PARTE 1

INTRODUCCIN A LA FISIOLOGA VEGETAL

LAS CLULAS DE LAS PLANTAS: COMPARTIMENTACIN,
MEMBRANAS Y PARED CELULAR
La fisiologa vegetal es la ciencia que estudia cmo funcionan las plantas; esto
es, qu ocurre en las plantas que las mantiene vivas. Una planta es as un organismo
eucariota pluricelular, con clulas dotadas de pared celular lignocelulsica (lo que las
diferencia de los hongos). La presencia de pared celular caracteriza la biologa de las
clulas de las plantas. La pared celular evita que la clula tenga que estar en un medio
isotnico; y la bomba de Na+/K+ apenas funciona en las clulas vegetales.
Las clulas de las plantas presentan una
especializacin funcional, en funcin de la cual
desempearn una serie de funciones. Dichas
funciones de una planta son la captacin de energa,
nutrientes y CO2; permitindole la sntesis de
molculas orgnicas en sus estructuras celulares.
El agua que llena las clulas proporciona
una fase acuosa para los distintos procesos
fisiolgicos y, por turgencia, da forma a la clula.
Las plantas no slo fijan CO2, sino que tambin lo
liberan en mucha menor medida. Igualmente, las
plantas no slo liberan O2, tambin lo consumen en
menor medida en la fotorrespiracin.
El desarrollo de las plantas responde a un programa de desarrollo en su genoma.
Al no poder desplazarse, las plantas tienen que adaptarse o morir al ambiente donde
estn viviendo; por ello, las plantas tienen una plasticidad. Sin embargo, hay daos
producidos por exceso de irradiacin luminosa a los que tambin
se tienen que adaptar. Dicha plasticidad viene dada por:
- Interacciones abiticas: Luz, fotoperiodo,
temperatura, nutrientes, longitud de onda de la
luz (calidad de la luz), etc.
- Interacciones biticas: Aspectos ecolgicos,
polinizacin, infecciones, etc.
Las membranas son la base de la compartimentacin
celular. Las clulas vegetales consideradas como tpicas son las clulas del mesfilo
fotosinttico. stas tienen una serie de orgnulos membranosos, como mitocondrias,
aparato de Golgi, retculo endoplasmtico, vacuolas, etc. La membrana es hidrofbica,
lo que permite delimitar los compartimentos. Compartimento Vol (%)
La vacuola es un orgnulo cuya membrana, sencilla, se Vacuola 527%
denomina tonoplasto; y ocupa un gran porcentaje del volumen Cloroplastos 213%
celular en clulas diferenciadas. Citosol 45%
El espacio entre la cara Mitocondrias 07%
Ncleo 04%
interna de la membrana
Apoplasto 160%
plasmtica y la membrana
externa de las membranas internas de la clula recibe el
nombre de simplasto. El espacio entre la membrana
plasmtica de una clula y la de la siguiente es el nombre
de apoplasto, e incluye la pared celular.
As, el apoplasto suele ser continuo, y representa

Iago Molist Prez 1 Fisiologa Vegetal, 3 Biologa (USC)

un 16% del volumen celular. Las clulas pueden estar comunicadas por plasmodesmos,
haciendo que el simplasto no est restringido a una sola clula.
El volumen de la vacuola con respecto al citosol es del orden de 13:1. Las
reacciones enzimticas dependen de la concentracin de sustrato, por lo que para tener
igualdad de condiciones para que una reaccin se lleve a cabo en el citosol o en la
vacuola dicha concentracin debe ser la misma. Por ello, la vacuola debera contener
una cantidad 13 veces superior de sustrato al citosol. De esta forma, es ms rentable
realizar las reacciones enzimticas en el citosol que en la vacuola. La
compartimentacin afecta as a la actividad metablica: el coste energtico de sta es
menor cuanto menor sea el tamao del compartimento.
La permeabilidad de las membranas depende de su hidrofobicidad: las sustancias
hidrofbicas pasarn con mayor facilidad; mientras que las hidroflicas ofrecen una
mayor resistencia a esta difusin (excepto el agua, cuya permeabilidad es an mayor en
las membranas biolgicas debido a la presencia de aquaporinas). Adems, el
movimiento de las molculas lipdicas favorece que se formen huecos, donde se
introducen y pasan molculas de agua.
Las membranas, sin embargo, al restringir el paso de sustancias hidroflicas,
deben utilizar sistemas de paso concretos para determinadas sustancias, en lo cual radica
su selectividad. La composicin lipdica difiere segn la membrana considerada,
condicionando as su funcionalidad.

Lpidos neutros Glucolpidos Fosfolpidos ndice de

(Esteroles) insaturacin
Membrana plasmtica 50 1 49 144
Mitocondria:
- M. externa 0 99 156
- M. interna 0 99 186
Cloroplasto
- M. externa 56 29 94
- M. interna 84 13 94
- Tilacoides 83 17 283
Tonoplasto 18 31 51

La composicin lipdica viene dada por la actividad metablica de la misma, y

afecta a la fluidez de la membrana. Dicha fluidez se mide por el ndice de instauracin
(nmero de dobles enlaces en cis por cada 100 restos de cidos grasos).
La temperatura de cambio de fase es una temperatura tal que bajo ella la fluidez
de la membrana es tan baja que sta no es funcional. As, cuantos ms cidos grasos
saturados haya, hay ms empaquetamiento (ya que encajan mejor entre ellos) y la
temperatura de cambio de fase aumenta; mientras que cuantos ms cidos grasos
insaturados haya, hay un menor grado de empaquetamiento (debido a que encajan peor
entre ellos) y la temperatura de cambio de fase disminuye.
Las plantas rebajan esa temperatura de cambio de fase aumentado el grado de
instauracin de sus cidos grasos, para ampliar a menores temperaturas su grado de
funcionalidad.
En la membrana plasmtica hay una serie de protenas asociadas:
- Protenas integrales: Estn ancladas en la fase lipdica mediante sus
dominios hidrofbicos, y slo se pueden extraer mediante tratamientos
con detergentes.

Iago Molist Prez 2 Fisiologa Vegetal, 3 Biologa (USC)

 - Protenas perifricas o extrnsecas: Son protenas dbilmente unidas a
la membrana plasmtica, por lo que se extraen fcilmente con
tratamiento con sales.
- Rafts: Son microdominios
ricos en esfingolpidos y
esteroles.
- Protenas ancladas a la
membrana: Son protenas
que mediante anclajes
lipdicos permiten que la
protena no se solubilice y
se mantenga anclada en la
membrana; aunque tambin
pueden estar unidas a la
pared celular.
La permeabilidad selectiva de las
membranas deriva de sistemas de transporte que contienen protenas integrales de
membrana. Sin embargo, qu dominios de una protena atraviesan la membrana y
cules no?
Cada aminocido, dentro de un ambiente hidrofbico (como el la membrana
plasmtica) siempre est en configuracin de hlice ; ocupando unos 015nm. Como la
membrana tiene un grosor de 3nm, son necesarios 20 aminocidos para atravesarla
(asumiendo que la hlice es perpendicular a la membrana).

- Paso de sustancias a travs de la membrana -

El paso de sustancias a travs de la capa hidrofbica de la membrana depende de
su carcter hidrofbico o hidroflico. Cuanto mayor es el coeficiente de difusin, mayor
es el grado de disolucin de una sustancia en la bicapa lipdica (y, por tanto, la
atravesar con mayor facilidad) y viceversa. As, se puede ver cmo permean las
sustancias por la membrana.
De esta forma, la membrana permite una compartimentacin. Al impedir el paso
de muchas sustancias, el paso de stas a su travs tendr que ser realizado mediante
mecanismos especficos de transporte, los cuales permiten un control y una selectividad
mayores.
El potencial qumico es la expresin de la capacidad de una sustancia para
realizar un trabajo, y se calcula segn la frmula:
s = s + RT ln C s + Z s FV + Vs P
0

Siendo s0 el potencial qumico bajo condiciones estndar, RTlnCs la

contribucin de la concentracin, ZsFV la contribucin de la carga y el potencial
elctrico y VsP la contribucin de la presin y el volumen molar. As, en el valor del
potencial qumico influyen la naturaleza de la sustancia, su concentracin (siendo
directamente proporcional a sta), la carga elctrica, el campo elctrico y la presin. Las
sustancias pasan de un mayor potencial qumico a otro menor, siendo as un paso
termodinmicamente favorable.

Sustancia no cargada (S).

La ecuacin anterior se convierte en s = s + RT ln S ,
0

ya que se trata de una sustancia sin carga (por lo que no hay

que tener en cuenta las cargas) y la presin, al tratarse de la

Iago Molist Prez 3 Fisiologa Vegetal, 3 Biologa (USC)

presin atmosfrica, no se considera.
( s ) E = s + RT ln S E
0

( s ) I = s + RT ln S I
0

S
s = RT ln E
SI
Si (s)E es mayor que (s)I, la sustancia entra en la clula; si (s)I es mayor que
(s)E, la sustancia sale de la clula; y si (s)I y (s)E tienen el mismo valor, la sustancia
est en equilibrio. Si la sustancia se pierde, disminuye el potencial qumico; si se gana,
aumenta el potencial qumico.
La sustancia se mueve por gradiente de potencial qumico. Sin embargo, la
membrana puede impedir que entre (coeficiente de difusin), por lo que se hace
necesario un mecanismo de transporte de sta (canales, etc.). As, hay dos tipos de
transporte:
- Pasivo: A favor de gradiente.
- Activo: En contra de gradiente. Se compensa el gradiente de potencial
qumico proporcionando energa para que en el balance global se tenga
una energa libre de Gibbs menor de cero.
En un estado inicial, en el exterior de la clula habra una sustancia SE con un
potencial qumico de (s)E; mientras que en el interior la misma sustancia SI estara con
un potencial qumico de (s)I. Tras la entrada de n moles de dicha sustancia en el
interior de la clula:
Exterior Interior
SE n moles SI + n moles
G E = ( s ) E . n G I = ( s ) I . n
As, G = G E + G I ; por lo que ( s ) E > ( s ) I . Al ser mayor el potencial
externo que el interno, el paso es termodinmicamente posible.

Sustancia con carga elctrica (I).

I = I + RT ln I + ZF
0

( I ) C = I + RT ln(I) C + ZF C
0

( I ) 0 = I + RT ln(I) 0 + ZF 0
0

I
I = RT ln C + ZF( C 0 )
I0
I
I = RT ln C + ZFVm
I0
El sistema est en equilibrio cuando el potencial qumico de la sustancia en el
interior y el exterior de la clula es el mismo (la diferencia de potencial es cero).
Considerando un in monovalente (Z=1) y un Vm=-116mV, el equilibrio se alcanza
cuando la relacin de concentracin I C I 0 = 100 . Considerando sin embargo un in
divalente (Z=2), la relacin de concentracin I C I 0 = 100 se alcanzara a un Vm de
-58mV.
Esta diferencia de potencial nos puede permitir explicar acumulaciones de
cationes en la clula con respecto al exterior y viceversa. El potencial slo depende de la
carga y la concentracin de los iones, no del in per s.

Iago Molist Prez 4 Fisiologa Vegetal, 3 Biologa (USC)

 Un experimento consiste en la colocacin de raz de avena (Avena sativa) en
distintas disoluciones de cationes y aniones para comprobar qu es lo que ocurre. El in
K+ se encuentra a concentraciones muy superiores a las esperadas, ya que en las clulas
existe un mecanismo que permite acumularlo por encima de la concentracin de
equilibrio. El in Na+, sin embargo, se encuentra a concentraciones muy inferiores a las
esperadas, por lo que en las clulas debe haber algn mecanismo que lo excluya.
Finalmente, el in NO3- se encuentra a una concentracin muy superior a la esperada, lo
que implica que debe haber algn mecanismo que evita que se alcance el equilibrio.

- Gnesis del potencial de membrana -

En la clula hay una diferencia de potencial que explica una diferencia de
concentraciones. Cmo se genera esa diferencia de
potencial? La hiptesis ms conocida es la de la
ecuacin de Goldman: hay una diferencia de potencial a
ambos lados de la membrana porque sta tiene distinta
permeabilidad para cada in en funcin de su carga o
volumen inico.
Si pasan sobre todo los aniones, se acabara
teniendo una carga negativa a un lado de la membrana;
aunque con esta hiptesis un Vm de -50 o -60mV se queda corto, ya que la diferencia de
potencial estndar para la membrana es de -150mV y de +20mV para el tonoplasto.
En una solucin con aniones y cationes que se difunden segn su carga y tipo de
in, al cabo de cierto tiempo se puede esperar una distribucin asimtrica a ambos lados
de la membrana si sta tiene una permeabilidad distinta para aniones y para cationes. De
esta forma, la ecuacin de Goldman slo explica una diferencia de potencial de -50 o
-60mV, lo que slo es una parte del potencial de membrana.
Inhibiendo la cadena respiratoria con KCN (de esta forma, deja de producirse el
ATP necesario para que funcionen las bombas), el potencial de membrana cae de
-150mV a valores similares a los explicados por la ecuacin de Goldman; al retirar el
KCN el potencial se recupera a los valores habituales. As, el mantenimiento de cierto
potencial de membrana depende del metabolismo energtico. Depende as de un
mecanismo activo que mantenga el potencial de membrana; y ste puede consistir en
sacar cargas positivas o introducir cargas negativas. Lo que sucede es que hay
mecanismos que transportan cargas positivas (hidrogeniones, H+) al exterior.
- Potencial basal: Por distinta permeabilidad en la difusin de iones.
- Resto del potencial: Por el transporte de hidrogeniones.
El transporte de hidrogeniones con gasto de ATP se realiza mediante un
mecanismo especfico, ya que las membranas biolgicas son impermeables a los
hidrogeniones. Por tanto, como en las clulas vegetales la bomba Na+/K+ no funciona, la
diferencia de potencial se genera por el transporte de hidrogeniones. El transporte a
travs de la membrana se realiza por mecanismos especficos que regulan el paso, lo
que permite una cierta selectividad:
- Bombas (Transportadores primarios): Transportan sustancias con gasto
directo de energa.
- Transportadores secundarios: Permiten que una sustancia vaya a favor
de gradiente gracias al gradiente de hidrogeniones. Sigue una cintica
Michaeliana.
- Canales: Permiten el paso de sustancias a favor de gradiente. Estn
sujetos a la difusin y presentan una relacin lineal paso/concentracin.

Iago Molist Prez 5 Fisiologa Vegetal, 3 Biologa (USC)

 - Bombas -
La gnesis del potencial de membrana implica el paso de hidrogeniones. Las
cargas positivas que poseen intrnsecamente implican que tendern a entrar a favor de la
diferencia de potencial (despolarizando la membrana) y de gradiente, por lo que es
necesario un transporte activo de los hidrogeniones: las bombas de hidrogeniones.
H+-ATPasa tipo P.
A nivel de la membrana plasmtica hay bombas de hidrogeniones dependientes
de ATP, llamadas H+-ATPasas de tipo P (de tipo P por el intermediario fosforilado). Se
encuentra en el plasmalemma.
Est formada por una protena con 10 dominios
transmembrana que forma un canal a travs del cual pueden
pasar los hidrogeniones. El paso de stos aumenta el
potencial de membrana, por lo que se requiere el aporte de
energa en forma de ATP.
Hay un loop hidroflico en el interior con un residuo
de cido asprtico (Asp), a donde se une el ATP para provocar un cambio
conformacional que permitir el paso del hidrogenin. Este mecanismo de transporte
implica la existencia de un intermediario fosforilado.
Estas bombas transportan 60H+/s; y por cada H+ transportado se consume una
molcula de ATP. La Km es de 0.15 a 1.5mM; y el peso molecular del pptido es de
100 kD.
H+-ATPasa tipo V.
Son bombas de hidrogeniones que se encuentran a nivel
del tonoplasto, recibiendo este nombre por ser inhibidas por
ortovanadato, y se encuentran as en la vacuola. Presenta unas
protenas integrales de membrana que forman el canal (V0); as
como otros pptidos en la cara citoslica (V1).
Transportan hidrogeniones al interior de la vacuola
tambin a una velocidad de 60H+/s; pero en este caso la
estequiometra de la reaccin es de 3H+ transportados por cada
molcula de ATP gastada, y la Km es asimismo menor, del
orden de 0.1 a 0.2mM. Su peso molecular es mayor, de 580 a
700 kD.
Pirofosfatasa.
Hidroliza pirofosfato para dar dos molculas de fosfato (PPi 2Pi), que
necesita recuperar la clula para emplearlos en la sntesis de ATP. Esta pirofosfatasa
aparece asociada con la membrana de la vacuola slo en las plantas.
Tiene 15 dominios transmembrana con una serie de loops hidroflicos. Los
pptidos tienen secuencias tpicas de pirofosfatasas; y adems de su actividad
pirofosfatasa tambin transporta H+ (actuando as como bomba electrognica).
Utiliza adems el pirofosfato en la sntesis de polisacridos; y adems al
hidrolizarlo para mantener los niveles de fosfato permite el paso de hidrogeniones al
interior de la vacuola con la energa liberada en ese paso.
Transportadores ABC (MRP2 de Arabidopsis).
Son transportadores que consisten en un pptido con 15 dominios
transmembrana con dos secuencias (Walker A y Walker B) caractersticas de esta
familia. Su extremo N-terminal se encuentra en el lumen; mientras que su extremo
carboxi-terminal est en el citosol. Transportan diferentes sustancias con utilizacin
directa de la energa del ATP; si transportan sustancias con carga, sern electrognicas.

Iago Molist Prez 6 Fisiologa Vegetal, 3 Biologa (USC)

 Su nombre ABC proviene del ingls ATP Binding Cassette (Casete de Unin al
ATP). Transportan cationes de metales pesados, pptidos, etc. Su actividad es sin
embargo reducida, por lo que no influyen demasiado en la gnesis del potencial de
membrana.

En el genoma de Arabidopsis hay ms de 100 transportadores, clasificados en

distintas familias. En animales hay un menor nmero de transportadores ABC, ya que
stos transportan sustancias txicas (como metales pesados) al exterior o los acumulan
en la vacuola, asocindolas con sustancias quelantes (fitoquelatinas) que normalmente
son pptidos derivados del glutatin (GSH).
Otra forma de detoxificacin en las plantas es la formacin de glicxidos: la
unin del txico a un azcar elimina su toxicidad, pudiendo ser introducido por el
transportador en la vacuola y as almacenado.
Hay ms transportadores ABC en plantas que en animales porque stas no se
pueden mover si estn en situaciones desfavorables; por ello, se necesitan ms
transportadores ABC para la detoxificacin. En la fitorremediacin se seleccionan las
plantas que puedan captar en mayor medida los txicos mediante estos transportadores;
aunque tambin se pueden modificar mediante ingeniera gentica para aumentar la
captacin.

- Simporte y antiporte -
Una vez generado el potencial de membrana por las bombas de hidrogeniones, el
interior queda con carga negativa. As, cualquier anin tender a salir siempre que tenga
un transportador o canal, y viceversa para los cationes. De esta forma, cmo entra un
anin? Su paso, contra gradiente electroqumico, se realiza mediante un sistema de
simporte: un transportador hace que pasen hidrogeniones y, aprovechando su paso, se
transportan los aniones (siempre se transportan ms hidrogeniones que aniones, para
obtener una carga global positiva). No consume energa qumica directamente, pero
depende del gasto de ATP para la gnesis del potencial de membrana, siendo as un
transporte secundario. Para sacar un catin, entra en el mismo transportador un
hidrogenin y un catin en un sistema de transporte antiporte.

Iago Molist Prez 7 Fisiologa Vegetal, 3 Biologa (USC)

 Al introducir una clula en una solucin, si a sta le aadimos glucosa, se
produce una despolarizacin de la clula y el pH exterior se basifica. Lo que ocurre es
que la glucosa entra a la clula por transportadores especficos que emplean la energa
de los H+ que entran a favor de gradiente electroqumico, provocando la despolarizacin
y, asimismo, el aumento del pH exterior. Conforme la glucosa entra, la clula activa sus
H+-ATPasas para expulsar los H+ que entraron.

- Transportadores secundarios -
Son pptidos de un peso molecular de 40 a 50 kD con dominios transmembrana
cuyos extremos N-terminal y carboxi-terminal se encuentran del lado citoslico.
Contienen adems un loop hidroflico por donde pasan las sustancias y unos 12
dominios transmembrana.
Siguen una cintica de tipo Michaeliana (la sustancia se une al transportador, por
lo que se llega a una saturacin) y un mecanismo de simporte o antiporte. Las sustancias
se transportan a favor de gradiente electroqumico, a una velocidad de 300 a 1000 iones
por segundo. Presentan asimismo una elevada especificidad.

- Canales inicos -
Los canales inicos son poros que permiten libremente el paso de sustancias de
un lado a otro de la membrana, por lo que su cintica es lineal, tpica de la difusin. Su
velocidad es muy alta, de entre 106 y 108 iones por segundo, por lo que si siempre
estuvieran abiertos se alcanzara rpidamente el equilibrio, lo que equivale a la muerte
celular.
La apertura y cierre de los canales se evala por la tcnica patch-clamp,
midiendo la corriente en trozos muy pequeos de membrana. Cuando la apertura y
cierre responde a un determinado efector (diferencias de potencial, efectores qumicos,
estrs), los canales inicos se denominan gaters. Los canales inicos, adems, tienen
una selectividad de iones (por ejemplo, por los canales de K+ slo pasa K+, no Na+); la
distincin entre iones del mismo signo es complicada, y no se conoce la base fsica de
esta seleccin.
KAT-1: Es un canal para K+ en condiciones de hiperpolarizacin de la
membrana; uno de los 6 dominios transmembrana de la protena detecta dicha
hiperpolarizacin. Tanto el extremo N-terminal como el carboxilo-terminal se
encuentran en el citosol. Si el voltaje es permisivo, el dominio sensible se mueve y el
canal se abre.
Aquaporinas: Son canales para agua formados cada uno de ellos por cuatro
subunidades. Cada subunidad tiene 6 dominios transmembrana; y
entre las cuatro subunidades conforman un poro central formado
por los loops hidroflicos de cada una de las subunidades (cada
subunidad tiene dos loops hidroflicos).
El mecanismo propuesto para su funcionamiento sugiere
que la carga parcial positiva del hidrgeno y la carga parcial
negativa del oxgeno interaccionan de alguna manera con la
protena, permitindole as el paso a la molcula de agua.

Como conclusin
Para el paso de sustancias a travs de la membrana es necesario:
- Generar un potencial de membrana mediante las bombas de H+/ATP o
las bombas de H+/PPi.
- Transportadores secundarios o canales.

Iago Molist Prez 8 Fisiologa Vegetal, 3 Biologa (USC)

 As, debe haber un nmero elevado de transportadores. Adems de las bombas
explicadas, hay bombas de Ca2+ dependientes de ATP, cuya aportacin al potencial de
membrana es muy baja, aunque participan en la homeostasis del Ca2+.
De este modo, en la membrana hay transportadores de nitratos (NO3-, necesarios
2H por in nitrato), de fosfatos (PO42-, necesarios 4H+ por in fosfato), de sacarosa
+

(1H+ por molcula), de aminocidos (hay un transportador distinto por cada grupo de
aminocidos), de potasio (necesarios 2H+, por antiporte con Na+), de sodio (siempre se
bombea o hacia fuera o hacia la vacuola, las clulas vegetales son muy sensibles al Na+),
de calcio (Ca2+) y de cloro (Cl-).
En la vacuola hay transportadores para cationes como el potasio (K+) o el calcio
(Ca ) o aniones como el cloro (Cl-); as como numerosas aquaporinas.
2+

- Apoplasto -
El apoplasto puede ser o no continuo y, segn Munch (1930), se define como el
espacio externo a la membrana plasmtica donde se encuentra la pared celular y que
puede (o no) presentar continuidad a travs del tejido. Su volumen relativo oscila entre
un 5-10% en el tallo; pero puede oscilar entre un 5-40% en las hojas. Su estructura se
divide en tres fases:
- Fase slida: La pared celular.
- Fase lquida: El fluido apoplstico. Es acuoso y tiene una baja
concentracin de solutos, aunque a veces presenta acmulos de
sustancias.

Iago Molist Prez 9 Fisiologa Vegetal, 3 Biologa (USC)

 - Fase gaseosa: En algunos lugares, como el parnquima aerfero de los
tejidos fotosintticos. Contiene CO2 (ciclo de Calvin), O2 (respiracin),
etc.
Adems de las funciones de la pared celular, el apoplasto permite que las clulas
no dependan de un ambiente isotnico, ya que gracias a l no explotan aunque se llenen
de agua por estar en un medio hipotnico.
El apoplasto no est tan controlado como el medio externo en un animal; su
rango de pH es amplio, oscilando entre 4.5 y 7. Este pH es cido a causa de la bomba de
hidrogeniones, que bombea H+ hacia el exterior de la clula; y depende por tanto de la
actividad de sta. A estos valores de pH no se puede utilizar el ATP, ya que el enlace
ster-fosfato es inestable. Esto se soluciona porque en el citoplasma de las clulas el pH
oscila entre 7.0 y 7.5.
Las pectinas de la pared celular tienen grupos cidos que estarn o no disociados
segn el pH del medio, pudiendo retener cationes y actuar como un complejo de cambio.
Mantiene adems la hidratacin de los tejidos: debido a los polisacridos hidroflicos,
mantiene la hidratacin del apoplasto.

- La pared celular -
La pared celular es la fase slida del apoplasto. La forma de las clulas depende
de su pared celular. En el parnquima aerfero, incrementa la superficie de contacto con
el exterior; en el xilema, le confiere forma de tubo y resistencia a las clulas; en la
epidermis de las clulas de los ptalos, les confiere una forma de cono que permite una
refraccin de la luz que atrae a los polinizadores, etc.

La pared celular no slo determina la forma de las clulas, sino tambin su

crecimiento y la velocidad y direccin de ste. Asimismo, contribuye a la
especializacin celular, pudiendo ser fuente de sustancias que acten como reguladores
de factores como el crecimiento o de infecciones (en este ltimo caso, se liberan
fragmentos de la pared celular para alarmar a la planta).
Tambin impide la penetracin de organismos, actuando de barrera mecnica;
acta como una reserva de carbohidratos e interviene en el reconocimiento celular. La
pared celular es la fraccin no digerible o fibra de los vegetales. Es as una de las
posibles fuentes de biocombustibles de segunda generacin.

- Partes de la pared celular -

La pared celular la conforman capas de material lignocelulsico. Estas capas son
las siguientes:

Iago Molist Prez 10 Fisiologa Vegetal, 3 Biologa (USC)

 - Lmina media: Est principalmente formada por pectinas sintetizadas
por ambas clulas. Acta como sustancia cementante, manteniendo las
clulas unidas con complejos con calcio. Los puntos en los que se unen
ms de dos clulas estn engrosados, lo que les confiere rigidez
mecnica.
- Pared primaria: Es la primera que se forma tras la mitosis. Su principal
caracterstica es que es capaz de extenderse, permitiendo el crecimiento
de la clula en ciertos momentos. Su principal componente son
carbohidratos con fenoles asociados (80%) y una serie de protenas
(20%). Dentro de los carbohidratos destacan glucosa, galactosa, manosa,
xilosa y arabinosa; as como los cidos glucurnico y galacturnico.
- Pared secundaria: Se deposita en distintas capas (denominadas S1, S2,
S3, etc.) segn el tipo de clula, confirindole determinadas propiedades.
Cuando la clula deja de crecer, se deposita la pared celular secundaria,
rgida e incapaz de extenderse. Si acumula lignina, se impermeabiliza
para formar una fibra o una esclereida. Si acumula suberina, sta le
conferir impermeabilidad y ligereza. Si acumula cutina, se
impermeabilizar.
De este modo, la pared celular condiciona la fisiologa de las clulas.

- Composicin de la pared celular -

Para estudiar la pared celular, sta se extrae por una serie de mtodos que van
desde mtodos ms suaves a mtodos ms agresivos. Los mtodos ms suaves consisten
en disoluciones salinas, disoluciones PARED CELULAR
quelantes, oxalato amnico o agua
caliente. Con estos tratamientos se
extraen las pectinas.
El residuo resultante se trata
con NaOH (al 17.5%) o con KOH (al PECTINAS
4-24%). Con este tratamiento
obtenemos las hemicelulosas. Tras NaOH 17.5%
extraerlas, nos queda simplemente la KOH 4-24%
-celulosa, que se puede tratar a su
HEMICELULOSAS
vez con una hidrlisis suave con
cido trifluoroactico 2N. En casos
ms extremos, se podra emplear
cido sulfrico al 72% o cido - CELULOSAS
sulfrico a 120C.

La celulosa es un homoglucano formado por cadenas de (14) glucosa;

aunque si se denomina -celulosa no tiene nada que ver con el tipo de enlace de sta. Su
grado de polimerizacin (nmero de glucosas por molcula de celulosa) es de 2300-
6000 en la pared celular primaria y de 10000 en la pared celular secundaria.
Las cadenas de (14) glucano pueden formar puentes de hidrgeno entre el
grupo hidroxilo (-OH) del C2 con uno de los hidrgenos del C6. La existencia de estos
puentes de hidrgeno restringe la rotacin, confirindole una estructura lineal.

Iago Molist Prez 11 Fisiologa Vegetal, 3 Biologa (USC)

 Cada cadena de (14) glucano aparece rodeada lateralmente de otras cadenas
con las que forma puentes de hidrgeno, consiguiendo que las cadenas en posicin
paralela se unan entre s. Al haber muchos puentes de hidrgeno (ya que la cadena es
muy larga), se forman microfibrillas de celulosa: 36 cadenas de (14) glucano unidas,
asociadas lateralmente.

Para alargarla, se debera deslizar una cadena sobre otra, lo cual es difcil debido
a la gran cantidad de puentes de hidrgeno que habra que romper. Sin embargo, en
sentido perpendicular (a lo ancho), slo habra que romper unos cuantos puentes de
hidrgeno, por lo que la microfibrilla es ms dbil en ese sentido (anisotropa).
As, alternando la direccin de las microfibrillas en capas, obtendremos una gran
resistencia mecnica hacia todos los sentidos. Las microfibrillas no estn unidas entre s,
sino mediante otros componentes

Las hemicelulosas son polisacridos que se extraen tras las pectinas mediante
disoluciones alcalinas, rompiendo puentes de hidrgeno que no estn dispuestos con
demasiada cohesin. Los componentes hemicelulsicos son xiloglucanos,
arabinoxilanos, glucano mixto y mananos.
La estructura de las hemicelulosas consiste en En polisacridos, el nombre
polisacridos lineales con cadenas laterales relativamente final es el del azcar en
cortas. Adems, los polisacridos hemicelulsicos estn mayor proporcin
(Fucogalactoxiloglucano; 1,
formados por azcares neutros (excepto el arabinoxilano, glucano; 2, xilosa; 3,
que puede contener cidos glucurnicos). Puede asociarse galactosa; 4, fucosa).
por puentes de hidrgeno a las microfibrillas de celulosa,
aunque en menor grado que sta. Debido a las ramificaciones, las hemicelulosas no se
pueden asociar lateralmente entre s, lo que constituye una restriccin exterior a la
asociacin.

La estructura del xiloglucano est constituida por una cadena de (14) glucano
(formando un eje central idntico al de la celulosa) con ramificaciones cada cuatro
residuos de glucosa. Empezando por el extremo reductor, la primera de las cuatro

Iago Molist Prez 12 Fisiologa Vegetal, 3 Biologa (USC)

glucosas no tiene nada unido, y las tres restantes tienen unido un residuo de xilosa al C6.
El segundo o el tercer grupo de xilosa pueden presentar a su vez un resto de galactosa
unida a su C2. En el segundo grupo de galactosa, sta incluso puede llevar unido un
resto de fucosa.
Las cadenas laterales implican restricciones para la unin mediante puentes de
hidrgeno a la celulosa. La cadena larga de fucosa-galactosa-xilosa se une alrededor del
eje, facilitando una estructura ms o menos lineal y dando una mayor posibilidad de
unin con las microfibrillas de celulosa.
El glucano mixto est constituido en su totalidad por cadenas de glucosa unidas
entre s tanto por enlaces (14) como
(13): cada tres glucosas unidas por un
enlace (14), hay una glucosa unida por
un enlace (13). Son estos ltimos
enlaces los que provocan una doblez en la
cadena. Por ello, es muy dudoso que se
una por puentes de hidrgeno a la
celulosa; se postula que adquiere una
constitucin lobular para formar puentes
de hidrgeno entre s.
Es de gran importancia econmica, ya que su degradacin es importante para el
malteado del proceso de formacin de la cerveza. Est presente as en las poales
(gramneas).
Los xilanos estn formados principalmente por (14) xilosa en una cadena
lineal. Adems de xilosa, pueden presentar restos de arabinosa como cadenas laterales
en el C3 (arabinoxilano). Asimismo, puede presentar azcares cidos en el C2, unidos a
la xilosa, como el cido glucurnico (glucuronoarabinoxilano). As, excepto por la
presencia de azcares cidos, cumple las caractersticas de las hemicelulosas.

Si est poco sustituido, puede unirse por puentes de

hidrgeno a las microfibrillas de celulosa. Como el glucano
mixto, es importante en poales (gramneas). Unidos a la
arabinosa, hay cidos fenlicos esterificados (cidos
hidroxicinmicos), de entre los que destaca el cido ferlico.
Mediante una peroxidasa y con H2O2, se forma un puente difenil
entre los grupos fenilos, producindose de esta forma un radical
libre que reacciona con dichos grupos fenilo (se forma un puente difenilo entre dos
arabinoxilanos, muy fuerte).
Los mananos estn formados por manosa y galactosa. Si hay mayor proporcin
de manosa, se llaman mananos; si hay mayor proporcin de galactosa, se llaman
galactomananos. No estn presentes en todas las paredes celulares, pero destacan en las
semillas.

Los polisacridos pcticos (pectinas) se caracterizan por estar muy ramificados.

Presentan un componente cido importante y, debido a su estructura, no son capaces de

Iago Molist Prez 13 Fisiologa Vegetal, 3 Biologa (USC)

asociarse a las microfibrillas de celulosa mediante puentes de hidrgeno. Los
componentes pcticos son homogalacturonano; as como galacturonanos ramificados
como xilogalacturonano, apiogalacturonano o ramnogalacturonano. Las funciones de las
pectinas son:
- Determinan la porosidad de la pared celular (permiten el paso de
molculas de hasta 40-50kD).
- Al tener grupos cidos, modulan el pH y el balance inico.
- Regulan la adhesin entre clulas.
- Participan en el reconocimiento de seales externas (insectos,
patgenos, simbiontes, etc.).
El homogalacturonano lo forman cidos galacturnicos D-GalA-(14)-D-
GalA, condicionando una estructura en forma de tapa de caja de huevos. Est formado
por hasta 200 restos de cido galacturnico y tiene hasta 100nm de largo. Presenta un
grupo carboxilo que puede estar como -COOH, como -COO- o metil esterificado. La
metil esterificacin se produce por reaccin con un alcohol, y es la forma en que son
sintetizados en el aparato de Golgi, ya que as se eliminan cargas negativas que podran
provocar su precipitacin.
Por la enzima metil esterasa se libera metanol y queda el grupo carboxilo (esto
puede ser un problema en la fabricacin de mosto, ya que el metanol es txico y las
uvas contienen muchas pectinas susceptibles de sufrir esto). El grupo carboxilo se
disociar o no segn el pH; y, de estar disociado, puede unirse a sustancias con carga
positiva.

Las cargas negativas se pueden asociar con el in Ca2+, dando lugar a una
estructura en caja de huevos, uniendo lateralmente cadenas de galacturonano. Esta
estructura es importante es la conservacin de los encurtidos (conservacin de
sustancias en vinagre): si el material es pobre en Ca2+, se pierde la cohesin celular y las
clulas se disgregan, y con ello el producto.
Componentes pcticos muy
ramificados son sustancias como el
ramnogalacturonano I, cuyo eje central
est constituido por un polmero de cido
galacturnico y ramnosa en disposicin
alterna; de forma D-GalA-(12) - L-
Rha-(14). El resto de ramnosa est
dispuesto de forma perpendicular al eje.
As, si hay otras cadenas que se unan a la
ramnosa en posicin 4, obtenemos un eje
central con cadenas laterales que salen de
l. Como azcar de inicio de las cadenas
laterales, puede presentar:

Iago Molist Prez 14 Fisiologa Vegetal, 3 Biologa (USC)

 - Galactano unido en 14.
- Arabinano unido en 15.
- Arabinano unido en 35.
- Arabinogalactano.
Las cadenas laterales (que pueden contener en su interior restos de glucosa y de
cido glucurnico) estn relativamente ramificadas, lo que da lugar a la formacin de
una estructura en rbol, cuyas ramificaciones contribuyen a la retencin de agua
(hidratacin). Esto es de gran importancia en la cubierta externa de algunas semillas,
contribuyendo a crear un ambiente hmedo alrededor de ellas que favorece su
germinacin.
Los galacturonanos modificados, no muy importantes cuantitativamente,
presentan sustituciones con xilosa o apiosa:
- Xilogalacturonano: Sustituciones de D-Xil-(13)-DGalA. Presente en
tejidos reproductores, incluyendo semillas de soja, manzanas y polen de
pino.
- Apiogalacturonano: Sustituciones de -D-Api y -D-Api-(13)- -D-
Api. Presente en monocotiledneas acuticas como los gneros Lemna
y Zostera.
Dentro de los galacturonanos modificados, merece una especial atencin el
ramnogalacturonano II. Presenta una cadena central de cido galacturnico, cuyos
monmeros estn unidos entre s mediante enlaces (14). Hay cuatro tipos de
ramificaciones de la cadena:
- Cadena lateral A: Presenta una muy elevada ramificacin, y es de
destacar la presencia de un azcar muy raro: la L-Galactosa; as como
la existencia de metil xilosa. Cuantitativamente, destaca la presencia de
ramnosa, apiosa y fucosa.
- Cadena lateral B: Presenta cido acrico acetilado; as como una fucosa
acetilada y metilada.
- Cadena lateral C: -Kdo-Rha. Minoritarios
- Cadena lateral D: -Dha-Ara.

Este ramnogalacturonano II presenta apiosa, azcar ignorado hasta la dcada de

los 90. La apiosa, en presencia de cido brico [B(OH)3], reacciona con dos de los
grupos -OH para formar un puente entre ambas cadenas. Estos polisacridos se separan
mediante columnas de cambio inico, a las que se le aade cido brico, que cambia el
pH. Si los dos restos de apiosa son de distintas molculas de ramnogalacturonano II,
stas se unen entre s mediante un puente borato, que es fcilmente hidrolizable

Iago Molist Prez 15 Fisiologa Vegetal, 3 Biologa (USC)

mediante un pH cido (4-5). Se saba que el cido brico participaba en la fisiologa
vegetal, pero no cmo; al no suministrarle cido brico a la
remolacha se produce el ennegrecimiento y desecacin de las hojas.
El arabinogalactano de tipo II est formado por un eje central
de galactano cuyos monmeros estn unidos por enlaces (13) o
(16). Es un polisacrido muy ramificado, lo que provoca que
tenga una gran zona de contacto con el medio, que aumenta a su vez
la zona de hidratacin. Puede contener cidos hidroxicinmicos metil
esterificados, como el cido cumrico o el cido ferlico.

- Protenas -
Hay dos tipos de protenas: estructurales y no estructurales.

- Protenas estructurales -
- Protenas ricas en prolina (PRP, Proline Rich Protein).
- Protenas ricas en glicina (GRP, Glycine Rich Protein).
- Protenas ricas en hidroxiprolina (HRGP, Hydroxyproline Rich Glyco Protein).
Aparece la hidroxiprolina en la pared celular, cuya presencia le confiere una elevada
resistencia mecnica. No se incorpora como tal en la sntesis del pptido: tras sta, la
prolina de la cadena polipeptdica se hidroxila en el RER. Aparece fuertemente asociada
a la pared celular: los primeros estudios en los que se consigui solubilizar se obtenan
slo fragmentos; ahora se ha conseguido obtener la protena completa mediante
tratamientos con fluoruro de hidrgeno (HF, utilizado para grabar el vidrio).
Se identificaron asimismo los genes que la codifican, y con ello se dedujo su
secuencia peptdica y sus propiedades. Son las protenas ms importantes
cuantitativamente; y fue el fisilogo Lampard el que ms las estudi.
En la dcada de 1960 se le dio a estas protenas el nombre de extensinas, ya que
se pensaba que intervenan en la extensin de la pared celular (aunque posteriormente se
demostr que su acmulo provoca disminucin de crecimiento y rigidez de la pared, por
lo que se desech ese nombre).
Dos secuencias tpicas de estas protenas son Ser-HPro-HPro-HPro y Tyr-Lys-
Tyr. Los restos de hidroxiprolina presentan unidos cuatro restos de arabinosa (tetra
arabinsido); aunque al ser separadas por un tratamiento muy fuerte no se saba si
provenan de otra molcula o los tenan unidos per s. Es caracterstico de estas
protenas su elevada glucosilacin.
Steve Fry (Universidad de Edimburgo) descubri que los restos de Tyr podan
unirse entre s mediante su anillo aromtico para formar un dmero: la isoditirosina. As,
cadenas peptdicas estn unidas de forma intercatenaria o intracatenaria mediante
puentes de isoditirosina. Esta reaccin est catalizada por peroxidasas y H2O2.

- Protenas no estructurales -
Son en su mayor parte enzimas, entre los que destacan hidrolasas (hidrolizan
enlaces glucosdicos), oxidasas, etc.

Cmo se organiza todo?

En principio, la presencia cualitativa de estos componentes es diferente segn la
planta y el tipo de clula. La celulosa est en todos los tipos celulares; mientras que el
xilano aparece en el esclernquima y las fibras vasculares y el homogalacturonano al
revs, en la mayora de los tejidos excepto el esclernquima y las fibras vasculares.

Iago Molist Prez 16 Fisiologa Vegetal, 3 Biologa (USC)

 Las microfibrillas de celulosa y las cadenas de xiloglucano se unen mediante
puentes de hidrgeno, formando as una red xilosa-celulosa. Las pectinas se unen
mediante las zonas de homogalacturonano por puentes de Ca2+; as como mediante
puentes borato y difenil de apiosa y arabinosa respectivamente. Se forma as una red de
pectinas no unida (pero s entrelazada) con la red de xilosa-celulosa. Las cadenas de
HRGP se unen por los puentes de isoditirosina, formando otra red.

Estas tres redes rodean el protoplasto, controlando los intercambios de la clula

y evitando las infecciones entre otras funciones. Hay dos tipos de paredes celulares:
- Tipo I: Contiene pectinas (RG I, RG II, HRGP), xiloglucanos y celulosa.
Es la de todas las plantas superiores excepto las poales (gramneas).
- Tipo II: Contiene pectinas (HRGP mayoritariamente), xiloglucanos
(principalmente, glucuronoarabinoxiloglucano) y celulosa. Es la
estructura, por ejemplo, de las poales.

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