JOURNAL READING

Difference Expression of Matrix Metalloproteinase-1 (MMP-1) in Primary

Progressive Pterygium After Subconjunctival Injection of Mitomycin C and 5-
Fluorouracil

Diajukan Guna Melengkapi Tugas Kepanitraan Klinik

Bagian Ilmu Penyakit Mata

Rumah Sakit Umum Daerah R. Soedjati Purwodadi

Disusun oleh :
Lisa Ikha Herwiani
01.2011.6435

Pembimbing :
dr. Rakhmasari Yan Ananta, Sp.M
 FAKULTAS KEDOKTERAN
UNIVERSITAS ISLAM SULTAN AGUNG
SEMARANG
2016

LEMBAR PENGESAHAN

Difference Expression of Matrix Metalloproteinase-1 (MMP-1) in Primary

Progressive Pterygium After Subconjunctival Injection of Mitomycin C and 5-
Fluorouracil

Diajukan Guna Melengkapi Tugas Kepanitraan Klinik

Bagian Ilmu Penyakit Mata
 Disusun oleh :

Lisa Ikha Herwiani

012116435

Telah disetujui dan disahkan oleh :

Dokter pembimbing

dr. Rakhmasari Yan Ananta, Sp.M

Perbedaan Ekspresi Matrix Metalloproteinase-1 (MMP-1) Pada Primer Progresif Pterygium
Setelah Injeksi subkonjungtiva dengan Mitomycin C dan5 Fluorouracil

ABSTRAK

Tujuan dari penelitian ini adalah untuk membandingkan ekspresi matriks metalloproteinase-1
pada pterygium primer setelah mitomycin C dan 5-Fluorourasil injeksi subconjunctival. Ini
merupakan studi cross sectional. Ada 54 subjek yang termasuk, dibagi menjadi 2 kelompok,
kelompok mitomycin C (n = 27) dan 5-Fluorour acil kelompok (n = 27), disuntikkan seminggu
sebelum insisi. Fivetyfour formalin-fixed, paraffin-embedded dari jaringan pterygium yang
terdaftar dalam penelitian ini. Mereka sampel dianalisis secara imunohistokimia, dengan MMP-1
antibodi monoklonal (IM 135L) untuk menentukan ekspresi MMP-1. Hasil penelitian ini
menunjukkan, ekspresi MMP -1 dalam kelompok mitomycin C adalah 13,22 12,59 dan 5-
Fluorourasil kelompok adalah 12,00 7. Tidak ada perbedaan statistik signifficant antara dua
kelompok dengan P> 0,05 (p = 0,669, Mann-Whitney test). Karakteristik dasar antara kedua
kelompok adalah serupa. Kesimpulannya penggunaan antiproliferasi dan agen antifibrotic seperti
mitomycin C dan 5-fluorourasil sebagai terapi adjuvant dapat memberikan pengaruh dalam
ekspresi MMP-1.

Introduction

Pterygium adalah berbentuk segitiga pertumbuhan jaringan fibrovascular dari konjungtiva dan
subconjunctiva bulbi sekitarnya dengan epitheliums konjungtiva dan jaringan hipertrofi
subconjuctiva yang tumbuh dari sisi medial ke lateral dari celah interpalpebrae ke kornea
memperluas dan infiltrat permukaan kornea dengan apex tumbuh ke arah pupil. Pterygium dibagi
menjadi bagian apeks atau kepala menyerupai kepala avaskular, pulau Fuch atau pulau Fuch dan
garis epitel Stocker dapat ditemukan di tepi kepala, corpus dan collum.

Degradasi membran Bowman atau matriks extracelullar mungkin berhubungan dengan enzim
protein extracelullar beberapa MMP. Saat MMP mungkin melibatkan pertumbuhan pterygium
dan disarankan untuk bekerja pterygium pemeriksaan kultur jaringan nduct untuk melihat
kolagenase (MMP-1) dan gelatinase (MMP-2, 9). MMP-1 dan MMP-2, 9 telah diperkirakan.
Matrix Metalloproteinase (MMP) adalah keluarga dari metalloenzyme endopeptide-tergantung
dan umumnya merupakan enzim kelas yang responsibles untuk extracelullar degradasi matriks
(ECM). Enzim ini disekresikan dan disintesis oleh beberapa jenis sel termasuk fibroblast.

Baru-baru ini, dilaporkan bahwa ekspresi peningkatan MMP pada pterigium. Ekspresi MMP-1,
MMP2, dan MMP9 peningkatan sel pterygium yang menyerang lapisan membran Bowman.
Mereka MMP adalah anggota paling penting yang bertanggung jawab dalam proses
penghancuran Bowman membrane.

Salah satu metode yang digunakan untuk menurunkan aktivitas fibroblast adalah dengan
menggunakan mitomycin C dan 5-fluorouracil (5-FU). Mitomycin C adalah agen antiproliferatif
berasal dari Streptomyces caespitosus. Ini adalah inhibitor poten dari proliferasi fibroblast oleh
sintesis inhib Iting DNA (fase G dan S) dan fungsinya. Selain itu juga bertindak sebagai
antineoplastik, antibiotik, dan antimetabolit. obat ini adalah 100 kali lebih kuat daripada 5-
fluorouracil (5-Fu). 5-Fu adalah antagonis pirimidin yang menghambat proliferasi fibroblast. Ia
bekerja dengan menghambat sintesis enzim timidin dan pengaruh replikasi fase S dan bekerja
pada RNA.
Method

Penelitian ini adalah penelitian cross-sectional. Subyek dialokasikan untuk kelompok perlakuan
secara acak. Oleh karena itu, masing-masing subjek memiliki kesempatan yang sama untuk bisa
mendapatkan satu pengobatan tertentu. Subyek penelitian adalah pterygium pasien yang
mengunjungi oftalmologi Departemen RS dr Sardjito Yogyakarta, dan jaringan yang memenuhi
kriteria inklusi dan eksklusi. Ada 54 orang, terbagi menjadi 2 kelompok, mitomyicin kelompok C
injection (n = 27) dan kelompok 5-fluorouracil injeksi (n = 27). Ekstirpasi dilakukan satu
minggu setelah postinjection subconjunctival. Maka ekspresi tingkat MMP-1 dievaluasi dengan
melakukan pemeriksaan immunohystochemistry dari MMP-1 (IM 135L).

Result and discusion

Penelitian ini dilakukan di Ophthalmology Departemen RS dr Sardjito Yogyakarta dan

jaringannya. Mulai dari Oktober 2007 sampai Maret 2008. Ada 54 subyek yang memenuhi
kriteria inklusi dan eksklusi. Subyek dibagi menjadi kelompok pterygium 5 dengan mitomycin C
injeksi subconjunctival (n = 27) dan kelompok pterygium dengan 5-fluorouracil injeksi
subconjunctival (n = 27). Kemudian, semua mata pelajaran mengalami MMP-1 pemeriksaan
ekspresi. Subjek berusia kurang dari 50 tahun (antara 27-50 tahun dengan rata-rata 45,5 + 4,05
tahun). karakteristik dasar terdiri dari distribusi usia, jenis kelamin, dan pterygium kelas dapat
dilihat pada tabel 1.

Kedua kelompok menunjukkan tidak berbeda signifikan berdasarkan umur (P = 0,159). frekuensi
subjek antara laki-laki dan perempuan adalah 27:27. Tidak ada perbedaan yang signifikan antara
dua kelompok berdasarkan distribusi jenis kelamin (p = 0,057). Pada penelitian ini ada progresif
pterygium primer kelas 2 sebanyak 29 banyak (53,7%), kelas 3 sebanyak 16 kasus (29,6%), dan
kelas 4 sebanyak 9 kasus (16,65%) untuk kedua kelompok. Deskripsi tentang tingkat gradasi
pada pterygium subjek ditampilkan secara konsisten tidak signifikan berbeda (p = 0,158). UV
cahaya itu penelitian ini adalah tertinggi di> 5 kelompok jam per hari (55,6%) dari <5 jam per
hari (44,4%). Tidak ada arti yang signifikan antara kedua kelompok (p = 1.00). Pterygium
dengan injeksi mitomycin C dan 5-fluorouracil diperiksa oleh immunohystochemistry untuk
memahami ekspresi MMP-1. Ekspresi MMP-1was disajikan pada Tabel 2. Sarana ekspresi
MMP-1 pada kelompok pterygium dengan mitomycin C injeksi 13,22 + 12,59 dan kelompok
dengan 5-FU injeksi 12.00 + 7.71 dengan nilai p> 0,05 (p = 0,669, Mann tes -Whitney). Pada
kelompok pterygium dengan mitomycin C injeksi, ekspresi terendah MMP-1 adalah 0 dan
tertinggi adalah 48 sel positif per 100 sel. Sementara itu, kisaran injeksi subconjunctival 5-FU
antara 0 dan 31 sel positif per 100 sel. Untuk menguji pengaruh paparan sinar UV dan usia untuk
ekspresi MMP-1 pada progresif primer pterygium, kita telah melakukan analisis oleh
stratificating periode paparan sinar UV dan kelompok usia sesuai dengan ekspresi MMP-1.
Dalam penelitian ini, berarti ekspresi MMP-1 baik kelompok perlakuan terhadap paparan sinar
UV <5 jam pada mitomycin C kelompok injeksi 15.92+ dan 5-Fu injeksi kelompok 7.58 + 7.88
dengan p> 0,05 (p = 0,139). Sementara itu, dengan sinar UV eksposur> 5 jam, mitomycin C
kelompok injeksi 11,07 + 7,30 dan kelompok injeksi 5-Fu adalah 7.40 + 5.37, p <0,05 (p =
0,045). Berarti ekspresi MMP-1 pada kedua kelompok perlakuan terhadap usia 24-44 tahun pada
injeksi
mitomycin C kelompok injeksi 6,9 + 2,73 dan 5-Fu injeksi kelompok 6.38 + 2.45, p> 0,05 (p =
0,6777). Satu-satunya yang berbeda adalah pada kelompok usia 45-50 tahun. Dalam kelompok
ini, mitomycin C kelompok injeksi adalah 16,9 + 14,62 dan 5-Fu kelompok injeksi adalah 7.95 +
7.56 p <0,05 (p = 0,024). Burratto 2000, mengatakan bahwa prevalensi pterygium tidak
tergantung pada jenis kelamin. sinar radiasi UV terus menerus dalam jangka waktu yang lama
akan menyebabkan terhambatnya mensintesis DNA, RNA, dan protein dan juga mengubah
permeabilitas dan motilitas albedo sinar cell.6,7 UV menyebabkan mutasi pada TP53 gen tumor
supressor di sel basal limbal orangtua dan fibroblast elastin gen di epitel limbal. Sel-sel ini
membuat material yang abnormal berbagai elastis dan ekspresi MMP.3 Berarti ekspresi MMP-1
pada kedua kelompok perlakuan terhadap usia 25-44 tahun pada kelompok mitomycin C injeksi
adalah 6,9 + 2,73 dan 5-Fu kelompok injeksi adalah 6.38 + 2.45, p> 0,05 (p = 0,677). kelompok
usia 45-50 tahun mengungkapkan mitomycin C injeksi adalah kelompok injeksi 16,9 + 14,62 dan
5-Fu adalah 7.95 7.56, p <0,05 (p = 0,024). Karakteristik pterygium adalah invasi permukaan
kornea melalui penghancuran Bowman Membran dan kolagen yang rusak. sel pterigium
menyerang membran Bowman hingga meningkatkan produksi dari matriks metalloproteinase
(MMPs) yang mengubah limbal stem cell basal dan diaktifkan fibroblast.3 Degradasi membran
Bowman mungkin berhubungan dengan enzim protein ekstraseluler atau beberapa MMP.3,6
Identifikasi 6 jenis 9 MMP yang berbeda dalam meningkatkan sel epitel basal dan ekspresi
MMP-1 ditemukan sebagian besar pada fibroblast pterygium dan juga sering di Bowman lapisan
separately.3,6 Li et. Al. (2001) digunakan untuk kultur in vitro yang menunjukkan peningkatan
MMP-1 dan MMP-3 pada pterygium fibroblast, (Dharmawan et.al., 2007)
menyatakan bahwa ada peningkatan ekspresi MMP-1 pada pterygium.2 primer progresif
Penggunaan obat antimetabolit dan antiproliferatif pada mata telah digunakan untuk terutama
pada sisi glaukoma untuk memeriksa keberhasilan operasi filtrasi. Mitomycin C adalah agen
antiproliferatif yang functionated sebagai metabolit activator melalui pengurangan proses untuk
alkil agen yang melintasi DNA dan berkata lebih kuat karena bisa mengganggu setiap fase dari
sel sabit, tidak hanya mengganggu replikasi DNA, tetapi juga menghambat mitosis dan protein
sintesis. Mitomycin C dan 5-Fu memiliki peran yang sama dalam menghambat pertumbuhan dan
replikasi fibroblast.4 Dalam penelitian ini, ditemukan bahwa baik mitomycin C atau 5-FU
berpengaruh terhadap ekspresi konsentrasi dari MMP-1 meskipun secara statistik tidak
signifikan. Mitomycin C ditekan proliferasi dari pertumbuhan sel dengan menghambat DNA
synthesize.8,9 Nending et.al. 2004 mengatakan bahwa 5-Fu suppresed proliferasi fibroblast
dengan menghambat sintesis DNA kompleks yang menginduksi oleh TGF- pada pembentukan
jaringan parut di kulit. Dikatakan bahwa mitomycin C lebih kuat dan memiliki efek yang berdiri
lebih lama dari budaya fibroblast, sementara 5-Fu hanya berdiri lebih dari 7 days.4 Mitomycin C
memiliki efek yang berdiri sampai satu bulan terhadap budaya fibroblast
Gambar

Sementara itu 5-FU hanya berdiri selama 7 days.4 Selain itu, ditemukan bahwa meskipun kedua
agen bekerja dengan menghambat sintesis DNA pada sel sabit, mitomycin C menghambat DNA
pada semua fase sel, sementara 5-Fu selektif hanya menghambat DNA pada fase S dan G2. Hasil
dari cochcrane dibandingkan yang mitomycin C dan 5-Fu menunjukkan bahwa kedua agen
memiliki efek yang sama dalam menghambat proliferasi fibroblast.10 Untuk menilai hubungan
antara variabel, diukur dengan menggunakan regresi linear terhadap hubungan antara ekspresi
MMP1 terhadap kelompok umur, pendidikan, pekerjaan, dan jangka panjang paparan sinar UV.
Tidak ada perbedaan yang signifikan secara statistik antara 4 variabel.
CONCLUTION

Berdasarkan penelitian, dapat disimpulkan bahwa berarti ekspresi MMP-1 pada pterygium
dengan mitomycin C injeksi 13,22 12,59 dibandingkan dengan injeksi 5-Fluorourasil 12,00
7,71 statistik tidak signifikan p> 0,05 (p = 0,669 , Mann-Whitney test). Tidak ada perbedaan
statistik antara umur, jenis kelamin, pterygium kelas, dan paparan sinar UV. Berdasarkan hasil
dan pembahasan pada penelitian ini, dapat disimpulkan bahwa MMP-1 tidak berbeda secara
signifikan antara kelompok injeksi mitomycin C dan 5-fluorouracil kelompok injeksi
subconjunctival. Kedua obat antiproliferatif bisa mempengaruhi tingkat MMP-1 ekspresi
pterygium. Berlebihan MMP-1 ekspresi pterygium pasien dapat ditekan dengan menggunakan
mitomycin C injeksi dan studi 5-Fluorouracil.This menunjukkan bahwa kedua obat ekspresi
dipengaruhi MMP
Daftar pustaka

1. TanD.H. Pterigium, Ocular Surface Disease. Medical and Surgical Managemant.

Springer-Verlag New York Inc 2002. 65 91. 13.

2. Li D.Q., Lee S.B., Gunja S.Z., Liu Y.Q., SolomonA., Meller D.

Overexpressionof collagenase (MMP-1) and tromelysin (MMP-3) by pterygium
headfibroblast.Arch Ophthalmol 2001. 119 (1): 7180

3. Duskhu N., John M., Schultz GS., Reid T.W. Pterygia Pathogenesis:
Corneal Invasion by Matrix Metalloproteinase Expressing Altered Limbal Epithelial
Basal Cells. Arch ophthalmol 2001. 119 (5): 695706.

4. Lama P.J., Fechtner R. D., Antifibrotics and Wound Healing in

GlaucomaSurgery. Surv Ophthalmol 2003. (48): 314316.

5. Prabhasawat P., Tesavibul N., Leelapatranura K., Phonjan T. Efficacy of

Subconjunctival 5-Fluorouracil and Triamcinolone Injection in Impending Recurrent
Pterygium.Ophthalmology 2006. 113: 11021109.

6. Di Girolamo N., Mc Clunskey P., Lloyd A., Coroneo M.T., Wakefield D.

Expressionof MMPs and TIMPs in human pterygia and culturedpterygium epithelial
cells. Invest Ophthalmol Vis Sci 2000. 41 (3): 6719.

7. Ang L.P.K., Chua J.L.L., Tan D.T.H.Current Concepts and techniques inpterygium
treatment, Curr Opin Ophthalmol 2007. 109: 175255.

8. Wendling J., Marchand A., Mauviel A. Verrecchia F. 5-Fluorourasil Block

Transforming Growth Factor--Induced a2 Type I Collagen Gene (COL 1A2)
Expressionin Human Fibroblast via c-jun NH2Terminal Kinase/Activator
Protein-1 Activation. Mol Pharmacol 2004. 64: 70713.

9. Kim T., Pak HJ., Lee SY., Tchah H., Mitomycin C-Induced Reduction of Keratocytes and
Fibroblast after Photorefractive Keratectomy. Invest Ophthalmol Vis Sci 2004. 45: 2978
2984.
10. Schlottman P. G., Clarke J. C. K. Mitomycin C versus 5-Fluorourasil for wound
healing in glaucoma surgery (protocol). The Cochrane Collaboration. Cochrane Database of
Systemic 2009. Reviews 1:17.