Revisin

VOL. 19 / N M. 2 Y 3 / 2000
INMUNOLOGA, 2000; PP 75-80

Inmunosenescencia
C. HERRERO, A. C ELADA
Departamento de Fisiologa (Biologa del Macrfago).
Facultat de Biologa. Universitat de Barcelona

INTRODUCCIN En las dcadas de los 60 y 70, se iniciaron los

estudios para demostrar cmo el envejecimiento

S
on numerosas y variadas las alteraciones afecta al sistema inmunlogico. Con muy pocas
fisiolgicas que se asocian con el envejeci- excepciones, estas investigaciones demostraron
miento. Quiz la alteracin ms importan- un declive con la edad tanto en las respuestas de
te sea el deterioro de la respuesta inmuno- tipo celular como en las de tipo humoral, en huma-
lgica (inmunosenescencia). Esta pare c e nos y en roedores (2).
ser la responsable de un incremento de la morbi-
cidad y mortalidad, y posiblemente, de procesos
autoinmunes y cancergenos que se observan en INMUNOSENESCENCIA
personas ancianas. La respuesta al virus de la gri- DE LOS LINFOCITOS T
pe y a los procesos de vacunacin frente a esta
Los primeros estudios de cmo el envejecimien-
enfermedad en las personas ancianas, han sido
to poda alterar la respuesta inmunolgica de un
particularmente bien estudiados y se dispone de
individuo, se centraron fundamentalmente en el
n u m e rosos datos epidemiolgicos. As, se sabe
anlisis de la actividad de los linfocitos T. Los pri-
que, del total de personas muertas por una epi-
meros datos obtenidos mostraron cmo la propor-
demia de gripe en los Estados Unidos, aproxima-
cin de linfocitos T CD4 y CD8 no presentaba cam-
damente el 80 90% corresponde a personas
bios con la edad. Por otro lado, la edad s provoca
mayores de 65 aos (1). A pesar de que la vacu-
grandes cambios en la proporcin de clulas vir-
na de la gripe que se administra actualmente,
gen o naive y clulas de memoria, tanto en los lin-
ofrece una elevada tasa de proteccin, el 60% de
focitos T CD4 como en los CD8, la proporcin de
las personas ancianas que han sido vacunadas
linfocitos T de ratn que expresan el marcador
sigue padeciendo la enfermedad. Adems, el 20%
CD44, tpico de clulas de memoria se incrementa
de las muertes por gripe que son ocasionadas en
con la edad en sangre, bazo y ndulos linfticos
personas ancianas no se puede prevenir a pesar
(3,4). El nmero de clulas que expresan el mar-
de las campaas de vacunacin (1). Estas obser-
cador CD45RBhi, tpico de clulas naive, disminu-
vaciones han sido atribuidas al declive del siste-
ye en el caso de ratones (4). En el caso de ancianos,
ma inmunolgico asociado al envejecimiento.
tambin se han descrito estas alteraciones (5, 6).
Numerosos factores pueden ser la causa de esta
deterioracin como pueden ser la involucin del
timo con la edad y el progresivo deterioro de los
Produccin de citoquinas
diferentes tejidos y tipos celulares implicados en
la generacin de una respuesta inmunolgica que Existe un gran nmero de estudios acerca del
ya han sido descritos (2). declive con la edad en la produccin de IL-2 por

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INMUNOSENESCENCIA
los linfocitos T, tanto en respuestas a lectinas como
a anticuerpos dirigidos contra las protenas inte-
grantes del complejo TCR-CD3 (2). Esta disminu-
cin de la secrecin de IL-2 es consecuencia de una
menor produccin de su mRNA (7-9). La obser-
vacin del declive en la produccin de IL-2 con la
edad, hizo pensar en el uso de esta citocina como
un potencial frmaco contra las inmunodeficien-
cias asociadas al envejecimiento. Sin embargo,
grandes dosis de IL-2 aadidas a los cultivos de
linfocitos T de donantes viejos no mejoran su res-
puesta a diferentes estmulos (10,11). La dismi-
nucin de la proliferacin de los linfocitos T
expuestos a estmulos policlonales parecen refle-
jar un conjunto de defectos: inferior produccin
de IL-2, menor expresin de receptores de IL-2 y
una peor respuesta de la citocina en aquellas clu-
las que presentan niveles correctos del receptor.
Los estudios realizados sobre la produccin de
IL-4, muestran cierta controversia. En el caso de
los linfocitos T obtenidos de ratn, la mayora de
los trabajos parecen indicar una mayor produc-
cin de esta citocina en cultivos in vitro en res-
puesta a anticuerpos anti-CD28 (4,12). Sin embar-
go, la estimulacin, tambin in vitro, con
anticuerpos anti-CD3 provoca una menor produc-
cin de esta citocina.
Tambin existen datos contradictorios acerca
de los posibles cambios en la produccin de IL-5 e
IL-10. La produccin de IL-5 por linfocitos T de
ratn estimulados con anticuerpos anti-CD3
inmovilizados parece incrementar con la edad
(13). A pesar de que otros estmulos, como pue-
den ser los anticuerpos anti-CD28, el PMA o la
I L - 4 , muestran una peor estimulacin de estas
clulas y por tanto, una menor produccin (14).
En lo que hace referencia a la IL-10, cuando se ha
usado anti-CD3 como estmulo, se ha descrito un
aumento en su sntesis con la edad pero se obser-
va una disminucin si la activacin se realiza con
IL-2 o IL-4 (14).
Por ltimo, la mayora de los trabajos realiza-
dos acerca del efecto del envejecimiento en la sn-
tesis de IFN, muestran un declive en su produc-
cin, incluyendo resultados obtenidos tras la
activacin de los linfocitos T con diferentes est-
mulos como son la concavalina A (15), la fitohe-
maglutinina (16) y anti-CD3 (17).
Activacin de los linfocitos T
El proceso por el cual un antgeno activa y esti-
mula la proliferacin de una clula linfocito T en
reposo, implica una cascada de seales que inclu-
ye cambios en los flujos de calcio, fosforilaciones
mediadas por quinasas y la transcripcin de cier-
tos genes.
El envejecimiento comporta un declive en la habi-
lidad de incrementar la concentracin de calcio
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intracelular en los linfocitos T humanos (18-20), de
ratn (21-23) y de monos (24), despus de una esti-
mulacin con activadores policlonales. Las bases
moleculares de esta menor liberacin de calcio son
todava desconocidas. Slo existen datos acerca de
una menor produccin de inositol-fosfato (IP3)
(25,26) que podra ser responsable, al menos en par-
te, del menor flujo de calcio.
Los primeros estudios acerca de alteraciones en
los procesos de fosforilacin de diferentes prote-
nas tras una activacin con ConA o anti-CD3 con
la edad, muestran un defecto en los linfocitos T de
donantes viejos (27,28). Sin embargo, estos traba-
jos no proporcionan informacin acerca del papel
de quinasas especficas o de sustratos proteicos
determinados. De estos trabajos se puede concluir
que durante el envejecimiento se altera el patrn
de fosforilacin de protenas, disminuyendo la tasa
de fosforilacin y slo incrementando el de unas
pocas protenas. Este proceso se observa tanto en
los linfocitos T CD4 como los CD8.
Finalmente, existen algunos artculos en los
que se describen disminuciones en la expresin
de diferentes genes cuyos productos se expresan
en las primeras etapas de la activacin como son
c-myc, c-myb, c-fos, c-jun y la formacin del com-
plejo AP-1 (29-32). En algunos casos (como por
ejemplo, c-myc) no est claro si las alteraciones
existentes representan defectos en el proceso de
transcripcin o de traduccin (29, 30).
Funcin T-citotxica
Durante el envejecimiento se observa una dis-
minucin progresiva en la produccin de linfo-
citos T citotxicos in vitro. Este proceso tiene
lugar de forma paralela al declive de la pro d u c-
cin de IL-2 por parte de los linfocitos T CD4 +
c o l a b o r a d o res (33,34). Adems, existe una
deficiencia intrnseca en la capacidad de los lin-
focitos CD8 en reposo para generar clones de
clulas efectoras en respuesta a un antgeno espe-
cfico (35). Los diferentes estudios re a l i z a d o s
acerca de la capacidad citoltica de las clulas T
citotxicas de ancianos muestran datos contra-
dictorios, existiendo datos que afirman que sta
no vara as como que se produce un deterioro
(36,37). En este sentido, se ha descrito que la
peor respuesta de ratones viejos al virus de la gri-
pe, se correlaciona con una peor generacin de
linfocitos T citotxicos.
Desarrollo de los linfocitos T
Uno de los efectos ms ampliamente descrito
de la vejez sobre el sistema inmunolgico ha sido
el proceso de involucin tmica. La disminucin
del tamao del timo, as como la sustitucin de
INMUNOLOGA
tejido parenquimal por tejido adiposo y conecti-
vo, resultan en la prdida de linfocitos CD4+CD8+
(38, 39). Experimentos de trasplante de tejido
tmico y mdula sea procedentes de ratones jve-
nes a ratones viejos, demuestran que la madura-
cin de los protimocitos a los linfocitos T est seve-
ramente comprometida a partir de los dos meses
de edad del ratn (40). Por otro lado, el nmero
de protimocitos en la mdula, no parece variar con
la edad aunque s sufren un proceso madurativo
diferente. As, el conjunto de precursores doble
negativo, que expresan CD44 pero no CD25, no
est alterado con la edad. Sin embargo, su proge-
nie inmediata (CD44+/CD25+, CD44- /CD25+,
CD44-/CD25) sufre un declive con el envejeci-
miento (41,42). Estos datos muestran cmo la
maduracin tmica en edades avanzadas parece
estar bloqueada en las primeras etapas, justo en el
momento previo al reordenamiento del gen V del
receptor del linfocito T (TCR) en los constituyen-
tes de la lnea germinal.
IMMUNOSENESCENCIA
DE LOS LINFOCITOS B
La enorme dificultad para analizar el efecto del
envejecimiento sobre la actividad de los linfocitos
B (medida clsicamente como proliferacin y
secrecin de anticuerpos), radica en distinguir
cundo la alteracin es intrnseca del propio lin-
focito B o bien es un reflejo de los defectos de los
linfocitos T que participan en su activacin. Los
estudios que se han realizado con mitgenos fuer-
tes, o bien aquellos en los que se ha utilizado un
exceso de participacin de linfocitos T, muestran
un declive en general de la actividad de los linfo-
citos B. As, la frecuencia de linfocitos B capaces
de responder a haptenos sintticos in vitro, dismi-
nuye hasta casi la mitad con la edad (43). Existen
pocos datos acerca de los cambios que tienen lugar
en los procesos de transduccin de seal en linfo-
citos B durante el envejecimiento. Los trabajos
publicados muestran cmo tras activar linfocitos
B por entrecruzamiento de inmunoglobulinas, con
esteres de forbol o con otros estmulos diferentes,
las tasas de traslocacin a la membrana y activa-
cin de PKC se ven reducidas hasta un 50% en el
caso de donantes viejos (44, 45).
Los anlisis por citometra de flujo, han permi-
tido detectar una menor proporcin con la edad
de linfocitos pre y pro-B en la mdula sea de los
ratones (46, 47). Adems, la capacidad de estos
precursores de generar linfocitos B maduros tam-
bin sufre un declive con la edad (47).
Produccin de anticuerpos y autorreactividad
Al igual que en otros aspectos del efecto del
envejecimiento sobre el sistema inmunolgico,
C. HERRERO ET AL
tambin existe controversia acerca de los datos
publicados sobre las posibles alteraciones en la
concentracin y los isotipos de inmunoglobulinas
en suero. Dos grupos, usando diferentes cepas de
ratones, han mostrado cmo se produce un gran
incremento (de hasta cinco veces) en la concen-
tracin en suero de IgM, IgA y IgG (48). Sin embar-
go, un tercer grupo no encuentra cambios con la
edad excepto para IgG2b (incremento de dos
veces) e IgG1 (incremento de tres veces). Por lti-
mo, los datos obtenidos en personas ancianas tam-
bin reflejan esta controversia (49, 50). Final-
mente, el envejecimiento comporta, tanto en
humanos (51) como en ratones (52), un aumento
en las concentraciones de anticuerpos reactivos
contra antgenos propios en suero. Dado que estos
anticuerpos presentan una baja afinidad por el
antgeno y que se encuentran en el 80% de perso-
nas ancianas y animales viejos, no parecen tener
consecuencias patolgicas relevantes.
Desarrollo de los linfocitos B
Los anlisis mediante citometra de flujo han
demostrado una menor presencia de linfocitos
pre-B y pro-B en la mdula sea de ratones viejos
(46). Adems la habilidad de estos precursores
para generar linfocitos B, est comprometida con
la edad (53). Los experimentos en los que se ha
realizado un trasplante de mdula sea de ratones
jvenes a ratones viejos irradiados, han mostrado
que tampoco en este caso se produce un desarro-
llo correcto de los linfocitos B. As mismo, el tras-
plante de linfocitos T de ratn joven a uno viejo,
da como resultado una produccin de linfocitos B
que presenta caractersticas propias del envejeci-
miento, como son un declive en la frecuencia de
linfocitos B reactivos (54).
INMUNOSENESCENCIA
DE LAS CLULAS NK
La mayora de los trabajos publicados hasta
ahora parecan estar de acuerdo en que la activi-
dad de las clulas NK no se vea alterada con la
edad en humanos (55). Sin embargo, en la actua-
lidad ya se dispone de datos que muestran ciertos
cambios funcionales en las clulas NK de ancia-
nos sanos. As, tras una estimulacin con IL-2, las
clulas NK de donantes viejos presentan una
menor movilizacin de Ca2+, una peor respuesta
proliferativa y una disminucin en la expresin de
CD69 (56,57).
INMUNOSENESCENCIA
DE LOS MACRFAGOS
A pesar del importante papel que juega el
macrfago en el desarrollo de una respuesta inmu-
77
INMUNOSENESCENCIA
nolgica, existen muy pocos trabajos publicados
acerca de cmo varan sus actividades funcionales
durante el proceso de envejecimiento. Adems, los
pocos datos existentes son, frecuentemente, con-
tradictorios entre ellos.
Los macrfagos son las clulas fagocticas ms
importantes del sistema inmunolgico. Son capa-
ces de matar microorganismos, clulas tumorales
y clulas propias daadas o muertas utilizando
principalmente especies reactivas de oxgeno y
nitrgeno y mediante la secrecin de algunas cito-
cinas como el TNF.
La produccin de radicales libres parece incre-
mentar con la edad en la mayora de los tejidos ana-
lizados. Sin embargo, en macrfagos, los escasos
estudios realizados al respecto parecen mostrar
una disminucin. As, macrfagos peritoneales
obtenidos de ratones adultos producen, tras una
activacin con IFN, aproximadamente un 50%
menos de NO que las clulas obtenidas de ratones
jvenes. Se ha descartado que esta disminucin
sea debida a una menor expresin del receptor de
IFN como se ha comprobado por anlisis de cito-
metra de flujo (58). En cuanto a la produccin de
radicales libres de oxgeno, se ha descrito que los
macrfagos peritoneales de ratones viejos en res-
puesta a diferentes estmulos (PMA, concavalina
A o zymosan) producen una menor cantidad de
O2- (59). El efecto del envejecimiento sobre la pro-
duccin de citocinas como el TNF o IL-1 tambin
parece resultar en una disminucin, tal como se
ha descrito utilizando macrfagos peritoneales de
ratones de 24 meses de edad (60).
Otra actividad importante de los macrfagos
que se ve alterada con la edad es la sntesis de pros-
taglandinas, en concreto, la PGE2. Los macrfa-
gos obtenidos de ratones viejos presentan una
mayor produccin de PGE2 contribuyendo as a
una desregulacin con la edad de las respuestas
inmunolgicas e inflamatorias. Este aumento es
debido a que existe una mayor disponibilidad del
sustrato a partir del cual se produce la PGE2, el
cido araquidnico (61).
En nuestro laboratorio hemos estudiado cmo
el envejecimiento afecta a los mecanismos de pro-
liferacin y activacin de los macrfagos deriva-
dos de mdula sea de ratones jvenes y viejos.
As, hemos podido ver que los macrfagos de rato-
nes viejos eran incapaces de proliferar en respues-
ta a GM-CSF. Esta respuesta alterada podra ser
debida a la falta de expresin de STAT5A, molcu-
la clave en el proceso de transduccin de la seal
de GM-CSF. Otros mecanismos moleculares de
sealizacin, como son las MAPK, no parecen
estar alterados con al edad (62). Por otro lado, la
induccin por IFN de las molculas de clase II del
complejo mayor de histocompatibilidad es menor
en el caso de los ratones viejos (63). Esta disminu-
cin se debe, probablemente, a un defecto a nivel
transcripcional de los genes de clase II.
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VOL. 19 NM . 2 Y 3 / 2000
PERSPECTIVAS FUTURAS
La mayora de los trabajos realizados hasta aho-
ra sobre el efecto del envejecimiento sobre la res-
puesta inmunitaria, han sido una descripcin
fenomenolgica sobre qu parmetros (sntesis de
citocinas, alteraciones celulares...) eran los que
estaban afectados con la edad. Prcticamente nin-
guno de ellos muestra cules son las alteraciones
a nivel gentico que explican las deficiencias
observadas a nivel funcional. As mismo, de
encontrarse estas alteraciones genticas, sera de
inters conocer cal es el mecanismo por el que se
producen.
La mayora de la teoras genticas acerca del
envejecimiento apuntan que la esperanza de vida
media de la mayora de las especies est determi-
nada por un programa de expresin gentica que
controla todas las etapas del envejecimiento y, por
tanto, la aparicin de un fenotipo senescente (64).
Esto supone que, el envejecimiento comportara
un patrn temporal intrnseco de expresin gni-
ca similar al que dirige los eventos moleculares del
desarrollo. Sin embargo, otras teoras sugieren que
el envejecimiento no es un proceso programado
sino ms bien, una falta de seleccin del manteni-
miento de las actividades funcionales. Por tanto, la
vida media de un organismo sera un balance entre
los cambios deletreos que pueden ocurrir en la
expresin de diferentes genes, y las capacidades de
reparar el dao ocasionado (65). Distintos tipos de
inestabilidad genmica han sido descritos durante
el envejecimiento. As por ejemplo, los individuos
que padecen el sndrome de Werner, asociado a un
envejecimiento prematuro, presentan una elevada
frecuencia de deleciones y reordenamientos gni-
cos (66). Otro ejemplo de inestabilidad genmica
que se ha descrito ha sido el de las telomerasas.
Existen en la literatura numerosos ejemplos de
cmo se reduce la longitud de los telmeros con la
edad (67). Recientemente se ha descrito que el
ratn knock out para el gen de la telomerasa presen-
ta un envejecimiento prematuro as como una ines-
tabilidad gentica elevada (68).
El deterioro en los sistemas de reparacin del
DNA que tiene lugar durante el envejecimiento,
podra ser responsable de la incorrecta expresin
de diversos factores de transcripcin que contro-
lan la expresin de molculas crticas del sistema
inmunolgico. Esta podra ser la base de las dis-
tintas alteraciones que tienen lugar durante la
immmunosenescencia.
CORRESPONDENCIA
Antonio Celada
Departamento de Fisiologa
Facultad de Biologa
Avda. Diagonal 645, planta 3
08028 Barcelona
INMUNOLOGA
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