janin dan pembatasan
pertumbuhan intrauterin, di wildtype SJL mice11. Demikian pula,
terkait Perancis Polinesia H / PF / 2013 regangan telah terbukti
menyebabkan kerusakan plasenta dan kematian janin dalam Ifnar - / - C57BL / 6
tikus sebagai
serta di wildtype C57BL / 6 tikus berikut blockade10 reseptor IFN-.

Pada penelitian tersebut peneliti merangcang full-length ZIKV Pre-membran dan


envelope (prM-Env) immunogen dari strain Brazil BeH815744 dan dioptimalkan
dengan peningkatan ekspresi antigen. Selain itu, dirancang juga deplesi mutan prM
dan atau hilangnya region transmembran. Vaksin DNA plasmid dapat mengkode
produksi antigen, dan ekspresi transgen yang diverifikasi oleh western blot. Untuk
menilai imunogenitas vaksin sampel mencit strain balb/c menerima imunisasi
tunggal secara intramuskular 50 g tiap vaksin DNA yang dimulai dari minggu 0.
Respon antibodi EnV spesifik dievaluasi pada minggu ke 3 dengan menggunakan
prosedur ELISA. Dari hasil penelitian didapatkan titer antibodi Env spesifik lebih
tinggi dibandingkan Env DNA dan srmua DTM dan semua deplesi mutan.Vaksin Full-
length DNA prM-Env vaksin PRM-Env DNA menimbulkan Envspecific lebih tinggi
titer antibodi daripada vaksin Env DNA dan semua DTM
dan dStem penghapusan mutan (Gambar. 1c), menunjukkan pentingnya
termasuk PRM serta full-length Env urut. Tidak ada PRM spesifik
respon antibodi yang terdeteksi (Extended data Gbr. 3). fulllength yang
Vaksin PRM-Env DNA juga diinduksi penetral ZIKV khusus
antibodi setelah imunisasi tunggal (Tabel 1), yang diukur dengan
a microneutralization assay17 virus-spesifik. Selain itu, PRM-Env
Vaksin DNA yang diinduksi Env-spesifik CD8 + dan CD4 + T limfosit
tanggapan, sebagaimana dinilai oleh IFN- ELISPOT dan multiparameter intraseluler
sitokin pewarnaan (ICS) tes (Gambar. 1d-e).

We also designed
deletion mutants lacking prM and/or lacking the transmembrane region
(dTM) or the full stem (dStem) of Env (Fig. 1a). Plasmid DNA vaccines
encoding these antigens were produced, and transgene expression
was verified by Western blot (Fig. 1b). To assess the immunogenicity
of these vaccines, groups of Balb/c mice (N = 5-10/group) received a
single immunization of 50 g of each DNA vaccine by the i.m. route
at week 0. Env-specific antibody responses were evaluated at week 3
by ELISA. The full-length prM-Env DNA vaccine elicited higher Envspecific
antibody titers than did the Env DNA vaccine and all the dTM
and dStem deletion mutants (Fig. 1c), indicating the importance of
including prM as well as the full-length Env sequence. No prM-specific
antibody responses were detected (Extended Data Fig. 3). The fulllength
prM-Env DNA vaccine also induced ZIKV-specific neutralizing
antibodies after a single immunization (Table 1), as measured by
a virus-specific microneutralization assay17. In addition, the prM-Env
DNA vaccine induced Env-specific CD8+ and CD4+ T lymphocyte
responses, as assessed by IFN- ELISPOT and multiparameter intracellular
cytokine staining (ICS) assays (Fig. 1d-e).

Kami merancang full-length ZIKV pre-membran dan amplop (PRM-Env)


immunogens dari strain Brasil (Extended data Gbr. 2)
dan dioptimalkan mereka untuk peningkatan ekspresi antigen. Kami juga dirancang
penghapusan mutan kurang PRM dan / atau kurang wilayah transmembran
(DTM) atau batang penuh (dStem) dari env (Gambar. 1a). vaksin DNA plasmid
encoding antigen ini diproduksi, dan ekspresi transgen
diverifikasi oleh Western blot (Gbr. 1b). Untuk menilai imunogenisitas
vaksin ini, kelompok Balb / c tikus (N = 5-10 / kelompok) menerima
imunisasi tunggal 50 g tiap vaksin DNA oleh i.m. yang rute
pada minggu 0 respon antibodi Env-spesifik dievaluasi pada minggu 3
dengan ELISA. The full-length vaksin PRM-Env DNA menimbulkan Envspecific lebih
tinggi
titer antibodi daripada vaksin Env DNA dan semua DTM
dan dStem penghapusan mutan (Gambar. 1c), menunjukkan pentingnya
termasuk PRM serta full-length Env urut. Tidak ada PRM spesifik
respon antibodi yang terdeteksi (Extended data Gbr. 3). fulllength yang
Vaksin PRM-Env DNA juga diinduksi penetral ZIKV khusus
antibodi setelah imunisasi tunggal (Tabel 1), yang diukur dengan
a microneutralization assay17 virus-spesifik. Selain itu, PRM-Env
Vaksin DNA yang diinduksi Env-spesifik CD8 + dan CD4 + T limfosit
tanggapan, sebagaimana dinilai oleh IFN- ELISPOT dan multiparameter intraseluler
sitokin pewarnaan (ICS) tes (Gambar. 1d-e).

Kami memproduksi vaksin DNA mengungkapkan ZIKV pre-membran dan amplop


(PRM-Env), serta serangkaian mutan penghapusan. PRM-Env vaksin DNA, tetapi
tidak mutan penghapusan, diberikan perlindungan yang lengkap terhadap ZIKV,
yang diukur dengan adanya viremia terdeteksi berikut tantangan, dan kemanjuran
pelindung berkorelasi dengan titer antibodi env-spesifik. Transfer angkat dimurnikan
IgG dari tikus divaksinasi diberikan perlindungan pasif, dan penipisan CD4 dan CD8
T limfosit pada tikus yang divaksin tidak membatalkan perlindungan ini. Data ini
menunjukkan bahwa perlindungan terhadap tantangan ZIKV dapat dicapai dengan
single-shot subunit dan vaksin virus yang tidak aktif pada tikus dan bahwa titer
antibodi Env-spesifik mewakili berkorelasi imunologi kunci perlindungan. Temuan
kami menunjukkan bahwa pengembangan vaksin ZIKV bagi manusia adalah
mungkin tercapai.

2015, Brasil mengalami kenaikan tajam dalam jumlah kasus


microcephaly kehamilan terkait, dan ini terkait dengan
epidemi bersamaan infeksi ZIKV. Pemasangan bukti menunjukkan
bahwa infeksi ZIKV pada wanita hamil menyebabkan kongenital
kelainan dan kematian janin (Brasil et al, 2016;. Sarno et al,.
2016; Ventura et al., 2016). deskripsi kasus awal dari microcephaly
dan aborsi spontan telah didukung oleh
bukti RNA virus dan antigen dalam otak kongenital terinfeksi
janin dan bayi baru lahir (Martines et al, 2016;.. Mlakar et al,
2016). Temuan ini diperkuat oleh sebuah penelitian prospektif
dari kohort gejala, ZIKV terinfeksi wanita hamil di
yang 29% janin dipamerkan kelainan perkembangan
termasuk microcephaly dan IUGR, yang dalam subset kasus mengakibatkan
di kematian janin atau lahir mati (Brasil et al., 2016). Pendahuluan
laporan menunjukkan bahwa kelainan janin ZIKV diinduksi dapat terjadi
dalam semua trimester kehamilan meskipun manifestasi yang paling parah
berhubungan dengan infeksi pada trimester pertama dan kedua
(Brasil et al., 2016). Kelainan bawaan terkait
dengan infeksi ZIKV juga telah dijelaskan di Polinesia Perancis
(Dengan analisis retrospektif) dan negara-negara Amerika Latin lainnya
(Cauchemez et al., 2016). Temuan ini menunjukkan bahwa
strain ZIKV di Polinesia Perancis dan Amerika Latin berbagi
potensi untuk menyebabkan penyakit selama kehamilan.

Lebih dekade terakhir, ZIKV telah muncul dari status relatif tidak jelas
untuk menyebabkan epidemi besar di Mikronesia, Polinesia Prancis,
dan Amerika Selatan dan Tengah. Meskipun dalam kebanyakan kasus ZIKV
hasil infeksi pada penyakit demam membatasi diri terkait dengan
ruam dan konjungtivitis, fenotip neurologis berat dapat terjadi, termasuk sindrom
Guillain-Barre dan meningoencephalitis
(Carteaux et al, 2016;.. Oehler et al, 2014). Infeksi di hamil
perempuan adalah perhatian utama, karena terkait dengan bencana
kelainan janin termasuk microcephaly, aborsi spontan,
dan pembatasan pertumbuhan intrauterin (IUGR) karena plasenta
insufisiensi (Brasil et al., 2016). Karena masyarakat yang berkembang
masalah kesehatan, ada kebutuhan mendesak untuk membentuk hewan
model infeksi ZIKV intrauterin yang mendefinisikan mekanisme
penularan janin dan memfasilitasi pengujian terapi dan
vaksin. Selanjutnya, di dalam rahim hewan model infeksi ZIKV
akan membangun kausalitas dan memenuhi kriteria untuk bukti
dari teratogenicity (Rasmussen et al., 2016).
Pada 2015, Brasil mengalami kenaikan tajam dalam

Organisasi Kesehatan Dunia menyatakan kelompok microcephaly


dan gangguan neurologis dan hubungan mereka dengan infeksi ZIKV
menjadi darurat kesehatan masyarakat global pada tanggal 1 Februari 2016. ZIKV
adalah
diyakini menyebabkan neuropatologi dalam mengembangkan janin dengan
menyeberangi
plasenta dan menargetkan kortikal saraf progenitor cells9-14, mengarah ke
gangguan neurogenesis dan mengakibatkan mikrosefali dan bawaan lainnya
malformasi. ZIKV juga telah dikaitkan dengan neurologis
kondisi pada orang dewasa seperti Guillain-Barre syndrome15.
Vaksin telah dikembangkan untuk flaviviruses lainnya, termasuk
virus demam kuning, virus ensefalitis Jepang, tick-borne ensefalitis
virus, dan virus dengue, tetapi tidak ada vaksin saat ini ada untuk ZIKV.
Untuk mengembangkan model tantangan praklinis

ZIKV adalah arbovirus yang dimiliki oleh Flaviviridae keluarga dan ditularkan
kepada manusia oleh nyamuk Aedes mosquitos1. ZIKV pertama kali diisolasi dari
sentinel monyet rhesus di hutan Zika dari Uganda pada tahun 1947 dan memiliki
kemudian ditemukan di nyamuk dan humans1. Sampai saat ini,
ZIKV tidak dipandang sebagai patogen penting, karena
Sebagian besar infeksi yang asymptomatic2. kasus gejala ZIKV
menyerupai kasus ringan demam berdarah, demam, mialgia, artralgia,
sakit kepala, konjungtivitis dan rash3.

Zika virus (ZIKV) adalah flavivirus yang bertanggung jawab untuk


epidemi saat belum pernah terjadi sebelumnya di Brazil dan Americas1,2. ZIKV
telah kausal dikaitkan dengan microcephaly janin, intrauterine
pembatasan pertumbuhan, dan cacat lahir lainnya di kedua humans3-8 dan
mice9-11. Pesatnya perkembangan vaksin ZIKV aman dan efektif
adalah priority1,2 kesehatan global, tapi sangat sedikit saat ini diketahui tentang
ZIKV imunologi dan mekanisme perlindungan kekebalan tubuh. Sini
kami menunjukkan bahwa imunisasi tunggal vaksin DNA plasmid atau
vaksin virus tidak aktif dimurnikan memberikan perlindungan lengkap
pada tikus yang rentan terhadap tantangan dengan strain ZIKV wabah
dari timur laut Brasil. regangan ZIKV ini baru-baru ini ditampilkan
untuk melewati plasenta dan untuk menginduksi microcephaly janin dan lainnya
cacat bawaan pada mice11. Kami memproduksi vaksin DNA
mengungkapkan full-length ZIKV pre-membran