Anda di halaman 1dari 4

Resume Isolasi dan karakterisasi antitumor alkaloid dari

kapsul poppy (Papaver somniferum)

Noskapin, alkaloid phthalideisoquinoline berasal dari opium, telah


digunakan dalam pengobatan berbagai jenis kanker, profil toksisitas
rendah telah meningkat memperhatikan alkaloid ini. Noskapin itu berhasil
isolared dari kapsul poppy untuk pertama kalinya dan kemurnian senyawa
terisolasi bertujuan untuk menjadi lebih 99,59% dengan analisis HPLC.
Struktur noskapin itu comfirmed oleh 1H NMR, 13CNMR, FT-IR, analisis
unsur, dan metode HR-ESI-MS. Introduction, senyawa alkaloid
membentuk, yang dapat ditemukan dalam produk-produk alami seperti
opium poppy, Papaver somniferum. alkaloid biasanya dihilangkan dari
produk alami menggunakan ekstraksi pelarut.

Namun, ekstraksi quintities sangat kecil alkaloid pada tanaman


alami diperlukan depelopment metode eksperimental baru dan lebih baik.
noskapin (3s), 6-7 dimetoksi-3 (5R) 4 metoksi 6 metil 5,6,7,8,
tetrahidro1,3 dioxolo 4-5 g isokuinolin 5yl isobenzofuran 1 (3H) satu,
adalah alkaloid phthalideisoquinoline alami yang diperoleh dari opium
poppy yang telah digunakan selama beberapa dekade batuk penekan
sangat aman dengan tidak ada efek samping tidak seperti alkaloid lain,
noskapin tidak adiktif.

Efek teraupetic dari noskapin dalam menghambat progresseion


tumor pada hewan percobaan yang angoing (4,6) Selain itu, penelitian
histologis menunjukkan bahwa noskapin tidak beracun untuk jaringan
normal (1,7,8) ,. umumnya alkaloid yang didapatkan dari opium poppy,
secara struktural kompleks, dan kebanyakan dari mereka tidak dapat
secara ekonomis sythesized. noskapin, memiliki profil farmakologi yang
sangat baik, oleh karena itu hasil murni dari alkaloid ini dari tumbuhan
alami sangat penting.

jerami poppy merupakan sumber alternatif yang secara kimia


digunakan untuk mengekstrak alkaloid. untuk Metode ini, kapsul
P.Somniferum adalah dengan cara di potong dan dikeringkan di udara di
bidang kemudian dipanen dan hancur untuk jerami. di banyak negara
metode ini hadir sebagai rute alternatif untuk mendapatkan alkaloid
seperti noskapin karena fakta bahwa penggunaan opium mentah yang
mengandung morfin substansi dikendalikan mungkin dibatasi oleh aturan
govermental. karena pembatasan ini, produsen noskapin telah mencari
sumber dan poppy jerami baru, yang dipanen ketika sepenuhnya matang
dan kering, yang cocok untuk ini. Penting untuk mengatakan bahwa
jerami poppy mungkin berisi jumlah yang jauh lebih tinggi relatif noskapin
dengan morfin contect (12). Namun P, Somniferum telah dimodifikasi
secara genetik oleh penyisipan gen baik meningkatkan produksi alkaloid
atau untuk mematikan gen yang bertanggung jawab untuk produksi
alkaloid nonrequired.Proses yang sederhana untuk mengisolasi alkaloid
sangat diinginkan untuk mengevaluasi kualitas produk. makalah ini
menjelaskan metode untuk ekstraksi dan pemurnian noskapin yang hadir
dalam jerami poppy .in metode ini, noskapin diperoleh dalam kemurnian
cocok untuk digunakan dalam pharmakopy, (99,59%). struktur chimical
dari alkaloid ini ditunjukkan pada Gambar 1.

Titik leleh ditentukan dalam tabung kapiler kaca terbuka dengan


cara titik leleh B-540 aparat BUCHI. infra merah (FT-IR) Spectra diambil
dengan menggunakan spektrum PerkinElmer satu spektrofotometer FT-IR,
Vmax di CM1. 1H dan C13 Nuklir magnetic resonance (NMR) diambil
dengan Bruker 500 NMR spektrometer. pergeseran kimia reportedin ppm.
resolusi tinggi electrospray ionisasi spektrum massa (HR-ESI-MS) diperoleh
dengan MeOH pada Bruker mikrOTOF-Q. ANALISIS ELEMENTAL (EA) yang
dilakukan menggunakan thermo Finnigan FLASH 11-12 SERIES EA
instrumen. Rotasi spesifik diukur pada aktivitas optik Ltd, A55 instrumen
polarimeter menggunakan 2cm3 sel dengan panjang jalur 0,5 dm dan
konsentrasi sampel diberikan dalam g / 100cm3 Unit. reagen kimia untuk
isolasi adalah kelas analitis dan dibeli dari Mecrk (Darmstadt, 90 Jerman).
Semua pelarut disaring melalui filter membran 0,45um sebelum
disuntikkan ke HPLC.

Bahan tanaman, poppy kapsul tersebut dibeli dari Turki Grain Dewan
Pada bulan Agustus 2009. Untuk metode ini, kapsul P, somniferum
dipotong dan dikeringkan di udara di bidang kemudian dipanen dan
hancur untuk jerami. kapsul ini tumbuh dari biji rekayasa genetika dan
mengandung 1,5% (w / w) noskapin.Extraction dari noskapin mentah.
Sebuah leher tiga labu didakwa dengan 500g dari udara kering dan tanah
poppy jerami, 200 cm 3. dari etanol, dan 250 cm3 air demineralisasi. isi
yhe labu diaduk secara mekanis. suspenssion disaring. ekstrak alkohol
terkonsentrasi pada tekanan rendah untuk memberikan 200 cm 3 fase
aqua coklat. The ph larutan ditetapkan 3,5 dengan menambahkan
acid.5,0g asetat arang aktif ditambahkan ke dalam larutan ini dan isinya
dipanaskan sampai 60 C dan diaduk mekanis selama lima belas menit.
Solusi ini disaring. Filtrat diekstraksi kloroform wiht (4 times250cm3) dan
ekstrak digabungkan.
Ekstrak kloroform dipekatkan untuk memberikan 15g residu coklat
gelap. Residu ini dilarutkan dalam 400ml larutan asam asetat 10% dan
dipanaskan sampai 50 p. Kemudian ph larutan ini dibuat 9,3 dengan
menambahkan 25% amonia perlahan. noskapin mentah diendapkan.
Endapan disaring dan dikeringkan dalam oven pada 105 c. Pemurnian
noskapin mentah. noskapin mentah dihentikan di 50cm3 toluena.
Suspensi dipanaskan sampai 70-80 0c. 5,0g arang aktif ditambahkan dan
diaduk mecanichally selama lima belas menit pada suhu kamar. Larutan
disaring. Filtrat concentarted pada tekanan rendah untuk memberikan
endapan putih dan diaduk mekanis selama tiga puluh menit dalam
penangas es. Endapan putih disaring dan dikeringkan dalam oven pada
105 * c. padatan putih yang dihasilkan berhubungan dengan yield 90%
dan kemurnian oleh HPLC dari 99,59% 2.5. Penentuan Konten Alkaloid dari
Poppy Capsule. Minyak mentah noskapin dan Pure noskapin oleh HPLC.

Persiapan sampel, 200 mg homogen, bubuk, poppy kapsul kering


terguncang dengan 50,0 cm 0,1 M asam klorida selama 2 jam. Sebuah
alikuot ekstrak wasltrated dan menyusup itu diisi dengan vial 50 mg
noskapin mentah atau noskapin murni dilarutkan dalam 5 cm dari 10%
larutan asam asetat ditambahkan sekitar dan 100 cm dari air
demineralisasi, disonikasi untuk membubarkan, kemudian diencerkan
dengan 250 cm3 dengan air demineralisasi Itu dicampur dengan baik diisi
dengan vial. Kromatografi System, Agilent 1200 HPLC dengan
kemampuan deteksi UV-vis Andari 0,01 cm Volume injeksi yang
digunakan. e panjang gelombang yang digunakan selama analisis adalah
288 nm. Sebuah Eurospher-100 kolom (KNAUER) seluas 120 4 mm,
5 ??? ukuran m partikel dan dengan fase stasioner C18 digunakan. e
kolom dipanaskan dan mempertahankan 40C. e fase seluler terdiri dari (A)
air dengan 0,67% asam tri uoroacetic (TFA) dan (B) 0,67% TFA dalam
campuran metanol, asetonitril, dan air (500/16/129 cm) menggunakan
sistem gradien. e ow tingkat adalah 1,0 mL / menit dan Program elusi
yang diterapkan dijelaskan pada Tabel 1.

Noskapin diisolasi sebagai kristal putih solid dengan rotasi negatif =


-176 ( = 0,5 g / 100 cm, CHCl) Beberapa sistem elusi diuji dalam hasil e
pemisahan HPLC menunjukkan bahwa ketika metanol-asetonitril-air
digunakan sebagai fase gerak dalam mode gradient (Tabel 1) hasil
pemisahan yang baik bisa didapat. analisis HPLC jerami poppy, ekstrak
kasar, dan murni acara noskapin yang noskapin jelas dipisahkan dan
dipamerkan kromatogram didefinisikan dengan baik-de dengan waktu
retensi 14,586 menit dalam kondisi eksperimental yang dipilih (Gambar
2).
E isi noskapin di ekstrak mentah 49,4%. Sebuah er puri pengobatan
kation, kemurnian fraksi dikumpulkan puncak 1 ditemukan 99,59% .
rumus molekul yang ditentukan sebagai CHNO22237 atas dasar HR-ESI-
MS (/ 414,1553 [M + H] +, calcd untuk CHNO414.1532). Gambar 3
menunjukkan puncak ion molekul yang diharapkan pada / = 414.1553,
menunjukkan pembentukan [MH]. e struktur kimia dari fraksi puncak pada
Gambar 2 (c) adalah ed identifikasi sesuai dengan yang FT-IR, data yang H
NMR C NMR ese yang cocok dengan literatur [12-15]. Gambar 4
menunjukkan spektra inframerah dari produk noskapin murni dan
noskapin standar (dibeli dari Turki Grain Board) IR spektrum menunjukkan
banyak band yang tajam antara 700 dan 1500 cm yang ditugaskan untuk
deformasi dan peregangan getaran dari sistem cincin alkaloid. Juga, band
yang kuat di 1756 cm-1is paling karakteristik untuk C = O peregangan
getaran.

e NMR spektrum noskapin menunjukkan dua doublet satu-proton


di 6.96 dan 6.08 ppm ditugaskan untuk proton aromatik di ring phthalidyl.
e satu-proton singlet sinyal pada 6.31 ppm dikaitkan dengan proton
aromatik di ring isoquinoline. e tiga proton singlet pada 3,86 ppm, 4,05,
dan 4,09 ppm dianggap berasal metoksi proton dalam isoquinoline dan
phthalidyl cincin, masing-masing. e sinyal pada 5.94 yang diberikan
sebagai singlet dua-proton dicatat metilen dioxy proton. e sinyal singlet
pada 2,55 ppm adalah karena N-CH proton protons.e -CH-CH- cincin
isoquinoline yang muncul sebagai multiplet di 2,32-2,38 ppm. E spektrum
C NMR senyawa dipamerkan sinyal untuk karbon aromatik antara 117,2-
134,1 ppm, methylene- karbon dioxy di 100,7 ppm, dan karbon karbonil di
168.0ppm. e sinyal pada 56,9, 59,4, dan 62,2 ppm dianggap berasal
metoksi atom karbon. e atom karbon yang atom nitrogen terikat diamati
pada 46,3 ppm.