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MICROBIOLOGIA (UV)
CURSO 15-
GOZALBO, DANIEL
16
MICROBIOLOGA Eric Borrs
TEMA 1
INTRODUCCIN A LA MICROBIOLOGA
1. CONCEPTO DE MICROBIOLOGA
La microbiologa es una ciencia que estudia los microorganismos desde muchos puntos de vista
(morfologa, fisiologa). El trmino microorganismo no tiene significado taxonmico ya que
abarca un gran nmero de microorganismos. Solo comparten el hecho de que no son visibles al
ojo humano. El grupo de los mamferos s que tiene significado taxonmico.
La microbiologa tiene relacin con otras ciencias, como por ejemplo, con la parasitologa ya
que comparten los microorganismos como objeto de estudio. Tambin est relacionada con la
gentica, bioqumica y biologa molecular debido a que en el avance de estas ciencias se han
estudiado los microorganismos.
Hay aspectos positivos y negativos de los microorganismos. Un aspecto positivo podra ser la
fermentacin, con la cual se pueden obtener determinados productos; y un aspecto negativo el
efecto virulento que tienen algunos microorganismos.
Surgi en la segunda mitad del siglo XIX, es una ciencia reciente. Se desarroll tan tarde debido
a la invencin de los instrumentos pticos implicados en el estudio de los microorganismos.
Mediante experimentos se demostr que el aire est lleno de microorganismos y es por eso
que la materia llega a podrirse. Si se esteriliza una muestra y se asla, puede estar
descontaminado siempre.
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Pasteur tambin demostr que los cambios qumicos que ocurren durante la fermentacin se
deben a la accin de los microorganismos.
Leche-> Yogur
Un mdico ingls, Joseph Lister, pens que las infecciones post-quirrgicas estaban provocadas
debido a que el ambiente est contaminado por microorganismos, entonces utiliz la asepsia,
manteniendo descontaminadas dichas zonas.
Robert Koch (1843 1910) demostr que los microorganismos son responsables de las
enfermedades infecciosas. l puso unos criterios para determinar una enfermedad:
POSTULADOS DE KOCH
Jenner (1798) observ que los agricultores en contacto con vacas con viruela no padecan la
enfermedad, o la padecan con poca actividad.
Se cre una sustancia de origen natural denominada antibitico, y la primera en crearse fue la
penicilina por Alexander Fleming, la cual inhibe el crecimiento de la bacteria. A partir de este
descubrimiento se fueron descubriendo otros antibiticos.
En la dcada del 1950 se invent el microscopio electrnico, el cual permite ver a 1000
aumentos y con mayor resolucin.
Tambin permite ver unos agentes infecciosos muy simples por primera vez, los virus. A partir
de aqu se enunciaron los dos tipos de organizacin celular, procariotas y eucariotas.
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En 1944, Avery, McLeod y McCarty mediante un experimento concluyeron que el ADN es el
material gentico.
Watson y Crick en el 1951 describieron por primera vez la estructura del ADN. El ADN contiene
los genes, para que se expresen tiene que haber una transcripcin y una transduccin, esto se
investig posteriormente y en la dcada de los 60 se haba descifrado el cdigo gentico. Todos
estos experimentos se llevaron a cabo con bacterias.
La siguiente etapa que llegaron los cientficos fue manipular in vitro el ADN, a esto se le
denomina ingeniera gentica. Cuando estas tcnicas se incluyeron a la microbiologa industrial
clsica, pas a ser microbiologa industrial moderna. La clara diferencia fue que ya se poda
manipular el organismo genticamente, teniendo una actividad artificial o teniendo una
enzima especfica. El ADN recombinante es el ADN artificial procedente de dos especies
distintas.
El problema de la resistencia a los antibiticos: Se pens que los antibiticos podan curarlo
todo y la poca de las enfermedades infecciosas haba terminado. Pero a medida que un
antibitico se va usando a lo largo del tiempo, las bacterias poco resistentes se eliminan, pero
las muy resistentes proliferan y dejan de ser tiles los antibiticos utilizados y es necesaria la
bsqueda de nuevos antibiticos, cosa en la que la industria farmacutica invierte mucho para
fabricar un antibitico ms potente.
2_ Los cambios qumicos que ocurren durante la fermentacin se deben a la accin de los
microorganismos.
3_ La vacuna.
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3. EVOLUCIN
Cuando apareci la Tierra no existan los seres vivos, fue una etapa de evolucin qumica,
donde todo fue reaccionando hasta dar molculas complejas, que formaban polmeros. Estos
polmeros desarrollaron la capacidad de autoduplicarse, luego se rodearon de una membrana
lo que dio lugar a un primordio de clula, y finalmente se dio lugar a una clula primitiva, a
partir de la cual se desarrollaron las dems clulas.
Poco a poco se llevo a cabo una etapa de diferenciacin micrbica que dio lugar a tres lneas de
crecimiento distintas:
Inicialmente los seres vivos eran unicelulares, luego surgieron los pluricelulares y cada clula
realizaba todas las funciones. Luego las clulas mutaron y se especializaron en diferentes
funciones, formndose as los tejidos, y de ah los microorganismos empezarn a evolucionar
lentamente en algas, plantas hasta la poca de los dinosaurios.
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4. TEORA DE LA ENDOSIMBIOSIS
Explica la relacin entre la mitocondria actual o el cloroplasto actual con las bacterias. Es una
relacin parastica que estableci una clula con ncleo con una bacteria hace millones de
aos.
La clula fagocit a la bacteria, y esa bacteria parasit en la clula tal que las dos clulas no
pueden vivir independientemente. Con el paso del tiempo la bacteria fotosinttica es una
mitocondria. En resumen, una clula adopto otras para poder sobrevivir a los cambios en el
medio. Por ejemplo, no poda producir energa y adopto una mitocondria, la mitocondria se
beneficio con los nutrientes que le daba la otra y por eso hicieron simbiosis, para la
sobrevivencia mutua. Esta hiptesis fue propuesta por Lyn Margulis y se basaba en el parecido
entre la bacteria y la mitocondria. La membrana interna de la mitocondria provendra de la
bacteria, y la externa de la propia clula. Los ribosomas de una clula eucariota son 80s y los de
una clula procariota son 70s, como los de la mitocondria que son 70s.
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TEMA 2
Partes de un microscopio:
La amplificacin se define como las veces que se aumenta el tamao de la imagen. El poder de
amplificacin aumenta 100 veces cuando pasa por el objetivo (100x) y 10 veces cuando
atraviesa la lente ocular (10x). [100 x 10 = 1000]
Poder de resolucin: Es la capacidad para distinguir como separados o distintos dos puntos
que estn adyacentes. Esta capacidad se mide como una distancia d
n sen donde
La distancia se define como la mnima distancia a la que han de estar dos puntos para poder
distinguirlos como separados o como distintos.
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-Observacin directa de microorganismos: Este mtodo es muy simple. Consiste en hacer una
suspensin del organismo y colocarla en el portaobjetos. Se observa con un objetivo de 40
aumentos y el ndice de refraccin es del aire. Como los microorganismos estn sin teir, el
80% es agua, por lo tanto, la observacin es difcil de manera que hay que hacerla con poca luz.
Es ms preferible hacer uso de la microscopa de contraste de fases que la de campo claro.
La ventaja es que observamos los organismos vivos y que hay algunas caractersticas que solo
presentan cuando estn vivos. Permite ver el movimiento, tambin permite ver la morfologa
de las bacterias pero es necesario no teir para no modificar la morfologa.
Un colorante es una sustancia que tiene una composicin qumica que absorbe parte de la luz
visible y muestra el complementario. Tiene afinidad por componentes del microorganismo, es
decir, se tie.
Consiste en el mismo procedimiento de tincin: Se coloca un colorante que suele ser violeta,
luego se aade lugol (yodo+yoduro) que no es un colorante, sirve para retener el colorante
violeta. A continuacin, se lava y los microorganismos se encontrarn todos teidos de violeta.
La decoloracin con etanol es el siguiente paso, que se aade durante unos 30 segundos.
En estas condiciones las bacterias Gram negativas extraen el decolorante (se decoloran debido
a que el colorante afecta a su membrana externa, no a su murena, entonces el etanol disuelve
esa membrana externa, dejando a la bacteria sin el color violeta. Las Gram positivas siguen con
el colorante aun habiendo echado el etanol, aunque se pueden decolorar si las dejamos ms
de 30 segundos. Despus se tie con fursiva diluida o safranina (rosa) que teir nicamente
las Gram negativas, entonces se realiza el lavado y se mira al microscopio.
El carcter Gram positivo o Gram negativo va ligado a las paredes celulares. Las bacterias
tienen dos tipos de pared celular, las de Gram positiva que resisten a la decoloracin, y las
Gram negativas no resisten a la decoloracin. Este tipo de tincin hay que hacerlo con un
cultivo joven, viejo no puede ser ya que la pared celular se puede deteriorar.
-Tincin de cido alcohol resistencia (AAR). Se tie primero con un colorante, luego con un
segundo pero la decoloracin se utiliza con una mezcla de alcohol con cido clorhdrico. Se
decoloran todas las bacterias menos unas en concreto que pertenecen al gnero
mycobacterium, que son resistentes a la decoloracin del alcohol con cido clorhdrico ya que
no tienen pared celular. Esta tincin tiene valor diagnstico. Las micobacterias tienen un
elevado contenido en grasas, y esto hace que sean unas bacterias difciles de teir, al tener una
parte hidrfoba. Cuando en condiciones muy potentes conseguimos teirlas, son muy difciles
de destruir, solo con elevadas temperaturas.
- Otras tinciones:
-La tincin de esporas: Se utiliza en gneros Bacillus y Clostridium. Las esporas se forman
dentro de la bacteria. El colorante entrar en la espora y por lo tanto dentro de la bacteria.
Pero cuando se lava con agua, el colorante se elimina de las bacterias pero no de las esporas.
-La tincin negativa (campo oscuro): Se utiliza un colorante llamado nigrosina que tiene la
caracterstica de no tener afinidad por los microorganismos. En un portaobjetos, cerca de un
extremo se coloca la suspensin del microorganismo y al lado o encima se coloca una gota de
nigrosina. A continuacin se hace una extensin con un portaobjetos, lo desplazamos en la
superficie y la mancha se extiende por toda la superficie. Lo que se pretende obtener con la
extensin es que el colorante se quede en una lmina muy fina y as los microorganismos no lo
tapan, entonces saldr al microscopio un fondo oscuro y los microorganismos iluminados. Es
muy til para la observacin de cpsulas.
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2. CONCEPTO DE MICROORGANISMOS PUROS
En la naturaleza no hay cultivos puros de microorganismos, son poblaciones mixtas, salvo casos
excepcionales como en una persona enferma. El cultivo puro es un estado artificial de
laboratorio.
Los microorganismos estn por todos lados, por lo tanto los cultivos puros se pueden
contaminar, cosa que no se puede permitir. Por ese motivo cualquier material a utilizar para
manipular organismos puros debe ser estril, con unas condiciones tales que eviten la
contaminacin del material.
Una herramienta es el asa de siembra. La parte final se coloca en la llama de un mechero para
esterilizar el material. Trabajar bien implica no contaminar la muestra ni el propio laboratorio.
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3. MTODOS DE OBTENCIN DE CULTIVOS PUROS
Despus de un tiempo se observan puntos, que se van haciendo cada vez ms grandes, siendo
las colonias que se van generando.
Estos mtodos son muy comunes cuando estamos delante de una muestra con
microorganismos mayoritarios, pero si necesitamos cultivos puros de microorganismos
minoritarios estas tcnicas no son eficientes. Para ello, son necesarios otros mtodos:
Otra observacin es que hay microorganismos que son imposibles de cultivar sin clulas
presentes, un ejemplo son las rickettsias, bacterias patgenas que parasitan
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intracelularmente. Cultivarla en medios artificialmente no se puede, hay que ponerle una
clula. Lo mismo pasa con los virus, no crecen si no tienen una clula en la que parasitar.
En medio slido:
1. Tamao de la colonia.
3. Textura o consistencia: Colonias mucosas o secas. Las colonias mucosas son aquellas
que al cogerlas con el asa de siembra tienen adherido una sustancia viscosa. En las
colonias secas no se pueden coger con el asa de siembra.
En medio lquido:
1. Turbidez del medio: A mayor cantidad de bacterias, ms turbio ser el medio lquido.
3. Olor: Amplia variedad de olores, muchas enterobacterias tienen un olor fecal. Otros
microorganismos como la sachnomyes cerevisine tienen un olor agradable.
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5. MTODOS DE CONSERVACIN DE MEDIOS PUROS
II. Cubrir el medio slido con aceite mineral esterilizado: Se suele realizar en tubos
de ensayo con agar slido inclinado. Al aadir una capa de aceite evitamos que se
mezcle con el medio y protege al organismo del oxgeno (reaccin de oxidacin) y
la desecacin y se deja en una cmara fra hasta 4C.
III. Liofilizacin: Este mtodo es esencial para preservar las caractersticas del cultivo
puro. Se trata de la congelacin del producto y la posterior introduccin en una
cmara de vaco para realizar la separacin del agua por sublimacin. Se elimina el
agua desde el estado slido al gaseoso sin pasar por el estado lquido (a baja
presin y temperatura). En el vaco, a -80C, el agua pasa de estado slido a vapor
mediante un aparato llamado liofilizador. Se consigue eliminar prcticamente la
totalidad del agua libre contenida en el producto original, pero preservando la
estructura molecular de la sustancia liofilizada. As, los microorganismos son
viables durante dcadas.
ESTRUCTURA BACTERIANA
La estructura de una bacteria es muy parecida a la de una arquea.
Las bacterias tienen morfologa definida, y bsicamente tienen dos formas principales:
-Bacterias alargadas: Bacilos: Hay bacilos cortos y largos. En algunos casos los bacilos son muy
cortos y al verlos al microscopio se puede dudar. A veces, para definir estos bacilos cortos se
emplea el trmino cocobacilo.
Tambin existen otros aspectos que definen a las bacterias, como el tamao:
Los virus son muy simples y tienen un tamao mucho ms pequeo que las bacterias. Por otro
lado, tenemos el resto de microorganismos, microorganismos eucariotas, que en general son
de mayor tamao, puesto que son clulas eucariotas y tienen compartimientos extracelulares
(ncleo, mitocondria, aparato de Golgi).
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2. AGRUPACIONES QUEE PUEDE PRESENTAR UNA BACTERIA
En el caso de los cocos, se pueden dar distintas agrupaciones, puesto que al ser esfricos se
pueden dividir en cualquier plano.
plano La agrupacin
n ms simple son los cocos aislados.
Tenemos ms posibilidades:
Los bacilos al ser formas alargadas, cuando se dividen siempre se dividen de forma ecuatorial.
as).
-Numerosas y cortas (fimbrias
pelos y flagelos).
-Menos numerosas y largas (pelos
Por otro lado contiene peso seco (25%): ADN (3-4 %), ARN (10-20%), Lpidos (10%),
Polisacridos (20%), Y Protenas (50%).
No en todas las bacterias se tienen estos clculos, por ejemplo las que tienen cpsula tendrn
mayor nmero de polisacridos, o las que acumulan sustancias de reservas,, esto modificara el
porcentaje).
*El ARN puede variar bastante porque su cantidad tiene que ver con la velocidad de
crecimiento. El ARN en la clula puede ser muy variado (distintos tipos de ARN), aquella
bacteria que crece
rece rpido necesita mayor cantidad de ribosomas que la que crece ms lento.
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4. ESTRUCTURA DE LAS BACTERIAS
*No debemos confundirnos con las arqueas,, puesto que tienen una pared celular distinta a las
bacterias y no presentan Gram positiva ni negativa.
Gram positiva:
positiva Su
u pared celular es una estructura homognea, que se ve
uniforme en toda la superficie. Es bastante gruesa (400 A), mientras que la
membrana plasmtica puede medir ms o menos unos 80 A. Rodea a la
clula en toda la superficie.
Peptidoglucano: Macromolcula
acromolcula que forma una coraza que envuelve a toda la pared
p celular,
de modo que la clula tiene la forma que tiene la murena.
murena Por lo tanto,, su funcin es
morfolgica.
*Glucotetrapptido
El componente ms importante de la
pared celular es el peptidoglucano
(murena).
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Gram negativa:
negativ La pared celular
elular es ms fina y ms complicada porque
presenta
ta varias capas. Tenemos la membrana plasmtica,
plasmtica, membrana
mem externa
(que solo est en Gram negativas), y entre las dos membranas
branas existe el
periplasma o espacio periplsmico. La capa dee murena aqu es mucho ms
fina (20 A), no obstante,
obstante la funcin es la misma.
El enlace entre las cadenas distintas se realiza por un puente peptdico de 4 o 5 aminocidos
que une el cuarto aminocido de un tetrapptido con el tercer aminocido de otra cadena de
tetrapptidos. El cuarto aminocido, al ser el ltimo tiene el grupo carboxilo
carboxi terminal libre y es
por donde se une a la otra cadena.
Estos enlaces no se forman al 100% pero en Gram positivos la frecuencia es muy elevada.
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El otro componente que forma parte de las paredes son los cidos teicoicos, son polmeros
cidos de polialcoholes. Son derivados de dos alcoholes, del glicerol (3C con OH en todos) y del
ribitol (5C con OH en todos).
El enlace que une las cadenas de alcoholes se da entre los hidrxidos de los extremos,
formando enlaces fosfodister, el mismo enlace presente en los cidos nuclicos. Estos cidos
teicoicos estn dentro de la murena, y son antignicos. Tambin actan regulando o
controlando la biosntesis de murena.
Los dems grupos hidroxilos de las cadenas de alcoholes, como no estn en los extremos,
pueden unirse a distintas cadenas, como por ejemplo, a diferentes aminocidos.
Hay un grupo denominado cidos lipoteicoicos, que en un extremo est unido a una cadena
lipdica que est a su vez anclada a la membrana lipdica.
La capa es mucho ms fina, est formada por muchas menos capas de polisacridos.
Aqu la unin entre el cuarto aminocido entre una cadena polipeptdica y el tercer
aminocido de otra cadena es directa. (Puentes disulfuro).
Protenas: Las ms importantes son las porinas, que actan como poros que permiten
el paso de molculas pequeas, cada tipo de porina solo deja pasar un grupo de
molculas, son semiespecficas.
Lipopolisacrido: Puede dividirse en dos partes, una parte lipdica y otra parte
polisacardica. Sin embargo, en la parte polisacardica hay dos partes, el antgeno O, y
el ncleo interno. El ncleo interno sirve de puente entre la parte lipdica y el antgeno
O. El antgeno O, es una molcula antignica (En las Gram positivas son los cidos
teicoicos) y es especfica de especies.
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El lipopolisacrido tambin se le conoce con el nombre de endotoxina,, ya que es una molcula
txica, la responsable de aumentar la temperatura y desencadenar procesos inflamatorios en
los seres vivos. La bacteria
teria sintetiza una protena txica y la secreta fuera, entonces pasa a ser
una exotoxina. El carcter txico del lipopolisacrido radica en el lpido A.. La presencia de la
membrana externa le da unas caractersticas funcionales.
funcionales La superficie de la bacteria que
interacciona con el exterior es como si estuviese forrada de azcares, por ese motivo les
confiere resistencia a agentes (antibiticos, colorantes, desinfectantes) que solo pueden
atravesar la bicapa lipdica, pero no la membrana
membrana externa que est llena de polisacridos.
En las Gram negativas tambin encontramos el espacio periplsmico, que est entre la
murena y la membrana externa, hay cationes bivalentes, enzimas hidrolticos,
hidrolticos protenas
implicadas en la captacin de nutrientes,
nutri etc
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6. FUNCIN DE LA PARED CELULAR
7. BIOSNTESIS DE LA MURENA
Las arqueas es un grupo de microorganismos procariotas, con una pared celular distinta a las
bacterias, no tienen murena.
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8. CPSULA BACTERIANA
Las capsulas bacteriana son unas estructuras que no las tienen todas las bacterias. Formadas
por un material que la bacteria origina fuera de la clula, son unas estructuras bastante
grandes, incluso hay bacterias englobadas por una capsula. Segn el grado de compactacin,
cuando la cpsula es ms o menos consistente y el borde est definido, entonces hablamos
propiamente de cpsula. Pero hay casos en los que el material est difuminado, no se sale
dnde empieza y dnde acaba, entonces se habla de capa de mucosas.
Hay algunas bacterias que tienen cpsulas polisacardicas o peptdicas (hay excepciones como
los gneros de Bacilus). Cada especie tiene una composicin definida, y segn ella, hay dos
tipos de cpsulas: Homopolisacardicas (polmero formado por una subunidad concreta)
Heteropolisacardicas (polmero formado por distintas subunidades de azcares).
No es una estructura vital para la bacteria, no la necesita para vivir, solo le hace falta a la
bacteria cuando esta infectando, en un cultivo del laboratorio no le da ninguna ventaja, y
crecen perfectamente.
Pelos: Son ms gruesos y ms largos, pero menos numerosos que las fimbrias.
Son de naturaleza proteica. No son responsables de la movilidad de las clulas,
tienen como funciones la adhesin y el reconocimiento de bacterifagos. El
pelo sexual (la pili) permite un proceso de intercambio de material gentico
denominado conjugacin bacteriana.
Los flagelos estn firmemente anclados a la clula, al cuerpo basal, y su parte ms externa est
formado por protenas, por una subunidad que se repite, es la flagelina y forma una estructura
helicoidal. Hay una estructura intermedia que se denomina gancho,, que sirve de puente o
unin entre el cuerpo basal cilindro central que atraviesa las distintas capas de la pared y
membrana a travs de cuatro anillos y el flagelo.
Se denomina anillo L a un polisacrido que hay a nivel celular, un anillo P est anclado en el
interior de la murena, y el anillo MS est a nivel de la membrana plasmtica. Los dos anillos
estos estn unidos por unas protenas que constituyen el motor del flagelo.
flagelo. El flagelo est en
contacto con el citosol y la membrana plasmtica, y el cuerpo basal a la bacteria, la murena es
importante para el movimiento.
movimiento Todo est hecho a base de protenas.
Movimiento: El flagelo se mueve como un motor a propulsin, gira como una hlice y al girar
se desplaza. Consume energa, entonces hay un potencial de membrana, un bombeo de
protones de fuera a dentro, ya que fuera hay demasiada cantidad de protones, en cambio,
cambio en
el interior no.
Las bacterias con varios flagelos, estos flagelos tienen que moverse coordinadamente para
permitir el desplazamiento de la bacteria.
Se encuentra por debajo de la pared celular, es una estructura que est presente en todas las
bacterias y clulas vivas, es fundamental
fundamenta para cualquier clula,, de lo contrario no sera viable.
Como es una bicapa lipdica, hay pocas molculas que pueden atravesarla, molculas sin carga
o hidrfobas. Para ello la temperatura determina una caracterstica determinante, la fluidez.
Transporte pasivo: Molculas pasan a favor del gradiente de concentracin, sin consumo de
energa. Molculas solubles o carga neta 0.
Transporte activo: Molculas pasan en contra del gradiente de concentracin. Se implica una
protena de canal, de tal forma que se consume energa.
en
Las bacterias modifican la composicin de los fosfolpidos de la membrana para adaptarse a los
cambios de temperatura.
Las micoplasmas no tienen pared celular, necesitan unas membranas muy resistentes, es por
eso que estas bacterias s que tienen esteroles
e en la membrana.
El ribosoma es una estructura muy numerosa, una bacteria es un saco repleto de ribosomas.
ribosomas
Tiene dos subunidades, una grande y otra pequea. El ribosoma procariota (bacterias y
arqueas) se dice que es un ribosoma 70s,
70s y el ribosoma eucariota es 80s.. El 80s o 70s es el
coeficiente de sedimentacin, es decir, la velocidad en la que tarda en sedimentar tras una
centrifugacin.
El ARN-mensajero
mensajero es una molcula muy fina y larga, de tal forma que puede estar siendo
traducido por muchos ribosomas a la vez.
Estamos hablando de ribosomas 70s de las bacterias, y 80s de las eucariotas. Sin embargo, las
arqueas tienen 70s, ya que son parecidas a las bacterias estructuralmente, pero
funcionalmente se parecen ms a las 80s. Los antibiticos afectan a las 70s de las bacterias
como la estreptomicina.. En las arqueas no afecta.
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12. CROMOSOMA BACTERIANO
El ADN no est separado del resto de orgnulos, sino que est disperso por el citoplasma. Lo
que ocurre es que cuando se tie de colorantes, se tie una regin central denominada
nucleoide, que es donde se encuentra dicho cromosoma.
Caractersticas:
Es una explicacin muy compleja, una manera de explicar el proceso sera la siguiente:
Cada 20 min la poblacin se duplica, pero al cromosoma le cuesta 35 min replicarse. Esto es
posible porque la frecuencia de llegada la establece la de salida. Si una clula se divide cada 20
min, cada 20 min empieza a replicarse un cromosoma, antes de acabar un ciclo de replicacin
empieza otro. Si la replicacin empieza cada 20 min, cada 20 min acabar una replicacin
como la replicacin es ms larga. Cada 20 min el cromosoma empieza a replicarse.
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En un momento dado tienes un cromosoma que est empezando a replicarse y otro
cromosoma que ya se ha replicado. Entonces cuando la clula se empieza a dividir, el
cromosoma ya est un tiempo replicndose.
La sincronizacin es muy simple, tengo una bacteria con su cromosoma que est unido por un
punto a la membranaa plasmtica, la bacteria empieza a crecer y el cromosoma se replica. El
punto de unin a la membrana tambin se replica, la bacteria va creciendo y esos puntos de
unin van separndose. De manera que cuando acaba la replicacin, los cromosomas estn
separados
ados y luego se forma un tabique.
A parte del cromosoma bacteriano, las bacterias pueden tener informacin gentica
extracromosomal (fuera del cromosoma). Molculas pequeas de ADN bicatenario y cerradas,
que se denominan plsmidos.
plsmidos Los plsmidos le confieren
ren a la bacteria unas caractersticas,
tienen orgenes de replicacin propios y suelen estar en varias copias.
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13. INCLUSIONES CITOPLASMTICAS
Se incluyen unos acmulos de sustancias que forman estructuras dentro del citoplasma
(no son orgnulos). Pueden ser muy variados:
-Sustancias de reserva: Son acmulos de nutrientes que la clula almacena cuando tiene
un exceso de nutrientes. Se acumulan en forma de polmeros insolubles para evitar el
aumento de la concentracin intracelular. Este acmulo es reversible, cuando la bacteria
no tiene suficientes nutrientes puede consumir los nutrientes que almacena. Hay varios
tipos de sustancias de reserva, pero solo definiremos los ms importantes:
Glucgeno: Polmero lineal de glucosa con enlaces 1-4 que forma unos grnulos muy
numerosos de pequeo tamao. Si se tien son visibles con el microscopio, pero por la
microscopa ptica no. Los glucgenos sirven como fuentes de carbono, como fuente
de energa.
Azufre elemental: Hay bacterias que acumulan azufre elemental porque son especiales
para su metabolismo.
- Vacuolas de gas: Acumulan gas, pero son de naturaleza proteica, no son membranas, tiene la
capacidad de que en su interior se acumule gas. Est presente en bacterias acuticas y les sirve
para controlar su densidad.
Cuando una bacteria est en condiciones desfavorables porque le falta algn nutriente o la
temperatura no es la adecuada no pueden esporular.
Solamente unas pocas son capaces de formar esporas, que son las Bacillus y los
Clostridium, ambos son bacilos. Una caracterstica de la esporulacin es que el tamao de
la espora y el sitio donde se genera tienen importancia taxonmica. Tenemos especies en
que la espora se genera en el centro, se denomina espora central. En otras especies la
espora se forma en un extremo, se llama espora terminal. Y en otras no est ni en el
extremo ni en el medio, entonces se llama espora subterminal. En los tres casos, la espora
no es ms grande que el bacilo, la clula no se deforma, entonces la llamamos espora no
deformante. Hay otros casos en los que se deforma y se denomina espora terminal
deformante. Esto es caracterstico de cada especie.
En las tinciones se puede ver la espora fuera de la clula que se asla. La espora es una
forma de vida latente pero que sigue viva. En condiciones en que las formas vegetativas de
la bacteria dejan de funcionar, mueren, las esporas siguen viables y cuando encuentran un
medio en los que crecen se empieza a generar un bacilo. La espora no se multiplica, para
ello tiene que estar en un medio favorable y formar un bacilo que se multiplicara.
Las esporas son resistentes tanto a agentes fsicos como qumicos, son resistentes a las
radiaciones, a la desecacin, que son formas de termoresistencia. La espora es
impermeable a muchas sustancias qumicas, el colorante no tie la espora, tambin resiste
a los desinfectantes. Esto se debe a la estructura y composicin que tiene la espora.
La espora bacteriana consta de una serie de capas que no estn presentes en la clula
vegetativa:
NUTRICIN
Una bacteria crece y se divide, esto se debe porque ocurren en su interior reacciones. Este
conjunto de reacciones que posibilitan el crecimiento y divisin de la bacteria se denomina
metabolismo.
Cuando una bacteria crece se sintetizan todas las estructuras y componentes celulares, es por
eso que las reacciones del metabolismo son rutas de sntesis, es decir, anabolismo. Esta
biosntesis consume energa (ATP). Esto obliga a la clula a hacer otras reacciones de
degradacin de molculas para obtener energa, catabolismo.
1. QU ES UN NUTRIENTE?
Los nutrientes son molculas que la bacteria necesita coger del medio y utiliza para rutas del
metabolismo, ya sea rutas anablicas como catablicas. Para que una bacteria crezca debe
tener todos los nutrientes necesarios.
Las bacterias que tienen una elevada capacidad de biosntesis son poco exigentes
nutricionalmente, ellas se pueden sintetizar los compuestos necesarios. Y viceversa.
MACRONUTRIENTES:
Del peso seco el 95% son CHONPS, el 5% elementos metlicos como K, Mg, Ca, Na, Fe.
MICRONUTRIENTES:
Tan poca cantidad que no hace falta echarlos al medio cultivo, si esta contaminado.
o NITROGENO:
Tambin hay microorganismos que utilizan el nitrgeno atmosfrico, son las bacterias fijadoras
de nitrgeno, incorporan el nitrgeno atmosfrico.
Las molculas fijadoras de nitrgeno son los aminocidos y, consecuentemente, las protenas
tambin pero las protenas para ser nutrientes se deben degradar en aminocidos y estos ya
son consumidos.
o AZUFRE:
La fuente as habitual es el sulfato (SO42-) pero algunas utilizan el sulfuro (S2-), tambin hay
fuente de sulfuro orgnica, por ejemplo los aminocidos (la cistena, la metionina).
o FSFORO
Hay otra serie de nutrientes que tiene las siguientes caractersticas. Son molculas orgnicas
que hacen falta en muy pequea cantidad pero que con esenciales para la vida, son esenciales
porque son cofactores de reacciones enzimticas, si no estn, se bloquean las reacciones
metablicas, no se pueden sintetizar, un ejemplo muy importante son las vitaminas. Para las
bacterias que pueden sintetizar esa determinada molcula, no sera una vitamina.
Factor de crecimiento: Cualquier molcula que la bacteria necesita para crecer y que no puede
sintetizar. Debe estar obligatoriamente en el medio de cultivo. Se necesitan en pequeas
cantidades.
Vamos a clasificar a los microorganismos segn cul sea su fuente de energa y su fuente de
carbono para biosntesis (anabolismo).
Las bacterias tienen como clasificacin una clasificacin final de las dos anteriores:
- Fotoautrtofos: Utilizan la energa de la luz solar para fijar el CO2 (fuente de carbono
materia inorgnica).
- Fotohetertrofos: tiene como fuente de energa la luz y, como fuente de carbono, la
materia orgnica.
- Quimioauttrofos:
Litoauttrofos: Son los ms abundantes y viven en ecosistemas minerales, en
ausencia de materia orgnica y la energa la obtienen de oxidar molculas
inorgnicas. Tienen un bajo rendimiento y proliferan al no tener competencia.
Organoauttrofos:
- Quimiohetertrofos:
Litohetertrofos
Organohetertrofos: Ms abundantes, las mismas molculas sirven para
fuente de carbono y fuente de energa.
MICROBIOLOGA Eric Borrs
REQUERIMIENTOS FISICOQUMICOS
Para cultivar un microorganismo no solo hacen falta los nutrientes, hacen falta otros
requerimientos fisicoqumicos para que los microorganismos puedan crecer, son varios:
-Temperatura -pH
-Luz -CO2
Segn su origen:
Medios slidos: El medio es slido y los nutrientes est disueltos ya que hay agua, lo que pasa
es que tiene una sustancia solidificante, que es el agar, insoluble en agua fra. El agar no puede
ser utilizado por ningn microorganismo, no pueden degradarlo.
Segn la composicin:
Segn la utilidad:
METABOLISMO
El anabolismo es que a partir de compuestos muy simples se sintetizan componentes, estos
reaccionan entre s, son procesos de biosntesis y son bastante parecidos en todos los seres
vivos.
La respiracin: Tiene dos variantes, puede ser aerobia (con oxgeno) o anaerobia (sin oxgeno).
1. RESPIRACIN AEROBIA
Molculas de glucosa (C6H12O6) sufren una serie de reacciones y se oxidan a pirvico (3C), los
electrones que pierde la glucosa van al NAD + que se reduce en NADH. Las bacterias tienen
varias vas distintas en las que se realiza este proceso, la ms importante es la gluclisis. El
pirvico an se puede oxidar ms, en una etapa en la que entra el CoA y se desprende CO 2,
convirtindose en acetil CoA. Entra en el ciclo de Krebs donde se liberan dos molculas de CO 2
por cada una de acetil CoA. Tambin se reduce un cofactor, el FAD al FADH 2.
En definitiva:
2. RESPIRACIN ANAEROBIA
Hay otro aspecto importante en la respiracin anaerobia, es que el aceptor final debe tener un
potencial de reduccin menor al del oxgeno. Es decir, puede tener tambin un potencial de
reduccin menor al de un determinado transportador de tal manera que no hace falta que sea
el ltimo transportador el que le ceda los electrones al aceptor final, ya que no sera reducirse,
sino oxidarse, puede ser ms corta la cadena de transporte, y por lo tanto, enviar menor
protones fuera.
MICROBIOLOGA Eric Borrs
ATPasa: Consume el gradiente de protones y sintetiza ATP, y hacer lo contrario, consumir ATP y
expulsar protones, es un intercambiador de energa. De hecho el nombre ATPasa se debe a que
hidroliza ATP (a la segunda funcin).
Hemos visto que la respiracin aerobia, en la cadena de transporte de electrones los electrones
son cedidos al oxgeno y lo reduce, sin embargo, adems de formar agua tambin puede
formar otros productos que son agua oxigenada (H2O2) o el superxido (O2-) estas son muy
txicas y pueden acabar matando a la bacteria si se acumulan, por ese motivo, las bacterias
con respiracin anaerobia deben tener mecanismos para eliminar estas molculas, y para ello
emplean dos enzimas, que son la catalasa y el superxido dismutasa. Estas son dos enzimas
que se ocupan de eliminar las molculas txicas. La catalasa le quita el oxgeno al agua
oxigenada, formndose agua (H2O2 H2O + O2). El superxido dismutasa produce agua
oxigenada del superxido (2O2- + 2H+ H2O2 + O2).
Las bacterias anaerobias estrictas no tienen estos enzimas ya que en su hbitat no hay oxgeno.
3. FERMENTACIN
-No requiere la presencia de oxgeno, pero muchas veces no molesta, hay microorganismos
que fermentan con presencia de oxgeno.
-No hay cadena de transporte electrnico, por lo tanto, no se obtiene ATP por fosforilacin
oxidativa.
>La segunda etapa de la fermentacin es la reduccin del pirvico con los electrones del NADH,
que se transforma en los productos finales de la fermentacin, aqu tampoco se gana ni se
pierde electrones.
Tipos de fermentacin:
- Fermentacin heterolctica: Se obtiene lctico, pero tambin etanol y CO2. Este tipo
de fermentacin la hacen muchas bacterias, las ms importantes son las bacterias
lcticas. El yogur se obtiene por la fermentacin lctica de la leche, proceso realizado
por estas bacterias.
MICROBIOLOGA Eric Borrs
Nuestras clulas tambin pueden fermentar en los casos en los que no tenemos oxgeno. Al
hacer mucho ejercicio, podemos llegar a realizar la fermentacin lctica, el lactato se acumula y
precipita, dndonos la sensacin de agujetas.
Los littrofos son auttrofos y anaerobios: La sustancia inorgnica reducida se oxida, esos
electrones van a la cadena de transporte de electrones produciendo ATP. Necesitan mucho
poder reductor. Una caracterstica importante de los litotrofos en general es que en el
anabolismo utilizan el CO2 como fuente de carbono, sin embargo, no sirve como fuente de
energa. El proceso por el cual el CO2 se incorpora a materia orgnica es el ciclo de Calvin, este
proceso consume energa y aparte consume electrones. Esto se debe a que este proceso es
justo lo contrario que en la respiracin.
La molcula que se oxida puede ser distinta, la cadena de electrones se inicia en el potencial
redox de la molcula que se oxida, tiene que cederle los electrones a una molcula con un
potencial redox menor, la consecuencia es que la cadena respiratoria es ms corta que si la
molcula que se oxida fuese el oxgeno.
CRECIMIENTO MICROBIANO
Se trata del crecimiento de las poblaciones microbianas, como crece individualmente un
microorganismo.
Hay microorganismos que pueden presentar dos morfologas, una detrs de otra:
4. Medicin de la absorbancia de los cultivos: See emplea luz visible a 600nm. Cuantos
ms microorganismos haya en la muestra, menos luz pasar (ms turbidez),
turbidez) de tal
forma que la absorbancia ser mayor.
mayor Es el mtodo ms til en laboratorios porque
podemos hacer una grfica para cualquier tipo de microorganismo (Eje de Y =
Absorbancia a 600nm; Eje de X= nmero de microorganismos). Se obtendr una recta,
que acabar conn una curva (la absorbancia acabar siendo constante ya que llegar un
punto que no traspase la luz y seguir en aumento el nmero de microorganismos). El
nmero de microorganismos equivale al peso seco de microorganismos (como en el
apartado anterior).
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3. CURVA DE CRECIMIENTO DE UN CULTIVO PURO
Fase 1, Periodo de latencia:: El tiempo va pasando pero sin embargo, la poblacin no aumenta.
Es un periodo de adaptacin metablica y depende del tiempo que tarda la bacteria en
adaptarse.
>La
La falta de nutrientes.
nutrientes
>El
El acmulo de sustancias
sustanc txicas del metabolismo del microorganismo (se crece por
fermentacin alcohlica, entonces se acumula etanol).
Cultivo continuo: Los microorganismos nunca dejan de crecer, la masa microbiana est
siempre en crecimiento. Un microorganismo deja de crecer por dos razones, la escasez de
nutrientes o la acumulacin de sustancias txicas, de manera que si se necesita que no pare de
crecer hay que cambiar el medio de cultivo mediante un aparato denominado quimiostato. El
nutriente limitante es el primer nutriente que se va a acabar, si en el medio que hemos
cambiado, pongo el nutriente limitante podremos determinar la concentracin de
microorganismos y si recambiamos el medio, la bacteria seguir creciendo, la velocidad de
crecimiento se podr controlar con la velocidad de recambio del medio y la concentracin de
nutrientes limitantes servir para controlar la concentracin de microorganismos.
La fluidez de una membrana tambin depende de la temperatura del medio.. Una bicapa puede
pasar de estar en forma lquida y viscosa a una forma ms ordenada y cristalina, perdiendo
pues sus propiedades de movimiento. Si la temperatura es suficiente baja (fro),
(fro) la membrana
se solidifica y pierde su caracterstica de permeabilidad selectiva ya que las protenas dejan de
ser funcionales. En cambio, si la temperatura es muy alta,
alta las protenas pueden llegar a
desnaturalizarse.
2. pH
3. PRESIN OSMTICA
Es un mtodo de conservacin de alimentos. Los alimentos con una gran cantidad de sal o de
azcar no se contaminan ya que si cae un microorganismo, este pierde agua y se deshidrata.
En cambio hay microorganismos que pueden crecer en condiciones salinas muy altas. Son los
halfilos y hay dos tipos:
Halfilos estrictos: See han adaptado tan bien a vivir con altas concentraciones salinas que
nicamente pueden crecer en estas condiciones.
condiciones
-Aerobios estrictos: Organismos que para poder crecer necesitan oxgeno, nicamente crecen
as. Hay algunas especies que siendo aerobios estrictos crecen a bajas concentraciones de
oxgeno (microaerfilos), crecen mejor as.
-Anaerobios estrictos: Es el caso contrario, para poder crecer necesitan ausencia total de
oxgeno. El oxgeno es txico para ellos.
Segn su metabolismo:
S que existen porque, para empezar no tienen ni H2O2 ni O2-, entonces no tienen cadena de
transporte de electrones, entonces aunque haya oxgeno nunca utilizan el oxgeno como
aceptor electrnico. Entonces son organismos que consiguen la energa por fermentacin. Se
les llaman anaerobios aerotolerantes: No adaptan su metabolismo, siempre fermentan.
El cultivo de organismos anaerobios estrictos hay que hacerlo en una atmsfera sin oxgeno,
adems de los dems parmetros que hay que tener en cuenta para hacer un cultivo
El primer mtodo consiste en aadir a los medios de cultivo sustancias reductoras como la
cistena, el sulfuro de sodio (Na2S), el cido ascarbato, el tioglicolato, etc Disminuyen el
potencial redox bajo, como con sustancias reductoras el oxgeno se consume oxidando a las
molculas dichas anteriormente.
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El segundo mtodo es el ejemplo de jarras de anaerobios, es muy simple, se trata de un
recipiente de diferentes
ntes tamaos diseados para colocar dentro las placas petri; este
recipiente tiene un cierre hermtico, las atmsferas no estn en contacto pero tienen la misma
composicin. Inyectamos gas por un extremo y el gas desplaza la atmsfera normal, pero en la
prctica se utiliza muy poco. Lo que se hace realmente es provocar una reaccin qumica que
produzca la consumicin de oxgeno en la molcula mediante combustin.
El tercer mtodo es cubrir el medio con parafina que evita el contacto con la atmsfera.
La sequedad inhibe el crecimiento y mata a los microorganismos, unos son sensibles y mueren
enseguida, y otros aguantan un poco ms. Hay unos microorganismos que se llaman xerfilos
que son un poco ms resistentes a la sequedad.
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5. RADIACIONES
La luz UV tiene un efecto negativo sobre los microorganismos, esta luz proviene del Sol.
Sol La
capa de ozono
ono absorbe gran parte de la luz UV que llega a la Tierra. A dosis bajas,
baja induce
mutaciones y a dosis altas mata microorganismos.
microorganismos
La longitud de onda del UVV es de 260 nm, es un efecto muy superficial, entonces la luz UV
U se
utiliza para tratar ambientes.
Las radiaciones X y Gamma ()) tienen menor longitud de onda, por lo tanto emiten ms
radiacin y son ms letales no solo para los microorganismos, sino tambin para otras formas
de vida como los mamferos.
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TEMA 8
1. EL CALOR
En el calor
alor o temperatura elevada:
El tiempo de muerte trmica: El periodo de tiempo ms corto, el mnimo que hace falta para
destruir completamente a una poblacin microbiana a una temperatura y en unas condiciones
cond
determinadas.
Estado fisiolgico del microorganismo: Las bacterias que estn en crecimiento exponencial
son ms sensibles que los que estn en fase estacionaria. Las esporas son formas de
resistencia, y sobre todo, formas de termorresistencia.
Aire caliente (horno Pasteur): Se dejan durante 3 horas a 180C. Por debajo de 140C.
En un principio las esporas son resistentes.
Limitacin: No se puede meter en el horno los medios lquidos porque sino hervira y
se secara todo. Solo sirve para materiales que no contengan agua como el material de
vidrio.
Incineracin o flameado: Se trata de quemar la muestra esterilizada. Esterilizacin
automtica: Se utiliza para eliminar restos biolgicos contaminados con patgenos
peligrosos. Un ejemplo es la esterilizacin del asa de siembra.
Hay una variacin de la autoclave que es el vapor fluyente.. Cuando hay que estabilizar por
calor hmedo, se inyecta a los grandes equipos vapor a sobrepresin. Esto imita
mita el efecto de la
autoclave.
Pasteurizacin: Pasteur prob a calentar el vino para evitar que se hiciese malo.
Consiste en aplicar un calor moderado durante
durante un periodo no muy largo. La L idea es
destruir a los microorganismos pero preservando intactas las caractersticas orgnicas
del producto, es decir, creando un equilibrio.
equilibrio Por ejemplo, a 80C,, durante quince
minutos, se destruyen los microorganismos vegetativamente pero no se destruyen las
esporas. Un calentamiento ms suave a mayor tiempo (60C durante treinta minutos)
puede llegar a eliminar todos los patgenos pero sin esterilizar el producto. La
pasteurizacin de la leche se realiza para eliminar la carga microbiana o por lo menos,
muchos microorganismos y no las esporas, garantizando la la duracin del producto. La
pasteurizacin flash consiste en calentar la leche a 72 C sin esterilizarla, sin eliminar
sus esporas bacterianas.
Uperizacin: Este s que es un mtodo de esterilizacin,
esterilizacin, es un tratamiento a 120C
120
entre 1 y 20 minutos.. Como es tan rpido, no se altera mucho el producto. El problema
de este mtodo es que la industria que lo realiza debe tener un equipamiento
adecuado y costoso,, cosa que encarece un poco el proceso.
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2. AGENTES FSICOS
Desecacin: Consiste en la eliminacin del agua. La prdida de agua produce una inhibicin
del crecimiento microbiano. Es un buen mtodo de conservacin, ya que sin agua no proliferan
los microorganismos.
Los rayos X: Son difciles de manipular, son letales para toda forma de vida.
Los rayos Gamma (): Son muy penetrantes, atraviesan grandes espesores. Se utilizan
para esterilizar paquetes con alimentos empaquetados.
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Las ondas snicas y ultrasnicas: Los ultrasonidos son ondas de elevada frecuencia. No los
podemos or pero cuando atraviesan un lquido con microorganismos en suspensin mata a la
mitad de la poblacin. No son tiles para esterilizar o desinfectar. S que se utilizan para
obtener extractos celulares.
MTODOS MECNICOS
-Filtracin: Mtodo de esterilizacin que se aplica con disoluciones con molculas con
actividad biolgica que no se pueden tratar ni con calor ni con radiacin para no desnaturalizar
las protenas que intervienen en la actividad biolgica. Se hace pasar la muestra por un filtro
que tiene millones de poros y se puede conocer las dimensiones del poro, puede haber poros
de 0,01 micrmetros en los que los virus o las partculas de microorganismos quedan
retenidos. Lo que pasa por el filtro se esteriliza. Los problemas que tiene este mtodo son
varios, uno de ellos es que es un proceso lento, para acelerar el paso del lquido hay que
aplicar una presin, positiva por arriba, o negativa por debajo. Hay que tener la siguiente
precaucin, el recipiente donde recojo el lquido tiene que estar estril. La solucin que se
filtra tiene que estar muy limpia porque si no, se obtura el filtro y entonces ya no pasara
lquido. Los filtros pueden ser en cuanto a su composicin, de porcelana, de celulosa, de
amianto (asbesto) o de vidrio poroso.
3. AGENTES QUMICOS
Desinfeccin: Un desinfectante es una sustancia qumica que desinfecta, que destruye a los
microorganismos pero no siempre a las esporas. La ebullicin es un agente fsico que
desinfecta pero no esteriliza. Los desinfectantes son bastante txicos, ya que no distinguen
entre los microorganismos y nuestras clulas, por ese motivo, normalmente se aplican sobre
un material inerte o inanimado. Por eso se dice que no tienen toxicidad selectiva. Los
antispticos son un grupo de desinfectantes ms suaves, que se pueden colocar sobre la piel y
aplicar en las heridas. Evita que los microorganismos proliferen los tejidos, tienen toxicidad
selectiva.
Quimioterapia: Cura las enfermedades infecciosas mediante las sustancias qumicas. Los
quimioterpicos antimicrobianos son estas sustancias qumicas. Tienen que destruir al
microorganismo sin que afecte a nuestras clulas, tienen toxicidad selectiva.
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Conceptos:
Mtodo de difusin en agar, o halos de inhibicin: Esta tcnica se utiliza para ver la
capacidad microbiana de los desinfectantes o para valorar la resistencia de los
microorganismos a los quimioterpicos. Consiste en hacer una suspensin de microorganismos
en una placa petri con medio de cultivo, no para aislar colonias, sino para sembrar
completamente la placa. Antes de incubar se coloca un papel de filtro que contiene una cierta
cantidad de sustancias (X) en medio de placa, entonces ya se lleva a una estufa a incubar. El
medio como es slido lleva agua, el desinfectante X empieza a difundir en todas direcciones y
diluyndose en el medio, entonces alrededor del disco se crea un gradiente de
concentraciones. A medida que nos acercamos al disco hay ms concentracin. Entonces el
microorganismo crecer a lo largo de toda la placa hasta un crculo que hay alrededor del
disco, en el cual no hay crecimiento del microorganismo, hay un halo de inhibicin. En un
punto del crculo debe haber una concentracin mnima inhibitoria. Es una medida indirecta
de la CMI. El halo es inversamente proporcional a la CMI, cuanto ms sensible es un
microorganismo, ms grande ser el halo.
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Cuanto ms resistente sea el microorganismo, ms pequeo ser el halo. Se puede hacer ms
de un disco. Los halos de inhibicin dependen de la cantidad de agente microbiano.
TEMA 9
Jabones naturales: Sales sdicas/potsicas de cidos grasos de cadena larga con una
base. El cido graso + la base forma agua con la cadena larga carbonada COO-Na. La
parte del cido graso con el grupo carboxilo negativo es la que tiene la actividad
detergente. Disuelven los lpidos de membrana, desinfectan y lavan. Estas molculas
tienen algunos inconvenientes, la actividad detergente (antimicrobiana) reside en el
anin, entonces cuando ocurre deben emplearse medios cidos. Los grupos carboxilos
que son cidos dbiles en medio cido cogen un protn y se desactivan, pierden su
actividad. O en aguas pesadas con calcio y magnesio tambin pierden sus propiedades.
Detergentes sintticos: Actan exactamente igual que los jabones pero son de origen
sinttico formado en el laboratorio. La parte que tiene actividad tensoactiva y de
detergente puede ser el anin o el catin. Desnaturalizan protenas, al alterar su
conformacin o inactivar enzimas.
cidos y bases fuertes: Se usan muy poco ya que son muy corrosivos. Causan la
hidrlisis de los enlaces celulares. No son antispticos y se usan a nivel de laboratorio.
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Alcoholes: Etanol o isopropanol son los nicos que se utilizan como desinfectantes. No
se utilizan alcoholes ms largos porque tienen problemas de solubilidad. Son efectivos
cuando estn en solucin acuosa en concentraciones de 70-80%. No destruyen las
esporas. Tambin disuelven lpidos. Son antispticos.
Metales pesados: La parte activa son los cationes. El mercurio, la plata y el cobre.
Desinfeccin de piscinas para la proliferacin de algas. El nitrato de plata tambin se
utiliza para la oftalmina gonococida geonatal, gonorrea..
TEMA 10
AGENTES QUIMIOTERPICOS
La quimioterapia es el empleo de sustancias qumicas para el tratamiento de de las
enfermedades causadas por los microorganismos (enfermedades infecciosas).
Quimioterpico: Sustancia qumica que se suministra a personas para curar las enfermedades.
Naturales: De origen natural, puede provenir de las plantas como la quinina para
tratar la malaria. Tambin pueden provenir de fondos marinos para los productos
farmacuticos. Los ms importantes son los antibiticos, que es un grupo de
quimioterpicos naturales fabricados por los propios microorganismos, que tienen
actividad microbiana.
Sintticos: Molculas de sntesis qumica en el laboratorio. Estas sustancias entran en
nuestro cuerpo y tienen que cumplir muchos requisitos. Desde el punto de vista
microbiolgico el requisito ms importante es el de la toxicidad selectiva. Tienen que
ser txicos para los microorganismos e inculos para las personas (que no afecte a las
clulas eucariotas). La toxicidad selectiva se debe a que cada quimioterpico acta
sobre un microorganismo inhibindolo porque acta sobre una estructura o ruta
metablica tpica de los microorganismos, y este sitio por donde acta el
quimioterpico cuya diana est solo sobre los microorganismos y no sobre nuestras
clulas, a esto se le llama toxicidad selectiva. Por si las tiene sobre todas las clulas no
tendr toxicidad selectiva.
Si un antibitico acta sobre una estructura que solo est en microorganismos, tendr
toxicidad selectiva.
A principios del siglo XX se empez a desarrollar, cuando se dieron cuenta de que los
microorganismos causaban las infecciones. Tambin es en esta poca cuando se dieron las
tinciones. Paul Erhcich pens que podran existir unas sustancias derivadas de colorantes.
Pens que podan existir algunas sustancias que intervinieran con las clulas microbiolgicas
en vez de con todas las clulas porque no tean las clulas humanas. Eran los primeros
compuestos sintetizados que se utilizaban en la curacin de las enfermedades infecciosas
causadas por protozoos y bacterias.
En 1929 Fleming descubri la penicilina que se desarroll con la Segunda Guerra Mundial para
tratar heridas de los soldados
Existen tcnicas para el estudio de las resistencias de los microorganismos, teniendo en cuenta
la sensibilidad y la resistencia del microorganismo. Esto se denomina antibiograma.
4. EL ESPECTRO DE ACCIN
-Relacin de indiferencia: No
o tiene ningn efecto el uno sobre el otro, realizan su funcin por
separado.
-Sinergismo: Cuando
uando el efecto combinado de los dos quimioterpicos es superior a la suma de
cada uno de ellos separados, es decir, se potencia
potencia el efecto. Se aconseja la asociacin.
Una tira contiene el antibitico A, la bacteria crecer hasta que alcance la CMI, a partir de ah
se inhibir. Otra tira contiene el antibitico B, la bacteria crecer hasta que alcance la CMI.
Los antibiticos son sustancias antimicrobianas producidas por los propios micoorganismos.
No solo las bacterias producen antibiticos, los hongos tambin los producen. Cada especie o
gnero produce un antibitico (especificidad)
-Gnero Bacillus
-Bacitracina: Afecta a nivel del lpido transportador que se encarga de translocar la cadena
nueva de murena.
-Las penicilinas y las cefalosporinas: Son producidas por hongos. Se llaman antibiticos -
lactmicos ya que en ambos casos tienen un anillo lactmico.
La penicilina para ser bactericida, la bacteria tiene que estar en crecimiento, sintetizando
murena porque, si no crece, la penicilina no tiene efecto. Entonces si no hay sntesis de
murena, la penicilina no sirve.
Si actan sobre la subunidad pequea (30s): Los inhibidores son los aminoglucosdicos
(estreptomicina, neomicina, kanamicina) y tetraciclinas.
Si actan sobre la subunidad grande (50s): Los inhibidores son el cloramfenicol,
eritromicina (antibiticos macrlidos), lincomicina, etc
Las equinocandinasas son antibiticos antifngicos que se utilizan para tratar infecciones
fngicas. La glucansintasa es una enzima que est en la membrana plasmtica de los hongos, y
sintetiza glucano (polisacrido de la pared celular de muchos
muc hongos). Son una alternativa a los
antibiticos que actan sobre las membranas biolgicas, como la anfotericina B.
Hay millones de microorganismos, y antibiticos tambin hay muchsimos, pero no todos los
antibiticos afectan de la misma forma a todos los microorganismos, hay unos ms sensibles
que otros. Hay dos tipos de resistencia:
Factores de resistencia (factores R): Genes que codifican las protenas responsables
de la resistencia, que se encuentran en plsmidos. Los plsmidos son molculas de
ADN circular independientes al ADN de la bacteria, y que tienen un origen de
replicacin propio. Los plsmidos se transfieren por conjugacin entre bacterias, eso
hace que la resistencia se transmita de una bacteria a otra y que no sea de forma
hereditaria.
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11. MECANISMOS POR LOS CUALES UNA BACTERIA ES RESISTENTE A LOS
QUIMIOTERPICOS