Microbiologa bsica para el rea

de la salud y afines
2.a edicin
Coleccin Salud

Hugo Humberto Montoya Villafae

Editorial Universidad de Antioquia
ISBN: 978-958-714-090-3

Segunda edicin: marzo de 2008

Correccin de texto: Miriam Velsquez
Diseo de cubierta: Anastasia Garzn Vidal
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Montoya Villafae, Hugo Humberto

Microbiologa bsica para el rea de la salud y afines /
Hugo Humberto Montoya Villafae. 2a. ed. Medelln :
Universidad de Antioquia, 2008.
254 p . : i l . ; 24 cm. (Coleccin salud)
Incluye glosario p. 229.
Incluye bibliografa.
ISBN 978-958-714-090-3
1. Microbiologa mdica 2. Bacteriologa mdica
3. Parasitologa mdica I. Tt. II. Serie.
616.01 cd 21 ed.
A l 144896

CEP-Banco de la Repblica-Biblioteca Luis Angel Arango

Microbiologa bsica para
el rea de la salud y afines
2.a edicin
Hugo Humberto Montoya Villafae

Coleccin Salud
Editorial Universidad de Antioquia
Me llena de satisfaccin e inmenso orgullo dedicar esta obra a
mi madre, motivo de superacin constante y motor de mi vida

A esas personas irremplazables que partieron del ncleo fami

liar y ahora se encuentran en compaa de Dios; a mi inolvida
ble ta, La gorda Betty: estars por siempre en mi memoria

A mis estudiantes, para quienes cualquier esfuerzo

de mi parte, es insuficiente
 Contenido

Prefacio.................................................................................................. xix

1.Historia de la microbiologa.............................................................. 1
Generacin espontnea..................................................................... 2
Teora del germen en la fermentacin............................................... 4
Teora del germen de la enfermedad................................................. 5
Postulados de Koch........................................................................ 6
Aplicaciones de la microbiologa...................................................... 8
Distribucin de los microorganismos............................................... 9
Clasificacin de los microorganismos.............................................. 10
Microscopa....................................................................................... 12
Unidades utilizadas en microscopia............................................... 12
Tipos de microscopios................................................................... 13
1. Microscopio de luz, ptico o de campo claro............................ 13
2. Microscopio de luz ultravioleta................................................. 15
3. Microscopio de campo oscuro................................................... 15
4. Microscopio de contraste de fases............................................. 15
5. Microscopio de fluorescencia.................................................... 15
6. Microscopio electrnico............................................................ 17
Historia de la microbiologa: sumario............................................... 18
Preguntas para autocontrol del aprendizaje....................................... 20

2 Morfologa y fisiologa de las bacterias............................................ 22

Caractersticas morfolgicas mayores de las bacterias..................... 22
Tamao........................................................................................... 23
Forma ............................................................................................ 23
Ordenamiento................................................................................. 23
Cocos............................................................................................. 23
Bacilos........................................................................................... 25
Espirales o helicoidales................................................................. 27
Caractersticas morfolgicas menores de las bacterias..................... 28
Estructuras obligadas .................................................................... 30
Pared celular................................................................................... 31
Micoplasmas.................................................................................. 38
 Membrana citoplasmtica.............................................................. 39
Bacterias Gram positivas............................................................... 41
B acterias Gram negativas............................................................... 41
Membrana externa ........................................................................ 41
Periplasma..................................................................................... 43
Mesosomas..................................................................................... 43
Citoplasma..................................................................................... 43
Ribosomas...................................................................................... 44
Nucleoide....................................................................................... 44
Estructuras facultativas.................................................................. 45
Cpsula........................................................................................... 45
Limo o slime, capa mucosa o capa mucilaginosa.......................... 46
Glicoclix o glicocliz................................................................... 46
Grnulos de almacenamiento......................................................... 47
Flagelos......................................................................................... 47
Fimbrias......................................................................................... 49
Pili.................................................................................................. 49
Esporo............................................................................................ 49
Germinacin................................................................................... 53
Taxonoma......................................................................................... 53
Categoras taxonmicas (taxa)....................................................... 54
Nomenclatura................................................................................. 54
Gnero........................................................................................... 55
Especie.......................................................................................... 55
Nombres comunes de las bacterias................................................ 56
Nombres cientficos de las bacterias.............................................. 56
Morfologa y fisiologa bacteriana: sumario..................................... 56
Preguntas para autocontrol del aprendizaje....................................... 56

3 Nutricin y metabolismo de las bacterias........................................ 58

Enzimas............................................................................................. 58
Propiedades fisicoqumicas........................................................... 59
Condiciones que afectan la actividad enzimtica.......................... 61
Reacciones fundamentales............................................................. 61
Nomenclatura................................................................................ 61
Reglas para nombrar y clasificar las enzimas................................ 62
Naturaleza y mecanismo de la accin enzimtica ........................ 62
Inhibicin de la accin enzimtica................................................. 63
Inhibicin reversible...................................................................... 64
Inhibicin irreversible.................................................................... 64
Metabolismo bacteriano.................................................................... 64
Nutricin........................................................................................... 65
Condicionantes fisicoqumicos del crecimiento bacteriano........... 66
Concentracin de iones de hidrgeno: pH..................................... 67
La luz y otros tipos de radiacin.................................................... 67
Temperatura................................................................................... 67
Presin osmtica............................................................................ 67
 Potencial de xido-reduccin: eH.................................................. 68
Presencia de dixido de carbono: C 02 .......................................... 68
Humedad........................................................................................ 68
Nutrientes como fuente de energa.................................................... 69
Autotrficas.................................................................................... 69
Hetertrofas.................................................................................... 69
Nutrientes necesarios para las bacterias............................................ 70
Nutrientes bsicos.......................................................................... 70
Macronutrientes............................................................................. 70
Micronutrientes u oligoelementos................................................. 72
Metabolitos esenciales................................................................... 72
Factores de crecimiento................................................................. 72
Factores estimulantes..................................................................... 72
Origen de los nutrientes bacterianos.............................................. 73
Medios de cultivo.............................................................................. 73
Clasificacin.................................................................................. 73
Consistencia................................................................................... 73
Origen ........................................................................................... 73
Composicin y utilizacin ............................................................ 74
Fuentes de energa............................................................................. 75
Energa radiante............................................................................. 75
Energa qumica............................................................................. 76
Mecanismo de transmisin de la energa qumica............................. 76
Gluclisis....................................................................................... 78
Fermentacin................................................................................. 80
Va o ciclo de la pentosa fosfato.................................................... 81
Catabolismo de los carbohidratos..................................................... 82
Degradacin de los monosacridos................................................ 83
Ciclo del cido ctrico.................................................................... 83
Reaccin de transicin................................................................... 84
Cadena de transporte electrnico................................................... 84
Catabolismo de las protenas............................................................. 87
Catabolismo de los lpidos................................................................ 90
Reproduccin y desarrollo bacterianos............................................. 90
Fisin binaria transversa................................................................ 90
Fragmentacin............................................................................... 90
Esporas........................................................................................... 92
Gemacin....................................................................................... 92
Ciclo de desarrollo normal de los cultivos bacterianos.................. 92
Fase lag o de adaptacin................................................................ 93
Fase logartmica o exponencial...................................................... 93
Fase estacionaria............................................................................ 94
Fase de declinacin, decadencia o muerte .................................... 94
Periodo de transicin entre las fases de desarrollo........................ 94
Metabolismo bacteriano: sumario..................................................... 94
Preguntas para autocontrol del aprendizaje....................................... 95
4 Gentica bacteriana.............................................................................97
cido desoxirribonucleico (ADN).................................................... ..97
cido ribonucleico .............................................................................98
Herencia de las caractersticas y la variabilidad................................ ..98
Variaciones fenotpicas o temporales (adaptaciones).................... ..99
Variaciones genotpicas o permanentes...........................................101
Tipos de mutantes bacterianos....................................................... ..107
Recombinacin gentica bacteriana.................................................. ..107
Conjugacin....................................................................................107
Sistema F+........................................................................................109
Sistema H fr......................................................................................109
Transformacin ...............................................................................110
Transduccin....................................................................................111
Gentica bacteriana: sumario..............................................................113
Preguntas para autocontrol del aprendizaje.........................................114

5 Inmunologa bsica............................................................................ ..116

Resea histrica..................................................................................116
Sistema inmunitario.............................................................................117
Inmunidad inespecfica....................................................................118
Resistencia de especie o gentica...................................................118
Barreras mecnicas y qumicas......................................................120
Respuesta inflamatoria y fiebre...................................................... .120
Interfern........................................................................................122
Complemento.................................................................................122
Inmunidad especfica..................................................................... .122
Linfocitos T ....................................................................................123
Linfocitos B ...................................................................................123
Clases de antgenos............................................................................125
Anticuerpos........................................................................................126
Clases de anticuerpos o inmunoglobulinas.....................................127
Inmunoglobulina G ....................................................................... .127
Inmunoglobulina M .......................................................................128
Inmunoglobulina A ........................................................................128
Inmunoglobulina E ........................................................................ .130
Inmunoglobulina D ....................................................................... .131
Reacciones antgeno-anticuerpo....................................................... .131
Aglutinacin...................................................................................133
Precipitacin ..................................................................................133
Neutralizacin................................................................................134
Tipos de inmunidad especfica ..........................................................135
Conceptos bsicos de inmunologa: sumario.....................................135
Preguntas para autocontrol del aprendizaje........................................136

6 V irus.....................................................................................................139
Resea histrica.................................................................................140
Caractersticas de los virus................................................................140
 Morfologa......................................................................................... ..141
Composicin...................................................................................... ..143
Estructura............................................................................................143
Accin de los agentes fsicos y qumicos sobre los virus...................144
Agentes fsicos.............................................................................. ..144
Agentes qumicos............................................................................145
Cultivo de los virus............................................................................ ..145
Animales de experimentacin........................................................ ..145
Huevos embrionados...................................................................... ..145
Cultivos tisulares.............................................................................146
Cultivos celulares........................................................................... ..146
Deteccin del desarrollo de los virus................................................ ..148
Patogenia viral.....................................................................................150
Virus bacterianos............................................................................... ..150
Infeccin viral................................................................................... ..152
Ciclo ltico........................................................................................152
Etapa 1: adsorcin.......................................................................... ..153
Etapa 2: infeccin.......................................................................... ..153
Etapa 3: replicacin.........................................................................153
Etapa 4: ensamblaje....................................................................... ..154
Etapa5:lisis................................................................................... ..154
Ciclo lisognico............................................................................. ..154
Ecologa y mecanismos de transmisin viral...................................155
Contacto directo persona-persona...................................................155
Transmisin de animal a animal......................................................156
Transmisin si se tiene como vector un artrpodo ....................... ..156
Virus: sumario................................................................................... ..157
Preguntas para autocontrol del aprendizaje.........................................158

7 Hongos................................................................................................. ..159
Importancia........................................................................................ ..159
Composicin..................................................................................... ..160
Morfologa......................................................................................... ..160
Hongos unicelulares: levaduras..................................................... ..160
Hongos pluricelulares: mohos ........................................................161
Reproduccin .....................................................................................163
Reproduccin asexual.....................................................................163
Reproduccin sexual.......................................................................164
Fisiologa y nutricin .........................................................................165
Medios de cultivo................................................................................165
Clasificacin........................................................................................166
Chytridiomycota-Chytridiomicetes..................................................167
Zygomycota-Zigomicetes................................................................167
Reproduccin...................................................................................167
Ascomycota-ascomicetes.................................................................169
Levaduras.........................................................................................170
Basidiomycota-Basidiomicetes...................................................... ..173
 Deuteromycota ................................................................................176
Hongos; sumario............. ................................................................. ..178
Preguntas para autocontrol del aprendizaje......................................... 178
Referencias bibliogrficas .................... ..............................................178

8 Introduccin a la parasitologa......................................................... ..179

Parsitos .............................................................................................180
Composicin bioqumica ................................................................180
Respiracin y metabolismo.......................................................... ..181
Fisiologa ..................................................................................... ..181
Nomenclatura............................................................ ......................181
Fuentes de las parasitosis.............................................................. ..181
Vas de entrada................................................................................182
Sarcodina (ameboides)........................................................................183

8A Protozoos............................................................................................183
Ciclo biolgico................................................................................184
Ciliophora (ciliados)............................................................................185
Mastigophora (flagelados)..................................................................187
Giardia lamblia (flagelado intestinal)..............................................187
Ciclo biolgico.................................................................................188
Trichomonas vaginalis (flagelado atrial)..........................................189
Tripanosoma cruzi (hemoflagelado)................................................190
Ciclo biolgico................................................................................190
Leishmania braziliensis (hemoflagelado)........................................192
Sporozoa o Apicomplexa (esporozoos)...............................................192
Plasmodium................. ................................................................. ..192
Ciclo biolgico.................................................................................193
Toxoplasma gondii............................................. ........................... ..194
Nematelmintos (phylum Nematod)....................................................195
Platelmintos (phylum Platyhelminthes)...............................................195
Clase Trematoda..............................................................................195
Clase Cestoda o Cestoidea..............................................................195

8B Helmintos...........................................................................................195
Nematoda o nematelmintos ............................................................196
Ascaris lumbricoides........................................................................196
Necator americanus..........................................................................197
Enterobius vermicularis...................................................................198
Platyhelminthes o platelmintos..................................................... ..199
Taenia solium................................................................................ ..199
Taenia saginata................................................................................201
Introduccin a la parasitologa: sumario.......................................... ..201
Protozoos.........................................................................................201
Helmintos.........................................................................................202
Preguntas para autocontrol del aprendizaje.........................................202
9 Control de microorganismos..............................................................203
Importancia del control .....................................................................203
Terminologa bsica y su definicin...................................................203
Condiciones para la accin de los agentes antimicrobianos .............204
Tipo o clase de microorganismo.....................................................204
Naturaleza del medio......................................................................205
Tiempo de exposicin.................................................................... .205
Nmero de microorganismos......................................................... .205
Intensidad y naturaleza del agente fsico....................................... .205
Temperatura aplicada a un agente qumico.....................................205
Concentracin del agente qumico................................................. .205
Mecanismos de accin de los agentes antimicrobianos ................... .205
Dao de la pared celular................................................................ .205
Alteracin de la permeabilidad de la membrana citoplasmtica.... 206
Alteracin de la naturaleza coloidal del citoplasma...................... .206
Inhibicin de la accin enzimtica.................................................206
Formacin de antimetabolitos........................................................206
Inhibicin de la sntesis de cidos nucleicos .................................207
Control con agentes fsicos ...............................................................208
Temperatura....................................................................................208
Temperaturas altas .........................................................................208
Calor seco.......................................................................................209
Calor hmedo..................................................................................210
Temperaturas bajas.........................................................................212
Liofilizacin................................................................................... .213
Presin osmtica........................................................................... .214
Radiacin ...................................................................................... .215
Radiaciones ionizantes...................................................................215
Radiaciones no ionizantes...............................................................215
Mecanismo de accin de la luz ultravioleta...................................216
Fotorreactivacin.............................................................................216
Reactivacin oscura o escotorreactivacin.....................................217
Filtracin....................................................................................... .217
Limpieza fsica.............................................................................. .217
Ultrasonido......................................................................................217
Lavado............................................................................................ .217
Control con agentes qumicos .......................................................... .221
Efectos de los agentes antimicrobianos sobre el crecimiento........... .222
Agente qumico antimicrobiano apropiado....................................... .222
Principales grupos..........................................................................222
Fenol (cido fnico) y compuestos fenlicos.................................222
Alcoholes........................................................................................222
Halgenos y sus compuestos..........................................................223
Metales pesados..............................................................................223
Colorantes.......................................................................................223
Compuestos de amonio cuaternario............................................... .223
Aldehidos........................................................................................223
 Quimioesterilizantes gaseosos....................................................... 223
Concentracin mnima inhibitoria (CMI)......................................... 224
Dilucin en tubo............................................................................. 224
Difusin en agar............................................................................. 224
Antibiticos y otros agentes quimioteraputicos.............................. 224
Historia de la quimioterapia.......................................................... 226
Antibiticos................................................................................... 226
Antibitico til ............................................................................. 226
Control de microorganismos: sumario.............................................. 226
Preguntas para autocontrol del aprendizaje....................................... 227
Referencias bibliogrficas................................................................. 227

Glosario................................................................................................. 229

Bibliografa............................................................................................ 253

ndice analtico...................................................................................... 255

 Prefacio

E n el campo de la microbiologa reaparece el libro Microbiologa bsica

para el rea de la salud y afines, en su segunda edicin; me genera un gran
placer por poder presentar esta obra a estudiantes, profesores, trabajadores del
rea de la salud y afines.
El libro llega con un planteamiento diferente con respecto a la primera
edicin, un concepto que bien podra catalogarse como un nuevo texto.
He modificado la estructura y contenidos adaptndolos en lo posible a los
planes de estudio de las ciencias bsicas, que en Colombia han sufrido cambios
sustanciales. Adems, la impresin en color de esta edicin eleva notoriamente
el valor pedaggico, porque muestra grficos ms claros, novedosos y atractivos.
No se trata de un libro para especialistas en microbiologa, por el contrario, es un
texto para estudiantes de pregrado y otros profesionales que en su cotidianidad
no tienen como prioridad esta especialidad, pero requieren el conocimiento
de ciertos conceptos bsicos para alcanzar un buen desarrollo en su disciplina
laboral y mantener interrelacin con otros campos del rea de la salud.
Mi vinculacin actual como docente de la Universidad de Antioquia ads
crito a la Facultad de Odontologa, me enorgullece y me motiva a trabajar en
pro de la docencia, por esto vislumbr la necesidad de esta segunda edicin
al comprender la importancia de avanzar en la produccin acadmica a la par
con los cambios curriculares propuestos.
Creo que el texto adquiere un carcter multidisciplinario y una mirada
pedaggica ms amplia.
Todos saben que la microbiologa es una de las disciplinas ms diversas y
que exige interrelacin con otros estudios muy cercanos, como la biologa, la
biologa molecular, la bioqumica, la patologa, la farmacologa, entre otras.
Obviamente, esta correlacin genera gran cantidad de informacin sobre los
microbios en general y los libros sobre microbiologa se convierten en ver
daderas enciclopedias, tan exhaustivos que se vuelven demasiado extensos,
profundos y minuciosos para que al estudiante promedio del rea de la salud le
sean atractivos en su estudio cotidiano, ms an si se tiene en cuenta que deben
cursar diferentes materias de forma simultnea. Sin embargo, reconocemos su
incalculable valor como obras de consulta.
Por causa de esta situacin, surge una nueva tendencia de libros con nfasis
en la brevedad, hasta el punto de proporcionar una informacin tan escasa,
que no alcanza a cubrir, siquiera, lo que ensean los docentes en sus clases.
Otros textos ofrecen mucha informacin clnica, pero la informacin sobre
microbiologa bsica resulta en realidad insuficiente.
El texto de Microbiologa bsica para el rea de la salud y afines, que
ahora entrego, se escribi tras una experiencia de casi 20 aos de docencia
con estudiantes del rea de la salud, y su principal propsito es presentar una
obra amena, de fcil comprensin y profusamente ilustrada, que cumpla las
necesidades de este grupo de personas y satisfaga sus necesidades en el rea.
Por eso, el lector encuentra un texto ms breve, un lenguaje familiar y menos
sofisticado que los grandes tratados sobre microbiologa, pero que contiene
toda la informacin que requiere cualquier persona que est en proceso de
formacin en alguna de las reas comprometidas con la salud. As mismo,
el libro es una herramienta de repaso, de gran utilidad para quienes piensen
validar sus carreras y ejercer su profesin en otros pases.
La obra se divide bsicamente en cuatro secciones, que abarcan igual nme
ro de disciplinas fundamentales de la microbiologa: bacteriologa, virologa,
micologa y parasitologa. Los captulos inician con una informacin general
de la disciplina que tratan, as como informacin bsica sobre clasificacin,
morfofisiologa, metabolismo y gentica de los organismos descritos.
Al final se describen procesos, agentes, mecanismos o modos de accin de
diferentes agentes fsicos y qumicos para lograr un efectivo y continuo control
de microorganismos.
Todos los temas se apoyan en figuras, esquemas y grficos, tan claros y com
prensibles que el texto explicativo, en realidad, resulta mnimo. Prcticamente, la
totalidad de los apoyos visuales son de mi autora o los he modificado y adaptado,
con el fin de lograr los objetivos buscados: claridad, comprensin y motivacin.
Aunque soy consciente de que ningn libro de texto satisface por completo las
necesidades de todos, me atrevo a afirmar que con esta obra nos aproximamos de for
ma muy certera a la transformacin acadmica que se desarrolla en la actualidad.
De nuevo, agradezco a aquellas personas que me colaboraron en la primera
edicin, pues, gracias a ellos se abri la puerta de entrada para esta nueva. Al
estmulo e invaluable ayuda del doctor Uber Alberto Isaza Agudelo, Coordi
nador del Eje de Complementacin Alimentaria del programa, adscrito a la
Gobernacin de Antioquia, MANA. Tambin dirijo mis agradecimientos, de
forma especial, a quienes han colaborado, directa e indirectamente, con mayor
o menor intensidad, en este nuevo proyecto. Gracias a mi madre y a otros seres
allegados, a quienes durante muchos meses no pude darles la atencin que se
merecen. Igualmente, mi reconocimiento a otros colaboradores que, aunque
annimos, merecen mi ms sincero agradecimiento.
Para terminar, agradezco a los lectores del libro, quienes de hecho y defini
tivamente son los verdaderos jueces de la obra que sale a la luz pblica. Espero
me disculpen por las erratas que puedan aparecer y tengan la seguridad de que si
aparecen, en ningn caso es por falta de atencin, sino que, a manera de duendes
editoriales, lograron escabullirse de la lupa correctora del autor y de quienes
colaboraron en esta funcin. Mil disculpas por esos involuntarios fallos en los
cuales haya podido incurrir.

Hugo H. Montoya Villafae


Historia de la microbiologa
D e ese gran rbol de la ciencia que se conoce
como biologa y se ocupa del estudio e inves
tigacin de los seres vivos con ayuda de otras
disciplinas como la qumica, las matemticas,
la fsica, entre otras, surge una rama descu
bierta recientemente: la microbiologa, la cual
se encarga de estudiar los organismos vivos de
tamao microscpico. Entre los microorganis
mos o microbios, cuyo estudio es la razn de
la microbiologa, se encuentran: los protozoos,
estudiados por la protozoologa\ los hongos,
por la micologa; las bacterias, por la bacte
riologa; las algas, por la. ficologa', estructuras
sub o acelulares como los virus y las partculas
subvirsicas como los viroides y los priones,
por la virologa.
El trmino microbiologa se deriva de las
palabras griegas mikros: pequeo; bios: vida y
logos: tratado, por tanto, la microbiologa, es
la ciencia que trata acerca de los organismos
imposibles de ser observados a simple vista (por
causa de su nfimo tamao), de ah el nombre de
microorganismos o microbios. Una parte de la
microbiologa tiene carcter general y se encarga
de estudiar las caractersticas morfofisiolgicas,
la gentica, el metabolismo, las relaciones con
otros grupos de organismos, el control e impor
tancia en la industria, la relacin con la salud y
el bienestar humano. Otra parte de la microbio
loga tiene un carcter sistemtico y se encarga
de la organizacin o taxonoma, de los grupos
o taxones en los cuales se ubican los diferentes
microbios.
Los microorganismos, algunos tiles y otros
dainos, estn ntimamente asociados a la vida.
Muchos son habitantes del cuerpo humano.
1
Algunos causan enfermedades y otros estn
implicados en actividades caseras o industriales
como la fabricacin del queso, el vino, el kumis,
el yogur, etc.; la produccin de antibiticos como
la penicilina, la estreptomicina, las cefalospori-
nas y en los procesos de tratamiento de aguas
residuales.
Como se mencion antes, la microbiologa es
una ciencia relativamente joven, pues el mundo
de los microorganismos se descubri hace 300
aos y debieron pasar otros 200 antes de apreciar
y comprender su significado real.
Durante las ltimas cinco o seis dcadas, la
microbiologa ha emergido como un campo
muy significativo de la biologa. Hoy los inves
tigadores utilizan los microorganismos para el
estudio de, prcticamente, todos los fenmenos
biolgicos importantes.
En la evolucin histrica de la microbiologa
intervienen destacados personajes que han hecho
grandes aportes a esta ciencia. Algunos de los
ms destacados se presentan a continuacin.
Anthony van Leeuwenhoek (1632-1723),
holands, estudiante de historia natural quien,
adems, se desempe como mercader de oficio
y tal vez no fue el nico que observ los microor
ganismos, pero s el primero en dar a conocer sus
observaciones con descripciones y dibujos muy
exactos. Leeuwenhoek hizo estas observaciones
al practicar su pasatiempo, que consista en el
pulido de lentes y construccin de elementales
microscopios. Durante su vida construy ms de
200 microscopios, bastante rudimentarios, que
constaban de una sola lente, pulida por mtodos
caseros, montada en latn y en plata, los ms
potentes podan aumentar la imagen del objeto
2 / Microbiologa bsica para el rea de la salud y afines

unas 200 a 300 veces. Con ellos, y gracias a su

gran curiosidad cientfica, observ numerosos
organismos microscpicos como bacterias,
protozoos y hongos, algunos procedan de las
muestras que tomaba de la cavidad bucal.
Esos microscopios se parecan poco al micros
copio compuesto actual, que utiliza una serie de
lentes en un sistema capaz de amplificar de 1.000
a 2.000 veces una imagen. Pero las lentes que
Leeuwenhoek us en sus microscopios estaban
muy bien hechas y lo principal era que l tena
esa apertura mental, tan importante para un inves
tigador y adems mantena una correspondencia
continua con la Royal Society de Londres.
El 9 de junio de 1675, Leeuwenhoek escribi
en su diario: ... al observar esta agua, yo tuve la
idea de que descubra criaturas vivas; pero como
eran tan pocas y no claramente detectables, no
pude aceptar esto como c i e r t o . L u e g o , volvi
a sus observaciones y anot: ... yo no tena
ninguna nocin que iba a ver criaturas vivas, pero
al observar vi maravillado ms de un millar de
criaturas vivas dentro de una gota de agua, Los Figura 1.1 Dibujos de bacterias realizados por
animlculos eran de la clase ms pequea que Leewenhoek y enviados a la Royal So
yo haba visto jams hasta ahora.. Hizo dibu ciety de Londres
jos de las bacterias presentes en el agua lluvia,
la saliva, el vinagre, adems de otras sustancias .Antes del siglo xix haba poca conciencia
y las describi con fascinantes palabras. Relat y sobre los microorganismos y, ms an, que
envi sus emocionantes descubrimientos, en una ellos pudieran causar enfermedades o producir
serie de ms de 300 cartas, a sus amigos de la cambios qumicos a la gran cantidad de mate
Royal Society de Londres y de la Academia de riales que cotidianamente se encuentran en el
Ciencias de Francia. entorno.
Una carta del 17 de septiembre de 1683 con A pesar de los grandes avances de la mi
tiene los primeros dibujos registrados de las croscopa actual, todava se reconocen estas
bacterias, observadas por Leeuwenhoek en una 3 formas generales de las bacterias descritas por
suspensin de sarro (placa dental o biopelcula Leeuwenhoek.
dental), que haba tomado de sus dientes. La
meticulosidad y exactitud de sus observaciones Generacin espontnea
las evidencian los dibujos que realiz. Diseaba
las clulas bacterianas indicando que eran esf El descubrimiento de un mundo invisible a sim
ricas (cocos), cilindricas o en forma de varilla ple vista aviv el inters por descubrir el origen
(bacilos) o en espiral (espirilos). de la vida. En el siglo xix se agudiz la polmica
Las observaciones de Leeuwenhoek, ma por causa de la teora que afirmaba que los mi
nifestadas en sus cartas llenas de entusiasmo, croorganismos aparecan espontneamente, sin
se leyeron con inters, pero no se reconoci progenitores que les dieran la vida. Una de las
el significado de estos descubrimientos (vase preguntas ms frecuentes de la poca era: de
figura 1.1). dnde vienen estos microorganismos?

Algunos respondieron que aparecan como
resultado de la descomposicin de tejidos vegeta
les y animales muertos. En otras palabras, pensa
ban que los organismos vivos surgan de materia
sin vida, despus de su descomposicin.
A este concepto se le conoci como generacin
espontnea o abiognesis: abio: sin vida y genesis:
origen. La idea bsica de la generacin espontnea
era: el alimento se pudre si permanece durante
cierto tiempo a la intemperie y al examinar mi
croscpicamente el alimento putrefacto, se observa
que est repleto de bacterias. Entonces surga
nuevamente la pregunta: de dnde provienen estas
bacterias que no se ven en el alimento fresco?
La idea de la generacin espontnea se
remonta a la antigua Grecia, en donde se crea
que la carne en descomposicin produca gusa
nos y que las moscas y ranas brotaban del barro,
bajo condiciones climticas apropiadas. Por eso,
muchos argyeron que los microorganismos se
originaban por generacin espontnea y tambin
hubo muchos fanticos que abogaban a favor de
la generacin espontnea de gusanos, insectos e
incluso de animales como ratones y ranas.
Hubo verdaderos lderes defensores y detrac
tores de esta teora, cada uno de ellos construy
nuevas y fantsticas explicaciones o emple evi
dencias experimentales, para tratar de demostrar
su posicin.
John Needham (1713-1781). En 1749 realiz
experimentos con carne cocida y observ que
la carne presentaba microorganismos al iniciar
el experimento, por eso, concluy que estos se
originaban de la carne cruda.
Hubo, tambin, quienes tuvieron la valenta
de demostrar los garrafales errores en que se
apoyaba la teora de la generacin espontnea.
Entre ellos se destacaron:
Lzaro Spallanzani (1729-1799). Trat de
refutar la generacin espontnea con un experi
mento en el cual utiliz matraces donde coloc
una solucin nutritiva (caldo de carne de buey),
despus los cerr hermticamente e hirvi la so lares a los microorganismos encontrados en el
lucin, durante una hora. Como es lgico, despus
de cierto tiempo, no aparecieron microbios en
el caldo contenido en los matraces. Pero estos
resultados, confirmados en repetidos experi
Historia de la microbiologa /3
mentos, no lograron convencer a Needham
quien defenda la teora, e insista en que el aire
era esencial para la generacin espontnea de
microbios.
Franz Schulze y Theodor Schwann (1815-
1873). Trataron de demostrar el error que defen
dan los espontanestas: Schulze haca pasar aire
a travs de soluciones fuertemente cidas y lo
haca llegar a los matraces que contenan caldo
de carne hervido. Por su parte, Schwann pasaba
el aire a travs de tubos calentados al rojo y lo
haca llegar a los matraces que contenan caldo
de carne hervido.
En ninguno de los dos casos aparecieron mi
crobios porque el cido en el primer experimento
y el calor extremo en el otro, les haban causado
la muerte. Sin embargo, los persistentes defen
sores de la generacin espontnea no quedaron
convencidos y argumentaban que el cido y el
calor alteraban el aire de tal manera que impe
dan el crecimiento de los microorganismos. Los
experimentos continuaron con menor o mayor
xito, pero no lograban convencer definitivamen
te a los espontanestas.
Durante la misma poca en que se realizaban
estos experimentos emerga a la luz pblica, en
Francia, Louis Pasteur, un nuevo cientfico que re
volucionara la ciencia con sus grandes aportes.
Louis Pasteur (1822-1895). Estudi qumica
y adquiri fama nacional en Francia, a comienzos
de su carrera, al descubrir la estructura qumica
del cido tartrico. Luego se interes por la in
dustria vincola y los cambios que se producan
en los procesos de fermentacin, lo que lo llev
forzosamente a debatir sobre la generacin es
pontnea. En esta tarea revis con cuidado todo
trabajo realizado sobre fermentacin y luego
efectu numerosos experimentos para comprobar
el hecho de que los microorganismos solo pueden
surgir de otros microorganismos en un proceso
llamado biognesis. Demostr que en el aire
normal se encontraban estructuras muy simi
material putrefacto. Descubri que esa diversidad
de microorganismos del aire era indistinguible de
los que se encontraban, aunque en mayor canti
dad, en el material en putrefaccin. Por tanto,
4 / Microbiologa bsica para el rea de la salud y afines
concluy que los microorganismos encontrados
en esa podredumbre se originaban a partir de los
microorganismos del aire, porque estos estaban
suspendidos y se depositaban constantemente
sobre la superficie de cualquier tipo de objeto.
Estos resultados lo envolvieron en debates muy
acalorados con sus oponentes. Uno de los mayo
res defensores de la generacin espontnea, en la
poca de Pasteur, fue el naturalista francs Flix-
Archimde Pouchet, quien en 1859 public un
amplio informe defendiendo la teora. Pero choc
con el adversario ms ferviente de la generacin
espontnea: Louis Pasteur, quien, irritado por lgi
ca y por los datos publicados por Pouchet, realiz
experimentos para acabar con sus argumentos.
Utiliz el calor para eliminar los microor
ganismos contaminantes, pues l ya utilizaba
el concepto de la destruccin microbiana por
calor. Igualmente, otros cientficos investigado
res haban demostrado que si se colocaba una
solucin nutritiva como el caldo de carne, en
un matraz de vidrio, luego se sellaba hermti
camente, se calentaban hasta ebullicin por un
tiempo determinado y la solucin, en su interior,
no se descompona y permaneca por muchsimo
tiempo incorrupta. Claro que los defensores de la
generacin espontnea alegaban que era necesa
rio el aire fresco para que se diera la generacin
espontnea y que el aire del interior del matraz
se modificaba por causa del calentamiento, e
impeda as la generacin espontnea.
Pasteur prepar soluciones nutritivas en
matraces de vidrio en forma de baln, los cuales
posean un cuello largo y estrecho o cuello de
cisne (hoy se conoce como m atraz Pasteur ) y
las llev a ebullicin, dejando entrar y salir el
aire sin hacerle ningn tratamiento y sin filtrar.
Despus, al enfriarse el matraz, el aire poda pasar
libremente. En los caldos no aparecieron microor
ganismos. La razn de esto era que las partculas
de polvo que contenan los microorganismos, no
podan llegar hasta el caldo nutritivo, porque se
haban sedimentado en la parte en forma de U del
tubo en cuello de cisne y las corrientes de aire
eran tan reducidas que las partculas de polvo no
haban sido arrastradas hasta el interior de los
matraces (vase figura 1.2). Pero si el matraz se
inclinaba lo suficiente como para permitir que
el caldo nutritivo estril hiciera contacto con el
cuello en U del matraz, el caldo se llenaba de mi
croorganismos y obligatoriamente se presentaba
la putrefaccin. Con este sencillo pero brillante
experimento, Pasteur aclar en definitiva la con
troversia suscitada por la teora de la generacin
espontnea y con ella a sus defensores.
En la Sorbona de Pars, Pasteur expuso sus
resultados el da 7 de abril de 1864 y como sus ma
traces no mostraban signo alguno de vida, dijo:
Yo les he resguardado y sigo an resguardndo
los de la nica cosa que est por encima de las
posibilidades del hombre hacer; los he resguar
dado de los grmenes que flotan en el aire, los
he resguardado de la vida...
Con la exuberancia de su refinado y florido
lenguaje, Pasteur lanz una serie de dardos con
tra los que disentan de l:
... no hay ninguna condicin en la que se pueda
afirmar que los seres microscpicos vienen al
mundo sin grmenes, sin padres semejantes a ellos
mismos. Los que alegan esto, han sido vctimas de
sus ilusiones, de experimentos defectuosos, vicia
dos por los errores que ellos no han sido capaces de
percibir y que no han sabido cmo evitar...
Con la aceptacin del concepto de bio g
nesis se desterr por completo y para siempre
a los espontanestas, se facilit el camino para
trabajos futuros y Pasteur continu sus estudios
sobre fermentacin y luego sus investigaciones
sobre microorganismos como agentes causales
de enfermedades.
Teora del germen
en la fermentacin
En la antigedad, muchas culturas desarrollaron
bebidas y alimentos que eran producto de la
fermentacin microbiana. Grecia fue uno de los
pases ms sobresalientes por la produccin de
vino; Mesopotamia, 500 aos a. C., tena la pro
fesin de cervecero; las salsas de soya de China

y Japn, obtenidas de legumbres fermentadas, se
han fabricado durante siglos; el kumis, bebida
alcohlica fermentada y elaborada a partir de
leche de mua o de camello, la disfrutaban desde
mucho tiempo atrs las tribus de Asia Central.
En esas pocas la gente iba mejorando la cali
dad de sus productos de fermentacin con base en
prueba y error, sin saber que la calidad dependa
de las condiciones de crecimiento de los microor
ganismos responsables de la fermentacin.
Hacia 1850, Pasteur enfoc su atencin en una
de las industrias ms importantes de Francia: la
fabricacin del vino. Al examinar muchos lotes
de vino, descubri microbios de diferentes clases.
En los lotes buenos encontr predominio de cierta
clase de microorganismos; en los lotes malos o
peores estaban presentes otras clases. Posterior
mente, Pasteur determin que con la seleccin
apropiada de un microorganismo, el fabricante
obtendra un producto consistente, bueno y
uniforme. Para lograr esto deba eliminar los mi
crobios que ya estaban en los mostos y comenzar
una nueva fermentacin con un cultivo (masa de
microorganismos en crecimiento), procedente de
una cava de vino que haba sido satisfactorio.
Historia de la microbiologa /5
Pasteur sugiri que las clases de microbios
indeseables podran eliminarse calentando los
mostos, no tanto como para estropear el aroma
del zumo de frutas, pero s lo suficiente para
matar esos microbios. Descubri que sometiendo
los mostos a temperaturas de 62,8 C (145 F)
por 30 min se lograba el objetivo deseado. Este
proceso se conoce en la actualidad como pasteu
rizacin, y se utiliza ampliamente en industrias
de fermentaciones, como en la lctea, para des
truir los microorganismos presentes en la leche
y derivados que causan enfermedades.
Teora del germen de la enfermedad
Esta teora tambin caus gran revuelo entre los
investigadores (incluso antes de aparecer Pasteur
se mencionaba), pero lgicamente tambin la
sustentaron teoras populares con buenos defen
sores. Entre otras, las que ms auge tuvieron y
obviamente las de mayor popularidad fueron:
1. Teora tergica. Afirmaba que la enferme
dad afectaba a una persona debido a un castigo
divino, por causa de las ofensas que los humanos
hacan a los dioses.
6 / Microbiologa bsica para el rea de la salud y afines
2. Teora miasmtica. Deca que la enfermedad
la causaban los miasmas o pestilencias que emana
ban de las calles, los pantanos, las basuras, los cuer
pos enfermos o la materia en descomposicin.
3. Teora contagium fo m ites. Atribua la en
fermedad a un contagio causado por objetos in
animados utilizados por una persona enferma.
4. Teora contagium vivo. La enfermedad
se produce por contagio directo de una persona
enferma a otra sana.
En 1546, Fracastoro de Verona (1483-1553)
sugiri que la enfermedad la podran causar or
ganismos demasiado pequeos para ser vistos,
que se transmitan de una persona a otra.
En 1762, Von Plenciz de Viena no solo asegu
raba que estos agentes vivos eran los causantes
de la enfermedad, sino que sugera que diferentes
agentes eran responsables de una gran variedad
de enfermedades.
Tambin hubo planteamientos no muy exi
tosos en un comienzo, como los del mdico y
letrado Oliver Wendell Holmes, quien en 1843
insista en que la fiebre puerperal, una grave y con
frecuencia fatal enfermedad de la madre despus
del parto, era contagiosa y que probablemente la
causaban microorganismos transportados de una
madre a otra por comadronas y mdicos.
En 1870, el mdico alemn Robert Koch (1843-
1910) se dej tentar por la nueva y fascinante
ciencia de la bacteriologa y contribuy de forma
decisiva al desarrollo de la microbiologa. Aisl y
cultiv las bacterias (bacilos) productores del car
bunco, a partir de la sangre de ovejas que haban
muerto por causa de esta enfermedad. Cultiv
en su laboratorio las bacterias, supuestamente
responsables y las observ al microscopio para
estar seguro que solo haba una clase de ellas y
luego las inyect en ratones, para ver si desarro
llaban la enfermedad. A partir de estos ratones,
aisl bacterias iguales a las que haba encontrado
originalmente en las ovejas que haban muerto
de carbunco. As demostr por primera vez que
una bacteria era el agente causal de una enfer
medad en un animal. Luego Koch descubri las
bacterias causantes de la tuberculosis y el clera.
Los criterios obtenidos en los experimentos de
Koch se conocen como postulados de Koch , los
cuales se convirtieron y siguen como normativa
para tener evidencia de que una enfermedad la
causa un microorganismo especfico.
Postulados de Koch
1. Un microorganismo especfico puede en
contrarse siempre asociado a una enfermedad
determinada.
2. El microorganismo puede aislarse y culti
varse en un cultivo puro en el laboratorio.
3. El cultivo puro del microorganismo produce la
enfermedad al ser inyectado en un organismo sano,
a partir del animal infectado experimentalmente.
4. Es posible, por procedimientos de labora
torio, recuperar el microorganismo inyectado a
partir del animal infectado.
Estas demostraciones tuvieron xito gracias
a la implementacin de los laboratorios de bac
teriologa y al uso de medios de cultivo, como
el agar con nutrientes que facilita el crecimiento
y desarrollo de los microorganismos. Una nue
va terminologa comenz a utilizarse rutina
riamente, destacndose, entre otros, trminos
como: 1) colonia: grupo de microorganismos
de la misma especie que puede observarse
macroscpicamente; 2) cultivo: grupo de micro
organismos en crecimiento, y 3) cultivo puro o
cepa pura: grupo de colonias conformadas por
microorganismos de la misma especie.
En 1880, Pasteur aisl y cultiv la bacteria
causal del clera aviar que estaba produciendo
estragos en las aves de corral. Para demostrar
que haba aislado en un cultivo puro la bacteria
responsable de esta enfermedad, hizo uso de
las tcnicas fundamentales diseadas por Koch
y organiz una demostracin pblica en la que
repiti un experimento que haba tenido xito
en muchos ensayos previos realizados en su
laboratorio. Inocul, es decir, le inyect a pollos
sanos sus cultivos puros del clera aviar y esper
a que se desarrollara la enfermedad y murieran.
Pero ante su asombro, los pollos no enfermaron
ni se murieron (vase figura 1.3).
Desconcertado revis con detalle cada uno de
los pasos de su experimento y encontr que acci
dentalmente haba utilizado en la demostracin
Historia de la microbiologa / 7
8 / Microbiologa bsica para el rea de la salud y afines
los cultivos viejos (que tenan varias semanas de
sembrados), en lugar de los recin sembrados.
Unas semanas despus, repiti el experi
mento utilizando 2 grupos de pollos: el primero,
haba sido inoculado en la primera demostracin,
con cultivos viejos que haban sido ineficaces. El
segundo, no haba sido previamente expuesto a
estos cultivos. Ambos grupos se inocularon con
bacterias de cultivos frescos y jvenes. Esta vez
los pollos del segundo grupo murieron y los del
primer grupo permanecieron vivos.
Pasteur explic convincentemente el hecho:
las bacterias pueden, de alguna manera, perder
su poder de virulencia, o sea, la capacidad para
producir enfermedad, despus de permanecer
en reposo y hacerse viejas. Sin embargo, estas
bacterias atenuadas o menos virulentas, pueden
todava estimular al hospedero (en el caso des
crito, el pollo), para que produzca anticuerpos;
es decir, sustancias de defensa orgnica contra
la infeccin causada por una nueva exposicin
al microorganismo virulento.
De esta manera, Pasteur llam a los cultivos
atenuados de bacterias vacunas y a la inmuniza
cin con cultivos atenuados vacunacin.
Con este experimento Pasteur demostr que
el cultivo viejo, aunque incapaz de producir la
enfermedad, poda hacer que los pollos produje
ran en su sangre sustancias protectoras denomi
nadas anticuerpos. Despus del descubrimiento
de la vacuna contra el clera aviar, continu
con sus estudios inmunolgicos y descubri la
vacuna contra la rabia o hidrofobia. Para hacerlo,
inoculaba un conejo con saliva de perro rabioso,
luego obtena un extracto del cerebro y la mdula
espinal del conejo del cual, atenuaba el virus y
lo inyectaba al paciente que haba contrado la
rabia. La figura 1.4 lo ilustra claramente.
Aplicaciones de la microbiologa
Existen diferentes ramas que se generan del
propio tallo de la microbiologa, entre ellas se
destacan, por causa de su inters en las pato
logas infecciosas humanas, la microbiologa
mdica y la clnica, pero ninguna de las dos
puede calificarse como ciencia independiente
del ser humano porque ambas comprenden en
>u vertiente general sistemtica, la inmunologa
microbiana (respuesta del hospedador u hospe
dero a los agentes infecciosos), la bacteriologa,
la protozoologa, la micologa, la virologa y el
estudio de los priones (se exceptan las algas
porque rara vez tienen inters en la enfermedad
humana). Las siguientes son las principales divi
siones y aplicaciones de la microbiologa:
1. Microbiologa del suelo. Se encarga de los
microorganismos que mejoran la fertilidad de los
teiTenos convirtiendo el nitrgeno atmosfrico en
compuestos nitrogenados que luego utilizarn las
plantas para la sntesis de protenas. Tambin estudia
la transformacin de materia orgnica, que llevan a
cabo los microorganismos en compuestos inorgni
cos hacindolos as utilizables por las plantas.
2. Microbiologa de los alimentos. Estudia
los microorganismos implicados en la contami-

nacin de alimentos que pueden causar enfer
medades o intoxicaciones. Tambin incluye los
microorganismos utilizados industrialmente para
mejorar la calidad de los alimentos o para obte
ner productos nuevos a partir de un compuesto
orgnico determinado.
3. Microbiologa de la leche. Investiga los
microorganismos que pueden ser utilizados en
la fabricacin de quesos, leches fermentadas,
mantequillas y una gran diversidad de productos
lcteos.
4. Microbiologa de lasfermentaciones indus
triales. Estudia los productos que se obtienen en
escala industrial, utiliza las actividades bioqu
micas de los microorganismos: medicamentos,
suplementos vitamnicos, bebidas alcohlicas,
enzimas, cidos orgnicos, concentrados para
animales y vacunas, entre otros.
5. Microbiologa del carbn y del petrleo. La
intervencin de los microorganismos en la forma
cin del carbn de piedra es importante, aunque
limitada a la conversin del material orgnico en
humus y a algunas modificaciones ulteriores, en
el estado de turba (depsito de materias vegetales
en descomposicin, de color pardusco y estructura
porosa). En la formacin del petrleo parece que
los microorganismos actan oxidando la materia
orgnica hasta obtener compuestos de estructura
semejante a la del petrleo.
6. Microbiologa de drenajes. Desde los
albores de la ciencia sanitaria y la ingeniera se
utilizan los microorganismos para depurar los
residuos domsticos e industriales.
7. Microbiologa acutica. Se ocupa de los
microorganismos que se encuentran en el mar,
los estuarios y las aguas dulces: lagos, manan
tiales, ros, etc.
8. Microbiologa mdica. Esta rama de la
microbiologa se relaciona directamente con la sa
lud, se dedica al estudio de los microorganismos
patgenos, es decir, que causan enfermedad y a
los que hacen parte, imprescindible, de la flora
bacteriana normal.
9. Microbiologa clnica. Aplica los conoci
mientos adquiridos en la microbiologa mdica,
para el diagnstico de los eventos infecciosos
humanos con fines asistenciales.
Historia de la microbiologa /9
10. Microbiologa bucal. Se circunscribe
al estudio de los microorganismos que habitan
normalmente en la cavidad bucal y los que por
medio de sus propios mecanismos logran im
plantarse en la boca y producir enfermedades.
La microbiologa bucal hace parte de las dos
ramas anteriores y sin duda tiene en sus aspectos
generales y sistemticos los mismos contenidos,
lgicamente enfatiza en los microorganismos
propios y relacionados con la cavidad bucal y
la respuesta de esta frente a aquellos. Tambin
estudia la ecologa bucal, es decir, las relaciones
que los microorganismos establecen entre s y
con los tejidos bucales.
11. Microbiologa del espacio. Tambin se
conoce con el nombre de exobiologa, estudia
la posible presencia de microbios en el espacio
exterior, as como su empleo potencial como pro
visin alimenticia y energtica de los astronautas
y para mantener, en los vehculos espaciales,
el equilibrio conveniente entre el oxgeno y el
dixido de carbono.
Distribucin de los microorganismos
Los microorganismos se encuentran dispersos en
casi toda la naturaleza. Las corrientes de aire los
llevan desde la superficie de la tierra a las capas
superiores de la atmsfera. Aun los procedentes
del ocano pueden encontrarse a mucha distancia
sobre las montaas ms elevadas. Igualmente,
se han hallado microorganismos en el fondo del
ocano en profundidades donde la vida normal
sera imposible. El suelo rebosa de ellos. Los
arroyos y los ros arrastran microorganismos a
los lagos y grandes embalses. Se presentan en
ms abundancia cuando encuentran materias
nutritivas, humedad y temperatura favorable para
su desarrollo y multiplicacin.
Las condiciones que favorecen la supervi
vencia y el crecimiento de muchos microor
ganismos son las que rodean normalmente al
hombre, por lo que es inevitable vivir entre una
multitud de microbios. Estn en el aire y en los
alimentos, se encuentran en la superficie del
cuerpo humano, los intestinos, la boca, la nariz,
y en otras cavidades abiertas del organismo. Por
10 / Microbiologa bsica para el rea de la salud y afines
fortuna, la mayora de los microorganismos son
inocuos. Adems, disponemos de los medios
para resistir la invasin de aquellos que puedan
causar dao.
Clasificacin de los microorganismos
En microbiologa, como en cualquier otra rien
da, clasificacin significa la disposicin ordena
da de las unidades en estudio, formando giupos
de unidades mayores. En 1753, el botnico sueco
Linneus intent clasificar todas las especies que
se conocan hasta ese entonces, en categoras
inmutables. Muchas de esas categoras todava
se usan en biologa actual. La clasificacin je
rrquica linneana se basaba en la premisa que
las especies eran la menor unidad y que cada
especie (o taxn), est comprendida dentro de
una categora superior o gnero.
Los nombres cientficos de animales, plantas
y microorganismos se escriben con dos palabras
que corresponden al gnero y la especie. Linneus
tambin denomin a este concepto nomenclatura
binomial, y eligi el latn, en ese entonces el len
guaje de los hombres cultos en todo el mundo,
para su escritura, con el objeto de asegurar que
todos los cientficos entendieran la nomenclatu
ra. En la actualidad an se utiliza el latn por ser
una lengua muerta.
Hasta el siglo xviii, la clasificacin de los
organismos vivos colocaba a todos los organis
mos dentro de uno de los dos reinos existentes:
vegetal y animal, clasificacin que vena desde
la poca de Aristteles, pero a medida que se
obtenan mayores conocimientos acerca de los
microorganismos se evidenciaba que algunos de
ellos no encajaban adecuadamente en ninguno le los
dos reinos. Una de las primeras propuesta? para
la clasificacin mejorada de los reinos la hizo,
en 1866, el zologo alemn E. H. Heckel, quien
sugiri que se creara el reino protista (primera
vida), donde solo se incluyeran los microorganis
mos unicelulares con caractersticas intermedias
entre animales y plantas. El reino protista, a su
vez, se subdividi en protistas inferiores o clu
las procariticas y protistas superiores o clulas
eucariticas.
1. Protistas inferiores o clulas procariti-
cas. Presentan un nucleoide no delimitado por
membrana, un solo cromosoma circular, son
haploides y no presentan nuclolo, cloroplas-
tos, aparato de Golgi, mitocondrias ni retculo
endoplsmico; no hacen mitosis, meiosis ni
picnocitosis, su citoplasma es coloidal y poco
fluyente. Su membrana celular no contiene este
rles, pero s actividad metablica, pues algunas
de estas clulas realizan procesos biolgicos
como respiracin y fotosntesis. Otras poseen
mesosomas y la pared celular la conforman pepti-
doglucanos.
2. Protistas superiores o clulas eucariticas.
Presentan ncleo delimitado por la membrana
nuclear con uno o ms cromosomas lineales, son
diploides y hacen divisin nuclear por mitosis.
Estas clulas poseen nuclolo, histonas, mitocon
drias, aparato de Golgi, retculo endoplsmico,
membrana celular con esterles y sin actividad
metablica. Carecen de peptidoglucanos, pueden
hacer picnocitosis y algunas clulas presentan
cloroplastos.
Un esquema de clasificacin de 5 reinos
lo propuso R. H. Whittaker, en 1969, en l se
incluan las bacterias y cianobacterias en un
reino que se denomina Mnera. Este reino se
reemplaz por el reino Prokaryotae.
De esta manera los microorganismos se
encontraban ubicados en 3 de los 5 reinos: 1) rei
no F ungi, que comprende levaduras y hongos
filamentosos o mohos; 2) reino Protista, que
incluye algas y protozoos microscpicos, y 3) reino
P rokaryotae, en l se ubican las bacterias y las
cianobacterias (antes se conocan como algas
verdes, azules o cianofceas). Sin embargo, por
causa de su carcter provisional y evidentemente
discutible, siguieron surgiendo nuevas propues
tas de clasificacin.
W oese y colaboradores, entre 1981 y 1990,
fueron los primeros en realizar estudios molecu
lares comparativos para analizar la sistemtica
filogentica de los organismos celulares. A partir
de estos estudios, se establecen relaciones entre
diversos organismos y se renen en rboles
filogenticos de carcter universal. A partir de
las secuencias de RNA ribosomal, descubrieron

que el reino Prokaryotae inclua dos grupos
filogenticos distintos: Archeobacterias, que se
encuentran en nichos ecolgicos con condiciones
de vida extremas, incluyen los microorganismos
que producen metano (metangenos o metano-
gnicos), ciertos metabolizadores del azufre que
pueden crecer en ambientes muy cidos y calientes
(termfilos extremos) y otros que viven en ambien
tes salinos (halobacterias o bacterias halfilas) y
Eubacterias que son las formas ms habituales y se
encuentran en cualquier nicho ecolgico, aisla
das en su mayora del cuerpo, el suelo y el agua.
Observndolas microscpicamente, todas las
bacterias parecen similares, adems la escasez
de fsiles ha dificultado el establecimiento de
las relaciones evolutivas entre ambos grupos.
La evidencia presentada por la biologa mole
cular sugiere que los primitivos procariotas se
separaron en esos dos grupos muy temprano
en el desarrollo de la vida en la tierra, de modo
que los descendientes de estas dos lneas son:
Eubacterias y Archeobacterias consideradas
como el sexto reino (vase figura 1.5).
Historia de la microbiologa / I I
La conclusin ms sorprendente que se
extrae de estos estudios filogenticos es que las
arqueobacterias tienen mayor relacin con los
eucariotas que las eubacterias. Se ha determinado
que la acumulacin de mutaciones concretas en
eubacteria es ms baja que en plantas y animales,
por lo cual, los procariotas han requerido del
doble de tiempo para poder evolucionar.
As, segn las teoras de Woese y sus colabo
radores, la vida en la Tierra puede clasificarse en 3
dominios celulares: Bacteria (bacterias), Archaea
(arqueobacterias) y Eucarya (eucariotas).
En la figura 1.5 aparece un esquema con
una raz nica que tiene en su base a Luca, l
timo antepasado comn universal de las clulas
modernas, equivale a lo que es Lucy en el rbol
evolutivo de Homo sapiens, es decir, no la pri
mera clula, sino una clula ya evolucionada, con
todas las caractersticas de sus futuros descen
dientes: los actuales procariotas y eucariotas.
Muchos autores han realizado diversas pro
puestas y otros continan hacindolo con base
en avances bioqumicos, moleculares, etc., per.
1 2 / Microbiologa bsica para el rea de la salud y afines
an no cuentan con amplia aceptacin de la
comunidad cientfica en general.
Los virus, las partculas subvirales, viroides,
virusoides, ARN satlites y los priones, son
entidades no celulares que por poseer caracte
rsticas muy peculiares no estn incluidos en
este esquema de los seres vivos. Actualmente
existe una propuesta para incluirlos en un nuevo
grupo o imperio o dominio (solo en el caso de
ser aceptada la propuesta de considerarlos como
seres vivos), que se llamara Viridae.
Microscopa
El conocimiento necesario para la inteipretacin
de los fenmenos, a los cuales se refiere esta
primera parte, se ha desarrollado principalmente
en los ltimos 100 aos. A finales del siglo x v i i i ,
cuando muy pocos crean en la existencia de
microorganismos y no se conocan todava
lentes perfeccionadas que permitieran su es
tudio. apareci en escena el holands Anthony
van Leeuwenhoek e inici el desarrollo de la
microscopa, utilizaba lentes convergentes de
gran potencia, para la poca, que producan una
imagen virtual muy aumentada de un objeto
situado en el foco, de esta manera lograba un
poder de resolucin que le permita observar
partculas hasta de dos mieras (jum) de dime
tro. Este primer y rudimentario microscopio se
modific paulatinamente y en la poca actual
se cuenta con una muy buena variedad de estos
implementos indispensables para el estudio de
la microbiologa (vase figura 1.6).
Unidades utilizadas en microscopa
La unidad de medida es la miera = jli, equiva
lente a la unidad de medida micrmetro = jum.
En este texto para facilitar la comprensin se
 Historia de la microbiologa / 13

Tabla 1.1 Equivalencia de las unidades mtricas de longitud utilizadas en microscopia

Unidad Prefijo Equivalencia mtrica

Decmetro (dm) Deci = 1/10 0,1 m = 10'1

Centmetro (cm) Centi = 1/100 0,01 = 10"2

Milmetro (mm) Mili = 1/1.000 0,001 = 10'3

Micrmetro o Micro = 1/1.000.000 0,000001 m = 10~6

miera (pm o p)

Nanmetro (nm) Nano = 1/1.000.000.000 0,000000001 =10 8

Angstrom () La unidad Angstrom no pertenece al 0,0000000001 = 1010

sistema mtrico, pero como su uso
est muy extendido en microbiologa,
se incluye en esta tabla

refiere el micrmetro (|iin) como unidad de
medida microscpica. Las equivalencias de las
unidades utilizadas en microscopia aparecen en
la tabla 1.1.
Tipos de microscopios
Una de las herramientas ms importantes para
el estudio de la microbiologa es el microscopio.
Este aparato aumenta el tamao de una imagen
hasta tal punto que facilita su visualizacin. A
partir del primer microscopio, elaborado por
Anthony van Leeuwenhoek, esta invaluable
ayuda ha sufrido cambios paulatinos que lo han
perfeccionado cada vez ms. En la actualidad
existe gran variedad de microscopios pticos
compuestos que se emplean segn las necesi
dades de observacin:
1. M icroscopio de luz, ptico o de
cam po claro
En esencia, fue el primero que se desarroll
cuando la microbiologa hizo su aparicin.
Inicialmente era un microscopio tan simple que
slo posea una lente biconvexa y la fuente de
luz que iluminaba la muestra era externa y tan
elemental como la llama de una vela. Despus se
perfeccion adicionndole un sistema de lentes
separados con los cuales se consegua mayor au
mento, por esto, tom el nombre de microscopio
compuesto, que es el mismo microscopio ptico
o microscopio de luz conocido actualmente.
El microscopio ptico, utilizado con mayor
frecuencia para la mayora de los estudios, utili
za el sistema de iluminacin que se conoce con
el nombre de campo claro, en el cual el campo
del microscopio se ilumina brillantemente,
mientras que el objeto que se va a estudiar se
ve oscuro o coloreado. Se ve coloreado cuando
se somete a procedimientos en los cuales se
utilizan uno o varios colorantes especficos que
permiten ver con ms detalle el objeto que se
observa. En este sistema el aumento se consigue
gracias al empleo de varias lentes pticas. La
mayora de los microscopios alcanzan los 1.000
y algunos hasta los 2.000 aumentos, con ocula
res de 10 dimetros y objetivos de 100 dimetros
de aumento, haciendo posible que partculas de-
0,2 jim de dimetro pueda ser amplificadas a
0,2 mm, as resultan claramente visibles. En
este tipo de microscopio, mayor amplificacin
no da mejor resolucin de los detalles, porque
se reduce el rea de observacin o campo visual
(vase figura 1.7).
El poder de resolucin del microscopio
ptico, en condiciones ideales, es aproximada
mente la mitad de la longitud de onda de la luz
empleada. El factor que limita el aumento en el
microscopio ordinario es el poder de resolucc n
14 / Microbiologa bsica para el rea de la salud y afines
que corresponde a la distancia que debe separar a
dos fuentes luminosas puntiformes, para que se
visualicen como dos imgenes diferentes.
En la mayora de los laboratorios relaciona
dos con microbiologa se encuentran microsco
pios de luz equipados con tres o cuatro objetivos
con amplificaciones diferentes cada uno. El
grado de amplificacin se calcula multiplicando
el poder de amplificacin del ocular por el poder
de amplificacin del objetivo correspondiente.
Por lo general, el poder de amplificacin es de
diez veces, aunque pueden encontrarse oculares
de menor y mayor aumento.
NA del objetivo + NA del condensador
Longitud de onda de la luz
Poder de resolucin = Longitud de onda de la luz
NA del objetivo +
NA del condensador
NA = apertura numrica
NA = n seno 0
Donde:
n: es el ndice de refraccin del medio que se
encuentra entre el objeto y la lente.
0: es la mitad del ngulo del cono de luz que
entra en el objetivo.
Cuando el medio entre la lente y el objeto es
el aire, la apertura numrica es siempre menor
que 1.0: en consecuencia, el poder de resolucin
obtenido es de 0,3 a 0,4 jum. Cuando se coloca
aceite de inmersin, la apertura alcanza valores
entre 1,2 y 1,4, y el poder de resolucin alcanza
un mximo de 0,2 |um, es decir, que con el uso
de aceite de inmersin pueden observarse los
objetos cuyo tamao est en las cercanas de las
2 |im o ms (vanse figuras 1.7-1.10).
 Historia de la microbiologa 15

Ocular IPX Ocular 10X Ocular 10X Ocular 10X

Objetivo Objetivo Objetivo: Objetivo.

4X 10X 40X 100X

y
Portaobjetos
}
Aumento total
10Xx4X= 40

Distancia de
enfoque
Portaobjetos
/
Aumento total
10Xx 10X= 100

Distancia de
enfoque
Portaobjetos
'}
Aumento total
10X x 40X= 400

Distancia de
enfoque
Aceite de
inm ersin'-*
Portaobjetos

Aumento total
10Xx 100X= 1000

Distancia de
enfoque

Figura 1.8 Objetivos utilizados con mayor frecuencia en el microscopio de luz: 4X, 10X, 40X y 100X
Obsrvese la disminucin del dimetro del orificio que permite la entrada de luz al objetivo y la
disminucin de la distancia de enfoque a medida que el valor del objetivo va aumentando.

2. M icroscopio de luz ultravioleta 4. M icroscopio de contraste de fa ses

Utiliza longitudes de onda de aproximadamente
0,2 jum, lo que permite la resolucin de partcu
las de 0,1 um de dimetro. Estos microscopios
emplean lentes de cuarzo y sistemas fotogrficos
demasiado complicados y costosos para uso
general.
3. M icroscopio de campo oscuro
Se emplea arreglando el sistema de lentes del
condensador de tal manera que no llegue la luz
al ojo a menos que sea reflejada por algn objeto
que se encuentre en el campo microscpico.
Las estructuras que proporcionan un contraste
insuficiente con el medio que las rodea pueden
hacerse visibles. Esta tcnica es particularmente
valiosa para observacin de organismos como
las espiroquetas, que son difciles de observar
con luz transmitida.
Se basa en el hecho de que las ondas luminosas
que pasan a travs de objetos transparentes, como
las clulas, emergen en fases diferentes, segn las
propiedades de los materiales que atraviesan. Un
sistema ptico especial convierte esta diferencia
de fase en una diferencia de intensidad, de esta
forma unas estructuras aparecen ms oscuras que
otras. Una caracterstica importante es que en
las clulas vivas las estructuras internas pueden
ser diferenciadas, lo que no se consigue con el
microscopio ordinario. Entre estos microscopios
puede incluirse el microscopio de Nomarsky o
de contraste diferencial, porque por causa de
su sistema de prismas, ofrece unas bellsimas
imgenes tridimensionales.
5. M icroscopio de fluorescencia
Tipo de microscopio muy especializado, se
utiliza en inmunologa, cuando se realizan los
16 / Microbiologa bsica para el rea de la salud y afines
mtodos de inmunofluorescencia. Este mtodo
permite localizar el antgeno o el anticuerpo sobre
la superficie de las clulas vivas en suspensin o
en el citoplasma o en los ncleos de las clulas en
secciones congeladas de tejido. Los dos colorantes
de fluorescencia ms comnmente utilizados son
el isotiocianato de fluorescena (fluorescena) y el
isotiocianato de tetrametilrodamina (rodamina).
Este microscopio es una modificacin del
microscopio comn: un rayo de luz de un arco
de mercurio o de una lmpara de cuarzo pasa a
travs de una serie de filtros de vidrio o gelatina,
cuya funcin es actuar como excitadores y estn
ubicados entre la lmpara y el portaobjetos. El
rayo de excitacin choca sobre el material del
portaobjetos y hace el colorante fluorescente.
Otro filtro, el filtro de bloqueo, que se localiza
entre el portaobjetos y el ocular, permite que pase
solo la longitud de onda emitida. Se utiliza tanto
para diagnstico directo como indirecto.

6. Microscopio electrnico
La microscopa electrnica proporciona am
plificaciones tiles y ostensiblemente mayores
que las que pueden obtenerse por medio del
microscopio de campo claro (microscopio pti
co). Es posible lograr estos inmensos aumentos
gracias al gran poder de resolucin que se obtiene
a partir de longitudes de onda de los haces de
electrones, que se utilizan en lugar de luz. Los
haces de electrones tienen longitudes de onda
del orden de 0,005 a 0,0003 nm, muy cortas en
comparacin con las longitudes de onda de la
luz visible que se utiliza en microscopia ptica.
Estas longitudes de onda permiten alcanzar
poderes de resolucin varios cientos de veces
ms elevados que los obtenibles en microscopia
ptica. Utilizando la microscopia electrnica es
posible resolver objetos que caen dentro del rango
de los 0,003 im. Las amplificaciones finales que
se acercan al 1.000.000 de veces, pueden lograrse
al ampliar la imagen fotografiada.
Historia de la microbiologa / 17
Para la microscopia electrnica, la muestra
que se va a examinar se prepara en forma de una
finsima pelcula seca sobre pequeas rejillas y se
introducen en el instrumento en un punto que que
da entre el condensador magntico y el objetivo
magntico (en microscopia electrnica no se usan
sistemas pticos de vidrio), que son comparables
al condensador y el objetivo del microscopio
ptico. La imagen ampliada se visualiza sobre
una pantalla fluorescente o se registra sobre una
pelcula fotogrfica que utiliza una cmara incor
porada al instrumento (vase figura 1.10).
Se han desarrollado muchas tcnicas para el
examen de los microorganismos por microscopia
electrnica. Entre ellas figuran: los nuevos m
todos de tincin; los mtodos para hacer cortes
finos de las clulas microbianas, que permiten
su observacin microscpica, y las tcnicas con
radiactivos. Estos procedimientos son aplicables
a la microscopia electrnica de transmisin
(TEM). En esta clase de microscopia, el haz de
electrones pasa a travs de la muestra preparada
18/ Microbiologa bsica para el rea de la salud y afines

Tabla 1.2 Observacin comparativa de algunos tipos de microscopios, sus caractersticas y sus
utilidades

Microscopios pticos Caractersticas Utilidad

compuestos

De campo claro o de luz - Luz visible - Tinciones

- Hasta 0,23 pm - Fcil utilizacin
- Muestra sobre un fondo
brillante

De campo oscuro - Luz visible difractada - Microorganismos de

- Muestra brillante sobre difcil tincin
fondo oscuro

De contraste de fases - Luz difractada - Estructuras internas

- Muestra con diferentes
grados de brillo y
contraste

De fluorescencia - Luz ultravioleta - Inmunofluorescencia

- Muestra fluorescente - Auramina
sobre un fondo no
fluorescente

Electrnico - Haces de electrones -V irus

Estructuras menores de 0,23 |jm - Ultraestructuras

con un corte extraordinariamente delgado, para
lo cual las clulas o tejidos se introducen en un
material plstico (parana), que posteriormente
se corta con una cuchilla de diamante o vidrio.
Luego se coloca la muestra en una rejilla de
metal por donde pasa el haz de electrones que
se dirige a una placa fotogrfica o a una pantalla
fluorescente y de esta manera la dispersin de
los electrones da lugar a la imagen.
Hacia 1960 se desarroll una modificacin
que se conoce como microscopia electrnica de
barrido (scanning : SEM). Este procedimiento
expone la muestra a un haz de electrones, que
no pasan a travs de ella, sino que ia muestra se
recubre con una pelcula de oro; as, cuando el
haz de electrones choca con diversos puntos de
la superficie de la muestra, se emiten electrones
secundarios cuya intensidad vara con el con
torno de la superficie. De esta manera se logran
imgenes tridimensionales de la superficie del
objeto, que proporcionan informacin respecto
a su morfologa y caractersticas externas, las
cuales no pueden ser resueltas mediante micros-
copia de transmisin electrnica.
En las tablas 1.2 y 1.3 se comparan los tipos
de microscopia y las preparaciones para realizar
un examen utilizando el microscopio ptico.
Historia de la microbiologa:
sumario
La microbiologa es la ciencia que estudia los
microorganismos y sus actividades, adems estu
dia su forma, estructura, reproduccin, fisiologa,
metabolismo e identificacin. As mismo, trata
acerca de su distribucin en la naturaleza, las re
laciones recprocas y con los dems seres vivos,
los efectos beneficiosos y perjudiciales para el
hombre y las transformaciones fsicas y qumicas
que ejercen en su medio circundante.
La microbiologa se ocupa, principalmente, de
los organismos unicelulares, en los cuales todos los
procesos vitales se llevan a cabo en una sola clu
la. Todas las clulas vivas son semejantes y estn
constituidas por el protoplasma (citoplasma), (del
griego protos: primaria, y plasma: formacin),
que es un complejo coloidal compuesto principal
mente de protenas, grasas, cidos nucleicos, etc.

Tabla 1.3 Preparaciones ms comunes para la observacin de muestras utilizando microscopia ptica
Tcnica Preparacin
Examen en fresco: Preparacin hmeda o tcnica lmina
- Preparacin hmeda laminilla: una gota del fluido que contie
- Gota pendiente ne los organismos entre un portaobje
tos y un cubreobjetos
Gota pendiente: la gota de fluido se co
loca sobre un cubreobjetos en la mitad
de un crculo hecho con vaselina y se
cubre con un portaobjetos excavado.
Se invierte la preparacin y se observa
por un periodo de tiempo prolongado
Procedimiento de tincin La suspensin de las clulas se fija a
un portaobjetos, generalmente por el
calor
Tincin simple El frotis o extendido se tie con un solo
tipo solucin colorante
Tinciones complejas: dife En el proceso de tincin se usan 2 o
renciales y especiales ms reactivos o soluciones colorantes
Gram El colorante primario (cristal violeta) se
aplica al extendido, luego se trata con
reactivos y se hace una tincin de con
traste con safranina
Ziehl Neelsen El frotis se tie con fucsina fenicada, se
(cido-alcohol resistente) decolora y se hace tincin de contraste
con azul de metileno
Giemsa Se aplica el colorante a un frotis de
sangre o a pelculas de otras muestras
De esporas El colorante primario
(verde malaquita) se aplica calentndo
lo para que penetre en las esporas; las
clulas vegetativas reciben coloracin
de contraste con safranina
De cpsulas Se tie el frotis despus de un tratamien
to con sulfato de cobre
Historia de la microbiologa / 19
Aplicacin
Estudio de la morfologa estructu
ras celulares internas, movilidad o
cambios celulares
Varios procedimientos de tincin
Muestra la forma, tamao y orde
namiento de las clulas.
Pueden observarse diferencias
entre las clulas, porque se apre
cian partes especficas de las
clulas
Caracteriza a las bacterias inclu
yndolas en 1 de 2 grupos: Gram
positivas (violeta oscuro) y Gram
negativas (rojo claro)
Separa a las bacterias cido-al
cohol resistentes, o sea, aquellas
que no se decoloran al aplicar la
solucin cida (por ejemplo, las
micobacterias), de las que son
decoloradas por el alcohol cido
Permite observar:
protozoos en frotis de sangre;
rickettsias (pequeas bacterias
parsitas) en ciertas clulas del
nospedador y el material nuclear
de las bacterias
Pueden verse endosporas en
especies de Bacillus y Clostridium
La cpsuia aparece como una
zona clara que rodea a los orga
nismos que la poseen
 Tabla 1.3 Continuacin
De flagelos Un mordiente o fijador acta aumentan
do el grosor de los flagelos, antes de
ser teidos
Tincin negativa La muestra se mezcla con nigroslna o
tinta china y se extiende formando una
pelcula fina
El desarrollo de las tcnicas de microscopia elec
trnica han revelado la organizacin enormemente
intrincada de la estructura intracelular.
Todos los sistemas biolgicos tienen los
siguientes caracteres comunes: 1) capacidad
de reproduccin; 2) propiedad de absorber sus
tancias nutritivas y metebolizarlas para obtener
energa y desarrollarse; 3) facultad de excretar
los productos de desecho; 4) aptitud de respuesta
a los estmulos del medio, se llama a veces irri
tabilidad, y 5) capacidad de mutacin.
Preguntas para autocontrol
del aprendizaje
1. Defina microbiologa y explique el objeto
de esta ciencia.
2. Describa las contribuciones de Leeuwen
hoek a la microbiologa.
3. Compare las contribuciones de Pasteur con
las de Koch.
4. Cul es la relacin entre la teora de los
grmenes en la fermentacin y la teora de
los grmenes en la enfermedad?
5. Por qu se necesit el desarrollo de la
microbiologa para refutar la teora de la
generacin espontnea?
6. Cite un importante aporte a la microbiolo
ga realizada por cada uno de las siguien
tes cientficos: Schulze, Pasteur, Koch,
Schwam, Spallanzani, Lister y Holmes.
7. A qu criterios debe ajustarse un mi
croorganismo especfico para demostrar
Observar flagelos en bacterias
Estudio de la morfologa. El
procedimiento de tincin y los
reactivos son muy suaves en su
efecto sobre los microorganismos
se llama tincin negativa porque
estos no se tien, pero se hacen
visibles porque el fondo aparece
oscuro
que causa una determinada enfermedad?,
cmo se denominan estos criterios?
8. Describa la importancia de los microor
ganismos en cinco reas aplicadas a la
microbiologa.
9. Enumere y explique las caractersticas
comunes a todos los sistemas biolgicos.
10. Cmo naci el trmino protista?, a qu
organismos se alude cuando se usa este tr
mino?, cul es la diferencia entre protistas
inferiores y protistas superiores?
11. Cul es la base del esquema de clasifica
cin de Woese? Explique las razones por
las cuales es tan ampliamente aceptada
por la comunidad biolgica, tanto que ha
desplazado la propuesta de Whittaker.
12. Qu se entiende por dominio Bacteria y
Archaea!
13. Qu organismos y por qu quedaron ubi
cados en estos dominios?
14. Analice el lugar de los microorganismos en
el esquema del rbol filogentico.
15. Por qu cree que las bacterias actualmente no
continan clasificadas en el reino mneral
16. Explique el nuevo esquema de clasificacin
de los seres vivos propuesto por Woese.
17. Defina los siguientes trminos: cultivo,
cultivo puro, cepa, cepa pura, cultivo mixto,
cultivo contaminado, colonia. Por qu no
siempre debemos estudiar los microorga
nismos en cultivo puro?
18. Explique claramente el principio de inmu
nizacin, cmo lo demostr Pasteur?

19. Qu vacuna descubri Pasteur despus de 25. A qu se debe el gran poder de resolucin
la del clera aviar y cmo fue su proceso?
20. Explique la distribucin de los microorganis
mos en la naturaleza. En qu lugares no es
posible encontrar microorganismos? Cmo
se trasladan los microorganismos de un lugar
a otro?
21. Qu es un cultivo atenuado de bacterias?
Analice su importancia en las ciencias de la
salud.
22. Cules son las unidades de medida utiliza
das en microscopia? Haga una conversin
de milmetros a unidades de microscopia
ptica y electrnica.
23. Qu es poder de aumento y qu poder de
resolucin? Por medio de ejemplos expli
que estos dos trminos.
24. Identifique las partes o elementos que com
ponen el microscopio ptico y explique la
funcin de cada una de ellas.
Historia de la microbiologa / 21
del microscopio electrnico?
26. Mencione algunas limitaciones del micros
copio electrnico.
27. Qu es una preparacin hmeda? Qu
caractersticas de los microorganismos
puede observar con esta tcnica?
28. Qu es una preparacin coloreada? Qu
caractersticas de los microorganismos
pueden observarse con esta tcnica?
29. Explique la coloracin de Gram y los resultados
obtenidos. Por medio de un grfico represente
los cambios que se producen en el interior de la
clula bacteriana al ir adicionando cada uno de
los reactivos que se utilizan en esta tcnica.
30. Haga lo mismo de la pregunta anterior, pero
con la coloracin de Ziehl Neelsen.
31. En los procedimientos de tincin defina los
trminos: extendido o frotis, fijado y tincin
y por qu se realizan.
 Morfologa y fisiologa de las bacterias
E n el captulo anterior se trabaja el concepto
de ubicuidad de los microorganismos y se afirma
que, stos, se encuentran en cualquier lugar del
entorno humano: suelo, aguas (desde arroyos hasta
ocanos), atmsfera, entre otros lugares. Los de
terminantes ecolgicos (condiciones ambientales)
establecen las caractersticas de los microorganis
mos presentes. Esas caractersticas, se ven repre
sentadas en la variedad de especies, el nmero
poblacional, los requerimientos nutricionales,
utilizacin del oxgeno para su metabolismo, etc.
Los microorganismos poseen estructuras que les
permiten coexistir con otros tipos de microorga
nismos y tambin con organismos superiores.
En la morfologa bacteriana se encuentran
caractersticas mayores como: el tamao, la for
ma o estructura y el tipo de agrupacin. Algunas
veces, estas caractersticas se relacionan con el
gnero y en ocasiones con una especie determi
nada. Sin embargo, actualmente el tamao de una
bacteria puede medirse con mxima exactitud,
sin importar sus dimensiones microscpicas.
Segn la especie las bacterias pueden ser es
fricas, en forma de bastn o de espiral. Estas
formas pueden sufrir variaciones por diferentes
circunstancias externas (exgenas) a las bacte
rias, como aumento de la presin osmtica del
medio, escasez de humedad, entre otras.
En ciertas especies bacterianas, sus integran
tes se organizan en grupos y conforman: pares,
cadenas, racimos y filamentos. Con frecuencia
estas formas de agrupacin son caractersticas de
un grupo taxonmico o taxn, por ejemplo, de un
gnero bacteriano cuyos integrantes se agrupan
genticamente en forma de racimos.
Otras especies bacterianas poseen apndices,
que se ponen de manifiesto con tcnicas espe
ciales de tincin o por medio de la microscopia
electrnica, como los flagelos, los cuales confor
man un sistema de propulsin que le proporciona
movilidad a la clula bacteriana.
Para facilitar el estudio y la comprensin de
este captulo, se divide as:
1. Caractersticas morfolgicas mayores de
las bacterias. Se encarga de estudiar los aspectos
grandes o ms notorios de las bacterias, como
la forma, el ordenamiento y el tamao. Estas
caractersticas pueden ser observadas con los
microscopios pticos compuestos.
2. Caractersticas morfolgicas menores de las
bacterias. Esta seccin se dedica al estudio de la
estructura fina de las bacterias que comprende
la pared celular, la membrana citoplasmtica y
el citoplasma, adems de otras organelas que se
encuentran en el citoplasma.
Caractersticas morfolgicas
mayores de las bacterias
Los primeros estudios sobre morfologa bacte
riana los realizo Anthony van Leeuwenhoek y se
limitaron a la descripcin del aspecto grande,
brusco o grueso de estos microorganismos.
Con las mejoras realizadas al microscopio
ptico, y la implementacin de las tcnicas de
tincin bacteriana, se mejor notoriamente la ob
servacin de los aspectos morfolgicos externos
como el tamao, la forma y la agrupacin que son
considerados como caractersticas morfolgicas
generales de las clulas bacterianas:

Tamao
El micrmetro (pm) es la unidad de medida que
se utiliza para determinar el tamao bacteriano,
equivale a 1/1.000 mm o 1/25,00 pulgadas.
Aunque el tamao de las bacterias, por lo ge
neral, vara considerablemente de una especie
bacteriana a otra, la mayora est dentro de un
rango aproximado de 0,5 a 2,0 pm de ancho y
1 a 10 pm de largo. Hay especies bacterianas
que pueden medir mucho ms, como las formas
alargadas que pueden estar en el rango de 2 a 100
pm de longitud o ms. Actualmente se conocen
reportes de algunos microbilogos, que sugieren
que en la naturaleza existen bacterias en extremo
pequeas a las cuales se les ha dado el nombre
de nanobacterias, que al parecer tienen un papel
importante en la formacin de precipitados y bio-
pelculas (bioftlms) en ambientes muy diversos
como los tejidos humanos y las superficies mine
rales. El tamao de estas posibles bacterias est
en el orden de 0,1 pin de dimetro, por supuesto,
menor que el tamao estndar de los procariotes.
Esta propuesta todava genera mucha controver
sia y obviamente un sinnmero de opositores,
quienes niegan su existencia aduciendo que son
solo artefactos originados a partir de materiales
inertes por causa de reacciones qumicas o
geoqumicas.
Al margen de la discusin, si las nanobac
terias existen, seran las estructuras vivas ms
pequeas conicidas en la actualidad.
En teora, puede afirmarse que el tamao de
las bacterias se mantiene constante, con excep
cin del momento de la divisin. Esto se explica
porque su crecimiento difiere del concepto que
se utiliza en los seres superiores. De cualquier
manera, existirn bacterias ms grandes o ms recen formas elipsoidales o las que poseen un
pequeas por causa de factores exgenos, como
la edad del cultivo, los nutrientes disponibles,
etapa de desarrollo del cultivo, entre otros, y
por factores endgenos como los estadios del
crecimiento normal de las bacterias.
Aunque estos microorganismos son tan di
minutos, es posible medir sus dimensiones con
relativa facilidad y precisin. Para este fin el
microscopio se equipa con un dispositivo llamado
Morfologa y fisiologa de las bacterias / 23
ocular micromtrico (disco que lleva grabadas
lneas equidistantes, con distancias preestableci
das) que permiten calcular, con mucha exactitud
el tamao de las bacterias (vase figura 2.1). El
tamao, en este caso, se ve mnimamente afectado
por las tcnicas de tincin que se utilizan, las cua
les producen algn grado de deshidratacin a las
clulas bacterianas que estn en observacin.
Forma
En los estudios biolgicos la palabra morfo
loga se refiere a la forma de un determinado
organismo. La forma de las clulas bacterianas
depende de la pared celular que les proporciona
rigidez y algo de elasticidad. Individualmente
las bacterias pueden aparecer como elementos
elipsoidales, esfricos, alargados (cilindricos),
o en espiral (helicoidales). Cada una de estas
formas es propia de una especie determinada,
por esto, las bacterias se clasifican en: cocos,
bacilos y espirales.
Ordenamiento
El ordenamiento de las bacterias es un mecanis
mo por el cual ellas pueden adoptar ciertas formas
cuando estn en grupos. El ordenamiento puede
depender de un factor gentico, como ocurre con
las clulas esfricas o cocos, o bien a un patrn
caprichoso o al azar como ocurre con las clulas
rectas, cilindricas o alargadas: los bacilos.
Cocos
Los cocos son clulas bacterianas cuya forma
habitual es esfrica pero, eventualmente, apa
extremo afilado con apariencia de lanza (lan
ceoladas), tambin se encuentran algunas con
formas ligeramente ovoides, con uno de sus lados
cncavos que las asemeja a un rin o a un grano
de caf, cuando se observan aisladas o en forma
individual (vase figura 2.2).
Cuando aparecen en agrupaciones se organi
zan en formas diferentes segn la especie. Este
tipo de ordenamientos obedece a un patrn ge-
24 / Microbiologa bsica para el rea de la salud y afines
ntico, propio de cada especie. Segn este patrn
de ordenamiento los cocos se clasifican as:
1. Diplococos. En este caso los cocos se
observan en pares con un solo plano de divisin.
Ejemplo: Diplococcus pneumoniae y Neisseria
gonorrhoeae (vase figura 2.3).
2. Estreptococos. Agrupacin bacteriana que
al observarse microscpicamente, permite detec
tar una clula detrs de la otra, formando filas o
cadenas semejantes a un rosario y tambin pre
sentan un solo plano de divisin. De esta forma,
los cocos se organizan en cadenas compuestas
por 5,20,100 elementos. Ejemplo: Streptococcus
lactis, Streptococcus pyogenes y Streptococcus
mutans (vase figura 2.4).
3. Ttradas. Tambin se llaman tetracocos.
Se observan en grupos conformados, cada uno,
por cuatro unidades celulares y presentan dos

planos de divis n perpendiculares. Ejemplo:
Micrococcus tetragenus (vase figura 2.5).
4. Estafilococos. Esta agrupacin bacteriana
se presenta en forma de masas irregulares que
recuerdan a los racimos de uvas y poseen los tres
planos del espacio. Ejemplo: Staphylococcus
aureus, Staphylococcus saccharolyticus y Sta
phylococcus epidermidis (vase figura 2.6).
5. Sarcinas. Esta agrupacin bacteriana se
ordena en forma bastante regular, donde apare
cen ocho o ms unidades celulares, organizadas
en form a de cubos. Los cocos con esta forma
de agrupacin, muestran divisiones sucesivas
en los tres p iaro s del espacio en forma per
Morfologa y fisiologa de las bacterias / 25
pendicular. Ejemplo: Sarcina ventriculi (vase
figura 2.7).
Raramente todas las clulas bacterianas, de
una especie dada, estn ordenadas exactamente
segn el mismo patrn. El ordenamiento predo
minante es la caracterstica ms importante.
Bacilos
Los bacilos son formas bacterianas alargadas
que pueden ser cortas, rectas o cilindricas y a
veces son tan cortas y difciles de identificar
que se denominan cocobacilos. Si se observa
detenidamente, se encuentra que los extremos
26 / Microbiologa bsica para el rea de la salud y afines
de los bacilos pueden variar y esta caracterstica
contribuye a su identificacin. Existen bacilos
cuyos extremos aparecen en form a de ngulo
recto, afilados, redondeados y en algunas espe
cies toman forma de mazo, semejantes al palo de
bastos de la baraja espaola, entre otras formas
(vase figura 2.8).
La agrupacin de los bacilos es diferente a la
de los cocos, pues al contrario de stos, aquellos
casi nunca se agrupan. Algunas especies, sin em
bargo, muestran tendencia a un ordenamiento de
sus clulas, que no obedece a un patrn gentico.
sino que depende de las etapas de desarrollo o
de las condiciones del cultivo. Por eso algunos
autores hablan de un ordenamiento o agrupacin
al azar (vase figura 2.9).
En algunas observaciones m icroscpicas
pueden aparecer conformando parejas (algunos
autores los referencian como diplobacilos), en
cadenas (tambin son referenciados por algu
nos autores como estreptobacilos) o en grupos
irregulares que forman verdaderas empalizadas,
ovillos o rosetas y masas entrecruzadas de clu
las bacilares (vase figura 2.10).

Los taxonomistas han utilizado las formas
individuales y algunas agrupaciones para darles
un nombre determinado, por ejemplo: algunos
bacilos cuyos extremos terminan en mazo se
les llama corineformes porque as se presentan
ciertos bacilos pertenecientes al gnero Coryne-
bacterium; si se agrupan en empalizadas se les
denomina como difteromorfos o difteroid.es, por
que as se agrupan algunos bacilos relacionados
con el agente etiolgico de la difteria.
Espirales o helicoidales
Clulas bacterianas que no presentan ordenamien
to especfico porque generalmente se encuentran
Morfologa y fisiologa de las bacterias / 27
aisladas con una o varias curvaturas. Segn la
especie, los espirales presentan una longitud, am
plitud de la espira y rigidez de la pared diferentes.
Entre estas formas bacterianas se encuentran:
1) vibrios; 2) espirilos; 3) espiroquetas (vase
figura 2.11).
1. Vibrios o vibriones. Estas bacterias tienen
una sola curvatura y toman la forma de una
especie de espiral incompleta, muy similar al
smbolo de la coma gramatical. Ejemplo: Vibrio
cholerae (vase figura 2.12).
2. Espirilos. Son bacilos incurvados helicoi
dalmente, mviles, generalmente, por penachos
de flagelos polares. Ejemplo: Spirillum volutans.
Algunos espirilos son muy grandes y es probable
28 / Microbiologa bsica para el rea de la salud y afines
que el padre de la microbiologa, Antony van
Leewenhoek, los hubiera descrito en la poca
de 1670 y posteriormente Eherenberg, en 1832,
cre oficialmente el gnero Spirillum (vase
figura 2.13).
3. Espiroquetas. Son formas alargadas que
presentan gran cantidad de curvaturas muy prxi
mas entre ellas, semejando un tirabuzn. Ejemplo:
Treponema pallidum (vase figura 2.14).
Caractersticas morfolgicas
menores de las bacterias
La microbiologa aunque haba avanzado como
ciencia todava no era capaz de dilucidar muchas
incgnitas, que el nfimo tamao de los micro
organismos no perm ita desvelar por causa de
la falta de herramientas microbiolgicas propias
para este fin. Solo a comienzos de la dcada de

1940 se pudo disponer del microscopio electr
nico como instrumento de laboratorio para los
microbilogos. El poder de resolucin alcanza
do con este microscopio resulta increble y si se
ana a nuevos mtodos para la preparacin de las
muestras, han posibilitado la identificacin de
las partes estructurales de una clula individual.
Se desarrollaron tcnicas mediante las cuales
una bacteria puede cortarse en secciones muy
finas y examinarse por microscopia electrnica.
Estos estudios revelaron las partes estructu
rales de las bacterias, lo que hoy se conoce
como la morfologa menor o estructura fina, en
contraste con su morfologa mayor o gruesa.
Morfologa y fisiologa de las bacterias / 29
Paralelamente a los avances en microscopia
electrnica se han desarrollando tcnicas para
desintegrar clulas bacterianas, aislar los com
ponentes celulares y analizar su composicin
qumica. De este modo, hemos sido testigos de
una era en la que se nos han revelado las partes
estructurales de la clula bacteriana. Se conoce
con exactitud la composicin qumica de estas
partes y se han adquirido los conocimientos
relativos a las funciones llevadas a cabo por las
organelas bacterianas. Gracias a estos avances
tecnolgicos, emergieron nuevos campos de
especializacin, como la citologa bioqumica
que relaciona forma y funcin.
30 / Microbiologa bsica para el rea de la salud y afines
Para facilitar y organizar el estudio de las
estructuras bacterianas se dividen en: estructuras
obligadas y estructuras facultativas. De estas
estructuras, algunas han sido catalogadas como
envolturas y se localizan externas al citoplasma
celular bacteriano y otras internas o contenidas
dentro del mismo (vase figura 2.15).
Estructuras obligadas
Las estructuras obligadas de las bacterias son:
la pared celular, la membrana externa, la mem
brana cituplasmtica, unas invaginaciones que
surgen de la membrana citoplasmtica se llaman
mesosomas (aunque se presentan especialmente

en las bacterias Gram positivas, por ser prolon
gaciones de la membrana hacia el interior del
citoplasma, se van a tratar en esta divisin), el
periplcisma, el citoplasma, los ribosomas y el
nucleoide.
Pared celular
La pared celular, tambin se conoce con el
nombre de pared bacteriana; es una estructura
fundamental para la bacteria. Se ubica inmediata
Morfologa y fisiologa de las bacterias / 31
mente antes de la membrana citoplasmtica y se
constituye en su elemento obligado ms externo.
Es una cubierta rgida que le da la forma peculiar
a la bacteria y la protege de las injurias exter
nas, principalmente de los posibles cambios de
presin osmtica que puedan surgir en el medio
donde se encuentra.
La pared puede visualizarse mediante una tc
nica de tincin bacteriana de tipo diferencial, des
cubierta por el cientfico dans Christian Gram. la
cual se conoce popularmente como coloracin de
32 / Microbiologa bsica para el rea de la salud y afines

Gram. Esta coloracin se basa en la capacidad de

las bacterias de retener el colorante primario (cris
tal violeta), aun despus de haber sido decoloradas
con alcohol acetona. Esta situacin se presenta por
causa de las diferencias estructurales de las paredes
celulares de las bacterias. Como esta coloracin se
clasifica como compleja y diferencial, el resultado
de la tcnica clasifica a las bacterias en bacterias
Gram positivas (color violeta) y bacterias Gram
negativas (color rojo claro o rosado).
Composicin. La microscopia electrnica
de transmisin revela que la pared bacteriana
la componen protenas, polisacridos y lpidos,
estructurados segn se trate de bacterias Gram
positivas, Gram negativas o las conocidas como
cido-alcohol resistentes (BAAR), que pueden
ser visualizadas microscpicamente por medio de
otra coloracin compleja y diferencial llamada co
loracin de Ziehl Neelsen, cuyo resultado clasifica
las bacterias como BAAR positivas (color rojo)
y BAAR negativas (color azul). Sin embargo,
todas poseen un componente comn que hace las
veces de esqueleto de la pared: el peptidoglucano.

Este compuesto se menciona en algunos textos
con diferentes nombres, entre ellos: murena,
glucopptido, glicopptido, m ucopptido, muco-
com plejo de Park o peptidoglicano.
Los peptidoglucanos son grandes polmeros,
es decir, molculas grandes formadas por unida
des que se repiten un sinnmero de veces. Sus
componentes son dos aminoazcares ubicados
en forma alterna, unidos por enlaces glucos-
dicos p-1-4 y aminocidos de la serie D y L.
Estos aminoazcares son: N-acetil glucosamina
(NAG) y N-acetil murmico (NAM). Cada ca
dena permanece unida a la adyacente mediante
un pequeo grupo de aminocidos que se unen
entre s para formar un tetrapptido, conocido
como tetrapptido de glucano (por lo general
cuatro o cinco aminocidos de la serie mencio
Morfologa y fisiologa de las bacterias / 33
nada), que se unen por su aminocido esencial,
generalmente la L-alanina, al grupo carboxilo del
cido N-acetil murmico y luego se encuentra un
enlace interpeptdico mediado por una pentagli-
cina (cinco molculas de glicina) (vanse figuras
2.16 y 2.17).
En las figuras 2.18 y 2.19 se observan esque
mas que representan la unin entre las cadenas
peptdicas del peptidoglucano de la pared de las
bacterias Gram positivas y Gram negativas.
P ared ce lu la r de las b a cteria s Gram p o
sitivas. En estos microorganismos la pared se
identifica fcilmente debido a la gran capa de
peptidoglucano o murena que poseen: se reporta
un grosor de 10 a 20 nm, donde la secuencia de
aminocidos unidos al NAM se da en este orden:
L-alanina (L-Ala); D-glutmicc (D-Gu); L-
34 / Microbiologa bsica para el rea de la salud y afines
(3-1-4 (3-1-4 (3-1-4
------- AMA ---------- AGA ---------- AMA ----------
Tetrapptido
(Glicna)5
(3-1-4 P-1 (3-1-4
AMA AGA
Tetrapptido
Figura 2.16 Composicin qumica de la pared celular de las bacterias
lisina (L-Lys); D-alanina (D-Ala); el enlace
interpeptdico es indirecto y est mediado por
una pentaglicina (Gly)s. Solo en estas bacterias
se encuentran los cidos teicoicos, los cuales son
polmeros de ribitol-fosfato y glicerol-fosfato so
lubles en agua, que se integran en cadenas de ms
de treinta unidades. Anclados a la membrana, por
un glucolpido, tambin se encuentran los cidos
lipoteicoicos (ALT). Estos y los cidos teicoicos
son los responsables de la carga negativa externa
que presentan las bacterias Gram positivas. A
pesar de no conocerse su localizacin exacta,
se cree que se unen covalentemente al peptido-
glucano y parecen intervenir en la integridad de
la pared, porque estn cargados negativamente
y pueden unirse a iones como el Mg++. Otros
compuestos adicionales a la pared son polisa-
cridos y protenas que pueden sobrepasar el
peptidoglucano (vase figura 2.20).
Pared celular de las bacterias Gram nega
tivas. La ubicacin de la pared en este tipo de
bacterias, se describe desde el exterior hacia el
interior de la bacteria, de la siguiente forma: la mem
brana externa, el espacioperiplsmico y la membra
na citoplasmtica. En el espacio periplsmico
se encuentra inmerso el peptidoglucano o pared
celular.
(3-1-4 (3-
AGA -
Tetrapptido
(Glicina);
(3-1-4
AMA AGA
Tetrapptido
En estos microorganismos la composicin
y estructuracin del peptidoglucano es bastante
similar a la de las bacterias Gram positivas, sin
embargo, su espesor es menor y predominan las
protenas, fosfolpidos y lipopolisacridos que
se unen formando otras capas. En este caso, los
enlaces interpeptdicos son directos, mediados,
tambin, por una pentaglicina y el aminocido
L-lisina es sustituido por el cido weso-diami-
nopimlico (w-DAP), como diaminocido, en la
posicin 3. Los lipopolisacridos desempean un
papel importante, actuando como barrera frente
a determinados antibiticos, como la penicilina,
que por esta razn es poco eficaz frente a las
bacterias Gram negativas.
Pared celular de las bacterias cido-alcohol
resistentes. Estas bacterias poseen la pared muy
semejante a la de las Gram positivas porque
su peptidoglucano es tpico, aunque realmente
el cido N-acetil murmico es en realidad N-
glicosilmurmico. La diferencia estriba en que en
estos microorganismos se describe la presencia
de cidos miclicos, no descritos en ninguna otra
especie. Estos cidos miclicos son los que Ies
confieren la capacidad de retener el colorante b
sico fuscina y resistir la decoloracin con alcohol
clorhdrico fuerte que se usa en la coloracin de
36 / Microbiologa bsica para el rea de la salud y afines

Zhiehl Neelsen. Esta propiedad la tienen las bac
terias pertenecientes al gnero Mycobacterium,
ejemplo: Mycobacterium tuberculosis.
En general, en la pared celular, la molcula
caracterstica de las bacterias, compuesta por
peptidoglucano, puede afectarse por la accin
de algunos agentes como la enzima lisozima o
muramidasa. Esta enzima, rompe los enlaces glu-
cosdicos P-l-4 localizados entre las 2 unidades
de aminoazcares (cido N-acetilglucosamina y
cido N-acetilmurmico) y disuelve la molcula
de peptidoglucano, por consiguiente, el agua
entra en la clula, la hincha y puede causarle
lisis o estallido. La enzima lisozima se encuentra
en algunas secreciones animales como la saliva,
lgrimas, sudor y otras secreciones corporales,
constituyndose en una barrera defensiva contra
las infecciones causadas por bacterias. En la
tabla 2.1, se establece un paralelo entre las bacte
rias Gram positivas y Gram negativas y se obser
van algunas de las caractersticas ms relevantes
de la pared de estos dos tipos de bacterias.
La pared bacteriana es susceptible de sufrir
modificaciones cuando su principal componente
(el peptidoglucano) se desestabiliza por accin
de agentes externos o por causa de cierto tipo de
Morfologa y fisiologa de las bacterias / 37
mutaciones genticas. Ejemplos de estas modi
ficaciones de la pared bacteriana son:
1. Formas L. Son estructuras que an con
servan restos de protenas parietales, en cantidad
suficiente para evitar el estallido de la clula
bacteriana en medios isotnicos, adems, tienen
la capacidad de sintetizar compuestos que refuer
cen la membrana citoplasmtica. Algunas formas
L no pierden la capacidad de dividirse y, si los
medios de cultivo son los adecuados, pueden
tener la posibilidad de formar colonias.
Estas formas provienen tanto de bacterias
Gram negativas como de bacterias Gram posi
tivas y pueden obtenerse en el mbito del labo
ratorio (in vivo), pero pueden surgir durante el
desarrollo bacteriano enhospedadores naturales,
por causa de mutaciones o por la accin de al
gunos antibiticos.
Dependiendo de la cantidad de contenido
parietal podrn regenerar totalmente la pared
y toman el nombre deformas L inestables y si
por el contrario no pueden hacerlo se denominan
formas L estables.
Las formas L son insensibles a los antibiti
cos que interfieren la sntesis del peptidoglucano
o murena.
38 / Microbiologa bsica para ei rea de la salud y afines

Tabla 2.1 Algunas caractersticas de las bacterias Gram positivas y Gram negativas

Caracterstica Gram positivas Gram negativas

Estructura de la pared Gruesa (15-80 nm) Delgada (10-15 nm) triple capa - mul-
celular Una sola capa monocapa ticapa

Composicin de la pared Baja en lpidos (1-4%) Alto en lpidos

celular Peptidoglucano presente formando
monocapa; es un componente impor
tante que supone 50% del peso seco
de algunas clulas bacterianas. Pre
sencia de cidos teicoicos
(11-22%)
Peptidoglucano presente en una
capa interna rgida; poca cantidad.
Representa 10% del peso seco.
No hay cidos teicoicos

Susceptibilidad a la Ms susceptibles Menos susceptibles

penicilina

El crecimiento es frenado El crecimiento se retrasa notoriamente El crecimiento se retarda menos

por colorantes bsicos,
por ejemplo el cristal
violeta

Requerimientos nutricio- Relativamente complejos en muchas Relativamente sencillos

nales especies

Resistencia a la rotura Ms resistentes Menos resistentes

mecnica

La pared bacteriana, al sufrir modificaciones, facilitan el acceso de ciertos compuestos antimi

puede transformar la bacteria en un protoplasto crobianos (tipo penicilina) al peptidoglucano.
o en un esfemplasto que son formas esfricas sin 3. Esferoplastos. Estas estructuras, como las
capacidad de reproduccin y se obtienen artifi anteriores, son clulas viables bacterianas incapa
cialmente al tratar las bacterias con compuestos ces de dividirse, pero se diferencian de los proto
enzimticos como la lisozima o antibiticos plastos, porque han perdido parcialmente la pared
como la penicilina, que desorganizan el pepti y en determinadas condiciones, pueden regenerar
doglucano o murena. la completamente. Se obtienen, por lo general, a
2. Protoplastos. Son unas estructuras viablespartir de las bacterias Gram negativas.
derivadas de una clula vegetativa. Se caracterizan Para mantener viables los protoplastos y
por la prdida total de la pared celular, causada por los esferoplastos y evitar su estallido, deben
cambios fsicos como la modificacin de las condi mantenerse en medios isotnicos respecto a su
ciones ambientales o qumicos como la accin de citoplasma.
la lisozima, algunos antibiticos, entre otros.
Desde el momento en que pierden la pared Micoplasmas
toman una forma globosa, esfrica. Son inm
viles, no se reproducen, ni tienen capacidad de Existen en la naturaleza algunas bacterias pat
formar nuevamente la pared celular perdida y no genas para la especie humana y los animales que
pueden ser atacados por bacterifagos (virus que carecen por naturaleza de pared bacteriana.
infectan bacterias), porque este tipo de virus se Estas bacterias pertenecen al gnero Myco-
adhiere a un receptor especfico que est ubicado plasma, y se consideran bacterias verdaderas por
en la pared. que su capacidad reproductiva permanece intacta
Por lo general, se originan de bacterias Gram a pesar de la ausencia de pared. Los micoplasmas
positivas que, al no poseer membrana externa, son microorganismos incapaces de sintetizai ia

pared y requieren colesterol y esterles para lo
grar un crecimiento ptimo. Dada su fragilidad,
slo pueden cultivarse en medios hipertnicos
enriquecidos con protenas y en atmsferas anae
robias o enriquecidas con 5-10% de CO,.
Debido a la ausencia de pared, los micoplas-
mas, adquieren gran pleomorfismo (capacidad
para adquirir varias formas), y desarrollan una
membrana citoplasmtica ms resistente y rica
en esterles que la de las bacterias normales.
Membrana citoplasmtica
Ubicada inmediatamente debajo de la pared
celular, existe una fina membrana que se llama
membrana citoplasmtica, tambin se conoce
como membrana protoplasmtica o membrana
celular bacteriana, o simplemente membrana
plasmtica. Los clculos acerca de su espesor,
basados en micrografas electrnicas de cortes
finos, son del orden de 7,5 nm. La membrana
es una estructura obligada de las bacterias,
constante en todas las especies sin excepcin y
constituye de 20 a 30% del peso de la bacteria.
En las bacterias Gram negativas, es la membrana
ms interna, limitado con el citoplasma y slo
separada de la membrana externa por un espacio
llamado espacio periplsmico. En las bacterias
Gram positivas se sita por debajo de la pared
bacteriana, delimitada hacia fuera por un espacio
tan pequeo, que es casi inexistente.
Composicin. La membrana citoplasmtica
est compuesta por fosfolpidos en un 40% y
por protenas el 60% restante. La estructura de
la membrana propuesta anteriormente, mostraba
una membrana con una doble capa de lpidos con
los polos hidrfilos hacia fuera y los hidrfobos
hacia dentro, envueltos por una doble capa pro
teica. Actualmente, se trabaja con el modelo ms
reciente de S. J. Singer y G. L. Nicolson en 1972,
que propone una doble capa de fosfolpidos, los
cuales, engloban las protenas, por lo tanto, la
membrana de conformidad con su modelo de
mosaico fluido presenta una estricta organi
zacin y elevada movilidad.
Existen, tambin, glucolpidos, aunque en pe
queas porciones, especialmente en las bacterias
Morfologa y fisiologa de las bacterias / 39
Gram positivas. Los lpidos comprenden una
variedad de sustancias insolubles en solventes
polares como el agua, sin embargo, pueden
disolverse en solventes no polares como el ter,
cloroformo y otros disolventes lipdicos. Los
lpidos, que en su mayora son fosfolpidos,
tienen en su estructura cadenas complejas de
hidrocarbonos que no son polares, por eso, se
les da el nombre de hidrofbicos o hidrfobos,
o sea, que repelen el agua.
En la membrana citoplasmtica existen
protenas producidas por los ribosomas, que se
encuentran inmersas en mltiples sitios de la
bicapa, y forman protenas globulares de dife
rentes tamaos, las cuales tienen la propiedad
de migrar libremente como si fueran tmpanos
navegando en un mar constituido por lpidos
(vase figura 2.21).
La membrana citoplasmtica es indispen
sable porque controla el paso de sustancias
qumicas en solucin: del exterior hacia el inte
rior y del interior hacia el exterior de la clula
bacteriana, es decir, que acta como una barrera
de permeabilidad. Es un logro notable que una
clula microscpica que flota en un ambiente
qumico extremadamente complejo y cambiante
sea capaz de tomar y retener cantidades adecua
das de nutrientes, descargar el exceso de ellos y,
adems, excretar los productos de desecho.
En la membrana citoplasmtica se anclan
ciertas estructuras como los pili, las fimbrias y
los flagelos. Algunos antibiticos como las po-
limixinas pueden producir una desorganizacin
de la membrana citoplasmtica, causndole un
dao irreparable.
La membrana citoplasmtica proporciona la
maquinaria bioqumica para transportar iones
inorgnicos, azcares, aminocidos, electrones y
otros metabolitos a travs de ella. Estas sustancias
en solucin o solutos atraviesan la membrana por
efecto de difusin pasiva o por transporte activo:
- Difusin pasiva (osmosis). La difusin pa
siva es inespecfica; no distingue entre los solutos
que atraviesan la membrana. En este proceso las
sustancias qumicas pasan a travs de la mem
brana desde un rea de mayor concentracin a
un rea de menor concentracin. Este fenmeno
40 / Microbiologa bsica para el rea de a salud y afines
se realiza para igualar la concentracir de los
solutos a ambos lados de la membrana.
- Transporte activo. Este fenmeno, a dife
rencia de la difusin pasiva, es altamente espec
fico, es decir, que los solutos pasan al interior de
la clula bacteriana, slo despus de haber sido
seleccionados. Adems, permite que se alcance
una concentracin de solutos ms alta dentro
de la clula, que la existente fuera de ella. El
transporte activo reviste extremada importancia
para las clulas bacterianas que se encuentran en
ambientes como el ocano, en donde los nutrien
tes estn presentes en pequeas cantidades, por
tanto, las clulas deben ser capaces de concentrar
nutrientes para desarrollarse.
El proceso de transporte activo implica un
intrincado mecanismo dentro de la membrana
cito p lasm tic a . C om pu esto s deno m in ad o s
transportadores de membrana (carriers), junto
con reacciones bioqumicas que proporcionan
energa, realizan esta clase de transporte.
L a m em brana c ito p la sm tic a p a rtic ip a
en procesos biodegradativos, biosintticos y
bioenergticos que son vitales para las clulas
bacterianas:
0 Procesos biodegradativos o catablicos.
Su participacin en este tipo de procesos es
fundam ental porque en ella se encuentran
enzimas que cuando son excretadas al exterior
(exoenzimas), escinden o dividen compuestos
complejos en otros ms simples y fcilmente
asimilables.
Procesos biosintticos o anablicos. En la
membrana se encuentran ciertos sistemas que
intervienen en la sntesis de varias estructuras
como la pared celular bacteriana, el glicocliz,
entre otros y de otra serie de compuestos.
Procesos bioenergticos. Estos procesos se
relacionan directamente con el transporte de elec
trones y con los eventos de la fosforilacin oxida-
tiva que llevan a la gnesis de adenosn trifosfato
(ATP), a partir de adenosn difosfato (ADP).

Bacterias Gram positivas
La membrana citoplasmtica de estas bacterias,
aparte de ser una estructura obligada, cumple con
todas las caractersticas descritas anteriormente y
se ubica inmediatamente por debajo de la pared
bacteriana. Algunos autores mencionan que entre
las dos estructuras existe un pequesimo espacio,
que en realidad la mayora de los investigadores lo
califican como inexistente (vase figura 2.22).
Bacterias Gram negativas
En las bacterias Gram negativas aparece una
estructura caracterstica de este tipo de bacterias
y no se reporta en las Gram positivas, a la que los
autores se refieren como membrana externa.
M em brana externa
Est constituida por lipopolisacridos, fosfolpi-
dos y protenas. Su estructura sigue el modelo
de la membrana convencional y est conformada
por dos capas, una externa y una interna, asocia
das con protenas.
1. La lmina externa. Est constituida, casi
en su totalidad, por un lipopolisacrido (LPS)
Morfologa y fisiologa de las bacterias / 41
muy im portante para estas bacterias y en su
constitucin se describen tres partes:
- Porcin superficial o polisacricla. Esta
porcin es antignica (capaz de desencadenar
una respuesta del sistema inmunolgico) y es
pecfica para cada especie, tambin se conoce
como antgeno O, antgeno especfico O, cmtfge
no somtico o polisacrido O, y es el principal
antgeno de las bacterias Gram negativas. Las
bacterias que pierden el antgeno O se encuen
tran en fase rugosa o R y las que lo tienen estn
en fase lisa o S. Estos conceptos se tratan con
mayor detenimiento en el captulo sobre gentica
bacteriana.
- Porcin intermedia. La forman oligosacri-
dos y cido ketodesoxioctnico (KDO), tambin
se conoce como core. La porcin intermedia o
core se comporta como un antgeno de grupo
porque es igual o muy semejante en muchas
bacterias. En algunas bacterias mutantes esta
porcin puede estar ausente.
- Porcin interna. Esta porcin es lipdica y se
llama lpidoA, su caracterstica principal es la alta
toxicidad y constituye la endotoxina responsable
del inicio del choque sptico (se produce cuando las
bacterias, generalmente Gram negativas, alcanzan
el torrente sanguneo y liberan en l sus endotoxi-
42 / Microbiologa bsica para el rea de la salud y afines

as). La toxicidad de la endotoxina puede variar 3. Protenas asociadas. Como sucede con
en intensidad entre diferentes especies, pero los otras membranas biolgicas, la membrana exter
efectos producidos son idnticos. Esta porcin es na tambin contiene protenas aunque su variedad
menos antignica que la porcin polisacrida. es menor. Se encuentran protenas transmembra-
2. La lmina interna. La membrana externa nosas, que se llaman porinas, protenas integra
es un fosfolpido que en algunas partes se inva- les, protenas superficiales y lipoprotenas
gina y se contina con la capa fosfolipdica de la - Porinas. Son protenas que actan como cana
membrana citoplasmtica. Estas invaginaciones les para la entrada y salida de sustancias hidroficas
se conocen como uniones de Bayer. de bajo peso molecular. Pueden existir diversos
El lipopolisacrido acta como una membra tipos de porinas en diferentes bacterias Gram ne
na impermeable, porque por la parte glusdica gativas e inclusive dentro de la misma especie. De
impide el paso de sustancias hidrfobas, por esta forma, estas protenas se conocen como:
ejemplo, algunos antibiticos, y por la parte Porinas especficas: contienen un sitio espe
lipdica impide el paso de sustancias hidrfilas cfico para la unin de una o ms sustancias.
como azcares y aminocidos, que son nutrientes Porinas inespecficas: sus canales estn
bsicos para las bacterias. Este inconveniente se llenos de agua y permiten el paso de cualquier
soluciona por medio de fenmenos selectivos de tipo de pequeas sustancias.
transporte activo, gracias a la presencia de poros - Protenas integrales. Su funcin princi
ubicados en la membrana externa que permiten pal es mantener la integridad de la membrana
el paso de pequeas sustancias hidrfilas como externa.
azcares, aminocidos y algunos iones con un -Protenas superficiales. Actan como recep
peso molecular que no sobrepase los 700 d. tores virales, especficamente de bacterifagos.
 Morfologa y fisiologa de las bacterias / 43

- Lipoprotenas. Su principal componentecitoplasmtica, las cuales se ubican en el interior del

es la murena, pero estas lipoprotenas se ubican citoplasma. Se observan en forma de remolinos u
en la porcin interior, tambin se conocen como ovillos que se colocan en una posicin ms o menos
protenas de Braum o lipoprotenas de murena. centrada y se conocen con el nombre de mesosomas.
Algunas funciones de la membrana externa son: En las bacterias Gram negativas estas estructuras,
1) patogenicidad causada por el lpido A; 2) exclu aparte de ser inconstantes, son ms pequeas.
sin de molculas hidrfobas e hidrfilas grandes, y Composicin. El componente estructural de
3) permeabilidad selectiva por la va de las porinas, los mesosomas es idntico al de la membrana
mediante transporte activo (vase figura 2.23). citoplasmtica y de acuerdo con la funcin que
tienen se dividen en septales y laterales:
Periplasma Mesosomas septales o centrales. Arrastran
la membrana citoplasmtica hacia el centro del
El periplasma se conoce con varios nombres, citoplasma y su funcin es inducir la formacin
entre ellos: gel periplsmico y espacio peri del tabique de separacin cuando se produce la
plsmico (recibe este nombre por separar las divisin celular bacteriana. De manera similar
dos membranas), aqu se encuentran: una capa participan en el desdoblamiento y separacin del
de peptidoglucano o murena; una solucin de cromosoma bacteriano durante la divisin celu
elementos con apariencia de gel, que contiene lar, puesto que el ADN bacteriano permanece fijo
enzimas hidrolticas, como: lasfosfatasas cidas al tabique inducido por el mesosoma.
y alcalinas, que se encargan de la degradacin Mesosomas laterales. Estas estructuras, al
inicial de algunos nutrientes, nucleasas, protea- invaginarse, aumentan la longitud de la mem
sas, lipasas, enzimas degradantes de carbohidra brana citoplasmtica y algunos autores afirman
tos y betalactamasas, oligosacridos aninicos y que tienen funciones excretoras, principalmente,
protenas para el transporte activo de azcares y porque en ellos se sintetizan exoenzimas del tipo
aminocidos, una de esas protenas es la protena P-lactamasas que son exportadas hacia el exterior
de Braun que por medio de enlaces covalentes de la superficie celular. Algunos autores afirman
ancla el peptidoglucano a la membrana externa, que, precisamente, por causa de esta riqueza
su aspecto y contenido varan segn el tipo de enzimtica, desempean un papel muy parecido
bacteria y el estado metablico en que se encuen al de las mitocondrias de las clulas superiores,
tre. El espacio periplsmico est delimitado por desarrollndose en ellos la funcin respiratoria
la superficie externa de la membrana citoplasm por medio de enzimas respiratorias. No obstante,
tica (membrana interna) y la superficie interna otros autores sugieren que los mesosomas latera
de la membrana externa. Las dos membranas les son simples artefactos sin funcin especfica
son hidrfilas. alguna, pero lo cierto es que se observan clara
El periplasma interviene en el transporte y mente con ayuda de la microscopia electrnica
procesamiento de molculas que entran o salen y con una configuracin bien definida.
de la clula bacteriana. Tiene una consistencia
gelatinosa, probablemente por la gran cantidad Citoplasma
de protenas periplasmticas. El periplasma no
existe en las bacterias Gram positivas. El citoplasma lo constituye un sistema coloidal o
hidrogel, compuesto por un 85 % de agua y el 15%
Mesosomas restante por minerales, estructuras y enzimas.
Comprende todo lo que se ubica en el interior de
Con cierta frecuencia en preparaciones de bacte la bacteria, exceptuando el ADN y los plsmidos,
rias Gram positivas, observadas al microscopio cuando estos ltimos existan. El citoplasma lo
electrnico, se detectan unas invaginaciones mem delimita la membrana citoplasmtica.
branosas que hacen parte de la misma membrana Composicin. El contenido lquido contiene
44 / Microbiologa bsica para el rea de la salud y afines
las organelas bacterianas y recibe el nombre de
citosol. En el citoplasma se encuentran 3 reas:
1) rea citoplasmtica de aspecto granular y rica
en ARN; 2) rea cromatnica o rea nuclear, rica en
ADN, y 3) rea o porcin fluida que contiene
nutrientes disueltos y materia particulada.
- Area citoplasmtica. Es un rea densa de
aspecto granular, porque se encuentran, densa
mente empaquetadas, partculas de protena y
ARN, llamadas ribosomas, que son el sitio de
la biosntesis de las protenas. Los ribosomas se
encuentran en todas las clulas, eucariticas y
procariticas.
- Area nuclear. Las clulas bacterianas a
diferencia de las clulas eucariticas, carecen de:
cromosomas lineales, aparato mittico para la di
visin celular, nuclolo y membrana nuclear. El
material nuclear o ADN, en una clula bacteriana
ocupa una posicin cerca del centro de la clula y
est unida al sistema mesosoma-membrana cito
plasmtica. Este material es el aparato gentico
total o genoma de la bacteria. La zona tambin
se conoce como rea cromatnica.
- Porcin fluida. Contiene estructuras forma
das por nutrientes disueltos y materia particulada,
llamados cuerpos de inclusin o inclusiones cito-
plasmticas, y son un conjunto de elementos sin
estructura uniforme que sirven como mecanismo
de regulacin o de almacenaje. Contiene, adems
de ribosomas (aunque en menor cantidad que el
rea citoplasmtica), mesosomas, nucleoide y
no posee mitocondrias, cloroplastos, aparato de
Golgi, lisosomas ni retculo endoplsmico.
Ribosomas
Son estructuras extraordinariamente numerosas,
hasta el punto que en la divisin bacteriana
pueden observarse ms de 10.000. Son grnulos
densos, homogneos, redondeados, pero ligera
mente aplanados, que constituyen del 25 al 30%
del peso de la bacteria y se localizan de manera
dispersa por el citoplasma.
Los ribosomas son el lugar donde se lleva a
cabo la sntesis de protenas. Cada ribosoma lo
forman dos subunidades una de 30 S y la otra de
50 S y as constituyen un ribosoma de 70 S. Estos
nmeros 30, 50 y 70S, se refieren a unidades de
sedimentacin o Svedberg (S), es decir, unidades
de los coeficientes de sedimentacin o de las sub
unidades ribosmicas o de los ribosomas intactos,
cuando se someten a la accin de la fuerza centr
fuga en un equipo de ultracentrifugacin.
Suelen presentarse aislados o agrupados en tres
o cuatro unidades o elementos unidos por un fila
mento de ARNm. Cuando se encuentran agrupados
toman el nombre de polisomas o polirribosomas.
Composicin. Sus componentes principales
son protenas y ARN. ARN es el contenido primor
dial del ARN ribosmico (ARNr). Las principales
funciones de los ribosomas son: intervenir en la
sntesis proteica y verificar la traduccin metab
lica del cdigo gentico portado por el ARNm y
en ellos convergen, por lo tanto, el ARNr, l ARNm
ms el ARNt que aporta los aminocidos.
Nucleoide
Por mucho tiempo se tuvo como el nombre
ms comn para designar esta estructura el de
equivalente nuclear, pero por no satisfacer las
necesidades de su definicin se ha reemplazado
por un trmino, al parecer, ms exacto: nucleoi
de. Sin embargo, la controversia contina y es
frecuente leer artculos en los cuales se habla de
ADN bacteriano ubicado en una regin citoplas
mtica llamada rea nuclear.
En esta obra, y mientras la discusin contine
como hasta hoy, se adopta el trmino nucleoide
para mencionar el ADN bacteriano. El material
nuclear se encuentra como una larga molcula de
dos cadenas que forman el cromosoma bacteriano.
El nucleoide carece de membrana nuclear que lo
delimite y se relaciona con la membrana citoplas
mtica por medio del mesosoma septal, al cual pa
rece estar anclado. Es el responsable de mantener
y transmitir la informacin gentica contenida en
los genes, direccin de las actividades biolgicas
y herencia de la clula bacteriana.
Las bacterias son haploides (nmero n de
cromosomas) y su nico cromosoma es circular,
pero es lineal la transmisin gentica. A pesar de
no existir mitosis como tal, cada clula hija recibe
su propio patrimonio de informacin gentica.

La situacin, forma y tamao del nucleoide
varan extraordinariamente segn la especie y
sobre todo segn la fase de desarrollo en que se
encuentre la bacteria. En los cocos tiende a dis
ponerse como una masa redondeada central. En
los bacilos se sita en forma alargada y paralela
al eje mayor de la bacteria.
Composicin. Aunque su disposicin vara,
en todos los casos, est constituido por dos cade
nas complementarias entre s y toma una forma
tridimensional de doble hlice, en la cual apare
cen enlaces formados por puentes de hidrgeno
entre las bases nitrogenadas, as: adenina (A)
con timina (T) y citosina (C) con guanina (G).
La citosina se une a la guanina por medio de
un triple enlace de hidrgeno y la adenina con
la timina por un doble enlace de hidrgeno. El
modelo es el clsico de Watson y Crick.
Es importante recordar que en la composicin
de los cidos nucleicos existen: 1) bases nitrogena
das pricas (adenina y guanina); 2) bases nitroge
nadas pirimdicas (timina y citosina en el ADN) y
uracilo (U) que reemplaza a la timina, en el ARN,
y 3) los azcares son una pentosa (desoxirribosa)
para el ADN y una ribosa para el ARN.
La unin de una base nitrogenada con un
azcar constituye un nuclesido y la unin de
una base nitrogenada con un azcar y un grupo
fosfato forman un nucletido.
El nucleoide tambin se conoce como:
cuerpo de cromatina, equivalente nuclear, nu-
cleoplasma, cromosoma bacteriano, genoma,
ADN bacteriano y ADN cromosmico.
Estructuras facultativas
Las estructuras facultativas de las bacterias son:
cpsula, limo, glicocliz, grnulos de almacena
miento, flagelos, fimbrias, pili y esporo.
Cpsula
Algunas bacterias estn rodeadas por una cu
bierta viscosa y pegajosa (secretada por ellas
mismas) firmemente adherida a la pared e
impermeable, que forma una capa o envoltura
alrededor de la clula, la cual se conoce con el
Morfologa y fisiologa de las bacterias / 45
nombre de cpsula y algunas veces, por ciertos
autores, capa mucosa, pero el uso indiscriminado
de este ltimo nombre podra confundirse con el
limo o slime que se describe ms adelante.
No todas las especies bacterianas producen
fcilmente cpsulas detectables y el volumen
de la cpsula est notablemente influido por el
medio donde la bacteria se cultiva. La cpsula no
es esencial para la fisiologa bacteriana y puede
estar presente, tanto en bacterias Gram positivas,
como Gram negativas.
Las colonias originadas de bacterias cap
suladas que aparecen en los medios de cultivo
slidos, se caracterizan por presentar un aspecto
bastante mucoso y se denominan colonias M.
Aunque la presencia o ausencia de cpsula
est regulada genticamente, la composicin de
los medios de cultivo (sobre todo los enriqueci
dos con sacarosa, suero, entre otros), y ciertas
condiciones ambientales de presin osmtica y
temperatura, favorecen su formacin. Ejemplos
de algunas bacterias capsuladas: Klebsiella
pneumoniae y Streptococcus pneumoniae.
Composicin. La componen polmeros org
nicos, tipo polisacridos extracelulares como dex-
trn, levn y celulosa, que por muchos motivos
se afirma que son sintetizados y excretados por
la propia clula bacteriana y que por causa de su
viscosidad e insolubilidad no se difunden en el
medio y se quedan envolviendo la pared celular.
Esta envoltura es una capa laxa, mucosa, viscosa
y pegajosa de un espesor considerable, que puede
detectarse, fcilmente, por medio de tcnicas de
tincin especializadas. Su grosor vara de 0,2 a
1 |im, aunque algunas veces dobla el volumen
bacteriano. Sin embargo, tambin se han descrito
cpsulas con una composicin polipeptdica.
Aunque, la cpsula le confiere algunas ventajas
a las bacterias que la poseen, definitivamente no es
vital para su subsistencia. Sus funciones son:
- Proteccin, a las bacterias que la poseen:
1) interfiere la fagocitosis, impidiendo que sean
fagocitadas por las clulas de defensa del orga
nismo (macrfagos); 2) evita la desecacin de la
clula bacteriana porque contiene gran cantidad
de agua; 3) dificulta la difusin de sustancias
hidrfobas y electronegativas, como algunos an
46 / Microbiologa bsica para el rea de la salud y afines

tibiticos y sustancias txicas que puedan tener en la cavidad bucal, como los estreptococos del
efectos letales sobre la bacteria, y 4) impide la grupo Mutans. Estos estreptococos, se caracte
adherencia de virus bacterifagos que necesitan rizan por su capacidad de sintetizar homopol-
un sitio activo en la pared celular para infectar la meros extracelulares, utilizando sacarosa como
bacteria y cumplir con su ciclo viral. sustrato de preferencia.
- Virulencia, las bacterias capsuladas tienen, Los homopolmeros extracelulares se clasi
generalmente, mayor poder de virulencia que fican en tres tipos:
las que no la poseen. Como se mencion, la - Glucanos hidrosolubles (dextranos)
cpsula impide que se lleve a cabo el proceso - Glucanos hidroinsolubles (muanos)
defensivo que se conoce como fagocitosis, en el - Fructanos
cual los leucocitos o glbulos blancos engloban La formacin de estos polmeros est media
y digieren elementos extraos principalmente da la accin de unas enzimas de tipo extrace-
microbios as como ciertos productos de la lular llamadas glucosiltransferasas (GTF) y
desasimilacin (toxinas, por ejemplo), lo cual, fructosiltransferasas (FTF), cuyo mecanismo
favorece su multiplicacin y facilita la invasin de accin es romper la molcula de sacarosa
del organismo infectado. El mecanismo interno y polimerizar los polisacridos.
de la resistencia a la fagocitosis no se conoce Algunas funciones del limo son similares
claramente, pero se han emitido varias teoras. a las de la cpsula, aunque tiene otras que
La de mayor aceptacin dice que la bacteria marcan la diferencia:
adquiere una capacidad deslizante que impide su - Proteccin
adherencia a los fagocitos. Lo que s resulta claro - Virulencia
es que la cpsula constituye unfactor de virulen - Facilitar mecanismos de adhesin, agre
cia, propio de las bacterias que la posean. gacin y coagregacin, porque por medio
de su capa mucosa las bacterias pueden
Limo o slime, capa mucosa o capa adherirse a superficies (como el esmalte
mucilaginosa dental) y tambin establecen uniones entre
bacterias similares o diferentes (agregacin
Envoltura o capa flexible e indefinida, por lo tanto, y coagregacin, respectivamente), as todo
sus mrgenes son difusos, su grosor y su densidad el conjunto queda adherente.
no son uniformes, su adherencia a la membrana - La capa de limo se convierte en una reserva
externa de las bacterias Gram negativas y a la mu nutricional, la cual utilizarn las bacterias
rena o peptidoglucano de las Gram positivas es ante la escasez de nutrientes provenientes
muy dbil por lo cual es fcilmente eliminada. del exterior.
Composicin. El limo o slime lo componen -Dificulta la accin de los antibiticos, porque
principalmente polisacridos y de forma ms los mecanismos de adhesin, agregacin y
frecuente homopolisacridos, por lo cual, y pese coagregacin forman una masa o biopelcula
a su diferencia conceptual, es difcil de diferen con ausencia de oxgeno en su interior, que
ciar en la prctica. dificulta el acceso de los frmacos, principal
Las colonias originadas en cultivos slidos, mente, los hidrfobos y los que necesitan el
por bacterias que poseen esta capa, ocasional oxgeno para poder actuar.
mente, se observan como si estuvieran rodeadas
por una gota de agua o enclavadas y adheridas Glicoclix o glicocliz
a la superficie. Los medios de cultivo slidos
enriquecidos con sacarosa, preferiblemente, Algunas bacterias cuando se desarrollan en
favorecen su formacin. su hbitat natural son capaces de segregar un
Entre las bacterias que poseen la capa de limo homopolmero compuesto por dextrn o levn,
o slime, se destacan algunas de gran importancia que se conoce con el nombre de glicoclix. Esta

estructura se sita en posicin extracelular y
forma un entramado o maraa de fibrillas poli-
sacridas, que facilitan la adherencia de la bac
teria a una superficie. Esto sucede con bacterias
como Streptococcus mutans y el esmalte dental,
Pneumococcus y el tejido pulmonar, el gonococo
y el tejido uretral, entre otras. Esta propiedad se
pierde, como sucede en muchas ocasiones con
la cpsula, cuando la bacteria se desarrolla en
medios sintticos en el mbito de laboratorio.
El homopolmero aunque es transparente, puede
ponerse de manifiesto al microscopio electrnico
con tcnicas muy especficas.
Algunos autores llaman glicocliz a la capa
mucosa o slime, pero no tiene total aceptacin.
Granulos de almacenamiento
Se localizan principalmente en la porcin fluida
del citoplasma y son estructuras formadas por
materia particulada y nutrientes disueltos. Tam
bin se les conoce con el nombre de cuerpos de
inclusin, inclusiones citoplasmticas o granulos
metacromticos. Se describen como un conjunto
de elementos sin estructura uniforme, que sirven
como mecanismo de regulacin o de almacenaje.
Son de naturaleza muy diversa (dependiendo de la
especie de la bacteria) y regularmente se observan
con mayor frecuencia en las fases de reposo o
envejecimiento de las bacterias, en las cuales ellas
los utilizan como reservas energticas.
Las bacterias de la cavidad bucal los utilizan
para obtener energa cuando el hospedero las
somete a periodos de ayuno prolongados.
Los grnulos o cuerpos de inclusin ms co
munes en las bacterias patgenas para el hombre
son de naturaleza:
a. Orgnica. Estn compuestos por glucgeno
(un polmero de la glucosa que funciona como un
depsito de carbono y energa, acumulndose cuan
do la fuente de carbono se encuentra en exceso) y
almidn, que conforman las reservas bacterianas
de hidratos de carbono y los de cido poli-P-
hidroxibutrico que son las reservas de lpidos.
b. Inorgnica. Compuestos por polifosfatos
que son las reservas de fsforo. Los grnulos
de almacenaje ms comunes, en general, estn
Morfologa y fisiologa de las bacterias / 47
compuestos de polifosfato, lpidos, glucgeno,
almidn, azufre o cido poli-P-hidroxibutrico.
Algunas bacterias presentan en su morfologa
unas estructuras facultativas con apariencia de
pelos muy largos y flexibles, unos cortos y otros
rgidos. Los dos tipos de pelos tienen diferentes
funciones y se han denominado, genricamente,
apndices bacterianos. Entre ellos encontramos
los flagelos, las fimbrias y los pili.
Flagelos
Los flagelos son apndices filamentosos, ondu
lados, sinuosos, extremadamente finos y frgiles
que se originan en una estructura granular lla
mada cuerpo basal, localizada en el citoplas
ma, inmediatamente despus de la membrana
citoplasmtica. El flagelo tiene tres partes: 1)
cuerpo basal: es una estructura basal; 2) codo:
una estructura a manera de gancho, y 3) elflagelo
propiamente dicho: un filamento largo fuera de
la pared celular.
El dimetro del flagelo, en general, es muy
uniforme (aproximadamente de 10 a 20 nm),
pero su longitud resulta muy variable segn
las especies y puede ser varias veces el soma o
cuerpo de la bacteria que lo posee. Es posible
afirmar, de manera general, que muchas especies
de bacilos tienen flagelos, pero muy rara vez se
aprecian en los cocos (vase figura 2.24).
Determinar si una bacteria es o no flagelada
resulta fcil, una de las tcnicas ms sencillas es
la inoculacin de las bacterias en un agar semi-
slido (agar blando) con un asa bacteriolgica de
aguja, mediante el mtodo que se conoce como
picadura. Si las bacterias no poseen flagelos, su
crecimiento se limita nicamente al lugar o tra
yecto por donde se realiza la picadura. Si, por el
contrario, son flageladas su crecimiento, adems
de aparecer por el trayecto de la picadura, se
extiende por todo el medio de cultivo, incluso la
superficie.
La principal funcin de los flagelos es pro
porcionar a las bacterias movimiento. Por causa
de esa motilidad, se les facilita la penetracin a
los tejidos y en ciertos casos desplazarse a contra
corriente, como ocurre con el flujo miccional, al
48 / Microbiologa bsica para el rea de la salud y afines

existir un proceso infeccioso. De esta forma, se
convierten en un factor de virulencia.
Composicin. La composicin del flagelo es
eminentemente proteica. La protena es de natu
raleza contrctil, se llamaflagelina. Su estructura
es semejante a la miosina del msculo estriado.
La estructura de la flagelina est dada por una
serie de subunidades o monmeros idnticos,
dispuestos de forma helicoidal.
La disposicin de los flagelos sobre la super
ficie de la bacteria difiere en las distintas especies
y constituye un carcter taxonmico importante.
El gnero Vibrio posee un solo flagelo polar
(bacterias monotricas), el gnero Pseudomonas
habitualmente posee un penacho de flagelos (bac
terias lofotricas) y en algunos espirilos se ubican
en ambos polos (bacterias anfttricas). La mayora
de las enterobacterias (bacterias cuyo hbitat ms
comn son las vas entricas o intestinales) tienen
flagelos distribuidos sobre toda la superficie del
soma bacteriano (bacterias peritricas), y algunos
gneros bacterianos carecen de flagelos (bacterias
atricas) (vase figura 2.25).
Fimbrias
Elementos filamentosos que pueden encontrarse
por cientos sobre la superficie de la bacteria,
visibles nicamente con microscopia electrnica.
Son ms pequeos, cortos y numerosos que los
flagelos y no tienen movimiento ondulatorio,
por tanto, no tienen funcin de motilidad y se
encuentran tanto en las especies mviles como
las inmviles. No todas las especies bacterianas
poseen fimbrias y la propiedad de poseerlas cons
tituye una caracterstica gentica. Se desconoce
con certeza la funcin de las fimbrias en muchos
tipos de bacterias, pero parece muy acertado que,
en algunos grupos bacterianos, favorece: 1) su
fijacin o adherencia a superficies, entre ellas los
tejidos animales, como lo hacen algunas bacte
rias patgenas; 2) la formacin de biopelculas,
como la biopelcula dental (placa bacteriana)
participando en fenmenos de adhesin, agrega
cin y coagregacin, y 3) la fijacin a superficies
lquidas en las cuales forman velos.
Composicin. La composicin estructural de
Morfologa y fisiologa de las bacterias / 49
las fimbrias es de naturaleza proteica. La protena es
rgida y se conoce con el nombre defimbrilina.
Pili
A diferencia de las fimbrias, los pili son largos
(hasta 20 |i aproximadamente), flexibles pero no
tanto como los flagelos y poco numerosos: de 1 a
4 por bacteria, aunque estructuralmente son muy
similares. Tambin poseen estructura proteica y la
protena se conoce con el nombre de pilma.
Se encargan de la transferencia del material
gentico en el proceso de apareamiento bacteria
no llamado conjugacin (vase figura 2.26). La
capacidad de producir estos pili se relaciona con
la presencia de unos plsmidos que se conoce
como Factor F (vase conjugacin en el captulo
4: Gentica bacteriana).
Esporo
Algunas bacterias tienen la facultad de producir
un cuerpo oval o esfrico de pared gruesa que co
rresponde a una clula de alta resistencia llamada
esporo, se forma cuando las condiciones ambien
tales se vuelven desfavorables para su supervi
vencia. Es una estructura refringente que posee
un papel muy importante en la conservacin de
la especie, pues, gracias a ella pueden sobrevivir
incluso, durante muchos aos, hasta que las con
diciones ambientales vuelvan a ser favorables y
las bacterias puedan adquirir nuevamente y sin
peligro su forma habitual o vegetativa.
El descubrimiento de la existencia de los
esporos bacterianos tuvo gran relevancia para la
microbiologa, porque el conocimiento de estas
formas tan resistentes al calor fue determinante
para desarrollar procesos de esterilizacin. Los
esporos, tambin, son resistentes a otros agentes
como la radiacin, la desecacin, los cidos y los
desinfectantes qumicos y pueden permanecer en
estado de latencia por periodos de tiempo muy
prolongados: meses, aos, siglos.
Las bacterias que tienen la capacidad de for
mar esporos se limitan a un grupo muy reducido
y generalmente son Gram positivas (rara vez se
encuentran en las Gram negativas).
50 / Microbiologa bsica para el rea de la salud y afines
Segn su localizacin en la clula los esporos
pueden ser exoesporos o endoesporos: los prime
ros se localizan externamente a la clula, como
en el gnero Streptomyces, y los segundos se
encuentran dentro de la clula y son producidos
por los gneros Bacillus, Clostridium y Sporo-
sarcinas, este ltimo es el nico gnero entre los
formadores de esporos, cuyos representantes son
cocos y no bacilos.
Los endoesporos pueden ubicarse en diferen
tes posiciones dentro de la bacteria y deformar o
no el soma, segn la especie que lo posea (vase
figura 2.27).
En el esporo se diferencian varias partes:
1. Exosporium o exosporio. Capa muy fina
y delicada de constitucin proteica. Es la capa
ms externa del esporo bacteriano.
2. Cubierta del esporo. Compuesta por varias
capas proteicas especficas del esporo. Es un
glucopptido especial con menos enlaces cruza
dos, posee las capas de revestimiento I y II, que
se llaman intina y exina respectivamente, que
tienen gran cantidad de queratina responsable
de la impermeabilidad del esporo.
3. Crtex. Es una capa de peptidoglucano
con uniones laxas. Internamente y por debajo
del crtex se encuentra la parte central o
4. Core. Esta capa la forman todas las es
tructuras que permiten su transformacin a la
forma vegetativa durante la germinacin. Estas
estructuras son: nucleoplasma excntrico, cito
plasma denso y granuloso, membrana esporal y
pared esporal con restos de murena.
Composicin. En el esporo se han encontrado
protenas, lpidos, polisacridos, ARN, ADN y un
componente propio que no se ha descrito en las
clulas vegetativas: cido dipicolnico que se
encuentra en el core, generalmente unido a iones
de calcio para formar dipicolinato de calcio. El
contenido de agua es muy pequeo (solo de 10
al 30% del agua de la bacteria) y no aparece en
forma libre sino combinada (vase figura 2.28).
Morfologa y fisiologa de las bacterias / 51
52 / Microbiologa bsica para el rea de la salud y afines
Esporulacin o esporognesis. Proceso de
maduracin del esporo en el que la bacteria
pasa de su forma habitual o vegetativa a la for
ma esporulada. Este proceso es una respuesta a
condiciones ambientales extremas, altamente
desfavorables para la subsistencia de la especie
y son varios los factores que pueden iniciarla: la
presencia del oxgeno favorece la esporulacin,
en el caso de las bacterias anaerobias y la falta
del oxgeno, lo hace, en las bacterias aerobias.
El proceso de esporognesis se inicia cuando las
condiciones de cultivo se vuelven precarias, es
decir, presentan evidentes cambios de carcter
negativo para las bacterias, como aumento o des
censo de la temperatura, pH, la presin osmtica
y agotamiento de las condiciones nutricionales,
entre otros, que pueden comprometer la inte
gridad de las bacterias. Bacillus subtilis es una
bacteria en la cual el proceso de esporulacin ha
sido mejor estudiado.
En condiciones ptimas en el mbito del la
boratorio, este bacilo tarda ms o menos 7 horas
para diferenciarse en un endoesporo. Desde el
inicio hasta la culminacin del proceso de dife
renciacin se han identificado 8 etapas diferentes
que se inician con una clula en su estado normal,
habitual o vegetativo, tomado como la etapa cero
o estadio cero (vase figura 2.29).
Estadio 0. Representa la forma vegetativa al
final del periodo exponencial, en el cual la bacte
ria contiene dos cromosomas porque es el instante
inmediatamente anterior a la divisin celular.
Estadio I. El material nuclear se dispone en
forma de filamento y ocupa la parte central del
soma bacteriano.
Estadio II. Se forma un tabique o septo ante-

rior del esporo que separa la cromatina nuclear
en 2 partes, una de las cuales emigra hacia uno
de los polos de la clula bacteriana.
Estadio III. Corresponde a una dilatacin de la
parte anterior del esporo, descrito por otros autores
como formacin delpreesporo, que es el resultado
del crecimiento unidireccional de la membrana
citoplasmtica de la clula bacteriana vegetativa.
Estadio IV. En esta fase se inicia la formacin
del crtex: crtex inmaduro, es el momento en
el cual el esporo comienza a aparecer como una
estructura retrctil, y se produce un aumento de
la actividad enzimtica, principalmente de la
ribosidasa y la dipicolinocosintetasa. Aparece,
en grandes cantidades, el cido dipicolnico en
forma de dipicolinato de calcio (aproximada
mente de 5 a 15% del peso en seco).
Estadio V. Se forma una capa constituida por
las cubiertas que se conocen como intina y exina,
a las cuales se incorporan protenas con un alto
contenido de cisterna. El esporo se impermeabi
liza al agua y microscpicamente se ve como un
cuerpo blanquecino.
Estadio VI. Es la fase de maduracin del
esporo. El crtex maduro y el citoplasma se
vuelven ms homogneos y densos, se forma la
enzima alanina-racemasa, una enzima importan
tsima para la germinacin del esporo.
Estadio Vil. Se observa el endoesporo com
pletamente maduro y se inicia la liberacin de la
bacteria hasta que, en el paso siguiente, el esporo
queda totalmente libre de ella.
Germinacin
La germinacin del esporo es el fenmeno
inverso al proceso de esporulacin y consiste
en la transformacin del esporo en una clula
bacteriana vegetativa. Cuando las condiciones
de humedad, calor y nutricin se vuelven favo
rables, el esporo puede germinar. La germinacin
implica la prdida de la refringencia y la termo
rresistencia, adems, se presenta formacin de
peptidoglucano o murena, captacin de agua,
eliminacin del cido dipicolnico y, por consi
guiente, la desaparicin total del dipicolinato de
calcio. La energa utilizada para la germinacin
Morfologa y fisiologa de las bacterias / 53
se almacena en forma de 3-fosfoglicerato y no
como ATP. Este proceso ocurre en 3 etapas: acti
vacin, iniciacin y excrescencia o extrusin.
1. Activacin. Generalmente, los endosporos
no pueden germinar inmediatamente despus
de formados, tal vez germinen transcurridos
varios das activndose solamente en el caso de
permanecer en un medio nutritivamente rico que
le ofrezca un ambiente favorable, y le propor
cione factores que permitan la destruccin de
las cubiertas externas del esporo, por ejemplo la
restitucin de la temperatura ptima, presencia
de agua, ph adecuado, entre otros, que estimu
lan la produccin de enzimas, las cuales tienen
como funcin la disolucin de las capas externas
cexina e intinas. As, se permite la penetracin de
agua nutrientes y el esporo se activa para comen
zar la segunda etapa de la germinacin.
2. Iniciacin. Este paso se produce si las con
diciones del medio continan favorables, entonces
se activa una autolisina (enzima que altera rpida
mente el peptidoglucano cortical), se absorbe agua
a la parte mas interna, se elimina el dipicolinato
de calcio y por accin de enzimas hidrolticas se
degradan los otros constituyentes del esporo.
3. Excrescencia o extrusin. Una vez degrada
dos, el crtex y las cubiertas, aparece una clula
vegetativa que entra en un periodo de biosntesis
activa y slo termina cuando se produce la divi
sin celular. Esta etapa exige una fuente abaste
cedora de todos los nutrientes esenciales para el
desarrollo bacteriano. La excrescencia finaliza
cuando la clula bacteriana inicia el fenmeno
de la reproduccin.
Taxonoma
El hombre, instintivamente, tiende a clasificar los
objetos de su entorno, organizndolos segn las
semejanzas o diferencias que encuentra en ellos.
La taxonoma es la ciencia que trata de los
principios de clasificacin y est muy relaciona
da con la sistemtica y sus especialistas se llaman
taxnomos, cuya funcin es la clasificacin o
agrupamiento sistemtico de los organismos en
grupos o categoras. El propsito de la taxonoma
es desarrollar un ordenamiento lgico de los
54 / Microbiologa bsica para el rea de la salud y ajines
organismos basndose en su afinidad natural.
Para esto se requiere de la determinacin de
tantas caractersticas como sean posibles, de or
ganismos colocados en grupos de gran similitud.
Como las propiedades de un organismo estn
ordenadas en un cdigo gentico, la similitud de
las bases entre cadenas que componen el ADN,
puede compararse. El parmetro ms utilizado
es la determinacin del porcentaje existente de
guanina (G) y citocina (C) en el ADN total.
La taxonoma tiene en cuenta tres procesos:
1. Clasificacin en sentido estricto. Aqu se
agrupan en conjunto los objetos o los seres que
poseen semejanzas, generalmente fenotpicas
entre s, para diferenciarlos de los que no se se
mejan a ellos. Un ejemplo anlogo y muy claro
sera dado por la organizacin de una baraja de
naipes: primero se separan las cartas por colores,
luego por palos y dentro de los palos las cartas se
organizan comenzando por las figuras y terminan
do con la carta que posee el nmero menor.
2. Nomenclatura. Se encarga de dar un nom
bre diferente a cada uno de los grupos creados.
Para lograr una denominacin uniforme de los
organismos que tenga validez internacional,
todos los investigadores deben seguir las reglas
establecidas. Debido a la aparicin de conceptos
divergentes se necesit unificar trminos en el
Primer Congreso Internacional de la Sociedad
Internacional de Microbiologa, en 1930. No
obstante, solo en 1947, en la cuarta reunin, se
adopt oficialmente el Cdigo Internacional de
Nomenclatura de las Bacterias, que est sujeto
a modificaciones continuas de acuerdo con la
informacin disponible.
3. Identificacin. En este proceso se reconoce a
un ser u objeto como perteneciente a uno de los gru
pos conformados previamente, o se lo define como
inclasificable entre los grupos preexistentes.
Cada grupo de organismos de cualquier nivel
taxonmico creado por las clasificaciones se de
nomina genricamente taxn y su plural es taxa
o taxones. Las taxa o categoras taxonmicas
utilizadas en biologa se inician de un rango su
perior a uno inferior, as: reino, filum (divisin),
subfilum (subdivisin), clase, orden, familia,
gnero y especie y en ocasiones subespecie,
porque aunque la especie es la unidad bsica de
clasificacin no representa el taxn ms pequeo
que se utiliza en la actualidad.
Poblaciones geogrficamente diferentes de
una especie a menudo muestran algunas caracte
rsticas consistentes, que permiten diferenciarlas
de otras poblaciones de la misma especie. Sin
embargo, si se entrecruzan se observa que tienen
una descendencia frtil, por lo que no constituyen
especies separadas y entonces se les denomina
subespecies. Para los microorganismos, como
las bacterias, se utiliza el trmino cepa, que hace
referencia a las caractersticas individuales de los
microorganismos contenidos en una sola colonia
de un cultivo bacteriano.
La taxonoma actual introduce el concepto
de dominio para referirse al nivel ms alto de
la clasificacin biolgica y en l se ubican los
grupos 1) Bacteria: grupo de procariotas filoge-
nticamente relacionados y diferente de Archaea
y 2) Archaea: grupo de procariotas relacionados
filogenticamente y diferente de Bacteria.
Categoras taxonmicas (taxa)
Un sistema de clasificacin biolgico se basa en una
jerarqua taxonmica u ordenamiento de grupos o
categoras que coloca a la especie en un extremo, y
en el otro al reino, en la siguiente sucesin:
1. Especie. Un grupo de organismos (para el
caso de esta obra: microorganismos), estrecha
mente relacionados, en el cual los individuos
del grupo son iguales en el mayor nmero de
caractersticas: genotpicas y fenotpicas.
2. Gnero. Un grupo de especies similares.
3. Familia. Un grupo de gneros similares.
4. Orden. Un grupo de familias similares.
5. Clase. Un grupo de rdenes similares
6. Filum. (Plural fila). Un grupo de clases
relacionadas.
7. Reino. Todos los organismos en esta jerar
qua (vase tabla 2.2).
Nomenclatura
Los grupos o taxa ms utilizados en bacteriologa
clnica son: familia, gnero, especie y rara vez
 Morfologa y fisiologa de las bacterias / 55

Tabla 2.2 Categoras taxonmicas

Categora Hombrea Gatoa Bacilo tuberculoso

Reino Anlmaiia Animalia Prokaryotae (antes moriera)

Filum Chordata Chordata Bacteria
Subfilum Vertebrata Vertebrata
Clase Mammalia Mammalia
Orden Primates Carnvora Actynomicetales
Familia Homonidae Felidae Mycobacteriaceae
Gnero Homo Felis Mycobacterium
Especie Sapiens Catus Mycobacterium tuberculosis

a Nombre comn.

subespecie. Para esta clasificacin se tiene en
cuenta: el genotipo que rene las bacterias en
grupos (taxa), las semejanzas de su genoma y el
fenotipo basado en los componentes qumicos, la
estructura y el metabolismo, entre otros.
Linneo ide un sistema que llam sistema de
nomenclatura binario para todos los organismos,
incluidas las bacterias. El sistema se basa en un
nombre nico y propio, compuesto por dos partes
para cada organismo. La primera parte nombra
el gnero y la segunda la especie. Esta ltima es
el epteto especfico o palabra que expresa alguna
cualidad del organismo. La especie siempre va
precedida por el gnero escrito completo o abre
viado. Estas dos palabras conforman el nombre
cientfico que va escrito en latn, para evitar
confusiones debido a la variedad de nombres
que se presentan en cada lugar para nombrar un
mismo organismo.
Todo nombre cientfico se escribe colocando
primero el gnero, que lleva la primera letra con
mayscula y en singular, y despus la especie o
epteto especfico, escrito con minscula. Las dos
palabras se escriben siempre en letra cursiva, lo
que indica que se est utilizando nomenclatura
cientfica. Ejemplos: Escherichia coli, Strep
tococcus mutans, Pseudomonas aeruginosa y
Corynebcterium matruchotii.
Gnero
Esta palabra no diferencia sexualmente las bac
terias entre masculino o femenino, que de hecho
no existe. El nombre genrico habitualmente se
refiere a alguna caracterstica de la bacteria, por
ejemplo, Legionella, por haber sido aislada en
antiguos legionarios, Bacillus, pequeo bastn; o
bien se da en honor de algn cientfico latinizan
do su nombre: Pasteurella, en honor de Pasteur,
Bordetella, en honor de Bordet, Neisseria, por
Albert Neisser, etc.
Como el gnero est escrito en un idioma que
no es el espaol y no indica diferencia de sexos,
no va precedido de ningn artculo (en singular
o en plural), del idioma en el cual se escribe el
texto, ejemplo: ... por esta razn Corynebacte-
rium matruchotii se relaciona con la presencia
de clculos dentales..., ... las quemaduras muy
extensas de piel a menudo presentan infecciones
bacterianas sobreagregadas, de donde es bas
tante comn aislar Pseudomonas aeruginosa ,
que....
Especie
Es el nombre o epteto especfico que algunas
veces califica el ttulo genrico: Bacteroides
fragilis (frgil), Staphylococcus epidermidis
(de la epidermis), esta palabra generalmente es
descriptiva. Puede ser alguna de las siguientes
partes de la oracin:
- Un adjetivo que modifica el nombre: Sta
phylococcus aureus (estafilococo dorado).
- Un adjetivo en forma de participio activo
de un verbo: Clostridium dissolvens (clostridio
disolvente).
- Un nombre en posesivo que modifica el
nombre genrico: Salmonellapolloru (salmonela
de los pollos).
- Un nombre en oposicin, un nombre ex-
56 / M icrobiologa bsica para el rea de la salud y afines

piicativo: Bacillus radicicola (bacilo que habita Tabla 2.3 Nombre comn y cientfico de
en la raz). diferentes organismos

Nombre comn Nombre cientfico

N om bres com unes de las bacterias
Algunas veces se suele denominar una especie
mediante un sinnimo en el idioma usual, por
ejemplo, la enterobacteria Escherichia coli
se menciona como colibacilo, Diplococ-
cus pneumoniae como neumococo, Neisseria
gonorrhoeae como gonococo, Mycobacte
rium tuberculosis como bacilo de Koch o
bacilo tuberculoso, etc. Las nicas ventajas
de utilizar nombres comunes son la sencillez, la
conveniencia y una conversacin ms efectiva
entre el profesional de la salud y los pacientes.
Por ejemplo, en una conversacin en el labora
torio con una persona lega, es ms conveniente
referirse al agente etiolgico de la tuberculosis
hablando del bacilo tuberculoso que decir
Mycobacterium tuberculosis.
N om bres cientficos de las bacterias
Los nombres cientficos de los organismos se
forman de acuerdo con las reglas del sistema
binario de nomenclatura, como ya se 1a indi
cado. Adems de sus nombres cientfic os, las
bacterias, al igual que las plantas y los ai males
tienen sus nombres comunes. En la tabla 2.3 se
observan varios ejemplos de organismos, los que
con frecuencia se mencionan por sus nombres
comunes, junto a sus nombres cientficos. En
muchos casos el nombre comn empieza a uti
lizarse antes de que se le conceda al organismo
un nombre cientfico.
Cuando se menciona un gnero sin indicarle
las especies se aade la sigla spp., por ejemplo,
Actinomyces spp. Si el gnero mencionado solo
tiene una especie que se conoce, se adiciona sp.,
por ejemplo, Rothici sp. Si excepcionalmente
hay que diferenciar subespecies, algunos au
tores lo designan escribiendo gnero, especie
y se aade ssp., por ejemplo, Fusobacterium
nucleatum ssp. Algunas veces se utiliza escribir
el gnero abreviado seguido de la especie escrita
completamente, as: del gnero solo se escribe
Perro Cannis familiaris
Mosca domstica Musca domestica
Roble blanco Quercus alba
Gonococo Neisseria gonorrhoeae
Bacilo diftrico Corynebacterium diphteriae
Bacilo tfico Salmonella typhi
la primera letra en mayscula seguida de un
punto e inmediatamente la especie escrita en
minscula y todo en letra cursiva o bastardilla:
S. aureus para Staphylococcus aureus, S. sanguis
para Streptococcus sanguis , S. sobrinus para
Streptococcus sobrinus.
Morfologa y fisiologa bacteriana:
sumario
El conocimiento de las caractersticas morfol
gicas mayores o gruesas y de las caractersticas
menores o finas de las bacterias se adquiri en
dos tiempos diferentes. Las observaciones hechas
por Leewenhoek, con su simple y rudimentario
microscopio ptico, revelaron el aspecto mayor
o grueso de los microorganismos, incluidas las
bacterias, es decir', que permitieron observar el
tamao, la forma y el ordenamiento. A comienzos
de la dcada de 1940 se dispuso del microscopio
electrnico lo que permiti estudiar la morfologa
y estructura menor o fina de las bacterias, los com
ponentes celulares y sus funciones especficas.
Preguntas para autocontrol
del aprendizaje
1. A qu se refiere la divisin del estudio
bacteriano en caractersticas morfolgicas
mayores o gruesas y caractersticas morfo
lgicas menores o finas?
2. Qu es un ocular micromtrico y cul es
su aplicacin microbiolgica?
3. Describa la agrupacin u ordenamiento que
caracteriza a los cocos y a qu tipo de patrn
obedece su agrupacin.

4. Describa algunos ordenamientos caracters
ticos de los bacilos y a qu tipo de patrn
obedece su agrupacin.
5. Si se observa microscpicamente el Sta
phylococcus aureus, en una preparacin
teida correctamente, se debera esperar
que todas las clulas bacterianas, sin excep
cin, se encontraran agrupadas en racimos?
Explique.
6. Explique por qu algunas especies de cocos
se disponen en cadenas y otras en cubos o en
filas.
7. Haga el esquema de una clula bacteriana
tpica e identifique las estructuras u organe-
las que la componen, tanto internas como
externas a la pared celular.
8. En cuanto a estructura y composicin defina
la pared bacteriana y las diferencias entre las
bacterias Gram positivas y Gram negativas.
9. Qu es el peptidoglucano o murena y qu
funcin cumple en la estructura de la clula
bacteriana?
10. Explique la composicin y funcin de las
siguientes estructuras: cpsula, glicoclix,
pared celular, membrana citoplasmtica,
nucleoide, mesosoma, fimbrias, pili, flage
lo, ribosoma, grnulos de almacenamiento,
citoplasma y esporo.
11. Qu caracterstica es comn a los proto-
plastos, esferoplastos y formas L de las
bacterias? Explique.
12. Describa la naturaleza de la membrana
bacteriana y de los mesosomas.
Morfologa y fisiologa de las bacterias / 57
13. Qu estructura de la bacteria contiene co
mnmente cantidades apreciables de cido
teicoico?, cul de cido diaminopimlico?,
cul de dipicolinato de calcio?, cul de
ADN?, cul de ARN?, cul de homopo-
lmeros como el levn y el dextrn?
14. Es correcto decir que la clula bacteriana
posee un ncleo tpico? Explique.
15. Es la formacin de endosporos en las
bacterias un modo de reproduccin o mul
tiplicacin? Explique su respuesta.
16. Contribuye la posicin y el tamao de
los endosporos en una clula vegetativa a
identificar una bacteria? Complemente la
respuesta con ejemplos concretos.
17. Explique la estructura y funcin del esporo
bacteriano.
18. Esquematice y explique el proceso de
esporulacin o esporognesis. Por qu se
presenta este fenmeno?
19. Estn todas las bacterias capacitadas para
producir esporos? Por qu y cules gne
ros bacterianos lo pueden hacer?
20. Cmo se llama el fenmeno inverso al
proceso de esporulacin?, cuntas y cules
son las etapas de este fenmeno? Explique
cada una de ellas.
21. Haga la diferenciacin entre un esporo libre,
un exoesporo y un endoesporo.
22. Qu se entiende por taxonoma?, cules
son sus principios bsicos? Haga un suma
rio muy explcito sobre el tema.
23. Qu significan las siglas: sp, spp, ssp?

Nutricin y metabolismo de las bacterias
L a s actividades qumicas para que una clula
bacteriana pueda vivir, desarrollarse y reprodu
cirse son muy complejas. Esto se entiende, si se
tiene en cuenta la gran variedad de materiales
que la clula utiliza como nutrientes y la gran
cantidad de sustancias que se forman como
constituyentes celulares, para ello, se requieren
energa y condiciones ambientales adecuadas.
Antes de que una clula bacteriana realice el
proceso de biparticin o divisin, deben ocurrir
muchas reacciones qumicas en esa clula. Estas
reacciones se conocen con el nombre de metabo
lismo. Las reacciones metablicas pueden liberar
energa y se denominan reacciones catablicas o
pueden consumir energa y se llaman reacciones
anablicas.
A raz del concepto anterior, se origina obliga
toriamente la pregunta: cmo se realizan todas
estas actividades celulares?
La respuesta recae en la accin de las enzi
mas, productos celulares presentes en la clula
en cantidades muy bajas y capaces de efectuar
todos los cambios propios de los procesos celu
lares que se asocian al fenmeno de la vida. En
cierta forma, las enzimas, pueden considerarse la
parte activa de la clula. Cualquier impedimento
de la actividad enzimtica se refleja en algn
cambio en la clula, hasta el punto que podra
ocasionarle la muerte.
Existen miles de enzimas diferentes en cual
quier clula. Las enzimas y sus actividades en la
clula viva deben coordinarse de tal forma que
proporcionen los productos adecuados a cada lu
gar, en las cantidades y momentos que convenga
y con el mnimo gasto energtico. As que para
entender los fenmenos asociados al proceso
3
de vida, se requiere estar familiarizado con la
naturaleza de las enzimas y las reacciones en las
cuales intervienen. Por tanto, no puede conside
rarse la vida sin la presencia de enzimas.
Enzimas
La palabra enzima la propuso Khne, en 1878, a
partir de una palabra griega que significa en le
vadura Anteriormente las enzimas se conocan
como fermentos, porque su accin era similar
a la accin de las levaduras.
Para la comprensin de este tema resulta
necesario desarrollar el concepto de energa de
activacin, es decir, el aporte inicial de energa
necesaria para poner en marcha una reaccin
qumica, algo as como el empujn que necesita
una roca que est en la cima de una colina para
que empiece a rodar por la pendiente. Este con
cepto, automticamente lleva a otro: catlisis.
Un catalizador es una sustancia que disminuye
la energa de activacin de una reaccin y, por
tanto, aumenta la velocidad de la reaccin. Las
enzimas son catalizadores biolgicos.
Los catalizadores, incluso en pequeas can
tidades, tienen especial capacidad de modificar
la velocidad de las reacciones qumicas, sin ser
consumidas ni alteradas como consecuencia de
las mismas. Es muy importante tener en cuenta
que los catalizadores no intervienen en la ener
ga o en el equilibrio de una reaccin, porque
nicamente afectan la velocidad a la cual ocurre
la reaccin.
Los catalizadores de las reacciones biolgi
cas o agentes catalticos orgnicos son prote
nas conocidas como enzimas. Las enzimas son

especficas, lo cual significa que solo actan
en un nico tipo de reaccin qumica, aunque
algunas enzimas pueden hacerlo en cierta cla
se de reacciones muy afines o estrechamente
relacionadas.
Las enzimas corresponden a dos clases o
grupos generales:
1. Protenas simples. Solo contienen residuos
de aminocidos, ejemplo, enzimas digestivas
como la tripsina, quimiotripsina y elastasa.
2. Protenas complejas. Contienen residuos
de aminocidos y un cofactor no aminocido.
Aunque la sntesis de toda enzima tiene lugar
en el interior de la clula, algunas se excretan a
travs de la pared celular y pueden funcionar
fuera de la misma. Por esto, se consideran dos
tipos de enzimas:
1. Enzimas extraeelulares, exocelulares o
exoenzimas. Funcionan o tienen su accin cata
ltica fuera de la clula.
2. Enzimas intracelulares, endocelulares o
endoenzimas. Cuya accin cataltica se limita
al interior de la clula.
La funcin principal de las enzimas extra-
celulares consiste en efectuar cambios precisos
en los nutrientes del ambiente externo, para que
dichos nutrientes puedan ser transportados al
interior de la clula. Por ejemplo, las amilasas
son enzimas hidrolticas que rompen el almidn
en molculas ms pequeas de azcar para que, estos investigadores recibieron en 1975 el Premio
en esta presentacin, logren pasar al interior de
la clula.
Las enzimas intracelulares sintetizan el ma
terial celular y tambin degradan los nutrientes,
que penetraron en la clula gracias a la accin de
las enzimas extracelulares, para proporcionarle
sus requerimientos energticos. Por ejemplo, las
hexoquinasas o hexocinasas son enzimas que
catalizan la fosforilacin de la glucosa y otras
hexosas (azcares elementales) en el interior de
la clula. Las caractersticas generales de las
enzimas son las mismas, independientemente
de que sean producidas por clulas microbianas,
humanas o de otros seres vivos. Por ejemplo,
muchas de las reacciones enzimticas que tienen
lugar en las levaduras, son idnticas a las de las
clulas musculares humanas.
Nutricin y metabolismo de las bacterias / 59
Propiedades fisicoqumicas
Las enzimas son protenas, es decir, polmeros
de aminocidos, que pueden o no tener unidos
otros grupos qumicos y tienen una forma tridi
mensional especfica, por tanto, poseen las mismas
propiedades caractersticas de las protenas: 1) se
desnaturalizan con el calor; 2) se precipitan con
el etanol o con concentraciones elevadas de sales
inorgnicas como el sulfato de amonio, y 3) no
dializan o difunden, a travs de membranas se
mipermeables o selectivas, porque son molculas
muy grandes.
Algunos autores mencionan en sus artculos
ciertos descubrimientos recientes en los cuales
se afirma que las enzimas no son solo protenas
porque algunas molculas de ARN tienen acti
vidad cataltica. Durante muchas dcadas, uno
de los principios ms importantes de la biologa
molecular afirmaba que la informacin gentica
era siempre unidireccional de ADN a ARN y
de este a protena. Howaerd Temin, en 1964,
por medio de sus estudios con virus tumorales
(oncgenos) que contenan ARN como nico
material gentico, descubri una importantsi
ma excepcin a esta regla. Muestra de este
tipo de enzimas fue descubierta en 1970, por
Temin y Baltimore y se conoce con el nombre
de transcriptasa inversa o inversotranscriptasa;
Nobel.
Muchas enzimas son una protena conoci
da como apoenzima, la cual se combina con
una molcula de bajo peso molecular llamada
cofactor. Al unirse las dos formas (apoenzima
y cofactor) forman una enzima activa llamada
holoenzima. El cofactor puede ser orgnico,
generalmente derivado de una vitamina, NAD+,
FAD+, coenzima A, etc., y se denomina coen
zima o tambin, puede ser inorgnico como
cualquiera de estos elementos: Mg", Co, Ca,
Cu, Fe2+, Zn2+ y Mn, entre otros y se designa
grupo prosttico.
El esquema de la figura 3.1 proporciona una
visin muy clara de la unin de la apoenzima
con el cofactor, tanto orgnico como inorgnico,
para formar la holoenzima.
60 / Microbiologa bsica para el rea de la salud y afines
Las dos caractersticas ms sobresalientes de
las enzimas son:
1. Su alto poder cataltico
2. Su alto grado de especificidad por los
sustratos.
Una enzima determinada solo puede reac
cionar con un determinado sustrato, o si acaso, a
veces con un grupo de sustratos muy relacionados
qumicamente; es decir, casi todas son capaces de
catalizar una sola reaccin o en algunos casos solo
unas pocas reacciones qumicas estrechamente
relacionadas. Esto significa que las clulas pro
ducen una enzima para cada una de las molculas
que metabolizan. La especificidad de la enzima
se debe a su estructura tridimensional.
Existen tambin sistemas enzimticos, por
ejemplo, la levadura transforma la glucosa en al
cohol y dixido de carbono. Esta transformacin
no se lleva a cabo por una sola enzima, sino por
un grupo de enzimas llamado sistema enzimtico
(vase figura 3.2).
La enzima amilasa desdobla solo el almi
dn y no acta sobre la lactosa o la maltosa y
la enzima ureasa, que descompone la urea en
amoniaco y dixido de carbono, no acta sobre
ningn otro sustrato.
Las bacterias pueden crecer en ambientes
expuestos a continuos cambios como pH cido o
alcalino. Esto hace que su contenido enzimtico
caracterstico cambie, en respuesta a las condi
ciones ambientales, pero solamente dentro de
ciertos lmites.
En lo que respecta a la influencia del sustrato
especfico er la formacin de enzimas, las enzi
mas bacterianas se dividen en dos grupos:
1. Enzimas constitutivas. Siempre son produ
cidas por las clulas, independientemente de la
constitucin del medio en el que se desarrollan.
2. Enzimas adaptativas (inducibles o induci
das). Son producidas por las clulas solamente
en respuesta a la presencia de un sustrato en
particular, esencialmente, solo se producen cuan-

do se necesitan. El proceso se llama induccin
enzimtica y el sustrato responsable de inducir la
formacin de la enzima se denomina inductor.
Condiciones que afectan la actividad
enzimtica
Entre las condiciones que afectan la actividad
enzimtica se encuentran:
1. Concentracin de la enzima. Si la concen
tracin de la enzima se mantiene constante, la
velocidad inicial de una reaccin enzimtica es
directamente proporcional a la concentracin del
sustrato presente. En este caso la concentracin
del sustrato es el factor limitante de la velocidad
de reaccin. Sin embargo, aunque se aumente
la concentracin del sustrato la velocidad de
reaccin no aumentar porque las molculas de
enzima se saturarn de l.
2. Concentracin del sustrato. En este caso la
concentracin de la enzima es el factor limitante
de la velocidad de la reaccin. De esta forma, la
velocidad inicial de la reaccin es directamente
proporcional a la concentracin de enzima
presente.
3. pH. La mayora de las enzimas requieren
un pH ptimo para mantenerse activas y solo lo
consiguen en un rango muy reducido: entre 6 y
8. Las variaciones de pH modifican las cargas
de la enzima produciendo un cambio en su
actividad.
Si el medio se toma muy cido o muy bsico,
muchas enzimas se inactivan y generalmente se
desnaturalizan de manera irreversible. Algunas
bacterias son excepciones a esta norma y pueden
crecer a pH muy cido, como los lactobacilos.
4. Temperatura. Muchas enzimas necesitan
una temperatura ptima para que la reaccin al
cance la mxima velocidad. Las temperaturas altas
inactivan rpidamente a la mayora de las enzimas
producindoles una alteracin molecular de tipo
irreversible, por tanto, no se reactivan cuando se
enfran. Gran cantidad de organismos encuentra la
muerte cuando son expuestos brevemente a altas
temperaturas, que ocasionan inactivacin de sus
enzimas y no pueden continuar su metabolismo.
Nutricin y metabolismo de las bacterias / 61
Existen algunas especies bacterianas que son
excepciones a esta regla porque pueden crecer
y desarrollarse a temperaturas muy altas, como
las que viven en aguas de manantiales calientes,
con temperaturas superiores a los 100 C (por
ejemplo, en los giseres de agua caliente del
Yellowstone Park en Estados Unidos), otras
logran sobrevivir a temperaturas superiores a
las de ebullicin y altas presiones atmosfricas
en manantiales calientes submarinos.
Temperaturas extremadamente bajas detie
nen la actividad enzimtica, pero no destruye las
enzimas. De esta forma pueden conservarse man
tenindolas a temperaturas de 0 C o menos.
Reacciones fundamentales
Las bacterias poseen cientos o millares de en
zimas, pero las reacciones fundamentales son:
1. Reduccin. Incorporacin de hidrgenos
o electrones (e-).
2. Oxidacin. Separacin de hidrgenos o
electrones (e~).
3. Deshidratacin. Prdida de una molcula
de agua del sustrato.
4. Hidrlisis. Introduccin de agua en un
enlace especfico del sustrato.
5. Desanimacin. Separacin de un grupo
amino (NH2).
6. Descarboxilacin. Separacin de C 02 de
un grupo carboxilo (COOH).
7. Fosforilacin. Adicin de un grupo fosfato
a una molcula orgnica.
Nomenclatura
Los nombres aplicados a las enzimas se han
ajustado al criterio individual de los investiga
dores. En muchos casos a una misma enzima se
le conoce con diferentes nombres o se les da el
mismo nombre a enzimas diferentes.
Tambin muchos de estos nombres de las
enzimas no dan idea, o dan muy poca, de la na
turaleza de las reacciones que catalizan. Debido
a esta situacin la nomenclatura enzimtica se
tom catica (vase tabla 3.1).
62 / Microbiologa bsica para el rea de la salud y afines

Tabla 3.1 Funcin de las principales clases de enzimas

Clase Reaccin cataltica

Oxido-reductasas Reacciones de transferencia de electrones o tomos de hidrgeno. Catalizan reaccio

nes de xido-reduccin

Transferasas Transferencia de grupos funcionales (entre los grupos funcionales se incluyen fosfa
to, amino, metilo, etc.). Catalizan la transferencia de un grupo funcional de una mol
cula donadora a una receptora

Hidrolasas Catalizan reacciones de hidrlisis, es decir, adicionan una molcula de agua para
romper enlaces qumicos

Liasas Catalizan reacciones en las cuales se forman o se rompen enlaces dobles. Adicin a
dobles enlaces de molculas, as como eliminacin hidroltica de grupos qumicos

Isomerasas Catalizan reacciones de isomerizacin, es decir, reacciones en las que un compuesto

se transforma en un ismero (imagen en espejo), este compuesto resultante tiene los
mismos tomos, pero con diferente estructura molecular

Ligasas Formacin de enlaces con hidrlisis de ATP (adenosina trifosfato), o sea, que catali
zan reacciones en las cuales se unen dos molculas

Reglas para nombrar y clasificar Naturaleza y mecanismo de la accin

las enzimas enzimtica

Cuando el nombre de las enzimas termina en asa,
debe usarse para una sola enzima, por ejemplo,
enzima catalasa, que cataliza el perxido de
hidrgeno en oxgeno y agua. Cuando se desea
nombrar un conjunto de enzimas que catalizan
un conjunto de reacciones, se debe usar la pala
bra sistema', por ejemplo, el sistema succinato-
oxidasa, que cataliza la oxidacin del succinato
por 0 2 y lo forman succinato-deshidrogenasa,
citocromo-oxidasa y varios acarreadores inter
medios.
Para la clasificacin solo se consideran enzi
mas individuales y no sistemas enzimticos. El
desarrollo reciente de la enzimologa ha creado
un problema nuevo respecto a la nomenclatura
de las enzimas, porque se ha encontrado que
muchas tienen formas estructurales diferentes,
pero propiedades catalticas idnticas o casi
idnticas. A estas enzimas se les da el nombre
de isoenzimas o isozimas.
La mayor parte de las reacciones enzimticas
pueden representarse por una ecuacin general
(vase figura 3.3).
La enzima E y el sustrato S se combinan para
formar un complejo enzima sustrato ES que des
pus se rompe para dar el producto P. La enzima
no se consume en la reaccin, sino que se libera
para reaccionar de nuevo con otra molcula de
sustrato. Este proceso se repite muchas veces
hasta que se agotan las molculas de sustrato.
El concepto activacin de sustrato, subsiguien
te a la formacin del complejo enzima-sustrato
es bsico en la teora sobre el mecanismo de
accin enzimtica. La activacin permite la
modificacin del sustrato por causa de la accin
enzimtica. La activacin de la molcula de
sustrato se produce gracias a su elevada afinidad
qumica por determinadas reas de la superficie
de la enzima conocidas con el nombre de sitio
activo o sitio cataltico. Estos sitios se presentan
como una especie de bolsa, donde se encuen
tran cadenas de aminocidos que forman, en
la enzima, una superficie tridimensional que se
complementa con el sustrato. Entonces, cuando
se acoplan el sustrato y la enzima por su sitio ac
tivo, se produce una distorsin o tensin en algn

enlace de la molcula de sustrato, de tal manera
que se hace lbil o inestable y sufre un cambio
determinado por la enzima en cuestin.
Las molculas modificadas carecen de afini
dad por los sitios activos, por tanto, despus de
ocurrida la reaccin, las molculas son liberadas.
La enzima queda libre para combinarse con
nuevas molculas de sustrato y repetir la accin
(vase figura 3.4).
Nutricin y metabolismo de las bacterias / 63
Inhibicin de la accin enzimtica
La actividad de una enzima puede inhibirse por
ciertos agentes qumicos y de diversas formas. Al
gunos inhibidores se unen a la enzima en el mismo
sitio que el sustrato (sitio cataltico o sitio activo);
otros lo hacen en alguna regin alejada de este,
llamada sitio alostco. Este sitio es donde las
molculas reguladoras, conocidas como efectores
64 / Microbiologa bsica para el rea de la salud y afines
alostricos, se unen a la enzima con el fin de alte
rar su conformacin y su actividad. Una enzima
puede presentar ms de un sitio alostrico.
La inhibicin de las enzimas se clasifica en
dos tipos: reversible e irreversible.
1. Inhibicin reversible. Un inhibidor forma
enlaces qumicos dbiles con la enzima y puede
ser competitiva o no.
2. Inhibicin irreversible. Hay por lo general
destruccin de uno a ms grupos funcionales de
la enzima.
Inhibicin reversible
Existen dos tipos muy importantes de inhibicin
reversible, denominados inhibicin competitiva e
inhibicin no competitiva, los cuales se diferen
cian porque la inhibicin competitiva se puede
revertir mediante el incremento de la concentra
cin del sustrato, en tanto que la inhibicin no
competitiva, no puede hacerlo.
1. Inhibicin competitiva. Un inhibidor
competitivo (metabolito o frmaco) con estruc
tura qumica similar a la del sustrato forma un
complejo con la enzima e impide la unin del
sustrato en el sitio activo; es decir, compite con
el sustrato por el sitio activo de la enzima. El
inhibidor competitivo ocupa el sitio activo solo
por un tiempo y no causa daos permanentes en
la enzima. Esta inhibicin puede anularse por el
incremento de la concentracin del sustrato, de
manera que las molculas de sustrato excedan
en nmero a las del inhibidor.
En la figura 3.5 se observa un esquema re
presentativo de la inhibicin competitiva, entre
el cido malnico y el cido succnico.
2. Inhibicin no competitiva. Este tipo de
inhibicin se produce cuando se encuentran una
enzima con dos sitios de unin importantes: el
sitio activo, propiamente dicho, y otro conocido
como sitio alostrico, la enzima con estas ca
ractersticas se conoce como enzima alostrica.
El inhibidor se une con la enzima en el sitio
alostrico, esto lo lleva a inactivarse porque se
modifica su forma, de modo que el sustrato no
puede unirse al sitio activo y, por tanto, no se
produce el proceso cataltico. El inhibidor y el
sustrato pueden unirse simultneamente y la pre
sencia del inhibidor afecta el proceso cataltico,
de tal manera que puede inactivarlo o hacer que
la formacin de los productos finales sea dema
siado lenta (vase figura 3.6).
Inhibicin irreversible
La inhibicin irreversible la causan agentes lla
mados inhibidores enzimticos irreversibles, que
generalmente son sustancias txicas, naturales
o sintticas que envenenan a las enzimas. El
inhibidor se combina con algn grupo funcional
del sitio activo de la enzima, forma un enlace
covalente y la deja, catalticamente, inactiva o la
destruye en forma permanente. Una gran varie
dad de venenos enzimticos como: los iones de
metales pesados (Ag+, Hg2+), agentes oxidantes,
la yodo-acetamida, cianuro, penicilina, aspirina,
entre otros, que inactivan la enzima en forma
permanente o cuando mucho, se reactiva muy
lentamente (esto requiere horas o das). Este tipo
de inhibidores no tienen semejanza estructural
con el sustrato, por tanto, un incremento en la
concentracin de este resulta ineficaz para su
primir tal inhibicin.
Metabolismo bacteriano
El metabolismo lo constituye el conjunto de re
acciones qumicas que una clula lleva a cabo y
que producen o utilizan energa para la sntesis de
componentes celulares o para otras actividades de
la clula, como el movimiento. El metabolismo
de las bacterias no difiere, en sus mecanismos
bsicos, del de los dems seres vivos. Las bacte
rias necesitan obtener del medio la energa y las
sustancias nutritivas necesarias para la sntesis de
sus componentes y los elementos de reserva, as
como para el crecimiento, movimiento y dems
actividades fisiolgicas. Las reacciones metab-
licas se dividen en dos grandes grupos:
I. Reacciones catablicas o energticas.
Tienen por objeto la descomposicin de los sus
tratos en sustancias ms sencillas con liberacin
de energa. Esta liberacin de energa se conoce
con el nombre de reaccin exergnica.

2. Reacciones anablicas o biosintticas.
Su objetivo es utilizar esas sustancias sencillas
y la energa para la sntesis de componentes
propios de la bacteria. La utilizacin de la ener
ga se conoce con el nombre de reaccin en-
dergnica.
Como se explic antes, todas estas reacciones
las regulan las enzimas. En realidad la clasifica
cin en reacciones catablicas y anablicas es
meramente didctica, porque ambos procesos no
existen por separado, sino que se mezclan. De
esta manera, el crecimiento a partir de una fuente
de carbono como la glucosa puede dar lugar a
energa (en forma de ATP, metabolismo ener
Nutricin y metabolismo de las bacterias / 65
gtico: catabolismo) y a la sntesis de protenas
(metabolismo biosinttico: anabolismo).
Nutricin
Los nutrientes son sustancias extracelulares de
donde la clula obtiene energa para poder llevar a
cabo la sntesis de sus componentes celulares indis
pensables para sus funciones vitales. Prcticamente
todas las sustancias terrestres pueden servir como
nutrientes para las bacterias: carbohidratos, pro
tenas, lpidos, fosfatos, etc,, y tambin sustancias
menos conocidas y ms complejas como azufre,
cuero, caucho, aceite, trementina, entre otras.
66 / Microbiologa bsica para el rea de la salud y afines
El poder de seleccin es una propiedad que
tienen las bacterias por medio de la cual solo
utilizan los nutrientes que necesitan y no todos
los existentes en el medio. Esta propiedad ayu
da para la clasificacin taxonmica de algunas
bacterias. Por ejemplo, la bacteria Ferrobacillus
oxida el ion frrico (Fe ), porque capta un elec
trn y lo pasa a ferroso (Fe ), como se observa
en la siguiente reaccin.
Fe+3 + e- 3*- Fe+2
Para entender la nutricin bacteriana deben
analizarse diferentes parmetros, como:
Condicionantes fisicoqumicas
del crecimiento bacteriano
Aun cuando en el medio se encuentren todas
las sustancias requeridas nutricionalmente, el
crecimiento y desarrollo bacteriano dependen de
aquellos factores externos que le permiten a la
bacteria desempear sus funciones. A estos fac
tores externos se les conoce como determinantes
ecolgicos o condicionantes fisicoqumicas. Los
principales son:

Concentracin de iones de hidrgeno: pH
En los hbitats naturales generalmente se en
cuentran rangos de pH entre 4 y 9, pero encontrar
el pH adecuado es un factor esencial para el
metabolismo y crecimiento de las bacterias. La
mayora de las bacterias comensales (saprofitas)
y patgenas tienen un crecimiento ptimo en
medios con pH neutro o ligeramente alcalino: 7,2
a 7,6, pero el rango ptimo es de 6,5 a 7,5. Sin
embargo, existen algunas bacterias que tienen la
capacidad gentica de producir cidos a partir de
ciertos carbohidratos y reciben el nombre de bac
terias acidognicas. Tambin se conocen las que
pueden desarrollarse en presencia de alto grado de
acidez y se mencionan como bacterias acidfilas.
Otras continan su crecimiento aunque el pH siga
descendiendo y se mencionan como bacterias
acidricas. Las bacterias pertenecientes al gnero
Lactobacillus y algunos estreptococos del grupo
Mutans cumplen con las tres caractersticas.
La luz y otros tipos de radiacin
Normalmente la necesidad de la luz es una
propiedad de las bacterias fottrofas. Otras
radiaciones como la ultravioleta proveniente
de la luz solar ultravioleta o la generada por
una lmpara de mercurio, pueden tener un poder
mutgeno sobre algunas bacterias y letal para
las que se desarrollan en la oscuridad, la cual
les proporciona condiciones favorables para su
crecimiento.
La radiacin de los rayos X y los rayos gam
ma tambin ejercen una accin mutgena sobre
las bacterias, pero por lo general son letales para
el comn de ellas.
Temperatura
Esta interviene en dos aspectos: en el crecimiento
de las bacterias y en su viabilidad. Para cada especie
hay una temperatura definida que puede variar entre
los lmites mnimos y mximos, pero hay puntos in
termedios en los cuales se encuentra la temperatura
ptinm. Para la mayora de las bacterias patgenas la
temperatura ptima est alrededor de los 37 C.
Nutricin y metabolismo de las bacterias / 67
Los investigadores han comprobado que en
tre 0 y 90 C existe actividad bacteriana; entre 0
y -250 C y entre 90 y 160 C hay supervivencia
en estado latente.
Para cada especie bacteriana pueden descri
birse tres tipos de temperaturas, de la siguiente
forma:
1. Temperatura mnima: la menor tempera
tura a la cual las bacterias pueden desarrollarse
activamente.
2. Temperatura mxima: la que indica que
por encima de ella las bacterias no pueden
sobrevivir.
3. Temperatura ptima: la que cumple con las
mejores condiciones trmicas para el crecimiento
y desarrollo bacteriano.
De acuerdo con estos conceptos las bacterias
se clasifican as:
- Bacterias psicrfilas. Son bacterias que
logran su desarrollo a temperaturas bajas:
T. mxima: 19 a 22 C
T. ptima: 15 a 18 C
T. mnima: -5 a 5 C
-Bacterias mesfilas. Son los que viven y se
desarrollan a temperaturas ambientales:
T. mxima: 40 a 45 C
T. ptima: 25 a 37 C
T. mnima: 5 a 10 C
- Bacterias termfilas. Son los que se desa
rrollan a altas temperaturas:
T. mxima: 80 a 90 C
T. ptima: 50 a 55 C
T. mnima: 25 a 45 C
Presin osmtica
Como resultado de la presencia de la membrana
citoplasmtica, las bacterias, al igual que otras
clulas, pueden superar diferentes cambios os
mticos. En general pueden ser bastante toleran
tes, tanto que crecen en soluciones con contenido
de sales de 0,1 al 1%. Claro que el aumento o
disminucin de la presin osmtica puede causar
grandes daos a la clula bacteriana. Por ejem
plo, alta concentracin de solutos en el medio,
generan un medio hipertnico, entonces, por
osmosis se produce salida de agua del interio?-
68 / Microbiologa bsica para el rea de la salud y afines

de la bacteria que genera, casi siempre el efecto b. Bacterias anaerobias moderadas. Crecen
bactericida que se denomina plasmlisis (muerte en presencia de 2 a 8% de oxgeno y expuestas
de la bacteria). Tambin es posible que cuando el al oxgeno atmosfrico pueden sobrevivir por un
ambiente es hipotnico, y pese a la presencia de periodo de 60 a 90 minutos.
la pared bacteriana, se produzca un estallido de la c. Bacterias anaerobias aerotolerantes.
bacteria o plasmoptisis. Lo ideal es que la presin Pueden, como su nombre lo indica, tolerar el
osmtica del medio externo y del citoplasma oxgeno, pero son incapaces de utilizarlo para
sean iguales, es decir, que la bacteria est en un su metabolismo.
medio isotnico. d. Bacterias anaerobias facultativas. No
Sin embargo, tambin existen bacterias ca necesitan el oxgeno para su desarrollo normal,
paces de desarrollarse con presiones osmticas pero si est presente lo pueden utilizar metab-
muy altas, estas se conocen como bacterias os- licamente.
mfilas, estas bacterias se diferencian en varios 3. Bacterias microaerfilas. Necesitan el
grupos, entre ellas se encuentran: oxgeno, pero en concentraciones inferiores a las
1. Bacterias halfilas. Son bacterias que pue normales, porque su crecimiento se inhibe con
den crecer y desarrollar en concentraciones altas las concentraciones ptimas para las bacterias
de sal, como el gnero Staphylococcus. aerobias.
2. Bacterias sucrfilas. Se conocen tambin Las bacterias que metabolizan el oxgeno,
como sacarfilas, son bacterias que pueden cre utilizndolo como aceptor de electrones, poseen
cer y desarrollarse en concentraciones altas de una propiedad gentica que induce a la bacteria
azcar, por ejemplo, el gnero Pseudomonas. a sintetizar una enzima llamada catalasa, cuya
funcin es desdoblar el perxido de hidrgeno que
Potencial de xido-reduccin: eH se forma al ponerse en contacto el hidrgeno y
el oxgeno.
Se refiere a la propiedad que tienen algunos com
puestos de ceder electrones y otros, a ganarlos. Presencia de dixido de carbono: C 0 2
De esta forma, es posible predecir qu tipo de
bacterias van a desarrollarse en un medio deter Todas las bacterias requieren la presencia de pe
minado. El eH se mide en milivoltios (mV). queas cantidades de dixido de carbono (0,03%
Los gases que tienen ms importancia para el de C 02) para su crecimiento, que normalmente
cultivo de las bacterias son el oxgeno y el dixido proviene de la atmsfera o de reacciones de
de carbono. Con respecto al oxgeno libre, pueden xido-reduccin y fermentaciones de la propia
considerarse tres grandes tipos bacterianos: clula. Otras lo necesitan en mayor cantidad, de
1. Bacterias aerobias. Necesitan obligatoria 5 a 10% de C 02, para lo cual se crea un ambiente
mente el oxgeno para poder desarrollarse porque definido en los cultivos in vitro. Este tipo de bac
lo requieren como aceptor final de electrones en terias con metabolismo capnfilo (metabolizan
la cadena respiratoria. Requieren un eH de +200 el C 02) se conocen con el nombre de bacterias
a +300 mV. capnfilas.
2. Bacterias anaerobias. Se desarrollan en
ausencia de oxgeno libre y su presencia las inhibe Humedad
o las mata. Este tipo de bacterias se clasifica en:
a. Bacterias anaerobias estrictas. CrecenEl agua es un requisito indispensable para el
solo en ausencia de oxgeno y su presencia desarrollo bacteriano, porque en su composicin
las inhibe o las mata, porque son incapaces de las bacterias poseen 80% de agua y, adems, para
desarrollarse con una tensin de oxgeno (p02), sobrevivir requieren ambientes hmedos, pues
mayor de 0,5%. Slo podran desarrollarse cuan el ambiente excesivamente seco es lesivo para
do el eH es de -200 mV, como mnimo. la mayora de los microorganismos.

Nutrientes como fuente de energa
La nutricin bacteriana se realiza a travs de la
membrana citoplasmtica por los fenmenos
conocidos como difusin, principalmente por el
proceso de osmosis. Muchos microorganismos
pueden utilizar la energa que encuentran dispo
nible en compuestos orgnicos (organotrofia),
en compuestos inorgnicos (quimiolitotrofia),
y otros la pueden tomar directamente de la luz
(fototrofia) (vase figura 3.7).
Segn la fuente de obtencin de energa y
carbono, las bacterias se clasifican en autotrfi-
cas, si la fuente de carbono es el C 0 2 y hetero-
trficas, si la fuente de carbono la obtienen de
uno o ms compuestos orgnicos.
Autotrficas
Estas bacterias obtienen su rgimen alimenticio
de compuestos inorgnicos y la fuente de car
Nutricin y metabolismo de las bacterias / 69
bono del dixido de carbono. Estas bacterias
pueden ser:
1. Auttrofas fototrficas. Cuando el radical
dador de electrones (RH2) es un compuesto
inorgnico como el azufre (H2S). La energa
la toman de la luz y el carbono del dixido de
carbono (C 0 2).
2. Auttrofas quimiolitotrficas. Igualmente
el radical dador de electrones es un compuesto
mineral, pero la energa la toman de reacciones
de xido-reduccin producidas por la oxidacin
de compuestos orgnicos y el carbono del dixi
do de carbono (C 02).
Hetertrofas
Estas bacterias son incapaces de sintetizar sus
propios constituyentes a partir de compuestos
inorgnicos y requieren compuestos orgnicos
de carbono para obtener energa suficiente. Estas
bacterias pueden ser:
70 / Microbiologa bsica para el rea de la salud y afines

Tabla 3.2 Tipos nutricionales bacterianos segn la fuente de energa y carbono

En el grupo de las heterotrf icas quimioorganotrficas se ubican la mayora de bacterias patgenas
para el hombre

Tipo de Sustrato Fuente de:

nutricin oxidable dador
de hidrgenos Energa Carbono

Autotrficas Fototrficas Compuesto Luz Dixido de carbono

inorgnico (H2S)

Quimiolitotrficas Compuesto Reacciones Dixido de carbono

inorgnico (H2S) de xido-reduccin

Heterotrficas Quimiolitotrficas Compuesto Luz Compuesto orgnico

orgnico y en muy poca
cantidad del dixido
de carbono

Quimioorganotrficas Compuesto Reacciones Compuestos

orgnico de xido-reduccin orgnicos

1. Hetertrofas quimiolitotrficas. Su raccin de las enzimas extracelulares o por endo-

gimen nutricional lo componen compuestos citosis, es decir, que se encuentran en el entorno
orgnicos, la fuente de energa la provee la luz de las bacterias y pueden penetrar en ellas para
y la fuente de carbono la toman de compuestos ser aprovechados y as conformar las estructuras
orgnicos y algunas, en muy poca cantidad, del necesarias (vase figura 3.8).
dixido de carbono. Cuando los diversos componentes nutritivos
2. Hetertrofas quimioorganotrficas. Suhan ingresado al citoplasma bacteriano pueden,
rgimen nutricional es orgnico, la energa la en ciertos casos, sufrir algunas biotransforma-
toman de reacciones de xido-reduccin produ ciones que los llevarn a alcanzar el estado de
cidas por la oxidacin de compuestos orgnicos y nutriente bsico propiamente dicho. Debido a
la fuente de carbono de un compuesto orgnico. esto, los nutrientes bsicos se dividen en macro-
Prcticamente todas las bacterias patgenas para nutrientes y micronutrientes u oligoelementos,
el hombre estn incluidas en esta clasificacin segn los requerimientos de la clula bacteriana:
(vase tabla 3.2). grandes o pequeas cantidades.

Nutrientes necesarios Macronutrientes

para las bacterias
Los nutrientes que las bacterias requieren para
su desarrollo son: los nutrientes bsicos, los me-
tabolitos esenciales, los factores de crecimiento
y los factores estimulantes, que se describen a
continuacin.
Nutrientes bsicos
Para las bacterias, los nutrientes bsicos son
aquellos que pueden ser asimilados, bien sea por
difusin simple o por transporte activo, previa
En este grupo se ubican todos los compuestos
que hacen parte de los carbohidratos, lpidos
y protenas, como por ejemplo el oxgeno, el
hidrgeno, el carbono, el nitrgeno, el azufre y
el fsforo. Tambin se incluyen en este grupo el
agua y ciertos cationes.
1. Agua. No se concibe la vida bacteriana en
ausencia de este elemento, que es absolutamente
indispensable, tanto que representa de 80 a 90%
del peso de la bacteria.
2. Carbono. El dixido de carbono (C02) es
la principal fuente de carbono para los microor-
 Nutricin y metabolismo de las bacterias / 71

ganismos auttrofos y en pequeas cantidades croorganismos que pueden fijar enzimticamente

para los hetertrofos. Las fuentes orgnicas, de el nitrgeno atmosfrico (N,).
donde las bacterias hetertrofas toman su fuente 4. Fsforo. Es imprescindible para la vida por
de carbono, son muy diversas y su naturaleza que tambin forma parte importante de los cidos
puede ser glucdica (principalmente cuando su nucleicos, los fosfolpidos, los cidos teicoicos
nutricin incluye la glucosa como fuente ener y el adenosn-trifosfato (ATP). Se obtiene prin
gtica), proteica o lipdica. cipalmente de fosfatos inorgnicos, aunque su
3. Nitrgeno. Por ser un constituyente funorigen tambin puede ser orgnico, en este caso,
damental de los cidos nucleicos, de las lipo- las enzimas fosfatasas hidrolizan los steres de
protenas de la membrana citoplasmtica de las fosfatos y liberan el fosfato inorgnico libre.
bacterias Gram negativas y de las protenas, los 5. Azufre. Las bacterias utilizan el azufre in
microorganismos deben obtenerlo de fuentes orgnico para realizar la sntesis de aminocidos
inorgnicas, como las sales de amonio (NH3) o azufrados. Lo obtienen fundamentalmente en
las de nitrato (NO*), porque son escasos los mi forma de sulfatas (SO^~) que son reducidos por
72 / Microbiologa bsica para el rea de la salud y afines

la bacteria a cido sulfdrico (H2S) y luego lo los requieren para sintetizar, a partir de ellos,
incorporan a los aminocidos azufrados como aminocidos, lpidos y otras molculas impres
un grupo sulfidrilo (-SH). cindibles para su crecimiento y multiplicacin.
6. Cationes. En este grupo se incluyen: el
potasio (K), indispensable para la sntesis Factores de crecimiento
proteica; el magnesio (Mg2+), necesario para la
estabilidad ribosmica y como cofactor para el Los factores de crecimiento son compuestos
funcionamiento normal de numerosos sistemas orgnicos que, sin ser una fuente de energa o
enzimticos; el calcio (Ca+2), contribuye a la de carbono, son necesarios para el crecimiento
resistencia de los esporos bacterianos, entre otras bacteriano, pero no todas las bacterias son capa
funciones; el hierro (Fe2+ y Fe3+), es uno de los ces de sintetizarlos. Los factores de crecimiento
componentes ms importantes de los citocromos encajan bsicamente en tres grupos: 1) aminoci
y acta como cofactor enzimtico y es parte dos esenciales precursores de protenas; 2) bases
fundamental de las protenas transportadoras pricas y pirimdicas; 3) vitaminas que actan
de electrones. como coenzimas o precursores de coenzimas; las
principales vitaminas requeridas por los microorga
Micronutrientes u oligoelementos nismos son: tiamina, biotinaypiridoxina, y 4) otros
factores, stos se encuentran generalmente en la
Son pequesimas concentraciones de algunos sangre, como el factor X o hemina y el factor
elementos necesarios para el desarrollo bacteria V o nicotn-adenn-dinucletido, comnmente
no que, aunque son requeridos en pequeas can conocido con la sigla NAD+.
tidades, son tan indispensables para la nutricin Si una bacteria no tiene la capacidad de sin
como los macronutrientes. En este grupo apare tetizar alanina a partir de metabolitos esenciales,
cen elementos como el cobre (Cu2+), presente en este aminocido se convierte en un factor de
algunas enzimas respiratorias; el cobalto (Co2+), crecimiento para ella y la bacteria se clasificara
que es un componente de la vitamina B 12; el zinc como auxtrofa, por el contrario, si la bacteria es
(Zn2+), presente en centros activos enzimticos; capaz de sintetizar este factor de crecimiento (la
el molibdeno (Mo2+), necesario para la fijacin alanina) se clasifica como prottrofa. Si se parte
del nitrgeno atmosfrico; el manganeso (Mn2+), de este concepto, las bacterias se clasifican as:
cofactor de enzimas que transfieren fosfatos y 1. Bacterias prottrofas, cuando pueden
forma parte de algunas superoxidodismutasas, sintetizar factores de crecimiento.
entre otros. Estos elementos en grandes canti 2. Bacterias auxtrofas, cuando son incapa
dades se convierten en elementos txicos para ces de hacerlo respecto a un determinado com
las bacterias. puesto. Vase captulo de gentica bacteriana.
Esto explica los fenmenos de relaciones
Metabolitos esenciales simbiticas como el mutualismo, en el cual
dos organismos se benefician mutuamente, el
Productos que se forman como resultado de los comensalismo, donde un organismo se beneficia
procesos catablicos bacterianos y son importan sin causarle dao al otro o el satelitismo, en el
tsimos para la sntesis de estructuras complejas cual una bacteria crece prxima a otra que le
de las bacterias. Ejemplos de algunos metaboli suministra un factor de crecimiento.
tos esenciales obtenidos por la degradacin de
uno de los nutrientes bsicos bacterianos, como Factores estimulantes
la glucosa, catabolizada por la va glucoltica,
son: el piruvato o cido pirvico y la acetil Son sustancias no indispensables para las bac
coenzima A (ACoA). El piruvato y la acetil CoA terias, pero pueden acelerar su multiplicacin.
no son sintetizados por las bacterias, pero estas Este tipo de factores se usa comnmente en

las investigaciones cientficas. La utilizacin
correcta de los factores estimulantes la condi
cionan la clase de microorganismos y el tipo de
medio, entre otros. El tipo de factor estimulante
se selecciona dependiendo directamente de la
especie bacteriana que lo requiera.
Origen de los nutrientes bacterianos
Las bacterias, sobre todo, las que colonizan el
ser humano obtienen sus nutrientes de diferentes
fuentes, de las cuales pueden mencionarse tres
como las principales:
1. Fuente exgena. Es aquella que le aporta
nutrientes a las bacterias porque el hombre toma
compuestos del exterior y ellas obtienen, de estos
compuestos, los nutrientes necesarios para su
desarrollo. De esta manera, la dieta es la fuente
exgena ms importante.
2. Fuente endgena. Esta fuente brinda su
aporte nutricional a partir de secreciones (saliva,
fluidos vaginales u otro tipo de fluidos orgni
cos), tejidos epiteliales de los cuales proceden las
clulas epiteliales de descamacin, entre otros.
3. Fuentes interbacterianas. Las bacterias
pueden obtener sus nutrientes a partir de otras
bacterias de dos formas:
Degradativa. Cuando escinden o parten ma-
cromolculas para hacerlas asimilables y as ser
utilizadas por ellas mismas o por otras bacterias.
Excretora. Cuando algunas bacterias produ
cen una excesiva cantidad de sustancias que, al
excretarlas al exterior, sirven como fuente nu
tricional a bacterias que se encuentran ubicadas
muy prximas a las que las producen.
Medios de cultivo
Un medio de cultivo es un sustrato o solucin de
nutrientes en los que crecen y se multiplican los
microorganismos en el laboratorio, con el objeto
de aislar diferentes especies bacterianas, proceder
a su identificacin y llevar a cabo una serie de es
tudios complementarios. Los sustratos energticos
y la materia orgnica sinttica (sustratos como
protenas, derivados de la celulosa, etc.) pueden
suministrarse por sustancias nutritivas contenidas
Nutricin y metabolismo de las bacterias / 73
en la maceracin de carne y visceras. Los ami
nocidos o pptidos los aportan las peptonas, que
contienen todos los productos de degradacin de
las protenas, sin vitaminas, y su composicin
exacta vara segn el tipo de sustrato y enzima
utilizados, como pepsina, tripsina, papana, entre
otras. Los factores de crecimiento se suministran
por maceracin y adicin de sangre, suero, extrac
to de levaduras, lquido asctico, etc.
Clasificacin
Los medios de cultivo pueden clasificarse segn su
consistencia, origen, composicin y utilizacin.
Consistencia
Segn la consistencia los medios de cultivo se
clasifican en:
1. Lquidos. Contienen los nutrientes antes
citados, a los cuales se les adiciona una sustan
cia capaz de mantener el pH adecuado. Entre
los ms empleados estn: el caldo nutritivo y el
caldo peptona.
2. Slidos. Se obtienen agregando agar, sus
tancia polisacrida e inerte obtenida de algas ma
rinas del gnero Gellidium, en una concentracin
de 1,5 a 2,0%, a un medio lquido determinado.
Este conjunto, debidamente esterilizado, se
vierte en una caja de Petri o en un tubo de ensa
yo. Las exigencias nutritivas y las condiciones
fisicoqumicas son similares a las de los medios
lquidos. Pero a diferencia de ellos, ofrecen la
posibilidad de obtener colonias aisladas, siempre
que la cantidad del inoculo est suficientemente
diluida. En este caso se observa la existencia de
colonias separadas unas de otras.
3. Semislidos. Son muy semejantes a los me
dios slidos, con la diferencia que a estos se les dis
minuye la concentracin del agar agregado a 0,5%.
Se utilizan para la conservacin de cepas bacterianas
y la observacin y registro de bacterias mviles.
Origen
Segn su origen, los medios de cultivo se dividen
en medios sintticos y medios naturales.
74 / Microbiologa bsica para el rea de la salud y afines
Los medios sintticos o qumicamente de
finidos son medios compuestos por productos qu
micos conocidos y se usan para estudios metab-
licos. Ejemplo: agar nutritivo, agar blando, caldo
nutritivo, agar eosina azul de metileno, etc.
Los medios naturales o qumicamente no
definidos son aquellos medios preparados a partir
de sustancias naturales animales o vegetales,
de composicin no rigurosamente constante.
Ejemplo: el suero, la leche, la papa, etc.
Composicin y utilizacin
Segn su composicin y utilizacin los medios
de cultivo se clasifican en: simples, enriquecidos,
selectivos, diferenciales, de enriquecimiento, de
recuento y de transporte.
1. Medios simples. Poseen los requisitos
nutricionales mnimos para permitir el desarrollo
bacteriano en general. Ejemplos: agar nutritivo,
caldo nutritivo, entre otros.
2. Medios enriquecidos. Son medios simples o
comunes, a los que se aaden ciertos componen
tes como sangre, suero, lquido asctico, huevo,
glucosa, vitaminas, entre otros, que permiten el
aporte de factores de crecimiento o sustancias que
neutralizan agentes inhibidores del crecimiento,
en bacterias exigentes nutricionalmente. Son
diferentes para cada tipo de bacterias. Ejemplo:
agar sangre, enriquecido con sangre; medio de
Lowestein Jennsen, enriquecido con huevo para
facilitar el crecimiento de bacterias del gnero
Mycobacterium; agar desoxicolato-lactosa (DLA),
enriquecido con lactosa y desoxicolato.
3. Medios selectivos. Se consiguen aadiendo
al agar nutritivo compuestos qumicos nocivos
para las bacterias cuyo crecimiento no interesa
o tambin alterando las condiciones fsicas del
medio. El cristal violeta, por ejemplo, impide
el crecimiento de bacterias Gram positivas sin
afectar a las Gram negativas. Ejemplos: agar
Mac Conkey que contiene cristal violeta; Thayer-
Martin selectivo para Neisseria gonorrhoeae,
porque posee antibiticos como vancomicina,
colistina y nistatina; caldo lactosado bilis verde
brillante (caldo brila), selecciona bacterias del
grupo coliforme, posee bilis que inhibe las Gram
positivas y lactosa que favorece el crecimiento
de los coliformes; el DLA tambin favorece el
crecimiento de coliformes; medio de Lowestein
Jennsen ms verde de malaquita, selecciona
Mycobacterium tuberculosis.
4. Medios diferenciales. A estos medios de
cultivo se les adicionan sustancias para que
solo crezcan determinadas bacterias y estas, al
actuar sobre algunas de las sustancias adicio
nadas, permiten observar macroscpicamente
ciertas propiedades de crecimiento que ayudan
a diferenciar sus colonias de otras de especies
diferentes (vase figura 3.9).

Como medios diferenciales se utilizan: el
agar eosina azul de metileno (EMB), que dife
rencia colonias de Escherichia coli (color verde
metlico brillante), de las colonias de Entero-
bacter aerogenes color rosado, consistencia
m ucosa y crecim iento abundante); el DLA,
que, diferencia las colonias de coliformes (rojo
oscuro) de las otras bacterias; el agar sangre
que diferencia variedades de Streptococcuspyo-
genes en Streptococcus P-hemoltico (produce
una zona de hemolisis amplia que se visualiza
como un halo transparente alrededor de la colo
nia), Streptococcus a-hem oltico (produce una
zona de hemolisis estrecha) y el Streptococcus
y-hemoltico (no presenta zona de hemolisis)
(vase figura 3.9); el agar SS (agar Salmonella-
Shiguella) tiene lactosa y un indicador de pH que
permiten diferenciar las colonias de bacterias
termentadoras de este disacrido.
5. Medios de enriquecimiento. Medios lqui
dos que favorecen o permiten la multiplicacin
de bacterias cuando la muestra obtenida es muy
pobre. Ejemplos: el caldo de Thioglicolato fa
vorece el crecimiento de bacterias anaerobias;
el caldo tetrationato favorece el crecimiento de
microaerfilas; los caldos de bilis y de Muller-
Kauffinan favorecen el crecimiento del gnero
Salmonella; caldo o agua de peptona alcalina se
utiliza para el crecimiento de Vibrin cholerae.
6. Medios de recuento. Se utilizan para de
terminar el contenido bacteriano de sustancias
como leche, agua, carnes, etc. El nmero de co
lonias resultantes del sembrado de la muestra, se
cuentan macroscpicamente y, posteriormente,
se aplican frmulas matemticas para obtener el
resultado final, el cual se expresa como unidades
formadoras de colonia (UFC). Ejemplos: el agar
cuenta-grmenes (ACG) sirve para determinar
el nmero total de bacterias que existen en una
muestra; el DLA se utiliza para hacer el recuento
de bacterias coliformes; el agar estndar tambin
se emplea en el recuento total de bacterias.
7. M edios de transporte. Se utilizan para
asegurar la viabilidad de las bacterias y evitar
que se reproduzcan alterando el nm ero de
bacterias iniciales, desde el momento de la toma
de la muestra hasta su posterior siembra en el
Nutricin y metabolismo de las bacterias / 75
laboratorio o para su envo de unos laboratorios a
otros. Para evitar la reproduccin de las bacterias
estos medios no presentan nitrgeno, que es un
elemento indispensable para la divisin celular,
por ejemplo: medio de Stuart.
Un gran nmero de medios de cultivo mi-
crobiolgicos son mixtos, es decir, que por su
utilizacin pueden pertenecer a uno o ms de
los grupos ya descritos, como el medio Thayer
Martin, el cual se enriquece con plasma y es
selectivo porque contiene antibiticos; el agar SS
se recomienda para el aislamiento de Salmonella
y Shiguella. es selectivo porque contiene un
inhibidor de bacterias Gram positivas (verde bri
llante) y es diferencial porque contiene lactosa y
un indicador de pH. El agar DLA es enriquecido
con lactosa y desoxicolato; tambin es selectivo
porque favorece el crecimiento de coliformes,
y diferencial porque perm ite diferenciar las
colonias de bacterias coliformes (de color rojo
oscuro), de las otras colonias bacterianas que
pueden crecer en este medio de cultivo; para
completar, tambin es de recuento porque per
mite contar las colonias rojas pertenecientes al
grupo coliformes.
Fuentes de energa
Para todos los sistemas biolgicos, plantas, anima
les, procariotes, las fuentes de energa son: energa
radiante o lumnica y la energa qumica.
Energa radiante
Las plantas, las algas y las cianobacterias viven
autotrficamente porque utilizan la luz como
fuente de energa y el dixido de carbono como
nica fuente de carbono. Para que el dixido de
carbono pueda ser til en el metabolismo, debe
reducirse a carbohidrato. Este proceso de reduc
cin, en el que se utiliza la luz e interviene un
pigmento verde llamado clorofila, se denomina
fotosntesis vegetal. La reaccin general puede
formularse como aparece en la figura 3.10.
En este caso la frmula (CH 0 )X representa
cualquier carbohidrato. El proceso requiere
dos factores importantes: 1) una gran cantidad
76 / Microbiologa bsica para el rea de la salud y afines
de energa en form a de ATP y 2) una gran
cantidad de reductores qumicos, en este caso
el agua. Algunos grupos de bacterias, verdes y
purpreas, se caracterizan por su capacidad para
efectuar la fotosntesis, sin producir finalmente
oxgeno, pues a diferencia de las plantas, algas
y cianobacterias no utilizan agua como agente
reductor y, por tanto, no liberan oxgeno como
uno de los productos finales de la fotosntesis
bacteriana. La ecuacin general de la fotosn
tesis bacteriana m uestra la similitud de ambos
procesos.
En la reaccin fotosinttica bacteriana H2A
representa el trmino general para un compuesto
sulfreo inorgnico reducido o un compuesto
orgnico (lactato o succinato), si, por ejemplo,
H 0A representa el sulfuro de hidrgeno o cido
sulfdrico (H,S), A es, entonces, el azufre ele
mental (vase figura 3.10).
Energa qumica
Este tipo de energa es responsabilidad de una
serie de reacciones qumicas conocidas como
oxidaciones biolgicas o procesos respiratorios,
las que tienen por resultado la oxidacin de sus
tancias orgnicas con liberacin de energa. Su
finalidad es la obtencin de la energa necesaria
(ATP) para el crecim iento, as mismo, en el
curso de dichas reacciones se obtienen productos
intermedios, que pueden utilizarse como punto
de partida para la biosntesis. En general, se
puede afirmar que cuando la glucosa se oxida,
se producen deshidrogenaciones repetidas con
liberacin de electrones, que son transportados
por unas molculas especiales (cadenas trans
portadoras), hasta un aceptor final y la energa
liberada se almacena en forma de ATP.
Es necesario tener muy presen te que cuando
una sustancia se oxida pierde electrones y cuan
do se reduce, los gana.
Mecanismo de transm isin
de la energa qumica
La transferencia de energa de una m olcula
a otra constituye una propiedad esencial para
la vida, donde tiene un papel muy importante
el nucletido adenosn trifosfato o ATP. Este
nucletido puede recibir energa de diferentes
reacciones catablicas y transferirla a otras
molculas de baja energa.
El ATP acumula energa y por eso se conoce
como molcula almacenadora de energa, pero
esto sucede solo temporalmente porque la mol
cula de ATP solo existe durante un corto periodo
de tiempo antes de que su ltimo grupo fosfato se
libere y su energa se transfiera a otra molcula
en alguna va metablica (vase figura 3.11).
El almacenamiento de nutrientes por largos
periodos de tiempo solo puede realizarse por
molculas ms estables como la sacarosa, el
glucgeno, almidn y las grasas.
Adems del ATP existen otras molculas

con la capacidad de transferir energa que son
indispensables para la vida com o el flavn-
aclenn-dinucletido (FAD) y el nicotn-adenn- proceso se esquematiza en la figura 3.12.
dinucletido (NAD+).
El mecanismo de transferencia de energa
qumica ocurre de esta forma: cuando los tomos
de una molcula absorben energa, algunos de sus
electrones cambian de nivel energtico, pasando a
uno mayor, o sea, que se mueven hacia fuera. Los
electrones pueden energizarse tanto que tienen
que salir totalmente del tomo. Al ocurrir esto,
pares de electrones de alta energa son recogidos
Nutricin y metabolismo de las bacterias / 77
y transferidos a otra molcula por un transporta
dor de electrones, como el NAD+ o el FAD. Este
Entre los m ecanism os de transm isin de
energa qumica est la respiracin que puede
ser aerobia o anaerobia.
La respiracin aerobia es la reaccin de
oxidacin que utiliza el oxgeno molecular como
aceptor final de hidrgenos.
La respiracin anaerobia es la reaccin de oxi
dacin que utiliza un compuesto diferente al oxge
no molecular como aceptor final de hidrgenos.
78 / M icrobiologa bsica para el rea de la salud y afines
Tabla 3.3 Clases de oxidacin biolgica
Clases de oxidacin Aceptor final
de hidrgeno
Respiracin Aerbica Oxgeno
Anaerbica Compuesto dife
rente del oxgeno
Fermentacin Anaerbica Compuesto
orgnico
dador y aceptor
de hidrgenos
El trmino respiracin tiene un sentido muy
amplio y se refiere a todas las reacciones de libe
racin de energa (oxidaciones) que ocurren en
la clula, sin embargo, y solamente para motivos
didcticos, como las oxidaciones que utilizan el
oxgeno molecular y las que no lo utilizan.
Otro mecanismo es lafermentacin que corres
ponde a un proceso de oxidacin, en el que las
bacterias facultativas o anaerbicas obligadas
utilizan un compuesto orgnico como dador y
aceptor final de hidrgenos (vase tabla 3.3).
En los procesos degradativos, la glucosa ha
sido objeto de los estudios ms profundos y de
tenidos, los mismos han proporcionado un gran
conocimiento sobre este proceso, hasta el punto
que actualmente se tiene una imagen clara de su
intrincado desarrollo.
La primera etapa de la degradacin de la
glucosa se expone con minucioso detalle en
el modelo de Embden-Meyerhof-Parnas, esta
etapa se conoce con otros nombres, como: va
de Embden-Meyerhof-Parnas, fermentacin de
Embden-Meyerhof-Parnas, fase de a hexosa-
difosfato, va glucoltica o el ms conocido,
gluclisis o gliclisis.
Gluclisis
La esencia del proceso la sugiere su propio nom
bre, pues, su etimologa viene del griego glicos
que significa dulce y lisis que significa romper o
degradar. Literalmente, gluclisis es el rompi
miento de algo dulce, o sea, de la glucosa y esta
es ei azcar con el cual se inicia esta va.
La gluclisis es una de las vas principales
de degradacin de la glucosa y tal vez una de las
rutas ms importantes que utilizan las clulas
bacterianas para producir energa. En 1940 se
culmin exitosamente el establecimiento com
pleto de la va de la gluclisis. Tres investigado
res sobresalieron en este reto: Gustav Embden,
Otto Meyerhof y Jacob Parnas. Sus apellidos
bautizaron esta importante va metablica.
Otra ruta, utilizada por las bacterias, para
producir energa y considerada como va alterna
o atajo, es la llamada va o ruta de la pentosa
fosfato.
La gluclisis no requiere presencia de ox
geno, tiene lugar en el citoplasma y se lleva a
cabo, exactamente de la misma manera, tanto en
las clulas aerbicas como en las anaerbicas.
Cuando la gluclisis se da en una clula que
respira se le conoce como gluclisis aerobia.
Las reacciones iniciales de la gluclisis son
fosforilaciones de la glucosa, es decir, que la hexo-
sa (glucosa = C H O ), fija dos grupos fosfatos
antes de partirse o separarse en dos molculas de
tres carbonos llamadas dihidroxiacetona fosfato
(DHAP) y gliceraldehdo 3-fosfato (G3P) (las dos
molculas se conocen como triosas-fosfato). Las
reacciones se continan hasta formar dos molcu
las de piruvato (cido pirvico) que tambin es un
compuesto de tres carbonos (vase figura 3.13).
Por cada molcula de glucosa metabolizada
se producen cuatro molculas de ATP y se con
sumen dos. El balance neto, por tanto, es de dos
molculas de ATP producidas en la metaboliza-
cin de una molcula de glucosa por la ruta de
la gluclisis.
La gluclisis no solo genera ATP y produce
piruvato para la oxidacin en el ciclo del cido
ctrico sino que tambin es una ruta de sntesis,
porque los productos intermedios de esta va son
precursores de numerosos compuestos, princi
palmente aminocidos y lpidos.
La va o ruta cataltica se compone de una
serie de reacciones catalizadas por enzimas que
logran descomponer una molcula de glucosa de
seis carbonos y formar finalmente dos molcu
las de piruvato de tres carbonos cada una. Para
Nutricin y metabolismo de las bacterias / 79
80 / M icrobiologa bsica para el rea de la salud y afines
facilitar la comprensin y el seguimiento de las
reacciones, en la figura 3.13 se esquematizan
solo los esqueletos de carbono de la glucosa y
de las molculas que se van produciendo durante
la degradacin de la glucosa (gluclisis).
Cada flecha gruesa, de color verde azulado,
representa una reaccin que est siendo catali
zado por, al menos, una enzima. Cada paso se
explica a continuacin.
Paso uno. La molcula combustible de glu
cosa se energiza al recibir un grupo fosfato de
una molcula de ATP, as fosforila la molcula
de glucosa que cambia su nombre por el de
glucosa-6-fosfato.
Paso dos. La glucosa-6-fosfato sufre una
transposicin sencilla, es decir, reordena sus
tomos de hidrgeno y oxgeno. En esta reaccin
y mediada por la accin de una enzima, tipo
isomerasa, se convierte en su ismero (imagen
en espejo): fructosa-6-fosfato.
Paso tres. En este punto otra molcula de
ATP dona un grupo fosfato y se forma fructosa-
1,6-difosfato. Los grupos fosfatos se han unido
en los carbonos 1 y 6, y queda la molcula lista
para su disociacin. Hasta este momento se han
invertido en el proceso dos molculas de ATP y
todava no ha producido ninguna.
Paso cuatro. La fructosa-1,6-difosfato se
parte en dos triosas (molculas de tres carbonos
cada una) y se forma dihidroxiacetona fosfato o
fosfato de hidroxiacetona o simplemente cetosa
(DHAP), que puede convertirse por accin enzi
mtica en su ismero.
Paso cinco. La hidroxiacetona fosfato, por
accin enzimtica, sufre una transposicin a
gliceraldehdo-3-fosfato o aldosa (G3P), es
decir, que una enzima isomerasa lo convierte
en su ismero, as quedan dos molculas de
gliceraldehdo-3-fosfato, que continan el pro
ceso y generan idnticas reacciones.
Paso seis. Cada molcula de gliceraldehdo-
3-fosfato, sufre dos reacciones de deshidroge-
nacin, casi simultneamente. En cada reaccin
se donan dos electrones y un ion hidrgeno
al NAD+ para formar NADH+H+ y se une un
fosfato inorgnico, por medio de un enlace de
alta energa a cada molcula de gliceraldehdo-
3-fosfato, y se forman dos molculas de 1,3-di-
fosfoglic eruto.
Paso siete. Un fosfato de cada 1,3-difosfo-
glicerato se transfiere a sendos ADP para formar
ATP. As se producen dos molculas de ATP. Al
perderse los grupos fosfatos de cada molcula
de 1,3-difosfoglicerato, la molcula se convierte
en 3-fosfoglicerato.
Estos ATP producidos, compensan los dos
ATP iniciales consumidos en la activacin de
la glucosa.
Paso ocho. Por accin enzimtica el 3-fos-
foglicerato se reordena y el fosfato cambia de
posicin: pasa del carbono tres al carbono dos,
formando 2-fosfoglicerato. Esta es, simplemente,
una reaccin preparatoria para el paso siguiente.
Paso nueve. La reaccin que se produce aqu es
poco comn y genera un grupo fosfato rico en ener
ga por deshidratacin (prdida de una molcula
de agua) y no por deshidrogenacin (disociacin
de tomos de hidrgeno), como sera lo normal.
El producto que resulta es el fosfoenolpiruvato.
Este cambio lo media la enzima enolasa, la cual es
inactivada por la accin del ion flor y produce la
suspensin del proceso glucoltico, por tanto, ste
no concluira y no se obtendra el producto final
(piruvato). como metabolito esencial.
Paso diez. Cada molcula de fosfoenolpiru
vato transfiere el fosfato que tiene en el carbono 2
para formar ATP y de esta manera quedan, como
productos finales de la gluclisis, dos molculas
de piruvato.
En este paso final se produce, como se men
cion inicialmente, una ganancia neta de dos
ATP por cada molcula de glucosa.
Fermentacin
Cuando las condiciones de anaerobiosis con
tinan, muchos microorganismos, como las
levaduras, utilizan la va de la fermentacin para
producir alcohol; los lactobacilos, cido lctico
o muchos otros productos finales como lo hace
Escherichia coli.
La mayor parte de las bacterias fermentativas
dan lugar a diferentes productos por fermenta
cin de glucosa, pero ninguna especie es capaz

de originarlos todos. Por esta causa, es posible
agrupar los microorganismos en funcin de
los productos finales de fermentacin y de este
modo se encuentra una clasificacin que permite
diferenciar las bacterias en: bacterias heterofer-
mentativas y bacterias homofermentativas:
1. Bacterias heterofermentativas. Cuando
al fermentar la glucosa se obtiene una mezcla
de productos finales. Ejemplo: Escherichia coli
(vase figura 3.14).
2. Bacterias homofermentativas. Cuando el
resultado de la fermentacin de la glucosa es,
casi exclusivamente, un solo producto final. Por
ejemplo, Streptococcus lactis prcticamente solo
Nutricin y metabolismo de las bacterias / 81
produce cido lctico como nico producto final
al fermentar la glucosa (vase figura 3.15).
Va o ciclo de la pentosa fosfato
Esta ruta de degradacin de carbohidratos lleva
aparejada la formacin de fosfatos, azcares de
6 tomos de carbono (hexosas monofosfatos) y
de 5 tomos de carbono (pentosas monofosfatos).
Como esta ruta incluye algunas de las reacciones
de la gluclisis, se la considera como un atajo
o va alterna a la va glucoltica. La glucosa pue
de oxidarse por la va de la pentosa fosfato con
liberacin de pares de electrones, que pueden
82 / Microbiologa bsica para el rea de la salud y afines
entrar en la cadena de transporte electrnico. Sin
embargo, este ciclo no se considera como una de
las principales vas de produccin de energa en
la mayor parte de los microorganismos.
La va de la pentosa fosfato se utiliza princi
palmente para labiosntesis, ya que aporta sustan
cias que se emplean en la sntesis de nucletidos.
Aunque sea una alternativa para la oxidacin
de la glucosa, tambin puede aportar energa
mediante utilizacin de azcares de 5 tomos de
carbono. Al igual que la va glucoltica, la ruta
de la pentosa fosfato se da tanto en procariotas,
como en eucariotas (vase figura 3.16).
Existen otras rutas de degradacin de carbo
hidratos, como la Entner-Doudoroff que tambin
son comunes a procariotas aerobios y anaerobios.
Algunos microorganismos catalizan nicamente
una de estas rutas, mientras que otros utilizan
ms de una, ya sea simultneamente o no. La
utilizacin de estas ratas depende de que hayan
heredado la correspondiente capacidad para ha
cerlo y del ambiente en que se desarrollen.
Catabolismo de los carbohidratos
Los carbohidratos son sustancias numerosas y
muy variadas, pero todas tienen como compo
nentes carbono, hidrgeno y oxgeno. Antes de
entrar en la forma de degradacin de los carbohi
dratos, conviene recordar algo muy general sobre
la naturaleza de estos compuestos. Es necesario
dividirlos en dos grupos: grupo A y grupo B.
1. Grupo A. En este grupo se incluyen los
carbohidratos ms simples y elementales, de
nominados monosacridos y son carbohidratos
compuestos por una sola molcula. Ejemplo:
glucosa (C6H 120 6).
2. Grupo B. A este pertenecen los carbohidra
tos ms complejos, denominados: polisacridos,
trisacridos y disacridos
a. Disacridos. Son carbohidratos compues
tos por dos molculas.
Ejemplos: sacarosa = glucosa + fructosa
maltosa = glucosa + glucosa
lactosa = glucosa + galactosa
b. Trisacridos. Son carbohidratos compues
tos por tres molculas.
Ejemplo: rafinosa - glucosa + galactosa +
fructosa
c. Polisacridos. Son carbohidratos com
puestos por una molcula que se repite n veces.
Ejemplo: celulosa = (glucosa)n. Este polisacrido
se cataboliza como se observa en la figura 3.17.
En general, la desarticulacin de los com
puestos del grupo B tiene lugar fuera de la clula
por accin de las enzimas extracelulares, de
gradndolos de polisacridos a monosacridos.
Las reacciones enzimticas son hidrolticas y

como se llevan a cabo en el exterior de la clula
las reacciones son hidrolticas extracelulares.
La importancia de estas reacciones radica en la
transformacin de sustratos complejos e inesta
bles a sustratos simples y estables que puedan
penetrar al interior de la clula.
Degradacin de los monosacridos
Cuando estos carbohidratos sencillos penetran en
la clula bacteriana, sufren la accin de las enzi
mas intracelulares y se obtiene de estas reacciones
la principal fuente de energa. Obsrvese la reac
cin general al degradarse, por accin enzimtica,
el monosacrido glucosa (vase figura 3.18).
Nutricin y metabolismo de las bacterias / 83
Las etapas iniciales de la degradacin de la
glucosa hasta la formacin de piruvato siguen la va
de la gluclisis o alguna variacin del proceso. El
piruvato (cido pirvico) puede considerarse como
el eje de la fermentacin de los carbohidratos.
El piruvato formado por gluclisis puede
sufrir una nueva oxidacin y de esta serie de
reacciones catalizadas enzimticamente resulta
la produccin de acetil coenzima A (AcoA), que
entra al ciclo del cido ctrico.
Ciclo del cido ctrico
Este ciclo es una ruta presente en los microor
ganismos aerobios, que facilita el consumo de
84 / Microbiologa bsica para el rea de la salud y afines
oxgeno y al mismo tiempo suministra interme
diarios tiles para la biosntesis de aminocidos,
cidos grasos y bases nitrogenadas, entre otros
compuestos.
El ciclo del cido ctrico tambin se conoce
como ciclo del cido tricarboxlico (TCA) y con
el nombre ms tradicional: ciclo de Krebs, en ho
nor al doctor Hans Krebs, cientfico y bioqumico
alemn de nacimiento, pero inmigrante en la Gran
Bretaa, a quien se le debe el descubrimiento de
esta va metablica. Descubrimiento que lo hizo
acreedor al Premio Nobel en 1953. Se caracteriza
por ser una secuencia de reacciones que generan
energa, en forma de ATP y de molculas de coen
zima reducidas como NADH+H y FADH .
2
Este ciclo tambin desempea otras funcio
nes: muchos de sus intermediarios son tambin
precursores de la biosntesis de aminocidos,
purinas, pirimidinas, etc.
Por tanto, el ciclo del cido ctrico es un
ciclo anfiblico, es decir, que no funciona solo en
el catabolismo (degradacin), sino tambin en
reacciones anablicas (sntesis).
Para dar inicio al ciclo cada molcula de
piruvato entra en el ciclo del cido ctrico me
diante una reaccin de transicin que produce
dos electrones de alta energa y una molcula
de dixido de carbono. El grupo acetilo que se
forma lo recoge la coenzima A (CoA) y entra en
el ciclo que se esquematiza en la figura 3.19, en
una serie cclica de 7 pasos.
Reaccin de transicin
Es aquella en la que el piruvato se convierte en
acetilo, libera C 02y electrones de alta energa
que son transportados por el NADH.
Paso cero. Cada molcula de piruvato,
de tres carbonos, sufre una descarboxilacin
(prdida de un grupo C 00). Al descarboxilarse
se pierde un tomo de carbono y los electrones
liberados son transportados por la coenzima
NAD+(en estado qumico oxidado) la cual queda
como NADH+H, es decir, pasa a estado quimico
reducido. Por tanto, el piruvato se convierte en
un grupo acetilo con dos carbonos.
Paso 1. Se produce una hidratacin, al ganar
una molcula de agua, y la CoA se une al acetilo
para formar acetil CoA.
Paso 2. La acetil CoA dona su grupo acetilo
al oxalacetato (cido oxalactico de cuatro car
bonos), para formar el citrato (cido ctrico de
seis carbonos).
Paso 3. El citrato por accin de una enzima
tipo isomerasa sufre una transposicin a isocitra-
to (cido isoctrico de cuatro carbonos).
Paso 4. El isocitrato sufre una descarboxila
cin y pierde un tomo de carbono, entonces, se
forma a-cetoglutarato (cido a-cetoglutrico).
Los dos electrones de alta energa liberados son
transportados por NAD+para formar NADH+H.
Paso 5. El a-cetoglutarato sufre una nueva
descarboxilacin con su consiguiente prdida
de un tomo de carbono y se forma succinato
(cido succnico). Los dos electrones de alta
energa liberados son transportados por NAD+
para formar NADH+H.
Paso 6. La energa qumica se transfiere fuera
del ciclo hasta el ATP. En este paso un ADP (ade-
nosna difosfato), cede un grupo fosfato al GDP
(guanidina difosfato) y se convierte en GTP (gua-
nidina trifosfato) que es un compuesto similar al
ATP y luego se convierte en este ltimo.
Paso 7. El succinato se oxida y los dos
electrones de alta energa son transportados por
medio del portador de electrones FAD, que queda
cargado y se convierte en FADH,. De esta forma,
el succinato pasa a fumarato (cido fumrico).
Paso 8. El fumarato recibe la adicin de una
molcula de agua (hidratacin) y se convierte en
malato (cido mlico).
Paso 9. El malato es objeto de deshidro-
genacin y se convierte en oxalacetato (cido
oxalactico). Los dos electrones de alta energa li
berados son transportados por NAD+para formar
NADH+H. De esta manera y en este momento el
oxalacetato puede combinarse con una molcula
de CoA y as comienza nuevamente el ciclo.
Cadena de transporte electrnico
La cadena de transporte electrnico tambin se
conoce como sistema de citocromos o cadena
respiratoria. Es una secuencia de reacciones
Nutricin y metabolismo de las bacterias / 85
 Nutricin y metabolismo de las bacterias / 87

de oxidacin-reduccin (oxidoreduccin) para - Un grupo carboxlico (-COOH), llamado

la generacin de ATP. Esta secuencia de reac tambin, cido carboxlico.
ciones funciona captando electrones, a partir - Un hidrgeno.
de compuestos reducidos, y transfirindolos al - Un grupo variable que se representa por
oxgeno con la consiguiente formacin de agua. las letras GV.
En varios de los pasos intermedios se libera su El grupo variable (GV), por ser diferente
ficiente energa para sintetizar ATP, a partir de en cada aminocido, le confiere a cada uno sus
ADP y fosfato inorgnico. Esta sntesis de ATP propiedades caractersticas (vase figura 3.22).
se denominafosforilacin oxidativa, debido a la En la sntesis de las protenas, l grupo
formacin de enlaces altamente energticos en amino (-NH2) de un aminocido se une a otro
los que interviene el fosfato. aminocido por el carbono del grupo carboxilo
En la figura 3.20 se observa que los tomos (-COOH), y forman un enlace covalente senci
de hidrgeno (electrones ms protones H+), llo, que toma el nombre de enlace peptdico, por
que pierden las sustancias que se oxidan y son consiguiente la cadena resultante es un pptido
transferidos al oxgeno molecular y forman (vase figura 3.23).
agua. En esta transferencia intervienen las en Los aminocidos se van uniendo uno por
zimas deshidrogenasas que contienen NAD+ uno hasta que la protena queda completa. En
(nicotn-adenn-dinucletido) o NADP (fosfato las clulas vivas las cadenas de aminocidos
de nicotn-adenn-dinucletido) o FMN (flavn- varan en su longitud (desde tres hasta miles de
mononucletido) y citocromos que contienen aminocidos). As que a las cadenas largas (de
hierro. Tambin se observa que en tres pasos 50 o ms aminocidos de longitud) se les reserva
especficos de la cadena, tiene lugar la sntesis el nombre de protena o polipptido y las cade
de ATP. Los electrones extrados por oxidacin nas que estn por debajo de esta longitud (ms
de sustancias inorgnicas como N 02, H, y H2S, cortas) se les llama pptidos.
pueden tambin alimentar la cadena de transpor El proceso de degradacin de las protenas
te de electrones para producir energa. se llama protelisis o hidrlisis de las protenas
As se obtiene el ATP en la cadena de trans y lo llevan a cabo por enzimas proteolticas
porte electrnico, por parte de las bacterias exocelulares.
quimioauttrofas (vase figura 3.20). Solo un reducido grupo de bacterias puede
La figura 3.21 presenta una visin general de producir enzimas proteolticas, en este grupo se
todo el proceso catablico de los carbohidratos encuentran los gneros Clostridium, Bacillus,
en condiciones de anaerobiosis y aerobiosis. Proteus y Pseudomonas. El proceso de prote
lisis ocurre en dos etapas:
Catabolismo de las protenas En la primera etapa, las enzimas proteo
lticas degradan las protenas en molculas
Las protenas son los principales constituyentes ms sencillas llamadas pptidos, es decir,
nitrogenados de todos los sistemas biolgicos aminocidos unidos por enlaces peptdicos.
(animales, plantas y procariotes). Las protenas se En la segunda etapa, se realiza la conversin
componen aproximadamente de 20 aminocidos de los pptidos, por accin de una peptidasa,
unidos por enlaces peptdicos, son molculas muy en aminocidos (vase figura 3.24).
grandes y, por tanto, deben ser desarticuladas para Algunos productos finales originados por
penetrar a la clula y servir como elementos nu- bacterias del gnero Clostridium son muy ma
tricionales. Todos los aminocidos presentan una lolientes de modo que el olor a putrefaccin
estructura bsica compuesta por un carbono central en general revela la accin y, por supuesto,
unido a cuatro grupos funcionales diferentes: la presencia de estas bacterias que tienen su
- Un grupo amino (-NH2), que contiene hbitat en el suelo, especficamente, en zonas
nitrgeno. donde no existe la presencia de oxgeno. Entre
88 / Microbiologa bsica para el rea de la salud y afines
estos productos se encuentran el cido sulfdrico
(H2S), el cido isovalrico, el cido isobutrico,
derivados de aminocidos azufrados como los
mercaptanos; derivados del aminocido omitira
como la putrescina: la omitina se descarboxila
por accin de la enzima omitira descarboxilasa
para dar 1,4-diaminobutano, ms conocido con
el prosaico nombre de putrescina por causa de
haber sido aislada por primera vez de la carne
en descomposicin o putrefacta; derivados de
la Usina como la cadaverih yi sl amoniaco. La
cadaverina es un homlogo de la putrescina que
tambin se sintetiza por descarboxilacin pero
de la Usina.
Nutricin y metabolismo de las bacterias / 89
90 / Microbiologa bsica para el rea de la salud y afines
Figura 3.25 Catabolismo de los lpidos
Catabolismo de los lpidos
Las grasas son compuestos resultantes de la
esterificacin o combinacin, de la glicerina y
cidos grasos. El proceso de degradacin de los
lpidos se llama liplisis. Las grasas pertenecen
a los lpidos donde tambin se incluyen fosfol
pidos y esterles.
Los lpidos de la mayora de los organismos
se encuentran en forma de triacilgliceroles
(antes denominados triglicridos). Las enzimas
responsables del proceso lipoltico se llaman
lipasas o enzimas lipolticas, que degradan
mediante hidrlisis los triacilgliceroles para
convertirlos en glicerol y cidos grasos (vase
figura 3.25).
La glucosa es la fuente de energa ms
importante para la mayora de las clulas. Sin
embargo, sustancias como los lpidos y las pro
tenas pueden utilizarse como vas alternativas.
Estos sustratos al ser metabolizados tienen un
intermediario comn que es la acetil coenzima A
(ACoA) y el ciclo del cido ctrico es la ruta
comn de oxidacin (vase figura 3.26).
Reproduccin y desarrollo
bacterianos
Cuando las bacterias se siembran en un medio
de cultivo con condiciones adecuadas se produce
un incremento, muy marcado, en el nmero de
clulas en periodos de tiempo muy cortos. En
algunas especies se alcanza la poblacin mxima
en 24 horas, en cambio, en otras se necesita un
periodo ms largo para alcanzar el mximo de
sarrollo. Ejemplos: 1) Escherichia coli, duplica
la poblacin entre 15 y 20 min; 2) Mycobac
terium tuberculosis, lo hace en 792 a 932 min
o, lo que es igual, 13,2 a 15,5 horas, cuando
crece en un medio sinttico; 3) Staphylococcus
aureus, sembrado en un caldo lo hace entre 27
y 30 min; 4) Treponema pallidum inoculado en
testculos de conejo, lo realiza en 1.980 min, es
decir, 33 horas.
Las formas ms comunes de reproduccin
bacteriana son: fisin binaria transversa, frag
mentacin, esporas y gemacin.
Fisin binaria transversa
Es un proceso de reproduccin asexual, por medio
del cual una clula se divide en dos clulas idnti
cas llamadas clulas hijas, despus de formar una
pared celular transversal o tabique divisorio.
Fragmentacin
Al igual que la anterior, es una forma de repro
duccin asexual. Se da en bacterias que producen
un desarrollo filamentoso extenso, seguido de la
fragmentacin de esos filamentos en pequeas
clulas bacilares o cocoides, cada una de las cua
les dar origen a un nuevo desarrollo. Ejemplo:
bacterias del gnero Nocardia.
Nutricin y metabolismo de las bacterias / 91
92 / Microbiologa bsica para el rea de la salud y afines
Esporas
El gnero bacteriano Streptomyces se caracteriza
por producir esporas con capacidad reproducti
va y cada una de ellas dar origen a un nuevo
individuo. Esta forma de reproduccin debe ser
diferenciada de la forma de resistencia conocida
con el nombre de esporo, vista en el captulo 2
sobre morfofisiologa bacteriana.
Gemacin
Por este mtodo se reproducen bacterias del g
nero Hypomicrobium sp. Del tallo de la clula
madre surge un crecimiento autnomo de forma
bulbosa o yema, y despus de un periodo de
alargamiento se separa de la clula progenitora
como una nueva clula.
De cualquier forma el proceso ms comn
de reproduccin bacteriana es la fisin binaria
transversa. El incremento poblacional se produce
en progresin geomtrica: 1, 2, 4, 8, 16, etc. El
tiempo necesario para que se duplique la pobla
cin se denomina tiempo de generacin (vase
figura 3.27).
Ciclo de desarrollo normal
de los cultivos bacterianos
Este ciclo tambin se menciona por muchos au
tores como la curva de crecimiento bacteriano,
porque cuando se estudia el desarrollo de un
cultivo de bacterias se observa que ocurren varias
etapas en forma sucesiva, con caractersticas
diferentes y muy especficas de cada etapa.
El trmino crecimiento, tal como se aplica
de forma usual a las bacterias y a otros micro
organismos, se refiere comnmente a cambios
en la cosecha celular (aumento en la masa total
de clulas), ms que a cambios en un organismo
en forma individual.
El inoculo inicial contiene miles de orga-

nismos; el crecimiento denota el incremento
del nmero o la masa, por encima del inoculo
original. Como ya se mencion, suponiendo
que el inoculo inicial fuera una sola bacteria, el
incremento se expresara como: 1, 2, 22, 23, 24,
25....... 2n. Al realizar el grfico se pone de mani
fiesto cada una de las cuatro fases de desarrollo
(vase figura 3.28).
Fase lag o de adaptacin
La siembra de bacterias en un medio nuevo no
va seguida de la duplicacin inmediata de la po
blacin. Por el contrario, la poblacin permanece
temporalmente inalterada, como se aprecia en la
curva normal de desarrollo. Sin embargo, esto no
implica que las clulas permanezcan inactivas o
latentes, al contrario, durante este estadio, cada
una de las clulas incrementa su tamao ms
all de las dimensiones normales. En trminos
fisiolgicos, se encuentran totalmente activas y
sintetizando citoplasma nuevo.
Las bacterias en este nuevo ambiente pueden,
quizs, encontrarse deficientes en enzimas y
coenzimas que primero deben ser sintetizadas en
las cantidades necesarias, para que la maquinaria
bioqumica celular funcione de manera ptima.
Se requiere tiempo para establecer ajustes
en el medio fsico que rodea a cada clula. Los
Nutricin y metabolismo de las bacterias / 93
organismos presentan gran actividad metablica,
pero existe un retardo en la divisin celular. Al
final de esta fase (lag) cada organismo se divide,
y si bien, no todos los organismos completan de
manera simultnea esta fase, se presenta un in
cremento gradual en la poblacin hasta el final
del periodo, cuando todas las clulas son capaces
de dividirse a intervalos regulares.
Fase logartmica o exponencial
Se conoce, tambin, como fase log. Durante este
periodo las clulas se multiplican regularmente
a ritmo constante si se grafica el logaritmo del
nmero de clulas contra tiempo, da una lnea
recta con mucha tendencia a la verticalidad.
En condiciones apropiadas durante esta fase
el grado de desarrollo es mximo. La pobla
cin de microorganismos es casi uniforme en
composicin qumica, actividad metablica y
otras caractersticas fisiolgicas. El ritmo de
reproduccin regular y constante quiere decir
que cada divisin sucesiva tarda el mismo tiem
po que la divisin que la precedi. El tamao
de las bacterias se reduce considerablemente y
alcanzan el tamao tpico de su especie, esto
se explica porque la reproduccin es tanta y
tan rpida que el medio comienza a declinar
nutricionalmente.
94 / Microbiologa bsica para el rea de la salud y afines
Fase estacionaria
Despus de varias horas de la terminacin de la
fase logartmica, el desarrollo comienza a dismi
nuir y vuelve gradualmente a presentar la lnea
recta horizontal que se observa en el grfico.
Esta tendencia al cese de desarrollo se atri
buye a diferentes factores, principalmente al
agotamiento de nutrientes del medio y a la pro
duccin de sustancias txicas que se acumulan
en el medio.
Esto lleva a que se produzca un equilibrio
entre el ndice de supervivencia y mortalidad
0nmero de bacterias vivas = nmero de bacte
rias muertas), esto conduce a que la poblacin se
mantenga constante por un tiempo porque cesa
por completo la divisin celular.
Fase de declinacin, decadencia
o muerte
Despus del periodo estacionario las bacterias
entran en una fase de decadencia y comienzan
a morir ms rpidamente que la produccin de
clulas nuevas, si acaso se producen algunas.
Sin duda, una gran variedad de condiciones
contribuyen a la muerte bacteriana, pero las
ms importantes son el agotamiento de las sus
tancias nutritivas esenciales y la acumulacin
de productos inhibitorios, en especial cidos.
Durante la fase de muerte, el nmero de clulas
viables desciende geomtricamente (en forma
exponencial), a la inversa de lo que sucede en la
fase logartmica. Las bacterias mueren en dife
rentes periodos de igual manera que lo hacen al
desarrollarse. Algunas especies de cocos Gram
negativos mueren rpidamente, de tal manera que
habr muy pocas clulas viables en un cultivo
prolongado de 72 horas y en ocasiones un poco
menos. Otras especies mueren tan lentamente
que pueden persistir clulas viables durante
meses o aos.
Periodo de transicin entre las fa ses
de desarrollo
Es de anotar que los cultivos avanzan de forma
gradual de una fase de desarrollo a la siguiente.
Esto significa que no todas las clulas estn
exactamente en condiciones fisiolgicas idnti
cas hacia el final de la fase de desarrollo dada.
El periodo de tiempo que transcurre entre la
terminacin de una fase y el inicio de la otra, se
conoce con el nombre de periodo de transicin.
En la figura 3.28 se representan estos periodos
con las tres lneas perpendiculares que atraviesan
la lnea generada al graficar la curva de creci
miento bacteriano.
Metabolismo bacteriano: sumario
Para que una clula pueda vivir, crecer y reprodu
cirse debe ser capaz de realizar un gran nmero de
transformaciones qumicas. Tiene que modificar
las sustancias nutritivas del medio para que pue
dan penetrar a su interior y, una vez incorporadas,
realizar en ellas nuevas trasformaciones. Con al
gunos de los materiales asimilados, debe sintetizar
los componentes que forman la estructura celular
y a otros someterlos a procesos de degradacin
que suministrarn la energa necesaria para
realizar esas sntesis. Todas estas operaciones se
cumplen gracias a las enzimas.
El gran nmero de procesos organizados de
actividades qumicas que desarrolla la clula se
denomina metabolismo y comprende fenmenos
de dos tipos generales:
1. Catabolismo o desasimilacin, es la
degradacin o desarticulacin del sustrato. Se
produce energa.
2. Anabolismo o asimilacin, es la compo
sicin o sntesis de materiales por la clula. Se
utiliza la energa.
En el metabolismo se producen reacciones
qumicas que desde el punto de vista energti

co se consideran exergnicas, productoras de
energa, o endergnicas, que requieren energa.
Dicho en otras palabras, en algunas reacciones
se desprende energa, mientras que otras no se
desarrollan si no se suministra un suplemento
energtico que incremente el contenido energ
tico de las partes que reaccionan.
Preguntas para autocontrol
del aprendizaje
1. Defina los siguientes trminos: coenzima,
cofactor, apoenzima, grupo prosttico,
enzima y holoenzima.
2. Cul es la relacin entre vitaminas y coen
zimas?
3. Explique dos de las propiedades caracters
ticas de una enzima.
4. Por qu son importantes las vitaminas en
la actividad celular?
5. Que se entiende por sistema enzimtico?
6. Cules son las 6 clases principales de
enzimas y sus reacciones catalticas?
7. Qu es un sitio activo en una enzima?
8. Qu es un sitio alostrico en una enzima?
9. Argumente acerca de los factores que afec
tan la actividad de una enzima.
10. Relacione la palabra fermentos con las
enzimas.
11. Qu es un catalizador biolgico? Expli
que.
12. Defina: exoenzima, endoenzima, enzima
constitutiva, enzima inductiva.
13. Cules son las reacciones enzimticas
fundamentales? Defnalas.
14. Qu es una isoenzima?
15. Explique el concepto activacin del sustra
to. Ejemplifique.
16. Respecto a la inhibicin de la accin en
zimtica, explique: inhibicin reversible,
inhibicin irreversible e inhibicin com
petitiva y no competitiva.
17. Qu se entiende por metabolismo y en qu
grupos se dividen las reacciones metabli-
cas? Explique.
18. Qu es una reaccin energtica?
19. Qu es una reaccin biosinttica?
Nutricin y metabolismo de las bacterias / 95
20. Qu es un nutriente? D ejemplos.
21. Explique la afirmacin: Las bacterias
poseen poder de seleccin.
22. Mencione las condiciones fisicoqumicas
necesarias para el crecimiento bacteriano
y explique cada una de ellas.
23. Por medio de un esquema explique la clasi
ficacin bacteriana respecto a la utilizacin
o no del oxgeno.
24. Explique los tipos nutricionales bacterianos
segn la fuente de energa.
25. Cules son los requerimientos nutriciona
les ms importantes para las bacterias?
26. Explique qu se entiende por medio de
cultivo.
27. Cmo se clasifican los medios de cultivo
segn su: consistencia, origen, composicin
y utilizacin? D varios ejemplos de cada
uno de ellos.
28. Cules son las fuentes de energa para
todos los sistemas biolgicos?
29. A qu procesos se conocen con el nombre
de oxidaciones biolgicas? Explquelos
30. Diferencie didcticamente entre las oxida
ciones que utilizan el oxgeno molecular y
las que no lo hacen.
31. Qu es la gluclisis, con qu otros nombres
se conoce, dnde se realiza, de qu tipo son
las reacciones enzimticas iniciales, cul es
el producto final de la gluclisis?
32. Cuntos ATP totales y netos se producen
en esta reaccin y bajo qu condiciones
fsicas?
33. Defina claramente qu son bacterias hete-
rofermentativas y homofermentativas. D
ejemplos.
34. Todas las bacterias utilizan la va de la
gluclisis? Justifique su respuesta.
35. Explique detenidamente el catabolismo de
los carbohidratos.
36. Explique en forma clara y concisa el ciclo
del cido tricarboxico. Qu sucede con
los pares de electrones liberados, cuntos
ATP se producen?
37. Explique la secuencia de reacciones de
xido-reduccin conocida como cadena de
transporte electrnico.
96 / M icrobiologa bsica para el rea de la salud y afines
38. Explique el proceso del catabolismo de las
protenas.
39. Explique el proceso del catabolismo de los
lpidos.
40. Realice un esquema que integre los proce
sos metablicos de carbohidratos, lpidos y
protenas.
41. Cules son las principales formas de re
produccin bacteriana ms comunes?
42. Qu es tiempo de generacin? Cmo se pro
duce el incremento poblacional bacteriano?
43. Explique el ciclo de desarrollo normal de
los cultivos bacterianos. Mencione y defina
todas sus etapas.

Gentica bacteriana
L a gentica se compromete con el estudio de
la variabilidad y la herencia de las caracters
ticas de un organismo, sea este eucaritico o
procaritico. Las investigaciones sobre gentica
bacteriana han sido las contribuciones ms alen
tadoras aportadas a la biologa, al final del siglo
xx y lo que va de este, debido a que las leyes
de la herencia se cumplen para todos los seres
vivos de igual forma. Antes de estos adelantos,
el nico camino que exista para hacer anlisis
genticos eran los experimentos en los que se
utilizaban apareamiento de animales o plantas
superiores. Actualmente, los experimentos del
siglo pasado, han cedido el paso a las inves
tigaciones genticas con bacterias, debido a
que aquellos experimentos tienen limitaciones
insalvables como: la lentitud de la reproduccin
y el escaso nmero de individuos que resultan
de cada apareamiento.
Al establecer la similitud entre los sistemas
genticos de las bacterias y los de las formas
superiores de vida se lleg al uso experimental
de las bacterias, en particular, la bacteria Escheri-
chia coli, para dilucidar los principios fundamen
tales de la gentica. Adems, las bacterias poseen
varios sistemas exclusivos de recombinacin
gentica, que se tratarn ms adelante.
Por recombinacin gentica se entiende que las
clulas descendientes pueden surgir con combinacio
nes de genes diferentes de los de sus antecesores.
Los microorganismos y en especial las
bacterias se multiplican con gran rapidez; E.
coli, en su etapa logartmica de desarrollo, se
duplica a intervalos aproximados de 20 min, lo
cual resulta excelente porque se tiene una nueva
4
generacin, con millones de individuos, cada
veinte minutos. Esto quiere decir, que despus
de 24 horas de incubacin se obtendra una po
blacin compuesta por ms de 2.000.000.000 de
individuos por mililitro.
cido desoxirribonucleico (ADN)
El cido desoxirribonucleico o ADN, es la sus
tancia qumica responsable de la transmisin
de la informacin hereditaria. El ADN es el
constituyente del cromosoma de las clulas
bacterianas. En su estructura se codifica la in
formacin para la sntesis de todas las protenas
celulares. Discretos segmentos del ADN, o del
cromosoma, son los denominados genes, que
codifican cada una de las protenas. Esta infor
macin se transmite de clula a clula por causa
de la replicacin del ADN.
El ADN es una molcula larga, parecida a una
cuerda, compuesta usualmente por dos filamen
tos, cada uno de ellos enroscado en tomo al otro
formando una doble hlice. Cada filamento de
la hlice de ADN est formado por nucletidos
unidos entre s para formar una cadena que se
llama polinucletido. Cada nucletido consta
de tres partes:
1. Una base nitrogenada, puede ser una:
Purina: adenina o guanina (A - G), o bien
Pirimidina: citocina o timina (C - T), en el
ADN y citocina o uracilo (C - U), en el ARN
(vase figura 4.1).
2. Un azcar con cinco carbonos (pentosa)
llamado desoxirribosa.
3. Una molcula de fosfato (cido fosfrico).
98 / Microbiologa bsica para el rea de la salud y afines
Estas tres partes estn unidas entre s en el
siguiente orden: base nitrogenada-desoxirribosa-
fosfato vase figura 4.2.
cido ribonucleico
Este cido o ARN tambin est presente en la
clula bacteriana, es semejante, pero no es igual,
al ADN y acta transmitiendo la informacin co
dificada en el ADN para la sntesis de protenas,
por medio de la transcripcin y la traduccin del
cdigo gentico.
Herencia de las caractersticas
y la variabilidad
Una caracterstica de todas las formas de vida,
desde el punto de vista de la gentica, est dada
por la estabilidad general o semejanza" que se
produce entre las caractersticas de los padres y
su descendencia. Es fcil observar, por ejemplo,
en nuestra propia especie, que algunas familias
tienen regularmente cabellos negros, ojos oscu
ros, mientras que otras tienen cabellos rubios y
ojos azules. De la misma manera, y a pesar de sus
pequeas dimensiones, las bacterias y otras clu
las inferiores tambin transmiten caractersticas
a su descendencia. El hecho mismo de poder
identificar especies e incluso cepas bacterianas
implica que estas son capaces de transmitir, con
mucha precisin, la informacin gentica de ge
neracin en generacin. Sin embargo, adems de
la herencia de caractersticas, la cual explica la
constancia que muestran las especies biolgicas,
existe una variabilidad o cambio, que se expresa
en la descendencia. Estos cambios estn asocia
dos a dos propiedades fundamentales de la clula
o del organismo: el genotipo y el fenotipo.

1. Genotipo. Se refiere a la constitucin ge
ntica precisa de una clula bacteriana o de un
organismo superior.
2. Fenotipo. Es la expresin del genotipo,
es decir, las caractersticas observables de una
clula bacteriana o de un organismo superior.
Las bacterias pueden experimentar cambios
en cualquiera de las dos propiedades y ocurren
fenmenos llamados variaciones o modificacio
Gentica bacteriana / 99
nes genotpicas ofenotpicas, segn la propiedad
que se vea afectada.
Variaciones fenotpicas o temporales
(adaptaciones)
Son modificaciones del fenotipo bacteriano, de
bidas, generalmente, a cambios ambientales, en
los cuales no se ve afectado el genoma, sobre el
100 / Microbiologa bsica para el rea de la salud y afines
cual no hay repercusin alguna, o sea, que no se
transmiten hereditariamente. Una caracterstica
destacada de este tipo de cambio fenotpico es
que implica a la mayora de las bacterias que
estn en el cultivo (prcticamente a toda la po
blacin bacteriana sometida a la modificacin
ambiental). Cuando se restablecen las condicio
nes originales del cultivo, se produce un retorno
al fenotipo inicial. Las variaciones fenotpicas
pueden ser de distintos tipos:
1. Morfolgicas. Se producen cambios de
forma, tamao, la prdida de la cpsula, de los
flagelos, del esporo, o de tincin como sucede
con las bacterias Gram variables (se refiere
a aquellas bacterias que cuando se realiza la
coloracin partiendo de un cultivo joven, su res
puesta a la coloracin de Gram es positiva; pero
cuando se realiza la misma tincin y el cultivo
ya est envejecido, su respuesta es negativa).
Estos cambios se presentan cuando se modifica
el pH, la temperatura, la presin osmtica o el
contenido nutricional del medio, entre otros
(vase figura 4.3).
2. Cromgenas. Algunas bacterias tienen
la capacidad de producir pigmentos, que le
imparten un color caracterstico a sus colonias.
Estos pigmentos pueden desaparecer temporal
mente al modificar las condiciones ambientales
y recuperarse cuando las condiciones originales
regresan. Ejemplo: la bacteria Serratia marces-
cens, produce colonias con un pigmento rojo
ladrillo cuando se cultiva en agar nutritivo, a
temperatura ambiente y en la oscuridad. Cuan
do la temperatura se suministra por medios
artificiales, como sucede en una incubadora,
el pigmento de las colonias se pierde, pero se
recupera cuando se cultiva nuevamente en las
condiciones iniciales.
3. Enzimticas. El ejemplo ms contundente
de este tipo de variaciones lo tenemos con las
enzimas inductivas, es decir, las bacterias slo
producen estas enzimas si el medio en el cual
se desarrollan induce su produccin. Ejemplo:
E. coli no produce la enzima p-galactosidasa, si
en el medio de cultivo hay ausencia de lactosa,
pero si el medio es enriquecido con este azcar
la bacteria produce normalmente esa enzima. Lo
mismo sucede con la enzima penicilinasa que
solamente se produce cuando en el medio est
presente la penicilina.
4. De tincin. Esta variacin se observa muy
bien en las bacterias denominadas Gram varia-

bles: las bacterias Gram positivas de un cultivo
viejo pierden la capacidad de retener el colorante
primario durante la decoloracin con alcohol
acetona en la coloracin de Gram. Capacidad
que se recupera cuando se repica el cultivo, es
decir, cuando se vuelve a sembrar y se obtiene
una poblacin bacteriana joven.
Variaciones genotpicas
o permanentes
El genotipo de una clula bacteriana est deter
minado por la informacin gentica contenida
en su cromosoma. El cromosoma se divide en
genes.
Un gen es la unidad funcional de la herencia.
Cada gen consta de cientos de pares de nucleti-
dos. Cualquier gen tiene la posibilidad de mutar
o de cambiar a una forma diferente y de esta
manera propiciar la formacin de una protena
alterada o nueva, que a su vez puede daar las
caractersticas de la clula, producindole a
veces la muerte. Por ejemplo, la sustitucin
de un solo aminocido, de los muchos que se
encuentran en la cadena polipeptdica, puede
hacer que la protena no sea funcional. Este
fenmeno se conoce como mutacin que no es
ms que el cambio en la secuencia de nucletidos
de un gen que se transmite en forma hereditaria.
Esto da origen a un nuevo rasgo gentico, o a un
fenotipo cambiado. Una bacteria o un organis
mo que muestra los efectos de una mutacin se
considera muante.
Las mutaciones son acontecimientos raros
que se producen al azar y surgen espontnea
mente, sin tener en cuenta los requerimientos del
ambiente. Las mutaciones bacterianas pueden
ocurrir a un ritmo de solo una mutacin por cada
1.000.000 de clulas, o bien, con una tasa de una
mutacin por cada 10.000.000.000 de clulas
bacterianas. Este tipo de mutaciones se conoce
como mutaciones espontneas y pueden surgir
como consecuencia de la accin de la radiacin
natural (como los rayos csmicos), que alteran
la estructura de las bases del ADN. Este tipo de
mutaciones pueden presentarse durante la repli-
cacin del ADN, como resultado de errores en el
Gentica bacteriana /101
apareamiento de las bases que origina cambios
en el ADN replicado (vase figura 4.4).
Generalmente, los mutantes que hay en una
poblacin de clulas bacterianas estn enmasca
rados por el nmero mayor de clulas sin mutar.
Tratar de aislar una clula mutante es algo as
como el coloquial dicho tratar de buscar una
aguja en un pajar. Sin embargo, la microbio
loga gentica ha desarrollado tcnicas que fa
cilitan el aislamiento de unos cuantos mutantes
a partir de una gran poblacin de bacterias no
mutadas, a las que se les conoce con el nombre
de cepa silvestre o prottrofa, es decir, que esta
es la cepa progenitora que crece en un medio
nutritivo completo, como el agar nutritivo. El
aislamiento puede hacerse de varias formas;
en una de ellas se incorpora un antibitico al
medio de cultivo, para seleccionar los mutantes
resistentes a ese antibitico, que crecen en el
medio de cultivo.
De cualquier forma, la cepa mutante es ms
exigente en los requerimientos nutricionales
que la cepa progenitora y, por consiguiente,
requiere de medios de cultivo ms especficos,
a esta poblacin bacteriana se le llama cepa
auxtrofa.
Una de las tcnicas ms utilizada para selec
cionar una cepa mutante nutricional, se conoce
como rplica en placa. La figura 4.5 ilustra un
mtodo experimental con el cual se lleva a cabo
esta tcnica.
Como se anot antes, las mutaciones espont
neas ocurren en condiciones normales de cultivo
y existen varias situaciones en las cuales pueden
ocurrir cambios en la secuencia de bases purina-
pirimidina del ADN. Estos cambios pueden
suceder de la siguiente manera:
1. Sustitucin. Se sustituye un nucletido
por otro. Este caso se puede presentar de dos
formas:
a. Sustitucin por transicin. Se presenta
cuando se cambia una base purina (prica) por
otra purina o una pirimidina (pirimidnica) por
otra pirimidina.
b. Sustitucin por transversin. Ocurre
cuando se sustituye una base prica por una
pirimidnica o viceversa.
102 / M icrobiologa bsica para el rea de la salud y afines
2. Insercin o adicin. Cuando se adicionan
uno o varios nucletidos adicionales a los ya
existentes.
3. Delecin, supresin o prdida. Se presenta
cuando se pierden uno o ms nucletidos.
A continuacin se observa una representa
cin esquemtica que muestra, en una forma
muy aproximada, lo que ocurre en el genoma
bacteriano cuando se producen cambios en las
bases del ADN, ocasionados por mutaciones.
En el ejemplo, se toma un segmento de ADN
normal donde se observa la secuencia de bases
en tres codones y sus respectivos aminocidos,
los cuales van a ser alterados por causa de ciertas
mutaciones espontneas (vase figura 4.6).
Las mutaciones pueden ser catalogadas
como mutaciones inducidas, cuando se aplica
a una poblacin bacteriana algn tipo de agente
inductor de mutaciones, conocido como agente
mutgeno o sustancia mutagnica.
Algunos de estos agentes mutgenos son:
1) agentes alquilantes, es decir, que introducen
radicales metilo; 2) las acridinas, son sustan
cias que actan como agentes intercalantes, es
Gentica bacteriana / 103
104 / Microbiologa bsica para el rea de la salud y afines

decir, que se insertan entre dos pares de bases
dei ADN, separndolas entre s; 3) los rayos X ,
que por su alto poder de penetracin ionizan el
agua y otras molculas, entonces, los efectos
mutagnicos se producen indirectamente por
causa de esta ionizacin; 4) los perxidos-, 5)
el xido nitroso (HNO,) y ms sustancias como
el gas mostaza, el cloruro de manganeso y la
cafena, entre otros.
Las mutaciones espontneas y las inducidas
Gentica bacteriana / 105
solo difieren en la frecuencia y no en la calidad.
Los mutgenos ms enrgicos son agentes qumi
cos que afectan la estructura del ADN. Como
la especificidad del ADN depende del enlace
purina-pirimidina y este ocurre por medio de las
uniones de hidrgeno entre muy pocos tomos
de cada molcula, todo agente que afecte esos
tomos causa una mutacin. El xido nitroso- por
ejemplo, puede eliminar grupos de aminocidos
de las purinas o pirimidinas.
106 / Microbiologa bsica para el rea de la salud y afines

Tipos de mutantes bacterianos
Entre los tipos de mutantes bacterianos estn los
siguientes:
1. Mutantes que exhiben una tolerancia
aumentada a agentes inhibitorios en particular
a antibiticos, por ejemplo, bacterias mutantes
resistentes a antibiticos y otros agentes inhi
bitorios.
2. Mutantes que demuestran una capacidad
de fermentacin alterada, bien sea aumentada o
disminuida para la elaboracin de un producto
final.
3. Mutantes con deficiencias nutricionales
que requieren para el desarrollo un medio ms
complejo que el cultivo original del cual se
derivaron.
4. Mutantes que muestran cambios en lafo r
ma de la colonia o en la capacidad de producir
pigmentos.
5. Mutantes que presentan cambios en la estruc
tura qumica de la clula, por ejemplo, mutantes
antignicos.
6. Mutantes resistentes a la accin de los
bacterifagos (virus que infectan bacterias).
7. Mutantes que muestran algn cambio en los
aspectos morfolgicos, como prdida de la capaci
dad de producir esporas, cpsulas o flagelos.
Recombinacin gentica bacteriana
Consiste en la formacin de un nuevo genotipo
por redistribucin de los genes, despus de un
intercambio gentico entre dos cromosomas
diferentes que poseen genes similares en sitios
que se corresponden. Estos cromosomas se de
nominan cromosomas homlogos, por eso, este
captulo se centra en la recombinacin general
u homologa.
La descendencia procedente de la recombi
nacin gentica tiene combinaciones de genes
diferentes a las combinaciones que presentan
sus progenitores. En la recombinacin bacte
riana las clulas no se fusionan y usualmente
solo una porcin del cromosoma de la clula
donadora es transferida a la clula receptora.
Las clulas receptoras se convierten en un me-
Gentica bacteriana / 107
rozigoto o merozoito, es decir, un zigoto diploide
incompleto.
Una vez que ha tenido lugar la formacin del
merozigoto, puede tener lugar la recombinacin,
que obviamente, se limita a la porcin diploide
del genoma y ocurre cuando se forma un nuevo
cromosoma recombinante del ADN al que con
tribuyen dos organismos diferentes.
El mecanismo general para la recombinacin
bacteriana se cree que tiene lugar de la siguiente
manera: dentro de la clula receptora, el frag
mento de ADN de la donadora se coloca a lo
largo del ADN de la receptora, de tal manera que
queden adyacentes los genes homlogos.
Ciertas enzimas actan sobre el ADN de la
receptora, produciendo cortes y la escisin de
un fragmento. Luego, el ADN de la donadora
queda integrado en el cromosoma receptor en el
lugar del ADN previamente escindido. La clula
receptora se convierte en la clula recombinante,
porque su cromosoma contiene ADN tanto de la
clula donadora como de la receptora. El trozo
de ADN escindido del cromosoma receptor es,
probablemente, degradado por enzimas especfi
cas. Este mecanismo general de recombinacin,
se ilustra en la figura 4.7.
La transferencia del ADN de las clulas do
nadoras a las clulas receptoras que dan origen
a formas recombinadas, se produce por tres
mecanismos distintos: conjugacin bacteriana
(apareamiento), transduccin (infeccin por
virus bacterifagos), transformacin (entrada
de ADN soluble que se encuentra en el medio).
Conjugacin
La conjugacin constituye uno de los tres me
canismos de transferencia de material gentico
de una bacteria a otra y depende del contacto
clula-clula. El proceso va ligado a los factores
F que tengan la capacidad de codificar los pili
encargados del apareamiento sexual. El contacto
directo que se produce entre las dos bacterias
que realizarn la conjugacin o apareamiento
sexual se da por medio de un pili especializado,
al cual, se le da el calificativo de sexual. El pili
se proyecta desde la bacteria donadora o F+hasta
108 / Microbiologa bsica para el rea de la salud y afines
la bacteria receptora o F~. Despus de hacer el
contacto el pili sexual se despolariza y se re
trae y las dos bacterias se juntan, los contactos
establecidos por el pili sexual se estabilizan
(posiblemente por fusin de las membranas
externas) para efectuar la transferencia del ADN
de la bacteria donadora a la receptora.
La conjugacin bacteriana la demostraron por
primera vez Lederberg y Tatum en 1946. Combi
naron dos cepas mutantes (auxtrofas) diferentes
de E. coli que carecan de la capacidad de sinteti
zar uno o ms factores de crecimiento y les dieron
la oportunidad de aparearse. Luego, en una caja de
Petri con un medio de cultivo mnimo sembraron
el cultivo mixto. En este medio solo podran crecer
las cepas del tipo silvestre o prottrofas. Cuando
aparecieron colonias del tipo silvestre, supieron
que estas colonias tenan que ser el resultado de
una recombinacin gentica por conjugacin entre
cepas mutantes o auxtrofas.
Despus, en 1952, Hayes demostr por pri
mera vez la diferenciacin sexual de las bacterias
en cepas de E. coli. Actualmente, se sabe que existen
diferentes tipos de apareamientos y que no todos
los pares son frtiles.
Existen cuatro modelos de conjugacin que,
generalmente, se producen entre bacterias Gram
negativas:

Sistema F+
Las clulas donadoras contienen una pieza cir
cular pequea y extracromosomal de ADN, esa
pieza se conoce con el nombre de plsmido, y
se le ha llamado factor de fertilidad, factor sexo
o factor F, y se simboliza como F +.
Las clulas receptoras se simbolizan con F~
y estn desprovistas del factor F. Se han hecho
las siguientes observaciones:
- Los cruces entre 2 cepas F son estriles.
- Solamente el cruce F+ y F produce recom-
binantes. Es posible, aunque excepcionalmente,
y con una frecuencia sumamente baja, F + y F +
logran realizar este cruce.
- Las clulas bacterianas F pueden conver
tirse en F +, cuando se mezclan con estas ltimas
(vase figura 4.8).
Sistema Hfr
Si una clula bacteriana tiene el factor F in
tegrado al cromosoma, ese factor se conoce
como episoma, que no es ms que un plsmido
especializado y la bacteria se llama bacteria Hfr,
es decir, que posee alta frecuencia de recombi
nacin, porque la recombinacin es 10 veces
mayor que lo sucedido entre F y F+.
Durante la conjugacin, la clula Hfr trans
Gentica bacteriana / 109
mite una copia de su genoma empezando por el
extremo opuesto al que se encuentra el factor F.
Normalmente el factor F integrado al cromosoma
o episoma no alcanza a pasar a la clula F. Por
este motivo, la clula receptora contina siendo
F", y aunque adquiere caractersticas genticas
de la clula donadora, no adquiere el factor F
(vase figura 4.9).
Por este mtodo los principales recombi-
nantes son:
- Hfr x F = Hfr y F
- Hfr x F = Hfr y Hfr. Este cruce podra
ocurrir, pero casi nunca sucede.
De estos plsmidos especiales o episomas se
conocen una gran cantidad y toman diferentes
nombres, algunos son:
Factor Col o Colicin. Las bacterias que poseen
este factor producen una protena llamada colicina
que destruye otras bacterias (vase tabla 4.1).
Tabla 4.1 Bacterias productoras de factor F
Bacteria Factor F producido
Escherichia coli Colicina
Pseudomonas aeruginosa Piocina
Serratia marcescens Marcena
Enterobacter aerogenes Aerocina
1 1 0 / Microbiologa bsica para el rea de la salud y afines
Factor R o factor RTF. Se conoce como fa c
tor de transferencia de la resistencia y confiere a
las bacterias que lo poseen resistencia a algunas
drogas (principalmente a los antibiticos). Este
factor solo codifica la resistencia a una droga
especfica.
Sistema F o F duccin o sex duccin. Al
igual que en los casos anteriores la bacteria F
hace contacto con una bacteria F_ y le transfie
re el plsmido que puede quedar autnomo o
integrarse al ADN cromosmico de la bacteria
receptora (como sucede en el sistema Hfr). De
esta forma, la bacteria receptora portar tres tipos
de informacin gentica: la propia u original,
la que le imparte el plsmido o plasmdica y la
procedente del ADN cromosmico de la bacteria
donadora.
Transformacin
Este fenmeno, observado por primera vez por
Griffith, en 1928, consiste en la capacidad de una

bacteria de incorporar por adsorcin, un fragmen
to de ADN exgeno o exogenote, que puede ser
cromosmico o plasmdico y por el mecanismo de
adsorcin, incorporarlo a su ADN cromosmico
realizando una recombinacin homologa.
En el experimento realizado, Griffith tra
baj con 3 tipos de Streptococcus pneumoniae
(neumococo):
1. Cepa II-S: lisos, cpsulados. Esta cepa la
conformaban Pneumococcus capsulados con sus
propiedades virulentas intactas.
2. Cepa II-R: rugosos, sin cpsula. Confor
mada por Streptococcus pneumoniae que haban
perdido la cpsula como consecuencia de una
mutacin inducida.
3. Cepa II-S lisos, muertos por calor. Con
formada por clulas de Streptococcus pneumo
niae muertas por la accin del calor.
Las figuras 4.10, 4.11, 4.12 y 4.13 muestran
esquemticamente una aproximacin del expe
rimento realizado por Griffith:
Lo sucedido en el experimento anterior se
demostr in vitro, en el mbito del laboratorio
como se representa en la figura 4.14.
Actualmente se ha profundizado mucho en el
fenmeno de la transformacin y se ha confirma
do que el ADN bicatenario libre en el ambiente
(medio de cultivo donde estaba la mezcla de las
cepas), procedente de clulas bacterianas lisadas,
Gentica bacteriana / 111
es fragmentado por una serie de enzimas (tipo
nucleasas) y a estos fragmentos se incorporan
a unas protenas de membrana. De esta manera
alcanza el ADN cromosmico y se produce la
recombinacin homologa.
Se ha demostrado que tambin son transfor
mables otras caractersticas, aparte de la tipo-
especificidad de los neumococos; entre estas la
fermentacin y la resistencia a los antibiticos.
Transduccin
Este fenmeno fue descubierto por Zinder y
Lederberg en 1952 cuando estudiaban la conju
gacin bacteriana con especies de Salmonella.
Consiste en la transferencia de una pieza de ADN
de una bacteria a otra por medio de un bacteri
fago (virus que infecta bacterias, conocido con
el nombre de fago o virus bacteriano), que sirve
como transmisor.
La mayor parte de los bacterifagos tienen
un rpido ciclo de desarrollo dentro de la clula
husped, llamado ciclo ltico en el cual el cido
nucleico inyectado a la bacteria por el fago, se re
plica rpidamente y dirige la sntesis de protenas
del nuevo fago. De 10 a 20 min, segn la clase de
fago, se produce el rompimiento o lisis de la bac
teria liberando los fagos totalmente formados.
112 / Microbiologa bsica para el rea de la salud y afines
Sin embargo, existen algunos bacterifagos
atenuados llamados fagos temperados que no
tienen capacidad ltica, sino que se integran al
cromosoma bacteriano comportndose como
una especie de episoma. Estos genomas virales
que se integran al genoma bacteriano se conocen
como profagos y las bacterias que portan los
profagos se denominan bacterias lisognicas.
Como en este ciclo no hay lisis de la bacteria, el
ciclo se denomina ciclo lisognico. La bacteria

se reproduce y su descendencia ser portadora del
profago. Normalmente solo es posible transportar
un gen de una bacteria a otra por medio de fago
temperado, excepcionalmente se puede dar el
caso de transportar dos genes.
Por accin de algn agente como la luz
ultravioleta, el profago puede activarse y des
prenderse del cromosoma convirtindose en un
fago ltico.
Por este proceso se transporta el factor pe-
nicilinasa, que es una enzima que hidroliza la
penicilina y evita que el antibitico produzca
Gentica bacteriana / 113
la destruccin del cultivo. Se ha observado este
fenmeno, principalmente, en cepas de Staphylo
coccus (vase figura 4.15).
Los fenmenos de transduccin y conjuga
cin son procesos pasivos, en cambio la trasfor-
macin es un proceso activo.
Gentica bacteriana: sumario
La gentica es una disciplina dinmica y en
rpido avance. Cientos de cientficos de todo el
mundo estn dedicados a su estudio. La ingenie-
1 1 4 / Microbiologa bsica para el rea de la salud y afines

ra gentica, una nueva faceta de estos estudios organismos que lograran adaptarse gentica
genticos, ofrece a la humanidad la promesa de mente a estos cambios ambientales lograran
logros beneficiosos y a la vez la posibilidad sobrevivir; por tanto, la capacidad de adquirir
de desastrosas consecuencias. Se considera la nuevos rasgos genticos confiere una ventaja
posibilidad de dominar todas las enfermedades para la supervivencia, a tales organismos.
genticas y el riesgo de cambiar un microbio
comn e inofensivo en una forma altamente Preguntas para autocontrol
patgena y resistente. del aprendizaje
Hace poco ms de 100 aos el botnico
austraco Gregorio Mendel emprendi el primer 1. Qu es ADN y ARN? Explique.
estudio serio de la gentica (con los guisantes o 2. Qu es una base nitrogenada?
frjoles), y a partir de estos estudios desarroll 3. Cules son las bases pricas y pirimdi-
las leyes fundamentales de la herencia. cas?
Casi al mismo tiempo, el naturalista britnico 4. Defina: nucletido, nuclesido, genotipo y
Carlos Darwin, presentaba su teora de la evo fenotipo.
lucin. Esta teora se basa en los principios de 5. Defina: variaciones fenotpicas y genotpi-
la seleccin natural y supervivencia de los ms cas. D ejemplos concretos.
adaptados. Es obvio que en un ambiente cam 6. Para qu y cmo se realiza la tcnica de
biante en el transcurso del tiempo, solo aquellos rplica en placa?

7. Con relacin a las mutaciones, explique las
formas en que pueden presentarse cambios
en la secuencia de bases pricas y pirimdi-
casdelADN.
8. Mencione y defina los principales tipos de
mutantes bacterianos.
Gentica bacteriana / 115
9. Explique claramente qu es la recombi
nacin bacteriana y cmo se produce este
proceso.
10. Por medio de esquemas claros y precisos
explique los tres procesos de recombinacin
bacteriana.

Inmunologa bsica
E l objetivo de este captulo es ofrecer una
visin general de algunos de los fascinantes
fenmenos inmunolgicos, abordados de una
forma sencilla para facilitar su entendimiento. Se
describirn unos de los eventos ms importantes
y esenciales para la comprensin de ciertos te
mas microbiolgicos, en los cuales se menciona
terminologa de uso comn en la descripcin de
procesos inmunitarios.
Resea histrica
Los cimientos de los fenmenos inmunolgicos
datan de pocas bastante remotas. Se ubican en
observaciones antiguas registradas en diferentes
culturas, en las cuales se mencionaba que los
pacientes que sufran una enfermedad infec
ciosa, rara vez la contraan de nuevo. Pero la
inmunologa como ciencia tuvo su nacimiento
hace relativamente poco tiempo. Algunos autores
la remontan a Inglaterra, siglo x v i i i , en la poca
en que se present una epidemia recurrente
de viruela. En ese tiempo una forma de evitar la
viruela era la utilizacin de la variolizacin,
prctica que, aunque haba tenido sus orgenes
en el Medio Oriente, era conocida por muchos
ingleses de la poca. Consista en la inoculacin
de una pequea cantidad de exudado extrado de
las lesiones de viruela de un individuo afectado,
en una incisin sobre la superficie de la piel, con
el fin de producir la infeccin, pero de una for
ma muy limitada. De esta manera, las personas
se protegan de adquirir la enfermedad severa
durante el periodo en que la epidemia asolaba
la regin. La viruela azolaba gran parte de las
poblaciones del mundo, causaba muchsimas
5
muertes y dejaba cicatrices deformantes a quie
nes lograban sobrevivir.
De cualquier manera, el xito de la varioli
zacin era muy limitado porque controlar en qu
grado se producira la infeccin era muy difcil,
condicin que permita, con mucha frecuencia,
que se contrajera la enfermedad severa.
Aunque en la poca an no se conocan los
microbios como agentes causales de infecciones,
en Inglaterra ya era conocido el mdico naturalis
ta Edward Jenner, estudioso de las enfermedades
infecciosas.
A mediados del siglo xvm, se reconoca que
las mujeres que ordeaban las vacas no se
contagiaban de viruela humana si ya se haban
infectado con la viruela vacuna. Este tipo de
viruela, propia de las vacas, causaba en las orde
adoras ampollas en los brazos y manos (que no
las afectaban mayormente), similares a las que
desarrollaban las vacas enfermas en sus ubres.
Era de conocimiento popular que cuando a una
poblacin la afectaba una epidemia de viruela,
estas mujeres no sufran la infeccin. Este hecho,
motiv a Edward Jenner a estudiar el porqu de
esa creencia y comprobar su veracidad.
Un da de 1796, muy afortunado por cierto,
la campesina Sarah Nelmes, a la cual l trataba,
desarroll la viruela vacuna por causa de su ofi
cio de ordeadora. Jenner aprovech al mximo
la oportunidad que se le presentaba y extrajo
exudado de una de las pstulas de la mano de la
campesina e inocul a un nio saludable de ocho
aos llamado James Phipps. El mdico realiz
dos cortes superficiales de, aproximadamente,
media pulgada en el brazo del nio, le aplic
el exudado y esper 6 semanas. Al cabo de este

tiempo inocul al nio con un exudado activo
de viruela humana y el nio no desarroll la
enfermedad. Repiti el experimento con otros
pacientes y tambin expuso a varias personas
que haban tenido la viruela vacuna, al virus
de la viruela humana y tampoco se produjo la
infeccin. Estos experimentos y observaciones le
permitieron, a Jenner, concluir que el virus de la
viruela vacuna protega contra la viruela humana,
y public en 1798 Investigacin sobre las causas y
efectos de la vacuna de la viruela.
Aunque, de por s, Jenner no descubri las
vacunas, s fue el primero en utilizar el mtodo
cientfico de observacin y experimentacin en
la produccin de vacunas. El experimento de
Jenner no se comprendi sino muchos aos ms
tarde cuando el francs Louis Pasteur comenz
a interesarse por la prevencin de enfermedades
infecciosas, convirtindose en el primer gran
inmunlogo experimental.
Uno de los experimentos ms famosos de
Pasteur lo realiz para descubrir la vacuna del
clera aviar, descrito con mucha claridad en el
primer captulo de esta obra. Este experimento y
otros que le sucedieron, permitieron comprender
el xito original de los estudios de Jenner. Pas
teur, en honor a Jenner, bautiz su tratamiento
como vacunacin, definindolo como un mtodo
para estimular la inmunidad a una enfermedad
infecciosa mediante la inoculacin de microor
ganismos atenuados o de sus productos.
Todo este relato permite comprender por qu
la inmunologa surgi como una subdisciplina
de la bacteriologa, la cual era una ciencia esta
blecida. La palabra inmunologa tiene sus races
en el latn immunis que significa libre de algo,
seguro, a salvo.
Los animales, incluso el hombre, poseen
unos mecanismos de defensa interna que los
protegen contra organismos que causan enfer
medades (los conocidos como patgenos), entre
los cuales existen hongos, protozoos, bacterias,
virus, entre otros.
Para que un organismo tenga xito en su
defensa interna debe tener la capacidad de distin
guir entre lo propio y lo extrao, reconocimiento
que se logra porque los organismos son bio
Inmunologa bsica / 117
qumicamente nicos. Por ejemplo, las clulas
poseen macromolculas de las clulas de otra
especie e incluso de las clulas de las de otros
miembros de la misma especie. Por tanto, un or
ganismo conoce sus propias macromolculas,
pero desconoce o reconoce como extraas
las de otros organismos (vase figura 5.1).
El carcter de extrao se alcanza en el
momento del nacimiento cuando el sistema in
mune reconoce sus propias sustancias. En el feto
se inicia la formacin del sistema linfoide y lo
va reconociendo como propio, al nacer ya tiene
la capacidad de identificar lo que no se form
con l como extrao. Esto pudo comprobarse
cientficamente cuando se realiz el siguiente
experimento: se tom una rata en gestacin,
marcada como cepa A, y al feto se le realiz un
trasplante de tejido de cuello uterino, proveniente
de otra rata marcada como cepa B y no ocurre
rechazo. Al nacer el ratn de la cepa A, se le
realiza un nuevo trasplante de la cepa B, el cual
reconoci como propio por el sistema inmune del
ratn recin nacido y, por tanto, no hubo rechazo.
Posteriormente se le realiz otro trasplante, fue
donadora una rata marcada como cepa C. El sis
tema inmune del ratn recin nacido desconoce
el tejido trasplantado y lo califica como extrao
producindose el rechazo (vase figura 5.2).
Sistema inmunitario
El sistema inmunitario tiene una serie de meca
nismos organizados de forma tan eficaz que pu
dieran perfectamente compararse con el sistema
militar ms exigente. Estos mecanismos no estn
alertas nicamente para un aviso de alarma mo
mentneo, sino que continuamente patrullan
por todo el cuerpo en busca de enemigos extraos
o propios y mantienen en guardia las diferentes
lneas de defensa para un posible ataque.
Al comparar el sistema inmunitario con lo
que sucede en la sociedad humana se logra mejor
entendimiento. Cualquier fuerza de seguridad
buena, utiliza diversas estrategias para lograr
una ptima vigilancia de su territorio y poder
defenderlo exitosamente en caso necesario. De la
misma forma, la sociedad de clulas del cuerpo
118/ Microbiologa bsica para el rea de la salud y afines
humano utiliza muchos mecanismos o estrate
gias de defensa para garantizar la integridad y
supervivencia del individuo.
Todos los mecanismos de defensa pueden
agruparse en 2 categoras: la inmunidad inespe-
cfica y la inmunidad especfica.
Inmunidad inespecfica
La inmunidad inespecfica incluye mecanismos
que atacan a una serie de agentes o afecciones
que pueden ser una amenaza para la superviven
cia. Estos mecanismos se producen por factores
de resistencia innatos.
La primera lnea de defensa frente a los agen
tes patgenos la componen mecanismosfsicos y
qumicos que poseen las especies animales, in
cluido el hombre, que actan inespecficamente
para evitar ser invadidos por agentes patgenos
y su consecuencia, es decir, la enfermedad. El
trmino inespecfico significa que esos mecanis
mos inmunitarios no actan nicamente sobre
uno o dos invasores determinados, sino que
por el contrario ejercen un tipo de defensa ms
generalizado y actan contra todo lo que no se
logre reconocer como propio.
De la gran variedad de mecanismos de
defensa inespecficos solo se relacionaran los
principales, los otros pueden conocerse cuando
se desee profundizar en los interesantes temas
inmunolgicos.
Resistencia de especie o gentica
La resistencia de especie es un fenmeno en el
cual las caractersticas genticas comunes de una
especie de organismo lo defienden contra ciertos
agentes patgenos (causantes de enfermedad).
Por ejemplo: el hombre no adquiere enfermeda
des propias de otros organismos como las plantas
y los animales, por consiguiente, el virus del
moquillo canino solo produce la enfermedad en
los cachorros de perro, porque el medio interno
humano no es adecuado para que este virus lleve
a cabo su ciclo de replicacin.
Esta resistencia vara segn las especies, las
razas o individuos. Otro ejemplo, los indios ame
ricanos y los negros estn ms predispuestos a
contraer tuberculosis que los caucsicos. Cuando
se da el caso en gemelos homocigticos, si uno
de ellos contrae la tuberculosis, la posibilidad
de que el otro tambin la contraiga es mayor
Inmunologa bsica / 119
120 / Microbiologa bsica para el rea de la salud y afines
que si el caso se hubiese producido en gemelos
heterocigticos.
Barreras mecnicas y qumicas
El medio interno del cuerpo humano se encuentra
protegido por dos grandes superficies: la piel y
las mucosas, denominadas con frecuencia por
la mayora de los autores como la primera lnea
de defensa. Las clulas de estas superficies estn
distribuidas en capas densamente agrupadas,
femando una especie de muro protector del
medio interno ante la invasin de agentes ex
ternos. Adems de este mecanismo la piel y las
mucosas poseen otros adicionales como:
1. Cera. Se produce en los odos, contiene
agentes inhibidores de agentes patgenos. Si este
mecanismo falla puede producirse diferentes
tipos de otitis.
2. Moco. Sustancia que se convierte en una
verdadera trampa de mucus para los agentes
patgenos, pues estos pueden quedar adheridos
y ser eliminados posteriormente.
3. Enzimas. Actan sobre los componentes
de los agentes patgenos y pueden hidrolizarlos
causndoles la muerte.
4. cido clorhdrico. Puede actuar como
mecanismo de barrera inespecfica en la mucosa
gstrica.
Respuesta inflamatoria y fiebre
En caso de que estos mecanismos de defensas
qumicos o mecnicos no consigan su objetivo
y las bacterias u otros grmenes logren pasar al
medio interno, el cuerpo dispone de una segunda
lnea de defensa conocida como respuesta infla
matoria y fiebre. Se trata de otro mecanismo de
defensa inespecfico, en el cual la lesin de los
tejidos desarrolla un sinnmero de respuestas
que contrarrestan la lesin y estimulan el retorno
a la normalidad.
La repuesta inflamatoria da lugar a la reac
ciones: eritema, hinchazn (tambin se conoce
como reaccin roncha-eritema), dolor y calor,
localizados en el lugar donde el hospedador
tuvo contacto con los estmulos nocivos. Los
mediadores de la inflamacin se incluyen en un
grupo de protenas denominadas citocinas o ci
toquinas, producidas por los leucocitos o clulas
blancas de la sangre. Adems de la fiebre en la
segunda lnea de defensa (respuesta inflamatoria
y fiebre), cumple una funcin muy importante
la fagocitosis.
Fiebre. El cuerpo humano es sorprendente
mente constante en cuanto a su temperatura cor
poral. En 24 horas puede fluctuar en un estrecho
margen de 1 a 1,5 C. La temperatura estndar
normal se considera en 37 C, pero puede variar
entre individuos y oscilar de 36 a 38 C. La tem
peratura corporal tambin puede variar durante el
sueo y estar 2 C por debajo de lo normal. Otra
variacin puede darse durante el ejercicio intenso
y estar 4 C por encima de lo normal.
La fiebre no es ms que un aumento anormal
de la temperatura corporal, causada por una
enfermedad infecciosa o no infecciosa, pero la
mayora de las fiebres las causan enfermedades
infecciosas, en las cuales los microorganismos
patgenos producen ciertas sustancias endotxi-
cas llamadas pirgenos (productores de fiebre).
Los pirgenos viajan por el torrente sanguneo
hasta el hipotlamo y elevan la temperatura
corporal.
La fiebre, al igual que la inflamacin, son
respuestas inespecficas a estmulos nocivos
causados por agentes patgenos. Estas dos res
puestas del hospedador pueden lograr la rpida
destruccin o al menos el aislamiento del agente
patgeno, pero tambin pueden causar dao a los
tejidos del hospedador.
Fagocitosis. Otro fenmeno importante de
la segunda lnea de defensa del cuerpo es la
fagocitosis, llevado a cabo por muchos tipos
de clulas llamadas fagocitos, que capturan y
destruyen a la mayora de los agentes patgenos.
El mecanismo de accin de estas clulas es el
siguiente: cuando los fagocitos se acercan a una
bacteria o cualquier otro microbio, emiten hacia
l unas proyecciones citoplasmticas llamadas
seudpodos, que rodean al microbio, formando a
su alrededor una especie de saco que lo engloba,
que se denominafagosoma. El fagosoma se ubica
en el interior de la clula donde un lisosoma se

une a l, formando una nueva vescula que se
llama fago lisos orna. El contenido del lisosoma
lo componen principalmente enzimas digestivas
y perxido de hidrgeno, que penetran en el fa-
gosoma y destruyen al invasor. Existen diferentes
tipos de fagocitos, como:
1. Neutrflo. Es un glbulo blanco (leucoci
to) especializado, tambin se denomina leucocito
polimoifonuclear, generalmente es el primero
de los fagocitos que llega al lugar de la lesin
durante la respuesta inflamatoria. La abreviatura
para estas clulas es: PMNs: polimorfonucleares.
Son clulas muy mviles que contienen gran
cantidad de lisosomas, predominan en el torrente
sanguneo y la mdula sea y pueden encontrarse
en grandes cantidades cuando hay un foco in
feccioso. Su vida es muy corta y los neutrfilos
muertos tienden a amontonarse en ese lugar,
constituyndose en los principales componentes
de la sustancia que se conoce como pus.
2. Macrfagos. Tambin son leucocitos que
despus de llegar al torrente circulatorio se desa
rrollan hasta alcanzar varias veces su tamao ori
ginal, convirtindose en clulas grandes capaces
de destruir la mayora de los agentes patgenos.
Algunas veces se mencionan con nombres ms
especficos que indican su localizacin, por
ejemplo: 1) histiocitos, en el tejido conjuntivo,
2) microgla, en el sistema nervioso y 3) clulas
de Kupffer, en el hgado (vase figura 5.3).
Infortunadamente, los fagocitos, al igual que
otras defensas inespecficas, no son totalmente
efectivos y las infecciones pueden aparecer en
Inmunologa bsica / 121
algn momento. Los principales factores deter
minantes de la inefectividad de los fagocitos son:
La edad y el estado nutricional.
- Edad. Generalmente la mayora de las en
fermedades y, por supuesto, las de origen infec
cioso suelen ser ms graves en los extremos de
la vida: la infancia y la senectud. En la infancia,
se asocia a la desaparicin de los anticuerpos
matemos, la inmadurez del sistema inmunitario
y a la pobre respuesta inflamatoria y fagocti-
ca. En la senectud, se presentan alteraciones
anatmicas que dificultan la eliminacin de los
agentes patgenos (bronquiectasias o adenoma
de prstata), tambin, una disminucin progre
siva de la respuesta inmunitaria.
- Estado nutricional. La desnutricin cau
sada por una prolongada carencia de alimentos
e inadecuada alimentacin se asocia con mayor
gravedad y frecuencia las enfermedades infec
ciosas. Esta situacin se presenta por disminu
cin de la actividad fagoctica, leucopenia (dis
minucin de los leucocitos o glbulos blancos),
o la avitaminosis que conlleva a una falta de
proteccin de las mucosas, entre otras.
3. Clulas asesinas naturales. Las clulas
asesinas naturales estn constituidas por un
grupo nuevo de linfocitos que destruyen muchos
tipos de clulas extraas, principalmente las tu-
morales o infectadas por virus. Se les conoce con
las letras maysculas NK, que vienen del ingls
Natural Killer. No son clulas T ni B y despus
de la estimulacin para su produccin, su nmero
no aumenta ni generan memoria inmunolgica.
122 / Microbiologa bsica para el rea de la salud y afines
Estas clulas acaban con la mayora de ese
pequeo y constante flujo de agentes patgenos
que logran atravesar las barreras o defensas
externas del cuerpo humano. Su mecanismo de
accin, generalmente, consiste en causar lisis
celular y ocasiona alteracin de la membrana
citoplasmtica.
Interfern
En la segunda lnea de defensa tambin tienen
gran importancia ciertas sustancias proteicas a
las cuales se les dio el nombre de interfern.
Los interferones son sintetizados por la mayora
de las clulas humanas como respuesta a una
invasin por virus, parte de estas protenas son
liberadas a la circulacin. Su nombre viene de
la funcin que cumplen: interferir la capacidad
viral para producir enfermedades.
Son protenas de bajo peso molecular (17.000
Dalton) que impiden la multiplicacin de los
virus al estimular la produccin de protenas
antivirales.
Complemento
Con este nombre se conoce a cada uno de los
miembros de un grupo aproximado de 20 enzi
mas plasmticas inactivas, que llevan a cabo una
funcin muy importante en la segunda lnea de
defensa. Las molculas del sistema del comple
mento se activan en una cascada de reacciones
qumicas desencadenadas por mecanismos de
defensa especficos e inespecficos, de una ma
nera secuencial y ordenada, interactando con
las bacterias u otro tipo de material extrao y
al final de la cascada del complemento, ocurre
la lisis o prdida de los componentes celulares,
como resultado del dao a la membrana citoplas
mtica de la clula extraa que desencaden la
activacin del complemento.
El sistema del complemento se designa con
la letra C mayscula y consta de una serie de
componentes proteicos mencionados con una C
y un nmero, ejemplo: Cl, C2, C3, ... y as su
cesivamente y solo se activa con los anticuerpos
o inmunoglobulinas G y M (IgG e IgM).
Inmunidad especfica
A diferencia de la inmunidad inespecfica, los
mecanismos inmunitarios especficos solo atacan
agentes extraos especficos que el organismo ha
reconocido como ajenos.
Esta clase de inmunidad se considera como
una tercera lnea de defensa del organismo y
est a cargo de un tipo de leucocitos llamados
linfocitos. Los linfocitos se originan, como todas
las clulas sanguneas, de unas clulas madre
hematopoyticas (productoras de sangre) loca
lizadas en la mdula sea roja del feto.
Los linfocitos se diferencian en linfocitos B
y linfocitos T tambin conocidos como clulas
B y clulas T.
La inmunidad especfica se caracteriza
porque posee tres propiedades: especificidad,
memoria y tolerancia.
1. Especificidad. La respuesta especfica
no se produce inmediatamente que sucede el
contacto con el antgeno (Ag) o agente extrao
capaz de estimular una respuesta inmunitaria,
sino que tiene unos das de retraso. Pero cuando
la respuesta ocurre solo se direcciona hacia los
antgenos del agente patgeno.
2. Memoria. Cuando el sistema inmunitario
ha producido una respuesta especfica anti
cuerpo (Ac) especfico al estar en contacto
por primera vez con un determinado antgeno,
se produce un efecto llamado memoria in-
munolgica, es decir, que cuando el sistema
inmunitario detecta por segunda vez el mismo
antgeno produce grandes cantidades del mismo
anticuerpo especfico que reaccionan con ese
agente patgeno y lo destruyen.
3. Tolerancia. Es la incapacidad del sistema
inmunitario para organizar una respuesta inmu
ne frente a determinados antgenos, porque las
clulas del hospedador tambin son antgenos
potenciales.
Por causa de la tolerancia, la respuesta inmune
del hospedador hace diferencia entre las mol
culas extraas no propias, y por consiguiente,
potencialmente perjudiciales y las molculas
propias e inocuas del hospedador e interacciona
adecuadamente con ellas.

Linfocitos T
Por definicin los linfocitos T son clulas que
han pasado por el timo (donde aprenden a
diferenciar entre lo propio y lo extrao) antes
de migrar al bazo, a los ganglios linfticos y al
hgado. Representan de 70 a 80% de los linfo
citos circulantes.
Las clulas T secretan esas sustancias llama
das citocinas o citoquinas que actan directa o
indirectamente sobre los agentes patgenos y
son la principal fuente productora de citocinas
en el transcurso de la respuesta inmunitaria. La
produccin de citocinas no es exclusiva de los
linfocitos T, existen otras clulas que tambin
pueden hacerlo como los macrfagos, los mas-
tocitos, los granulocitos, los fibroblastos y las
clulas endoteliales.
Algunas citocinas tienen nombres muy espe
cficos segn la funcin que desempeen:
1. Factor activador de macrfagos. Estimula
los macrfagos para que destruyan los agentes
extraos fagocitndolos velozmente.
2. Factor quimiotctico. Atrae a los macrfa
gos haciendo que cientos de ellos migren cerca
de una clula T.
3. Factor inhibidor de la migracin. Detiene
la migracin de los macrfagos.
4. Linfotoxina. Es una sustancia con gran
poder txico que acta de forma ms directa, y
elimina rpidamente las clulas que ataca.
5. Otras linfocinas. Se nombran como inter-
leucina 1, interleucina 2, interleucina 3 e interleu-
cina 4 , todas con funciones especficas (tambin
se mencionan como interleuquinas 1, 2, 3y 4).
Este tipo de inmunidad mediada por los lin
focitos T se denomina inmunidad celular.
Linfocitos B
Estas clulas representan de 5 a 15% de los lin
focitos circulantes. El desarrollo de los linfocitos
B se produce en 2 etapas o fases:
Primera fase. En el pollo la primera fase se
produce en un rgano llamado bolsa de Fabri-
cio, por eso, se denominan clulas B. Como los
mamferos no poseen este rgano, otro u otros
Inmunologa bsica / 123
rganos deben suplir esta ausencia y actuar
como sitio para que se d la primera fase de
desarrollo de las clulas B. En los mamferos la
funcin linfopoytica es asumida por el tejido
hematopoytico del hgado durante su estado
fetal y posteriormente por la mdula sea, donde
persiste por el resto de la vida.
Segundafase. Esta etapa de desarrollo se pro
duce cuando la clula B adquiere en su superficie
un receptor especfico para el antgeno llamado
inmunoglobulina (Ig) o anticuerpo (Ac). La
inmunidad mediada por linfocitos B se conoce
como inmunidad humoral (vase figura 5.4).
Tanto los linfocitos T como los B, se origi
nan de las clulas madre de la mdula sea. El
desarrollo de ambos se inicia por divisin de la
clula madre que produce clulas, bien sea pre-T
o pre-u, _gn el caso. Las clulas pre-B se desa
rrollan en tejidos equivalentes de la bolsa, como
el saco vitelino, el hgado fetal y la mdula sea.
Las clulas pre-T migran al timo donde se desa
rrollan. Ya desarrolladas y formadas las clulas B
y T pasan al torrente sanguneo y circulan hasta
los ganglios linfticos y el bazo.
Entre los exponentes de la respuesta inmunita
ria, los principales son los dos tipos de linfocitos
mencionados como clulas B y clulas T, descritos
en los prrafos anteriores (vase tabla 5.1). Estos
dos tipos de clulas desempean funciones muy
diferentes en la respuesta inmunitaria, pero en los
dos casos el sistema inmunitario sigue tres pasos
fundamentales: 1) reconocer al invasor; 2) lanzar
un ataque, y 3) recordar al invasor para repeler
invasiones futuras.
Antes de continuar con este tema, es impor
tante enfatizar en los siguientes conceptos:
1. Antgeno (Ag). Molculas grandes y com
plejas (macromolculas) de alto peso molecular,
superior a las 100.000 UMA, potencialmente pa
tgenas que inducen al sistema inmunitario a pro
ducir cierto tipo de respuestas muy especficas. La
mayora de los antgenos son protenas extraas
al organismo, es decir, extraas a la especie. No
necesariamente todos los antgenos deben ser
protenas, algunos pueden ser polisacridos como
la cpsula de las bacterias, los cidos nucleicos y
sustancias inertes, entre otras sustancias.
124 / Microbiologa bsica para el rea de la salud y afines
2. Determinantes antignicos. Son pequeas
zonas ubicadas en la superficie de la molcula
antignica que pueden presentar formas variadas.
Los determinantes antignicos se conocen con
un nombre ms sencillo y menos largo: eptopo.
Por ejemplo, si la molcula antignica es una
protena, el eptopo est compuesto por una
secuencia de aminocidos de estructura rgida
que forman parte de una cadena de aminocidos
mucho ms larga. La sucesin de aminocidos de
un eptopo determina su forma, y como la suce
sin es diferente en los distintos antgenos, cada
clase de estos puede tener eptopos especficos
y de forma nica.
 Inmunologa bsica / 125

Tabla 5.1 Clulas comprometidas en la respuesta inmunitaria

Nombre de las clulas Descripcin

Macrfagos Glbulos blancos que engloban a los agentes extraos o patgenos y avisan a
otras clulas inmunitarias que se ha presentado una invasin

Clulas asesinas Glbulos blancos que destruyen clulas del cuerpo que han sido infectadas o
clulas cancerosas.

Clulas B Linfocitos que producen anticuerpos (Ac) o inmunoglobulinas (Ig)

Clulas plasmticas Clulas descendientes de clulas B que secretan anticuerpos al torrente san
guneo

Clulas B de memoria Clulas descendientes de clulas B que proveen una inmunidad futura contra
invasiones causadas por el mismo antgeno (Ag)

Clulas T Grupo de linfocitos que regulan la respuesta inmunitaria o destruyen (matan) a

ciertos tipos de clulas

Clulas T citotxicas Clulas descendientes de clulas T que destruyen clulas que son un blanco
especfico, principalmente clulas eucarlticas ajenas, clulas infectadas o
clulas cancerosas del cuerpo

Clulas T auxiliares Clulas descendientes de clulas T que inducen respuestas inmunitarias por
parte de las clulas B y T citotxicas

Clulas T supresoras Clulas descendientes de clulas T que inhiben las respuestas inmunitarias de
otros linfocitos cuando el invasor ha sido controlado

Clulas T de memoria Clulas descendientes de clulas T que proveen una Inmunidad futura contra
invasiones causadas por el mismo antgeno

3. Anticuerpo (Ac). Sustancias que carac 8. Punto de combinacin. Lo determinan

terizan la respuesta inmunitaria humoral, des
encadenada por los linfocitos B. Su principal
caracterstica es la capacidad de reaccionar con los
antgenos que indujeron su produccin. El trmino
ms aceptado y de uso ms general para referirse
a los anticuerpos es inmunoglobulina (Ig).
4. Clon. Se refiere a una familia de clulas en
la que todas descienden de una misma clula.
5. Complemento. Se refiere a un grupo de
protenas plasmticas que, cuando se activan,
actan juntas para destruir clulas extraas.
6. Hapteno. Es una molcula que no produce
una respuesta inmune por s misma, pero que
puede reaccionar con un anticuerpo especfico.
7. Toxoide. Es el equivalente a ciertas toxinas
que por accin de un agente fsico, como el calor,
o un agente qumico, han perdido su efecto txico,
pero no su capacidad antignica, es decir, continan
siendo antgenos.
pequeas regiones de forma cncava ubicadas en
la superficie de la molcula del anticuerpo. Estos
puntos de combinacin de los anticuerpos tienen
una forma tal que permiten que los eptopos anti-
gnicos encajen perfectamente en ellos quedando
unidos el antgeno y el anticuerpo. A esta unin
se le llama complejo antgeno-anticuerpo. Como
los puntos de unin reciben y fijan antgenos,
tambin se les denomina receptores antignicos
y puntos o sitios fijadores de antgenos.
Clases de antgenos
Los antgenos pueden ser de diversas clases entre
ellas tenemos:
1. Antgeno viral. Los virus son excelentes
antgenos porque la cpside y el cido nucleico
son buenos antgenos individualmente y, por
consiguiente, la nucleocpside tambin lo es.
126 / Microbiologa bsica para el rea de la salud y afines
2. Antgeno fngico. Las partes que constitu
yen los hongos son buenos antgenos: la pared,
las hifas, las toxinas, entre otros.
3. Xenoantgeno. Esta clase de antgenos
procede de especies diferentes, es decir, son
xenognicos. Ejemplo: los antgenos de las
bacterias, de los hongos o de los animales son
xenoantgenos para el hombre.
4. Aloantgeno. Proceden de individuos de
la misma especie, pero de diferente constituci n
gentica, es decir, son alognicos. Por ejemplo,
los antgenos eritrocitarios responsables de los
grupos sanguneos A, B, O y Rh; los antgenos
de histocompatibilidad responsables del rechazo
de trasplantes.
5. Autoantgeno. Son sustancias del propio
organismo que no son reconocidas como propias
y, por tanto, el sistema inmunitario, de ese orga
nismo, responde contra ellas.
6. Toxoide. Como ya se mencion, es una
sustancia que por accin del calor o productos
qumicos ha perdido su virulencia, pero conserva
su propiedad antignica intacta.
7. A ntgeno bacteriano. Se presentan
varios tipos de antgenos bacterianos, entre
ellos: 1) antgeno K (Vi), se encuentra en
la cpsula de las bacterias que la poseen;
2) antgeno H, est en los flagelos de las bacterias
que poseen estos apndices; 3) antgeno O, se
consideran antgenos somticos: la pared, la
membrana citoplasmtica, cidos nucleicos y
dems estructuras internas de la bacteria; 4) an
tgeno secretado, constituido principalmente por
exotoxinas y exoenzimas (vase figura 5.5).
Anticuerpos
Todos los anticuerpos comparten el mismo pa
trn estructural, son protenas producidas por las
clulas B como respuesta inmunitaria al estmulo
causado por un antgeno y poseen caractersticas
fisicoqumicas muy similares. A estas protenas o
anticuerpos se les conoce como inmunoglobulinas,
se las identifica con la sigla Ig y, como todas las
protenas, son molculas muy grandes formadas
por largas cadenas de aminocidos o polipptidos.
Se encuentran presentes en el suero y en otros
lquidos corporales como las secreciones gstricas,
la leche materna, la saliva, entre otras.
Cada molcula de inmunoglobulina la forman
cuatro cadenas polipeptdicas: dos cadenas pesa
das o H (heavy) y dos cadenas livianas o ligeras
o L (,light). Estas cadenas se unen entre s por
puentes disulfuro, de tal manera que la molcula
de inmunoglobulina en conjunto tiene la forma de
la letra Y. Las dos cadenas pesadas estn unidas

una a la otra por un nmero variable de puentes de
azufre (2 a 15) y cada cadena pesada se une a una
cadena ligera, tambin, por puentes disulfuro.
Cada molcula pesada tiene 446 aminoci
dos, es decir, que son ms largas y pesan aproxi
madamente el doble de las cadenas livianas.
Las cadenas pesadas y livianas poseen unas
regiones variables, mencionadas con las letras
VH para las cadenas pesadas y VL para las li
geras, esto quiere decir, que son regiones en las
cuales las secuencias de aminocidos varan en
las diferentes molculas de anticuerpos y son las
responsables de la especificidad.
Las cadenas pesadas y livianas poseen,
adems de las regiones variables, unas regiones
constantes, tambin nombradas con dos letras
CH, para las pesadas y CL, para las ligeras,
formadas por 106 aminocidos cuya secuencia
es exactamente igual en todas las molculas de
inmunoglobulinas. Las cadenas pesadas tienen
tres regiones constantes y las livianas solo una.
Las cadenas pesadas se unen entre s por los
enlaces disulfuro que, a su vez, se unen a las cade
nas livianas adyacentes por los mismos enlaces.
Los extremos externos, formados por la cade
na pesada y la liviana, poseen un grupo conocido
como amino terminal (-N) y es precisamente
aqu donde se encuentra el sitio de unin del
antgeno. El extremo contrario, formado por las
dos cadenas pesadas, posee un grupo llamado
carboxilo terminal (C-).
En 1959, R. Porter demostr que al tratar
una molcula de inmunoglobulina (el estudio
lo realiz con la IgG) con una proteasa como
la enzima papana o la pepsina, en presencia de
cisterna, la molcula se parta en dos fracciones
importantes:
1. Fraccin Fab. En esta se determinaron
dos sitios de unin antignica. Ubicados en los
extremos de cada par de regiones variables o
ab, esta sigla se refiere a las iniciales en ingls
de la expresin unin con el antgeno antigen
binding fragment.
2. Fraccin C o Fe. En el experimento esta
fraccin no se una con el antgeno, pero se cris
talizaba fcilmente. La C se refiere a cristaliza-
ble: crystallizable fragment (vase figura 5.6).
Inmunologa bsica / 127
Clases de anticuerpos
o inmunoglobulinas
En la mayora de los mamferos superiores existen
cinco tipos diferentes de inmunoglobulinas tam
bin denominados isotipos: IgG, IgA, IgM, IgD
e IgE. Actualmente se han descrito dos subclases
de IgA: IgAl, IgA2 y cuatro subclases de IgG:
IgGl, IgG2, IgG3, IgG4 (Vase Tabla 5.2).
El nombre de la inmunoglobulina lo da la es
tructura primaria o secuencia de aminocidos de
las cadenas pesadas (isotipo de cadena pesada) y se
nombran por las letras derivadas del griego, as.
1- IgG Gamma = y
2. IgA Alfa =a
3. IgM Mu - p
4. IgD Delta - 5
5. IgE Epsilon = s
Existen, adems, dos tipos de cadenas li
vianas nombradas tambin por letra griegas k
(kappa) y X (lambda).
Una molcula de inmunoglobulina solo puede
tener un tipo de cadena liviana, o bien k, o bien
X, pero en el suero humano normal pueden haber
molculas de, por ejemplo IgG, que tengan cade
nas livianas k y otras con cadenas livianas X.
Como el nombre de la inmunoglobulina lo
da la secuencia de aminocidos de la cadena
pesada, para el caso que describimos, el nombre
sera y, es decir, IgG.
Por ejemplo: la frmula estructural de la IgG,
se representa de la siguiente forma:
1. y2K2 si la molcula posee cadenas livianas k.
2. y2X2 si la molcula posee cadenas livianas
X (vase figura 5.7).
Inm unoglobulina G
La inmunoglobulina G o IgG constituye de 70 a
75% de todos los anticuerpos circulantes y pre
domina en la segunda respuesta de anticuerpos,
es decir, que esta es la respuesta que sigue a con
tactos posteriores con un antgeno determinado,
corresponde a la segunda lnea de defensa.
Esta inmunoglobulina defiende al organismo
contra muchos patgenos que podran ser transpor
tados por la sangre, como: bacterias, virus y algunos
128 / Microbiologa bsica para el rea de la salud y afines

Tabla 5.2 Clases de inmunoglobulinas humanas (Ac) y sus propiedades

ig Concentracin Sitios de Propiedades Distribucin

srica (mg/ml) unin al
antgeno

IgG (y) 13,85 2 Es principal anticuerpo (Ac) Fluido extra-celular, sangre y

circulante y se une al com linfa y atraviesa la placenta
plemento

IgA (a) Srica 3,5 2 Es un importante anticuerpo En el suero

circulante (en forma de monmero)

Secretora 4 Es el principal anticuerpo En las secreciones (en for

0,05 presente en las secreciones ma de dmero)

IgM (M) 1,5 10 Es el primer anticuerpo po- Sangre, linfa y superficie de

sinmunizacin y tiene fuerte los linfocitos B
unin al complemento

IgE (s) 0,00005 2 Participa en las reacciones Solamente en sangre y linfa

alrgicas, porque presenta
un fragmento (CH4) que es
capaz de unirse a las clulas
cebadas o mastocitos

IgD (5) 0,03 2 Es el anticuerpo circulante Sangre, linfa y superficie de

que se encuentra en menor los linfocitos B
cantidad

hongos y toxinas. Tambin, tiene la capacidad de
atravesar la placenta, pasando de la sangre de la
madre al feto. Esta accin se facilita porque son
molculas de un nico monmero, formadas por
una sola unidad bsica de anticuerpo, relativamente
pequea, que se encargan de la proteccin del recin
nacido cuando entra en contacto con sustancias
extraas. Esta proteccin es de mucha importancia
porque el nio nace con altos niveles de IgG ma
terna, que lo protegern (como inmunidad pasiva)
durante los primeros meses de vida, mientras
comienza su produccin regular de anticuerpos,
que solo se inicia despus del nacimiento. Otras
funciones son estimular macrfagos y activar el
sistema de complemento (vase figura 5.8).
Inm unoglobulina M
La inmunoglobulina M o IgM representa el 10% de
las inmunoglobulinas totales y es la primera inmu
noglobulina que aparece en la respuesta inmune,
el primer anticuerpo producido por el neonato y el
anticueipo predominante en la respuesta inmune
primaria. Es una inmunoglobulina de muy alto
peso molecular porque cada molcula de IgM la
forman cinco unidades bsicas de anticuerpos en
forma de Y, unidas por puentes disulfuro. Las mo
lculas se encuentran asociadas con un polipptido
conocido como cadena J o joining Can.
La inmunoglobulina la sintetizan las clulas B
inmaduras y es el anticuerpo predominante tras el
contacto inicial con un antgeno, primera lnea de
defensa. Igual que la IgG, la IgM puede neutralizar
cuerpos extraos (antgenos) como bacterias, virus
y hongos. Por sus numerosos puntos de unin puede
aglutinar clulas, tambin estimula macrfagos y ac
tiva el sistema de complemento (vase figura 5.9).
Inm unoglobulina A
Las molculas de inmunoglobulina A o IgA
pueden presentarse como monmeros y como

polmeros. Esta inmunoglobulina la forman
dos unidades bsicas de anticuerpos unidas
por una cadena proteica que se conoce como
cadena J y un componente secretor, SC. Es el
principal anticuerpo presente en las mucosas del
organismo (secreciones seromucosas del tracto
respiratorio y genitourinario), en la saliva, las
lgrimas, el moco, secreciones gastrointestina
les, traqueobronquiales y en la leche materna, la
mayor cantidad de este anticuerpo se encuentra
en la leche calostro. La IgA impide el ataque de
las superficies epiteliales por virus y bacterias.
Inmunologa bsica / 129
Defiende contra los patgenos inhalados o
ingeridos. Se localiza estratgicamente en las
vas respiratorias, tubo digestivo, vas urina
rias, conducto reproductivo y surco gingival.
Cuando se presenta con dos unidades bsicas
de anticuerpos se denomina inmunoglobulina
A secretora (IgAS) y las cadenas livianas de
ambos monmeros son del mismo tipo k o X,
pero no un monmero k y el otro X. Cuando
aparece como monmero se conoce como in
munoglobulina A srica y se encuentra en el
suero normal (vase figura 5.10).
130 / Microbiologa bsica para el rea de la salud y afines
In m u n o g lo b u lin a E
La inmunoglobulina E o IgE est compuesta
forma una sola unidad bsica de anticueipo y,
a diferencia de las otras molculas de inm u
noglobulina, sus cadenas pesadas estn unidas
por dos enlaces disulfuro y un puente disulfuro
une las cadenas pesadas y livianas entre s.
Se encuentra en muy baja concentracin en
el suero y su vida media es aproximadamente
de dos a tres das, es importante porque puede
producir interesantes efectos nocivos, como los
relacionados con las reacciones alrgicas. Los
antgenos que la estimulan se llaman alergenos
(vase figura 5.11). Aunque el suero contiene
 Inmunologa bsica / 131

cantidades bajas de IgE, se encuentran en la

superficie de los basfilos y de los mastocitos
de todos los individuos y tambin sensibiliza
a algunas mucosas como la nasal, bronquial y
conjuntival. Algunos reportes indican que esta
Ig desempea algn papel defensivo contra
los parsitos helmintos, pero la mayora de los
cientficos inmunlogos la relacionan con las
enfermedades alrgicas, como el asma o la fiebre
del heno. Hasta hace poco, se pensaba que el
receptor de alta afinidad para la IgE se ubicaba
exclusivamente en los mastocitos y basfilos,
pero investigaciones recientes publicaron que
las clulas de Langerhans (islotes pancreticos
de Langerhans) y las clulas madre podran
poseer tambin ese receptor.

Inmunoglobulina D

La molcula de inmunoglobulina D o IgD

tambin esta compuesta una sola unidad bsica
de anticuerpo. Se encuentra-en cantidades muy
pequeas en la sangre, aproximadamente en
1%, an se ignora su funcin biolgica exacta,
sin embargo, se reporta gran actividad de este
anticuerpo cuando se presentan deficiencias de
insulina y tambin cuando se presentan reaccio
nes alrgicas ocasionadas por la penicilina.
Cuando realizaban estudios de una protena
poco comn que se encontraba asociada con el
mieloma humano, (tumor en la mdula sea), se
produjo el descubrimiento de la IgD. Debido a su
baja concentracin en el suero normal los estudios
no han aportado resultados exitosos, por tanto, su
funcin en el conjunto de la respuesta inmune es
poco conocida (vanse figuras 5.12 y 5.13).

Reacciones antgeno-anticuerpo

Los anticuerpos luchan para que permanezcamos

saludables, para que no nos enfermemos, recono
ciendo las sustancias extraas o anormales.
El tipo de inmunidad mediada por anticuer
pos se conoce como inmunidad humoral porque
se produce en el plasma, que es uno de los hu
mores o lquidos del cuerpo. Cuando el antgeno
se une con el anticuerpo se forma un complejo
132/ Microbiologa bsica para el rea de la salud y afines

llamado antgeno-anticuerpo que puede reaccio
nar en formas diferentes. La forma ms fcil de
estudiar las reacciones antgeno-anticuerpo es in
vitro, utilizando preparaciones de antgenos y an
tisueros. Este estudio se llama serologa y es de
especial importancia en la microbiologa clnica
diagnstica. Pueden observarse diferentes tipos
de reacciones antgeno-anticuerpo, pero solo se
mencionan algunas (vase figura 5.14).
Aglutinacin
En la reaccin de aglutinacin los anticuerpos
capturan antgenos particulados o celulares como
virus, bacterias, esporos, eritrocitos, etc., hacen
que se adhieran entre s y forman racimos, lo que
permite que los macrfagos y otros fagocitos los
eliminen con mayor rapidez, al ingerir y digerir,
y dirigen muchos antgenos de una sola vez. La
aglutinacin o aglomeracin al formar agregados
Inmunologa bsica / 133
o racimos mayores puede visibilizarse a simple
vista. Esta reaccin se utiliza eventualmente para
la determinacin del grupo sanguneo, para la
identificacin de especies bacterianas y de an
ticuerpos contra algunas protenas bacterianas,
como la protena de la tuberculosis, entre otras
pruebas de identificacin (vase figura 5.15).
Precipitacin
Otra reaccin antgeno-anticuerpo donde, a
diferencia de la anterior, el antgeno es soluble,
por ejemplo, venenos, enzimas, sueros, entre
otros. Esta reaccin experimentalmente se pue
de realizar una prueba inmunolgica llamada
inmunodifusin en gel. Se toma una placa con
el gel, al cual, se le realizan dos orificios, uno
para los antgenos y otro para los anticuerpos. Los
lquidos depositados en los orificios comienzan
a difundirse en el gel y cuando se encuentran
134 / M icrobiologa bsica para el rea de la salud y afines

forman una banda visible, la cual indica que los

anticuerpos eran especficos para esos antge
nos, por lo tanto, la reaccin es positiva (vase
figura 5 16).
Otra variacin para observar los resultados
de la precipitacin en gel es la difusin doble en
dos dimensiones. Los resultados se interpretan
en la figura 5.17.
Una diferencia para tener en cuenta entre las
reacciones de aglutinacin y de precipitacin es
que el antgeno en la aglutinacin es insoluble,
antgeno particulado.

Neutralizacin
En la reaccin de neutralizacin, las toxinas bac
terianas o exotoxinas son neutralizadas por an
ticuerpos especficos. Esto se produce cuando
las molculas de toxina y las molculas de
anticuerpos respectivas se combinan, de tal
manera, que la porcin activa de la molcula de

toxina, que es la responsable del dao celular,
queda bloqueada.
Otras reacciones de naturaleza similar ocu
rren cuando, por ejemplo, anticuerpos especfi
cos neutralizan la accin de los virus. La cpside
viral es un antgeno que estimula el sistema
inmunitario y produce anticueipos especficos
contra las protenas de la cpside; al neutralizarse
la cpside, el virus no puede realizar el primer
paso de la replicacin viral, o sea, la adsorcin
a la clula (vase figura 5.18).
Tipos de inmunidad especfica
Existen dos grandes tipos de inmunidad espec
fica: heredada y adquirida.
La inmunidad heredada. Se produce cuando
la inmunidad a ciertas enfermedades se desa
rrolla por procedimientos genticos antes del
nacimiento. Esta inmunidad tambin se conoce
como inmunidad innata.
La inmunidad adquirida. Es la que se con
sigue despus del nacimiento y se divide en:
inmunidad natural e inmunidad artificial y a su
vez cada una puede ser activa o pasiva.
1. Inmunidad adquirida natural activa. Se
Inmunologa bsica / 135
consigue cuando la persona adquiere una en
fermedad que le proporciona inmunidad, por
ejemplo: sarampin, viruela, etc.
2. Inmunidad adquirida natural pasiva. Se
produce cuando se adquieren anticuerpos en for
ma natural, ejemplo: el feto recibe proteccin de
la madre cuando la inmunoglobulina G atraviesa la
placenta y el lactante la recibe cuando la madre
le proporciona inmunoglobulina A secretora por
medio de su leche.
3. Inmunidad adquirida artificial activa. Este
tipo de inmunidad lo proporcionan las vacunas
que se aplican a las personas para evitar que
contraigan una enfermedad especfica.
4. Inmunidad adquirida artificial pasiva. Se
consigue cuando a un organismo se le proporcio
nan anticuerpos prefabricados en un organismo
diferente, por ejemplo: suero antiofdico, gam-
maglobulina prefabricada (vase figura 5.19).
Conceptos bsicos de inmunologa:
sumario
Son tantos los factores que pueden producir
enfermedades, que si un organismo no tuviera
una fuerza de seguridad eficaz que lo defen-
136 / Microbiologa bsica para el rea de la salud y afines

diera de esos peligrosos factores, difcilmente bsicos necesarios para comprender los fen
sobrepasara los primeros das de nacido, porque menos que utiliza el sistema que proporciona
los miles de microorganismos patgenos como defensas contra los enemigos internos e internos:
protozoos, hongos, bacterias, virus, etc., son el sistema inmunitario.
tan omnipresentes y potencialmente letales, que
con facilidad lograran causarle la muerte. Pero Preguntas para autocontrol
estos no son los nicos enemigos, tambin se del aprendizaje
encuentran en el interior del organismo en for
ma de clulas anormales de formas irregulares 1. Explique en qu consiste la capacidad que
que aparecen continuamente. Si estas clulas posee un organismo de distinguir entre lo
lograran sobrevivir, su reproduccin anormal propio y lo extrao.
podra originar la aparicin de tumores, que por 2. En qu momento se da el carcter de ex
s mismos pueden amenazar la vida, adems de trao? Explique.
tener la posibilidad de volverse cancerosos y 3. Qu se entiende por sistema inmune?
difundirse, es decir, hacer metstasis a diferentes 4. Explique con detalle en qu consisten los
puntos del cuerpo. mecanismos de defensa conocidos como
En este captulo se mencionan los conceptos inmunidad inespecfica.
 inmunologa bsica / 137

5. Qu es resistencia de especie o gentica? - Clulas plasmticas

6. En qu consiste la primera lnea de defensa - Clulas B de memoria
de un organismo? D ejemplos y explque- - Clulas T
los claramente. - Clulas T citotxicas
7. Qu es la segunda lnea de defensa y con - Clulas T auxiliares
qu otro nombre se conoce? - Clulas B supresoras
8. Describa el proceso de la fagocitosis. A - Clulas T de memoria
qu lnea de defensa pertenece? 11. Explique con detalle los m ecanismos
9. Cules son los diferentes tipos de fagoci inmunitarios conocidos como defensa es
tos? Describa la importancia de cada uno de pecfica.
ellos. 12. Defina la tercera lnea de defensa. Explique
10. Defina y explique la importancia de los qu son los linfocitos T y B, detalle su im
siguientes trminos. portancia, origen y funciones.
- Clulas asesinas naturales 13. Defina ampliamente la siguiente termino
- Interfern loga.
- Complemento - Antgeno
- Linfocinas - Determinante antignico
- Macrfagos - Anticuerpo
- Clulas B - Clon
138 / Microbiologa bsica para el rea de la salud y afines

- Complemento explique qu representan las letras griegas

- Hapteno que aparecen en ella.
- Toxoide 19. De las reacciones antgeno-anticuerpo,
- Punto de combinacin explique.
13. Cules son las diferentes clases de antge - Aglutinacin
nos? - Precipitacin
14. En un esquema, ubique los antgenos bac - Neutralizacin
terianos K (Vi), H y O. 20. En qu consiste la difusin en gel? Expli
16. Haga el esquema general de una inmuno- que.
globulina, coloque cada una de las partes 21. Esquematice e interprete los posibles resul
que la conforman y explquelas. tados al realizar pruebas de inmunodifusin
17. Mencione las clases de anticuerpos co dobles en dos dimensiones.
nocidos, esquematcelos y describa con 22. Construya un cuadro sinptico e incluya en
amplitud cada uno de ellos. l los diferentes tipos de inmunidad. Expli
18. Escriba la frmula estructural de cada Ig y que cada concepto incluido en el cuadro.
 6
Virus
L o s virus conforman un inmenso y heterog
neo grupo de agentes infecciosos de estructura
subcelular, que se comportan como parsitos
intracelulares obligados de las clulas de los
hospederos que ellos mismos han seleccionado.
Se caracterizan por ser partculas infecciosas
diminutas, de estructura elemental y tener un
mecanismo de replicacin, en el cual el cido
nucleico o material gentico del virus da la in
formacin necesaria para programar a la clula
hospedera y hacerla sintetizar macromolculas
especficas.
Los virus son referidos y descritos como
elementos proteicos y genticos que infectan
una clula, la invaden y se replican a expensas de
ella. A la clula infectada se le denomina clula
hospedadora u hospedera.
Sin embargo, es difcil delimitar exactamente
el concepto de virus si se tiene en cuenta que en
la actualidad se han identificado agentes an ms
pequeos y elementales, los cuales se denominan
viroides y priones.
Viroides. Son agentes que se caracterizan
por estar constituidos exclusivamente por una
molcula de ARN monocatenario, circular, de bajo
peso molecular y porque son capaces de producir
enfermedades en plantas como el coco y los c
tricos, entre otros y causan daos a las cosechas.
Estas molculas infecciosas o viroides hacen
parte de los patgenos ms pequeos reportados
a la fecha. La forma extracelular de un viroide
es el ARN desnudo, es decir, que no tienen una
estructura de proteccin.
Priones. Son molculas de protena infeccio
sas de bajo peso molecular codificadas por genes
de clulas humanas o de animales sanos, que al
sufrir la alteracin de algn codn originaran
protenas insolubles, las cuales al acumularse
en agregados intracelulares aceleraran el curso
de enfermedades que normalmente tienen un
largo periodo de incubacin. Por sus caracte
rsticas submicroscpicas, su estudio se asimila
a la virologa, aunque, en realidad, poco tienen
ver con los virus. Los priones tienen una forma
extracelular distintiva que parece exclusivamen
te proteica. En apariencia no contienen cido
nucleico, sin embargo, la protena del prin es
infecciosa y causa diversas enfermedades en los
animales, principalmente, y en algunos casos en
el hombre. De las enfermedades ms conocidas
causadas por priones estn el prurito lumbar de
las ovejas y cabras conocido como scrapie; la
encefalopata espongiforme del ganado vacuno
o BSE se conoce vulgarmente como enfermedad
de las vacas locas, el Kuru y la enfermedad de
Creutzelt-Jakob o CDJ, en el hombre (todas
estas enfermedades producen una degeneracin
espongiforme caracterstica de la sustancia gris
de la mdula espinal).
Tal vez, la definicin ms aceptada de viras
es la propuesta por el investigador Luria, en
1967, quien los define:
son entidades cuyos genomas son elementos
de cido nucleico que se replican en el interior
de clulas vivas utilizando la maquinaria en
zimtica celular y dando lugar a la sntesis de
elementos especializados que pueden transferir
el genoma viral a otras clulas.
Los virus se replican en las clulas que cons
tituyen las plantas, los animales, el hombre y en
140 / Microbiologa bsica para el rea de la salud y afines
los microorganismos. Causan enfermedades o
infecciones a insectos, peces, microorganismos
en general (eucariticos y procariticos) y, por su
puesto, a las plantas, a los animales y al hombre.
Muchos virus no causan daos importantes
a sus hospederos, pero aun en estos casos tienen
un efecto visible, por ejemplo, el virus de los
tulipanes produce un jaspeado a esas flores,
muy apreciado por los cultivadores, pues los
tulipanes sanos tienen colores uniformes. Otros
virus, por el contrario, son responsables de una
amplia variedad de afecciones en las plantas,
en el ser humano y animales; entre ellas estn
el sarampin, la poliomielitis, la rabia, el sida,
entre otras.
Los virus no poseen capacidad para reali
zar metabolismo, tampoco tienen movilidad
independiente, pero tienen la propiedad de mu
tacin y su estudio se realiza con tcnicas muy
diferentes a las utilizadas para las bacterias y
otros microorganismos. Para poder observarlos,
resulta indispensable la utilizacin del micros
copio electrnico.
Resea histrica
Desde hace siglos se conocen las enfermedades
virales. La primera enfermedad infecciosa para
la cual se descubri un mtodo prctico y eficaz
de prevencin tena origen viral.
En 1796, Jenner vacun a un nio de ocho
aos con el exudado de una lesin de viruela
bovina obtenida de la mano de una ordeadora
(vase resea histrica en el captulo 5: Inmu
nologa).
En 1892, Dimitrii Ivanowski, botnico ingls,
descubri que el agente causal de la enfermedad
mosaico del tabaco era filtrable, adems, demos
tr que la savia de una planta enferma era infec
tante, aun despus de haber sido pasada por filtros
capaces de retener las bacterias ms pequeas
conocidas hasta ese momento. Su experimento se
realiz de la siguiente forma: coloc un filtrado
obtenido del triturado de plantas enfermas y libres
de bacterias, en las hojas de una planta de tabaco
sana y consigui reproducir la enfermedad en las
hojas de la planta (vase figura 6.1).
Caractersticas de los virus
1. Inertes. Los virus en su forma aislada son
inertes, carecen de metabolismo porque no
tienen la maquinaria biosinttica necesaria para
la produccin de energa y sintetizar macromo-
lculas. Por tanto, son incapaces de crecer y multi
plicarse en medios inanimados como los medios
de cultivo sintticos utilizados para los cultivos
bacterianos.
2. Composicin. Estn compuestos por una
cubierta proteica o cpside que protege el cido
nucleico. Algunos poseen, adems de lo anterior,
una capa o membrana lipdica que se ubica ex
ternamente a las estructuras mencionadas.
3. Tamao. Su tamao es increblemente
pequeo, si se tiene en cuenta que las bacterias
se miden en mieras o micrmetros, los virus se
miden en milimicras o nanmetros (nm) que
son unidades mil veces menores y en angstroms
() que son 10.000 veces menores. El tamao
vara de 20 a 300 nm, por tanto, solo pueden
observarse con instrumentos de altsimo poder de
resolucin, como el microscopio electrnico.
4. Filtrables. Los virus no son retenidos por
los filtros ni membranas que retengan las bacte
rias de menor tamao conocidas.
5. Termolbiles. Presentan gran sensibili
dad a temperaturas entre 50 y 65 C, durante
30 min.
6. Estables a temperaturas bajas. Pueden
continuar activos a temperaturas de subcongela-
cin: -75 C o inferiores. Pueden ser conservados
en estado seco a temperaturas de 4 C. Tambin
presentan estabilidad a pH comprendido entre los
valores 5,0 y 9,0, aunque algunos virus, como
los que afectan las vas entricas, son resistentes
a las condiciones cidas.
7. Tienen un solo cido nucleico. Todas las
formas de vida contienen ADN y ARN, pero el
virus solo contiene uno de los dos: ADN o ARN
y de ninguna forma ambos cidos nucleicos en
el mismo virus.
8. Parsitos intracelulares obligados. Esta
caracterstica hace que nicamente puedan ser
cultivados en tejidos vivos, animales de experi
mentacin, embriones, cultivos celulares, etc. Es

decir, que los virus solo se activan cuando infec
tan una clula viva pues su informacin gentica
es suficiente, en ese momento, para duplicar su
cido nucleico y lograr invadir y, posteriormente,
salir de la clula hospedera.
9. Cristalizables. Es una propiedad que
contribuye a los estudios de la virologa, porque
permite analizar la organizacin de las sub-
unidades proteicas que conforman la cpside o
cubierta proteica protectora del material gentico
del virus, quienes informan si los virus que se es
tudian poseen cpsides helicoidales, polidricas,
combinaciones ms complejas de ambas formas
como los virus bacterianos o bacterifagos que
generalmente muestran una cabeza polidrica
y una cola helicoidal.
10. Sensibles. 1) A una protena producida
por las clulas humanas, excepto por los glbulos
rojos, llamada interfern, que pertenece a esa
gran familia de las citoquinas que inhiben la
duplicacin viral porque, los interferones, son los
primeros que actan en el cuerpo (en horas) en
Virus / 141
la respuesta defensiva contra una infeccin viral;
2) a temperaturas superiores a 45 C; 3) al ter
que inactiva los virus que poseen la membrana
rica en lpidos que envuelve a la cubierta proteica
de proteccin o cpside; 4) al formaldehdo que
destruye la infectividad del virus al reaccionar
con el cido nucleico.
11. No son sensibles. 1) A los antibiticos;
2) a las sulfonamidas antibacterianas, y 3) a las
temperaturas bajas.
Morfologa
Con los adelantos del microscopio electrnico
y el perfeccionamiento de las tcnicas de con
traste, se ha logrado observar gran variedad de
morfologas virales altamente simtricas (vase
figura 6.2). En los virus se reconocen dos tipos
de simetras: la cilindrica y la esfrica corres
pondientes a las dos formas primarias que poseen
casi todos ellos. Los virus con forma cilindrica
poseen simetra helicoidal (virus del mosaico
142 / Microbiologa bsica para el rea de la salud y afines
 I
del tabaco o TMV), y los esfricos, simetra
icosadrica (virus del papiloma humano o HPV).
Esta morfologa muestra una estructura simtrica
casi esfrica, compuesta por veinte caras y se
constituye en el modo ms eficiente de ordenar
las subunidades proteicas (los capsmeros) en
una cubierta cerrada (la cpside), utilizando el
menor nmero de unidades y la mayora de los
virus tienen ms cido nucleico del que puede
empaquetarse en otro tipo de simetra.
Composicin
El estudio de la composicin qumica de los
virus ha sido posible gracias a los adelantos
tecnolgicos y al empleo de diversas tcnicas
analticas que han logrado purificar y concentrar
los virus, sin desnaturalizar sus componentes.
Estos estudios han permitido observar que los
virus estn compuestos por: cido nucleico,
diversas protenas y en algunos casos por car
bohidratos y lpidos.
1. Acido nucleico. Es el soporte de la info-
macin gentica, de la capacidad de replicacin
y por consiguiente de la infecciosidad. Como los
virus nicamente posee un solo tipo de cido nu
cleico, ADN o ARN, pero en ningn caso los dos
al mismo tiempo, los cientficos los clasificaron en
dos grandes grupos: 1) desoxirribovirus cuando
su cido nucleico es ADN, y 2) rbovirus cuando su
cido nucleico es ARN.
Los rbovirus son el nico ejemplo en la
naturaleza de agentes infecciosos, en los cuales
el ARN es el portador de toda la informacin
gentica.
Este cido nucleico puede estar constituido
por una sola cadena de nucletidos (cido nu
cleico monocatenario), o por una doble cadena
de nucletidos (cido nucleico bicatenario).
El peso molecular y longitud del cido nu
cleico se relacionan con el tamao del virus y
puede presentarse como una gran molcula lineal
o circular (vase figura 6.3).
2. Protenas. Estos compuestos constituyen
cuantitativamente la fraccin ms importante
de los virus, de 50 a 90% del total de sus com
ponentes, y tienen como funcin la proteccin
Virus / 143
del genoma viral de la accin de las enzimas
intracelulares de la clula hospedera como las
nucleasas, por ejemplo.
3. Lpidos. Los virus no pueden producir
sus propios lpidos, por consiguiente, deben
obtenerlos a expensas de las clulas que infectan
y pueden ser diversos tipos de lpidos, segn la
clula que estn infectando.
Los virus que presentan envoltura rica en
lpidos se describen como virus cubiertos o en
vueltos y son sensibles a los disolventes de grasas
como el ter, cloroformo y sales biliares. Los que
no la poseen son virus desnudos y son resistentes
a esas sustancias (vase figura 6.4).
4. Carbohidratos. Estas sustancias tambin
son obtenidas a expensas de las clulas infec
tadas y se ubican en la cubierta viral en forma
de glucoprotenas conformadas por diferentes
monosacridos como fructosa, maosa, gluco-
samina, galactosa. Los carbohidratos o glcidos
que se encuentran en los virus hacen parte de los
azcares que componen el cido nucleico.
Adems de las sustancias mencionadas, los
virus ms complejos presentan huellas de me
tales y sustancias vitaminoides.
Estructura
Los virus estn compuestos por:
Cpside. Es una cubierta proteica, simtrica y
rgida que protege el cido nucleico componente
del genoma viral. Las cpsides estn constituidas
de una manera altamente simtrica, es decir, que
las formas de las unidades proteicas se ordenan
en forma perfectamente regular.
Capsmeros. Son subunidades proteicas que
se unen para formar la cpside.
Material gentico. Se encarga de la transmi
sin de la informacin gentica contenida en uno
de los cidos nucleicos, bien sea, ADN o ARN.
Nucleocpside. La conforman la cpside y
el cido nucleico. Actualmente se sabe que la
membrana lipdica o envoltura no hace parte
del virin.
Envoltura. Es una estructura membranosa
que poseen solo algunos virus llamados cu
biertos y su composicin es una bicapa lipdica
144 / Microbiologa bsica para el rea de la salud y afines
con protenas (generalmente glucoprotenas)
embebidas en ella. Los lpidos de la membra
na son obtenidos de la membrana de la clula
hospedadora.
Virin. Es la partcula viral infecciosa com
pleta, es decir, el virin puede ser la cpside y
cido nucleico (en algunos casos como el virus
de la polio o el de las verrugas humanas es idn
tico a la nucleocpside). En virus ms complejos
como el del herpes o el de la influenza, el virin
lo compone la nucleocpside (cpside y cido
nucleico) sin incluir la envoltura lipdica circun
dante. En los virus bacterianos o bacterifagos,
el virin lo conforma slo el cido nucleico
(ADN), pues la cpside no penetra al interior
de la bacteria
Accin de los agentes fsicos
y qumicos sobre los virus
A continuacin se describe el efecto de los agen
tes fsicos y qumicos sobre los virus.
Agentes fsicos
Entre los agentes fsicos se consideran: la tem
peratura y las radiaciones.
1. Temperatura. Los virus son termolbiles y
con temperaturas de 50 a 65 C mantenidas por
30 min a una hora se inactivan la mayora de los
virus, porque se desnaturalizan las protenas que
componen la cpside. Sin embargo, hay excep
ciones como el virus de la hepatitis B que debe
someterse a temperaturas de 120 C por 30 min
y a 15 Ib de presin en autoclave para desinfectar
objetos de metal o instrumentos que no se alteren
con la accin del calor, humedad y presin. Para
los equipos sensibles al calor se recomienda el
xido de etileno (xido de etilo o etileno). Otro
germicida recomendable para eliminar este virus
es el glutaraldehdo activado a 2%. Los virus
son estables a temperaturas bajas, por ejemplo,
a -75 C, o sea, la temperatura de congelacin
de la nieve carbnica, pueden conservarse activos
 Virus / 145

durante meses. A temperaturas de -196 C, que algunos frmacos antivirales, aunque no resultan
es la temperatura de congelacin del nitrgeno ideales, pues, todava no han podido desarrollar
lquido, pueden conservarse activos durante se exitosamente.
aos. 3. pH. Los virus son muy sensibles a los
2. Radiaciones. Tanto las radiaciones no cambios de acidez y basicidad ocurridos en el
ionizantes (luz ultravioleta), como las ionizantes medio donde se encuentran, por esta razn, es
(los rayos X) inactivan los virus porque alteran la muy importante tener en cuenta factores qumicos
cadena de nucletidos, produciendo roturas, forma como el pH, cuando se requiere hacer cultivos
cin de dmeros, entre otras alteraciones. Los virus virales en el mbito del laboratorio. Los viras
ms sensibles a las radiaciones son los que poseen son sensibles a los cambios drsticos de pH, slo
cido nucleico monocatenario, es de anotar que soportan lmites entre 5,0 y 9,0, por debajo o por
las dosis de radiacin cambian para los diferentes encima, respectivamente, de estos rangos los viras
virus. Las partculas irradiadas, que ya no tienen se inactivan.
capacidad de replicacin, pueden ser an capaces
de manifestar algunas funciones muy especficas Cultivo de los virus
en las clulas hospederas.
Estas partculas infecciosas solo se desarrollan
Agentes qumicos en el interior de clulas vivas. Para aislar y culti
var los virus en el laboratorio se utilizan diversos
Entre los agentes qumicos se consideran los procedimientos.
disolventes lipdicos, los antibiticos. Es impor
tante tener en cuenta el efecto que causa el pH Animales de experimentacin
sobre los virus.
1. Disolventes lipdicos. Los virus que poseen Es el mtodo ms antiguo para aislar y conservar
envoltura lipoprotica se pueden inactivar fcil los virus. Los viras se inoculan en animales de
mente con los disolventes de grasa, como el ter, experimentacin y se produce, casi siempre, una
el cloroformo, los detergentes amnicos como el enfermedad con lesiones caractersticas que se
desoxicolato sdico y los detergentes no inicos puede transmitir en serie. Pero por el alto costo, a
como Nonidet P40 y Tritn X-100. la presencia de virus latentes y por dichos anima
En cambio, los viras desnudos son resistentes les presentar respuesta inmunitaria, los mtodos
a la mayora de los desinfectantes que se emplean de inoculacin se emplean cada vez menos y
para bacterias y otros microorganismos. Pero quedan reducidos a la inoculacin intracerebral
son muy sensibles a agentes oxidantes como de ratones adultos y lactantes. Sin embargo, los
hipocloritos y compuestos yodforos, al formol, animales se utilizan actualmente en investiga
el glutaraldehdo y a los cidos en general, prin ciones experimentales sobre virus oncgenos
cipalmente al cido clorhdrico diluido. (productores de tumores), sobre la patogenia e
2. Antibiticos. Estos frmacos que se utili inmunidad de las virosis o infecciones causadas
zan exitosamente en infecciones bacterianas, no por los virus y para la obtencin de antisueros
son eficaces contra los virus. Solamente existe (vase figura 6.5).
un tipo de antibiticos que podra inactivar a los
virus y son los que interferiran la sntesis de Huevos embrionados
ADN y ARN porque impediran el mecanismo
de replicacin viral. Pero dichos antibiticos Los huevos embrionados presentan la ventaja de
tambin interfieren en el metabolismo de la ser animales embriolgicamente estriles, con
clula hospedera y son altamente txicos para escaso riesgo de virus latentes y sin producir
ser utilizados en los tratamientos de infecciones respuesta inmunitaria. Los virus pueden inocu
virales humanas. Sin embargo, se dispone de larse en huevos embrionados entre 7 y 14 das de
146 / Microbiologa bsica para el rea de la sana y afines
incubacin; haciendo un pequeo agujero en el
cascarn, se alcanza la zona necesaria, segn el
virus que se investiga: en la cavidad alantoidea, el
virus de la gripa; en la membrana corioalantoidea,
el virus de la viruela; en la cavidad amnitica,
o sea, directamente en las vas respiratorias del
embrin, el viras de la gripa y las paperas; o
en el saco vitelino, el virus del herpes (vase
figura 6.6).
Actualmente los estudios en este tipo de medio
de cultivo se encuentran bastante restringidos,
principalmente, para el virus de la gripa.
Cultivos tisulares
Aunque los cultivos de tejidos y de clulas se
conocen desde hace mucho tiempo, solo pudie
ron utilizarse de manera sistemtica cuando se
descubrieron los antibiticos que permitieron
evitar las contaminaciones bacterianas.
Las clulas pueden cultivarse a partir de
fragmentos de tejidos o explantes (cultivos tisu
lares) o tambin de clulas aisladas o disociadas
(cultivos celulares) o de cortes de rganos que
conservan su arquitectura (cultivos de rganos).
En la actualidad, los cultivos celulares constitu
yen el mtodo de eleccin para el desarrollo de
la mayora de los viras y se utilizan los cultivos
de rganos para el aislamiento de virus de difcil
desarrollo o en casos especiales.
Cultivos celulares
Cuando Enders descubri que los virus eran ca
paces de replicarse en cultivos de clulas aisladas
o disociadas, este descubrimiento se constituy
en el mtodo fundamental para ei cultivo de los
virus. Estos cultivos pueden ser:
1. Cultivos celulares primarios. Esta tcnica
consiste en cultivar clulas aisladas proceden
tes de tejidos normales. Los tejidos u rganos
normales de origen animal o humano, se tratan
con tripsina (enzima que rompe el cemento
intracelular) y las clulas del tejido se separan
o disgregan. Se obtienen as suspensiones de c
lulas aisladas que una vez lavadas y contadas se
siembran en tubos, matraces, botellas especiales,
que contengan en su interior un medio de cultivo
adecuado por ejemplo el medio de Hanks.
Las clulas se sedimentan, se adhieren al vidrio
y se multiplican alrededor de una divisin diaria,
y forman islotes de crecimiento que se extienden
progresivamente hasta que entran en contacto,
momento en el cual se inhibe su crecimiento (fe-
 Virus / 147

nmeno de inhibicin por contacto), por ltimo, tripsina; obtienen clulas aisladas, lo que permite
se forma una monocapa en la pared del recipiente iniciar un nuevo cultivo que se conoce como
que constituye el sustrato sobre el cual se desa cultivo secundario.
rrollan los virus. Este tipo de cultivos no tienen 3. Cultivos celulares permanentes o de
duracin indefinida, por lo que deben prepararse capa continua. Se obtienen utilizando clulas
cultivos nuevos a partir de material fresco cada tumorales, por ejemplo, las clulas He La, que son
vez que el estudio lo requiera. clulas neoplsicas o cancerosas de cuello uterino.
2. Cultivos celulares secundarios. Los culEste tipo de cultivos crece de forma indefinida y
tivos primarios se mantienen vivos cambiando son los ms utilizados en investigaciones virales,
el medio dos o tres veces por semana. Cuando porque suministran material de estudio de forma
estn muy desarrollados se tratan de nuevo con continua.
148 / Microbiologa bsica para el rea de la salud y afines
4. Cultivo de rganos. Recientemente para
el aislamiento de algunos virus de difcil cultivo
se ha utilizado el cultivo de rganos. Se realizan
cortes de rganos embrionarios que, llevados a un
medio adecuado, pueden mantener su estructura
y funcin durante un corto periodo de tiempo.
Se utilizan cultivos de rganos embrionarios
de trquea, intestino, entre otros. Estos cultivos
tambin son tiles en la investigacin vrica,
porque permiten el crecimiento de los virus en
condiciones de mayor control en el mbito del
laboratorio.
Los recipientes para realizar estos cultivos
que permiten el crecimiento de los viras son
tubos de ensayo, cajas de Petri y botellas cono
cidas como de Roux.
Deteccin del desarrollo de los virus
Los viras se manifiestan cuando la estructura del
tejido se deteriora a medida que el virus se mul
tiplica. Este deterioro de los tejidos se denomina
efecto citoptico (ECP). Algunos ejemplos de
efectos citopticos son:
Cambio de forma de las clulas (vanse
figuras 6.7 y 6.8).
Clulas sincitiales (vase figura 6.9).
Clulas aglutinadas y degeneradas (vase
figura 6.10).
Ncleos picnticos (vase figura 6.11).
Cuerpos de inclusin. Son estructuras espe
cficas de los virus que aparecen en la clula por
causa una infeccin viral y poseen caractersticas
Virus / 149
1 5 0 / Microbiologa bsica para el rea de la salud y ajines

Tabla 6.1 Clasificacin de los virus segn su tropismo o afinidad por diferentes tejidos

Tropismo

Neurotropos o Dermotropos o Viscerotropos o Neumotropos o Pantropos o Oncgenos u

neurotrpicos dermotrpicos viscerotrpicos neumotrplcos pantrpicos oncognicos

Tejido Tejido nervioso Piel Visceras y Vas y tejidos Muchos tipos de Promueven de
afectado rganos internos respiratorios clulas y tejidos sarrollo tumoral

Virus Encefalitis Rubola o Hepatitis A, B, C Influenza Infecciones por Sarcoma de

sarampin virus coxsackie Roux
alemn

Rabia Sarampin Fiebre amarilla Catarro comn Dengue Fibroma de

Shope
Poliomielitis Viruela Coriomeningitis Leucemia muri-
vacuna o linfoctica na en ratones
viruela bovina

Herpes simple Leucemia aviar

o fuegos

Verrugas

diferentes segn la infeccin viral que sufra la
clula. A veces su tamao es mayor que el de
la partcula viral y tienen afinidad por ciertos
colorantes de carcter qumico cido como la
eosina. Pueden ser detectados en el ncleo, en
el citoplasma o en ambos. La presencia de los
cuerpos de inclusin en las clulas pueden tener
una considerable importancia en el diagnstico
mdico, por ejemplo, el virus de la rabia produce
los cuerpos de Negri y el de la viruela los cuer
pos de Guarnieri, ambos son patognomnicos
de las dos entidades virales.
Los cuerpos de inclusin detectados en el cito
plasma de la clula pueden ser producidos por los
virus de la viruela humana, la viruela ovina, de las
gallinas, la rabia y otras. Las inclusiones intranu-
cleares detectadas pueden provenir de la infeccin
de los virus de la varicela o el herpes, entre otros.
Estos efectos citopticos que se observan
in vitro son exactamente iguales a los que se
producen in vivo.
Patogenia viral
En general, el cuerpo de los vertebrados posee
tres grandes superficies que estn en contacto
con el medio ambiente: la piel, las mucosas y
la cavidad bucal. Las mucosas ms importantes
son: la digestiva y la respiratoria. Existen tam
bin dos superficies menos extensas que son la
conjuntiva y el aparato genitourinario.
Para que el virus pueda invadir el organismo
debe infectar clulas de una de estas superficies.
La infeccin viral cumple con las siguientes
etapas: 1) proliferacin de los virus en el sitio de
entrada; 2) proliferacin en los ganglios linfti
cos regionales; 3) viremia, es decir, penetracin
del virus al torrente sanguneo, y 4) asentamiento
en el rgano afectado (vase tabla 6.1).
Virus bacterianos
Segn los hospedadores u organismos infectados
se conoce la clasificacin de los virus, en: virus
animales, virus vegetales o de las plantas y virus
bacterianos o bacterifagos o abreviadamente
fago, que viene del griego phagein y significa
comer. De estos grupos, tal vez el ms estudiado
es el de los virus bacterianos o bacterifagos. Estos
virus infectan bacterias del grupo entrico, como
Escherichia coli y Salmonella thyphimurium.
Sin embargo, se conocen virus que infectan tanto

al dominio Bacteria como al Archaea. El viras
bacteriano con el mayor genoma conocido es el
bacterifago G (la G mayscula, indica gigante)
que infecta a Bacillus megaterium. La mayora de
los bacterifagos estudiados en detalle contienen
genomas de ADN bicatenaiio y hasta el momento
es el tipo de virus bacteriano ms comn en la
naturaleza. Uno de ios ms conocidos es el coli-
fago, que en virologa y gentica se conoce como
Virus / 151
bacterifago T4. El virin del fago T4 es estructu
ralmente complejo y consta de una cabeza de forma
icosadrica y una cola compleja, la cual, posee un
tubo helicoidal con una vaina contrctil, que se une
a la cabeza por medio de un collar y termina en una
placa basal o platina dotada de unas espculas y al
final de la cola se encuentran unas fibras caudales
que se fijan a la platina. En la figura 6.12 se observa
una representacin esquemtica del fago T4 y su
152 / Microbiologa bsica para el rea de la salud y afines
forma de infectar a la bacteria E. coli.
Muchos de los conceptos bsicos existentes
en la virologa actual se originaron de trabajos
realizados con bacterifagos y posteriormente se
aplicaron a virus de organismos superiores.
Infeccin viral
Los virus solo se replican en clulas vivas y
pueden ser lisognicos cuando se integran al cro
mosoma de la bacteria, as cada vez que esta se
reproduce lleva el virus en su material gentico
transmitindolo de generacin en generacin,
este ciclo se conoce como ciclo lisognico. Cuan
do los virus lisan o destruyen la clula hospedera,
el ciclo se denomina ciclo Utico.
Los virus que realizan este ltimo ciclo utili
zan la maquinaria metablica del hospedero para
obtener energa y los precursores de bajo peso
molecular para la sntesis de protenas y cido
nucleico viral, es decir, que el virus induce a
la clula hospedera a sintetizar todos los com
ponentes necesarios para fabricar ms virus.
Luego los componentes se ensamblan formando
virus nuevos y estos nuevos virus deben salir de
la clula para infectar nuevas clulas.
Los virus han desarrollado diferentes mto
dos para lograr la multiplicacin en las clulas
hospederas parasitadas por ellos. Aunque los de
talles varan de un grupo a otro, el patrn general
de los ciclos de replicacin es semejante.
Ciclo ltico
Se toma como ejemplo la replicacin del virus
bacterifago conocido como colifago para esque
matizar el ciclo ltico viral pues, generalmente,
los pasos de la infeccin viral son comunes a la
mayora de los bacterifagos.
Los virus infectan a las bacterias inyectando
el cido nucleico, utilizan el tubo para abrir un
agujero al punzar la pared celular. El cido nu
cleico viral comienza a controlar el metabolismo
de la clula y dirige a la bacteria en la sntesis de

ms cido nucleico viral, para fabricar partculas
de viras completas. En corto tiempo, las partcu
las de viras recin formadas se liberan, mediante
la ruptura o lisis repentina de la pared celular, as
quedan libres para infectar a otras bacterias sus
ceptibles y dar inicio a un nuevo ciclo. El ciclo
ltico se produce en cinco etapas: 1) adsorcin,
2) infeccin, 3) replicacin, 4) ensamblaje, 5)
lisis (vase figura 6.13).
Virus / 153
Etapa 1: adsorcin
Es la adherencia del virus a un receptor especfi
co ubicado en la pared de la bacteria. Esta unin
es altamente especfica porque el virus tiene una
o ms protenas que interaccionan con los com
ponentes especficos o receptor especfico de la
superficie de la clula. El rgano de adhesin se
encuentra en los pequeos apndices o espculas,
de la cola del fago. La adhesin requiere dos
pasos: 1) se presenta una adhesin preliminar de
tipo inico, que es susceptible a reversibilidad
por cambios en el pH, en la presin osmtica,
entre otros, y 2) se produce la real adsorcin a
la pared de la bacteria, esta unin es ms firme
e irreversible (vase figura 6.14).
Etapa 2: infeccin
Tambin se conoce como penetracin o in
yeccin. Se ha demostrado que la penetracin
real es mecnica, pero, tal vez, la facilita una
enzima llamada lisozima fgica que va en la
cola del fago. La penetracin se logra cuando:
1) las fibras caudales del virus se adhieren a la
bacteria mantenindolo firmemente adherido;
2) la vaina de la cola se contrae y el tubo penetra
en la clula, y 3) la inyeccin del ADN, que es
el cido nucleico de los bacterifagos, se hace
como lo hara una jeringa al inyectar su conte
nido. La cubierta proteica que forma la cabeza y
la estructura de la cola quedan fuera de la clula
hospedera (vase figura 6.15).
E tapa 3: replicacin
Se presenta inmediatamente despus de la in
yeccin del cido nucleico a la clula bacteria
na. Esta fase del ciclo tambin se conoce como
periodo de eclipse. Esta etapa es un estadio de
intensa actividad sinttica, el virus se encarga
de la maquinaria metablica de la bacteria ha
cindola fabricar cido nucleico virale, en vez de
los cidos nucleicos bacterianos, necesarios para
que la bacteria fabrique cada una de sus partes.

nombre de profago. En esta situacin la bacteria
realiza normalmente su metabolismo y reproduc
cin y el ADN viral es transmitido a cada clula
hija en las generaciones sucesivas. Si una bacteria
est infectada por un fago temperado se vuelve
inmune al mismo fago o fagos relacionados y
recibe el nombre de bacteria lisognica. Ocurre,
a veces y por razones desconocidas, que el ADN
viral se separa del cromosoma bacteriano, dando
lugar al ciclo ltico, este proceso se conoce como
induccin espontnea. A escala experimental este
proceso puede inducirse por irradiaciones con
luz ultravioleta o por exposicin a algn agente
qumico (vase captulo 4: Gentica bacteriana:
Transduccin, figura 4.12).
Ecologa y mecanismos
de transmisin viral
Los virus, aunque sean clasificados como par
tculas inertes, han desarrollado ingeniosos y
Virus / 155
complicados mecanismos para transmitirse de un
hospedero a otro, segn la naturaleza del virus y
la interaccin entre este y el hospedero.
Contacto directo persona-persona
En este caso el medio principal de transmisin
puede consistir en infeccin por:
1. Gotitas o aerosoles. Como sucede con el
sarampin, la gripa, influenza o la viruela.
2. Va fecal-bucal. Se transmite de esta forma
el sarampin y la hepatitis infecciosa A.
3. Contacto sexual. As se transmite el virus
de la hepatitis B, el herpes genital y el sida.
4. Contacto de mano-boca, mano-ojo, boca-
boca. Por estas vas se transmiten la gripa, el
herpes simple y la mononucleosis infecciosa
aguda o virus de Epstein-Barr.
5. Intercambio de sangre contaminada. Es
uno de los mecanismos de transmisin, princi
palmente, de la hepatitis B y el sida.
156 / Microbiologa bsica para el rea de la salud y afines
Transmisin de animal a animal
En este mecanismo el hombre acta como un
hospedero accidental:
1. Mordedura, Como en el caso de transmi
sin de la rabia.
2. Gotitas o aerosoles infectantes. Las cuales
pueden dispersarse en sitios contaminados por
roedores, se transmiten as las fiebres hemorr-
gicas sudamericana y de Corea.
Transmisin si se tiene como vector
un artrpodo
Por esta forma se transmite la encefalitis, la me-
ningoencefalitis, la fiebre amarilla y el dengue.
Entre los mecanismos de transmisin existen al
menos tres patrones reconocidos de infeccin
transmitidos por artrpodos.
1. Ciclo hombre-artrpodo. Ejemplos: fiebre
amarilla y dengue (vase figura 6.19).
2. Ciclo vertebrado inferior-artrpodo con
infeccin colateral al hombre. Este representa uno
de los mecanismos ms comunes de transmisin. El
hombre infectado se denomina hospedero de pun
to tenninal. Ejemplos: fiebre amarilla selvtica y
encefalitis de St. Louis (vase figura 6.20).
3. Ciclo artrpodo-artrpodo con infeccin
ocasional del hombre y vertebrados inferiores.
En este ciclo el virus puede transmitirse del artr
podo adulto a su prole por intermedio del huevo,
es decir, se presenta transmisin transovrica, de
esta forma el ciclo puede seguir adelante con la
intervencin de un hospedero vertebrado infec-

tado con el virus o sin ella. Ejemplos: fiebre del
Colorado causada por picadura de garrapata y
encefalitis de La Crose (vase figura 6.21).
Virus: sumario
Hacia finales del siglo xix se formul la teora de
que cada enfermedad se produce por un germen.
Se tena, entonces, la seguridad de que para cada
enfermedad infecciosa habra de encontrarse un
microorganismo que podra verse con ayuda del
microscopio, cultivarse en un medio nutritivo y
ser retenido por los filtros. Pero los investigadores
reconocan que haba un conjunto de organismos,
tan molestos como los anteriores, que no eran
susceptibles de ser cultivados in vitro.
Virus / 157
Sin embargo, Iwanowoski pudo demostrar que
el agente causal del mosaico del tabaco pasaba a
travs de los filtros para bacterias, no poda culti
varse en los medios conocidos ni se poda ver en
el microscopio de luz.
Luego se comprob que si la fiebre aosa poda
transmitirse de un animal a otro, el agente causal
tena que reproducirse y no poda ser, por tanto,
una toxina bacteriana, puesto que los experimentos
se haban realizado con un grado muy elevado en
cada paso, es decir, utilizando la tecnologa ms
avanzada de la poca. As la primera definicin del
nuevo tipo de agentes infecciosos, los virus, se ex
puso en trminos totalmente negativos: no podan ser
vistos, no podan ser cultivados y, lo ms importante,
no eran retenidos por los filtros para bacterias.
158 / M icrobiologa bsica para el rea de la salud y afines
Preguntas para autocontrol
del aprendizaje
1. Esquematice dos viriones sencillos identi
ficando las siguientes estructuras: cpside,
capsmero, cido nucleico, ncleo cpside,
envoltura lipdica. Indique cul es desnudo
y cul cubierto. Por qu se les da esos
nombres y cul es su importancia?
2. Analice algunas propiedades de los virus
que los distingan de otros organismos.
3. En qu difieren: un virus de un plsmido
y un virin de una clula?
4. Analice la composicin viral y cada uno de
sus componentes y comprela con la com
posicin de las bacterias y de los horgos.
5. Mencione diferentes agentes fsicos y qu
micos y analice su accin sobre los virus.
Justifique su anlisis comparativamente,
con el efecto que esos mismos agentes
causan sobre las bacterias.
6. Si los virus no pueden cultivarse en los
medios de cultivo para hongos y bacterias,
explique y ejemplifique cmo se logra su
cultivo al nivel de laboratorio y cules son
esos procedimientos.
7. Qu es un organismo hospedador u hos
pedero?
8. Explique la utilidad de los cultivos celulares
en la replicacin viral.
9. Cuando los virus se replican en las clulas
de los tejidos, estos se deterioran, o sea,
que se produce un CEP. Qu significa
esta sigla? Defina y ejemplifique algunos.
Sucede esto con las bacterias?, con los
hongos? Justifique.
10. Qu etapas debe cumplir un virus para
producir una infeccin?
11. Por medio de esquemas claros y precisos
compare un virus sencillo, per ejemplo, un
virus animal con un bacterifago.
i 2. Cul es la importancia del colifago o bac
terifago de la bacteria entrica Escherichia
coli ?
13. Compare la replicacin viral con la re
produccin de las bacterias y la de los
hongos.
14. Por qu se habla de replicacin y no de
reproduccin como en otros seres vivos?
Explique cada paso del ciclo ltico viral.
Por qu se llama ciclo ltico? En qu se
diferencia del ciclo lisognico?

Hongos
L a rama de la microbiologa que se encarga
del estudio de los hongos es la ideologa; en la
actualidad se conocen ms de 65.000 especies
de hongos identificadas (de un total cercano al
1.500.000 que podran existir en la Tierra), de
las cuales la gran mayora son benficos para
la humanidad y se encuentran en la naturaleza
cumpliendo una funcin imprescindible en la
descomposicin y el reciclaje de materia orgni
ca. El aspecto de los hongos nos resulta familiar,
pues hemos visto su crecimiento azul y verdoso
sobre los limones, las naranjas, los quesos, el
pan y la mermelada viejos, tambin, en las cor
tinas plsticas de los baos etc., con apariencia
de filamentos (comnmente conocidos con el
nombre de lama)', tambin los observamos como
los paragitas de sapo y las orejas de palo en
los campos y bosques.
Aunque su tamao y morfologa presentan
mucha variedad, todos los hongos son eucario-
tes , por tanto, sus clulas poseen, al menos, un
ncleo, membrana nuclear, retculo endoplsmico,
mitocondrias y aparato secretor adems de
otras organelas rodeadas por la membrana cito
plasmtica.
Se reconocen tres grandes grupos de hongos:
los mohos u hongos filamentosos (pluricelulares),
las setas u hongos de masa, tambin pluricelula
res, y las levaduras, generalmente, unicelulares.
Im portancia
Los hongos, antiguamente, aparecan clasifica
dos como una divisin del reino vegetal o reino
Plantae. La gran mayora de los cientficos,
incluidos los que se dedicaban a la taxonoma,
7
crean que eran plantas sin tallos y sin hojas, que
al evolucionar a organismos capaces de absorber
alimento, haban perdido la clorofila y, por su
puesto, la capacidad de realizar fotosntesis.
Debido a sus caractersticas morfolgicas,
fisiolgicas, bioqumicas y ecolgicas, en la
actualidad, los hongos se ubican en su propio
reino llamado reino fung. Este reino est com
puesto por organismos hetertrofos quimioor-
ganotrofos, es decir, que requieren compuestos
orgnicos para su nutricin, para lo cual, secretan
enzimas que descomponen una gran variedad de
estos sustratos. Cuando se alimentan de materia
orgnica muerta se conocen como saprofitos y,
generalmente, no causan enfermedades, solo
descomponen restos complejos de vegetales y
animales, degradndolos a sustancias qumi
cas ms sencillas que son devueltas al suelo,
aumentando as su fertilidad. Por esta razn, se
les menciona como descomponedores de m a
teria orgnica. De esta forma brindan muchos
beneficios al ser humano, pero tambin pueden
resultar dainos cuando pudren madera, textiles,
papel, alimentos y ottos productos derivados de
fuentes naturales, utilizndolos como fuentes
de carbono y energa.
Los hongos saprofitos tambin son impor
tantes en las fermentaciones industriales; por
ejemplo, cuando se utilizan como medicamentos
al suministrar metabolitos secundarios tiles
como los antibiticos (la penicilina) y los fr
macos inmunodepresores (ciclosporma) o en la
industria lctea en la fermentacin de leches y
derivados lcteos, la produccin de alimentos
y bebidas espirituosas (quesos maduros, vinos,
champaas, entre otros).
160 / Microbiologa bsica para el rea de la salud y afines
Algunos hongos a pesar de ser saprofitos
pueden prosperar como parsitos y causar
enfermedades (hongos patgenos) en plantas y
animales, incluidas las personas.
Los hongos ejercen gran impacto econmico
en las industrias agrcolas debido a las enferme
dades que les pueden causar a las plantas. A estos
hongos tan particulares se les clasifica como
hongos fitopatgenos. Sin embargo, de las ms
de 100.000 especies que se conocen slo unas
100 son patgenas para los seres humanos.
Muchos hongos patgenos como Histoplas-
ma capsulatum, causante de la histoplasmosis
(infeccin fngica del sistema retculo-endo-
tetelial y que compromete varios rganos),
presentan dimorfismo, es decir, pueden existir en
forma unicelular como las levaduras, o en forma
filamentosa como los mohos. Adoptan la fase
levaduriforme cuando el hongo es un parsito o
un patgeno de un tejido y la forma filamentosa
cuando es un saprofito del suelo o se cultiva en
un medio de laboratorio.
Por lo general, los hongos toleran amplios
rangos de pH de 2,2 a 9,6, el rango ms comn
es entre 4 y 8. La mayora son aerbicos obliga
dos y necesitan mucho oxgeno y agua para su
reproduccin y desarrollo, sin embargo, existen
reportes de hongos que frente a la presencia o
no del oxgeno se comportan como facultativos.
Genticamente son haploides, es decir, tienen un
nmero n de cromosomas.
Composicin
La pared de las clulas fngicas difiere de la pared
bacteriana porque contiene quitina (polmero de
N-acetil-D-glucosamina, conformado por subu
nidades de azcar nitrogenado), que tambin es
un componente de los exoesqueletos de insectos
y es mucho ms resistente a la degradacin por
causa de los microorganismos, que la celulosa, el
principal componente de las paredes celulares de
las clulas vegetales. Algunas especies fngicas
pueden presentar paredes celulsicas o con otros
polmeros como mananos, galactanos y quitosn.
La membrana citoplasmtica es rica en esterles
y en el citoplasma existen mitocondrias, retculo
endoplsmico y flujo citoplasmtico, tambin
poseen membrana nuclear, ncleo definido,
varios pares de cromosomas y su reproduccin
puede ser sexual o asexual, no tienen clorofila
ni cloroplastos por lo cual no pueden fotosin-
tetizar. En resumen, los hongos se caracterizan
por ser organismos eucariotes perteneciente
al grupo nutricional hetertrofos quimioorga-
notrofos.
Alcanzan ptimo desarrollo en ambientes
oscuros y hmedos. Muchas especies de hongos
pueden crecer en ambientes extremos con pH muy
bajos y con altas temperaturas (hasta de 62 C).
Cuando el ambiente cambia y se vuelve muy
seco, los hongos pueden sobrevivir entrando en
una fase latente o producen esporas resistentes
a la falta de humedad.
Morfologa
Los hongos crecen en dos formas bsicas: leva
duras (unicelulares) y mohos que son filamen
tosos (pluricelulares).
Hongos unicelulares: levaduras
Las levaduras varan considerablemente en
cuanto a tamao, oscilando entre 1 y 5 am de
anchura y entre 5 a 30 pm de longitud. Cada
especie tiene una forma caracterstica, pero aun
en cultivo puro, entre las clulas individuales,
existe una considerable variacin en el tamao
y la forma que puede ser redondeada, elipsoide
o casi cilindricas. Estas caractersticas morfol
gicas se ven afectadas por la edad y el entorno.
Las levaduras no poseen flagelos ni ningn otro
tipo de rgano de locomocin. Las levaduras se
reproducen normalmente por biparticin o fisin
binaria (casi siempre asimtrica) o por gema
cin , porque producen unos abultamientos en la
clula madre llamados yemas que crecen hasta
separarse. Algunas levaduras pueden filamentar,
es decir, que la yema no se desprende y se van
alargando tomando el nombre de seudohifa,
al proliferar las seudohifas toman el nombre
de seudomicelio. Esta fase filamentosa es una
propiedad necesaria para la patogenicidad de

Candida albicans, levadura que puede causar in
fecciones en la cavidad bucal, vagina, pulmones
y en el caso de los enfermos de sida, les produce
dao sistmico tisular.
Otra de las levaduras bastante conocida es Sa-
ccharomyces cerevisiae, utilizada en la produccin
del pan y en la mayora de las fermentaciones al
cohlicas. Fue la primera clula eucaritica cuyo
genoma se secuenci por primera vez en 1997. El
hbitat original de esta levadura est en las frutas
y sus zumos, pero las levaduras comerciales que
existen en la actualidad difieren mucho de su
ancestro silvestre, por causa de la manipulacin,
voluntaria o involuntaria, que ha hecho el hombre
desde la antigedad.
Hongos pluricelulares: mohos
Estos hongos se encuentran ampliamente distri
buidos en la naturaleza y estn constituidos por
filamentos tubulares llamados hifas.
Cada hifa tiene aproximadamente de 5 a 10 pin
de anchura y 1 pm de dimetro. En el interior y
a lo largo de cada hifa existe un citoplasma co
mn para toda su extensin. La hifa es la unidad
estructural y funcional del hongo. Segn la clase
de hongo que la posea, la hifa puede presentar
Hongos / 161
diversas morfologas. Estos son algunos tipos
de hifas:
1. Hifas no septadas o cenocticas. Son es
tructuras tubulares comunicantes y ramificadas,
con muchos ncleos en el citoplasma rodeados
por una pared nica y rgida, no presentan ta
biques o septos que dividan la hifa en clulas
(vase figura 7.1).
2. Hifas septadas. Son hifas que presentan
celdillas o compartimentos que las delimitan por
tabiques o septos. Estas hifas pueden ser uninu-
cleadas o polinucleadas.
- Hifas septadas uninucleadas: presentan
septos que las dividen en compartimentos o c
lulas con un solo ncleo en cada compartimento.
En cada septo existe un poro o canal central
que permite la migracin de los ncleos y del
citoplasma de un compartimento a otro. Aunque
cada compartimento de una hifa septada no est
limitado por una membrana como en una clula
tpica, habitualmente se menciona el comparti
mento como si fuese una clula independiente
(vase figura 7.2).
- Hifas septadas polinucleadas: los septos
dividen a las hifas en clulas que presentan ms
de un ncleo en cada compartimento (vase
figura 7.3).
162 / Microbiologa bsica para el rea de la salud y afines

Las hifas crecen en masa, por lo cual el con
junto o masa de hifas cenocticas o septadas se
denomina micelio. Cuando el micelio crece sobre
un sustrato (materia orgnica) toma el nombre de
micelio areo que consta de las hifas y sus esporas
(clulas resistentes, en reposo o durmientes); su
funcin principal es la reproduccin. El micelio
areo es el que le da el aspecto algodonoso carac
terstico de los hongos filamentosos o mohos.
El micelio que se introduce dentro del sus
trato, se llama micelio vegetativo y sus funciones
primordiales son la nutricin y el soporte del hongo
(vase figura 7.4).
Reproduccin
La mayora de las partes de un hongo filamento
so son potencialmente capaces de crecer y mul
Hongos / 163
tiplicarse. La inoculacin de un diminuto fragmen
to fngico sobre un medio de cultivo adecuado, es
suficiente para dar inicio a un nuevo individuo.
Los hongos se reproducen en forma natural
por medio de una variedad de mtodos que
dependen del tipo de reproduccin: 1) asexual
mente por fisin, gemacin o formacin de
esporas asexuales, 2) sexualmente por fusin de
los ncleos de dos clulas afines.
Reproduccin asexual
Es la ms comn y no hay contacto de ncleos.
Se relaciona directamente con la multiplicacin.
Los hongos que solo presentan este tipo de
reproduccin son hongos imperfectos. La repro
duccin asexual puede ser por fisin, gemacin
y esporas asexuales.
164 / Microbiologa bsica para el rea de la salud y afines

- Fisin. Una clula se divide para formar Los odios o artrosporas. Son unicelulares
dos clulas hijas iguales. y se forman al separarse o fragmentarse entre s
- Gemacin. La clula madre desarrolla una las clulas de la hifa.
pequea protuberancia (yema), de la cual se Las clamidosporas. Tambin son esporas
origina una clula hija. unicelulares, de gruesas paredes, muy resistentes
-Esporas asexuales. Su funcin es diseminar a las condiciones adversas. Se forman a partir de
o multiplicar la especie, por tanto, se producen en clulas de hifas vegetativas.
gran nmero y existen muchas clases como: coni- Las blastosporas. Son yemas que se forman
diosporas, esporangiosporas, odios o artrosporas, sobre las clulas de levadura.
clamidosporas, blastosporas. Son resistentes a la
desecacin y son el medio por el cual el hongo se Reproduccin sexual
dispersa a nuevos hbitats.
Las conidiosporas o conidias. Se forman en Se caracteriza porque la fusin de los ncleos da
los pices o a los lados de una hifa y a menudo origen a un zigote. Este tipo de reproduccin se
muy pigmentadas. Cuando aparecen las conidias relaciona con la evolucin y de ella se originan
el color blanco, original del micelio cambia por hongos perfectos. Estas esporas se producen en
el que le dan las conidias vindose negro, azul nmero menor que las asexuales y, adems, solo
verdoso, amarillo, rojo o marrn. La presencia de se forman bajo ciertas condiciones. Son resisten
estas esporas da al micelio la apariencia de una tes a la desecacin, a la congelacin y a ciertos
capa de polvo. Si son pequeas y unicelulares se compuestos qumicos, pero no son tan resistentes
llaman microconidias. Si son grandes y plurice como los endosporos bacterianos.
lulares se denominan macroconidias. Existen varios tipos de esporas sexuales: zi-
Las esporangiosporas. Son esporas unicelulagosporas, ascosporas, basidiosporas y oosporas.
res y se forman dentro de unos sacos llamados espo Zigosporas. Son esporas grandes, de pared
rangios. Cuando estas esporas son mviles, porque gruesa que se forman cuando los extremos de dos
poseen flagelos, se llaman zoosporas y cuando son hifas sexualmente compatibles o gametangios,
inmviles se denominan aplanosporas. de ciertos hongos, se fusionan entre s.

Ascosporas. Son esporas unicelulares que se
producen dentro de un saco llamado asea. General
mente hay ocho ascosporas dentro de cada asea.
Basidiosporas. Estas esporas unicelulares
nacen sobre una estructura en forma de porra,
llamada basidia o basidio (vase figura 7.5).
Oosporas. Se forman dentro de una estruc
tura especial femenina llamada oogonio.
En general, las esporas sexuales son el resul
tado de la reproduccin sexual de algunos mohos
que se lleva a cabo en tres pasos:
1. Plasmogamia. Es la unin de citoplasmas
por medio de la cual se acercan dos ncleos
compatibles.
2. Cariogamia. Es la fusin efectiva de los
ncleos, dando lugar al zigote o zigoto (cigote
o cigoto), que posee su ncleo con un nmero
diploide de cromosomas.
3. Meiosis. Tambin llamada reduccin cro
matnica. En este paso se restablece el estadio
haploide del ncleo.
Fisiologa y nutricin
Fisiolgicamente los hongos se adaptan con
facilidad a condiciones ms adversas y severas
que los otros microorganismos.
1. Temperatura. Los rangos de temperatura,
para la supervivencia de los hongos, son bastante
amplios: de 0 a 62 C, el rango ptimo es de 22
a 37 C. Ni siquiera los alimentos refrigerados
se escapan a la invasin de los hongos.
2. pH. Soportan escalas de pH entre 2 y 9,
pero el pH ptimo, para casi todas las especies,
est alrededor de 5,6.
3. Presin osmtica. Una gran cantidad de
hongos son menos sensibles a las presiones
osmticas elevadas que las bacterias y son
capaces de desarrollarse en soluciones salinas
concentradas como las salmueras o en solucio
nes altamente azucaradas como las jaleas o los
jarabes.
4. Agua. Aunque necesitan humedad para
su desarrollo y pueden obtener el agua de la
atmsfera y del medio, los mohos pueden so
brevivir en ambientes deshidratados, que seran
inhibidores para la mayor parte de las bacterias
Hongos / 165
no esporuladas. Cuando el medio se deseca, los
hongos producen esporas o pasan al estadio de
resistencia.
5. Oxgeno. Casi todos los mohos son aer-
bicos estrictos y su crecimiento lo incrementa
la presencia de oxgeno abundante. Tambin se
tienen datos de algunos reportes que ponen de
manifiesto la existencia hongos facultativos.
6. Carbono. Aparentemente este elemento
podra actuar como factor limitante en el desa
rrollo de los hongos, pero realmente no posee
mayor importancia, porque son capaces de ob
tener el carbono de los elementos ms variados
como los alcoholes o los hidrocarburos. Segn
el potencial enzimtico de cada hongo, ellos
pueden obtener el carbono de productos solu
bles como los azcares, por ejemplo, glucosa,
maltosa, sacarosa, entre otros; o de productos
insolubles como celulosa.
7. Nitrgeno. Lo obtienen de aminocidos
por desanimacin y de restos orgnicos e inor
gnicos como los nitratos.
8. Sustancias inorgnicas. Entre estas se
incluyen elementos como fsforo, azufre, potasio,
magnesio, entre otros, que son obtenidos muy fcil
mente, adems, sus requerimientos son mnimos.
9. Vitaminas. Las necesidades de vitaminas
tambin son mnimas y solo algunos hongos
las necesitan preformadas como la biotina, la
tiamina y la piridoxina, por esto, se dice que:
un hongo se desarrolla donde existi o existe
crecimiento de seres vivos.
Los hongos que parasitan tejidos vegetales
y animales (incluidos los humanos), con fre
cuencia desarrollan unas estructuras que salen
de la hifa y penetran en la clula husped para
obtener alimento directamente del citoplasma.
Estas estructuras se llaman haustorias o hauxto-
rias. El alimento pasa de las haustorias a la hifa
principal que se desarrolla entre las clulas del
husped. Las haustorias pueden ser bulbosas y
ramificadas (vase figura 7.6).
Medios de cultivo
Los hongos crecen prcticamente sobre cual
quier sustrato y donde haya humedad, pero
166 / Microbiologa bsica para el rea de la salud y afines
especficamente, en general, existen tres tipos
de medios de cultivo para los hongos:
1. Medios naturales. En este caso pueden
utilizarse trozos o infusiones de frutas, vegeta
les, granos de cereales o tejidos animales. Estos
medios varan mucho en su composicin y no
son fcilmente reproducibles. ni tampoco de
amplio uso.
2. Medios preparados. A los cuales se les han
adicionado sustancias como peptonas, extractos de
plantas, agar y otros compuestos de composicin
desconocida o variable.
3. M edios sintticos. De composicin qu
mica definida, por ejemplo: 1) agar sabouraud
contiene glucosa y peptona m odificada, pH
cido para favorecer el crecim iento de los
hongos y evitar la contaminacin por bacterias.
En este medio se cultivan hongos saprofitos y
patgenos; 2) agar mycocel, a este medio se le
adicionan antibiticos como el cloramfenicol
y la ciclohexidina, que impiden el crecimiento
de hongos saprofitos, de bacterias y permiten el
desarrollo ptimo de los hongos dermatofitos
(hongos que afectan la piel); 3) agar Czapek-
Dox a su composicin normal, se le adicionan
determ inadas cantidades de estreptom icina y
aureomicina, segn el caso, para inhibir el cre
cimiento bacteriano.
Si quieren aislarse los mohos resulta muy
prctico usar un medio de cultivo que favorezca
su desarrollo, pero que no sea ptimo para las
bacterias, como los medios cidos con un pH de
5,6, con concentraciones relativamente altas de
azcar. Estos medios son bien tolerados por los
hongos e inhiben a la mayora de las bacterias.
Un medio natural de amplio uso para el cul
tivo de hongos es una infusin de maz al que se
le adiciona agar y glucosa. Otro medio de cultivo
para mohos y levaduras contiene infusin de
papa con agar y glucosa.
Clasificacin
Como se haba mencionado antes, los hongos
estn ubicados en el reino fu n g y todos sus
representantes se encuentran incluidos en el
phylum mycota, donde se encuentran dos gran
des grupos:
Mixomycota. En este grupo no se incluyen
hongos que sean patgenos para el hombre.

Eumycota. La clasificacin de los hongos
toma como base principal las caractersticas
de sus esporas sexuales y cuerpos fructferos.
Los bilogos taxonomistas an no llegan a un
consenso sobre la forma de clasificar esta gran
diversidad de organismos y a pesar de que al
gunos textos utilizan complicados sistemas de
clasificacin, los miclogos utilizan un sistema
bastante sencillo y fcil de aplicar. Con este siste
ma agrupan ms de 65.000 especies conocidas en
cuatro divisiones o filos -phyla (fila) . Estas
divisiones tienen mucha importancia debido
a la gran variedad de sus miembros donde se
encuentran hongos patgenos para el hombre,
los animales y las plantas, adems de los hongos
utilizados industrialmente como los comestibles
y farmacolgicos. Segn este sistema los cuatro
phyla son: Chytridiomycota (Chytridiomicetes);
Zygomycota (Zigomicetes); Ascomycota (Asco-
micetes); Basidiomycota (Basidiomicetes). Las
cuatro divisiones se caracterizan por tener en su
reproduccin una fase sexual, conocida como
teleomorfo y otra fase asexual que se conoce
como anamorfo.
Un grupo de hongos que no presenta te
leomorfo o fase sexual conocida se asigna, en
forma arbitraria a un phylum deforma, llamado
Deuteromycota o Deuteromycetes. Investigado
res como Kirk et al.,1en el ao 2001, reconocen
las cuatro divisiones y no aceptan al phylum
Deuteromycota como una categora taxonmica
formal. Otros autores, como Esperanza Franco
Molano et al.,2 2005, corroboran esta posicin.
Los miembros de un phylum de forma son simi
lares entre s en algunos aspectos, pero probable
mente no comparten un ancestro comn.
Aun as, en este grupo algunos taxonomistas
han ubicado esas especies que no pueden ser
clasificadas con facilidad por causa de la au
sencia de estructuras sexuales, denominndolas
inclasificables, por lo cual, las incluyen entre
los deuteromicetes. Sin embargo, la mayora
de esas especies est emparentada con el filum
ascomicetes.
Vale aclarar que no es una propuesta univer
sal, aunque tiene bastante peso en la taxonoma
fngica ms actualizada, muchos autores con
Hongos / 167
tinan describiendo el phylum Deuteromycota.
Debido a esto y por causa de la controversia
taxonmica, en esta obra aparecen descritas las
cuatro divisiones propuestas y adems el phylum
Deuteromycota, donde quedan incluidos ciertos
mohos que anteriormente se localizaban en la
divisin de los Ascomycetes.
Algunos mohos como los deslizantes (orden,
acrasiales) y los oomicetes u hongos acuticos
(Oomycota) que siempre se clasificaron como
hongos, en la actualidad muchos taxonomistas,
los consideran protistas (vase tabla 7.1).
Chytridiomycota-C hytridiomicetes
Los hongos de la divisin Chytridiomycota se ca
racterizan por ser hongos primitivos unicelulares
o con un micelio rudimentario con hifas cenoc-
ticas. Se reproducen sexualmente por zoosporas
mviles por medio de un flagelo localizado en
su parte posterior. Viven en medios acuticos,
terrestres, materia orgnica viva y en descom
posicin, algunos son anaerobios y ayudan a los
rumiantes a descomponer el material vegetal que
consumen ubicndose en el tracto digestivo de
estos animales.
Zygomycota-Zigomicetes
Los hongos de la divisin Zygomycota son fi
lamentosos, con hifas cenocticas y multinu-
cleadas. Se encuentran en el suelo, aire y agua.
Entre ellos se sealan algunos gneros patgenos
como Mucor y Rhizopus. Por ejemplo, Rhizopus
nigricans se conoce con el nombre vulgar de
moho del pan.
Reproduccin
Segn su reproduccin, se clasifican como hon
gos perfectos pues adems de su reproduccin
asexual, tambin poseen la sexual.
1. Reproduccin asexual. Estos mohos po
seen micelios abundantes y bien desarrollados;
las hifas frtiles poseen en su parte ms distal un
saco o bolsa llamado esporangio que contiene las
esporas de reproduccin asexual o esporangios-
Tabla 7.1 Clasificacin de los hongos

Divisin o phyla Nombre comn Clase de hifas Estructuras repro Hbitat Principales Repercusin en la salud
ductivas representantes y la economa

Chytridiomycetes Hongos primitivos Cenocticas Esporas sexuales: Materia orgnica

zoosporas viva o en descom
posicin, ambientes
acuticos

Zlgomicetes Moho del pan Cenocticas Esporas sexuales: Suelo y materia Rizophus nigrcans Causan la podredumbre
zigosporas orgnica vegetal en blanda de las frutas y el
Asexuales: espo descomposicin moho negro que aparece
rangiosporas en el pan

Ascomicetes Hongos Septadas Esporas sexuales: Suelo y materia Saccharomyces Forman mohos en las
ascosporas orgnica vegetal en (levadura) frutas y causan dao a los
Esporas asexua descomposicin textiles. Afectan
les: conidias rboles como el olmo y
el castao. Se incluyen
levaduras y las morillas

Basidlomicetes Setas Septadas Esporas sexuales: Suelo y materia Amanita (hongo Producen dao a ciertos
basidiosporas orgnica vegetal en venenoso) cultivos vegetales.
Esporas asexua descomposicin Pleurotus (hongo Se incluyen zetas vene
les: odios o comestible) nosas, alucingenas y
artrosporas Roya y comestibles
tizones (hongos
fitopatgenos)

Deuteromicetes Hongos Septadas Esporas asexua Suelo y materia Candida albicans Estn incluidos la mayora
imperfectos les: micro y ma- orgnica vegetal en Paracoccidiodes de los hongos patgenos
croconidios descomposicin y el brasiliensis Cocci- para el hombre
organismo de huma diodes immitis
nos y animales

poras. La hifa que sostiene el esporangio es el
esporangiforo. Las esporas poseen un nmero
n de cromosomas (vase figura 7.7).
2. Reproduccin sexual. Este tipo de repro
duccin es diferente segn se trate de hongos
acuticos o terrestres. Se describe la terrestre.
La reproduccin sexual necesita dos talos o
micelios de tipos diferentes para poder apa
rearse. Como los talos no pueden diferenciarse
morfolgicamente, se designan como ms (+) y
menos (-), provenientes de sus respectivos talos
y esporos, con un nmero n de cromosomas,
se ponen en contacto y se inicia un proceso de
diferenciacin.
Se produce una prolongacin del citoplasma
conocida como progametangios que al unirse
se convierten en gametangios separados por
un tabique. El tabique se disuelve y ocurre la
fusin de los citoplasmas, este paso se denomina
plasmogamia. Los ncleos se van aproximando
y se aparean (fusionan) producindose el evento
que se conoce como cariogamia, cuyo resultado
es un zygote, zigote, cigote, zigoto o cigoto que
genticamente es 2n, es decir, diploide. Es el
nico momento en que el moho tiene un nmero
diploide de cromosomas. El cigote maduro reci
be el nombre de zigospora que est contenida en
una estructura llamada coenozygote o cenozygo-
te. Posteriormente se produce meiosis y la pared
Hongos / 169
del coenozygote pronto se engruesa, se vuelve
negra y se arruga, rompindose y permitiendo
que de la zigospora salga un esporangiforo
con su respectivo esporangio y un nmero n de
cromosomas (vase figura 7.8).
Ascomycota-ascomicetes
Los hongos de la divisin Ascomycota poseen
micelios con hifas septadas, algunas son hete-
rotlicas y otras liomotlicas, es decir, que se
autofecundan porque son autofrtiles. Estn am
pliamente difundidos en la naturaleza y algunos
pueden ser patgenos para el hombre.
1. Reproduccin asexual. La realizan por
medio de esporas asexuales llamadas conidias,
de las cuales existen diferentes clases que pueden
ser unicelulares y pluricelulares.
2. Reproduccin sexual. Se inicia cuando dos
hifas, positiva y negativa, se unen y producen un
fruto que da origen a unas hifas especializadas
llamadas hifas ascgenas que luego sufren los
procesos de plasmogamia, cariogamia, meiosis y
mitosis; lo que da como producto final ocho as-
cosporas (haploides) en una asea. Las ascosporas
son cuatro positivas (+) y cuatro negativas (-).
Las aseas son una especie de vainas que
contienen las ascosporas.
Los ascomicetes pueden formar cuerpos fruc-
170 / Microbiologa bsica para el rea de la salud y afines
tferos o ascocarpos donde se alojan las aseas. Los
ascocarpos dependiendo de su forma toman los
siguientes nombres: apotecio, cleistotecio, perite-
cio. Cuando el asea madura estalla y dispersa las
ascosporas que inician un nuevo ciclo.
Levaduras
Las levaduras son hongos unicelulares que tienen
la pared celular conform ada por residuos de
cido-N-acetil glucosamina unidos por enlaces
(3-1-4 en cantidad diferente a los mohos. Tam
bin poseen un polmero de la glucosa que es
el glucano, que le da rigidez, adems, manano
y protenas que en algunas especies forman el
complejo manano-protena, tambin presentan
lpidos y cantidades variables de quitina.
La pared no es homognea y permite la dife
renciacin de dos capas, una externa compuesta
por glucano y una interna por manano-protena.

En el citoplasma las levaduras poseen varias
vacuolas que contienen lpidos, polifosfatos
y m etafosfatos. Los estudios realizados han
demostrado actividad enzimtica parecida a la
actividad de las enzimas hidrolticas como las
proteasas, las esterasas y las ribonucleasas. La
existencia comprobada de hidrolasas en las va
cuolas sugiere que estas desarrollen una funcin
muy similar a la de las lisozimas.
Otra funcin de las vacuolas es servir de
reserva energtica para la nutricin de este tipo
de hongos unicelulares (vase figura 7.9).
Las levaduras son clulas con caractersticas
morfolgicas, fisiolgicas y reproductivas dife
rentes a los dems hongos. Las que se reproducen
asexualmente se toman como imperfectas y las
que poseen esporas sexuales como perfectas.
Durante siglos, la mayora de las levaduras
han sido utilizadas en procesos fermentativos,
en procesos de panificacin y en la elaboracin
de alimentos.
A ctualm ente, su utilizacin tiene m ucha
demanda en las industrias de vitaminas, grasas y
protenas, en las cuales se utilizan como sustratos
azcares simples y amoniaco.
Debido a su facilidad y velocidad de repro
duccin, las levaduras se utilizan para estudiar
procesos bioqumicos y metablicos de las clulas
eucariticas.
Sin embargo, algunas especies, causan dao
a las plantas, animales y a los humanos. Tambin
Hongos / 171
pueden deteriorar alim entos, textiles, papel,
y materia orgnica en general. Las levaduras
poseen reproduccin sexual y asexual.
1. Reproduccin asexual. Las levaduras la
pueden realizar- de diferentes formas: con blas
tosporas y forman por este modo un seudomice-
lio, es decir, un falso micelio, por fisin binaria
y gemacin (vase figura 7.10).
2. Reproduccin sexual. La realizan por
medio de ascosporas. Se inicia con dos clulas
positiva y negativa que se aproximan, dndose
la plasmogamia, luego la cariogamia y el resul
tado final son ocho ascosporas en un asea (vase
figura 7.11).
Las tres clases principales de este plrylum
son: Hemiascomicetes, Euascomicetes y Locu-
loascomicetes (los trminos filum, plrylum y filo
significan lo mismo, igual que phylla, el cual
usan actualmente algunos taxonomistas). Solo
se describe el primero.
Hemiascomicetes. Agrupa, principalmente,
a las levaduras y otros hongos similares. Uno
de los principales representantes de esta clase
es la levadura de la cerveza o Saccharomyces
cerevisiae que adems de tener reproduccin
sexual por medio de ascosporas, tambin se
reproduce asexualmente utilizando el proceso
de gemacin, en el cual aparece en la levadura
una protuberancia o yema que va aumentando
su tamao y posteriormente se separan de la
levadura original o clula madre.
172 / Microbiologa bsica para el rea de la salud y afines

Basidiomycota-Basidiomicetes
Los hongos del phylum basidiomycota, se carac
terizan por poseer hifas septadas dicariticas, es
decir, dos ncleos y los septos impiden el paso de
los ncleos de un segmento a otro. Poseen tam
bin una estructura en forma de pon-a o botella
llamada basidia que contiene las esporas sexua
les o basidiosporas. En esta clase se encuentran
hongos macroscpicos o de masa, como las setas,
los championes, los hongos conocidos como
paraguas de sapo, orejas de palo, los txicos,
los alucingenos y los fitopatgenos, o sea, los
que atacan a las plantas como la roya y los tizones
(vase figura7.12). Algunos hongos de este gru
po presentan, en sus hifas, unas estructuras que
conectan un septo con otro llamadas grapas de
conexin, las cuales permiten el paso del cito
plasma y ncleos de un segmento a otro.
Los hongos Basidiomycota tienen reproduc
cin asexual y sexual.
1. Reproduccin asexual. La realizan por
medio de estructuras asexuales como artrosporas
u odios.
2. Reproduccin sexual. Cuando una espora
positiva o negativa encuentra el sustrato adecua
do germinan y forman cada una un micelio por
separado. Este micelio se llama micelio primario.
Hongos / 173
Cuando la hifa (+) se une con la hifa (-), ambas
provenientes de sus respectivos micelios primarios,
ocurre un intercambio de ncleos que despus de
ciertos procesos de diferenciacin forman un nuevo
micelio conocido como micelio secundario.
Cada segmento de las hifas de este micelio
posee dos ncleos (n+ y n_), luego se forma una
estructura fuerte o basidia y ocurre la cariogamia
que forma un solo ncleo (2n), el ncleo, por
meiosis, se divide y da lugar a cuatro ncleos que
son cromosmicamente n, para luego diferenciar
se en basidiosporas (esporas sexuales), que salen
al exterior por medio de unos conductos, ubicados
en la basidia, denominados esterigmas.
Cuando el basidiocarpo presenta en la parte
inferior del peo las estructuras en forma de
lminas conocidas como Zamelas se denomina
agarical. Si su superficie presenta poros seme
jantes a un panal de abejas se llam a poliporaceo.
Si su superficie es irregular semejando salientes
o apariencia dentada se le denomina hydnaceo y
si su superficie es lisa, es decir, que no presenta
ninguna caracterstica en particular, recibe el
nombre de teleforaceo (vase figura 7.13).
Los hongos ms conocidos de esta divisin,
se utilizan mucho industrialmente, entre ellos se
encuentran: los championes, las setas, Pleuro-
tus ostreatus que posee alto contenido de fibra.
174 / Microbiologa bsica para el rea de la salud y afines
El gnero Amanita incluye muchas especies
venenosas como las llamadas popularmente
ngel destructor y ngel de la muerte, pues la
ingesta de una sola sombrilla de esos hongos
puede ocasionar la muerte a un adulto sano. Es
muy conocido el hongo Amanita muscaria que
produce la sustancia alucingena que se deno
mina muscarina y afecta de muchas formas al
sistema nervioso.
El gnero Psilocybe incluye hongos muy
populares en Mxico, donde se consideran como
hongos sagrados por algunas tribus indgenas
aztecas y algunos indgenas americanos an los
utilizan en ceremonias religiosas. Un compo
nente qumico de estos hongos es lapsilocibina,
pariente qumico con uno de los componentes
del LSD o cido lisrgico, que es el responsable
del estado de trance y las visiones multicolores
experimentadas por quienes los ingieren. Gene
ralmente, no son letales, pero algunos consumi
dores han reportado sntomas de intoxicacin
como malestar estomacal, sudoracin y acele
racin del ritmo cardiaco (taquicardia) (vase
figura 7.14).
Entre los hongos fitopatgenos estn: la roya
que puede destruir grandes reas sembradas de
cafetos y las royas negras que afectan los cereales
como el trigo, maz y rboles frutales como los
ctricos (vase figura 7.15).
Otros hongos son micorrizantes como Boletus
que establece una relacin mutualista con las ra
ces del vegetal, beneficia la planta al descompo
ner materia orgnica del suelo y as ayuda a que la
planta obtenga agua y minerales como el fsforo
Hongos / 175
176 / Microbiologa bsica para el rea de la salud y afines
mientras que las races aportan al hongo azcares,
aminocidos y otras sustancias orgnicas.
Deuteromycota
En este phylum ele form a se han asignado unas
25.000 especies de hongos que pueden causar
enfermedades al hombre y a los animales. Solo
presentan un tipo de reproduccin, la asexual;
por esto, se les cataloga como fung imperfecta.
Entre estos hongos se encuentran los dimrficos,
o sea, los hongos que pueden ser filamentosos y
levaduriformes. Estos hongos se relacionan en
forma estrecha con los ascomicetos y parece ser
que algunos pocos estn ms relacionados con
los basidiomicetos. Si en estudios posteriores
se descubren algunos hongos ubicados en este
phylum, que posean reproduccin sexual, estas
especies se reasignan a otro phylum.
La reproduccin asexual la hacen por me
dio de conidias que son esporas asexuales de
diferentes formas y tamaos. Generalmente, se
mencionan como microconidias y macroconi-
dias.iyanse figuras 7.16).
Los hongos que se enumeran a continuacin
estuvieron clasificados en e\ phylum Ascomyco
ta, actualmente se incluyen entre los D eute
romycota, pues no se les reconoce reproduccin
sexual.
1. Penicillium notatum y Penicillium a y so-
 Hongos / 177

genum, de ellos se obtiene uno de los antibiticos llaman micosis que reciben el nombre segn el
ms conocidos: la penicilina (vase figura 7.17). lugar donde se produzcan, as:
2. Penicillium camembertti y Penicillium 1. Micosis superficiales o cutneas. Tambin
roquefortti, utilizados en la industria lctea en la conocidas como dermatomicosis o tias. El hongo
produccin de quesos, conocidos comercialmen slo infecta la piel, el pelo o las uas. Las tias
te como quesos camembert y roquefort. reciben el nombre dependiendo del lugar afec
3. Aspergillus niger, del cual se obtiene cido tado, por ejemplo: tia de la cabeza, tia del pie
ctrico y cido glucnico (vase figura 7.18). (pie de atleta), de las uas, etc. La candidiasis es
4. Aspergillus fumigatus, produce una dolen una infeccin de las membranas mucosas de la
cia pulmonar conocida como goma aspergilosa boca y vagina y se cuenta entre las micosis ms
pulmonar. comunes.
5. Aspergillus flavus, produce una sustancia 2. Micosis subcutneas. Para que se produz
llamada aflatoxina que en dosis altas puede ser letal can es necesario que haya una puerta de entrada
y en dosis pequeas induce mutaciones celulares. o solucin de continuidad como una herida en la
6. Candida albicans, responsable de infec piel. Son muy frecuentes entre los horticultores,
ciones fngicas de las mucosas bucales y vagi las personas que trabajan en aserros, etc.
nales que se conocen como candidiasis. 3. Micosis profundas o sistmicas. Com
Los hongos dimrficos se caracterizan porque prometen uno o varios sistemas orgnicos. La
a determinadas temperaturas y al nivel del labo histoplasmosis es una infeccin mictica muy
ratorio se comportan como mohos, pero cuando grave, que causa un hongo llamado Histoplasma
estn en el cuerpo humano son levaduras. capsulatum, el cual esporula abundantemente en
Aunque la piel y la membrana mucosa del los suelos que contienen excrementos de aves y
hombre y animales sanos son una barrera muy cualquier persona que inhale las esporas puede
eficaz contra la penetracin de los hongos, exis contraer la infeccin.
ten algunas especies que les pueden producir 4. Micosis oportunistas. Las causan hongos
enfermedades. que no afectan a personas sanas, sino a aquellas
Las enfermedades producidas por hongos se que han sido debilitadas por algn tipo de en-
178 / M icrobiologa bsica para el rea de la salud y a fines
fermedad sistmica debilitante, como: cncer,
diabetes, sida, desnutricin, entre otras.
Hongos: sumario
Los hongos son microorganismos eucariticos
hetertrofos que obtienen su alimento en forma
soluble, incorporndolo a travs de la membra
na citoplasmtica de una manera similar a las
clulas procarioticas. Poseen una gruesa pared
celular constituida por polisacridos sencillos.
Pueden encontrarse como organismos unicelu
lares (levaduras) y pluricelulares (mohos).
Las levaduras generalmente se reproducen
por gemacin y como clulas aisladas, crecen y
se reproducen ms rpidamente que los mohos.
Los mohos tienen un crecimiento tpicamente
ramificado (micelio), formado por filamentos
individuales (hifas).
La mayora de los hongos estn adaptados para
vivir en el suelo, donde tienen importancia por con
vertir el carbono orgnico en dixido de carbono.
Preguntas para autocontrol
del aprendizaje
1. Compare la morfologa y procesos de
reproduccin de las levaduras, mohos y
bacterias.
2. En qu se parecen los hongos a las bacte
rias?, en qu difieren?
3. Compare morfolgicamente las levaduras
y los mohos.
4. Describa ampliamente la morfologa, me
tabolismo, reproduccin y gentica de los
mohos, y compare estas propiedades con
las bacterias.
5. Las esporas de los hongos pueden formarse
asexualmente, pero a veces las esporas se
producen por procesos sexuales. Por qu
son importantes estas ltimas?
6. D ejemplos de esporas sexuales y asexua
les y descrbalas.
7. Los hongos necesitan medios de cultivos
diferentes a los de las bacterias, mencione
varias clases de medios y comprelos con
los utilizados para las bacterias.
8. Hable sobre la clasificacin de los hongos
(grupos o divisiones), dando las caractersti
cas de cada clasificacin y comprelas entre
s. Analice sus formas de reproduccin.
Por qu algunos se llaman imperfectos?,
d ejemplos y describa sus caractersticas.
Referencias bibliogrficas
1. Kirk et al. Citado por Franco M olano E, et al.
M acrohongos de la regin del M edio Caquet-
Colombia. Medelln: Universidad de Antioquia,
2005.
2. Franco Molano E, et al. Macrohongos de la regin
del M edio Caquet-Colombia. Medelln: Univer
sidad de Antioquia, 2005.
 8
Introduccin a la parasitologa
E s t e captulo considera las principales interre-
laciones nutricionales entre diferentes especies,
pero se limita a las que afectan a distintos tipos
de animales, con el prembulo de que una bue
na parte, aunque no todo, de lo que se diga, se
extiende tambin a las interrelaciones entre ani
males y plantas. Existen fundamentalmente dos
vas principales por las cuales un animal puede
obtener alimento a expensas de otros animales:
la predacin o depredacin y la simbiosis.
Un animal puede atacar a otro animal vivo,
producindole o no la muerte y posteriormente
consumir todo o parte de su cuerpo para ali
mentarse. Este proceso se denomina predacin
o depredacin: el atacante es el predador o
depredador y la vctima la presa. Algunos ani
males pueden nutrirse de animales previamente
muertos, bien sea devorando a aquellos que han
muerto por causas naturales o comindose los
restos que ha dejado un depredador. Los anima
les que subsisten de esta forma se denominan
carroeros. Algunos animales son depredadores
puros, otros carroeros puros, pero muchos
depredadores no se muestran adversos a una
comida ocasional de carroa.
Algunos animales consiguen siempre su
alimento por su propio esfuerzo, o en asociacin
con otros animales de su misma especie. Esta es
la forma ms notoria y quiz la ms comn por
la que los animales consigan su alimento; es a
este gran grupo al que se hace referencia cuando
se habla de carroeros y depredadores.
Otros animales que, aunque en esencia son
depredadores o carroeros, se han modificado
tanto, hasta el punto de ser incapaces de obtener
alimento a menos que se asocien, bien sea de
forma continua o intermitente, a miembros de
otras especies. Esta asociacin entre dos especies,
quiz bsicamente para obtencin de alimento,
por parte de uno o de ambos miembros se deno
mina simbiosis. Literalmente, simbiosis, quiere
decir vida en comn y puede indicar tambin la
existencia de proteccin u otras ventajas para uno
de los asociados. Si se considera la asociacin
perjudicial o no para uno de los asociados, pueden
distinguirse diferentes tipos de simbiosis.
El comensalismo. Del latn comiendo en
la misma mesa, define una asociacin que es
beneficiosa para un asociado y, al menos, no
perjudicial para el otro.
El mutualismo. Es una forma especializada
de comensalismo y se produce cuando la asocia
cin que surge resulta beneficiosa para ambos
organismos.
El parasitismo. Por el contrario, es una in-
terrelacin simbitica en la cual un animal, el
hospedador, se perjudica en algn grado por las
actividades del otro animal, el parsito.
El parasitismo, como los otros tipos de sim
biosis, implica necesariamente una interrelacin
ntima entre las dos especies y es este contacto
estrecho y prolongado el que diferencia al pa
rasitismo de las actividades predadoras de los
no parsitos.
El parasitismo como modo de vida puede ser
la nica posibilidad para un organismo dado, o
ser solo una alternativa. De esta manera se con
sidera la siguiente clasificacin:
- Parsito obligado. Se refiere a un orga
nismo que no puede sobrevivir de ninguna otra
forma.
- Parsito facultativo. Es un organismo que
1 8 0 / Microbiologa bsica para el rea de la salud y afines
puede vivir en estado libre o como comensal,
pero si se le presenta la oportunidad vive como
parsito. Est implcito en el trmino, el que este
organismo no tenga la necesidad de ser parsito
en ninguna fase de su vida.
- Parsitos temporales. Algunos animales
son parsitos obligados en una o ms fases de sus
ciclos biolgicos y son de vida libre en otras. A
este tipo de parsitos muchas veces se les califica
de esta forma.
- Endoparsitos. En este grupo se incluyen
los parsitos que viven, necesariamente, en el
interior del hospedador.
- Ectoparsitos. Este trmino abarca los
parsitos que se encuentran en la superficie del
cuerpo del hospedador.
- Parsitos intermitentes . Esta clasifica
cin, no aceptada por muchos ecologistas, in
corpora a los animales pequeos como los mos
quitos, que deben buscar peridicamente a otros
animales ms grandes para poder alimentarse.
Esta utilizacin infortunada del trmino parsito
proviene del supuesto que un depredador debe
ser mayor y ms fuerte que su presa, mientras
que un parsito es un organismo pequeo y dbil.
La generalizacin es cierta para la mayora de
los depredadores y de los parsitos, o al menos
para los ms representativos. Sin embargo, la
esencia de la interrelacin parasitaria y lo que
la diferencia de la depredacin es la asociacin
prolongada e ntima entre el parsito y el hos
pedador. La asociacin entre el mosquito y su
vctima no es ni prolongada ni ntima. Estos ar
trpodos hematfagos, que llevan una existencia
independiente, excepto ocasionales incursiones
para alimentarse, deben denominarse micropre-
dadores, trmino sugerido por un importante y
representativo nmero de parasitlogos.
Muchos organismos que se han considerado
por costumbre como parsitos son en la actuali
dad comensales. Entamoeba coli vive en la luz del
intestino, subsiste all alimentndose de la flora
bacteriana entrica y no produce al hospedador
ningn dao apreciable. Es una interrelacin
simbitica en la que no se producen ventajas ni
desventajas para el hospedador, mientras que la
ameba est abastecida de alimento y protegida.
Aunque el parasitismo es un fenmeno gene
ral de adaptacin ecolgica entre seres vivos que
se asocian entre s, la parasitologa mdica est
circunscrita al estudio de los parsitos del reino
animal, solamente cuando el hombre acta como
hospedador. La mayor parte de los parsitos
humanos son endoparsitos que, gracias a algn
mecanismo, lograron penetrar en la profundidad
de los rganos, tejidos, sangre o cavidades na
turales. Tambin existen ectoparsitos que solo
actan en la piel o sus anexos.
Las definiciones que se ofrecen en esta obra
para simbiosis, comensalismo y mutualismo,
difieren de las empleadas por muchos autores.
Sin embargo, estn de acuerdo con las reco
mendaciones del Comit de Terminologa de la
Sociedad de Parasitologa.
Parsitos
Actualmente se trabaja con base en dos grandes
grupos, en los cuales se ubican todos los parsi
tos que se referencian en este captulo: protozoos
y metazoos. Los primeros son unicelulares y
poseen la tpica estructura de la clula eucari-
tica. Los metazoos son parsitos pluricelulares,
de los cuales, interesan a la parasitologa clnica
los helmintos o gusanos redondos y planos.
Otro grupo de parsitos son los denominados
artrpodos o animales provistos de exoesque-
leto articulado como los insectos, pulgas, caros,
entre otros.
Composicin bioqumica
Los parsitos poseen los mismos constituyentes
de todas las clulas eucariticas, pero se destacan
por su alto contenido en hidratos de carbono.
El principal de estos, de los helmintos y pro
tozoos, es el glucgeno, el cual se utiliza en los
procesos energticos, cuando aquellos viven en
un hbitat deficiente en oxgeno. Las protenas
estructurales de muchos parsitos son la querati-
na en los cestodos o tenias y la esclerotina en los
quistes de protozoos y huevos de los helmintos.
En los protozoos se encuentran fosfolpidos y
esterles en la composicin de la membrana

citoplasmtica y triacilgliceroles (anteriormente
llamados triglicridos) en los lugares de almace
namiento. Entre las sustancias inorgnicas de los
helmintos se destacan los corpsculos calcreos,
que adems de los dos cidos nucleicos, prote
nas y polisacridos, poseen calcio, magnesio,
fsforo y otros oligoelementos.
Respiracin y metabolismo
Inicialmente se consider que por vivir en el
tubo digestivo los parsitos intestinales eran
anaerobios, mientras que los parsitos tisulares
y hemticos eran aerobios, porque en ellos la
tensin de oxgeno es alta. Ninguna de estas
aseveraciones es cierta, ya que los primeros
pueden consumir oxgeno, incluso en altas
concentraciones y los segundos utilizan la va
glucoltica en anaerobiosis total.
Estructuras semejantes a las mitocondrias
o ellas mismas son las encargadas del proceso
respiratorio en helmintos y protozoos. La gluc
lisis y el ciclo del cido ctrico (ciclo de Krebs)
van unidos a hemoprotenas tipo citocromos, en
la respiracin aerbica. Se conocen actualmente
varias protenas que intervienen en los procesos
respiratorios de ciertos parsitos, pero an se des
conocen muchos de los mecanismos que se siguen
en esta cadena.
En resumen, la mayora de los parsitos
obtienen la energa necesaria para su metabolis
mo por medio de procesos anaerobios como la
gluclisis, pero en presencia de oxgeno pueden
utilizar las actividades oxidativas. En anaerobio
sis, los aceptores de electrones son sustancias
orgnicas, y en aerobiosis, el oxgeno, por medio
de una cadena enzimtica en la cual intervienen
los citocromos.
Fisiologa
La actividad fisiolgica en los protozoos se efec
ta mediante las formas biolgicas vegetativas,
denominadas trofozotos. En muchos casos estos
dan lugar a otras formas biolgicas llamadas
quistes, caracterizados por su inmovilidad y
Introduccin a la parasitologa / 181
bajo metabolismo, por lo cual son considera
das formas de resistencia y conservacin de la
especie.
La movilidad de los trofozotos se establece
mediante cilios, flagelos, seudpodos o membra
nas ondulantes. Los protozoos pueden reprodu
cirse de dos formas: sexual o asexualmente.
Nomenclatura
La denominacin de los parsitos, al igual que
la de otros microorganismos, se ajusta a la no
menclatura binomial de Linneo (1785). en la
cual, la primera palabra corresponde al gnero
y la segunda a la especie. Ejemplo: Entamoeba ,
esta palabra corresponde al gnero y la segunda,
histolytica, corresponde a la especie. Es decir,
que el nombre completo del parsito sera En
tamoeba histolytica.
Fuentes de las parasitosis
Una infeccin parasitaria puede adquirirse cuan
do el parsito utiliza una de estas vas:
1. A partir de otra persona por contacto, que
puede ser ms o menos directo. Por ejemplo:
Trichomonas vaginalis.
2. Por autoinfeccin. Uno de los ejemplos
ms representativos es el mecanismo ano-mano-
boca de la oxiuriasis, cuyo agente etiolgico es
Enterobius vermicularis.
3. Por transmisin matemofilial o congnita:
Toxoplasma gondii.
4. A partir de objetos contaminados, como
ropa o sbanas. Esta es una de las vas de
infeccin parasitaria propia de Enterobius ver
micularis.
5. A partir del suelo, aguas o alimentos
contaminados con excretas humanas, ejemplo
Entamoeba histolytica.
6. Por el consumo de carne de animales con
taminados, es el caso de Taenia solium.
7. Mediante artrpodos transmisores. Por ejem
plo, Plasmodium agente causal del paludismo, se
transmite por la picadura de la hembra de diferentes
especies del mosquito hematfago Anophelex.
182 / Microbiologa bsica para el rea de la salud y afines
Vas de entrada
Los parsitos pueden penetrar en el cuerpo
humano por diversas vas, como la cutnea, la
mucosa, la digestiva y la respiratoria. Otra po
sible va de entrada es la transfusin de sangre,
cuando esta viene de individuos enfermos o
portadores asintomticos como sucede con el
gnero Plasmodium, productor del paludismo
o malaria.
El presente captulo se divide en dos seccio
nes para facilitar su estudio y entendimiento:
una seccin dedicada a los protozoos y la otra
a los helmintos.
 8A
Protozoos
L o s protozoos son organismos unicelulares
de estructura eucaritica, desprovistos de pared
celular, de los cuales se han descrito aproximada
mente 50.000 especies y de estas solo una vein
tena son patgenas para el hombre y animales,
otras especies son saprofitas y establecen hbitats
diferentes como el suelo, el aire o las plantas,
entre otros. Los protozoos pueden establecer su
hbitat en aguas dulces o saladas (marinas).
La estructura celular eucaritica del pro-
tozoo, bsicamente, consta de citoplasma y
ncleo. El primero est formado, casi siempre,
por una zona delgada perifrica llamada ecto-
plasma y otra interna muy compleja denominada
endoplasma. El citoplasma tiene importantes
funciones como el movimiento, la ingesta de
alimentos, la excrecin y, en algunos casos, la
respiracin. El endoplasma es granular, posee
funciones de nutricin y en l existen vacuolas
digestivas o de reserva y contrctiles, estas
ltimas tienen como funcin la eliminacin de
agua y regulacin osmtica.
Una gran cantidad de protozoos realiza su
alimentacin por el mecanismo de fagocitosis
(proceso por el cual una partcula alimenticia
es rodeada por unas prolongaciones o emisiones
citoplasmticas, que la introducen en la clula).
Otros utilizan una estructura llamada citostoma,
que funciona a modo de boca, la cual le permite
al protozoo, literalmente, tragar bacterias u
otras clulas eucariticas de menor tamao
El ncleo es el responsable del control de las
funciones vitales y la reproduccin. Esta orga-
nela puede ser vesicular o compacta y posee una
membrana nuclear, un retculo con ADN cromo
smico y los nuclolos o cariosomas. La forma,
el tamao y el nmero de los ncleos tienen un
gran valor taxonmico y diagnstico.
Los protozoos se clasifican en cuatro grupos
taxonmicos, se tienen en cuenta caractersticas
como: la movilidad, la patogenicidad, ciclo bio
lgico, entre otras. Los grupos taxonmicos son:
Sarcodina (ameboides), Ciliophora (ciliados),
Mastigophora (flagelados) y Sporozoa o Api-
complexa (esporozoos) (vase tabla 8.1).
Sarcodina (ameboides)
Los principales representantes del grupo Sarcodi
na son las amebas y entre ellas se destacan como
parsito comensal de vida libre Entamoeba coli
y Entamoeba histolytica, como parsito patgeno
y comn en el intestino grueso de los humanos,
productor de cuadros diarreicos llamados disente
ras amebianas. El parsito, tambin se encuentra
frecuentemente en el intestino grueso de animales
del grupo de los primates y otros que se encuen
tran normalmente en situaciones de estrs, como
les ocurre a los animales de los zoolgicos. La
Entamoeba histolytica presenta tres formas bio
lgicas: trofozoto, prequiste y quiste.
Trofozoto. Es la forma de vida libre, la cual
muestra la forma ameboidea caracterstica de
este parsito y es extraordinariamente mvil
pleomrfica porque su aspecto y movilidad estn
influidos por los cambios de pH, potencial de
xido-reduccin y osmolaridad. Se multiplica
por fisin binaria, es muy sensible al jugo gs
trico y a los agentes externos. Su hbitat com
prende la luz y la pared del colon, especialmente
el sigmoides y el recto. El tamao del protozoo
adulto oscila entre 15 y 35 ,um y se nutre por
184 / Microbiologa bsica para el rea de la salud y afines
Tabla 8.1 Principales protozoos patgenos para el hombre
Grupo taxonmico Nombre comn
Sarcodina Ameboides
Ciliophora Ciliados
Mastigophora Flagelados
Sporozoa o Esporozoos
Apicomplexa
fagocitosis a expensas de los tejidos disueltos
y hemates o glbulos rojos, ayudndose con la
emisin de seudpodos (falsos pies). El trofozo-
to ameboideo es laforma invasiva de Entamoeba
histolytica y la nica forma biolgica detectable
en los tejidos, tambin puede detectarse en las
diarreas acuosas de la disentera amebiana.
El citoplasma presenta dos regiones una
ms externa hialina y otra interna granular. En
la regin citoplasmtica granular se encuentran
vacuolas alimenticias que desarrollan gran ac
tividad enzimtica para degradar las partculas
nutritivas y vacuolas contrctiles que regulan el
balance hdrico del parsito.
Prequiste. Se forma por evolucin del trofo-
zoto y no es ms que un quiste joven, inmaduro,
posee uno o dos ncleos, algunos cuerpos cro-
matnicos y vacuolas de glucgeno. Esta forma
no es infectante.
Quiste. Cuando el prequiste madura des
aparecen los cuerpos de cromatina y se forman
4 ncleos (quiste cuatrinucleado), la estructura
resultante toma el nombre de quiste, convir
tindose en la forma infecciosa y resistente del
parsito. Pueden observarse en la luz del colon y
en las heces pastosas o formadas, de la persona
parasitada. Es de forma oval o esferoidal y su
tamao vara de 10 a 25 |am.
El quiste es muy resistente al jugo gstrico, a
factores ambientales externos y a las concentra
ciones habituales de cloro en el agua. Sobrevive
hasta 5 minutos a temperatura de 50 C y en el
agua puede tolerar temperatura de 0 C por 90
Principal representante
Entamoeba histolytica
Balantidium coli
Giardia lamblia
Trypanosoma cruzi
Trichomonas vaginatis
Leishmania braziliensis
Plasmodium vivax
Toxoplasma gondii
das. Se mantienen viables en alimentos lquidos
a temperaturas de 4 C durante 10 a 15 das. En
las deposiciones resiste hasta 9 das a temperatu
ras de 22 C y 25 das a 5 C. El quiste es la forma
infectante del parsito (vase figura 8.1).
Ciclo biolgico
El ciclo de vida o ciclo biolgico es relativamen
te sencillo. La infeccin se inicia con la ingesta
de los quistes, los cuales, como se anot antes,
son capaces de resistir el pH gstrico. Los quistes
provienen y son transportados por el agua o ali
mentos contaminados con materia fecal humana
o de animal parasitado por el protozoo. En el
intestino delgado ocurre la llamada exquistacin,
que consiste en la divisin del quiste cuatrinu
cleado que da origen a ocho ncleos, es decir, que
pasa a un estado metaqustico transitorio (ameba
metaqustica), la divisin citoplsmica contina
y emergen ocho trofozotos. Los trofozotos se
dirigen al intestino grueso para colonizarlo y
madurar, ah se alimentan de bacterias y restos
celulares y reciben el nombre de trofozotos de
la luz intestinal (vase figura 8.2).
En determinadas circunstancias, los trofo
zotos adquieren capacidad de invadir la mucosa
intestinal y por la accin de enzimas proteasas,
hialorunidasas y mucosacaridasas, erosionan la
mucosa, produciendo, aveces, ulceraciones y al
canzan incluso la submucosa. Toman el nombre
de trofozotos tisulares, que son de mayor tama
o, poseen ms movilidad, son hematfagos, no

se transforman en quistes y no suelen salir por
las heces. Por medio del sistema portal pueden
alcanzar el hgado u otros rganos.
Finalmente, los trofozotos de la luz intestinal
pueden enquistarse completando el ciclo.
Ciliophora (ciliados)
En el grupo Ciliophora se encuentran dos de los
representantes ms estudiados: Paramecium, es
un parsito de vida libre y habitante normal de
las aguas estancadas y Balantidium coli, como el
representante patgeno humano. Las caracters
ticas de este ltimo se mencionan a continuacin
por ser un parsito, primariamente, de animales
y ocasionalmente infecta el intestino del hom
bre y produce cuadros diarreicos conocidos como
disenteras balantidianas muy similares a las
disenteras amebianas.
Este protozoo posee dos formas biolgicas: el
trofozoto que es la forma invasiva y el quiste que
es la infecciosa, porque el trofozoto se destruye
rpidamente en el medio ambiente.
Introduccin a la parasitologa / 185
Trofozoto. Es la forma de vida libre del par
sito, su morfologa es oval y de tamao variable
entre 40 y 50 pm. Superficialmente est cubierto
por una capa de cilios de pequea longitud que le
proveen una caracterstica de avance continuo y
rotacin alrededor del eje mayor del parsito.
Posee dos ncleos, uno grande o macroncleo
de aspecto arrionado o en V que se relaciona
con las actividades vegetativas y otro pequeo o
microncleo que se relaciona con las funciones
reproductivas y de la herencia. El citoplasma suele
ser granuloso y posee varias vacuolas alimenticias
y dos vacuolas contrctiles. En el polo anterior
se encuentra el citostoma o boca del parsito,
recubierto de cilios y en el posterior el orificio
excretor o citopigio.
El trofozoto se multiplica por fisin binaria
y quiz tambin tiene la posibilidad de realizar
el proceso de intercambio de material gentico
conocido com o conjugacin (apaream iento
sexual). Se encuentra en la luz intestinal y en el
interior de la mucosa y submucosa de la regin
terminal del leon, ciego, sigmoides y recto.
186/ Microbiologa bsica para el rea de la salud y afines
Quiste. Tiene un tamao de 45 a 65 am y una
pared doble y resistente, es esfrico u oval. Los
quistes jvenes son ciliados y estos cilios se sitan
dentro de la pared. Posteriormente y a medida que
el quiste madura, los cilios, el citostoma y con
frecuencia el microncleo desaparecen.
El quiste es la forma infectante del Balanticlium,
pero a diferencia del de E. histolytica, no se divide.
El quiste se arroja al medio externo con las heces
donde contamina aguas y alimentos, que facilitan
la infeccin del hombre (vase figura 8.3).
Ciclo biolgico
Los quistes maduros penetran por va bucal,
transportados por agua o alimentos contaminados
con materia fecal. En el estmago comienza a
disolverse la pared del quiste, proceso que se
completa en el intestino delgado, dejando en
libertad al trofozoto de la luz intestinal. Los
trofozotos emigran al intestino grueso donde
se multiplican y se comportan normalmente en
forma comensal (vase figura 8.4).

Posteriormente, los trofozotos pueden inva
dir la mucosa intestinal, incluso la mucosa sana,
por accin de la secrecin de enzimas como
la hialorunidasa. Estos se llaman trofozotos
tisulares, los cuales se multiplican, no se en-
quistan, pero atraviesan la muscularis mucosae
del intestino y alcanzan la submucosa, donde
originan ulceraciones intestinales de aspecto cra
teriforme. En ocasiones produce perforaciones
intestinales, pero son raras las propagaciones a
distancia por va hemtica, al hgado, pulmn forma vegetativa o trofozoto (forma invasiva) y la
o corazn.
Mastigophora (flagelados)
En este grupo taxonmico se encuentran los
protozoos mviles por estructuras o apndices
flexibles llamados flagelos. Muchos de estos fla
gelados son de vida libre y un nmero importante
de ellos son parsitos de animales y del hombre.
Segn su hbitat se dividen en tres grupos:
1. Flagelados intestinales. Como su nombre
lo indica son parsitos de las vas intestinales.
Por ejemplo, Giardia lamblia.
2. Flagelados atriales. Parsitos de la boca,
uretra y vagina, como Trichomonas vaginalis.
3. Hemoflagelados. Este tipo de parasitos
se desarrolla en secreciones propias de la boca,
flagelados de la sangre, en este grupo pueden
Introduccin a la parasitologa / 187
mencionarse Leishmania brasilienzis y Tripano-
soma cruzi.
Giardia lamblia (flagelado intestinal)
Es el nico protozoo flagelado patgeno para el
hombre que habita el intestino en la porcin del
duodeno y yeyuno, de manera especial en nios,
en ambientes de bajo nivel higinico y sanitario.
El protozoo tiene dos fases o formas biolgicas: la
forma de resistencia o quiste (forma infecciosa).
A este parsito se le asignan varios nombres
como: Giardia duodenalis, Giardia intestinalis
(comnmente utilizado en Europa); Lamblia in
testinalis (utilizado en la antigua Unin Sovitica),
pero en esta obra se adopta el de Giardia lamblia
hasta que los taxonomistas logren consenso para
mencionar el protozoo con un solo nombre.
Trofozoto. Tiene aspecto piriforme, con un
polo anterior redondeado y otro posterior afilado.
Su tamao es de 10 a 20 |jm de longitud. La cara
anterior es cncava y la posterior convexa. En la
cara anterior se encuentra una estructura llamada
axostilo, formado por un engrasamiento protoplas-
mtico que divide al parsito en dos mitades. Posee
dos ncleos anteriores con cariosomas centrales
muy manifiestos. Tiene un gran disco de succin,
cuatro pares deflagelos y corpsculos parabasales
188 / Microbiologa bsica para el rea de la salud y afines
Figura 8.4 Ciclo biolgico de Balantidium coli
o cuerpos cromcitnicos. El trofozoto casi nunca
aparece en las heces, excepto en aquellos casos
en que existe una marcada aceleracin del trnsito
intestinal, pero posee extraordinaria labilidad y se
destruye rpidamente en el medio ambiente (vase
figura 8.5).
Quiste, Es ovalado o elipsoidal, refringente,
posee dos ncleos cuando est inmaduro y cuatro
cuando alcanza la madurez, con sus correspon
dientes cariosomas centrales. La pared es lisa e
incolora y normalmente gruesa.
Cuando los parsitos pasan al colon, por lo
general, se enquistan. El quiste, al igual que el de
los parsitos ya mencionados, es la forma infec
ciosa y la ms usual y detectable del parsito en
las heces, donde aparecen en grandes cantidades,
inclusive, cuando las personas son totalmente
asintomticas (vase figura 8.5).
Es el agente causal de la giardiasis adquirida
en humanos.
Ciclo biolgico
Este en la Giardia lamblia es muy sencillo, por
que no necesita un husped intermediario. Su
hbitat se encuentra en el intestino delgado alto,
fundamentalmente el duodeno, aunque tambin,
puede hacerlo en el yeyuno. El quiste penetra

al organismo por va bucal y por la accin del
jugo gstrico pierde la envoltura protectora,
dejando libre el trofozoto en la luz intestinal.
El trofozoto permanece fijo a la superficie del
epitelio intestinal por medio del disco de succin
(ubicado en la parte superior del parsito), se
reproduce por fisin binaria o sexualmente y al
llegar al colon, como las condiciones intestinales
le son desfavorables, se transform a en quiste
para ser expulsado con las heces. El quiste se
adquiere por la ingesta de aguas o alimentos
contaminados o por contaminacin fecal directa
como puede ocurrir, con alguna frecuencia, en
las guarderas para nios.
Trichomonas vaginalis (flagelado
atrial)
Trichomonas vaginalis es un protozoo flage
lado atrial que parasita el tracto urogenital y
es patgeno para la especie humana, aunque,
experimentalmente se ha conseguido que pa-
rasite a algunos animales. En el varn afecta
la prstata, vesculas seminales y uretra, y en la
Introduccin a la parasitologa / 189
mujer el parsito es responsable de 15 a 20% de
las vulvovaginitis clnicamente diagnosticadas.
La temperatura ptima para su crecimiento est
entre 35 y 37 C y el pH entre 5,5 a 6,5 (vase
figura 8.6).
El trofozoto es su nica forma biolgica
y cumple simultneamente las dos funciones:
infecciosa e invasiva. Es el agente causal ms
comn de las tricomoniasis en humanos.
La morfologa del trofozoto es piriforme y
en el extremo superior se observa el citostoma.
El protozoo es extraordinariamente mvil con
movimientos bamboleantes y de rotacin, muy
caractersticos del parsito, adems, es demasia
do sensible a los agentes externos, aunque puede
resistir algunas horas en ambientes hmedos.
Posee un ncleo redondeado o ligeram ente
ovalado, con un nuclolo o cariosoma de dispo
sicin central o subcentral. El citoplasma que
es de aspecto granuloso est surcado por varias
vacuolas y granulaciones siderfilas, adems, es
atravesado en forma bastante manifiesta el axos-
tilo. Tiene cuatro flagelos libres y uno ms que se
fija al borde libre de la membrana ondulante que
190 / Microbiologa bsica para el rea de la salud y afines
es corta y casi nunca sobrepasa el tercio posterior
del parsito; todos los flagelos se originan de un
blefaroplasto.
Se conocen varias especies de las cuales solo
trichomonas vaginalis es patgena y se encuen
tra en el aparato genitourinario de hombres y
mujeres.
Trichomonas hominis se encuentra en el in
testino y trichomonas tenax en la boca asociada
a enfermedades periodontales, pero a ninguna de
las dos se les describe patologia en humanos. Las
tres especies son prcticamente indiferenciables
morfolgicamente.
Tripanosoma cruzi (hemoflagelado)
Este protozoo hemoflagelado, parsito de la
sangre, adopta diferentes formas durante el
desarrollo de su ciclo biolgico. La morfologa
del parsito que esquematiza la figura 8.7, co
rresponde a la forma de trypomastigote donde
se observa un gran blefaroplasto, el ncleo, el
flagelo que limita la membrana ondulante y
presenta abundantes grnulos de volutina.
Es el agente etiolgico de la tripanosomiasis
americana o enfermedad de Chagas (nombres
con los cuales se conoce la patologia en el sur
de Estados Unidos, Mxico, Amrica Central y
Sudamrica). Esta enfermedad se presenta en
muchas zonas del nuevo continente entre los
42 de latitud norte y los 43 de latitud sur. En
Africa se conoce con el nombre de enfermedad
africana del sueo. La transmiten insectos red-
vidos, principalmente los chinches domsticos
que defecan durante o inmediatamente despus
del proceso de alimentacin, esos insectos
pertenecen a los gneros Triatoma, Rhodnius y
Panstrogylus.
Ciclo biolgico
El artrpodo que lo transmite es un insecto
redvido que se conoce con el nombre vulgar
de pito y se infecta cuando pica a una persona
o animal enfermo y succiona de su sangre unas
formas llamadas tripomastigote, que luego en
el tubo digestivo del artrpodo se transforman
en epimastigotes, es decir, formas cortas, que se
dividen por fisin binaria dando lugar a nuevos
epimastigotes o formas largas. Estos epimastigo
tes se transforman, a su vez, en tripomastigotes
metacclicos que son expulsados por las heces
(vase figura 8.8).
Cuando el insecto redvido o pito infectado

pica a un nuevo husped para tomar su sangre y
alimentarse, deposita su contenido intestinal. Las
heces del artrpodo contienen tripomastigotes
metacclicos que penetran en el tejido subcutneo
a travs de la herida causada por la picadura o
por otras heridas prximas, por folculos pilosos,
por la conjuntiva e incluso la piel o las mucosas
sanas. En el sitio de entrada suele presentarse
un nodulo subcutneo llamado chagoma. Desde
esta localizacin llegan a la sangre en la que se
Introduccin a la parasitologa / 191
difunden vehiculizados por leucocitos, linfocitos,
monocitos o simplemente como elementos libres.
Los tripomastigotes no se dividen, pero penetran
en tejidos, especialmente msculo cardiaco y
sistema retculo endotelial y se transforman en
amastigotes que son formaciones intracelulares,
que se dividen por fisin binaria y se convierten
en epimastigotes, los cuales son liberados al
torrente circulatorio donde adoptan la forma de
tripomastigotes (vase figura 8.9).
192 / M icrobiologa bsica para el rea de la salud y afines
Leishmania braziliensis
(hemoflagelado)
Este protozoo es un hemoflagelado y agente
etiolgico de la leishmcmiosis mucocutnea o
nasofarngea, pues, adems de afectar la piel tie
ne preferencia por las mucosas de la nariz, boca y
faringe. El gnero Leishmania est ampliamente
difundido en la naturaleza y las especies que lo
componen son prcticamente indiferenciables
morfolgicamente.
En Sudam rica lo transm iten moscas del
gnero Lutzomya, que se conocen comnmente
con el nombre de mosquito palomilla, tambin
por garrapatas y por contacto hombre-hombre;
en Europa se transmite por moscas del gnero
Phlebotomus.
Sus reservorios principales son los cnidos,
roedores y el propio hombre. La picadura de la
mosca es muy dolorosa y produce una lcera que
crece en superficie y profundidad, generalmente
en cara y extremidades.
Sporozoa o Apicomplexa (esporozoos)
En el grupo Sporozoa o Apicomplexa se encuen
tran los gneros Plasmodium y Toxoplasma, que
son solo dos representantes de este numeroso
grupo de esporozoos caracterizados por ser pa
rsitos obligados e inmviles en estado adulto.
A unque su nom bre sugiere la form acin de
esporos, estos protozoos no lo hacen como es el
caso de las bacterias y los hongos. Si originan
unas estructuras semejantes se conocen como
esporozotos.
Plasmodium
Este gnero incluye ms de 100 especies, cuatro
de las cuales son agentes etiolgicos de la ma
laria o paludismo humano: Plasmodium vivax,
Plasm odium ovale, Plasm odium fa lciparum
y Plasmodium malariae. Todos son parsitos
intracelulares ameboides, caracterstica morfo
lgica que los diferencia de otros esporozoos. Se

transmite al humano con la ayuda de un vector:
el m osquito hem atfago hem bra del gnero
Anophelex infectado.
Se presenta en zonas tropicales y subtropica
les que se localizan a altitudes por debajo de los
1.500 m; sin embargo, los cambios climticos y
los movimientos de las poblaciones pueden hacer
que la enfermedad se expanda.
A parte del vector, la enfermedad tambin
puede transmitirse por causa de transfusiones
sanguneas cuando el donante est enfermo o es
un portador asintomtico. Normalmente el perio
do de incubacin ocurre entre 10 y 15 das, pero
puede ser mayor cuando la infeccin la causan
Plasmodium vivax o Plasmodium malariae.
Los sntomas ms constantes son fiebres muy
Introduccin a la parasitologa / 193
altas y escalofros, que a veces se acompaan de
dolores musculares, de cabeza, vmito, diarrea y
algunos pacientes pueden sufrir alteraciones del
estado de conciencia, si no reciben tratamiento
despus de las crisis febriles.
Ciclo biolgico
El ciclo biolgico es prcticamente igual en las
cuatro especies y presenta dos etapas o fases
bien diferenciadas:
1. Fase asexuada, esquizognica o endge
na, Con multiplicacin en el hospedador verte
brado, para nuestro caso, el hombre. Esta fase es
doble: a) esquizogonia exoeritroctica o tisular,
que se produce en las clulas parenquimatosas
194 / Microbiologa bsica para el rea de la salud y afines

hepticas, y b) esquizogonia eritroctica, que los ooquistes que, posteriormente, se ingieren

tiene lugar en el interior de los hemates. y se localizan en neuronas, retina, miocardio,
2. Fase sexuada, esporognica o exgena. Semsculos y sistema retculo endotelial. Es el res
lleva a cabo en el tubo digestivo de la hembra del ponsable de la toxoplasmosis que tambin puede
mosquito Anophelex (vase figura 8.10). ser congnita posnatal y producirle, si no se
produce el aborto, al recin nacido hidrocefalia,
Toxoplasma gondii calcificaciones intracraneales y coriorretinitis.
Estas importantes secuelas corresponden a la
Este parsito Toxoplasma gondii es un esporozoo triada de Sabin. La infeccin congnita solo
intracelular que puede parasitar varias especies se produce cuando las madres no inmunes se
animales, incluyendo al hombre. Son parsitos infectan durante el embarazo y es la causa de
naturales de gatos, felinos y algunos pjaros, en mortinato (beb que nace muerto) que general
el intestino delgado de estos animales se mul mente ocurre cuando la madre se infecta en el
tiplican y por medio de las heces se expulsan primer trimestre del embarazo.

Helmintos
L o s helmintos son gusanos o vermes de cuerpos
redondos o planos, pluricelulares, invertebrados, sin
apndices articulados que carecen de aparato circula
torio, rganos de respiracin y que pueden parasitar
al hombre. La mayor parte de su ciclo vital ocurre
en condiciones de anaerobiosis. El trmino helminto
viene del griego helmint que significa gusano.
De los helmintos parsitos del hombre se
estudian dos grandes phylum:
Nematelmintos {phylum Nematoda)
Son gusanos redondos no segmentados y con
sexos separados, conocidos popularmente como
lombrices. Los ms comunes son: Ascaris lum-
bricoides, Necator americanus (uncinaria), Ente
robius vermicularis (oxiuro), Trichuris trichura,
Strongiloides stercoralis y Ancylostoma duode-
nale. En muchas ocasiones se les puede apreciar
vivos en las heces con tamaos tan diferentes, que
varan desde una hebra de hilo hasta el dimetro
de una lombriz de tierra comn. Posteriormente
se describen las tres primeras especies. Segn su
nmero y tamao causan hiporexia (disminucin
del apetito) o anorexia (falta o prdida del ape
tito), palidez causada por anemia, sensacin de
embalonamiento o entamboramiento (sensa
cin de estmago hinchado o distendido), mala
absorcin de nutrientes e incluso dolor abdominal
que puede llegar a semejar la sintomatologa de
un abdomen agudo.
Platelmintos (phylum Platyhelminth.es)
Se dividen en dos clases de inters mdico: la
clase Trematoda que agrupa a los tremtodos
8B
y la clase Cestoda o Cestoidea que agrupa los
cestodos o tenias.
Clase Trematoda
Son gusanos planos no segmentados, forma de
hoja y pueden parasitar el aparato digestivo, los
vasos sanguneos mesentricos, el cerebro, el
aparto urinario y otros rganos. Casi todos los
gusanos agrupados en esta clase son hermafro-
ditas y se reproducen por autofecundacin. Uno
de los representantes ms importante es Fasciola
heptica, conocida como la lombriz del hgado
de la oveja. Encontrar estas lombrices adultas en
humanos es rarsimo, pero son muy abundantes
en ovejas, terneras y otros herbvoros, a los
cuales les penetran el intestino, luego pasan al
hgado desde la cavidad abdominal y maduran
en los conductos biliares.
Clase Cestoda o Cestoidea
Son gusanos planos, generalmente segmentados,
hermafroditas, conocidos popularmente con el
nombre de tenias o cestodos. Las ms comunes
son Taenia solium (tenia del cerdo); Taenia sagi-
nata (tenia de la vaca); Hymenolepis nana (tenia
de la rata) y Equinococcus granulosum (tenia
del perro). Solo se describen las dos primeras
especies. Estos gusanos (gusanos acintados) se
caracterizan por su forma plana y, en algunos
casos, cuando han alcanzado su estado adulto,
viven en el hombre pero la larva debe crecer en
un animal, de esta manera, la infeccin ocurre
por contaminacin con heces de animales, como
sucede con la tenia del perro y de la rata o por
196 / Microbiologa bsica para el rea de la salud y afines
ingesta de carnes eradas o mal cocidas (send
eradas) como la tenia del cerdo y de la vaca. La
mayor complicacin de la infeccin por estos
gusanos se presenta cuando es la larva la que se
desarrolla en el hombre, como puede suceder con
la larva de la tenia del cerdo llamada Cisticercus
cellulosae, la cual puede localizarse en el cerebro
y causar la cisticercosis. La larva del perro o de
la rata puede localizarse en los pulmones o en
el hgado y causar el quiste hidatdico (quiste
heptico que contiene las larvas de la tenia). En
los dos casos se presenta el riesgo de muerte
y el tratamiento debe ser intrahospitalario con
posibilidad de intervenir quirrgicamente al
paciente.
Nematoda o nematelmintos
Ascaris lumbricoides
Este gusano fue descrito por Linneo en 1758.
Es el nematodo intestinal de mayor tamao
que afecta al hombre, es de color blanco o
rosado y los extremos son redondeados. Los
gusanos producen la ascariasis o ascaridiasis.
La ascariasis es una geohelmintiasis (grupo de
afecciones parasitarias relacionadas con las
condiciones del ambiente, es decir, que son
helmintiasis transmitida por el suelo, ya que
los huevos deben permanecer algn tiempo en
la tierra hasta que embrionen alcanzando as su
forma infecciosa), de distribucin mundial que
se presenta en climas hmedos, tropicales o
templados. El parsito se conoce desde la poca
de los romanos, quienes lo confundan con las
lombrices de la tierra. Estn libres en la luz
intestinal del intestino delgado y se alimentan
del material alimenticio digerido. La hembra
pone ms de 20.000 huevos por da, que son
expulsados con las heces, donde forman em
briones en presencia de humedad y temperatura
favorable, en un periodo de dos a tres das. En
estado adulto el gusano hembra mide de 25 a 35
cm de longitud y en ocasiones puede alcanzar
ms de 50 cm, mientras que los machos son,
relativamente, pequeos, en general miden 15
20 cm, en pocas ocasiones alcanzan los 30 cm
(vase figura 8.11).
Ciclo biolgico. Su ciclo biolgico se inicia
con la expulsin de huevos inmaduros con las he
ces y su diseminacin en el suelo. En buenas con
diciones ambientales de temperatura, humedad,
calidad de suelo y sombra, en 18 das alcanzan
el estado de embrin. Al ingerirse los huevos en
embrin llegan al intestino delgado donde eclo-
sionan y las larvas penetran la mucosa. Luego, por
va venosa alcanzan la circulacin portal y van a
los pulmones donde sufren dos mudas. Posterior
mente, ascienden por el rbol respiratorio hasta
la faringe donde son deglutidas y vuelven a su
hbitat, el intestino delgado, donde sufren otra
muda y se convierten en gusano adulto. El par-

sito adulto se mantiene en movimiento constante
para no ser expulsado por las ondas peristlticas.
Su longevidad es de doce a veinte meses.
Las hembras fecundadas inician la postu
ra entre ocho y doce semanas despus de la
infeccin. Sus ovarios pueden contener hasta
27.000.000 de huevos y se calcula que un gusano
hembra puede producir unos 220.000 huevos
al da. Su sistema reproductor est altamente
desarrollado y adaptado para producir grandes
cantidades de huevos, debido a que su posibili
dad de sobrevivir es menor a 1/1.000.000, aun
en medios ambientes favorables.
Cuando el nmero de gusanos es muy alto, es
decir, que el individuo tenga en su intestino del
gado varias decenas de parsitos adultos, puede
provocar una obstruccin del intestino al formar
una especie de bola u ovillo de gusanos, yeyuno. Se fijan en la mucosa intestinal mediante
que es la responsable de producir la oclusin,
especialmente en los nios. Los infantes que
presentan este tipo de oclusin intestinal, en
general sufren fiebre y malestar general.
Tambin es habitual una distensin del
estmago con dolor a la palpacin. Este signo
ayuda a nombrar comnmente esta enfermedad
con la denominacin de sndrome del nio flaco
y barrign.
Epidemiologa. Parasitosis que afecta a 20%
de la poblacin mundial y a 45% del continente
americano. Los nios preescolares son los ms
afectados. Presenta una distribucin heterognea
e impredecible. Se observa principalmente en cli
mas templados o clidos (22 a 33 C), ambientes
hmedos, lluviosos y suelos arcillosos. La con
taminacin fecal del suelo tiene relacin directa
con una disposicin inadecuada de las excretas,
la calidad del agua y el uso del excremento
humano como fertilizante, tambin favorecen
su diseminacin.
Necator americanus
Infeccin intestinal conocida como uncinariasis
o anemia tropical producida por esta especie de
nematodos (tambin se conoce como uncinaria)
que ocasionan anemia microctica e hipocrmi-
ca, se acompaa de sintomatologa digestiva no
Introduccin a la parasitologa / 197
caracterstica. Este gusano es una las especies
que con mayor frecuencia causan enfermedad
al hombre. Los gusanos machos adultos miden
entre 5 y 12 mm de longitud y la hembra pue
de alcanzar hasta 1 cm. El trmino uncinaria
se refiere a la curvatura que posee en su parte
anterior a manera de gancho, donde la cpsula
bucal est provista de unas placas o lminas
cortantes. En la hembra el extremo posterior
termina en punta y en el macho presenta una di
latacin en forma de campana, que corresponde
a la bolsa copulatriz. Los gusanos son de color
blanquecino y poseen un esfago musculoso
que les permite la succin vigorosa del material
alimenticio (vase figura 8.12).
Los vermes o gusanos adultos viven en el
intestino delgado del hombre, sobre todo en el
su cpsula bucal con sus placas cortantes, con
las cuales destruyen el epitelio, ingieren tejidos
y succionan sangre de los capilares. Cuando los
gusanos se desprenden de un sitio y se fijan en
otro punto del intestino, dejan ulceraciones que
continan sangrando por tiempo prolongado, de
bido a la presencia de sustancias anticoagulantes.
Histolgicamente se encuentra inflamacin de la
mucosa, enteritis y sndrome de malabsorcin
intestinal.
Ciclo biolgico. Su ciclo biolgico se inicia
cuando las hembras fecundadas colocan sus
huevos en la luz del intestino, aproximadamente
10.000 a 20.000 huevos por da, los cuales salen
con las heces y en un medio ambiente apropiado,
despus de un periodo de veinticuatro horas,
ocurre la eclosin de las larvas, que despus de
dos mudas alcanzan una longitud de 450 jam
y en una semana ms se convierten en larvas
enquistadas, que son la forma infectante para
el hombre. Al ponerse en contacto con la piel
o mucosa farngea, la penetran activamente.
Necator americanus se adquiere solamente por
va cutnea. Al momento de la penetracin, las
larvas se despojan de una cutcula protectora
y llegan a los vasos sanguneos o linfticos y
de ah a la circulacin general. El sitio de en
trada ms frecuente es la piel de los espacios
interdigitales de pies o manos y en esa zona se
198 / Microbiologa bsica para el rea de la salud y afines
observan signos de dermatitis, manifestada por
edema eritematoso acompaado de una erupcin
papular o vesicular pruriginosa hasta por dos
semanas. Esta sintomatologa se conoce con el
nombre comn de candelilla. Al llegar las larvas
a los capilares pulmonares, rompen su pared,
pasan a los alvolos, donde causan pequeas
hemorragias e infiltrados celulares. Luego, as
cienden por los bronquios, trquea, faringe y son
deglutidos hasta alcanzar su hbitat definitivo (el
intestino delgado, principalmente el yeyuno),
donde requieren de 3 a 4 semanas para llegar al
estado adulto. Estos gusanos pueden sobrevivir
en el intestino de 7 a 10 aos.
La hemorragia intestinal y el consumo de san
gre por cada parsito se calcula en 0,5 mi por da.
Epidemiologa. El hombre es la nica fuente
de infeccin humana. En las zonas tropicales la
interaccin de tres factores: ambiente, agente
y hospedero favorecen la permanencia de los
huevos y larvas. Esta situacin es ms frecuente
en el campo, porque la vegetacin abundante
favorecida por la lluvia permite la humedad,
sombra y riqueza de residuos orgnicos, que
resultan apropiados para la evolucin de los
huevos y larvas.
En zonas endmicas, la poblacin infantil
es la ms susceptible para contraer la infeccin
y el hbito de caminar descalzo incrementa la
posibilidad de infectarse. La desnutricin y
anemia por deficiencia de hierro que prevalecen
en las zonas endmicas agravan los efectos de
la enfermedad, lo que eleva significativamente
su letalidad.
Enterobius vermicularis
A este gusano tambin se le conoce con el nom
bre de oxiuro y es el responsable de la oxiuriasis.
Popularmente se le denomina lombriz de los
nios. En nuestro medio es el parsito ms co
mn, tiene un color blanco nacarado, el macho
mide 2 a 5 mm de longitud, lo que dificulta su
observacin y la hembra puede alcanzar 1 cm y
en ocasiones un poco ms.
La hembra adulta sale generalmente de
noche, hasta las mrgenes del ano y pone sus
huevos en cantidad de 10.000 o ms por noche.
La persona parasitada sufre un intenso prurito
anal (escozor anal) que la obliga a rascarse, as
logra que los huevos penetren en las uas y las
cutculas, y posteriormente se produzca la au-
toinfeccin por el mecanismo ano-mano-boca.
Los huevos que quedan en la ropa, sabanas, etc.,
pueden producir infeccin porque all logran
permanecer vitales hasta por dos semanas.

Los sntomas que se le atribuyen a Entero
bius vermicularis son numerosos y aparte del
prurito anal se mencionan: la falta de apetito,
nerviosismo diurno, mal dormir y generalmente
con los ojos entreabiertos y el rechinar de dientes
causado por bruxismo acentuado. En las nias
pueden invadir la vagina al abandonar el recto y
producir irritacin local.
Cuando la hembra est a punto de poner los
huevos, migra hacia el final del tubo intestinal
para salir por el ano y depositar los huevos. Este
hecho es la causa del intenso prurito local que
puede perturbar el sueo de los nios o adultos,
parasitados por estos gusanos.
Tambin es cierto que para efectos prcticos
Enterobius vermicularis puede considerarse
como un comensal, excepto en aquellos indi
viduos que por causa de hipersensibilidad a las
secreciones y excreciones del gusano se produce
prurito rectal (vase figura 8.13).
Epidemiologa. Es una helmintiasis de carcter
cosmopolita, es decir, de distribucin mundial.
Tiempo atrs se hablaba de que entre 5 y 15%
de la poblacin del planeta estaba infectada por
este parsito.
En Colombia existen regiones donde la inci
dencia es superior a 60% y otras donde la inci
dencia de este parsito est por debajo de 10%.
La infeccin por Enterobius vermicularis u oxiuro
se caracteriza por la presencia tanto en el mbito
rural como urbano. Se observa con ms frecuencia
Introduccin a la parasitologa / 199
en nios en edad escolar y en grupos familiares
numerosos debido a su alta contagiosidad.
Platyhelminthes o platelmintos
En el phylum Platyhelminthes se encuentra el
grupo de los cestodos y en ste se ubica un grupo
llamado Taenia o simplemente tenia, compuesto
por gusanos planos, de cuerpos segmentados y
desprovistos de aparato digestivo, toman los
materiales nutritivos a travs de la cutcula que
rodea el cuerpo del gusano y presenta gran va
riedad de vellosidades o estilaciones submicros-
cpicas, por lo cual se aumenta enormemente la
superficie de contacto con el exterior. Realizan
pinocitosis , son hermafroditas y en el mismo
segmento se encuentran los rganos genitales
masculinos y femeninos. Se alimentan directa
mente de los nutrientes existentes en el intestino
del hospedero.
Otros grupos de cestodos tambin parasitan
al hombre, pero en esta obra solo se trata el grupo
Taenia. Se tienen datos que reportan aproxi
madamente 350 especies de tenias conocidas y
algunas hasta de 23 m de longitud.
Taenia solium
Este gusano se conoce como tenia armada o tenia
solitaria, en estado adulto mide de 2 a 8 m y puede
poseer hasta 1.000 segmentos o anillos.
200 / Microbiologa bsica para el rea de la salud y afines
Su hbitat es la posicin proximal del yeyu
no. Su cabeza o esclex est provista de cuatro
ventosas y un rostelo con una doble corona de
ganchos, los anillos o segmentos se denominan
progltides y en ellos estn los rganos sexua
les masculinos y femeninos, con un tero poco
ramificado. Cada progltide puede producir de
30.000 a 50.000 huevos.
La forma larvaria se denomina Cisticercus
cellulosae, comnmente mencionado como
cisticerco, es un quiste translcido con un esc
lex invaginado provisto de rostelo con ganchos,
el cual produce la cisticercosis. El hospedador
intermediario es el cerdo y excepcionalmente el
hombre, pero este es el nico hospedero defini
tivo (vase figura 8.14).
El gusano llamado tambin tenia del cerdo,
causa dos tipos de enfermedades al hombre,
dependiendo de la etapa en que se encuentre el
parsito cuando se ingiere: si lo que se ingiere son
los cisticercos contenidos en la carne de cerdo
mal cocida, se adquiere una teniasis intestinal
que puede producir dolor abdominal, aumento del
apetito, prdida notoria de peso y debilidad. Los
pacientes pueden referir que han observado los
progltides y huevecillos en su excremento.
La cisticercosis, que es la segunda enfermedad
producida por Taenia solium, se adquiere al inge
rir los huevecillos del parsito. Esta enfermedad
produce invalidez y puede tener un desenlace
fatal. Las formas ms graves de cisticercosis son
la ocular, cerebral, cardiaca y, desde luego, la
neurolgica (sistema nervioso central: SNC).
La cisticercosis cerebral se caracteriza por
manifestaciones de hipertensin intracraneal,
cefalea, alteraciones de la visin, vmitos en
proyectil y crisis convulsivas.
El tratamiento quirrgico de la cisticercosis
de SNC vara segn la localizacin de los par
sitos. En trminos generales cuando el neuroci-
rujano manipula los parsitos pueden ocasionar
cuadros agudos de hipertensin intracraneal
posoperatoria que con frecuencia ocasionan la
muerte del paciente.
La teniasis intestinal se adquiere al ingerir
carne, chorizo o longaniza de cerdo mal cocidos
o crudos con cisticercos viables, a los cuales, por
accin del pH cido y las sales biliares, se induce
la evaginacin del esclex y por medio de sus
ganchos (rostelo) se fija a la mucosa del yeyu
no, desarrollndose la tenia de 5 a 10 semanas
despus de la ingesta.

Taenia saginata
Es la tenia del ganado vacuno y alcanza la madu
rez sexual solo en el hombre que es el hospedero
definitivo. La infeccin se produce en personas
que han consumido carne de res cruda o mal
cocida, que contiene los cisticercos. Infeccin
habitualmente asintomtica, pero puede mani
festarse con dolor abdominal, prdida de peso,
aumento del apetito y expulsin de progltides
en las heces
Tambin se conoce como tenia inerme y
en el estado adulto mide de 4 a 12 m y llega
a poseer hasta 2.000 anillos o progltides. Se
instala preferentemente en el duodeno y pri
mera porcin del eon, despus en la luz del
intestino evoluciona al estado de tenia adulta.
Su esclex posee cuatro ventosas elpticas y
carece de rostelo y ganchos.
Sus progltides son ms largas que anchas
y contienen los rganos masculino y femenino
con un tero muy ramificado.
Cada segmento puede poseer ms de 10.000
huevos, idnticos a los de Taenia solium. Su
estado larvario es un cisticerco llamado Cisti-
cercus bovis cuyo esclex no posee rostelo ni
ganchos y se enquista en el tejido conjuntivo
intersticial y en el corazn del ganado vacuno.
Introduccin a la parasitologa / 201
El hospedero intermediario es un bovino y casi
nunca el hombre (vase figura 8.15).
Introduccin a la parasitologa:
sumario
Los parsitos, como muchos animales superio
res, deben competir por un hbitat, el alimento
y la supervivencia. Para lograr esa meta desarro
llan relaciones simbiticas como: mutualismo,
comensalismo y parasitismo. No todas estas
relaciones son positivas o benficas para el
hospedador, pero resultan fundamentales para
el parsito asegurar su subsistencia en el hbitat
elegido.
Protozoos
El trmino protozoo viene de los vocablos grie
gos protozoos y zoom, que significa primer
animal", son organismos eucariticos que existen
como clulas aisladas y que pueden diferenciarse
de otros eucariticos por su capacidad de despla
zarse durante algn estadio de su ciclo biolgico
y por su falta de pared celular. El estudio de los
protozoos es la protozoologa.
Existen ms de 64.000 especies conocidas de
protozoos: aproximadamente 32.000 son fsiles,
202 / Microbiologa bsica para el rea de la salud y afines
22.000 son formas de vida libre y 10.000 son
parsitos. De estos ltimos solo unas cuantas
especies causan enfermedades a los seres hu-
manos.
La locomocin es un importante criterio para
diferenciar la clase de protozoos: las amebas
se desplazan por seudpodos; los ciliados por
medio de delicados pelos o cilios; los flagelados
son propulsados por flagelos generalmente loca
lizados a un extremo de la clula y en ocasiones
por membranas ondulantes y los esporozoos se
desplazan deslizndose al flexionar sus cuer
pos, ya que no poseen organelas externas de
locomocin.
Helmintos
Los helmintos o gusanos son metazoos de si
metra bilateral y envoltura musculocutnea, sin
apndices articulados que se dividen en gusanos
de cuerpos aplanados o platelmintos como el
grupo Taenia y de cuerpo cilindrico o nematel-
mintos como los parsitos de los gneros As caris
y Enterobius. Sus formas larvarias o adultas
pueden parasitar al hombre y producir numerosas
enfermedades infecciosas parasitarias.
Preguntas para autocontrol del
aprendizaje
1. Por qu se llama protozoos a este grupo
de microorganismos?
2. Desde el punto de vista morfolgico, cu
les son las diferencias entre un protozoo y
un hongo?
3. Compare los modos de reproduccin
asexual de los protozoos con los de las
bacterias y levaduras.
4. Describa varias maneras de obtener alimen
to por parte de los protozoos.
5. Compare y contraste los modos, generales,
de reproduccin de los cuatro principales
grupos de protozoos.
6. Son todos los protozoos patgenos para
los seres humanos?, explique.
7. Haga un cuadro en el cual asocie las
principales clases de protozoos, tenga en
cuenta: clase y nombre comn, modo de
locomocin, modo de reproduccin y otras
caractersticas, d ejemplos.
8. Haga un paralelo entre las clases Sarcodina
y Ciliophora.
9. Hable sobre las caractersticas de los parsi
tos pertenecientes a la clase Mastigophora.
Clasifique segn su hbitat y esquematice
un representante de cada gnero y describa
sus estructuras.
10. Haga un paralelo entre protozoos y hel
mintos.
11. Compare y analice las caractersticas de los
nematelmintos y platelmintos, dando varios
ejemplos de cada uno, analice morfologa,
fisiologa y ciclo biolgico.
12. Realice un paralelo entre helmintos y pro
tozoos.
13. Explique en forma resumida el ciclo bio
lgico de los siguientes gusanos redondos:
Ascaris lumbricoides, Necator americanus
y Enterobius vermicularis.
14, De Taenia solium y Taenia saginata diga
cul es la funcin de las siguientes estruc
turas: esclex, rostelo y progltide.

Control de microorganismos
D u ra n te toda nuestra vida estamos en con
tacto con microorganismos. Muchas clases de
microbios colonizan las superficies corporales,
el intestino y los orificios que estn en contacto
con el ambiente. Verbigracia, la biota bacteriana
normal (tambin llamada flora) de la parte baja
del intestino es tan abundante, que casi la mitad
del peso seco de la materia fecal la componen
bacterias. La salud y el bienestar estn influidos
por la presencia o ausencia de microorganismos
en el ambiente. En otras palabras, el bienestar y
la prosperidad del hombre dependen en gran par
te de su dominio sobre los microorganismos.
El crecimiento microbiano se lleva a cabo
exitosamente, si se cumplen dos factores deter
minantes: 1) condiciones ambientales favorables
como la temperatura, la-humedad, la presin
osmtica y el pH, entre otras; 2) medio de cultivo
apropiado, es decir, que los microorganismos
puedan obtener los nutrientes necesarios para
su crecimiento y desarrollo.
Muchas prcticas de la vida diaria como:
purificacin del agua, pasteurizacin y conserva
cin de alimentos, tienen como fin primordial el
control de los microorganismos o grmenes. El
trmino germen en microbiologa se utiliza para
referirse a cualquier tipo de microorganismo,
especialmente, los patgenos. De esta manera
es frecuente encontrar escritos que rezan: ...
entre los grmenes ms peligrosos para la salud
de los humanos se encuentran....
Importancia del control
Los motivos principales para controlar los micro
organismos se resumen de la siguiente manera:
9
1. Prevenir la contaminacin, para evitar la
proliferacin de microorganismos peijudiciales.
2. Prevenir la transmisin e impedir la trans
misin de la infeccin y la enfermedad.
3. Prevenir el deterioro, para evitar la des
truccin o deterioro de materiales por micro
organismos.
Los microorganismos se eliminan o se inhiben
por medio de agentes fsicos, procedimientos
fsicos o por agentes qumicos, agentes quimio-
teraputicos como los antibiticos y las sulfo-
namidas.
Terminologa bsica y su definicin
Por decisin judicial del Pur Food and Drug
Act se estableci que el lenguaje que se utiliza
en las tcnicas de control de microorganismos
es para darle el significado comn convenido,
para aquellos a quien va dirigido. Por tanto, el
productor y el consumidor deben entender, do
minar y manejar perfectamente la terminologa
referente al control de microorganismos.
Antimicrobiano. Se refiere a cualquier agente
que interfiera con el crecimiento y la actividad
de los microorganismos. Si se refiere a grupos
de microorganismos determinados se emplean
los trminos antibacteriano o antifngico, entre
otros.
Bactericida. Es un agente que mata las bac
terias. De manera similar los trminos fungicida,
virucida y esporicida se refieren a agentes que
eliminan, respectivamente, hongos, virus y
esporas.
Bacteriosttico. Es un agente que produce la
supresin del desarrollo de las bacterias, solamen-
204 / M icrobiologa bsica para el rea de la salud y afines
te mientras el agente est en contacto con ellas. De
la misma manera, los fungistticos se refieren a la
supresin del desarrollo de los hongos.
Los agentes que tienen en comn la capaci
dad de inhibir el desarrollo de los microorganis
mos se designan colectivamente con el nombre
de microbiostticos.
Antisptico. Se refiere a toda sustancia que
se opone a la sepsis, es decir, impide el desa
rrollo o accin de los microorganismos, ya sea
destruyndolos o inhibiendo su crecimiento y
actividad. Generalmente, alude a sustancias que
pueden ser aplicadas al cuerpo.
Desinfectante. Es un agente, por lo general
qumico, capaz de matar las formas en desarrollo,
pero no necesariamente las formas resistentes o
esporas, de los microorganismos patgenos. El
trmino se aplica de forma comn a las sustan
cias que se utilizan en la desinfeccin de objetos
inanimados. Por consiguiente, desinfeccin es
el proceso de destruir, prcticamente, todos los
agentes patgenos o infecciosos de objetos o
superficies inanimadas. Se debe tener en cuenta
que este proceso no destruye todos los microor
ganismos de forma indiscriminada. Existe otro
procedimiento muy utilizado en cuanto al control
de microorganismos: la descontaminacin, la
cual, se describe como el tratamiento que se le
hace a un objeto o superficie inanimada con el fin
de poder manipularlo sin peligro para la salud.
Germicida o microbicida. Es un agente que
mata las formas en desarrollo, pero no forzosa
mente las esporas. En la prctica un germicida
es lo mismo que un desinfectante.
Saneamiento. Consiste en reducir la pobla
cin bacteriana por medio de un agente, segn
los requerimientos de salud pblica. Por lo re
gular es un agente qumico que mata 99,9% de
las bacterias en crecimiento. Los agentes para el
saneamiento se aplican casi siempre a objetos in
animados: equipos, utensilios en lecheras y plantas
de alimentos, vajillas y cubiertos en los restauran
tes. La desinfeccin produce saneamiento, pero
ste no necesariamente supone desinfeccin.
Agente teraputico. Se refiere a los agentes
antimicrobianos que se utilizan, especficamente.
en el tratamiento de las infecciones causadas por
algn tipo de microorganismo.
Esterilizacin, Es el proceso con el cual se
destruye toda forma de vida microbiana. Un
objeto esterilizado, en el sentido microbiol-
gico, est libre de microorganismos vivos. Los
trminos estril, esterilizar y esterilizacin se
refieren a la ausencia o destruccin completa
de los microorganismos y no se usan en sentido
relativo. Una sustancia o un objeto estn estriles
o no lo estn, pero de ninguna manera se puede
aceptar que se mencionen como semiestriles o
casi estriles.
Condiciones para la accin
de los agentes antimicrobianos
El trmino muerte se define en microbiologa
como la prdida irreversible de la capacidad
de reproduccin. Los microorganismos viables
tienen la capacidad de multiplicarse, en cambio,
los muertos no se multiplican ni se desarrollan.
Muchas de las caractersticas biolgicas de los
microorganismos influyen en la calificacin de
estos como muertos o inactivados por un agente
qumico o fsico.
No es posible elegir un procedimiento que
desinfecte o esterilice todo tipo de materiales.
Es necesario valorar cada situacin por separado
para seleccionar el mtodo que la investigacin
y la experiencia han demostrado que produce un
resultado ptimo. Se deben tener muy presentes
los siguientes factores:
Tipo o clase de microorganismo
Las distintas especies de microorganismos
difieren en su susceptibilidad a los diferentes
agentes qumicos y fsicos que se utilizan para
controlarlas. Las bacterias jvenes son ms vul
nerables porque las viejas tienen menor actividad
metablica. Las clulas vegetativas en desarrollo
son mucho ms susceptibles que las especies
esporuladas, por consiguiente, las esporas son
muy resistentes, pues son las formas orgnicas
capaces de sobrevivir en condiciones adversas.

Naturaleza del medio
Las propiedades qumicas o fsicas del medio
en que viven los microorganismos tienen gran
influencia en la velocidad y eficacia de la des
truccin bacteriana. Por ejemplo, el calor es ms
eficaz en un medio cido que en uno alcalino.
La consistencia del material, acuoso o viscoso,
influye marcadamente en la penetracin del
agente. Las concentraciones altas de carbohi
dratos aumentan, por lo regular, la resistencia
trmica de los microorganismos.
La presencia de materia orgnica extraa
reduce notablemente la eficacia de un agente
qumico antibacteriano, porque lo inactiva pro
tegiendo de este modo al microorganismo. La
materia orgnica aadida a una sustancia des
infectante conduce a los siguientes resultados:
1) combinacin del desinfectante con la materia
orgnica para formar un producto que no es
microbicida; 2) combinacin del desinfectante
con la materia orgnica para formar un precipi
tado, porque de esta forma se aparta al agente
desinfectante de su posible combinacin con el
microorganismo, y 3) acumulacin de materia
orgnica sobre la superficie celular, con lo cual
se forma una capa que impide el contacto entre
desinfectante y microorganismo.
Tiempo de exposicin
La poblacin de microorganismos no muere ins
tantneamente. As, cuanto ms prolongado es el
tiempo de exposicin o contacto, entre el agente
y los microorganismos, mayor es el nmero de
microorganismos destruidos.
Nmero de microorganismos
A mayor poblacin bacteriana, mayor debe ser
el tiempo de contacto entre el agente y los mi
croorganismos para destruirlos.
Intensidad y naturaleza del agente fsico
A mayor intensidad del agente fsico utilizado,
mayor destruccin de los microorganismos, por
Control de microorganismos / 205
ejemplo: ms calor, ms radiacin, mayor con
centracin, entre otros, ms rpidamente sern
destruidos los microorganismos.
Temperatura aplicada a un agente
qumico
El aumento de la temperatura a un agente qumi
co aumenta la velocidad de muerte de las clulas
bacterianas y, por consiguiente, potencializa su
poder microbicida aunque la concentracin del
agente qumico permanezca constante.
Concentracin del agente qumico
El aumento de la concentracin del agente qumi
co aumenta la velocidad de muerte de las clulas
bacterianas y, por consiguiente, se aumenta su
poder microbicida aunque la temperatura, a la
cual se utiliza el agente qumico, se mantenga
constante.
Mecanismos de accin de los agentes
antimicrobianos
Los mecanismos de accin, ms comunes, de
los agentes antimicrobianos son: 1) dao de la
pared celular; 2) alteracin de la permeabilidad
de la membrana citoplasmtica; 3) alteracin de
la naturaleza coloidal del citoplasma; 4) inhi
bicin de la accin enzimtica; 5) formacin de
antimetabolitos, y 6) inhibicin de la sntesis de
cidos nucleicos.
Dao de la pared celular
Las paredes de algunas bacterias Gram positivas
son atacadas por la enzima lisozima que se en
cuentra en las lgrimas, leucocitos, secreciones
mucosas y otras fuentes naturales. Las enzimas
producidas por varias especies bacterianas,
tambin son capaces de degradar la estructura
de la pared celular de otras especies. A la des
integracin de la pared celular le sigue la lisis
de la bacteria.
Algunos agentes inhiben la formacin de los
componentes de la pared celular en un cultivo de
206 / M icrobiologa bsica para el rea de la salud y afines
bacterias en desarrollo y propician la formacin
de protoplastos. Los protoplastos son suscep
tibles a la lisis, a menos que se les provea de
condiciones ambientales especiales. El efecto
antimicrobiano de la penicilina se atribuye a la
inhibicin de la sntesis de la pared celular.
Alteracin de la permeabilidad
de la membrana citoplasmtica
La membrana citoplasmtica preserva la inte
gridad de los constituyentes celulares y tiene a
su cargo el transporte selectivo de nutrientes al
interior de la clula bacteriana. Del dao a esta
membrana resulta una inhibicin del desarrollo o
la muerte celular. La actividad antimicrobiana de
los compuestos fenlicos, detergentes sintticos,
jabones y compuestos de amonio cuaternario
anulan la permeabilidad selectiva de la mem
brana y permiten la salida de los constituyentes
celulares.
La membrana celular, que tiene varias capas,
es el asiento de diversas enzimas y su alteracin
afecta adversamente la funcin de estas.
Alteracin de la naturaleza coloidal
del citoplasma
La viabilidad de la clula bacteriana est con
dicionada la naturaleza coloidal del citoplasma.
Toda situacin o sustancia que altere este estado,
bien sea por desnaturalizacin o coagulacin,
daa irreparablemente la bacteria.
Las altas temperaturas y altas concentracio
nes de agentes qumicos cumplen esta funcin,
porque producen un dao irreversible de los
componentes citoplasmticos vitales, como son
las molculas de protenas y cidos nucleicos.
Inhibicin de la accin enzimtica
Cada una de las numerosas enzimas que hay en
una clula es un blanco potencial para la accin
de un inhibidor. La disminucin de las reaccio
nes que suministran energa es particularmente
daina. Muchos agentes afectan enzimas que
son claves en sistemas tan importantes como el
glucoltico, el ciclo del cido ctrico y el sistema
de citocromos. Por ejemplo:
1. Cianuro (CN~). Es una sal del cido cian
hdrico, muy txica, que inhibe el citocromo
oxidasa de la cadena de transporte electrnico, y
provoca la muerte en pocos minutos al organismo
envenenado.
2. Flor. Impide la gluclisis porque inhibe
la accin de la enzima enolasa e impide la for
macin del fosfoenolpiruvato, por consiguiente,
tampoco se obtiene el producto final de la glu
clisis: el metabolito esencial piruvato o cido
pirvico.
3. Compuestos arsenicales trivalentes (arsni
co inorgnico). Estos son compuestos derivados
del arsnico. Muchos compuestos que poseen
arsnico se utilizan como pesticidas, herbicidas
y aditivos alimentarios. Se caracterizan porque
estos venenos bloquean el ciclo del cido c
trico.
4. Dinitrofenol. Es una sustancia liposoluble
que desacopla las fosforilaciones oxidativas,
induce la formacin de poros en la membrana
y destruye la fuerza motriz de los protones y su
capacidad para producir la sntesis de ATP.
5. Agentes oxidantes fu ertes. Sustancias
como los halgenos y el perxido de hidrgeno
(H O ) pueden daar los constituyentes celulares,
impidindoles efectuar sus funciones metabli-
cas normales.
As, por ejemplo, la actividad catalizadora de
muchas enzimas depende de uno de sus compo
nentes, un grupo sulfidrilo (-SH), en este caso
un agente oxidante como el oxgeno molecular
(O j puede alterar esta disposicin qumica e
inactivar las enzimas (vase figura 9.1).
La inactivacin de ciertas enzimas se produ
ce cuando estas se unen a iones metlicos como
cobre, plata y mercurio. En la figura 9.2 se obser
va que el efecto es sobre el grupo sulfidrilo.
Formacin de antimetabolitos
En algunos casos, cuando ocurre inhibicin,
la lesin inicial es una interferencia con una
biosntesis especfica. Un ejemplo clsico es el
bloqueo de la sntesis del cido flico (vitamina)

por la accin selectiva de la sulfanilamida, que
es la sulfamida ms simple.
Uno de los componentes del cido flico es
el cido p-aminobenzoico (PABA), el precursor
para la sntesis del cido flico y cuya estructura
qumica es tan similar a la estructura de la sul
fanilamida que sta puede entrar en la reaccin
y ocupar el lugar del PABA. De esa manera,
bloquea la sntesis del constituyente celular
esencial: el cido flico.
Este mecanismo de accin es un claro ejem
plo de inhibicin competitiva entre un metabolito
esencial: cido PABA y un anlogo metablico:
la sulfonilamida, porque esta es un anlogo del
cido p-aminobenzoico o cido PABA (vase
figura 9.3).
Un agente que bloquee la accin enzimtica
se considera bacteriosttico, porque cuando cesa
Control de microorganismos / 207
la accin del agente, la actividad enzimtica se
recupera.
Inhibicin de la sntesis de cidos
nucleicos
Existen sustancias qumicas sintticas y otras
naturales que son poderosos inhibidores de la
sntesis de ADN y ARN. Se encuentran dos
categoras de sustancias que inhiben la sntesis
de cidos nucleicos:
1. Compuestos que interfieren con la forma
cin de los bloques estructurales de los cidos
nucleicos, los nucletidos purina y pirimidina.
2. Compuestos que interfieren con la po
limerizacin de los nucletidos en el cido
nucleico.
El papel vital del ADN y del ARN en los pro-
208 / Microbiologa bsica para el rea de la salud y afines
cesos normales de la vida de la clula, seala que
toda interferencia con su formacin y su funcin
produce un dao grave a la clula.
Los agentes qumicos y los antibiticos ac
tan en la clula bacteriana en mltiples sitios
(vase figura 9.4).
Control con agentes fsicos
Los microorganismos no solo son capaces de
sobrevivir sino de desarrollarse en medios de
condiciones limitantes y especficas, las cuales
pueden tolerar, se adaptan y garantizan su su
pervivencia. En este captulo, tambin se habla
sobre los agentes fsicos disponibles para el
control de los microorganismos y se describen
sus efectos y aplicaciones.
Las actividades metablicas de un organismo
son el resultado de la suma de todas las reac
ciones qumicas y como estas reacciones son
influenciadas por la temperatura, en consecuen
cia, el proceso vital tambin lo estar. Todos los
organismos dependen del agua, la mayor parte
de su masa es agua y todas sus actividades se
realizan en ambientes acuosos. Estos factores
se relacionan ntimamente y se deben considerar
juntos al discutir los efectos de las condiciones
fsicas sobre los microorganismos.
Temperatura
Los microorganismos se desarrollan en una am
plia gama de temperaturas, desde las muy bajas
(psicrftlos), hasta las muy altas (tennfilos), pa
sando, obviamente, por las temperaturas medias
(mesfilos). Todos los microorganismos tienen
una temperatura mnima, ptima y mxima para
su desarrollo. Las temperaturas superiores a la
mxima, en general los matan y las inferiores a
la mnima, les producen stasis y por ello se les
considera como temperaturas preservativas.
El control de microorganismos puede realizarse
con temperaturas altas o con temperaturas bajas.
Temperaturas altas
La temperatura elevada, combinada con un alto
grado de humedad, es uno de los mtodos ms

efectivos para destruir los microorganismos. Es
muy importante diferenciar entre el calor hme
do y el calor seco en cualquier procedimiento de
control microbiano. El calor hmedo mata los
microorganismos porque coagula sus protenas,
es ms rpido y efectivo que el seco, que tam
bin los destruye al oxidar sus constituyentes
qumicos esenciales.
El siguiente ejemplo ilustra las diferencias: las
esporas de Clostridium botulinun, algunas de las
cuales, al germinar producen una toxina mortfera
que causa un envenenamiento alimentario letal,
denominado botulismo, mueren en un tiempo de
4 a 20 min a 120 C con calor hmedo, en cambio
con calor seco es necesario someterlas a 2 horas
de exposicin a la misma temperatura.
Se sabe que las clulas vegetativas de las
bacterias son mucho ms sensibles al calor
que sus esporas. Las formas vegetativas de la
mayora de las bacterias mueren con un tiempo
de exposicin de 5 a 10 min, sometidas a tem
peraturas entre 60 y 70 C con calor hmedo.
La susceptibilidad de los virus al calor se pare
Control de microorganismos / 209
ce mucho a la de las formas vegetativas de las
bacterias mesfilas. Para expresar la resistencia
de las bacterias al calor, se usan dos conceptos:
el tiempo de muerte por el calor y la reduccin
decimal del tiempo.
1. Tiempo de muerte por el calor. Es el pe
riodo de tiempo ms corto requerido para matar
una suspensin de bacterias o de esporas, a una
temperatura determinada y bajo condiciones
especficas.
2. Reduccin decimal del tiempo. Se refiere
a una reduccin especfica del nmero de clulas
viables, o sea, el tiempo en minutos que se necesi
ta para reducir la poblacin bacteriana en 90%.
Los procedimientos prcticos en los que
se emplean las temperaturas altas o el calor se
dividen convencionalmente en calor seco y calor
hmedo.
Calor seco
La aplicacin del calor seco para la destruc
cin de los microorganismos, comprende tres
210 / M icrobiologa bsica para el rea de la salud
mtodos: 1) esterilizacin con aire caliente: 2)
desecacin y 3) incineracin.
1. Esterilizacin con aire caliente. El calor
seco o aire caliente se recomienda siempre que
el vapor de agua a presin no sea deseable o no
sea posible que entre en contacto directo con
el material que se va a esterilizar. Esto ocurre
con objetos de vidrio de laboratorio como
cajas de Petri, tubos de ensayo, pipetas, entre
otros; igualmente con sustancias como polvos,
aceites y algunos instrumentos metlicos. Estos
elementos se esterilizan en un horno elctrico o
de gas, que consta de un termostato y un reloj.
La esterilizacin con aire caliente tiene menor
efecto sobre los microorganismos, por tanto,
necesita un tiempo de exposicin mayor que
el calor hmedo. El calor seco produce una
oxidacin de los componentes qumicos de los
microorganismos, causndoles la muerte.
Los siguientes rangos se consideran sufi
cientes para la esterilizacin de estos tipos de
materiales:
- 1:30 horas a 180 Cpara material metlico.
- 2:00 horas a 160 Cpara material de vidrio.
2. Desecacin, Es la accin de reducir el agua
o grado de humedad que necesitan las bacterias
para su supervivencia. La desecacin o secado
de la clula microbiana o del ambiente donde
se encuentra, minimiza o detiene la actividad
metablica y puede producir la muerte de un
gran nmero de bacterias, pero no de sus espo
ros. En general, el tiempo de supervivencia de
los microorganismos despus de la desecacin
vara dependiendo de los siguientes factores:
1) clase de microorganismo; 2) material en el
cual o sobre el cual el microorganismo se dese
ca; 3) perfeccin del proceso de desecacin, y
4) condiciones fsicas a las que se exponen los
microorganismos desecados, por ejemplo, luz,
temperatura y humedad.
3. Incineracin. Como procedimiento de
esterilizacin resulta ideal para la destruccin
de animales de laboratorio infectados, esquele
tos para desechar; carcazas y cualquier tipo de
material infectado que sea preciso destruir.
La destruccin de microorganismos, inci
nerndolos, se practica en forma rutinaria en
y afines
el laboratorio cuando se quema el asa bacte
riolgica de aro o de aguja, mantenindola a la
llama del mechero hasta obtener el rojo vivo y,
posteriormente, realizar sembrados o cultivos
microbianos y, de esta forma, evitar su conta
minacin con otros microorganismos.
En este procedimiento debe evitarse el chis
porroteo porque pueden salpicar gticas que
lleven microorganismos viables, que al caer en
un medio de cultivo adecuado pueden crecer,
desarrollarse y provocar contaminacin.
Calor hmedo
Este tipo de calor tiene un efecto mayor y ms
rpido sobre las bacterias que el calor seco.
Como el agua es muy buen conductor de tempe
ratura, el calor penetra mejor y se distribuye en
forma ms uniforme. El calor hmedo se puede
aplicar por cualquiera de los siguientes proce
dimientos: 1) vapor a presin, 2) esterilizacin
fraccionada, 3) agua hirviente y 4) pasteurizacin.
Estos procedimientos causan la muerte de los
microorganismos porque coagulan y desnatu
ralizan sus constituyentes proteicos y por ende
sus enzimas.
1. Vapor a presin. Es la forma ms prctica
y segura para esterilizar porque alcanza tem
peraturas muy altas en corto tiempo, adems,
hay penetracin de la temperatura y humedad
en abundancia que facilitan la coagulacin y
desnaturalizacin de las protenas. El aparato
para esterilizar que utiliza vapor de agua a pre
sin regulada se denomina autoclave (antes se
mencionaba simplemente como olla a presin)
(vase figura 9.5). Actualmente se cuenta con
una gran variedad de referencias de equipos para
esterilizacin al vapor (vase figura 9.6).
En este proceso de esterilizacin no es la
temperatura o el .vapor de agua o la presin
en forma independiente las que destruyen los
microorganismos sino la alta temperatura del
vapor a presin. Este es el principio fsico para
la destruccin de microorganismos empleando
la autoclave.
Se utiliza para la esterilizacin de ropa de
ciruga, gasas, guantes, instrumental cortante,
 Control de microorganismos / 211

medios de cultivo slidos o lquidos, soluciones - U tilizacin de productos qumicos que

y cultivos que se van a desechar. En condiciones cambian de color segn los niveles
normales la autoclave funciona a: 121 C a 15 Ib de temperatura alcanzados.
de presin (1 atmsfera) x 15 min. 2. Esterilizacin fraccionada. Se utiliza para
Los mtodos de esterilizacin ms importan ciertos medios de cultivo y sustancias qumicas
tes en el medio hospitalario utilizan el autoclave, que no pueden someterse a ms de 100 C sin que
por tanto, requiere de indicadores de control, que se alteren sus propiedades, ejemplo: medios de
comprueben que en el interior del recipiente se cultivo ricos en carbohidratos, vitaminas, entre
han dado las condiciones ptimas de temperatu otros. El mtodo se realiza durante tres das de
ra, presin y tiempo de exposicin para destruir la siguiente manera:
toda forma de vida. - Primer paso: se calienta el medio de cultivo
Las principales fallas que se presentan con el a 100 C por 30 minutos.
uso del autoclave, generalmente, se relacionan - Segundo paso: se incuba por 24 horas a
con: mal funcionamiento del equipo, programa una temperatura favorable para la germinacin
inadecuado, mala manipulacin del equipo por de las esporas.
parte del personal encargado (sta es la ms - Tercer paso: se repite el proceso de calen
frecuente). Los indicadores de control ms tamiento e incubacin hasta completar los tres
utilizados son: das.
- Esporos de ciertas bacterias como Bacillus Este mtodo tambin se conoce como tin-
stearothermophilus. dalizacin. El aparato para llevar a cabo esta
212 / M icrobiologa bsica para el rea de la salud y afines
tcnica se llama esterilizador de Arnold, aunque
se puede obtener el mismo resultado si se adapta
el autoclave, de tal manera, que se permita que el
vapor fluya.
3. Agua hirviente. Si bien es cierto que todas
las formas vegetativas se destruyen aproximada
mente a los 10 min de estar expuestas al agua
hirviendo a 100 C, no puede decirse lo mismo de
las esporas que pueden resistir esas condiciones
por muchas horas.
Por este motivo, el agua hirviendo no es un m
todo recomendable para lograr la esterilizacin.
4. Pasteurizacin, La leche, la crema de leche
y ciertas bebidas alcohlicas como la cerveza y
el vino son sometidas a un tratamiento por calor
controlado que mata a los microorganismos de
ciertos tipo, pero no a otros, por tanto, es un proceso
que reduce la poblacin microbiana. El primero
en utilizar este mtodo fue Louis Pasteur, quien
utiliz el calor para controlar la contaminacin
del vino.
La leche pasteurizada no es leche estril, lo
cual quiere decir que pasteurizacin no es sinni
mo de esterilizacin. La temperatura selecciona
da para la pasteurizacin depende del tiempo de
muerte por calor del microorganismo patgeno
ms resistente que se debe destruir. La exposi
cin de la leche a una temperatura muy elevada
no es deseable porque produce sabores extraos,
y cambia sus propiedades organolpticas.
En sus comienzos, la pasteurizacin de la
leche se utiliz para destruir los agentes pat
genos causantes de la tuberculosis, la bruce-
losis, la fiebre tifoidea y la fiebre Q, pero este
procedimiento tambin mejor la vida til de la
leche y tambin ha conseguido eliminar gneros
bacterianos como E. coli y Salmonella.
Los tiempos y temperaturas ms usadas en
la pasteurizacin se describen claramente en la
tabla 9.1, donde se diferencian la pasteurizacin
lenta, rpida y ultrarrpida.
Temperaturas bajas
Las temperaturas bajas, por debajo de la ptima
para el crecimiento de las bacterias, disminu
yen la tasa metablica y si la temperatura es
suficientemente baja, cesan el metabolismo y el
crecimiento. Las temperaturas bajas son tiles
para la conservacin de cultivos microbianos,
porque los microorganismos tienen una capaci
dad impresionante de sobrevivir al fro extremo.

Tabla 9.1 Tipos de pasteurizacin
Tipo de pasteurizacin Tiempo requerido
Pasteurizacin lenta 63-66 C x 30 min
Pasteurizacin rpida 71 Cx 15 s
Pasteurizacin ultrarrpida 85 C x 2-6 s
Obviamente existen excepciones como los go
nococos y los meningococos que se destruyen a
temperaturas de 0 C.
Cuando se utilizan las temperaturas bajas en
el control de microorganismos, hay que marcar
diferencia entre las temperaturas de refrigeracin
y las temperaturas de congelacin.
Temperaturas de refrigeracin. Las tempe
raturas de refrigeracin son las comprendidas
entre 4 y 7 C, sirven para la conservacin de
alimentos (es la temperatura del interior la ne
vera, refrigerador o heladera) y para mantener
cultivos de bacterias, levaduras y mohos crecidos
sobre medios con agar en tubos de ensayo. De
esta forma, se logra que permanezcan viables
por meses.
Temperaturas de congelacin. Las tempera
turas de congelacin son las que se ubican por
debajo de 0 C. Los virus y las bacterias pueden
mantenerse a -20 C (temperatura de los conge
ladores mecnicos), a -70 C (la temperatura del
hielo seco o nieve carbnica), e incluso a-195 C
(la temperatura del nitrgeno lquido). De hecho,
el nitrgeno lquido se usa con frecuencia para
conservar cultivos de virus y microorganismos,
as como para almacenar clulas de tejidos de
mamferos utilizados en virologa animal y en
otros muchos tipos de investigacin. En todos
estos procedimientos el congelamiento inicial
mata algunas de las clulas, pero la mayor parte
de las sobrevivientes, generalmente, permanecen
viables durante largos periodos de tiempo.
Ante la evidencia de estos conceptos, queda
claro que las bajas temperaturas, aun las extre
Control de microorganismos / 213
Usos principales
Se usa principalmente para crema de leche, y que
sos. No se usa para leche de consumo
Se utiliza en leche de consumo, cervezas y jugos,
entre otros
Es muy utilizada en Europa. Con este mtodo se
consigue mayor destruccin de microorganismos
mas, no sirven para la desinfeccin y mucho
menos para la esterilizacin.
Los organismos mantenidos a temperaturas
de congelacin o inferiores pueden considerarse
como durmientes, porque no tienen ninguna
actividad metablica detectable. Esta es la base
del xito de la conservacin de alimentos a bajas
temperaturas.
Liofilizacin
Como se sabe, segn la temperatura una sustancia
cualquiera tiene tres estados: slido, lquido y
gaseoso. Si queremos convertir el agua en gaseosa
(vapor) la tenemos que hervir o por lo menos
dejarla reposar largo tiempo para que se seque
espontneamente.. Si queremos que un pedazo de
hielo se derrita, le aplicamos el calor ambiental o
lo calentamos para acelerar su licuefaccin.
La liofilizacin consiste en sacarle el agua a
una sustancia congelada saltndose el paso por
el estado lquido: se congela una solucin acuosa
de la sustancia qumica que se desea liofilizar
y, a esa baja temperatura que impide cambios
qumicos que produzcan deterioro, se le somete
a un alto vaco que pasa el agua del estado slido
al estado gaseoso, sin pasar por el estado lqui
do. Es una forma de secar un producto qumico
a temperaturas bajsimas, sin el deterioro que
producira el recalentamiento.
La liofilizacin es ms un proceso para conser
vacin que para destruccin de los microorganis
mos. Los cultivos de microorganismos liofilizados
permanecen viables durante muchos aos.
214 / Microbiologa bsica para el rea de la salud y afines
Presin osmtica
Osmosis es la difusin por medio de una mem
brana semipermeable que separa dos soluciones
con distintas concentraciones de sustrato o solu
to. El proceso tiende a igualar la concentracin
de soluto a ambos lados de la membrana.
El aumento de la presin osmtica se con
sigue ampliando la concentracin de solutos al
medio que contiene los microorganismos. Este
incremento de la presin osmtica puede detener
el crecimiento bacteriano o destruir las clulas.
En este proceso se basan algunas tcnicas
de conservacin de alimentos como: salado de
carnes y salmueras, entre otros, a las cuales se
les aumenta la concentracin de sal. Tambin
puede incrementarse la concentracin de glucosa
como sucede en jarabes, jaleas, mermeladas,
leche condensada azucarada, entre otros, para
conseguir el mismo efecto.
La presin osmtica puede aumentarse, si
se incrementa la concentracin de sal o azcar
del medio, por consiguiente, la cantidad de
solutos del medio externo, es mayor que los
solutos que se encuentran en el interior de la
clula (solucin o medio hipertnico), lo que
provoca una deshidratacin celular conocida
como plasmlisis. La presin osmtica tambin
puede disminuirse (solucin o medio hipotnico)
rebajando la concentracin de solutos a niveles
que sean inferiores a los que se encuentran en
el interior de la clula. De esta manera, el agua
fluye desde la solucin al interior de la clula y
produce un fenmeno llamado plasmotipsis o
turgencia. El medio ideal debe tener una presin
osmtica equilibrada entre la clula y el medio
externo donde ella se encuentre, es decir, que
la concentracin de solutos que se encuentran
en el interior de la clula estn en equilibrio
con los solutos del medio externo (solucin o
medio isotnico). Si la membrana de la clula
es elstica, por ejemplo, en los glbulos rojos de
la sangre, har que se hinchen e incluso estallen.
Las bacterias tienen paredes celulares rgidas que
resisten los cambios de presin osmtica y por
ello no presentan cambios notables en su forma
o tamao cuando tienen lugar los fenmenos de
plasmlisis o plasmotipsis (vase figura 9.7).

Radiacin
La radiacin es un fenmeno electromagntico,
por el cual la energa se propaga en el espacio o
en otro medio. Varias clases de radiaciones elec
tromagnticas se convierten en armas letales para
las clulas microbianas, bien sea produciendo la
esterilizacin o disminuyendo la carga microbia
na de, prcticamente, cualquier sustancia que
se someta a sus efectos. Las diferentes clases
de radiaciones electromagnticas comprenden
porciones del espectro electromagntico, de esta
manera se conocen: ondas de radio, microondas,
radiaciones infrarrojas, luz visible, radiaciones
de luz ultravioleta, rayos X, radiaciones gamma o
radiaciones y, los rayos catdicos, los electrones
de alta velocidad. Estos tipos de radiacin elec
tromagntica pueden, potencialmente, controlar
el crecimiento de los microorganismos, depen
diendo de la radiacin utilizada, pues, cada tipo
de radiacin tiene su mecanismo especfico de
accin. En este captulo se diferencia entre las
radiaciones ionizantes y las no ionizantes.
Radiaciones ionizantes
Las radiaciones ionizantes son letales para los mi
croorganismos y tambin para formas superiores de
vida por causa de su gran energa y alto poder de
penetracin. Sin embargo, no resultan tiles para
mtodos rutinarios de control de las poblaciones
microbianas porque, a causa de su alto poder de pe
netracin, resulta muy difcil establecer pantallas
protectoras, adems de la dificultad para utilizarse
de manera eficiente. Las principales radiaciones
ionizantes son: los rayos catdicos, las radiaciones
gamma y los rayos X. La radiacin ms energ denominadas lmparas germicidas, las cuales
tica es la de los rayos catdicos, seguida por la
radiacin gamma y luego los rayos X.
Estas radiaciones tienen longitud de onda
corta. Por ejemplo: los rayos X de 1 a 100 A y
los rayos gamma de 0,01 a 1 .
La fuerza de este tipo de radiacin es sufi
ciente para sacar los electrones de las molculas,
ionizarlos y producir hidrgenos libres, grupos
hidrxido (-OH) o algunos perxidos (H20 2) que
provocan dao celular.
Control de microorganismos / 215
La radiacin ionizante se utiliza para la es
terilizacin y descontaminacin de suministros
mdicos, suministros quirrgicos, materiales de
un solo uso en laboratorios (medios de cultivo),
medicamentos, injertos de tejidos (teniendo en
cuenta sus limitantes) y en algunas industrias de
alimentos. En Estados Unidos, la Food and Drug
Administration (FDA) aprob el uso de la radia
cin ionizante para los productos mencionados,
pero por causa de su alto costo y la peligrosidad
del equipo de radiacin, esta prctica de esteri
lizacin se limita solamente para aplicaciones
industriales a gran escala que estn provistas de
instalaciones muy especializadas y de ninguna
manera contempla la prctica rutinaria.
Radiaciones no ionizantes
Este tipo de radiaciones no ioniza sino que se
absorbe. Especficamente produce una excita
cin de los electrones aumentndolos a niveles
mayores de energa.
Como ejemplo, se tiene la luz ultravioleta
(LUV) que es una porcin del espectro electro
magntico que comprende todas las radiaciones
desde 15 a 390 nm, o sea, entre 150 y 3.900 .
La longitud de onda alrededor de 260 a 270 nm,
es decir, 2.600 a 2.700 A, tiene la mayor eficien
cia bactericida. La LUV que llega a la superficie
de la tierra est entre 280 y 390 nm o entre 2.800
a 3.900 A porque la filtra la capa de ozono y las
nubes. Esta luz prxima a la visible, teniendo
en cuenta el espectro electromagntico, se utiliza
para la desinfeccin de superficies, aire y otros
materiales.
Pueden conseguirse diferentes tipos de las
emiten una elevada concentracin de LUV en la
regin de incidencia directa. Estas lmparas tie
nen amplia utilizacin para reducir la poblacin
bacteriana de los quirfanos en los hospitales,
salas de envasado asptico en la industria farma
cutica, donde los productos estriles se pasan al
interior de viales o ampolletas, y en las industrias
lechera y alimentaria, para el tratamiento de
superficies contaminadas.
Una importante consideracin prctica en el
216 / Microbiologa bsica para el rea de la salud y afines
uso de LUV para destruir microorganismos es
su bajo poder de penetracin. Por eso, solo son
susceptibles de destruccin los microorganismos
que estn sobre la superficie de un objeto, en don
de queden directamente expuestos a la LUV.
Mecanismo de accin de la luz
ultravioleta
La luz ultravioleta la absorben casi todos los
componentes celulares, pero de manera ms
significativa los cidos nucleicos, a los cuales
causa el mayor dao, predominantemente en las
bases pirimidinas. Una alteracin importante es
la formacin de dmeros pirimidnicos, en los
cuales dos pirimidinas adyacentes se enlazan
como se observa en la figura 9.8.
A menos que los dmeros sean separados por
enzimas intracelulares especficas, se inhibe la
replicacin del ADN y pueden presentarse mu
taciones o la muerte de la bacteria.
Las bacterias han desarrollado mecanismos
de restauracin por medio de enzimas encargadas
de reparar estos daos de dos formas: 1) la fotorreac-
tivacin, y dos) la escotorreactivacin.
Fotorreactivacin
Mecanismo enzimtico reparativo que desarro
llan algunas bacterias que han sido sometidas a
irradiaciones con LUV. Este mecanismo puede
demostrarse cuando se expone un cultivo de
clulas bacterianas irradiadas con LUV, a la luz
visible durante varios minutos. Algunas clulas
se recuperan, nunca todas. Es decir, que las
clulas aparentemente daadas y recuperadas,
que han sido fotorreactivadas por la exposicin
a la luz visible, lo hacen por la activacin de una
enzima reparativa conocida con el nombre de
enzima luzdependiente. Esta enzima cumple el
papel de reconocer los dmeros pirimidnicos de

timina, presentes en el ADN y posteriormente,
reestablecer la estructura normal del ADN (vase
figura 9.9).
Reactivacin oscura
o escotorreactivacin
Algunas bacterias desarrollaron un segundo
mecanismo para reparar el dao producido en
el ADN por las radiaciones ultravioletas. Este
mecanismo no es luzdependiente y necesita una
secuencia de reacciones enzimticas. Tambin
se conoce con el nombre de reactivacin por
escisin y se realiza en dos pasos.
Primer paso. Se da inicio al proceso con la
accin de dos enzimas: una, la enzima endo-
nucleasa dmero-especfica, y otra, la enzima
exonucleasa dmero-especfica. Estas enzimas
se encargan de escindir el segmento de ADN
alterado, es decir, cortan la parte de ADN donde
se localizan los dmeros de timina y varios nu
cletidos vecinos, para evitar cualquier tipo de
fallo en la reparacin.
Segundo paso. El segmento de la cadena de
ADN escindido o separado, se repara por medio
de la insercin enzimtica de nucletidos com
plementarios.
En este paso, al igual que en el anterior, son
dos las enzimas que se encargan de la realizacin
del proceso: una, la enzima ADN-poiimerasa se
encarga de sintetizar o polimerizar el segmento
necesario, y otra, la enzima ADN-ligasa restable
ce su localizacin y fijacin en la posicin correc
ta de la cadena de ADN (vase figura 9.10).
Filtracin
Algunos materiales, en particular fluidos bio
lgicos como sueros animales, soluciones de
sustancias enzimticas, ciertas vitaminas, gases
y antibiticos, son termolbiles o termosensibles,
es decir, que se alteran con el calor. Agentes fsi
cos como las radiaciones, son perjudiciales para
estos materiales, de modo que resulta impracti
cable esterilizarlos por los mtodos que hemos
conocido. As que la opcin disponible consiste
en esterilizar por medio &filtros.
Control de microorganismos / 217
Durante muchos aos, el microbilogo
ha dispuesto de una cierta variedad de filtros
bacteriolgicos, pero en los ltimos aos se ha
desarrollado un nuevo tipo de filtro para elimi
nar microorganismos y ahora su uso est muy
extendido.
Un filtro es un dispositivo provisto de poros
tan pequeos que impiden el paso de bacterias e
inclusive de virus, pero lo suficientemente grandes
para permitir el paso de lquidos o gases. El mate
rial para confeccionar el filtro se prepara con un
ster de celulosa u otras sustancias polmeras con
poros de tamao preciso y uniforme. El tamao de
los poros se conoce y su rango est entre 0,001 y
10 jom. El material filtrante es muy delgado, tiene
aproximadamente 150 |am de espesor y, por ello,
se le denomina filtro de membrana.
L im pieza fsic a
La limpieza fsica comprende muchos procedi
mientos entre ellos se mencionan el ultrasonido
y el lavado.
Ultrasonido
Las ondas sonoras de alta frecuencia se usan para
desintegrar clulas microbianas y para limpiar o
eliminar microorganismos de equipos, as como en
tcnicas especializadas de diagnstico y ciruga.
Lavado
El lavado o cepillado con jabn, preferiblemente
antisptico o antibacteriano, constituye otro
mtodo fsico para eliminar microorganismos
de las superficies. Al frotar la superficie se
desprende el polvo de los objetos, de la piel o
de las manos, por efecto de la friccin. El jabn
elimina la cutcula aceitosa que mantiene a las
bacterias unidas a las superficies, incluida la piel.
Una vez que se ha eliminado esta cutcula, los
microorganismos son arrastrados por el flujo de
agua corriente (vase tabla 9.2).
Existen otros procesos fsicos para eliminar mi
croorganismos como la electricidad, la tensin su
perficial, la centrifugacin y ultracentrifugacin.
218 / Microbiologa bsica para el rea de la salud y afines
Control de microorganismos / 219
220 / Microbiologa bsica para el rea de la salud y afines
Tabla 9.2 Aplicacin de agentes fsicos para controlar los microorganismos
Mtodo Usos recomendados
Calor hmedo con Esterilizacin de instrumentos, ropa
autoclave clnica, utensilios y bandejas de tra
tamiento, medios de cultivo y otros
lquidos
Vapor libre o agua Destruccin de patgenos no forma-
hirviendo dores de esporas. Para higienizar
ropa de cama, ropa en general, platos,
utensilios de cocina, entre otros
Calor seco con horno de Esterilizacin de materiales imper
aire caliente meables o que se deterioren con la
humedad, por ejemplo, aceites, vidrio,
instrumentos cortantes e instrumental
metlico
Incineracin Eliminacin de objetos contaminados
que no pueden volverse a usar
Radiacin con Control de infecciones transmitidas por
luz ultravioleta el aire. Desinfeccin de superficies
Radiacin con rayos X, Esterilizacin de materiales quirrgi Procedimiento demasiado costoso
gamma y rayos catdicos cos sensibles a! calor y otros instru
mentos mdicos
Filtracin con filtros de Esterilizacin de fluidos biolgicos
membrana sensibles al calor
Filtracin con filtros Desinfeccin del aire
de vidrio
Limpieza fsica con Descontaminacin de instrumentos
ultrasonidos muy delicados para su limpieza
Limpieza fsica con Descontaminacin de manos, piel y
lavado objetos
Limitaciones
Ineficaz contra organismos que
estn en materiales impermeables
al vapor; no puede usarse para
materiales sensibles al calor
No se puede garantizar la este
rilizacin despus de una sola
exposicin
Destructivo para materiales que no
pueden resistir altas temperaturas
durante largos periodos de tiempo
El tamao del incinerador debe ser
adecuado para quemar la carga
pronto y por completo. Se puede
presentar una potencial polucin
del aire
Para ser eficaz, debe ser absor
bida por los microorganismos. No
pasa a travs del vidrio transpa
rente u objetos opacos. Irrita los
ojos y la piel. Tiene poco poder de
penetracin
que requiere instalaciones espe
ciales para su uso
El fluido debe estar relativamente
libre de material particulado
Mtodo bastante costoso
No es efectivo por s solo; como
procedimiento adjunto aumenta la
efectividad de otros mtodos
Higieniza, es decir, solo reduce la
flora microbiana a niveles no perju
diciales para la salud

Control con agentes qumicos
Muchas sustancias qumicas tienen efectos no
civos sobre los microorganismos porque tienen
la capacidad de inhibirlos o matarlos. La accin
sobre ellos permite clasificar esas sustancias
as: 1) a los agentes que destruyen bacterias
se les da el nombre de bactericidas', a los que
destruyen los hongos, fungicidas y para los de
los virus se utiliza el trmino virucida', 2) a los
agentes que dificultan o inhiben el crecimiento,
tambin se les asigna un nombre dependiendo del
tipo de microorganismo sobre el cual ejercen su
accin, de esta manera, los que actan sobre las
bacterias reciben el nombre de bacteriostticos\
sobre los hongos, fungistticos y sobre los virus,
virustticos.
Los componentes etimolgicos de los trmi
nos indican: el sufijo cida se refiere a muerte,
destruccin, y el prefijo remite al tipo de micro
organismo que destruye. El sufijo esttico indica
obstruccin o inhibicin del crecimiento, y el
prefijo da cuenta del tipo de microorganismo,
al cual le inhibe el crecimiento. Tales sustancias
van desde elementos metlicos pesados como
la plata y el cobre, hasta molculas orgnicas
complejas como los compuestos de amonio
cuaternario.
En la vida cotidiana, domstica o laboral, se
utilizan un sinnmero de compuestos qumicos
para controlar el crecimiento de los microorga
nismos. Los detergentes y jabones que utilizamos
para la higiene corporal diaria, para el lavado de
la ropa o de los utensilios de cocina, tienen la
finalidad de reducir la carga microbiana, inhibir
el crecimiento de los microorganismos de la
superficie corporal o de la ropa o en el mejor de
los casos, destruirlos. En unidades especializadas
como los laboratorios microbiolgicos, hemato-
lgicos, instalaciones industriales, entre otros, se
utilizan agentes qumicos en forma rutinaria para
controlar el crecimiento de microorganismos
indeseados.
Sin embargo, no existe un solo producto qu
mico que sea capaz de convertirse en el agente
qumico ideal para el control microbiolgico,
pues, para lograrlo debe cumplir con una serie de
Control de microorganismos / 221
caractersticas, prcticamente imposibles de reunir
en un solo producto. Esas caractersticas son:
1. Actividad antimicrobiana. El producto
qumico, a baja concentracin, debe tener un
amplio espectro de actividad antimicrobiana, es
decir, que pueda destruir muchas clases de micro
organismos.
2. Solubilidad. La sustancia debe ser soluble
en agua u otros solventes en la cuanta suficiente
para que permita su uso efectivo.
3. Estabilidad. Los cambios que sufra la
sustancia a lo largo del tiempo, mientras perma
nece guardado en un estante, deben ser mnimos.
Adems, estos cambios no deben producir una
prdida significativa de la accin antimicro
biana.
4. No debe ser txico para personas y ani
males. El compuesto debe ser letal para los
microorganismos e inocuo para las personas y
animales.
5. Homogeneidad. El agente debe tener una
composicin uniforme, de tal manera que los
ingredientes activos estn presentes en cada
aplicacin. Los productos qumicos puros son
homogneos, pero las mezclas pueden hacer que
se pierda esta propiedad.
6. No debe combinarse con material org
nico extrao. Muchos desinfectantes tienden a
combinarse con las protenas u otro material
orgnico. En consecuencia, cuando son usados
en condiciones en que exista una considerable
cantidad de material orgnico, la mayor parte
del desinfectante queda inactivado.
7. Actividad antimicrobiana a temperatura
ambiente y corporal. El agente qumico debe ser
efectivo sin que sea necesario elevar la tempe
ratura del producto, por encima de los valores
que normalmente se encuentren en el ambiente
en donde se va a usar el compuesto.
8. Capacidad de penetracin. El agente
qumico debe ser capaz de penetrar a travs de
la superficie, para que su accin antimicrobiana
no se limite nicamente al sitio de aplicacin. Si
la sustancia no logra atravesar la superficie, su
accin antimicrobiana estar siempre limitada a
la superficie donde se aplica el producto.
9. No debe ser corrosivo ni teir. El agente
222 / M icrobiologa bsica para el rea de la salud y afines
qumico no debe oxidar o estropear de ninguna
forma los metales, tampoco debe teir ni dete
riorar o estropear cualquier tipo de tela.
10. Poder desodorante. El agente qumico,
como un desinfectante, por ejemplo, debera,
idealmente, ser inodoro o al menos poseer un
olor agradable,
11. Capacidad detergente. Un agente qumi
co, por ejemplo, un desinfectante que tambin
sea detergente (agente limpiador) tiene la ventaja
que su accin limpiadora mejora la efectividad
del desinfectante. Esta propiedad se encuentra
en varios productos comerciales utilizados para
la limpieza diaria.
12. Disponibilidad y costo. Se debe poder
disponer del producto en cantidades abundantes,
en cualquier momento del ao y a un precio
razonable.
Efectos de los agentes
antimicrobianos sobre el crecimiento
Pueden diferenciarse tres tipos de efectos al aa
dir agentes antimicrobianos sobre un cultivo de
bacterias que se encuentre en fase exponencial
(fase log o de reproduccin acelerada).
Efecto bacteriosttico. Se inhibe el crecimien
to, pero las clulas bacterianas no mueren por
que los agentes bacteriostticos se unen a los
ribosomas e inhiben la sntesis de protenas. Sin
embargo, esa es una unin dbil y al disminuir la
concentracin del agente se libera de los riboso
mas y se reanuda el crecimiento bacteriano.
Efecto bactericida. Los agentes bactericidas
matan las bacterias, pero no les producen rom
pimiento o lisis.
Efecto bacterioltico. Los agentes bacterio-
lticos causan la muerte bacteriana produciendo
lisis a las clulas que conforman el cultivo.
Agente qumico antimicrobiano
apropiado
Los compuestos qumicos antimicrobianos
pueden ser muy efectivos en algunos usos y
completamente nulos en otros, as que para
seleccionar el agente qumico apropiado, debe
tenerse en cuenta:
1. Naturaleza del material que se va a tratar.
Un agente qumico utilizado para desinfectar
utensilios efectivamente puede ser poco satis
factorio si se usa en la piel, porque le puede
producir dao a las clulas de la epidermis. La
sustancia seleccionada debe ser compatible con
el material al cual se aplica.
2. Tipo de microorganismo. Se debe saber
seleccionar el agente antimicrobiano para que
sea efectivo contra los microorganismos que se
quiere eliminar.
3. Condiciones ambientales. El uso exitoso
de un agente antimicrobiano requiere el conoci
miento de la influencia que sobre l ejercen las
condiciones ambientales, como pH, temperatura
y presencia de materia orgnica, entre otros. De
esta manera puede emplearse bajo condiciones
ms favorables.
Principales grupos
Los grupos de agentes qumicos antimicrobianos
ms utilizados son:
Fenol (cido fnico) y com puestos
fenlicos
El fenol tiene importancia histrica en el desa
rrollo de tcnicas quirrgicas spticas por haber
sido utilizado por Lister en la dcada de 1860.
Actualmente se utilizan otros desinfectantes ms
eficaces y activos a concentraciones mucho ms
bajas. Los compuestos fenlicos, como el cido
fnico puro, son bactericidas o bacteriostticos
dependiendo de la concentracin a la cual, se
usen.
Alcoholes
El alcohol etlico a concentraciones de 50 a
70% es el agente qumico ms usado como an
tisptico, porque produce desnaturalizacin de
las protenas y, adems, es solvente de lpidos.
por lo que causa dao a la membrana celular.
 Control de microorganismos / 223

pero tiene un bajo poder sobre las formas es- C ompuestos de am onio cuaternario
poruladas. Existen reportes que demuestran la
supervivencia de esporas de Bacillus subtilis Se encuentran ejerciendo acciones desinfectan
durante nueve aos y las del carbunco durante tes, antispticas e higienizantes, ejemplos: el
veinte aos.1 cloruro de benzalconio (Zephiran), cloruro de
benzetonio (Phemerol) y cloruro de acetilpiridi-
H algenos y sus com puestos nio (Cupryn). Estos compuestos tienen un gran
poder bactericida sobre bacterias Gram positivas
En este grupo de los halgenos se encuentran el y un poco ms bajo sobre las Gram negativas.
yodo, cloro, flor, bromo. Los compuestos del
cloro como los hipocloritos de calcio o de sodio Aldehidos
y el yodo, son muy utilizados en las industrias
y en los hogares. El glutaraldehdo y el formaldehdo son los dos
1. Cloro y sus compuestos. Es uno de loscompuestos que pertenecen a los aldehidos, que
desinfectantes ms utilizados para el tratamiento tienen diversas aplicaciones para controlar los
de aguas en los abastecimientos municipales. microorganismos:
Tal vez los componentes ms conocidos son 1. Glutaraldehdo. Una solucin de gluta
el hipoclorito de de calcio, Ca(OCl)2y el hipo- raldehdo al 2%, presenta amplio espectro de
clorito de sodio, NaOCl. Los dos compuestos actividad antimicrobiana. Es efectiva contra
pueden obtenerse en variadas presentaciones bacterias vegetativas, hongos, esporas bacte
comerciales. rianas y fngicas, virus. Se usa para esterilizar
2. Yodo. Es uno de los germicidas ms aninstrumentos mdicos y odontolgicos. Sin
tiguos y se utiliza para este fin desde hace ms embargo, se necesita largo tiempo de exposicin
de un siglo. El derivado que ms se usa como para lograr la esterilizacin.
germicida es la tintura de yodo. Las soluciones 2. Formaldehdo. Los vapores de formalde
de yodo se utilizan principalmente como desin hdo se usan para esterilizar un rea cerrada y
fectantes de la piel, en especial, como desinfec bajo condiciones apropiadas. Las caractersticas
tante prequirrgico. indeseables del formaldehdo son la irritacin de
la piel y los vapores nocivos.
M etales pesados
Q uim ioesterilizantes gaseosos
Metales como el cobre, el mercurio, especial
mente la plata, poseen una propiedad llamada Su uso resulta muy efectivo en materiales que no
accin oligodinmica, es decir, que en cantida pueden ser esterilizados con temperaturas altas
des muy pequeas (solo unas pocas partes por o con esterilizantes qumicos. Por ejemplo, el
milln), ejercen un efecto letal sobre los micro xido de etileno es un compuesto orgnico cuya
organismos. El trmino se deriva de dos palabras frmula es relativamente simple.
griegas: oligos, que quiere decir pequeo y Se utiliza mucho en hospitales, industria y
dynamis que significa poder. laboratorios. Destruye tanto formas vegetativas
como resistentes. Una notable y deseable carac
Colorantes terstica es su alto poder de penetracin, porque
puede pasar a travs de las envolturas y esteriliza
Principalmente los colorantes derivados del trife- grandes paquetes de materiales, piezas de tela
nilmetano como el verde de malaquita, el cristal e incluso ciertos plsticos. El xido de etileno
violeta y el verde brillante, tienen alto poder es explosivo y txico, por eso, debe utilizarse
destructor contra bacterias Gram positivas. con mucha precaucin. Los vapores de xido
224 / Microbiologa bsica para el rea de la salud y afines
de etileno en el aire son altamente inflamables,
aunque se encuentren en bajas concentracio
nes. Por ser un potente agente esterilizador se
utiliza universalmente para la esterilizacin de
materiales sensibles al calor o a la humedad,
adems, las formas esporuladas, prcticamente,
no presentan resistencia a la destruccin con la
utilizacin adecuada del xido de etileno (vase
tabla 9.3).
Concentracin mnima
inhibitoria (CMI)
El valor utilizado para expresar el resultado de
la medicin de la actividad antimicrobiana es
el CMI. Se mide determinando la cantidad o
la concentracin mnima de un agente qumico
antimicrobiano que se necesita para inhibir el
crecimiento de un microorganismo utilizado
como control. Para conseguir este objetivo se
utilizan, comnmente, dos mtodos: 1) dilucin
en tubo, y 2) difusin en agar.
Dilucin en tubo
Este mtodo consiste en inocular con el mi
croorganismo escogido una serie de tubos de
ensayo con un medio de cultivo lquido. A cada
tubo se le agrega una concentracin diferente
del agente qumico antimicrobiano que se va a
estudiar. Despus de la incubacin se observa la
turbidez de los tubos: a mayor turbidez mayor
crecimiento microbiano y viceversa. De esta
manera, el tubo con menor concentracin del
agente inhibitorio que impida el crecimiento
del microorganismo utilizado como referencia da
el valor de la CMI. Por consiguiente, la CMI no
es constante para un determinado agente porque
depende del tipo de microorganismo utilizado,
del tamao del inoculo, de las condiciones de
incubacin: temperatura, pH, aireacin, entre
otras. Este mtodo no permite ver la diferencia
entre un agente microbicida o microbiosttico,
porque el agente va a estar presente en el medio
de cultivo durante el tiempo que dure el periodo
de incubacin.
Difusin en agar
Es otro procedimiento que se utiliza con fre
cuencia para estudiar la accin antimicrobiana.
El mtodo consiste en preparar una caja de Petri
con un medio de cultivo apropiado para el ptimo
crecimiento del microorganismo seleccionado.
El microorganismo escogido se cultiva en un
medio de cultivo lquido y se inocula uniforme
mente en el medio de cultivo de la caja de Petri,
por el mtodo de barrido. Luego se impregnan
discos de papel de filtro con diferentes concen
traciones del agente qumico antimicrobiano y
se colocan en la superficie del medio de cultivo.
Durante la incubacin, el agente se difunde
desde el disco de papel de filtro al agar o medio
de cultivo. Al finalizar el periodo de incubacin
se observan una serie de halos de inhibicin del
crecimiento microbiano alrededor de los discos
de papel, de diferentes dimetros. A una deter
minada distancia del disco de papel se alcanza
la CMI y a partir de ese punto se observa el
crecimiento microbiano. La zona de inhibicin
es proporcional a la cantidad del agente qumico
antimicrobiano aadido al disco de papel de
filtro, la solubilidad del agente, el coeficiente de
difusin y la eficacia del agente. Este mtodo es
muy rutinario para comprobar la sensibilidad a los
antibiticos de los microorganismos patgenos y
se conoce con el nombre de antibiograma.
Antibiticos y otros agentes
quimioteraputicos
Los agentes quimioteraputicos son sustancias
qumicas usadas para el tratamiento de enfer
medades infecciosas (quimioterapia) o para la
prevencin de enfermedades (quimioprofilaxis).
Estas sustancias se obtienen de los mismos
microorganismos o de plantas y se sintetizan en
los laboratorios farmacuticos. En general, las
sustancias qumicas que existen naturalmente se
distinguen de los compuestos sintticos con el
nombre de antibiticos.
Para que una sustancia qumica sea til como
agente quimioteraputico debe tener toxicidad
Tabla 9.3 Principales grupos de agentes qumicos antimicrobianos
Grupo principal Caractersticas Modo de Compuestos especficos Uso recomendado Limitaciones
adicionales accin
Fenol y compuestos Desnaturalizan las prote Los derivados como Los cresoles son ms germi Desinfeccin general Efectividad microbiana
fenlicos nas y daan la membrana el hexilresorcinol, cidas que los fenlicos. limitada. Irritantes y co
celular de los microorga reducen mucho la Otro compuesto es el hexil rrosivos
nismos tensin superficial resorcinol
Alcoholes Desnaturalizan protenas. Cuantos ms carbo El alcohol metlico es menos Antisepsia para la piel. Su efectividad es anti
Los alcoholes son agen nos tenga el alcohol, bactericida y ms txico. El La concentracin de sptica
tes deshidratantes que, su accin es ms alcohol etlico es el menos 60% elimina a los virus
tambin, tienen accin germicida txico y se utiliza en con si no hay materia orgni
detergente centraciones de 70%. Otros ca extraa
alcoholes como el proplico,
el butrico y el amlico son de
uso menos frecuente
Halgenos: Producen halogenacin de Efectivo contra bacte La tintura de yodo se prepara Desinfeccin de la piel Irritante de las membra
yodo la tirosina; inactivan enzi rias y esporas disolvindolo en alcohol. Los nas mucosas
mas y otras protenas. compuestos yodforos se ob
tienen cuando se adicionan
agentes de superficie
Cloro y compuestos Se combinan con las pro El cloro se usa para Los hipocloritos higienizan Desinfeccin del agua Inactlvados por la materia
de cloro tenas de la membrana y desinfectar el agua; los utensilios y equipos. Las orgnica. La efectividad
las enzimas de la clula compuestos de cloro cloraminas son agentes depende del pH. El sabor
son ms fciles de oxidantes y el olor son objetables si
usar y tienen muchas no se controlan estricta
aplicaciones mente
Aldehidos Rompe enlaces de hidr Efectivos contra todos Glutaraldehdo Esterilizacin de instru Estabilidad limitada: no
geno y desnaturalizan las los microorganismos, mentos y fumigacin son esporicidas
protenas excepto las esporas
bacterianas
Quimioesterillzantes El xido de etileno alquila Mata todas las formas xido de etileno Esterilizacin de mate Este agente es inflamable
gaseosos compuestos orgnicos e de vida riales sensibles al calor; y potencialmente explosivo
inactiva enzimas instrumentos, equipos en forma pura. Su accin
grandes y colchones es relativamente lenta
Compuestos Desnaturalizan protenas y Ms germicidas que Cloruro de benzalconio, clo Desinfeccin de la piel. No son esporicidas
de amonio cuaternario: daan la membrana celular otros detergentes; ruro de benzetonio y cloruro Son agentes higieni
detergentes catinicos ms bactericidas de acetilpiridinio zantes
contra Gram positivas;
son fungicidas
226 / M icrobiologa bsica para el rea de la salud y afines
selectiva, es decir, que debe inhibir o matar al
microorganismo, al parsito o a la clula ma
ligna, mientras que causa poco o ningn dao a
las clulas del hospedador. Otro requerimiento
es que sea capaz de penetrar en las clulas y en
los tejidos del hospedador.
Historia de la quimioterapia
En 1630 los europeos utilizaban la quinina natural,
procedente de la corteza del rbol de la quina de
Amrica del Sur, para tratar la malaria, pero los
indgenas nativos ya la utilizaban con el mismo
fin, desde muchos aos antes de esa fecha.
Cuando la sfilis devastaba poblaciones se
inici el tratamiento quimioteraputico. En
1495 se utiliz el mercurio, pero solo en 1910
Paul Ehrlich, sintetiz un compuesto arsenical
conocido como salvarsn, que fue una droga
especfica capaz de curar la enfermedad sin gran
peligro para el paciente.
En 1935 hubo un gran estruendo, cuando
investigadores alemanes encontraron que un
colorante particular llamado prontosil curaba
ratones a los que se les haba suministrado dosis
letales de estreptococos hemolticos (bacterias
que destruyen glbulos rojos).
En el mismo ao 1935, se descubri que la
accin bactericida del prontosil era causada por
uno de sus compuestos: la sulfonamida o sulfa
nilamida. En 1945 ya se haban fabricado unos
5.488 derivados de la sulfanilamida.
Antibiticos
Un antibitico es el producto metablicc de un
organismo, que resulta perjudicial o inhibitorio
para otros microorganismos en muy pequeas
cantidades. Dicho de otra manera, un antibi
tico es una sustancia qumica producida por un
microorganismo, que es inhibitoria para otro
microorganismo.
En 1929, Alexander Fleming descubri que
el hongo Penicillium notatum produca una
sustancia m etablica que actuaba contra el
Staphylococcus aureus y llam a esa sustancia
penicilina. Fleming cultiv, aisl e identific
al hongo y la penicilina se convirti en una
droga milagrosa solo hasta la Segunda Guerra
Mundial. Posteriormente vinieron los descubri
mientos de muchos antibiticos, entre ellos la
estreptomicina, por Selman Waksman a partir
del aislamiento del Streptomyces griseus. En la
actualidad, se han descubierto antibiticos que
poseen efectos secundarios tan txicos que no
pueden utilizarse en los seres vivos, a pesar de
su potente capacidad antibacteriana.
Antibitico til
Para que un antibitico logre la calificacin de
til, debe cumplir con estas propiedades:
1. Ser capaz de destruir o inhibir muchas
especies de microorganismos patgenos espec
ficos, es decir, que el antibitico sea de amplio
espectro.
2. No debe propiciar el desarrollo de formas
resistentes de los microorganismos al antibitico
que se est utilizando en la terapia.
3. No debe producir efectos colaterales inde
seables en el hospedador como reacciones alr
gicas, dao a las clulas nerviosas, alteraciones
renales o irritacin del tracto gastrointestinal.
4. No debe eliminar la flora microbiana
normal del hospedador, porque puede alterar
el equilibrio natural y permitir que microbios
normalmente no patgenos o patgenos res
tringidos por la flora normal, establezcan una
nueva infeccin.
5. Debe poderse administrar por va bucal,
sin que se inactive por los cidos estomacales,
o por va parenteraJ mediante inyeccin, sin que
se una a las protenas de la sangre.
6. Debe tener alto grado de solubilidad en los
fluidos del cuerpo.
7. El antibitico debe permitir alcanzar altas
concentraciones en los tejidos o en la sangre para
inhibir o destruir los agentes infecciosos.
Control de microorganismos:
sumario
Los microorganismos pueden causar mucho
dao y perjuicio. Infectan a las personas- a

animales y a las plantas, produciendo enferme
dades cuya gravedad oscila entre una infeccin
dbil y la muerte. Contaminan los alimentos y
producen cambios qumicos en ellos, que los
vuelven incomestibles o incluso venenosos. Los
microorganismos son, adems, responsables de
la alteracin y deterioro de muchos materiales
como los textiles, el cuero, el papel, la madera,
etc. Las prdidas econmicas, que de ello se
derivan, pueden ser sustanciosas. Por esto, es
necesario disponer de procedimientos efectivos
para controlar la contaminacin y el crecimiento
microbiano. La palabra control, como se utiliza,
regularmente se refiere a la inhibicin, muerte o
eliminacin de los microorganismos.
Preguntas para autocontrol
del aprendizaje
1. Mencione cules son las principales razones
para controlar las poblaciones microbianas.
2. Diferencie las siguientes parejas de trminos:
a) esterilizacin y desinfeccin; b) accin
germicida y accin bactericida; c) agente
bactericida y agente bacteriosttico; d) agen
te microbioltico y agente bacterioltico.
3. Describa situaciones prcticas y en lo posi
ble cotidianas, en las que sea apropiado: a)
desinfectar, b) higienizar, y c) esterilizar.
4 M Asuma que usted aade un desinfectante a
una suspensin de microorganismos, mue
ren todas las clulas instantneamente?
Explique su respuesta.
5. En qu se diferencia el trmino muerte
utilizado en microbiologa, del mismo tr
mino usado en organismos superiores.
6. Qu efecto puede tener la materia orgnica
extraa sobre la efectividad de un desinfec
tante?
Control de microorganismos / 227
7. Compare la eficacia del calor hmedo y el
calor seco como medios de esterilizacin.
8. Haga un paralelo funcional entre las clulas
vegetativas bacterianas con sus esporas, en
cuanto a la resistencia al calor.
9. Qu es un autoclave?, cul es su princi
pio fsico?, qu materiales se esterilizan
usualmente en este aparato?
10. En qu se fundamenta la esterilizacin
fraccionada?
11. Cite algunos materiales que se esterilicen
en un homo de aire caliente. Indique para
cada material, por qu el aire caliente es el
mtodo de eleccin para su esterilizacin.
12. Cul es el efecto de las temperaturas bajo
cero sobre la supervivencia de los micro
organismos?
13. Cite varios tipos de radiaciones microbici-
das. Cules son las ventajas, limitaciones
y aplicaciones prcticas de cada una de
ellas?
14. Por qu no existe el agente qumico ideal
en el control de microorganismos?
15. Mencione los principales grupos de agentes
qumicos antimicrobianos. Cules son
sus principales usos y cul su modo de
accin?
16. Son los antibiticos tiles como agentes
quimioteraputicos? Explquelo.
17. Los antibiticos son generalmente ms
efectivos contra infecciones bacterianas
que contra infecciones virales? Exponga
las razones para ello.
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Impreso en marzo de 2008