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Rev Soc. Ven. de Microbiol. Vol. 33, Supl. 1, Noviembre 2013

X Congreso venezolano de Microbiologia Ada Martnez de Gallardo

Revista de la Sociedad Venezolana de Microbiologia Revista de la Sociedad Venezolana de Microbiologia

Volumen 33 Suplemento 1 (2013) (Rev Soc Ven Microbiol)
JUNTA EDITORIAL
Informacin General
Editor-Director
Vidal Rodriguez Lemoine La Revista de la Sociedad Venezolana de Microbiologa es el rgano oficial de
divulgacin de la Sociedad Venezolana de Microbiologa (SVM). Por tanto,
Comisin Editora publicar trabajos originales, artculos de revisin, ensayos sobre temas de
Maria Josefina Gomez actualidad, avances de investigacin, reportes de casos clnicos y educacin
Ana Brito en microbiologa, cartas al editor y comentarios, notas biogrficas, revisin
Maria Antonia de la Parte crtica de libros y noticias sobre eventos cientficos, que tengan que ver con
Maria Isabel Urrestarazu las reas de Bacteriologa, Virologa, Micologa, Parasitologa y otras reas
Vera Revikina
Maria Mercedes Panizo del conocimiento microbiolgico. Servir de enlace entre los microbilogos
de Venezuela, de otros pases de Amrica y el resto del mundo. La revista se
Directores Emeritos distribuye a todos los miembros de la Sociedad Venezolana de Microbiologa
Jos J. Gutierrez Alafaro () y es enviada a las bibliotecas de centros hospitalarios del pas, as como a
Oswaldo Carmona instituciones acadmicas de pases de Latinoamrica y Europa. Tambin es
asequible a mdicos, bioanalistas, bilogos y profesionales afines. Para citas
Comisin de Honor de referencias, la abreviatura de la Revista de la Sociedad Venezolana de
Alberto Pardi () Microbiologa es: Rev Soc Ven Microbiol.
Jos Esparza
Jos Antonio Serrano
El Comit Editorial.
Comisin de Asesores
Gladys Bentez Tami (Paraguay) Eduardo Dei-Cas (Francia)
Jos Manuel Echeverra (Espaa) Alicia Farinatti (Argentina)
Belisario Gallegos (Venezuela) Roger Glass (EUA)
Mara Isabel Gonzlez (Cuba) Eduardo Gotuzzo (Per)
Manuel Guzmn (Venezuela) Mara Hortal de Peluffo (Uruguay)
Elsa La Corte (Venezuela) Ferdinando Liprandi (Venezuela)
Yesenia Lpez (Francia) Jos Luis de Lorenzo (Brasil)
Tibaire Montes (Venezuela) Beatriz Nieves (Venezuela)
Mara Josefina Nez (Venezuela) Irene Prez-Schael (Venezuela)
Hugo Pezarossi (Gua-temala) Jean Pitteloud (Venezuela)
Valeria Prado (Chile) Nicole Richard-Yegres (Venezuela)
Carlos Ramrez Ronda (Puerto Rico) Antonio Ros (Venezuela)
Yajaira Roldn (Venezuela) Denis Rosa-Re (EUA)
Gioconda San-Blas (Venezuela) Honorio Silva (EUA)
Daniel Stamboulian (Argentina) Mara Eugenia Valenzuela (Chile)
Francisco Yegres (Venezuela) Dario Novoa Montero (Venezuela)
Isidro Zabala (Mxico) Silvia Giono Cerezo (Mxico).

La Revista est indizada en: Scientific Electronic Library Online (Scielo),

[www.scielo.org]; [www.scielo.or.ve], Biblioteca virtual en Salud [www.bvsalud.org],
[www.bireme.br], [www.bvs.org.ve], LATINDEX [www.latindex.unam.mx],
Literatura Latinoamericana y del Caribe en Ciencias de la Salud (Bases de Datos
LILLACS), Literatura Venezolana en Ciencias de la Salud (Bases de Datos LIVECS).
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X Congreso venezolano de Microbiologia Ada Martnez de Gallardo
Revista de la Sociedad Venezolana de Microbiologia
(Rev Soc Ven Microbiol)
Instrucciones a los Autores
La Revista de la Sociedad Venezolana de Microbiologa (RSVM) es el rgano
oficial de la Sociedad Venezolana de Microbiologa (SVM). Sirve de enlace e
intercambio entre los microbilogos de Venezuela, Amrica Latina, el Caribe y el resto
del mundo. La RSVM es una publicacin semestral destinada a la difusin de la
Microbiologa y sus aplicaciones. Publica adicionalmente un nmero especial
temtico.
La RSVM publica: trabajos originales, artculos de revisin, ensayos sobre temas de
actualidad, avances de investigacin, reportes de casos clnicos y educacin en
microbiologa, cartas al editor y comentarios, notas biogrficas, revisin crtica de
libros y noticias sobre eventos cientficos.
Condiciones generales de publicacin.
Los manuscritos deben ser enviados al D ire ct or
(vrodriguezlemoine@gmail.com) o coeditores (finamaria@cantv.net,
murrest@gmail.com), acompaados de una comunicacin firmada por los autores
cediendo los derechos editoriales a la SVM.
Todos los manuscritos sern examinados por la Comisin Editora y luego sometido
a revisin crtica de al menos dos especialistas. Los autores estn invitados a proponer
a otros investigadores como evaluadores, los cuales formarn parte del banco de
rbitros de la RSVM. Los manuscritos que no cumplan con los propsitos y estndares
de calidad de la RSVM sern devueltos a los autores. Las opiniones de los rbitros, as
como la autora de los trabajos, sern estrictamente confidenciales. Los autores
recibirn, tanto en los casos de modificaciones como en el caso de rechazo, las
opiniones de los rbitros consultados. La Revista dar un plazo prudencial a los
autores para responder a las opiniones de los rbitros o hacer las modificaciones
sugeridas. Si stos toman mas tiempo del estipulado el trabajo ser rechazado o
considerado como nuevo. La RSVM no cobra a los autores por los gastos de
publicacin de su trabajo.
Los manuscritos podrn ser redactados en espaol, ingls o portugus, siempre
empleando un lenguaje claro y preciso, y observando cuidadosamente las reglas
gramaticales. Someter un artculo a la RSVM supone que el mismo no ha sido
publicado, ni enviado simultneamente a otras revistas. Se excepta el material
contenido en tesis de grado o trabajos de ascenso, otras monografas o publicaciones
internas, resmenes de congresos, talleres o simposia.
Sobre la presentacin de los trabajos.
La RSVM se rige por las recomendaciones o normas de estilo del Grupo
Vancouver (www.ICMJE.org). Los manuscritos deben ser elaborados como un
documento en formato Word, letra Times New Roman tamao mnimo de 12
puntos, a doble espacio, en hojas numeradas correlativamente. Las figuras en
archivo .jpg. Las letras en negrita o itlica se usarn cuando corresponda.
En la primera pgina se indicar el titulo del trabajo (16 puntos) en el idioma en
que est escrito el trabajo. Nombres y apellidos completos de los autores, indicando
en cada caso la institucin a la que pertenecen. Debajo de los autores se colocar el
titulo del trabajo en ingls (16 puntos) o en espaol si estuviese escrito en otro
idioma. Con un asterisco se debe sealar al autor de correspondencia, indicando su
direccin de correo electrnico, la cual ser colocada al pie de la pgina.
En la segunda pgina se incluirn: un Resumen en el idioma original del artculo
y un Abstract en ingls, ambos de igual contenido, escritos en un solo prrafo y con
una extensin no mayor de 200 palabras, seguidos de una lista de 3 a 6 palabras en
espaol (Palabras clave) y en ingls (Key words).
Los artculos de revisin y los ensayos sobre temas de actualidad, deben incluir:
resumen y abstract, palabras clave y key words, introduccin, anlisis crtico del
tema, conclusiones o recomendaciones y referencias. Los artculos originales deben
incluir adems: materiales y mtodos, resultados, discusin, o resultados y discusin.
Cada una de las secciones debe comenzar en pgina aparte. Los estudios con
humanos deben establecer, en la descripcin del material utilizado, la aprobacin
del Comit de tica de la institucin donde se realiz el trabajo. Aquellos estudios
donde se involucren animales, deben seguir los lineamientos de cuidado y uso de
animales de laboratorio. Los datos numricos deben incluir slo un decimal.
Los Reportes de Casos deben consistir en la presentacin de casos clnicos poco
frecuentes en la prctica mdica. Deben incluir la descripcin del caso, seguida de
una discusin con el soporte bibliogrfico correspondiente.
Las Tablas: deben ser numeradas y una por pgina hasta un mximo de 3.
Deben contener un ttulo descriptivo escrito en maysculas y no llevar lneas
verticales para separar las columnas. Las notas referentes a lo expresado en el cuerpo
de cada tabla deben ser incorporadas al final, colocando los smbolos
correspondientes.
Las Figuras: deben ser hasta un mximo de 3, numeradas una por pgina, en
formato electrnico, en blanco y negro y contener una leyenda donde se incluya el
nmero de la figura, as como suficiente informacin que permita su interpretacin
sin recurrir al texto. Las fotografas deben tener un contraste adecuado para su
reproduccin.
Las Referencias: deben identificarse con nmeros arbigos, colocados entre
corchetes, y relacionarse directamente con el contenido del prrafo y dentro del
mismo orden de aparicin, siguiendo los siguientes modelos:
Revistas: apellidos e iniciales del nombre de los primeros seis autores y, si son
ms, aadir la expresin "et al (si el trabajo est escrito en ingls) o "y col" (si est en
espaol). Punto. Ttulo del artculo. Punto. Nombre abreviado de la revista, segn
estilo del Index Medicus (consultar el nmero de Enero de cada ao y "List of
Journals Indexed" en http://www.nlm.nih.gov). Punto. Seguido del ao. Punto y
coma. Volumen, seguido de dos puntos, pgina inicial, guin y pgina final seguida
de un punto. Ejemplo: Gonzlez AM, Prez N, Gutirrez HL. Agentes de diarrea
infantil en el estado Miranda. Rev Soc Ven Microbiol. 2001; 21:38-40.
Libros y otras monografas : apellidos e iniciales de todos los autores, editores,
compiladores o el nombre completo de una entidad colectiva. Punto. Ttulo. Punto.
Nmero de la edicin, slo si ha habido ms de una edicin (i.e.3a ed). Punto. Lugar
de publicacin. Dos puntos. Entidad editorial. Punto y coma. Ao. Punto. Ejemplos:
Nez MJ, Gmez MJ, Carmona O, editores. Microbiologa Mdica, 2da ed. Caracas;
Ediciones y Publicaciones Vicerrectorado Acadmico UCV; 1997. Pingreen MK, Bond
D. Gastronterology and leadership skills for nurses. 2nd ed. Albany (NY): Delmar
Publisher; 1996.
Captulos en un libro con autor: Marcano C. Candidiasis y otras micosis. En:
Nez MJ, Gmez MJ, Carmona O, editores. Microbiologa Mdica,2 aed. Caracas:
Ediciones y Publicaciones Vicerrectorado Acadmico UCV. 1997. pp. 645-663.
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X Congreso venezolano de Microbiologia Ada Martnez de Gallardo

Material de pgina Web : Estas notaciones deben utilizarse lo menos posible y slo X Congreso Vnezolano de Microbiologia
se recomiendan cuando proceden de alguna agencia gubernamental o de
organizacin internacional de prestigio. Debe incluirse: nombre del autor u Ada Martinez de Gallardo
organizacin, ttulo del documento, direccin URL (pgina web) y fecha de la
consulta. Comit Organizador
Ej.: National Institute of Health Consensus Development Conference Statement,
1995. Physical Activity and Cardiovascular Health. En:
htpp://www.medscape.com//govNIM/1999/guideline/NIM-card/NIH-card- Dra. Nereida Valero Presidente
toc.html. Acceso 23 de abril 2000. Dra. Laugeny Daz Vice-Presidente
MSc. Jennifer Gotera Secretaria General
Dra. Lisette Sandrea Secretaria de Asuntos Cientificos
Dra. Irene Parra de Cepeda Secretaria de Finanzas
MSc. Nstor Rosales Secretario de Actas
MSc. Ricardo Atencio Vocal

Miembros de Comisiones

Comisin Cientfica Comisin de Publicacin e Informtica

Dra. Lisette Sandrea(Coordinadora)
MSc. Anyelo Duran
Dra. Kutchynskaya valero
Dra. Gabriela Carruyo
MSc. Jennifer Gotera
Dr. Ernesto San Blas
Dra. Marynes Montiel
Dra. Alisbeth Fuenmayor
Dra. Julia Arias
Dra. Dilia Martinez
Dra. Laugeny Diaz
Dra. Katiuska Acosta
Dra. Yasmir Quirz (Coordinadora)
Univ. Luis Gallardo
Lcdo. Jhony Torres
Lcdo. Lisandro Morn
MSc. Keila Yaguas
Comisin de Finanzas
Dra. Irene Parra de Cepeda (Coordinadora)
Lcda. Luciana Costa de Len
Lcdo. Jhon Bermdez

Comisin de Apoyo Logstico Comisin Socio-Cultural

MSc. Ricardo Atencio (Coordinador) Med. Edixon Ochoa (Coordinador)
MSc. Angela Bracho MSc. Belkys Fuentes
MSc. Reina Moronta Dra. Julia Arias
Lcda. Natasha Pirela

Comisin de Relaciones Pblicas

Dr. Luis Gallardo (Coordinador)
Dra. Nereida Valero
Dra. Yasmir Quiroz
Dra. Irene Parra de Cepeda

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Grupo de Protocolo y logistica

Univ. Zarath Valles

Univ.Orlanys Vega
Univ. Karla Coronel
Univ. Gabriel Hernndez
Univ. Endrina Duarte
Univ. Dayana Urdaneta
Univ. Yineska Bermdez
Univ.Nuris Parody
Univ. Betsy Molina
Univ. Hernando Alonzo
Univ. Alberto Landaeta
Univ. Merly Patio
Univ. Carleidy Viloria
Univ. Darwinso lvarez
Univ. Eduardo Portillo
Univ. Belkis Parra
Univ. Lineth Delgado
Univ. Andrea Gonzlez
Univ. Kevin Snchez
Univ. Rafaela Carrero
Univ. Karelis Rangel
Univ. Mara Jos Arguello
Univ. Andrea Angulo
Univ. Kelly Atencio
Univ. Marisabel Mora Gracia
Univ. Fiorella La Rosa
Univ. Yakelin Abou Massoud

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X Congreso venezolano de Microbiologia Ada Martnez de Gallardo
Mensaje de Bienvenida
Estimados Colegas:
La Sociedad Venezolana de Microbiologa (SVM)
capitulo Zulia conjuntamente con la Junta Directiva
Nacional, con anhelo y responsabilidad, asumimos el
reto y ha organizado el X CONGRESO VENEZOLANO
DE MICROBIOLOGIA ADA MARTINEZ DE
GALLARDO. Es placentero para el Comit
Organizador recibir a todos nuestros colegas y ofrecerles un evento cientfico
de excelente calidad, avalado con la presencia de ilustres Invitados de la
geografa nacional e internacional que presentarn los ltimos avances
en Parasitologa, Bacteriologa, Virologa, Micologa, Epidemiologia,
Entomologa, Inmunologa, Biologa, Veterinaria, Microbiologa Ambiental,
Industrial y de Alimentos, Microbiologa Odontolgica y Biotecnologa. El
programa incluye cursos pre-congreso, conferencias magistrales, mesas
redondas, plenarias, foros, exposicin de temas libres e inmejorables
simposios.
Estamos seguros que la calidad de los trabajos de investigacin que se
presentarn, superarn las expectativas de todos los que asistiremos a este
encuentro cientficamente acreditado. Tenemos el honor de acoger este
evento en el extremo Occidental de Venezuela, en Maracaibo- Estado Zulia,
una de las ciudades ms importante del pas, Capital Cientfica, Ciudad de la
Chinita, de la Gaita y del calor marabino, ofrece toda una variedad de bellos
escenarios, desde su majestuoso Puente sobre el Lago hasta la Baslica, y sobre
todo por su gente amable y hospitalaria, es el escenario ideal para el
desarrollo de este Congreso, que es nuestro y de ustedes!.
Esperamos que el X Congreso Venezolano de Microbiologia Ada Martinez
De Gallardo no solo sea la oportunidad para un intercambio de
conocimientos y experiencias, sino un verdadero acercamiento de
amistad digno de los participantes e invitados, brindndoles durante la
realizacin del evento una enriquecedora experiencia y grata estada en
tierras zulianas del 4 al 6 de noviembre de 2013,
Bienvenidos desde ya Colegas Microbilogos de Venezuela y el mundo!!
Dra. Nereida Valero
Presidenta del Comit Organizador
ADA MARTINEZ DE GALLARDO
Ada Elena Martnez Garca, naci en el sector
veritas de la parroquia Santa Luca de la ciudad de
Maracaibo el 13 de septiembre de 1947, hija de
Alfonso Enrique Martnez, comerciante y Bernarda
Garca de Martnez, ama de casa. Es la cuarta de
una numerosa familia de nueve hermanos. Su
niez transcurri dentro de un ambiente de amor y
fraternidad.
Realiza sus estudios de primaria y secundaria en el Colegio "El Pilar",
gradundose de bachiller en 1965. Su fascinacin por la Biologa y la
Qumica la llev a formar parte del primer grupo de estudiantes de la carrera
de Bioanlisis en La Universidad del Zulia (LUZ), donde se destac por su
excelente desempeo acadmico, gradundose el 7 de noviembre de 1969.
Su brillante trayectoria como estudiante permiti su ingreso, en febrero de
1970, como becario docente de la Ctedra de Microbiologa de la Facultad de
Medicina de LUZ. En 1973, su espritu emprendedor y su deseo de
superacin la motiv a trasladarse a la ciudad de Atlanta (EEUU) para
realizar estudios en el rea de Bacteriologa Clnica, en el Centro para el
Control de Enfermedades Infecciosas (CDC), regresando a Venezuela en el
ao de 1974.
Ada Elena es profesora titular de la Universidad del Zulia desde 1984. Se
ha desempeado como docente en las Ctedras de Microbiologa y
Bacteriologa.
Fue profesora-fundadora de la Prctica Profesional de Bacteriologa de la
Escuela de Bioanlisis; Jefe del Departamento de Microbiologa de la Escuela
de Bioanlisis durante los perodos 1986-1990 y 1994-1996. En la
actualidad, a pesar de haberse jubilado en 1997, no se ha desligado de sus
actividades universitarias y ejerce el cargo de Directora de la Escuela de
Bioanlisis para el perodo 1999-2002.
Durante las epidemias de Salmonelosis que ocurrieron en el Zulia entre
los aos 1968 y 1976, la Seccin de Bacteriologa del Hospital Universitario
de Maracaibo, desempe un papel fundamental en el control de esta
epidemia. Esta situacin condujo a la creacin del Centro Regional de
Referencia Bacteriolgico del Hospital Universitario de Maracaibo, en el ao
1975.
Centro al cual, segn sus compaeros de trabajo, Ada se entreg con gran
devocin convirtindose en "el alma del centro"; donde promovi labores de
investigacin y docencia, desempendose como coordinador Tcnico entre
1978-1986, Directora Encargada entre 1985-1986 y como Coordinadora-
docente de cursos de actualizacin. En 1986 su labor cientfica la llev a
promover la investigacin de nuevos enteropatgenos, siendo la primera en
aislar Campylobacter en el estado Zulia.
Su empeo en proyectar la Escuela de Bioanlisis hacia la comunidad,
permiti su incorporacin al equipo fundador del Laboratorio Clnico de la
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Escuela de Bioanlisis, desempendose como Coordinadora Docente- Actualmente, nos sigue honrando con su presencia y se desempea como
Asistencial y Coordinadora General del mismo. adjunto a la Coordinacin Academica del decanato de la Facultad de
Ha integrado diversas comisiones universitarias entre las que destacan: Medicina de la Universidad del Zulia.
Consejo de la Orden "Dr. Jess Enrique Lossada", Comisin de Calificacin de Adita, como la llamamos cariosamente sus amigos, sabe causar efectos
Reglamento de la Escuela de Bioanlisis y Comisin de Currculo y Comisin en los dems por su forma de presentarse ante ellos, tanto fsica como
de Reglamento de la Escuela de Bioanlisis y Comisin de Ingreso y Cambios mentalmente. Es una amiga fiel y solidaria. Es una persona digna de
de Dedicacin de la Facultad de Medicina de LUZ. admiracin y respeto, quien a pesar de los xitos alcanzados, conserva la
Ha publicado innumerables trabajos de investigacin en prestigiosas humildad y sencillez que siempre le ha caracterizado, permitiendo que
revistas nacionales e internacionales, siendo su principal lnea de amigos, compaeros de trabajo y estudiantes la describan como una
investigacin las diarreas infecciosas bacterianas. Adems, es rbitro de excelente persona, mujer, profesional y esposa, en pocas palabras toda una
varias publicaciones cientficas de LUZ tales como: Investigaciones Clnicas y dama.
Kasmera de la Facultad de Medicina y Revista Cientfica de la Facultad de
Veterinaria.
Ada Martnez es autora de numerosas publicaciones de carcter cientfico
entre las que destacan: Molecular Biology Pathogenicity and Ecology of
Bacterial plasmids y Mtodos de laboratorio en Bacteriologa Mdica bsica.
En mltiples oportunidades ha participado como conferencista en cursos de
actualizacin, simposios, mesas redondas y talleres. Ha presentado ms de
100 trabajos de investigacin en eventos cientficos.
La labor docente de Ada Elena destacada por haber sido tutora de
numerosas tesis de pre y posgrado, as como tambin asesora de muchos
trabajos de ascenso. Adems, ha formado parte del Jurado Evaluador del
Premio Anual Municipal "Rafael Rangel", Premio Beneficio por Rendimiento
Acadmico de LUZ, Premio de la Sociedad Venezolana de Microbiologa para
estudiantes, y Premio "Luis Daniel Beauperthuy".
Ha sido merecedora del Premio Anual Municipal "Rafael Rangel" (1983),
Premio "Dr. Julio Arraga Zuleta" (1985), Premio Cientfico "Andrs Bello"
(1987) Premio Bristol Myers Squibb (1987 y 1994) y Premio al rendimiento
Acadmico (1998). Adems, ha recibido la Orden Mrito Universitario "Dr.
Jess Enrique Lossada" en su primera clase (1987), Orden Mrito al Trabajo
"Rafael Rangel" en su tercera clase (1988), Medalla de la Salud "Dr. Enrique
Tejera" en su primera clase (1993).
Es miembro titular de la Sociedad Venezolana de Microbiologa, Captulo
Zulia, organizacin cientfica en la cual ha ejercido cargos de Secretara
General y Presidenta. Fue Vicepresidenta del Comit Organizador de la XIX
Jornadas Venezolanas de Microbiologa (1990) y Presidenta del Comit
Organizador del VII Congreso Venezolano de Microbiologa (2000). Adems,
pertenece a la American Society for Microbiology (ASM) y a la Asociacin
Venezolana de Escuelas de Bioanlisis.
Esta incansable trabajadora, en 1993, contrajo matrimonio con el Doctor
Luis Gallardo, con quien ha establecido una slida y duradera unin afectiva.
Le encanta viajar, siendo Puerto Rico, el lugar donde ms le gusta disfrutar
del calor del sol sobre su piel, le agrada reunirse con familiares y amigos a
compartir una velada de fin de semana para liberar el stress provocado por el
trabajo.

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GERARDO MORENO GRANADILLO Zulia, efectuada por la Coral Antiphona, y del Festival de Coros Infantiles
Artista visual y plstico (pintor, dibujante, escultor y celebrado por la Secretaria de Educacin en la ciudad de Maracaibo, entre
orfebre), educador y msico (vocalista, cuatrista, otros.
guitarrista, flautista, percusionista y armonista), nacido As mismo, ha formado parte de connotadas agrupaciones musicales. Fue
en Maracaibo un 24 de diciembre de 1962, y criado en la integrante de la Coral del Conservatorio Jos Lus Paz, del Ensamble
pintoresca, ancestral y lacustre poblacin de San Rafael Polifnico de Maracaibo, de la Coral Antiphona y del Coro Lrico Maracaibo.
de El Mojn, y quien lleva por nombre Gerardo Jess Por igual fue percusionista de la Camerata Tierra Firme, de la Orquesta
Moreno Granadillo. Sinfnica Juvenil, de la Orquesta Sinfnica del Zulia, de la Banda de
Guiado por su padre, don Ramn Moreno Vsquez, quien fue su primer Conciertos Pedaggicos Juan Jos Landaeta, y de la Banda Marcial Jos
maestro de artes y, al mismo tiempo, tratando de encaminar a su Antonio Pez; adems de msico y director de la Agrupacin Palo de
temperamental hijo, le prohiba la entrada a su estudio. Pero este guerrero Lluvia.
de batallas ancestrales, este gladiador indomable, no se rinde ni se aquieta, y Comprometido con su muy especial esencia creativa, el caballero,
descubre la pasin por el volumen, la arcilla, el producto tridimensional, maestro, compaero y amigo, Gerardo Moreno Granadillo, ofrece el trabajo
llevndolo a ser conducido por otro gran maestro del arte de El Mojan, Jos definido entre moluscos imaginarios, embarcaciones alucinantes, su pasin
Nicanor Fajardo. ste, tambin de espritu irreverente, encamina a su por perros y caballos, y sus consecuentes soles; ejecutando de esta manera, la
aprendiz y, gracias a ello, hoy, vemos dicho camino fielmente expresado en entrega de sus ms preciados valores. No olvidando que este ilustre zuliano
cada pieza expuesta, la cual no slo lo define como un artista visual, sino es tambin, para orgullo y satisfaccin de nuestra regin, el artista oficial y
tambin como un artista musical. autor de la obra emblemtica del X Congreso Venezolano de Microbiologa
Y as es como inicia una carrera de estudios en el Conservatorio de Dra. Ada Martnez de Gallardo.
Msica Jos Luis Paz, con la Orquesta Sinfnica Juvenil de Maracaibo, y en
la Escuela de Arte Nepal Rincn en la Secretara de Cultura del Estado Lic. Mariela Gonzlez Pacheco.
Zulia; y, adems, realiz estudios en Licenciatura en Educacin (Mencin MgSc. Iris M. Barboza Pereira.
Esttica), en la Universidad Catlica Cecilio Acosta (UNICA). Completa su
instruccin, bajo la sabia orientacin del eminente msico Oswaldo Nol
Sugo, mediante un Curso Superior para Educadores Musicales. Ms
adelante, en aras de perfeccionar sus conocimientos, har lo propio
participando en el II Taller de Actualizacin y Mejoramiento Profesional del
Educador Musical, impartido por la Universidad Pedaggica Experimental
Libertador (UPEL) de Caracas.
Una vez convertido en profesional de la pintura, la escultura y la msica,
Gerardo, inicia su fructfera carrera. En 1984, lo encontramos ejerciendo la
docencia musical en la Escuela Bsica Activa Dr. Pedro Luengo de Santa
Cruz de Mara, donde labor hasta 2001, y para la cual esculpi una pieza
emblemtica del rostro del Libertador Simn Bolvar, la cual se aprecia
todava en la plazoleta de esta institucin escolar. Los frutos de su creatividad
artstica merecieron un digno y decoroso espacio en varias exposiciones, a
saber: la Exposicin de Arte y Diseo (Analogas), en la Galera Epsilon; la
Exposicin Venta El Quinto Elemento, llevada a cabo en la Sala de
Exhibicin Ildelbrando Rossi; la II Exposicin del Maestro Artista, en el
Municipio Escolar Mara; y la Expo pintura Pintores y escultores de mi
pueblo, realizada en El Mojn en 2002.
Como msico, Gerardo tiene en su haber la autora del Himno Nacional a
la Biblioteca Escolar, y la creacin del Ritmo Sanbesn como propuesta
musical presentada en el Festival Internacional del Caribe, celebrado en
Maracaibo en octubre de 2000, en el Centro de Arte de Maracaibo La
Bermdez (CAMLB). Fue tambin partcipe de la Toma de Caracas por el
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X Congreso venezolano de Microbiologia Ada Martnez de Gallardo

PATROCINANTES ACTIVIDADES PRECONGRESO

HOSPITAL UNIVERSITARIO DE MARACAIBO
GANBARO C.A. LUNES 04-11-2013
PRODUCCIONES RODENEZA C.A.
BANCO MERCANTIL SALON LAGUNILLAS
LABORATORIOS KALSTEIN HORA: 8:00 a 12:00 m.
UNIVERSIDAD DEL ZULIA. 2:00 a 5:00 pm. Proceso de Inscripcin
GOBERNACION DEL ESTADO ZULIA
PARAMITO POSADA CLUB SALN SUCRE
INSTITUTO CLINICO Y DIAGNOSTICO ESPECIALIZADO C.A. HORA: 9:30 a 12:00 m.
WORD MEDICAL UNIFORMS 2:00 a 5:00 p.m.. Curso Pre-Congreso
Nuevas Metodologas y criterios de interpretacin de
AGRADECIMIENTOS muestras para estudios bacteriolgicos
Coordinadoras: MSc. Amrica Paz
DR. SERGIO OSORIO DECANO DE LA FACULTAD DE MEDICINA Dra. Alisbeth Fuenmayor
PERSONAL DEL INSTITUTO DE INVESTIGACIONES CLINICAS DR.
AMERICO NEGRETTE SALN PALMAREJO
DIARIO PANORAMA HORA: 9:30 a 12:00 p.m.
DIARIO LA VERDAD 2:00 a 5:00 p.m Curso Pre-Congreso
REVISTAS CIENTIFICAS Tcnicas de deteccin de coliformes en agua
DRA. ALEXIS MORON Coordinadora: Dra. Marynes Montiel
PERSONAL DEL RECTORADO DE LUZ EN SUS DEPENDENDENCIAS:
RECTORIA, VICERRECTORADO ACADEMICO, VICERRECTORADO
SALN URDANETA
ADMINISTRATIVO Y SECRETARIA. HORA: 9:30 a 12:00 p.m.
SRA. DELIA CORONA SECRETARIA DE LA SOCIEDAD VENEZOLANA 2:00 a 5:00 p.m. Curso Pre-Congreso
DE MICROBIOLOGIA CAPITULO ZULIA Resistencia Bacteriana
Coordinador: MSc. Armindo Perozo
AVALES

DIVISIN DE ESTUDIOS PARA GRADUADOS DE LA FACULTAD DE SALN FALCN

MEDICINA (DEPGFM) DE LA FACULTAD DE MEDICINA DE LA
UNIVERSIDAD DEL ZULIA
FEDERACION MEDICA VENEZOLANA
SOCIEDAD AMERICANA DE MICROBIOLOGIA
HORA: 11:00 a 2:00 p.m. Consejo Superior de Captulos.
Sociedad Venezolana de Microbiologa
HORA: 2:00 a 5:00 p.m. Encuentro de Editores de revistas cientficas
Coordinador: Dr. Vidal Rodriguez Lemoine

SALN BOLVAR

HORA: 6:30 p.m. ACTO DE INSTALACIN

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PROGRAMA CIENTFICO HORA: 4:00 a 6:00 p.m.

CICLO DE CONFERENCIAS:
LA INMUNOLOGIA EN LA ACTUALIDAD
MARTES 05-11-2013 Coordinadora-Moderadora: Dra. Julia Arias
Biomarcadores pronsticos en sepsis
Dr. Melchor lvarez de Mon (Espaa)
SALN BOLVAR Factores inmunolgicos predictores de alergia en recin nacidos
Dra. Tania Bravo (LUZ/MSD)
HORA: 8:30 a 9:30 a.m. Translocaciones en bacterias e inflamacin: Implicaciones
Conferencia Magistral Dr. Enrique Tejera patognicas. Dr. Melchor lvarez de Mon (Espaa)
Las vacunas: desde Jenner hasta una vacuna contra el VIH/SIDA
Dr. Jose Esparza HORA: 6:00 p.m.
ASAMBLEA ANUAL
HORA: 10:00 a 10:15 a.m. Refrigerio SOCIEDAD VENEZOLANA DE MICROBIOLOGA

HORA: 10:00 a 12:00 p.m.

SIMPOSIO: Resistencia Bacteriana SALN URDANETA
Coordinador: MSc. Armindo Perozo
Moderador: MSc. Luis Gonzlez HORA: 10:00 a 12:00 p.m.
Multiresistencia de las drogas en enterobacterias SIMPOSIO: Infecciones de transmisin sexual en Venezuela. Un problema de
Lcdo. Luis Carlos Torres (UCV) salud pblica
Multresistencia a las drogas en bacterias Gram positivas Coordinadora: Dra. Diana Callejas
Lcdo. Lorena Abada (UDO) Moderador: Dr. Pablo Altuve
Multiresistencia a las drogas en Bacilos Gram negativos no fermentadores Mapa epidemiolgico de la infeccin por VPH en Venezuela.
Lcdo. Luis Carlos Torres (UCV) Dra. Mara Eugenia Cavazza (MPPS-UCV)
Panresistencia Realidad o Ficcin? Estado del arte de la vacunas para la prevencin de la infeccin por VPH.
MSc. Armindo Perozo (LUZ) Dra. Mara Correnti (MPPS)
Papel de la inmunidad en la infeccin por VPH en mujeres venezolanas.
HORA DE ALMUERZO LIBRE Dra. Diana Callejas (LUZ)
Mujeres e ITS. Una experiencia de investigacin en Mrida Venezuela.
HORA: 2:00 a 3:45 p.m. Dr. Luis Tllez (ULA)
CICLO DE CONFERENCIAS
LOS VIRUS: NUEVOS AVANCES HORA DE ALMUERZO LIBRE
Coordinador-Moderador: MSc. Anyelo Durn
Evolucin molecular de los virus de hepatitis en Latinoamrica. HORA: 2:00 a 3:45 p.m.
Dra. Flor Pujol (IVIC-Caracas) CONTINUACION-
Epidemiologa molecular del virus dengue en amrica SIMPOSIO: Infecciones de transmisin sexual en Venezuela. Un problema de
Dr. Germn Aez (EEUU) salud pblica
Etiologa de las infecciones respiratorias virales Coordinadora-Moderadora: Dra. Diana Callejas
Dr. Betulio Chacn (LUZ) Las ITS estn solo en los genitales? Dra. Mara Correnti (MPPS)
Terapia antiviral profilctica y resistencia a drogas Trabajando en Red se puede conocer mejor la distribucin de las
Dr. Hctor Rangel (IVIC-Caracas) infecciones de transmisin sexual en Venezuela
Dra. Mara Eugenia Cavazza (MPPS-UCV)
HORA: 3:45 a 4:00 p.m. Refrigerio Construccin de plataformas de informtica para registro de casos de
VPH y su asociacin con cncer de cuello uterino. Aplicaciones en
geo-referencia. Ing. Antonio Salgado (MPPS-UCV)

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X Congreso venezolano de Microbiologia Ada Martnez de Gallardo

HORA: 3:45 a 4:00 p.m. Refrigerio MSc. Angelina Mrquez (LRSP)

Rabia urbana y silvestre en el estado Zulia
HORA: 4:00 a 6:00 p.m. Med. Vet. Alessandri Palencia (Coord. Zoonosis-Sanidad)
CICLO DE CONFERENCIAS Leishmaniasis en el estado Zulia. Dr. Ismael Contreras (MPPS)
Coordinadora-Moderadora: Dra. Alisbeth Fuenmayor Rickettsias Hay en realidad una epidemia?
La Ciencia en los tiempos del clera. Dra. Gioconda San Blas MSc. Omaira Parra (LUZ)
(Ministerio de ciencia y tecnologa. Estado Miranda)
Uso de la informtica como herramienta de apoyo al diagnstico y
la vigilancia epidemiolgica de las infecciones. SALN FALCN
Dr. Ascanio Rojas (ULA)
Microbiota y obesidad. Dra. Lidia Meja (LUZ) HORA: 10:30 a 12:30 p.m.
La Era Postgenmica. Dr. Ascanio Rojas (ULA) SIMPOSIO: Aspectos microbiolgicos del agua
Coordinadora-Moderadora: Dra. Marynes Montiel
Nuevos indicadores de calidad de las aguas
SALN SUCRE Dr. Walter Betancourt (IVIC-Caracas)
Las bacterias viables no cultivables en ambientes acuticos: mtodos de
HORA: 10:00 a 12:00 p.m. estudio. Dr. Flix Andueza (ULA)
CICLO DE CONFERENCIAS Agua, alimentos y manipuladores: triangulo de la vida
PARASITOLOGIA HOY Dra. Luz Bettina Villalobos (UDO)
Coordinadora-Moderadora: MSc. Zulbey Rivero Identificacin de peligros y manejo del riesgo microbiolgico en el envasado
El significado de las infecciones inaparentes en enfermedad de Chagas y de agua potable. MSc. Patricia Blasco (Empresas Polar)
Leishmaniasis en el occidente de Venezuela. Dr. Nstor Aez (ULA)
Avances en Protemica de tripanosoma. MSc. Roger Ramrez (LUZ) HORA DE ALMUERZO LIBRE
Nematodosis en caninos: importancia en sanidad animal y salud pblica.
Dr. Francisco Angulo (LUZ) HORA: 2:00 a 3:45 p.m.
Reunion de los grupos de trabajo de micologia en Venezuela
HORA DE ALMUERZO LIBRE
HORA: 3:45 a 4:00 p.m. Refrigerio
HORA: 2:00 a 3:45 p.m.
CICLO DE CONFERENCIAS HORA: 4:00 a 6:00 p.m.
PARASITOLOGA HOY SIMPOSIO: Biotecnologa microbiana
Coordinadora: MSc. Zulbey Rivero Coordinadora: Dra. Laugeny Daz
Moderadora: MSc. Angela Bracho Moderador: MSc. Nstor Rosales
Blastocystis y Nitazoxanida: notas y experiencias Remocin de contaminantes en aguas residuales por microalgas.
Dr. Rodolfo Devera (UDO) MSc.Charity Andrade (LUZ)
Un nuevo reto diagnostico en amibiasis:la deteccin de E. moshkovskii Biorecuperacin de agua contaminada con combustible mediante consorcios
en humanos. MSc. Zulbey Rivero (LUZ) microbianos. Dra. Laugeny Daz (LUZ)
Seleccin de los medicamentos antiparasitarios segn su efectividad. Produccin de biopolmeros bacterianos. MSc. Jorge Guiez (LUZ)
Dr. Rafael Villalobos. (LUZ) Biocombustibles microbianos. MSc. Nstor Rosales. (LUZ)

HORA: 3:45 a 4:00 p.m. Refrigerio

HORA: 4:00 a 6:00 p.m.

SIMPOSIO: Zoonosis reemergentes
Coordinadora-Moderadora: MSc. Jennifer Gotera
Leptospirosis. Qu estamos haciendo hoy?
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X Congreso venezolano de Microbiologia Ada Martnez de Gallardo

SALN PALMAREJO MIERCOLES 06-11-2013

HORA: 10:00 a 12:00 p.m. SALON BOLIVAR
SIMPOSIO: Hongos anemfilos y su impacto en la salud pblica venezolana
Coordinadora Dra. Hilda Romero HORA: 8:00 a 10:00 a.m.
Moderador: MSc. Luis Gonzlez CICLO DE CONFERENCIAS:
Aspectos ecoepidemiolgicos de los hongos anemfilos y su vinculacin con LOS VIRUS: NUEVOS AVANCES
la salud. Dra. Hilda Romero C. (UCV) Coordinador-Moderador: MSc. Anyelo Durn
Situacin en Venezuela. Problemtica laboral y repercusin en la Diversidad y evolucin de los rotavirus en la era post-vacuna.
comunidad. Lcda. Edith Ortega U. (UCV) Dra. Esmeralda Vizzi (IVIC-Caracas)
Contribucin actual en el estudio de hongos anemfilos. Mecanismos de patognesis de los Rotavirus
MSc. Joel Torres L. (UCV) Dr.Jos Luis Zambrano (IVIC-Caracas)
Vulnerabilidad y riesgos. Normativa laboral. Lcda. Anglica Castro Avances en el desarrollo de una vacuna contra el dengue
Dr. Germn Aez (Federal and Drugs Administration, FDA, EE.UU)
HORA DE ALMUERZO HORA: 10:00 a 10:30 a.m. Refrigerio

HORA: 2:00 a 3:45 p.m. HORA: 10:30 a 12:30 a.m.

CICLO DE CONFERENCIAS: SIMPOSIO: Las infecciones asociadas a la atencin en salud:
LOS MICROBIOS Y LOS ALIMENTOS Un problema de todos.
Coordinadora-Moderadora: Dra. Kutchynskaya Valero Leal Coordinadora-Moderadora: MSc. Arelis Lares de Acevedo
Actividad antibacteriana de aceite esencial de frutas ctricas. Infecciones asociadas a la atencin en salud. Que estamos haciendo?
M.Sc. Laura Soto (LUZ) MSc. Zaida Castellano de Caldern
Biotecnologa en la produccin de vinos. Dra. Mara Berradre (LUZ) Neumona asociada a los servicios de salud vs neumona adquirida en la
Mtodos microbiolgicos para la determinacin de antibiticos en comunidad. Dr. Francisco Arocha (LUZ)
alimentos. M.Sc. Nancy Morillo (Inst. Nac. de Investigaciones Agrcolas) Programa nacional de resistencia en la UCI Qu tenemos?
Qu hacemos?. Lcdo. Daniel Marcano (INHRR)
HORA: 3:45 a 4:00 p.m. Refrigerio SARM en el ambiente hospitalario. Dr. Armando Hoet (EEUU)
HORA: 4:00 a 6:00 p.m. HORA DE ALMUERZO
CICLO DE CONFERENCIAS
AGRONOMA: QUE HAY DE NUEVO? HORA: 2:00 a 3:45 p.m.
Coordinadora-Moderadora: MSc. Katiuska Acosta CICLO DE CONFERENCIAS
Cambio climtico, microorganismos y seguridad agroalimentaria. Moderador: MSc. Edixon Ochoa
Ing Agr. Werner Gutirrez (LUZ) La interculturalidad en la Salud
Micorrizas herramienta biotecnolgica en los sistemas de Dra. Noly Fernandez (Hospital Universitario de Maracaibo)
produccin sostenible de alimentos. MSc Katiuska Acosta (LUZ)
Spirulina: el alimento del futuro. MSc.Jos Luis Bermdez. (LUZ) Los beneficios de Sonrer
Psic. Ghandy Aboul

(12:00 m 2:00 p.m) Presentacin de trabajos libres reas: Microbiologa Programa Dr. Yaso
Bsica, Ambiental e Industrial, Veterinaria, Agronoma, Entomologa, Fundacion Ecorisas
Inmunologa y Epidemiologa
HORA: 3:45 a 4:00 p.m. Refrigerio

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X Congreso venezolano de Microbiologia Ada Martnez de Gallardo
HORA: 4:00 a 6:00 p.m.
SIMPOSIO: Avances en Micobacteriologa.
Coordinadora-Moderadora: MSc. Francis Villarroel
Situacin actual y epidemiologa de la Tuberculosis
Dra. Margiori Cordones (Coord. Reg. TBC y Enf. Pulmonares-HGS)
Alternativas para el tratamiento de micobacterias atpicas.
Dr. Rafael Paris (Coord. Reg. TBC y Enf. Pulmonares-HGS)
Resistencia a las drogas antituberculosas
Dr.Jos Ignacio Delgado (Hospital Central)
Resultados preliminares de la encuesta nacional de resistencia a
medicamentos antituberculosos.
Lcda. Carmen Ramrez (Caracas- Divisin Nacional de
Salud Respiratoria)
SALN URDANETA
HORA: 8:00 a 10:00 a.m.
CICLO DE CONFERENCIAS:
AVANCES EN VETERINARIA
Coordinadora-Moderadora: Dra. Gabriela Carruyo
Fiebre Aftosa: estrategias actuales. MSc Robert Valeris (LUZ)
Peste porcina clsica. Dr. Willian Meja (LUZ)
Bioseguridad en las unidades de produccin bovina. Dr. Disney Pino (LUZ)
HORA: 10:00 a 10:30 a.m. Refrigerio
HORA: 10:30 a 12:30 a.m.
SIMPOSIO: Candida spp. resistentes a antifngicos
Qu alternativas quedan disponibles?
Coordinadora: Dra. Dilia Martnez
Moderadora: Dra. Patricia Navas Yamarte
Significado de la IgM en estudios de variabilidad en la actividad srica
aglutinante anti-Candida albicans
MSc. Neomar Semprun (UNERMB y LUZ)
FASH, IRH y reactividad autloga como indicadores de variabilidad en la
actividad aglutinante anti-Candida albicans. MSc. Sandra Azuero (LUZ)
Candidosis invasivas: patrones de susceptibilidad y resistencia
MSc. Maribel Dolande (INH - Caracas)
Infeccin por Candida spp. en pacientes VIH: estado actual.
Dra. Julman Cermeo (UDO-Bolvar)
Antifngicos: resistencia realidad. Dra. Dilia Martnez (Zulia)
HORA DE ALMUERZO LIBRE
HORA: 2:00 a 3:45 p.m.
SIMPOSIO: Avances sobre alimentos, probioticos y prebiticos y salud
Coordinadora: Esp. NC Hazel Anderson
Moderadora: MSc. Doris Garca
Fibra, prebiticos, probiticos y simbiticos. Esp. NC Mareidys Daza (LUZ)
La microbiota intestinal y sus funciones en el tracto digestivo.
Lcda Mariana Gil (LUZ)
Aplicacin clnica de los probiticos en enfermedades metablicas,renales y
pulmonares. Esp. NC Luisandra Gonzlez (LUZ)
Nuevas estrategias en el uso de los probiticos en enfermedades hepticas
y del tracto digestivo inferior. Esp. NC Hazel Anderson (LUZ)
HORA: 3:45 a 4:00 p.m. Refrigerio
HORA: 4:00 a 6:00 p.m.
SIMPOSIO: Infecciones de transmisin sexual (ITS): Impacto en la comunidad.
Coordinadora-Moderadora: MSc. Belkis Fuentes
La prevencin de las ITS en la comunidad. Dra. Sofa Vera (LUZ)
ITS en el siglo XXI. Dr. Domingo Carrizo. (Coordinacin ITS)HIV)
La mujer y su sexualidad. Dra. Sofa Vera (LUZ)
Diagnstico de la ITS curables y no curables
Lcda. Mariana Semprn (Ambulatorio Dr. Francisco Gmez Padrn)
SALN SUCRE
HORA: 8:00 a 10:00 a.m.
SIMPOSIO: Epidemiologa molecular e infecciones asociadas a la atencin de
salud. (IAAS).
Coordinador: MSc. Armindo Perozo
Moderadora: MSc. Messaria Ginestre
Tcnicas de tipificacin de microorganismos. MSc. Armindo Perozo (LUZ)
Control de Infecciones asociadas a la atencin de salud. (IAAS).
Lcdo. Maikel Yhansi (MPPS)
Papel del Laboratorio en las IAAS. Lcdo. Daniel Marcano (INHRR)
HORA: 10:00 a-10:30 a.m. Refrigerio
HORA: 10:30 a 12:30 a.m.
SIMPOSIO: Avances sobre vacunas en Venezuela.
Coordinadora-Moderadora: MSc. Enza Spadola
Vacunas contra la enfermedad neumoccica: caso Venezuela.
Dr. Alejandro Risquez. (UCV)
Vacunas contra el Dengue. Dr. Luis Echezura (INHRR)
Introduccin de la vacuna anti-Rotavirus en Venezuela: Logros.
Lcda. Dagelis Hermoso. (PAI-Caracas)
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HORA DE ALMUERZO
HORA: 2:00 a 3:45 p.m.
SIMPOSIO-TALLER: Conservacin ex situ de la biodiversidad microbiana en
Venezuela.
Coordinador: Dr. Vidal Rodrguez Lemoine
Moderadora: MSc. Mara Mercedes Panizo
Presentacin: Las colecciones de cultivo en Venezuela. pasado, presente y
futuro. Dr. Vidal Rodrguez Lemoine (UCV)
Colecciones acadmicas. Coleccin de bacterias CAZ:
Dr. Jorge R. Guiez. (LUZ)
Biodiversidad fngica de inters en medicina. Micoteca del Instituto Nacional
de Higiene Rafael Rangel. Dra. Mara Mercedes Panizo. (INHRR-Caracas)
Biodiversidad fngica de inters industrial. Coleccin micolgica Nodo-
CVCM-LPFIBE. Dra. Roxana Gajardo (UCV)
Colecciones especializadas. Grupo Actiniomicetales Mrida.
Dr. Jos Antonio Serrano (ULA)
Colecciones de servicio. El Centro Venezolano de Colecciones de
Microorganismos. Dr. Vidal Rodrguez Lemoine (UCV)
Breve resea sobre la Federacin Latinoamericana de Colecciones de
Cultivos (FELACC). Presente y futuro. MSc. Mara Mercedes Panizo
(INHRR)
Conclusiones y recomendaciones
HORA: 3:45 a 4:00 p.m. Refrigerio
HORA: 4:00 a 6:00 p.m.
MESA DE TRABAJO: Propuestas para el control biolgico de insectos
vectores de enfermedades humanas en Venezuela.
Coordinador-Moderador: Dr. Ernesto San Blas
Alternativas de control biolgico microbiano de mosquitos (Diferentes
gneros) para la disminucin de ncidencia de enfermedades como dengue,
malaria y otros
Alternativas de control biolgico microbiano de jejenes (gnero
Phlebotomus) para la disminucin de la incidencia de Leishmaniasis
Alternativas de control biolgico microbiano de chipos.(gnero Rhodnius)
para la disminucin de la incidencia de mal de Chagas
SALN FALCN
HORA: 8:00 a 10:00 a.m.
CICLO DE CONFERENCIAS:
MICROBIOLOGIA DE LA ENFERMEDAD PERIODONTAL
Coordinador. Dr. Ronald Milln
Moderadora: MSc. Drubic Lemus
Enfermedad periodontal. Dra. Mercedes Paz de Gudio (LUZ)
Microbiologa de la enfermedad periodontal. Dr.Ronald Milln (LUZ)
Aspectos inmunolgicos relacionados con la inflamacin en la enfermedad
periodontal. Dra.Dinorath Bohrquez (LUZ)
HORA: 10:00 a 10:30 a.m. Refrigerio
HORA: 10:30 a 12:30 a.m.
SIMPOSIO: Infeccin VIH/SIDA.
Coordinadora: Dra. Arelis Lleras de Torres
Moderadora: MSc. Belkys Fuentes
Tuberculosis y SIDA: Problemtica en Venezuela y herramientas
diagnsticas. Dra. Zhenia Fuentes (Programa de Tuberculosis)
Manifestaciones cutneo-mucosas en nios con infeccin
VIH/SIDA. Dra. Arelis Lleras de Torres (Fundacin INNOCENS)
Cryptococosis: Un reto para el Laboratorio y para el clnico.
Dr. Hctor Abad (Hospital Coromoto. Zulia)
HORA DE ALMUERZO LIBRE
HORA: 2:00 a 3:45 p.m.
MESA REDONDA: Perspectiva, enfoque e importancia de la vigilancia
epidemiolgica.
Coordinadora-Moderadora: MSc. Jennifer Gotera
Generalidades e importancia de la vigilancia epidemiolgica en el estado
Zulia. Dra. Cecilia Lpez
Procedimientos locales de la vigilancia epidemiolgica. Dra. Flor Fernndez
El papel de la enfermera en la vigilancia epidemiolgica.
Lcda. Luz Marina Ruiz
Factores de riesgo y prevencin de las Hepatitis virales B y C.
Dra. Maribel Lizarzabal
Factores de riesgo y frecuencia de Leptospirosis y Rotavirus en el estado
Zulia. Vigilancia de infecciones bacterianas de denuncia obligatoria.
MSc. Angelina Mrquez
Evaluacin cronolgica de las enfermedades exantemticas y Chagas en el
estado Zulia en ltimos aos. MSc. Alibeth Mavarez
HORA: 3:45 a 4:00 p.m. Refrigerio
HORA: 4:00 a 6:00 p.m.
SIMPOSIO: Los microorganismos en la industria petrolera.
Coordinadores: Dra. Laugeny Daz
Moderador: MSc. Nstor Rosales
Biocorrosin en la industria petrolera. Dra. Zoilabet Duque (INZIT-Zulia)
Hidrocarburos en ecosistemas acuticos: Interaccin petrleo -
microorganismos. Dra. Luz Marina Soto (LUZ)
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Rev Soc. Ven. de Microbiol. Vol. 33, Supl. 1, Noviembre 2013
X Congreso venezolano de Microbiologia Ada Martnez de Gallardo

Tapetes microbianos y biorremediacin. MSc. Beltrn Briceo (LUZ)

Tcnicas de microbiolgicas de recuperacin de aguas petrolizadas. Flebotominos vectores de Leishmania bioecologia y transmisin.
Dra. Nancy Angulo (LUZ) Dra. Elsa Nieves (ULA)
Degradacin de suelos por actividades petroleras. Dr. Gustavo Morillo (LUZ)
HORA: 3:45 a 4:00 p.m. Refrigerio

SALN PALMAREJO HORA: 4:00 a 6:00 p.m.

HORA: 8:00 a 10:00 a.m.
SIMPOSIO: Nuevas tecnologas y sus efectos sobre la carga Microbiana.
Coordinador: Dr. Wilfido Briez
Moderadora: Ing. Agron. Nohans Rumbos
La ultra alta presin de homogenizacin aplicada en alimentos fluidos.
Efecto sobre microorganismos Gram positivos y negativos.
Dr. Wilfido Briez Zambrano (LUZ)
La alta presin como herramienta para asegurar la estabilidad microbiolgica
de los alimentos. Dr. Arthur Xavier Roig Sages (UAB-Espaa)
Efecto de las altas presiones isostticas y la irradiacin sobre la Listeria
monocytogenes inoculada sobre ovoproductos.
Dr. Vctor Gelvez Ordoez (Universidad de Pamplona, Colombia)
El control de la formacin de aminas bigenas en los alimentos.
Dr. Arthur Xavier Roig Sages (UAB-Espaa)
Microbiologa predictiva y seguridad alimentaria.
MSc. Emiro Valbuena (LUZ)
CICLO DE CONFERENCIAS:
LOS MICROBIOS Y LOS ALIMENTOS
Coordinadora-Moderadora: Dra. Kutchynskaya Valero
Productos congelados Seguros microbiolgicamente?
Dra. Zoraida Medina (LUZ)
Herramientas moleculares para detectar patgenos en alimentos.
MSc. Jhoandry Rivera (LUZ)
Recubrimientos comestibles para el control de microorganismos en
alimentos. MSc. Viluzca Fernndez
Mejorando la calidad de los quesos con bioconservacin
MSc. Gustavo Castro (LUZ)
(12:00 m 2:00 p.m) Presentacin de trabajos libres reas: Micologa,
Parasitologa, Virologa, Bacteriologa y Biologa Molecular

HORA: 10:00 a 10:30 a.m. Refrigerio

HORA: 10:30 a 12:30 a.m.

CICLO DE CONFERENCIAS:
AVANCES EN VETERINARIA
Coordinadora-Moderadora: Dra. Gabriela Carruyo
Staphylococcus aureus meticilino-resistente. Dr. Armando Hoet (EEUU)
Infecciones oftalmolgicas en caninos. MSc. Gibson Fernndez (LUZ)
Aspectos epidemiolgicos relevantes de la Leptospirosis en Venezuela.
Dra. Arelis Garca (LUZ)
Encefalitis del Oeste del Nilo. Dr. Alberto Medina (LUZ)

HORA DE ALMUERZO

HORA: 2:00 a 3:45 p.m.

SIMPOSIO: Progresos en el estudio de las interrelaciones patgeno-vector.
Coordinador-Moderador: Dr. Ernesto San Blas
Usos de Wolbachia para reducir la transmisin del Dengue.
Dr. Luciano Moreira (Brasil)
Interrelaciones Trypanosoma cruzi/Trypanosoma rangeli-Triatominos y la
enfermedad de Chagas en Venezuela. Dr. Nstor Aez Reverol (ULA)
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X Congreso venezolano de Microbiologia Ada Martnez de Gallardo

PROGRAMA SOCIOCULTURAL
LUNES 04-11-2013
Exposicion permanente de Don Gerardo Moreno, artista creador de la imagen
del X Congreso Venezolano de Microbiologia
Ada Martinez de Gallardo

HORA: 6:30 p.m. Saln Bolvar

ACTO DE INSTALACIN
Interpretacin de los himnos nacional y regional a cargo del Coro de
Cmara Madrigalia.
Palabras de la Dra. Nereida Valero, Presidenta del Comit Organizador.
Semblanza de la Dra. Ada Martnez de Gallardo, epnima del Congreso, a
cargo de la Prof. Messaria Ginestre.
Entrega de Reconocimiento a la Dra. Ada Martnez de Gallardo.
Palabras de la Dra. Ada Martnez de Gallardo.
Entrega de reconocimiento a don Gerardo Moreno, artista plstico oficial
del Congreso, e invitacin a su exposicin artstica.
Repertorio musical a cargo del Coro de Cmara Madrigalia
Brindis y recital de msica a cargo del Grupo Elegancia.

MARTES 05-11-2013

HORA: 7:30 p.m.

RUTA PATRIMONIAL A BORDO DEL TRANVIA DE MARACAIBO

MIERCOLES 06-11-2013
HORA: 7:00 p.m.
ACTO DE CLAUSURA
Palabras de la Dra. Nereida Valero, Presidenta del Comit Organizador.
Entrega de premios a los trabajos galardonados del Congreso.
Entrega de reconocimientos al Comit Organizador.
Celebracin del da del Microbilogo con una noche a lo zuliano.
Danzas Cantaclaro
Grupo gaitero los Galenos de la Gaita
Orquesta del Pelon Valbuena
Tambores Zaguan de LUZ

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X Congreso Venezolano de Microbiologa Ada Martnez de Gallardo

RESMENES DE CONFERENCIAS

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 Revista de la Sociedad Venezolana de Microbiologa 2013; 33: suplemento 1
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X Congreso Venezolano de Microbiologa Ada Martnez de Gallardo

Conferencia Magistral
Dr. Enrique Tejera
Las vacunas: desde Jenner hasta una vacuna contra el VIH/SIDA

Dr. Jos Esparza

Fundacin Bill & Melinda Gates, Seattle, WA, Estados Unidos

La primera descripcin de inmunidad post-enfermedad se
hizo durante la Plaga de Atenas en el ao 430 antes de Cristo.
Durante ms de 2,000 aos ese concepto se incorpor de
manera emprica a la prctica de la medicina, notablemente
con el uso de la variolizacin. El gran salto intelectual ocurri
cuando Edward Jenner utiliz la experimentacin para
demostrar que la inoculacin en humanos de una enfermedad
pustular de las vacas confera proteccin contra la viruela,
naciendo as la primera vacuna en 1796. Pasaron entonces casi
100 aos antes de que se conceptualizara la teora microbiana
de las enfermedades y se establecieran las bases de la
inmunologa. En 1885 Louis Pasteur desarrolla la segunda
vacuna, esta vez contra la rabia. En honor a Jenner, Pasteur
extendi el uso de la palabra vacunacin a todas las
inoculaciones preventivas contra las enfermedades
infecciosas. Durante la primera mitad del siglo 20 se
desarrollaron, de manera prcticamente emprica, vacunas
efectivas contra muchas enfermedades infecciosas. Un
esfuerzo heroico fue el desarrollo en 1954-1955 de la vacuna
Salk contra la poliomielitis, que requiri una prueba de
eficacia la cual en una ao reclut a cerca de 1.8 millones de
nios en los Estados Unidos.
El uso de la vacuna permiti erradicar la viruela en 1977 y
esperamos que tambin la poliomielitis se erradique en los
prximos aos. Una vacuna tambin fue instrumental en la
erradicacin de una enfermedad veterinaria en el 2011, el
. 2. Esparza J. A brief history of the global effort to develop a
Rinderpest o peste bovina. Otras vacunas han disminuido de
manera significativa la morbilidad y mortalidad causadas por
las enfermedades infecciosas.
Sin embargo, el desarrollo de una nueva generacin de
vacunas altamente efectivas, especialmente contra el
paludismo, el SIDA y la tuberculosis, requerir la aplicacin
de enfoques nuevos basados en la biologa molecular,
estructural y de sistemas. Mtodos de vacunologa reversa ya
estn dando sus primeros frutos. En el 2009 tuvimos la
primera seal de eficacia protectora de una vacuna contra el
VIH (RV144, implementada en Tailandia) lo cual nos est
dando la oportunidad de identificar correlatos inmunolgicos
de proteccin. Las nuevas vacunas tendrn que ser mejor que
la naturaleza, induciendo la inmunidad no natural que se
necesita, por ejemplo, para desarrollar vacunas universales
contra la influenza.
Pero una vez que venzamos lo retos cientficos, debemos
tambin vencer el reto social de hacer dichas vacuna
accesibles a todas las poblaciones que las necesiten,
especialmente en los pases en vas de desarrollo
Bibliografa Consultada:
1. Esparza J. A tale of two vaccines: lessons from polio that
could inform the development of an HIV vaccine. AIDS
27:1-5 (2013).
preventive HIV vaccine. Vaccine 2013 (en imprenta)

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 Revista de la Sociedad Venezolana de Microbiologa 2013; 33: suplemento 1
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X Congreso Venezolano de Microbiologa Ada Martnez de Gallardo
SIMPOSIO
RESISTENCIA BACTERIANA
Coordinador: MSc. Armindo Perozo
Moderador: MSc. Luis Gonzlez
Resistencia a drogas en
enterobacterias
Lcdo. Luis Carlos Torres Castillo
Ctedra de Microbiologa.
Escuela de Bioanlisis. UCV.
ltorresucv@gmail.com
En los ltimos veinte aos hemos sido testigos de la
publicacin de mltiples artculos a nivel mundial que
destacan a un grupo de bacterias que causan graves problemas
de multiresistencia. Estas bacterias se han agrupado bajo las
siguientes siglas: grupo ESKAPE ESCAPE, bajo cualquiera
de las dos nomenclaturas se observa claramente como las
Enterobacterias tienen un papel preponderante dentro de las
llamadas superbacterias difciles de tratar.
En la actualidad podemos observar reportes de especies
como K. pneumoniae, E. cloacae, E. coli, entre otras capaces
de presentar determinantes de resistencia a prcticamente
todas las opciones teraputicas disponibles en el mercado
farmacutico.
Por muchos aos los B-lactmicos constituyeron drogas
efectivas para el tratamiento de mltiples gneros de la familia
Enterobacteriaceae, sin embargo en la actualidad se ha
diseminado la resistencia a prcticamente todos los
representantes de este grupo de antibiticos, incluyendo los
carbapenmicos. Varios gneros pertenecientes a las
Enterobacterias (Enterobacter, Serratia, Citrobacter,
Providencia, etc.), de manera intrnseca son resistentes a las
penicilinas, aminopenicilinas, combinaciones con inhibidores
como amoxicilina/clavulnico, ampicilina/sulbactam,
cefalosporinas de primera y segunda generacin producto de
que expresan B-lactamasas de origen cromosmico conocidas
como AmpC, este tipo de enzima puede ser expresada de
forma constitutiva (basal y derreprimida) e inducible. De la
misma manera existen B-lactamasas codificadas a nivel
plasmdico que se han diseminado a todos los gneros de
Enterobacterias, las primeras de estas enzimas se
denominaron B-lactamasas de espectro ampliado, las ms
conocidas se denominan TEM-1, TEM-2 y SHV-1, las cuales
hidrolizan las penicilinas, aminopenicilinas y cefalosporinas
de primera y segunda generacin, y a diferencia de las AmpC,
son inhibidas por compuestos como sulbactam y clavulnico.
La diseminacin de este tipo de enzimas hizo que la industria
farmacutica desarrollara nuevos B-lactmicos estables frente
a estas B-lactamasas, pero ya para la dcada de los aos 80
surgen las B-lactamasas de espectro expandido (BLEE), las
cuales hidrolizan prcticamente todos los B-lactmicos
excepto los carbapenmicos, las combinaciones con
inhibidores de B-lactamasas y las cefamicinas. Las primeras
de estas BLEEs que se diseminan a nivel mundial son las
derivadas de TEM y SHV, pero en la ltima dcada hemos
observado una real pandemia de microorganismos portadores
de BLEEs tipo CTX-M, con especial atencin en la variante
CTX-M-15 que se ha diseminado inclusive a nivel
comunitario. Existen problemas adicionales de resistencia con
las BLEEs, ya que cuando se conjuga este mecanismo de
resistencia junto a la alteracin de la permeabilidad de la
bacteria se puede generar resistencia a los carbapenmicos,
especialmente al ertapenem.
La diseminacin masiva de Enterobacterias productoras de
BLEE gener un sobreuso de carbapenmicos, ya que estos
antibiticos constituyen la mejor opcin teraputica para
bacterias productoras de BLEE y AmpC derreprimidas, este
uso excesivo trajo nuevos problemas como fue la seleccin de
P. aeruginosa y A. baumannii resistentes a carbapenmicos, y
ms recientemente, la seleccin de Enterobacterias
productoras de carbapenemasas. Si bien es cierto que la
diseminacin de BLEEs gener una alarma mundial, es de
mayor preocupacin el panorama devastador que tenemos en
el futuro si existiese una diseminacin de carbapenemasas
parecida a la ocurrida con las BLEEs. En los microorganismos
productores de carbapenemasas las opciones teraputicas se
encuentran limitadas a prcticamente dos o tres antibiticos
para los cuales ya existen reportes de resistencia tambin. Las
carbapenemasas que mayor problema generan en las
Enterobacterias son las KPC, las NDM-1 y las derivadas de la
OXA-48.
En cuanto a la resistencia a las quinolonas, el principal
mecanismo observado en las Enterobacterias sigue siendo las
mutaciones cromosmicas de los genes codificantes de las
girasas y topoisomerasas, estas mutaciones se dan en
segmentos calientes denominados QRDR. La resistencia a
quinolonas bajo este mecanismo es escalonada, es decir, una
mutacin inicial genera resistencia al cido nalidixico y
mutaciones subsiguientes afectarn entonces a las
fluoroquinolonas. Adicionalmente, desde hace varios aos se
han reportado nuevos mecanismos de resistencia a las
quinolonas, los cuales son codificados a nivel plasmdico, los
principales mecanismos de este tipo son protenas protectoras
de la ADN girasa denominadas QNRs. Otro mecanismo que
afecta de manera especial a la ciprofloxacina y la norfloxacina
viene dado por una acetilasa de aminoglicsidos, que por
cambios mutacionales logra inactivar a las fluoroquinolonas
que tienen un grupo piperacnico en su estructura qumica,
esta acetilasa es la AAC(6`)-Ib-cr. Adems de estos
mecanismos, tambin se han reportado dos bombas de flujo
que expulsan a las quinolonas y son codificadas en plsmidos,
la primera de ellas en ser reportada fue la QepA.
Otro grupo de antibiticos donde hemos observado un
desarrollo de mecanismos de resistencia importante por las
Enterobacterias lo constituyen los aminoglicsidos. Por
muchos aos el principal mecanismo de resistencia a estos
antibiticos vino dado por enzimas inactivantes o
modificadoras, enzimas tipo acetilasas (AAC),
fosfotrasnferasas (APH) y nucleotidil transferasas (ANT), las
cuales modifican la estructura de los aminoglicsidos y de
esta manera no se pueden unir de manera eficaz a su sitio
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blanco, es decir, a los ribosomas. Los genes que codifican
estas enzimas son plasmdicos y generalmente se asocian a los
mismos plsmidos en los cuales se encuentran los genes de
BLEE y QNRs. Las diferentes variantes de estas enzimas
afectan de manera especfica a determinados aminoglicsidos,
de tal manera que la resistencia a todos los representantes de
los aminoglicsidos, incluyendo la amikacina, generalmente
es producto de la coexistencia de mltiples enzimas
modificadoras. Pero para complicar an ms el panorama se
han reportado enzimas denominadas metilasas que metilan la
subunidad ribosomal blanco de los aminoglicsidos y de esta
manera estos antibiticos no se pueden unir a su blanco; lo
importante de este mecanismo es que afecta de forma cruzada
a todos los aminoglicsidos y adems sus genes son
codificados tambin en plsmidos.
En este panorama de resistencia extrema de las
Enterobacterias solo quedan pocas opciones teraputicas,
como la tigeciclina, la colistina y la fosfomicina, y para cada
uno de estos antibiticos ya se ha documentado reportes de
resistencia, inclusive ha ocurrido brotes de resistencia de K.
pneumoniae resistentes a colistina.
Es un verdadero reto para el laboratorio de Microbiologa
tener un recurso humano formado y actualizado que entienda
de manera clara estos mecanismos de resistencia y que tenga
la capacidad de poder detectarlos. Asimismo, debe existir una
dotacin de los equipos e insumos necesarios para la
deteccin de estos mecanismos, muchos de los cuales pueden
ser expresados a un nivel bajo, difcil de ser detectados en el
laboratorio si no se dispone de las herramientas adecuadas. Es
imprescindible que el microbilogo est consciente de la
relevancia de detectar estos mecanismos de resistencia para
alertar al clnico y ajustar la teraputica, pero tambin para
informar a epidemiologa en el momento adecuado y de esta
manera implementar las medidas de control necesario.
Resistencia a drogas en bacilos
gram negativos no fermentadores
Lcdo. Luis Carlos Torres Castillo
Ctedra de Microbiologa.
Escuela de Bioanlisis. UCV.
ltorresucv@gmail.com
Sin lugar a dudas, entre los Bacilos Gram negativos que
mayor problemtica de multiresistencia generan en nuestras
instituciones hospitalarias se encuentran los No
Fermentadores, especialmente, P. aeruginosa y A. baumannii,
los cuales, juntamente con las Enterobacterias forman parte
del llamado grupo ESKAPE/ESCAPE. Ambas especies de
bacilos no fermentadores han sido catalogadas como
microorganismos con resistencia extrema, inclusive existen
reportes de resistencia a todas las opciones teraputicas
disponibles para ellos.
P. aeruginosa por mucho tiempo ha sido catalogada como
una bacteria dinmica para adquirir diversos mecanismos de
resistencia a los antibiticos, de manera natural, cuenta con
una membrana externa y porinas que no permiten el paso de
varios antibiticos, adicionalmente cuenta con mltiples
sistemas de eflujo que le permiten expulsar diferentes drogas
y en el caso de la resistencia a B-lactmicos cuenta con una B-
lactamasa tipo AmpC denominada PDC, que le confiere
resistencia a varios B-lactmicos y que cuando se derreprime
logra afectar a la ceftazidima.
En cuanto a la resistencia adquirida a B-lactmicos es
producto de diversas BLEEs que logran hidrolizar a la
ceftazidima y al cefepime, las principales son las de tipo GES,
OXA y las tradicionales SHV, TEM e inclusive las CTX-M.
De la misma manera, la bomba de eflujo MexAB OprM logra
expulsar muy eficazmente al cefepime, aztreonam y
meropenem, generando resistencia a dichos antibiticos,
pudindose observar disociaciones tales como cepas
resistentes al cefepime y sensibles al ceftazidime.
La resistencia a carbapenmicos es multifactorial y es
disociada, se puede obtener resistencia solo al imipenem,
producto de la prdida de permeabilidad por alteracin o
prdida de la porina OprD, que permite la entrada
fundamentalmente de imipenem en una relacin 10:1 vs
meropenem. La bomba MexAB OprM expulsa principalmente
meropenem, generando resistencia solo a este carbapenmico.
La combinacin de estos dos mecanismos puede afectar a
ambos carbapenmicos, pero el mecanismo de resistencia a
estas drogas que mayor problema genera es la produccin de
carbapenemasas, principalmente se han reportado en P.
aeruginosa las metalo-B-lactamasas tipo VIM, IMP, SPM,
estas enzimas hidrolizan todos los B-lactmicos excepto el
aztreonam. Tambin ha llamado la atencin los mltiples
reportes de deteccin de carbapenemasa tipo KPC en P.
aeruginosa, corroborando la gran diseminacin que ha
mostrado esta enzima.
La resistencia a quinolonas igualmente es producto de
mutaciones en los genes gyrA, gyrB y parC, parD,
adicionalmente los sistemas de eflujo tambin colaboran con
esta resistencia al igual que lo hacen los nuevos mecanismos
de resistencia plasmdicos tipo QNR. Los aminoglicsidos
tambin son afectados, al igual que ocurre en las
Enterobacterias, por la accin de enzimas inactivantes y
metilasas que contribuyen drsticamente con la resistencia,
aunque tambin participan las bombas de eflujo.
Cuando se expresa toda esa diversidad de mecanismos de
resistencia nos conseguimos con un microorganismo muy
difcil de tratar. En algunos casos solo queda como opcin
teraputica la colistina para la cual tambin se ha demostrado
resistencia.
Con respecto a A. baumannii, podemos decir que se ha
convertido en el paradigma de la multiresistencia bacteriana.
Es un microorganismo que genera principalmente infecciones
nosocomiales, que presenta una permeabilidad relativa de su
membrana externa que impide que muchos antibiticos
penetren hasta sus sitios blancos. Tambin cuenta con una
cefalosporinasa cromosmica denominada ADC y dos
sistemas de eflujo que colaboran con la resistencia intrnseca
de esta bacteria.
Adicionalmente, se ha demostrado la presencia de
diferentes BLEEs y carbapenemasas, entre estas ltimas las de
mayor relevancia para esta especie son las carbapenemasas de
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la familia OXA, principalmente las variantes OXA-23, 24, CICLO DE CONFERENCIAS
40,58. El nivel de resistencia que pueden generar estas
enzimas est relacionado de manera ntima con unas
LOS VIRUS: NUEVOS AVANCES
secuencias de insercin denominadas ISAba, las cuales se Coordinador-Moderador: MSc. Anyelo Durn
encuentran a nivel del sitio promotor, mientras mayor
cantidad exista de estas secuencias ISAba mayor ser el nivel
de resistencia que se genere a los B-lactmicos. Adems de
estas carbapenemasas tipo OXA, A. baumannii tambin ha Evolucin molecular de los virus de
logrado adquirir genes plasmdicos o asociados a hepatitis en Latinoamrica
transposones, que codifican para KPC y NDM-1.
La resistencia a quinolonas y aminoglicsidos es similar a Dra. Flor Pujol
la descrita en P. aeruginosa y Enterobacterias, ambas se
Instituto Venezolano de Investigaciones Cientficas,
expresan con mucha frecuencia y es por ello que se observa
Centro de Microbiologa y Biologa Celular,
resistencia extrema en este microorganismo, en mltiples
Laboratorio de Virologa Molecular.
ocasiones solo se observa sensibilidad a la tigeciclina y la fhpujol@gmail.com
colistina, las cuales al ser usadas por mucho tiempo tambin
permiten la seleccin de las variantes resistentes que se
Se conocen en la actualidad al menos 5 virus causantes de
reportan cada vez con mayor frecuencia.
hepatitis (VH): de transmisin entrica (VHA y VHE) y los de
Es importante destacar que a diferencia de los Gram
transmisin parenteral (VHB, VHC y VHD) asociados stos a
positivos para los cuales han salido al mercado nuevas
secuelas ms graves como carcinoma hepatocelular. Adems de
opciones teraputicas, en el caso de los Bacilos Gram
estos virus, se han propuesto otros, como el GBV-C, que se ha
negativos eso no ha ocurrido y nos encontramos en una
demostrado posteriormente que no est asociado a hepatitis. De
situacin crtica en la cual tenemos que ser muy ingeniosos
los 8 genotipos del VHB (A-H), el genotipo F sur americano es
para cuidar y prolongar la vida de las opciones que nos
el ms divergente y el posible progenitor de los virus humanos.
quedan hoy en da. El reto es difcil pero no imposible, el
Este genotipo es altamente frecuente en Venezuela, as como en
conocimiento de los mecanismos de resistencia puede permitir
pases donde el reservorio gentico amerindio es importante. De
el desarrollo de nuevos antibiticos, as como adecuar las
los 8 genotipos del VHD, el genotipo 3 sur americano est
dosis o formas de administracin de los antibiticos que se
asociado a una alta frecuencia de hepatitis fulminante. De los 6
utilizan actualmente.
genotipos del VHC, el genotipo 1 es muy frecuente en
La deteccin de mecanismos de resistencia en P.
Latinoamrica. La baja prevalencia de infeccin por VHC
aeruginosa y A. baumannii es ms compleja que en las
encontrada en poblaciones amerindias, as como la distribucin
Enterobacterias, ya que al existir mltiples mecanismos
de genotipos en la regin, sugieren que este virus fue introducido
intrnsecos se puede enmascarar la deteccin de mecanismos
en Amrica mayormente por inmigraciones europeas. La
como las BLEEs y carbapenemasas.
frecuencia del genotipo 2 del VHC ha ido aumentando en forma
El grupo de BGNNF es muy grande y adicionalmente a P.
significativa en Venezuela. Dentro del genotipo 2, circula
aeruginosa y A. baumannii, tambin existen otras especies
abundantemente el subtipo 2j, que probablemente fue
que portan mecanismos de resistencia sofisticados y que
introducido a Venezuela a travs de la trata de Esclavos,
dificultan su teraputica, tal es el caso de S. maltophilia y el remontando su origen en el pas hacia 1785. La circulacin del
complejo B. cepacea, ambas presentan resistencia natural a un
genotipo asitico del GBV-C en las poblaciones amerindias
nmero elevado de antibiticos, por lo tanto las opciones
venezolanas confirma la hiptesis de que este virus migr con
teraputicas disponibles son muy pocas y cuando se expresa
los primeros Hombres americanos, hace unos 10.000-30.000
resistencia a las mismas nos encontramos con aos. A partir de estos estudios podemos concluir que el GBV-C
microorganismos muy difciles de tratar.
sera probablemente el virus ms antiguo de este grupo y el VHC
El panorama de la resistencia bacteriana a los antibiticos
el ms reciente. En base a los anteriormente expuestos, ms que
puede lucir muy oscuro y desolador, solo la forma en la que
de 5 entidades virales, podramos estar hablando de una
actuemos hoy nos dar respuestas claras y contundentes de veintena de variantes virales que infectan al hgado, en forma
cmo se puede sobrellevar el futuro.
individual o mixta, con secuelas variables segn la variante, la
constitucin gentica del hospedador y distintos aspectos
epidemiolgicos. No para todos estos virus existe una vacuna
pero las vacunas existentes (contra el VHA, el VHB y pronto
el VHE) son altamente efectivas y protegen hasta de un
carcinoma hepatocelular como en el caso de la vacuna contra
el VHB. Algunas de estas variantes virales podran haberse
originado en nuestro continente, como es el caso del VHB
genotipo F y H. Algunos de estos virus tienen un largo tiempo
de convivencia con nuestros pobladores originarios, como el
GBV-C, mientras que otros son productos de introducciones
ms recientes, de la poca de la trata de esclavos como el

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VHC genotipo 2 an ms recientemente, como los genotipos
1 del VHC.
Epidemiologa molecular del virus
dengue en Amrica
Molecular epidemiology of dengue virus
in America
Dr. Germn Aez
Visiting Associate, Laboratory of Emerging Pathogens,
DETTD, OBRR
Center for Biologics Evaluation & Research (CBER)
US Food and Drug Administration (FDA)
German.Anez@fda.hhs.gov
El dengue es una enfermedad febril aguda emergente
causada por la infeccin con cualquiera de los miembros de
un complejo de cuatro virus (DENV-1 al 4) pertenecientes al
gnero Flavivirus, los cuales son transmitidos por la picadura
de mosquitos del genero Aedes (Stegomyia). La infeccin con
cualquiera de los tipos de DENV puede ser asintomtica en
una proporcin de los individuos infectados o puede causar un
espectro clnico de severidad variable (fiebre dengue a dengue
severo). Esta enfermedad se cree que ha estado presente en
Amrica desde hace ms de 200 aos, adonde se especula que
lleg desde frica junto con el virus de la fiebre amarilla y
otros patgenos a travs del comercio de esclavos. Cada uno
de los cuatro tipos de DENV han sido clasificados
filogenticamente en genotipos que varan en nmero
dependiendo del tipo de DENV: 5 genotipos para DENV-1, 6
para DENV-2, 5 para DENV-3 y 4 para DENV-4 (1). El
primer reporte de casos de dengue en Amrica confirmados
virolgicamente ocurri en Trinidad durante 1953 y en el cual
se aisl DENV-2. Subsecuentemente durante 1963-1964, la
primera epidemia de dengue confirmada por laboratorio
(causada por DENV-3) fue registrada en varios pases del
Caribe. Ya para 1977, se reporta la circulacin de DENV-1 el
cual se cree que fue introducido al continente Americano va
Jamaica, desde donde rpidamente se desplaza a otros pases
caribeos y de Suramrica causando importantes brotes
epidmicos. No fue sino hasta 1981 cuando se confirma por
primera vez la circulacin de DENV-4 en el continente
cuando este tipo de DENV fue detectado en Puerto Rico
donde se diseminara posteriormente al resto del continente (2,
3). Desde entonces, todos los tipos de DENV circulan en el
continente, siendo hoy en da frecuente encontrar co-
circulacin de los cuatro tipos de DENV simultneamente en
varios pases de la regin, fenmeno epidemiolgico este
conocido como hiperendemicidad. Estudios filogenticos
han revelado la circulacin en el continente Americano de
cepas pertenecientes a genotipos especficos de cada uno de
los tipos de DENV, algunos de los cuales se han visto
desplazados por otros a lo largo del tiempo; as para DENV-1
circularon inicialmente cepas pertenecientes al genotipo IV
(1970s-1980s) pero actualmente circulan exclusivamente
cepas del genotipo V, para DENV-2 originariamente circulaba
el genotipo Americano (1970s-1990s) que fue desplazado por
el genotipo Americano/Asitico (el cual se ha asociado a
mayor virulencia), para DENV-3 inicialmente circulaba el
genotipo IV (1960s-1970s) y desde finales de los aos 1990s
circula el genotipo III (tambin de origen asitico), mientras
que para DENV-4 solo cepas pertenecientes al genotipo II han
sido detectadas circulando en el continente desde su
identificacin en la dcada de los 1980s (3, 4). Los genotipos
de DENV frecuentemente poseen estructura geogrfica y
temporal definida, es decir, cepas aisladas en un lugar y fecha
determinados tienden a estar estrechamente relacionadas
filogenticamente entre s. Dentro de cada uno de los
genotipos de DENV diferentes linajes virales han sido
detectados circulando en ciertas regiones del continente, lo
cual sugiere evolucin in situ que se ha acompaado de
modesta seleccin positiva de un nmero de codones a lo
largo del genoma viral. Algunos de estos linajes virales han
sido relacionados con severidad clnica incrementada en
epidemias recientes (4, 5). El continente Americano es un
lugar interesante para el estudio de la dinmica evolutiva del
DENV, dado que en el mismo parecen existir ciclos activos de
intercambio de cepas y linajes virales con circulacin
(introducciones y re-introducciones frecuentes) entre pases de
Centroamrica, Suramrica y el Caribe (4, 5). Los fenmenos
epidemiolgicos y evolutivos responsables por la introduccin
y subsecuente extincin temporal o definitiva de genotipos y
linajes de los cuatro tipos de DENV en pases de Amrica en
donde DENV es endmico o causa epidemias espordicas, son
poco entendidos y son por ende motivo de intenso estudio.
Referencias
1. Chen R, Vasilakis N. Dengue quo tu et quo vadis?
Viruses. 2011;3(9):1562-1608.
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http://www.paho.org/English/HCP/HCT/dengue_timelin
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America: a worsening scenario? Biomed Res Int. 2013;
678645. doi: 10.1155/2013/678645.
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Phylogenetic analysis of dengue virus types 1 and 4
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2010 epidemics. Am J Trop Med Hyg. 2012; 87(3):548-
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5. Aez G, Morales-Betoulle ME, Rios M. Circulation of
different lineages of dengue virus type 2 in Central
America, their evolutionary time-scale and selection
pressure analysis. PLoS One. 2011;6(11):e27459. doi:
10.1371/journal.pone.0027459.
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Terapia antiviral profilctica y
resistencia a drogas
Pre-Exposure therapy and drug resistance
Dr. Hctor R. Rangel Escalante
Instituto Venezolano de Investigaciones Cientficas,
Laboratorio de Virologa Molecular.
hrangel2006@gmail.com
La terapia profilctica contra Virus de Inmunodeficiencia
Humana (VIH) consiste en la aplicacin, en forma de pldoras
o geles vaginales o rectales, de un medicamento con actividad
antiviral. Esto se traduce en el mantenimiento de una
concentracin determinada en el organismo del principio
activo de manera tal que si en un momento determinado el
individuo se expone al virus, se reduzca la probabilidad de
infeccin. En este sentido la terapia profilctica se diferencia
de la terapia post-exposicin en que la segunda se aplica para
reducir la probabilidad de xito de un evento de infeccin,
posterior al contacto con el virus. Si bien la terapia
profilctica ha mostrado buenos resultados en varios de los
triales realizados, existe preocupacin en el sentido que esta
pueda favorecer la transmisin de variantes resistentes.
Durante el ciclo de replicacin del VIH se acumulan
mutaciones asociadas al proceso de transcripcin reversa, lo
que genera una poblacin viral altamente relacionada pero a
su vez con diferencias, esta poblacin es conocida como
cuasiespecie y en ella se encuentran las diversas variantes
virales sobre las cuales la seleccin natural acta, la
preexistencia de variantes virales con mutaciones, que pueden
conferir resistencia a un frmaco determinado, es una de las
principales causas que conllevan a las fallas teraputicas, si
esto se asocia a una baja adherencia al tratamiento se tiene la
combinacin apropiada para la seleccin de variantes
resistentes. En Venezuela aproximadamente el 11 % de los
pacientes que no han recibido tratamiento presentan
mutaciones detectables asociadas a resistencia a alguno de los
antirretrovirales existentes, lo que puede sugerir la
transmisin de variantes resistentes, que a su vez puede
impactar negativamente en la implementacin de una terapia
profilctica, favoreciendo la dispersin de estas variantes en la
poblacin.
Palabras clave: VIH, resistencia, profilaxis, terapia.
CICLO DE CONFERENCIAS
LA INMUNOLOGIA EN LA ACTUALIDAD
Coordinadora-Moderadora: Dra. Julia Arias
Factores inmunolgicos predictores
de alergia en recin nacidos
Dra. Tania Bravo
Catedra de Medicina Tropical.
Facultad de Medicina, Universidad del Zulia
El desarrollo de patologa alrgica se produce como
consecuencia de una alteracin de la inmunidad natural, y una
alteracin de los mecanismos de proteccin corporal, dando
lugar a una respuesta errnea o exagerada frente a antgenos
normalmente inocuos, que genera cuadros clnicos con
manifestaciones cutneas, digestivas y/o respiratorias. Es una
respuesta mediada por inmunoglobulina E (IgE), que
condiciona en un segundo contacto la liberacin de
mediadores que desencadenan el cuadro clnico. La frecuencia
y distribucin de este proceso ha sufrido un incremento desde
la dcada de 1970, en las sociedades desarrolladas alcanza el
20% de la poblacin, mientras que en los pases en vas de
desarrollo estas enfermedades afectan entre 2,6 % y 6% de la
poblacin, lo que hace que exista un mayor inters en el
conocimiento de los mecanismos que la producen.
La naturaleza gentica de la alergia y los complejos
mecanismos que rigen el desarrollo del fenotipo atpico desde
la vida fetal se reconocen desde hace tiempo. Durante el
embarazo, se produce el paso de clulas trofoblsticas del
feto hacia la circulacin materna. La madre presenta durante
ese perodo un estado Th2 predominante y de este modo se
previene el rechazo al aloinjerto fetal, mediado por una
respuesta Th1. Este predominio Th2 supone una produccin
constante de interleucina-4 (IL 4) durante todo el embarazo.
En el feto tambin existe un predominio de respuesta Th2. El
proceso de sensibilizacin comienza sincrnicamente con el
inicio de la produccin fetal de IgE en la XI semana
gestacional, causada por protenas presentes en el lquido
amnitico que pasan al feto a travs de la piel y en menor
cantidad por va respiratoria. La sntesis de IgE est regulada
por los linfocitos Th2, que producen IL 4, la cual ejerce sus
funciones mediante la unin a un receptor especfico
expresado en las membranas celulares, acta sobre clulas B
en reposo hacindolas sensibles a otros estmulos, tiene
capacidad para producir una expansin de la proliferacin de
linfocitos B activados y dirige el cambio de isotipo haca IgE.
La IL-4 tambin promueve la expansin de linfocitos de
tipo Th2 que controlan la proliferacin y las acciones de
eosinfilos y mastocitos, la proliferacin de linfocitos T en
humanos y el aumento de la expresin de CD23 y de MHC de
clase II. Este efecto indirecto de IL-4, junto con su efecto
directo sobre la produccin de IgE, indica que IL-4 tiene un
papel principal en las enfermedades alrgicas. El predominio
de respuesta Th2 fetal que se ve acentuado en el caso de
madres atpicas implica que la determinacin de los valores
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X Congreso Venezolano de Microbiologa Ada Martnez de Gallardo
cuantitativos de las sustancias involucradas en la respuesta
Th2 debe estar directamente relacionada con la susceptibilidad
individual al desarrollo de enfermedad atpica, sirviendo por
tanto como marcador precoz de alergia. Esto se puede
correlacionar con la aparicin posterior de alteraciones
analticas que se correspondan con aparicin de
sintomatologa, mediante seguimiento posterior.
Referencias
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et al. Extent and burden of allergic diseases in elementary
schoolchildren: a national multicenter study. J Investig
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3. Devereux G, Barker RN, Seaton A. Antenatal determinants
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Allergy. 2002; 32: 43-50.
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J. allergy Clin Immunol. 2000, 105: 399-408.
SIMPOSIO
INFECCIONES DE TRANSMISIN SEXUAL
EN VENEZUELA. UN PROBLEMA DE SALUD
PBLICA
Coordinadora: Dra. Diana Callejas
Moderador: Dr. Pablo Altuve
Mapa epidemiolgico de la infeccin
por VPH en Venezuela
Dra. Mara Eugenia Cavazza Porro
Servicio Autnomo Instituto de Biomedicina.
MPPS-UCV
mcavazza@yahoo.com
En Venezuela as como en otros pases de la regin los
genotipos VPH-16 y 18 fueron los genotipos ms prevalentes
en las lesiones analizadas .El VPH-16 fue el ms
frecuentemente encontrado tanto en LIEag (35.56% ,48/135)
como en los casos de carcinoma ( 57.43% ,85/148).La
prevalencia del VPH-16 y 18 en las mujeres con lesiones
intraepiteliales de alto grado vara entre los pases
Latinoamericanos , con una prevalencia reportada entre 15.6
% y 70.7 .En los tres grupos de lesiones estudiadas se
presentaron en mayor frecuencia los genotipos de alto riesgo
oncognico VPH-16,18,33 y 52.La distribucin de los
distintos genotipos en los casos de coinfeccin en los grupos
analizados mostraron algunas diferencias. En los LIEbg se
observ que la coinfeccin ms frecuente fue con los
genotipos VPH 16, 18 y 33 en un 6.6% (9/135), VPH 18 y 33
(6.3% ,6/95) en las pacientes con LIEag y VPH -16 y 52 (
2.7% ,4/148) y VPH 31, 33 y 44 ( 2.7% ,4/148) en los casos
con carcinoma de cuello uterino .Las infecciones mltiples
con VPH van disminuyendo a medido que se avanza en el
grado de las lesiones. Estos resultados se corresponden con el
modelo de etapas mltiples para el desarrollo del cncer
cervical en el cual existe una tendencia al predominio de un
solo genotipo en relacin a la severidad de las lesiones
cervicales.
Al analizar la frecuencia de VPH versus a la tasa de
mortalidad por cncer de cuello uterino en Venezuela se
encuentra una gran dispersin de datos, debido a la falta de
estudios de epidemiologia molecular con criterios unificados y
metodologas nicas estandarizadas. Las frecuencias de la
presencia de VPH en muestras ginecolgicas pueden variar
desde un 80 % a un 20 % sin observarse una relacin directa
con las tasas de mortalidad ni los genotipos de alto riesgo
oncognico. Sin embargo, es claro que los genotipos de alto
riesgo oncognico como el 16 y 18 circulan en la mayora de
los estados del Pas.
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 Revista de la Sociedad Venezolana de Microbiologa 2013; 33: suplemento 1
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Estado del Arte de la Vacuna para la Trabajando en Red se puede conocer
Prevencin de la Infeccin por VPH mejor la distribucin de las
Infecciones de transmisin sexual en
Dra. Mara Correnti Venezuela
Jefe del Laboratorio de Gentica Molecular
Instituto de Oncologa y Hematologa Dra. Mara Eugenia Cavazza Porro
MPPS-UCV
Servicio Autnomo Instituto de
Biomedicina.
En Venezuela el cncer de cuello uterino es un problema
MPPS-UCV
de salud pblica, representando la primera causa de muerte en
mcavazza@yahoo.com
nuestra poblacin femenina. Cada ao se detectan 3.000 casos
nuevos de cncer cervicouterino en mujeres comprendidas
Las infecciones de transmisin sexual (ITS) estn entre las
entre 25 y 64 aos, considerado el grupo etario ms afectado.
patologas ms comunes en todo el mundo. La Organizacin
Estudios epidemiolgicos han demostrado que tipos
Mundial de la Salud (1991) ha establecido que una de cada
especficos de Virus Papiloma Humano (VPH), estn
100 personas hace, por lo menos, una consulta anual por
asociados a la patognesis de lesiones intraepiteliales
encontrarse infectado por alguno de los agentes asociados a
escamosas (LIE) y al cncer invasor. Se ha propuesto que la
estas enfermedades. En Venezuela, el Ministerio del Poder
progresin de LIE a cncer, suele estar asociado a infeccin
Popular para la Salud considera que las ITS integran un grupo
persistente con un mismo tipo viral de VPH de alto riesgo
de enfermedades endmicas, cuya principal fuente de
oncognico o por la ocurrencia de infecciones mltiples, con
adquisicin es el contacto sexual, e incluyen patologas como
ms de un genotipo de VPH.
sfilis, gonorrea, las producidas por el virus de papiloma
La integracin del ADN viral al genoma humano es
humano (VPH), virus herpes, hepatitis B y VIH. Las ITS son
considerada un evento fundamental para la progresin
un problema social, econmico, cultural y mdico. Se
tumoral. La utilizacin de las tcnicas de Biologa Molecular
diferencian claramente de otras enfermedades transmisibles y
para el diagnstico de la infeccin por VPH, permiten detectar
producen secuelas que slo se observan en ellas. En todas las
el genoma viral en material de citologa y biopsia, an si la
regiones estudiadas, se determin que la infeccin ms
infeccin es subclnica o el nmero de partculas virales
frecuente es la de VPH, seguida de Chlamydia y Herpes. En la
presentes es bajo.
Gran Caracas y Cojedes se detect la presencia de sfilis.
El control para el cncer cervical tiene nueva frontera
Actualmente, la evidencia epidemiolgica relaciona la
enfocada a la prevencin primaria, va inmunizacin contra el
infeccin por VPH con el desarrollo del cncer del cuello
VPH y al monitoreo de la infeccin con tcnicas que detectan
uterino. Mediante la realizacin de estudios moleculares se ha
el genoma viral aplicadas tanto solas o conjuntamente con la
establecido que alrededor de 99% de los cnceres del cuello
citologas, para poder determinar la adquisicin y/o la
uterino pueden atribuirse a los genotipos de alto riesgo
resolucin de la infeccin por los diferentes tipos de VPH.
oncognico de este agente viral. La deteccin de VPH
El desarrollo de vacunas profilcticas constituye un
demostr que en la Gran Caracas el virus est presente en
advenimiento importante en la prevencin de la infeccin por
59% de la poblacin estudiada; en Cuman hay 46,3% de
VPH. Actualmente se cuenta con la vacuna divalente que
mujeres infectadas y en Cojedes, 40%. En Zulia la positividad
incluye los genotipos 16,18 y cuadrivalente genotipos 16, 18,
es de 36,5% y en Mrida de 21,6%. Un estudio con
6, 11. La vacuna se est aplicando en nias en edades
proyeccin multicntrica permitir fortalecer grupos de
comprendidas entre 9 y 14 aos, en varios pases europeos y
trabajo y consolidar otros en distintas regiones del pas,
algunos latinoamericanos, aunque todava no de manera
unificar criterios de diagnstico, de interpretacin de
masiva en la poblacin general a travs de los esquemas de
resultados y de publicacin de nuevas terapias. El
vacunacin establecidos por los Ministerios Salud de cada
establecimiento de redes de centros de investigacin
pas. Es importante destacar que la colocacin de la vacuna en
preparados tecnolgicamente para la deteccin temprana de
la poblacin juvenil debe estar acompaada de programas
ITS, y su participacin en programas conjuntos de prevencin
educativos preventivos y continuos.
con los entes gubernamentales de salud y educacin, incidir
favorablemente en los parmetros de costo-efectividad y de
beneficio de la poblacin.
Proyecto financiado por FONACIT G-20050000408

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Construccin de plataformas de
informtica para registro de casos de VPH y su
asociacin con cncer de cuello uterino.
Aplicaciones en georeferencia
Dr. Antonio Salgado-Sabel
Seccin de Informtica.
Instituto de Biomedicina-MPPS-UCV.
En Venezuela el cncer de cuello uterino es la segunda causa
de muerte por cncer en mujeres, cada ao se detectan 3.000
nuevos casos, asocindose un 65% de estos al VPH. La
carencia de sistemas de informacin para el registro de la
morbilidad de casos asociados al VPH, nos plantea el diseo
de mecanismos de acceso y herramientas en red de mbito
nacional, que nos permitan conocer la situacin de salud en
relacin esta patologa, estratificar los hallazgos y plantear
medidas de prevencin y control. Se plantea desarrollar
sistemas de informacin orientados a la Web para ofrecer
cobertura ampliada. Utilizando los conocimientos sobre la
enfermedad se disean instrumentos de registro,
(epidemiolgicos, clnicos y de laboratorio), los cuales
incluyen indicadores de georreferencia (Estado). Se desarrolla
el sistema mediante herramientas de software libre y se aloja
en un servidor Web seguro. Se desarroll el sistema portal-
web que puede ser utilizado en red por las distintas
organizaciones de salud. Se realiz un piloto con 200
pacientes provenientes del estado Mrida y Regin Capital,
obtenindose datos georeferenciados que permitirn, mediante
un Sistema de Informacin Geogrfica, estratificar la
informacin disponible. Los datos de morbilidad y
epidemiologa de la enfermedad, optimizarn el uso de los
recursos disponibles, como por ejemplo, la distribucin de la
vacuna de acuerdo a grupos etarios. Se pueden relacionar las
consultas de ETS del pas en una red con este sistema, para
conocer la situacin epidemiolgica del VPH. El sistema
puede ser escalable y utilizado por organismos pblicos y
privados mediante inscripcin, es totalmente seguro y tico
para los pacientes. Para que un Sistema de Informacin en
Salud sea exitoso, aparte de un buen diseo y la tecnologa
apropiada, deber formar parte de un programa de notificacin
obligatoria. Financiado por: Misin Ciencias G-2007001088.
Palabras clave: Sistema de Informacin, Red, Virus del
papiloma humano, Cncer de Cuello Uterino, Georreferencia
CICLO DE CONFERENCIAS
Coordinadora-Moderadora:
Dra. Alisbeth Fuenmayor
Microbiota y Obesidad
Dra. Lidia Meja
CIEM Dr. Flix Gmez
Facultad de Medicina.
Universidad del Zulia
La obesidad es el principal problema de salud pblica que
afecta al menos a 400 millones de personas en el mundo. Las
causas que conducen a la obesidad son complejas, pero existe
consenso al proponer que la obesidad est influenciada por
una mezcla de factores ambientales, genticos, neuronales y
endocrinos. Recientemente, los cambios en el ambiente
microbiano dentro del intestino humano se han propuesto
como un factor etiolgico de la obesidad. La microbiota
intestinal tiene profundos efectos sobre la expresin gentica
del sistema enteroheptico del husped, incluyendo genes
involucrados con la inmunidad y el metabolismo; por ejemplo,
ella afecta la expresin de las protenas secretadas por el
intestino, modulando el metabolismo de los lpidos en rganos
perifricos (incremento en la actividad de la lipoproten lipasa,
regulacin de la sntesis de cidos biliares, reduccin de la
insulino-sensitividad, entre otros).
Asimismo, la microbiota intestinal es una fuente de
citoquinas proinflamatorias que aumentan la respuesta
inflamatoria del tejido graso y el reclutamiento de macrfagos
siguiendo la sealizacin del sistema inmune innato a travs
de los receptores del tipo Toll (TLRs), alterando
profundamente la homeostasis de la glucosa.
Existe una relacin recproca entre la microbiota y la
densidad calrica, de modo que la densidad calrica modula la
actividad bacteriana, pero por su lado, la composicin de la
microbiota afecta la cantidad de energa extrada de los
alimentos por el husped.
Incluso el sistema nervioso central del husped humano
se ve influenciado por la microbiota intestinal, ya que esta
ltima interviene en la liberacin de neurotransmisores que
actan en el eje intestino-cerebro (zonas que controlan las
emociones, las sensaciones y la cognicin) y de esta forma
modula la ingesta calrica y su balance energtico,
contribuyendo de este modo a la obesidad.
Las estrategias a implementar para facilitar la prdida de
peso debern tomar en cuenta estas relaciones, en
consecuencia los cambios de los componentes dietarios, como
cidos grasos, carbohidratos, micronutrientes, prebiticos y
probiticos, pueden conducir a cambios en la composicin de
la microbiota intestinal y a la modulacin de los genes del
husped humano, especialmente en rganos como intestino,
msculo, hgado y tejido adiposo.
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Uso de la informtica como
herramienta de apoyo al
Diagnostico y vigilancia
epidemiolgica
Dr. Ascanio Rojas
CeCalCULA
A finales del siglo pasado se puso en marcha uno de los
proyectos mas importante en la biologa, descodificar la
secuencia de pares del bases del todo el genoma humano.
Desde el descubrimiento de la estructura del ADN no se haba
revolucionado tanto la biologa hasta que el Proyecto
Genoma Humano (PGH) dio a conocer los resultados de su
investigacin, dejando ms dudas que respuesta satisfechas,
como en principio se pens. Para llevar a cabo esta colosal
tarea fue necesario hacer uso de todas la tecnologas
disponible para la fecha, incluso desarrollar nuevas tcnicas,
tanto moleculares, estadsticas e informticas, que pudieran
procesar satisfactoriamente la gran cantidad de datos
generados. Actualmente hay en curso 409 estudios de
metagenomas (3499 en proyecto) y 7400 genomas resueltos y
24889 incompletos, y esta tendencia sigue creciendo
exponencialmente. Ahora, como esta ingente cantidad de
datos moleculares, y la informtica, puede ayudarnos a
comprender, analizar, seguir y prevenir enfermedades?.
Como resultado del PGH, han surgido nuevas ciencias
biolgicas, micas (protemica, trasncriptmica,
metabolmica, epigenmica, metagenmica, etc), enfocadas
en cada uno de los aspecto de la biologa, apoyadas en
tcnicas moleculares nunca antes pesadas, que permiten de
manera eficiente, rpida y econmica, analizar una gran
cantidad de datos biolgicos, que nos permiten seguir con
bastante precisin estos procesos y diferenciar los estados
sanos de los alterados. Tecnologas como la secuenciacin
masiva o NGS, anlisis de polimorfismos de una solo
nucletido (SNPs) y el proyecto HapMap, estudios de
asociacin del genoma completo (GWAS, en ingls), entre
muchas otras relacionadas al genoma nos estn permitiendo
hacer asociaciones bastante acertadas sobre el genotipo y el
fenotipo, y poder diferencias cuales de estos podras asociarse
a patologa o susceptibilidades a padecer una determinada
enfermedad. Adicionalmente, se cuenta con un extenso grupo
de bases de datos biolgicas, que almacenan, procesan,
analizan y ponen a disposicin estas gigantescas cantidades de
datos, permitiendo, mediante algoritmos bioinformticos,
correlacionar fenotipos con patologas. Por otra parte, los
sistemas de informacin geogrficos (SIG) sumados a datos
climticos y epidemiolgicos (Epi-SIG) se han convertido en
poderosas herramientas de monitoreo, vigilancia, incluso de
aleta temprana para muchas enfermedades. Finalmente, la
reciente aparicin de los sistemas mviles con acceso a la
Web (telfonos inteligente, verdaderas porttiles, tables, ect)
permiten que el ciudadano comn participar de esta iniciativas
Epi-SIG, al poder aportar datos o reportes a tiempo real sobre,
en lo que se ha llamado Ciencia Ciudadana (CitizenSci) con
muy buenos resultados en monitoreo en Ecologa,
biodiversidad, astronoma y otras ciencias.
La era post genmica
Dr. Ascanio Rojas
CeCalCULA
A ms 50 aos del descubrimiento de Watson y Crick
sobre la estructura del ADN, mucho ha cambiado sobre
nuestra percepcin de la vida y la biologa de los organismos,
principalmente en el rea de la gentica y la herencia,
revolucionando la biologa de finales del siglo pasado. A
principios de los 80s se crearon insipientes bases de datos de
secuencias de ADN y protena, siendo la ms conocida
GenBank, y con ella los primeros algoritmos necesarios para
procesar, editar, almacenar y divulgar la informacin
contenidas en estas bibliotecas digitales. Para la dcada de los
90 se inici el ambicioso Proyecto Genoma Humano (PGH)
que implicara hacer uso de todas las tcnicas moleculares e
informticas disponibles para la fecha para completar
descifrar, en un lapso no mayor a 15 aos, la composicin y
secuencia de los pares de bases que componen todo el
material gentico humano. En 2003 se publica el borrador
definitivo del PGH, generando ms preguntas que
respuestas, debido a que los resultados no correspondan con
el pensamient o reduccionista de las tres ltimas dcadas del
siglo pasado, lo que no satisfizo todas nuestras esperanzas en
tan costoso proyecto. Como consecuencia de ello nuestro
enfoque sobre los genes y genomas ha sufrido un vertiginoso
cambio en la era post genmica, donde se han puesto en
marcha nuevos proyecto que buscan responder esas dudas no
respondidas por el PGH. Estas nuevas ciencias biolgicas,
denominadas micas (protemica, trasncriptmica,
metabolmica, epigenmica, metagenmica, etc), crecen a
pasos agigantados apoyados en ciencias computacionales
(principalmente bioestadstica biologa computacional y
bioinformtica), mayor capacidad de computo y
almacenamiento a menor costo, la Internet, y en nuevas
tecnologas moleculares, como la secuenciacin masiva o
NGS (Next-Generation Sequencing) que han permitido
plantearse grandes retos nunca antes considerados, lo que ha
llevado a proyectarse estudios macros, relacionados ya no a
los genes y sus funciones, sino, como estos se ven afectados
por su expresin y regulacin, epigenmica y el
comportamiento de los individuos y su entorno, enfocados en
la Biologa de Sistemas.
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CICLO DE CONFERENCIAS
PARASITOLOGIA HOY
Coordinadora: MSc. Zulbey Rivero de Rodrguez
Moderadora: MSc. Angela Bracho
El significado de las infecciones
inaparentes en enfermedad de Chagas y
leishmaniasis en el occidente de Venezuela
Dr. Nstor Aez
Investigaciones Parasitolgicas J.F.Torrealba,
Departamento de Biologa, Facultad de Ciencias,
Universidad de Los Andes,
Mrida, 5101, Venezuela
Se discute el trmino infecciones inaparentes (= ocultas o
asintomticas) y se contrasta con la patogenicidad causada por
Trypanosoma cruzi y Leishmania sp. en infecciones
sintomticas, de severidad variable, detectadas en la
enfermedad de Chagas y las leishmaniasis, respectivamente.
Se enfatiza sobre la similitud biolgica de la infeccin
inaparente y la enfermedad patente en relacin con el curso
natural, la transmisibilidad y la cura de la parasitosis, y se
valora su significado en trminos epidemiolgicos. Se
analizan resultados obtenidos en estudios sobre deteccin de
infecciones inaparentes en individuos asintomticos de
localidades del occidente de Venezuela donde la enfermedad
de Chagas es endmica (60%) y se compara con aquellos
detectados en habitantes de localidades indgenas donde no se
haba detectado casos de enfermedad de Chagas (14%) y con
el hallazgo en personas sin manifestaciones clnicas aparentes
de localidades del semirido venezolano donde la
leishmaniasis visceral es endmica (17%). Se discute el
significado de las infecciones asintomticas, ocultas o
inaparentes y su potencial importancia en el contexto
epidemiolgico.
Trabajo financiado por CDCHTA-ULA-C-1821-13-07-AA
Palabras clave: Infecciones inaparentes, Enfermedad de
Chagas, leishmaniasis, Venezuela
Avances en protemica de tripanosomas
Dr. Roger A. Ramrez Barrios
Ctedra de Parasitologa Veterinaria,
Facultad de Ciencias Veterinarias,
Universidad del Zulia.
Maracaibo, estado Zulia, Venezuela
El trmino protemica fue acuado en 1995 para describir
la caracterizacin del conjunto de todas las protenas presentes
en una clula, fluido o tejido en un momento dado, y hoy en
da constituye uno de los mtodos de separacin proteica ms
potentes y tiles que existen. La aplicacin de estos mtodos
en tripanosomatdeos es particularmente importante porque
estos organismos no usan el inicio de la transcripcin como un
paso regulatorio en el control de la expresin gnica. En estos
organismos, todos los genes que codifican protenas estn
organizados en grandes unidades de transcripcin
policistrnicos que generan ARN precursor policistrnicos,
los cuales entonces son procesados en ARNm
monocistrnicos a travs de un mecanismo de transempalme
(trans-splicing). Las anteriores consideraciones justifican el
anlisis protemico de estos parsitos como una herramienta
ideal para evaluar los niveles de expresin proteica en
determinados momentos. En tripanosomas que afectan a
humanos, especialmente en Trypanosoma cruzi, existen
muchas investigaciones en protemica, logrndose identificar
algunas protenas que se sobreexpresan en aislados ms
virulentos que otros, adems de algunas protenas
relacionadas con la forma aguda de la Enfermedad de Chagas.
En cuanto a las investigaciones en tripanosomas que afectan a
animales domsticos, se podra considerar que las
investigaciones en protemica estn apenas en sus inicios.
Tanto en T. vivax como en T. evansi se han logrado identificar
algunas protenas con expresin diferencial entre aislados con
diferencias en su virulencia y en su patogenicidad. Algunas de
estas protenas pudieran ser candidatos a biomarcadores
relacionados con virulencia y/o patogenicidad. En T. evansi,
tienen especial importancia la calreticulina y el factor de
elongacin alfa (EF-1). En T. vivax, las protenas asociadas a
virulencia son: protena 78 regulada por glucosa (GRP78),
protena paraflagelar 3 (Par3), alfa tubulina, beta tubulina,
protena de choque trmico 70 (HSP70), arginina quinasa,
protena del Complejo T 1, subunidad theta (TCP1), mientras
que las protenas asociadas a patogenicidad son: protena rod
paraflagelar 1 (PFR1), piruvato quinasa, ATP sintetasa
vacuolar, protena del Complejo T 1, subunidad alfa (TCP1),
glicerol quinasa, y la Inosin-5'-monofosfato deshidrogenasa
(IMPDH).
Nematodosis en caninos y su
importancia en Salud Pblica
Dr. Francisco Angulo Cubilln
Departamento de Sanidad Animal y Salud Pblica,
Facultad de Ciencias Veterinarias,
Universidad del Zulia, Maracaibo, Venezuela.
francisco.angulo@fcv.luz.edu.ve
Los pequeos animales sirven de hospedadores a
diferentes especies de nematodos, los cuales se ubican en
diferentes rganos y tejidos causando daos a su salud,
caracterizndose por generar cuadros clnicos con anemia,
diarrea, sndrome de mala digestinabsorcin, intolerancia al
ejercicio, y en algunas ocasiones pueden causar la muerte.
Entre estos nematodos tenemos ancilostomideos de los
gneros Ancylostoma y Uncinaria, especies de gran
patogenicidad por su capacidad hematfaga. stos nematodos
aseguran su transmisin a nuevos hospedadores por las
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diferentes vas, como: transplacentaria, lactognica,
percutnea y oral, por la ingestin de la forma infectiva desde
el ambiente o por el consumo de hospedadores paratnicos.
Ancylostoma es el responsable de causar el sndrome de larva
migrans cutnea en el hombre, cuando ste es infectado por la
forma infectiva a travs de la piel. Adems de los anteriores,
existen ascarideos que infectan a caninos, como Toxocara,
basa su patognesis en la competencia por lo alimentos del
hospedador, clicos, diarreas, distencin abdominal y posibles
problemas respiratorios por la migracin de sus larvas. En el
hombre, causan el sndrome de larva migrans visceral, el cual
se debe a la ingestin en alimento o agua de bebida de la
forma infectiva y puede llegar a causar problemas graves en la
salud humana como cegueras. Existen nematodos
gastrointestinales pertenecientes a los gneros Phisaloptera,
Strongyloides, Trichuris que son de menor importancia
mdica que los anteriores. Es de relevancia revisar aspectos de
un filarideo que afecta el ventrculo anterior y la arteria
pulmonar de los caninos, especie denominada Dirofilaria
inmitis. Este nematodo genera cambios irreversibles en el
corazn generando insuficiencia cardiaca y congestin
pulmonar, manifestado el animal intolerancia al ejercicio,
pudiendo presentar un sndrome vagal que puede ser mortal.
Las nematodosis en pequeos animales causan enfermedades
en sus hospedadores y en varios casos pueden generar
problemas en salud pblica, de all la importancia de su
estudio y diseo de estrategias para la prevencin y control de
estas parasitosis.
Palabras clave: Nematodosis, caninos, Salud Pblica.
Blastocystis y Nitazoxanida:
notas y experiencias
Dr. Rodolfo Devera
Departamento de Parasitologa y Microbiologa,
Escuela de Ciencias de la Salud,
Universidad de Oriente, Ncleo Bolvar.
Ciudad Bolvar, estado Bolvar, Venezuela.
rodolfodevera@hotmail.com
Nitazoxanida es un nitrotiazlico similar a los
nitroimidazoles, pero con un tomo de sulfuro que aumenta la
potencia. Es activa frente a la mayora de los helmintos y
protozoarios intestinales. Pero tambin se ha verificado su
actividad antibacteriana y recientemente se utiliz para tratar
algunos virus. Incluso nuevos estudios sealan que podra ser
til contra parsitos tisulares del grupo de los protozoarios
cinetoplastidios, especficamente Trypanosoma y Leishmania.
En el caso especfico del tratamiento de Blastocystis sp.
con Nitazoxanida, hay pocos estudios al respecto. En Mxico
se evalu un grupo de apenas 10 pacientes peditricos
obtenindose un 100% de cura (Romero Cabello et al., 1997).
En 2003, Cimerman et al. en Brasil, informaron del
tratamiento exitoso de un caso de blastocistosis en un paciente
con SIDA. Rossignol et al. (2005) evaluaron el efecto de la
droga en 42 pacientes adultos y nios con diarrea atribuible a
Blastocystis spp. obteniendo un porcentaje de cura
parasitolgica de 86%.
Recientemente nuestro grupo desarroll un estudio para
determinar la utilidad de la Nitazoxanida en el tratamiento de
nios infectados con Blastocystis sp. Fueron evaluadas 530
muestras fecales provenientes de igual nmero de nios
menores de 15 aos, de ambos gneros habitantes de una
comunidad marginal y de 5 escuelas de Ciudad Bolvar,
estado Bolvar. Todos los nios con Blastocystis sp. fueron
convocados para ser tratados con Nitazoxanida a la dosis de
100 (2-4 aos) 200 mg (5-14 aos) cada 12 horas por 3 das
consecutivos. Posteriormente se les realiz nuevo examen
clnico y tres exmenes coproparasitolgicos controles a los
das 7, 14 y 21 (1 da) post-tratamiento empleando las
mismas tcnicas diagnsticas. Un total de 92 nios asistieron
y recibieron el medicamento, pero se excluyeron
posteriormente 25 que no realizaron los tres controles post-
tratamiento. Hubo cura parasitolgica en 43,9% (29/66) de los
casos. Se observ una baja frecuencia de reacciones adversas
posterior a la ingesta del medicamento. En conclusin, en la
muestra estudiada, la Nitazoxanida no fue til en el
tratamiento de nios infectados con Blastocystis spp. a la
dosis recomendada por el fabricante ya que present un bajo
porcentaje de cura parasitolgica (43,9%).
Un nuevo reto diagnostico en
amibiasis: la deteccin de
E. moshkovskii en humanos
MSc. Zulbey Rivero de Rodrguez.
Docente de Prctica Profesional de Parasitologa
Escuela de Bioanlisis.
La Universidad del Zulia
zulbeyrivero@gmail.com
El gnero Entamoeba comprende varias especies de
amibas, seis de las cuales pueden habitar en el intestino grueso
del hombre: Entamoeba histolytica, Entamoeba dispar,
Entamoeba moshkovskii, Entamoeba polecki, Entamoeba coli
y Entamoeba hartmannii. Las infecciones con especies de
Entamoeba pueden resultar en una colonizacin no patgena
del intestino o en la invasin de la pared intestinal,
dependiendo de la especie implicada. Las tres primeras
especies son morfolgicamente idnticas, pero presentan
diferencias bioqumicas y genticas. E. histolytica es
considerada como patgena, mientras que E. dispar y E.
moshkovskii son consideradas no patgenas. En general, las
amibas presentan dos formas evolutivas durante su ciclo de
vida, los trofozotos o formas vegetativas y los quistes o
formas de resistencia. Las amibas del gnero Entamoeba
comparten muchas caractersticas morfolgicas y biolgicas;
pero principalmente tienen en comn, el hecho de presentar
cromatina adosada a la membrana interna nuclear. Los
trofozotos y quistes de E. histolytica, E. dispar, E.
moshkovskii presentan esta cromatina en la cara interna
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distribuida de forma regular; por sta y otras caractersticas
son morfolgicamente indistinguibles entre si, por lo que en lo
sucesivo las denominaremos complejo Entamoeba.
La amibiasis se define como la infeccin en humanos
producida por E. histolytica; segn estimaciones de la dcada
de los noventa, el 10% de la poblacin mundial sufra la
infeccin. Su prevalencia puede alcanzar hasta el 50% en
zonas de Centro y Sudamrica, frica y Asia. Alrededor de
500 millones de infecciones se atribuyen a E. dispar. Se
consideran 40.000 100.000 muertes/ao a nivel mundial
debidas a la amibiasis, particularmente en Mxico, se
encuentra entre las primeras 20 causas de morbilidad. Por lo
anteriormente expuesto, se hace necesario reevaluar la
epidemiologa de la amibiasis, ya que las cifras mencionadas
probablemente no corresponden a la realidad, si se consideran
las infecciones por E. dispar y E. moshkovskii. Es importante
contar con nuevos procedimientos de diagnstico,
principalmente en los pases en desarrollo (los ms afectados
debido a condiciones deficientes de higiene, contaminacin
fecal y hacinamiento), para reevaluar la morbimortalidad de la
amibiasis.
La microscopia ptica sigue siendo la tcnica de
diagnstico ms utilizada en los laboratorios de rutina para el
diagnstico de la amibiasis. En la preparacin con Solucin
Salina Fisiolgica (SSF) de la muestra fecal, se pueden
detectar quistes y los trofozotos mtiles de las amibas;
tambin se puede observar la presencia de algunas otras
clulas como leucocitos o glbulos rojos que refieren
infeccin intestinal. Es en sta preparacin donde pueden
detectarse trofozotos hematfagos, que hasta la fecha son
exclusivos de E. histolytica. En la preparacin con lugol se
pueden identificar las estructuras internas tpicas de los
quistes, que colaboran en su identificacin. Se requiere la
realizacin de un mtodo de concentracin fecal o tres
exmenes de heces negativos (seriado), para indicar que un
paciente no presenta infeccin amibiana. Se ha sealado que
la sensibilidad del examen microscpico es menor al 60% y
por otro lado, existe la posibilidad de error en el diagnstico,
cuando personal poco entrenado confunde macrfagos con
trofozotos y polimorfonucleares con quistes de amibas. Las
dificultades diagnsticas aumentan si consideramos la
presencia de quistes de otras amibas del gnero Entamoeba
(Ej.: Entamoeba coli) o de otros gneros como Iodamoeba y
Endolimax. La deteccin de la lectina de galactosa y N acetil
galactosamina (Gal/GalNAc-lectina) en materia fecal
mediante ensayo inmunoenzimatico (ELISA) y la
amplificacin por PCR de fragmentos especficos de ADN
genmico, s permiten identificar las especies, las cuales son
tcnicas que por su alto costo y/o condiciones de
infraestructura especiales, no se realizan en los laboratorios de
rutina.
Segn investigaciones previas, en las cuales se realizaron
tcnicas especiales para distinguir entre las diferentes amibas,
E. dispar es 10 veces ms frecuente que E. histolytica en
pases desarrollados; mientras que en los pases en vas de
desarrollo ambas amibas pueden tener cifras similares de
prevalencia. En relacin a E. moshkovskii, son escasas las
referencias a nivel mundial en relacin a la prevalencia de esta
amiba en humanos, ya que en principio fue considerada una
amiba de vida libre que infrecuentemente parasitaba humanos,
sin embargo, las cifras informadas hasta la fecha han variado
desde 5,2% hasta 50%.
Actualmente debe considerarse dentro del diagnstico de
especie a E. moshkovskii, debido a su morfologa, tambin
indistinguible de E. histolytica/E. dispar, aunque se
desconocen en buena medida aspectos relacionados con su
epidemiologa y patogenicidad. Ms recientemente, el
aumento en el descubrimiento de casos en humanos de
parasitismo por E. moshkovskii, provoca una complicacin
mayor, pues entonces debe discriminarse entre las tres amibas
para realizar un diagnstico de laboratorio definitivo. Por otro
lado, persisten los problemas tcnicos en cuanto a un mtodo
rpido, sencillo y poco costoso que permita a los laboratorios
de rutina distinguir entre E. histolytica, E. dispar y E.
moshkovskii. Por los momentos, se recomienda al personal de
laboratorio reportar los trofozotos y/o quistes
morfolgicamente compatibles con E. histolytica, como
complejo Entamoeba o como E.
histolytica/dispar/moshkovskii. Por otro lado, el clnico debe
estar consciente de este inconveniente tcnico y tratar de
manejar teraputicamente de la manera ms efectiva, a una
persona infectada con el complejo Entamoeba, tomando en
consideracin aspectos importantes como, contexto
epidemiolgico del paciente, presencia o no de sntomas y
descarte de otros enteropatgenos, para la aplicacin del
tratamiento.
Actualizacin en antiparasitarios
intestinales
Dr. Rafael Villalobos
Profesor Titular. Facultad de Medicina.
Universidad del Zulia
Antiparasitarios: antibiticos que actan en cualquier fase
del ciclo vital de un parsito (protozoarios o helmintos).
NOTA IMPORTANTE: Las parasitosis intestinales son un
diagnstico de laboratorio.
GEOHELMINTIASIS. Helmintiasis en las cuales una fase del
ciclo vital del helminto se desarrolla en la tierra.
Las Geohelmintiasis son la Ascariasis o Ascaridiasis,
Tricocefalosis, la Uncinariasis y la Estrongiloidiasis.
Un informe de la OMS del 2005, dice que
aproximadamente de 807 a 1.221 millones de personas
padecen Ascaridiasis; 604 millones padecen Tricocefalosis y
576 millones padecen de Uncinariasis.
Segn Morales y colaboradores, en un estudio publicado
en 1999, el examen coproparasitolgico (tcnica de Kato-
Katz) de un total de 113.254 personas, pertenecientes a 100
municipios de Venezuela, permiti establecer las siguientes
prevalencias a nivel nacional: Ascaris lumbricoides:
26,9%, Trichuris trichiura: 32,6% y Anquilostomideos: 5,6%.
Para que existan las geohelmintiasis la conducta humana
importante es el fecalismo (evacuar a cielo abierto en la
tierra-)
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Ascaridiasis: Predomina en la edad escolar (juegos con
contacto con tierra, geofagia). El parsito se ubica en el
intestino delgado, cuando hay abundantes parsitos adultos se
pueden formar ovillos y obstruir el trnsito intestinal.
Tambin se puede producir migracin errtica de los adultos y
ser expulsados por boca o introducirse en los conductos biliar
o pancretico y producir obstruccin, colangitis o pancreatitis.
Tratamiento: De eleccin: Pamoato de Pirantel: unidosis,
efectividad 70 90%. No se absorbe, se puede utilizar en
embarazadas. Obstruccin Intestinal: Piperazina. Alternativas:
Ivermectina. Novedad Teraputica: Tribendimidina
(desarrollado y en prueba en China).
Alerta: Mebendazol y Albendazol pueden originar migracin
errtica, por lo que a pesar de tener buena efectividad no son
recomendados (en contra de la literatura en ingls).
Tricocefalosis: Predomina en la edad escolar. Hbitat:
Intestino grueso (recto). La mayora de los casos son
asintomticos. Solo en infestaciones intensas: ms de 200
helmintos adultos, Diarrea crnica; Disentera, Predisposicin
al prolapso de mucosa rectal, Apendicitis Aguda. NO
PRODUCE ANEMIA.
Tratamiento: Eleccin: Mebendazol: 95 - 97% (3 das),
Alternativas: Pamoato de Pirantel/Oxantel: 98,7%
Alerta: Albendazol NO TIENE BUENA EFECTIVIDAD (28
-32%).
Uncinariasis: Producida por Necator americanus o
Ancylostoma duodenale. Preodominan en reas rurales
(particularmente la Necatoriasis). Los huevos de ambas
especies son iguales, por lo que imposible identificar la
especie parasitaria. A diferencia de otros geohelmintos, las
Uncinarias (Necator en particular) son adquiridas
gradualmente durante la infancia, con mayor prevalencia en
escolares y adolescentes. En reas de elevada endemicidad
hay elevada prevalencia en preescolares. Digestivas: Dolor
epigstrico, nuseas, vmitos, meteorismo y puede existir
melena. Cutneas: En el punto de entrada pude existir discreto
dolor, prurito e infeccin secundaria. Xantosis plantar y
palmar, urticaria, palidez por anemia ferropnica.
Respiratorias: Sndrome de Leffler. Cardiacas: Taquicardia,
soplos, tonos apagados e Insuficiencia cardiaca cuando la
anemia es severa. Se supone que cada parsito sustrae
diariamente de 0.2 a 0.5ml de sangre. Otras: Astenia,
anorexia, pica, retraso genital, retraso pondo-estatural, retraso
escolar. La apata mental, pelo sin brillo y la desnutricin
junto a la palidez, trastornos digestivos, eosinofilia moderada
y procedencia rural, debe hacer pensar en las Uncinariasis.
Tratamiento: Albendazol OD por tres das (80% de eficacia).
Corregir anemia. Tratar Insuficiencia Cardaca.
Estrongiloidiasis: Agente etiolgico: Strongiloides
stercoralis. Es un geohelminto de distribucin cosmopolita.
Localizacin: mucosa duodenal.Forma infectante: Larva
filariforme no envainada. Va de transmisin: Penetra por la
piel desnuda de personas que contactan las tierras
contaminadas o por autoinfeccin. Cutneas: Dermatitis
pruriginosa en la zona donde penetran; pude existir infeccin
secundaria. Respiratorias: Sndrome de Leffler. Se
caracteriza por tos, expectoracin, febrcula transitoria y
condensacin bronconeumona con eosinofilia. Digestivas:
nuseas, vmitos, dolor epigstrico de tipo ulceroso, diarreas
acuosas que pueden alternar con estreimiento. Sndrome de
malabsorcin en infestaciones masivas. Hay que hacer
algunas consideraciones diagnsticas; Hallazgo de larvas
rabditoides en examen microscpico de heces, liquido
duodenal, esputo o tejidos. Cultivo de heces en placa de agar
Hemograma: leucocitosis con eosinofilia intensa
(hipereosinofilia; > 3000 eosinofilos/ml =
inmunocompetentes).
Enterobiasis u Oxiuriasis: Agente etiolgico: Enterobius
vermicularis (oxiuro). Tiene amplia distribucin mundial y
prevalece entre los nios preescolares. Los otros grupos
etarios se contaminan a partir de los preescolares. No es un
geohelminto. Forma infectante: El huevo embrionado. Forma
de infestacin: Autoinfestacin, oral-fecal (mano-boca), por
contaminacin de alimentos y el agua. Localizacin: Recto,
ciego y apndice. El prurito anal principalmente nocturno, es
la principal manifestacin de esta parasitosis. Se produce por
accin mecnica debido a la presencia de la hembra en las
mrgenes del ano.
Insomnio. En nias, la invasin vaginal causa irritacin local
y leucorrea.
Tratamiento: Albendazol, dosis nica, Tratar a todo el grupo
familiar.
Giardiasis: Est presente por todo el mundo con una
distribucin en reas silvestres. En numerosos riachuelos,
lagos y zonas montaosas. Reservorios animales como:
Diferentes mamferos de reas silvestres; incluyendo el
ganado vacuno = ZOONOSIS. GRUPOS DE RIESGO:
Preescolares. Personas que convivan con preescolares. El
consumo de agua contaminada no tratada adecuadamente
(ENFERMEDAD HDRICA). Vas de entrada: El consumo
de vegetales o frutos contaminados y no cocinados.
Contaminacin de una persona a otra por la va feco-oral u
oral-anal.
Tratamiento: El frmaco de eleccin es el tinidazol. Por no
estar disponible la presentacin peditrica del tinidazol,
secnidazol: efectividad: 73,3% - 90%. Nitazoxanida:
efectividad: 69 - 71,42%. Se ha observado resistencia a la
Nitazoxanida en G. intestinalis y C. cayetanensis
Alternativas: Albendazol. Furazolidona (en embarazadas).
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NITAZOXANIDA:
Parasitosis 1ra Eleccin 2da Eleccin 3ra Eleccin

Parasito Efectividad de un esquema Ancilostomiasis Albendazol Pamoato de

(3 das) 400 mg. Pirantel 10 mg/Kp
diarios por 3 diarios por 3 das
G. intestinalis 69% das
Ascaridiasis Pamoato de Pamoato de
E. histolytica 96%
Pirantel Pirantel/Oxantel
B. hominis 97% 10 mg/kp. 10 mg/Kp. Dosis
Dosis nica
Cryptosporidium sp. 100% nica
Enterobiasis Albendazol.
Cyclospora 71% 400 mg. Dosis
cayetanensis nica
Hymenolepis nana 80% Estrongiloidiasis Ivermectina Nitazoxanida: Albendazol 400
200 g/Kp/d 500 mg bid por 3 mg diarios por 5
Trichuris trichiura 100% por 2 das das (dosis en das
Ascarys lumbricoides 100% adultos)*
(94% de
Enterobius 100% efectividad)
vermicularis Teniasis Nitazoxanida: Mebendazol
500 mg bid 300mg dos veces
por 3 das al da por 3 das
(adultos)*
Parasitosis 1ra Eleccin 2da Eleccin 3ra Eleccin Tricocfalos Mebendazol: Pamoato de NOTA:
Amibiasis Metronidazol Metronidazol EV 100 mg BID Pirantel/Oxantel El albendazol
(invasiva) 750 mg VO + por 3 das. 10 mg/Kp, dosis no tiene
EV TID por 10 Dihidroemetina (no usar diaria por 3 das. actividad
das 10 mg/kp/d S.C. cuando (seleccionar efectiva contra
por 10 das coexista cuando coexista Tricocefalosis
(mximo) Ascadiasis) Ascaridiasis
Si el cuadro Ancilostomiasis)
clnico es severo
o extraintestinal
Giardiasis En nios: Albendazol
Secnidazol 400 mg diarios
30 mg/Kp/d. Nitazoxanida: por 5 das
Dosis nica 500 mg bid por 3 (69,7% de xito
Adultos: 2 gr das (adultos) en nuestro
Curacin: Efectividad: 95% estudio)
90%*
* Restrepo y
cols: Ob. Cit.
Embarazadas:
Furazolidona:
100 mg TID
por 7 das

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SIMPOSIO
ZOONOSIS REEMERGENTES
Coordinadora-Moderadora: MSc. Jennifer Gotera
Leptospirosis.
Que estamos haciendo hoy?
MSc. Angelina Mrquez
Magister en Diagnostico Bacteriolgico
Bioanalista del MPPS
La leptospirosis es una enfermedad re-emergente de
distribucin mundial con un comportamiento endmico.
Constituye un problema de salud pblica, y de denuncia
obligatoria en Venezuela. Se caracteriza por ser infecto-
contagiosa, aguda y febril causada por un microorganismo del
gnero Leptospira que infecta sobre todo a los animales,
salvajes y domsticos, que sirven como fuente de infeccin
para el hombre. Adems, presenta una epidemiologa
compleja y de distribucin cosmopolita, es la zoonosis
contempornea ms difundida en el mundo, excepto en las
regiones polares que son las nicas zonas libres del
microorganismo (Rodrguez y col., 2009, Koneman, y col.,
2008).
La transmisin de la infeccin del animal al hombre puede
ocurrir por contacto directo con lquidos, tejidos y orina de
animales infectados o ms comnmente, por el contacto con
un ambiente contaminado. Estos mecanismos de transmisin
explican el alto riesgo ocupacional que presentan cierto grupo
de trabajadores relacionados a la exposicin y en ciertas zonas
donde se realizan actividades recreativas (Najera y col., 2005,
Rodrguez y col., 2009).
La prevalencia y tasas de incidencia publicadas para esta
enfermedad en el mundo varan notablemente segn la zona y
pueden llegar a alcanzar valores elevados en tiempos de
inundaciones y en los pases tropicales y sub tropicales.
Tambin presenta un importante aspecto socio-econmico y
sanitario, que radica principalmente en las perdidas
econmicas que se deducen de una enfermedad que es de
difcil diagnstico, debido a que en sus estadios iniciales cursa
con sntomas y signos semejantes a una gran variedad de
enfermedades, siendo las ms frecuentes: malaria, hepatitis,
dengue, infeccin por el virus de inmunodeficiencia humana
(VIH), entre otros (Lau y col., 2010; Najera y col., 2005;
Cermeo y col., 2005).
El diagnstico certero de la enfermedad es muy importante
por ser una de las pocas enfermedades febriles hemorrgicas
que puede combatirse con antimicrobianos y cuyo tratamiento
oportuno puede disminuir la mortalidad tanto en humanos
como en animales. El conocimiento de la relacin de las
fuentes de infeccin y la aparicin de casos o brotes en
humanos contribuye igualmente al fortalecimiento de la
vigilancia epidemiolgica y el control de esta en la regin
(Toyokawa y col. 2011; Cruz y col. 2002).
Se ha estimado que esta patologa afecta anualmente
decenas de millones de humanos, con una tasa de letalidad
que va desde 5 hasta 25 %. Los reportes de incidencia de la
leptospirosis muestran una variacin anual entre 0.53 por
100.000 habitantes en las reas tropicales a un 0.04 por
100.000 habitantes en los pases desarrollados como Alemania
u Holanda (Schneberg y col., 2011).
En virtud de que el conocimiento epidemiolgico acerca de
los factores de riesgo, morbilidad, mortalidad y letalidad en
humanos por leptospirosis es escaso en el pas y en el estado
Zulia, es evidente la importancia de conocer cules son las
zonas con mayor riesgo para adquirir la enfermedad y de qu
manera la ocupacin de las personas y las fuentes de
contaminacin afecta a la poblacin, as como tambin
conocer acerca de los avances acerca del diagnstico de esta
enfermedad, su diversidad y como hasta ahora la prueba
implementada para su diagnstico sigue siendo la tcnica gold
estndar a pesar de los avances en biologa molecular.
Situacin de la rabia urbana y rabia
silvestre en el estado Zulia ao 2012
Dr. Alessandri Palencia
Ctedra de salud pblica veterinaria.
La Universidad del Zulia.
Facultad de ciencias veterinarias.
Practica rabia urbana y zoonosis
Una de las zoonosis de mayor importancia dada a que
causa muertes en la poblacin humana en Venezuela es la
Rabia. Esta es una enfermedad infecciosa producida por un
rabdovirus que causa una encefalomielitis irreversible y
mortal. El virus penetra por la piel (heridas) o las mucosas y
se instala en las terminaciones nerviosas de la zona de entrada.
Otra va de ingreso puede ser la respiratoria, en lugares donde
puede haber una gran cantidad de virus como en cuevas en
donde se encuentran murcilagos. Una vez que el virus ha
ingresado en el organismo se difunde hacia el sistema
nervioso central, siendo este periodo de incubacin muy
variable, pero en general va de 15 das a 30 das,
mencionndose en la literatura hasta aos.
La rabia urbana constituye un problema de salud pblica
en Venezuela y especficamente para el estado Zulia, debido a
que actualmente, es la nica entidad del pas donde se
reportan casos humanos presentndose catorce (14) muertes
humanas en los en el periodo 1994 al 2000 y para el periodo
2001-2011 ocurrieron siete (7) muertes humanas por esta
zoonosis. Para el periodo 2001 al 2006 han ingresado un
promedio de unas 500 a 700 muestras al ao al Laboratorio de
Diagnostico de Rabia (ubicado en el Ambulatorio tipo III Dr.
Francisco Gmez Padrn) y vemos como ha descendido la
captacin de encfalos a unos 300 a 400 al ao en el periodo
2007 hasta el 2011. Esto es preocupante debido a que debe
haber una afluencia de muestras para el diagnstico y as
poder hacer vigilancia, monitoreando la circulacin viral en el
estado.
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En cuanto al nmero de casos positivo, vemos que en el
periodo 2001 al 2005 se diagnosticaron entre 80 y 170 casos
positivos anuales, para el periodo 2006 al 2009 vemos un
descenso de unos 15 a 40 casos positivos anuales y para los
aos 2010, 2011 y 2012 tenemos un descenso a unos 4 casos
por ao. Esto no significa un xito total del programa debido a
que hay factores que hacen siempre presente la aparicin de
nuevos casos; como son las coberturas de vacunacin
antirrbica no mayores al 60% y que no se mantiene en el
tiempo. Adems existen factores sociales, econmicos,
culturales y ambientales que hacen que esta temible
enfermedad persista en nuestra regin. Haciendo un pequeo
anlisis retrospectivo vemos que para el ao 2009 se
presentaron unos 33 casos positivos de rabia canina y 1 caso
positivo de rabia humana, correspondiendo respectivamente a:
9 caninos y 1 humano en el municipio Maracaibo, 1 canino en
el municipio San Francisco, 3 caninos en Cabimas, 18 caninos
en Lagunillas y 1 canino en Simn Bolvar.
Para el ao 2010, se presentaron 3 caninos positivos en el
municipio Maracaibo y 1 canino en Cabimas; para el 2011
tenemos 2 caninos positivos en el municipio Maracaibo y se
anexa un nuevo municipio con caso de rabia canina como lo
es el municipio Santa Rita con 2 nuevos casos. Ya para el
2012 hasta la semana epidemiologa numero 46 se han
presentado 4 casos en el municipio Maracaibo en tres
diferentes parroquia (1 caso en Idelfonso Vsquez, 2 casos en
Antonio Borgas Romero y 1 caso en Lus Hurtado Higuera).
Se ha observado un descenso significativo desde el ao
2009 (33 casos) hasta el 2012 (4 casos) y vemos la no
ocurrencia de casos humanos hasta la fecha. Pero que las
acciones tomadas no son suficientes para garantizar la no
ocurrencia de casos debido a la presencia de los factores antes
mencionados. Desde el ao 2007 hasta la semana
epidemiolgica numero 46 del ao 2012 se han diagnosticado
4 caso de rabia silvestre en el estado Zulia, correspondiendo
respectivamente a 1 caso en el municipio Baralt, 1 en Jess
Maria Semprn, 1 en Cabimas, 1 en Jess Enrique Lossada.
Todos los casos diagnosticados son de bovinos
correspondientes a muestras ingresadas por el INSAI y
productores de la zona.
Para un pas libre de rabia urbana es necesario implementar
las medidas necesarias para garantizar la continuidad en las
acciones de prevencin y control de esta zoonosis y poder
hacer asi garantizar la no ocurrencia de casos en caninos y asi
evitar muertes en humanos.
Rickettsia
Es en Realidad una Epidemia?
MSc. Omaira Parra M., M.V.
La Universidad del Zulia.
Facultad de Ciencias Veterinarias.
Departamento Mdico Quirrgico.
Unidad de Investigaciones Clnicas.
A travs de la historia, las enfermedades infecciosas han
afectado tanto a un individuo como a grupo de personas o
poblaciones enteras, dependiendo del grado epidemiolgico.
Sin embargo, las enfermedades infecciosas transmitidas por
vectores, especficamente por garrapatas, aunque no son de
naturaleza epidmica, se han ido incorporando al grupo de
enfermedades emergente que de manera silente est afectando
a la humanidad. Por otra parte, las aerolneas internacionales
han contribuido a la dispersin de estos patgenos hacia
regiones no-endmicas, al transportar a miles de personas con
sus mascotas. La distribucin global de estos patgenos van a
variar de acuerdo a la densidad y distribucin del tipo de
garrapata y a la densidad de la poblacin que sirve de
reservorio.
Por lo tanto, los perros como los humanos se han hecho
susceptibles a los diferentes patgenos transmitidos por la
picadura de las garrapatas (Ixdido), especficamente los del
orden Rickettsial, hasta el punto de desarrollar la enfermedad
o servir como reservorio de las mismas. As tenemos, que las
especie Ehrlichia canis y Ehrlichia ewingii inducen la
Ehrlichiosis monocitica y granulocitica canina; Ehrlichia
chaffeensis induce la Ehrlichiosis monocitica en humanos.
Anaplasma phagocytophilum, es la responsable de la
anaplasmosis en humana y Anaplasma platys, la cual haba
sido descrita solo en caninos, recientemente ha sido detectada
en humanos. La Rickettsia rickettssi, causa la fiebre de las
montaas rocosa y Rickettsia coronarii, es la causante de la
fiebre manchada del mediterrneo.
Basado en evidencia cientfica, estos patgenos
rickettsiales pueden provocar manifestaciones clnicas que
van desde padecimientos agudos fatales, hasta estados de
enfermedades debilitantes crnicas. El impacto de estos
patgenos en caninos y humanos en la salud puede continuar
creciendo e incluso quizs en Venezuela nuevas especies de
estos patgenos pueden aparecer. Por esta razn, hoy en da,
implementar medidas para reducir o eliminar la exposicin a
los vectores, tiene una gran importancia en la salud de
nuestras mascotas, as como en la salud pblica.
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SIMPOSIO
ASPECTOS MICROBIOLGICOS DEL AGUA
Coordinadora-Moderadora:
Dra. Marynes Montiel
Nuevos indicadores de calidad de
las aguas
Walter Q. Betancourt, PhD.
Centro de Microbiologa y Biologa Celular. IVIC.
La enumeracin e identificacin de microorganismos
indicadores de calidad de aguas ha proporcionado una
estrategia til para la proteccin de la salud pblica. Sin
embargo, los desafos microbiolgicos son cada vez mayores
y los ecosistemas acuticos utilizados para la distribucin y
recreacin se encuentran hoy en da ms vulnerables a la
contaminacin microbiolgica proveniente de las descargas
puntuales (cloacas) y no puntuales (aguas de escorrenta). En
los sistemas de tratamiento de aguas potables, la Organizacin
Mundial de la Salud (OMS) recomienda como requerimientos
mnimos el anlisis de parmetros microbiolgicos garantizar su pureza, su buen uso y restringir que sean
indicadores de eficiencia de tratamiento (bacterias hetertrofas
y coliformes totales) y seguridad o calidad sanitaria del agua
(Escherichia coli) junto con los registros de cloro residual y
turbidez. Se estima que con un ndice bajo de bacterias
hetertrofas (<10 unidades formadoras de colonias [UFC] por
mililitro) los coliformes totales, coliformes termotolerantes y
Escherichia coli deberan estar ausentes. Sin embargo, esto no
asegura la ausencia de microorganismos patgenos entre ellos
los virus (enterovirus, rotavirus, norovirus) y parsitos
entricos (Cryptosporidium). Estos microorganismos pueden
atravesar las barreras de tratamiento y estar presentes en los
sistemas de distribucin cuando las fuentes de agua cruda
estn altamente contaminadas y cuando los procesos
operacionales tales como la coagulacin y la filtracin son
ineficientes o cuando existen deficiencias en la desinfeccin.
En este sentido las investigaciones indican que las bacterias
capaces de producir esporas (Bacilos y Clostridios) podran
ser simultneamente evaluadas para determinar eficiencia de
remocin de estos patgenos. En ambientes naturales
dulceacucolas se recomienda el ndice de E. coli para evaluar
la calidad sanitaria del agua y en ambientes marinos el ndice
de Enterococos. El anlisis de Clostridium perfringens ha sido
recomendado en ecosistemas acuticos de regiones tropicales
debido a que tanto los enterococos como E. coli han sido
aislados de ambientes acuticos prstinos. En conjunto, la
mayora de estas bacterias podran representar nuevos
indicadores de calidad de aguas al considerar la variabilidad
de los estndares de calidad de aguas de cada pas. Por esta
razn, sera ms asertivo considerar la situacin especfica de consideramos libres de microorganismos. La aplicacin de la
cada regin y emplear los avances cientficos disponibles en la
actualidad (mtodos moleculares y metagenmica microbiana)
para incorporar mtodos rpidos y nuevos indicadores de
calidad de aguas con el fin de preservar la salud pblica.
Agua, alimentos y manipuladores,
Triangulo de la vida
Water, food and handlers, lifes
triangle
Dra. Luz Bettina Villalobos de Bastardo.
Universidad de Oriente,
Ncleo de Sucre. Postgrado en Biologa Aplicada
lbvillalobosb@yahoo.com
El agua una molcula cuya estructura tridimensional es tal
que el ngulo formado por los enlaces del oxgeno con los
tomos de hidrgenos es como si estos (los hidrgenos)
estuvieran dirigidos hacia dos vrtices de un tetraedro regular
mientras que aquel (el oxgeno) estuviera en el centro del
mismo. Las cargas elctricas hacen que esta molcula sea
dipolar formando puentes de hidrgenos que permiten
propiedades fisicoqumicas nicas y que hacen que cumpla
con funciones biolgicas. Disolvente biolgico, funcin
metablica, estructural, mecnica amortiguadora, transporte,
termorreguladora, vida acutica en climas fros.
Su uso recreacional, industrial domstico, est resguardado
por leyes y reglamentos en casi todo el mundo, con el fin de
contaminados los reservorios.
Una de las maneras de interpretar el grado de sanidad del agua
es determinando la presencia de microorganismos patgenos o
utilizando los llamados microorganismos indicadores, lo que
plantea dos escenarios: indicadores presentes y patgenos
ausentes (escenario falso positivo), indicadores ausentes,
patgenos presentes (falso negativo) y un tercer escenario la
presencia de organismos viables no cultivables que se dieron
a conocer por mtodos como es el marcaje o hibridacin
fluorescentes (FISH) y gracias a la metagenmica y a los
nuevos mtodos de secuenciacin desarrollados conocemos
su caractersticas metablicas, fenotpicas, como es el caso de
la TM7 (Albertsen et al., 2013), dando una visin distinta a lo
que consideramos agua pura. Otro ejemplo se muestra en un
trabajo realizado por Gmez-Alvares et al. (2012) quienes
realizaron anlisis metagenmico en agua potable que reciba
diferentes tratamientos de desinfeccin (Tratada con cloro
libre, CHL) y tratada con monocloroamina (CHM), se
encontraron diferencias en cuanto a la abundancia de genes
parecidos a Legionella en muestras CHL, mientras que genes
de micobacterias fueron ms abundantes en muestras CHM.
En ambas comunidades se observ la presencia de genes
con distintos mecanismos de resistencia a antibiticos y otros
factores de virulencia, es decir la transferencia horizontal de
genes como mecanismo de sobrevivencia en ambientes no
aptos hace que las comunidades de microorganismos se
integren en su beneficio. Esto implica tambin la presencia de
microorganismos importantes en salud pblica en aguas que
nanotecnologa aplicada en lograr la purificacin de aguas
muy contaminadas sea una respuesta a este problema. Esto
se dirige a entender que hay evolucin de los
microorganismos; que conlleva a cambios en el manejo de los
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recursos hdricos y del abastecimiento de agua; a cambios de
herramientas y mtodos para estudiar los organismos y sus
efectos sobre la salud, o a cambios en la misma poblacin
humana.
Otro aspecto importante que concierne a la salud es la
alimentacin, el buen funcionamiento de nuestro organismo,
depende de la nutricin y alimentacin que tengamos durante
la vida. La alimentacin nos permite tomar del medio que n
os rodea, los alimentos de la dieta (de la boca para fuera) y la
nutricin es el conjunto de procesos que permiten que nuestro
organismo utilice los nutrientes que contienen los alimentos
para realizar sus funciones (de la boca para adentro). Los
alimentos son todos los productos naturales o industrializados
que consumimos para cubrir una necesidad fisiolgica
(hambre). Cuando ingerimos los alimentos si no se guardan
las medidas higinicas adecuadas, que incluyen agua potable
de buena calidad, conducen a brotes originados, por bacterias,
virus, parsitos u hongos, los mtodos convencionales se han
basado en la deteccin de los patgenos ms importantes,
como son Salmonella sp, Listeria monocytogenes, E. coli, S.
aureus, rotavirus, norovirus, etc. Estos mtodos
convencionales bsicamente proponen un enriquecimiento, un
medio de aislamiento o diferencial, aislamiento e
identificacin. Al respecto la metagenmica ha revelado que
cuando hacemos un enriquecimiento alteramos la comunidad
original que posee el alimento y puede que esta alteracin ms
bien no permita que el patgeno que se busca no se detecte o
como lo concluyeron Pettengelli et al. (2012), que el
enriquecimiento no aumenta la probabilidad en su deteccin.
En un alimento fermentado tpico de Korea (Kimchi) el
estudio de su microbioma y de los productos metablicos
durante el proceso fermentativo demostr el alto potencial en
la produccin lctica heterotrfica, adems de la participacin pueden son transmitidas de persona a persona y
activa de tres grupos dominantes de gneros Leuconostoc,
Lactobacillus y Weissella. Pero la mayor sorpresa fue la
abundancia de ADN de fagos indicando que los bacterifagos
influyen en la dinmica de la comunidad microbiana del
kimchi (Young et al., 2011)
El conocimiento alrededor de las relaciones entre salud y
alimentacin ha aumentado progresivamente. Se ha
establecido la relacin entre el bienestar y longevidad con la
diversidad bioqumica de los alimentos que comemos, adems
de otros condicionamientos ambientales. Al mismo tiempo
tambin va aumentando la difusin del hecho de que las
grandes diferencias que se dan entre individuos en la respuesta
a la alimentacin dependen de las caractersticas particulares
codificadas en los genes, de las adaptaciones implementadas
en las diferentes condiciones experimentadas y el microbioma
de cada persona a lo largo de su vida.
Al momento de nacer estamos conformados solo por
clulas eucariticas, pero desde el primer respiro y a travs de
los das y aos toda la superficie de la piel, cavidad oral e
intestinal son colonizados por una tremenda diversidad de
bacterias, arqueobacterias, hongos y virus. La comunidad
conformada es lo que denominamos microbioma humano, el
cual contiene diez veces ms clulas que las que existen en el
resto del cuerpo, cuyo peso y magnitud en genes son muchos
ms que los contenidos en el genoma humano. La relacin
anfibitica de la flora residente depende del contexto
biolgico que se tenga en el momento, es lo que se traduce en
un equilibrio sutil de una flora que se considera comensal y
que en otras circunstancias es patgena. En nuestro afn de
higienizar todos nuestro ambientes, el equilibrio de esta
comunidad de naturaleza fractal se rompe y los beneficios que
de ellas obtenemos a nivel, inmunolgico y nutricional caen
vertiginosamente, es lo conoce la hiptesis de la microbiota
desaparecida que explica el aumento de enfermedades
alrgicas, asma, reflujo esofgico, sndrome de colon
inflamado metablicas como la obesidad entre otras. Un
ejemplo se ha observado en la bacteria Staphylococcus
aureus, residente comensal de la piel en los humanos, que
produce entre otras toxinas, enterotoxinas. Durante la
manipulacin de un alimento de manera inadecuada cepas de
la bacteria pueden pasar del manipulador y ocasionar
enfermedad o en el peor de los casos un brote. Streptococcus
pneumoniae se encuentra en las personas sanas en la
nasofaringe. Los neumococos son transformables
naturalmente y su variedad est confinada al tipo de
polisacridos de la capsula, la enfermedad en los humanos es
producida por unos serotipos predominantes, lo que ha
conllevado a estrategias de prevencin como es el desarrollo
de vacunas polivalentes. Estas han sido efectivas y han
reducido el riesgo de la infeccin neumococcica, pero esta
inmunizacin no solo protege contra las cepas infectivas, sino
tambin impide la colonizacin de otros serotipos presente en
la vacuna y esto ha provocado que S. aureus competidor
natural de los neumococos encapsulados emerge en
momentos en que la aparicin sin precedentes de infecciones
por S. aureus meticilino resistentes, en personas que no han
estado hospitalizadas o han recibido tratamientos con
antibiticos. En ausencia de una presin selectiva, estas cepas
ocasionalmente pero muy grave a fenotipos clnicos. Es
evidente que la ecologa de S. aureus ha cambiado (Blaser y
Falkow, 2009). Estas cepas podrn encontrarse en aguas y
alimentos tambin ocasionando no solo la diseminacin de
estas cepas sino que brotes antes fcilmente tratable sean
ahora fatales.
Los alimentos tambin interaccionan con la informacin
codificada en nuestros genes y con toda la malla metablica
que se deriva de ello y sus consecuencias a todos los niveles,
esto se conoce como nutrigenmica, es decir, cmo los
distintos componentes de los alimentos, sean nutrientes o no,
influyen sobre la expresin gentica, se ocupa de conocer y
caracterizar las diferentes respuestas a la alimentacin segn
el genotipo (nutrigentica) y segn la historia alimentaria
individual (epigentica). Ejemplo las personas que padecen
diabetes tipo 2, que segn estudios est asociada abaja ingesta
clrica de la madre durante el primer trimestre de gestacin y
poseen una hipometilacin del gen igf-2 (factor de
crecimiento similar a la insulina 2) lo que hace que este gen
sea ms activo y tenga mayor expresin que si se hubiera
metilado correctamente. Otro factor que corresponde a este
tema es que la obesidad que se observa en nios nacidos por
cesrea, no sea slo producto de no adquirir la flora intestinal
adecuada en el momento de nacimiento, sino la falta de
consumo de leche materna con niveles adecuados de leptina
(Casabiel et al., 1997)
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El alimento y el agua son fundamentales en la vida humana,
sin alimentacin adecuada o agua potable la vida tal como
como la concebimos puede desaparecer. Hay una gran
heterogeneidad de microorganismos conocidos pocos y por
conocer muchos con los que interactuamos sin darnos cuenta,
en el agua, en el alimento, en el ambiente y en nosotros
mismo como manipuladores de agua y alimentos, donde el
equilibrio de los microcosmos que integran cada uno de los
vrtices de este tringulo influye en el bienestar individual y
colectivo. Las interacciones entre los microrganismos estn
mostrando una faceta ms dinmica, evolutiva, cambiante.
Hasta el momento el quorum sensing ha ayudado a
comprender la formacin de biopelculas microbianas o de
como las infecciones pueden ser exitosas para una
determinada comunidad de microorganismos, algo que hace
aos atrs hubiese sido ciencia ficcin, pero cada vez estamos
siendo convencidos que no hay nichos separados, sino que
todo est interactuando haciendo lo que somos, la visin
integradora de genoma ambiente y nutricin se empieza por
entender que de donde surgi la vida tambin puede comenzar
el declive de la misma, pues todos compartimos un espacio
nico por el momento, la Tierra.
Referencias:
1. Albertsen, M., Hugenholtz, P., Skarshewski, A., Nielsen,
K.,Tyson GW., and Nielsen P. Genome sequence of rare,
uncultured bacteria obtained by differential coverage
binning of multiple metagenomes. Nat Biotech.doi. 2013;
10.1038/nbt.2579.
2. Blaser, M.J., Falkow, S. What are the consequences of the
disappearing human microbiota?. Nature Rev. 2009;
7:887-894.
3. Casabiell X, Pieiro V, Tom MA, Pein R, Diguez
C, Casanueva FF. Presence of leptin in colostrum and/or
breast milk from lactating mothers: a potential role in the
regulation of neonatal food intake. J Clin Endocrinol
Metab. 1997; 82(12):4270-3.
4. Gomez-Alvarez V., Revetts, R and Santo Domingo, J.
Metagenomic analysis of drinking water receiving
different disinfection treatments. Appl Environ Microbiol;
2012; 78(17):6095-6102.
5. Pettengelli, J., McAvoy E., White, J.R., Allard, M.,
Brown, E. and Ottesen A. Using metagenomic analyses to
estimate the consequences of enrichment bias for pathogen
detection. BMC Res. Notes. 2012; 5:378-385.
6. Young Jung J, Hee Lee, S, Myeong Kim, J., Su Park M.,
Bae Jin-woo., Hahn, Y., Madsen, E, and Ok Jeon Ch.
Metagenomic analysis of Kimchi, a traditional Korean
fermented food. Appl Environm Microbiol; 2011; 77
(7):2264. DOI 10.1128/AEM. 02157-10.
Identificacin de peligros y manejo
del riesgo microbiolgico en el
envasado de agua potable
MSc. Patricia Blasco
Gerencia de Manejo de Riesgo Microbiolgico.
Empresas Polar.
El agua embotellada puede ser cualquier fuente de agua
potable que recibe tratamientos fsicos y/o qumicos, y que
est libre de agentes infecciosos. Como cualquier producto
alimenticio, debe ser procesada, empacada y almacenada de
manera sanitaria y libre de contaminacin.Dado que se conoce
que existen enfermedades causadas por el consumo agua
contaminada por desechos humanos, animales o qumicos, las
embotelladoras de agua deben seguir estrategias destinadas a
minimizar los riesgos de contaminacin de sus productos.
En cada caso en particular se debe, en primer lugar,
identificar y caracterizar los peligros asociados a la fuente de
agua, luego valorar el riego que ellos representan, para
posteriormente gestionarlo a travs de estrategias que
permitan garantizar la inocuidad y calidad del producto final,
como son: 1) seleccionar adecuadamente la fuente y proteger
los recursos hdricos, 2) controlar las operaciones de
tratamiento y distribucin, 3) controlar la calidad higinica de
materias primas y empaques, 4) contar con un programa de
monitoreo de los principales parmetros crticos, 5) disear y
ejecutar programas de limpieza y saneamiento para equipos de
proceso y ambientes y 6) Implementar programas de buenas
prcticas de fabricacin.
El examen microbiolgico de las aguas destinadas al
abastecimiento tradicionalmente se encuentra dirigido a
detectar la presencia de los microorganismos patgenos de
transmisin hdrica, que originan su proceso infeccioso a
travs de la ruta fecal-oral y que, comnmente, se
corresponden con los microorganismos entricos. La
deteccin directa de estos patgenos resulta difcil,
complicada y lenta, por lo que recurrir a los microorganismos
indicadores de contaminacin fecal es la solucin adoptada y
reconocida. Su deteccin indica el riesgo de presencia de
agentes patgenos.
Sin embargo, ninguno de los microorganismos indicadores
conocidos cumple perfectamente con su funcin, por lo que su
ausencia no supone la inexistencia de patgenos, asimismo, se
han identificado una serie de patgenos emergentes, que no
necesariamente estn relacionados con contaminacin fecal
reciente, como es el caso del gnero Aeromonas.
En consecuencia, es necesario que se revisen las
normativas vigentes para incorporar microorganismos
realmente importantes. Adems, es crucial el avance en
nuevas tecnologas que permitan detectar los patgenos de
transmisin hdrica y as proporcionar datos que ayuden al
control de la salud pblica.
En todo caso, la clave para garantizar la inocuidad del agua
potable embotellada es el uso de barreras mltiples, aplicadas
desde la cuenca de captacin al consumidor, para evitar la
contaminacin del agua o para reducirla a niveles que no sean
perjudiciales para la salud.
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SIMPOSIO
BIOTECNOLOGA MICROBIANA
Coordinadora: Dra. Laugeny Daz
Moderador: MSc. Nstor Rosales
Remocin de contaminantes de
aguas residuales con microalgas
Dra. Charity Andrade
Ingeniera Qumica. MSc. Ingeniera Ambiental. Docente
Ordinaria de la Universidad del Zulia, FEC, Departamento de
Qumica
Las aguas residuales debido a su alto contenido de
nutrientes se consideran un medio apropiado para el
crecimiento de microalgas, las cuales juegan un importante
papel en el tratamiento de las mismas debido a su capacidad
de remocin de nutrientes y alto valor comercial que puede
tener la biomasa producida en conexin con este tratamiento.
Se realiz la evaluacin de las microalgas Scenedesmus sp. y
Chlorella sp. en la remocin de nutrientes y materia orgnica
de aguas residuales domsticas e industriales a nivel de
laboratorio y a cielo abierto. Se utilizaron para ello cultivos
discontinuos a nivel de laboratorio de 1,5 a 10 litros, con
aireacin constante, iluminacin artificial, fotoperiodo 12:12h
y 28+2oC; y cultivos en tanques a cielo abierto con 150 litros,
aireacin constante y en condiciones no controladas de
fotoperiodo y temperatura. Para la recoleccin de la biomasa,
se evaluaron los mtodos: coagulacin-floculacin y
sedimentacin natural. Se realizaron anlisis fisicoqumicos y
bacteriolgicos a la biomasa. Las Microalgas crecieron
satisfactoriamente a nivel de laboratorio, en todos los lquidos
residuales evaluados. Se reportaron remociones totales del
nitrgeno amoniacal; para ortofosfatos la remocin estuvo
entre 30 y 98%; mientras que, la remocin de materia
orgnica estuvo entre 30 y 97%. La biomasa seca resulto ser
un componente de alto contenido proteico, altamente fibroso,
con niveles de grasas y sales minerales adecuadas para
complementar la nutricin animal y desde el punto de vista
microbiolgico utilizable como complemento alimenticio para
especies avcolas y porcinas. Estos resultados demostraron la
contribucin que tienen las microalgas en el tratamiento
terciario de aguas residuales con la produccin de biomasa
microalgal de valor agregado.
Palabras clave: Microalgas, agua residual, remocin,
biomasa producida
Biorrecuperacin de agua contaminada
con combustible mediante consorcios
microbianos.
Microbial consortia to bioremediation of
water polluted with fuel
Dra. Daz-Borrego, Laugeny
Universidad del Zulia,
Facultad Experimental de Ciencias,
Departamento de Biologa,
Laboratorio de Microorganismos Fotosintticos,
Apartado Postal 526, Maracaibo, Venezuela,
laugeny@yahoo.com.
La contaminacin con combustible en aguas costeras
como en el Puerto de Lanchas de Isla de Toas-estado Zulia
debido a derrames ocasionados por embarcaciones con
motores fuera de borda, afectan negativamente el ecosistema
lacustre y el desarrollo de actividades pesqueras y tursticas de
la regin. Es por esto que la presente investigacin se enfoc
en evaluar el crecimiento y biodegradacin de gasoil al 1%
por consorcios de bacterias heterotrficas aerbicas y de la
microalga Chlorella sp., y sus bacterias asociadas
provenientes del Puerto de Lanchas de Isla de Toas, en
condiciones de laboratorio. Las bacterias crecidas hasta fase
exponencial fueron cultivadas en 100 mL de medio mnimo
mineral con gasoil al 1% durante 30 das en agitacin
constante, con determinaciones de recuento bacteriano y pH
cada tres das y remocin de hidrocarburos totales (TPH) al
inicio y fin del ensayo. La microalga fue cultivada en 70 mL
de agua destilada estril con fertilizante Nitrofoska (1mL/L) y
gasoil al 1%, adems de un control sin gasoil, incubados por
32 das y determinacin de la densidad celular, pH, pigmentos
(clorofila total y carotenoides), recuento de bacterias
asociadas y remocin de TPH al inicio y fin del ensayo, en
condiciones de temperatura de 30C, fotoperodo
luz/oscuridad 12/12h, y agitacin manual diaria en
comparacin con un control sin gasoil. El consorcio
bacteriano removi gasoil en un 65,62%, aunque la cepa
codificada como PL2C en cultivo puro lo degrad en 73,49%.
En el consorcio microalgal la produccin de pigmentos se
afect negativamente en presencia de gasoil, al igual que el
crecimiento microalgal; mientras que, las poblaciones
bacterianas asociadas a la microalga se beneficiaron en
presencia del gasoil obtenindose una remocin del
combustible gasoil del 88,98%, por lo que se recomienda el
consorcio microalga/bacterias heterotrficas en ensayos de
biorrecuperacin del agua costera contaminada con
combustible gasoil.
Palabras clave: Biorrecuperacin, agua costera, microalga,
bacterias, gasoil.
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Produccin de biopolmeros fuentes de energa renovable, las cuales no compiten con las
bacterianos fuentes alimenticias. El biodiesel ha recibido mucha atencin
en los aos recientes. Aunque numerosos reportes estn
Bacterial production of disponibles sobre la produccin de este combustible a partir
biopolymers de aceites vegetales, su produccin a partir de microalgas est
en franco aumento. La biotecnologa microalgal parece poseer
Jorge R. Guiez O. alto potencial para la produccin de biodiesel debido a las
Laboratorio de Antgenos Bacterianos. altas cantidades de lpidos producidos por estos
Facultad Experimental de Ciencias. Universidad del Zulia. microorganismos, que cada da aumenta debido a la
Maracaibo-Venezuela. posibilidad de cultivar de forma heterotrfica y con la
ingeniera gentica. El uso de estos microorganismo no est
Los biopolmeros son macromolculas presentes en basado slo en la alta carga lipdica que ellos pueden poseer
los seres vivos. La celulosa, el almidn, la actina, la miosina y sino adems a su alta tasa de crecimiento, el uso de tierras no
el ADN son ejemplos de polmeros naturales. Existen en la cultivables, aguas servidas y que no son cultivos estacionales.
naturaleza un gran nmero de microorganismos que Algunos gneros como Chlorella, Spirulina, Nannochloropsis
representan una fuente inagotable de nuevos productos, los y Neochloris han sido ampliamente estudiados, llegando a
cuales son de gran utilidad para diferentes propsitos. Los obtenerse en algunas ocasiones ms del 50% del peso seco en
polihidroxialcanoatos (PHA) son polmeros naturales lpidos, sobre todo bajo limitacin de nitrgeno. Pero estos
producidos por bacterias. Los microorganismos que los microorganismos no slo son capaces de producir biodiesel,
producen los utilizan como reserva de nutrientes. Son adems, y a travs de la fotosntesis oxignica, algunos de
biodegradables, tienen propiedades fsicas semejantes a las de ellos son capaces de romper molculas de agua y liberar tanto
los plsticos derivados del petrleo y son producidos a partir O2 como H2. Esta propiedad les confiere la habilidad de
de recursos renovables. Por ejemplo, Azotobacter vinelandii, utilizar de forma directa la luz solar para producir el
una bacteria que vive en el suelo sobre la hojarasca a la combustible ms limpio, gas H2, a travs del proceso de
sombra de los rboles y que produce dos polmeros de inters fijacin de nitrgeno y la enzima hidrogenasa.
industrial: un polisacrido llamado alginato, y un tipo de
polihidroxialcanoato denominado poli-beta hidroxibutirato
(PHB). Ambos polmeros presentan un gran potencial en
diversas aplicaciones, tanto en la industria de alimentos como
en la qumica y farmacutica. Otro biopolmero de inters es
la flagelina (FliC), principal molcula proteica presente en los
flagelos bacterianos. Esta protena monomrica se ordena en
extensos polmeros empaquetados, formando el esqueleto
principal de todos los flagelos de las bacterias mtiles. La
cualidad auto-agregativa de la molcula de flagelina (FliC),
esta siendo actualmente estudiada en diversas reas, como
inmunologa y biotecnologa; con especial atencin en el
campo nanotecnolgico, donde esta siendo utilizada como
base para el desarrollo de nanomquinas artificiales.

Palabras clave: biopolmeros, bacterias, polihidroxialcanoato,

flagelina.

Biocombustibles a partir de
Microorganismos fotosintticos

MSc. Nstor Rosales Loaiza

Laboratorio de Microorganismos Fotosintticos,
Departamento de Biologa, Facultad Experimental de
Ciencias, Universidad del Zulia
nestoralgae@gmail.com

La necesidad de desarrollar y mejorar fuentes de

energa renovables es de importancia inminente debido a la
naturaleza finita de los combustibles fsiles. Las microalgas y
cianobacterias son consideradas la tercera generacin de
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SIMPOSIO
HONGOS ANEMFILOS Y SU IMPACTO EN
LA SALUD PBLICA VENEZOLANA
Coordinadora: Dra. Hilda Romero
Moderador: MSc. Luis Gonzlez
Aspectos eco-epidemiolgicos de los
hongos anemfilos y su vinculacin con la salud
Hilda Romero C. Ph.D.
Se realiza una introduccin al tema, comenzando por
definir y exponer las caractersticas de los hongos anemfilos,
tales como el tamao de sus conidias, las fuentes de emisin,
distribucin mundial, variedad de gneros y nmero segn las obstculos y siendo puntas de lanza en el abordaje de los
estaciones del ao. Tambin se pone de manifiesto la
importancia y las consecuencias que conlleva la inhalacin de
los propgulos de estos hongos, cuyo recorrido es desde la
nasofaringe hasta los bronquolos terminales, sobre la salud en
el ser humano y se explica, someramente, los mecanismos de
la respuesta inmunolgica en los individuos
inmunocompetentes y susceptibles.
Hongos Anemfilos: Situacin en
Venezuela. Problemtica laboral
y repercusin en la comunidad
Lcda. Edith Ortega U. (UCV)
Existe una amplia evidencia histrica que relaciona
determinados tipos de alergias con los hongos. Se ha
demostrado la prevalencia de conidios fngicos en el
ambiente relacionado con la mayor presencia de reaccin
cutnea positiva a los antgenos fngicos. Eventos climticos
que movilizan grandes cantidades de polvo como el del
desierto Saheriano se han asociado a un aumento de procesos
asmticos y alrgicos en combinacin con esporas de hongos.
En Venezuela el cambio climtico tambin ha afectado
significativamente a la poblacin, la ecologa y la
epidemiologa en cuanto a las enfermedades respiratorias,
alrgicas y oportunistas. No siempre es posible establecer una
relacin directa entre los recuentos de propgulos fngicos en
la atmsfera y la presencia de sintomatologa alrgica, sin
embargo cada vez ms, se observa un crecido inters por
entender la dinmica de estos procesos y su relacin con la
calidad del aire en los ambientes donde el individuo se
desenvuelve.
Los hongos aerotransportados llegan fcilmente a diversos
lugares y sustratos como bibliotecas, museos y causan dao a
tesoros histricos como enciclopedias, memorias, obras de
arte arquitectnicas y pictricas, y hospitales, guarderas,
hogares, depsitos de alimentos, entre otros, afectando y
sensibilizando a los trabajadores de dichos lugares,
ocasionando adems daos a las edificaciones. Alrededor del
mundo se ha observado un incremento significativo en el
inters del estudio de la calidad del aire y su impacto sobre la
salud. En Venezuela de igual forma ha aumentado este inters
con una mayor inclinacin hacia el estudio de la flora fngica
y su relacin con la salud pblica, sin embargo son muy pocos
los trabajos sistemticos que se han realizado hasta ahora. En
Venezuela los reportes cada vez ms frecuentes en las
consultas de dermatologa y neumonologa de enfermedades
alrgicas asociadas con los hongos, tambin ha motivado en
las ltimas dcadas a los grupos de inters a hacer estudios de
aerobiologa fngica. Es as como se reportan estudios de la
flora fngica en los hospitales de Caracas, Carabobo, Zulia,
Lara, Sucre y en las bibliotecas de la UCV, IVIC; UC,
museos, entre otros. Cabe destacar que en estos tiempos
difciles para las Universidades, estas siguen superando
problemas de salud de la comunidad y en procurar respuestas
a dichas necesidades en la medida de sus posibilidades. La
mayora de los trabajos realizados en nuestro pas, sobres los
hongos y la aerobiologa, no poseen un carcter
multidisciplinar, fundamental para el abordaje sistemtico del
impacto de los hongos en el ambiente. Es necesario dar todo
el aporte a las Universidades e Instituciones Acadmicas y
Cientficas para modernizar la investigacin, procesos de
muestreo ambiental, establecer criterios de valoracin propios
de cada situacin analizada, tener protocolos de bioseguridad
en los ambientes de trabajo, determinados no slo por la
percepcin de riesgos sino por la cuantificacin y correcta
correlacin de los hallazgos, con sintomatologas o patologas
de los individuos afectados. Tener un claro mapa
micoepidemiolgico de nuestras regiones o comunidades,
permitira hacer de la prevencin y el control, nuestro ms
econmico y seguro recurso en salud.
Contribucin Actual en el Estudio
de Hongos Anemfilos
MSc. Joel Torres L.
Ctedra de Micologa,
Escuela de Bioanlisis, UCV.
La mayora de las enfermedades por hongos ocurren por la
inhalacin de sus partculas o por el contacto directo con stas
y puesto que ellos se encuentran en el ambiente, la exposicin
es constante. Generalmente, la concentracin fngica
intramural es menor que en el exterior y al respecto la Agencia
Nacional de Proteccin Ambiental de estados Unidos
considera que la calidad del aire intramural es un problema de
salud pblica, ya que alrededor del 90% de las personas pasan
un mayor tiempo en estos. Para el ao 2000, se estableci que
una concentracin de hongos mayor de 2.000 UFC/m3 en
ambientes internos, es un factor de riesgo para la salud de los
ocupantes; adems, la Asociacin Americana de Higiene
Industrial propone que la cantidad de UFC/m permitidas debe
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ser menor a 500 en edificios residenciales y menor a 25 para
centros comerciales.
En la actualidad no existe a nivel mundial un criterio
unificado de niveles de partculas fngicas que puedan ser
considerados como seguro. Existe poca informacin sobre
estandarizacin de metodologas para el estudio de hongos
anemfilos, sin embargo, la informacin existente arroja datos
interesantes que estimulan la investigacin sobre este tema. En
Suecia, el valor aceptado para las concentraciones de
elementos fngicos es de 300 UFC/m3. En Brasil, la gua para
el control de calidad del aire interior en oficinas, sugiere que
la cantidad total de hongos no debe exceder de 750 UFC/m.
En Espaa se considera la identificacin de las especies
fngicas si la concentracin excede las 500 UFC/m. Por otra
parte, diferentes pases han determinado la variabilidad de los
gneros fngicos en ambientes interiores en diversas pocas
del ao, reportando a Cladosporium sp. como el gnero con
mayor frecuencia de aislamiento, seguido de Penicillium sp. y
Aspergillus sp.
En Venezuela se han realizado importantes aportes sobre
la variabilidad fngica en ambientes internos como las
bibliotecas del IVIC, del ncleo de Barquisimeto de la UCV y
de la Universidad de Carabobo, determinando que los gneros
Aspergillus y Clasdosporium son los predominantes en esos
ambientes. La Ctedra de Micologa de la Escuela de
Bioanlisis de la UCV, desde el ao 2010 ha investigado los
hongos anemfilos en ambientes internos tipo bibliotecas
estandarizando la metodologa internacional recomendada
(mtodo aerobiolgico de impactacin), teniendo como
propsito establecer, en un futuro, rangos de referencia de
partculas fngicas en estos ambientes, expresndolos en
UFC/m3, destacando el hecho de que en nuestro pas no
existen normas COVENIN que establezcan las
cuantificaciones de microorganismos fngicos permitidos por
metros cbicos, careciendo as de un real control y
conocimiento de la situacin de los ambientes interiores de
reas como las bibliotecas, salas de hospitales, entre otras,
para dar cumplimiento a las normas locales de higienizacin y
de proteccin al trabajador, que estn expresadas en las
normas LOPCYMAT (Ley Orgnica de Prevencin, Control y
Medio Ambiente de Trabajo) y en el Reglamento de las
Condiciones de Higiene y Seguridad en el trabajo.
Hongos Anemfilos. vulnerabilidad
y riesgos. Normativa laboral
Lcda. Anglica Castro
El aire que respiramos es un entramado complejo de
elementos fsicos, qumicos y microbiolgicos que confluyen
en un instante bajo determinadas condiciones de humedad,
presin y temperatura. Dentro del elemento microbiolgico, se
encuentra el material particulado de origen fngico, que por
su participacin protagnica en la descomposicin de la
materia orgnica y el dimetro aerodinmico de sus
estructuras de reproduccin y propagacin, poseen una
caracterstica de omnipresencia tanto en ambientes externos
como en ambientes internos. El estudio de la micoflora
ambiental es de inters por su impacto fitosanitario, en el
biodeterioro del patrimonio artstico y sin duda en la salud
pblica. Las fuentes de emisin de propgulos fngicos
pueden ser naturales, como bosques y pastizales, o antrpicas,
como las diferentes actividades humanas que implican el
almacenamiento y procesamiento de desechos slidos u otras
actividades que propicien el manejo constante de substratos
para estos microorganismos. Los hongos anemfilos por su
accin alergnica poseen un importante efecto sobre la salud
pblica, el dimetro aerodinmico de sus propgulos, les
permite su permanencia en el aire por largos perodos de
tiempo, tras ser emitidos por diversas fuentes, y movilizarse
hasta distancias de 100 Km o ms, adems de permitirle
alcanzar niveles del aparato respiratorio que van desde la
nasofaringe hasta los bronquolos terminales. A pesar del
potencial que poseen las partculas fngicas de impactar sobre
la salud de los individuos, sin dudas hay poblaciones ms
vulnerables a sufrir alteraciones de su estado de salud como
consecuencia del contacto los hongos anemfilos, la
probabilidad de que esto acontezca est relacionada con
diferentes variables, la condicin inmunolgica del individuo,
la edad, el grado y el tiempo de exposicin al elemento
fngico. Existen ciertos ambientes donde el riesgo a padecer
infecciones respiratorias por partculas fngicas es mayor,
dentro de ellos destacan las unidades de informacin y
almacenamiento bibliogrfico. Las colecciones impresas
representan un sustrato ideal para muchos hongos que tienen
ampliamente expresada su actividad celuloltica, quienes
tambin son conocidos por su amplio efecto alergnico. Esta
situacin ha llegado a desencadenar conflictos laborales que
involucran, a los empleados y a los empleadores de estos
lugares de trabajo, y al organismo del estado encargado de la
seguridad de los trabajadores, INPSASEL, quienes albergan la
normativa de higiene y seguridad laboral actual. Por una parte,
los individuos afectados en defensa de su derecho a la salud,
por otro lado, el empleador en reclamo de la permanencia de
los trabajadores en su ambiente laboral, mientras que
INPSASEL solo puede recurrir a argumentos poco sostenibles
para la defensa y proteccin de los afectados. En tal sentido
hay una carencia de sistemas de evaluacin de la calidad del
aire en funcin a la micoflora anemfila en Venezuela, y ms
an en la implementacin de polticas preventivas y
correctivas en procura del bienestar de los individuos
vulnerables ante la accin de estos microorganismos sobre su
salud.
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CICLO DE CONFERENCIAS:
LOS MICROBIOS Y LOS ALIMENTOS
Coordinadora-Moderadora:
Dra. Kutchynskaya Valero Leal
Biotecnologa en la produccin de vinos
Dra. Mara Berradre
Dra. en Ciencias,
Mencin Ciencia y Tecnologa de Alimentos
La biotecnologa suele asociarse con procesos modernos
que emplean seres vivos para la creacin de productos de
consumo humano, como lo es el vino, producto
biotecnolgico milenario obtenido mediante la fermentacin
alcohlica de mosto de uva por la accin de las levaduras que
transforman los azcares en etanol. El proceso de vinificacin
representa un conjunto de operaciones que dependern del
tipo de vino a elaborar, para vino tinto las operaciones
principales son la maceracin, fermentacin alcohlica,
disolucin especfica de compuestos fenlicos y fermentacin
malolctica, mientras que para vino blanco son la extraccin
del mosto, fermentacin alcohlica y proteccin de
oxidaciones. Para ambas vinificaciones, la etapa fundamental
para obtener vino es la fermentacin alcohlica, que en
condiciones de vinificacin espontnea, las primeras horas de
fermentacin son llevadas a cabo por gneros presentes en las
uvas con predominio de las levaduras no-Saccharomyces
Hanseniaspora y Kloeckera. Las levaduras del gnero
Saccharomyces, principalmente la especie Saccharomyces
cerevisiae se empiezan a desarrollar tras una veintena de
horas, coexistiendo con las levaduras de la uva. Despus de
tres a cuatro das de fermentacin predominan y son las
responsables ltimas de la fermentacin alcohlica. Este
cambio poblacional est relacionado a factores como
presencia de etanol, anaerobiosis, el sulfitado de la vendimia y
el mosto, la cantidad de azcar y la mayor tolerancia a
temperaturas elevadas de Saccharomyces cerevisiae frente a
otras levaduras. La relacin de las levaduras no-
Saccharomyces/Saccharomyces, puede contribuir a acentuar
los cambios tanto qumicos como sensoriales que tienen lugar
durante las fermentaciones repercutiendo evidentemente en la
calidad del vino obtenido, ya que las levaduras no-
Saccharomyces secretan una serie de enzimas que
interaccionan con los sustratos presentes en el medio
especialmente el aroma. En vista de esto, la biotecnologa
enolgica moderna aporta novedades que mejoran la
produccin enolgica y la calidad de los vinos, proponiendo la
aplicacin de varias tcnicas de mejora de levaduras a travs
de las cuales es posible construir levaduras vnicas
recombinantes que expresen actividades metablicas de
inters o que ejerzan efectos beneficiosos en las caractersticas
organolpticas de los vinos como mutacin, seleccin
inducida, hibridacin, tecnologa de ADN recombinante,
clonacin, transformacin de genes y fusin de protoplastos.
Mtodos microbiolgicos para la
determinacin de antibiticos
en alimentos
Dra. Nancy Morillo
Instituto de Investigaciones Agricolas
Los sistemas actuales de explotacin intensiva de los
animales favorecen la aparicin de procesos infecciosos y
parasitarios que requieren la utilizacin de frmacos con fines
profilcticos y/o teraputicos para cubrir las necesidades
asociadas al tratamiento de problemas a difierentes niveles.
Sin embargo se ha observado que ciertos productos
veterinarios, como las sustancias de accin hormonal y los
antibiticos, se han venido administrando fraudulentamente en
animales sanos, para ejercer un efecto promotor del
crecimiento, reducir el estrs o evitar muertes y conseguir la
mejora del animal, en trminos de produccin.
La evidencia cientfica por el uso masivo de estos
frmacos pone de manifiesto en los ltimos aos la existencia
de una interaccin negativa entre estas sustancias
farmacolgicas, el medio ambiente, los animales y las
personas, se ha observado la aparicin de Cepas
Multiresistentes que poseen una capacidad para soportar e
incluso crecer rpidamente en presencia de una gran variedad
de frmacos, a esto se le suma la gran dispersin en el sistema
de distribucin de los medicamentos y la existencia de un
mercado negro, donde los nicos datos disponibles refieren
ms al volumen de venta que al consumo efectivo.
La realidad actual, es el desconociendo de la informacin
que se maneja en granja, como el tipo de medicamento, la
dosis y tiempo de espera necesario para el sacrificio o
cosecha, con lo cual se garantice la inocuidad del producto
final, ya que estos frmacos pueden provocar en el
consumidor efectos adversos relacionados con la toxicidad
propia del compuesto suministrado. Esta situacin ha causado
preocupacin a nivel mundial y ha obligado a las naciones a
implementar y ejecutar polticas de estado que monitoreen y
establezcan Lmites Mximos de Residuos (LMRs) de ciertas
sustancias y sus residuos en animales vivos y productos
derivados incluyendo los huevos, la leche y la miel.
En este sentido las autoridades sanitarias han establecido
mtodos de anlisis tanto rpidos como confirmatorios para la
deteccin y determinacin de residuos veterinarios. Los
mtodos rpidos son de carcter exploratorio y se utilizan para
identificar la presencia de una o varias drogas en una muestra
sospecha, donde una respuesta positiva indica que se requiere
de la validacin mediante la aplicacin de un mtodo
confirmatorio con alta especificidad, sensibilidad y rango
cuantitativo.
Entre los diferentes mtodos empleados para la deteccin
y determinacin de residuos veterinarios destacan, los
mtodos serolgicos, fisicoquimicos y mayormente como
exploratorios, los mtodos microbiolgicos, principalmente
para la determinacin de antibiticos. Se tratan de mtodos
cualitativos, cuya finalidad es establecer la presencia o
ausencia de residuos de antibiticos por encima de los Lmites
Mximos de Residuos permitidos (LMR). Estn basados
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fundamentalmente en pruebas de inhibicin del crecimiento CICLO DE CONFERENCIAS
de un microorganismo especfico (microorganismo de prueba
o microorganismo test), empleando para la deteccin de esta AGRONOMA: QUE HAY DE NUEVO?
inhibicin, diversos sistemas como indicadores de pH, redox, Coordinadora-Moderadora:
bioluminiscencia, etc., es decir, aprovechan M.Sc. Katiuska Acosta
fundamentalmente la capacidad de las bacterias de producir
cido, reducir colorantes o producir halos de inhibicin en un
medio de cultivo, de manera que el resultado se puede Cambio climtico, microorganismos
interpretar visualmente. y seguridad agroalimentaria

Dr. Werner Gutirrez Ferrer

Facultad de Agronoma.
Universidad del Zulia.
wernergutierrez@fa.luz.edu.ve

Segn las estimaciones de diferentes organismos

internacionales para el ao 2050, la poblacin mundial
superara los 9000 millones de personas, de los cuales la
mayora, estar ubicada en los pases en vas de desarrollo.
Para garantizar la seguridad alimentaria de esta significativa
poblacin, y evitar una tragedia humana por falta de
disponibilidad de alimentos, debe incrementarse la produccin
agrcola mundial actual, alrededor de un 70 %. El
cumplimiento de esta meta debe considerar no solo el
incremento en la cantidad de alimentos para garantizarle a la
poblacin mundial acceso pleno y en todo momento a los
alimentos, sino que debe igualmente incluir el estar enfocados
en la inocuidad de los productos ofertados, y su calidad
nutricional, para asegurarles a los individuos su bienestar y
salud. El cumplimento de esas metas se ve oscurecido por el
cada vez ms notorio proceso de cambio climtico que afecta
a las principales regiones agrcolas del mundo. Segn informe
divulgado por la Administracin de Ocanos y Atmsfera de
Estados Unidos (NOAA), el ao 2012 fue record en prdida
de hielo rtico, en subida del nivel del mar, en emisin de
gases de efecto invernadero, adems de haber estado entre los
10 aos ms clidos desde que se tengan registros. Aun
cuando la tierra ha sufrido cambios climticos drsticos a lo
largo de su historia, y que para muchos especialistas, es solo
un proceso natural y cclico del planeta, el calentamiento
actual va a un paso diez veces ms rpido que ningn otro en
los ltimos 65 millones de aos. Segn los escenarios
planteados, es probable que para mediados del siglo, se haya
alcanzado un incremento de 2 a 3 grados de temperatura, y de
unos 5 a 6 grados para finales de siglo. De continuar el paso
actual en el cambio climtico del planeta, sera sumamente
difcil a las especies vegetales y animales, adaptarse a los
eventos climticos extremos de olas de calor o lluvias, los
cuales sern cada vez ms severos y frecuentes. Toda esta
amenaza inherente al cambio climtico afecta a los dos
factores ms ntimamente ligados al desarrollo de los cultivos,
la precipitacin y la temperatura. El calentamiento global
afecta negativamente la produccin agrcola toda vez que el
aumento de la temperatura del mar, junto al derretimiento de
los glaciares, est ocasionando el aumento del nivel del mar,
afectando el drenaje superficial y sub superficial de zonas
agrcolas cercanas, as como dao de los acuferos. El
calentamiento est generando prdidas de la materia orgnica,

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y cambios en la flora y fauna del suelo, as como en la tomar la decisin de hacer uso de esta herramienta
fertilidad del mismo. Estaciones de crecimiento ms largas biotecnolgica de inocular con cepas de hongos micorrizcos
pueden variar considerablemente poblaciones de insectos y y aplicarlos al suelo, debemos considerar el monitoreo de la
microorganismos perjudiciales a los cultivos, disminuyendo zona donde est establecido o se quiera establecer la siembra,
su rendimiento y aumentado los costos de produccin. siendo clave la seleccin e identificacin de cepas nativas
Particularmente el efecto del incremento de la concentracin particulares de cada cultivo, las cuales tienen que ser
de CO2 disponible en el espacio intersticial del suelo tiene previamente seleccionadas en base a su capacidad competitiva
efectos increblemente variables sobre la actividad biolgica Yefectiva, ya que pueden estar presentes en el suelo en
de los suelos agrcolas, siendo este un tema fundamental para proporciones significativas, pero con una baja capacidad de
la produccin de alimentos a nivel mundial, considerando que colonizacin; lo cual no garantiza el xito de este tipo de
las poblaciones de estos microorganismos controlan la interaccin, clave importante para un eficiente desarrollo en el
respuesta de los ecosistemas agrcolas a los cambios cultivo del cultivo, evaluando la incidencia de propgulos de
climticos, y juegan un papel primordial en el rendimiento de hongos micorrizas nativos infectivos.
cultivos y rebaos.

Micoriizas herramienta biotecnolgica

en los sistemas de produccin
sostenible de alimentos

Ing Agr. MSc Katiuska Acosta

Universidad del Zulia
kacosta@fa.luz.du.ve

Actualmente la biotecnologa agrcola busca el aumento de

la productividad, reducir costos de produccin y el aumentar
la calidad de los alimentos utilizando estrategias ecolgicas.
Desarrollando tcnicas biotecnolgicas, se ha logrado la
utilizacin de los microorganismos del suelo que cumplen
diferentes funciones, ya sea como fijadores de nitrgeno,
solubilizadores de fsforo, potencializadores de nutrientes y
agentes de descomposicin de la materia orgnica, logrando
as beneficios en la produccin de los cultivos, al ser
utilizados estos microorganismos como bioestimulantes o
biofertilzantes.
Dentro de estas, las micorrizas son asociaciones
simbiticas ecolgicamente mutualistas que se establecen
entre un selecto grupo de hongos y la gran mayora de las
plantas, conllevando a cambios en la fisiologa de la planta,
cambiando la morfologa de la raz, debido a una alteracin
hormonal. Jugando un papel importante en el crecimiento y
nutricin de las plantas, debido a que aumentan la absorcin
de nutrientes, colocando a la disposicin de la planta, una
cantidad mayor de nutrientes asimilables en la zona de la
rizosfera, esto incluye la solubilizacin de formas no
disponibles de ciertos elementos fsforo, nitrgeno, potasio,
magnesio, manganeso, calcio, hierro, cobre, aumento en la
tolerancia y adaptabilidad de la planta a condiciones adversas
del ambiente y condiciones qumicas del suelo, as como
tambin interacta significativamente en el reciclaje de
nutrientes y aumento en la absorcin del agua por la intensiva
exploracin del suelo a travs de las hifas de los hongos,
excluyndose la prdida de nutrientes por la fijacin qumica
ola lixiviacin, despus de la mineralizacin de la materia
orgnica. Logrando as mejorar la productividad del cultivo y
reduciendo las aplicaciones de fertilizantes inorgnicos,
ayudando as a conservar el ambiente. Sin embargo antes de
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CICLO DE CONFERENCIAS: LOS VIRUS:
NUEVOS AVANCES
Coordinador-Moderador: M.Sc. Anyelo Durn
Diversidad y evolucin de los rotavirus
en la era post-vacuna
Rotavirus diversity and evolution in the
post-vaccine era
Dra. Esmeralda Vizzi
Instituto Venezolano de Investigaciones Cientficas,
Laboratorio de Biologa de Virus,
Centro de Microbiologa y Biologa Celular.
Carretera Panamericana km 11. Caracas.
Estado. Miranda
esmeralda.vizzi@gmail.com
Rotavirus es la principal causa de gastroenteritis grave
infantil a nivel mundial. Cada ao ms de 500.000 nios
menores de 5 aos mueren a causa de este virus,
especialmente en los pases en va de desarrollo, lo cual
representa casi un tercio de todas las causas de muerte por
diarrea. Existe una amplia variabilidad genotpica en los
rotavirus humanos que circulan en la poblacin, en relacin a
las principales protenas G y P de la capside externa. Su
genoma segmentado favorece la aparicin de variantes
rearregladas, si bien ciertas constelaciones genticas son
preferidas y mantenidas en naturaleza, asumiendo un mayor
peso epidemiolgico las infecciones sostenidas por cepas
definidas como Wa- o DS-1-like. A partir del 2006 dos
vacunas anti-rotavirus, RotarixTM y RotaTeqTM , han sido
introducidas en la rutina de inmunizacin de numerosos
pases. Estas parecen conferir proteccin contra diferentes
genotipos G/P predominantes, incluyendo algunos no
incluidos en las actuales formulaciones, reportndose una
eficacia >85%, y una efectividad variable (45-80%) que, por
motivos an no completamente aclarados, es mayor en pases
ms desarrollados. A pesar de esto, la vacunacin ha
provocado un importante declino en el nmero absoluto de
gastroenteritis severa y de muertes por diarrea en pases con
menores recursos. No se conoce si las variaciones temporales
y geogrficas observadas en los genotipos predominantes
pueden ser moduladas a travs de una presin selectiva que la
vacuna ejercera sobre los tipos circulantes, o si son producto
de fluctuaciones naturales. Solo a travs del mantenimiento y
evaluacin de los programas de vigilancia epidemiolgica,
que contemplen la tipificacin de las cepas aisladas en la
poblacin, ser posible monitorear el impacto directo o
indirecto que la introduccin de la vacuna pueda tener sobre la
diversidad y evolucin de los rotavirus.
Palabras clave: rotavirus, diarrea, diversidad antignica,
vacuna, impacto
Mecanismos de Patognesis de los
Rotavirus
Rotavirus Pathogenesis Mechanisms
Dr. Jos Luis Zambrano Rouvier*
Instituto Venezolano de Investigaciones Cientficas,
Centro de Microbiologa y Biologa Celular,
Laboratorio de Biologa de Virus.
jlzr@ivic.gob.ve
Biologa de Rotavirus.
Rotavirus es el agente etiolgico ms importante de las
diarreas severas en infantes. Pertenece a la familia de los
Reoviridae, y se caracteriza por tener una cpside sin
envoltura lipdica, compuesta por tres capas protecas que
protegen 11 segmentos de ARN de doble cadena (dsRNA), la
capside desnuda facilita la transmisin oral-fecal. Cada
segmento genmico (excepto el segemento 11), codifica una
protena viral para un total de seis protenas no estructurales
(NSP1-NSP6) y seis protenas estructurales que conforman la
cpside (VP1-VP7).
La capa interna de la cpside la constituye la protena
estructural VP2, VP1 (ARNasa dependiente de ARN, RdRP)
y VP3 (guanliltransferasa/metilasa). La capa intermedia esta
compuesta por la portena viral mas abundante del virin VP6,
y la capa externa por la glicoprotena VP7 y la protena
sensible a protelisis VP4 la cual se pliega en forma de
espculas trimricas que se poroyectan desde la superficie del
virin. La protena VP4 es sensible a la accin proteoltica de
la tripsina para formar los dominios VP8* y VP5* escenciales
para la infectividad del rotavirus.
Ciclo Replicativo.
Los enterocitos son las principales clulas blanco del
rotavirus. Sin embargo la mayora de los estudios sobre el
ciclo replicativo se han realizado en clulas en cultivo. La
replicacin del rotavirus ocurre exclusivamente en el
citoplasma, y su ciclo de vida se encuentra ntimamente ligado
al retculo endoplasmtico (RE).
Una vez que el virus entra a la clula por va endosomal,
la capa externa de la cpside se solubiliza permitiendo la
salida de los transcritos para la sntesis de las protenas
virales, las cuales son concentradas en estructura electrodensa
localizadas en el citoplasma llamadas viroplasmas (VP1, VP2,
VP3, VP6, NSP2, NSP5). Las protenas VP4, VP7 y NSP4
son protenas integradas (VP4, VP7) o asociadas (NSP4) al
RE.
Dentro de los viroplasmas ocurre la replicacin del dsRNA
y el ensamblaje de las capas interna e intermedia para
conformar las partculas DLP (Partcula de Doble Capa).
Subsecuentemente las DLP son translocadas por un
mecanismo de gemacin hacia el lumen del RE gracias a la
interaccin de las protenas VP6 y NSP4. sta ltima acta
como un receptor intracelular que ancla el viroplasma con la
membrana del RE. Rotavirus utiliza el lumen del RE durante
la morfognesis que involucra el ensamblaje de la capa
externa y maduracin final de las partculas virales (TLP,
Partculas de Tres Capas).
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Durante la gemacin de las DLP al RE, la partcula
inmadura adquiere una membrana transitoria y la protena
VP7. En el lumen del RE, el virin adquiere la protena VP4 y
por un proceso selectivo aun desconocido retiene la protena
VP7 y elimina la membrana transitoria. La salida de las
partculas involucra la muerte celular por va de necrosis.
Mecanismo de Patognesis.
Calcio. El Calcio (Ca2+) es el principal segundo mensajero de
numerosos procesos celulares. Durante la replicacin de
rotavirus en clulas en cultivo se ha reportado cambios en la
homeostasis celular al Ca2+.
Las clulas infectadas por rotavirus, muestran un incremento
progresivo en la permeabilidad de la membrana plasmtica al
Ca2+, lo cual conduce a un incremento de la [Ca2+]cyto unido al
secuestro del Ca2+ liberable con thapsigargina, un inhibidor de
la Ca+2 ATPasa del RE. El inicio de los cambios de la
homeostasis al Ca2+ es concomitante con el inicio del
ensamblaje de las TLP en el RE.
Alteraciones en la homeostasis celular al Ca2+ han sido
relacionadas con citotoxicidad y la muerte celular, ya que la
prevencin o reduccin de estos cambios resulta en un retraso
de la muerte celular. Por otra parte alteraciones en la
homeostasis al Ca2+ puede ser parte de la base de las
alteraciones fisiolgicas en el intestino causadas por la
infeccin de rotavirus que finalmente conduce a la diarrea.
Los cambios en la homeostasis al Ca2+ parecen estar
mediados por la sntesis de las protenas virales, ya que los
cambios de Ca2+ son revertidos cuando las clulas infectadas
son tratadas con cicloheximida y no con actinomicina D. En
numerosos trabajos se ha tratado de establecer cual de las
protenas virales se encuentra asociada a los cambios en la
homeostasis del Ca2+ en las clulas infectadas con rotavirus.
Se ha reportado que la clulas infectadas con rotavirus y
tratadas con tunicamicina, los cambios en la permeabilidad al
Ca2+ de la membrana citoplasmtica son inhibidos, sugiriendo
que las protenas glicosiladas NSP4 y VP7 pueden estar
involucradas a estos cambios.
La expresin de NSP4 recombinante en clulas de insecto
Sf9 mostraron cuatro veces incrementado la [Ca2+]cyto. Ms
aun la expresin de la protena de fusin NSP4-GFP en
clulas de mamfero HEK293 mostr un incremento de dos
veces de los niveles basales de Ca2+ comparados con las
clulas que no expresaban la protena de fusin. Por otra parte
cuando se bloquea la expresin de la protena NSP4 utilizando
ARN de interferencia (RNAi), los cambios en la homeostasis
de Ca2+ son totalmente revertidos.
UPR. La respuesta a protena no plegada (UPR), tiene como
funcin primaria restaurar la homeostasis celular cuando el
RE se encuentra comprometido debido a la acumulacin de
protenas mal o no plegada. La activacin de la UPR conduce
en un incremento de la expresin de chaperonas asociadas al
RE (GRP94, GRP78). La activacin de la UPR es debido a la
activacin de protenas sensoras de estrs del RE (ATF6,
IRE1 y PERK). Las protenas sensoras de la UPR son
protenas transmembranales cuyo dominio luminal se
encuentran asociadas a la protena GRP78. La acumulacin de
protenas mal o no plegadas en el RE conduce a disociacin
entre la protena GRP78 y las protenas sensoras, conduciendo
a la fosforilacin de IRE1 y PERK y la translocacin de ATF6
al aparato de golgi donde un producto clivado (ATF-p50) es
subsecuentemente transportado al ncleo. ATF6-p50 es una
protena transactivadora la cual se une a promotores de los
elementos de respuesta a estrs de RE (ESRE).
Recientemente se ha reportado que en clulas infectadas
con rotavirus cambios en los niveles de expresin de protenas
asociadas al estrs celular, incluyendo las chaperonas GRP78
y GRP94. La infeccin de rotavirus activa eficientemente las
tres protenas sensoras de la UPR, sin embargo protenas con
sensible importancia en la ruta de la UPR incluyendo ATF6p-
50, PERK, CHOP y GADD34, se encuentran localizadas en
los viroplasmas, bloqueando la ruta de sealizacin de estrs.
La modulacin de esta ruta al secuestrar o reclutar protenas
sensoras, factores de transcripcin y protenas efectoras en los
viroplasmas sugiere que stas estructuras de inclusin
citoplasmticas pueden directa o indirectamente tener un
papel en la regulacin de vas de sealizacin asociadas con la
respuesta de defensa celular frente a la infeccin de rotavirus.
Recientemente se ha sugerido que la protena de rotavirus no
estructural NSP3 podra estar involucrada en la activacin de
la UPR durante la infeccin de rotavirus.
Citoesqueleto. El citoesqueleto celular es una compleja red de
protenas involucradas en procesos de sealizacin,
transporte, movimiento y divisin celular.
El citoesqueleto se encuentra conformado por los
microfilamentos de actina, filamentos intermediarios
(desmina, vimentina, keratina) y los microtbulos de tubulina.
En clulas infectadas con rotavirus ocurre la disrupcin de
la distribucin de actina y tubulina; as como tambin las
protenas de los filamentos intermediarios como desmina y
vimentina.
En clulas humanas polarizadas (CaCo-2), los
microvellosidades de F-actina son desensamblados. Estos
cambios en clulas CaCo-2 se han asociado a la actividad
sobre la homeostasis al Ca2+ de la protena NSP4 mostrados
en ensayos de expresin transitoria de la protena no
estructural.
El silenciamiento de la expresin de la protena NSP4
revierte los cambios en la distribucin tanto de la actina como
de la tubulina, confirmando la actividad de la NSP4 en los
cambios observados en el citoesqueleto.
Sin embargo los cambios y alteraciones de los constituyentes
del citoesqueleto celular puede deberse tambin a mltiples
mecanismos relacionados directa o indirectamente con la
homeostasis al Ca2+. La protena RhoA, una pequea protena
G es la responsable de activar la formacin de fibras de estrs
de actina, mecanismo relacionado a numerosas funciones
celulares e involucradas a patologas relacionadas con el
citoesqueleto celular.
Rotavirus activa la fosforilacin de RhoA, que dispara una
va de sealizacin compleja que desencadena en la formacin
de fibras gruesas de actina conocidas como fibras de estrs. La
fosforilacin de Rhoa es dependiente del estimulo de la
integrina 21. sta integrina es parte del complejo receptor
de rotavirus al interactuar con la protena VP5*. No esta claro
aun la funcin de las fibras de estrs en el ciclo replicativo de
los rotavirus.
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Conclusin:
Las alteraciones inducidas en la homeostasis al calcio, la
arquitectura del citoesqueleto celular y la modulacin de rutas
de estrs inducidas por la infeccin de rotavirus, pudieran
contribuir a los cambios morfolgicos observados en el efecto
citoptico de las clulas infectadas con rotavirus y adems
constituye un importante componente de los mecanismos
asociados a la diarrea y la sobrevivencia viral.
Palabras clave: rotavirus, calcio, citoesqueleto, mecanismo
de patogenicidad.
Referencias:
1. Zambrano JL, Daz Y, Pea F, Vizzi E, Ruiz M-C, et al.
Silencing of rotavirus NSP4 or VP7 expression reduces
alterations in Ca2+ homeostasis induced by infection of
cultured cells. J Virol 2008. 82: 58155824.
doi:10.1128/JVI.02719-07.
2. Zambrano JL, Ettayebi K, Maaty WS, Faunce NR,
Bothner B, et al. Rotavirus infection activates the UPR
but modulates its activity. Virol J. 2011. 8: 359.
doi:10.1186/1743-422X-8-359.
3. Zambrano JL, Sorondo O, Alcala A, Vizzi E, Daz Y, et
al. Rotavirus Infection of Cells in Culture Induces
Activation of RhoA and Changes in the Actin and
Tubulin Cytoskeleton. PLoS ONE. 2012. 7: e47612.
doi:10.1371/journal.pone.0047612.g008.
Avances en el desarrollo de una vacuna
contra el dengue
Advances in the development of a vaccine
against dengue
Germn Aez, M.D.
Visiting Associate,
Laboratory of Emerging Pathogens, DETTD, OBRR
Center for Biologics Evaluation & Research (CBER)
US Food and Drug Administration (FDA)
German.Anez@fda.hhs.gov
El dengue es una enfermedad tropical desatendida que ha
emergido o re-emergido en las ltimas dcadas en numerosas
regiones del mundo y para el cual no existe tratamiento
antiviral especfico ni vacunas efectivas disponibles. El
dengue es considerado la arbovirosis ms importante
alrededor del mundo y es causado por la infeccin con
cualquiera de los cuatro tipos del virus dengue (DENV-1 a 4,
gnero Flavivirus). Dichas infecciones pueden ser
asintomticas o pueden causar un espectro clnico que vara
desde una enfermedad febril autoresolutiva (fiebre dengue)
hasta una condicin potencialmente mortal (dengue
severo/fiebre hemorrgica por dengue, DS/FHD) (1). Se
estima que alrededor de 390 millones de infecciones por
DENV ocurren cada ao en pases tropicales y sub-tropicales
en los que la enfermedad es endmica o donde causa
epidemias espordicas (2). Desde el aislamiento del DENV en
la dcada de los aos 1940, numerosos intentos han sido
realizados con el fin de obtener candidatos de vacunas
eficaces. Mltiples estrategias has sido implementadas en la
bsqueda de candidatos de vacunas contra el dengue
incluyendo: i) vacunas a virus inactivado; ii) vacunas a virus
vivo atenuado por pases sucesivos en lneas celulares o a
travs de ingeniera gentica reversa mediante quimerizacin
con el virus de la fiebre amarilla o mediante el intercambio de
genes codificantes de protenas virales antignicas entre
diferentes tipos de DENV, as como a travs de la
introduccin de deleciones y/o mutaciones atenuantes
especficas a lo largo del genoma viral; iii) vacunas de sub-
unidades antignicas (conteniendo la principal protena
inmunognica del virin; la protena de envoltura); y iv)
vacunas basadas en ADN codificante de protenas del DENV
(3). La vacuna ideal contra el dengue debe cumplir no solo
con los requisitos bsicos de cualquier vacuna de ser segura,
de baja reactogenicidad y capaz de conferir proteccin de por
vida en los individuos vacunados, idealmente en una o pocas
dosis, sino que adems deben generar un reportorio
balanceado de anticuerpos neutralizantes contra cada uno de
los cuatro tipos de DENV; el principal correlato inmunolgico
de proteccin, razn por la cual la mayora de las
formulaciones de vacunas en desarrollo son tetravalentes, es
decir, incluyen antgenos de cada uno de los cuatro tipos de
DENV. Esta respuesta de anticuerpos neutralizantes debe ser
sostenida a lo largo del tiempo, de manera que se prevenga de
sensibilizar a los individuos vacunados con un inmungeno
que incremente potencialmente los riesgos para la aparicin
de formas severas de la enfermedad (DS/FHD). Estas formas
severas de dengue han sido relacionadas con la presencia de
concentraciones sub-neutralizantes de anticuerpos anti-
DENV, que por su parte conllevan a la formacin de
complejos virus-anticuerpo que facilitaran la entrada de
DENV a clulas portadoras de receptores Fc; principalmente
monocitos/macrfagos. Este complicado fenmeno
inmunopatolgico es conocido como amplificacin
dependiente de anticuerpos (ADA) y el mismo,
desencadenara la produccin de citocinas pro-inflamatorias y
otros mediadores solubles que seran responsables de la
patologa observada en dengue severo (4). Un nmero
importante de candidatos de vacuna contra el dengue se
encuentran en diferentes fases de desarrollo, varios de ellos en
fases avanzadas (fase III) y estn siendo estudiadas o se
encuentran en planes de ser estudiadas en poblaciones en
riesgo en pases endmicos (5), a la espera de obtener
resultados positivos que sustenten la aprobacin de dichos
candidatos de vacunas por parte de las autoridades
regulatorias y sanitarias competentes y as poder prevenir
efectivamente y de una vez por todas, a este flagelo que causa
un importante impacto negativo en la vida de una cuarta parte
de la poblacin mundial que habita en zonas de riesgo para la
infeccin por DENV.
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Referencias SIMPOSIO:
1. Aez G, Rios M. Dengue in the United States of
America: a worsening scenario? Biomed Res Int.
LAS INFECCIONES ASOCIADAS A LA
2013;678645. ATENCIN EN SALUD: UN PROBLEMA DE
2. Bhatt S, Gething PW, Brady OJ, Messina JP, Farlow TODOS
AW, Moyes CL, Drake JM, Brownstein JS, Hoen AG, Coordinadora-Moderadora:
Sankoh O, Myers MF, George DB, Jaenisch T, Wint GR, M.Sc. Arelis Lares de Acevedo
Simmons CP, Scott TW, Farrar JJ, Hay SI. The global
distribution and burden of dengue. Nature. 2013.
25;496(7446):504-7.
3. Halstead SB. Flavivirus Vaccines. In: Molecular Staphylococcus aureus
Virology and Control of Flaviviruses, Ed. Pei-Yong Shi, resistente a la meticilina (SARM)
Caister Academic Press. 2012: 185. el ambiente hospitalario
4. Halstead SB. Identifying protective dengue vaccines: Methicillin Resistant Staphylococcus
Guide to mastering an empirical process. Vaccine. 2013.
26. 10.1016/j.vaccine.2013.06.079. [Epub ahead of print]
aureus (MRSA) in the Hospital
5. Durbin AP, Whitehead SS. Next-generation dengue Environment.
vaccines: novel strategies currently under development.
Viruses. 2011. 3(10):1800-1814. Hoet, Armando E. a,b y Van-Balen, Joany a
a Department of Veterinary Preventive Medicine, College of
Veterinary Medicine; b Epidemiology Division, College of
Public Health; The Ohio State University, Columbus, Ohio,
USA.

Hoy en da Staphylococcus aureus Resistente a la

Meticilina (SARM) es uno de los patgenos nosocomiales
ms importantes alrededor del mundo, causando cientos de
miles de casos clnicos por ao. Solo en los Estados Unidos,
SARM produce ms de 90 mil casos septicmicos adquiridos
en hospitales por ao, de los cuales al menos 19 mil de estos
mueren debido a la infeccin. Uno de los mayores retos que
tiene el personal mdico dedicado a la prevencin y control de
enfermedades infecciosas hospitalarias, es el identificar las
posibles fuentes de infeccin. En el caso de SARM todava no
se ha determinado con claridad el papel que el ambiente
hospitalario pueda jugar en el mantenimiento y transmisin de
este patgeno nosocomial. Los objetivos de esta lnea de
investigacin han sido el determinar la presencia y
distribucin de SARM en diferentes ambientes hospitalarios
durante largos periodos de vigilancia, as como el determinar
las caractersticas fenotpicas y genotpicas de las cepas de
SARM que circulan en ambientes hospitalarios. Esta
informacin nos permitir entender la epidemiologia y
ecologa de SARM en nuestros hospitales, con el fin de poder
disear programas de limpieza y desinfeccin que permitan
controlar ms eficientemente a este patgeno. En los ltimos 4
aos se han implementado diferentes programas de vigilancia
activa para muestrear el ambiente buscando SAMR en
diversos ambientes hospitalarios. Entre los ambientes
investigados se incluyeron un hospital universitario
(especficamente la unidad de enfermedades infecciosas), un
hospital de nios (especficamente su unidad de cuidados
intensivos para neonatos), una clnica de ojos, el sistema
estatal de ambulancias, y el transporte pblico que sirve a
dichos hospitales. Fueron muestreadas en forma regular
(mensual o trimestral) por un ao superficies especificas en
cada una de esas instituciones, usando una tcnica de
muestreo ambiental previamente estandarizada y validada
basada principalmente en el uso de paos electrostticos. Las
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muestras recolectadas fueron procesadas usando medios de investigaciones se puede indiciar sin lugar a duda que SARM
pre-enriquecimiento y selectivos para el aislamiento de est presente a lo largo del ao en el ambiente hospitalario,
estafilococos. Una vez purificadas todas las cepas de cada aun sin estar relacionados con brotes hospitalarios. Tambin
muestra, estas fueron identificadas y caracterizadas usando se pudo observar que dichas cepas pueden sobrevivir hasta 4
procedimientos microbiolgicos rutinarios. Las cepas meses en superficies contaminadas y que estas pueden circular
identificadas como S. aureus fueron luego confirmadas como a lo largo del hospital, siendo diseminadas mayormente por el
SARM usado un PCR Duplex. Todas las cepas de SARM personal mdico. Tambin se puede concluir que cada
fueron caracterizadas fenotpicamente y genticamente, ambiente posee su poblacin nica de cepas de SARM
determinando su patrn de susceptibilidad a 16 diferentes circulando en este, representando diferente niveles de riesgo a
drogas antimicrobianas, adems de tipificarse por SCCmec y la hora de adquirir una infeccin nosocomial por cualquiera de
por PFGE. estas cepas. Finalmente, los diferentes programas de limpieza
En el Hospital Universitario, el ms grande del estado de y desinfeccin deben ser personalizados para cada institucin
Ohio, EEUU, se determin luego de un ao de muestreo que de acuerdo a su nivel de contaminacin y sus prcticas
23,1% (103/446) de las superficies muestreadas fueron clnicas.
positivas a SARM. Este hospital recibe un gran nmero de
casos clnicos de SARM, aproximadamente 6,78 por cada Palabras clave: Staphylococcus aureus Resistente a la
1.000 pacientes. El 90% de todas las cepas fueron clasificadas Meticilina, SARM, ambiente, hospitales
como Multi-Resistentes a tres o ms clases de antibiticos, y
genticamente fueron determinadas como cepas de SARM Referencias
Adquiridas en Hospitales (HA-MRSA, con sus siglas en
Ingles). Este nivel de contaminacin fue completamente 1. Hoet A, Johnson A, Nava-Hoet R, et al.
opuesto a lo observado en la vigilancia realizada en el Environmental methicillin-resistant Staphylococcus
Hospital de Nios, donde SARM solo fue detectado en 0,8% aureus in a veterinary teaching hospital during a
(2/225) de las superficies muestreadas. Ambas cepas fueron nonoutbreak period. Vector Borne and Zoonotic
caracterizadas como HA-MRSA, pero sus patrones de Diseases 2011;11:609-615.
resistencia fueron menores a aquellas observadas en el
hospital universitario. Sin embargo, en el hospital de nios se
detect 27,5 de las superficies contaminadas con S. aureus
susceptible a la Meticilina (SASM). En la Clnica de Ojos, a
pesar de solo atender unos pocos casos de infecciones por
SARM anualmente, se detect que un 4% (5/112) de las
superficies estaban contaminadas con SARM. Contrario a los
hospitales previamente descritos, el 60 % de las cepas de
SARM fueron clasificadas como Adquiridas en la Comunidad
(CA-MRSA, con sus siglas en Ingles) en vez de HA-MRSA
(los cuales fueron solo un 40%). Al comparar el nivel de
susceptibilidad y las caractersticas genticas de dichas cepas,
se observ una gran diferencia entre aquellos circulado en los
hospitales previamente mencionados y los de la clnica de
ojos. Las cepas de este ltimo fueron todas pansusceptibles
(excepto por los SARM que fueron solo resistentes a las
drogas beta-lactmicas como era de esperarse) y adems se
observ una gran diversidad de clones circulando en dicha
clnica, contrastando con lo visto en los hospitales donde
haba poca diversidad gentica (uno o dos clones mayormente
prevalentes a lo largo del hospital, donde ningn clon fue
visto ms de una vez). En cuanto a las Ambulancias que
sirven a esta poblacin, se determin que 50% de estas tenan
por lo menos una superficie contaminada con SARM,
teniendo una contaminacin promedio de 9,6% (89/926).
Finalmente, los Autobuses Pblicos que sirven dicha rea
tambin presentaron contaminacin por SARM en el orden
del 15% (35/234) de sus superficies, con 63% (25/40) de los
autobuses muestreados presentado aunque sea una superficie
contaminada. La mayora (65%) de estas cepas fueron
clasificadas como CA-MRSA, y pansusceptibles a todas las
otras clases de antibiticos. Las superficies que fueron ms
comnmente contaminadas en cada uno de estas instituciones
sern publicadas en el futuro cercano. Basado en todas estas
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SIMPOSIO
AVANCES EN MICOBACTERIOLOGA
Coordinadora-Moderadora:
M.Sc. Francis Villarroel
Situacion actual y epidemiologa
de la tuberculosis
MSc. Margiori Cordones
Magister en Epidemiologia
Coordinacion regional de tuberculosis del edo zulia
La tuberculosis (TBC) es una enfermedad infecciosa
transmisible causada por el complejo Mycobacterium
tuberculosis, generalmente de evolucin crnica y
caracterizada por la formacin de granulomas. Su localizacin
preferente es el pulmn, aunque puede afectar a cualquier
rgano. El reservorio es el hombre enfermo o infectado. La
fuente de infeccin es casi exclusivamente el hombre enfermo
bacilfero. La va de transmisin ms importante y habitual es
la respiratoria, tambin se describe la transmisin por va
digestiva, la cual ha desaparecido a partir de la pasteurizacin
de la leche.
El periodo de incubacin de la TBC es de 2 a 10 semanas,
desde el ingreso del bacilo en el organismo y el desarrollo de
la positividad a la prueba de la tuberculina. Si se considera
hasta el inicio de la enfermedad puede extenderse desde
semanas hasta toda la vida. El periodo de
transmisibilidad dura mientras el paciente expela bacilos
La susceptibilidad a la enfermedad es generalizada, pero
existen factores que la aumentan como: la edad, el estado
inmunitario del husped, la presencia de enfermedades
concomitantes, entre otros.
SITUACION ACTUAL
La enfermedad est ampliamente distribuida por todo el
mundo, aunque con diferentes prevalencia segn las regiones.
Actualmente dista mucho de ser una enfermedad
controlada, observndose en las ltimas dos dcadas un
incremento en el n de casos, incluso en pases desarrollados
donde se haba logrado un descenso muy significativo.
Desde 2004, Venezuela est clasificada en el grupo de
pases de la Regin de las Amricas con mediana carga de
TB, por lo que sigue siendo considerada como un problema de
salud pblica, una enfermedad reemergente. Cuatro factores
contribuyen a esta situacin de reemergencia de la TB: la
epidemia de VIH--SIDA, el incremento de poblaciones
marginales con precarias condiciones sanitarias, desnutricin,
hacinamiento y pobreza como la poblacin privada de libertad
y las etnias indgenas; las fallas y descuidos de los programas
de salud pblica y la resistencia creciente del bacilo
tuberculoso a los frmacos.
Resistencia a las drogas
antituberculosas
Dr. Jos Ignacio Delgado M.
Medico neumonologo/tisiologo
Medico jefe de programa de tisiologia hcu
Mycobacterium tuberculosis (MT) agente productor de la
tuberculosis humana, tiene una antigedad aproximada de ms
de 20 mil aos, calculada en base a su poca prdida de
nucletidos y capacidad de sufrir mutaciones. Los antecesores
del MT dieron el salto del reservorio acutico al reservorio
animal, y de all al hombre. Este microorganismo se siente
cmodo bajo condiciones de hacinamiento, pobreza,
marginalidad y desnutricin. La probabilidad de desarrollar la
TB es ms alta entre enfermos de SIDA, sin embargo an los
HIV negativos tienen una probabilidad de 70% de morir en
los siguientes 10 aos si no reciben tratamiento. La TB sigue
siendo diagnosticada mayormente por la baciloscopia, sin
embargo nuevos mtodos de diagnstico molecular han sido
desarrollados y se han extendido para descartar la resistencia a
las drogas antituberculosas. sta se ha extendido por el mundo
pero es ms fuerte en los pases ms pobres de Asia y frica,
sobre todo en aquellos donde no existen pautas de tratamiento
supervisadas ni mtodos de diagnstico rpido y confiable. La
resistencia a la TB puede ser dividida en natural, producto de
mutaciones salvajes, y aquella que es adquirida por la
seleccin de cepas mutantes debido al uso de la monoterapia o
de tratamientos mal planteados. La resistencia a la Isoniazida
y a la Rifampicina se considera tan importante que se le
denomina resistencia a mltiples drogas (MDR) que puede
extenderse a las drogas de segunda lnea incluyendo las
drogas parenterales (XDR). Los tratamientos para la TB en
adultos siguen siendo los esquemas de 6 meses y 4 drogas de
primera lnea. En el caso de las MDR los tratamientos
recomendados por la OMS duran hasta 20 meses y deben ser
cumplidos bajo internacin hospitalaria lo que genera altos
costos sociales y econmicos.
Vigilancia de la resistencia a los
medicamentos antituberculosos
en venezuela
Lcda. Carmen Ramrez Ovispos
Licenciada en Bionalisis,
Especialista en Salud Pblica
Bacteriologa de la Tuberculosis
La resistencia a los medicamentos antituberculosos aparece
desde los inicios de la quimioterapia. El uso de esquemas de
tratamiento antituberculosos inadecuados, determina la
seleccin de mutantes resistentes de bacilos tuberculosos a
uno o ms medicamentos, que gradualmente reemplazan a los
sensibles como agentes de transmisin de la enfermedad. El
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porcentaje de resistencia en pacientes tuberculosos nuevos o
nunca tratados, vara de pas a pas y est en relacin directa a
la calidad del esquema de tratamiento, abandono e
irregularidad en la administracin del mismo. Los
tratamientos acortados y supervisados han tenido un impacto
favorable en el descenso de la resistencia en casos de
tuberculosis. Existe una creciente asociacin de Tuberculosis
y SIDA, pero no se conoce el nivel de resistencia a los
medicamentos de uso comn en estos pacientes. La medicin
de la prevalencia de resistencia permite adecuar los regmenes
teraputicos y evaluar la gestin del programa. En Venezuela
en los aos 98-99, se realiz la I Encuesta Nacional de
Resistencia, la cual permiti conocer la situacin de la
resistencia a los medicamentos antituberculosos desconocida
hasta ese momento, donde obtuvieron una resistencia total de
7,5% y una tuberculosis multidrogorresistente (MDR) de
0.5%, con una muestra de setecientos sesenta y nueve
pacientes (769) casos nuevos o nunca tratados y con
tratamiento previo la total fue de 30,8% y la MDR de 13,5%,
en ciento cuatro (104) casos. Es preciso destacar que por
normas internacionales es necesario realizar encuestas
nacionales de resistencia en casos nuevos o nunca tratados por
lo menos cada tres aos para mantener la vigilancia del
comportamiento de las cepas resistentes que circulan en el
pas. El objetivo de este estudio nacional fue determinar la
incidencia de la resistencia a los medicamentos
antituberculosos en las cepas de Mycobacterium tuberculosis,
aisladas en muestras de esputos de pacientes nuevos o nunca
tratados con baciloscopa positiva, que inician tratamiento en
los establecimientos de salud. Para el clculo de la muestra se
utiliz el muestreo por conglomerado en poblacin finita
utilizando como marco los 24 estados del pas, con
informacin sobre el nmero de pacientes BK positivos y al
nmero de notificacin por establecimientos de salud. El
periodo de recoleccin de las muestras y cultivos fue de un
ao (2011-2012). Para la determinacin la susceptibilidad de
Mycobacterium tuberculosis a los medicamentos
antituberculosos, se utiliz el mtodo de las proporciones de
mltiples de Canetti, Rist y Grosset en medio slido
Lowenstein Jensen con isoniacida (INH) rifampicina (RMP),
estreptomicina (SM) y etambutol (EMB) Se obtuvieron los
siguientes resultados: Novecientos noventa y cuatro (994)
pacientes nuevos o nunca tratados presentaron una incidencia
de resistencia total de 7,5% y una tuberculosis
multidrogorresistente (MDR) de 0,3%, cabe resaltar que la
vigilancia en casos con tratamiento previos debe ser realizado
rutinariamente. Conclusiones. Los resultados obtenidos,
comparados con la I Encuesta Nacional de Resistencia
demuestran que no ha habido aumento significativo en la
resistencia a los medicamentos ni en la tuberculosis MDR.
Los hallazgos indican que el esquema proporcionado por el
Programa Nacional de Control de la Tuberculosis es adecuado
para manejar estos casos.
Palabras clave: Tuberculosis, Resistencia a medicamentos,
Mycobacterium tuberculosis
CICLO DE CONFERENCIAS:
AVANCES EN VETERINARIA
Coordinadora-Moderadora:
Dra. Gabriela Carruyo
Fiebre Aftosa: estrategias actuales
M.Sc.Robert Valeris-Chacn
Medico Veterinario.
Magister Scientiarum en Biologa mencin Inmunologa
Bsica
Profesor Asosiado de la Ctedra de Infectologa Veterinaria
Universidad del Zulia
La fiebre aftosa es an en la segunda dcada del siglo XXI
una enfermedad que produce una alta carga econmica en los
sistemas de produccin animal a nivel mundial, bien sea por
los efectos directos sobre la salud animal, bien sea por los
altos costos de su prevencin. El virus de fiebre aftosa es
responsable de una de las enfermedades de mayor morbilidad
conocida en los mamferos. Un perodo de transmisibilidad
que comienza antes de la aparicin de los signos clnicos, una
alta resistencia al medio ambiente y una similitud clnica con
otras enfermedades virales hacen de la fiebre aftosa un reto
para la comunidad cientfica que se dedica a la sanidad y
produccin animal. Muchos pases a nivel mundial han podido
erradicar la enfermedad siguiendo diferentes rutas (con o sin
protocolos de vacunacin). Sin embargo, Venezuela est
dentro de un reducido grupo de pases americanos donde la
fiebre aftosa es an endmica. En un estudio
seroepidemiolgico a nivel del Estado Zulia (en vas de
publicacin) se evalu la circulacin viral del FMDV (Foot-
and-mouth disease virus) en bovinos a travs de la tcnica de
ELISA 3ABC que detecta anticuerpos contra la protena no
estructural 3ABC. Estos anticuerpos normalmente se generan
ante la infeccin con cepas de campo, ya que las vacunas
modernas contra la fiebre aftosa se purifican para eliminar las
trazas de protenas no estructurales de la masa antignica. Los
resultados de ese estudio muestran que la seroprevalencia
general de fiebre aftosa es de 23,77% a nivel de finca, pero
esta seroprevalencia no se distribuye de manera homognea:
los municipios Machiques de Perij, Catatumbo y Coln
presentan seroprevalencias mucho ms altas de la media
(57,58%; 54,76% y 47,62%, respectivamente), mientras otros
municipios como Mara y Pez no presentaron fincas con
animales con anticuerpos anti FMDV. Esto implica que las
estrategias de campaas de vacunacin obligatorias
semestrales contra la fiebre aftosa deberan reforzarse en los
municipios con mayor circulacin viral, puesto que es all
donde hay mayor riesgo por la conjuncin de factores
climticos, culturales y sobre todo de las caractersticas del
circuito ganadero en la zona Sur del Lago que depende en
gran medida de la compra de ganado de los llanos
venezolanos considerados un ecosistema endmico para el
FMDV. Adems, los municipios que no presentaron actividad
viral son candidatos a establecerse como municipios libres de
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fiebre aftosa, una vez que estudios de actividad viral
consecutivos y exhaustivos garanticen tal estatus. Otro
aspecto importante es el tamao de las explotaciones
pecuarias. En el estudio de seroprevalencia se encontr que
las fincas con ms de 120 animales tenan un mayor riesgo,
por lo que sera recomendable aumentar la supervisin de la
cobertura y adecuada administracin de la vacuna contra
fiebre aftosa en las fincas de gran nmero de animales puesto
que son aquellas que presentan ms movilizaciones durante el
ao y este es un factor de riesgo preponderante en la fiebre
aftosa. Otras estrategias que deben reforzarse son la atencin
oportuna y adecuada de los focos de fiebre aftosa para limitar
la diseminacin viral, la caracterizacin de los aislados de
fiebre aftosa de campo de modo que se garantice que las
vacunas actualmente utilizadas en el pas protejan contra los
subtipos circulantes y una concientizacin de todos los
involucrados en la produccin agropecuaria del pas: la
erradicacin de la fiebre aftosa es una meta que slo se podr Palabras clave: cerdas, VPPC, PRRS, Zulia, aborto,
alcanzar y mantener si hay un compromiso de todos los
actores responsables.
Deteccin del virus de la Peste Porcina
Clsica y Sndrome
Respiratorio y Reproductivo
Porcino en granjas porcinas del
estado Zulia
Detection of Classical Swine Fever
virus and Porcine Reproductive and
Respiratory Syndrome from pig
farms in Zulia state
Mejia Williana, Zapata Deniceb, Quintero Armandoa,
Padrino Teofilob, Virla Jessb,
Negrete Jeanc.
a Universidad del Zulia. Unidad Curricular Sistemas de
Produccin de Cerdos; b Universidad del Zulia. Estudiante de
Postgrado. c Universidad del Zulia. Estudiante de Pregrado.
En la actualidad se requiere granjas porcinas que se
encuentren libres de enfermedades infecciosas, la presencia de
esta enfermedades conllevan a una disminucin de la
productividad de las granjas. Dentro de las principales
enfermedades de origen viral que causan problemas
reproductivos en los cerdos se encuentran el Virus de la Peste
Porcina Clsica (VPPC) y el Sndrome Respiratorio y
Reproductivo Porcino (PRRS) (Diseases of Swine. 2006). El
objetivo de este estudio es conocer la situacin de la VPPC y
el PRRS en las granjas porcinas del estado Zulia. Para el caso
de la VPPC, en primer lugar se estandariz una RT-PCR y
luego se procedi a la deteccin del VPPC en tonsilas de
cerdas y por otra parte se realiz un muestreo serolgico de
los engordes a nivel de matadero. Para PRRS se evaluaron
mediante serologa 40 granjas porcinas y en cada una de ellas
se tomaron 20 muestras de sangre al `plantel reproductor. Las
muestras fueron enviadas y procesadas en el Laboratorio de
Patologa Porcina de la FCV-LUZ y el Laboratorio de
Gentica Molecular de la FCV-LUZ. Con la realizacin del
presente trabajo se logr la estandarizacin de la tcnica de
RT-PCR y en la prueba de campo se detect una hembra
porcina portadora de la cepa salvaje del VPPC. En cuanto a la
serologa para VPPC, se encontr que un 58,60% de los
cerdos evaluados no presentaron anticuerpos contra el VPPC.
De la evaluacin del PRRS, se encontr un 32% de las granjas
positivas. Estos resultados indican, que existen animales
persistentemente infectados con el VPPC y se evidenci que
la mayora de las granjas no estn vacunando contra VPPC o
en caso de realizarlo, la misma es muy deficiente. Por otro
lado, el virus del PRRS est ampliamente difundido en las
granjas porcinas del estado Zulia.
serologa.
Bioseguridad en las unidades de
produccin bovinas
Disney Pino Ramrez, MV, MSc
Profesor Emerito
disneypino@gmail.com
Cualquier brote de enfermedad pudiera ser
financieramente devastador para la unidad de produccin,
especialmente cuando se ejecutan planes de expansin
aumentando la carga animal sustancialmente. Un programa
diseado para prevenir las enfermedades de la finca, debe ser
ms que un mero programa sanitario. Por lo antes dicho, los
programas sanitarios deben ser complementados, con un
sistema de bioseguridad diseado para maximizar la
resistencia a las enfermedades y minimizar la exposicin del
rebao a agentes infecciosos. Si se logra identificar aquellas
enfermedades que representan un riesgo grande para la finca,
se podrn desarrollar e implementar medidas de control y
prevencin dirigidas contra aquellas que regularmente crean
problemas. Por aos, los productores han venido ignorando o
subestimando las medidas de bioseguridad, pensando que
pueden ser implementadas de un da para otro. El sistema de
bioseguridad debe ser planificado con tiempo suficiente para
cubrir todos aquellos puntos de riesgos y debe ser diseado
para cada operacin ganadera de manera tal, que todo el que
haga vida en la finca lo conozca y juegue un papel cuando se
active. Una vez listo el sistema, este debe constituir parte de la
vida diaria de la finca y cuando ms, se reforzara en caso de
existir un brote de enfermedad importante en la zona. Para
programar, es importante conocer las enfermedades de la zona
y su nivel de riesgo y el efecto caballo de Troya que utilizan,
para irrumpir en la unidad de produccin, causando
devastacin. Se hace necesario establecer un nivel de
seguridad que vaya de 1 a 5, siendo 1 un rebao cerrado y 5
un rebao completamente abierto. Para evitar la entrada de
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enfermedades a la finca se debe implementar el control del SIMPOSIO
trfico de vehculos en especial aquellos que tienen contacto
con otras fincas (camin lechero, camiones ganaderos,
CANDIDA SPP. RESISTENTE A
vehculos del productor, veterinario, etc.), control del trfico ANTIFNGICOS QU ALTERNATIVAS
de personas, control del trfico de animales (bovinos, ovejos, QUEDAN DISPONIBLES?
cerdos, perros, etc.), el control de las fuentes de alimento y del Coordinadora: Dra. Dilia Martnez
agua, el control de vectores (ratas, moscas, tbanos y Moderadora: Dra. Patricia Navas Yamarte
garrapatas). El aislamiento o cuarentena juega un papel clave
en el trfico de animales adquiridos o que salen y retornan,
debido a que permite en ese lapso la posible identificacin de Significado de la IgM en estudios de
enfermedades de inminente entrada a la finca. La limpieza y
desinfeccin es un rengln olvidado por los productores, variabilidad en la actividad srica aglutinante
quienes pretenden sustituirlo por la administracin de anti-Candida albicans
antibiticos y antiparasitarios de amplio espectro. Todas estas
medidas comprenden medidas bsicas de bioseguridad que M.Sc. Neomar Semprn-Hernndez
permiten blindar la unidad de produccin contra las Laboratorio de Inmunologa,
enfermedades. Facultad Experimental de Ciencias,
Universidad del Zulia. (Maracaibo, Venezuela)
Departamento de Ciencias Naturales,
Programa Educacin.
Proyecto de Biologa y Qumica. UNE.
Rafael Mara Baralt. (Cabimas, Venezuela)

Las pruebas inmunodiagnsticas para C. albicans han

evidenciado problemas de sensibilidad, especificidad y
reproducibilidad. La levadura presenta variabilidad antignica
dependiente de la relacin entre la cepa endgena (autloga)
con su hospedador en individuos sanos o infectados,
condicionando el criterio para seleccionar anticuerpos de
utilidad diagnstica. Las aglutininas (IgM) anti-Candida
albicans fijan complemento y son especficas para glucanos y
mananos superficiales. Los mananos (de mayor antigenicidad
y concentracin), son oligosacridos responsables de la
seroespecificidad diagnstica, que recae en la unin y
exposicin entre residuos de manosa. La IgM y otros isotipos
anti-manano, se presenta en portadores sanos y enfermos; un
grupo reconoce el -manano (posfolipomanano-PLM) y est
asociado con proteccin inmunitaria; potencian la
opsonizacin por C3 del complemento y la fagoctosis. Las
aglutininas no asociadas con proteccin reconocen el -
manano de menor cantidad de azcares (manoprotena-MP).
Ambos son detectables en suero de portadores sanos pero en
candidisicos reacccionan nicamente contra PML. Se ha
evidenciado que la especificidad de eptopes y complejidad
antignica de Candida albicans, originar una respuesta
heterognea de anticuerpos, particular en cada individuo. Por
otra parte; el 70-97% de la pared celular en C. albicans son
azcares, favoreciendo la produccin de IgM, y el 0,8-10%
son protenas. La mayora de los anticuerpos monoclonales
para investigacin son de tipo IgM, casi todos, dirigidos
contra eptopes del manano superficial. La deteccin de
anticuerpos sricos policlonales especficos, aportara
informacin presuntiva mientras se implementan pruebas ms
concluyentes, aun cuando sera limitada para inferir la
capacidad de respuesta en el enfermo. En nuestro programa
hemos demostrado una tendencia a mayores valores de
reactividad aglutinante autloga anti-C. albicans en
portadores sanos con respecto a individuos bajo riesgo, todos

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sin candidiasis. As mismo, hemos demostrado que los
anticuerpos aglutinantes reaccionan indistintamente con
reactivos elaborados con cepas provenientes de individuos con
candidiasis o de individuos portadores sanos.
Palabras clave: IgM, Candida albicans, inmunodiagnstico,
actividad srica aglutinante
FASH, IRH y reactividad autloga como
indicadores de variabilidad en la actividad
aglutinante anti-Candida albicans
MSc. Sandra Azuero
Laboratorio de Inmunologa,
Facultad Experimental de Ciencias,
Universidad del Zulia. (Maracaibo, Venezuela)
Candida albicans presenta variabilidad antignica
dependiente del hbitat, hospedador y medio de cultivo,
dificultando el estudio de la respuesta inmunitaria especfica y
el inmunodiagnstico. Se ha reportado que un factor
responsable de esta variabilidad es la relacin entre la cepa
endgena (autloga) con su hospedador en individuos sanos e
infectados, incluso encontrndose diferencias en la expresin
antignica de levaduras aisladas de diferentes partes del
cuerpo en un individuo, causando una respuesta heterognea
de anticuerpos. Este fenmeno puede ser responsable de los
problemas de especificidad, sensibilidad y reproducibilidad
del inmunodiagnstico. A pesar de la importancia de los
anticuerpos aglutinantes en la respuesta anti-C. albicans, no
existe claridad sobre la variabilidad en la respuesta basal
mediada por IgM. Nuestro programa ha implementado un
diseo sencillo en individuos portadores sin candidiasis,
estudiando parmetros que reportan una aproximacin al
estudio de la variabilidad en la respuesta aglutinante anti-C.
albicans: a) Frecuencia de Aglutinacin Srica Heterloga
(FASH): #sueros heterlogos (SH-para el aislado impropio)
causando aglutinacin de un #variable de cepas heterlogas
(CH). El criterio que arrojan los datos es que las FASH ms
representativas se ubican cuando ms del 50% de CH son
aglutinadas por ms del 40% de SH. FASH elevadas
evidencian baja variabilidad en la respuesta aglutinante. b)
ndice de Representatividad Heterloga (IRH): medida en la
que cada cepa es aglutinada por un #variable de SH
(IRHcepa(s)X = #SH aglutinando a X / #total de CH),
evidencindose que pocas cepas son reconocidas por ms del
90% de SH, a pesar de tratarse de la misma especie y
c)Reactividad autloga (para el aislado propio). Los
parmetros evaluados son tiles como indicadores de
variabilidad de la respuesta aglutinante en grupos de
individuos portadores de C. albicans, con y sin candidiasis y
documentan la existencia del mismo fenmeno que se observa
in-vitro sobre la variabilidad antignica de la levadura.
Palabras clave: IgM, Candida albicans, inmunodiagnstico,
FASH, IRH, reactividad autloga
Candidosis invasora: patrones de
susceptibilidad y resistencia
MSc. Maribel Dolande Franco
Especialista en Micologa Mdica.
MSc en Micologa. UNEFM.
Coordinadora de la Red de Candidemia y Vigilancia de la
resistencia a los antifngicos.
Docente del Postgrado de Especializacin en micologa
mdica del INHRR.
Los avances diagnsticos, quirrgicos y farmacolgicos si
bien es cierto que han contribuido a aumentar la sobrevida de
los pacientes tambin ha llevado a un incremento en las
infecciones oportunistas de forma general y entre ellas el
aumento en la incidencia de infecciones por hongos, lo que
ha producido cambios sustanciales en la Micologa mdica,
especialmente en pacientes inmunocomprometidos por
diversas causas como infecciones por el VIH, desordenes
metablicos, enfermedades neoplsicas trasplantados, uso de
antibiticos de amplio espectro y edades extremas de la vida
entre otras, las cuales son determinantes en el desarrollo de las
enfermedades fngicas invasoras (EFI), producida por los
gneros Candida, Aspergillus y Cryptococcus, adems de
otras especies de hongos oportunistas.
La morbi-mortalidad asociada a las EFI es significativa, y
es evidente el papel que juegan como un problema de salud
pblica potencial, siendo la candidiasis invasora (CI) la
infeccin nosocomial y oportunista ms frecuente en stos
pacientes, los diversos programas de vigilancia reportan
cambios importantes en la distribucin de las especies de
Candida por regin as como el patrn de susceptibilidad a los
antifngicos a nivel mundial. Entre los cambios ms
importantes a resaltar es la epidemiologa con respecto al
agente etiolgico, observando una disminucin importante de
Candida albicans en cuanto a su frecuencia de aislamiento
por el aumento de especies de Candida no albicans a partir de
muestras de sangre.
Una vez conocida la distribucin de Candida spp., es
importante detectar la posible resistencia a los antifngicos de
uso frecuente que stas puedan presentar en los centros
hospitalarios, para ello debemos realizar pruebas de
susceptibilidad capaces de cumplir con ste fin.
Las pruebas de susceptibilidad son una herramienta til e
importante en la escogencia del antifngico por parte del
clnico, as como en el desarrollo de nuevas drogas y ms
importante an en la deteccin de resistencia a los frmacos
utilizados, por esta razn diversos comit internacionales han
desarrollado y estandarizado tcnicas, aplicables y
reproducibles en cualquier regin geogrfica con el fin de
comparar los datos obtenidos.
Los comit internacionalmente reconocidos en sta rea
son Clinical and Laboratory Standards Institute (CLSI)
Subcommite for Antifungal Testing, y el European Committee
on Antimicrobial Susceptibility Testing (EUCAST) que han
desarrollado la tcnica de microdilucin en caldo que se
considera el mtodo de referencia a nivel mundial, el cual es
sensible, reproducible pero laborioso y requiere de gran
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cantidad de insumos y reactivos, as como la experticia y
dedicacin del operador.
Se han desarrollado varios mtodos de fcil ejecucin e
interpretacin que pueden ser utilizados en los laboratorios de
microbiologa de forma rutinaria tales como las tabletas o
discos de sensibilidad, las tiras de Etest, basadas en la tcnica
de difusin en agar, adems de los sistemas automatizados
como el ATB-Fungus, Sensititre Yeast One System y
recientemente la incorporacin del sistema VITEK 2 mtodo
automatizado de susceptibilidad antifngica creado por
Biomriux, los cules comienzan a ser objeto de estudios y de
investigacin, a fin de contar con la tcnica que se ajuste ms
a las necesidades de cada laboratorio de Microbiologa.
El mtodo de difusin en agar Etest ha sido validado y
ampliamente estudiado en la determinacin de la actividad
antifngica contra varios gneros de hongos incluyendo
especies de Candida, el cual permite determinar valores de
CMI frente a diversos antifngicos. Las tiras de Etest (AB
Biodisk, Solna, Suecia), estn disponibles comercialmente
para anfotericina B, fluconazol, itraconazol, flucitosina,
voriconazol, posaconazol, anidulafungina y caspofungina. La
ventaja ms notable de esta tcnica es su fcil ejecucin y
requiere de pocos insumos, ha resultado un mtodo muy
eficaz para detectar resistencia cuando se compara con la
tcnica de referencia de microdilucin en caldo. El medio
recomendado en su ejecucin es el RPMI 1640 suplementado
con 2% de glucosa, pero se han utilizado otros medios con
buena reproducibilidad de los resultados entre los que cabe
mencionar el agar Mueller Hinton suplementado con 2% de
glucosa y azul de metileno l cual es el medio aprobado por el
CLSI en su documento M44-A2 para la pruebas de difusin
en agar. Es necesario desarrollar programas de epidemiologa
y vigilancia, donde podamos estar alerta a los diferentes
cambios en la distribucin de las Candida spp., y a los
patrones de susceptibilidad de las mismas, determinando los
puntos de corte epidemiolgicos por especie y propios de
cada regin, para orientar al clnico en la instauracin del
tratamiento antifngico de forma precoz de acuerdo a la
especie y patrn de sensibilidad detectados.
Con los datos analizados hasta el momento en la Red de
Candidemia y Vigilancia de la resistencia a los antifngicos
podemos decir que C. albicans se mantiene sensible a todos
los antifngicos y no as para el resto de las especies de
Candida en donde ya se detecta resistencia especialmente a
fluconazol, por lo que es importante identificar hasta especie
toda Candida aislada y determinar la susceptibilidad para
orientar al clnico en un tratamiento eficaz aumentando la
sobrevida de los pacientes con candidosis invasora.
Infeccin por Candida spp. en
pacientes infectados con el
Virus de Inmunodeficiencia
Humana. Estado actual
Dra. Julman Cermeo
Universidad de Oriente. Ncleo Bolvar.
La candidiasis es la infeccin oportunista ms comn en
los pacientes infectados por el Virus de Inmunodeficiencia
Humana. El espectro de la infeccin por Candida es diverso,
a partir de la colonizacin asintomtica hasta comprometer
rganos profundos y ocasionar una forma diseminada que
pone en riesgo la vida del paciente. Los bajos niveles de
linfocitos T CD4+ es un factor de riesgo para el desarrollo de
candidiasis oro farngea y las directrices actuales sugieren un
aumento del riesgo una vez que stos disminuyen por debajo
de 200 clulas /mL. El surgimiento gradual de las especies de
Candida no albicans como causa de la candidiasis mucosa e
invasiva refractaria, especialmente en pacientes con
inmunosupresin avanzada y el problema de la resistencia a
los azoles y otros agentes antifngicos en la especie Candida
es en la actualidad una situacin de preocupacin. En esta
revisin se analizan y se discuten los principales aspectos de
la patognesis, presentacin clnica, diagnstico y las
principales estrategias teraputicas, discutindose algunas
contribuciones de inters nacional e internacional realizando
una puesta al da.
Resistencia antifngicos: que realidad que
nos espera?
Dra. Dilia Martnez Mndez.
Mdico Miclogo
Miembro Titular de la Sociedad Venezolana de
Microbiologa.
El creciente reporte de infecciones fngicas ha promovido
el advenimiento de nuevos y mejores mtodos para el estudio
de los hongos que facilitan: el estudio de las caractersticas
fenotpicas y genticas, as como el diagnstico precoz. Los
datos aportados han permitido establecer nuevas especies y
stas a su vez generan nuevas interrogantes y son gracias a los
mejorados mtodos de estudio que comienzan a ser
respondidas. Paralelo a los avances diagnsticos, el aumento
en la sntesis de nuevos antifngicos ha sido discreto.
Antifngicos destinados principalmente a pacientes con
micosis invasivas. ste inters creciente ha puesto en
evidencia el auge vertiginoso que se observa en la resistencia
de levaduras y hongos filamentosos a los antifngicos,
dejndonos con pocas alternativas teraputicas, con altos
costos y malos pronsticos para las micosis oportunistas.
La resistencia puede clasificarse en: Clnica o
Microbiolgica: que a su vez se divide en: 1.- Resistencia
intrnseca o innata; 2.- Resistencia primaria y 3.- Resistencia
secundaria o adquirida. Por otra parte, el desarrollo de
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resistencia puede ser por: a.- Incapacidad del frmaco para Como vemos, en la resistencia a los antifngicos: que
alcanzar la diana por la presencia de barreras de realidad la que nos espera!! Y nos est esperando aqu, a la
permeabilidad y/o el aumento en la produccin de Bombas vuelta de la esquina.
que favorezcan la excrecin del frmaco, evitando que ejerza
su mecanismo de accin. b.- Cambios en la interaccin Referencias:
frmaco-diana: por aumento en el nmero de copias o por 1. Enferm Infecc Microbiol Clin 2002;20(10):523-30.
mutaciones que modifiquen el sitio de accin. c.- 2. Current Opinion in Infectious Diseases 2009, 22:568573.
Modificacin en las enzimas y d.- Alteraciones en el 3. Rev Iberoam Micol. 2006;23:39-49.
procesamiento intracelular del frmaco, aumentando la 4. J Bras Pneumol. 2006;32(5):449-60.
degradacin. 5. Rev Esp Quimioter 2010;23(4):169-176.
En ciencias de la salud, hablar de resistencia generalmente 6. An Brs Dermatol. 2010;85(5):657-67.
se circunscribe a la horrorosa realidad que vivimos con las 7. Am J Med. 2012;125(suppl 1):S3-13.
bacterias, microorganismos primitivos que nos dominan cual 8. Rev Braz Cs Farma. 2006;42(2):167-94.
tiranos y con los que hemos tenido que aprender a convivir, 9. Rev Esp Quimioter 2010;23(4):169-176.
dejndonos ganar algunas batallas, pero siempre esperanzados
en ganar la guerra. Pues ahora la resistencia, ha germinado
tambin en los hongos (decir ahora es risible, pues tienen
aos en eso). Las levaduras se han apoderado de un
deshonroso segundo lugar como productoras de infecciones
nosocomiales sobre todo en las UCIs. Las especies de
Candida emergen con caractersticas fenotpicas y genotpicas
tan feroces como sus familiares lejanas las bacterias y como
casi todo en la vida, cuando la situacin es feroz, es cuando
alarma. Hay especies genticamente resistentes (C. krusei) y
casos preocupantes de especies en donde la resistencia aparece
por la presin del uso indiscriminado de los antifngicos (C.
glabrata). Y lamentablemente, de los hongos filamentosos
(Aspergillus spp). ya hay descrito casos de multi-resistencia.
La resistencia de las Candida spp. ha sido descrita a todo el
reducido arsenal teraputico, apenas disponemos de 7 familias
con muy pocos miembros y de ellos, slo los ms
representativos estn en el mercado nacional. La anfotericina,
con ms de medio siglo en el mercado, se mantiene an como
gold estndar, pero la que disponen en instituciones pblicas
es la forma desoxicolato, la ms txica, pues las
presentaciones liposomales son costosas e importadas. Igual
pasa con las equinocandinas que, aunque son excelentes en el
uso contra levaduras y hongos filamentosos, su incursin en el
mercado Venezolano es tmida, no solo por los problemas de
divisas que elevan los costos, sino tambin porque la
distribucin en el mercado nacional est muy limitada.
Debemos recordar que el problema no solo es la resistencia un
antifngico y los costos, sino que la situacin se agrava
porque en una misma especie pueden desarrollarse varios
mecanismos de resistencia simultneamente, hacindose
resistente a varios antifngicos de familias distintas.
En Venezuela, la red para la vigilancia de resistencia a los
antifngicos es de reciente formacin, sin embargo ha
arrojado datos interesantes sobre las CMI, las especies
resistentes y los mecanismos de accin. Es un productivo (y
reducido) crculo de trabajo que favorece a investigadores y
especialmente, a pacientes con micosis invasivas al iniciar el
estudio del comportamiento de las especies patgenas
humanos, entendiendo que cada vez ms son los reportes de
micosis oportunistas que elevan los costos de hospitalizacin,
dificultan el manejo teraputico y lo ms lamentable,
evolucionan a desenlaces fatales.

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SIMPOSIO
AVANCES SOBRE ALIMENTOS,
PROBIOTICOS Y PREBITICOS Y SALUD
Coordinadora: Esp. NC Hazel Anderson
Moderadora: MSc. Doris Garca
Fibra, Prebiticos, Probiticos
y Simbiticos
Lcda. Mareidys Daza
El trmino fibra dietaria fue usado por primera vez por
Hippsley en 1953, quien discuti su significado diciendo que
la fibra diettica es un trmino utilizado para los
constituyentes no digeribles que componen la pared celular de
las plantas(1,2). Desde entonces muchas definiciones de fibra
dietaria han surgido por varios investigadores. La National
Academy of Sciences (NAS) y Food and Nutrition Board de
los Estados Unidos, enel ao 2002, definieron los trminos
Fibra Dietaria, Fibra Funcional y Fibra Total. Se entendi
como fibra dietaria a aquellos glcidos no digeribles y la
lignina intactos presentes en las plantas. Por otra parte,
describieron fibra funcional como aquellos hidratos de
carbono no digeribles aislados para los cuales sehan
acumulado evidencias de efectos fisiolgicos benficos en la
salud de los seres humanos. Y por ltimo, a fibra total como
la suma de la fibra dietariay la fibra funcional (2, 3)
El concepto de fibra ha evolucionado y han surgido
controversias al respecto. En la reunin de Sudfrica del
Codex Alimentarius Committee on Nutrition on Foods for
Special Dietary Uses (CCNFSDU), se logr un importante
consenso. En esta reunin definieron fibra diettica como
polmeros de carbohidratos con 10 o ms unidades
monomricas, las cuales no son hidrolizadas por enzimas
endgenas en el intestino delgado de humanos y pertenecen a
las siguientes categoras: Los polmeros de carbohidratos
comestibles presentes naturalmente en el alimento; los
polmeros de carbohidratos los cuales han sido obtenidos de
los alimentos por medios fsicos, enzimticos o qumicos y los
polmeros de carbohidratos sintticos, los cuales han mostrado
tener un efecto fisiolgico benfico para la salud, demostrado
por evidencia cientfica(4).
La fibra dietaria puede clasificarse en base a su fuente de
origen, estructura, propiedades y aplicaciones pero
comnmente se clasifica de acuerdo a su solubilidad, en
solubles o insolubles. El consumo recomendado de fibra
diettica depende de la edad y sexo de la persona y es
aproximadamente de 25-38 gramos por da, el consumo de
referencia diettica es de 14 gramos por 1000 Kilocaloras. En
nios mayores de dos aos de edad se sugiere consuman un
total de fibra de acuerdo a: "edad+5" por da (1). La
importancia del consumo de fibra radica en mejorar el estado
de salud debido a que estudio realizados indican que la fibra
diettica reduce el riesgo de enfermedades cardiovasculares,
diabetes, obesidad, cncer de colon y otra diversidad de
enfermedades. De ah la importancia de aumentar el consumo
de alimentos ricos en esta fibra (2,5)
Prebiticos
Son definidos como ingredientes alimenticios no digeribles
de los alimentos que afectan de manera positiva al husped,
estimulando de forma selectiva el crecimiento y/o la actividad
metablica de un nmero limitado de cepas de bacterias
colnicas. (Bifidobacterias y Lactobacilos)(2)
Estructuralmente son oligo polisacridos de fructosa (FOS
e inulina respectivamente) o de galactosa (GOS). Tambin se
usa la lactulosa (un disacrido de galactosa y fructosa) y el
lactitol (galactosa y un polialcohol derivado de la glucosa) (6).
Para que un ingrediente alimenticio sea considerado
prebitico debe cumplir con los siguientes criterios: No debe
ser hidrolizado o absorbido en la parte alta del tracto
digestivo, debe ser fermentado selectivamente por una un
nmero limitado de bacterias potencialmente benficas del
colon, por ejemplo bifidobacterias y lactobacilos y debe ser
capaz de alterar la microflora colnica tornndola saludable(2)
El objetivo principal de los prebiticos es favorecer el
desarrollo de las bifidobacterias, que son capaces de degradar
diversos glcidos complejos. La proliferacin subsiguiente de
la microbiota intestinal potenciara su antagonismo frente a
microorganismos patgenos y contribuira a recolonizar la
mucosa. Adems, la fermentacin de los prebiticos generar
cidos grasos de cadena corta, H2 y CO2. Los cidos grasos
inhibirn el crecimiento de organismos patgenos, sern
utilizados como nutrientes por los enterocitos y neutralizarn
los grupos amonio generados por desanimacin de los
aminocidos. (6).
Probiticos
Son microorganismos vivos, principalmente bacterias, no
patgenas, utilizados en forma de suplemento alimenticio, que
tras ser ingeridos en cantidades suficientes, mejoran el
equilibrio microbiano intestinal y provocan efectos benficos
sobre la salud de quienes los ingieren(7). Las bacterias
probiticas utilizadas en alimentos deben ser capaces de
sobrevivir al paso por el aparato digestivo y proliferar en el
intestino. Son bacterias gram positivas y se utilizan
fundamentalmente dos gneros: Lactobacillus y
Bifidobacterium. Se las conoce como BAL, por su capacidad
de convertir los hidratos de carbono en cido lctico y pueden
ser homofermentativas o heterofermentativas. Las tres
especies ms utilizadas y estudiadas son: Lactobacillus
acidophilus, Lactobacillus casei y Bifidobacterium spp. El
aumento de la concentracin de las bifidobacterias en la flora
intestinal incrementa la conversin de carbohidratos a cidos
orgnicos (lctico y actico), estimula el peristaltismo del
intestino y contribuye a regularizar el trnsito intestinal
enlentecido (2).
Simbiticos
Se denomina as a la mezcla de uno o ms organismos
probiticos con uno o varios compuestos prebiticos. Su
objetivo es favorecer el desarrollo/actividad de los probiticos
y prebiticos componentes para potenciar sus propiedades
saludables, generando un efecto sinrgico entre ellos. Esto
implica que un producto solo puede ser denominado
simbitico si ha demostrado inducir un efecto beneficioso
superior al de la suma de los generados, separadamente, por
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sus integrantes. Adicionalmente, se espera que esta mejora se
acompae de un incremento de la densidad de los probiticos
componentes o de las actividades saludables a que dan lugar (4)
Referencias
1. Mara del Refugio Falcn V., Jess Manuel Barrn H
Efecto adverso en la calidad proteica de los alimentos de
dietas con alto contenido de fibra dietaria .Rev Chil Nutr
2011 38 (3):369-375
2. Gabriela Olagnero, Andrea Abad, Silvia Bendersky.
Alimentos funcionales: fibra, prebiticos, probiticos y
simbiticos. DIAETA (B.Aires) 25(121):
3. E. Escudero lvarez y P. Gonzlez Snchez La fibra
diettica. Nutr. Hosp.2006 21(2): 61-72
4. Codex Alimentarius Commission. Report of the 30th
Session of the Codex Committee on Nutrition and Foods
for Special Dietary Uses (CNFSDU and WHO/FAO).2008,
appendix II: 49
5. Joanne Slavin Reiew Fiber and Prebiotics: Mechanisms
and Health Benefits
Nutrients 2013, 5, 1417-1435;
6. Surez JE Microbiota autctona, probiticos y prebiticos.
Nutr Hosp.2013 28 (1):30-41
7. Claudia Manzano A., Diana Estupin G. Efectos clnicos
de los probiticos: qu dice la evidencia. Rev Chil Nutr
2012.39(1): 98-110
Microbiota intestinal y sus
funciones en el tracto
digestivo
Lcda. Mariana Gil
Especialista en Nutricin Clnica
La Universidad del Zulia
La mucosa del tracto gastrointestinal es la segunda
superficie ms extensa del organismo y constituye la principal
zona de contacto y defensa frente a agentes externos como
bacterias, virus, toxinas y alrgenos. La flora intestinal que la
coloniza es un complejo ecosistema compuesto por varios
cientos de especies de microorganismos, la mayora de ellos
del gnero bacteria; dicho ecosistema incluye especies
consideradas patgenas por su capacidad de invadir al
husped, pero a su vez tambin contiene numerosos
microorganismos capaces de promover efectos beneficiosos
para la salud. La flora bacteriana se comienza a desarrollar
inmediatamente despus del nacimiento, a los dos aos de
edad la flora establecida est prcticamente definitiva, existen
modificaciones transitorias derivadas del uso de antibiticos o
en relacin a cambios dietticos, pero suelen ser reversibles,
la composicin de esta es variable de un individuo a otro y
estar determinada por factores fisiolgicos como la capa de
mucus, el peristaltismo intestinal, la velocidad de recambio
del epitelio, la acidez y la actividad enzimtica endgena.
La microbiota intestinal desarrolla una intensa actividad
metablica que le permite mantener una relacin de simbiosis
con el husped, la actividad bioqumica microbiana acta
colectivamente como un rgano, interviniendo en la mejora
de la biodisponibilidad de nutrientes a travs de la
fermentacin de residuos de la dieta y mucinas endgenas, la
recuperacin de energa mediante la generacin de cidos
grasos de cadena corta y la proteccin contra la colonizacin e
invasin de agentes patgenos; las bacterias intestinales
desempean un papel fundamental en el desarrollo,
estimulacin y modulacin del sistema inmunitario. Estas
funciones metablicas tienen una gran repercusin en el
estado nutricional y de salud del hombre; esto va a estar
condicionado por la composicin de la flora y de sus
complejas interacciones con la dieta y el individuo.
En este contexto, la administracin de bacterias
seleccionadas denominadas probiticos y compuestos no
digeribles que favorecen el desarrollo de la flora deseable
designadas prebiticos a travs de la seleccin de alimentos
funcionales ricos en dichos compuestos o suplementos
alimenticios que permitan modular la composicin de la
microbiota intestinal y potenciar sus efectos metablicos
beneficiosos. Los instrumentos de biologa molecular
desarrollados recientemente sugieren que todava se ha de
describir una parte sustancial de las comunidades bacterianas
del intestino humano, no obstante existen mltiples evidencias
clnicas sobre la relevancia y el impacto de las bacterias
residentes en la fisiologa y la patologa del husped.
Referencias.
1. Simren M, Giovanni B, Flint H, Brennan S, Spiller
R, Vanner S, Verdu E, Whorwell P, Zoetendal E.
Intestinal Microbiota in Functional Bowel
Disorders: a Rome Foundation Report. GUT 2013;
62: 159 176
2. Aziz Q, Dore J, Emmanuel A, Guarners F, Quigley
E. GUT Microbiota and Gastrointestinal Health:
Concepts and Future Directions. Neurogastroenterol
Motil 2013; 25:4 - 15
3. Culebras J, Garca DeLorenzo y Mateos A. IV
Workshop Probiticos, Prebiticos y Salud:
Evidencia Cientfica. Nutricin Hospitalaria 2013;
(Supl I) 28: 1 - 68
4. Bibiloni R, Membrez M, Jason C. Microbiota
Intestinal, Obesidad y Diabetes. ANN Nestle. Espaa
2009; 67: 39 - 48
Aplicacin clnica de los prebiticos
en enfermedades metablicas,
renales y pulmonares
Esp. NC. Luisandra Gonzlez
Microbiologa en general y bacteriologa, en particular, han
sido utilizados en el mundo de la medicina a travs de la
bsqueda de bacterias patgenas implicadas en la etiologa de
las enfermedades infecciosas. El uso reciente de los
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X Congreso Venezolano de Microbiologa Ada Martnez de Gallardo
probiticos en el tratamiento profilctico de infecciones de las
vas respiratorias no se debi solamente al aumento de las
resistencias a los antibiticos de los patgenos y a la
necesidad de buscar alternativas a estos agentes. De hecho, el
uso de probiticos en este campo depende de tres factores
principales: Un mejor conocimiento de la microbiota del
tracto respiratorio; una mejor comprensin de los
mecanismos de accin relacionados con la inhibicin de
patgenos por los probiticos, la inocuidad de estos micro-
organismos. El conocimiento de la microbiota del tracto
respiratorio, es decir, todos los micro-organismos que viven
en un entorno especfico, es crucial, para tener en cuenta la
complejidad de las interacciones entre los microorganismos
(incluidos los probiticos) que lo componen, as como las
interacciones entre estos micro-organismos y su hospedero
(1), En el estado actual de los conocimientos, se estima que
los efectos protectores de los probiticos contra bacterias
patgenas se basa sobre la aplicacin de tres tipos de procesos
biolgicos: actividad antimicrobiana directa; refuerzo de la
funcin de barrera del epitelio y inmunomodulacin (1). Con
respecto a las enfermedades renales, se han realizado estudios
del uso de probiticos para mejorar la degradacin de oxalato
en pacientes hiperoxaluria con formacin de litiasis renal, aun
los estudios no son concluyentes (2, 3) Los modelos
experimentales ponen de relieve varios mecanismos de
conexin la microbiota intestinal a la obesidad y los trastornos
metablicos. la reconocimiento de que la microbiota intestinal
es importante en la regulacin de los la extraccin de energa
de la dieta vino de la observacin de ratones libres de
grmenes (planteado en la ausencia de microorganismos )
eran ms delgados que los ratones con una microbiota
intestinal normal , a pesar de que ratones con una microbiota
intestinal normal fueron alimentados con 30 % menos de
caloras .Por otra parte cuando los ratones libres de grmenes
se trasplantaron con microbiota intestinal cosechadas de los
ratones con la microbiota intestinal normal ganaron 60 % de
grasa corporal y se convirti en resistentes a la insulina , a
pesar de, menor ingesta de alimentos . Estudios posteriores
demostraron tambin el papel de microbiota intestinal en la
regulacin del almacenamiento de energa en forma de
triglicridos, y el gasto de energa de la oxidacin de cidos
grasos. Cani et al demostraron que ratones alimentados con
una dieta alta en grasas durante 2 a 4 semanas mostraron una
significativa aumento de los niveles circulantes de LPS y que
estos ratones se convirti en obesos y tenan la obesidad
asociada trastornos metablicos. Los intestinos de los seres
humanos obesos mostraron tener un nmero reducido de
Bacteroides y un mayor nmero de Firmicutes en
comparacin a sus homlogos delgados.. El hecho de que
composicin microbiana es reversible con la modificacin de
la dieta sugiere que las diferencias en la composicin intestino
de los fenotipos obesos y delgados estn relacionadas con
factores dietticos independientemente estado de la obesidad.
En conjunto, la evidencia actual apoya un papel para la flora
intestinal en la patognesis de la obesidad inducida por la
dieta y su relacin a trastornos metablicos, que podran ser
reversible con dieta y / o manipulacin microbiota intestinal
(3,4)
Referencias.
1. Alexandrea Y., Le Blayb G., Boisram-Gastrina S., Le
Galla,c F., Hry-Arnauda,c G., Gourioua S., Valleta,c S.,
Le Berrea R.. Probiotics: A new way to fight bacterial
pulmonary infections? Mdecine et maladies infectieuses
xxx (2013) xxxxxx
2. Abrat Valerie R. and Reid Sharon J.. Oxalate-Degrading
Bacteria of the Human Gut as Probiotics in the
Management of Kidney Stone Disease. 2010 Elsevier Inc.
capitulo 3. Advances in Applied Microbiology, Volume
72.
3. Rodrguez J. M., Sobrino O. J., Marcos A., Collado M. C.,
Prez-Martnez G., Martnez-Cuesta M. C., Pelez C. y
Requena T. Existe una relacin entre la microbiota
intestinal, el consumo de probiticos y la modulacin del
peso corporal? Nutr Hosp 2013; 28 (Supl. 1):3-12
4. Ly Ngoc P., Litonjua Augusto, Gold Diane R., and
Celedon Juan C.. Gut microbiota, probiotics, and vitamin
D: Interrelated exposures influencing allergy, asthma, and
obesity? (J Allergy Clin Immunol 2011;127:1087-94.
Nuevas estrategias en el uso de los
probiticos en enfermedades
hepticas y del tracto digestivo inferior
Esp. NC Hazel Anderson .
En los ltimos aos se ha reconocido el papel relevante de
la microflora intestinal en el mantenimiento de la salud y en
mltiples enfermedades. La interaccin entre el husped y la
microflora intestinal puede jugar un papel crucial en la
historia natural de las enfermedades crnicas del tracto
inferior y del hgado del hgado. La microflora intestinal no
slo est implicada en la digestin de nutrientes, sino tambin
en la inmunidad local, formando una barrera contra
microrganismos patgenos. Su alteracin puede conducir a la
translocacin microbiana, La evidencia ms reciente sugiere
que la translocacin microbiana, puede producirse por
diferentes mecanismos, tales como la proliferacin bacteriana
intestinal, aumento de la permeabilidad de la mucosa
intestinal, y alteraciones de la inmunidad, no slo en la
cirrosis, sino tambin en la etapa temprana de varias
enfermedades del hgado, incluyendo hepatopata alcohlica y
la enfermedad de hgado graso no alcohlico. El consumo de
probiticos podra permitir enterobacterias a travs de la
inhibicin competitiva. Lo que permitira estrategas
dietoterpicas ms adecuadas, reparacin de la barrera-
mucosa, la prevencin de la apoptosis debido a que
proporciona los cidos de cadena corta, y la mejoria de la
viabilidad del epitelio intestinal que estabilizan la
permeabilidad luminal fisiolgica, junto con la reduccin y
absorcin de amoniaco.1-3
En la mayora de enfermedades hepticas, entre ellas la
cirrosis, la esteatohepatitis alcohlica y no alcohlica, la
hepatitis fulminante o el trasplante heptico, se producen una
serie de fenmenos entre los que destacan los cambios en la
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microbiota intestinal, el aumento en la permeabilidad 2013 May;62(5):787-96. doi: 10.1136/gutjnl-2012-302504.
intestinal, las alteraciones en el sistema inmune y la respuesta Epub 2013 Mar 8. Review.
inflamatoria. Por otra parte, la profilaxis antibitica, sobre 2. Pinzone MR, Celesia BM, Di Rosa M, Cacopardo B,
todo cuando se realiza durante periodos prolongados, favorece Nunnari G. Microbial translocation in
la aparicin de resistencia bacteriana, por lo que se ha chronic liver diseases. Int J Microbiol. 2012;2012:694629.
postulado la necesidad de encontrar mtodos alternativos de doi: 10.1155/2012/694629. Epub 2012 Jul 17
prevencin de infecciones. En este sentido, se ha empleado los 3. Soriano G, Snchez E y Guarner Probiticos en las
probiticos con este objetivo. Stadlbauer et al, reportaron que enfermedades hepticas Nutr Hosp. 2013;28(3):558-563.
el tratamiento con Lactobacillus casei Shirota durante 4 4. Imani Fooladi AA, Mahmoodzadeh Hosseini H, Nourani
semanas en pacientes con cirrosis de etiologa alcohlica MR, Khani S, Alavian SM. Probiotic as a novel treatment
mejora la actividad fagoctica de los neutrfilos, disminuye strategy against liver disease. Hepat Mon. 2013 Feb
los niveles del receptor soluble de TNF 1 y 2 lo que indica 25;13(2):e7521. doi: 10.5812/hepatmon.7521. Print 2013
que el efecto beneficioso del probitico sobre el Feb
funcionalismo de los neutrfilos sera consecuencia, al menos 5. Loguercio C, Federico A, Tuccillo C, Terracciano F,
en parte, de la disminucin en la translocacin bacteriana.4-6 DAuria MV, De Simone C et al. Beneficial effects of a
Estos mismos autores estudiaron 55 pacientes cirrticos probiotic VSL#3 on parameters of liver dysfunction in
con encefalopata heptica mnima en tres grupos de chronic liver diseases. J Clin Gastroenterol 2005; 39: 540-
tratamiento durante 1 mes: un grupo recibi un simbitico, 3.
una mezcla de 4 probiticos (Pediacoccus pentoseceus 5-33:3, 6. Yasutake K, Kohjima M, Nakashima M, Kotoh K,
Leuconostoc mesenteroides 32-77:1, Lactobacillus paracasei Nakamuta M, Enjoji M. Nutrition therapy for liver diseases
19 y Lactobacillus plantarum 2592) y 4 fibras (inulina, based on the status of nutritional intake. Gastroenterol Res
pectina, almidn y beta glucano), un segundo grupo se trat Pract. 2012;2012:859697. doi: 10.1155/2012/859697. Epub
solo con prebiticos (las 4 fibras), y un tercer grupo recibi 2012 Nov 14.
placebo. En los pacientes tratados con el simbitico hubo una 7. Scaldaferri F, Gerardi V, Lopetuso LR, Del Zompo F,
disminucin de la concentracin de Escherichia coli y un Mangiola F, Bokoski I, Bruno G, Petito V, Laterza L,
aumento de lactobacilos en heces, disminucin de la Cammarota G, Gaetani E, Sgambato A, Gasbarrini A Gut
amoniemia y de la endotoxemia, y mejora de la insuficiencia microbial flora, prebiotics, and probiotics in IBD: their
heptica y resolucin de la encefalopata heptica mnima en current usage and utility. Biomed Res Int.
el 50% de los pacientes. Lo que infiere que la utilizacin de 2013;2013:435268. doi: 10.1155/2013/435268. Epub 2013
una dieta rica en esprragos, alcachofas, batata, manzanas, Aug 7
avena, y platano verde asociados con una terapia de una
mezcla de probiticos, pudiera mejorar a estos pacientes.2,4
En este orden de ideas, Loguercio et al evaluaron los
efectos de VSL#3 que es una mezcla de 8 probiticos. El
tratamiento durante 3 meses con VSL#3 mejor la funcin
heptica y disminuy las citocinas proinflamatorias TNF e
IL-6, el dao oxidativo y la produccin de xido ntrico en
pacientes con cirrosis de etiologa alcohlica. En pacientes
con cirrosis por virus de la hepatitis C se observ mejora en
las transaminasas y en la produccin de xido ntrico.
Tambien se han observado efectos positivos en la enfermedad
inflamatoria intestinal y en pouchitis. Aunque los resultados
de ensayos clnicos realizados en enfermedades hepticas y
digestivas mostraron los efectos positivos de los probiticos,
hay dos problemas que limitan su uso como una terapia de
rutina. Dado que los mecanismos funcionales de los
probiticos son especficos de la cepa, se hace necesario
reconocer cepas especiales con las ms altas propiedades
profilcticas y preventivas sobre estas enfermedades.
Adems, los probiticos generados por la ingeniera para las
propiedades especficas deseables podran ser tiles. Por
ltimo, para confirmar la viabilidad de bacterioterapia, se
necesitaran ms ensayos clnicos en varios pases con
diferentes razas, etnias y estilos de vida.5-7

Referencias consultadas
1. Sanders ME, Guarner F, Guerrant R, Holt PR, Quigley EM,
Sartor RB, Sherman PM, Mayer EA. An update on the use
and investigation of probiotics in health and disease. Gut.
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SIMPOSIO Las ITS en el Zulia en pleno siglo XXI
INFECCIONES DE TRANSMISIN SEXUAL
(ITS): IMPACTO EN LA COMUNIDAD. Dr. Domingo Carrizo
Coordinadora-Moderadora: M.Sc. Belkis Fuentes Mdico Adjunto
Programa VIH-SIDA-ITS Zulia

Debido a la alta incidencia de las ITS, su alta morbilidad y

La prevencin de las ITS en la su consecuente carga econmica, ha hecho que sea necesario
comunidad conocer cul es la verdadera situacin que vivimos en el Zulia
con respecto a estas infecciones. El problema es ms grave de
lo que la gente se imagina. Nosotros como Programa Regional
Dra. Sofa Vera
de ITS-VIH-SIDA recibimos la informacin de la morbi-
Departamento de Salud Pblica Integral
mortalidad de todo el Estado, desconocemos ms del 80% de
lo que sucede, esto es debido a varias razones, una de las ms
Conjunto de enfermedades infecciosas (bacterianas,
importantes es que, aun cuando estamos en pleno siglo XXI
virales o parasitarias) que tienen en comn la va de
todava persisten los mitos y tabes. Es increble que todavia
transmisin sexual y las cuales son de inters epidemiolgico.
consigamos personas, principalmente docentes, para quienes
Epidemiologa: 1. Alta prevalencia e incidencia: 333
se han diseado talleres de hasta 40 horas semanales, con el
millones de casos nuevos al ao, lo que supone el 10 % de los
propsito de que una vez finalizado el mismo esa informacin
adultos en edad reproductiva; 2. Afecta principalmente grupo
sea divulgado al resto de los docentes, estudiantes y al
entre 15 y 55 aos; 3. Los adolescentes sexualmente activos
comunidad en general, sin embargo, no son capaces de
tienen mxima prevalencia (5-10%) 3 millones de casos
transmitirlo pues no se consideran sensibilizados para ello,
nuevos y cerca de 1 milln de adolescentes se embarazan; 4.
alegando que cuando nios no recibieron informacin de sus
Se estima que 20% de las mujeres adquirir al menos una ITS
padres, cuando adolescente no tuvieron docentes que
antes de los 35 aos; 5. Infeccin por VIH, sfilis, gonorrea y
manejaran el tema de la sexualidad con propiedad y ahora
Chlamydiasestn entre las 10 a 20 principales enfermedades
como adultos por pena o temor a preguntar manifiestan que
que afectan la poblacin;
lo nico que aprendieron de sexualidad fue por la informacin
6. Infeccin por VIH, en el mundo cada ao 5.2 millones de
que recibieron de su pareja, siendo sta la persona menos
personas contraen el VIH, y ms de la mitad de ellos son
indicada para hablar del tema. Aunado a esto, la falta de tica
menores de 24 aos; 7. El SIDA ya ha producido la muerte de
de algunos profesionales de la salud a mantener el sagrado
unas 20 millones de personas; 8. Para el ao 2002, segn la
derecho que tienen los pacientes a la confidencialidad de la
ONU-SIDA: 42 millones de personas infectadas por el VIH, 4
informacin, ha hecho que stos no acudan a los servicios de
millones afectando a menores de 15 aos (>90% RN de
ITS que existen en el Estado, sino que prefieren consultar en
madres seropositivas); 9. La transmisin heterosexual ha
las farmacias o al amigo que alguna vez la padeci,
aumentado desde el 8% en 1990 hasta el 27% en el ao 2002;
promocionndose as la automedicacin, lo que traera
10. La incidencia del HIV en las mujeres llega al 46%; 11.
como consecuencia el uso indiscriminado de medicamentos de
Hombres con infecciones por clamidia y/o gonorrea no
primera lnea, por lo que nos hemos visto en la necesidad de
tratadas desarrollan infertilidad (20 - 40%); 12. Mujeres
usar drogas de segunda lnea las cuales no han dado los
gonorrea y clamidia pueden causar EPI con daos
resultados esperados. Todo esto conlleva a la estigmatizacin
irreversibles lo que puede causar esterilidad (55-85% de las
o discriminacin que se les da a los pacientes VHI-SIDA que
EPI no tratadas); 13. Las ITS en las mujeres embarazadas
acuden a los diferentes hospitales, haciendo que los mismos
producen partos prematuros y RN de bajo peso; 14. La Sfilis
tomen represalias contra el personal de salud, por lo que
y el Herpes genital producen abortos espontneos, muerte
debemos tomar conciencia y aprender a manejar a este tipo de
fetal intrauterina o perinatal; 15. VPH est relacionado a Ca
pacientes. El 60% de los infectados reciben el medicamento y
de cuello uterino; 16. En la infeccin por VIH las relaciones
no lo consumen por diferentes razones, por lo tanto, se puede
sexuales sin proteccin sigue siendo la causa de contagio ms
concluir que la falta de educacin sexual, la poca tica mdica
importante. La coexistencia de lesiones genitales aumenta la
de algunos profesionales de salud y la falta de conciencia de
susceptibilidad a la infeccin.
algunos pacientes ha hecho que a las ITS no se le haya dado la
GRUPOS DE RIESGO: Prostitucin, Adictos a drogas va
verdadera importancia que tienen como problema de salud
parenteral (VIH, VHB), Poblacin adolescente: (uso irregular
pblica.
de preservativo), Alta frecuencia de abusos sexuales, Mujeres
jvenes: el cuello uterino es altamente sensible en edades
precoces a la infeccin por Clamidia, VPH, Gonococo.

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Mujer y Sexualidad (sfilis y gonorrea) y no curables (virus de papiloma humano y
VIH-Sida) se encuentran el VDRL, FTA-ABS, frotis de
secrecin uretral y cervical, pruebas de ELISA, Western blot,
Dra. Sofa Vera PCR, entre otras. A pesar de los avances logrados en el
Departamento de Salud Pblica Integral desarrollo de distintas pruebas y con una variedad de
principios tcnicos, se siguen produciendo falsos positivos y
La Sexualidad Es fundamental, ya que muchos aspectos con menor frecuencia falsos negativos que se atribuyen en
de la Vida como los afectos y la identidad, giran alrededor de parte a la enorme demanda analtica y a la recoleccin,
la sexualidad. El desconocimiento trae infelicidad general transporte y procesamiento de las muestras, ocasionando
Descubriendo el cuerpo femenino: La ausencia de situaciones que generan ansiedad en el paciente y
educacin sexual se inicia al ir descubriendo el cuerpo desconcierto en el profesional encargado del diagnstico;
humano, esto hace que los planes de planificacin familiar debido a esto se debe extremar el cuidado al emitir los
sean insuficientes. La sexualidad ertica y reproductiva no resultados de laboratorio, pues del conjunto de pruebas deber
puede separarse, pero se hace. resultar la emisin de un diagnstico claro y concluyente o
El erotismo y placer: Son la capacidad de goce sexual, es bien la formulacin de recomendaciones precisas para el
parte de la salud mental. Casi toda la actividad sexual va seguimiento y diagnstico definitivo.
dirigida al alcance de un goce compartido, y no a la
reproduccin. El placer forma parte de los derechos sexuales y
se considera fuente de bienestar fsico, psicolgico, intelectual
y espiritual.
El orgasmo: Para muchas mujeres el orgasmo es momento
de mayor placer que han experimentado, para otras es un
estado de lmites difusos y no estn seguras de haberlo vivido.
Involucra reacciones psicolgicas y fisiolgicas. Tambin
tenemos casos de mujeres que tienen Multiorgasmia; es decir,
mujeres que responden a una estimulacin de inmediato y
pueden presentar una respuesta tambin de inmediato,
mientras que el hombre debe regresar a una condicin de
reposo antes de poder experimentar una respuesta, lo cual
hace que la respuesta sexual de la mujer tenga ms
potencialidades.

Diagnstico de las infecciones de

transmisin sexual (ITS) curables
y no curables

Lcda. Mariana Semprn

Las infecciones de transmisin sexual (ITS) continan siendo
un problema de salud pblica de gran importancia en la
mayora de los pases del mundo. Se considera que la
incidencia de las ITS agudas es alta en muchos pases. Las
fallas en el diagnstico y el tratamiento de las ITS en estadios
tempranos pueden ocasionar graves complicaciones y
secuelas, entre las que se incluyen la infertilidad, la prdida
fetal, el embarazo ectpico, el cncer anogenital y la muerte
prematura, as como infecciones en recin nacidos y lactantes.
Los costos de la atencin de una ITS, tanto a nivel individual
como nacional, pueden ser considerables. Con la aparicin del
VIH y del SIDA, el control de las ITS comenz a atraer ms
atencin. Existe una fuerte correlacin entre la diseminacin
de las ITS convencionales y la transmisin del VIH, y se ha
demostrado que tanto las ITS ulcerosas como las no ulcerosas
aumentan el riesgo de transmisin sexual del VIH.
Entre las pruebas para diagnstico empleadas para buscar las
ms frecuentes de estas infecciones que pueden ser curables
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SIMPOSIO
EPIDEMIOLOGIA MOLECULAR E
INFECCIONES ASOCIADAS A LA ATENCIN
DE SALUD (IAAS)
Coordinador: MSc. Armindo Perozo
Moderadora: MSc. Messaria Ginestre
Vigilancia epidemiolgica para la
prevencin y control de las infecciones
asociadas a la asistencia sanitaria
Epidemiological Surveillance of Healthcare-
associated Infections,
Prevention and Control system
Lcdo. Maikel J. Yhansi T.
Representante del MPPS
Las infecciones asociadas a la asistencia sanitaria (IAAS),
tienen relacin con la prctica de procedimientos mdicos en
pacientes que pudieran estar hospitalizados o ambulatorios. A
nivel mundial, las IAAS afectan a un importante nmero de
personas y tributan una elevada morbilidad y mortalidad,
aunado al alto costo sanitario, econmico y social que de ellas
se deriva, por lo que son consideradas un importante
problema de salud pblica. Existe una evidente relacin entre
el fortalecimiento de programas de vigilancia epidemiolgica
de las IAAS y la disminucin de los indicadores
epidemiolgicos, debido fundamentalmente a cambios en las
prcticas asistenciales, por intervenciones diseadas con base
en informacin generada por el sistema de vigilancia
epidemiolgica. Es por eso que un comit de prevencin y
control de infecciones eficaz reduce sustancialmente la
morbilidad y mortalidad relacionada a las IAAS y
simultneamente los costos de la atencin sanitaria vinculados
a estas. El Ministerio del Poder Popular para la Salud como
ente rector, viene impulsando una serie de polticas en materia
de salud integral, dirigidas a fortalecer el sistema de vigilancia
epidemiolgica nacional que incluye la vigilancia de las
IAAS, para garantizar la optimizacin de la calidad de la
atencin y la disminucin de los riesgos que atentan contra la
salud y vida de la poblacin en los establecimientos que
prestan de servicios en esta materia a nivel nacional,
plantendose como desafo el tener los comits de infecciones
operativos en los diferentes niveles del sistema y que estos a
su vez sirvan de herramienta para la produccin de propuestas
que impacten directamente sobre la calidad de la atencin
prestada y recibida.
SIMPOSIO
AVANCES SOBRE VACUNAS EN VENEZUELA
Coordinadora-Moderadora: MSc. Enza Spadola
Vacunas contra el Dengue
Dr. Luis Echezuria
Especialista en Pediatra y Puericultura
Especialistas en Epidemiologa
Los esfuerzos en desarrollar las vacunas contra el dengue
han estado activos por ms de sesenta aos y ha estado
plagada de numerosos obstculos.
La virolgica, serolgica, inmunologa, los aspectos
clnicos han hecho posible el desarrollo de una vacuna
tetravalente extremadamente difcil y complicado.
La existencia de (4) serotipos antignicamente
relacionados pero distintos serolgicamente, cada uno puede
causar enfermedad y muerte, hace necesario el desarrollo de
cuatro vacunas monovalentes y la combinacin exitosa en una
tetravalente.
La formulacin exitosa ha sido difcil, especialmente en
vacunas a virus vivos, ya que se replican, en la que la
combinacin ptima de Dengue cepas, grados de atenuacin,
y la concentracin viral adecuada para equilibrar la
reactogenicidad e inmunogenicidad ha sido muy difcil de
alcanzar. (1)
Los resultados obtenidos a travs de una extensa
evaluacin preclnica de vacunas candidatas deben estar de
acuerdo con su seguridad e inmunogenicidad, y la reduccin
al mnimo de los riesgos de seguridad (Plan de
desarrollo/dRMP). Seguridad positiva y equilibrada PRNT
inmunogenicidad 50 datos correspondientes a los cuatro
serotipos han apoyado y van hacia el desarrollo de grandes
ensayos de eficacia a gran escala
Primeros resultados de ensayo de eficacia en humanos
sern un hito clave para los fabricantes as mismo todas las
partes interesadas en el dengue (virologa, serologa,
inmunologa, epidemiologa) para lograr que deje de tener la
carga como problema de salud pblica y podamos ver el
impacto mensurable que logre la vacunacin.
La vigilancia epidemiolgica no puede dar toda la
informacin necesaria para evaluar la efectividad,
costo/efectividad, etc.
Estudios epidemiolgicos: Cohorte, Prevalencia, etc.,) son y
sern necesarios para generar evidencia para: Los gobiernos,
los Organismos financieros, los Fabricantes y Otras partes
interesadas en tomar decisiones correctas y oportunas. (2)
La investigacin del dengue se ha fortalecido, por la
creciente carga de la enfermedad, junto a la perspectiva de una
vacuna. Ninguna vacuna puede ser una panacea inmediata, los
esfuerzos para mejorar el tratamiento aplicando las mejores
prcticas existentes en el triaje, administracin de lquidos,
desarrollo nuevas drogas antivirales u otros, continan.
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Innovaciones para prevenir la transmisin: modificando las
poblaciones de mosquitos, se fomentan. Mejorar la
comprensin de la epidemiologa de la enfermedad y la
posibilidad de su futura propagacin tambin ayudara a los
polticos a asignar recursos para combatir este problema
mundial de salud pblica. (3
Distinguir anticuerpos homotpicos protectores, de
anticuerpos heterotpicos no protectores, pero que pueden
modificar la enfermedad y un biomarcador validado de
proteccin tras la vacunacin es una prioridad en la
investigacin para el desarrollo de la vacuna.Es posible que
haya un impacto ambiental con una vacuna tetravalente en la
evolucin del virus salvaje, y una importante consideracin
para su inclusin como uno de los objetivos para los ensayos
de eficacia de vacunas. (1).
La Vacuna candidata lder, ChimeriVax (Sanofi Pasteur),
tetravalente de cepas atenuadas de Fiebre Amarilla 17D que
expresan el virus dengue prM y E protenas. Muy difcil
desarrollarla demuestra ser segura y provoca respuestas de
anticuerpos neutralizantes de los cuatro serotipos. En los
ltimos 5 aos, progresos notables en estudios multicntricos,
fase 2-3 en ensayos clnicos que han determinado la eficacia
de tres dosis. Los datos de correlatos de inmunidad an son
insuficientes. Seguir a largo plazo a los vacunados es esencial
para entender si cae la inmunidad o predispone a padecer
infeccin natural ms grave despus. Otras candidatas en fases
tempranas desarrollo clnico incluyen vacunas que contiene
virus vivos atenuados y recombinantes de subunidades. (4)
Vacunas vivas atenuadas son pilotos de desarrollo clnico
avanzado y hay optimismo de que puedan tener licencia para
humanos. Indicaciones que tienen que ser aplicadas en 2 3
dosis y lograr seroconversin tetravalente. Usando esta
vacuna, los viajeros de regiones no endmicas puede esperar a
estar completamente inmunizados antes de visitar zonas
endmicas.
Naciones de escasos recursos con gran carga de
enfermedad, la vacuna tiene que ser no slo segura y eficaz,
tambin debe ser barata. Hay necesidad en desarrollar
potentes vacunas de subunidades no replicantes, que no slo
eliminan los problemas de seguridad sino tambin ser
asequibles.(5)
ESTUDIOS CLNICOS: programa que cubre el mundo
Primera vacuna para la fase III estudio clnico, pasos finales
en desarrollo clnico de antes de su introduccin.
15 pases endmicos y no endmicos incluidos en estudio para cada serotipo fue de 77% a 92%, en comparacin con
clnico global programa (terminados, en curso y previstos.
Nivel mundial, 45.000 personas sern incluidos en el estudio
clnico Sanofi Pasteur.
Vacuna de Sanofi Pasteur ha sido evaluada en estudios
clnicos (Fase I, II) en adultos y nios en USA, Asia y
Amrica Latina.
Resultados eficacia iniciales de estudio Tailandia se esperan
para finales 2012.
Muchos factores contribuyen a que los resultados
favorezcan el uso de una vacuna contra el dengue.
1) Precio 0,50 $ EE.UU. dosis en sector pblico, la vacuna es
barata. Se basa en el xito de contratacin del sector pblico a
travs Fondo Vacunas en bajar el precio VHB a la mitad.
Tambin, la participacin de los donantes en las pruebas de
eficacia, adquisiciones grandes del sector pblico, con
sobrecarga concomitante de marketing bajo, para dar al
productor un medio para reducir costos de produccin,
distribucin, que aumenta la rentabilidad.
2) Asumimos que la vacuna estara vinculada con ltima dosis
del PAI, una alta tasa de cobertura (85%) parece razonable.
Estudio centrado en sudeste Asia, regin del mundo con
mayor incidencia. Las implicaciones distributivas de
vacunacin (se evita la enfermedad y la incidencia de costos)
son tambin favorables. Beneficios generalizados. Sin
vacunar, cada persona podra esperar 0,8 casos en su vida,
como la vacunacin reduce la incidencia 81%, casi todo el
mundo recibe por lo menos un beneficio moderado, evitando
la enfermedad. Vacunados ms beneficiados, la infancia, la
incidencia es ms alta en este perodo, pero evita infecciones y
casos en adultos Los costos se distribuyen ms o menos por la
capacidad de pago.
Vacunando 90% de la poblacin (sector pblico), la vacuna
estar ampliamente disponible, un aceptable y conveniente
10% de la poblacin del sector privado. La vacuna contra el
dengue peditrico sera altamente rentable y ampliamente
beneficiosa una vez desarrollada, su continuo desarrollo y uso
generalizado, una vez que un producto eficaz se hace,
merecen altas prioridades. (6)
Enfoques actuales vacunas DENV: Desarrollar vacunas se
concentra en virus vivos atenuados; virus inactivados y
subunidades virales. El xito de la Fiebre Amarilla vivos
atenuados (FA) 17D JEV SA14-14-2 y vacunas de la ECE y
las inactivadas TBEV dan orientacin clara para el desarrollo
exitoso de una vacuna contra el dengue. Otros enfoques,
incluyendo subunidad, vectorizado y preparaciones de
vacunas ADN, se encuentran en desarrollo.
Los requisitos que cuatro vacunas contra el dengue deben ser
combinadas en una sola, para impedir el desarrollo de la ADE,
DH y DSS en los vacunados y que proporcione inmunidad a
largo plazo, son los principales desafos.
Ningn evento adverso grave relacionado con la vacuna,
otros importantes eventos clnicos adversos, o tendencias
clnicamente significativas en la seguridad biolgica se
observaron. La Reactogenicidad no aument con sucesivas
dosis de TDV, y de leve a moderado dolor en el sitio de
inyeccin, dolor de cabeza, mialgia y malestar fueron
notificadas con ms frecuencia (14% -40% despus de cada
dosis). Despus de 3 dosis TDV, la tasa de seropositividad
85% a 94% despus de la finalizacin del rgimen de YF-
TDV-TDV. De los 2 - a 11-aos de edad, los participantes,
95% eran seropositivos contra 3 serotipos despus de 3
vacunas.
Conclusiones:
Esquema 3-dosis TDV tiene perfil de seguridad favorable
en nios y adultos y suscit respuestas de anticuerpos
neutralizantes contra los 4 serotipos. Estos hallazgos apoyan
el desarrollo continuo de esta vacuna. (7)
Perspectivas vigilancia dengue para apoyar la introduccin
de la vacuna en las Amricas
La Estrategia de Gestin para la prevencin y control en las
Amricas (IMS-Dengue) Programa Cooperacin Regional
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OPS, junto Instituto Sabin y CDC han iniciado proyecto
(2012-2014) orientado a: Desarrollar un marco de vigilancia
epidemiolgica que genere la informacin necesaria para
definir estrategias de vacunacin y evaluar su impacto
META. Definicin de estrategias de vacunacin en Amrica
Latina y el Caribe.
Fuente. PAHO/WHO, 2012
Perspectivas vigilancia dengue para apoyar introduccin
de la vacuna en las Amricas: Crear grupo de trabajo tcnico
para asesorar y coordinar las prioridades en cooperacin,
vigilancia, investigacin; Aplicacin de definiciones sobre
diagnstico y clasificacin clnica de casos publicados por
OMS, 2009
Adaptar sistemas vigilancia para generar datos que permitan
la toma de decisiones sobre la introduccin de la vacuna,
definir estrategias nacionales de inmunizacin y evaluar
impacto;
Fortalecer red regional laboratorios de dengue de las
Amricas, y; Naturalizacin de las investigaciones operativas
claves
Fuente. PAHO/WHO, 2012
Referencias
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Thomasa and Timothy P. Endyb aViral Diseases Branch,
Walter Reed Army Institute of Research, Silver Spring,
Maryland and bInfectious Disease Division, Department of
Medicine, State University of New York, Upstate Medical
University, Syracuse, New York, USA Correspondence to
Timothy P. Endy, MD, MPH, Infectious Disease Division,
Department of Medicine, State University of New York,
Upstate Medical University, 725 Irving Avenue, Suite 304,
Syracuse, NY 13210, USA E-mail: endyt@upstate.edu
Current Opinion in Infectious Diseases 2011, 24:442450
2. Amarrasinghe, Amanda (MD). Dengue Vaccine Initiative
International Vaccine Institute. Presentation: EVidence for
decision Making data are needed to support vaccine
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Current Concepts Dengue. Cameron P. Simmons, Ph.D.,
Jeremy J. Farrar, M.D., Ph.D.Nguyen van Vinh Chau,
M.D., Ph.D., and Bridget Wills, M.D., D.M.
5. (SPECIAL SECTION: BIOLOGY AND PATHOGENESIS
OF VIRUSES CURRENT SCIENCE, VOL. 98, NO. 3, 10
FEBRUARY 2010 369 *For correspondence. (e-mail:
swami@icgeb.res.in) Dengue vaccine current progress
and challenges S. Swaminathan* and N. Khanna
Recombinant Gene Products Group, International Centre
for Genetic Engineering and Biotechnology (ICGEB),
Aruna Asaf Ali Marg, New Delhi 110 067, India
6. (1280 DS Shepard et al. / Vacuna 22 (2004) 1275-1280
7. (Pediatric Infectious Disease Journal: January 2011 -
Volume 30 - Issue 1 - pp e9-e17 doi:
10.1097/INF.0b013e3181fe05af. Original Studies Live-
attenuated Tetravalent Dengue Vaccine in Dengue-nave
Children, Adolescents, and Adults in Mexico City:
Randomized Controlled Phase 1 Trial of Safety and
Immunogenicity Poo, Jorge MD*; Galan, Francisco MD;
Forrat, Remi MD; Zambrano, Betzana MD; Lang, Jean
MD; Dayan, Gustavo H. MD
Experiencia de introduccion de la
vacuna de rotavirus en venezuela.
Desafios y logros
Lcda. Dagelis Hermoso
Ministerio Del Poder Popular Para La Salud
Direccion General De Epidemiologia
Venezuela particip desde la dcada del 80 en diversos
estudios de evaluacin de vacunas contra rotavirus,
inicialmente, en la evaluacin de la seguridad e
inmunogenicidad de una vacuna monovalente desarrollada en
Estados Unidos y posteriormente en los estudios fase II y fase
III de las vacunas actuales usadas contra rotavirus. La
decisin de introduccin de la vacuna rotavirus en el pas
gener el montaje de la vigilancia centinela de diarreas
producidas por rotavirus que inici en tres hospitales
posteriormente a seis.
La introduccin de la vacuna de rotavirus experiment
grandes desafos para lograr su aplicacin universal, a fin de
dar cumplimiento a lo establecido en la Constitucin de la
Repblica Bolivariana de Venezuela y a los objetivos del
milenio: Disminucin de la Mortalidad Infantil.
Muchos factores contribuyeron al xito de la introduccin
de la vacuna de rotavirus como el contar con un instituto
regulador capaz de evaluar la seguridad y calidad de la
vacuna, un sistema de vigilancia de episodios agudos de
diarrea, un sistema de vigilancia de eventos adversos, guas
operativas, disponibilidad de cadena de frio, acompaamiento
de la Sociedad de Pediatra, y apoyo tcnico de la OPS.
Posterior a la introduccin de la vacuna la cobertura
obtenida fue menor a la esperada debido a factores previsibles
y no previsibles que hoy se toman como lecciones aprendidas
para futuras introducciones tales como: ocurrencia simultnea
de un brote de sarampin, poca estrategia de comunicacin,
un esquema rgido que limitaba completar la segunda dosis de
la vacuna, poca capacitacin del recurso humano sobre la
nueva vacuna y temores o resistencia de algunos sectores en
aplicar la nueva vacuna frente a un brote.
Estas dificultades fueron superadas posteriormente y como
resultado en los ltimos 3 aos se ha observado un incremento
de la cobertura de vacunacin, permitiendo una importante
disminucin de hospitalizaciones y muertes debidas a
rotavirus en la poblacin < 5 aos de Venezuela.
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SIMPOSIO-TALLER
CONSERVACIN EX SITU DE LA
BIODIVERSIDAD MICROBIANA EN
VENEZUELA
Coordinador: Dr. Vidal Rodrguez Lemoine
Moderadora: MSc. Mara Mercedes Panizo
Colecciones de cultivo en Venezuela.
Pasado, presente y futuro
Dr. Vidal Rodrguez Lemoine
En Venezuela los estudios de microbiologa se inician
formalmente en la en la Ctedra de Histologa Normal y
Patolgica, Fisiologa Experimental y Bacteriologa fundada
por el doctor Jos Gregorio Hernndez en la en 1891. La
primera coleccin de microorganismos se establece en 1896
en el Instituto Pasteur de Caracas (IPC) fundado por el Dr.
Santos Anbal Dominici. Consista en una copia de la
coleccin de microorganismos creada en el Instituto Pasteur
de Pars con fines de diagnstico. A la dotacin inicial se van
incorporando los primeros microorganismos (bacterias)
asilados en pacientes atendidos en el Hospital Vargas de
Caracas (HVC). Ms adelante, venciendo toda clase de
dificultades, se van creando colecciones especializadas en
otros espacios acadmicos. Primero, en el Laboratorio del
HVC, dirigido desde su fundacin (1902) hasta su muerte
(1909) por el sabio Rafael Rangel. Y ms tarde en el
Laboratorio de Bacteriologa de la Sanidad Nacional fundado
en 1919. Esta iniciativa se ampla en el Instituto Nacional de
Higiene fundado en 1938 y se extiende gradualmente a las
ctedras y departamentos de microbiologa fundados en las
escuelas de ciencias mdicas, veterinaria y agronoma de las
universidades nacionales. Poco sabemos sobre la diversidad,
nmero y viabilidad de los cultivos preservados en las
colecciones creadas en la primera mitad del siglo XIX ya que
no contamos con registros confiables. Hay ejemplos de
colecciones creadas por iniciativa de investigadores como el
caso de la coleccin construida por el Dr. Enrique Tejera en la
dcada de los cuarenta y las colecciones de hongos creadas
por Pollak y Montemayor en la Universidad Central de
Venezuela. En algunos casos se ha logrado rescatar parte del
inventario a los fines de garantizar su conservacin en las
instituciones de origen o en nuevos centros de investigacin.
A partir de la fundacin del Centro Venezolano de
Colecciones de Microorganismos (CVCM) se fueron
estableciendo condiciones para promover la creacin de un
Sistema Nacional de Colecciones de Cultivos (SNCC) capaz
de responder a las necesidades actuales y potenciales del pas
en materias relacionadas con el estudio, conservacin, uso y
aplicaciones de la biodiversidad microbiana, a objeto de
asegurar el manejo soberano de los recursos genticos para
mejorar las condiciones de vida de la poblacin. En este
Simposio-taller sobre conservacin de la diversidad
microbiana nos proponemos evaluar la situacin de las
colecciones estructuradas o en peligro de desaparecer para
promover su fortalecimiento y la creacin definitiva del
SNCC.
Biodiversidad fngica de inters en
medicina. Micoteca del Instituto
Nacional de Higiene Rafael Rangel
MSc. Mara Mercedes Panizo
Departamento de Micologa.
Instituto Nacional de Higiene Rafael Rangel
La Micoteca del Departamento de Micologa del Instituto
Nacional de Higiene "Rafael Rangel (INHRR), es una
coleccin que se ha formado con cepas de hongos aislados a
partir de muestras clnicas, ambientales y de procedencia
vegetal o animal. Fue creada en el ao 1955, como una
necesidad para el desarrollo de la Seccin de Micologa del
INHRR, creada en 1953. Sus objetivos fundamentales son: la
preservacin y mantenimiento de cultivos puros con
estabilidad gentica, la conservacin de la biodiversidad
fngica y el suministro de cepas para investigacin bsica y
aplicada en el rea de medicina. Para la conservacin de los
hongos se utiliz desde sus inicios el mtodo de capa de
Aceite Mineral y, a partir del ao 1970, se implement
adicionalmente el mtodo de Castellani. Estos dos mtodos de
conservacin se siguen usando actualmente con excelentes
resultados. Los hongos se hallan preservados por duplicado en
cada mtodo, lo que permite mantener prcticamente dos
colecciones, asegurando as su permanencia. La coleccin
actualmente cuenta con 2.500 cepas pertenecientes a 77
gneros y 165 especies de hongos levaduriformes,
filamentosos y actinomicetos. Posee un rea totalmente
equipada, procesos de preservacin y mantenimiento
optimizados, base de datos semi-automatizada, personal
calificado y est en continuo crecimiento, ya que est ubicada
en un centro de referencia nacional en diagnstico micolgico.
La conservacin de hongos microscpicos es fundamental,
debido a su importancia en el funcionamiento de los
ecosistemas y a su impacto en la vida del hombre. Esta
Micoteca garantiza la preservacin ex situ de la biodiversidad
fngica de inters mdico; sus caractersticas la consolidan
como una unidad cnsona con las exigencias de los mbitos
cientfico, tecnolgico y docente, para el desarrollo de
investigaciones cientficas, particularmente en el rea de
medicina.
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Biodiversidad fngica de inters
industrial. Coleccin micolgica
Nodo CVCM-LPFIBE
Roxana Gajardo Muoz
Universidad Central de Venezuela
Facultad de Ciencias
Instituto de Biologa Experimental
El Laboratorio de Procesos Fermentativos, ubicado en el
Instituto de Biologa Experimental de la Universidad Central
de Venezuela, cuenta con una coleccin de hongos
entomopatgenos y antagonistas, con los cuales se han
desarrollado procesos fermentativos para su produccin
industrial y posterior utilizacin en el control biolgico de
plagas y enfermedades agrcolas. Todos los procesos se llevan
a cabo con el aprovechamiento de subproductos
agroindustriales a travs de fermentaciones en estado slido.
De acuerdo con las tendencias mundiales por la utilizacin de
productos que sean amigables con el ambiente, los hongos
utilizados como controladores biolgicos de plagas tienen un
inters creciente como alternativas frente al uso de los
insecticidas qumicos, porque son eficientes, econmicos y
duraderos. La coleccin cuenta con 8 cepas de hongos
entomopatgenos, representada por las especies Beauveria
bassiana, Verticillium lecanii, Nomuraea rileyi y Metarhizium
anisopliae. Por otro lado, la necesidad de disminuir el
consumo de agroqumicos ha promovido la utilizacin de
microorganismos endofticos en el manejo del cultivo de
inters agrcola. Entre ellos destacan algunos hongos, que
comparten nicho ecolgico con hongos fitopatgenos, y
pueden as controlarlos por competicin por nutrientes,
espacio y/o produccin de sustancias antibiticas. Este es el
caso del hongo antagonista Trichoderma harzianum, el cual
acta de todas las formas antes descritas y adems acta
directamente sobre el patgeno, parasitando sus clulas e
impidiendo el surgimiento de los sntomas de la enfermedad
en la planta, a nivel de sus races. La coleccin cuenta con 6
cepas, representadas principalmente por esta especie.
Grupo de actinomicetales de Mrida.
Venezuela. Coleccin especializada
de actinomicetos patgenos y del
medio ambiente
Jos A. Serrano
Laboratorio de Investigaciones de Actinomicetos Patgenos y
del medio ambiente.
Facultad de Farmacia y Bioanlisis.
Universidad de Los Andes, Mrida, Venezuela
El Grupo de Actinomicetales de Mrida, hace parte del
Grupo Internacional de Investigacin sobre Actinomicetos
Patgenos (GIIAP). El Grupo de Mrida sirvi de base para la
creacin del GIIAP, grupo el cual se estableci por primera
vez en Mrida, Venezuela en el ao de 1990 y el mismo fue
establecido de manera oficial en la ciudad de Oaxtepec,
Morelos, Mxico, el 4 de Marzo de 1992. El GIIAP est
constituido por investigadores, docentes y estudiantes de las
universidades: de Los Andes (Mrida, Venezuela).
Autnoma-Metropolitana-Xochimilco (Mxico), Centro
Occidental Lisandro Alvarado (Barquisimeto-Venezuela),
Instituto de Medicina Tropical, Universidad de Sao Paulo,
(Brasil), Facultad de Farmacia, Universidad de Lyon
(Francia), Facultad de Medicina, Universidad de Nuevo Len
(Mxico), Universidad de Newcastle Upon Tyne (Reino
Unido). Estos grupos mantienen relaciones activas de
cooperacin e intercambio con otras universidades e institutos
de investigacin, de frica, de la India y del Japn. Cada uno
de estos grupos, miembros del GIIAP, mantienen sus propias
colecciones de actinomicetos y se mantiene un intercambio
activos de cepas e informaciones sobre las mismas tanto entre
los grupos, como con otras universidades, institutos o
laboratorios que tengan inters en las mismas.
La coleccin especializada de actinomicetos del Grupo de
Mrida, denominada bajo las siglas de GAM, se encuentra
registrada en el directorio mundial de colecciones de
microorganismos, bajo el nmero 283 del World Directory of
Coilections of Culture of Microorganisms y as mismo hace
parte de la World Federation for Culture
Colecctions(WFCC). El cepario est bajo la responsabilidad
de la Dra. Mayela Uzctegui-Negrn, su manutencin, bajo la
responsabilidad Tcnica de la Tec. Judhit Gelbis y bajo la
coordinacin general del Dr. Jos A. Serrano. La coleccin se
encuentra en el laboratorio de Actinomicetos patgenos y del
suelo, en la Facultad de Farmacia y Bioanlisis de la
Universidad de Los Andes, Mrida, Venezuela, Las cepas son
mantenidas, tanto en congelacin, preservadas en glicerol o
deshidratadas, as como en medios de cultivo, en particular en
el medio de Bennett (lquido o slido), para su uso de rutina.
Son mantenidas cepas de Actinomicetos patgenos, en
especial de Nocardia, provenientes de casos clnicos, como
del medio ambiente, as mismo de otros actinomicetos
patgenos, tales como :Actinomadura , Streptomyces y
Rhodococcus entre otras. Estas cepas provienen de
aislamientos realizados en el laboratorio, pero de manera
particular de otros ceparios, tanto del GIIAP, como de otras
colecciones internacionales.
Colecciones de servicio. El Centro
Venezolano de colecciones de
microorganismos
Dr. Vidal Rodrguez Lemoine
El Centro Venezolano de Colecciones de
Microorganismos (CVCM) fue creado en 1992 con apoyo del
programa BID-CONICIT-UCV. Es una institucin, sin fines
de lucro, dedicada al estudio y conservacin de la diversidad
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microbiana. Se ocupa de la bsqueda, aislamiento,
identificacin, caracterizacin, conservacin, almacenamiento
y distribucin de cultivos para uso y aplicaciones en medicina,
agricultura animal y vegetal, industria de medicamentos,
alimentos y bebidas, petrleo, petroqumica y conservacin
del medio ambiente. Es, por definicin y de acuerdo a las
normativas internacionales, una coleccin de servicio, abierta
y en crecimiento permanente. Est estructurado bajo un
sistema de nodos de servicio formados por colecciones
especializadas que mantiene su autonoma acadmica y
administrativa. De los identificados en la propuesta original
solo dos estn plenamente integrados y sus colecciones estn
registradas en el sistema de datos del CVCM: Nodo INHRR-
CVCM dedicado a colecciones de hongos filamentosos y
levaduriformes, virus y lneas celulares con sede en el
Instituto Nacional de Higiene Rafael Rangel; y Nodo LPF-
IBE-CVCM dedicado a la preservacin de la diversidad
fngica de inters industrial con sede la Universidad Central
de Venezuela y la Universidad de Carabobo. Bajo estudio se
encuentra la incorporacin de colecciones especializadas de
laboratorios o centros de investigacin de la Universidad de
Oriente, Universidad de los Andes y la Universidad del Zulia.
El CVCM publica un catlogo actualizado en versiones
impresa y electrnica que puede ser consultado en :la pgina
web: www.cvcm.ciens.ucv.ve o a travs del sistema
internacional de datos sobre microorganismos: World Data
Centre for Microorganims patrocinado por la World
Federation for Culture Collections. Consulta en lnea:
http://www.wfcc.info/ccinfo/815. En suma las colecciones
asociadas al CVCM alojan ms de 3500 cultivos de bacterias,
hongos filamentoso y levaduriforrmess, virus, bacterifagos,
plsmidos, vectores de clonacin y cultivos celulares
almacenados y preservados en los laboratorios asociados. Se
considera que este modelo organizacional podra servir de
base para la creacin del Sistema Nacional de Colecciones de
Cultivos.
aplicacin de normas internacionales relacionadas con la
gestin de las colecciones, la distribucin nacional-regional de
cultivos y ha promovido la participacin de sus miembros en
eventos nacionales, regionales e internacionales, sobre temas
afines a su naturaleza y funciones. El trabajo se realiza
mediante subcomisiones que organizan conferencias, mesas
redondas y talleres en reuniones cientficas nacionales e
internacionales, adems del desarrollo de programas de
capacitacin de recursos humanos, proyectos de investigacin
y la edicin de un boletn electrnico peridico. Actualmente
la base de datos rene a 56 colecciones de cultivos federadas
de Argentina, Brasil, Colombia, Cuba, Ecuador, Mxico,
Per, Uruguay y Venezuela, que mantienen alrededor de
55.000 cepas de diferentes grupos taxonmicos, que sirven de
apoyo a las actividades de investigacin y desarrollo,
agricultura animal y vegetal, industria farmacutica, de
alimentos y bebidas, educacin, biomedicina y conservacin
ambiental. El establecimiento de estndares de calidad
aceptados internacionalmente, la aplicacin de polticas de
funcionamiento compartidas y la creacin de programas de
investigacin conjuntos, representan un desafo, que permitir
aumentar el conocimiento sobre las especies existentes en la
regin y mejorar las condiciones para su preservacin ex situ.
El nmero de microorganismos, incorporados anualmente en
las colecciones asociadas a FELACC representa un esfuerzo
significativo en la preservacin mundial de la diversidad
microbiana.

Breve resea sobre la Federacin

Latinoamericana de Colecciones
de Cultivos (FELACC).
Presente y futuro

MSc. Mara Mercedes Panizo

Departamento de Micologa.
Instituto Nacional de Higiene Rafael Rangel.
Miembro de la Junta Directiva de la FELACC

La Federacin Latinoamericana de Colecciones de

Cultivos (FELACC) es una organizacin sin fines de lucro
que agrupa colecciones de cultivos microbianos de Amrica
Latina. Su objetivo principal es proveer un marco nico para
el establecimiento y funcionamiento de las colecciones,
promoviendo el desarrollo de las mismas y la cooperacin
entre instituciones interesadas en el estudio y la conservacin
de la biodiversidad microbiana en la regin. Desde su
fundacin en 2004, ha propiciado los medios para la
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CICLO DE CONFERENCIAS:
MICROBIOLOGIA DE LA
ENFERMEDAD PERIODONTAL
Coordinador: Dr. Ronald Milln
Moderadora: Drubic Lemus
Aspectos Inmunolgicos de la
inflamacin en la enfermedad periodontal
Od. Dionorath Bohrquez
Especialista en Periodoncia
Magister en Gerencia de Recursos Humanos
Profesora. Facultad de Odontologa
El sistema inmunitario es un sistema de defensa muy
verstil que es capaz de generar una variedad molculas
capaces de reconocer y eliminar una gran variedad de agentes
invasores, para ello genera dos tipos de respuestas la natural o
inespecfica y la adquirida. Uno de los mecanismos de la
respuesta inmunitaria innata es la inflamacin, esta consiste en
una serie de fenmenos fisiolgicos y morfolgicos en los que pblica, estimndose ms de un milln de nuevos casos
toman parte principalmente los vasos sanguneos, elementos
figurados de la sangre y tejidos conectivos adyacentes, en
respuesta al agente agresor, con el propsito de destruir al
agente extrao, inicindose simultneamente procesos de que el 9.5% de las muertes por TB estn asociadas al VIH. En
reparacin en el rea daada. Clnicamente se caracteriza por Venezuela se realiza serologa para VIH a alrededor de un
presentar cinco signos cardinales como son calor, rubor,
tumor, dolor y prdida de funcin.
En la cavidad bucal se presentan diversas patologas que
cursan con eventos inflamatorios como es la periodontitis, esta
se caracteriza por la presencia de bacterias que colonizan el
nicho gingival que pueden provocar cambios de coloracin de
la enca, sangrado espontaneo, movilidad dental y
eventualmente si no es tratada prdida de las piezas dentales.
Para explicar la etiopatogenia de la periodontitis no se debe
prestar atencin exclusivamente a las bacterias, sino tambin a
la respuesta inmunitaria del husped, la cual comprende la
participacin de factores celulares y humorales del sistema
inmune, que interaccionan para eliminar las bacterias del
husped y acaban daando a la vez los tejidos. Puede decirse
por tanto, que las bacterias son condicin necesaria, ms no
suficiente, para que aparezca la periodontitis. La respuesta
inflamatoria en la periodontitis es resultado de la presencia de
uno o varios patgenos y/o de la respuesta de los tejidos que
la sufren, y que, a nivel bioqumico se traduce en la liberacin
de un conjunto de mediadores resultantes de la activacin de
varios sistemas como es el complemento, la coagulacin, la
fibrinolisis y las kininas; y a nivel celular en la presencia de
determinados tipos celulares que participan en la respuesta
defensiva del husped frente a dicha agresin.
SIMPOSIO
INFECCIN VIH/SIDA
Coordinadora: Dra. Arelis Lleras de Torres
Moderadora: MSc. Belkys Fuentes
Tuberculosis y SIDA: problemtica
en Venezuela y herramientas
diagnsticas actuales
Dra. Zhenia Fuentes
Neumonlogo Clnico, Coordinador de la Lnea de
Investigacin de Tuberculosis. Servicio de
Neumonologa Hospital Dr. Jos Ignacio Bald. El
Algodonal-Caracas
La tuberculosis (TB) y la infeccin por virus de
Inmunodeficiencia humana/sndrome de inmunodeficiencia
adquirida (VIH/SIDA) son las enfermedades infecciosas ms
importantes en la actualidad a nivel mundial. La coinfeccin
TB/HIV, manifestada como infeccin tuberculosa latente o
enfermedad tuberculosa activa, es un problema de salud
anuales en todo el mundo y 24.000 en la regin de las
Amricas. La TB es la causa de muerte de un tercio de las
personas con SIDA en el mundo y en la Amricas se estima
70% de los pacientes con TB, la incidencia notificada de
coinfeccin TB-VIH/SIDA es cercana al 10% y el Distrito
Capital es la entidad con un mayor reporte de casos.
Alrededor de la mitad de los casos con esta coinfeccin
corresponden a TB extrapulmonar, predominando las formas
severas de la enfermedad (TB menngea y miliar), seguidos
por TB ganglionar y pleural.
El diagnstico de la TB pulmonar en personas VIH+ se
basa en las manifestaciones clnicas, diagnstico
bacteriolgico: baciloscopia, cultivo y pruebas de sensibilidad
a frmacos (convencionales y rpidos); diagnstico
imagenolgico, con diferentes formas de presentacin segn
el grado de inmunodeficiencia; y otros mtodos (PPD,
interfern gamma, determinacin de Adenosn deaminasa y
tcnicas de amplificacin de cidos nuclicos). El diagnstico
de la TB pulmonar con baciloscopia negativa y de las formas
extrapulmonares de TB amerita estrategias que difieren en los
pases segn la prevalencia de VIH y segn los recursos
econmicos disponibles. Los diagnsticos diferenciales con
otras enfermedades infecciosas bacterianas o micticas, o no
infecciosas (Asma, EPOC, ICC, Neoplasias) deben tenerse en
cuenta.
Por mltiples razones epidemiolgicas y clnicas, es
tambin es de suma relevancia realizar pruebas de VIH a los
pacientes con sospecha o diagnstico de TB, para iniciar
oportunamente la teraputica especfica. El VIH puede ser
diagnosticado en el laboratorio mediante: deteccin de
anticuerpos contra el virus, deteccin de antgenos del virus,
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deteccin de ARN/ADN viral y cultivo del virus, sin embargo
en la prctica clnica las pruebas rpidas y el ensayo
inmunosorbente ligado a enzimas (ELISA) son las ms
utilizadas.
Manifestaciones cutneo-mucosas
de infeccin VIH/SIDA en nios
Dra. Arelis Lleras de Torres
Microbilogo e Infectlogo
Segn reportes de la Organizacin Mundial de la Salud
se estima que, en el mundo, existen ms de 34 millones de
personas con infeccin por el VIH, de los cuales la mitad
son mujeres y 3.3 millones nios. El primer nio infectado
por el VIH, a nivel mundial, fue reportado en 1983. De la
poblacin peditrica, cerca de tres cuartos de casos procede de
frica subsahariana y de reas en desarrollo de las Amricas.
Desde la aparicin de la pandemia, los trastornos cutneos
son considerados de gran importancia tanto para el
diagnstico de la enfermedad, as como tambin por la posible
asociacin de enfermedades sistmicas con expresin cutnea
que igualmente pueden ayudarnos en el diagnstico precoz ya
que en ocasiones tienen el carcter predictivo, porque
preceden al VIH. Las enfermedades de piel y membranas
mucosas fueron una de las primeras manifestaciones del SIDA
que pudieron reconocerse clnicamente.
Durante la ltima dcada, se ha puesto de manifiesto cada
vez ms, que la afectacin cutnea no constituye una
representacin exclusiva de inmunodeficiencia terminal sino
que tambin surge durante el curso de la infeccin o puede ser
la primera manifestacin.
En nios con cuadro de infeccin por VIH/SIDA, las
manifestaciones cutneas se distinguen en trminos de
intensidad, atipicidad, cronicidad, tendencia a la gravedad y
resistencia a tratamientos. Adems los cuadros clnicos
observados difieren mucho de los presentados en adultos,
raramente se presentan nios con leucoplasia vellosa o
neoplasia como Sarcoma de kaposi
Existe una amplia gama de infecciones de tipo bacterianas,
virales, micoticas y parasitarias que en ocasiones son
recidivantes o se presentan como una expresin exagerada de
la patologa
Con la utilizacin de la terapia antirretroviral de alta eficacia
las infecciones oportunistas han disminuido sin embargo las
infecciones de piel persisten y deben prestrseles la atencin
oportuna.
MESA REDONDA
PERSPECTIVA, ENFOQUE E IMPORTANCIA
DE LA VIGILANCIA EPIDEMIOLGICA
Coordinadora-Moderadora: M.Sc. Jennifer Gotera
Generalidades e importancia de
la vigilancia epidemiolgica
Dra. Cecilia Lpez
Especialista de Medicina Interna
Profesora de epidemiologia de las enfermedades infecciosas y
parasitarias del Programa de post-grado de Administracin
del Sector Salud,
Jefe de Vigilancia Epidemiolgica de la Direccin Regional
de Epidemiologa
Generalidades de la Vigilancia Epidemiolgica en el estado
Zulia
La Vigilancia Epidemiolgica se puede definir como un
proceso lgico y prctico de observacin sistemtica activa y
prolongada y de evaluacin permanente de la tendencia y
distribucin de casos y defunciones y de la situacin de salud
de la poblacin. Permite utilizar la informacin para tomar
decisiones de intervencin mediante el seguimiento de
aquellos eventos o factores determinantes o condicionantes
que puedan modificar el riesgo de ocurrencia a fin de iniciar y
completar oportunamente las medidas de control necesarias.
Otros la definen como un proceso regular y continuo de
observacin e investigacin de las principales caractersticas y
componentes de la morbi-mortalidad de una comunidad.
Permite planificar, ejecutar y evaluar las medidas de control.
Para la OMS es "INFORMACIN PARA LA ACCIN".
Entre las caractersticas principales, resaltan: Exacta.
Oportuna. Fidedigna. Completa. Objetiva. Permanente.
Comparable
Entre los objetivos bsicos de la Vigilancia
epidemiolgica, estn: Diagnstico de situacin de salud.
Historia natural de las enfermedades. Identificar grupos
susceptibles y de riesgo. Analizar factores que generan,
incrementan o agravan la enfermedad. Tomar medidas de
control, prevencin y erradicacin. Evaluar impacto de las
medidas. Apoyar la planificacin y prestacin de los servicios
de salud. Determinar necesidades de investigacin en salud.
Los elementos en los que se basa la vigilancia
epidemiolgica, encontramos: los Casos y/o muertes.
Resultados de laboratorio. Medidas de prevencin y control.
Medio ambiente. Vectores. Reservorios. Poblacin
Los mecanismos para obtener los datos es mediante la
Notificacin, Registros, Rumores, Investigacin
epidemiolgica, Encuestas, Estudios de laboratorio
Las principales actividades de la vigilancia epidemiolgica,
son la Recoleccin de datos. Anlisis e interpretacin de
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datos. Ejecucin de las medidas de prevencin o control.
Diseminacin de la informacin
Importancia de la Vigilancia Epidemiolgica
La importancia radica en la capacidad de generar
informacin til, para la orientacin e intervenciones
oportunas que se requieren en la atencin de las situaciones de
riesgos que afecta a la comunidad en formas graves y
frecuentes, as como en las acciones y evaluaciones del
impacto, cuyo objetivo es la prevencin y control de las
enfermedades, que se realizan tanto a nivel local y/o
municipal
Procedimientos locales de la
vigilancia epidemiolgica en el
estado Zulia
Dra. Flor Fernndez
Magster Scientiarum en Administracin del Sector Salud
Mencin: Epidemiologa
Doctora en Ciencias Mdicas
Magster Scientiarum en docencia para educacin superior
El nivel local genera la informacin que pone en marcha
el sistema de vigilancia y es el encargado de realizar las
medidas de control necesarias dentro de las posibilidades de
su alcance tcnico mediante los siguientes procedimientos:
Detectar oportunamente la ocurrencia de una enfermedad
o evento en la comunidad: Es fundamental que el personal
de salud est debidamente capacitado y sensibilizado para la
identificacin y registro de signos y sntomas de
enfermedades o sndromes reconocibles, utilizando las
definiciones de casos sospechosos y probables, realizar las
gestiones para la toma de muestra requerida para la
confirmacin diagnstica en el nivel local o regional. De igual
forma las comunidades deben estar educadas para identificar
casos segn la sabidura popular o por definiciones sencillas
de casos y tener a disposicin los mecanismos para realizar
la denuncia al sistema de salud lo ms pronto posible. Se
realiza adems el control y anlisis de los datos primarios:
mediante la revisin diaria y sistemtica de los registros de
atencin mdica, investigacin de rumores, denuncias
comunitarias, entre otras. En estas actividades participan el
personal del Servicio de Registros y Estadsticas de Salud,
enfermera, Trabajo Social y epidemiologa.
Una vez Identificada la ocurrencia de la enfermedad o evento
se procede a Iniciar oportunamente las acciones de control
segn las pautas especficas que Involucra en la mayora de
los casos una visita domiciliaria que brinda la oportunidad de
concluir el llenado de la ficha, realizar bsqueda activa de
nuevos casos y ejecutar las acciones de control especficas en
la familia y comunidad. Generalmente estas acciones estn
contempladas en los lineamientos y manuales emitidos por el
nivel regional y/o nacional.
La Notificacin al nivel superior puede ser inmediata,
semanal o mensual segn las normas de vigilancia de la
situacin o enfermedad objeto, puede realizarse de manera
individual o procesada y consolidada en los formularios
establecidos para tal fin. De igual forma Informar sobre las
acciones realizadas por medio de los formularios
establecidos para tal fin o mediante informe detallado.
Evaluacin del impacto de las medidas ejecutadas:
utilizando indicadores establecidos como disminucin del
nmero de casos, no aparicin de casos secundarios o nuevos,
aumento de tasas de coberturas de inmunizacin en una
poblacin. Entre otros.
Informar a la comunidad sobre la situacin presentada,
promover la participacin social como parte del derecho a la
salud, y corresponsabilidad en el cuidado de la misma,
mantener las organizaciones comunitarias de apoyo a la
vigilancia epidemiolgica.
El Papel de la Enfermera en la
vigilancia epidemiolgica
Lcda. Luz Marina Ruiz
Licenciada en Enfermera.
Coordinadora de Enfermera en la Direccin Regional de
Epidemiologa Ambulatorio Urbano III
Dr. Francisco Gmez
En la vigilancia epidemiolgica el profesional de
enfermera recopila informacin sobre la causa de la
enfermedad, factores que aumentan el riesgo para adquirir una
enfermedad, mecanismos de transmisin y la extensin de la
enfermedad en la comunidad. A partir del conocimiento de
estos factores el profesional de enfermera se plantea como
objetivo principal reducir la morbi-mortalidad a travs de
cuatro grandes funciones: Administrativas, Asistenciales,
Docentes y de Investigacin
Las Funciones Administrativas: Parte de una activa
recoleccin de datos e informacin sobre los eventos, los
cuales deben ser analizados para constituirse en informacin o
insumo til para la toma de decisiones, organizacin,
ejecucin y evaluacin de intervenciones orientadas a la
promocin, prevencin, curacin y recuperacin del estado de
salud bien sea a nivel individual o colectivo
Las Funciones Asistenciales: Se dirigen al cuidado integral
que tiene como eje a la persona, comunidad y su mutua
interaccin, entre esta funcin se destaca:
- Toma de muestras segn el tipo de enfermedad sospechosa;
- Bsqueda activa de otros casos sospechosos dentro del
hogar, la comunidad y otras fuentes como la escuela o lugar
de trabajo;
- Embalaje y envi de muestras al nivel correspondiente
municipal, regional o central;
- Medidas de control con Proteccin especfica a travs de
Barridos con los biolgicos indicados sea el caso de
inmunoprevenibles.
Las Funciones Docentes: Participacin en eventos cientficos
y gremiales, diseo y ejecucin de programas de capacitacin
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continua para el personal de salud en servicio, orientacin al
nuevo trabajador, asesoria a estudiantes de pregrado grupos
sociales
Las Funciones de Investigacin: Recoleccin de datos de
toda enfermedad de denuncia obligatoria, infectocontagiosas o
inmunoprevenibles, fuentes de infeccin, monitoreos mixtos o
rpidos de coberturas para conocer los susceptibles, bsqueda
activa de casos en comunidad y participacin en la bsqueda
prospectiva y retrospectiva de casos a nivel institucional.
Aporte del laboratorio a la vigilancia
epidemiolgica
MSc. Angelina Mrquez
Magister en Diagnostico Bacteriolgico
Bioanalista del MPPS
Rotavirus, Leptospira H.influenzae, N.meningitidis,
N.gonorrhoeae, Clera y otros enteropatgenos
La vigilancia en salud pblica tiene por objeto la
recoleccin sistemtica, anlisis e interpretacin de datos comunicado a la direccin de ITS quienes son los encargados
sobre acontecimientos de salud especficos que afectan a una
poblacin, seguido de la difusin oportuna de estos datos a
aquellos responsables de la prevencin y control.
Los laboratorios de microbiologa desempean un
importante papel en vigilancia epidemiolgica no slo en la
realizacin de pruebas diagnsticas, sino tambin con el
suministro de esta informacin a las unidades de vigilancia.
Los resultados de laboratorio constituyen una fuente de
excelente sensibilidad y valor predictivo positivo,
imprescindible para cumplir eficazmente los objetivos de un
sistema de vigilancia, a su vez devuelve permanentemente
informacin, retroalimentando el sistema para mantenerlo
funcionando, darle credibilidad y permitir que los integrantes
del sistema de los diferentes niveles puedan formular sus
propias polticas de trabajo.
Lgicamente, un sistema integral de Vigilancia
Epidemiolgica incorpora las actividades de muy variadas
unidades operativas, del mbito de la salud humana y de otros
relacionadas con temas especficos, ministeriales y
municipales, pblicas y privadas, asistenciales, acadmicas,
vinculadas a programas especiales y al manejo de estadsticas.
Tal complejidad en la generacin y en el manejo de la
informacin hace necesario definir muy precisamente el rol de
cada participante en el sistema, que debe realizarse luego de
definir la enfermedad o el evento sujeto a vigilancia y de
identificar a todos los sectores que pueden aportar a ese fin.
No obstante, la direccin y la responsabilidad ltima del
sistema es de la autoridad sanitaria, Ministerio del Poder
Popular para la Salud, a travs de sus rganos competentes.
En el Laboratorio Regional de Salud Publica de Maracaibo
Estado Zulia, se realiza una vigilancia de el agente etiolgico
Rotavirus como productor de diarreas en menores de 5 aos,
siendo nombrados hospitales centinelas para tal vigilancia el
SAHUM y el HMI Ral Leoni.
En cuanto a la vigilancia de Clera, se realiza un estudio
anual donde participan varios hospitales del estado con
referencia de coprocultivos para la investigacin de clera as
como de otros enteropatgenos, de igual manera junto al INH
R.R los otros enteropatgenos, tales como Salmonella y
Shigella son serotipiados en dicho instituto, tambin involucra
la vigilancia a los portadores sanos, en base a la concurrencia
de los manipuladores de alimentos para la obtencin del
certificado de salud, tambin abarca la investigacin de
intoxicaciones alimentarias a travs del descarte de
Staphylococcus aureus.
Con respecto a Neisseria meningitidis y Haemophilus
influenzae, se realiza investigacin de los microorganismos en
muestras biolgicas provenientes de los pacientes del estado
pero tambin de los pacientes ambulatorios que acuden al
laboratorio, se investiga a fin de tomar las acciones
pertinentes tanto al paciente como a los contactos ya sean
familiares o no.
La investigacin de Leptospira se realiza por dos fuentes, es
decir se realiza a pacientes del estado quienes tienen una
sospecha directa acerca de leptospirosis, as como tambin a
los pacientes con sndrome icterohemorragico, a los cuales las
pruebas de Dengue y Hepatitis han resultado negativas.
Por otra parte el hallazgo de Neisseria gonorrhoeae, es
de tomar las acciones y correctivos al respecto.
Aunque toda esta muestras e informacin es suministrada
por los entes de salud del estado se observa la necesidad
actual de estandarizar los formatos y potenciar la colaboracin
entre laboratorios del sector pblico y privado, donde la
informacin de enfermedades de denuncia obligatoria es
limitada.
La implementacin de vigilancia en la resistencia a los
antimicrobianos debera establecerse a fin de que aun cuando
la mayora de los cultivos realizados sean en pacientes
ambulatorios, se conocera la frecuencia de resistencia a
ciertos antimicrobianos.
El diagnostico en tcnicas de avanzada como la biologa
molecular y la implementacin de otros diagnsticos que el
laboratorio est en la capacidad de prestar, y descargar al
rgano central (INH R:R)
OPS/DPC/CD (Unidad de Enfermedades Transmisibles)
Washington. Lineamientos para la elaboracin de estrategias
y acciones para el fortalecimiento de la capacidad nacional
para la prevencin y el control de epidemias. Documento de
trabajo, marzo 2004.
Association of Public Health Laboratories USA. 2002 Core
Functions and Capabilities of State Public Health
Laboratories Morbidity and Mortality Weekly Report 51: N
RR-14.
US Department of Health and Human Services, Center for
Disease Control and Prevention and National Institutes of
Health . USA. 2009 Biosafety in Microbiological and
Biomedical Laboratories.
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de la situacin de este grupos de enfermedades en nuestro
estado para as poder determinar si debe realizarse una
Evolucin cronolgica de las revisin del sistema de control de enfermedades reforzando
diferentes enfermedades exantemticas de los diferentes aspectos de prevencin para estas patologas.
denuncia obligatoria y Chagas en el
estado Zulia en los ultimos aos

Lcda. Alibeth Mavarez

Las enfermedades exantemticas son una serie de

patologas que pueden ser causadas por agentes virales como
son Sarampin, Rubola y Dengue, el conocimiento de la
epidemiologa de estas enfermedades prevenibles, puede ser
determinante para su eliminacin o erradicacin.
El sarampin y la rubola son enfermedades transmisibles
de amplia distribucin mundial, observndose un descenso
considerable del nmero de casos desde la implementacin de
la vacuna, las campaas se mantienen, principalmente en
poblaciones con edades de mayor riesgo, lo que favorece la no
circulacin del virus en la actualidad. Estas enfermedades
como problema de salud pblica son muy importante para la
Organizacin Mundial de la Salud (OMS); la eliminacin del
sarampin y la rubola y la prevencin del Sndrome de
Rubola Congnita incluyen el mantenimiento de una
cobertura vacunal elevada (>=95%) con dos dosis de vacuna
triple vrica, el reforzamiento de los sistemas de vigilancia
epidemiolgica y la disponibilidad de informacin dirigida a
los trabajadores sanitarios sobre los beneficios y riesgos
asociados a la vacunacin.
El dengue se transmite a travs de la picadura de un
mosquito de la especie Aedes infectado por alguno de los
cuatro virus del dengue. Es la nica enfermedad tropical
desatendida (ETD) que se ha expandido en la ltima dcada,
su incidencia se ha multiplicado por 30 en los ltimos
cincuenta aos y tiene el potencial real de convertirse en
epidemia mundial. La enfermedad est presente en 150 pases
y no hay una regin en el mundo donde no est presente; si no
se controla correctamente puede dispararse y convertirse en
una verdadera pandemia. La OMS recomienda cinco reas de
trabajo: diagnstico y control de casos; vigilancia integrada y
respuesta a brotes; control sostenido del vector;
implementacin futura de las vacunas; e implementacin de
las investigaciones.
La enfermedad de Chagas es una afeccin parasitaria,
sistmica, crnica, transmitida por vectores y causada por el
protozoario Trypanosoma cruzi, con una firme vinculacin
con aspectos socio-econmico-culturales deficitarios,
considerndosela una enfermedad desatendida. Es una
patologa endmica en 21 pases de las Amricas, aunque las
migraciones de personas infectadas pueden llevarla a pases
no endmicos de Amrica y el Mundo.
La implementacin de medidas preventivas para limitar el
avance de enfermedades prevenibles ya sea por
inmunizaciones, control de vectores o cualquier otra estrategia
es de vital importancia para todos los que trabajamos en el
rea de salud pblica, por tal motivo se realiza este anlisis
para dar a conocer una visin actualizada con datos obtenidos
en nuestro laboratorio de salud pblica en los ltimos 5 aos
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SIMPOSIO
LOS MICROORGANISMOS EN LA
INDUSTRIA PETROLERA.
Coordinadora: Dra. Laugeny Daz
Moderador: M.Sc. Nstor Rosales
Biocorrosin en la Industria Petrolera
Zoilabet Duque
Fundacin Instituto Zuliano de Investigaciones Tecnolgicas
(INZIT), Estado Zulia, Venezuela, zduque@inzit.gob.ve
La Biocorrosin es un problema que afecta a todos los
procesos industriales en donde se expongan materiales a
medios naturales con posibilidad de desarrollo microbiolgico
[1], o dispongan de los mismos para sus procesos, tal como la
recuperacin secundaria de crudo por inyeccin de agua,
proceso que involucra el 40% en el estado Zulia. [2]. La
prctica comn en estas industrias es el monitoreo de la
corrosin utilizando cupones, tradicionalmente se refiere a la
corrosin uniforme aplicando la norma ASTM G1 y la G46.
Es necesario entender que la corrosin bacteriana es un
proceso interfacial que se desarrolla por la interaccin de la
dinmica metablica de los microorganismos sobre el
material, dada la conformacin de una biopelcula [1-4]. Por
lo tanto, se considera un valor agregado importante al
monitoreo de la corrosin los anlisis de poblaciones
bacterianas ssiles asociadas a la corrosin, especficamente a
las bacterias anaerbicas reductoras de sulfato (SRB), las
bacterias facultativas productoras de cido (APB), previo
desprendimiento de la biopelculas por ultrasonido. As
mismo, la observacin microscpica y el microanlisis de los
mismos. En resumen, se expondrn las tcnicas
implementadas, en conjunto con la gravimetra normada,
cuyas evidencias indican la influencia de la actividad
bacteriana en los daos al acero al carbono, material utilizado
en los sistemas de distribucin y produccin petrolera
monitoreada, determinando la corrosividad general del
mismo tanto por la velocidad de corrosin obtenida como por
los daos localizados detectados.
Palabras clave: Biocorrosin, biopelculas, SEM, ssiles.
Referencias
1. I. B Beech1, J.Sunner. Current Opinion in Biotechnology
(2004), 15:181186.
2. M. Paris de Ferrer. Inyeccin de agua y gas en yacimientos
petrolferos. Edit. Astro data. Venezuela (2001).
3. Brenda Little, Jason S. Lee. Microbiologically Influenced
Corrosion. Wiley-Interscience, John Wiley & Sons, Inc.
Publication (2007), 56-78.
4. E. Miranda et al., Biocorrosion of carbon steel alloys by a
hydrogenotrophic sulfate-reducing bacterium Desulfovibrio
capillatus isolated from a Mexican oil field separator.
Corrosion Science 48 (2006) 24172431.
Tapetes Microbianos y Biorremediacin
Microbial Mats and Bioremediation
Beltrn Briceo Rodrguez
Laboratorio de Microorganismos Fotosintticos.
Departamento de Biologa.
Facultad Experimental de Ciencias.
Universidad del Zulia. Maracaibo. Venezuela.
beltbric@gmail.com
Las costas del Lago de Maracaibo de manera eventual son
impactadas con petrleo. El petrleo presenta hidrocarburos
con potencial mutagnico, txico y carcinognico que ejercen
un efecto nocivo sobre la microbiota, flora y fauna de los
ecosistemas costeros, con efectos tanto a corto, como a medio
y largo plazo, caracterizndose por su persistencia a pesar de
procesos de degradacin natural que puedan ser sometidos. La
biodegradacin microbiana constituye un proceso de
descontaminacin natural que se puede acelerar y mejorar
mediante la aplicacin de tcnicas de biorremediacin.
Numerosas investigaciones proponen el uso de TM como una
tcnica novel de biorremediacin de sedimentos costeros
contaminados con petrleo. Los TM estn constituidos por
complejas comunidades microbianas pertenecientes a
diferentes grupos fisiolgicos, agrupados en pelculas
estratificadas de pocos milmetros de espesor, formando
gradientes ambientales que se establecen en la interfase agua -
sustrato slido petrolizado; los TM son capaces de colonizar
zonas contaminadas y de degradar compuestos orgnicos
txicos recalcitrantes. En nuestro pas no se han realizado
estudios de biorremediacin con TM. En el Laboratorio de
Microorganismos Fotosintticos estamos evaluando el
potencial uso de TM autctonos como un mtodo alternativo
de biorrecuperacin de sedimentos contaminados con
petrleo, utilizando microcosmos que permitan el estudio del
efecto y la respuesta de este tipo de ecosistema ante un vertido
de petrleo. Este estudio abarca tres fases: en la primera fase
se realiz la caracterizacin microbiolgica de TM del Sector
Tasajeras, Municipio Lagunillas, Estado Zulia, Venezuela. En
una segunda fase se determin las condiciones de cultivo de
TM a nivel de microcosmos bajo condiciones de laboratorio,
tambin se determin la sucesin de los microorganismos
fototrficos presentes en los TM. En la ltima fase se realizar
un estudio de tratabilidad, empleando cultivos de TM y
sedimentos petrolizados, tratando de simular las condiciones
ambientales de las zonas costeras.
Palabras clave: Biorremediacin, sedimentos, petrleo,
tapetes microbianos, cianobacterias, bacterias
hidrocarburoclsticas.
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Tcnicas microbiolgicas en la se trata de medir la biodegradacin o la biodegradabilidad de
recuperacin de aguas petrolizadas los compuestos, se debe definir el contexto del ambiente, a fin
de que puedan ser identificados los contaminantes y los
Microbiological techniques oil productos generados [6].
water recovery En el caso de los hidrocarburos, lo que se desea es su
mineralizacin, convirtiendo el carbono orgnico en carbono
Dra. Angulo Nancy mineral como CO2, y H2O. Los factores que influyen en las
Centro de Investigacin del Agua, Facultad de Ingeniera, velocidades de crecimiento microbiano y las actividades
Universidad del Zulia. enzimticas, afectan las velocidades de biodegradacin de
nancyangulo71@gmail.com; nangulo@fing.luz.edu.ve hidrocarburos del petrleo [7]. La persistencia de los
contaminantes del petrleo depende de la cantidad y calidad
de la mezcla de los hidrocarburos y de las propiedades que
Introduccin.
afecten al ecosistema [8].
En los ltimos aos, el hombre ha visto los impactos
negativos causados al medio ambiente, producto de las
Biorremediacin in situ o ex situ.
actividades industriales en desarrollo, y las limitaciones que
La biorremediacin es una tcnica sencilla, que permite
presentan los ambientes alterados para lograr la
eliminar o disminuir algunos contaminantes a partir de la
autorregulacin y como estos cambios influyen en la calidad
actividad biolgica. Tiene la ventaja de ser de bajo costo,
de vida del hombre. En Venezuela, la actividad industrial
tiene aplicabilidad a nivel mundial y suele ser bastante
principal es la explotacin de petrleo, de all que los
efectiva al aplicarse sobre contaminantes orgnicos [9]. Esta
principales contaminantes sean el resultado de las actividades
tcnica puede realizarse in situ o ex situ, la seleccin depende
de exploracin, produccin y refinacin del mismo.
del tipo de contaminante, por lo general, los contaminantes
En el inicio durante la perforacin de pozos de produccin,
voltiles y semivoltiles reciben aireacin in situ [10].
los excedentes que no podan ser reutilizados, eran
La biorremediacin in situ, se basa en la estimulacin de
depositados en sitios denominados fosas petrolizadas, adems
la actividad de la poblacin microbiana degradadora nativa
durante los procesos de exploracin y produccin de
del sitio, como agua superficial contaminada y/o fosas
hidrocarburos se generan efluentes, y por lo complejo de las
petrolizadas, por adicin y manejo de nutrientes y oxgeno.
operaciones, suceden derrames de efluentes y slidos
Puede ser efectiva para un amplio rango de hidrocarburos del
contaminados en suelos y/o aguas superficiales.
petrleo. Los constituyentes ms solubles en agua, de cadena
De acuerdo al ltimo inventario realizado por la estatal
corta y bajo peso molecular, son degradados ms rpidamente
petrolera, existen 15528 fosas en la regin oriental y 2000
que aquellos compuestos de cadena larga, alto peso molecular
fosas en la regin occidental del pas [1], razn por la cual los
y menor solubilidad; y se monitorea la concentracin de
ambientes contaminados debern ser saneados y restaurados
nutrientes (nitrgeno y fsforo), aceptores de electrones
utilizando tcnicas aprobadas en la normativa ambiental
(oxgeno), y sustratos primarios [11].
venezolana [2].
El tratamiento ex situ, implica la excavacin o remocin
del medio contaminado y el traslado del desecho a otra rea
Proceso de Biorremediacin. especfica y previamente preparada para realizar el
La biodegradacin del petrleo y otros hidrocarburos en el
tratamiento, donde se garantice que el manejo y tratamiento
ambiente es un proceso complejo, cuyos aspectos cualitativos
del contaminante no provocar una nueva contaminacin al
y cuantitativos dependen de la naturaleza y cantidad de los
ambiente.
hidrocarburos presentes, las condiciones ambientales y la
composicin de la comunidad microbiana autctona. Algunos
Biodegradabilidad de los hidrocarburos.
microorganismos han demostrado la capacidad de utilizar los
La degradacin de hidrocarburos es un proceso complejo,
derivados de hidrocarburos como fuente de carbono y energa,
un microorganismo degrada slo cierto tipos de derivados del
en distintos ambientes, y cuando se utiliza un cultivo mixto
petrleo, mientras que un consorcio bacteriano compuesto por
aumenta la eficiencia de degradacin de dichos compuestos
una poblacin mixta de microorganismos permite un mayor
[3].
nivel de degradacin, algunos compuestos slo pueden ser
El tratamiento biolgico consiste en la degradacin del
degradados mediante co-metabolismo y otros slo son
residuo orgnico por la accin de los microorganismos. La
degradadas parcialmente [12,13,14].
biodegradacin altera la estructura molecular de los
La velocidad de la degradacin por parte de los
compuestos orgnicos y el grado de modificacin determina si
microorganismos depende de varios factores como la cantidad
ha ocurrido transformacin o mineralizacin. La
del contaminante y su toxicidad, la disponibilidad de un
biotransformacin es una degradacin parcial del compuesto,
aceptor de electrones, la presencia de nutrientes y la condicin
mientras que la mineralizacin es completa a CO 2 y H2O [4].
de factores ambientales como humedad, pH, temperatura,
La biodegradabilidad implica la susceptibilidad de los
conductividad y potencial redox [10,15].
compuestos a ser degradadas mediante procesos microbianos.
Existen dos pasos fundamentales en los procesos de
La biorremediacin ha sido aplicada con xito en la
biodegradacin. El primero es la toma del sustrato por la
degradacin y/o recuperacin de algunos contaminantes como
clula, y el segundo es el metabolismo o degradacin del
los hidrocarburos, plaguicidas y metales pesados [5]. Cuando
sustrato. Sin embargo, la degradacin de los contaminantes
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puede estar limitada por su baja biodisponibilidad. La mayora
de los microorganismos requiere una alta actividad del agua
(> 0,96) para activar el metabolismo, y as el contacto con el
compuesto orgnico se ve limitado por la solubilidad en el
agua. Los hidrocarburos lquidos pueden ser ms o menos
densos que el agua, formando una fase separada sobre o por
debajo de la superficie acuosa [8].
Existen tres formas posibles de que el microorganismo
ataque al contaminante de un lquido: los microorganismos
toman el hidrocarburo disuelto en la fase acuosa, por contacto
directo de las clulas degradadoras en la interfase
hidrocarburo-agua de grandes gotas de crudo en agua, por
contacto directo de las clulas degradadoras con finas gotas de
tamao submicromtrico dispersos en la fase acuosa y por
contacto debido a la produccin de biosurfactantes, que
aumentan la solubilidad del hidrocarburo en el agua y permite
el ataque de los microorganismos a los hidrocarburos [8,16].
Factores que influyen en la Biorremediacin.
Existen distintos factores que influyen en el rendimiento de
la biorremediacin, los cuales pueden clasificarse como
medioambientales, fsicos y qumicos [10].
Los factores medioambientales son aquellos que se
relacionan con las condiciones ptimas de crecimiento de los
microorganismos. Los microorganismos son sensibles a
cambios de temperatura, pH, disponibilidad de nutrientes,
oxgeno y humedad. Para las bacterias el intervalo ptimo de
temperatura va entre 5 40 C, el pH entre 6 a 9 y los
nutrientes requeridos son el nitrgeno y el fsforo, que pueden
limitar la velocidad de la degradacin microbiana [3,5,10].
El oxgeno y la humedad se relacionan inversamente,
debido a la baja solubilidad de este gas en el agua (9 mg/L a
20 C). El oxgeno se requiere en el proceso de respiracin
como aceptor final de electrones y en ciertos procesos de
xido-reduccin catalizados por enzimas, mientras que el
agua sirve de medio de transporte de nutrientes [10].
Los factores fsicos incluyen la biodisponibilidad del
contaminante, los hidrocarburos se acumulan en la fase slida
y su concentracin disminuye en la fase lquida; la presencia
de agua, facilita el contacto entre el contaminante y los
microorganismos; y un aceptor de electrones adecuado, como
el oxgeno. El factor qumico ms importante es la estructura
molecular del compuesto a degradar, pues de ello depende la
solubilidad, acidez, estabilidad y volatilidad del mismo [10].
En funcin de lograr las condiciones ptimas para el
crecimiento de los microorganismos se han desarrollado
diferentes estrategias para la aplicacin de la biorremediacin,
entre ellas se encuentra el uso de surfactantes [16,17,18],
adicin de fertilizantes [19, 20], compuestos que favorecen la
liberacin de oxgeno, microorganismos genticamente
modificados [21].
Aplicacin del proceso de Biorremedicin.
El primer paso es la caracterizacin del sitio contaminado.
La extensin de la contaminacin y la concentracin de los
contaminantes necesitan ser evaluados para determinar el
alcance de la misma. Las propiedades fsicas y qumicas del
medio influyen sobre la aireacin, la disponibilidad de
nutrientes y en la actividad biolgica [3,10].
El segundo paso es la aplicacin de pruebas de factibilidad,
donde se determina si el sitio cuenta con una poblacin
microbiana indgena (autctona), que posea la capacidad
metablica para la utilizacin de los contaminantes como
fuente de carbono y energa, y se evala la necesidad de la
adicin de nutrientes para estimular la biodegradacin, que
pudiera ser un factor limitante de este proceso [10,22]. En
general, los ensayos de factibilidad suelen consistir en la
adicin de oxgeno u otro receptor de electrones al medio,
junto con otras fuentes de carbono, nitrgeno y fsforo [3,10].
El tercer paso es la aplicacin de pruebas de tratabilidad,
que consisten en ensayos de laboratorio, estudios a escala
piloto y a escala real, cuyo objetivo es el aporte de
informacin ms precisa para el control de los parmetros del
proceso y los criterios de diseo.
En los estudios de tratabilidad, bajo condiciones
controladas de laboratorio, se determina la capacidad de
aumento de la poblacin microbiana, el grado de
biodegradabilidad del contaminante [3,22]. En el proceso a
escala piloto, se busca determinar las condiciones ptimas
para la biodegradacin y como se pueden reproducir en el rea
a remediar. El proceso pretende simular las condiciones del
medio real, por lo que se escogen aquellos factores que
puedan ser controlados en el estudio [3,10].
El cuarto paso es la realizacin del diseo del sistema,
donde se integra el conocimiento de las caractersticas del
sitio estudiado, y los resultados de las pruebas de factibilidad
y de tratabilidad, con el propsito de ofrecer un proceso
ambientalmente seguro y de bajo costo para la recuperacin
del sitio contaminado [10,22].
Tcnicas aplicadas en la biorremediacin de aguas
contaminadas con hidrocarburos.
Existen distintas tendencias para aplicar la
biorremediacin, entre las ms comunes se ubican la
bioatenuacin, que se basa en la degradacin natural de los
hidrocarburos por parte de los microorganismos autctonos, la
bioaumentacin, que consiste en el uso de un consorcio
bacteriano sobre el ambiente contaminado, la bioestimulacin,
que consiste en introducir nutrientes y oxgeno al medio a fin
de favorecer el crecimiento de los microorganismos del rea
[23,24,25] y la produccin de biosurfactantes, que posibilita
una mayor superficie de contacto entre el hidrocarburo y los
microorganismos [16]. A continuacin se presentan algunas
investigaciones realizadas en la regin:
Araujo y col. (2004), utilizaron cepas bacterianas
autctonas en la biorremediacin de agua del Lago de
Maracaibo, contaminada con aceite lubricante, sector Capitn
Chico, Edo. Zulia. Se aislaron 16 cepas bacterianas, utilizadas
en el ensayo de factibilidad, con gasoil como nica fuente de
carbono. Las siete cepas ms eficientes en la degradacin de
los hidrocarburos (> 40 % de remocin), conformaron el
cultivo mixto utilizado en el estudio de tratabilidad. En los
tanques 8, 9 y 10, con cultivo mixto, aireacin y fertilizacin
se lograron porcentajes de remocin de 95, 93 y 87 %. La
aplicacin de nutrientes y aireacin hizo ms eficiente el
proceso de remocin del aceite lubricante [11].
Araujo y col. (2008), realizaron el estudio de tratabilidad,
donde se utiliz biosurfactante producido a partir de cepas
76
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bacterianas (MI9 y MI10), y un cultivo mixto con las cepas
MI5, MI7, MI9, MI10, y MI11. Los tratamientos con
biosurfactantes: ANHCB (agua del Lago, hidrocarburo,
cultivo mixto y biosurfactante) y ANHB (agua del lago,
hidrocarburo y biosurfactante), presentaron remociones de 81
y 50 %, respectivamente, mayores que los tratamientos sin
biosurfactantes: ANHC (agua del lago, hidrocarburo y cultivo
mixto) y AEHC (agua del lago esterilizada, hidrocarburo y
cultivo mixto) con 36 y 29 % de remocin. El biosurfactante
influenci positivamente la emulsin creando una mayor
superficie de contacto [16].
Angulo y col. (2010a), aislaron cepas bacterianas de las
aguas de la fosa Ul. 12 cepas demostraron un crecimiento
eficiente utilizando gasoil como fuente de carbono, y se
utilizaron en la prueba de factibilidad, consiguindose el
mayor porcentaje de remocin para la cepa 9 con 89 %,
seguido de las cepas 6 (63 %), 4 y 11 (61 %). La utilizacin
de cepas bacterianas autctonas en la biorremediacin de
aguas contaminadas, incrementa la degradacin de los
hidrocarburos [26].
Angulo y col. (2010b), aplicaron una prueba de tratabilidad
con agua de la fosa Ul. Los tratamientos con cultivo mixto (4
y 8 cepas), aireacin y nutrientes (AN4C, AN8C), removieron
una mayor proporcin de las fracciones de hidrocarburos,
siendo el mejor tratamiento AN8C, donde se consigui la
mayor remocin de la fracciones de los hidrocarburos, 85 %
de saturados, 58 % de resinas, 35 % de asfaltenos y 30 % de
aromticos, seguido por NC8: consorcio de 8 cepas y
nutrientes (82, 59, 26, 15 %) y ANC4: consorcio de 4 cepas,
aireacin y nutrientes (76, 51, 31, 24 %). La utilizacin de
consorcios bacterianos autctonos, con aireacin y nutrientes,
favoreci la biorremediacin de aguas contaminadas [27].
Melo y col. (2012), utilizaron 8 cepas bacterianas aisladas
de agua petrolizada, las cuales mostraron la mayor capacidad
para utilizar los hidrocarburos como fuente de carbono y
energa. Los consorcios estuvieron formados por cuatro cepas
(C50) y por ocho cepas (C100). Los tratamientos ms
eficientes en la remocin de hidrocarburos fueron NAC100,
NAC50 (consorcios bacterianos, aireacin y nutrientes), con
valores de remocin de 94 y 92 %, mientras que NC100 y
NC50 (consorcios bacterianos y nutrientes), se consigui un
85 y 83 % de remocin. La degradacin de los hidrocarburos
en el agua petrolizada se increment en los tratamientos
acondicionados con nutrientes, aireacin y consorcio
bacteriano [28].
Conclusin.
La Biorremediacin pretende ofrecer una propuesta
biotecnolgica para el manejo de efluentes contaminados con
hidrocarburos y/o sus derivados, originados en las actividades
de produccin del petrleo con un costo/beneficio tal que
permita su transferencia y aplicacin a las reas donde dichos
efluentes se generen para as disminuir los pasivos
ambientales que existen en el pas.
Palabras clave: biorremediacin, cepas bacterianas,
degradacin de hidrocarburos, aguas petrolizadas.
Referencias:
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petrolizada en la biorremediacin de agua contaminada.
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Ingeniera Sanitaria y Ambiental. Punta Cana, Repblica
Dominicana. 2010a; 1-4.
27. Angulo N, Araujo I, Valery K, Crdenas C, Morillo G,
Melo P. Biorremediacin de agua contaminada procedente
de fosa petrolizada. Memorias del XXXII Congreso
Interamericano de Ingeniera Sanitaria y Ambiental. Punta
Cana, Repblica Dominicana 2010b; 1-4.
28. Melo P, Araujo I, Angulo N, Crdenas C, Beltrn A.
Biotratamiento de aguas petrolizadas utilizando inyeccin
de aire y dos consorcios bacterianos. Memorias del
XXXIII Congreso Interamericano de Ingeniera Sanitaria
y Ambiental. Baha, Brasil 2012; 1-5.
SIMPOSIO
NUEVAS TECNOLOGAS Y SUS EFECTOS
SOBRE LA CARGA MICROBIANA
Coordinador: Dr. Wilfido Briez
Moderador: Nohans Rumbos
La ultra alta presin de
homogenizacin aplicada en alimentos
fluidos. Efecto
sobre microorganismos gram positivos
y negativos
The ultrahigh pressure homogenisation
applied in fluid food. Effects on gram
positive and negative microorganisms
Briez Z. Wilfido Jos
Departamento de Sanidad Animal y Salud Pblica. Unidad de
Investigacin en Ciencia y Tecnologa de los Alimentos.
Facultad de Ciencias Veterinarias.
Universidad del Zulia.
Maracaibo. Estado Zulia. 4005-A, Venezuela.
wilfido.brinez@fcv.luz.edu.ve fitobrinez@gmail.com
En la conservacin de alimentos fluidos se pueden
emplear tratamientos alternativos a los mtodos fsicos,
qumicos y biolgicos, reduciendo los efectos indeseables de
estos tratamientos sobre los alimentos. Los tratamientos
trmicos son los ms utilizados y pueden provocar
alteraciones del sabor y desnaturalizacin de compuestos
esenciales como vitaminas y protenas. Las Altas Presiones de
Homogenizacin (UHPH) constituyen una nueva alternativa
para la higienizacin de alimentos fluidos, la cual, es basada
en los mismos principios de diseo de la homogeneizacin
convencional, utilizada en la industria lctea para reducir el
tamao del glbulo de grasa. En la ultima dcada se han
realizado estudios para evaluar la inactivacin bacteriana
usando UHPH a 300 + 30 MPa de cepas de Listeria innocua
ATCC 33090, Escherichia coli ATCC 10536, Escherichia
coli O157:H7 CCUG 44857, Staphylococcus aureus ATCC
13565 y Staphylococcus carnosus CECT 4491 inoculadas en
leche. Tambin, se ha estudiado el efecto de la temperatura de
entrada en la mquina de alta presin sobre la letalidad y
produccin de daos subletales en estos microorganismos. En
cuanto a la inactivacin por UHPH, en todas las cepas, tanto
la temperatura como el tipo de matriz influenciaron
significativamente (P 0,05) su inactivacin, que fue mayor a
20 C. En leche el nivel de inactivacin fue similar para ambas
cepas de E. coli. No se observaron daos subletales tras los
tratamientos en ninguno de los casos. En conclusin, los
tratamientos de UHPH a 300 + 30 MPa y una temperatura de
entrada de 6 y 20 C fueron eficientes para reducir los
recuentos de todas las cepas estudiadas. La UHPH puede
ofrecer una alternativa para la pasteurizacin de la leche y
otros alimentos lquidos combinado con la posibilidad de
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incrementar la temperatura de entrada de las muestras antes est trabajando en el diseo de nuevos equipos de alta
del proceso. capacidad productiva.

Palabras clave: Nuevas tecnologas, alta presin,

inactivacin, microorganismos.
El control de la formacin de aminas
bigenas en los alimentos
La alta presin como herramienta
para asegurar la estabilidad Dr.Artur X. Roig Sagus
microbiolgica de los alimentos Universidad Autnoma de Barcelona, Espaa

Las aminas bigenas (AB) se forman en los alimentos

Dr. Artur X. Roig Sagus principalmente por la descarboxilacin enzimtica de algunos
Universidad Autnoma de Barcelona, Espaa
aminocidos. Algunas de estas AB, como la histamina o la
tiramina, tienen propiedades vasoactivas y psicoactivas, y su
El uso de la presin como tratamiento de conservacin de
presencia excesiva en los alimentos puede causar una
los alimentos ya fue planteado a finales del siglo XIX, aunque
intoxicacin ms o menos grave segn la predisposicin del
hubo que esperar varias dcadas para que los avances en
consumidor. Otras, como la putrescina o la cadaverina,
ingeniera y el desarrollo de nuevos materiales pusieran esta
pueden potenciar la accin txica de las anteriores. En los
tecnologa al alcance de la industria alimentaria. Hoy existen
alimentos frescos, la acumulacin de niveles txicos suele
en el mercado varios tipos de alimentos cuya seguridad y vida
producirse cuando los signos organolpticos de alteracin son
til han sido mejoradas mediante un proceso de Alta Presin
muy evidentes, salvo en determinadas especies de pescado,
Hidrosttica (APH), tecnologa basada en transmitir una
como los escmbridos, cuyos elevado niveles de histidina
presin muy elevada (miles de bares) a un alimento a travs
libre favorece la formacin de elevadas concentraciones de
de un lquido en el que est inmerso. Una de las grandes
histamina. En alimentos como el queso, sometidos a
ventajas de esta tecnologa es que puede ser aplicada en fro y
fermentacin y maduraciones ms o menos prolongadas,
en un producto ya envasado. La APH permite eliminar gran
tambin pueden formarse un amplio abanico de estos
parte de la microbiota contaminante del alimento, aunque sin
compuestos pero sin que ello implique una alteracin de sus
afectar significativamente sus propiedades organolpticas o
propiedades sensoriales y el consecuente rechazo por parte del
tecnolgicas. No obstante, presenta ciertas limitaciones, que
consumidor. En ambos casos, el control del desarrollo de la
dependen no slo de las caractersticas del propio alimento,
microbiota con capacidad descarboxiladora es esencial para
sino tambin del tipo de microorganismo que se pretenda
disminuir el riesgo de intoxicacin, aunque su naturaleza
eliminar. Las esporas bacterianas son especialmente
distinta en cada caso. Se han descrito diversos grupos de
resistentes a sus efectos, y se ha observado una gran
microorganismos capaces de formar AB, pero aunque es ms
variabilidad en la sensibilidad a la presin en las formas
frecuente entre ciertos gneros o especies, se considera una
vegetativas, incluso entre cepas de una misma especie.
caracterstica especfica de algunas cepas. Existe adems una
Actualmente, el empleo de presiones por encima de los 5000
gran variedad en el tipo y cantidad de AB que las cepas de una
bar, as como la sinergia con otros sistemas de conservacin
misma especie pueden formar. Incluso algunas cepas son
(calor, conservantes naturales, etc.), son algunas de las
capaces de producir simultneamente ms de una AB.
posibilidades en estudio para lograr una mayor eficacia de los
Adems de la presencia de microorganismos con actividad
tratamientos de APH.
descarboxiladora, otros factores determinan la formacin de
Otra tecnologa basada en la alta presin, que se ha
AB en los alimento, como la presencia suficiente de
desarrollado ms recientemente, es la denominada Alta
aminocidos precursores y cofactores, el pH, la actividad de
Presin Dinmica u Homogeneizacin por Presin Ultra Alta
agua o la temperatura de conservacin. En el pescado fresco
(UHPH). A diferencia de la APH, esta tecnologa slo es
conservado en frio, la formacin de histamina viene marcada
aplicable a alimentos fluidos, los cuales son forzados a pasar
por el desarrollo de la microbiota Gram negativa,
por un estrecho espacio generado en una vlvula, lo que causa
especialmente de algunas enterobacterias como Hafnia alvei,
no slo un incremento considerable de la presin en el
Klebsiella pneumoniae o Morganella spp., de carcter
alimento (superior a los 2000 bar), sino tambin la accin de
psicrotrofo. En cambio, en los alimentos fermentados suelen
una serie de fuerzas fsicas que aumentan su eficacia,
ser cepas de Lactobacillus spp. Lactococcus spp.,
incrementando el efecto letal sobre las clulas vegetativas y
Pediococcus spp. o Enterococcus spp., que se desarrollan
con una menor generacin de lesiones sub-letales que la APH,
durante la maduracin, las que suelen formar histamina y/o
aunque tambin presenta ciertas limitaciones segn el tipo de
tiramina, adems de otras AB. La implantacin de buenas
alimento. En la ltima dcada se ha estudiado su aplicacin en
prcticas higinicas, aunque importante, no siempre es
productos como la leche y sus derivados, licuados vegetales o
suficiente para controlar su formacin. Por ello, la aplicacin
zumos de frutas, consiguiendo buenos resultados. Aunque esta
de tecnologas como las altas presiones o las radiaciones
tecnologa an no ha dado el salto a la industria,
ionizantes, o el uso de cultivos iniciadores especiales, estn
probablemente lo haga en breve, ya que en la actualidad se

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X Congreso Venezolano de Microbiologa Ada Martnez de Gallardo
actualmente en estudio para reducir el riesgo de su formacin la realidad, por lo cual, la microbiologa predictiva presenta
y aumentar as la seguridad de estos alimentos. tambin algunas limitaciones.

Microbiologa Predictiva:
Usos actuales y potenciales en la calidad y
seguridad alimentaria

MSc. Emiro Valbuena

Prof. Titular. Facultad de Ciencias Veterinarias. Universidad
del Zulia
emiro.valbuena@fcv.luz.edu.ve

Tradicionalmente, la seguridad de los alimentos ha sido

establecida en base a la interpretacin de anlisis de
laboratorio para establecer la presencia, ausencia o cantidad
de microorganismos o toxinas presentes en el producto, este
sistema ha demostrado ser eficaz durante dcadas, pero resulta
costoso, lento y destructivo, dejando siempre muchas
interrogantes a las cuales no es fcil dar respuesta.
Por otra parte, los sistemas de muestreo y anlisis dan una
informacin no acumulativa, es decir, es necesario seguir
analizando lote tras lote para garantizar que cada uno de ellos
cumple con los requisitos establecidos.
La microbiologa predictiva representa la integracin de
los conocimientos tradicionales de la microbiologa de
alimentos con los que se encuentran en las matemticas,
estadstica y sistemas informticos, mediante los cuales ha
sido posible describir y predecir el comportamiento
microbiano con el fin de prevenir las enfermedades
transmitidas por los alimentos o predecir la descomposicin
de los mismos.
El comportamiento de las poblaciones microbianas en los
alimentos (crecimiento, supervivencia o muerte) es afectada
por las propiedades de los alimentos (actividad de agua y pH,
por ejemplo) y por las condiciones de almacenamiento
(temperatura, humedad relativa, atmsfera, entre otras). El
efecto de estas propiedades puede ser calculado mediante
modelos matemticos derivados de los estudios cuantitativos
sobre las poblaciones microbianas dentro de un rango de
condiciones estudiadas, llamado dominio. De esta forma, el
uso de modelos predictivos permiten predecir las poblaciones
microbianas o los metabolitos derivados de su actividad
(toxinas, por ejemplo) en cualquier etapa desde la produccin
agropecuaria, procesamiento industrial, distribucin,
comercializacin y hasta el uso final de los alimentos, siendo
posible obtener esas estimaciones partir de los cambios en los
parmetros del producto (temperatura, atmsfera de
almacenamiento, pH, sal, etc.) dentro del dominio estudiado.
Los modelos predictivos tienen reconocida utilidad en los
sistemas HACCP, en el establecimiento de la Vida til o
Comercial de los productos y en la Evaluacin Cuantitativa de
Riesgo Microbiano en Alimentos, sin embargo, debido a la
complejidad de los sistemas alimentarios y a la variabilidad
del comportamiento microbiano, estos modelos matemticos
son, a lo sumo, una representacin general y simplificada de

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CICLO DE CONFERENCIAS:
AVANCES EN VETERINARIA
Coordinadora-Moderadora:
Dra. Gabriela Carruyo
Staphylococcus aureus resistente a la meticilina
(SARM) en animales
y ambientes veterinarios
Meticillin resistant Staphylococcus aureus in
Animals and Veterinary Environments
Hoet, Armando E.a,b ; y Van-Balen, Joanya
a Department of Veterinary Preventive Medicine, College of
Veterinary Medicine; b Epidemiology Division, College of
Public Health; The Ohio State University, Columbus, Ohio,
USA
Staphylococcus aureus tesistente a la metacilina (SARM)
es un problema de salud pblica muy importante ya que es el
principal patgeno causante de infecciones de la piel y tejidos
suaves a nivel de la comunidad, as como uno de los
patgenos nosocomiales ms frecuentes en hospitales
humanos. A medida que la prevalencia de este patgeno ha
incrementado en la poblacin humana, se ha comenzado a ver
un desbordamiento y circulacin de cepas de SARM de
origen humano en diferentes poblaciones de animales
domsticos, especialmente en perros, gatos y caballos, entre
muchos otros. La prevalencia de SARM en ese tipo de
animales esta frecuentemente asociada con trasmisin
zoontica directa (de animales infectados a humanos), as
como transmisin anthropozoontica o zoonosis en reversa
(de humanos infectados a animales). Muchos de estos casos
de trasmisin zoontica de SARM han sido reportados en
hospitales veterinarios, donde este patgeno se ha vuelto no
solo un problema nosocomial, sino tambin un problema de
salud ocupacional importante para el personal veterinario. A
pesar de esto, la informacin sobre SARM en pacientes
animales que asisten a consulta en hospitales veterinarios, as
como la prevalencia del mismo en este tipo de ambientes, es
prcticamente desconocida. Por la tanto, los objetivo de esta
lnea de investigacin fu determinar la prevalencia y
caractersticas fenotpicas y genotpicas de cepas de SARM en
perros y caballos a su llegada a un hospital veterinario
universitario; as como determinar la ecologa y epidemiologa
de SARM en el ambiente de dicho hospital.
En los ltimos 7 aos se ha mantenido una vigilancia
activa enfocada en SARM en el Centro Mdico Veterinario
perteneciente a la universidad del Estado de Ohio. Este un uno
de los hospitales veterinarios ms grandes de los Estados
Unidos con ms de 37 mil pacientes por ao. En dicha
vigilancia se muestrearon tanto pacientes como el ambiente de
las secciones de perros y caballos del hospital. En los
animales se recolectaron muestras de tres a cuatro reas
anatmicas. En el ambiente, superficies especificas en cada
una de esas secciones fueron muestreadas en forma regular
(mensual o trimestral) usando una tcnica de muestreo
ambiental previamente estandarizada y validada, basada
principalmente en el uso de paos electrostticos1. Las cepas
identificadas como S. aureus fueron confirmadas como
SARM usado un PCR Duplex. Todas las cepas de SARM
fueron caracterizadas fenotpicamente y genticamente,
determinando su patrn de susceptibilidad a 16 diferentes
drogas antimicrobianas, adems de tipificarse por SCCmec y
por PFGE.
En un estudio de corte se evidenci que el nivel de
contaminacin ambiental del hospital veterinario era
sorpresivamente alto: 15,6 % (17/109 superficies
muestreadas) en la seccin de perros, y 4,4% (1/23) en la
seccin de equinos1. Este hallazgo impuls la vigilancia
activa continua en los siguientes aos, muestreando mensual o
trimestralmente las mismas superficies en el hospital. Dicho
estudio mostr un nivel de contaminacin del 13,5% (77/569)
durante el primer ao de vigilancia, donde la mayora de las
cepas de SARM fueron caracterizadas como cepas de SARM
Adquiridas en Hospitales (HA-MRSA, por sus siglas en
Ingles). Esta contaminacin ambiental se ha mantenido
durante los muestreos realizados trimestralmente los ltimos 4
aos, con un promedio del 11,4% (83/726). Adicionalmente,
durante el primer ao de esta misma vigilancia se detect que
5,6% (25/435) de los perros que llegaban al hospital ya
estaban colonizados o infectados con SARM antes de su
admisin. Los anlisis moleculares de las cepas caninas y
ambientales de SARM permitieron comprobar que dichos
perros continuamente introducen y distribuyen,
probablemente con ayuda del personal veterinario, este
patgeno dentro del hospital2,3. Es importante resaltar que
todas las cepas de SARM detectadas en el ambiente y en los
perros fueron clasificadas como de origen humano, ya que
stas han sido previamente reportadas en humanos por
muchos aos antes de ser observadas en perros. Otro punto
preocupante, es el hecho de que el 100% de las cepas halladas
en este ambiente hospitalario veterinario fueron identificadas
como Multi-Resistentes a tres o ms clases de antibiticos, la
mayora de ellos comnmente usados para tratar infecciones
por Staphylococcus. Resultados similares se han observado en
la seccin equina del hospital, donde SARM fue identificado
en 5,8% (7/120) de los caballos admitidos al servicio, as
como en 8,6% (66/770) de las superficies ambientales
muestreadas en diferentes reas del hospital. Sin embargo, el
tipo de cepas circulando en esta poblacin de animales fue
muy diferente de aquellas cepas detectadas en perros. El 90%
de todas las cepas de SARM en equinos fueron clasificadas
como Adquiridas en la Comunidad (CA-MRSA, por sus siglas
en Ingles) en vez de HA-MRSA, y su resistencia a las drogas
antimicrobianas tambin fue mucho menor (70%). De hecho,
en el anlisis molecular se observ muy poca circulacin de
cepas de SAMR entre las dos secciones. Estos resultados
confirman la presencia de cepas de SARM adaptadas a
diferentes especies animales y ambientes hospitalarios
veterinarios.
Basado en esta vigilancia activa se puede observar
claramente que SARM est presente a lo largo del tiempo (>7
aos) en el ambiente hospitalario veterinario, donde grupos
especficos de SARM estn circulando en perros y sus
81
 Revista de la Sociedad Venezolana de Microbiologa 2013; 33: suplemento 1
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X Congreso Venezolano de Microbiologa Ada Martnez de Gallardo
ambientes relacionados, as como en caballos y sus reas.
Tanto las cepas HA-MRSA como las CA-MRSA, han sido
reportadas con anterioridad como agentes causales de
infecciones humanas, por lo que su deteccin en este grupo de
animales y el ambiente veterinario es de gran preocupacin
desde el punto de vista ocupacional y de salud pblica. Ms
an si se toma en cuenta que la mayora de estas cepas fueron
resistentes a muchos grupos o clases de drogas (algunas cepas
fueron solo susceptibles a vancomicia). La circulacin y
mantenimiento de SARM en el ambiente hospitalario
veterinario a travs del tiempo enfatiza la necesidad de prestar
gran atencin a la limpieza y desinfeccin de dichos entornos.
A su vez, es necesario incrementar la higiene y proteccin
personal, especialmente cuando estas instituciones se parecen
cada da ms a los hospitales humanos, no solo por su manejo,
sino por el tipo de patgenos (como SARM) que comienzan a
circular por estos.
Palabras clave: SARM, Animales, Hospitales Veterinarios,
Ambiente.
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Infecciones oculares en pequeos animales
M.V. MSc. Gibson Fernndez
Clnica de Pequeos Animales.
Policlnica Veterinaria Universitaria
Facultad de Ciencias Veterinarias
Universidad del Zulia
El sistema ocular es considerado un sitio privilegiado
inmunolgicamente, que puede ser vulnerado por algunos
agentes infecciosos capaces de atravesar las barreras de
defensa del ojo y causar lesiones en el mismo; provocando
perdida irreversible de la visin en algunos casos. Los factores
fsicos de proteccin al ojo, incluyen; la respuesta al
parpadeo, el tercer parpado y la pelcula lagrimal, los cuales
representan una importante barrera de defensa para los
microbios, qumicos y alrgenos. Las lgrimas constituidas
por moco, lquido y lpidos, contienen inmunoglobulinas A,
G y M y otras sustancias antibacterianas como la lactoferrina.
El ojo posee una flora normal de bacterias y hongos (en
menor nmero), controlados stos por el lavado constante de
la superficie ocular a travs de las lgrimas. Una serie de
manifestaciones oculares pueden presentarse en perros y gatos
cuando se produce una alteracin en la funcin ocular,
provocando que estos microorganismos se exacerben
generando lesiones en el ojo. Agentes virales, parasitarios,
ricketsiales son capaces de afectar el ojo, ya que ste a
menudo es un rgano blanco de las infecciones sistmicas.
Estos patgenos ingresan en el organismo por diferentes vas
y pueden alcanzar el ojo a travs de la uvea o tnica vascular.
Es comn que los agentes infecciosos o los inmunocomplejos
se establezcan en la uvea, produciendo uvetis anterior, uvetis
posterior o corioretinitis cuando superan las barreras de
defensa. Otras manifestaciones oculares incluyen; blefaritis,
conjuntivitis, dacriocistitis, queratoconjuntivitis seca,
queratitis y ulceras corneales. Los agentes infecciosos
comnmente asociados a estas manifestaciones oculares son;
el virus del distemper canino, adenovirus canino tipo 1, herpes
virus canino, Ehrlichia canis, Brucella canis, Borrelia
burgdorferi, Leptospira spp., virus de leucemia felina, virus
de inmunodeficiencia felina, Toxoplasma gondii, coronavirus
felino (PIF), Herpesvirus felino, Clamidia psittaci, Calicivrus
felino. Algunos hongos; aspergillus spp., Cryptococcus
neoformans, Histoplasma capsulatum, Blastomyces
dermatitidis, Coccidioides immitis. El diagnstico de estas
enfermedades depende del agente causal; algunos
microorganismos pueden ser diagnosticados por medio de
citologa, hematologa, PCR, evaluacin serolgica, cultivos,
histopatologa solos o en combinacin. El tratamiento de estas
lesiones oculares, es especfico de las estructuras afectadas,
sin embargo el tratamiento sistmico debe ser dirigido a
contrarrestar la accin patgena del agente infeccioso causal.
Palabras clave: perros, gatos, manifestaciones oculares,
agentes infecciosos.
Encefalitis del Oeste del Nilo
Dr. Alberto Medina
La incidencia de las encefalitis virales a nivel mundial
tiende a tener una distribucin geogrfica y estacional. Dado
el hecho de ser endmicas en reas restringidas, tienden a ser
denominadas de acuerdo a su localizacin en encefalitis
japonesa, encefalitis equina oriental, encefalitis de San Luis,
encefalitis equina occidental, encefalitis equina venezolana,
encefalitis australiana o del Valle de Murray y encefalitis del
Oeste del Nilo, que al igual que muchas otras enfermedades
zoonticas tienen una gran importancia sobre la salud pblica
por su alta morbilidad, as como un impacto social debido a
las secuelas posteriores a la infeccin que se traducen en
prdida de la capacidad productiva en los individuos
afectados, as como aquella erogacin que se genera como
consecuencia de la atencin mdica, la prdida de das
laborales y la aplicacin de tratamientos curativos.
La encefalitis del Oeste del Nilo, es una enfermedad viral,
infecciosa, no contagiosa, transmitida a travs de la picadura
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de un mosquito ornitoflico infectado del gnero Culex, tanto oportuna, integrada, veraz y efectiva, aspectos stos
a aves migratorias y silvestres como a los humanos. Esta contemplados en la Primera Reunin Binacional Colombo-
enfermedad se caracteriza por producir inflamacin del Venezolana sobre Encefalitis equina realizada en la ciudad de
sistema nervioso central, con daos neurolgicos o no y en Maracaibo, estado Zulia, Venezuela en el ao 2000.
algunas ocasiones puede conllevar a la muerte. Su etiologa
est dada por un virus de genoma ARN, perteneciente al
gnero Flavivirus de la familia Flaviviridae la cual incluye un
nmero de patgenos de importancia mdica en humanos tales
como el virus de Dengue, virus de la hepatitis C y el virus de
la encefalitis japonesa.
Dentro de los hospedadores se citan aves migratorias y locales
como azulejo, estornino comn de los pastores, cuervo
americano, pinzn casero, gorrin casero, gaviota de pico
anillado, urraca de pico negro, tordo americano, gonzalitos,
pjaro negro de alas rojas, frailecillo norteamericano, cuervo
pescador, pato silvestre. As mismo, se citan como
hospedadores a equinos, humanos, perros, gatos y otros
vertebrados como ardillas y conejos domsticos.
El diagnstico se basa en signos y sntomas clnicos,
diagnstico epidemiolgico en funcin a la morbilidad y
mortalidad de aves, quidos y humanos; densidad de
mosquitos, entrada y salida de lluvias, ruta o patrn migratorio
de las aves y un diagnstico de laboratorio mediante
aislamiento viral en cultivos celulares y ratones lactantes y por
serologa a travs de inhibicin de la hemoaglutinacin,
seroneutralizacin, prueba de neutralizacin por reduccin de
placas y ELISA indirecta. La enfermedad no tiene un
tratamiento especfico, el mismo se limita a una terapia de
soporte. Las medidas de prevencin estn orientadas al control
ambiental del mosquito y a la fumigacin para eliminar las
formas adultas. La vigilancia epidemiolgica incluye el
estudio de la morbimortalidad de aves silvestres y migratorias
principalmente en las reas de llegada de estas, muestreo de
aves silvestres como animales centinela para la deteccin de
focos enzooticos, morbimortalidad en quidos, muestreo de
especies domsticas que incluya bovinos y equinos jvenes,
morbilidad y mortalidad en humanos en base a sndromes
febriles encefalticos de causa desconocida, captura y
clasificacin de mosquitos y la notificacin oportuna de casos
en poblaciones animales y humanas. Es importante resaltar
que pases de Amrica Central, las islas del Caribe y ciertos
pases de Amrica del Sur incluyendo Venezuela, estn en
riesgo potencial para la ocurrencia de brotes de encefalitis del
Oeste del Nilo ya que varias especies de aves migratorias
virmicas tienen la capacidad de migrar desde la regin de
Nueva York y cruzar el atlntico norte occidental o el mar del
Caribe contribuyendo al desplazamiento y circulacin del
virus en una o varias especies de aves amplificatorias como lo
han demostrado ciertos estudios realizados en Venezuela. Por
lo tanto, es importante afianzar el conocimiento de la ecologa
del virus, as como un profundo conocimiento de los patrones
migratorios de las aves, pocas del ao de las migraciones,
tipos de aves silvestres y migratorias presentes en el pas que
contribuya al diseo y ejecucin de programas de control y
vigilancia epidemiolgica de esta enfermedad
mayoritariamente en reas de riesgo, enmarcado dentro de un
mbito multidisciplinario e intersectorial, con una estructura
fortalecida de unidades de diagnstico a nivel local y nacional
permitiendo as contar con una informacin de calidad,
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SIMPOSIO
PROGRESOS EN EL ESTUDIO DE LAS
INTERRELACIONES PATGENO-VECTOR
Coordinador-Moderador: Dr. Ernesto San Blas
Interrelacin Trypanosoma cruzi/Trypanosoma
rangeli-Triatominos y la enfermedad de Chagas
en Venezuela
Dr. Nstor Aez
Investigaciones Parasitolgicas J.F.Torrealba,
Departamento de Biologa, Facultad de Ciencias, Universidad
de Los Andes, Mrida, 5101, Venezuela
Trypanosoma cruzi, agente causal de la contaminativa en
T.cruzi y por va inoculativa en T.rangeli. Se discute las
implicaciones epidemiolgicas que podra tener la circulacin
simultnea de ambos parsitos en reas donde la enfermedad
de Chagas es endmica, hacindose especial referencia a la
posibilidad de prevenir infecciones enfermedad de Chagas, y
Trypanosoma rangeli, especie americana inocua para el
organismo humano, se caracterizan por su compartimiento
antignico y por poseer una similar distribucin geogrfica,
infectar los mismos hospedadores vertebrados y ser
transmitidos por insectos hematfagos de la subfamilia
Triatominae. No obstante estas similitudes, ambos parsitos se
diferencian en su comportamiento en sus vectores triatominos,
detectndose una marcada patogenicidad de T.rangeli e
inocuidad de T.cruzi durante el desarrollo en el insecto. Se
sealan las diferencias morfo-fisiolgicas durante el
desarrollo de ambos parsitos en el vector y se discute su
efecto en la dinmica de transmisin, enfatizndose sobre la
eficiencia de transmisin por va severas por T.cruzi en las
poblaciones expuestas.
Palabras clave: Trypanosoma cruzi, Trypanosoma rangeli,
Triatominos, Enfermedad de Chagas
Trabajo financiado por CDCHTA-ULA-C-1821-13-07-AA
Flebotominos vectores de Leishmania
bioecologia y transmisin
Dra. Nieves Elsa
LAPEX-Laboratorio de Parasitologa Experimental,
Departamento de Biologa, Facultad de Ciencias, Universidad
de Los Andes-Venezuela
nievesbelsa@gmail.com
Los flebotominos son insectos hematfagos transmisores
de Leishmania, agente causal de la leishmaniasis, enfermedad
que presenta un amplio espectro clnico en los humanos. En el
presente trabajo se aborda primeramente aspectos sobre la bio
ecologa de los flebotominos. Se plantea adems, el potencial
de la saliva de los flebotominos como un coctel farmacolgico
que interviene en la biologa del insecto, en el proceso de
transmisin de Leishmania y su posibilidad de ser usada
como un marcador epidemiolgico y fuente proteica para una
vacuna contra la leishmaniasis, relevantes a la hora de
considerar la prevencin y posible surgimiento de nuevos
brotes de leishmaniasis. La distribucin de los flebotominos se
asocia a diferentes factores ligados a variables climticas, que
contribuyen a determinar su distribucin espacial y la
propagacin de la leishmaniasis. La composicin y estructura
de la flebotomofauna cambia de acuerdo a factores
climatolgicos con un patrn de dispersin especie especfico.
Se muestra el efecto del grado de perturbacin ecolgica
sobre la composicin y estructura poblacional de
flebotominos, que ocasionan especies emergentes que podran
incrementar la transmisin de leishmaniasis. El conocimiento
de la situacin actual de los vectores de Leishmania y como
estas poblaciones se modifican, producto de alteraciones
ambientales de origen climtico y/o antropognico son
importantes en la epidemiologia y control de la leishmaniasis.
Por otro lado, la saliva de los flebotominos est conformada
por un conjunto de protenas con diferentes propiedades. Se
ha demostrado el desarrollo de anticuerpos anti saliva en
animales experimentales, silvestres y en humanos expuestos a
las picadas de los flebotominos. Proponindose el uso de la
saliva de los flebotominos como un posible marcador
epidemiolgico o de riesgo. Sin embargo, en las zonas
tropicales con leishmaniasis tegumentaria, existen dificultades
a ser superadas. Tambin, los estudios sugieren la posibilidad
de prevenir la leishmaniasis, a partir de las protenas salivales
de los flebotominos como posible blanco de una vacuna,
aunque, los estudios son alentadores, es necesario la
integracin de tcnicas moleculares de avanzada, que
permitan entender el papel de la saliva de los flebotominos en
el mecanismo de transmisin de Leishmania, principalmente
de la leishmaniasis tegumentaria americana, que posibiliten el
uso de la saliva en la prevencin.
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CICLO DE CONFERENCIAS:
LOS MICROBIOS Y LOS ALIMENTOS
Coordinadora-Moderadora:
Dra. Kutchynskaya Valero
Productos congelados.
seguros microbiolgicamente?
Dra. Zoraida Medina
Los hbitos de vida han cambiado mucho en las ltimas
dcadas. El ritmo actual, ha moldeado las costumbres, entre
ellas, la alimentacin. Ya no comemos como antes, debido a
las prisas, la falta de dinero o la bsqueda de comodidad, han
popularizados los alimentos congelados. Alrededor del 70%
de los hogares consumen alimentos congelados una vez a la
semana como mnimo, segn afirma un estudio conjunto
elaborado por la Sociedad Espaola de Diettica y Ciencias de
la Alimentacin (SEDCA) y la Confederacin de
Consumidores y Usuarios (CECU). Estos alimentos se
presentan como buenos candidatos para sustituir y acompaar
los productos frescos. Sin embargo, la calidad de los frescos
siempre se supone superior. Por tanto, la congelacin, en
concreto, supone la prdida de algunas de las caractersticas
organolpticas de los alimentos. No obstante, si el proceso se
realiza de manera adecuada, estas prdidas son mnimas y
apenas se notan. Los alimentos congelados pueden
mantenerse durante largos periodos, pero tambin pueden
deteriorarse si la congelacin se da de manera lenta. Las
prdidas de las propiedades organolpticas, como la textura,
condicionan el alimento para el crecimiento de bacterias
debido a la disponibilidad de molculas de agua (sinresis)
que no logran fijarse a los tejidos del alimento permitiendo el
crecimiento microbiano. As mismo, la ruptura o
modificaciones estructurales de los tejidos provocan aumento
de la viscosidad de los lquidos interceluares evitando una
congelacin verdadera dando oportunidades de crecimiento
bacteriano. Un alimento congelado puede ser considerado
seguro microbiolgicamente cuando se manejan
adecuadamente para evitar daos celulares y congelndolo
rpidamente.
Herramientas moleculares para detectar
patgenos en alimentos
Jhoandry J., Rivera Salazar
Laboratorio de Gentica y Biologa Molecular, FEC-LUZ
jhoandriveras@gmail.com
El asegurar un alimento inocuo lleva a acciones orientadas a
garantizar la mxima seguridad posible de los alimentos, por ello;
los incursos en esta ardua tarea deben vigilar con rigurosidad toda
la cadena alimenticia que va desde la produccin hasta el
consumo. En este sentido, la vigilancia microbiolgica en las
plantas industriales de alimentos ser siempre un componente
vital para ofrecer al consumidor alimentos seguros y por lo cual
representa un factor determinante para poder acceder a los
mercados locales, nacionales e internacionales en la medida que
las legislaciones en seguridad e inocuidad de alimentos se hacen
cada vez ms rigurosas. Sin embargo, la vigilancia
microbiolgica oportuna se torna cuesta arriba puesto que los
mtodos y tcnicas convencionales para detectar patgenos de
inters alimenticio (hongos, levaduras, bacterias, virus, etc.)
requieren de: laboriosos y extensos pasos a lo largo del
procedimiento, diferentes medios de cultivos, suplementos
selectivos, condiciones especiales durante la incubacin, entre
otros. Todos esto para llegar a obtener resultados entre 48 y 72
horas (inclusive hasta semanas) y en muchos casos sin siquiera
llegar a resultados conclusivos. En los ltimos diez (10) aos se
han modificado tcnicas de diagnosis molecular (que slo estaban
circunscrita para la investigacin y a casos clnicos) para ser
llevados al campo de la industria alimentaria. Estas tcnicas
basadas, en su mayora, en el anlisis de material gentico
(DNA/RNA), inmunoensayos o deteccin de ATP tienen la
ventaja de tener una alta sensibilidad, especificidad y rapidez, de
hecho, las tcnicas de deteccin basadas en anlisis de los cidos
nucleicos permiten en un solo ensayo detectar e identificar
simultneamente diferentes patgenos que pueden estar presentes
en una misma matriz de alimento. En este sentido, se expone una
revisin de los innovadores avances y las bondades que
caracterizan las herramientas moleculares para detectar patgenos
en alimentos como mtodos rpidos, seguros y oportunos dentro
de las industrias alimentarias, as como, su aceptacin dentro de
los actuales mtodos estandarizados para el anlisis
microbiolgico de alimentos.
Mejorando la calidad de los quesos por
medio de bioconservacin
MSc. Gustavo Castro. M.V.
En Venezuela se consume una gran cantidad de quesos
blancos frescos, muchos de los cuales llegan a presentar una
calidad sanitaria baja, debido en parte a la utilizacin de
procesos poco tecnificados y en algunas ocasiones, leche sin
pasteurizar como materia prima. De all que sean los
productos lcteos, y a su vez, los quesos blancos, los
implicados en muchos de los casos de intoxicacin
estafiloccica, principal enfermedad transmitida por alimentos
de nuestro pas.
Son varias las medidas que pueden implementarse para
mejorar la calidad sanitaria de los quesos, siendo lo ideal el
empleo de leche pasteurizadas, y la puesta en prctica de las
buenas prcticas de fabricacin e incluso el sistema de anlisis
de peligros y puntos crticos de control.
La bioconservacin implica la utilizacin de cultivos
bacterianos inocuos o sus metabolitos, para frenar el
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crecimiento de bacterias patgenas o alterantes en los
alimentos. Las bacterias generalmente empleadas son las La bioconservacin representa una alternativa para mejorar la
cido lcticas, las cuales ejercen su efecto conservador como calidad sanitaria de los quesos blancos frescos, y lograr la
resultado de la competencia por nutrientes y por su capacidad conservacin e inocuidad de los mismos; ms cuando el
de producir cido lctico y otros cidos orgnicos que bajan el empleo de conservantes qumico est limitado por las normas
pH de los alimentos, frenando el crecimiento de bacterias nacionales. Pero adems, el empleo de cultivos fermentadores,
patgenas, que por lo general, necesitan de pH ms elevados permite obtener quesos con caractersticas organolpticas
para crecer. agradables gracias al metabolismo fermentativo y se evitan
Otro mecanismo por el cual tienen poder conservador es la prdidas econmicas debido al desarrollo de forma
produccin de compuestos antimicrobianos (bacteriocinas), tal incontrolada de aromas, sabores y texturas.
como la nisina producida por ciertas cepas de Lactococcus
lactis subsp. lactis, que es usualmente empleada en la
industria de alimentos por su comprobada efectividad
antibacteriana, sobre todo, ante especies Gram positivas como
Clostridum y Staphylococcus. Algunas de las tcnicas
disponibles para

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RESMENES DE TRABAJOS LIBRES

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REA MICROBIOLOGA BSICA

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Efecto inhibitorio de extractos acuoso del Neem (Azadirachta indica) sobre cepas de
Staphylococcus aureus multirresistentes
Aqueous extracts inhibitory effect on strains Neem (Azadirachta indica) multiresistant Staphylococcus aureus

Isai Hernndeza,b, Lilibeth Cabreraa,b, Lorena Atencio a,c, Gisela Colinaa,d

a
Facultad Experimental de Ciencias, Departamento de Biologa, Universidad del Zulia; b Laboratorio de la Maestra en
Microbiologa; c Laboratorio de Gentica y Biologa Molecular;
d
Laboratorio de Microbiologa General
cabreralilibeth@gmail.com

Introduccin. Materiales y mtodos.

La multirresistencia bacteriana es un problema mundial
que ha surgido en los ltimos aos, convirtindose da a da mediante infusin de 2g de hojas frescas en 200 mL de agua
en una tarea difcil de controlar [1, 2], siendo la
automedicacin de los pacientes, el uso inadecuado y masivo
de antibiticos como aditivos en alimentos, las prescripciones
de antibiticos en animales y productos de los mismos para el
consumo humano, causas relevantes de la misma [3, 4].
Una de las especies que muestra ste comportamiento es
Staphylococcus aureus el cual es un patgeno nosocomial que
ha desarrollado adaptaciones para sobrevivir en ambientes
hostiles rodeado de antimicrobianos, volvindose inmune a
ellos y representando un problema intra y extra hospitalario
[5,6]. Las cepas SARM se identificaron por primera vez en
Inglaterra en 1961 [7], dos aos despus de la introduccin de
la meticilina; desde entonces a lo largo de los aos, ha
aumentado su prevalencia con el consecuente desarrollo de
numerosos mecanismos de multirresistencia [8]. Basado en la
medicina natural Ayurvdica [9], los extractos del Neem
resultan apropiados para el control y prevencin de
infecciones [10], dado sus bondades como bioplaguicida,
microbicida, insecticida, antihelmntico, antifngica, entre
otras [11,12,13]. De lo anteriormente mencionado, se plante
el presente estudio el cual se bas en la evaluacin de la
actividad antimicrobiana de extractos acuosos de las hojas de
Neem Azadirachta indica, sobre cepas de Staphylococcus
aureus multirresistentes y poder utilizarlo como tratamiento
alternativo de infecciones causadas por dicho microorganismo
patgeno.
Se obtuvo 20mg/mL de extracto acuoso del Neem
destilada y esterilizada por filtracin con membrana de
acetato de celulosa de 0,22 m (Millipore). La actividad
antibacteriana se evalu con visualizacin de halos de
inhibicin, utilizando la tcnica de difusin de agar en placa
de Kirby-Bauer, en medio Mueller-Hinton (HIMEDIA,
India) suplementado con NaCl al 4% p/v segn las normas
del CLSI [14], con siete cepas de SARM provenientes de
portadores sanos y enfermos (SU1, SU2, SU5, SP15; SP19,
SP21 y SP22), se utiliz la cepa control ATCC 25923.
Adems se hizo la determinacin de la Concentracin Mnima
Inhibitoria (CMI) con diluciones del extracto madre a
concentraciones de 19, 18, 17, 16, 14, 13 mg/mL.
Resultados y discusin.
Todas las cepas SARM resultaron inhibidas por el
extracto acuoso de hojas del Neem (20mg/mL) presentando
un efecto tipo bactericida. La cepa SP22 fue las que mostr
los mayores halos de inhibicin de 8,7 mm al igual que la
cepa ATCC 25923, mientras que en la cepa SP19 result la
menos sensible con un halo promedio de 6,3 mm. El resto de
las cepas mostraron halos entre 7,0 y 7,3 mm como se observa
en la Figura 1.

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result con la menor concentracin inhibitoria de 16 mg/mL
en comparacin con el resto de las cepas SARM.

Tabla 1. Valores promedios de la CMI (mg/mL) del extracto

acuoso de hojas del Neem por cepa SARM.

Cepas CMI
(mg/mL)
SU1 18
SU2 17
SU5 17
Figura 1. Valores promedios de halos de inhibicin (mm) por
efecto de extractos acuosos de hojas del Neem sobre cepas de SP15 17
Staphylococcus aureus multirresistentes. SP19 18
SP21 18
Los halos de inhibicin resultaron similares a los
SP22 16
reportados para cepas de S. aureus aisladas de pacientes con ATCC 25923 18
conjuntivitis, con halos promedios de 8,00 mm [15]. Valores
de 6 mm tambin fueron reportados en extractos etanlico de
Se han reportado valores menores de CMI de extractos
hojas de Neem [16]. Cepas de dicha bacteria patgena
acuosos del Neem. En este sentido, valores de 1 mg/mL
aisladas de leche de vacas con mastitis subclnica, tambin
resultaron letales en un tiempo de 8 horas, mientras que una
resultaron inhibidas por efecto de extractos acuosos de hojas
concentracin de 2mg/mL lo fue en 6 horas [21]. Se indica
del Neem, con halos entre 2 y 18 mm [17]. Tambin se
que cepas de S. aureus, aislada de muestras clnicas resultan
reporta el efecto inhibitorio de hojas del Neem sobre cepas de
inhibidas a una concentracin mnima de 1mg/mL [22], lo
S. aureus tanto sensible como resistente a meticilina,
cual concuerda con lo sealado en hojas y corteza del rbol
obtenindose zonas de inhibicin entre 8 y 19 mm [16]. Halos
Neem [10]. Valores de 6,25 y 3,17 mg/mL resultan inhibitorio
de inhibicin menores de 1,6 0,16 mm fueron reportados
para dos cepas de S. aureus evaluadas con extractos acuoso de
con un 20% de extracto acuoso de Neem, sobre S. aureus
semillas del Neem [23].
[18]. En un trabajo con extractos del Neem encontraron halos
Varios autores han mencionado que los extractos
promedio de inhibicin de 7 mm en placas con S. aureus
vegetales resultan tener mayor efecto inhibitorio del
utilizando 20 g/disc [19]. Con extractos de Neem a una con
crecimiento de bacterias Gram positivas que de las Gram
concentracin de 80 mg/mL, el cual es superior al utilizado en
negativas y esto ha sido atribuido a las diferencias en su
el presente estudio, se ha observado halos de 16 mm en nueve
membrana celular [24, 25]. Por otro lado, se ha resaltado que
cepas de S. aureus [10]. Es posible que concentraciones
las plantas presentan importantes compuestos bioactivos tales
menores de 20 mg/mL, utilizadas en el presente estudio hayan
como alcaloides, flavonoides, taninos y compuestos fenlicos
contribuido a que los halos resultaran menores de 16 mm.
que le confieren la actividad antimicrobiana [26].
Resultados contrarios son donde se encontr resistencia de S.
Actualmente, la prctica Ayurveda es considerado como
aureus de origen clnico a extractos del Neem a una
un sistema vital de la medicina que se ha expandido por todo
concentracin de 170 mg/mL [20].
el mundo ya que las plantas medicinales no presentan
En Tabla 1 se presentan los valores de CMI en mg/mL de
sustancias no txicas [27] y constituyen la base de su uso
cada una de las siete cepas SARM ensayadas. La cepa SP22

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teraputico en los pases en desarrollo [28]. Agua hervida de
hojas de Neem es un excelente antisptico para las heridas
limpias, acta como antiinflamatorio aliviando de esta manera
problemas que se presentan en la piel [29].
Lociones a base de hierbas han resultado tiles para la
inhibicin de S. aureus y E. coli en piel y esto resulta como
tratamiento alternativo en jabones, geles, cremas y lociones
[30].
Las investigaciones sobre el conocimiento de la actividad
antimicrobiana de plantas se intensifica cada da, dado el
inters de comprobar que existen componentes bioactivos que
puedan ser clnicamente tiles, debido al problema eminente
de cepas resistentes a los antibiticos [31].
Conclusiones
Extractos de hojas del rbol Neem mostraron actividad
inhibitoria del crecimiento de cepas de Staphylococcus aureus
meticilina resistente aisladas de infecciones en el hombre. De
esta forma podran ser utilizados para el control de
infecciones bacterianas dado por sus componentes bioactivos,
que muy bien pueden ser obtenidos y combinarse con otros
productos naturales en forma de jarabe o en presentaciones
antispticas en piel, evitando as la resistencia y minimizando
el uso de compuestos txicos para la salud humana y animal.
Palabras clave: Actividad inhibitoria, extractos acuosos
foliar del Neem, concentracin mnima inhibitoria,
Staphylococcus aureus, SARM.
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Demostracin de microorganismo intracelular plaquetario utilizando frotis de capa
blanca en pacientes con sintomatologa de Dengue
Demonstration of platelet intracellular microorganism using Buffy Coat Smear in patients with
symptoms of Dengue

Gmez Garca Maraa,b, Arraga de Alvarado Cruza, Vilchez Pia Alejandraa, Briceo Solarte Rosirisa,
Mrquez Angelinab, Berrueta Maribela, Castillo Machado Elinab, Izaguirre Ana Mariac, Marquez Nora b,
Avila Larreal Ayaria, Barreto Sorad
a
Universidad del Zulia. Laboratorio Regional de Salud Pblica del estado Zulia. c Direccin Regional de
b

Epidemiologa. dAmbulatorio 1 de Mayo

Introduccin: La presencia de microorganismos intracelulares, invasores de las plaquetas y leucocitos en el humano, como
la Ehrlichia, Anaplasma y Rickettsia, son capaces de producir enfermedades emergentes de origen zoontico. Estas
bacterias Gram negativas producen manifestaciones clnicas similares a las del Dengue. El Objetivo fue determinar la
presencia de microorganismos intracelulares plaquetarios usando frotis de capa blanca (FCB) en pacientes con
sintomatologa de Dengue. Materiales y Mtodos: Se atendieron 159 pacientes, en edades de 5 meses a 90 aos, de ambos
sexo, en la Unidad de Investigacin Clnica de la Facultad de Veterinaria (LUZ), desde Mayo a Julio del 2013, a los
cuales se aplic la ficha de sndrome febril ictero hemorrgico. Se obtuvieron 10 ml de sangre, 3 ml con EDTA para el
FCB, que fue coloreado con Dip quick stain Hemacolor y 7 ml para serologa de Dengue procesada con el kit Umelisa
IgM Plus. El anlisis estadstico se realiz con SPSS, a travs de las tablas de contingencia y anlisis de frecuencias
absolutas y relativas. Resultados: De los 159 pacientes estudiados, en 95 (59,70%) se evidenci la presencia de un
microorganismo intracelular plaquetario por FCB, entre ellos 8 (8,42%) positivos a Dengue y 64/159 resultaron negativos
por FCB y positivos a Dengue 8 (12.5%). El sntoma de fiebre, estuvo presente en 80 pacientes, de los cuales 48 (60,0%)
resultaron positivos en el FCB y 32/80 negativos, sin encontrar diferencias significativas en la asociacin de las variables.
Conclusiones: Los resultados revelan que un alto porcentaje de pacientes con sintomatologa de Dengue, presentaron FCB
positivo, lo cual es indicativo de la presencia de un microorganismo intracelular; sin embargo, la confirmacin serolgica a
travs de la IgM anti Dengue fue baja (10,10%) 16/159, por lo que es necesario profundizar el estudio del microorganismo
intracelular detectado mediante FCB.

Palabras clave: Microrganismo intracelular, Ehrlichia spp., Anaplasma spp., Rickettsia spp, Dengue.

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Evaluacin del papel de los autofagosomas durante el ciclo viral del rotavirus
en clulas MDCK-LC3EGFP
Evaluation of the role of autophagosomes during the viral cycle of rotavirus in
MDCK-LC3EGFP culture cells

Prieto Andreaa, Vu Lan-Trangb, Duponchel Sarahb, Trugnan Germainb, Rojas Hectora, Zavala Reinaldoa,
Chemello Mara Elenaa, Aristimuo Carolinaa, Pea Franshellea, Michelangeli Fabina y
Ruiz Marie-Christinea.
a
Laboratorio de Fisiologa Gastrointestinal, CBB-IVIC, Caracas, Venezuela
b
ERL INSERM U1057/UMR7203, ENS-CNRS-UPMC, Paris, Francia

Introduccin: Los rotavirus son la principal causa de gastroenteritis infantil a nivel mundial. Durante el ciclo viral el
inicio del ensamblaje de nuevas partculas ocurre en los viroplasmas y luego en el retculo endoplasmtico (RE) de
enterocitos. Reportes anteriores indican que la va de estrs del RE, especficamente la UPR (Unfloded Protein Response),
y la autofagia son activadas. El papel de estos procesos en la maduracin del rotavirus an no se conoce. En este trabajo
se estudi el proceso autofgico durante el ciclo del rotavirus. Metodologa: Se sigui, a diferentes horas post-infeccin
(hpi) (2, 4, 6, 8, 10 y 12 hpi), la distribucin sub-celular de EGFP-LC3 en monocapas celulares MDCK-LC3EGFP
infectadas con diferentes cepas virales, RF (MOI: 22), OSU (MOI:39), UK (MOI: 18) y DxRRV (MOI: 38), y su
colocalizacin con las protenas virales VP6 y NSP4 por immunofluorescencia indirecta. Se utiliz la microscopia
confocal para la recoleccin de imgenes y el software ImageJ 1.47 para su anlisis. Resultados: A 6hpi, con cada una de
las cepas, no se observaron cambios en el nmero de autofagosomas por clula con respecto a las clulas sin infectar ni
colocalizacin de EGFP-LC3 con NSP4 o VP6, pero si una disminucin en la intensidad de fluorescencia de la EGFP-
LC3 difusa en clulas con mayor acumulacin de protenas virales. En clulas infectadas con RF y UK, el nmero de
autofagosomas aument a partir de 8hpi despus de haber alcanzado la mxima produccin de viriones. En cuanto a la
infeccin con DxRRV no se observ aumento ni en etapas ms tardas (12hpi). La NSP4 producto de la infeccin con RF
y DxRRV no colocaliz con la protena EGFP-LC3, mientras que durante la infeccin con UK, NSP4 colocaliz
parcialmente con EGFP-LC3 a partir de 10hpi. La cepa DxRRV present la mejor produccin viral y UK la ms baja.
Conclusin: El conjunto de resultados parece indicar que el rotavirus no utiliza la va autofgica para su replicacin y
ensamblaje.

Palabras clave: Rotavirus, autofagia, autofagosoma, LC3, NSP4

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Evaluacin preliminar del potencial probitico de Lactobacilos
aislados de fluido vaginal de mujeres sanas
Probiotics preliminary assessment of the potential for isolated lactobacilli
vaginal fluid of healthy women

Salas Osorio Elaysaa,b,d, Jimnez Medina Jos M.a,b,c, Moreno Baptista Rose1ynna,b, Snchez Kiralbaa,b,
Martnez Amaya Carlosd, Medina Ramrez Gerardoa,c
a
Laboratorio de Diagnostico e Investigaciones Microbiolgicas "Prof. Celina Araujo de Prez", b Laboratorio
de Inmunologa. Unidad de Probiticos. Departamento de Microbiologa y Parasitologa, c Seccin de
Biotecnologa, Instituto de Investigaciones, Facultad de Farmacia y Bioanlisis. d Grupo de Investigaciones
Biopatolgicas GIBFO, Facultad de Odontologa, Universidad de los Andes, Mrida - Venezuela.

Introduccin. Grupo de estudio. Mujeres clnicamente sanas, no

Lactobacillus, pertenece a las llamadas bacterias
cido lcticas (BAL), son bacilos o cocobacilos
grampositivos, agrupados en cadenas cortas, no
esporulados, anaerbicos facultativos o microerofilicos,
con requerimientos nutricionales complejos,
homofermentativos y heterofermentativos
Recientemente, algunas especies, se han destacado por
tener propiedades beneficiosas para el individuo,
acundose dentro de la definicin de bacterias
probiticas, abriendo una puerta no tradicional de
restablecimiento de la salud y coadyuvante teraputico
en diferentes patologas humanas [2,3,4,5]. En la
vagina, la microbiota debe permanecer en equilibrio,
para proteger de la colonizacin por patgenos y as
evitar las infecciones. La flora vaginal humana est
formada por una compleja variedad de gneros y
especies donde predominan las bacterias grampositivas,
con una relacin 1:10 entre anaerbicas sobre aerbicas,
donde las especies ms abundantes pertenecen al gnero
Lactobacillus, quienes juegan un papel muy importante
en el mantenimiento y regulacin del pH vaginal y en la
proteccin contra la colonizacin de patgenos externos
[5]. Con base en todo lo anterior, el objetivo del
presente estudio fue evaluar el potencial probitico de
lactobacilos aislados a partir de muestras de fluido
vaginal de mujeres sanas; mediante las pruebas in vitro
de resistencia a la acidez gstrica y sales biliares.
Materiales y Mtodos.
gestantes en edad frtil que acudieron al servicio de
Ginecologa y Obstetricia del Hospital Sor Juana Ins
de la Cruz durante el mes de Mayo de 2011. Haciendo
uso de hisopos estriles se recolectaron muestras de
fluido vaginal, las cuales se inocularon en caldo MRS
[1,2,3]. (HIMEDIA) pH 6,5 e incubaron durante 24 horas a
35C. Posterior al tiempo de incubacin, el caldo MRS
se subcultiv placas de agar MRS (HIMEDIA) pH6,5
utilizando la tcnica de aislamiento en cuatro
cuadrantes, e incubaron a 35C en microaerofilia + CO2
durante 48 horas. Se evaluaron las caractersticas
macroscpicas del crecimiento obtenido y se
seleccionaron colonias sospechosas a las que se les
realizaron las pruebas preliminares del gnero: Tincin
de Gram, Prueba de catalasa, fermentacin de glucosa,
crecimiento a 15C y 45C [1]. La identificacin de
especie se realiz haciendo uso de los sistemas de
identificacin bioqumica API 50CH siguiendo la
metodologa sugerida por la casa comercial. Previo a la
evaluacin del potencial probitico se realiz la
estandarizacin del inculo a 1x10 8 UFC/ml [2]. Para la
prueba de resistencia a la acidez gstrica se inocularon
por duplicado 20 L de la suspensin bacteriana en 10
mL de Caldo MRS suplementado con 3,2 g de pepsina
1000 unid/ mL (HIMEDIA), 2 g de NaCl (Merck),
ajustado a los pH 2, 3 y 4. Se incubaron en bao de
agua sin agitacin a 35C y se realiz el recuento
bacteriano a las O,1, 2 y 3 horas en placas de Agar

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MRS pH 6,5 utilizando la tcnica de siembra en con crecimientos entre 5 y 5,5 log UFC/mL a pH 4; en
superficie. Todas las placas obtenidas fueron incubadas contraste con las cepas 24V4, 24L2 y 14L2 donde se
en microaerofilia + CO2 a 35C durante 24 horas. observaron contajes por debajo de 5 log UFC/ml a pH
Transcurrido el tiempo de incubacin se realiz el 4. Ninguna de las cepas evaluadas present crecimiento
contaje de las colonias expresndolo en unidades a pH 2, resultado que se corresponde con lo observado
formadoras de colonias por mililitro (UFC/mL). El por Alvarado y col y Moreno y col. De las cepas
aumento o mantenimiento del contaje celular con evaluadas, 24V4 y 14V2 presentaron los menores
respecto al control (MRS, pepsina, NaCl, pH 6,5) indic valores (entre 0 y 60 minutos) de retraso en el
la resistencia de las cepas a la acidez ensayada. La crecimiento (D) (D= diferencia entre el tiempo
resistencia a las Sales Biliares se realizo inoculando 20 requerido en minutos para aumentar 0,3 unidades a DO
L de la suspensin bacteriana en 10 mL de Caldo 560 nm del cultivo con y sin sales biliares), lo que
MRS, suplementado con sales biliares Oxbile indica una mayor resistencia a las sales biliares; seguida
(HIMEDIA) a 0.05, 0.1, 0.15 y 0.30%. Los tubos de las cepas 09Lp1, 14L2 y 24L2, con valores de D
obtenidos fueron incubados en bao de agua sin entre 30 y 90 minutos. Mientras que, la cepa 05L
agitacin a 35C realizando medidas de densidad ptica present valores de D mayores de 60 minutos (los
a 560mn (OD560) contra el blanco (medio sin inocular) cuales no pudieron ser determinados, debido a que la
cada hora durante las seis primeras horas, incluyendo el fase exponencial no ocurri durante las primeras 6
tiempo cero y luego a las 24 horas. El aumento o horas de incubacin). Los resultados obtenidos
mantenimiento de la densidad celular con respecto al coinciden con lo reportado por diversos autores al
control (MRS pH 6,5) indic la resistencia de las cepas estudiar lactobacilos potencialmente probiticos
a la concentracin de sales biliares ensayada. aislados a partir de productos lcteos, pastizal de fincas
lecheras, vagina de mujeres sanas, tracto intestinal
Resultados y Discusin. humano y animal.
El estudio de las muestras de fluido vaginal permiti
el aislamiento a nivel macroscpico de 27 cepas Conclusiones.
sospechosas, a las cuales fueron aplicadas las pruebas Todas las cepas evaluadas fueron capaces de resistir
preliminares, descartndose solo tres cepas. Las 24 la acidez gstrica a pH 4 y solo la cepa 14V2 fue capaz
cepas restantes fueron conservadas a -40C en caldo de resistir la acidez a pH 3. Las cepas 24V4 y 14V2,
MRS suplementado con glicerol para su posterior presentaron la resistencia sales biliares ms marcada al
identificacin. Para la identificacin bioqumica, se reportar valores de retraso en el crecimiento (D) muy
seleccionaron al azar 6 cepas las cuales fueron bajos, mientras que la cepa 05L presento los valores
identificadas hasta especie como L. paracasei ssp. ms altos de D. Los resultados obtenidos contribuyen en
paracasei (05L, 24V4, 24L2, 14L2 y 09Lp1) y L. el proceso de bsqueda y caracterizacin de las cepas de
acidophilus (14V2). Al evaluar las propiedades lactobacilos autctonas potencialmente probiticas que
probiticas de las cepas identificadas se obtuvieron los se adelante en la Unidad de probiticos del
siguientes resultados: La cepa 14V2 mostr la mayor Departamento de Microbiologa y Parasitologa de la
resistencia a la acidez gstrica de todas las cepas Facultad de Farmacia y Bioanlisis de la Universidad de
evaluadas, presentando un crecimiento por encima de 5 los Andes. Mrida Venezuela.
log UFC/ml a pH 3. Seguida de las cepas 09Lp 1 y 05L

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Palabras clave: Lactobacilos, vagina, potencial 3. Moreno R, Salas E, Prez-Maldonado C, Jimnez
probitico M. J.M. Potencial probitico de lactobacilos
aislados de heces de lactantes y leche materna
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Efecto de la variacin de las condiciones de cultivo sobre cepas de lactobacilos
analizado por espectrofotometra infrarroja con transformadas de Fourier (ft-ir)
Effect of variation of culture conditions on lactobacilli strains tested by infrared spectrometry with
Fourier transforms (ft-ir)

Jimnez J. M.a,b,c, Salas Osorio E.b,c,d, Moreno R.b,c, Snchez K.b,c, Medina Ramrez G.a,c.
a
Seccin de Biotecnologa, Instituto de investigaciones Facultad de Farmacia y Bioanlisis, b Laboratorio de
Inmunologa. Unidad de Probiticos. Departamento de Microbiologa y Parasitologa,
c
Laboratorio de Diagnostico e Investigaciones Microbiolgicas Prof. Celina Araujo de Prez,
d
Grupo de Investigaciones Biopatolgicas, Facultad de Odontologa, Universidad de los Andes.
Mrida - Venezuela.

Introduccin: Las Bacterias cido Lcticas (BAL) juegan un papel crucial en los procesos de fermentacin en la
produccin de quesos y yogures. Las BAL pueden ser conservadas y comercializadas en forma lquida, congelada, secado
por pulverizacin o secado por congelacin. En el presente trabajo se evalu el efecto sobre la estructura celular y
metabolitos, derivados de la sustitucin del Tween a travs del mtodo espectrofotomtrico FT-IR en cepas de
lactobacilos aisladas de queso fresco artesanal en Mrida, Venezuela. Metodologa: Cinco cepas de lactobacilos 3
Lactobacillus plantarum y 2 L. paracasei se cultivaron en caldo MRS sustituyendo el Tween 80 por Tween 20, 40 y 60
y se incubaron a 30 C durante 48 h. Posteriormente se cosecharon por centrifugacin a 3000 g durante 15 min, el
sobrenadante se decant, lavando dos veces con solucin salina, el sedimento obtenido se sec a 50 C. Por ltimo, se
prepararon las pastillas con KBr y se analiz mediante un infrarrojo con transformadas de Fourier Perkin-Elmer modelo
RX1. A cada tratamiento se le realizaron 10 escaneos con una resolucin espectral de 2 cm-1. Los espectros fueron
analizados en las distintas bandas y los picos caractersticos con la correlacin de Pearson de Excel 2007. Se analizaron
las bandas que corresponden a cidos grasos, protenas, carbohidratos, finger print y zonamixta y picos caractersticos
para cada regin. Resultados: Espectros FT-IR de los lactobacilos cultivados fueron cualitativamente similares, mientras
que las intensidades de banda de hidratos de carbono, protenas y lpidos cambio, indicando que existen variaciones
cuantitativas de los principales componentes bioqumicos celulares, tambin se evidenci por el desplazamiento de los
picos. Conclusin: Se espera realizar otros anlisis estadsticos y tratamientos qumicos y fsicos, que permitan
determinar la posible modificacin de los componentes celulares, los desplazamientos en los picos de los espectros.

Palabras clave: FT-IR, MRS, Tween , Cultivo, Lactobacilos

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Un mtodo simple para la Criopreservacin de la Cianobacteria Filamentosa
Spirulina subsalsa
A Simple Method for Cryopreservation of Filamentous Cyanobacteria Spirulina subsalsa

Sena Luciaa, Gonzlez Meralysa, Sosa Daynet, De Sisto Angela, Parra Jos, Rojas Diego, Inojosa Isvic.
a
Fundacin Instituto de Estudios Avanzados (IDEA)

Introduccin: Spirulina subsalsa es una cianobacteria filamentosa de inters biotecnolgico debido a sus pigmentos
(principalmente ficocianina y ficoeritrina). El mantenimiento de las cianobacterias filamentosas se realiza comnmente
mediante sub-cultivos en serie bajo condiciones no ptimas de crecimiento, debido a que no son fciles de criopreservar,
sobre todo cuando estn presentes bacterias que cohabitan con ellas (cultivos no axnicos). Las tcnicas validadas para
criopreservar este tipo de microalga requieren de equipos sofisticados para generar un gradiente de baja temperatura a una
tasa crtica ptima. En este trabajo proponemos un mtodo simple para criopresevar la cianobacteria filamentosa Spirulina
subsalsa no axnica que asegura la estabilidad gentica y fenotpica de la misma. Metodologa: Para establecer dicho
mtodo se obtuvo la concentracin y combinacin ptima de criopersavantes celulares utilizando un diseo factorial 5 2
que consisti en la aplicacin de 25 tratamientos por triplicado y se sigui una serie de pasos sencillos que procuran evitar
cambios bruscos de temperatura. Resultados: se demostr que el tratamiento 19 con 2,5 % de glicerol y 1,5 % de
dimetilsulfxido (DMSO), gener una viabilidad superior al 70% despus de un periodo de dos meses de criopreservado.
Conclusiones: Este tratamiento no produjo variaciones morfolgicas en la cianobacteria, no afect su tasa de crecimiento,
concentracin de clorofila a ni carotenoides totales (metabolitos). Tampoco indujo variacin gentica en la
cianobacteria, lo cual se observa al utilizar el marcador gentico ERIC-PCR (Enterobacterial Repetitive Intergenic
Consensus).

Palabras clave: Cianobacterias, Criopreservacin, Cultivos no axnicos, Diseo factorial, Variabilidad gentica y
fenotpica.

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Evaluacin de la actividad antimicrobiana del Bromuro de Lauril Dimetil Bencil
Amonio (Gerdex) frente a cepas de Staphylococcus aureus resistente a la meticilina
(SARM) de origen nosocomial
Evaluation of the antimicrobial activity of bromide Benzyl Dimethyl Ammonium Lauryl (Gerdex)
against strains of Staphylococcus aureus resistant to methicillin (MRSA) nosocomial origin

Betancourt Adrianaa, Daz Mariania, Velazco Elsaa

a
Laboratorio de Investigaciones en Bacteriologa Clnica Anaerobia Roberto Gabaldn. Departamento de
Microbiologa y Parasitologa. Facultad de Farmacia y Bioanlisis.
Universidad de los Andes. Mrida- Venezuela

Introduccin: Las infecciones nosocomiales constituyen un problema de salud mundial donde Staphylococcus aureus
resistente a la meticilina (SARM) representa uno de los microorganismos multirresistentes asociados con ms frecuencia
a este tipo de infecciones. En los programas de vigilancia y control se aplican elementos qumicos, tal como el Bromuro
de Lauril Dimetil Bencil Amonio (Gerdex), para la desinfeccin de reas e infraestructuras, mobiliario, equipos e
instrumentos que as lo requieran. Por tal motivo, en la presente investigacin se estableci como objetivo general evaluar
la actividad antimicrobiana del Gerdex frente a 11 fenotipos de SARM de origen nosocomial, aislados tanto de neonatos
con infeccin nosocomial como del personal de salud que labora en la Unidad de Alto Riesgo Neonatal (UARN) del
IAHULA, durante el perodo junio- diciembre 2009. Metodologa: La prueba de susceptibilidad al biocida (Gerdex al
10%) se realiz por el mtodo de dilucin y neutralizacin de acuerdo a la tcnica normalizada por la Asociacin
Francesa de Normalizacin (AFNOR, 1995) y a la Asociacin Espaola de Normalizacin y Certificacin (AENOR,
1997) a cada fenotipo de SARM (los cuales fueron verificados en su identificacin y perfil de resistencia previamente).
Resultados: Se determin que el Gerdex concentrado y en la dilucin 1:5 inhibi el desarrollo bacteriano de los 11
fenotipos de SARM; sin embargo este desinfectante no tuvo actividad antibacteriana en la dilucin 1:10 y 1:50.
Conclusin: El Gerdex solo mostr actividad antimicrobiana en su presentacin pura y en la dilucin 1:5 sobre todos los
fenotipos de SARM evaluados sin distincin de su origen clnico; por lo que se recomienda utilizarlo a estas
concentraciones para lograr una desinfeccin eficaz en la mencionada rea de hospitalizacin.

Palabras clave: Staphylococcus aureus resistente a la meticilina (SARM), Desinfectantes, Bromuro de Lauril Dimetil
Bencil Amonio (Gerdex), Infeccin nosocomial

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Preservacin de la biodiversidad y situacin actual de las colecciones de
microorganismos afiliadas a la FELACC

Davel Graciela1,2, Martos Gladys1,3, Levis Silvana1,4, Panizo Domnguez Mara Mercedes1,5, Weng Alemn
Zulia1,6, Giono Cerezo Silvia1,7, Estrada Mora Juan Carlos1,8, de Filippis Ivano1,9, Trespalacios Alba
Alicia1,10, Rey Arvalo Marcela1,10, Rodrguez Lemoine Vidal1,11, Loperena Lyliam1,12.
1Federacin Latinoamericana de Colecciones de Cultivos, FELACC. 2 INEI, Instituto Nacional de Enfermedades

Infecciosas de ANLIS, Dr. Carlos Malbrn, Buenos Aires, Argentina. 3CERELA, Centro de Referencia de Lactobacilos,
PROIMI, Tucumn, Argentina. 4INEVH, Instituto Nacional de Enfermedades Virales Humanas de ANLIS, Dr. Carlos G.
Malbrn, Pergamino, Argentina. 5INHRR; Instituto Nacional de Higiene Rafael Rangel, Caracas, Venezuela. 6INHEM,
Instituto Nacional de Higiene, Epidemiologa y Microbiologa, La Habana, Cuba. 7C-ENCB, Coleccin de Cultivos de la
Escuela Nacional de Ciencias Biolgicas del Instituto Politcnico Nacional de Mxico, DF, Mxico. 8CDBB-500,
Coleccin Nacional de Cepas Microbianas y Cultivos Celulares, CINVESTAV, DF, Mxico. 9CMRVS, Coleo de
Microoganismos de Referncia em Vigilncia Sanitria, FIOCRUZ, Ro de Janeiro, Brasil. 10CMPUJ, Coleccin de
Microorganismos Pontificia Universidad Javeriana, Bogot, Colombia. 11CVCM, Centro Venezolano de Colecciones de
Microorganismos, Caracas, Venezuela. 12FI, Coleccin de Hongos y Bacterias de la Facultad de Ingeniera, Montevideo,
Uruguay.

Introduccin: La Federacin Latinoamericana de Colecciones de Cultivos (FELACC) agrupa colecciones de

microorganismos de Argentina, Brasil, Colombia, Cuba, Ecuador, Mxico, Per, Uruguay y Venezuela. Debido a la
importancia de la preservacin ex situ de la biodiversidad, el objetivo de este trabajo fue conocer la situacin actual de las
colecciones afiliadas a la FELACC y el material que preservan. Metodologa: Se dise una encuesta que evalu el
estado de las colecciones segn origen y tipo de microorganismos preservados, recursos humanos, financiamiento,
servicios, disponibilidad de catlogos, mtodos de identificacin y preservacin utilizados y sistema de gestin de calidad.
Resultados: Respondieron 38 (68%) de las 56 colecciones de cultivos todas pertenecientes a sectores pblicos y diez de
ellas registradas en la World Federation for Culture Collections (WFCC). La mayora de las colecciones son de
investigacin (25/38) y prestan servicios de identificacin de aislamientos, suministro de cepas para investigacin y
aseguramiento de la calidad, proveen asesoras, y dictan cursos de capacitacin en control de calidad, preservacin y
bioseguridad. De las colecciones, 36/38 tienen un curador y 23/38 cuentan con personal tcnico/profesional especializado.
Treinta colecciones conservan bacterias, 21 hongos, 18 levaduras, 1 algas y 1 microorganismos del dominio Archaea.
Conclusiones: La identificacin polifsica de los microorganismos es comn en las colecciones. La liofilizacin y la
preservacin en nitrgeno lquido estn disponibles en el 30% de las colecciones, mientras que mtodos como subcultivos,
conservacin en agua destilada, bajo aceite mineral y deshidratacin en papel y suelo son usados por el 36%. El catlogo
publicado est disponible en pocas colecciones y la mayora no dispone de financiamiento exclusivo. Con la finalidad de
ofrecer ms y mejores servicios, las colecciones afiliadas a la FELACC comparten sus experiencias y conocimiento, para
afrontar unidas el desafo que implica la preservacin de microorganismos y el registro de la biodiversidad en
Latinoamrica y El Caribe.

Palabras clave: microorganismos, colecciones, biodiversidad, conservacin.

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El Centro Venezolano de Colecciones de Microorganismos (CVCM). 20 aos
apoyando la investigacin y el desarrollo cientfico
The Venezuelan Centre for Microbial Collections (CVCM). 20 years supporting science and
development

Rodrguez Lemoine Vidal, Prez Valduciel Indira, Vitelli-Flores Juana.

Centro Venezolano de Colecciones de Microorganismos. Instituto de Biologa Experimental.
Facultada de Ciencias, Universidad Central de Venezuela
vrodriguezlemoine@gmail.com

Introduccin. perodo (1992-2012) como Laboratorio Nacional de

El Centro Venezolano de Colecciones de Biodiversidad Microbiana.
Microorganismos (CVCM) es una institucin
acadmica, sin fines de lucro, dedicada al estudio, Resultados.
conservacin y uso de la diversidad microbiana. Fue Desde su fundacin hasta la fecha el CVCM ha
creado en el Instituto de Biologa Experimental a partir contribuido al rescate y reconstruccin de valiosas
de pequeas colecciones especializadas construidas a lo colecciones creadas en el pas a lo largo de varias
largo de varias dcadas en escuelas e institutos de dcadas. La aplicacin de mtodos rigurosos de
investigacin de la Universidad Central de Venezuela. aislamiento, identificacin, caracterizacin y
En 1992 se transform en Laboratorio Nacional de conservacin de microorganismos ha permitido la
Servicio a la Investigacin (Programa BID-CONICIT- incorporacin selectiva de cepas autctonas o
UCV) y ms tarde en Unidad Integral de Servicio a la adquiridas de inters actual o potencial para actividades
Investigacin (Programa CDCH-UCV). Actualmente de investigacin bsica y sus aplicaciones en diferentes
funciona como un repositorio nacional de biodiversidad campos del conocimiento.
microbiana que garantiza el uso y aplicaciones de Actualmente el CVCM registra ms de 3.000
microorganismos en medicina, agricultura animal y cultivos puros, viables disponibles para distribucin
vegetal, industria de medicamentos, alimentos y inmediata en todo el territorio nacional. La data est
bebidas, petrleo, petroqumica y conservacin del organizada en 6 secciones especializadas: I. bacterias
medio ambiente. Contribuye en forma permanente a la aisladas en ecosistemas naturales o intervenidos; II.
formacin de capital humano en reas de su bacterias tipo y mutantes de inters en estudios
competencia. Est incorporado al sistema internacional genticos y fisiolgicos; III. hongos filamentosos y
de colecciones de cultivos como miembro activo de la levaduriformes; IV. bacterifagos; V. plsmidos y VI.
World Federation for Culture Collections (WFCC), y vectores de clonacin. El sistema CVCM publica un
como miembro fundador de la Federacin catlogo en versiones impresa (Figura 1) y electrnica
Latinoamericana de Colecciones de Cultivos que puede ser consultado en la pgina web del CVCM:
(FELACC). www.cvcm.ciens.ucv. o en lnea a travs del sistema

Metodologa.
Se examina y evalan la organizacin, funciones,
servicios y asesoras prestadas por el CVCM durante el

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X Congreso Venezolano de Microbiologa Ada Martnez de Gallardo
data sobre las colecciones del Instituto Nacional de
Higiene Rafael Rangel (nodo INHRR) est incorporada
al catlogo internacional. Hasta el presente se han
realizado ocho ediciones del catlogo impreso. y su
evolucin se observa en la figura 2.
Servicios y asesoras. El CVCM presta servicios de
asesora tcnica sobre aislamiento, identificacin,
caracterizacin, conservacin, almacenamiento,
transporte, uso y aplicaciones de microorganismos para
actividades de investigacin bsica y sus aplicaciones.
La distribucin de cepas de microorganismos se hace

Figura 1: Portada del catalogo 2013 del Centro bajo la solicitud de instituciones pblicas y privadas con
Venezolano de Colecciones de capacidad instalada para el manejo seguro y uso
Microorganismos. Octava edicin.
adecuado de microorganismos.
internacional de datos sobre microorganismos (World
Data Centre for Microorganisms) de la WFCC.
Consulta en lnea: http://www.wfcc.info/ccinfo/815. La

Figura 2: Evolucin de las colecciones del CVCM. Nmero de cultivos de bacterias incorporados. Catlogos publicados
(columnas). Nodos de servicio asociados y cepas incorporadas por los nodos principales. Principales fuentes de
financiamiento.

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Figura 3: Distribucin de solicitudes de servicio. A) Solicitudes de servicios por reas; B) Universidades: solicitudes de
servicios de identificacin, conservacin y cultivos para actividades de investigacin y docencia; C) Empresas industriales,
laboratorios, clnicas y hospitales: solicitudes de servicios de identificacin, conservacin y cepas.
Conclusiones y recomendaciones.

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A lo largo de los aos el CVCM se ha ido Referencias
fortaleciendo mediante la aplicacin de polticas de 1. Rodrguez Lemoine, V. (1992) Banco de plsmidos,
bacterias, bacterifagos y vectores de clonacin de
incorporacin selectiva y permanente coleccin
inters en biotecnologa de avanzada. Avances en
abierta- de pequeas colecciones especializadas o de Gentica 35-43
2. Rodrguez Lemoine, V. (1996) The Venezuelan
grupo de cepas de referencia, inters acadmico,
Centre for Culture Collections (CVCM), a new
diagnstico o industrial. Durante el perodo bajo institution devoted to the preservation of microbial
diversity: Culture Collections to improve the quality
consideracin se registra una apreciable demanda de los
of life. En: Sanson et al. Eds. ISBN 90-70351-33-1
servicios asignados al CVCM como laboratorio pp 224-225
3. Rodrguez Lemoine, V. (1998). Microbial
Nacional de Referencia de la Diversidad Microbiana en
Resources Centers and sustainable development.
Venezuela (Figura 3). What is going on Venezuela? ATCC workshop on
microbial resources centers and sustainable
Se concluye que la forma organizativa-funcional
development. Manassas. Estados Unidos.
adoptada por el CVCM potencia el aprovechamiento de 4. World Data Centre for Microorganisms.
http://www.wfcc.info/ccinfo. CVCM 815
los recursos acadmicos identificados en las
5. Rodrguez Lemoine, V., Prez Valduciel, I., Alves,
universidades e institutos de investigacin y desarrollo B., Vitelli-Flores, J. Centro Venezolano de
Colecciones de Microorganismos. Repositorio
del pas, contribuyendo en conjunto a la preservacin
nacional de diversidad microbiana. XXXIV
del patrimonio gentico disponible en nuestro medio. Jornadas Venezolanas de Microbiologa. Puerto La
Cruz, octubre 2011
En conclusin se propone tomar al CVCM como
6. Rodrguez Lemoine, Vitelli-Flores, J. (2013)
modelo organizativo para la creacin definitiva del Catlogo CVCM 2013. Octava edicin. ISSN:1316-
3604. 2013:611 pp.
Sistema Nacional de Colecciones de Microorganismos
(SNCM-VEN) para garantizar la conservacin,
Financiamiento.
disponibilidad, uso y aplicaciones de la biodiversidad
CDCH PSU-03-7713 2009
microbiana presente en los ecosistemas que ocupan CDCH. PI-03 00 6822 2007.
territorio nacional. UISI 03 00 6162 2005 Sistema Nacional de
Colecciones de Microorganismos (SNCM).

Palabras clave: Diversidad microbiana, repositorio,

colecciones microorganismos.

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Ensayos biolgicos para la determinacin semicuantitativa de fenilalanina en
alimentos, empleando cepas de Bacillus subtilis y Proteus mirabilis
Biological essays to semi-quantitative detection of phenilalanine in food, using Bacillus
subtilis and Proteus mirabilis strains

Ortiz-Crdova, Maribela,d *; Aguilar-Garca, Carlosb; Vitelli-Flores, Juanac, Prez-Valduciel, Indirac

Rodrguez-Lemoine; Vidalc
a
Instituto de Ciencia y Tecnologa de Alimentos, Universidad Central de Venezuela (ICTA-UCV).
b
Departamento de Tecnologa de Alimentos, Universidad de Oriente - Ncleo Nueva Esparta (UDO).
c
Centro Venezolano de Colecciones de Microorganismos (CVCM). d Laboratorio de Control de
Calidad Servicio de Alimentacin del Ejrcito (SEALEJ)

*Correspondencia autor principal:

Email: zelmar@cantv.net, cvcm@ciens.ucv.ve

Introduccin. En la presente investigacin, se describen dos

La fenilcetonuria es una enfermedad metablica
provocada por un defecto congnito debido a la
carencia de la enzima fenilalanina-hidroxilasa. Como
resultado, la fenilalanina (Phe) se acumula en la sangre
y en determinado porcentaje es excretada por la orina.
La acumulacin progresiva de este aminocido, puede
causar severos daos cerebrales y hasta retardo mental
irreversibles en los primeros aos de vida. En pacientes
que presentan una concentracin superior a 8-10 mg/dl
de Phe en sangre, debe establecerse de inmediato un
control dietoteraputico, con baja concentracin del
aminocido.
Como un aporte a la formulacin de una dieta para
pacientes con fenilcetonuria, se analizaron las materias
primas (harinas de diferente origen) y una pasta
alimenticia preparada con bajas concentraciones de Phe
(56,22 mg Phe/100 g de pasta cruda y 47,46 mg
Phe/100 g de pasta cocida), determinada mediante
analizador de aminocidos Biochrom 30. La cantidad
admisible para estos pacientes segn Shils [1], oscila
entre 70 y 15 mg/kg de peso corporal para nios
lactantes de 0 a 12 meses, y vara entre 40 y 15 mg/kg
de peso corporal para nios de 1 a 11 aos. Segn elabor una pasta compuesta con harinas provenientes
Macleod y Ney [2] las valores de ingestin de Phe/da
varan entre 200 y 700 mg dependiendo del sexo y la
edad.
ensayos biolgicos, como alternativas rpidas para la
determinacin semicuantitativa de Phe en el producto
arriba sealado y sus materias primas.
Ensayo A: Consisti en una adaptacin del
mtodo de inhibicin bacteriana de Guthrie, utilizado
para cuantificar el aminocido en fluidos (sangre,
suero, plasma, orina), mediante la activacin de
esporas de Bacillus subtilis spizizenii en agar PKU con
-2 tienilalanina. La reactivacin de las esporas es
impedida por el compuesto -2-tienilalanina,
antagonista de la Phe. La presencia de Phe inhibe al
efecto antagnico del compuesto permitiendo el
crecimiento de la bacteria, formando halos [3].
Ensayo B: Basado en la capacidad que tiene
Proteus mirabilis de desaminar el aminocido
aromtico Phe a cido fenilpirvico, por accin de la
enzima fenialanina-desaminasa, produciendo acidez, la
cual se evidencia por una coloracin verde-azulada en
presencia de cloruro frrico (FeCl3) al 10 % [4, 5].
Materiales y mtodos.
Preparacin de la pasta: Para este estudio se
de maz desgerminado, arroz pulido y almidn de yuca
fosfatado parcialmente gelatinizado, en proporcin
20:20:60, respectivamente.

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Hidrolizados de los alimentos: Se efecto una solucin de FeCl3 al 10 % [4, 5], obtenindose una
hidrlisis cida de los componentes de formulacin y coloracin verde-azulada. Para establecer la
de las pastas en su forma cruda y cocida, en presencia sensibilidad del mtodo se prepararon patrones,
de cido metanosulfnico 4 M con 0,2 % de sembrando el microorganismo en tubos del medio
triptamina, realizada en bao seco a 106 C y en diluido, conteniendo concentraciones decrecientes de
condiciones de vaco por 16 horas. El contenido en mg DL-Phe (2 0 mg por ml) y manteniendo constantes los
de Phe por anlisis de aminocidos en 100 g de elementos nutritivos. Se obtuvieron diferentes
muestra, result ser: almidn de yuca 1,09; harina de intensidades de coloracin azul-verdoso, segn las
maz desgerminada 87,79; harina de arroz pulido concentraciones de Phe presente en el agar. El ensayo
138,81; pasta cruda 56,20 y pasta cocida 47,46. Estos con las muestras se realiz sembrando el
procedimientos fueron realizados en el Instituto microorganismo en el bisel del mismo medio sin Phe,
Nacional de Tecnologa Agropecuaria INTA- donde el aminocido fue aportado por los hidrolizados
Argentina. de las muestras, colocados en el medio antes de
Cepas empleadas en los bioensayos: B. subtilis solidificar el agar, en proporcin de 0,6 ml en 2 ml de
spizizenii (ATCC 6633, CVCM 1609) y P. mirabilis medio sin Phe. Despus de la incubacin (37 C/24 h)
(ATCC 35659, CVCM 620), adquiridas en el Centro se revel la reaccin con el FeCl3.
Venezolano de Colecciones de Microorganismos
(CVCM). Resultados y discusin.
Determinacin de la concentracin de L- Por el mtodo A, los halos de crecimiento
fenilalanina (L-Phe) por el mtodo A: Se elabor obtenidos de las muestras (Figura 1a) fueron
previamente una curva patrn, sembrando las esporas comparados con los halos de crecimientos de las
de Bacillus subtilis en placas con el medio PKU/-2 diferentes concentraciones de L-Phe establecidas para la
tienilalanina de Himedia M398 [6, 7], colocando en la curva patrn (Figura 1b). Las concentraciones de L-Phe
superficie discos de papel de filtro de 6 mm de presente en los hidrolizados de las muestras en relacin
dimetro, impregnados con distintas concentraciones a la curva patrn (Figura 2) fueron: almidn de yuca
del aminocido (desde 0 - 5,43 mg L-Phe/ml). Se fosfatado parcialmente gelatinizado (Y): 0,15 mg L-
incubaron a 37 C/24 h y la formacin de halos de Phe/ml, harina cruda de arroz pulido (A): 0,68 mg L-
crecimiento obtenida fue proporcional a la Phe/ml, harina cruda de maz desgerminado (M): 0,58
concentracin de L-Phe. Para la cuantificacin de Phe mg L-Phe/ml, mientras que para la pasta cruda (P) y
en los alimentos, se realiz el mismo procedimiento, cocida (P2), las concentraciones de L-Phe/ml, fueron de:
utilizando discos impregnados con los hidrolizados. Los 0,70 y 0,40 mg, respectivamente.
halos de crecimiento fueron comparados con los de las Los resultados obtenidos, muestran una alta
concentraciones establecidas por la curva patrn. sensibilidad del mtodo aplicado a los alimentos,
Determinacin de la concentracin de Phe por el pudiendo medir concentraciones menores de 1,21mg de
mtodo B: Se sembr un cultivo de P. mirabilis en Phe/ml de hidrolizado.
medio agar fenilalanina de Himedia M281 (bisel), el
cual contiene 2 mg del aminocido DL-fenilalanina
(DL-Phe) por 1 ml del medio. Despus de 24 h de
incubacin a 37 C se cubri la superficie con una

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(a) (b)
Figura 1. Halos de crecimiento de B. subtilis spizizenii. (a):
materias primas y pastas, donde Y: yuca, M: maz, A: arroz P:
pasta cruda, P2: pastas con coccin, B: blanco. (b): patrones de
L-fenilalanina (L-Phe), donde 1: 5,43 mg Phe/ml; 2: 3,62
mg/ml Phe; 3: 1,21 mg Phe/ml; 4: 0,81 mg Phe/ml; 5:1,80 mg
Phe /ml y disco central: Blanco.
Figura 2. Curva patrn de la concentracin de fenilalanina
(Phe) y valores de las muestras analizadas en relacin a los
halos de crecimiento de B. subtilis spizizenii.
Por el mtodo B, en los patrones de color se pudo
evidenciar las diferentes intensidades de verde-azulado,
en los medios de cultivos con concentraciones de DL-
Phe desde 2 mg, hasta la menor concentracin visible al
ojo humano (0,0313 mg DL-Phe/ml de medio), tal
como se observa en la Figura 3a. A menor
concentracin de Phe, menor intensidad en la
coloracin.
En los tubos donde se aadieron los hidrolizados de
las muestras (Figura3b), no se evidenci cambio en la
coloracin, a excepcin de la muestra de harina de arroz
pulido, donde si se observ un ligero cambio de color
verde. En base a los valores obtenidos por el anlisis de
aminocidos, se calcularon las cantidades de Phe que
aportaron los hidrolizados por ml de medio. Estas
cantidades fueron de: almidn de yuca fosfatado
parcialmente gelatinizado (Y): 0,0007, harina de arroz
pulido (A): 0,0331 harina de maz desgerminada (M):
0,0183, mientras que para las pastas cruda (P) y cocida
(P2), las concentraciones de L-Phe fueron de: 0,018 y
0,0126 mg, respectivamente. Los valores concuerdan
con la falta de coloracin al revelar la reaccin, a
excepcin de la muestra correspondiente a la harina de
arroz, cuyo valor fue cercano a la mnima apreciable
(0,0313 mg DL-Phe/ml de medio) y se demuestra la
baja concentracin del aminocido en las pastas
elaboradas y sus materias primas.
Los resultados obtenidos por el mtodo B, permiten
entonces detectar concentraciones mayores a 0,0313
mg de Phe/ml de medio.
(a)
Blanco
(b)
Figura 3. Patrones de intensidad de color para la
determinacin de fenilalanina (Phe). (a): Disminucin del
color por la concentracin decreciente del aminocido Phe
presente en el medio, comparado con un blanco (ltimo tubo).
(b): Medio sembrado conteniendo los hidrolizados de las
muestras (Y: almidn de yuca, M: harina de endospermo de
maz, A: harina de arroz pulido, P1: pasta cruda y P2: pasta
cocida). Slo se observ, al ojo humano, cambio de color en la
harina de arroz pulido (tubo A), al aplicar al csped de P.
mirabilis la solucin de FeCl3 .
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Conclusiones.
Los mtodos descritos resultaron adecuados para la
determinacin de Phe en alimentos, previa hidrolisis
cida de los mismos, en presencia de triptamina, y tiles
para la semicuantificacin del aminocido en productos
destinados al plan dietoteraputico para pacientes
fenilcetonricos.
Por el mtodo A, basado en la difusin del
aminocido en el medio, cuyo efecto antagnico del
inhibidor permite la formacin de halos de crecimiento
de B. subtilis, se pudo determinar que las pastas
alimenticias elaboradas y sus materias primas contienen
concentraciones inferiores a 1,21 mg de Phe/ml de su
hidrolizado. En el mtodo B, basado en la reaccin
bioqumica de desaminacin de la Phe por el P.
mirabilis, se pudo determinar que en las pastas
elaboradas y las harinas presentaron concentraciones
inferiores a 0,0313 mg Phe/ml de medio, a excepcin de
la harina de arroz pulido.
Los resultados muestran que el contenido de Phe
tanto en las materias primas como en las pastas
elaboradas cruda y cocida, es inferior a la cantidad
estipulada y permisible segn lo reportado por Shils [1]
y Macleod y Ney [2]. Segn la tabla de procionamiento
de la universidad del Zulia (LUZ) [8], una porcin
pequea de pasta alimenticia corresponde a 25g. Esta
porcin de la pasta formulada para un nio de 8kg
aportara un 11,87 mg Phe/kg de peso corporal /da, lo
que representa el 2,1% de la ingesta diaria permitida.
Ambas metodologas, aunque basadas en distintos
principios, representan un aporte til para
determinacin semi-cuantitativa de fenilalanina en
alimentos y sugieren ser una alternativa
laboratorios o empresas dedicadas a la elaboracin de
productos destinados a la poblacin con rgimen
especial de alimentacin.
Palabras clave: Ensayos biolgicos, Fenilcetonuria
(PKU), Fenilalanina, Desaminacin, -2-Tienilalanina,
Alimentos.
Referencias.
1. Shils, M. Nutricin en salud y enfermedad. Vol. 2.
Novena Edicin. 2006. Mcgraw-Hill
Interamericana editores, S.A. Mxico, D.F.
2. Macleod E., Ney D. 2010. Tratamiento Nutricional
de la fenilcetonuria. Annales Nestl. Karger
Medical and Scientific Publisher. 68(2):6071
3. Jinks, D., Guthrie, R. Simplified procedure for
producing Bacillus subtilis spores for the Guthrie
L-Phenylketonuria and Other Microbiological
Screening Tests. J. Clin. Microb. 1985; 21(5):826-
829
4. Cortes, J. Fenilalanina desaminasa. Ensayos
microbiolgicos. Pruebas bioqumicas. Recursos
didcticos para microbiologa. 2001
5. Lippincolt, W. y Wilkins. Prueba de fenilalanina
desaminasa. En: Mac Faddin. Pruebas bioqumicas
para la identificacin de bacterias de importancia
clnica. Capitulo 34. 3era Tercera edicin. 2003.
Editorial Mdica Panamericana. Estados Unidos.
6. Demain, A. L. Minimal media for quantitative
studies with Bacillus subtilis. J. Bacteriol., 1958;
75:517-522.
7. Guthrie R., Tieckelmann H. The inhibition assay:
Its use in screening urinary specimens for
metabolic differences associated with mental
retardation. Proceedings of the London Conference
on The Scientific Study of Mental Deficiency, ed.
Richards, BW, May & Baker Ltd. (Dagenham).
1960. 2:672.
8. Universidad del Zulia (LUZ). Tabla de
porcionamiento y raciones de alimentos. Tablas del
proyecto Venezuela. Escuela de nutricin y
diettica. Ctedra de nutricin normal. Facultad de
la
medicina. 1983
para
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Anlisis de la composicin de la pared celular y de la expresin del gen CDC42,
en cultivos en fase levaduriforme de Paracoccidioides spp,
suplementados con suero de caballo
Analysis of cell wall composition and CDC42 gene expression in yeast phase cultures of
Paracoccidioides spp. supplemented with horse serum

Moreno Da, Villalobos Ha, Nio-Vega Ga.

a
Centro de Microbiologa y Biologa Celular, Instituto Venezolano de Investigaciones Cientficas,
Caracas, Venezuela
dubi2909@gmail.com

Introduccin: Paracoccidioides spp. son agentes causales de la paracoccidioidomicosis. Son hongos trmicamente dimrficos: a
temperatura ambiente crecen en forma micelial y a 37C crecen en forma levaduriforme multigemante. Actualmente se acepta la existencia
de tres especies crpticas: S1, PS2 y PS3, del complejo P. brasiliensis y Paracoccidioides lutzii. Cdc42 es una GTPasa, que actualmente se
relaciona con cambios morfolgicos en Paracoccidioides brasiliensis. Por otro lado, se ha descrito que la composicin de la pared celular en
hongos afecta directamente la morfologa presentada por el organismo. En P. brasiliensis el suero de caballo ha sido utilizado como
suplemento en el medio de cultivo con el fin de restaurar la cantidad habitual de -1,3-glucn de la pared celular de la forma levaduriforme
del hongo anteriormente mencionado. El presente estudio pretende determinar si los cambios morfolgicos observados pueden relacionarse
con cambios en la composicin bioqumica de la pared celular, modificacin en los niveles de expresin del gen CDC42, o con ambos, en
cultivos de la fase levaduriforme de P. brasiliensis y P. lutzii, lo cual podra indicar posibles blancos especficos para el desarrollo de
antifngicos efectivos. Metodologa: Cepas Pb73 (P. brasiliensis) y Pb 01 (P. lutzii), medio PYG lquido con y sin suplemento de suero de
caballo al 5%, mediciones morfomtricas, RT-PCR en tiempo real, fraccionamiento de la pared celular, espectroscopia de infrarrojo y
determinacin bioqumica de componentes de pared. Resultados: Se observ disminucin del rea de ambas cepas, variaciones en
componentes bioqumicos como hexosas, aminoazcares y aminocidos en Pb73 y Pb01 en diversas fracciones de la pared celular y
disminucin de la expresin de CDC42 en Pb73. Conclusin: Se observ variacin de la composicin bioqumica de la pared,
disminuyendo y variando el rea y aspecto morfolgico influenciado en parte por la expresin del gen CDC42.

Palabras clave: Paracoccidioides spp., CDC42, pared celular

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Capacidad degradadora de hongos aergenos aislados en la campana de extraccin
del laboratorio de VASSA, S.A. sobre desechos del ensayo del punto de anilina para
aceites minerales
Capacity degrading airfungi isolated in the laboratory hood of VASSA, SA on waste aniline point
test for mineral oils

Mrquez R Mara A.a*, Navas Y. Patricia C.b, Lpez R. Eveymar C.a y Yegres E. Jos F.b
a
UNEFA sede Coro; bLIADSA-UNEFM.

*Correspondencia autor principal

Email: ma_marquezr@hotmail.com

Introduccin. requiere para su aplicacin de la evaluacin de la

En Venezuela, especficamente en la industria del
petrleo y sus derivados, la anilina se emplea para la
realizacin del ensayo de laboratorio denominado punto
de anilina, el cual permite caracterizar hidrocarburos
puros o mezclas de hidrocarburos, siendo por su
sencillez y confiabilidad el ms utilizado para
proporcionar una estimacin del contenido de
aromticos, lo que cobra relevancia al tratarse de un
pas de gran potencial petrolfero [1].
Sin embargo, el inconcluso sistema de manejo y
disposicin de desechos peligrosos venezolanos trae
como resultado que algunas empresas mantengan
almacenados los desechos de sus procesos productivos
[2]; realidad que se refleja en la existencia de alrededor
de diecisiete mil (17.000) fosas petroleras donde se han
almacenado por dcadas desechos de las actividades de
exploracin y produccin de hidrocarburos en el pas
[3]. Venezuela, no escapa a esta realidad y empresas del
sector como Aceites y Solventes Venezolanos VASSA,
S.A enfrentan esta situacin da a da en su laboratorio
al realizar ensayos de calidad sobre sus productos.
Uno de los ensayos realizados por esta empresa es el
anlisis del punto de anilina para aceites minerales el
cual genera desechos de gran toxicidad que han sido
almacenados durante trece aos en las instalaciones de
la empresa a la espera de un tratamiento factible.
Por esta razn, surge la iniciativa de ofrecer una
solucin a travs de la biorremediacin, tratamiento que
capacidad degradadora de los hongos aergenos
aislados en la campana de extraccin del laboratorio de
VASSA, S.A. sobre desechos del ensayo del punto de
anilina para aceites minerales lo cual constituye el
objeto de este estudio.
Material y mtodos.
Caracterizacin fisicoqumica de los desechos del
ensayo del punto de anilina. Obtencin de los desechos
del ensayo del punto de anilina para aceites minerales,
los cuales fueron suministrados conjuntamente con su
respectiva hoja de seguridad por la empresa Aceites y
Solventes Venezolanos VASSA, S.A, contenidos en una
caja con material absorbente y dos (2) botellas mbar de
cuatro (4) litros previamente identificadas, las cuales se
extrajeron al azar del depsito de almacenamiento de
sustancias peligrosas de la planta y fueron trasladadas a
la ciudad de Santa Ana de Coro bajo previa autorizacin
del gerente de planta, el jefe del laboratorio y el jefe de
seguridad industrial. Se evalu el punto de ebullicin
segn mtodo de Siwoloboff [4], densidad de cada una
de las fases del desecho a travs de procedimientos
establecidos por las normas COVENIN 356-1994 [5] y
viscosidad con viscosmetro Rotacin Brookfield
modelo DV-11.
Identificacin de los hongos aergenos aislados de la
campana de extraccin del laboratorio Aceites y
Solventes Venezolanos VASSA, S.A.: El aislamiento de

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los hongos aergenos se efectu mediante la tcnica de Anlisis estadstico: La significancia fue dada a partir
sedimentacin en placas propuesta por Omeleanski [6], de un anlisis de comparacin de media a partir de un
el cual consiste en colocar cuatro (4) placas de petri ANOVA de un factor a travs de comparaciones
contenidas con medio de cultivo Sabouraud Dextrosa mltiples de post hoc asumiendo varianzas a travs de
Agar (SDA) previamente esterilizadas, a las Tukey, entre la velocidad de crecimiento, medios de
instalaciones del Laboratorio de Aceites y Solventes cultivos (alternando las fuentes de carbono) y
Venezolanos VASSA; S.A, donde se abrieron por microorganismos (A. niger, A. flavus y Rizhopus sp.)
quince (15) minutos en las esquinas de la campana de donde la media y la desviacin estndar fueron tomadas
extraccin en la que se generan los desechos del punto de una distribucin de contraste normal calculados a
de anilina. Para luego ser incubadas durante siete (7) partir de dichos datos teniendo una confiabilidad del
das en un rango de temperaturas del laboratorio de 28 95%. Los datos se analizaron utilizando paquete
32C. Para la identificacin de los gneros se emple el estadstico Minitab versin 15.0 para Windows.
estudio micolgico: macroscpicas (color, textura y
crecimiento) y microscpico mediante microcultivo en Tabla 1. Medios de cultivo para el estudio de tolerancia
de los hongos aislados a los desechos del ensayo del
lmina (morfologa y conidiognesis) Riddel [7].
punto de anilina para aceites minerales.
Capacidad degradadora de los hongos aergenos
Identificacin del
aislados sobre desechos del ensayo del punto de anilina Composicin
grupo
para aceites minerales. Preparacin del inoculo: se Grupo 0 MD sin ninguna de las fases del
desecho
tomo una azada de esporas y fue sembrado en medio de Anilina 1 MD + 10 mM de Anilina
Anilina 2 MD + 50 mM de Anilina
cultivo Sabouraud lquido, en condiciones de Anilina 3 MD + 100 mM de Anilina
esterilizacin, los frascos se colocaron en agitacin a Aceite 1 MD + 1 ml de aceite / litro de medio
de degradacin
130rpm por 15 das a temperatura del laboratorio 25- Aceite 2 MD + 5 ml de aceite / litro de medio
de degradacin
28C. Medio de cultivo: medio de degradacin (MD) Aceite 3 MD + 10 ml de aceite / litro de medio
agar 1.5%, NaNO3 0.2%, K2HPO4 0.01%, MgSO4.7H2O de degradacin

0.005%, KCl 0.005%, FeSO4 0.001%. En la tabla 1. Se

observa los medios de cultivo para el estudio de la
Resultados y discusin.
tolerancia.
Propiedades fisicoqumicas de los desechos del
La degradacin slida se realiz por triplicado a
ensayo del punto de anilina para aceites minerales. Los
diferentes concentraciones de las distintas fases del
resultados expuestos en la tabla 2 expresan una
desecho del ensayo del punto de anilina para aceites
diferencia del 16,48 % entre el punto de ebullicin
minerales por separado. Con el objeto de seleccionar los
experimental de la anilina con respecto al terico,
hongos y las concentraciones a emplear en el desarrollo
adems de un 4,03 % en el caso de la densidad y un
de las siguientes etapas de la investigacin mediante la
12,64 % de diferencia en la viscosidad; esto como
deteccin de inhibicin en el crecimiento micelial. El
consecuencia de que al tratarse de un desecho, no se
cual consisti en medir diariamente el dimetro de
manejan sustancias puras en su totalidad.
crecimiento con un vernier desde cuatro (4) puntos
Adicionalmente, el almacenaje durante el transcurso de
equidistantes del centro de crecimiento de cada hongo.
trece aos de este desecho, es un factor significativo en
Luego de quince (15) das se determin la velocidad de
la discrepancia entre los valores experimentales y
crecimiento micelial en centmetros por da.

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tericos. No obstante, la diferencia de densidad de una Tabla 3. Especies encontradas en la campana de flujo
fase con respecto a la otra crea la inmiscibilidad de la Especie
Cantidad de Porcentaje
colonias (%)
anilina con el aceite mineral y la disposicin de las
Aspergillus niger 7 38,89
fases en los envases que contengan el desecho; donde la
Aspergillus flavus 6 33,33
anilina al ser ms densa se va al fondo del recipiente.
Rhizopus sp. 4 22,22

Tabla 2. Propiedades fisicoqumicas de los desechos del Saccharomyces cerevisiae 1 5,56

ensayo del punto de anilina para aceites minerales. 18 100,00
Total de colonias
Valor
Valor
Propiedad Valor para terico El estudio de la tolerancia de los hongos a las
para Fase
fisicoqumica fase anilina para
aceite distintas fases de los desechos del ensayo del punto de
anilina
Punto de anilina para aceites minerales arroj resultados comunes
154C 184,4C 122C
ebullicin
para todos los microorganismos, en cuanto a lo que se
0,8366
Densidad 0,9808g/ml 1,022g/ml
g/ml refiere a la mejor concentracin de anilina y a la mejor
Viscosidad 3,8 Cp. 4,35 Cp. 3,3 Cp. concentracin de aceite, donde anilina 1 y aceite1,
resultaron ser las concentraciones de menor inhibicin

Identificacin de los hongos aergenos aislados de en el crecimiento, esto como consecuencia de la

la campana de extraccin del laboratorio Aceites y utilizacin del sustrato como fuente de carbono. Dicha

Solventes Venezolanos VASSA, S.A. Se obtuvo un seleccin se bas en comparaciones realizadas entre las

total de 18 colonias aisladas a partir de la tcnica de velocidades de crecimiento micelial de los distintos

sedimentacin en placas aplicada en la campana de hongos a distintas concentraciones de anilina y aceite,

extraccin del Laboratorio de Aceites y Solventes cuyos resultados se resumen en la siguiente tabla 4 y

Venezolanos VASSA, S.A. Segn el estudio de las figura 1:

caractersticas macroscpicas y microscpicas de cada

colonia, (tabla 3), se pudo conocer cuatro especies de
hongos diferentes: Aspergillus niger, Aspergillus flavus,
Rhizopus sp. y Saccharomyces cerevisia, Aspergillus
niger fue la especie ms frecuente con un 38,89 %
seguida muy de cerca por Aspergillus flavus con un
33,33 %, resultado acorde con mltiples investigaciones
que buscan detectar flora fngica en el aire venezolano
donde el gnero Aspergillus es el ms frecuente [8]. La
aparicin de la especie Saccharomyces cerevisiae
caracterstica de ambientes donde se manejan vinos y
Figura 1. Comparacin de las velocidades de
harinas se atribuye al consumo de alimentos que se crecimiento micelial.*significancia estadstica (p<0.05)
realizaba en el laboratorio durante la toma de muestra.

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Tabla 4. Promedio de las velocidades de crecimiento ambiente limpio. El gnero Aspergillus fue el ms
micelial.
frecuente con un porcentaje de 38,89%, en el aire de la
Velocidad de crecimiento (cm/da) campana de extraccin de VASSA S.A. Se estableci
un medio de composicin definida para el estudio de
Grupo A. niger A. flavus Rhizopus sp.
tolerancia. La comparacin de la tolerancia de A. niger
(MD) SFC 0,3667 0,0073 0,4378 y A. flavus sobre los desechos del ensayos del punto de
(MD) y A1 0,1933 0,1211 0,3189 anilina fue significativa (P<0.05). La comparacin con
(MD) y A2 0,0155 0,0133 0,0167 Rhizopus sp. no fue significativo para ninguno de los
(MD) y A3 0,0067 0,01 0,0153 medios de cultivos (P>0.05). A. niger y A. flavus
(MD) y Ac1 0,2000 0,2633 0,5145 tuvieron mayor velocidad de crecimiento micelial con
(MD) y Ac2 0,0800 0,1222 0,1611 los medios de cultivos (MD-A1, MD-A2 y MD-AC1).
(MD) y Ac3 0,0467 0,02 0,1167
MD: medio de degradacin, SFC: sin fuente de
carbono, A: anilina, Ac: aceite Palabras clave: hongos aergenos, desechos, anilina,
aceites minerales.

La comparacin de la tolerancia de A. niger y A.

flavus sobre los desechos del ensayos del punto de Referencias:

anilina a concentraciones de 10mM y 50mM y aceite 1. Comisin Venezolana de Normas Industriales.

1mL/1L, fue significativa (P<0.05) segn ANOVA y
Post hoc de Tukey, la comparacin con Rhizopus sp.
Este no fue significativo para ninguno de los medios de
cultivos siendo (P>0.05).
La mxima expresin de la cintica de cada
microorganismo en un medio ideal rico
carbohidratos para su crecimiento es el medio SDA. De
igual manera la aparicin de crecimiento para A. niger y
Rhizopus sp. en el medio de degradacin que no tenia
fuente de carbono, lo cual se le atribuye al uso de las
reservas de glucgeno de las clulas para el desarrollo
de un micelio areo en bsqueda de la dispersin de la
especie mediante esporas.
Conclusiones.
Se evalu las propiedades fsico-qumicas como
punto de ebullicin, densidad y viscosidad para los
desechos del ensayo del punto de anilina para aceites
minerales. Se lograron aislar 4 especies y 3 gneros de
hongos aergenos, lo cual indica que el aire del lugar
donde se tomaron las muestras tiene una calidad de
Productos derivados del petrleo. (1993).
Determinacin del punto de anilina y punto de
anilina mixto (Norma Venezolana COVENIN
1090-93). FONDONORMA, Caracas.
2. Mora C. Poltica ambiental en Venezuela y su
relacin con las empresas. Gestiopolis 2007. [fecha
de consulta enero 2013] Disponible en:
http://www.gestiopolis.com/marketing/politica-
en ambiental-empresarial-en-venezuela.htm.
3. Madrid M. Cataldi A. Caracterizacin de fosas
petroleras y sitios contaminados por crudos a
travs de mtodos geofsicos y sensores
geoqumicos in situ. (2002). Sociedad Venezolana
de Ingenieros Geofsicos, Caracas.
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Universidad Nacional Experimental Politcnica de
la Fuerza Armada Nacional Bolivariana, Santa Ana
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COVENIN 356- 93). FONDONORMA, Caracas.
6. Berenguer MJ; Mart MC. Ambientes cerrados:
calidad del aire. (Ministerio de Trabajo y Asuntos
Sociales Espaa; Instituto Nacional de Higiene y
Seguridad en el Trabajo). 1989. [Citado en junio
de
2013]http://www.insht.es/InshtWeb/Contenidos/D
ocumentacion/FichasTecnicas/NTP/Ficheros/201a
300/ntp_243.pdf.

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7. Casas G. micologa general. Segunda edicin. Puerto Cabello, estado Carabobo. Durante el
Caracas-Venezuela: ediciones de la biblioteca perodo 2006-2007. Vitae [versin electrnica]
UCV; 1998. 2009. [Citado en junio de 2013]N 38. Disponible
8. Pereli A. et al. Presencia de flora fngica en reas en: vitae.ucv.ve/psd/vitae_2604.pdf
internas del hospital Dr. Alodlfo Prince Lara,

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Aseguramiento de la calidad para la preparacin de Medios de Cultivos
Microbiolgicos en conformidad con la Norma ISO/TS 11133-2
Quality assurance for the preparation of bacterial culture media in accordance
with ISO / TS 11133-2.

Rosas Santana Angely Sail a, Rodrguez Veracieta Jos Luisb

a
Residente del Postgrado en Bacteriologa Clnica del Hospital Vargas de Caracas
b
Microbiologia Hospital Vargas de Caracas

Introduccin: El Aseguramiento de la calidad de los medios de cultivo constituye uno de los elementos ms importantes
que permiten, en conjunto con otros factores, garantizar la calidad dentro del laboratorio de Microbiologa, ya que es a
partir de ellos desde donde comienza la evaluacin microbiolgica que permita de manera satisfactoria cubrir las
necesidades de consumo, que demandan todos aquellos pacientes en busca de un adecuado servicio de calidad. Por tal
razn se plante como objetivo principal de la presente investigacin elaborar lineamientos para el Aseguramiento de la
calidad en la preparacin de medios de cultivo microbiolgicos en conformidad con lo establecido por la Norma ISO/TS-
11133-2. Metodologa: a partir de dicha normativa se evalu de manera cualitativa, semicuantitativa y cuantitativa los
medios de cultivo microbiolgicos como productos terminados, en funcin del ndice de recuperacin, grado de
selectividad y/o productividad de los mismos. Siendo evaluados un total de 8 medios de cultivo en placa (Agar Sangre,
Agar Chocolate, Agar Cled, Agar Macconkey, Agar Levine, Agar XLD, Agar SS, Agar TCBS), preparados en el
Laboratorio de Bacteriologa del Hospital Vargas de Caracas, utilizando para ello 11 cepas de referencia internacional
clasificadas como cepas blanco y no blanco en base a la funcionalidad de cada medio. Resultados: Los medios de cultivo
evaluados reflejaron un ptimo desempeo respecto a ndice de Productividad y Selectividad entre un 90 y 95% de los
lotes de medios evaluados. Conclusiones: cualquiera de las tres formas evaluadas puede ser aplicable a la rutina diaria en
el laboratorio de bacteriologa, ms sin embargo recomendamos la evaluacin semicuantitativa (Tcnica Ecomtrica) por
su sencillez, practicidad y confiabilidad de los resultados; para ser incluida en la elaboracin de lineamientos para
aseguramiento de la calidad en los medios de cultivo bacteriolgicos.

Palabras clave: Aseguramiento de la calidad, Bacteriologa, Medios de cultivo, Normas ISO, Tcnica Ecomtrica

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Variacin en la longitud celular y patrones de swarming formados en cepa de Proteus
spp. aislada del Lago de Maracaibo
Changes in cell length and swarming patterns formed in strain of Proteus sp isolated from the Lake
Maracaibo

Colina Gisela, Hernndez Yarelis, Prez Donald, Prez Aleivi, Pineda Estefany, Pia Josxy, Rojas Anthony.
Universidad del Zulia, Facultad Experimental de Ciencias, Laboratorio de Microbiologa General.

Email: kyubineko@hotmail.com

Introduccin. y se somete a algn proceso de diferenciacin

Una gran parte de las bacterias flageladas tienen
ms de un modo de locomocin debido a que stas
exhiben diferentes tipos de desplazamiento entre los
cuales se encuentran Swarming, Twiching, Glinding,
Sliding y Darting [1]. De los antes mencionados el
swarming ha sido el ms representado y se manifiesta
por la formacin de una capa fina de crecimiento que se
expande a partir de colonias aisladas confirindoles,
entre otros beneficios, supervivencia, colonizacin de
superficie y la subsiguiente formacin de comunidades
bacterianas resistentes conocida como biopelculas
[2,3,4].
Hasta la fecha se han reportado tres fases generales
que exhibe un swarming: diferenciacin, migracin y
consolidacin. El proceso de swarming es mdicamente
importante porque la expresin de los genes de
virulencia y de la capacidad de invasin estn acoplados
a la aparicin de clulas swarmer diferenciadas [5].
Proteus spp. exhibe una pelcula de crecimiento que, a
nivel de laboratorio clnico, dificultad el aislamiento de
cualquier otro agente patgeno [6]. Esto se debe al
comportamiento grupal de las bacterias en la periferia
de la colonia logrando desplazarse sobre sus vecinos
[1]. Proteus spp. es un bacilo Gram negativo, mvil,
aerobio y anaerobio facultativo [7]; de acuerdo con
Negroni, (2009) [8], sta bacteria presenta flagelos
pertricos, es decir, que poseen flagelos a su alrededor.
Se desplaza de manera coordinada y rpida lejos del
sitio de inoculacin hasta que se detiene (consolidacin)
formndose as zonas concntricas capaces de cubrir la
superficie del medio slido [9].
Las clulas swarmer de Proteus mirabilis se
caracterizan por un incremento de 20 a 40 veces tanto
de la longitud celular como del nmero de flagelos [10].
Durante el swarming los filamentos flagelares de P.
mirabilis se encuentran altamente organizados y se
entrelazan para formar conexiones helicoidales entre las
clulas swarmer adyacentes [11]. La diferenciacin
celular se activa por el crecimiento en superficies
slidas y algunos factores como la inhibicin de la
rotacin flagelar, la acumulacin de putrescina
extracelular, interacciones antgeno O-con la superficie,
y la sealizacin clula a clula intervienen en el inicio
de este proceso de diferenciacin [8].
En P. Mirabilis la produccin de un polisacrido
capsular cido regulada por qurum sensing juega un
papel clave en la motilidad swarming mediante el
aumento de la fluidez de superficie del medio [12]. As
mismo, se ha encontrado evidencia de que la putrescina
acta como seal extracelular en la formacin del
swarming de P. mirabilis [13].
El anlisis gentico del proceso de swarming ha
puesto de manifiesto que se requiere una gran variedad
de distintos loci para esta diferenciacin, entre estos se
encuentran: los genes implicados en la regulacin,
sntesis de lipopolisacridos y peptidoglicano, divisin
celular, produccin de ATP, biosntesis de putrescina,
protelisis y la determinacin de la forma celular. Un
acontecimiento clave en el proceso de diferenciacin es

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la regulacin de FlhD2C2, quien activa el reguln
flagelar y los genes adicionales requeridos para la
diferenciacin. Tambin se ha reportado que el gen fliL
de P. mirabilis juega un papel en la diferenciacin de la
clula swarmer [14].
Dada la importancia del swarming para el desarrollo
de biopelculas y resistencia a antibiticos, el estudio
en curso estuvo dirigido a investigar la variacin en la
longitud celular y los patrones de swarming formados
en cepa de Proteus spp., aislada de muestras del Lago
de Maracaibo.
Material y mtodos.
Cepas bacterianas: Los experimentos se llevaron a
cabo con una cepa de Proteus spp. aislada de muestras
de aguas provenientes del Lago de Maracaibo donada
por el UIMA (Unidad de Investigacin de
Microbiologa Ambiental). Los cultivos fueron
mantenidos en la nevera a 7 C y luego se sembraron en
caldo nutritivo (a 37 C por 24 horas) para su
activacin; posterior a esto se re-sembraron en caldo
nutritivo para preparar los inculos bacterianos.
Tcnicas de siembra: Se aplicaron dos mtodos de
siembra en placas de agar nutritivo: 1) con movimientos
circulares con un asa en aro (ansa) en el centro de la
placa y en la superficie del medio, y 2) por puncin con
un asa en punta (aguja) en el centro de la placa. Se
sembraron 10 placas por cada tcnica de siembra.
Incubacin: se incubaron a una temperatura alrededor
de 35C-37C. Se realizaron 8 muestreos en un periodo
total de 81,4 horas.
Observaciones macroscpicas y microscpicas: Para
la observacin macroscpica se procedi a tomar una
foto de cada placa sembrada con una cmara Cannon
PowerShot A470 Digital, 7.1 MP para determinar la
cantidad de anillos formados. Posteriormente, se grafic
el n de anillos vs tiempo de incubacin. Para la
observacin microscpica se realizo tincin simple con
safranina en muestras tomadas tanto de la zona de
migracin (zona clara) como de la zona de
condensacin (zona oscura) del swarming.
Fotografas: se realizaron observaciones a 400X en un
microscopio Olympus BX40 con cmara digital
conectada a un ordenador. Con el software WinTV se
tomaron fotos en formato BMP (bitmap).
Edicin de imagen: La imagen previamente tomada en
formato BMP con el microscopio, se edit en el
programa Paint con el fin de agregar la escala de
calibracin. Posteriormente, se edit en el programa
Adobe Photoshop CS6 para transformarla a escala de
grises, 8 bit, binaria y sin comprimir. Por ultimo, se
utiliz el software CMEIAS ImageTool V1.27 para
realizar la medicin de la longitud en micras (m) de las
clulas observadas. Con esta informacin se calcul el
promedio de la longitud celular para cada cepa tanto de
la zona de dispersin como de la zona de consolidacin
Resultados y discusin.
Desde un punto de vista macroscpico, el grosor de
los anillos vari para la cepa de Proteus spp.
encontrndose distintos patrones de formacin de
swarming. El ancho de los anillos tambin vari hasta
alcanzar 1-2 cm. La mayora de las placas con
swarming de Proteus spp. no mostraron una estructura o
patrn similar; del total de placas sembradas, el 80%
mostr un patrn de swarming formando hasta 3
crculos concntricos con las clulas en difusin hasta
10 cm del sitio de inoculacin (Figura 1a). Un patrn
semejante a este fue reportado tambin por Smith,
(1972) [15]. El resto de las placas (20%) formaron un
swarming con uno o dos crculos concntricos a partir
del sitio de inoculacin originando en la periferia del
ltimo circulo colonias dispersas que a su vez
desarrollaron su propio swarming, segn Hernndez y
Rodrguez (1993) [1] ste fenmeno se puede deber a la
presencia de otro tipo de desplazamiento llamado
Darting (bacterias expulsadas de la colonia) el cual
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ocurre por la presin ejercida de unas bacterias sobre
otras durante su crecimiento (Figura 1b).
1a Colonias en 1b
periferia
Figura 1. Patrn de swarming formado por Proteus
spp.
La diferencia encontrada en cuanto al grosor de la zona
de migracin en las diez placas para cada cepa puede
deberse a mltiples factores tales como: grado de
humedad, temperatura, composicin de nutrientes,
concentracin del agente solidificante, diferencias en la
velocidad de desplazamiento de las clulas, capacidad o
grado de elongacin celular, capacidad de
diferenciacin y desdiferenciacin entre fases,
interacciones entre clulas. Adicionalmente, la ruta de
avance de una clula puede ser bloqueada dando lugar a
la formacin de conglomerados. Segn Darnton y col.,
(2009) [12], estos empujones pueden implicar tanto
verdaderos choques como fuerzas mutuamente
inducidas transmitidas por el fluido.
En cuanto al nmero de anillos formados, se
evidenci que a partir de las primeras 12.4 horas de
incubacin, se obtuvo una media de 0.6 anillos
formados de manera tal que, al haber transcurrido el
periodo total de incubacin (81,4 horas) dicha cepa
alcanz una media de 4.9 anillos formados. Como se
observa en la Grafica 1, a pesar del largo periodo de
incubacin, Proteus spp. no detuvo su avance a travs
de la superficie del medio sino que el nmero de anillos
aument paulatinamente en el tiempo lo que demuestra
su capacidad para desplazarse (swarming).
Grfico 1. Media del # de anillos formados
en cada placa a lo largo del periodo de
incubacin de Proteus spp.
Respecto a los mtodos de siembra aplicados, en las
placas sembradas con el asa en aro se evidenci un
swarming ms desarrollado con la formacin de anillos
concntricos, el cual abarcaba ms de la mitad de la
placa (anillos de hasta 1,5 cm de grosor) (Figura 2b).
De manera contrastante, ninguna de las placas
sembradas con el asa en punta desarrollo swarming,
solo se obtuvo un crecimiento en el sitio de inoculacin
(Figura 2a). Se presume que la cantidad de inoculo
tomada con el asa en punta es menor que la que confiere
el asa en aro, aunado al hecho de que el inoculo
incrustado en el agar representa para la bacteria mayor
dificultad de desplazamiento.
2a 2b
Figura 2. Mtodos de siembra para Proteus spp.
Desde un punto de vista microscpico, se observ
que las clulas, cuya forma inicial corresponda a
cocobacilos, se diferenciaron en bacilos alargados
durante su migracin en la superficie. Este fenmeno de
elongacin celular y de formacin de flagelos mltiples
ha sido reportado por [6,13,16].
Proteus spp., en su fase de consolidacin, obtuvo
una media de longitud de 1.3 m aunque se observaron
clulas que median desde 0.4 m hasta 2.9 m (Figura
119
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3a). En algunas de las fotos tomadas se observaron
cadenas de cocobacilos (de hasta 7 clulas), lo que
indica no solo un cambio en la elongacin celular, sino
tambin en la inhibicin de la septacin, hecho que les
permite a estas clulas permanecer unidas en cadenas
despus de la divisin celular (Figura 3b) [17]. Para la
fase de migracin, se obtuvo una media de longitud
celular de 4.7 m aunque se observaron bacterias que
median desde 2.2 m hasta 12.5 m (Figura 3c).
9 m
9 m
3a 3b
9 m
3c
Figura 3. Microfotografas a 400X
Proteus spp.
Comparando la media de las longitudes celulares de
las fases de consolidacin y migracin, se obtuvo una
diferencia significativa (t = 11,896, p <0,05); por lo
tanto, la bacteria transfigura su longitud de una fase a la
siguiente durante la formacin de su swarming (Figura
3).
Conclusiones.
Desde un punto de vista macroscpico, no se
observ un patrn uniforme de swarming para la
bacteria Proteus spp., de hecho sta cepa present tanto
crculos concntricos como colonias dispersas en la
periferia. A pesar del largo periodo de incubacin,
Proteus spp. no detuvo su avance a travs de la
superficie del medio sino que el nmero de anillos
formados aument conforme al avance del tiempo de
incubacin, lo que demostr su capacidad para
desplazarse a travs de los caractersticos anillos
concntricos de su swarming.
En cuanto al mtodo de siembra aplicado, las placas
sembradas con asa en punta no desarrollaron swarming,
mientras que las sembradas con el asa en aro muestran
un evidente swarming con la formacin de los
caractersticos anillos concntricos del gnero Proteus.
Desde un punto de vista microscpico, se evidenci
una transfiguracin en la longitud celular pasando de
ser un cocobacilo en la fase de consolidacin a un
bacilo alargado en la fase de migracin.
Palabras clave: swarming, Proteus, bacteria,
desplazamiento, colonizacin.
Referencias:
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swarming y otros tipos de desplazamiento
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Cost Cien Med. San Jos. Costa Rica. 1993; 14,
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Patrones de swarming y cambios de longitud celular en cepas de Pseudomonas
aeruginosa silvestre y Pseudomonas aeruginosa ATCC 27853
Swarming patterns and cell length changes in strains of Pseudomonas aeruginosa wild type and
Pseudomonas aeruginosa ATCC 27853.

Colina Gisela, Hernndez Yarelis, Prez Aleivi, Prez Donald, Pineda Estefany, Pia Josxy, Rojas Anthony.
Universidad del Zulia, Facultad Experimental de Ciencias, Laboratorio de Microbiologa General.

Email: anthony_rojas_25@hotmail.com

Introduccin. En condiciones ambientales adecuadas, sta

Pseudomonas aeruginosa es un bacilo gram
negativo, mvil, aerobio estricto, que presenta un
flagelo polar, muchas cepas producen pigmentos
fluorescentes (pioverdina) y pigmentos solubles
(piocianina) que le confieren el color verdoso
caracterstico al medio [1]. Tiene uno o ms de un modo
de locomocin [2] dentro de los cuales se encuentra el
swarming. Este se manifiesta por la formacin de una
capa fina de crecimiento que se expande a partir de
colonias aisladas confirindoles, entre otros beneficios,
supervivencia, colonizacin de superficie y la
subsiguiente formacin de comunidades bacterianas
resistentes llamadas biopelculas [3,4].
Este suceso no es exclusivo del mundo
microscpico ya que se refleja en los movimientos
coordinados de las bandadas de aves o banco de peces
[5]. Tambin lo hacen algunos insectos como hormigas,
abejas y seres vivos de vida marina como langostas,
krill, coppodos, algas (blooms algales), y otros
animales como cuadrpedos [6].
P. aeruginosa exhibe una pelcula de crecimiento,
que a nivel de laboratorio clnico dificultad el
aislamiento de cualquier otro agente patgeno [7]
formando zarcillos que migran hacia el exterior desde el
lugar de inoculacin, con ramificaciones continuas. Este
patrn tambin ha sido reportado por Tremblay & col,
(2007) [2] y Lindhout & col, (2009) [8]. Hasta la fecha
se han reportado tres fases generales para el swarming:
diferenciacin, migracin y consolidacin [9].
bacteria sufre alteraciones ultraestructurales
(diferenciacin) e inicia la migracin a partir del borde
de la colonia despus de un periodo de incubacin que
vara segn la especie, y luego se da la fase de
consolidacin en la que se detiene o disminuye la
velocidad, aumentando la densidad de la poblacin en
ese punto [7,9,10]
La presencia de ramnolipidos en cultivos de P.
aeruginosa disminuye la tensin superficial y aumenta
la humedad y el carcter hidroflico del agar,
favoreciendo la formacin de swarming [11,12,13].
Thomas y Willis en 1999 propusieron que para la
formacin del swarming en cultivos de Pseudomonas
syringae se requieren de los genes gacS (lemA) y gacA,
mientras que Harunur y col, en el 2000 [14] observaron
que Pseudomonas aeruginosa necesitaba la presencia
del gen ppk cuya expresin es la Polifosfato quinasa
(PPK), necesaria para la sntesis de del polifosfato
inorgnico (poli P) a partir de ATP. La dependencia de
la motilidad al PPK revela funciones importantes del
poli P en diversos procesos tales como la formacin de
biopelculas, simbiosis, y la virulencia.
Haubler en el 2004 describi que P. aeruginosa
crece en estructuras conocidas como biopelculas en
donde las bacterias muestran fenotipos particulares
diferentes de las clulas planctnicas [15].
Adicionalmente, en el 2006, Shrout y col afirmaron que
es necesario la contribucin del Quorum sensing para el
desarrollo de biopelculas de P. aeruginosa.

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El comportamiento de la poblacin en un swarming
y el desempeo de sus individuos, proporciona modelos
atractivos para los fsicos y matemticos dedicados al
estudio de dinmicas de grupo y auto-organizacin de
los sistemas [16,17].
Debido a lo antes mencionado y dada la importancia
de la motilidad del swarming para conferir el desarrollo
de biopelculas y resistencia a los antibiticos, el
estudio en curso est dirigido a investigar la variacin
en la longitud celular y los patrones de swarming
formados en dos cepas de P. aeruginosa
Material y Mtodos.
Cepas bacterianas. Los experimentos se llevaron a
cabo con la cepa P. aeruginosa silvestre aislada por el
profesor Prez A., la cual fue reactivada en el ao 2006
y conservada hasta la fecha, en sulfato de calcio (yeso)
y la cepa P. aeruginosa ATCC 27853 donada por el
Centro de Investigacin del Agua. Los cultivos fueron
mantenidos en la nevera a 7 C y luego se sembraron en
caldo nutritivo, se realiz tincin Gram para la
confirmacin de la pureza de los cultivos. Posterior a
esto se incubaron a 37 C por 24 horas para su
activacin.
Incubacin: se incubaron a una temperatura alrededor
de 35C-37C. Se realizaron 8 muestreos por un
periodo total de 81,4 horas.
Observaciones macroscpicas: se procedi a tomar
una foto de cada placa sembrada con una cmara
Cannon PowerShot A470 Digital, 7.1 MP para
determinar la cantidad de anillos formados.
Posteriormente, se grafic el n de anillos vs tiempo de
incubacin.
Observacin Microscpica: se realizo tincin simple
con safranina en muestras tomadas tanto de la zona de
migracin (zona clara) como de la zona
condensacin (zona oscura) del swarming. Se realizaron
observaciones a 400X en un microscopio Olympus
BX40 con cmara digital conectada a un ordenador.
Con el software WinTV se tomaron fotos en formato
BMP (bitmap).
Edicin de imagen: a las imgenes BMP se les agreg
la escala de calibracin, y posteriormente se editaron en
Adobe Photoshop CS6 para llevarlas a escala de grises,
8 bits, binaria y sin comprimir. Por ultimo, se utiliz el
software CMEIAS ImageTool V1.27 para realizar la
medicin de la longitud en micras (m) de las clulas.
Con est informacin se calcul el promedio de la
longitud celular para cada cepa.
Resultados y Discusin.
Desde un punto de vista macroscpico, se observ
la formacin de crculos concntricos en todas las
placas sembradas. La anchura de los anillos vario desde
menos de 1 mm hasta 0,5 cm. En algunas placas se
observ una banda estrecha formada inmediatamente
detrs de algunos anillos. Bajo las condiciones
ambientales antes indicadas, tanto P. aeruginosa
silvestre (Figura 1a) como P. aeruginosa ATCC 27853
(Figura 1b) formaron anillos concntricos en su avance
desde el punto de inoculacin. ste patrn no coincide
con otros estudios de P. aeruginosa en los que el
swarming exhibe ramificaciones continuas semejantes a
zarcillos o dedos que migran hacia el exterior desde el
punto de inoculacin [2,8].
1a 1b
Figura 1. Patrones de swarming formados por P. aeruginosa.
Las cepas iniciaron la formacin del primer anillo
concntrico a partir de las 25,1 horas del inicio del
de periodo de incubacin, y a medida que avanzaba el
tiempo las bacterias exhiban su capacidad de
extenderse y colonizar ambientes ricos en nutrientes. En
la Grafica 1 se observa que a partir de las 64.2 horas de
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incubacin se dio una divergencia entre ambas cepas obtuvo un crecimiento en el sitio de inoculacin (Figura
tanto para la ATCC como la silvestre, siendo esta 2c). Se presume que la cantidad de inculo tomada con
ltima caracterizada como altamente productora de el asa en punta es menor que la tomada con el asa en
biosulfactantes [17 18]. Tambin se puede apreciar en aro, y que el inculo incrustado en el agar pre-establece
dicha grfica que a medida que se avanza en el tiempo mayor dificultad para el desplazamiento bacteriano.
de incubacin, la cepa silvestre incrementa
significativamente el nmero de anillos formados,
demostrando con ello su capacidad para colonizar el
entorno a pesar de haber estado inactiva durante aos.
Se realiz la prueba de t-student para muestras 2a 2b 2c
independientes obtenindose un valor de t = 2,223; p <
Figura 2. Mtodos de siembra para cepas de
a 0.05; por lo tanto, existe diferencia significativa entre Pseudomona aeruginosa.
ellas. Esto ltimo se evidenci ya que al final del
periodo de incubacin, P. aeruginosa silvestre obtuvo
La motilidad de P. aeruginosa se vio acompaada
un promedio de 6.8 anillos en comparacin con P.
de gotas de color verde-esmeralda (Figura 3) que se
aeruginosa ATCC que obtuvo un promedio de 4.6
encontraban atrapadas entre grupos de clulas
anillos. Se observ que el mtodo de conservacin
organizadas en empalizada [11,12,13].
(sulfato de calcio o yeso) empleado en P. aeruginosa
silvestre, que le permiti estar inactiva durante siete
aos, no afect su capacidad de formacin de
Gota Bacteria
swarming; de hecho, en la grfica 1 se evidencia que
s
dicha cepa produjo un promedio de anillos de ms de
dos puntos de diferencia en comparacin con la cepa
Figura 3. Presencia de gotas verdes entre bacterias de
ATCC. Pseudomona aeruginosa.

Una de las caractersticas que se observ fue que

Grfico 1. Media del # de anillos formados en cada
placa a lo largo del periodo de incubacin de las cepas
de P. aeruginosa silvestre y P. aeruginosa ATCC.
Respecto a los mtodos de siembra, se evidenci que
los mejores resultados en cuanto a nmero de anillos
formados se obtuvieron de las placas sembradas con el
asa en aro para ambas cepas (Figura 2a y 2b, silvestre y
ATCC, respectivamente). De las placas sembradas con
el asa en punta, ninguna desarrollo swarming, solo se
las clulas de las cepas de P. aeruginosa que
inicialmente fueron cocobacilos con pocos flagelos, se
transfiguraron en bacilos alargados [9]. ste fenmeno
tambin ha sido reportado por Belas y col, (1986) y
Belas, R, (1992) [7,18]. Para P. aeruginosa silvestre, en
su fase de consolidacin, se obtuvo una media de
longitud celular de 1.1 m aunque se observaron
bacterias que medan desde 0.5 m hasta 3.0 m
(Figura 4a). Para la fase de migracin se obtuvo una
media de longitud celular de 5.4 m, observndose
longitudes en el rango de 3.0 m hasta 14.6 m (Figura
4b). En sta fase tambin se observ la presencia de
bacilos alargados multinucleados con una longitud de

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hasta 36.0 m (Figura 4c). Comparando las medias de
longitud celular de la fase de consolidacin con la fase
de migracin, se obtuvo una diferencia significativa (t =
8,161; p< 0.05); por lo tanto, sta bacteria transfigura
su longitud celular de una fase a la siguiente para
desplazarse en el medio formando su patrn de
swarming.
9 m
9 m 9 m
4a 4b 4c
Figura 4. Microfotografas a 400X para Pseudomona
aeruginosa silvestre.
Por otro lado, para la cepa de P. aeruginosa ATCC
27853, en su fase de consolidacin, obtuvo una media
en cuanto a su longitud celular de 1.0 m aunque se
observaron bacterias que median desde 0.5 m hasta 1.9
m (Figura 5a). Segn Williams y col, (1978) [9] uno
de los cambios producidos durante el swarming es la
inhibicin de la septacin (despus de la divisin, las
clulas permanecen unidas formando cadenas); de
9 m 9 m 9 m
5a 5b 5c
Figura 5. Microfotografas a 400X para Pseudomona
aeruginosa ATCC.
Por ltimo, una prueba t-student aplicada a los
valores (media) obtenidas de ambas cepas de P.
aeruginosa (silvestre y ATCC), tanto de la fase de
consolidacin como de la fase de migracin, no revel
diferencia significativa en la longitud celular de la fase
de consolidacin (t = 1,686; p > 0,05) (Grafico 2a) pero
si se obtuvo una diferencia significativa en cuanto a su
fase de migracin (t = 5,998; p < a 0.05) demostrando
que la cepa silvestre alcanz una longitud celular mayor
que la cepa ATCC (Grfico 2b). El hecho de que P.
aeruginosa silvestre haya formado una mayor cantidad
de anillos y un swarming de mayor tamao que P.
aeruginosa ATCC parece estar acoplado a la mayor
longitud celular obtenida.
Fase de Consolidacin.

hecho, algunas de las fotos tomadas de cada fase en las 1,2

1
0,8
diez placas sembradas evidenci la presencia de 0,6
0,4
1,1 1

0,2
cadenas de hasta 5-6 clulas (Figura 5b). Para la fase de 0
Pseudomona Silvestre Pseudomona ATCC

migracin, se obtuvo una media en cuanto a su longitud

Grfico 2a. Media de la longitud celular (m) por las
celular de 2.2 m aunque se observaron bacterias que
cepas de Pseudomona aeruginosa silvestre y ATCC y
median desde 1.9 m hasta 3.2 m (Figura 5c). en la fase de consolidacin
Comparando ambos valores (media) de la longitud
celular de la fase de consolidacin con la fase de
migracin se obtuvo una diferencia significativa (t =
14,249; p< 0.05); por lo tanto, sta bacteria transfigura
su longitud celular de una fase a la siguiente a medida
que se desplaza en el medio.
Grfico 2b. Media de la longitud celular (m) por las
cepas de Pseudomona aeruginosa silvestre y ATCC
en la fase de migracin.

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Conclusiones.
Tanto P. aeruginosa silvestre, como P. aeruginosa
ATCC 27853 presentaron un patrn de swarming con
crculos concntricos que difiere de los registrados en
otras investigaciones. A medida que avanzaba el tiempo
de incubacin ms cantidad de anillos se formaban, es
decir, dichas cepas exhiban capacidad de extenderse y
colonizar ambientes ricos en nutrientes. Se observo que
la cepa P. aeruginosa silvestre, la cual estuvo inactiva y
conservada en sulfato de calcio durante siete (7) aos,
exhibi su capacidad para la formacin de swarming.
En cuanto al mtodo de siembra aplicado, las
placas sembradas con el asa en aro desarrollaron anillos
concntricos para las dos cepas estudiadas, a diferencia
de las cepas sembradas con el asa en punta, lo que se
presume se deba a la poca cantidad de inoculo que sta
es capaz de tomar.
Desde un punto de vista microscpico, se observ
una diferenciacin en la longitud celular caracterizada
por un alargamiento, pasando las clulas de ser bacilos
cortos en la fase de consolidacin a ser bacilos
alargados en la fase de migracin.
Palabras clave: swarming, Pseudomonas aeruginosa,
longitud, patgeno
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Microbiologa de las infecciones odontognicas. Revisin de la literatura

Microbiology of odontogenic infections. Review of the literature

Contreras C.a, Castillo H.a, Barrios J.b, Huartaja J.c

a
Interno de Ciruga Bucal y Maxilofacial de la Universidad Gran Mariscal de Ayacucho. Hospital General del
Oeste Dr. Jos Gregorio Hernndez. b Residente de 1er ao Postgrado de Ciruga Bucal y Maxilofacial de la
Universidad Gran Mariscal de Ayacucho. Hospital General del Oeste Dr. Jos Gregorio Hernndez.
c
Especialista y adjunto del Postgrado de Ciruga Bucal y Maxilofacial de la Universidad Gran Mariscal de
Ayacucho. Hospital General del Oeste Dr. Jos Gregorio Hernndez.

Las Infecciones Odontognicas (IO) son una entidad patolgica polimicrobiana mixta, entre aerobios y anaerobios, con
origen endodntico o periodontal, presentando caractersticas clnicas clsicas, como dolor agudo, aumento de volumen,
disnea y disfagia. Microbiolgicamente, se evidencian diferentes tipos de microorganismos dependiendo del tiempo de
evolucin, encontrando dos estadios fundamentales, agudos o crnicos, y de su localizacin anatmica. Estas se
manifiestan de manera circunscrita o puede diseminarse a espacios profundos, a travs de la continuidad de espacios, y
por vas linfticas o hematgenas, complicando el cuadro clnico con posibilidad de desarrollar obstruccin de las vas
areas, angina de Ludwig, trombosis del seno cavernoso, mediastinitis necrotizante, entre otras, comprometiendo la vida
del paciente. Por otro lado, las IO son el segundo motivo de consulta a la sala de emergencia del servicio de ciruga
bucomaxilofacial del Hospital General del Oeste (CBMF-HGO), en los Magallanes de Catia (Caracas, Venezuela), por lo
que es de inters conocer su etiopatogenia y posibles complicaciones. La investigacin planteo como objetivo realizar una
actualizacin de la literatura de IO y microorganismos involucrados en sus diferentes estadios, para establecer una
correcta planificacin teraputica. Conclusin: Las IO son polibacterianas y en mayor frecuencia mixtas, siendo
constituidas fundamentalmente por cocos grampositivos anaerobios facultativos y bacilos gramnegativos anaerobios
estrictos, con la interaccin de Prevotella spp., Streptococcus spp., Peptostreptococcus spp. y Eubacterium spp, siendo este
conocimiento fundamental para establecer tratamientos correctos y obtener una resolucin satisfactoria para tal entidad.

Palabras clave: Infecciones odontognicas, diseminacin, espacios anatmicos, complicaciones.

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Visin microbiolgica del fracaso en la implantologa dental. Revisin de la literatura
Microbiological vision of failure in implantology desntistry. Review of the literature

Castillo H.a, Contreras C.a, Bruces Y.b, Huartaja J.c

a
Interno de Ciruga Bucal y Maxilofacial de la Universidad Gran Mariscal de Ayacucho. Hospital General del
Oeste Dr. Jos Gregorio Hernndez. b Residente de 2do ao Postgrado de Ciruga Bucal y Maxilofacial de
la Universidad Gran Mariscal de Ayacucho. Hospital General del Oeste Dr. Jos Gregorio Hernndez.
c
Especialista y adjunto del Postgrado de Ciruga Bucal y Maxilofacial de la Universidad Gran Mariscal de
Ayacucho. Hospital General del Oeste Dr. Jos Gregorio Hernndez.

En odontologa, los implantes dentales son aditamentos utilizados para la rehabilitacin de la oclusin mediante tcnicas
quirrgicas, para lo cual se requiere la regeneracin sea adyacente al implante, es decir, la seointegracin. Esto va a
depender de las condiciones sistmicas del paciente, superficie del implante y de la micro flora bucal, siendo este ltimo
tpico importante por su carcter multimicrobiano mixto, con predominio de Streptococcus de grupo viridans,
Lactobacillus, entre otros del tipo aerobio y Fusobacterium, Prevotella del tipo anaerobio, evidencindose diversos
ecosistemas microbiolgicos dependiendo incluso de la zona anatmica de la cavidad bucal. La mucositis y
periimplantitis, son afecciones comunes en la implantologa, causada por la formacin de placa bacteriana en los
mrgenes del implante, induciendo a la afeccin de los tejidos blandos y mineralizados periimplantarios, a consecuencia
de estadios inflamatorios crnicos. La presente revisin permite dar una visin de la frecuencia de los microorganismos
involucrados en las periimplantitis y cules son las implicaciones tisulares que producen el fracaso del implante, mediante
una revisin actualizada de la literatura Conclusiones: La microbiologa est ntimamente relacionada con el pronstico
de los implantes dentales, por la influencia de los microorganismos presentes antes de la colocacin de implantes, a
determinar la composicin de la nueva microbiota bucal. Creando un ecosistema para el posible desarrollo de mucositis o
periimplantitis, en la cual se evidencia una modificacin en la microflora, presentando predominio de bacterias gram
negativas sobre gram positivas, como Porphyromonas gingivalis, Tannerella forsythia y Treponema denticola, tambin,
Fusobacterium nucleatum, Prevotella intermedia. De manera inusual se ha encontrado Candida albicans y con alta
adherencia a la superficie del implante. Por tal implicacin microbiolgica, se evidencian diversas afecciones clnicas
como, edema, enrojecimiento, hiperplasias, bolsas periodontales con sangrado y supuracin, reabsorcin sea, movilidad
del implante, persistencia de dolor y malestar.

Palabras clave: Perimplantitis, mucositis, regeneracin sea, multimicrobiano.

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El hongo Pleurotus ostreatus alternativa nutricional para comunidades
agroecolgicas y herramienta pedaggica en la enseanza de la biologa
The fungi Pleurotus ostreatus nutritional alternative for agroecological communities and
pedagogical tool in the teaching of biology

Guerrero Crdenas Balmorea*, Morillo Pia Osmarb, Carrero Christianc, Chalbaud Mogollon Eduardoa
Laboratorio de Biotecnologa de Microorganismo (BIOMI) Sixto David Rojo, Facultad de Ciencias.
a

Universidad de Los Andes; b Centro de Investigaciones del Estado para la Produccin Experimental
Agroindustrial, Fundacin CIEPE c Laboratorio de Fitopatologa, Instituto de Investigaciones Agropecuarias
(IIAP), Facultad de Ciencias Forestales y Ambientales, Universidad de los Andes

*Correspondencia autor principal

Email:balmoregc@gmail.com

Introduccin. leche y al del frijol, siendo superior al del arroz, maz y

El cultivo de hongos comestible ocupa en el presente
el segundo lugar entre las industrias de biotecnologa
microbiana, la gran ventaja de esta tecnologa es que en
estos procesos los desechos agrcolas de valor escaso o
negativo son reciclados, facilitando la reduccin de su
volumen y acelerando su descomposicin; en el proceso
se generan alimentos ricos en protenas para uso
humano y los sustratos transformados pueden ser
utilizados como enmiendas de los suelos mejorando las
condiciones fsicas del mismo o como alimento para
animales logrndose el reciclaje total de los desechos.
[1, 2].
Pleurotus ostreatus y en general las especies del
gnero Pleurotus son hongos comestibles, saprofitos,
descomponedores de material vegetal en los que crecen,
degradando estructuras lignocelulsicas, utilizando para
ello enzimas que liberan al medio. La diversidad del
gnero Pleurotus abarca al menos 20 especies, entre
ellas, P. djamor, P. eryngii, P. smithii, P. levis, P.
pulmonarius, P. sajor-cajou, P. citrinopileatus y P.
ostreatus [3]. La tecnologa de su cultivo se ha
extendido rpidamente debido a que estos hongos, se
adaptan a un amplio intervalo de temperatura y a sus
propiedades nutricionales y culinarias. Las especies del
gnero representan un alimento rico en protenas 24 a
30% alto contenido en fibra y bajo contenido de lpidos
y caloras. El contenido proteico es similar al de la
trigo [4]. a digestibilidad de estas protenas es del 98%
[5]. El potencial enzimtico de las especies del gnero
Pleurotus y de otros hongos de podredumbre blanca, ha
permitido su aplicacin en diversos procesos. Bien sea
por la accin directa de los hongos, o mediante las
enzimas que ellos producen. Particularmente, especies
del gnero Pleurotus se han utilizado en el tratamiento
de residuos agrcolas para enriquecerlos en protena
fngica, o incrementar su digestibilidad por
disminucin en los contenidos de lignina. [6, 7].
En lo que respecta a la naturaleza del sustrato estos
hongos pueden crecer en residuos orgnicos, como
paja de trigo, maz, algodn, coco, bagazo de caa de
azcar, aserrn, hoja de pltano capacho de uchuva,
cscara de arveja, tusa de maz , paja de arroz y pulpa
de caf [8,9]. Existen varios criterios para determinar
la calidad del sustrato en cuanto a la produccin de
carpforos, el ms utilizado es la eficiencia biolgica
definida como: EB (%)= (peso fresco de los
carpforos)/ (peso seco inicial del sustrato)100 [8].
El cultivo de P. ostreatus se realiza en sistemas de
fermentacin en medio solido (FMS) que constan de
cinco etapas 1.- preparacin de inculos o semilla, 2.-
acondicionamiento del medio de cultivo e inoculacin,
3.- incubacin en la oscuridad, 4.- fructificacin en
presencia de luz, 5.-cosecha. Los diferentes mtodos se

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diferencian principalmente por la forma en que es
acondicionado el sustrato (tamao de partcula,
densidad de empaque, contenido de humedad entre
otros. Y por el tipo de los contenedores que se utilizan
en el cultivo, los ms utilizados son: camas de sustrato
sin cobertura, camas con cobertura de polivinilo
perforado acolchado, bolsas de polietileno de varios
tamaos, botellas, bandejas, tarros, contenedores de
mallas de polietileno, bloques de sustrato. [10; 11].
Hoy en da existe consenso en que la biotecnologa
es la alternativa con mayores perspectivas de xito en el
tratamiento de desechos y residuos agroindustriales. En
este sentido el cultivo del hongo P. ostreatus resulta
atractivo ya que no requiere tecnologas complicadas y
las instalaciones requeridas son muy econmicas. En el
entendido del impacto que el cultivo de hongos
comestibles puede tener en la bsqueda de la soberana
agroalimentaria, y en la mejora de las condiciones
socioeconmicas de las clases ms desposedas, y en la
bsqueda de la conservacin y uso racional de nuestro
recursos, esta investigacin se realiz con la finalidad
de estudiar en una primera etapa las tcnicas de cultivo
del hongo P. ostreatus principalmente aquellas
relacionada con la produccin de inculos y ensayos de
produccin en sustratos lignocelulsicos en el
laboratorio. En la segunda etapa se realiz un ensayo de
cultivo en el cual participaron nios y nias de quinto
grado de educacin bsica de la Unidad Educativa. Dr.
Carlos Emilio Muoz Ora, del Estado Mrida, bajo un
ambiente escolar en el saln de clase se crearon las
condiciones mnimas para realizar el cultivo y
produccin de los carpforos del hongo, con la finalidad
de observar si los estudiantes luego de un entrenamiento
sencillo podan realizar las distintas etapas del cultivo.
El xito con estudiantes sera un fuerte indicio de que la
tcnica es acertada y puede ser incorporada en la
enseanza de la biologa a nivel de educacin primaria
y que el cultivo puede ser implementado en las
comunidades, principalmente aquellas que cuenten con
desechos agrcolas.
Material y mtodos.
Microorganismo: un cultivo puro de la cepa P.
ostreatus, perteneciente al Laboratorio de Biotecnologa
de Microorganismos de la Universidad de Los Andes.
Mantenido en cuas conteniendo medio de cultivo
estril, compuesto por harina de maz 10 g, harina de
avena 10 g, harina de trigo integral 10 g, agar 15 g y
agua hasta un volumen final de 1000 ml. Medios de
cultivo: se utiliz el medio de cultivo slido M200,
preparado con 3 g/l extracto de levadura, 3 g/l extracto
de malta, 5 g/l de peptona, 10 g/l de glucosa y 20 g/l de
agar.
Preparacin de inculos: granos de maz fueron
sumergidos en agua, luego de 24 horas se sometieron a
coccin durante 45 minutos. Se dren el agua, y se
empacaron en frascos de vidrio y bolsas plsticas
esterilizables, colocando 300 y 500g respectivamente,
se taparon y se esterilizaron durante 1 hora en autoclave
a 121 C, Una vez fros se inocularon, colocando en cada
uno 5 trozos de agar invadidos por el hongo,
provenientes de cajas de Petri con medio M200. Se
incubaron a 25 C en oscuridad, hasta observar que los
micelios del hongo cubran totalmente los granos maz.
Ensayos de laboratorio: esta experiencia se realiz en el
Laboratorio de Biotecnologa de Microorganismos de la
ULA.
Sustratos: los materiales: lignocelulsicos utilizados
fueron la tusa de maz, proveniente de la manufactura
artesanal de cachapa y hoja de caa, generado en la
cosecha de la caa azcar (procedentes del sector San
Pablo, Municipio Sucre, Estado Mrida).
Preparacin del sustrato: utilizando una picadora de
pasto se redujo el tamao de las partculas de la hoja de
caa de 3 a 5 cm. La tusa de maz fue quebrantada en
un molino de martillo hasta un tamao de partcula
entre 0,5 y 1 cm. Por separado ambos materiales fueron
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colocados en sacos de polipropileno y sumergidos en
agua durante 24 horas, a continuacin se dejaron drenar
hasta eliminar toda el agua en exceso. Y se sometieron a
tratamiento trmico con vapor durante un periodo de 6
horas, utilizando un barril metlico y suministrando
calor con un mechero a gas para la generacin de vapor.
Una vez concluido el tiempo de calentamiento, se dej
reposar durante 48 h.
Inoculacin de sustratos lignocelulsicos: en bolsas de
plstico transparentes se adicion capas alternas de
inculo y sustrato cuidando de no compactar la mezcla.
En todos los casos se utilizaron 2 kg de material vegetal
y se inocul con 200 g de semillas de maz invadidas
por el hongo. Las bolsas fueron cerradas, con cilindros
plsticos previamente esterilizados de 10 cm de largo
por 2 cm de dimetro conteniendo fibra de vidrio, los
cuales se aseguraron a la bolsa con bandas elsticas. Se
prepar un lote con cada sustrato solo y otro agregando
2% cal al sustrato. Se realiz un total de 5 rplicas por
cada ensayo para un total de 20 bloques de sustrato.
Incubacin: los bloques de sustrato inoculados se
incubados en ausencia de luz a 271 C y humedad
relativa aproximada de 80% en una cmara de
incubacin, El tiempo de incubacin finalizo en el
momento en que el sustrato fue totalmente colonizado
por el hongo. A continuacin se incubo con incidencia
de luz natural indirecta, para ello los bloques de
sustratos se colgaron dentro de la cmara de cultivo y se
perforaron para facilitar la salida de los primordios y
formacin de los cuerpos fructferos.
Cosecha: una vez alcanzada la madurez de los cuerpos
fructferos, se recolectaron manualmente cortando con
una cuchilla estril la base del tronco del hongo y
pesados en una balanza analtica.
Evaluacin de la eficiencia biolgica: a partir del peso
fresco de los cuerpos fructferos se determin la
eficiencia biolgica (EB):
[1]
Donde : Peso de los carpforos frescos
expresados en Kg o g y : Peso seco
de los materiales lignocelulsicos en Kg o g.
Experiencia de campo: que se describen a continuacin
se realizaron en el saln de clases del 5to. Grado en las
instalaciones del colegio CEAPULA, ubicado en el
Municipio Liberador del Estado Mrida, y en ellas
participaron la profesora, estudiantes, padres y
representantes del referido grado. Los sustratos
lignocelulsicos utilizados fueron: hojas de caa de
azcar secas, aserrn de madera libre de aditivos
qumicos proveniente de labores de tallado, cascaras de
cacao secadas al sol.) los sustratos se cortaron
manualmente hasta un tamao de 3 a 5 cm de longitud.
al aserrn de madera se le elimin los trozos mayores a
5 cm de dimetro, seguidamente los sustratos, fueron
sumergidos en agua durante 12 horas, se dren el
exceso de agua, finalmente se trataron en bao de vapor
durante 6 horas en un recipiente cerrado.
Inoculacin de sustratos lignocelulsicos: para prevenir
la contaminacin se dise y construy una cmara de
inoculacin la cual consisti de un marco de madera en
forma de cubo de 1 m de lado, las paredes se cubrieron
con plstico transparente y se abrieron ventanas de
tamao suficiente para que los nios pudieran introducir
sus brazos para realizar la inoculacin. Antes de iniciar
la inoculacin, se introdujo en la cmara el material
lignocelulsico previamente pasteurizado y los frascos
conteniendo el inoculo (granos de maz infestados con
el hongo). En bolsas de plstico transparentes se
adicion capas alternas de inculo y sustrato cuidando
de no compactar la mezcla. En todos los casos se
utilizaron 2 kg de material vegetal y se inocul con 200
g de inoculo. Se realiz un total de 10 rplicas por cada
sustrato utilizado. Los cultivos se introdujeron en la
cmara de incubacin ubicada en el saln de clases, sus
dimensiones fueron 0,80 x 2 x 2 m las paredes y piso
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estaban formadas por cortinas de plstico transparente, se utiliz hoja de caa con cal (34,703,21), siendo los
soportadas por alambres tensados, se dispuso de 2 dos ensayos con tusa de maz los de menor eficiencia.
ventanas de ventilacin de 0,4 x 0,4 m cubiertas con
tela anti-afidios. Las temperaturas oscilaron entre 23 C Tabla 1. Efecto del tipo de sustrato sobre la eficiencia
biolgica en los cultivos de P. ostreatus. en los ensayos
y 28C. Las bolsas conteniendo los cultivos se
de laboratorio.
suspendieron del techo de la cmara cuidando de Sustrato Eficiencia Biolgica
mantener entre ellos una distancia mnima de 20 cm. 52,522,51
Hoja de caa de azcar
durante los primeros das los cultivos permanecieron en Tusa de maz 26,166,42
la oscuridad para ello se cubrieron con polietileno Hoja de caa 2% cal 34,703,21
negro. Luego de 20 das, se procedi a retirar las bolsas Tusa de maz 2% cal 31,021,10
negras y a perforar las paredes para facilitar la salida de
los primordios, durante todo el proceso, la humedad se Experiencia de campo: los resultados mostrados en la
mantuvo mediante riegos por aspersin 4 veces al da. tabla 2 indican que el mayor valor en la eficiencia
Una vez iniciada la fructificacin se recolectaron biolgica, 32 % se obtuvo en los cultivos sobre conchas
diariamente los carpforos producidos en cada bolsa. de cacao, seguido por las hojas de caa de azcar con
25% y en tercer lugar el aserrn de madera con 22 %. En
Resultados y discusin. estos ensayos la eficiencia biolgica en general fue
Ensayos de laboratorio: la fase de incubacin en menor a la obtenida en los ensayos a nivel de
oscuridad finalizo a los 21 das, tiempo en el cual laboratorios, esto pudo deberse a que las condiciones de
todos los bloques de sustrato fueron invadidos cultivo en el saln no pudieron ser controladas
totalmente por el micelio del hongo. Los cuerpos adecuadamente.
fructferos recolectados fueron pesados para la
Tabla 2. Efecto del tipo de sustrato sobre la eficiencia
estimacin de la EB, proceso que se realiz para tres biolgica en los cultivos de P. ostreatus. en los ensayos
cosechas del cultivo. Los carpforos obtenidos de campo.
Sustrato Eficiencia Biolgica
presentaron un color blanco a blanco crema, textura
carnosa, olor caracterstico, el dimetro del pleo fue Hoja de caa de azcar 253,50

muy variado entre 8 y 25 cm. En la figura 1, se muestra Conchas de cacao 324,42

varias etapas del crecimiento P. ostreatus. Aserrn de madera 222,31

1 2 3
Figura 1. Etapas de crecimiento del P. ostreatus.
Bloques de sustratos totalmente invadidos (1),
primordio (2), cuerpos fructferos maduros (3).
Como se observa en la tabla 1, el ensayo donde se
utiliz hoja de caa presento la mayor eficiencia
biolgica (52,522,51), seguida del tratamiento donde
En lo referente a la intervencin de la profesora,
estudiantes y representantes del 5to grado del
CEAPULA en la realizacin de los experimentos, se
logr que todos participaran desde la fase de
preparacin de sustratos hasta la recoleccin de
carpoforos durante y al final del proceso, los alumnos
fueron evaluados por la profesora con respecto a los
conocimientos y destrezas adquiridas durante el ensayo
con resultados altamente satisfactorios. En la figura 2 se

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muestra la evolucin de los cultivos en sus distintas
etapas.
a b
c 4. Martinez-Correa, D., Sabal, M., Morales, P.,
Figura 2. Etapas de los cultivos de P. ostreatus: (a)
cultivos recin inoculados en condiciones de oscuridad,
(b) sustrato totalmente colonizado por el hongo inicio
de la fase de induccin en la luz (c), primordios y
carpfagos maduros.
Conclusiones. .
La hoja de caa representa un potencial como
sustrato en el cultivo de hongos, no solo por la
capacidad invasiva del Pleurotus ostreatus sobre el
mismo, sino por su disponibilidad.
El cultivo de Pleurotus ostreatus podra ser
incorporado como herramienta en la enseanza de la
biologa como queda demostrado con la experiencia
realizada en un ambiente escolar con los nios de 5to
grado del colegio CAPULA.
El cultivo de Pleurotus ostreatus representa una
tecnologa fcil de implementar, representando un
alternativa de produccin de alimentos de alto valor
nutricional desde niveles artesanales a industriales.
Palabras clave: Pleurotus ostreatus. Agroecolgico.
Desechos lignocelulsicos
Referencias:
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Biomarcadores y parmetros clnicos en pacientes con neumona adquirida
en la comunidad
Biomarkers and clinical parameters in patients with community-acquired pneumonia

Larreal Yraimaa, Arias Juliab, Chacn Betulioc, Morales Rosmaryd, Espina Luz Marinaa , Montiel Milagrosb,
Gil ngelae, Jaimes Patriciaf, Lanoy Nidiaf, Mrquez Marag, Valero Nereidaa.
a
Instituto de Investigaciones clnicas Dr. Amrico Negrette. Facultad de Medicina. LUZ. b Prctica
Profesional de Inmunologa. Escuela de Bioanlisis. Facultad de Medicina. LUZ. c Escuela de Medicina.
Facultad de Medicina. LUZ. d Post-Grado de Pediatra. Hospital General del Sur Dr. Pedro Iturbe.
e
Laboratorio clnico Hospital Universitario de Maracaibo. fLaboratorio Clnico Maternidad Armando
Castillo Plaza. gLaboratorio de Salud Pblica del estado Zulia. Maracaibo. Estado Zulia-Venezuela.

Introduccin: Las neumonas extrahospitalarias son la principal causa de muerte de origen infeccioso en todo el mundo.
Para determinar la gravedad, necesidad de hospitalizacin e inicio de antibioticoterapia se han desarrollado puntuaciones
de gravedad para ser usadas en conjunto con diferentes biomarcadores. En este estudio se plantea como objetivo,
relacionar parmetros clnicos de respuesta inflamatoria aguda, con algunos mediadores inflamatorios. Metodologa: A
32 pacientes con diagnstico clnico de neumona, se les tomaron muestras de secrecin respiratoria para cultivos virales y
bacteriolgicos por mtodos convencionales, adems de muestras sanguneas para la obtencin de suero y posterior
determinacin de anticuerpos especficos por IFI y valoracin de las concentraciones de proteina C reactiva ultrasensible
(PCRus) y procalcitonina (PCT) con las tcnicas de quimioluminiscencia y fluorescente ELFA respectivamente.
Resultados: El 62,5 % de los pacientes fueron del sexo masculino y 56,2% menores de 5 aos de edad. La temperatura
corporal y la frecuencia respiratoria estuvieron aumentadas en 18,7% y 25% respectivamente. 43,5% de los pacientes
presentaron leucocitosis. Mycoplasma pneumoniae result el patgeno principalmente identificado. La PCRus result
elevada en 62,4%, con asociacin a infeccin bacteriana estadsticamente significativa (p<0,01). La PCT result > 0,5-2
ng/ml en 12,5%, quienes tuvieron leucocitosis, PCR elevada y cultivo bacteriolgico positivo. Conclusiones: El uso de
los biomarcadores en conjunto con la valoracin clnica constituyen una herramienta til en el diagnstico diferencial de
las neumonas; sin embargo, su baja especificidad limita su utilidad diagnstica, asimismo la cintica variable de estos
marcadores promueve a tomar en cuenta ms que su valor absoluto, la variacin temporal, lo cual los hace principalmente
tiles en pronstico y monitoreo de teraputica.

Palabras clave: Neumonia, Biomarcadores, PCR.

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REA MICROBIOLOGA AMBIENTAL

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Produccin de enterotoxinas en cepas de Staphylococcus aureus y Staphylococcus
coagulasa negativa aisladas de bovinos y caprinos con mastitis subclnica
Production of enterotoxins by Staphylococcus aureus and coagulase negative Staphylococci strains
isolated from bovine and goats subclinical mastitis

Valero Leal Kutchynskayaa*, Ferrer Yonairab, Barrios Enab,

Colina Gladisc, Valeri Robert d, Boscn Julio d
a
Bacteriologa Clnica Escuela de Bioanlisis Universidad del Zulia; b Licenciada en Bioanlisis; c Escuela de
Bioanlisis Universidad del Zulia; d Facultad de Ciencias Veterinarias Universidad del Zulia.

*Correspondencia autor principal

Email:kutchynskaya@gmail.com

Introduccin. SCN aisladas de bovinos y caprinos con mastitis

Un pre requisito para producir leche higinica y de
buena calidad es, que sea proveniente de una glndula
mamaria sana, sin embargo, con frecuencia es
producida en un cuarto mamario afectado por mastitis.
La mastitis o inflamacin de la glndula mamaria se
produce principalmente en respuesta a la presencia de
un microorganismo infeccioso.
infecciosa es la de mayor prevalencia en el ganado
lechero y la responsable de
econmicas para los productores a nivel mundial ]1].
Aunque, se han implicado ms de 137 especies
bacterianas diferentes como agentes causales de la
mastitis [2], Staphylococcus aureus y Staphylococcus
coagulasa negativa (SCN) son uno de los principales
patgenos [3,4]. Uno de los factores de virulencia ms
estudiados en S. aureus es
enterotoxignico, razn por la cual el recuento de S.
aureus se incluye en las regulaciones microbiolgicas
establecidas por los gobiernos y la industria. Sin
embargo, aunque se ha reportado la capacidad de los
SCN de producir enterotoxinas y su asociacin con
brotes en intoxicacin alimentaria, este grupo de
bacterias son considerados como contaminantes y no
son tomados en cuenta a la hora de establecer
normativas de calidad en alimentos [5]. El objetivo de
este trabajo fue determinar la
enterotoxinas en cepas de Staphylococcus aureus y
subclnica cuya leche se destina a la elaboracin de
queso fresco artesanal.
Materiales y Mtodos.
Se estudiaron un total de 308 cepas del gnero
Staphylococcus. De estas cepas, 227 eran S. aureus y 81
Esta enfermedad eran SCN, las cepas se aislaron de leche de cuartos
mamarios de bovinos y caprinos con mastitis subclnica.
grandes prdidas Las 227 cepas de S. aureus fueron aisladas de 187
muestras de leche de cuartos mamarios de bovinos y 40
de leche de cuartos mamarios de caprinos. En el caso de
los 81 aislamientos de SCN, 41 eran de origen bovino y
40 de origen caprino. Para la deteccin de las
enterotoxinas A, B, C y D se utiliz la tcnica de
aglutinacin en ltex en fase reversa (RPLA) (Oxoid,
su potencial Ltd., Basingstoke, United Kingdom). Se utiliz
estadstica descriptiva para determinar el porcentaje de
cepas enterotoxignicas y no enterotoxignicas. Se
construyeron tablas de contingencia 2 x 2, para las
variables dependientes y dicotmicas (Si/No) cepas de
S. aureus y cepas de SCN productoras de enterotoxinas
y no productoras de enterotoxinas y para el tipo de
especie (S. aureus y SCN) contra la variable
independiente origen de las cepas (leche de bovinos y
leche de cabra), con el fin de determinar la relacin
produccin de entre las variables mediante el estadstico Chi-cuadrado
(2). Los resultados del anlisis estadstico fueron

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interpretados con un nivel de confiabilidad del 95%. los aislamientos, el mayor nmero de cepas productoras
Los datos fueron analizados estadsticamente mediante de enterotoxinas (SEs) provenan de las muestras de
el programa Statgraphics plus versin 5.1. leche de vaca con mastitis subclnica (27/187; 14,44%)
en comparacin con los aislamientos de leche de cabra
Resultados y Discusin. (1/40; 2,5%), estos resultados fueron significativamente
De las 227 cepas analizadas de S. aureus por la diferentes (P < 0,01) (Tabla 2).
tcnica de RPLA, 28 (12,33%) fueron positivas para
algunas de las enterotoxinas evaluadas, mientras que de Tabla 2. Distribucin de acuerdo al origen de las cepas
de S. aureus productoras y no productoras de SEs
las 81 cepas de SCN slo 1 (1,23%) result productora
Origen del N Cepas N Cepas no Total
de enterotoxina, estos resultados fueron aislamiento productoras productoras
SEs (%) SEs (%)
significativamente diferentes (P < 0,01) (Tabla 1).
Leche de 27 (14,44)* 160 (85,56) 187
vaca
Tabla 1. Capacidad enterotoxignica de cepas de S. Leche cabra 1 (2,5)* 39 (97,5) 40
aureus y Staphylococcus coagulasa negativa (SCN) Total 28 199 227
aisladas de leche de bovinos y caprinos con mastitis *Diferencia significativa (P < 0,01)
subclnica
Estos resultados son similares a lo reportado por
Produccin de N de aislamientos (%)
Enterotoxinas S. aureus SCN Total Cremonesi y col. [8] y Morandi y col. [9] en Italia
Cepas 28 (12,33)* 1 (1,23) 29 quienes al evaluar la produccin de enterotoxinas
productoras
utilizando el mtodo de RPLA, reportaron una mayor
Cepas no 199 80 (98,77) 279 produccin de enterotoxinas en las cepas de S. aureus
productoras (87,67)*
aisladas de leche de vaca en comparacin con los
Total 227 81 308 aislamientos obtenidos de leche de cabra. Pero difieren
*Diferencia significativa (P < 0,01)
de lo reportado por Rodrigues y col. [10] en rebaos de

La mayor capacidad enterotoxignica de las cepas de vacas y cabras en Brasil, quienes encontraron que las

S. aureus en relacin con las cepas de SCN han sido cepas de S. aureus provenientes de leche de cabra con

sealadas por otros autores en aislamientos obtenidos de mastitis subclnica eran ms productoras de

diversas fuentes. Vasil [6], al utilizar el mtodo de enterotoxinas (86%) que, las cepas aisladas en leche de

ELISA para determinar la produccin de enterotoxinas vaca con mastitis (9,4%) resultados que fueron

clsicas en las cepas de Staphylococcus causantes de confirmados molecularmente. Las diferencias

mastitis en dos rebaos de ovejas en Slovakia obtuvo observadas pueden deberse a la diversidad del rea

como resultado que las cepas de S. aureus eran ms geogrfica, el tipo de manejo y el medio ambiente,

productoras de enterotoxinas (64%) en comparacin factores que determinan las caractersticas de la cepa e

con las cepas de SCN (36%). Rosec y Gigaud, [7] al inciden en la distribucin de las cepas enterotoxignicas

utilizar ELISA en aislamientos de S. aureus y SCN de S. aureus [9,11].

provenientes de diferentes tipos de alimentos en Francia La distribucin de los diferentes tipos de

obtuvieron que ninguna de las cepas de SCN eran enterotoxinas clsicas detectadas se presenta en la Tabla

productoras de enterotoxinas, mientras que el 29% de 3. En las cepas de S. aureus aisladas de leche de

las cepas de S. aureus fueron capaces de producir al bovinos se detect un mayor porcentaje de SEB (12/28;

menos un tipo de enterotoxina. De acuerdo al origen de 42,86%), seguido de SEA (6/28; 24,43%) y en menor

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porcentaje SEC (3/28; 10,71%) y SED (3/28; 10,71%). actividad de superantgeno por parte de las SEs
Dos cepas (2/28; 7,14%) produjeron SEB+SEC y slo ocasiona un aumento en la produccin y liberacin de
una cepa produjo SEA + SEB (1/28; 3,57%). Mientras interleucina 2 a nivel del tejido mamario lo que conlleva
que la nica cepa enterotoxignica de SCN aislada de al proceso inflamatorio en el tejido antes mencionado
leche de bovinos fue coproductora de las SEB + SED. [19, 20].
En cuanto al nico aislamiento de S. aureus procedente
de leche de cabra se caracteriz por ser productor de Conclusiones.
SED. Los resultados sugieren que los productos
elaborados a partir de leche cruda, como son los quesos
Tabla 3. Tipos de Enterotoxinas clsicas producidas por frescos artesanales de amplio consumo en la poblacin
las cepas de S. aureus y SCN aisladas de leche de cabras y
zuliana, tienen un alto riesgo de intoxicacin
bovinos con mastitis subclnica
Origen de la Cepas N (%) alimentaria por Staphylococcus, debido al potencial
Tipos de Leche de Leche de
enterotoxignico detectado en las cepas evaluadas y
Enterotoxinas Cabras Bovinos
S. SCN S. SCN Total aunque solo se detecto una cepa de SCN
aureus aureus
enterotoxignica esta se caracteriz por ser
SEA 0 (0) 0 (0) 6 0 (0) 6
(24,43) coproductora de SEB+SED, microorganismo que es
SEB 0 (0) 0 (0) 12 0 (0) 12 considerado como contaminante y por lo tanto su
(42,86)
SEC 0 (0) 0 (0) 3 0 (0) 3 deteccin se pasa por alto en las determinaciones
(10,71) microbiolgicas de calidad en los alimentos.
SED 1 0 (0) 3 0 (0) 4
(3,57) (10,71)
SEA-SEB 0 (0) 0 (0) 1 0 (0) 1 Palabras clave: enterotoxinas, mastitis subclnica, S.
(3,57)
SEB-SEC 0 (0) 0 (0) 2 0 (0) 2 aureus, SCN, leche de bovinos, leche de caprinos.
(7,14)
SEB-SED 0 (0) 0 (0) 0 (0) 1(100) 1
Referencias:
Estudios previos muestran que existe una variacin 1. Ruegg P. Investigation of mastitis problems on
farms. Vet Clin Food Anim. 2003; 19: 47-73.
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diversos pases, por ejemplo en aislamientos de S. 2006; 89: 2542-2551.
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aureus en vacas con mastitis subclnica en Turqua, Garca D, Hernndez L, Prez M. Bacterias
Latvia y Corea del Sur, la SEA fue la ms prevalente patgenas potenciales al inicio del periodo seco
de vacas doble propsito con mastitis subclnica.
(11, 12, 13), en Italia, Marruecos e Irn se ha reportado Rev Cient FCV-LUZ. 2009; 3: 277-283.
principalmente las SEA y SED [8, 9, 14, 15], en Brasil 4. Caldern A, Rodrguez V, Arrieta G, Mttar S.
Prevalencia de mastitis bovina en sistemas doble
la SED [16], mientras que en Suiza y Argentina la SEC propsito en Montera (Colombia): etiologa y
fue la ms prevalente [17, 18]. Es importante sealar susceptibilidad antibacteriana. Rev Colomb Cienc
Pecu. 2010; 24:19-28.
que se cree que las SEs contribuyen en la patognesis 5. Veras JF, Do Carmo LS, Tong LC, et al. A study
de la mastitis, al estimular en forma no especfica la of the enterotoxigenicity of coagulase-negative
and coagulase-positive staphylococcal isolates
produccin de linfocitos T en el hospedador, esta from food poisoning outbreaks in Minas Gerais,
Brazil. Int J Infect Dis 2008;12 : 410415.

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Susceptibilidad de cepas autctonas de Escherichia coli a la infeccin por colifagos
procedentes de muestras ambientales
Susceptibility of Escherichia coli strains native to infection by phages from environmental samples

Ros Arnaldoa, Montiel Marynesa , Rincn Milagrosb

a
Unidad de Investigacin en Microbiologa Ambiental, Facultad experimental de Ciencias, Universidad del
Zulia, b Laboratorio de Microbiologa Acutica, Facultad Experimental de Ciencias, Universidad del Zulia

Introduccin: Los colifagos son bacterifagos que infectan a la bacteria Escherichia coli y han sido propuestos como
indicadores de contaminacin. La presencia de colifagos en heces humanas y desages es constante, su deteccin es fcil
y rpida. A pesar de los amplios estudios realizados con colifagos y en su deteccin, todava no se ha llegado a un acuerdo
sobre un mtodo estndar para el anlisis de colifagos. Una de las cuestiones que ha retrasado la decisin es la eleccin de
un buen hospedador. El objetivo de esta investigacin fue evaluar la susceptibilidad de cepas autctonas de E. coli a la
infeccin por colifagos procedentes de muestras ambientales recolectadas en el Sistema del Lago de Maracaibo.
Metodologa: Se aislaron e identificaron cepas de E. coli provenientes de agua, sedimento y almeja, segn la tcnica
descrita en los mtodos estndares (APHA). La cuantificacin de los colifagos se realiz por la tcnica de capa doble
descrita en el APHA (2005). Como hospederos controles se utilizaron las cepas de E.coli ATCC 13706 y 700891.
Resultados: Se aislaron e identificaron 21 cepas autctonas de E. coli. El 80,9% (17/21) de las cepas fueron susceptibles a
la infeccin por colifagos en ensayos previos, se seleccionaron las mejores nueve cepas para el anlisis de cuantificacin.
El conteo de colifagos ms alto fue el conseguido por la cepa ATCC 13706 con 366 UFP/ml en una de las muestras,
seguido por el hospedero AG-7 con 287 UFP/ml y luego por la cepa ATCC 700891 con 170 UFP/ml. La cepa ATCC
13706 detect colifagos en cada una de las muestras analizadas, seguidamente por los hospedadores autctonos SD-7 y
SD-10. Conclusin: La susceptibilidad de los hospedadores autctonos a la infeccin por colifagos es variable y depende
tanto del hospedador que se utilice como del tipo de colifagos que se encuentran en el ambiente.

Palabras clave: Colifagos, hospedador, Escherichia coli, ambiente, indicadores de contaminacin.

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Evaluacin del efecto de diferentes concentraciones de queroseno sobre el crecimiento
de bacterias provenientes de un ambiente acutico contaminado con petrleo
Evaluation of the effect of different concentrations of kerosene on the growth of bacteria from an aquatic
environment contaminated with oil

Rincn Milagrosa, Soto Luz Marinaa, Ros Arnaldob

a
Laboratorio de Microbiologa Acutica, Facultad Experimental de Ciencias, Universidad del Zulia
b
Unidad de Investigacin en Microbiologa Ambiental, Facultad experimental de Ciencias,
Universidad del Zulia

Introduccin: Los derrames de petrleo incorporan al ecosistema acutico hidrocarburos que provocan cambios en la
estructura, fisiologa y diversidad de las comunidades microbianas. A su vez, las comunidades microbianas desempean
procesos metablicos que previenen y controlan los daos ocasionados por ciertos contaminantes, ya que existen
microorganismos que tienen la capacidad de utilizar estos hidrocarburos como fuente de carbono y energa. Por ello, el
objetivo de este estudio fue evaluar el efecto del queroseno sobre el crecimiento de bacterias procedentes de un ambiente
contaminado con petrleo. Metodologa: Se tomaron muestras de agua por duplicado, fueron filtradas por una red de
zooplancton de 45m, expuestas a diferentes concentraciones de queroseno (0,5, 1, 5% v/v) y un control sin queroseno,
luego se incubaron a 32C por un periodo de 19 das. Las muestras se tomaron cada 24 a 48 horas, tiempo al cabo del
cual se fijaron con formol, tomando 1ml de la muestra, filtrando y cuantificando el crecimiento bacteriano mediante la
tcnica de epifluorescencia. Resultados: Los diferentes tratamientos con queroseno dieron como respuesta sucesiones de
tipo alognica y autognicas, con diferentes poblaciones pertenecientes al gremio de las degradadoras de queroseno,
mostrando que el ptimo de crecimiento fue a la concentracin de 5% con la mayor abundancia de 1,56E+07 Cel/mL, y la
mayor tasa de crecimiento con una velocidad de crecimiento de = 0,025das-1 y con el menor tiempo de duplicacin,
siendo td de 27,72 horas, adems la forma que mejor se adapt fueron los bastones libres con un porcentaje mayor de
(47,20%). Conclusin: El queroseno fue utilizado como efecto nutriente para el crecimiento bacteriano, mientras la
forma bacteriana exhibe cambios morfolgicos al ser expuestas al queroseno.

Palabras clave: Hidrocarburos, queroseno, crecimiento bacteriano, sucesin alognica, sucesin autognica,
epifluorescencia

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Calidad microbiolgica del agua para consumo humano de la poblacin de Santa
Rosa de Agua, Maracaibo, Estado Zulia
Microbiological Quality of Drinking Water in the Town of Santa Rosa de Agua, Maracaibo, Zulia

Tern Greisisa, Gonzlez Arleya, Montiel Marynesa, Moran Yoraidab, Balzan Eddy Karinac.
a
Universidad del Zulia; b Centro de Educacin Popular (CEP); c Instituto Zuliano de Investigaciones
Tecnolgicas.

Introduccin: El agua es un recurso esencial para toda forma de vida, casi las tres cuartas partes de nuestra superficie
terrestre est cubierta de agua, constituye del 50 al 90% de la masa de los organismos vivos, es necesario que su calidad
microbiolgica sea ptima para el consumo humano para evitar las enfermedades de transmisin hdrica. La investigacin
tiene como finalidad evaluar la calidad microbiolgica del agua para consumo humano de la poblacin de Santa Rosa de
Agua Maracaibo Estado Zulia. Metodologa: se emple el mtodo de membrana filtrante descrita por COVENIN para
aerobios mesfilos, coliformes totales y fecales, y la tcnica de agar en capa simple para la deteccin de colifagos, descrita
por la Agencia de Proteccin Ambiental (EPA, por sus siglas en ingles). El trabajo se efectu entre noviembre del 2012 y
abril del 2013. Para la toma de la muestra, se seleccionaron diez sitios de inters para la comunidad recolectando un total
de 60 de muestras. Resultados: se detect valores por encima de lo establecido en la normativa venezolana para agua
potable, en el 65% de las muestras para coliformes totales, 18,3% para coliformes fecales y 83,3% para aerobios
mesfilos. Por otra parte el 66,6% de las muestras fueron positivas para los colifagos F+ mientras que para los somticos
el 38,3%. Conclusin: Se encontr que el 85% de las muestras analizadas no estn aptas para el consumo humano, ya que
no cumplen con las normas sanitarias para la calidad del agua establecidas en la Gaceta Oficial de la Repblica de
Venezuela 36.395.

Palabras clave: Calidad, Indicadores, Santa Rosa, agua, microorganismos.

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Niveles Fngicos ambientales y sensibilizacin a los Aeroalrgenos en el departamento
de registro y estadstica de Salud Hospital Universitario
Dr. Alfredo Van Grieken, Coro-Venezuela
Enviromental fungal levels and aeroallergens sensibilization in the Registration and Statistics
Health Department of Dr. Alfredo Van Grieken University Hospital Coro-Venezuela

Oberto-Perdign Lairet a, Miquilena Nellya , Yegres Francisco a, Navas Patriciaa, Silva Ricardob.
a
Laboratorio de Investigacin y Apoyo Docente Santa Ana, Universidad Nacional Experimental Francisco de
Miranda; b Ctedra de Microbiologa; Universidad Nacional Experimental Francisco de Miranda.
lairetop2@gmail.com

Introduccin. son hongos patgenos o toxignicos [9]. En la

La prevalencia de las enfermedades alrgicas oscila actualidad a pesar de no existir un consenso
entre 10 y 30% a nivel mundial, representando un internacional para establecer niveles de esporas
problema de salud pblica, siendo los ms comunes: fngicas en ambientes contaminados o no, varias
Conjuntivitis alrgica, rinitis y asma [1,2]. Las Instituciones han establecido normativas en diferentes
enfermedades alrgicas respiratorias son ocasionadas pases o regiones tales como ACGIH, Healthy
por alrgenos o aeroalrgenos, desencadenantes de Building Internacional y Brazilian Health Ministry,
enfermedades atpicas: caros del polvo, polen epitelio entre otros [10,11]. Se plante como objetivo
de animales (perro, gato), plumas, chiripas y hongos determinar los niveles fngicos ambientales y la
[3,4,5]. En alergologa existe una relacin entre el sensibilizacin a los aeroalrgenos en los trabajadores
aumento de niveles y esporas fngicas en el ambiente del Departamento de Registro y Estadstica de Salud del
donde habita o trabaja el individuo (interior/exterior) y Hospital Universitario Dr. Alfredo Van Grieken de
la presencia de sntomas alrgicas. Se considera que la Coro-Venezuela.
exposicin de 1000 esporas/m3 de aire incrementa entre
10 y 30% la posibilidad de desarrollar sntomas Material y mtodos.
alrgicos [5,6]. La poblacin qued conformada por 7 trabajadores
En las manifestaciones clnicas de alergias que laboran en el Departamento de Registro y
respiratorias por hongos, los ms comnmente Estadstica de Salud del Hospital Universitario Dr.
involucrados son: Alternaria, Aspergillus, Alfredo Van Grieken; la muestra fue igual a la
Cladosporium, Curvularia y Penicillium entre otros poblacin y se obtuvo mediante muestreo intencional.
[5,7,8]. Medicin de Temperatura y Humedad: Se registr
Para clasificar un ambiente como contaminado la temperatura y humedad dos veces al da (09:00am y
autores han planteado que por encima de 30 o 1000 01:00pm) en todas las reas con un Psicrmetro Digital
UFC/m3 se considera ambiente interior contaminado. La (UEI Automotive Compaa PE (Professional
European Collaborative Action clasifica la Equipment) (DTH31) en el mismo sitio donde fueron
concentracin de hongos en oficinas en las siguientes recolectadas las muestras biolgicas.
categoras: muy bajo < 25 UFC/m3, bajo <100 UFC/m3, Toma de Muestra del aire: Los dos ambientes se
intermedio < 500 UFC/m3, alto < 2000 UFC/m3 y muy dividieron en 5 reas, y cada rea se midi en m2. Las
alto > 2000 UFC/m3. En general son aceptables entre muestras se obtuvieron por dos mtodos. El mtodo de
100-750 UFC/m3 en ambiente interior y 50 UFC/m3 si centrifugacin a travs de un muestreador centrfugo

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(Himedia), modelo LA002, serial 471), donde el aire
succionado por un rotor que crea fuerza centrfuga hace
que impacten las partculas sobre una tira de plstico el
cual contiene el medio de cultivo (Agar papa
Himedia) y las capturas fueron por rea (1 vez)
durante un minuto.
El otro mtodo fue el de sedimentacin modificado
donde se exponen las placas de Ptri (90 mm de
dimetro) que contienen el medio de cultivo (Agar
papa) abiertas al medio ambiente por un perodo de 30
min a un metro de altura del suelo. Las placas se
distribuyeron de la siguiente manera: rea 1 (4 placas),
rea 2 (6 placas), rea 3 (2 placas), rea 4 (3 placas) y
rea 5 (3 placas). La diferencia del nmero de placas es
por la diferencia de tamao de las reas por m2. Se
identificaron segn el rea, fecha y hora. Tanto las tiras
retiradas del equipo y las placas de Ptri se incubaron a
temperatura ambiente por 7 das para observar el
crecimiento fngico.
Determinacin de las Unidades Formadoras de
3
Colonias (U FC) por m de aire: El conteo de las UFC
en las Placas de Ptri se realiz utilizando la ecuacin
descrita por Omeliansky[12]
N= C x factor K
T UL/ml.
Donde: N= concentracin microbiana en UFC/m3.
C= nmero de colonias por placa de Ptri
Factor k= una constante 63
T= tiempo de exposicin (min)
El conteo de las FC en las tiras de plstico por el
mtodo de centrifugacin:
UFC/m3: n colonia x 25
Tiempo (min)50
Identificacin de colonias fngicas aisladas: Se
observaron las caractersticas morfolgicas
(macroscpicas y microscpicas) y se identificaron
segn su clasificacin taxonmica.
Determinacin de la Distribucin relativa (DR) de
las colonias [9,13,15].
Se realiz segn Smith [14] que propone calcular la DR
de la siguiente manera:
Distribucin relativa (%) = (No. de colonias del
gnero o especie/ No. Total de colonias de todos los
gneros o especies) x 100
Toma de muestra a los trabajadores: A los
trabajadores del Departamento de Registro y Estadstica
de Salud del Hospital Universitario Dr. Alfredo Van
Grieken, que cumplieron con criterios de inclusin,
consentimiento Informado y llenaron ficha de
Recoleccin de datos. Datos parte I Clnico-
demogrfico (edad, sexo, antecedentes, hbitos,
manifestaciones clnicas respiratorias entre otras) Datos
parte II hallazgos al examen fsico (tensin arterial,
frecuencia cardaca y respiratoria, hallazgos en piel
entre otras). Parte III Nivel de IgE srica y descarte de
Histoplasmosis pulmonar, para lo cual se tomaron 5 cc
de sangre venosa de cada trabajador y se cuantific la
IgE por la tcnica de ELISA en el Laboratorio del
Centro Regional de Inmunologa Clnica el Estado
Falcn, considerando como valor normal de 0-100
Para la determinacin de Histoplasma
capsulatum en sangre, se realiz mediante la tcnica
Comercial de Inmunodifusin en gel de Agarosa marca
IMMY para la deteccin de anticuerpos precipitantes,
se utiliz adems suero control de Histoplasma
capsulatum (IMMY). Parte IV Toma de muestras de
secrecin nasal por hisopado nasal, tomadas del tercio
interior de ambas fosas nasales, y se sembraron en
placas de Ptri que contenan Agar Papa para evidenciar
crecimiento fngico, identificar y cuantificar en UFC,
utilizando la misma metodologa que en muestras de
aire. Las muestras tomadas de ambiente y de las fosas
nasales de los trabajadores se procesaron en el
Laboratorio de Investigacin y Apoyo Docente Santa
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Ana (LIADSA) de la Universidad Nacional
Experimental Francisco de Miranda.
Por ltimo Parte V Prick Test ambiental
(AlkAbell). La prueba de prick test se realiz con
dos controles: control (+) histamina y control (-)
Solucin salina. El mtodo consisti en colocar una
gota de cada extracto alergnico en el antebrazo y se
pinz muy superficialmente con una lanceta, se esper
15 min y se procedi a leer. Se consider grado 1 sin
ppula o meda menos de la mitad del control positivo.
Grado 2 ppula que meda la mitad del control positivo.
Grado 3 ppula que meda igual al dimetro del control
positivo. Grado 4 ppula que meda ms de la mitad del
dimetro del control positivo. Grado 5 ppula que
meda ms de dos veces del dimetro del control
positivo. Los grados 3, 4 y 5 se consideraron positivos.
Se aplicaron los siguientes alrgenos: caros (D.
Farinae, D Pteronyssinus, B. Tropicalis), hongos I
(Alternaria, Aspergillus, Cladosporium, Penicillium),
hongos II (Botrytis, Mucor, Rhizopus, Stemphylium),
hongos III (Chaetomiun, Fusarium, Neurospora,
Pulularia), hongos IV (Epicoccum, Helminthosporium,
Merulius, Trichothecium), polen I (Platanus, Populus,
Salix, Umus), polen II (Betula, Fraxinus, Olea, Quercs,
Llex, Robina), polen III (Avena, Hordeum, Secale,
Triticum), polen IV (Dactylis, Festuca, Lolium, Phleum,
Poa), polen V (Artemisa, Chenopodium, Parietaria,
Plantago), epitelios de animales (gato, perro, plumas) y
cucaracha (Blattella germnica).
Anlisis Estadstico: La significancia estadstica entre
las tcnicas de Centrifugacin y Sedimentacin se
calcul utilizando la prueba estadstica de t Student con
una confiabilidad del 95%, aplicando el paquete
estadstico SPPS versin 10.0 para Window.
Resultados y discusin.
Al analizar los dos ambientes que se subdividieron
en 5 reas, se encontr en el rea 1 por la tcnica de
centrifugacin 775 UFC/m3. Se aisl Aspergillus niger
(54,84%), Aspergillus flavus (25,81%), Cladosporium
spp. (12,90%) y Aspergillus terreus (6,45%). Por la
tcnica de Sedimentacin un total de 39,9 UFC/m3,
Aspergillus niger (47,37%), Aspergillus falvus y terreus
y Cladosporium spp. (15,79%), y Micelio sterilia
(5,26%).
En el rea 2 se obtuvo por centrifugacin 750
UFC/m3, Aspergillus flavus (46,67%), Aspergillus
niger (33,33%) y Cladosporium spp. (20%). Por
sedimentacin se obtuvo 84 UFC/m3, Aspergillus flavus
(27,50%), Aspergillus niger y terreus (22,50%), micelio
sterilia (20%), Cladosporium spp. (5%) y Rhizopus spp.
(2.50%).
En el rea 3 se obtuvo por centrifugacin 250
UFC/m3 y se aisl Aspergillus niger y Clasdosporium
spp. (30%), Aspergillus flavus y micelio sterilia (20%).
Por sedimentacin se obtuvo 14,70 UFC/m3,
Aspergillus flavus (42,85%), micelio sterilia (28,57%),
Aspergillus niger y Rhizopus (14,29%).
En el rea 4 se obtuvo por centrifugacin 600
UFC/m3 se aisl Cladosporium spp. (45,83%),
Aspergillus niger (33,33%), micelio sterilia (12,50%) y
Aspergillus terreus (8,34%). Por sedimentacin se
obtuvo 58,80 UFC/m3, Aspergillus terreus (67,86%),
Aspergillus flavus (17,86%), Aspergillus niger y
Cladosporium spp. (7,14%).
En el rea 5 por centrifugacin se obtuvo 600
UFC/m3 y se aisl Aspergillus niger (50%), Aspergillus
flavus y Cladosporium spp. (20,83%) y Aspergillus
terreus (8,34%). Por sedimentacin se obtuvo 46,20
UFC/m3 y se aisl Aspergillus terreus (50%),
Aspergillus flavus (45,45%) y micelio sterilia (4,55%).
La temperatura promedio que se registro fue de 16,92C
y la humedad relativa promedio fue de 48,73%.
El 85,71% de los trabajadores expresaron
antecedentes atpicos 55,65% por rinitis y 22,22% por
alergia a medicamentos y conjuntivitis alrgica, y el
14,29% neg antecedentes atpicos.
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En los cultivos obtenidos del hisopado nasal, hubo pero para el resto de las Instituciones citadas sera
crecimiento fngico en un 100%. Se contabiliz 129 catalogado como no contaminado por el mtodo de
UFC, se aisl Aspergillus niger (48,20%), Aspergilus sedimentacin y altamente contaminado por el mtodo
terreus (17,27%), Aspergillus flavus (15,83%), Micelio de centrifugacin [16].
sterilia (12,23%) y Rhizopus spp. (6,47%). El gnero predominante fue Aspergillus por ambos
Los niveles de IgE srica total fueron elevados en mtodos, coincidiendo con otros autores, aunque
42,86% (2/7) y 57,14% (5/7) se encontraron dentro de algunos consideran que ms de 50 UFC/m3 por este
los valores normales. Y a la prueba de Inmunodifusin gnero, es un ambiente contaminado por la alta
para Histoplasmosis resultaron negativos. alergenicidad, patogenicidad y toxicidad que el gnero
De los alrgenos empleados con la prueba de Prick Aspergillus ocasiona, siendo ampliamente descrito en la
Test los trabajadores presentaron reaccin a los caros literatura [15,17,18].
(42,86%) D farinae, D pteronyssinus, B. tropicalis as Las muestras tomadas a los trabajadores mediante
como al extracto de cucaracha (28,58%) Blatella hisopado nasal fue Aspergillus el gnero ms frecuente
germnica, seguido de extracto de epitelio de perro coincidiendo con los resultados ambientales lo cual
(14,28%). puede ser un factor predisponente a desarrollar o no
Al analizar las concentraciones fngicas por ambos alergias a hongos por la exposicin diaria a estos
mtodos se comprob que los valores fueron mayores aeroalrgenos [9,13]
por el mtodo de centrifugacin (2975 UFC/m3) que por Al aplicar las pruebas cutneas ningn trabajador fue
el mtodo de sedimentacin (243,60 UFC/m3). La sensible a los diferentes extractos de hongos, y con la
significancia bilateral entre las tcnicas de prueba serolgica de IgE slo resultaron positivos dos
Centrifugacin y Sedimentacin fue altamente trabajadores, por lo cual la IgE no se usa como
significativa p <0.01 (1%), segn la prueba estadstica t indicador exclusivo diagnstico ya que no es especfico
Student (-5,789). Actualmente no existen Normas y puede elevarse por otras causas diferentes.
Internacionales para establecer los lmites de
contaminacin ambiental, pero hay estudios y Conclusiones.
normativas establecidas por Instituciones en ciertos El Departamento de Registro y Estadstica de Salud
pases o regiones. La norma por la Conferencia del Hospital Universitario de Coro Dr. Alfredo Van
Americana de Higienistas Industriales Gubernamentales Grieken se considera un ambiente contaminado por los
(ACGIH) y el US Public Health Service, recomiendan dos mtodos utilizados y sigue siendo el gnero
3
hasta 200 UFC/m como valor lmite para bioaerosoles Aspergillus y la especie niger la ms aislada tanto en
fngicos en ambientes interiores. La Unin Europea las muestras areas del departamento como en las
estableci un lmite de 500 UFC/m3 para ambientes muestras obtenidas de los hisopados nasales. El mtodo
interiores no contaminados. Instituciones como Healthy de centrifugacin una vez ms demuestra ser el mtodo
Building International y Brazilian Health Ministry ms idneo, ms efectivo y preciso porque no
establecen como lmite de contaminacin 750 UFC/m3 discrimina la densidad de flotacin de cualquier espora
y otros establecen como un ambiente interno fngica suspendida en el aire.
contaminado hasta 300 UFC/m3. Por lo tanto en este
estudio segn ACGIH y el US Public Health Service Palabras clave: Aeroalergenos, Hisopado nasal,
Niveles fngicos, Aspergillus niger
sera un ambiente contaminado por ambos mtodos,

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Caracterizacin por PCR de aislados de Escherichia coli procedentes de aguas
marinas costeras del estado Sucre, Venezuela
PCR Characterization of Escherichia coli isolates from coastal sea waters of Sucre state, Venezuela

Martnez Rosa E. Villalobos de B. Luz Bettina

Universidad de Oriente, Ncleo de Sucre, Postgrado en Biologa Aplicada

Introduccin: Las playas como zonas de esparcimiento pueden estar contaminadas por agentes patgenos causantes de
infeccin. Ante tal situacin, se propuso determinar la presencia de cepas de Escherichia coli patgenas asociadas a casos
de diarrea aguda en aguas marinas destinadas a actividades recreacionales, procedentes de 5 playas reconocidas del estado
Sucre (Pen, Cul, Girintal, Quetepe y Tocuchare). Metodologa: Para el aislamiento de E. coli se utiliz la tcnica de
filtracin por membrana (APHA-AWWA-WPCF). La identificacin de las cepas se realiz por pruebas (IMVIC) y
confirmadas por el sistema API 20E. La extraccin de ADN se realiz por el mtodo de lisis por calentamiento. La
identificacin de los genes de patogenicidad se llev a cabo por PCR determinando la presencia de los genes eae y bfp
para E. coli enteropatgena (ECEP), st y lt para E. coli enterotoxignica (ECET), ipaH y virF para E. coli enteroinvasiva
(ECEI), sxt1 y sxt2 para E. coli shigatoxignica (ECST), aafII para E. coli enteroagregativa (ECEA), y daaE para E. coli
de adherencia difusa (ECAD). Resultados: Se logr aislar e identificar un total de 77 (96,25%) cepas de E. coli. Del
96,25% de las cepas, 35,00% fueron recuperadas de playa Peon, 11,25% de playa Cul, 23,75% de playa Girintal,
6,25% de playa Quetepe y 20,00% de playa Tocuchare. La amplificacin por PCR de los genes de virulencia asociados
a las categoras diarreognicas de E. coli, revel que del total de las cepas aisladas, 16,90 % eran del tipo (ECEP), 6,50%
del tipo (ECEAgg), 2,60% del tipo (ECST) y 74,00% eran cepas no patgenas. No se identificaron los patotipos (ECET),
(ECEI) y (ECAD). Conclusin: Los resultados obtenidos en este estudio indican que los genes asociados con factores de
virulencia de E. coli, estn distribuidos en cepas de aguas marinas recreacionales, por lo menos en la zona geogrfica
analizada.

Palabras clave: Escherichia coli diarreognicas, PCR, aguas marinas recreacionales.

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Calidad Microbiolgica de las aguas costeras del Pen, Cul, Girintal, Quetepe, y
Tocuchare, ubicadas entre los Municipios Sucre y Bolvar, estado Sucre, Venezuela
Microbiological quality of coastal waters of Peon , Cul, Girintal, Quetepe, and Tocuchare,
located in Sucre and Bolvar Municipality, Sucre state, Venezuela

Castillo Lena Karinaa*, Martnez Rosa Elenab, Villalobos de B, Luzb.

a
Escuela de Ciencias, Universidad de Oriente, Departamento de Biologa; b Postgrado en Biologa Aplicada,
Universidad de Oriente, Ncleo de Sucre.
lenacastillo@hotmail.com

Introduccin. presencia de Clostridium perfringens (CP) como

La contaminacin biolgica de las aguas marinas indicador microbiolgico de contaminacin de aguas,
costeras se ha convertido en un problema que requiere antes la posible ausencia de contaminacin reciente por
una especial atencin, debido al aumento progresivo de coliformes fecales. Para su determinacin se utiliz el
la introduccin de contaminantes por parte del hombre mtodo de Abeyta y col. [4], el cual consisti al igual
[1,2]. El estado Sucre cuenta con un conjunto de playas que en los coliformes fecales, en la fermentacin
de inters turstico, de las cuales muy pocas son tormentosa por tubos mltiples conteniendo el medio
monitoreadas para conocer la calidad de sus aguas. Por leche ms sulfato de hierro. Los tubos que resultaron
tal motivo, el objetivo del presente trabajo fue positivos para (CF), (EF) y (CP), fueron confirmados en
determinar la presencia de indicadores microbiolgicos medios de cultivos tradicionales como agar eosina azul
de contaminacin en las aguas de las Playas: Pen, de metilo, agar bilis esculina y triptosa Sulfito
Cul, Girintal, Quetepe y Tocuchare, todas Cicloserina, respectivamente. La identificacin
pertenecientes al estado Sucre. bioqumica de las cepas bacterianas aisladas, se realiz
segn pautas de identificacin bioqumica Koneman y
Material y mtodos. col. [5].
Se recolect una muestra mensual por un perodo de
seis meses, en playa Pen (102655N y Resultados y discusin.
640516O), Cul (102628N y 640343O), Las bacterias coliformes totales y fecales se utilizan
Girintal (102625N y 640230O), Tocuchare en varios pases al igual que en Venezuela, para evaluar
(1026342N y 640025 O) y Quetepe (102607N las condiciones microbiolgicas de las aguas
y 640120O). El muestreo se realiz en una sola recreacionales, las destinadas al crecimiento de
estacin por playa, a una distancia de 3 metros de la moluscos bivalvos y tambin, las de las aguas arrojadas
orilla, a una profundidad de 30 cm y en contra de la al medio marino-costero [6]. Segn gaceta 883 [7],
corriente. A cada muestra de agua por separado, se les dichas descargas no deben contener ms de 1000
determin nmero ms probable (NMP) por el mtodo NMP/100 ml de coliformes totales y 200 NMP/100 mL
de fermentacin por tubos mltiples, utilizando caldo de coliformes fecales. De las 5 playas monitoreadas,
lactosado para la determinacin de coliformes totales Peon, Guirintal y Tocuchare, mostraron violaciones
(CT), caldo verde bilis brillante a 44C para coliformes consecuentes a los estndares de calidad de aguas
fecales (CF) y caldo azida glucosa para enterococos recreacionales para los parmetros microbiolgicos
fecales (EF) [3]. De igual modo se determin la evaluados. Para coliformes totales se observ en

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promedio para playa Pen, Guirintal y Tocuchare
valores de 1733, 1141 y 1443 NMP/100 mL
respectivamente, coliformes fecales (1487, 1005, y
1310 NMP/100 mL). En el caso de los enterococos, al
no estar incluidos en la gaceta 883 [7], la evaluacin de
este indicador microbiolgico se realiz segn los
lineamientos sealados por la Agencia Ambiental de los
Estados Unidos [8] para aguas con uso recreativos,
donde refieren un lmite mximo de 33 NMP de
enterococos por cada 100 mL de agua, En funcin de
este lmite, encontramos en este estudio, que al igual
para los coliformes, las playas Pen, Guirintal y
Tocuchare, arrojaron los valores ms altos (40, 174 y 41
NMP/100 mL), respectivamente, indicando que dichas
playas excedieron los criterios permitidos. Dentro de los
coliformes fecales, las especies predominantes e
identificadas fueron: E. coli, seguido de Klebsiella sp y
dentro de los enterococos, Enterococcus faecalis. Para
Clostridium perfringens, se pudo observar que durante
los meses de muestreo, los niveles de contaminacin,
fueron relativamente bajos en playa Cul, Guirintal,
Quetepe y Tocuchare, en comparacin con playa pen,
quenes mostraron los un valor promedio de 26
NMP/100 mL de agua. Los resultados demuestran altos
niveles de contaminacin de origen fecal en las playas
Peon, Guirintal y Tocuchare. Los resultados obtenidos
junto con las inspecciones realizadas a las reas
circundantes a estas tres playas, permiten inferir que
estas playas, adems de ser utilizadas con fines
recreacionales, las poblaciones aledaas a estas, estn
ocasionando la degradacin de la costa e insalubridad
de la misma, debido a la carencia de servicios sanitarios
bsicos, lo que trae como consecuencia, la descarga de
aguas domsticas y desechos slidos hacia los cuerpos
de aguas.
Conclusiones.
Se demuestra con este estudio niveles de
contaminacin fecal en tres de las 5 playas evaluadas
(Pen, Guirintal y Tocuchare). Ante un nmero bajo
de Clostridium perfringens, se puede inferir que la
contaminacin fecal que se est presentando en estas
playas no es de tipo intermitente, sino continua, como
un manifiesto claro de la exposicin constante a
descargas de aguas domsticas, as como basuras y
material fecal procedentes de baistas tanto humano
como animal que acuden a estas playas con fines
recreativos.
Palabras clave: Calidad, Indicadores, aguas marinas
costeras, contaminacin fecal.
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como herramientas para medir la calidad ambiental
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Giardia spp. y Cryptosporidium spp. en Agua Potable en la Comunidad de Santa Rosa
de Agua, Maracaibo, Estado Zulia
Giardia spp. and Cryptosporidium spp. in Drinking Water in the Community of Santa Rosa de
Agua, Maracaibo, Zulia State

Cuenca Esthera, Medina Zoraidaa

a
Universidad del Zulia, Unidad de Investigacin en Microbiologa Ambiental (UIMA)

Introduccin: El agua es un recurso vital para mantener la vida en nuestro planeta, as mismo es transmisor de diversos
agentes microbianos capaces de ocasionar enfermedades gastrointestinales, provocando problemas de salud pblica. El
objetivo de este trabajo se bas en evaluar la presencia y viabilidad de Giardia spp. y Cryptosporidium spp. en el agua de
consumo de la poblacin de Santa Rosa de Agua, Maracaibo, Estado Zulia. Metodologa: Se analizaron muestras de agua
provenientes de cinco puntos de muestreo en la comunidad, durante un perodo de cinco meses. Las tcnicas aplicadas
para la determinacin y el recuento de las formas qusticas fueron: filtracin, centrifugacin y pruebas de colorantes
vitales para viabilidad. Se identificaron quistes de Giardia spp. a la observacin directa con tincin temporal con lugol, y
ooquistes de Cryptosporidium spp. con coloracin de Kinyoun. Resultados: Se confirm la presencia de Giardia spp. en
el 88% (22/25) de las muestras analizadas y Crytosporidium spp. se encontr en el 92% (23/25). Todos los quistes y
ooquistes encontrados en las muestras analizadas fueron viables. Conclusiones: Estos resultados muestran la presencia de
protozoos en aguas de consumo de Santa Rosa de Agua lo cual puede generar riesgo sanitario para la poblacin de dicha
zona.

Palabras clave: Giardia spp., Cryptosporidium spp., Agua Potable, Santa Rosa de Agua, Enfermedades
gastrointestinales.

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Evaluacin de la calidad de agua destinada a uso y consumo humano en la Isla de
Zapara Estado Zulia, Venezuela
Quality evaluation of water destined for human use and consumption at the Island of Zapara, Zulia
State, Venezuela

Moreno Elainea, Urribarr Maraa, Angulo Nancyb, Montiel Marynsc, Melo Penelopeb y Beltran Alidab
a
Universidad del Zulia Facultad Experimental de Ciencias Departamento de Biologa. b Laboratorio de
Microbiologa Industrial, Centro de Investigacin del agua, Facultad de Ingeniera. c Unidad de Investigacin
en Microbiologa Ambiental Facultad Experimental de Ciencias. Universidad del Zulia,
Maracaibo, Venezuela.

Introduccin: La necesidad de acceso al agua potable se incrementa con el crecimiento de la poblacin, y ante la
dificultad de su disponibilidad en muchas zonas, se generan problemas de acceso al recurso natural para su consumo
relacionados con la calidad, como lo demuestra la ocurrencia de enfermedades de transmisin hdrica. Metodologa: En la
Isla Zapara, Estado Zulia, se evalu la calidad del agua para uso y consumo humano mediante la determinacin de
indicadores de contaminacin fecal: coliformes totales (CT), coliformes fecales (CF), estreptococos y Enterococos fecales
(EsF y EnF), por la tcnica nmero ms probable (NMP/100mL). Adicionalmente, se cuantificaron las bacterias aerobias
mesfilas, por la tcnica de placa vertida (UFC/mL). Conjuntamente, se determinaron los parmetros fisicoqumicos:
temperatura, salinidad, pH, conductividad, turbidez y slidos disueltos. El programa de muestreo se realiz mensualmente,
abarcando un perodo de seis meses, se captaron muestras de agua a partir de pozos artesanales, pozos con planta
desalinizadora y por transporte en gabarra, fuentes principales que surten del recurso a los habitantes. Resultados: Los
resultados obtenidos evidenciaron la presencia de CT, CF, E. coli, y aerobios mesfilos, durante todo el periodo de
muestreo a excepcin del sexto muestreo del pozo con planta desalinizadora, en el cual los CF estuvieron ausentes. Los
valores de CT y CF estuvieron comprendidos entre 2,2 y >23 NMP/100ml. En el caso de EsF y EnF entre <1,1 y 23
NMP/100ml. Los valores de salinidad fueron de 1 a 9. Conclusin: Siguiendo los lineamientos de las Normas
Sanitarias de Calidad del Agua Potable del MSAS N SG-018-98, estas aguas no cumplen con la misma y por ende no
son aptas para el consumo humano, necesitando un proceso de desinfeccin antes de su consumo.

Palabras clave: Calidad de agua, indicadores de contaminacin fecal, parmetros fisicoqumicos, Isla Zapara.

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Determinacin de Coliformes Totales, Fecales y Vibrio spp. en aguas de consumo
humano, provenientes de San Fernando, estado Apure
Determination of total coliforms, fecal coliforms and Vibrio sp. in drinking water from San
Fernando, Apure state

Michelli Elviaa,b, Rojas Anaisa, Hernndez Radamsc, Rodulfo Hectorinab, De Donato Marcosb
a
Departamento de Bioanlisis, Escuela de Ciencias, Ncleo de Sucre-UDO; b Laboratorio de Gentica
Molecular; IIBCA-UDO; c Hospital Dr. Pablo Acosta Ortiz, San Fernando, estado Apure.

Introduccin: la calidad bacteriolgica del agua para el consumo humano se define como una reaccin causa/efecto,
entre el nivel del indicador de calidad de agua y los riesgos potenciales para la salud asociados con el uso de la misma. La
investigacin tuvo como objetivo evaluar la calidad bacteriolgica del agua, mediante la determinacin del nivel de
coliformes totales, fecales y Vibrio spp. de pozos de almacenamiento y agua potable, en San Fernando de Apure.
Metodologa: se recolectaron 42 muestras de agua, con 15 das entre ellas, en 21 estaciones distribuidas entre 9 pozos, 6
plantas de tratamiento y 6 grifos. Se recogieron 100 ml de agua por estacin; la tcnica de tubos mltiples se utiliz para
determinar el NMP/100 ml de los coliformes totales, fecales y Vibrio sp. Luego, se realiz la cuantificacin de unidades
formadoras de colonias por mililitro de agua (UFC/ml), y la identificacin bioqumica de las cepas aisladas. Resultados:
se determin la presencia de coliformes totales y fecales en todas las estaciones de muestreo, sin que se recuperaran cepas
de Vibrio spp. en las mismas. Los mayores valores de NMP/100 ml para coliformes totales y fecales se obtuvieron en las
muestras provenientes de la urbanizacin El Recreo. Las muestras obtenidas en pozos tuvieron los mayores valores de
NMP/100 ml de agua, tanto para coliformes totales como fecales, seguidas por las muestras provenientes de grifos y, por
ltimo, se ubicaron las tomadas en las plantas de tratamiento. En el estudio se identificaron siete especies de
enterobacterias; de stas, Enterobacter aerogenes y Escherichia coli fueron las ms frecuentemente aisladas en todas las
estaciones de muestreo. Conclusin: Todas las muestras evaluadas presentaron indicios de contaminacin fecal y
mostraron niveles de coliformes no permisibles para el agua potable, por lo que requieren un proceso de desinfeccin
previo al consumo humano

Palabras clave: control calidad de agua; coliformes; Vibrio spp.; agua potable

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Potencial del hongo Pycnoporus sanguineus IDEA para la micorremediacin de suelos
y aguas contaminados con hidrocarburos y metales pesados
Potential of fungus Pycnoporus sanguineus IDEA for mycoremediation of hydrocarbons and heavy
metals contaminated soils and water

Perna Beatriza, Salas Milagrosb, Malaver Norab, Sena Luciaa, Tusa Alfonsoa, Jhonny Demeya
y Naranjo-Briceo Leopoldoa
a
rea de Energa y Ambiente, Instituto de Estudios Avanzados (IDEA), Caracas 1080, Venezuela.
http://www.idea.gob.ve. b Instituto de Zoologa y Ecologa Tropical (IZET), Facultad de Ciencias,
Universidad Central de Venezuela (UCV), Caracas, Venezuela. E-mail: bpernia@idea.gob.ve.

Introduccin: La actividad petrolera genera una gran cantidad de desechos txicos y contaminantes que deben ser
manejados adecuadamente y bajo un criterio de sustentabilidad. En la bsqueda de hongos con alto potencial de
micorremediacin de suelos y aguas contaminados con hidrocarburos y metales pesados, se aisl la cepa identificada
como Pycnoporus sanguineus IDEA del lago de asfalto de Guanoco (estado Sucre, Venezuela). El objetivo del presente
trabajo fue caracterizar este hongo segn su capacidad para: i) degradar distintos sustratos tales como glucosa, almidn,
pectina, quitina, urea, celulosa, lignina, inositol, fosfatos, nitritos, gelatina y peptona; ii) tolerar hidrocarburos policclicos
aromticos (HPAs; dibenzotiofeno, fenantreno, naftaleno y pireno), crudo extrapesado (CEP) y metales pesados (Cd, Cu,
Cr, Pb y Zn); iii) producir exoenzimas ligninolticas tales como lignina peroxidasa (LigP), manganeso peroxidasa (MnP) y
lacasa (LacP) y; iv) de producir biosurfactantes. Metodologa: se realizaron pruebas bioqumicas utilizando los sustratos
mencionados como nica fuente de carbono y energa. Para las pruebas de tolerancia se utiliz un medio slido mnimo
BSM con distintas concentraciones de HPAs (2.5 - 1600 ppm), CEP (1000-50000 ppm) y metales pesados (100 M-10
mM). Para determinar la tasa de crecimiento, se realizaron mediciones del dimetro de las colonias durante 6 das. Las
actividades LigP, MnP y LacP se determinaron espectrofotomtricamente en medio lquido y la capacidad de producir
biosurfactantes se analiz utilizando agar-acetato y agar-sangre. Resultados: Los resultados mostraron que el hongo fue
capaz de degradar todos los sustratos utilizados menos fosfatos y dibenzotiofeno. La concentracin mnima inhibitoria del
crecimiento en fenantreno fue 25 ppm y en naftaleno 400 ppm, mientras que en pireno y en CEP mostr una alta
tolerancia hasta 1.600 ppm y 20.000 ppm, respectivamente. Es tolerante a los metales pesados en el orden
Pb>Zn>Cu>Cr=Cd con una concentracin mnima inhibitoria de crecimiento de 8 mM (Pb), 4 mM (Zn), 400 M (Cu),
100 M (Cr) y 100 M (Cd). Adems de mostrar una alta actividad lacasa, es capaz de producir compuestos tensoactivos.
Conclusin: P. sanguineus IDEA es un hongo promisorio para ser usado en procesos de micorremediacin de aguas y
suelos contaminados con hidrocarburos y metales pesados.

Palabras clave: Pycnoporus sanguineus, tolerancia, hidrocarburos, metales pesados, surfactantes, micorremediacin.

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Polymesoda solida, almeja del lago de Maracaibo, potencial biofiltro para disminuir
coliformes en aguas contaminadas
Polymesoda solida, clam present in Maracaibo lake, a potential biofilter to reduce coliforms in
contaminated waters

Fonseca Nathalia,b, Montiel Marynesb, Garca de Severeyn Yajairaa*

a
Laboratorio de Cultivo de Invertebrados Acuticos, b Unidad de Investigaciones de Microbiologa
Ambiental2, Facultad Experimental de Ciencias, Universidad del Zulia, Maracaibo, Venezuela

*Autor para Correspondencia

Email: ygsevereyn@yahoo.com

Introduccin. Una de las alternativas que han sido sugeridas para

La carga de contaminantes producidos por las
actividades humanas, como los desechos industriales y
municipales, as como las aguas de drenaje procedentes
de escurrimientos de zonas urbanas y/o de campos
agropecuarios con tratamiento insuficiente
inadecuado, es hoy da uno de los problemas que
demanda urgente atencin por el alto impacto ambiental
que ocasionan a las aguas costeras. Al respecto, el
agravante ms importante de los efluentes sin
tratamiento es su elevada concentracin
microorganismos patgenos. La mayora de las
enfermedades infecciosas, tales como fiebre tifoidea y
paratifoidea, clera, disentera, hepatitis y varias formas
de gastroenteritis, se adquieren por el consumo directo
de agua y de alimentos capturados o cosechados en
aguas contaminadas. El contagio tambin es posible en
forma directa por contacto al baarse o realizar
actividades recreativas en cuerpos de agua que
contienen los patgenos causantes de enfermedades de
transmisin hdrica [1].
La organizacin Panamericana de la Salud seal
que en 1998 menos del 14% de los 600 m3 /s de aguas
residuales domsticas colectadas en pases de Amrica
Latina recibieron algn tipo tratamiento antes de ser
dispuestas en ros, lagos y el mar. As mismo, se ha
indicado recientemente que un 40% de las poblaciones
urbanas contrae enfermedades infecciosas asociadas al
agua que consumen [2].
tratar aguas contaminadas in situ es el uso de
organismos. Este procedimiento, conocido como
tratamiento biolgico, se conoce desde principios del
siglo pasado e implica el uso depurador que tienen los
o moluscos bivalvos [3]. Su caracterstico hbito de filtrar
el agua que les circunda para obtener de ella oxgeno y
alimento los convierte en biofiltros naturales, excelentes
para la remocin de los contaminantes presentes en
diferentes cuerpos de agua [4,5]. Al respecto, existe
de literatura acerca del xito en la reduccin bacteriana de
cuerpos de agua por medio de moluscos bivalvos tales
como mejillones (Perna viridis, Mytilus edulis y M.
galloprovincialis), almejas de agua dulce (Diplodon
chilensis y Anodontites tortolis) y ostras (Crassostrea
belcheri, C. gigas y C. virginica) en pases asiticos,
europeos y del continente americano [6-13]. Sin
embargo, en Venezuela esta tcnica esta apenas
comenzando a aplicarse utilizando a la almeja
Polymesoda slida del Lago de Maracaibo, ya que se ha
demostrado que es capaz de filtrar y retener partculas
slidas y nutrientes presentes en efluentes de granjas
camaroneras, en especial cuando se encuentra a altas
densidades [14]. En este contexto, el presente trabajo
cuantific la capacidad de Polymesoda slida como
biofiltro para disminuir los niveles de indicadores
microbiolgicos (coliformes totales y fecales) en
muestras de agua, para verificar si es posible adecuarlas
segn las exigencias legales y sanitarias pudiendo con

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ello reducir el ndice de enfermedades infecciosas,
coadyuvando por lo tanto, a crear mejores condiciones
de vida a las comunidades costeras del Lago de
Maracaibo.
Materiales y mtodos.
Las muestras de agua se tomaron en garrafas de
plstico de 20 L en la playa del sector Santa Rosa de
Agua de la ciudad de Maracaibo ubicada en la zona
Noroeste del Estrecho del Lago de Maracaibo, Edo.
Zulia. Esta playa se encuentra impactada por
desperdicios orgnicos e inorgnicos arrojados por
drenajes urbanos (caadas) que desembocan en la zona.
Por otro lado, las almejas se colectaron en la zona
Noroccidental del Lago de Maracaibo, especficamente
en el sector Nazaret de la ciudad de San Rafael del
Mojn, ubicada a 40 Km. de Maracaibo. Alrededor de
240 almejas fueron colectadas de manera manual y
transportadas por va terrestre en envases plsticos con
agua del sitio de colecta, al Laboratorio de Cultivo de
Invertebrados Acuticos de la Facultad Experimental de
Ciencias, de la Universidad del Zulia. En el laboratorio,
las almejas se midieron con un vernier para seleccionar
animales de similar tamao (25-35mm de longitud
valvar), se les limpi la superficie con un cepillo y
luego se procedi a aclimatarlas a la temperatura del
laboratorio. Finalmente las almejas se depuraron (para
limpiar su interior) sometindolas a cuatro cambios de
agua diarios sucesivos durante 48 horas. El agua de los
recambios se prepar con agua destilada a 4 UPS con
sal de mar artificial Instant Ocean y posteriormente
esterilizada con luz ultravioleta. El experimento se
diseo en envases de 150 litros (sistemas cerrado), con
dos densidades, 30 y 50 almejas, tres rplicas, mas
controles por tratamiento y cada tiempo de medicin (0,
12. 24 y 36 horas). Para el anlisis microbiolgico, las
muestras se prepararon siguiendo los procedimientos de
acuerdo a la normativa vigente (Comisin Venezolana
de Normas Industriales) para determinar el nmero ms
probable (NMP/g) de Coliformes totales (CT) y
Coliformes fecales (CF) [15]. Los resultados fueron
analizados con estadstica no paramtrica (Anova no
paramtrico Kruskal-Wallis) ya que estos no
cumplieron con el supuesto de distribucin normal.
Resultados y discusin.
En la Tabla I se muestran los resultados de las
pruebas del nmero ms probable (NMP/g) de CT y CF,
por tratamiento (densidades) y por tiempo de medicin,
expresados en porcentajes de reduccin. Se puede
observar que en la densidad de 50 almejas, la reduccin
mxima (CT = 93.75 %; CF = 92.50 %) fue mayor que
en la densidad de 30 almejas (CT = 85.80 %; CF =
86.10 %), siendo en ambos casos estadsticamente
significativa (ANOVA no parametrito, Kruskal-Wallis;
CT p = 0.0044, CF p = 0.0241). Sin embargo, la
diferencia ms importante se observ en la velocidad de
reduccin. Efectivamente, con 30 almejas la mxima
reduccin se observ a las 36 horas, mientras que con
50 almejas esta reduccin se alcanz a solo 24 horas.
Tambin fue notoria la efectividad de reduccin de
coliformes en general a tan solo 12 horas ya que con 50
almejas esta alcanz un promedio de 72.5 % contra solo
3 % con 30 almejas.
Los resultados obtenidos en esta investigacin
coinciden llamativamente con un estudio previo
realizado tambin con P. solida [16], donde el objetivo
fue determinar la capacidad depurativa, inorgnica y
microbiolgica, de esta almeja. A nivel microbiolgico
se determin que P. solida fue capaz de reducir
notablemente su carga de coliformes. En efecto, los CT
en las almejas se redujeron desde un rango entre 260 y
3500 NMP 100 g1 hasta un valor mnimo de 19 NMP
100 g1, durante un proceso de depuracin de 72 horas.
En el caso de los CF los valores iniciales en las almejas
oscilaron entre 111 y 900 NMP 100 g1, logrndose
una reduccin de hasta 16 a 107 NMP CF 100 g1,
durante el proceso. Como puede observarse si los
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valores mximos de reduccin, son expresados en concentracin de bacterias presentes) y la combinacin
porcentajes (para CF va desde 86 al 88%), son muy de ellos (dependencia de la tasa de bombeo de agua con
similares a los determinados en el presente estudio con la temperatura ambiental) interactan para definir la
una densidad de 30 almejas (ver Tabla 1). La diferencia capacidad mxima de reduccin de bacterias por parte
ms notable, sin embargo fue el tiempo necesario para de moluscos bivalvos en un cuerpo de agua [3,17]. Es
llegar a estos porcentajes de reduccin, ya que la almeja precisamente esta variada gama de factores la que ha
necesit hasta 72 horas para depurarse, en cambio la producido alta diversidad de resultados [13]. Por esta
almeja depur el agua en menos de la mitad de ese razn los resultados obtenidos con una especie no
tiempo. pueden ser extrapolados a otra.
El presente estudio es pionero en Venezuela y ha
Tabla 1. Porcentaje de reduccin de Coliformes Totales permitido aportar valiosa informacin para futuras
y Fecales en el agua en funcin de la densidad y el
aplicaciones. Por ello es importante continuar con esta
tiempo de exposicin a la almeja Polymesoda solida .
Coliformes Totales (CT) lnea de investigacin y llevar los experimentos de
Tiempo 30 laboratorio a condiciones de campo, similares a las
(horas) almejas 50 almejas
presentes en las reas que se desearan restaurar.
0 0 0
12 2 75
24 59 93.75 Conclusiones.
36 85.8 93.75 La almeja estuarina Polymesoda solida puede ser
Coliformes Fecales (CF) utilizada como biofiltros para reducir los coliformes
Tiempo 30 presentes en muestras de aguas contaminadas. La
(horas) almejas 50 almejas
0 0 0 densidad y el tiempo determinan la eficiencia de la
12 4 70 reduccin.
24 65 92.5
36 86.1 92.5 Palabras clave: Coliformes, Polymesoda solida,
Biofiltro, aguas contaminadas.
Es evidente que los resultados con P. solida son
alentadores ya que nos indica que esta almeja podra ser Referencias:

usada como un filtro biolgico remediador de la 1. Quiones, E; Vzquez, C; Francisco F, Moreno, P;

contaminacin microbiana en reas afectadas con
coliformes, pudindose alcanzar el lmite permisible
establecido por la normativa nacional de 300 NMP/g
coliformes fecales. Por supuesto hay aspectos
adicionales que necesitan ser investigados como la
magnitud o la escala del rea que podra ser
descontaminada y cuantas almejas serian necesarias por
unidad de volumen de agua.
A este respecto es importante tener en cuenta que
varios factores intrnsecos (las caractersticas propias de
la especie siendo estudiada), extrnsecos (como la
Rodas, O. 2000. Presencia de los gneros Vibrio y
Salmonella y deteccin de coliformes fecales en
almejas del golfo de Mxico, Universidad de
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Presencia de enterobacterias resistentes a antibiticos en efluentes tratados en el
Sistema de Reutilizacin de Aguas Servidas (RAS)-Pequiven, Estado Zulia
Presence of Enterobacteria antibiotic resistant in treated effluents of the Wastewater Reuse System-
Pequiven, Zulia state.

Garca Martnez Danaa, Luzardo Mndez Mariangelb, Montiel de Morales Marynesc

a Laboratoriode Proteccin Vegetal, Centro de Estudios Botnicos y Agroforestales, Instituto Venezolano de
Investigacin Cientficas; b Laboratorio de Virologa, Centro de Investigacin del Agua, Universidad del Zulia; c
Unidad de Investigacin de Microbiologa Ambiental, Departamento de Biologa, Facultad Experimental de
Ciencias, Universidad del Zulia.

*Correspondencia autor principal

Email:dagarcia@ivic.gob.ve

Introduccin. Se sospecha que una de las principales fuentes

Los agentes antimicrobianos son
teraputicamente en humanos y animales para el control
de infecciones bacterianas y son incorporados como
dosis subteraputicas, dentro del alimento del ganado
comercial y de las aves de corral, para promover el
crecimiento. Los antibiticos, sus metabolitos y las
bacterias resistentes son excretados en las heces y orina
de humanos y animales de sangre caliente a las aguas
residuales, especialmente a las aguas residuales
domsticas y hospitalarias, debido al uso masivo de los
mismos en las terapias, diseminndose al ambiente
acutico y de esta manera ejerciendo presin selectiva
sobre poblaciones bacterianas naturales presentes en
estos ambientes y en el intestino de los animales
[1,2,3,4,5,].
Escherichia coli, posee genes que
multiresistencia a antibiticos encontrndose como
microbiota normal del colon y en el tracto intestinal de
individuos tanto sanos como enfermos, hallndose
incluso en el 80% de las heces de personas sanas con
resistencia a varios tipos de
simultneamente. Junto con los excrementos las
enterobacterias llegan a las aguas
municipales e incluso luego de ser tratadas en plantas
biolgicas funcionales estos microorganismos son
diseminados al ambiente en grandes cantidades a travs
de los efluentes tratados [3].
usados antropognicas de la diseminacin de antibiticos,
genes de resistencia a antibiticos y bacterias resistentes
a los mismos son los efluentes de las plantas de
tratamiento de aguas residuales [5]. Los procesos en las
plantas biolgicas de tratamiento podran ocasionar
cambios en la proporcin de los fenotipos o eliminacin
selectiva dentro de las poblaciones bacterianas del
efluente ya que se encuentran en contacto continuo con
estas sustancias qumicas [3,5](
En las aguas residuales, especialmente en los lodos
activados, donde las poblaciones bacterianas tienen gran
densidad, estos microorganismos tienen acceso a un
amplio pool de genes itinerantes que se transfieren de
una clula a otra bien sea horizontal o verticalmente.
Por lo tanto las plantas de tratamiento de aguas
codifican residuales constituyen un importante reservorio de
bacterias entricas que portan potenciales genes de
resistencia a antibiticos transferibles. Junto con el agua
que ha sido tratada estos microorganismos pueden
penetrar el suelo, llegar a las aguas superficiales,
antibiticos reservorios de aguas subterrneas, agua potable e
incluso al aire como bioaerosoles [3].
residuales La medida de la concentracin de antibiticos en los
alfuentes de plantas de tratamiento de aguas reflejan los
niveles y tipos de antibiticos usados en una regin
dada; muchos son removidos en el lodo activado. Sin
embargo, los antibiticos hidrofbicos por su movilidad

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limitada y baja biodegrabilidad en el lodo, tienden a
absorberse y ser ms estables que aquellos en el agua
residual, demostrando as que los lodos activados
tienden a ser un amplio reservorio de antibiticos y de
bacterias resistentes a ellos, pudiendo considerarse un
gran peligro ambiental y de salud [4]. Pocos son los
estudios enfocados en las caractersticas genticas de las
poblaciones bacterianas que son descargadas al medio
ambiente a travs de los efluentes de aguas residuales
tratadas y cuales expresiones fenotpicas puedan
considerarse perjudiciales para el ser humano [4]. El
objetivo de este estudio es mostrar datos preliminares
del perfil de resistencia a 10 antibiticos de uso comn
en la poblacin y en la comunidad mdica de tres
gneros de enterobacterias aisladas de la Planta de
Tratamiento RAS-Pequiven de lodos activados.
Material y mtodos.
La toma de muestras fue llevada a cabo dentro de
un proyecto de evaluacin de la calidad microbiolgica
del Sistema de Reutilizacin de Aguas Servidas
perteneciente a la Petroqumica de Pequiven en el
municipio Miranda del Estado Zulia durante un perodo
no continuo de 6 meses cada 15 das durante los meses
de mayo a diciembre de 2012.
Se escogieron 5 puntos de toma de muestras a lo
largo del sistema de tratamiento los cuales fueron: el
Afluente que recibe la planta (Punto de muestro 1/
Afluente), otra muestra luego de los procesos fsicos de
la planta (Punto de muestro 2), luego de los procesos
biolgicos de desinfeccin (Punto de muestreo 3/
Descarga al Lago) y en el punto de desinfeccin
qumica (Punto de muestro 4) y una ltima muestra
luego de los procesos qumicos de desinfeccin (Punto
de muestreo 5/ Efluente Complejo Petroqumico).
El aislamiento bacteriano para Escherichia coli se
realiz a partir de la serie de diluciones de tubos de
caldo EC pertenecientes al anlisis de deteccin de
Coliformes Fecales previamente obtenido dentro del
proyecto cuya metodologa es descrita en el manual
Standard Methods [6]. Los tubos de caldo EC en los que
se observ crecimiento y produccin de gas, fueron
sembrados en placas con agar EMB e incubados a 37 C
durante 24 h, y se seleccionaron las colonias
caractersticas de E. coli.
Para la deteccin y aislamiento de los gneros
Salmonella y Shigella se realiz inicialmente una
filtracin de 100 ml de muestra por cada punto y se
coloc la membrana en incubacin en un caldo de
enriquecimiento selectivo caldo tetrationato (24 h, 37C
+/- 0.5), luego de observar turbidez en los tubos se
procede a realizar rayado en placas de agar Salmonella-
Shigella y Agar Bismuto Sulfito (APHA, 1999). Las
colonias bacterianas que presentaron la coloracin
caracterstica de cada uno de los gneros fueron
sometidas a coloracin de gram y pruebas bioqumicas
(IMVIC, TSI, LIA, MIO) para confirmarlas
fenotpicamente (Murray y col., 1999).
La susceptibilidad a los agentes antimicrobianos se
determin por el mtodo de difusin en disco de Kirby-
Baer, utilizando Agar Meller Hinton (MHA) [7] y 10
antibiticos de acuerdo con las sugerencias del Clinical
and Laboratory Standards Institute [8]. Los antibiticos
usados fueron: Ampicilina (AM: 10 g),
Ampicilina/Sulbactn (SAM: 10 ug), Amikacina (AN:
30 g), Cloranfenicol (C: 30 g), Trimetoprim/
Sulfametoxazole (SXT: 23.75g-1.25g), Tetraciclina
(TE: 30 g), Gentamicina (G: 10 g), Kanamicina (K:
30 g), Imipenen (IMP: 10 ug) y Cefuroxime (CXM: 30
ug). La tcnica consisti en realizar un cultivo de las
cepas a usar en el caldo Meller Hinton, el cultivo se
incub a 36C, aproximadamente de 2 a 8 horas, hasta
alcanzar el estndar McFarland de 0.5 equivalente a 1.5
x 108 UFC/ml. Cuando se obtuvo la densidad requerida,
se us un hisopo para humedecer en el cultivo
bacteriano e inocular el agar MHA previamente
solidificado en la placa, rotndola de tal forma que se
obtuvo un crecimiento confluente en la misma. Las
160
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placas se dejaron secar por cinco minutos, se procedi a resultados de las pruebas de resistencia a los 10
colocar los discos de difusin de los antimicrobianos ya antibiticos se muestran en la Tabla 2. Se observ un
mencionados ayudndose con una pinza y presionando alto porcentaje de resistencia (56. 5% a 84.7%) a cinco
ligeramente sobre el disco. Se incubaron a 35C ( 1C) de los antimicrobianos y no se present sensibilidad
por 16 a 18 h. Despus de la incubacin, las cepas absoluta a ninguno de ellos. El orden en que se expres
fueron clasificadas como susceptibles (S), intermedias la resistencia fue el siguiente:
(I) y/o resistentes (R) de acuerdo a la medicin de los AM>SAM>TE>SXT>C>CXM>K>GN>AN>IMP.
dimetros de inhibicin sugeridos por el CLSI, 2012.
Como cepa control se utiliz una cepa de Escherichia Tabla 2. Resistencia a antibiticos en enterobacterias aisladas de muestras de
agua residual RAS.
coli ATCC 25922. Antibitico Resistente Intermedio Sensible
N % N % N %
Ampicilina 39 84.7 1 2.1 6 13.2
Resultados y discusin.
Ampicilina/Sulbactn 37 80.5 3 6.5 6 13
Se lograron aislar 46 cepas en los diversos puntos Amikacina 2 4.3 2 4.3 42 91.3
Kanamicina 4 8.6 23 50 19 41.4
muestreados del sistema RAS (Tabla 1), de las cuales
Gentamicina 3 6.5 0 0 43 93.5
todas fueron resistentes al menos a uno de los Trimetoprim/Sulfametoxazole 28 61 1 2.1 17 36.9

antibiticos probados, 37 (80%), presentaron resistencia Tetracilina 35 76 2 4.4 9 19.6

Cefuroxime 17 36.9 18 39.1 11 24
intermedia al menos a uno de los antibiticos y ninguna Imipenem 1 2.1 16 34.8 29 63.1

de las 46, result sensible a todos los antibiticos. Cloranfenicol 26 56.5 1 2.1 19 41.4
AM= Ampicilina; SAM= Ampicilina/Sulbactn; AN= Amikacina; K= Kanamicina; GN=
Gentamicina; SXT= Trimetoprim/Sulfametoxazole; TE= Tetraciclina; CXM= Cefuroxime;
IMP= Imipenem; C= Cloranfenicol; N= Numero de cepas; %=Porcentaje de cepas.
Tabla 1. Numero de cepas aisladas a lo largo del Sistema de Tratamiento.
Cepas Afluente Punto 2 Efluente Punto 4 Efluente Total
Lago Pequiven
La mayor resistencia se observ a la ampicilina con
E.coli 7 8 7 1 0 23 un 84.7%, siendo este del grupo de los Betalactmicos,
Salmonella sp. 1 6 4 1 1 13
Shiguella sp. 4 2 2 1 1 10 que es un grupo de antibiticos ampliamente usado
Total 12 16 13 3 2 46
tanto en la medicina humana como la animal. Dentro de
los nicos estudios realizados en plantas de tratamiento
La ocurrencia de bacterias resistentes a antibiticos
del estado Zulia, Zambrano y col. (2002) [9], consigui
en los efluentes debe ser un tema de estudio de inters,
especialmente por la alta cantidad de bacterias un 83.8% de resistencia a ampicilina en aguas
residuales crudas. A pesar de la diferencia de tiempo y
comnmente encontradas que expresan algn fenotipo
de resistencia y son continuamente descargadas en zona de estudio observamos la prevalencia de estos
fenotipos y, adems, si observamos algunos de los
aguas receptoras como lagos y ros [5]. Tomando en
resultados encontrados en las aguas superficiales del
cuenta adems que al Lago de Maracaibo est siendo
descargado en el efluente de este sistema un promedio Lago podemos establecer la diseminacin de los
mismos, tal como se encontr en el trabajo de Garca y
de 105- 107 NMP/100 ml de Coliformes diariamente
(data no publicada) que pueden tener alguno de estos Botero (2012) [10]. Sin embargo, algo que es necesario

genes de resistencia generalmente a varios antibiticos
y a aquellos que son usados generalmente por la
poblacin humana, representa entonces un foco de
atencin y peligro a la salud pblica de la poblacin que
no est siendo tomado en cuenta lo suficiente. Los
resaltar es igualmente la alta resistencia al antibitico
Ampicilina/Sulbactn (80.5%), resultado que no se
esperaba ya que este fenotipo no ha sido hallado o
muchas veces ni siquiera detectado en muestras de
aguas residuales crudas o tratadas. En estudios previos

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no se ha reportado resistencia en cepas provenientes de curioso y sugiere un mayor estudio a este tipo de
medios acuticos a este antibitico [10]. Este es un muestras que son clorinadas y en las cuales la poblacin
frmaco relativamente nuevo en el mercado que surgi bacteriana y por ende el intercambio de genes de
debido a la necesidad de un antibitico que fuera capaz resistencia disminuye, incluyendo en un futuro estudio
de inactivar las enzimas betalactamasas que rompen los el rol de E. coli en estos procesos teniendo en cuenta
anillos betalactmicos de este grupo de antibiticos que en esta muestra donde no existe multiresistencia
[11]. Estos resultados nicamente demuestran que es este gnero est ausente. Los porcentajes de
posible que el uso de este antimicrobiano haya multiresistencia fueron mayores para aquellas cepas que
aumentado considerablemente y sus determinantes fueron resistentes a 5 antibiticos al mismo tiempo
genticos estn siendo diseminados en la poblacin. La (45.9%), seguidas por las que fueron a 6 antibiticos al
resistencia a tetraciclina es ampliamente reportada en mismo tiempo (24.3%) (Tabla 3). Estos porcentajes de
todo tipo de muestras de agua y con altos porcentajes en multiresistencia son elevados con respecto a otros
aguas residuales crudas y tratadas, inclusive siendo uno estudios en aguas residuales en el estado Zulia y
de los genes de resistencia mayormente estudiados a mundialmente [1,3,9].
nivel molecular [1,12,13,14,15]. En este trabajo se Tabla 3. Nmero de cepas de enterobacterias con multiresistencia por punto
de muestreo en el sistema RAS.
obtuvo un 76% de resistencia que concuerda con Punto de muestreo % Multiresistencia por punto
Zambrano y col., (2002) [9]. La resistencia a la 3 4 5 6 N %
Afluente 2 3 2 2 9 19.5
Tetraciclina en E. coli se origina, en la mayora de los
Punto 2 2 1 8 4 15 32.6
casos, a partir de genes adquiridos y no por mutaciones Efluente Lago 1 1 6 2 10 21.7
Punto 4 0 1 1 1 3 6.5
genticas. La Tetraciclina es un antibitico que ha sido
Efluente Pequiven 0 0 0 0 0 0
usado en prcticas mdicas humanas por dcadas; sin Total % 13.5 16.2 45.9 24.3 37 80.4

embargo, varios autores coinciden en que la resistencia Multiresistencia

N= Numero de cepas; %=Porcentaje de cepas.
a este antimicrobiano mostrada en cepas entricas
aisladas de aguas naturales se debe a su uso
Se encontraron 13 patrones de multiresistencia
indiscriminado en prcticas veterinarias, agrcolas y en
diferentes, los cuales abarcaban entre 5 a 6 antibiticos
cra de animales [10]. Se demostr multiresistencia
los ms frecuentes, y otros que abarcaban desde cuatro
(resistencia a tres o ms de los antibiticos probados) en
a tres antimicrobianos (Tabla 4).
cepas aisladas de todos los tipos de muestras. Se
determin que 37 (80.4%) de las cepas resistentes
fueron multiresistentes; de las cuales, 9 (19.5%)
provenan de las muestras del afluente a la planta, 15
(32.6%) del punto 2 del sistema con previo tratamiento
fsico, 10 (21.7%) de la muestra proveniente del
efluente al Lago y 3 (6.5%) del punto 4 del sistema
donde se realiza el tratamiento qumico. El efluente a
Pequiven no present ninguna cepa multiresistente y las
nicas dos bacterias que constituyen esta muestra (en el
cual no se detectaron coliformes) presentan nicamente
resistencia a tetraciclina. Este resultado es bastante

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Tabla 4. Patrones de multiresistencia a antibiticos presentados en las cepas y genes resistentes a la tetraciclina y las sulfonamidas
de enterobacterias aisladas del sistema RAS.
Numero de Antibiticos
estrechamente relacionados.
3 4 5 6
AM-SAM-TE AM-SAM-TE- AM-SAM-SXT- AM-SAM-SXT-
Conclusiones.
CXM TE-C TE-CXM-C
AM-K-GN AM-SAM-SXT- AM-SAM-TE- AM-SAM-SXT- En este trabajo se detectaron cepas de
TE CXM-C TE-IMP-C
enterobacterias con porcentajes elevados de resistencia
SAM-K-TE AM-SAM-TE-C AM-SAM-AN-
SXT-TE a varios antibiticos al mismo tiempo en los efluentes
AM-AN-SXT-TE AM-SAM-K- del Sistema de Reutilizacin de Aguas Servidas de
GN-CXM
AM= Ampicilina; SAM= Ampicilina/Sulbactn; AN= Amikacina; K=
Pequiven. Esta situacin refleja una problemtica
Kanamicina; GN= Gentamicina; SXT= Trimetoprim/Sulfametoxazole; TE= ambiental y de salud que no est siendo considerada
Tetraciclina; CXM= Cefuroxime; IMP= Imipenem; C= Cloranfenicol; N=
debidamente. La remocin bacteriana de muchas
Numero de cepas; %=Porcentaje de cepas.
plantas de tratamientos de agua alcanzan niveles

Entre estos patrones, el 37.8% de las cepas ptimos, pero esto no asegura la remocin de sustancias

mostraron el siguiente: AM-SAM-SXT-TE-C, de las antimicrobianas y la obvia diseminacin de bacterias

cuales 3 (21.4%) correspondan a las muestras del resistentes a ellos. Es necesario un estudio ms

afluente, 5 (35.7%) a las del punto 2, 5 (35.7%) a las del profundo en estos tipos de muestras y establecer una

efluente al Lago y solo 1 (7.1%) a las del punto 4. Este relacin o patrn entre la presencia de estas sustancias y

patrn prevalece en las cepas estudiadas en todos los bacterias en los efluentes y aguas receptoras.

tipos de muestras usadas y gneros bacterianos. Seguido

a este patrn se encuentra en el 21.6% de las cepas la
siguiente multiresistencia a 6 antibiticos al mismo
tiempo: AM-SAM-SXT-TE-CXM-C
tambin en todos los tipos de muestra.
La multiresistencia a antimicrobianos se encuentra
comnmente reportada a nivel mundial en diversas
cepas entricas aisladas de muestras de agua potable,
residuales y recreacionales, sedimentos y organismos
marinos [1,3]. En muchos de los casos las cepas
bacterianas presentan grupos de genes de resistencia
estrechamente unidos o en islotes lo cual explica
patrones de resistencia repetitivos
antimicrobianos, especialmente si se codifican en
elementos mviles. Akiyama y Savin (2010) [16]
detectaron cepas entricas en efluentes de aguas
residuales con patrones de ampicilina- trimetropim
asociados genticamente y Jiang y col. (2013) [15]
observaron la contaminacin de fuentes naturales de
agua potable que reciba efluentes tratados con bacterias
Palabras clave: Aguas residuales, Enterobacterias,
Resistencia a Antibiticos.
distribuido Referencias:
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Microorganismos patgenos en agua de consumo humano
en el sector Santa Rosa de Agua
Pathogens microorganisms in drinking water from Santa Rosa de Agua sector

Gonzlez Arley, Montiel Marynes, Teran Greysi, Balzan Eddy Karina.

Universidad del Zulia, Facultad Experimental de Ciencias, Biologa.
Laboratorio Unidad de Microbiologa Ambiental

Introduccin: El agua es una fuente de recursos importante para el hombre, por esta razn el objetivo fue evaluar la
presencia de patgenos en el agua de consumo humano. Metodologa:Se realizaron varios muestreos en distintos puntos
de inters del sector Santa Rosa de Agua como lo son la Escuela Nacional, el Ambulatorio, el Preescolar, los Comedores
de la CEP y Capitn chico adems de diferentes viviendas del sector, para determinar la presencia de bacterias patgenas
tales como Salmonella spp., Shigella spp., Aeromonas spp., Vibrio spp. y Pseudomonas spp., ya que la zona presenta alto
nivel fretico y una salinidad que vara por el hecho de estar rodeada de zonas de mangles y suelos senagosos. El estudio
se llev a cabo siguiendo la tcnica de membrana filtrante y para la cuantificacin de Pseudomonas spp. por la tcnica de
nmero ms probable segn la metodologa designada por COVENIN 2986-93. Para su identificacin se realizaron las
pruebas bioqumicas API 20E. Resultados: para la tcnica de membrana filtrante en los 2 primeros muestreos se obtuvo
un crecimiento masivo en placa, pero que no presentaba caracterstica alguna de los patgenos que se queran estudiar por
tal motivo se lleg a la determinacin que en los muestreos 3 y 4 se identificara el crecimiento bacteriano que se
presentara como resultado arrojo un 100% (20/20) de la identificacin en los cuales se pudieron observar Vibrio fluvialis,
Klebsiella pneumonae, Enterobacter cloacae, E. sakazakii, E. aerogenes, Chromobacterium violacium, Serratia odifera y
Aeromonas salmonicida. Los resultados obtenidos en cuanto a Psedumona spp. fue de un 100% positivo para todas las
muestras, esto se puede deber a la falta de saneamiento en las redes de distribucin pblica o al mal almacenamiento de
las aguas en el sector. Conclusin: se hace necesario una mayor vigilancia para el mejoramiento del agua de consumo
humano del sector Santa Rosa de Agua.

Palabras clave: Agua de consumo humano, Patgenos, Tcnica de membrana filtrante, Numero ms probable

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Comportamiento bacteriano en la remocin de nitrgeno de efluentes de
tenera utilizando un reactor discontinuo secuencial
Behavior bacterial nitrogen removal from tannery effluents using a sequencing batch reactor

Angulo Nancya, Carvajal Kerenb, Marquz Andreaa, Portillo Yoselina,

Araujo Ismeniaa, Crdenas Carmena, Beltrn Alidaa, Pire Marac, Daz Altamirad*
a
Centro de Investigacin del Agua, Facultad de Ingeniera, Universidad del Zulia; b Agua Mineral
La Palma C.A., Barinas-Venezuela; c Programa de Ingeniera Agroindustrial, Decanato de
Agronoma, Universidad Centro-occidental Lisandro Alvarado; d Departamento de Ingeniera
Sanitaria y Ambiental, Facultad de Ingeniera, Universidad del Zulia.

*Correspondencia autor principal

Email: nancyangulo71@gmail.com

Introduccin. activa, provinieron de una industria de tenera y de una

Los efluentes generados en la industria del curtido
de pieles, causan la contaminacin del cuerpo de agua
natural si no son tratados antes de su vertido, por
presentar sustancias orgnicas e inorgnicas altamente
contaminantes, entre ellas el nitrgeno, que al ser
descargado en grandes cantidades acelera el proceso de
eutrofizacin del mismo, por lo que se hace necesario
tratar el efluente antes de su descarga al medio marino
costero [1,2]. La normativa ambiental venezolana exige
que los efluentes industriales deban cumplir con los
lmites permisibles establecidos antes de ser
descargados al medio ambiente [3]. En este estudio se
evalu el comportamiento bacteriano durante la
remocin de nitrgeno de un efluente de tenera
utilizando un reactor discontinuo secuencial (RDS) bajo
dos condiciones de llenado (lento y fraccionado).
Material y mtodos.
Para este estudio se utiliz un RDS constituido por
un cilindro de vidrio de 14,5cm de dimetro y 26cm de
alto con un volumen total de 4L. El volumen de trabaj
fue de 2L, del cual un 30% correspondi a la biomasa
(lodo activado) y el resto al agua residual. El reactor
trabaj de manera automatizada para su carga y
descarga; se le suministr aire al sistema desde el fondo
del recipiente y tuvo una agitacin mecnica por medio
de un aspa. El agua residual industrial y la biomasa
planta de lodos activados ubicada entre Barquisimeto y
Carora (Venezuela). En el proceso se emplearon dos
condiciones de operacin, la primera comprendida por
una serie de etapas: entrada (0m), llenado (1h), mezcla
anxica (2h 45m), mezcla xica (7h 15m),
sedimentacin (45m) y purga (15m), donde el llenado
ocurri de manera lenta durante 1 hora; y en la segunda
condicin se vari la etapa de llenado, la cual fue
fraccionada, adicionando 5 veces una cantidad nueva de
agua residual durante el transcurso del ciclo. El RDS
funcion con un tiempo de retencin hidrulica de 12
horas y un tiempo de retencin celular de 15 das. Las
muestras se tomaron por duplicado a la entrada y salida
de cada etapa del RDS durante 4 ciclos de operacin
para cada condicin. Las muestras se colectaron en
recipientes estriles y cerrados y fueron trasladados al
laboratorio de Microbiologa Industrial ubicado en el
Centro de Investigacin del Agua (CIA) de la
Universidad del Zulia (LUZ). Se determin la densidad
poblacional de bacterias nitrificantes y desnitrificantes
mediante la tcnica del Nmero Ms Probable (NMP)
[4] y las concentraciones de los parmetros
fisicoqumicos como demanda qumica de oxgeno
(DQO) y nitrgeno amoniacal (NH4), siguiendo la
metodologa estndar [5].

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Resultados y discusin. la concentracin del nitrato disminuy durante la etapa
En la caracterizacin fisicoqumica del efluente anxica (de 7 a 5mg/L), la concentracin de OD en esta
industrial de teneras, se observ que la concentracin etapa fue de 0,2mg/L, favoreciendo el proceso de
del nitrgeno total kjeldahl (NTK) fue de 160mg/L y la desnitrificacin; pero aument durante la etapa xica
DQO fue de 1056,58mg/L, resultando elevadas al (37mg/L) por el proceso de nitrificacin.
comparar con los limites de calidad permitidos de
acuerdo a la norma (NT: 40mg/L; DQO: 350mg/L).
Tambin se detect la presencia de amonio (48,9mg/L),
nitritos (6,7mg/L) y nitratos (23,3mg/L) en el agua
residual industrial. La concentracin de OD fue de
2,3mg/L y el pH de 8,42. De acuerdo a los resultados
obtenidos se evidencia que es necesario el tratamiento
del efluente industrial de tenera antes de ser descargado
a los cuerpos de agua naturales para poder cumplir con
la normativa ambiental vigente [3].
BAO: bacterias amonio oxidantes, BNO: bacterias nitrito oxidantes, BDN:
Las bacterias nitrificantes comprendidas por las
bacterias desnitrificantes
amonio oxidantes (BAO) y las nitrito oxidantes (BNO) Figura 1. Crecimiento bacteriano durante el ciclo de
conducen la oxidacin del amonio en nitrito y luego en operacin del reactor con el llenado lento
nitrato bajo condiciones aerbicas, mientras que las En la Figura 2, se observa la densidad poblacional
bacterias desnitrificantes (BDN) o reductoras del nitrato, promedio de estos grupos bacterianos durante la
en condiciones anaerbicas causan la reduccin del segunda condicin secuencia anxica-xica con llenado
nitrato a xidos de nitrgeno y luego a nitrgeno gas, el fraccionado.
cual es liberado al ambiente, y as es eliminado del
sistema mediante los procesos de nitrificacin y
desnitrificacin.
En la Figura 1, se observa la densidad poblacional
promedio de estos grupos bacterianos durante los ciclos
de operacin del RDS durante la primera condicin
secuencia anxica-xica con llenado lento. Las BAO y
las BNO aumentaron su densidad poblacional durante la
etapa xica del ciclo de 7,2x103 a 7,3x105NMP/100mL y
6,3x102 a 1,4x103NMP/100mL, respectivamente,
BAO: bacterias amonio oxidantes, BNO: bacterias nitrito oxidantes, BDN:
coincidiendo con la disminucin del amonio, de 38 a
bacterias desnitrificantes
11mg/L al final de la etapa. El oxgeno disuelto (OD) Figura 2. Crecimiento bacteriano durante el ciclo de
promedio fue de 6,6mg/L en la etapa xica. La operacin del reactor con el llenado fraccionado
concentracin ptima de OD para lograr una buena Las BAO aumentaron su densidad poblacional
nitrificacin se sita en 2-3mg/L [6,7]. Mientras que las durante la etapa xica del ciclo de 1,1x10 3 a
BDN crecieron durante el transcurso del ciclo de 4,6x105NMP/100mL, mientras que las BNO se
operacin del RDS (de 2,4x102 a 6,7x105NMP/100mL),

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mantuvieron entre 3 y 15NMP/100mL; se observ la
disminucin del amonio, de 37 a 12mg/L, y el OD fue
de 6,4mg/L, favoreciendo el proceso de nitrificacin
durante la etapa xica. Mientras que las BDN
aumentaron durante el transcurso del ciclo de operacin
del RDS (de 2,2x103 a 1,0x104NMP/100mL);
aument durante todas las etapas (de 1 a 20mg/L), el
proceso de desnitrificacin no se produjo dentro del
RDS, aunque el OD fue de 0,2mg/L durante la etapa
anxica, lo cual favoreca este proceso. Las BDN son
bacterias facultativas, por lo que no requieren
condiciones anaerbicas estrictas sino una condicin
ambiental intermedia, que acepta bajas tensiones de
oxgeno o ausencia del mismo para su crecimiento [8].
En la Figura 3, se muestran los porcentajes de
remocin de DQO y NH4 obtenidos con la secuencia de
etapas anxico/xico, utilizando llenado lento y llenado
fraccionado en el RDS.
DQO: demanda qumica de oxgeno; NH4: nitrgeno amoniacal
Figura 3. Porcentajes de remocin durante el ciclo de
operacin del reactor
El tratamiento que logr el mayor porcentaje de
remocin de DQO con respecto a la entrada y salida del
reactor fue aquel que emple la condicin de llenado
por etapas con un valor de 46%; la condicin de llenado
lento logr una remocin menor obteniendo un
porcentaje de 41%. En relacin con el nitrgeno
amoniacal se logr un 94% de remocin en el llenado
lento, mientras que en el llenado por etapas se obtuvo el
66%. Se pudo observar que la variable de tiempo de
llenado influenci en la remocin de DQO y NH4. La
condicin llenado lento favoreci la remocin de DQO
en el RDS, mientras que la remocin del NH4 se vio
favorecida por el llenado por etapas.
el nitrato
Conclusiones.
El tratamiento ms eficiente result ser la condicin
anxico-xico con llenado lento, donde se obtuvo una
remocin del NH4 de 93% y de la DQO de 41%. El
efluente de tenera luego del tratamiento biolgico
cumpli con el lmite requerido de descarga a un medio
marino costero para el NH4 (4,55mg/L), pero en
relacin que la DQO al final del tratamiento, la
concentracin fue mayor (683,5mg/L) a lo establecido
en la normativa ambiental venezolana para descargar a
cuerpos de agua natural.
Palabras clave: Remocin biolgica del nitrgeno,
Procesos de nitrificacin/desnitrificacin, Reactor
discontinuo secuencial, Efluente industrial de Tenera.
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Deteccin de patgenos en los suministros de agua para consumo humano en Isla
Zapara estado Zulia
Detecting pathogens in the water supplies for human consumption in state Zulia state Zapara Island

Urribarr Maraa, Moreno Elainea, Angulo Nancyb, Montiel Marynsc, Melo Penelopeb y Beltran Alidab
a
Universidad del Zulia Facultad Experimental de Ciencias Departamento de Biologa. b Laboratorio de
Microbiologa Industrial, Centro de Investigacin del agua, Facultad de Ingeniera. c Unidad de Investigacin
en Microbiologa Ambiental Facultad Experimental de Ciencias. Universidad del Zulia, Maracaibo,
Venezuela.

Introduccin: El agua es el recurso natural ms apreciable e indispensable para la existencia de los seres humanos y del
ambiente. Sin embargo, es un elemento que interviene extraordinariamente en la morbilidad y mortalidad de las
poblaciones, ya que es un vnculo transmisor de distintas enfermedades. Se realiz un estudio para conocer la calidad
microbiolgica de los suministros de agua (agua transportada en gabarra, dos pozos artesanales y planta desalinizadora)
que abastecen a la poblacin de Isla Zapara, Edo. Zulia, Venezuela. Metodologa: se realiz la deteccin de los
microorganismos patgenos: Pseudomonas aeruginosa y Salmonella spp, utilizando la tcnica de tubos mltiples;
Aeromonas spp, Shigella spp y Vibrio spp, mediante la tcnica de filtracin por membranas, regidas por norma COVENIN
y APHA. Se realizaron 6 muestreos, analizando 4 muestras por duplicado, durante 6 meses, en el periodo comprendido de
febrero-julio de 2013. Resultados: El 100 por ciento de los suministros examinados exhibieron presencia de patgenos,
con mayor prevalencia en pozos y agua transportada en gabarra y menor en agua de planta desalinizadora se encontr que
P. aeruginosa 2 a 240NMP/100 ml, Salmonella 2 a 54NMP/100 ml, Shigella spp y Vibrio spp estuvieron presentes en el
31 y 41% de todas las muestras, respectivamente, mientras que Aeromonas spp estuvo ausente en el 100% de las muestras.
Basados en los lineamientos de las Normas Venezolanas Resolucin MSAS N SG-018-98 Normas Sanitarias de Calidad
del Agua Potable estas no son aptas para el consumo Humano, evidencindose la existencia de factores potenciales de
contaminacin en el entorno inmediato de los pozos artesanales, los tanques de almacenamiento de la planta
desalinizadora y del agua transportada en gabarra. Conclusiones: Los resultados manifiestan la necesidad de fomentar un
programa permanente de desinfeccin y monitoreo del agua para consumo humano, que asegure la calidad del agua de las
fuentes de abastecimiento que surten a la poblacin en Isla Zapara.

Palabras clave: calidad de agua, microorganismos patgenos, Isla de Zapara, consumo humano

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Caracterizacin Fenotpica y Molecular de la resistencia a antibiticos en aislados de
Escherichia coli provenientes de una planta tratamiento de la ciudad de Maracaibo,
estado Zulia
Phenotypic and Molecular characterization of resistance to antibiotics in Escherichia coli isolates
from a treatment plant in the city of Maracaibo, Zulia state

Garca Danaa, Caraballo M Lizethb, Luzardo Mariangelc, Montiel Marynesc, Takiff Howardb y Guerrero Elbab
a
Laboratorio de Proteccin Vegetal del Instituto Venezolano de Investigaciones Cientficas (IVIC) estado
Zulia. b Laboratorio de Gentica Molecular del Instituto Venezolano de Investigaciones Cientficas (IVIC),
estado Miranda. c Laboratorio de Microbiologa Ambiental de la Facultad Experimental de Ciencias de la
Universidad del Zulia. Maracaibo, estado Zulia.

Introduccin: Las plantas de tratamiento de aguas residuales son consideradas fuente de diseminacin de bacterias
resistentes a antibiticos y sus genes transmisibles responsables. En Venezuela se ha documentado la existencia de
bacterias resistentes a antibiticos en aguas residuales; sin embargo, poco se conoce sobre la presencia de genes
responsables de los fenotipos de resistencia y su relacin con elementos genticos mviles. En el presente trabajo se
caracteriz fenotpica y molecularmente la resistencia antibitica en aislados de Escherichia coli provenientes de las aguas
de una planta de tratamiento de la ciudad de Maracaibo. Metodologa: Se evaluaron 16 aislados bacterianos provenientes
de distintas estaciones o efluentes de la planta de tratamiento. El fenotipo de resistencia se determin mediante la tcnica
de difusin del disco, empleando los antibiticos tetraciclina, cloranfenicol, kanamicina, gentamicina,
trimetoprim/sulfametoxazol, ampicilina o piperacilina, ampicilina/sulbactam o piperacilina/tazobactam. La caracterizacin
molecular se realiz mediante PCR amplificando genes que confieren resistencia a -lactmicos (blaTEM), tetraciclina
(tetA, tetB, tetM), sulfonamidas (sul1, sul2), cloranfenicol (cat1) y trimetoprim (dfr7-17) usando lisados bacterianos.
Resultados: Se observ resistencia a por lo menos uno de los antimicrobianos evaluados en 75% de los aislados (con el
50% presentando un patrn de multiresistencia), mientras el 25% restante present resistencia intermedia. El fenotipo de
resistencia ms frecuente fue a tetraciclina (68,75%). Se detectaron varios genes que pueden conferir resistencia, con tetA
o tetB presentes en el 100%, sul2 en el 100% y blaTEM en el 60% de los aislados resistentes a tetraciclina, sulfonamida y
-lactmicos, respectivamente. El 100% de los aislados poseen plsmidos. Conclusiones: La presencia de plsmidos y
genes de resistencia comnmente asociados a elementos mviles sugiere una propagacin activa de resistencia en
enterobacterias provenientes de aguas de desecho que podran ocasionar infecciones bacterianas de difcil terapia
antimicrobiana y que impactan ambientes naturales empleados para la pesca y recreacin.

Palabras clave: antibiticos, resistencia, genes, plsmidos, E. coli

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Identificacin de hongos del ambiente en una empresa del Estado Mrida-Venezuela
Environmental fungal identification on a company in the State of Mrida Venezuela

Carrero Sarelie, Moreno Alexander, Salazar Oduar, Daz Clara, Prez de Salazar Celina.
Laboratorio de Micologa, Facultad de Farmacia y Bioanlisis,
Universidad de los Andes (U.L.A.), Mrida-Venezuela.

Introduccin. La presencia de los agentes fngicos en los ambientes cerrados es favorecida por los aires acondicionados,
sus ductos y filtros; la temperatura, humedad, y limpieza de las superficies de las diversas reas; la presencia de las
personas y sus hbitos. El objetivo fue asociar los agentes fngicos aislados del aire y la presencia o ausencia de
alfombras, y la hora de visita, de una empresa ubicada en el estado Mrida. Metodologa: Se visit la empresa (9am y
7pm). Se utiliz la tcnica de Sedimentacin en placas, con Agar Sabouraud Dextrosa con Antibitico, expuestas durante
10 minutos/visita, a 50cm de la altura del piso (aire) y sobre las alfombras de acuerdo al rea, sin perturbar la rutina de
trabajo de la empresa. Las placas se incubaron a 25C por 7 das, revisndolas diariamente. Se registraron las Unidades
Formadoras de Colonias (UFC), las caractersticas macroscpicas y microscpicas (exmenes directos con azul de
lactofenol). Se identificaron siguiendo las caractersticas morfolgicas segn Hoog y col (2000). Resultados y Discusin:
Se identificaron: Cladosporium spp. (68,85%), Mycelia sterilia (17,76%), Penicillium spp. (3,43%), Rhodotorula spp.
(3,12%), Fusarium spp. (2,18%), Cylindrocarpon spp. (1,25%), Lecythophora spp, Trichoderma spp. y Acremonium spp.
(0,62% respectivamente), Syncephallastrum spp, Emmonsia spp, Arthrinium spp, Aspergillus niveus, y Bipolaris spp.
(0,31%, respectivamente). El gnero Cladosporium es uno de los ms frecuentemente reportados en la literatura. Se
observaron mayor variedad y frecuencia de gneros micticos en la visita de la tarde (69,78%), a razn de 3,98:1 de UFC
en el aire con respecto a las alfombras, probablemente debido a las actividades del personal, que favorece la formacin de
aerosoles, tal como se ha reportado con anterioridad. Conclusin: Cladosporium spp. fue el gnero ms frecuentemente
recuperado tanto en aire como en alfombras. Existe mayor aislamiento de hongos en la tarde, predominantemente en el
aire.

Palabras clave: Hongos ambientales, mtodo por sedimentacin en placas, ambiente interno, ambiente externo

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REA MICROBILOGA INDUSTRIAL

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Plan nacional de cultivo de Pleurotus ostreatus como una alternativa
de seguridad alimentaria
National plan of Pleurotus ostreatus culture that an alternative of security alimentary

Guerrero-Crdenas Balmorea, Chalbaud-Mogolln Eduardoa,b,d, Morillo Osmar e, Chrystian Carrerof ,

Castaeda Rafaelg, Garca-Casares Ladyb, Lobo ngelb,d, Polanco Danielab, Bracho Juanc, Ovalle Adrinc .
a
Laboratorio de Biotecnologa de Microorganismos "Sixto David Rojo", Departamento de Biologa, Facultad
de Ciencias, Universidad de los Andes. bDepartamento de Biologa Facultad de Ciencias Universidad de los
Andes ,cUniversidad Politcnica Territorial de Mrida, dAsamblea Bolivariana de Estudiantes de Ciencia y
Tecnologa, eCentro de Investigaciones del Estado para la Produccin Experimental Agroindustrial Fundacin
CIEPE, fLaboratorio de Fitopatologa, Instituto de Investigaciones Agropecuarias (IIAP) Facultad de Ciencias
Forestales y Ambientales Universidad de los Andes, gInstituto de Investigacin Fundamentales en Agricultura
Tropical Alejandro Humboldt (INIFAT), Cuba.

Introduccin: Pleurotus ostreatus hongo comestible del orden Agaricales cuyo cultivo se realiza en Iberoamrica desde
los aos 70 como alternativas alimentarias, implementando desechos agroindustriales para la biorremediacin de los
suelos, retomando actividades culturas ancestrales basadas en tecnologas limpias. Metodologa: El cultivo de Pleurotus
ostreatus en Venezuela, se abord de forma artesanal evaluando los factores abiticos y biticos en las fases de pre-
inoculo, semilla, fructificacin y cosecha; utilizando cepas presentes en el estado Mrida en las localidades
correspondientes a los micro climas que reflejan el nicho ecolgico que este ocupa, realizando su identificacin morfo-
anatmica a travs de clave de identificacin de los gneros y especies de hongos, colectando cepas de las especies P.
eryngii, P. citrinopileatus y P. ostratus; las cuales se lanzaron a cultivo de forma cerrada a condiciones de pre-inoculo en
medio Agar Potato Dextrosa a 22C, semilla en incubacin a 28C en oscuridad en semilla de sorgo por 22 das, luego la
fructificacin en diferentes desechos agroindustriales como bagazo de caa y tuza de maz a a 22C en luz; para una
produccin de 250kg de hongos; realizando mltiples repeticiones a produccin de 20kg en los liceos CEAPULA
municipio Libertador, Edo. Mrida y Liceo Bolivariano Miguel Otero Silva municipio Santos Marquina, Tabay, Edo.
Mrida con los estudiantes dentro de los proyectos endgenos de 5to ao. Resultados y Conclusiones: Encontrando as
que es posible desarrollar este tipo de actividad artesanal en todos niveles educativos, y adems se ajusta a las condiciones
de desarrollo agroindustrial e investigacin presentes en la legislacin de las Estrategia Nacional para la Conservacin de
la Diversidad Biolgica y su Plan de Accin; siendo as rugro con un alto potencial agroecolgico como una alternativa
endgena de seguridad alimentaria en la mayor cantidad de comunidades del pas.

Palabras clave: Pleurotus ostreatus, hongos comestibles, cultivo y alternativa alimentaria.

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Propiedades antioxidantes, antimicrobianas y antincancergenas de extractos de
semillas de guanbana (Annona muricata)
Antioxidant, antimicrobial and seed extracts antincancergenas soursop (Annona muricata)

Zambrano Alexandraa, Raybaudi-Massilia Rosaa, Arvelo Francisco b,d, Suarez Alrica I.c,
Caldern Mara Isabela, Sojo Felipea y Mosqueda-Melgar Jonathana.
a
Instituto de Ciencia y Tecnologa de Alimentos UCV, b Instituto de Biologa Experimental UCV,
c
Facultad de Farmacia UCV. d Fundacin Instituto de Estudios Avanzados IDEA.

Introduccin. La guanbana (Annona muricata) pertenece a la familia Anonceae, la cual se caracteriza por la presencia
de numerosas sustancias bioactivas, las cuales pueden ofrecer beneficios para la salud del consumidor. Con el objetivo de
estudiar las propiedades antioxidantes, antimicrobianas y anticancergenas de las semillas de guanbana, se emplearon dos
metodologas de extraccin: por decoccin y maceracin. Metodologa: Para la determinacin de la capacidad
antioxidante se utiliz el mtodo colorimtrico de captura de radicales libres, empleando el radical 1,1-difenil-2-picril-
hidrazilo (DPPH); para la actividad antimicrobiana se emple el mtodo de difusin con discos sobre cultivos de Listeria
monocytogenes, Salmonella entrica ser. Enteritidis y Staphylococcus aureus; y para la determinacin de la actividad
anticancergena se realizaron estudios in vitro empleando el mtodo de la reduccin del reactivo 3-(4,5-dimetiltiazol-2-
il)-2,5-difenil tetrazolio (MTT) sobre lneas celulares de cncer humano HeLa (cncer de tero), PC3 (cncer de prstata),
MCF-7 (cncer de mama), SKBr3 (cncer de mama, /HER/2) y fibroblastos epidrmicos de humanos (clulas control).
Resultados:. Los extractos alcohlico y acuoso de semillas de guanbana, mostraron entre moderada y alta capacidad
antioxidante con valores de 56,58 % y 84,44 % respectivamente. A su vez, el extracto alcohlico mostr actividad
antimicrobiana, determinndose un halo de inhibicin de 0,15 mm para un cultivo de S. Enteritidis y de 0,20 mm para un
cultivo de S. aureus empleando concentraciones de 0,5% del extracto. En cuanto a la actividad anticancergena, se
establecieron valores de IC50 menores a 20 g/mL en la mayora de las clulas estudiadas; el extracto acuoso alcanz
valores de IC50 de 4,45xE-5 y 1,32 g/mL en lneas celulares PC3 y HeLa, mientras que con el extracto alcohlico se
obtuvieron IC50 de 0,25 y 5,42 g/mL para lneas celulares de MCF-7 y SKBr3. Conclusin: De esta manera quedan
confirmadas las excelentes propiedades antioxidantes, anticancergenas y antimicrobianas de los extractos de semillas de
guanbana.

Palabras clave: semillas, guanbana, antioxidante, anticancergeno, anitimicrobiano

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Bioconversin de crudo extrapesado y asfaltenos por el hongo
Pycnoporus sanguineus IDEA
Extra heavy crude oil and asphaltenes bioconversion by Pycnoporus sanguineus IDEA

van Grieken Manuelaa, Perna Beatrizb, Guerra Mayamaruc, y Naranjo-Briceo Leopoldob

a
Universidad Simn Bolvar (USB). b rea de Energa y Ambiente, Instituto de Estudios Avanzados (IDEA),
Sartenejas, Caracas 1080, Venezuela. http://www.idea.org.ve/. c Unidad de Optoelectrnica y Tecnologa
Lser, Instituto Zuliano de Investigaciones Tecnolgicas (INZIT), Maracaibo, Estado Zulia, Venezuela.
http://www.inzit.gob.ve/. E-mail: bpernia@idea.gob.ve.

Introduccin: La contaminacin de ecosistemas por hidrocarburos es un grave problema ambiental asociado a la

industria petrolera. Existen evidencias sobre la biotransformacin mediada por hongos de compuestos txicos y
recalcitrantes en sustancias menos txicas o inocuas. El objetivo del presente trabajo fue estudiar la capacidad del hongo
sper productor de lacasa Pycnoporus sanguineus IDEA de bioconvertir crudo extrapesado (CEP) y asfaltenos.
Metodologa: se realiz un experimento de bioconversin en medio mnimo lquido BSM en presencia de 1% de CEP o
de asfaltenos a los 30 das de crecimiento. Se determin el efecto de los sustratos estudiados sobre el crecimiento del
hongo, la secrecin de protenas extracelulares y sobre la actividad especfica lacasa. Se realizaron pruebas de
fitotoxicidad y determinacin del ndice de toxicidad (IT). Los posibles procesos de bioconversin se estudiaron mediante
tcnicas TLC-FID y FTIR-ATR. Resultados: Se mostr que en presencia de CEP el hongo tuvo una reduccin en el
crecimiento de 37,14%. No hubo diferencias significativas en las protenas secretadas totales para ninguno de los
tratamientos en comparacin al control. Sin embargo, la actividad lacasa se vio estimulada significativamente en un
86,13% en presencia de asfaltenos y se observ una tendencia al aumento en CEP. Las pruebas de fitotoxicidad mostraron
una disminucin de 3,55% del IT en el CEP biotratado. El anlisis TLC-FID mostr una disminucin de 14,72% en la
fraccin de aromticos del CEP biotratado en comparacin al control. Los espectros FTIR-ATR de asfaltenos y CEP
biotratados revelaron cambios en los grupos funcionales C=O y C=C de compuestos conjugados y aromticos, as como
una disminucin de la banda de sulfxidos (S=O). Estas variaciones se corresponden a reacciones de oxidacin que se
atribuyen a la actividad lacasa. Conclusion: Se evidencia que P. sanguineus IDEA es capz de inducir procesos de
bioconversin en CEP y asfaltenos sin generar compuestos txicos.

Palabras clave: Pycnoporus sanguineus, bioconversin, asfaltenos, crudo extrapesado, fitotoxicidad

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Eficiencia del tratamiento y remocin bacteriana en el sistema de reutilizacin de
aguas servidas complejo Ana Mara Campos de Pequiven, estado Zulia
Efficiency and bacterial treatment removal in the Wastewater reuse system, complex Ana Maria
Campos of Pequiven, Zulia State

Luzardo Mndez Mariangela, Ordoez Guerra Gisella, Montiel de Morales Marynesb,

Garca Martnez Danac
a
Laboratorio de Virologa, Centro de Investigacin del Agua, Universidad del Zulia;
b
Unidad de Investigacin de Microbiologa Ambiental, Departamento de Biologa, Facultad Experimental de
Ciencias, Universidad del Zulia; c Laboratorio de Proteccin Vegetal, Centro de Estudios Botnicos y
Agroforestales, Instituto Venezolano de Investigacin Cientficas
mariangelluzardo2@gmail.com

Introduccin: El adecuado tratamiento de aguas residuales

La mayora de las ciudades del mundo no tratan sus
aguas residuales, siendo depuradas en porcentajes muy
bajos y otras difcilmente se filtran por medios
mecnicos, desechndolas directamente a la cuenca de
los ros, mar o a lagos. A medida que la poblacin
crece, se promueve una mayor demanda en la
utilizacin del agua y una mayor introduccin de
volmenes elevados de contaminantes. La falta de un
adecuado saneamiento eleva la positividad
contaminacin bacteriana proveniente de los desechos y
residuos. Se hace necesario proporcionar el tratamiento
adecuado a las aguas residuales para disminuir su
potencial contaminante y convertirse en una posibilidad
para incrementar la disponibilidad de recursos hdricos
en todo el mundo [1,2].
La descarga y reuso de aguas servidas con una baja
calidad microbiolgica por insuficiencia o ausencia de
tratamiento, es la va de transmisin idnea para el
contagio de enfermedades de origen hdrico [3].
La regulacin de la calidad de los efluentes que se
vierten en los cuerpos de agua naturales es de suma
importancia. El mundo afronta su escasez debido, entre
otras cosas, a los niveles de contaminacin de las aguas
dulces por las descargas de aguas residuales con un
tratamiento deficiente, y con un elevado nmero de
organismos que pueden ser patgenos, adems de la
sobreexplotacin del recurso [1,4].
industriales y domsticas para su posterior reutilizacin
en mltiples usos contribuye a un consumo sostenible
del agua, as como a la regeneracin ambiental del
dominio pblico hidrulico, martimo y de sus
ecosistemas, sin olvidar que el agua de adecuada
calidad es una materia prima crtica para la industria [5]
En la ciudad de Maracaibo se ha hecho nfasis en la
necesidad de la descontaminacin del Lago, al cual se
de descargan alrededor de 10.000 l/seg. de aguas
residuales, estos desechos que se agregan a este cuerpo
de agua natural constituyen la principal fuente de
contaminacin, adicionando a este ambiente elevadas
cargas de componentes qumicos y un alto nmero de
patgenos entre ellos: bacterias, virus y parsitos
entricos, que causan diversas enfermedades hdricas
[6]. La valoracin de la calidad del agua que se lleva a
cabo actualmente se basa fundamentalmente en
parmetros bacterianos. Los indicadores bacterianos
constituyen la prueba ms sensible para detectar
contaminacin fecal reciente [7,8]. Otro mtodo para
evaluar la eficiencia en la remocin bacteriana en las
plantas de tratamiento es mediante la capacidad del
sistema para eliminar parte de la concentracin de
contaminantes que se encuentra en el agua residual
mediante la determinacin de los porcentajes de
remocin [9].

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 Revista de la Sociedad Venezolana de Microbiologa 2013; 33: suplemento 1
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Tomando en consideracin que en Maracaibo se
presentan elevados ndices de gastroenteritis, diarreas,
hepatitis infecciosa y otras enfermedades consideradas
de trasmisin hdrica, se plante esta investigacin con Resultados y Discusin:
el objeto llevar a cabo un estudio y valoracin de la
calidad bacteriolgica, a travs, de la presencia de
indicadores de contaminacin fecal en el Sistema de
Reutilizacin de Aguas Servidas (RAS), ubicado dentro
del complejo petroqumico El Tablazo en los Puertos de
Altagracias estado Zulia, y determinar la eficiencia del
tratamiento y remocin bacteriano de los procesos
llevados a cabo en el en dicho sistema de reutilizacin
de agua.
Materiales y Mtodos:
La fase de muestreo consisti de 12 tomas de
muestras en un periodo de seis meses continuos,
estableciendo tres puntos de toma de muestras (afluente,
efluente descargado al Lago y efluente reutilizado por
Pequiven, Maracaibo estado Zulia) en cada uno de los
muestreos obteniendo un total de 36 muestras. Para
evaluar la calidad microbiolgica del sistema de
tratamiento se llev a cabo la cuantificacin mediante el
Numero Ms Probable (NMP) de Coliformes Totales
(CT) y Termotolerantes (CTT) siguiendo la tcnica de
fermentacin de tubos mltiples, en tres series de cinco
tubos y para la cuantificacin de Hetertrofos, se
emple la tcnica de vaciado en placa propuesta en el
Standard Methods [10].
Para determinar el porcentaje de remocin
bacteriano se emple la siguiente frmula propuesta por
Romero y col. [9]
Remocin (%) = (Ci-Cf) /Ci x 100
Donde Ci= Concentracin inicial y Cf= Concentracin
final.
Con respecto a la determinacin de eficiencia del
tratamiento se compar los porcentajes de remocin
tericos del diseo de planta con los porcentajes
obtenidos en la presente investigacin en el afluente y
efluentes del sistema.
El anlisis de CT y CTT en el total de las muestras
de agua residual demostr su presencia en el 100% de
las muestras estudiadas provenientes del Afluente de la
planta, con un rango que oscil entre 2,3 x 10 6 hasta 9,0
x 107 NMP/100 ml, y una media geomtrica de 2,1 x
107 NMP/100 ml para CT. Para los CTT el intervalo se
encontr entre 7,0 x 105 y 5,0 x 107 NMP/100 ml, y
una media de 1,6 x 107 NMP/100 ml.
La positividad y el nmero elevado de
microorganismos en las muestras clasificadas como
aguas residuales de origen domestico, era de esperarse,
debido precisamente al hecho que son aguas
compuestas principalmente por materia orgnica,
incluyendo heces humanas y de animales de toda la
poblacin de la zona norte del municipio Maracaibo. La
presencia de CTT en estas muestras es un indicador de
la existencia de contaminacin fecal [11]. Si bien el
grupo de los CT no es empleado como un indicador de
la presencia de contaminacin fecal en algunos pases,
en Venezuela si, debido a que en l estn incluidos tanto
CTT como bacterias ambientales. Las altas
concentraciones de organismos CTT demostradas en
este estudio, comprueban que no solo existe una
contaminacin de origen fecal sino que sugiere la
posible presencia de agentes patgenos en el agua
quizs en una proporcin de riesgo para la transmisin
de enfermedades de origen entrico [11].
Con respecto al efluente que es descargado hacia el
Lago de Maracaibo se obtuvo un 100% de positividad
para la presencia de CT y CTT con un rango que oscil
entre 1,7 x 104 y 9,0 x 106 NMP/100 ml, y una media
geomtrica de 1,4 x 106 NMP/100 ml para CT y para
CTT un intervalo que abarc entre 1,7 x 10 4 y 2,8 x 106
NMP/100 ml, y una media de 6,4 x 10 5 NMP/100 ml.
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De acuerdo con la Normativa Venezolana
presentada en la Gaceta Oficial N 5021, y el
reglamento de clasificacin de las aguas y medidas de
control de la polucin de la cuenca de Lago de
Maracaibo, las aguas de los efluentes del sistema de
tratamiento analizado, pueden ser consideradas aguas
del tipo 4A; es decir, aguas para el contacto humano
total, ya que son vertidos al Lago de Maracaibo el cual
es un sistema estuarino donde la comunidad o
poblaciones aledaas hacen vida y uso de este recurso.
Tomando en cuenta estas normativas, el 100% de las
muestras del efluente final del Lago analizadas; no
cumplen con los criterios bacteriolgicos contemplados
por la norma y por lo tanto, se presumen que no eran
aptas para ser descargadas a cuerpos de agua naturales.
Estos resultados son de suma importancia, debido a
que no solo el 100% de las muestras incumplen la
normativa, sino que adems, la carga bacteriana
sobrepasa la concentracin permitida hasta 1,4 x 10 6 CT
y 6,4 x 105 CTT, lo que afecta directamente la ecologa
de tan importante reservorio.
Las descargas de aguas servidas con alta carga
microbiana presentan una relacin causa-efecto bastante
clara y muy directa [12], puesto que no solo afecta al
ecosistema como tal, sino que adems, afecta la
economa de las poblaciones que se encuentran
asentadas en las orillas de la cuenca del Lago de
Maracaibo, debido a que sus ingresos familiares estn
basados fundamentalmente en la pesca y otras
actividades relacionadas con el Lago.
El segundo efluente de la planta RAS analizado en
este estudio tiene especial atencin para los anlisis
llevados a cabo, debido a que, presenta doble propsito
en su utilizacin post-tratamiento. Uno de los
propsitos que tienen estos vertidos que salen de la
planta es su reutilizacin por parte de Pequiven y segn
la Gaceta Oficial N 5021 como aguas de tipo 5, que
son aquellas destinadas para usos industriales que no
requieren de agua potable, por lo cual la normativa no
contempla lmites de CT o CTT ya que estas aguas no
son ingeridas o entran en contacto con la poblacin. Sin
embargo, es de suma importancia que se monitoree la
carga de la comunidad microbiana (Hetertrofos), como
prevencin de otro tipo de bacterias altamente
corrosivas, reductoras de sulfato y oxidadoras de
hierro, que afectan a los componente metlicos y
tuberas de la industria petroqumica en la cual se usan
estos efluentes para procesos de enfriamiento [13].
Otro de los propsitos que tienen estos efluentes
luego de ser abastecido el complejo petroqumico en el
uso de los procesos industriales es, el mantenimiento de
areas verdes y riego de sembrados de zonas cercanas
al complejo (poblacin aledaa). De acuerdo con la
clasificacin segn la Gaceta Oficial N 5021, estas son
aguas Sub Tipo 2B: Aguas para el riego de cualquier
otro tipo de cultivo y para uso pecuario, de las cuales
podemos decir que se obtuvo en el 100% de las
muestras nmeros menores a dos organismos
correspondientes a CT y CTT, cumpliendo con la
normativa legal. Estos resultados demuestran que con
los tratamientos aplicados en esta fase, los cuales son
tratamientos qumicos a base de cloracin, se logro
reducir hasta siete rdenes de magnitud con rangos que
iban de 107 a <2 NMP/ 100 ml.
Los resultados en este estudio demuestran que el
sistema de tratamiento por lodos activados de aguas
residuales, llevado a cabo en el rea objeto de estudio,
logra disminuir en promedio un orden de magnitud (de
106 a 105) para CT y en promedio tres rdenes de
magnitud (de107 a 105) para CTT de las
concentraciones descargadas pertenecientes al efluente
del Lago de Maracaibo, con porcentaje de remocin
que oscilan entre 43,4% y 99,9% tanto para CT como
para CTT y con promedios de porcentajes de remocin
de 97,1% y 95,5% respectivamente (Figura 1), lo cual,
adems indica que este tipo de tratamiento es eficiente,
puesto que, supera los requerimientos iniciales del
diseo de planta que es un porcentaje terico de 80% de
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remocin para el efluente que es descargado al Lago
[14]
Valor Terico efluente hacia el Lago de Maracaibo
Figura 1. Porcentajes de remocin de CT y CTT en el
efluente descargado hacia el Lago de Maracaibo vs
Porcentaje de remocin terico del diseo de la planta
para el efluente al Lago.
Los resultados expresados
demuestran la idoneidad de los procesos de tratamiento
de las aguas que forman parte del efluente usado por
Pequiven, puesto que en la mayora de las muestras fue
posible disminuir hasta en siete rdenes de magnitud
(107 a <2 NMP/100ml) las concentraciones de CT y
CTT, para dicho efluente. Con respecto a la remocin
de CT y CTT del efluente que es usado por Pequiven se
obtuvo en la totalidad de las muestras 99,9% de
remocin para ambos grupos (Figura 2).
Valor Terico efluente usado por
Pequiven
Figura 2. Porcentajes de remocin de CT y CTT en el
efluente usado por Pequiven vs Porcentaje de remocin
terico del diseo de la planta para el Afluente
Pequiven.
Los resultados demuestran que el tratamiento
aplicado a este efluente es 100% eficiente, esto debido a
los tratamientos de desinfeccin aplicados en la planta,
puesto que en el total de muestras analizadas el
porcentaje de remocin supero en un 9,9% el valor
terico de diseo para el Afluente usado por Pequiven
para la construccin de la planta que fue de un 90%, sin
embargo, en datos no mostrados se evidencio la
presencia de virus entricos [14].
Tomando en cuenta los anlisis bacteriolgicos
restantes (hetertrofos), del total de los 12 muestreos
analizados en el sistema de tratamiento de aguas
servidas RAS, el 100% fueron positivas para la
presencia de organismos Hetertrofos, tanto en el
afluente como en el efluente del Lago, con rangos que
oscilaron entre 1,0x106 y 1,6x107 UFC/100 ml con un
promedio aritmtico de 7,6x106 UFC/100 ml para el
caso de las muestras provenientes del Afluente a la
planta, y con intervalos que abarcaron desde 3,2x10 5
hasta 3,1x106 UFC/100 ml y un promedio de 8,93x105
UFC/100 ml para el efluente que es vertido al Lago. A
anteriormente,
pesar de los resultados obtenidos, para el efluente que
es reutilizado por Pequiven se obtuvo un 100% de
muestras negativas para la presencia de estos
microorganismos. Con respecto a los anlisis de
remocin, se puede decir que los tratamientos (fsicos y
biolgicos) aplicados al efluente que es descargado al
Lago de Maracaibo, se obtuvo porcentaje de remocin
que oscila entre 26,1% y 96,3% y con promedio de
79,8%, lo que indica que los tratamientos aplicado a
dicho efluente son eficientes, puesto que del total de
muestras (12), Ocho sobrepasaron hasta en un 80% los
porcentajes de remocin. Por otra parte, con a la
deteccin de microorganismos heterotrficos, se puede
decir que la planta fue eficiente en la remocin de estos,
con un porcentaje promedio de remocin del 99,9%,
esto posiblemente debido al tratamiento terciario
(Qumico) que es aplicado al efluente el cual consiste en
la adicin de cloro.
A pesar de no existir una normativa Venezolana que
incluya dentro de los parmetros biolgicos el
monitoreo de Hetertrofos, la cuantificacin de los
mismos es muy importante, ya que son un grupo de
organismos que indican la carga total microbiana que se
encuentra en el ambiente estudiado o muestra analizada.
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Los resultados indican la presencia de una elevada
carga microbiana total en los puntos analizados, en los
cuales se encuentran cantidades similares al del grupo
de los coliformes. Los microorganismos en general
indican la eficiencia de los tratamientos de aguas
residuales, debido a que es posible medir la carga inicial
de estos y la carga final [15].
Conclusiones:
La planta de Reutilizacin de Aguas Residuales
(RAS) es eficiente en la remocin de los indicadores de
contaminacin fecal tradicionales Coliformes Totales y
Coliformes Termotolerantes en los efluentes que son
tratados con cloracin, considerando este el mtodo ms
idneo para la manipulacin de este tipo de afluentes
con altas carga microbiana iniciales de
microorganismos.
Las muestras evaluadas de los efluentes vertidos al
Lago de Maracaibo no cumplieron con lo establecido en
la gaceta Oficial N 5021 y la gaceta Oficial N
252,750, a pesar de obtenerse porcentajes altos de
remocin, de este modo, no son aptas para ser vertidas
de forma directa o indirecta al cuerpo de agua sin antes
ser tratadas por mtodos ms efectivos. Las muestras
evaluadas del efluente final del RAS que son
reutilizadas por la Petroqumica y las cuales son
tratadas previamente por cloracin, cumplen con los
criterios bacteriolgicos descritos la gaceta Oficial N
5021, por tanto, pueden ser usadas con fines de
irrigacin y en los procesos industriales. A pesar de
estos resultados se debe incluir anlisis virolgicos
puesto son buenos indicadores de la calidad de las
aguas.
Palabras clave: Coliformes totales, Coliformes
Termotolerantes, Hetertrofos, Porcentaje de remocin.
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Calidad microbiolgica de galletas tipo cracker saborizadas con queso cheddar
y ajo/perejil
Microbiological quality of cracker flavored with cheddar and garlic/parsley

Mrquez Jos G.a, Prez S. Elevina E.b, Guzmn A. Romel E.b

a1
Escuela de Nutricin y Diettica, Facultad de Medicina, Universidad Central de Venezuela.
b
Instituto de Ciencia y Tecnologa de Alimentos, Facultad de Ciencias, Universidad Central de Venezuela.

Introduccin: Las galletas tipo cracker gozan de gran aceptacin en un amplio rango de edades. Generalmente, pueden
encontrrseles en la despensa de muchos hogares, por lo que su uso en reuniones y cocteles es muy comn. Sin embargo,
con el uso de la tecnologa de alimentos es muy frecuente encontrar hoy en da, formulaciones de cracker bajas en
caloras, ricas en fibra diettica y hasta saborizadas a partir de materias primas naturales, lo que promueve entonces un
consumo masivo de las mismas, dado a que han pasado de ser un simple snacks a un posible producto funcional. En tal
sentido, el objetivo de esta investigacin fue evaluar la calidad microbiolgica de galletas tipo cracker saborizadas con
queso cheddar y ajo/perejil. Metodologa: La formulacin de las galletas se hizo a base de trigo, manteca vegetal, agua,
preservantes (c. ascrbico y propionato de sodio) y los saborizantes: cheese bix (queso chdar) deshidratado (comercial)
y una mezcla de ajo criollo fresco con perejil deshidratado (comercial). Cada una de las galletas se envas por separado en
bolsas trilaminadas y se almacenaron a temperatura ambiente durante 90 das. El nmero de aerobios mesofilos (AE),
coliformes totales (CT), Escherichia coli, mohos y levaduras (MH) y Staphylococcus aureus (SA), se determin mediante
la siembra en pelculas secas rehidratables Petrifilm 3M. Resultados: Se mostr que el contaje de AE y MH para las dos
formulaciones evaluadas se encontraron por debajo de los lmites establecidos por COVENIN. En cuanto a SA, CT y E.
coli no se encontraron contajes. Conclusin: Estos resultados indican que las galletas evaluadas tienen una buena calidad
microbiolgica, que se mantiene en el tiempo, lo que sugiere su inocuidad para el consumo humano.

Palabras clave: snacks, aerobios mesfilos, coliformes totales, mohos y levaduras

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Determinacin de Listeria monocytogenes en ensaladas listas para consumo
expendidas en establecimientos de comida rpida en la ciudad de Mrida-Venezuela
Listeria monocytogenes determination in salads ready to use issued in fast food establishments in
the city of Merida, Venezuela.

Salas Osorio Elaysa1a,b,d, Guerra Altuve Laura a,b Jimnez Medina JMa,b,c
a
Laboratorio de Microbiologa de Alimentos Prof. Cndida Daz. b Laboratorio de Diagnostico e
Investigaciones Microbiolgicas "Prof. Celina Araujo de Prez", Departamento de Microbiologa y
Parasitologa. c Seccin de Biotecnologa, Instituto de investigaciones Facultad de Farmacia y Bioanlisis.
4
Grupo de Investigaciones Biopatolgicas GIBFO, Facultad de Odontologa, Universidad de los Andes,
Mrida Venezuela.

Introduccin: El Gnero Listeria se encuentra ampliamente distribuido en la naturaleza y tambin en los alimentos. De
todas las especies del Gnero solo Listeria monocytogenes est asociado a una grave enfermedad conocida como
listeriosis. A pesar de que los sntomas son autolimitados en las personas sanas, trastornan el mbito personal y laboral del
individuo, y representa un alto riesgo para los pacientes inmunosuprimidos e inmunocomprometidos. En Venezuela no se
cuenta con informacin epidemiolgica disponible sobre Listeriosis, pero existen reportes recientes que indican
aislamientos en peces, frutas y vegetales mnimamente procesados. En la ciudad de Mrida, uno de los alimentos de
mayor demanda son las ensaladas preparadas a base de vegetales frescos, de all que el objetivo del presente estudio fue
determinar la presencia de L. monocytogenes en ensaladas listas para consumo expendidas en establecimientos de comida
rpida de la ciudad de Mrida- Venezuela. Metodologa: 40 muestras de ensaladas elaboradas a base de Lechuga Lactuca
sativa, Tomate Solanum lycopersicum y Pimentn Capsicum annuum fueron analizadas mediante el uso del Sistema
comercial TECRA LISTERIA INMUNOENSAYO VISUAL (VIA) para determinar la presencia del gnero y a partir
de las muestras positivas se sigui el protocolo para identificacin de especie mediante la metodologa tradicional.
Resultados: Listeria se evidenci en un 35% de las muestras del estudio: 40% correspondi a L. monocytogenes,
resultados que permiten reafirmar la importancia del control microbiolgico de los vegetales para el aseguramiento de la
calidad de los mismos.

Palabras clave: Listeria monocytogenes, ensaladas, comida rpida.

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Primera evidencia sobre aislamiento e identificacin de hongos filamentosos y
levaduriformes de sistemas de almacenamiento y distribucin de nafta en
instalaciones petroleras venezolanas
First evidence of isolation and identification of filamentous fungi and yeasts from naphtha storage
tanks and transporting pipelines in Venezuelan oil facilities

Naranjo-Briceo Leopoldoa, Perna Beatriza, De Sisto ngelaa, Inojosa Ysvica; Rojas Diegoa;,
Gonzlez Meralysa, Luca Senaa, Freites Miguela, Rosales Jos Davida y Duque Zoilabetb
a
rea de Energa y Ambiente, Instituto de Estudios Avanzados (IDEA), Sartenejas, Caracas 1080, Venezuela.
http://www.idea.org.ve/. b Instituto Zuliano de Investigaciones Tecnolgicas (INZIT), Maracaibo, Estado
Zulia, Venezuela. http://www.inzit.gob.ve/.

E-mail: lnaranjo@idea.gob.ve / lenaranjo@gmail.com

Introduccin: Se define como corrosin inducida microbiolgicamente al proceso electroqumico donde los
microorganismos inician, facilitan o aceleran una reaccin de corrosin que causan daos localizados en una superficie
metlica. Actualmente, la biocorrosin representa uno de los principales problemas operativos, econmicos y ambientales
en la industria petrolera. La corrosin influenciada por hongos ocurre principalmente debido a los cidos orgnicos
producidos por su actividad metablica. Los objetivos de este trabajo fueron aislar e identificar las cepas cultivables de
hongos filamentosos y levaduriformes de un sistema de almacenamiento y distribucin de nafta de una operadora
petrolera establecida en la Faja Petrolfera del Orinoco (FPO). Metodologa: El aislamiento se llev a cabo a partir de
muestras tomadas de 12 puntos a lo largo del sistema: a la entrada y salida del tanque de almacenamiento de nafta, dentro
del tanque, en dos troncales con altos niveles de dao en su estructura, y en el cabezal de dos agrupaciones de pozos. La
identificacin molecular se realiz mediante amplificacin por PCR y secuenciacin del gen 28S del ARNr. Resultados:
Los resultados mostraron la presencia de cuatro morfotipos diferentes en el sistema estudiado. Dentro del tanque de
almacenamiento de nafta, una nueva especie de hongo Ascomycota (BM-103) con alta identidad con las especies
reportadas como Noosia banksiae y Sporidesmium tengii. La existencia de dos levaduras Ascomycota, Rhodotorula
mucilaginosa BM-104 y Wickerhamia sp. BM-105, en un troncal con alto ndice de criticidad (Troncal T2 B), la primera
descrita como asociada a procesos de biocorrosin. Adems, se identific en un clster de pozo (MC) la presencia de
Cladosporium cladosporioides BM-102, un hongo filamentoso Ascomycota reportado previamente en procesos FIC.
Conclusin: Este trabajo representa la primera evidencia sobre el aislamiento e identificacin de hongos filamentosos y
levaduriformes de sistemas de almacenamiento y distribucin de nafta en la industria petrolera.

Palabras clave: hongos, biocorrosin, nafta, crudo extrapesado, oleoductos, Faja Petrolfera del Orinoco.

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Aislamiento y caracterizacin de bacterias termfilas, capaces de crecer en
combustible diesel como nica fuente de carbono
Isolation and characterization of thermophilic bacteria, capable to use diesel fuel as the only
source of carbon

Leonardo Velazcoa, Valeria Ricoya, Claudio Granadoa,

Eucandis Fuentesab, Carlos Morenoa,b.
a
Departamento de Biologa, Universidad de Carabobo; b Unidad de Biotecnologa Aplicada FACYT-UC.
leonardvr_723@hotmail.com

Introduccin. condiciones de temperatura, pH y concentraciones de

El disel es un derivado del petrleo, compuesto por
diversos hidrocarburos. Es utilizado como combustible
para motores de combustin interna de encendido por
compresin, destinados principalmente para el
transporte de cargas pesadas y/o pasajeros, sin embargo,
es considerado un contaminante comn de suelos y
aguas [1].
Una alternativa para tratar ambientes contaminados
por hidrocarburos es la tcnica de biorremediacin, la
cual consiste en el uso de organismos o sus productos
con el objetivo de remover el agente contaminante o
destoxificar el ambiente contaminado, es decir,
descomponer o degradar sustancias peligrosas en
sustancias menos txicas o inocuas para el medio
ambiente. Para lograr esto los organismos requieren de
condiciones fsico-qumicas y nutricionales que les
permitan utilizar sustancias como los hidrocarburos
como fuente de carbono [2,3].
Tradicionalmente en la tcnica de biorremediacin
se han utilizado microorganismos que puedan haber
sido aislados o no de ambientes contaminados. En
Venezuela existen numerosos ambientes, de los cuales
ha sido posible aislar microorganismos con diversas
capacidades biotecnolgicas, entre estos destacan las
aguas termales [4,5].
Por lo antes expuesto en este trabajo se plante aislar
y caracterizar el crecimiento de bacterias termfilas
provenientes de las fuentes termales del sector las
Pavas, Estado Trujillo Venezuela, frente a diferentes
diesel.
Materiales y mtodos.
Toma y caracterizacin de las muestras: La zona de
muestreo corresponde a aguas termales del sector Las
Pavas, Edo Trujillo, Venezuela en las coordenadas de
91534.92N 70480676O. Se determin la
temperatura de la fuente termal directamente del punto
de emergencia del agua. De igual modo, se registr pH,
oxgeno disuelto y conductividad, utilizando para ello
dos dispositivos multifuncionales marca Oakton.
Las muestras fueron recolectadas en tubos con 10 ml
c/
u de medio nutritivo (Nutritive Broth) in situ y
transportadas en recipientes trmicos. Llegadas al
laboratorio, las muestras se inocularon en caldo
nutritivo (HIMEDIA) durante 72 horas en estufa a 55C
sin agitacin. Una vez observado crecimiento se cultiv
el pool bacteriano en medio mnimo mineral (M.M.M)
(tampn fosfato 0,1M pH 7.4, suplementado con 500l
CaCl2 1%; 100l CuSO4 1%; 2ml FeSO4 0.5%; 200l
MgSO4 1%; 500l ZnSO47H2O 1%; 500l NaCl 1%;
100l (NH4)2SO4 1%) y combustible disel comercial
(1%) como nica fuente de carbono.
La caracterizacin de la morfologa colonial se
realiz utilizando microscopia ptica, tomando en
cuenta parmetros como: forma, color, brillo, bordes,
apariencia entre otras. En la caracterizacin de las cepas
bacterianas aisladas, se emple el mtodo de tincin de
Gram y observacin al microscopio ptico para

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observar afinidad tintorial, arreglo y morfologa celular Tabla 1: Caractersticas macroscpicas de las
colonias.
[6].
Cepas Bordes Pigmentacin Apariencia
Condiciones que optimizan el crecimiento 1.D Amplia e Oscura en el Poca
microbiano: La medida del crecimiento se evalu con irregular Centro spera
el cambio de turbidez a 540nm de cultivos frescos. Con 2.1D Reducida y lisa Oscura en el lisa
esto se determin la temperatura, pH y concentracin de Centro
Diesel, para esto ltimo alcuotas de 500l de cultivos 2.2D Reducida e Poca en el spera
bacterianos fueron inoculadas en M.M.M con irregular centro
combustible diesel como nica fuente de carbono. Para
la temperatura se analizaron seis temperaturas: 36, 55, En trabajos previos se ha demostrado que en los
65, 70, 75 y 80C. Para pH se tomaron siete: 6, 7, 8, puntos de emergencia de los manantiales termales la
8,5; 9, 10 y 11,0 y la concentracin del Diesel se evalu poblacin microbiana puede ser alta (hasta 10 6/ml),
al 1,5; 2,0 y 2,5%. Las mediciones se realizaron pero un gran porcentaje de ellos se encuentra en estado
inicialmente cada 30 minutos hasta completar ocho de latencia, son metablicamente inactivos y no se
horas y luego se realizaron mediciones puntuales a las multiplican por lo que el nmero de microorganismos
24, 48, 72 y 144 horas. Obtenidos dichos valores se viables suele ser pequeo (hasta 10-103/ml),
realiz la cintica de crecimiento para la cepa 2.2.D dependiendo de la temperatura de incubacin y de los
bajos las condiciones que optimizan su crecimiento, con medios de cultivo empleados en su deteccin. As
el fin de determinar el porcentaje de Diesel consumido. mismo, en las aguas hipertermales se encuentran una
A los datos obtenidos se les realizo estadstica mayor proporcin de bacterias Gram-positivas [8].
descriptiva, con el programa SPSS Statistica 21. En este trabajo se encontr que de las tres colonias
capaces de crecer en combustible diesel comercial los
Resultados y discusin. morfotipos 1.D y 2.1.D fueron cocos Gram-Negativos
Toma y caracterizacin de las muestras mientras que el morfotipo 2.2.D Bacilo Gram-Positivo.
Los parmetros evaluados en la zona de colecta Esto concuerda con lo reportado en la literatura [9],
fuern: Temperatura: 46C, clasificadas como aguas donde se suele reconocer que la termoestabilidad est
hipertermales (7); con respecto al pH reportado para las ms asociada a organismos Gram-positivos, sin
aguas termales del estado Trujillo, existe variabilidad embargo, en aguas termales se establece una relacin
desde cido hasta bsico, en nuestro caso neutro (pH: 1:2 entre organismos termfilos Gram-negativos y
7,09); conductividad: 0,44 y oxigeno disuelto: 1.96 Gram-positivos cerca de los puntos de salida de las
g/ml. Datos que concuerdan con lo reportado para este fuentes termales, respaldando as los hallazgos
mismo tipo de ambiente [7]. encontrados [9].
De un total de 22 morfologas coloniales solo tres
morfotipos fueron capaces de utilizar como fuente de En lneas generales los resultados obtenidos
carbono combustible diesel comercial (Figura 1), por su concuerdan con lo establecido por la literatura [10], al
parte, la Tabla 1 detalla las caractersticas establecer que la gran mayora las bacterias
macroscpicas de las colonias. degradadoras de hidrocarburos se encuentran en el

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grupo de Gram-negativas debido a que los Las altas temperaturas donde se desarrollan dichos
lipopolisacridos presentes en sus membranas ayudan a microorganismos hacen probable que aumente la
la formacin y estabilizacin de emulsiones de biodisponibilidad del combustible diesel para ser
hidrocarburos en sistemas acuosos y contribuyen al captado, permitiendo entonces que los mismos puedan
incremento en la superficie de ataque sobre el ser utilizados como fuente de carbono, as mismo, se
contaminante, para su posterior incorporacin [11]. Una sugiere que estas bacterias posean mecanismos
vez dentro el hidrocarburo, estudios previos [12; 13] moleculares que le permitan incorporar estos
demuestran que algunas cepas bacterianas cuentan con hidrocarburos al interior celular, tal como sucede en
la maquinaria enzimtica necesaria para la asimilacin algunos mesfilos degradadores de Disel [15].
de molculas hidrocarbonadas de diferente naturaleza y
que en este caso estn presentes en el combustible
diesel.

1. 2.1. 2.2.
D D D
Figura 1: Vista microscpica de la morfologa colonial
ptica (40X) de las cepas que mostraron crecimiento en
medio mnimo suplementado con Diesel.

Condiciones que maximizan el crecimiento

microbiano: Los valores que maximizan el crecimiento
de las tres cepas estudiadas se encontr que la
temperatura de mximo crecimiento fue 55C y pH 7,0
(Figura 2), 2,5% resulto ser el porcentaje de diesel al
cual se evidencio el mayor crecimiento de las cepas
estudiadas (datos no mostrados), con estos parmetros
ya establecidos se seleccion la cepa 2.2.D para evaluar
la cintica de crecimiento y el porcentaje de
degradacin de combustible diesel, en este orden de
ideas en la Figura 3, se evidencia que el mayor
crecimiento ocurri a las 120 horas (3,22 x10 8 UFC). Figura 2: Perfil de crecimiento de la cepa 2.2.D A)
Para este tiempo el porcentaje de degradacin de Temperatura, B) pH.

combustible diesel fue del 16% anlisis realizado por

gravimetra (datos no mostrados). Presumiblemente la
porcin que est siendo degradada por la bacteria
corresponde a la fraccin de alcanos que se encuentra
presente en el diesel [14].

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Figura 3: Perfil de crecimiento de la cepa 2.2.D a 55C,
7,0 de pH y 2,5% de combustible diesel comercial.
Conclusiones.
UFC (108/ml)
El consorcio de microorganismos posee una
temperatura ptima de 55C y pH ptimo de 7,0;
demostrando su termoestabilidad aun en condiciones
superiores a las encontradas en el rea de muestreo.
El consorcio de microorganismos logr degradar
efectivamente el combustible Diesel comercial con un
ptimo de 2,5% v/v. Haciendo plausible su uso para
procesos de biorremediacin.
Tiempo (Horas)
Palabras clave: Bacterias termoflicas, crecimiento,
temperatura, pH, diesel.
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Calidad microbiolgica de sueros controles comerciales utilizados en laboratorios
clnicos del Estado Zulia, Venezuela
Microbiological quality of commercial control sera used in clinical laboratories of Zulia State,
Venezuela

Parra de Cepeda Irenea*, Molero Paredes Taniab*, Gonzlez Surez Keniab, Gonzlez Salgueiro Zinniab,
Zambrano Morales Marianab, Cruz Moran Solbellysb, Nez Hurtado Milagrosc,
Panunzio Rodrguez Ameliaa
a
Departamento de Salud Pblica y Social. Escuela de Bioanlisis. Facultad de Medicina. Universidad del Zulia
b
Departamento de Qumica. Escuela de Bioanlisis. Facultad de Medicina. Universidad del Zulia
c
Departamento de Morfofisiopatologa. Escuela de Bioanlisis. Facultad de Medicina. Universidad del Zulia

*Correspondencia autor principal

Email: irenep49@hotmail.com/ tmp1509@hotmail.com

Introduccin. Estos materiales de control deben poseer una serie de

Uno de los roles fundamentales del Licenciado en
Bioanlisis en el equipo de salud, es el de proporcionar
datos confiables y garantizados de los diferentes anlisis
procesados con el fin de establecer un diagnstico,
pronstico y prevencin del estado de salud. Por tal
implicacin los resultados obtenidos y reportados deben
reflejar el estado real del paciente, as como tambin ser
similares en determinaciones repetidas cuando el
individuo no ha sufrido cambios en su estado de salud
[1].
Dentro de este contexto, cabe destacar que lo ms
importante en el concepto de calidad en un programa
asistencial es que debe ser lo suficientemente concreto
como para permitir que las evaluaciones que se hagan
del desempeo e ste se hagan en trminos claramente
cuantificables y que ofrezcan validez y reproducibilidad
[2].
Para lograr ese nivel de confiabilidad, el control de
calidad analtico de todo laboratorio requiere del
anlisis de uno o ms materiales de control o sueros
controles, utilizadas al mismo tiempo con las muestras
de los pacientes. Siendo estos materiales, el centro del
control de calidad interno, es de suma importancia
verificar que cumpla con todas las condiciones
necesarias para su utilizacin pues se garantiza el xito
del proceso [2].
caractersticas o especificaciones, entre ellas, turbidez
lmite de 0,100 unidades de absorbancia (UA); el pH
debe oscilar entre 7,5 y 8,5; la contaminacin menor a
las 10 Unidades Formadoras de Colonias; el coeficiente
de variacin intervial debe ser menor a 5%; bajo o
ningn riesgo biolgico o ausencia de patgenos
virales, tiempo de reconstitucin menor a 30 min y
debe ser estable desde el punto de vista qumico
[2,3,4].
Hoy da, en los laboratorios clnicos de la regin no
se presta la debida atencin a la utilizacin de los sueros
controles en materia del control de calidad interno, ya
sea por el aumento en los costos de los equipos
comerciales o por falta de concientizacin en la
importancia de su uso y no se incluyen en el tratamiento
de las muestras. Tomando en cuenta lo planteado,
aunado al dficit de estudios en este aspecto de la
calidad, el propsito de la presente investigacin es
evaluar los parmetros de calidad microbiolgicos en
materiales de control comerciales utilizados en
laboratorios clnicos del Estado Zulia, cuyo aporte
permita asegurar confiabilidad de resultados en el
control de calidad de la fase analtica.

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Materiales y Mtodos.
La presente investigacin es descriptiva y de corte
transversal. Se seleccionaron 5 marcas comerciales de
sueros controles; que para fines del estudio se
denominaron como casa comercial A, B, C, D y E.
Posteriormente, los sueros fueron reconstituidos con
5ml agua bidestilada para su utilizacin segn las
indicaciones del fabricante, previa esterilizacin y
tratamiento adecuado del material a utilizar a fin de
mantener su condicin estril hasta el momento de la
reconstitucin. Una vez reconstituidos todos los sueros
controles se separaron en alcuotas por marca, nivel y
lote.
Para valorar la calidad bacteriolgica, una alcuota
de cada suero control se sembr en medios de cultivo
Agar Sangre Humana (ASG) para la recuperacin de
bacterias Gram positivas y de otros microorganismos de
fcil crecimiento, Agar Gelosa Chocolate (AGC) para la
recuperacin de microorganismos con mayor
requerimiento para su crecimiento, Caldo Thioglicolato
(CT) para favorecer el crecimiento de microorganismos
que estn en baja concentracin y Caldo Soya
Tripticasa suplementado con Isovitalex (CSTs) con la
finalidad de favorecer el crecimiento de especies de
Haemophilus. Se incubaron a 37C y se realiz la
lectura de las placas a las 24 horas y luego a las 48
horas y se establecieron las Unidades Formadoras de
Colonia (UFC) las cuales deben ser menores a 10
UFC/ml [7].
En cuanto a la medicin de ausencia de patgenos
virales a los sueros controles comerciales se les practic
determinacin del Virus de Inmunodeficiencia
Adquirida (VIH) por el mtodo inmunoenzimtico
(ELISA); siendo ste de cuarta generacin, lo que
implica deteccin del antgeno y de los anticuerpos
contra el virus. Tambin se determin presencia de
virus de hepatitis B, especficamente antgeno de
superficie (agsHB) y antgeno Core (antiHBc) por
inmunoensayo enzimtico. Para determinacin de
hepatitis C, se empleo la metodologa de Elisa de cuarta
generacin a travs del equipo Murex HCV Ag/Ac,
detectndose simultneamente tanto el antgeno como la
presencia de anticuerpos contra el virus.
Resultados y discusin.
La ausencia de patgenos bacterianos en los sueros
controles comerciales es indispensable para el
trabajador del Bioanlisis. Considerado la calidad
bacteriolgica de los mismos al evaluar resultados en
esta investigacin se pudo observar que en el lapso de
48 horas de incubacin en estufa a temperatura de 37C
y en atmsfera de microaeroflia en las placas de Agar
Sangre Humana y Gelosa Chocolate y en aerobiosis los
caldos Soya Tripticasa suplementado y caldo
Thioglicolato; no se observ crecimiento bacteriano
mayor a 10 UFC/ml en ninguno de los medios
sembrados con los sueros controles de las diferentes
marcas comerciales.
Segn la Confederacin Latinoamericana de
Bioqumica Clnica, se ha establecido que la
contaminacin de un suero control debe ser menor a 10
UFC/ml para encontrarse dentro de las condiciones
ptimas para su utilizacin [2]. Por esta razn, al
observar que ninguno de los sueros estudiados present
un crecimiento mayor a este, todo indica que las cinco
marcas comerciales manejan con calidad la preparacin
de los materiales de control, lo cual evita contaminantes
que interfieran en alguna determinacin. Este aspecto
favorece que los materiales de control de las cinco casas
comerciales califiquen para ser empleados en el
mercado ocupacional.
En relacin a la calidad virolgica o ausencia de
patgenos virales, especficamente al determinarse la
presencia del virus de inmunodeficiencia adquirida
(VIH), hepatitis B y hepatitis C, los resultados del
estudio mostraron que ninguno de los sueros de las
casas comerciales revelaron positividad para los
referidos antgenos, por lo que optimiza su utilizacin
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en el mercado ocupacional al no existir riesgo de
infeccin o adquisicin de estas enfermedades en el
personal encargado de procesarlos en las corridas
analticas.
Estos resultados apoyados en otros estudios tales
como los fsico qumicos, resultan en concordancia con
otros autores tales como Marjani (2007) y Van
Vrancken et al (2012) quienes mencionan en sus
publicaciones que en conformidad con los estndares
internacionales, todo laboratorio debe establecer guas
o protocolos para valorar la calidad de los parmetros
del suero control, como parte importante que garantice
el control interno de la calidad en los laboratorios
clnicos [3, 6].
Conclusiones.
La totalidad de las casas comerciales presentaron
valores satisfactorios desde el punto de vista
microbiolgico al no observarse crecimiento bacteriano
ni mostrar positividad para HIV, Hepatitis B y C. Se
concluye entonces que los mismos son recomendados
para ser utilizados en los laboratorios clnicos durante
las corridas analticas al ofrecer ausencia de riesgos en
el medio ocupacional.
Palabras clave: Calidad microbiolgica, sueros
controles, laboratorios clnicos.
Referencias:
1. Tellez, W; Pealoza, R.. Aspectos Metodolgicos
del Control de Calidad Intralaboratorio en Qumica
Sangunea. Anuario Instituto Boliviano de
Biologa de Altura (Publicacin peridica en
linea). La Paz. 2009. 41-46. Disponible en
http://www.ops.org.bo/textocompleto/rnbiofa
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2. Fernndez, C., Mazziotta, D. Gestin de Calidad
en el Laboratorio Clnico. Confederacin
Latinoamericana de Bioqumica Clnica
(Colabiocli). Editorial Mdica Panamericana.
Buenos Aires, Argentina. 556 p. 2005
3. Barbagallo, R; Boley, N; Holcombe, Gl; Merson,
S; Mussell, C; Pritchard, C et al.. Production and
certification of four frozen human serum certified
reference materials containing creatinina and
electrolytes. Ann Clin Biochem. 2008. 45( 2): 160-
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4. Rivera Prez, J. Validacin de resultados en el
laboratorio de Bioqumica Clnica Facultad de
Farmacia Universidad de Iberoamrica. 2009
5. Marjani, A. Effect Of Storage Time And
Temperature On Some Serum Analytes. The
Internet J Lab Med. 2007. 2(2).
6. Van Vrancken, M; Briscoe, D; Anderson, K;
Wians, F. Time dependent Stability of 22 analytes
in lithium plasma specimens stored al refrigerator
temperature for up to 4 days. Lab Medicine. 2012.
43(6):268-275
7. Forrest K. E. 2003. Manual of Clinical
Microbiology. Edit. American Society for
Microbiology.
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Comparacin del desempeo de dos estuches comerciales para la deteccin e
identificacin de enterotoxinas estafiloccicas en alimentos
Performance comparison of two commercial kits for detection and identification of staphylococcal
enterotoxins in foods

Blasco Patriciaa, Fuentes Yamilab, De Oliveira Lauraa, Gmez Patriciaa

a
Gerencia de Manejo de Riesgo Microbiolgico, Centro Tecnolgico Polar, Cervecera Polar C.A. Planta Los
Cortijos, Estado Miranda, Venezuela. b Escuela de Biologa, Facultad de Ciencias, Universidad Central de
Venezuela, Distrito Capital, Venezuela.

Introduccin: La intoxicacin estafiloccica representa la segunda causa ms comn de enfermedades transmitidas por
alimentos a nivel mundial. Por esta razn distintas casas comerciales han desarrollado estuches de deteccin, que aceleran
la obtencin de resultados y son de gran utilidad como mtodos pre-confirmatorios. Muchas de estas pruebas se basan en
ensayos inmunolgicos, siendo los formatos ms frecuentes los de tipo enzimtico (ELISA) y las reacciones de
aglutinacin; algunas adems de detectar la toxina, son capaces de identificar el tipo especfico de la misma entre sus
variantes ms frecuentes. El objetivo del presente estudio fue comparar el desempeo de los estuches comerciales SET A-
E Ridascreen de R-Biopharm y SET RPLA de Oxoid, para la deteccin e identificacin de enterotoxinas estafiloccicas
en distintos alimentos artificialmente inoculados con S. aureus. 129 Metodologa: La metodologa empleada comprendi
la seleccin de cepas enterotoxignicas a partir de aislados disponibles en el laboratorio donde se realiz el estudio, la
evaluacin de alimentos como matriz de crecimiento para la bacteria, y la deteccin de enterotoxinas en las matrices que
resultaron ser ms aptas, en contraste con el perfil de deteccin mostrado en cultivos puros del mismo microorganismo.
189. Resultados: Ambos sistemas mostraron un lmite de deteccin relativo comparable, reportando presencia de toxinas
en diluciones 1/10 y 1/200 del cultivo puro de ATCC 29213 y O4 respectivamente, pero arrojaron falsos positivos (hasta
38%) y negativos (hasta 75%) que sugieren problemas de especificidad, probablemente asociados a interferencias con los
alimentos empleados como matriz. 241 Conclusin: El estudio indic que los estuches comerciales probados son
efectivos como mtodos de identificacin del tipo de toxina producida por el microorganismo en un cultivo puro del
mismo, una vez aislado del alimento, pero su confiabilidad para la deteccin directa de las toxinas en alimentos no puede
validarse, con base al criterio de veracidad aqu empleado. 297

Palabras clave: enterotoxinas, S. aureus, deteccin, alimentos

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Comparacin de desempeo entre dos inmunoensayos enzimticos para la deteccin
de enterotoxinas en cultivos puros y alimentos artificialmente inoculados con
Staphylococcus aureus
Performance comparison of two enzymatic immunoassays for detection of enterotoxins in pure
cultures and food artificially inoculated with Staphylococcus aureus

Blasco Patriciaa, Fuentes Yamilab, De Oliveira Lauraa, Gmez Patriciaa

a
Gerencia de Manejo de Riesgo Microbiolgico, Centro Tecnolgico Polar, Cervecera Polar C.A. Planta Los
Cortijos, Caracas, Estado Miranda, Venezuela. b Escuela de Biologa, Facultad de Ciencias, Universidad
Central de Venezuela, Caracas, Distrito Capital, Venezuela

Introduccin: Staphylococcus aureus es un microorganismo de gran relevancia en la industria alimentaria por su

capacidad de producir enterotoxinas causantes de enfermedades en el hombre, lo que hace indispensable contar con
mtodos efectivos para su deteccin y la de dichas molculas, que optimicen el control de calidad en la industria y el
manejo de brotes alimentarios. Algunos sistemas, disponibles como estuches comerciales, permiten descartar rpidamente
la presencia de las toxinas antes mencionadas en la muestra analizada, teniendo gran receptividad en el mercado como
alternativa a la metodologa tradicional, que resulta mucho ms lenta y laboriosa. La finalidad de este trabajo fue
comparar el desempeo de dos inmunoensayos enzimticos comerciales para la deteccin de enterotoxinas estafiloccicas,
SET Total Ridascreen de R-Biopharm, y SET VIA TecraTM de 3MTM. (125) Metodologa: Se plante una metodologa
de cuatro fases: 1) Seleccin de aislados y cepas enterotoxignicas de Staphylococcus aureus; 2) Aptitud de alimentos
(productos riesgo y/o de inters para la empresa) como matrices de crecimiento para dichos aislados y cepas,
determinndose en cada caso el nivel de inculo necesario para alcanzar un recuento de 10 6 clulas por gramo o mililitro
de matriz luego de 48h,
3) Seleccin del mtodo de contaminacin artificial ms adecuado para la deteccin de toxinas utilizando los sistemas
disponibles y 4) Comparacin entre dichos sistemas a partir de la estimacin de algunos de sus parmetros de desempeo
en cultivos puros y sus diluciones, y en alimentos artificialmente inoculados con la bacteria. (113). Resultados: Ambos
mtodos funcionan mejor en cultivos puros, ya que los alimentos parecen causar interferencias conducentes a falsos
negativos, que son ms evidentes en SET VIA TecraTM. Este ltimo present adems menor lmite de deteccin relativo,
lo que unido a sus problemas de especificidad permite concluir que SET Total Ridascreen es ms confiable para la
deteccin presuntiva de enterotoxinas estafiloccicas. (59)

Palabras clave: deteccin, enterotoxinas, cultivos puros, alimentos

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Comparacin del desempeo de 4 mtodos rpidos vs mtodo tradicional para la
deteccin de Salmonella en alimentos
Performance comparison of 4 rapid methods vs traditional culture method for the detection of
Salmonella in foods

Blasco Patriciaa, Gmez Patricia M.a y De Oliveira Lauraa

a
Gerencia de Investigacin y Soporte Analtico, Empresas Polar

Introduccin: La Salmonelosis es una de las causas ms comunes de intoxicacin alimentaria el mundo, de ah la

importancia que reviste su deteccin para la industria de alimentos. Dado que la metodologa tradicional arroja resultados
en 5 das, se han desarrollado mtodos rpidos alternativos, cuyo desempeo debe verificarse en la matriz alimenticia de
inters, antes de ser aplicados como mtodos de rutina. Este estudio compar el desempeo de 4 mtodos rpidos de
determinacin de Salmonella: 1-2 Test Salmonella de Biocontrol, Vidas Easy SLM de Biomerieux, Singlepath
Salmonella de Merck y Salmonella Precis de Oxoid, tomando como estndar la metodologa oficial venezolana
COVENIN 1291:2004. Metodologa: Se analizaron 35 matrices, principalmente materias primas para la elaboracin de
alimentos para animales y se incluyeron 120 muestras artificialmente contaminadas con Salmonella anatum y otras
enterobacterias. La equivalencia con el mtodo tradicional se evalu estadsticamente a travs del Test Chi Cuadrado de
Mc Nemar y se calcul la sensibilidad, especificidad y exactitud relativa como indicadores de desempeo. Resultados: En
los alimentos artificialmente inoculados, los mtodos 1-2 Test, Singlepath y Vidas Easy SLM resultaron
equivalentes a la metodologa tradicional (p<0,05) y mostraron porcentajes de exactitud mayores al 95%. Sin embargo, en
el caso de las matrices sin inculos artificiales, se observ que slo el mtodo Vidas Easy SLM demostr su
equivalencia con a la metodologa tradicional y una exactitud del 100%. Conclusiones: Entre los 4 mtodos rpidos
evaluados, el VIDAS Easy SLM es quien obtuvo el mejor desempeo, tanto para muestras artificialmente inoculadas
como para matrices de alimentos sin inculos artificiales, obteniendo valores de 100% en los indicadores de exactitud,
sensibilidad y especificidad relativa en todos los casos.

Palabras clave: mtodos rpidos, deteccin, Salmonella, alimentos

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Expresin de protenas de membrana por Pseudomonas luteola en presencia de
antraceno o combustible diesel como nicas fuentes de carbono
Membrane protein expression by Pseudomonas luteola in the presence of anthracene or diesel fuel
as sole source of carbons

Ricoy Valeriaa, Velazco Leonardoa, Moreno Carlosa,b, Valbuena Oscara,b

a
Departamento de Biologa, Universidad de Carabobo; b Unidad de Biotecnologa Aplicada

*Correspondencia autor principal

Email:Valeria.ricoy.flores@gmail.com

Introduccin. Trabajos previos [9] con Pseudomonas luteola y

Para la incorporacin de nutrientes al interior celular
estos deben atravesar una barrera fsica constituida por
un sistema membranoso [1]. En bacterias Gram
negativas se presentan dos tipos de membranas, una
externa (ME) que provee una barrera selectiva ante el
medio ambiente y una interna (la membrana plasmtica,
MI) las cuales ofrecen proteccin a la clula y
mantienen el interior celular en un estado constante,
entre ambas se localiza el espacio periplsmico, [2]. En
las dos membranas se localizan transportadores
especficos para incorporar, al interior celular, los
nutrientes [1].
Debido a que la captacin de nutrientes es el primer
paso para la utilizacin de los mismos, las clulas
presentan una serie de mecanismos de transporte para
que estos puedan atravesar las membranas, impidiendo
a su vez el paso libre de una variedad de sustancias, lo
que les confiere una permeabilidad selectiva. Entre
estos mecanismos de transporte se encuentran: difusin
pasiva, difusin facilitada y transporte activo [2]. Las
molculas transportadoras pueden agruparse en:
porinas, canales y permeasas; las dos primeras
localizadas en la ME y la ltima en la MI [3].
La actividad degradativa de Hidrocarburos
Policclicos Aromticos (HPA) y alcanos por bacterias
se ha comprobado en varios gneros bacterianos, entre
ellos Pseudomonas [4-9] y tal actividad ha sido
asociada a transportadores ubicados en la ME [10].
Escherichia coli transformada con un plsmido de P.
luteola, dieron a conocer una protena de membrana de
70KDa (p70) involucrada en la captacin de alcanos
constituyentes del combustible diesel. Debido a que P.
luteola puede tambin metabolizar antraceno como
nica fuente de carbono, en sistemas in vitro [11], se
plantea estudiar si la protena p70 es tambin expresada
en presencia de antraceno.
Materiales y mtodos.
a) Cepa bacteriana: P. luteola fue suministrada por el
Laboratorio de Biotecnologa del Departamento de
Biologa, FACYT-UC, Venezuela - Carabobo.
b) Cultivos bacterianos: Las bacterias se crecieron en
dos medios: 1) Medio Mnimo Mineral (MMM 1)
constituido por CaCl2 1%, CuSO4 1%, FeSO4 7H2O
0.5%, MgSO4 1%, ZnSO47H2O 1%, NaCl 1%, y
(NH4)2SO4 1%, disueltos en un tampn fosfato (0,1M;
p.H:7.0) suplementado con combustible disel (1%
V/V) incubndose a 36C por 3 das (9); y 2) Medio
Mnimo Mineral (MMM 2) constituido por 1,2%
NH4Cl; 2,4% KNO3; 0,07% CaCl2 2H2O; 2,4%
Na2SO4; 2,04% MgSO4 7H2O; 0,65% K2HPO4 3H2O;
0,5% KH2PO4 3H2O; 1,2% FeSO4 7H2O y
suplementado con antraceno como nica fuente de
carbono (0,05% P/V) incubndose a 36C con agitacin
constante de 100rpm por 10 das [11] Ambos medios
tienen un volumen total de 1L.

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c) Fraccionamiento Celular: alcuotas de cultivos evidenciar cuando la cepa bacteriana fue cultivada en
bacterianos previamente crecidos en combustible diesel presencia de antraceno o combustible diesel (Figura 2).
o antraceno se centrifugaron durante 30 min. a 20000g.
Se elimin el sobrenadante libre de bacterias (SLB) y se
resuspendi el sedimento (clulas) en tampn de lisis
(NaCl 500mM, Tris HCl 20mM, 2-mercaptoetano 1mM
Imidazol l, 5mM, Tritn X-100 0,1% v/v y EDTA
0,1M pH 8), se sonicaron las muestras por tres ciclos
de 45 segundos cada uno (con un poder igual a 7) con
enfriamiento de 15 segundos (Ultrasonic Cell Disrupter
VirSonic 100- VirTis). Luego, se centrifug a 4700g
durante 15 min. El sobrenadante correspondiente a la
fraccin citoplasmtica, FC, y el sedimento, fraccin
membranosa, FM, (9) se almacenaron a 4C hasta su
posterior uso en presencia de EDTA 0,05mM. Figura 1: Perfil polipeptdico de las fracciones de
d) Anlisis Electrofortico de Protenas: las fracciones membrana (FM) y de citoplasma (FC) de P. luteola
crecida en caldo nutritivo, comparadas con un Marcador
FC y FM aisladas anteriormente se sometieron a de Peso Molecular (MPM) de 10-250KDa de BIO-
anlisis utilizando la tcnica de SDS-PAGE, con el gel RAD.
separador al 10% acrilamida/bisacrilamida, la corrida
electrofortica se realiz con un campo elctrico de 100
voltios. El revelado del gel se realiz con Coomassie
Blue R-250 0,123%.
e) Expresin de la p70 respecto al tiempo de cultivo y
70 KD
fuente de carbono: alcuotas de los cultivos bacterianos
establecidos en la seccin b se retiraron a las 0, 1, 2, 3,
4, 5, 6, 7 y 8 horas (Cultivo MMM 1 D 1% v/v) y a 0,
24, 36, 48, 72 horas (Cultivo MMM 2 A 0,05% p/v).
Posteriormente, las alcuotas se fraccionaron de acuerdo
a lo establecido en la seccin c y analizados por SDS-
PAGE segn lo descrito previamente.

Figura 2: Perfil polipeptdico de las fracciones de

Resultados y discusin.
Las Figuras 1 y 2 muestran el perfil polipeptdico
electrofortico de los extractos de P. luteola cultivada
en caldo nutritivo y medio suplementado con diesel o
antraceno respectivamente. En caldo nutritivo (Figura
membrana (FM) y de citoplasma (FC) de P. luteola
crecida en MMM 1 con diesel y MMM 2 con antraceno,
comparadas con un Marcador de Peso Molecular
(MPM) de 10-250KDa de BIO-RAD.
En bacterias se ha demostrado que un conjunto de

1) en ambas fracciones no se observ la banda genes solo se expresan si el medio de cultivo suministra

correspondiente a la zona de 70KDa, la cual se pudo un determinado grupo de molculas, es decir, son genes
inducibles [12,13]. Tal es la situacin descrita

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anteriormente siendo las sustancias inductoras el
combustible diesel o el antraceno y el producto
inducible la protena p70. Ha sido demostrado [9] que la
p70 expresada por P. luteola participa en la
incorporacin de la fraccin de alcanos del combustible
diesel, y su funcin probablemente sea la de actuar
como un canal proteico localizado en la membrana
externa de la bacteria. En los experimentos reportados
se evidenci la presencia del polipptido p70 cuando se
utiliz antraceno como nica fuente de carbono (Figura
2). Este resultado podra indicar que la protena p70
constituye un canal proteico que permite
incorporacin de molculas hidrofbicas, tipo
hidrocarburo, indistintamente de la estructura qumica
de la molcula; los alcanos son molculas carbonadas
lineales, mientras el antraceno es una molcula
policclica, siendo ambas insolubles en agua pero
solubles en solventes orgnicos.
En los extractos proteicos de P. luteola cultivada en
presencia de antraceno como nica fuente de carbono
(Figura 3) se evidenci la expresin de la protena p70
despus de transcurridas 24 horas de exposicin al
substrato;
Figura 3: Perfil polipeptdico de las fracciones de
membrana (FM) y de citoplasma (FC) de P. luteola
crecida MMM 2 con antraceno a las 0 y 24 horas,
comparadas con un Marcador de Peso Molecular
(MPM) de 10-250KDa de BIO-RAD..
Lo cual indica que el proceso de activacin del gen
codificante de p70 inducida por antraceno toma lugar en
un lapso de tiempo cercano a las 24h, el cual es mucho
mayor al determinado en P. luteola cuando el
combustible diesel es el agente inductor, el cual es de
aproximadamente 2h (datos no mostrados). En modelos
predictivos se ha establecido que la fase de latencia,
perodo en el cual las clulas trabajan activamente
adaptando el equipo enzimtico al medio de cultivo,
toma lugar durante la fase de crecimiento, lo cual
depender de la disponibilidad de nutrientes y del
la substrato [15]. De tal manera se puede decir que la
aparicin de la protena p70 durante las 2 primeras
horas de crecimiento en presencia de combustible diesel
y a las 24 horas en presencia de antraceno concuerda
con el tiempo de duracin de la fase respectiva de
crecimiento (4 y 10 das respectivamente) en los
cultivos de P. luteola.
Conclusin.
En conjunto los datos tienden a indicar que la
incorporacin de material hidrofbico al interior celular
de P. luteola ocurre a travs de un canal proteico que si
bien puede ser especfico para hidrocarburos no tiene
propiedades discriminatorias respecto al hidrocarburo a
ser incorporado.
Palabras clave: membrana externa, Pseudomonas,
antraceno.
Referencias:
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molecules traverse the outer membranes of Gram-
negative bacteria. PNAS. 2011; 108(27):10929-
10930.
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4. Kanaly R, Harayama S. Biodegradation of high- 10. Van Den Berg B. Going forward laterally:
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ENTOMOLOGA

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Aedes aegypti en un cementerio de Ciudad Bolvar, estado Bolvar, Venezuela
Aedes aegypti in a cemmetery of Ciudad Bolvar, Bolvar state, Venezuela

Devera Rodolfo, Devera Zahory, Velsquez Virma

Departamento de Parasitologa y Microbiologa, Escuela de Ciencias de la Salud, Universidad de Oriente,
Ncleo Bolvar, Ciudad Bolvar, Estado Bolvar, Venezuela.

Introduccin. Aedes aegypti es el vector primario de Dengue en Amrica y en el ambiente urbano donde habita, los
cementerios pudieran llenar los requerimientos como criaderos principales debido a la presencia de numerosos tipos de
contenedores que sirven como floreros. En febrero de 2013 se realiz un estudio trasversal en el cementerio Jobo Liso
de Ciudad Bolvar, estado Bolvar, para determinar la presencia de A. aegypti y otros culicidios en recipientes empleados
como floreros. Material y mtodos. De los 4 cementerios de Ciudad Bolvar fue seleccionado Jobo Liso por su fcil
acceso y amplitud. El cementerio se dividi en cuatro cuadrantes, realizndose la bsqueda de estadios inmaduros,
examinando todas las tumbas de esos cuadrantes en busca de floreros con agua. Resultados y discusin. Se revisaron 120
recipientes con agua en 77 tumbas. Un total de 7 recipientes (5,8%) y 7 tumbas resultaron positivos (9,1%). Con relacin
al tipo de recipiente empleado como floreros el ms comn fue el envase plstico de refrescos cortado a la mitad. Cinco de
ellos estaban con estadios inmaduros (larvas y/o pupas) de culicidios. Seis de los 7 recipientes positivos tenan A. aegypti
(ndice de recipiente: 5%). De estos 6 recipientes con Aedes, 4 eran de material plstico, 1 de vidrio y 1 de granito. Dos de
los recipientes (plstico y granito) positivos presentaron larvas de Culex spp. (28,6%). En un mismo envase (florero de
granito) se encontraron simultneamente A. aegypti y Culex spp. Se recolectaron 145 ejemplares, 97 (66,9%) eran larvas o
pupas de A. aegypti y 48 (33,1%) larvas de Culex spp. Conclusiones. Se encontraron estadios inmaduros (larvas y pupas)
de los culicidios A. aegypti y Culex spp. en floreros del cementerio Jobo Liso de Ciudad Bolvar; sin embargo, el ndice
de infestacin de los recipientes por A. aegypti fue bajo (5%). Es difcil explicar las razones para esta baja prevalencia
sabiendo que en otros cementerios de Venezuela y Amrica Latina se han encontrado prevalencias mayores, sin embargo,
este porcentaje no es despreciable y representa un posible riesgo para transmisin del Dengue en el cementerio estudiado.

Palabras clave: Dengue, Aedes aegypti, cementerios, floreros.

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Una Nueva Alternativa en la Dieta Alimentaria para la Cra Bajo Condiciones de
Laboratorio de los Estados Inmaduros de Aedes aegypti, Principal Vector del Dengue
A New Alternative in food diet for Breeding of of Immature Stages of Aedes aegypti, vector of
Dengue under Laboratory conditions

Cordero Sanguino Adriana Mileydia, Acua Gonzlez Lourdes J.a , Hurtado Maca Silviaa
a
Instituto Venezolano de Investigaciones Cientficas (IVIC)

Introduccin: En la fase larval de Aedes aegypti es importante y fundamental el consumo de nutrientes para el desarrollo
evolutivo de sus estados (pupa y adulto). El objetivo del trabajo fue comparar tres dietas alimentarias, evaluar su efecto
durante el desarrollo de estadios inmaduros de Aedes aegypti y observar el efecto de sustituir el alimento control, (BATP
Biscocho de perro, harina de Avena, de Trigo y de Pan) consumido rutinariamente en el laboratorio. Las dietas evaluadas
fueron: comida para gallinas ponedoras (ponarina), comida para perros (perrarina) y comida para gatos (Gatarina), los
cuales poseen los mismos nutrientes que el BATP pero en diferentes concentraciones. Metodologa: El ensayo se realiz
en la Unidad Insectario del IVIC, que mantiene colonias cerradas del mosquito bajo condiciones controladas de:
temperatura a 27 C, (+/-1), humedad relativa de 60% y un foto-perodo de 12 horas luz/oscuridad. Una muestra de 320
larvas L1 repartidas en 80 por cada bandejas/ensayo (tres dietas y el control), fueron colocadas en un (1) litro de agua
declorada y reposada e identificadas. Se alimentaron diariamente con cada dieta. Resultados y discusin: En las bandejas
con alimento control y Gatarina, la duracin en sus estados inmaduros registr un tiempo de desarrollo de 13 das,
representando el desarrollo ms corto. La poblacin de inmaduros de la dieta Gatarina fue la primera en alcanzar el
estadio pupal y adultos. Igualmente se evidenci de manera cualitativa un tamao significativamente mayor de las larvas
en sus diferentes estados en comparacin con el crecimiento en las otras bandejas. Conclusiones: La dieta con mejores
resultados, menor tiempo de duracin por estado, rpida emergencia de adultos, mayor tamao en cada fase fue la
Gatarina, debido a su aporte nutricional con respecto a las otras dietas. Presentndose como una nueva alternativa de
alimentacin para estados inmaduros de Aedes aegypti.

Palabras clave: Aedes aegypti, fase larval, dietas alimentarias

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INMUNOLOGA

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Niveles de PDGF y VEGF en el Plasma Rico en Plaquetas antes y despus de
antiagregantes plaquetarios
PDGF and VEGF levels in platelet-rich plasma before and after antiplatelets drugs

Maczy Gonzleza, Melvis Arteaga-Vizcanob, Ana Ruizc, Olga Briceoc, Maribel Quintero c,
Ricardo Atencio b y Richard Floresc
a
Jefe Ctedra de Hematologa, Facultad de Medicina, Universidad del Zulia, Venezuela.
b
Instituto de Investigaciones Clnicas, Facultad de Medicina, Universidad del Zulia, Venezuela.
c
Ctedra de Hematologa, Facultad de Medicina, Universidad del Zulia, Venezuela. d Prctica Profesional de
Hematologa, Facultad de Medicina, Universidad del Zulia, Venezuela

Introduccin: El Factor de crecimiento derivado de las plaquetas (PDGF) y el Factor de crecimiento vasculo endotelial
(VEGF) son dos de los mitgenos ms potentes para el tejido conectivo, adems de gran actividad angiognica en el caso
del VEGF, su secrecin parece ser particularmente importante cuando la fuente es el Plasma Rico en Plaquetas (PRP), de
all el rol protagnico de este ultimo en la regeneracin tisular. La presente investigacin planteo como objetivo
determinar los niveles de PDGFBB (Isoforma BB del PDGF) y VEGF en el PRP, Plasma Pobre en Plaquetas (PPP) y
Exudado (suero producto de la activacin con calcio del PRP). Metodologa: Se analizaron las muestras de PPP, PRP y
Exudado obtenido de acuerdo a la tcnica de Anitua provenientes de 32 sujetos sanos antes y 24 horas despus de ingerir
AAS (Aspirina) y Clopidogrel, para ambos factores de crecimiento mediante ELISA. Resultados: Los niveles basales de
PDGFBB fueron de 10,6 1,9 ng/ml (PPP), 12,122,5 ng/ml (PRP) y 10,841,68 ng/ml (Exudado).Mientras que despus
del tratamiento con AAS las concentraciones de PDGFBB estuvieron en 8,961,4 ng/ml (PPP), 11,361,48ng/ml (PRP),
11,111,14ng/ml (Exudado) y para el Clopidogrel fueron de 8,530,59 ng/ml (PPP), 9,651,17 ng/ml (PRP) y 8,510,75
ng/ml (Exudado). Los valores basales del VEGF fueron de 973,9 590,3 pg/ml (PPP), 1184,2 288,4 pg/ml (PRP),
1069,3 192,3 pg/ml (Exudado). Luego del tratamiento con AAS los valores de VEGF estuvieron en 1439,5 117,4
pg/ml (PPP), 1802,3 123,9 pg/ml (PRP), 1745,6 171,6 pg/ml (Exudado) y para el Clopidogrel fueron 577,8 150,6
pg/ml (PPP), 668,7 100,6 pg/ml (PRP), 624,9 106,7 pg/ml (Exudado). Conclusiones: Se not que luego de la
administracin de los frmacos antiagregantes los valores de PDGFBB y VEGF disminuyeron de manera estadsticamente
significativa, en especial para el grupo del Clopidogrel. El AAS pareci afectar en menor grado las concentraciones de
ambos factores, lo cual puede ser atribuible al mecanismo de accin farmacolgica de estos antiagregantes.

Palabras clave: PRP, PDGF, VEGF, Aspirina, Clopidogrel

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Deteccin por hibridacin in situ cromognica de alteraciones cromosmicas durante
la infeccin con el VPH en casos de cncer del canal anal
Detection by in situ hybridization chromogenic of chromosomal alterations during infection with
HPV in cases of anal canal cancer

*Sweden Loaizaa, Santi Quinteroa, Julia Molina Barriosa, Asmiria Arenas de Sotolongo b,
Annee Rincn Fernndeza, Eduardo Blasco Olaetxeac y Jorge Garca Tamayo a.
a
Laboratorio de Patologa Molecular, Maracaibo, Venezuela; bUniversidad de Los Andes, Mrida, Venezuela;
c
Instituto Canario de Investigacin sobre el Cncer, Fuerteventura, Islas Canarias
swedenloaiza7@gmail.com

Introduccin. tcnicas de biologa molecular para actualizar algunos

El Cncer anal, aunque es poco comn aument
progresivamente durante aos. En los Estados Unidos a
comienzos de la dcada de los aos noventa del pasado
siglo XX era ms frecuente en mujeres que en hombres,
en personas de raza negra que en los caucsicos y en los
habitantes de las ciudades ms que en los de reas
rurales [1].
En las mujeres el cncer del canal anal est asociado
al uso del cigarrillo y a prcticas sexuales [2], en tanto
que en los hombres los tumores se detectaron
primariamente en las zonas perianales. La causa del
cncer del canal anal sabemos hoy da que es la
infeccin con el virus del papiloma humano (VPH) [3],
el riesgo de padecer cncer del ano ha aumentado y el
coito anal est estrechamente relacionada con el
desarrollo del mismo [4].
El VPH de alto riesgo tipo 16 se ha descrito en la
neoplasia intraepitelial anal (NIA) y en el cncer
invasivo del canal anal [5], y hay una clara relacin
entre el VPH de alto riesgo, la NIA de alto grado y el
carcinoma escamoso de la regin anal [6], el cual se ha
relacionado directamente con los hbitos sexuales, en
particular entre homosexuales y hombres infectados con
el VIH [7]. Estudios sobre la relacin entre el VPH y el
carcinoma escamoso de la regin anal, han asociado al
VPH 16 en ms del 80% de este tipo de neoplasia [6].
Analizamos biopsias de 15 mujeres con diagnstico
de NIA y de cncer del canal anal utilizando diversas
aspectos sobre esta neoplasia.
Materiales y mtodos.
Se utilizaron sondas biotiniladas de ADN especficas
para VPH, WS: (de amplio espectro: Wide Spectrum
HPV Biotinylated DNA Probe-Cdigo Y1404 de
DAKO) que comprende los virus tipo 6, 11, 16, 18, 31,
33, 35, 45, 51 y 52; y AR: (de alto riesgo: The
GenPoint HPV Probe-Cdigo Y1443 de DAKO) con
los virus tipo 16,18, 31,33,35,39, 45, 51, 52, 56, 58, 59
y 68. Las seales de la Biotina fueron demostradas con
el complejo primario de estreptavidina-peroxidasa,
tiamina-biotinilada y secundariamente estreptavidina-
peroxidasa (Sistema GenPoint para amplificacin de la
seal (DAKO).
Para el estudio de hibridacin cromognica se
seleccionaron seis (6) casos de NIA y de cncer del
canal anal. Las muestras fijadas en formol tamponado al
10%, fueron deshidratadas en alcoholes y se incluyeron
en parafina. Se examinaron histolgicamente los casos
y se seleccionaron varios casos para su estudio (estos se
sealan en cada uno de los casos examinados). En un
micrtomo de rotacin, se realizaron cortes de los
bloques de parafina para practicar en ellos la tcnica de
Hibridacin Genmica Comparada (HGC) utilizando
sondas centromricas para los cromosomas 3, 17 y 18.
El procedimiento de hibridacin in situ cromognica
(HiSC) se realiz en los cortes de dos micras de

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espesor, colocados en una solucin recuperadora Resmenes de casos:
precalentada a 98C durante 40 minutos. Despus de 1. 76-2005 Paciente femenina de 66 aos con tumor del
lavarlos con agua desionizada se hizo una digestin recto. Diagnstico: Carcinoma epidermoide poco
breve con Proteinasa K 1/8.000. Los cortes en el agua diferenciado infiltrante.
desionizada fueron deshidratados con etanol, y se 2. 3714-2003 Paciente femenina de 66 aos con lesin
secaron al aire. Se aplicaron 15 microlitros de las condilomatosa y pruriginosa anal. Diagnstico:
sondas centromricas correspondientes a los Carcinoma in situ/displasia severa.
cromosomas 3, 17 y 18 (Zymed SP.T-Light ) y se 3. 4055-2003 Paciente femenina de 64 aos con lesin
colocaron en un hibridizador durante 5 minutos a 95C tumoral en el canal anal. Diagnstico: Carcinoma
para su desnaturalizacin. El proceso de hibridacin se escamoso bien diferenciado.
realiz durante 14 horas. Los cortes se lavaron con PBS 4. 4217-2002 Paciente femenina de 82 aos con tumor
y se bloque la peroxidasa endgena con H2O2- en el ano. Diagnstico: Carcinoma escamoso
metanol. Tras un nuevo lavado, se hizo un bloqueo de moderadamente diferenciado con reas basaloides.
TM
protenas (CAS-LOCK ) por 10 minutos y la 5. 5637-2000 Paciente femenina de 64 aos con lesin
inmunodeteccin se hizo con un polmero de en la mucosa anal. Diagnstico: Carcinoma escamoso
estreptavidina por 30 min. Los cortes fueron lavados bien diferenciado.
nuevamente, se colocaron en DAB por 30min, se 6. 6709-2004 Paciente femenina de 67 aos con lesin
lavaron con agua, se deshidrataron en alcoholes se polipoide vellosa en ano recto. Diagnstico: Carcinoma
contrastaron con hematoxilina, y fueron deshidratados y escamoso poco diferenciado con extensa necrosis.
montados con medio de montaje. 7. 74-2005 Paciente femenina de 69 aos. Con lesin
En todos los casos en el material ya incluido en de la regin perianal. Diagnstico: Carcinoma
parafina, se hicieron cortes de dos a tres micras de epidermoide del canal anal, moderadamente
espesor en un microtomo de rotacin los cuales fueron diferenciado, infiltrante.
teidos con hematoxilina y eosina y examinados con un 8. 1345-2007 Paciente femenina de 64 aos con tumor
microscopio de luz. En algunos casos, antes del estudio en recto bajo. Diagnstico: Carcinoma escamoso in situ.
inmunohistoqumico, se realiz la coloracin de PAS 9. 1551-2006 Paciente femenina de 70 aos con tumor
con el reactivo de Schiff usando la digestin con del canal anal resecado mediante abdmino-perineal de
diastasa para la deteccin del glicgeno. Los cortes de recto posterior a radioterapia y quimioterapia.
dos a cuatro micras hechos en el micrtomo rotatorio Diagnstico: Carcinoma escamoso moderadamente
fueron recogidos en lminas sialinizadas o recubiertas diferenciado con extensa necrosis
con poli-l-lisina, previo bloqueo de la peroxidasa 10. 6396-2000 Paciente femenina de 74 aos con
endgena con perxido de hidrgeno-metanol. Se tumor anal pruriginoso. Diagnstico: Carcinoma
utiliz para la recuperacin antignica una solucin de escamoso bien diferenciado de tipo basaloide.
citrato de sodio a pH 6, o de EDTA a pH 9, en una olla 11. 651-2006 Paciente femenina de 61 aos con tumor
de presin dentro de un horno de microondas para en la regin anal. Diagnstico: Carcinoma del canal
elevar la temperatura a 100C durante varios minutos. anal basaloide.
Se us como cmara hmeda, un sistema de capilaridad 12. 069-2010 Paciente femenina de 69 aos con lesin
de Shandon y los anticuerpos usados fueron de DAKO a tumoral pigmentada del canal anal. Diagnstico:
las diluciones correspondientes. Carcinoma del canal anal.

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13. 684-2010 Paciente femenina de 52 aos con tumor
del canal anal. Diagnstico: Carcinoma del canal anal.
14. 1370-2010 Paciente femenina de 84 aos con tumor
en canal anal. Diagnstico: Carcinoma neuroendocrino
del canal anal.
15. 736-2011 Paciente femenina de 52 aos con tumor
en canal anal. Diagnstico: Carcinoma del canal anal.
Resultados.
El presente estudio se ha realizado en 15 pacientes
de sexo femenino utilizando la hibridacin in situ como
mtodo para detectar diversos tipos de VPH. Todas las
pacientes fueron negativas al VIH. No conocemos
referencias sobre alteraciones del examen ginecolgico.
Para su estudio histolgico, las lesiones anales fueron
divididas entre las que se originan en el canal anal y las
que se originan en el margen anal o piel perianal. El
canal anal se divide en tres zonas que se hallan
tapizadas por distintos tipos de mucosa; la regin
superior es llamada zona colorectal y est recubierta por
mucosa del tipo colorectal; la zona intermedia es
denominada zona transicional anal (Z T A), suele
extenderse unos 10 mms., por encima de la lnea
pectnea y suele estar tapizada por epitelio transicional
anal, pero tambin pueden estar presentes islotes de
epitelio colorectal y escamoso. Por debajo de la lnea
pectnea se halla la zona escamosa tapizada por epitelio
escamoso que empieza a queratinizarse en la apertura
anal y a continuacin se halla la piel perianal que
contiene pelos y glndulas sebceas, ecrinas y
apocrinas.
Estudiamos la presencia de infeccin con el virus
del papiloma humano (VPH) en 15 casos de mujeres
con diagnstico histolgico de cncer del canal anal. El
VPH fue examinado por hibridacin in situ, en todos los
casos demostr ser positivo para WS y para AR. Le
dimos especial atencin a las caractersticas del marcaje
observado entre las dos sondas especficas WS y AR
(DAKO), de modo que las seales de la biotina se
demostraron con el complejo primario de
estreptavidina-peroxidasa,tiamina-biotinilada y
secundariamente estreptavidina-peroxidasa. Todos los
casos con presencia de VPH-AR, se examinaron
nuevamente para la deteccin de VPH 16, 18 y 31-33.
La distribucin del marcaje en las clulas de los
distintos estratos del epitelio se estudi en base a la
apariencia histolgica, el grado de la neoplasia
intraepitelial anal (NIA) presente y de las caractersticas
invasivas de los carcinomas (figura 1). Todos los casos
examinados para VPH de Amplio espectro (WS) y de
Alto riesgo (AR) resultaron todos positivos para ambas
sondas. Se examinaron los virus 16, 18 y 31-33, en
casos seleccionados (1, 3, 4, 6, 9 y 11) y todos
mostraron positividad para VPH 16 y 31-33. Dos casos
(1 y 9) mostraron solamente VPH 18. En uno de los
casos de carcinoma (caso 11) se observ presencia de
inmunomarcaje para ambos virus 16 y 18 (figura 2).
Las seis biopsias seleccionadas para estudiarlas
simultneamente con hibridacin in situ cromognica
con VPH y con Hibridacin Genmica Comparada
correspondieron a los casos 1, 3, 4, 5, 6, y 11. En los
casos 5 y 8 no se obtuvieron resultados satisfactorios
por problemas tcnicos. Se examinaron 4 casos (1, 4, 6,
y 11) con resultados satisfactorios utilizando las sondas
para los cromosomas 3, 17 y 18. Se detectaron
aneuploidas, ms evidentes para los cromosomas 3 y
17 (figura 3).
Figura 1. Cancer del canal anal (H&E)
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Figura 2. (WS) VPH de amplio espectro
Figura 3. Monosomas y trisomas del
cromosoma 17
Discusin.
Se ha sealado que los queratinocitos sometidos a
cambios en el microambiente de la interfase epitelio-
mesnquima, soportan influencias extracelulares que
conducen a modificaciones fenotpicas epiteliales y
como estos cambios se pueden correlacionar con las
etapas de transicin de la neoplasia intraepitelial
cervical [8]. Esas modificaciones fenotpicas se
traducen en fenmenos de proliferacin, de
comunicacin y de adherencia intercelular, que
morfolgicamente corresponden a los ya conocidos
cambios histolgicos de progresin en las lesiones
intraepiteliales [9]. Sabemos que el oncogn E6 del
VPH de alto riesgo est directamente implicado en la
carcinognesis cervical y una de las vas que utiliza es
promoviendo la degradacin de p53 [10], y que estas
alteraciones del gen P53 y otras modificaciones en
genes supresores inducen cambios en la heterocigosis
[11], los cuales provocarn las alteraciones
cromosmicas como las que ya hemos descrito
previamente en el cuello uterino [12].
En ms de un 30% de carcinomas epidermoides en
el rea de cabeza y cuello se ha podido demostrar
prdida de la heterocigosis, detectndose alteraciones
cromosmicas principalmente en 3p, 9p, 13q, 15q, y
17p lo cual parece indicar que locus de genes supresores
de tumores estn involucrados en el proceso de
carcinognesis [13]. Hemos propuesto que el anlisis de
la expresin del perfil gnico del epitelio cervical en la
infeccin por el VPH debe ofrecer claves para entender
mejor la evolucin y el pronstico del cncer del cuello
uterino [14].
La mayora de las personas con infeccin por VPH
del epitelio del canal anal, no evoluciona hacia el
cncer. Algunos estudios han sugerido que el desarrollo
de la neoplasia tiene que ver con virus de alto riesgo,
con infeccin con varios tipos de VPH y con los niveles
de clulas CD4 [7].
En este sentido nuestros casos de NIA y de cncer
del canal anal en mujeres han demostrado inicialmente
que el VPH 16 es el tipo viral ms frecuente y la
asociacin de VPH 16 y 18 la observamos en menor
proporcin. Solo dos casos mostraron VPH 18. Vimos
con frecuencia presencia simultnea de VPH 16 y VPH
31-33, as como un caso negativo para VPH 16 y 18 con
positividad solamente para VPH 31-33.
Como se ha descrito, la infeccin con VPH de alto
riesgo, as como el cigarrillo, relaciones sexuales y la
existencia de varias parejas sexuales, son todos
importantes factores que inciden en la aparicin del
cncer del canal anal [15].
Conclusiones.
Demostramos la existencia de la infeccin con VPH
de alto riesgo y la presencia de varios tipos de VPH en
los casos de NIA y de cncer del canal anal en mujeres.
En este trabajo, sealamos hallazgos similares en la
NIA y el cncer del canal anal y estamos sugiriendo
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X Congreso Venezolano de Microbiologa Ada Martnez de Gallardo
como cambios en determinados genes pueden inferirse and survival: the surveillance, epidemiology, and
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 Revista de la Sociedad Venezolana de Microbiologa 2013; 33: suplemento 1
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X Congreso Venezolano de Microbiologa Ada Martnez de Gallardo
Participacin de los sistemas de secrecin tipo VII (SST7/ESX) de Mycobacterium
smegmatis en la supervivencia extendida en macrfagos mediada por el sistema de
secrecin ESX-3 de M. tuberculosis
Involvement of Type VII Secretion Systems from M. smegmatis in Its Increased Survival in Murine
Macrophages mediated by the M. tuberculosis ESX-3 Secretion System

Contreras Whendy, Querales-Leal Luis, Lpez Gustavo, Takiff Howard.

Laboratorio de Gentica Molecular, Centro de Microbiologa y Biologa Celular,
Instituto Venezolano de Investigaciones Cientficas, Caracas, Venezuela.

Introduccin: Mycobacterium tuberculosis es el agente causal de la tuberculosis. En los ltimos aos se han estudiado
los sistemas de secrecin tipo siete (SST7) que participan en mecanismos fisiolgicos importantes y se asocian a la
virulencia de la bacteria. Por lo tanto, el estudio de los SST7 ayuda a comprender la interaccin patgeno-hospedador, y
representan un blanco promisorio para nuevas vacunas y drogas antituberculosas. M. tuberculosis posee cinco SST7
(ESX-1 al ESX-5). El sistema ESX-3, nico esencial para M. tuberculosis, participa en homeostasis de iones como hierro
y cinc. Adicionalmente, encontramos que unos genes de esx-3 de M. tuberculosis, clonados en un plsmido, aumentan la
supervivencia de M. smegmatis, una micobacteria no patgena, en macrfagos murinos. Sin embargo, estos genes no
codifican para una maquinaria de secrecin completa, lo que sugiere que algn SST7 de M. smegmatis actuara en
conjunto con los genes clonados del esx-3 de M. tuberculosis. Metodologa: Para determinar la participacin de los SST7
de M. smegmatis, se infectaron macrfagos J774.A1 con cepas de M. smegmatis mutantes en cada uno de sus SST7,
portadoras tambin del plsmido con los genes de esx-3 de M. tuberculosis que confieren la supervivencia extendida. Los
macrfagos infectados fueron lisados a 24 y 48h post-infeccin a fin de recuperar y cuantificar las micobacterias
sobrevivientes. Resultados: Se encontr que M. smegmatis mutante en esx-1 o esx-3 pierde el fenotipo de supervivencia
extendida, a diferencia de la mutante en esx-4. Conclusin: Los resultados sugieren que tanto ESX-1 como ESX-3 de M.
smegmatis pudieran participar en conjunto con las protenas codificadas por los genes del ESX-3 de M. tuberculosis para
extender la supervivencia en macrfagos. Este trabajo presenta una base para estudios futuros sobre las interacciones entre
los diferentes componentes de los ESX, los mecanismos de reconocimiento de los sustratos y su especificidad.

Palabras clave: tuberculosis, micobacterias, virulencia, sistemas de secrecin, macrfagos.

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 Revista de la Sociedad Venezolana de Microbiologa 2013; 33: suplemento 1
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X Congreso Venezolano de Microbiologa Ada Martnez de Gallardo
Enfermedad de Chagas: Asociacin de polimorfismos genticos de la regin
promotora del gen de la interleucina IL-10, con el desarrollo de patologa
Chagas disease: Association of polymorphisms in the promoter region of the gene for interleukin
IL-10, with the development of pathology.

Espinoza Mara, Briceo Luisa, Rodrguez EvaMaryb, Campos Yelitzaa y Mosca Waltera.
a
Instituto de Biomedicina. Universidad Centarl de Venezuela. b Centro de Investigacin en Salud Pblica
Jacinto Convit. Universidad Central de Venezuela

Introduccin: La miocardiopata chagsica (CDM) acontece en el 20-30% de los pacientes infectados crnicamente con
T cruzi. La etiopatogenia de la enfermedad podra ser ocasionada por mecanismos de hipersensibilidad tarda o
autoinmunes. Ambas propuestas tienen en comn la existencia de complicaciones en la regulacin inmune. Nuestro grupo
esta realizando un estudio de casos y controles, en una zona endmica del estado Lara, con el fin de determinar que
factores se asocian con la CDM. Existen mltiples evidencias que sustentan la relevancia de la interleucina-10(IL-10) y
los linfocitos T CD25+, en la regulacin inmune. Los niveles de produccin de IL-10 pueden estar limitados
genticamente por mutaciones en un nucletido (single nucleotide polimorphism), condicionando la proteccin o el
desarrollo de patologa. Los resultados que se presentan son un primer corte de los resultados obtenidos con una fraccin
de los pacientes diseados para el estudio de casos y controles. Objetivo. Estudiar la posible asociacin de los
polimorfismos de la regin promotora de la IL-10 -1082 y 592 y su posible accin protectora o patolgica.
Metodologa. Se estudiaron 518 sujetos, 241 seronegativos y 277 seropositivos a T. cruzi. Este ltimo grupo (evaluados
por ecocardiografa y electrocardiografa), se compararon 111 CDM (casos) y 110 controles seropositivos
(Asintomticos).La genotipificacin se realiz por la tcnica de RFLP. Resultados. Las frecuencias genotpicas para los
grupos controles (seronegativos y asintomticos) se encontraron en equilibrio de Hardy-Weinberg. Entre seronegativos y
seropositivos, no se encontr asociacin allicas, ni genotpicas de los polimorfismos evaluados, al igual que entre
seronegativos y casos. Para los 4 posibles modelos de herencia evaluados entre casos y controles seropositivos, se
encontr una asociacin significativa con la condicin de heterocigoto (AC, del -1082) y la presencia de dao miocrdico
(OR: 0,54; IC95%: 0,31-0,94). Conclusin: Se hall una asociacin protectora, correspondiente a una produccin
intermedia de IL-10. FONACIT 2000001530

Palabras clave: Palabras claves: Chagas, IL-10, Polimorfismo

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 Revista de la Sociedad Venezolana de Microbiologa 2013; 33: suplemento 1
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X Congreso Venezolano de Microbiologa Ada Martnez de Gallardo
Utilidad clnica de la procalcitonina, PCR (us) y dimero D como reactantes de fase
aguda en pacientes peditricos hospitalizados
Clinical utility of procalcitonin, CRP (us) and dimer D as acute phase reactants in pediatric
patients hospitalized

Amaya Ivn, Raucci Mara Luisa, Torres Luis

Dpto. Parasitologa y Microbiologa. Escuela de Ciencias de la Salud Dr. Francisco Battistini Casalta.
Universidad de Oriente, ncleo Bolvar

Introduccin: En la prctica diaria es importante establecer la distincin etiolgica entre la infecciones de origen vrico
de la bacteriana por ello el tiempo de respuesta de los estudios microbiolgicos, en general, limita la posibilidad de
establecer un diagnstico temprano y la mayora de los grupos de trabajo utilizan 2-3 reactantes de fase aguda junto con
los signos y sntomas del paciente para iniciar un tratamiento. El objetivo de esta investigacin fue valorar la utilidad
clnica de la Procalcitonina, PCR(us) y Dimero D como reactantes de fase aguda en pacientes peditricos diagnstico de
infecciones. Metodologa: Se seleccionaron un total de 142 pacientes peditricos que fueron hospitalizados bajo
diagnstico de cuadro infeccioso con sintomatologa febril, a los cuales se les realiz un seguimiento tanto clnico como
de laboratorio de rutina (hematolgicos y bioqumicos) y Procalcitonina, PCR(us) y Dimero D a fin de sealar las
variaciones de estos durante su periodo de hospitalizacin (2do y 4to. das) y en la convalecencia posthospitalaria (8vo
da). Resultados: Se encontraron elevacin de los reactantes de fase aguda proporcionales a la intensidad de los cuadros
infecciosos. Las mayores alteraciones se observaron en protena C reactiva hasta 90 UI/L en los pacientes al 2 da de
hospitalizacin al igual que el contaje leucocitario que en 66,9% (n=95) de los pacientes present elevaciones por encima
de los valores de referencia, tendiendo a disminuir y/o normalizarse hacia el 8vo da. En cuento a los nuevos reactantes,
las mayores alteraciones se observaron en los valores de procalcitonina al inicio del seguimiento disminuyendo
significativamente en los pacientes con evolucin hacia la resolucin del cuadro infeccioso. Este reactante alcanzo
mayores valores en pacientes diagnosticados con infecciones bacterianas, mientras que en las infecciones virales su
alteracin fue discreta. Conclusiones: La determinacin conjunta de los reactantes de fase aguda, tanto los tradicionales
como los nuevos marcadores, proveen al clnico de una conjunto de informacin que permite valorar ms eficientemente
los diferentes cuadros clnicos, as como, el diagnstico precoz y diferencial, seguimiento de evolucin y de la
verificacin de la efectividad de la teraputica empleada.

Palabras clave: Procalcitonina PCRus Reactantes de fase aguda Infecciones peditricas

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 Revista de la Sociedad Venezolana de Microbiologa 2013; 33: suplemento 1
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Diferentes asociaciones HLA clase II proveen una contribucin potencial en la
patognesis de las leucemias
Different HLA class II associations provide a potential contribution in pathogenesis of leukemias

Rivera Sergioa, Echeverra Miriama, Salcedo Pedroa, Mrquez Georginab, Carrillo Zuheyb,
Parra Yennisb, Pereira Naydaa , Farruco Atilioa, Cipriani Ana Maraa y lvarez Demon M.c
a
Universidad del Zulia, Maracaibo, Venezuela; b Banco de Sangre del Estado Zulia, Maracaibo, Venezuela
c
Universidad de Alcal de Henares Banco de Sangre del Estado Zulia, Laboratorio HLA e Inmunologa, final
de la Av. 20 diagonal a la Maternidad Castillo Plaza, Maracaibo 4001, Venezuela
e-mail:sergio.rivera54@hotmail.es

Introduccin: Mltiples mecanismos han sido propuestos para esclarecer la patognesis de las leucemias, incluidas las
asociaciones con diversos alelos HLA al origen del desarrollo de las mismas. La presente investigacin planteo como
objetivo evaluar en pacientes con Leucemia Linfoide Aguda (LLA), Leucemia Mieloide Crnica (LMC) e individuos
sanos en la poblacin mestiza de Venezuela, los alelos HLA clase II, a fin de determinar posibles asociaciones y sus
implicaciones en la patognesis de la enfermedad. Metodologa: Se estudiaron 48 pacientes con LMC y 47 pacientes con
LLA voluntarios adultos y nios (autorizados) se compararon con 48 individuos sanos voluntarios seleccionados nacidos
en Venezuela con al menos tres generaciones. Se realiz el estudio molecular PCR-SSP para determinar las frecuencias
alelicas HLA clase II incluyendo las regiones DRB1*, DQB1*, DPA1* y DPB1* comparando estadsticamente cada
grupo de pacientes con los controles calculando Riesgo Relativo, Frecuencia Etiolgica, Frecuencia Preventiva y Chi
cuadrado corregido utilizando el estadstico SPSS statitics 17,0. Resultados: Asociaciones positivas fueron observadas
entre los alelos DQB1*04, DPA1*01:06, *01:07 y *01:08 con LLA. Los alelos DQB1*05, DPA1 01:09,* 02:01, DPB1*
02:01 y *03:01 se asociaron negativamente con LLA. El DRB1*14 especialmente el subtipo DRB1*14:21 se asoci
positivamente y el DRB1*13 negativamente con LMC. Los alelos DPA1*01:03, *02:01 tambin resultaron asociados
positivamente con LMC. DQB1*02, DPA1*01:05,*01:09 se asociaron negativamente con LMC. Conclusiones: Lo
diferentes patrones de asociacin entre las LLA y LMC con HLA de clase II en mestizos venezolanos sugieren diferencias
sustanciales en la patogenia de ambas enfermedades. En pacientes con LLA consideramos que existe una falla en la
presentacin de antgenos por la ausencia de varios alelos DQB1* y *DPA1 considerados de proteccin en individuos
sanos. En LMC la patognesis estara asociada, con la asociacin positiva HLA-DRB1*14 previamente descrito, cuya
secuencia peptdica semeja algunas secuencias virales constituyndose probablemente en un blanco de ataque del sistema
inmunitario.

Palabras clave: LMC, LLA, asociacin HLA clase II y leucemia

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Supervivencia extendida de Mycobacterium smegmatis en macrfagos mediada por el
Sistema de Secrecin ESX-3 y la protena PE_PGRS4 de Mycobacterium tuberculosis
ESX-3 and PE_PGRS4 from M. tuberculosis Increase the Intramacrophage survival of M.
smegmatis

Querales-Leal Luis, Lpez Gustavo, Contreras Whendy y Takiff Howard.

Laboratorio de Gentica Molecular, Centro de Microbiologa y Biologa Celular, Instituto Venezolano de
Investigaciones Cientficas, Caracas, Venezuela

Introduccin: La tuberculosis es la segunda enfermedad infecciosa ms letal, en el 2010 las muertes por tuberculosis
alcanzaron los 1,4 millones. El auge de la resistencia a antibiticos, la proteccin ineficaz brindada por la vacuna BCG y
la co-infeccin con el VIH agrava la situacin, lo que hace necesario el desarrollo de nuevas estrategias que permitan
combatir la tuberculosis. Los factores de virulencia son blancos atractivos para el desarrollo de nuevas drogas o vacunas.
La supervivencia en macrfagos es un factor clave en la virulencia de M. tuberculosis (Mtb), por lo que el objetivo de este
trabajo fue analizar una librera genmica de Mtb en busca de genes que aumentan la supervivencia de la micobacteria
avirulenta M. smegmatis (Msm) en macrfagos de la lnea J774.A1. Metodologa: Mediante la infeccin de sta lnea
celular se evalu la supervivencia de un clon de Msm portador del csmido pCEF que contiene 21 kb del ADN de Mtb e
incluye slo los 3 primeros genes del sistema de secrecin ESX-3, junto a 3 genes de la familia pe/ppe (pe_pgrs3,
pe_pgrs4 y ppe3). Las protenas de la familia PE/PPE suelen ser sustratos de los sistemas de secrecin ESX por lo que se
realizaron otros ensayos de supervivencia en macrfagos con el propsito de determinar la participacin de cada uno de
los genes pe/ppe de pCEF en el aumento de la supervivencia de Msm en macrfagos. Resultados y conclusin: A travs
del conteo de bacterias viables supervivientes se encontr que el clon de Msm que portaba genes del ESX-3 truncado junto
con el gen pe-pgrs4 de Mtb aumenta la supervivencia de Msm en macrfagos, lo cual sugiere que el sistema ESX-3
truncado de Mtb es necesario para la secrecin PE_PGRS4, posible sustrato efector que incrementara la supervivencia en
los macrfagos por un mecanismo an desconocido.

Palabras clave: tuberculosis, micobacterias, virulencia, sistemas de secrecin, macrfagos, PE/PPE

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 Revista de la Sociedad Venezolana de Microbiologa 2013; 33: suplemento 1
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EPIDEMIOLOGA

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Seroprevalencia de la infeccin por Trypanosoma cruzi e infestacin ambiental por
triatomnos transmisores de la enfermedad de Chagas en poblaciones rurales del
estado sucre, Venezuela
Seroprevalence of Trypanosoma cruzi infection and infestation by triatomine environmental
transmitters of Chagas disease in rural Sucre state, Venezuela

Garca Jordn Norisa,b, Berrizbeitia Mariolgab,c, Figueroa Milagrosb,d, Seijas Nairobisd,

Rodrguez Jessiccaa,d, Aldana Elise y Concepcin Juanf.
a
Departamento de Biologa. Universidad de Oriente. Ncleo de Sucre.; b Postgrado en Biologa Aplicada.
Universidad de Oriente. Ncleo de Sucre; c Instituto de Investigaciones en Biomedicina y Ciencias Aplicadas.
Universidad de Oriente; d Departamento de Bioanlisis. Universidad de Oriente. Ncleo de Sucre; e Facultad
de Ciencias, Laboratorio de Enzimologa de Parsitos. ULA; f Facultad de Ciencias, Laboratorio de
Entomologa Herman Lent, ULA.

Introduccin: T. cruzi infecta de 8 a 10 millones de personas. En Venezuela, se calcula que aproximadamente existen 2,8
millones en riesgo de contraer la infeccin. Para el estado Sucre no existen estudios actualizados de los ndices de
seroprevalencia de la infeccin por T. cruzi ni de los ndices entomolgicos de los vectores transmisores de la enfermedad
de Chagas. La investigacin fue determinar la situacin real de la infeccin en este estado. Metodologa: Se utiliz un
diseo muestral polietpico, en cual se escogieron al azar en los 15 municipios del estado, 96 centros poblados rurales y
596 viviendas en las cuales se evalu la seroprevalencia de la infeccin por T. cruzi en un total de 2 212 individuos, a
travs de tres pruebas serolgicas diferentes (ELISA, HAI e IFI). Asimismo se recolectaron muestras entomolgicas de
forma activa en los 15 municipios del estado, las cuales se clasificaron taxonmicamente. La deteccin de Trypanosoma
sp en las heces de los triatominos recolectados se hizo a travs del examen directo. Resultados: La seroprevalencia de la
infeccin por T. cruzi en el estado fue de 3,12% (69/2 212) los municipios localizados geogrficamente en el golfo de
Cariaco obtuvieron una mayor seroprevalencia de infeccin por T. cruzi (2,76%). La identificacin taxnomica revel que
en el estado Sucre existe un ndice de infestacin de 3,65 %. La especie ms importante es Triatoma sp. (58,62 %)
seguidos de Rhodnius sp. (32, 76 %) y Panstrongylus sp. (8,62 %). Solamente el 1,47 % de los ejemplares estaba
infectado con Trypanosoma sp. Conclusin: Estos resultados evidencian que el estado Sucre a pesar de no poseer un alto
ndice de seroprevalencia ni entomolgico, la infeccin se encuentra presente lo que indica que existen factores que
garantizan el mantenimiento de la cadena epidemiolgica del parsito y de su vector.

Palabras clave: Seroprevalencia, Triatominos, Trypanosoma cruzi.

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Microbiota vaginal en trabajadoras sexuales que acuden al Servicio de Infecciones de
Transmisin Sexual del Instituto Autnomo Hospital Universitario de Los Andes,
IAHULA. Mrida-Venezuela
Vaginal microbiota in female sex workers attending to the Service of Sexually Transmitted
Infections at the Autonomous Institute University Hospital of the Andes, AIUHLA.
Mrida-Venezuela

Uzctegui Clarat, Dugarte Marelis, Snchez Kiralba *

Laboratorio de Diagnstico e Investigaciones Microbiolgicas Prof. Celina Araujo de Prez. Facultad de
Farmacia y Bioanlisis, Universidad de los Andes.
*sanchezkm@ula.ve

Introduccin. entidades clnico-microbiolgicas ms comunes en esta

La microbiota vaginal juega un papel muy
importante durante la edad reproductiva de la mujer,
evitando la colonizacin por microorganismos
responsables de vaginitis, vaginosis bacteriana (VB) e
infecciones de transmisin sexual (ITS). El contenido
vaginal est sujeto a variaciones endgenas,
fundamentalmente relacionadas con el factor hormonal
y la respuesta inmune local. En el caso particular de las
trabajadoras sexuales (TS), es tambin influenciado por
la accin de factores externos, como la promiscuidad, la
falta de proteccin durante el contacto con clientes, la
prctica de duchas vaginales y la automedicacin [1-3].
La informacin sobre la composicin de la microbiota
vaginal en este grupo de riesgo es escasa; puesto que los
estudios en este colectivo se han dirigido bsicamente a
la pesquisa de ITS. En virtud de ello, el anlisis
microbiolgico de la secrecin vaginal en TS es
importante para conocer el estatus del componente
bitico ms significativo de la vagina, los lactobacilos;
as como para discriminar las entidades clnicas como
VB, tricomoniasis, candidiasis y vaginitis aerbica
(VA); considerados cofactores en la infeccin por el
virus de la inmunodeficiencia humana (VIH).
En este contexto, se plante investigar la presencia
de microorganismos aerbicos y anaerbicos
facultativos en la secrecin vaginal de un grupo de
trabajadoras sexuales; por otra parte, identificar las
poblacin.
Material y mtodos.
Se estudiaron 64 mujeres entre 18 y 49 aos de edad,
quienes asistieron al Servicio de Infecciones de
Transmisin Sexual del Instituto Autnomo Hospital
Universitario de Los Andes (IAHULA), Mrida-
Venezuela. Todos los procedimientos fueron realizados
siguiendo la normativa establecida en la Declaracin de
Helsinki para investigacin en humanos [4]. A cada
trabajadora sexual se le recolectaron 4 hisopados
vaginales en forma consecutiva. Las muestras se
procesaron siguiendo las recomendaciones de la
literatura [5]. Con el primer hisopo se realizaron 2
extendidos en lminas portaobjetos para teir con la
coloracin de Gram, con el segundo hisopo se practic
un montaje en fresco con solucin salina fisiolgica (1,5
ml), para la investigacin de trofozoitos de
Trichomonas vaginalis, levaduras y clulas gua. El
tercer hisopo sirvi para el cultivo en agar sangre (AS,
Oxoid), agar vaginal, agar bilis, manitol salado (MS,
Oxoid) y Mac Conkey (MK, Oxoid); el cuarto hisopado
se coloc en medio de transporte Stuart (Oxoid). La
descripcin del frotis se realiz siguiendo el sistema de
graduacin de Nugent [6]; esto permiti la
identificacin de las entidades clnico-microbiolgicas:
microbiota normal (MN), microbiota bacteriana alterada
(MBA) y vaginosis bacteriana (VB). El diagnstico de

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 Revista de la Sociedad Venezolana de Microbiologa 2013; 33: suplemento 1
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X Congreso Venezolano de Microbiologa Ada Martnez de Gallardo
vaginitis (VA) se confirm por el hallazgo de
trofozotos de T. vaginalis y/o levaduras y pseudohifas
y ms de 10 leucocitos polimorfonucleares por campo
(Lpc). En el caso de VA atribuibles a bacterias
aerbicas o facultativas, el diagnstico se bas en la
recuperacin del microorganismo responsable entre III
y IV cuadrante de la placa, asociado a una disminucin
marcada de lactobacilos y ms de 10 Lpc. La
identificacin bacteriana se realiz siguiendo las
recomendaciones de la Sociedad Americana de
Microbiologa [7]. Se investigaron nicamente los
microorganismos detectables por las tcnicas
microbiolgicas convencionales, por lo tanto, no se
practic la bsqueda de especies de Mycoplasma,
Ureaplasma ni microorganismos anaerbicos.
Resultados y discusin.
Desde el punto de vista clnico, 53 (82,81%) mujeres
presentaron flujo vaginal normal (homogneo,
ligeramente blanco, escaso, con olor sui generis) y 11
(17,19%) una secrecin vaginal anormal (heterogneo,
moderado a abundante, amarillo o grisceo y/o con olor
ftido). El estudio microbiolgico de la secrecin
vaginal demostr que G. vaginalis fue el
microorganismo ms frecuentemente aislado, solo o
asociado a otros anaerbicos facultativos. Mientras que,
Lactobacillus spp. se present en baja frecuencia (Tabla
1). De lo anterior se deduce que, la primera lnea de
defensa del ambiente vaginal fue desplazada por
microorganismos como G. vaginalis y SCN.
Posiblemente, estos resultados estn relacionados con
las caractersticas epidemiolgicas propias del grupo de
estudio para el momento del muestreo. Por otro lado, la
informacin obtenida refleja la susceptibilidad de esta
poblacin ante el riesgo de adquirir una ITS.
Tabla 1. Microbiota vaginal en 64 trabajadoras sexuales
que asistieron al Servicio de ITS-IAHULA.
Microorganismo Frecuencia Porcentaje
(%)
Microbiota mixtaa 20 31,25
Gardnerella vaginalis 18 28,13
G. vaginalis asociado a 12 18,75
otros microorganismos
Lactobacillus spp.b 8 12,50
Lactobacillus spp.c 6 9,37
Total 64 100,00
a
SCN/Enterobacterias/Streptococcus spp.; b Crecimiento
escaso entre I y II cuadrante. cCrecimiento de moderado
a abundante entre III y IV cuadrante. SCN:
Staphylococcus coagulasa negativa.
A travs de los resultados microscpicos, de cultivo
y las caractersticas de la secrecin vaginal, se pudieron
discriminar 4 entidades clnico-microbiolgicas (Tabla
2). Llama la atencin que 57 (89,06%) trabajadoras
presentaron algn tipo de disfuncin vaginal, con
especial nfasis la alta frecuencia de la categora MBA
(50%) con respecto a la presencia de MN (10,94%). El
resultado obtenido para MBA en este estudio, es
comparable al publicado por Lpez-Olmos et al. [8]
quienes detectaron alteraciones de la microbiota vaginal
en el 60,6 % de las citologas provenientes de un grupo
de trabajadoras sexuales en la ciudad de Valencia-
Espaa. En el presente estudio, la entidad clnica VB se
detect en 10 (15,63%) mujeres, este resultado es
similar a los publicados en la literatura 13,33% [9];
17,4% [10] y 18% [11]. En contraste, Fernndez et al.
[12] en 322 TS encontraron una prevalencia de VB del
26,1%; comparables a las tasas reportadas en clnicas
de planificacin familiar (39%) [13]. G. vaginalis fue
responsable del 53,33% de los casos de VA, hallazgo
que discrepa con los reportados en la poblacin
femenina general [14, 15]. Candida spp. se detect en 2
trabajadoras sexuales (13,33%) y T. vaginalis en una de
ellas (6,67%). Estos resultados son consistentes con los
obtenidos por Alvis et al. [10], quienes estudiaron un
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grupo de alto riesgo y detectaron C. albicans y T. nivel primario del sistema de salud. Rev Cub
Obstet Ginecol. 2010; 36(1):65-72.
vaginalis en 2,9% cada uno. As mismo, Shethwala et
3. Wang B, Li X, Stanton B, Yang H, Fang X, Zhao
al. [9], estudiaron 300 trabajadoras sexuales y R, et al. Vaginal douching, condom use, and
sexually transmitted infections among Chinese
encontraron 31 (10,33%) casos de candidiasis y 6 (2%)
female sex workers. Sex Transm Dis. 2005;
de tricomoniasis. 32:696-702.
4. Briceo E, Surez E, Michelangi C, Feliciangeli
D, Ptaiza E, Mendible J, et al. Cdigo de Biotica
Tabla 2. Entidades clnico microbiolgicas en 64 y Bioseguridad 2002. Ministerio de Ciencia y
trabajadoras sexuales. ITS-IAHULA. Tecnologa (FONACIT). 2da Edicin. Venezuela.
5. Snchez K. Diagnstico microbiolgico de las
Entidades Frecuencia % infecciones del tracto genital. En: Velasco J,
Araque M, Araujo E, Longa A, Nieves B, Ramrez
Microbiota normal (MN) 7 10,94 A, et al. Manual prctico de bacteriologa clnica.
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Total 64 100
7. [7] Winn W, Allen S, Janda W, Koneman E,
%: porcentaje
Procop G, Schreckenberger P, Woods, G.
Diagnstico Microbiolgico. Texto y Atlas a color.
Conclusiones. 6 ed. Espaa: Medica Panamericana; 2008.
8. Lpez-Olmos J, Terradez J, Gasull J. Prostitutas:
G. vaginalis fue el microorganismo que se aisl con
infecciones vaginales y lesiones cervicales en la
mayor frecuencia en las trabajadoras sexuales, que citologa. Clin Inv Ginecol Obstet. 2009; 36:194-
202.
acudieron al servicio de ITS-IAHULA, en Mrida-
9. Shethwala ND, Mulla SA, Kosambiya JK, Desai
Venezuela. Lactobacillus spp., se detect en 21,87% de VK. Sexually transmitted infections and
reproductive tract infections in female sex workers.
las mujeres. De las 64 trabajadoras sexuales, 89,06%
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Palabras clave: Microbiota vaginal. Trabajadoras
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 Revista de la Sociedad Venezolana de Microbiologa 2013; 33: suplemento 1
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X Congreso Venezolano de Microbiologa Ada Martnez de Gallardo
Caractersticas de la diarrea aguda en el Servicio de Pediatra del Hospital Vargas de
Caracas. Periodo Marzo-Agosto 2013.
Characteristics of acute diarrheal in the Pediatric Services in the Hospital Vargas of Caracas.
March - August 2013.

Gonzlez Rosabela, Martnez Jos Ramna, Rivero Lisbetha, Isalui Vargasb, Torres Joselit c,
Espinoza Wilmerc
a
Seccin de Enfermedades Entricas -Instituto de Biomedicina, b Laboratorio de Microbiologa- Hospital
Vargas de Caracas, c Servicio de Pediatra - Hospital Vargas de Caracas

Introduccin: La diarrea aguda es un problema de salud pblica, afecta a millones de personas en el mundo, pero es
crtica en los nios menores de 5 aos. Adems, el comportamiento de la infeccin no es igual en los distintos pases y
regiones. Por esta razn, el presente trabajo tiene como objetivo describir las caractersticas clnicas, epidemiolgicas y
etiolgicas de la diarrea aguda en la poblacin < 5 aos que consult el Servicio de Pediatra de Hospital Vargas de
Caracas durante el perodo Marzo Agosto 2013. Metodologa: Los datos de cada nio se registraron en una ficha
clnica-epidemiolgica. Las muestras de heces para el anlisis bacteriolgico se transportaron en el medio Cary - Blair y
se analizaron mediante tcnicas convencionales para la identificacin de Shigella spp, Aeromonas spp y Plesiomonas spp.
Las cepas identificadas de Escherichia coli diarreagenicas, las especies de Shigellas y Salmonellas se confirmaron
mediante el mtodo de aglutinacin en lmina utilizando sueros polivalentes comerciales. Rotavirus fue detectado por una
ELISA comercial. Resultados: Se registraron 75 eventos de diarrea aguda, predomin significativamente (p<0,05) el
grupo etario de 12-59 meses (68%, 51/75) y el 17% (10/58) present algn grado de desnutricin. Escherichia coli
enteropatgena (ECEP) fue el microorganismo ms frecuente identificado con un 13,3% (10/75), seguido por Shigella
flexneri (2,7% ; 2/75), Salmonella entrica (1,3% ; 1/75) y Rotavirus (1,3% ; 1/75). El 80% (8/10) de las cepas de ECEP
mostraron la presencia de BLEE y resistencia al trimetroprin-sulfametoxazol. Adems, todas resultaron sensibles a la
Gentamicina y Ciprofloxacina. Conclusiones: Estos resultados parciales, muestran la importancia de ECEP como agente
causal de diarrea y alertan sobre la necesidad de hacer un uso racional de los antibiticos. Igualmente, resaltan la
necesidad de conocer en cada regin las caractersticas de la diarrea aguda, para brindar un tratamiento oportuno y tomar
medidas de control y prevencin.

Palabras clave: diarrea, BLEE, Escherichia coli enteropatgena, resistencia, antibiticos

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X Congreso Venezolano de Microbiologa Ada Martnez de Gallardo
Estudio seroepidemiolgico de Brucelosis humana en Venezuela, 1997-2012
Seroepidemiological study of human Brucellosis in Venezuela, 1997-2012

Rivera-Olivero Ismar A,*, Lpez Eneida, Moros V. Rosalba, Cardona Marta, Gmez Keyla,,
Perez Jose Luis, Hernndez Roberto, Rodrguez Juan y Morales Richard
Departamento de Bacteriologa. Instituto Nacional de Higiene Rafael Rangel

*Correspondencia autor principal

Email:ismaralejandra@gmail.com

Introduccin. serolgicas, entre las que se encuentran las de

La brucelosis es una zoonosis re- emergente que
causa significativos problemas en salud pblica y salud
animal, debido a las caractersticas y patognesis de la
enfermedad, adems de que tiene fuertes repercusiones
socioeconmicas, dado que la carga global de la
enfermedad esta subestimada y en muchos pases se ha
descuidado el diagnstico de esta patologa [1]. Es
causada por bacterias pertenecientes al gnero
Brucella, spp.. las cuales son cocobacilos Gram
negativos, no motiles y no esporulados. Son bacterias
intracelulares facultativas, pueden sobrevivir y Salud Agrcola Integral (INSAI), y en el sector humano,
multiplicarse en monocitos y macrfagos del sistema
retculo endotelial (SRE) inhibiendo la fusin fago-
lisosoma [2]. Son transmitidas al hombre por contacto
directo con secreciones vaginales, restos de aborto,
placentas y orina de animales infectados o bien por
contacto indirecto al ingerir derivados lcteos
contaminados [2]. Las bacterias del gnero Brucella
son consideradas como microorganismos fastidiosos
de crecimiento lento, para lo cual se implementaron
medios especiales para su primo-aislamiento, como el
Medio Ruiz-Castaeda, pero se pueden sub-cultivar en
medios de agar sangre, tripticasa de soya y agar
McConkey, a 37 C en una atmosfera con 5% de CO2.
La prueba patrn de oro es el cultivo; sin embargo, no
es posible realizarlo en cualquier laboratorio debido a
las caractersticas de bioseguridad que se requieren para
el manejo del microorganismo ya que es un patgeno
perteneciente al grupo de riesgo 3. Es por ello que se
han desarrollado diferentes mtodos y pruebas
aglutinacin, Rosa de Bengala, prueba lenta en tubo o
microplaca con fenol y 2-mercaptoetanol, Fijacin de
complemento, Prueba de Coombs, ELISA, entre otras
que han tenido un rol fundamental en el diagnstico
rpido y oportuno de esta patologa [3], del mismo
modo en las ltimas dcadas se han desarrollado
mtodos moleculares para mejorar el diagnostico e
incrementar la especificidad y sensibilidad del mismo.
En Venezuela, el organismo que regula los aspectos
sanitarios en el sector animal es el Instituto Nacional de
es el Ministerio del Poder Popular para la Salud (MPPS)
que diagnostica los casos a travs del laboratorio
nacional del referencia en el Instituto Nacional de
Higiene Rafael Rangel (INHRR) y notifica los casos
a travs del Sistema de Vigilancia de las Enfermedades
Zoonticas. El objetivo de la presente investigacin fue
determinar la casustica nacional a travs del estudio de
brucelosis humana que se realiza en el INHRR, para
contribuir a determinar la incidencia, posibles fuentes
de infeccin, grupos etarios ms afectados y otras
caractersticas de importancia epidemiolgica para un
mayor conocimiento de esta importante zoonosis, en el
pas.
Material y mtodos.
Se realiz un estudio prospectivo no concurrente a
partir de muestras de sueros que provienen de pacientes,
clnica y epidemiolgicamente sospechosos de
brucelosis, que ingresaron al INHRR en el periodo

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X Congreso Venezolano de Microbiologa Ada Martnez de Gallardo
1997-2012, para la pesquisa de esta patologa como parte del personal clnico aunado a la difcil expresin
parte de la Vigilancia Epidemiolgica que realiza el sindrmica de la enfermedad, que trae como
MPPS. A todas las muestras se les aplic la prueba consecuencia el sub diagnstico; otro factor importante
rpida de Rosa de Bengala (Card Test) para detectar es que en general el diagnstico de brucelosis humana
anticuerpos tipo IgG, considerndose la presencia de es realizado por mdicos veterinarios en laboratorios
aglutinacin como positiva. Igualmente se procesaron privados, donde se realiza el diagnostico animal, por lo
por la prueba de referencia de aglutinacin en que no se reportan al MPPS y tampoco se derivan las
microplaca (SAT, Serum Agglutination Test) con Fenol muestras de humanos al centro de referencia,
y 2-Mercapto-Etanol, empleadas en forma simultanea, generndose un sub-registro.
siguiendo la metodologa de Brown et al. [4] adaptadas En la figura 1 se muestra la seropositividad por aos,
en nuestro laboratorio [5] empleando el antgeno observndose un mayor porcentaje de casos positivos en
elaborado por el Instituto de Investigaciones los aos 1998 (9%), 2003 (7,3%) y 2007 (8,8%).
Veterinarias de Venezuela, el cual consiste de una
suspensin particulada de la cepa de B. abortus 1119.
10
Las pruebas de SAT con fenol y SAT con 2-Mercapto- 9
8
Etanol se consideran positivas cuando se observan 7
6
ttulos > 100 y > 50 Unidades Internacionales, 5
4
respectivamente. Se consideraron casos recientes a los 3
2
pacientes que resultaron positivos en la prueba de Rosa
1
0
de Bengala y en la prueba SAT con fenol ttulos
1997

1998

1999

2000

2001

2002

2003

2004

2005

2006

2007

2008

2009

2010

2011

2012
mayores a 100. Los datos demogrficos, clnicos y
epidemiolgicos de los pacientes se tomaron de la ficha % casos positivos

epidemiolgica. Figura 1. Casos positivos por aos. Venezuela.1997-

2012

Resultados y discusin.
En relacin a la distribucin de los casos por gnero,
Entre 1997 y 2012 se recibieron un total de 2988
el masculino fue cuatro veces superior al femenino con
pacientes con sospecha de brucelosis en el laboratorio
80,8% vs 19,2%, respectivamente. El promedio de edad
nacional de referencia del INHRR y se diagnosticaron
en los hombres fue 38 aos mientras que en las mujeres
120 casos positivos, que representa una seropositividad
fue 48 aos. El 58,3% del total de casos estuvo entre los
del 4% en un periodo de 15 aos, con un promedio
jvenes (16-25 aos), adultos jvenes (26-35 aos) y
anual que oscila entre 3 y 17 casos por ao; nmeros
adultos (36-45 aos), hallndose la mayor proporcin
bastante bajos si los comparamos con otros pases de la
en hombres (87%), pero en el segmento poblacional de
regin como Mxico que para los aos 1994-1998
adultos y adultos mayores se detecto un 61% de casos
notifico un promedio de 4.754 casos/ao [6], Per que
en mujeres (Figura 2)
en el 2004 registr 1.116 casos [7] o nuestro vecino pas
Esta distribucin de los casos por edad y sexo es
Colombia que entre los aos 1996-2004 report
similar a la reportada por otros pases, donde los
solamente en Bogot 653 casos positivos [8] El bajo
hombres jvenes y adultos tienen una mayor exposicin
nmero de casos en Venezuela podra explicarse por
al riesgo por las ocupaciones que realizan [9,10]. Datos
varios factores; uno de ellos es la poca sospecha por

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 Revista de la Sociedad Venezolana de Microbiologa 2013; 33: suplemento 1
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X Congreso Venezolano de Microbiologa Ada Martnez de Gallardo
que corroboramos en este estudio puesto que el 45% animal han reportado una alta proporcin de fincas
(54/120) de los pacientes positivos tenan alguna positivas a brucelosis (entre 42% y 88%) [14].
profesin u oficio relacionada con algn reservorio de En concordancia con lo reportado en la literatura; la
la bacteria; como mdicos veterinarios, obreros de fiebre fue el sntoma ms frecuente presentndose en
fincas y mataderos, matarifes, inseminadores y/o 72,5% de los pacientes, seguido por la cefalea (50%) y
ordeadores y el 95% del total de casos pertenecan al la astenia (44,2%). En la tabla 1 se observa la
gnero masculino. frecuencia de las manifestaciones clnicas encontradas.
Veinte pacientes (17%) positivos reportaron
presencia de complicaciones de la enfermedad; siendo
las manifestaciones osteoarticulares la complicacin
focal ms frecuente, observndose en el 50% (10/20)
de los casos. Otras complicaciones reportadas fueron
endocarditis, epididimitis y meningitis.
Est bien documentado que el nmero de
complicaciones focales en brucelosis se incrementa con
el retraso en el diagnstico, por lo que la demora
Figura 2. Distribucin de casos por grupo etario y gnero.
Venezuela. 1997-2012 superior a 30 das incrementa a su vez el riesgo de un
curso clnico desfavorable de la enfermedad [15].
Ochenta y cinco (85%) de los casos provenan de la
La presencia de este nmero importante de
regin central, centro-occidental y occidental del pas.
complicaciones en una cohorte tan pequea de casos de
El consumo de derivados lcteos (leche y queso) no
brucelosis, evidencia un retraso en el diagnstico y
pasteurizados fue el antecedente epidemiolgico ms
tratamiento de la enfermedad, debido probablemente a
relevante 65,8% (79/120) en todos los casos, siendo la
la escasa sospecha por parte del personal mdico.
va indirecta de trasmisin la ms importante en nuestro
pas, similar a lo reportado en Israel entre 1998-2009,
Tabla N 1. Frecuencia de Signos y sntomas en casos de
donde el 66% de los casos de brucelosis fue producido Brucelosis humana. Instituto Nacional de Higiene Rafael
Rangel. 1997-2012. Venezuela
por consumo de alimentos no pasteurizados [11] al
igual que en Bangladesh donde la va indirecta es la Signos y
N de casos %
ms importante [12]. Sntomas
Fiebre 87 72,5
Esto es un indicativo de que se deben revisar los
Cefalea 60 50
aspectos de higiene y seguridad alimentaria, realizando Mialgias 52 43,3
una mejor vigilancia epidemiolgica en los centros de Artralgias 48 40
Sudoracin 36 30
acopio lecheros y queseras del pas; siendo las regiones Astenia 53 44,2
Centro Occidental (Cojedes, Falcn, Lara, Portuguesa, Inapetencia 40 33,3
Insomnio 14 11,7
Yaracuy) y Occidental (Barinas, Mrida, Tchira,
Trujillo, Zulia) donde se encuentran muchos de estos
centros [13], y se concentran la mayora de los casos
diagnosticados en este estudio. Asimismo en estas
regiones, los laboratorios dependientes de sanidad

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 Revista de la Sociedad Venezolana de Microbiologa 2013; 33: suplemento 1
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X Congreso Venezolano de Microbiologa Ada Martnez de Gallardo
Conclusiones.
A pesar que el nmero de casos de brucelosis
humana fue bajo, se diagnosticaron en prcticamente
todo el territorio nacional. Los hallazgos de este estudio
permite concluir que existe un sub-diagnstico y un
sub-registro de los casos de brucelosis humana, por lo
tanto es necesario fortalecer el diagnostico en todas las
regiones del Pas. Una de las medidas tiles para
aumentar el registro de casos seria la inclusin de esta
patologa en las enfermedades de notificacin
obligatoria en humanos; as como divulgar la
importancia en salud publica de esta zoonosis y lograr
que sea implementada la tcnica de Aglutinacin en
Microplaca en varios laboratorios de salud pblica del
pas, de esta forma se tendra un conocimiento real de la
incidencia, prevalencia, distribucin geogrfica,
factores de riesgo y fuentes de infeccin de esta
patologa en Venezuela. Esto debe conducir a fortalecer
el diagnstico clnico y de laboratorio, as como mejorar
y extender la vigilancia epidemiolgica a mataderos,
queseras y lecheras, que son sectores que constituyen un
alto riesgo para la poblacin. Paralelamente se deben
implementar programas educativos dirigidos tanto a
profesionales como a la poblacin en general, sobre
higiene de los alimentos y prevencin de la brucelosis.
Palabras clave: Brucelosis humana, diagnstico,
serologa, Venezuela
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Asociacin del Virus Papiloma Humano, Chlamydia trachomatis y Virus Herpes
Simple en poblacin femenina de regiones venezolanas
Association of the Papilloma Virus human, Chlamydia trachomatis and Herpes Simplex Virus in
Venezuelan female population

Correnti Maraa, Cavazza Mara E.b, Plata Gysellc, Contreras Lucreciad,

De Guglielmo Zorayaa y Avila Mairaa
a
Instituto de Oncologa y Hematologa .Ministerio del Poder Popular para la Salud. Caracas. Venezuela
b
Instituto de Biomedicina. Ministerio del Poder Popular para la Salud. Universidad Central de Venezuela
c
Proyecto FONACIT G-2005000408. Ministerio del Poder Popular para la Ciencia Tecnologa e Innovacin
d
Centro de Investigaciones en Enfermedades Tropicales Dr. J. Witremundo Torrealba San Carlos,
Estado Cojedes

Introduccin: El VPH es el agente causal del 95 % de los canceres de cuello uterino. El objetivo del trabajo fue evaluar
la presencia de VPH y otras infecciones de transmisin sexual como Chlamydia trachomatis y virus herpes simple en
poblacin femenina venezolana en regiones llaneras y costeras venezolanas. Metodologa: Se estudiaron 264 mujeres con
edades comprendidas entre los 15 y 70 aos (32,1512,8); 186 mujeres de Macapo, Cojedes (36,9512,3 aos, 17-70
aos) y 78 mujeres de Cuman, Sucre (20,72,9 aos, 15-28 aos). Previo C Informado se tomaron las citologa, suero e
hisopado cervical. La poblacin de Cuman asisti a la consulta de patologa cervical, Hospital Universitario Antonio
Patricio de Alcal. La poblacin de Cojedes acudi a la convocatoria de despistaje de CCU en Macapo. VPH fue
determinado por PCR (iniciadores Gp5/Gp6). Las infecciones de Chlamydia trachomatis y Herpes se realizaron por
ensayo inmunoenzimtico. Resultados: Cojedes tiene una tasa de mortalidad por CaCU de 20.74%. En Macapo: se
detect un 29,6% (55/186) de casos positivos por VPH, 1.6% (3/186) de VHS y 7.5% (14/186) para Chlamydia spp. con
IgG e IgM positiva en 0,5% (1/186). El estado Sucre presenta una tasa de mortalidad por CaCU del 11.67%. En Cuman
se observ: VPH en 43,6% (34/78), VHS en 14,1% (11/78), IgG anti- C. trachomatis en 7,7% (6/78) e IgM anti-C.
trachomatis en 25,6% (20/78). Las Infecciones mixtas fue el siguiente: Macapo, 0,53% (1/186) coinfeccin con VHS y
VPH, VPH y presencia de IgG e IgM anti-C. trachomatis 0,53% (1/186). Cuman, 6,4% (5/78) coinfeccin VHS y VPH;
VPH e IgG anti-C. trachomatis en 5,12% (4/78) de los casos y VPH con IgM anti-C. trachomatis en 10,25% (8/78).
Resultados estadsticamente no significativos. Conclusiones: Ambas entidades geogrficas VPH fue el ms frecuente y
vara segn la poblacin estudiada. Financiado por FONACIT G2005000408

Palabras clave: VPH, ITS, mujeres.

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Deteccin de Rotavirus en nios menores de 5 aos con diarrea en el estado Zulia

Presence of Rotavirus in children 5 years of age with diarrhea in Zulia state

Mrquez Velarde Angelina Maraa, Gotera Zambrano Jennifer Lucilaa,

Bermdez Caldern Indira Nataly, Martnez Daz Olga Josefina, Mavrez Montes Alibeth Alexandra,
Gmez Garca Mara del Carmen, Castillo Machado Elina Margarita.
a
Laboratorio Regional de Salud Pblica del estado Zulia.
Email: ange_mar_70@hotmail.com

Introduccin. son los ms importantes en cuanto a patogenicidad se

La diarrea es una de las causas ms comunes de
morbilidad peditrica, especialmente durante los
primeros meses de vida. La mayora de los casos se
producen en nios menores de 2 aos, por lo que a
pesar de ser un proceso benigno, sigue siendo un
motivo de consulta frecuente, tanto en los centros de
salud como en los servicios de urgencia de los
hospitales [1]. En Venezuela, la diarrea aguda
infecciosa, es la segunda causa de consulta de
notificacin obligatoria con 48.724 casos representados
por un 18,91%. El Zulia es uno de los estados con
mayor nmero de reportes de diarrea segn los registros
de la Semana epidemiolgica N 14 del Ministerio del
Poder Popular para la Salud (MPPS) [2]. Su incidencia
es muy elevada en la edad peditrica, especialmente en
los nios menores de 1 ao, en quienes la letalidad es de
0,95%, seguido del grupo de 1 a 5 aos, con una
letalidad de 0,28% [3]. En pases desarrollados del 2-
3% de los nios menores de 5 aos ingresan a causa de
diarrea aguda vrica. El grupo ms afectado son los
nios menores de 2 aos [1] La etiologa de la diarrea
aguda infecciosa representa el 80% y puede ser causada
por virus, bacterias y excepcionalmente por hongos
parsitos. El aislamiento de patgenos, se obtiene en
aproximadamente la mitad de los casos, los cuales
varan segn la etiologa, la tasa de infeccin y el grupo
etario. Hoy en da, las pruebas diagnosticas han
demostrado, que no solamente los episodios diarreicos
son de origen bacteriano, sino que tambin los agentes
virales estn implicados en esta enfermedad y quizs
refiere, siendo responsables de ms del 60% de los
cuadros en los menores de 2 aos. Dentro de los agentes
virales cauantes del proceso diarreico, uno de los ms
importantes es el Rotavirus, el cual tiene distribucin
mundial, es el principal agente viral causante de diarrea
aguda en nios menores de 5 aos y responsable de
aproximadamente el 6% de las muertes en este grupo
etario [3]. Esto se evidencia en las altas cifras de morbi-
mortalidad en la poblacin infantil y en la marcada
asociacin entre desnutricin y diarrea aguda. Las
ltimas estimaciones sobre esta enfermedad indican que
cada ao, se enferman en el mundo 1,4 billones de
nios menores de 5 aos y de ellos mueren 2,1 millones
[4]. La diarrea por Rotavirus ocupa el tercer lugar en las
causas de muerte en nios menores de 5 aos, en el
mundo [5]. Es pertinente mencionar que la vacunacin
es la medida ms efectiva para prevenir una enfermedad
infecciosa, en el caso de la inmunizacin con rotavirus,
esta ha contribuido a mejorar la salud de la poblacin
infantil, as como hacer realidad la meta de poder
controlar la diseminacin de la enfermedad [6].
Considerando la alta incidencia de esta infeccin y
siendo causantes de aproximadamente 6% de las
muertes en nios menores de 5 aos [5,6] as como
tambin, por la gravedad de esta patologa, se realiz el
presente estudio con el objetivo de detectar la presencia
de Rotavirus en nios menores de 5 aos con diarrea en
el estado Zulia.
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Materiales y mtodos. Resultados y Discusin.

rea y Poblacin de estudio: Se analizaron un total de
468 casos de nios menores de 5 aos que consultaron
por diarrea aguda, sin distincin de sexo y condicin
social, que asistieron al Servicio Autnomo Hospital
Universitario de Maracaibo (SAHUM) y Hospital
Materno Infantil Ral Leoni, denominados hospitales
centinelas por el Programa de Vigilancia
Epidemiolgica de la diarrea por Rotavirus del MPPS,
durante el perodo del 2007 al 2012. El rea de
influencia de los centros de salud, es el estado Zulia, los
principales municipios que consultaron fueron
Maracaibo, Mara y Almirante Padilla. El instrumento de
trabajo para analizar los datos clnicos y infectados [7,8]. Del total de los nios, 112 resultaron
epidemiolgicos que se utiliz, fue la ficha elaborada
por el mdico de guardia en el centro de salud centinela.
Deteccin de RV (Rotavirus): Para la deteccin del
antgeno fecal del rotavirus del grupo A, se utiliz
muestras de heces diarreicas de cada nio, estas fueron
recolectadas y congeladas a 20C hasta su posterior
procesamiento. RV grupo A fue identificado mediante
la tcnica de Ensayo Inmuno Enzimtico (EIA) de la
casa comercial (IDEIA Rotavirus de Oxoid) y se
consideraron como positivo, de acuerdo a los criterios
de validacin de cada ensayo.
Se evaluaron un total de 468 nios menores de 5
aos con diarrea, de los cuales 278 correspondieron al
sexo masculino (59,41%) y 190 al femenino (40,59%).
(Tabla 1). Es evidente que nios de ambos sexos son
susceptibles al sndrome diarreico por rotavirus,
estudios han demostrado que la incidencia de infeccin
por estos virus es ligeramente ms elevada en los
varones que en las hembras, esto se pudo evidenciar en
el presente estudio, y aunque se observ un ligero
aumento de la tasa de infeccin en el sexo masculino
con respecto al femenino, no se encontr diferencia
significativa cuando se compararon con los nios no
positivo a Rotavirus con un 23,93%, esto result ser
similar a lo encontrado por Romero y col, en el 2007,
quienes obtuvieron un 19% de infeccin por rotavirus
en la poblacin estudiada as mismo Maldonado y col
en el 2010, encontraron un 19,5% de positivos a RV por
ensayo inmunoenzimtico.
Tabla 1. Distribucin de los casos de infeccin por
Rotavirus segn sexo en nios menores de 5 aos con
diarrea. Estado Zulia. Ao 2007-2012
Sexo n % + % - %

Anlisis estadstico: Los datos obtenidos fueron Masculino 278 59,40 70 62,50 208 58,43
Femenino 190 40,60 42 37,50 148 41,57
ordenados y analizados estadsticamente mediante el
Total 468 100 112 100 356 100
programa GraphPad Instat Versin 4 (San Diego, CA,
USA). Los resultados obtenidos fueron expresados en
valores absolutos y porcentajes. Se utiliz el Ji cuadrado En la Tabla 2 se observa que el grupo etario
y el test de correccin de Yates como pos-test, para el predominante fue el de nios menores de un ao
anlisis de la significancia entre las variables (374/468) con un 79,91%, de estos, 82/112 (73,21%)
estudiadas, as como la frecuencia de los agentes resultaron positivo a Rotavirus (p<0,05), seguido de los
patgenos identificados. Se tom el 95% como ndice nios en edades comprendidas entre 1 y 4 aos (94/468)
de confiabilidad estadstica y se consider significativa con un 20,08% de los cuales 30/112 (26,78 %) fueron
toda p<0,05. positivo, estos resultados estn dentro del grupo de
edades (3 a 24 meses) igual que los reportados en otros
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pases del mundo [7] y tambin en estudios venezolanos en los aos evaluados, esto suele ser comn en los
[8]. pases tropicales, donde la tasa de deteccin de la
infeccin por Rotavirus puede aparecer en cualquier
Tabla 2. Distribucin de los casos de infeccin por mes del ao, y no ser influenciada por la escasa
Rotavirus segn grupo etario en nios menores de
variacin de la temperatura que ocurre durante todo el
5 aos con diarrea. Estado Zulia. Ao 2007-2012
ao, a diferencia de lo que se observa en los pases
Edad + % - % Total %
templados [7,11].
<1ao 82* 73,21 292 82,02 374 79,91
1-4 30 26,78 64 17,97 94 20,08
aos
Figura I. Distribucin anual del nmero de casos de infeccin
Total 112 23,93 356 76,06 468 100 por rotavirus en nios menores de 5 aos con diarrea.
*p<0,05 con respecto a los de 1-4 aos Rotavirus positivo POSITIVO NEGATIVO

104
En relacin al antecedente de vacunacin 47/116
79
nios fueron vacunados y 69/116 no recibieron la 50
51
40
vacuna anti-Rotavirus, el resto de los nios (352/468) 20
32
32
sus madres desconocan si se les aplic o no la vacuna. 23 32
1 4
El anlisis estadstico realizado entre los nios
2007 2008
2009
vacunados y no vacunados versus presencia o ausencia 2010
2011
2012
de Rotavirus, no result significativo, a pesar de que en
el presente estudio 47 nios recibieron al menos una *2007 y 2008 p<0,001 con respecto a 2009 y 2010
dosis de vacuna anti-rotavirus y en 38 de ellos (80,85%) *2009 p<0,001 con respecto a 2011 y 2012

no se detect rotavirus en sus heces, este hecho podra

indicar que la proteccin ofrecida por la vacuna est
siendo efectiva [10] (Tabla 3).
Tabla 3. Relacin entre Vacuna Anti Rotavirus y
frecuencia de infeccin por Rotavirus. Estado Zulia.
Ao 2007-2013
Tambin en el caso del presente estudio algunas de
las variaciones en la deteccin de casos anuales, pudo
ocurrir debido a que es en el ao 2007 que se inicia el
programa de vigilancia de Rotavirus y a travs de este
hubo no solamente mayor alcance en el diagnostico sino
tambin en la vacunacin. La desnutricin estuvo

Vacuna + % - % n representada con un 54,49 % (datos no mostrados) en la

Si 9 19,14 38 80,85 47 poblacin analizada, esto se demuestra en un estudio
No 15 21,73 54 78,26 69 realizado en Venezuela sobre mortalidad por diarrea,
Total 24 20,68 92 79,31 116 donde se encontr que el 57% de las muertes por
diarreas ocurrieron en nios desnutridos [3], por lo que
En la Figura I se observa que el ao 2007 (17,85%) se ha considerado el mayor determinante de mortalidad
y 2008 (28,57%) result significativo (p<0,001) con infantil debido su sinergia con las enfermedades
respecto a 2009 y 2010. El 2009 (0,89%) fue infecciosas [12].
significativo p<0,001 con respecto a 2011 y 2012. Las La mejor prevencin es la vacunacin y fortalecer la
infecciones por Rotavirus se presentaron a lo largo de vigilancia activa, solo as se asegurara reducir el
todo el periodo de estudio, sin embargo se observa un nmero de consultas, ingresos hospitalarios y costos
perfil de distribucin epidemiolgico de forma irregular mdico-asistenciales, pero sobre todo el nmero de
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muertes en la poblacin infantil, contribuyendo esto a 6. Atencio R, Gotera J. Diarreas por rotavirus: una
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86.
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Palabras clave: Rotavirus, Diarrea, Vacuna, estado
group A rotavirus from hospitalized children in
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editores. Coleccin Razetti. Volumen VIII.
octubre 2012, 713-792. La mortalidad por
Capitulo II. Caracas: Editorial Ateproca;
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2009.p.63-88. Vacuna de rotavirus: un recorrido
encuesta representativa a nivel nacional de muertes
exitoso en Venezuela. Dra. Irene Prez Schael
por diarrea. Shaun K Morris, Shally Awasthi,
Ajay Khera, Diego G Bassani, Gagandeep Kang,
Umesh D Parashar, Rajesh Kumar, Anita Shet,
Roger I Glass, Prabhat Jha & for the Million Death
Study Collaborators.
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Estabilidad temporal de serotipos de Streptococcus pneumoniae en la nasofaringe de

nios y madres Warao en el Estado Delta Amacuro, Venezuela
Temporal Stability of S. pneumoniae serotypes carried by Warao mother and children in Delta
Amacuro State, Venezuela

Rivero Rosnelda,b, Sisco Maraa Carolinab , Rivera-Olivero Ismar A.b, Gmez Keylab, Ramrez Rosaliciab,
del Nogal Berenicec , Verhagen Lillyb y de Waard Jacobus H.b
a
Universidad Central de Venezuela, Escuela de Biologa. b Laboratorio de Tuberculosis, Instituto de
Biomedicina. c Servicio de Nio Sano. Hospital de Nios JM de los Rios

Introduccin: La poblacin indgena Warao del Estado Delta Amacuro en Venezuela presenta una alta prevalencia de
colonizacin nasofarngea por Streptococcus pneumoniae, por lo que presentan riesgo elevado de padecer enfermedad
neumoccica invasiva. Las vacunas neumoccicas conjugadas son de utilidad para esta poblacin de riesgo pero solo
cubren un reducido nmero de serotipos. En el presente estudio se evalu la estabilidad temporal de los serotipos en la
poblacin Warao en 3 periodos distintos: 2004, 2008 y 2012, este ltimo previo a la introduccin de la vacuna conjugada
13 valente (PCV13) en la poblacin. Metodologa: En el periodo en estudio se recolectaron 1.818 hisopados
nasofarngeos, que se procesaron aplicando mtodos convencionales. Las cepas de S. pneumoniae fueron serotipificadas
por PCR mltiple y Quellung. Resultados: En el ao 2004 se observ 49% de colonizacin por S. pneumoniae, en el ao
2008 fue de 60.2% y en el 2012 49%. Evaluando la distribucin de serotipos a lo largo del tiempo se observa que en el
ao 2004 los serotipos/grupos predominantes fueron 6A (19.6%), 23F (19.6%), 15B (10.5%), 6B (9.2%) y 19A (3.3%), en
el ao 2008 fueron 6 (24.5%), 23F (11.1%), 19A (5.4%) y 4 (4.9%), mientras que en el 2012 la distribucin fue
serotipo/serogrupo 6 (21.9%), 1 (11.5%), 14 (9.4%) y 23F (6.9%). Se observa que el serogrupo 6 se ha mantenido como el
principal colonizador en la etnia Warao, en contraste el serotipo 23F ha ido disminuyendo en la poblacin. Tambin se
evidencia que los serotipos 14 y 1 se han incrementado notablemente como colonizadores. Conclusin: Nuestros
resultados demuestran una poblacin de S. pneumoniae muy dinmica, con variacin en el tiempo, pero que mantiene
cifras altas de colonizacin por lo que la poblacin Warao se beneficiara con la introduccin de la vacuna PCV13.

Palabras clave: Serotipo, Colonizacin Nasofarngea, Neumococo, Vacuna.

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Candidemia asociada a especies de Candida y factores clnico-epidemiolgicos en

recin nacidos de la unidad de alto riesgo neonatal del IAHULA-Mrida
Candidemia Candida species associated factors and clinical epidemiology of high risk infants on
IAHULA`s neonatal unit of -Mrida.

Snchez Mairenaa, Rosales Carlab, Moreno Alexanderc, Hernndez Jos Gregoriod, Salazar Oduarc,
Solorzano Josefinae, Aguilera Greanae, Hernndez Mileidye, Alfonzo Eulimare, Rodrguez Carmene,
Paredes Carmene, Mendez Yureimae, Prez de Salazar Celinac, Pulido Orangele
a
Postgrado de Microbiologa Clnica, Facultad de Farmacia y Bioanlisis, Universidad de Los Andes
(U.L.A.). b Unidad de Alto Riesgo Neonatal, Instituto Autnomo Hospital Universitario de Los Andes
(I.A.H.U.L.A.). c Laboratorio de Micologa, Facultad de Farmacia y Bioanlisis, U.L.A. d Laboratorio de
Sndromes Gastrointestinales y Urinarios, Facultad de Farmacia y Bioanlisis, U.L.A. e Laboratorio de
Microbiologa, (I.A.H.U.L.A.)

Introduccin: Las infecciones invasivas por Candida spp., constituyen causa de elevada morbi-mortalidad, en particular
en inmunosuprimidos, como los recin nacidos. La investigacin se plante como propsito comprobar la asociacin entre
candidemia, especies de Candida y factores clnico-epidemiolgicos en recin nacidos de la Unidad de Alto Riesgo
Neonatal del Instituto Autnomo Hospital Universitario de los Andes, Mayo 2009Diciembre 2010. Metodologa: Se
realiz una investigacin de campo, diseo no experimental, descriptivo, transversal. A recin nacidos con factores de
riesgo para candidemia, sin tratamiento antifngico, ingresados en la Unidad de Alto Riesgo Neonatal del I.A.H.U.L.A.,
previa firma del consentimiento informado, se llen ficha de recoleccin de datos, hemocultivo, aislamiento e
identificacin de especies de Candida por CHROMagar Candida y prueba de filamentacin. Resultados: De 346 casos
estudiados se diagnostic Candidemia 27,5% (95): C. parapsilosis 63,2% (60), C. albicans 18,9% (18), C. glabrata 6,3%
(6), C. krusei 3,2% (3), C. lusitaniae 3,2% (3), C .tropicalis 2,1% (2), C. guilliermondi 2,1% (2), C. famata 1,1% (1).
Razn masculino/femenino 1,16:1. Razn edad gestacional 35 semanas/36 semanas: 1,32:1. Asociaciones especies de
Candida con factores clnico-epidemiolgicos: uso de antibiticos de amplio espectro y procedimientos invasivos (100%);
catter umbilical 98,9%(94/95); nutricin parenteral 98,9%(94/95); catter venoso central 95,8%(91/95); ventilacin
mecnica 47,4%(45/95); intervencin quirrgica 15,8%(15/95). Peso al nacer: 2500g: 87,36%, todas las especies
aisladas, excepto C. parapsilosis y C. albicans. Edad del RN 7 das: 82,12%(78/95), predomin C. parapsilosis 4:1, C.
albicans 5:1, y el resto C. no albicans. Conclusin: La candidemia en la Unidad de Alto Riesgo es principalmente por
especies de Candida diferentes a C. albicans: 77 (81,05%). Todo procedimiento que altere las barreras naturales, el bajo
peso al nacer de los RN y el mayor tiempo de hospitalizacin favorecieron la candidemia.

Palabras clave: Candida spp., Candidemia neonatal, Recin Nacidos, Hemocultivo

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Epidemiologia de la colonizacin nasofarngea de patgenos respiratorios bacterianos

en nios de la etnia Warao, Delta Amacuro, Venezuela
Epidemiology of nasopharyngeal carriage of respiratory bacterial pathogens in Warao children,.
Delta Amacuro, Venezuela.

Rivera-Olivero Ismar A.a, del Nogal Bereniceb, Sisco Mara Carolinaa, Bello Teresitaa,
WH Hermans Peterc, de Waard Jacobus Ha
a
Instituto de Biomedicina. Universidad Central de Venezuela. Caracas, Venezuela. b Departamento de
Pediatra, Hospital de Nios J.M. de Los Ros. Caracas, Venezuela. c Department of Pediatrics, Radboud
University Nijmegen Medical Centre, Nijmegen. Holanda

Introduccin: La nasofaringe esta colonizada por gran variedad de microorganismos; tanto comensales como patgenos
potenciales como: Streptococcus pneumoniae, Haemophilus influenzae y Moraxella catarrhalis. En los nios la flora
nasofaringe se establece en el los primeros meses de vida. La colonizacin es un proceso asintomtico. Sin embargo, en
situaciones de alteraciones del equilibrio husped-patgeno esta precede a la enfermedad. Las poblaciones indgenas
como la etnia Warao se consideran grupos de riesgo para el desarrollo de infecciones respiratorias por estos patgenos.
Metodologa: Se realiz un estudio entre marzo 2004- mayo 2008 que incluyo la evaluacin clnica y el estudio
microbiolgico de muestras de hisopado nasofarngeo para la bsqueda de S. pneumoniae, H.influenzae, M. catarrhalis y
S. aureus en nios de ms de 30 comunidades Warao del Estado Delta Amacuro. Resultados: Se evaluaron 1000 nios
menores de 15 y se tomaron 882 hisopados, encontrndose un 36% de portadores de S. pneumoniae, 7,3% de M.
catarrhalis, 4,1% de S. aureus y 0,1% de H.influenzae. Observndose diferencias entre las comunidades muestreadas que
van desde 25,5% de portadores de S. pneumoniae en el municipio Tucupita vs. 55,2% en el municipio Pedernales. Del
mismo modo M. cararrhalis con 8,5% y 5,6% en los municipios Tucupita y Pedernales respectivamente. El anlisis
univariante mostro asociaciones positivas entre la presencia de rinorrea y la colonizacin por S. pneumoniae Odd Ratios
(OR) 1,73 (95% IC 1,26-2,37) y entre la otitis versus la colonizacin por M. catharralis OR 3,62 (95% IC 1,60- 8,26)
Conclusiones: La poblacin infantil Warao tiene una alta frecuencia de colonizacin nasofarngea por los patgenos
potenciales estudiados, especialmente S. pneumoniae. La nasofaringe es un nicho ecolgico muy dinmico cuya
comprensin y estudio nos permitir tener mejor conocimiento de la etiologa de las enfermedades respiratorias y
establecer mejores estrategias de control y prevencin en estas poblaciones en riesgo.

Palabras clave: colonizacin nasofarngea, Warao, Delta Amacuro

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Rabia Urbana en el Estado Zulia - Venezuela. Perodo 2007 Julio 2013

Urban Rabie in Zulia State Venezuela. Period 2007 Julio 2013

Fuentes Belkisa,b*, Panunzio Ameliaa, Villarroel Francisa, Prela Elsaa, Molero Milagrosb,
Parra Irenea, vila Ayara, Prieto Yelitzab.
a
Departamento de Salud Pblica y Social, Escuela de Bioanlisis, Facultad de Medicina, Universidad del
Zulia. b Coordinacin Regional de Zoonosis, Secretara de Salud del Poder Ejecutivo del Estado Zulia.

*Correspondencia autor principal: Belkis Fuentes

Email: belkisfm4@hotmail.com

Introduccin. sirven como reservorio de rabia en la naturaleza o como

El virus de la rabia produce una encefalomielitis
viral aguda, con frecuencia mortal, que puede afectar a
todo animal de sangre caliente. Se transmite
principalmente por la saliva de animales portadores del
virus y est presente en todos los continentes, excepto
en la Antrtida [1]. La rabia es, bsicamente, una
enfermedad de los animales, y la epidemiologa de la
rabia humana es un reflejo de la epizootiologa de la
enfermedad en los animales y del grado de contacto
humano con ellos. Se estima que 70.000 personas
mueren anualmente por esta enfermedad en el mundo y,
aunque afecta a todos los grupos de edad, su incidencia
es de 3 a 5 veces ms elevada en los menores de 15
aos [2]. Desde el punto de vista epidemiolgico, la
enfermedad puede desarrollarse en un entorno urbano, o
silvestre. En la mayora de las reas donde la rabia de
los animales domsticos no ha sido adecuadamente
controlada, los perros son responsables del 90% o ms
de los casos notificados en seres humanos y animales
[2,3,4,5]. El porcentaje restante se adjudica a otros
animales como gatos, caballos, ovejas, cerdos, ganado
bovino, etc. Por el contrario, en reas donde la rabia de
los animales domsticos se encuentra controlada, como
en los pases de Europa Occidental, Canad y Estados
Unidos, los perros representan menos del 5% de los
casos animales notificados. Los principales vectores de
vida salvaje son: mangosta, chacal, zorro, murcilago
vampiro, mapache y murcilago insectvoro. Los
pequeos roedores (ratas, ardillas) y los reptiles rara vez
vectores para el hombre [3]. En los aos ochenta, los
pases miembros de la Organizacin Panamericana de la
Salud (OPS) asumieron como objetivo eliminar para
2005 la rabia humana trasmitida por perros en la Regin
de las Amricas. Si bien la meta no se logr, la
reduccin de un 91% en el nmero de casos humanos y
de un 93% en perros en el perodo 1982-2003 confirma
los grandes esfuerzos realizados.
En 2004, en Latinoamrica, fueron reportados 20
casos de rabia humana trasmitida por perros y 71
trasmitidos por otras especies, en su mayora
murcilagos hematfagos; entre estos ltimos se
encuentran los brotes epidmicos de Brasil, con 22
casos, Colombia con 14 y Per con 8. En la actualidad,
el virus de la rabia circula activamente en la especie
canina en espacios geogrficos delimitados, como el de
la frontera de Bolivia - Argentina, Bolivia - Per, gran
parte de Bolivia, el Zulia en Venezuela, reas de El
Salvador, Guatemala y la zona de frontera Guatemala
Mxico [6].
En Amrica Latina se presentaron 58 casos de rabia
canina en lo que va de este ao frente a 293 casos
ocurridos en 2012. Repblica Dominicana registr el
mayor ndice, con 29 casos seguido por Cuba y
Venezuela con 17 y 9 casos respectivamente; en Per
no se report ningn caso de rabia canina, ndices de
2012 [7].
La rabia constituye uno de los graves problemas de
salud pblica por su trascendencia, gravedad e impacto
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social en humanos y animales causando alta mortalidad,
por encefalitis vrica aguda (Instituto Nacional de Salud
2002). En este estudio se plante el objetivo de
determinar los casos de rabia urbana en el Estado Zulia,
adems identificar su distribucin segn municipios y
especies afectadas, y evaluar la cobertura de vacunacin
en el perodo 2007 Julio 2013.
los aos 2011 y 2012 con 4 casos cada uno, mientras
que hasta Julio de 2013 va en aumento la aparicin de la
enfermedad con 9 casos; el Municipio con mayor
incidencia fue Maracaibo con 50 casos (42,73%),
seguido de Lagunillas con 27 casos (23,08%) y San

Material y mtodos.
La investigacin es de tipo descriptivo, se realiz
revisin documental de los registros del nmero de
ingresos y casos positivos reportados en la
Coordinacin Regional de Zoonosis del Estado Zulia.
La poblacin estudiada estuvo conformada por 2130
muestras (animales y humanos), reportados en el Estado
Zulia; las muestras ingresaron al laboratorio de
Diagnstico de Rabia ubicado en el Ambulatorio
Urbano III Dr. Francisco Gmez Padrn, la cual
Francisco con 19 casos (16,23%); los resultados
reporta los resultados ante la Coordinacin Regional de
expuestos, son similares a los reportados en otras
Zoonosis. La informacin obtenida fue procesada a
investigaciones [4,8], donde reflejan la situacin
travs del anlisis de frecuencia, expresada en
endmica de la enfermedad.
porcentaje.

En la distribucin porcentual de casos de rabia

Resultados y discusin.
segn especie (tabla II), se observ que la mayor
El anlisis de la rabia urbana en los ltimos 6 aos y
proporcin fue la especie canina con un 94,02%, otros
hasta Julio de 2013 (tabla I), evidencia que ingresaron
animales con un 3,42%, la felina con un 1,71% y la
2130 muestras y se observ una ocurrencia total de 117
humana con un 0,85%. Estos resultados reflejan, que el
casos de rabia en 12 (57%) Municipios de los 21 que
perro es el vector principal del virus de la rabia
conforman el Estado Zulia, lo que muestra que esta
especialmente en pases en vas de desarrollo, siendo el
enfermedad ha descendido (14%) en cuanto a la
responsable en un 95% de los casos humanos que se
cantidad de Municipios con casos de rabia, al
reportan en el mundo, principalmente en frica y Asia
compararlo con otras investigaciones [4], donde 15
[2,4,5,9].
Municipios presentaban casos. Del total de casos de
rabia 116 fueron en animales y 1 en humano,
observndose la mayor incidencia anual en los aos
2007 (20 casos), 2008 (39 casos) y 2009 (31 casos), y
encontrndose que la rabia urbana en el Estado Zulia ha
mostrado descendencia en el ao 2010 (6 casos) y en
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seguido de animal con dueo casero (23,2%); mientras

que en la tabla V se observa que el mayor porcentaje de
los casos positivos no estaban vacunados (58%), y solo
el 15,2% presentaban sus vacunas. Esto significa que
pocos habitantes se ocupan de dar vacunacin a sus
animales y ofrecerles alimentos, razn por la cual estos
animales se ven obligados a vagar por las calles en
busca de alimento entre los desperdicios de las casas
[10]; lo que representa un problema de salud pblica,
debido a las agresiones de los perros a la poblacin, lo
que se traduce en tratamientos mdicos, vacunaciones
por riesgos y/o muertes por la misma causa. La tenencia
Con respecto a la rabia humana (tabla III) durante el
irresponsable de mascotas, implica la necesidad de
perodo en estudio se report en el ao 2009 la muerte
concientizar a la poblacin sobre el compromiso social
de una nia de 5 aos perteneciente al Municipio
que implica el poseer animales y cuidar de su salud
Maracaibo, Parroquia Idelfonso Vsquez, que es una de
[11].
las parroquias con nivel socioeconmico bajo e
identificada zona de alto riesgo [8]; este resultado
coincide con la Organizacin Mundial de la salud
(OMS) cuando indica que la rabia es una enfermedad
desatendida de poblaciones pobres y vulnerables [1], y
la cual puede prevenirse mediante la vacunacin post-
exposicin [5].

Se observa en la tabla VI, que el rango porcentual de

las coberturas de vacunacin durante el perodo 2007
La tabla IV, muestra que el mayor porcentaje
2012 flucto entre el 24% y 60%, reportndose el
(68,8%) de la condicin de tenencia del animal agresor
mayor nmero de casos y el mayor porcentaje de
la ocup el animal con dueo con hbitos callejeros;
cobertura en el ao 2008; no se alcanz el 80% que
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establece como mnimo el comit experto en rabia de la
Organizacin Panamericana de la Salud (OPS) [12]; por
lo que resulta claro, que la actividad de vacunacin se
constituye en la estrategia ideal para minimizar la
presencia de la enfermedad como lo demuestra
Jaramillo y col., en Ecuador, quienes determinaron que
el coeficiente de correlacin y de determinacin fueron
estadsticamente significativos [1,11].
Conclusiones
Se observ la ocurrencia de 117 casos de rabia
urbana en el Estado Zulia, y el mayor nmero se
concentr en los Municipios Maracaibo y Lagunillas, lo
cual, constituye un problema de salud pblica a pesar de
ser una enfermedad inmunoprevenible.
El caso humano se encontr en una poblacin con
necesidades bsicas insatisfechas; por lo que se
considera organizar actividades de educacin y 6. Caruso M. Rabia. Alerta en nuestro medio.
vigilancia epidemiolgica en comunidades de bajos
recursos econmicos y culturales sobre la transmisin
de la rabia, las medidas preventivas y profilcticas que
deben ser tomadas despus de la mordedura de un
animal.
Se corrobora la baja cobertura de vacunacin por
parte de las entidades sanitarias, por lo que es necesario
el desarrollo de medidas de control integrado que
involucren a funcionarios de salud pblica, veterinarios,
las entidades de conservacin de la fauna y las
asociaciones de bienestar de los animales, para
mantener una cobertura mnima del 80% y asegurar que
el control de la enfermedad sea una realidad.
Los resultados revelan que se deben coordinar
actividades de extensin en comunidades basadas en la
tenencia y manejo responsable de las mascotas, as
como la necesidad de vacunarlos anualmente para
eliminar el riesgo de infeccin5.
Palabras clave: Zoonosis, ocurrencia, rabia urbana,
epidemiologa, virus.
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descriptiva. Marzo 2013. No. 99 Consultada el
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Inmunidad al virus de la Hepatitis B en nios y comunidad educativa de la

Escuela Bsica San Alfonso
Immunity to Hepatitis B in children and educational community of
St. Alphonsus Elementary School

Gmez Garca Maraa,b, Lizarzabal Garca Maribelb, Castillo Machado Elinaa, Guerra Meryb, Mrquez
Angelinaa, Gotera Jennifera, Martinez Olgaa, Mavrez Alibetha, Fereira Maritzaa Ana Maria Izaguirrec
a
Laboratorio Regional de Salud Pblica - Zulia; b Universidad del Zulia; c Direccin de Epidemiologa.
gomezmaria2000@yahoo.es

Introduccin. La mejora de hepatitis aguda en adultos es de 90 a

La hepatitis B es una enfermedad infecciosa que
afecta fundamentalmente al hgado, potencialmente
mortal causada por el virus de la hepatitis B (VHB).
Constituye un importante problema de salud pblica y
es la causa ms comn de enfermedad heptica en el
mundo. Se estima que a nivel mundial hay ms de 350
millones de personas infectadas y que entre 500.000 y
un milln mueren cada ao [1]. En Venezuela, la tasa
de morbilidad de las hepatitis virales es un problema
creciente; y en el estado Zulia durante los ltimos aos,
se ha incrementado el nmero de personas infectadas,
as como tambin, se ha evidenciado un aumento de
casos de Hepatitis que no han sido clasificadas, por falta
de marcadores serolgicos a nivel de los servicios de
laboratorios de las instituciones pblicas [2].
Para un mejor abordaje de las cifras de la morbi-
mortalidad, Lizarzabal (2006) [3], recopila la data
oficial, donde la Hepatitis B y otras Hepatitis agudas
constituyeron el 0,13% del total de causas atendidas en
el Sistema de Salud Pblica del pas durante el
quinquenio 2000-2004. El anlisis de los Anuarios de
Mortalidad oficiales, revelan que un promedio de 3.2%
del total de muertes anuales registradas en Venezuela,
durante el primer quinquenio del nuevo siglo ocurrieron
por patologa de Hgado, vescula biliar y vas biliares
[3].
La historia natural del virus de la hepatitis B
demuestra que cuando se presenta una infeccin aguda,
menos del 2% evoluciona a falla heptica fulminante.
95%, y solo un 5-10% desarrolla infeccin crnica. En
nios en la temprana infancia, hasta un 50% desarrolla
cronicidad, y hasta un 90% de recin nacidos de madres
infectadas puede evolucionar a cronicidad si no se
hacen las medidas preventivas adecuadas en el
momento de nacer [4].
El virus de la hepatitis B (VHB), es de transmisin
exclusivamente humana, no existiendo ningn
reservorio animal efectivo, esto quiere decir que, si se
bloquea la transmisin interhumana se conseguira la
erradicacin de la enfermedad, de hecho, este es uno de
los objetivos de la Organizacin Mundial de la Salud.
Las principales vas de transmisin son la exposicin
parenteral, la transmisin sexual y la va vertical [5].
El principal pilar de prevencin de esta enfermedad,
es la vacuna contra la hepatitis B, dado que induce a la
produccin de anticuerpos confirindole al individuo
inmunidad proteccin contra la infeccin.
Por lo tanto, la prevencin es la mejor forma de
controlar y erradicar completamente la enfermedad.
Actualmente se encuentran disponibles vacunas
recombinantes contra el VHB, que han mostrado una
elevada respuesta inmunognica y eficacia protectora
con poca reactogenicidad [6].
La cobertura de vacunacin es un indicador del
estado de inmunizacin de la poblacin y se define
como la proporcin estimada de la poblacin objetivo
que ha recibido las dosis de vacunas establecidas. Las
estrategias recomendadas para mantener la eliminacin
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de las enfermedades inmunoprevenibles incluyen
coberturas mnimas de 95% mediante actividades de
vacunacin regular o jornadas nacionales de vacunacin
[7].
El diagnstico de la Hepatitis B se basa en la
deteccin de los marcadores serolgicos: a) HBsAg:
(antgeno de superficie de Hepatitis B) (protena
localizada en la superficie de la envoltura del virus y
primera prueba de escrutinio; est presente desde la
primera hasta la tercera semana anterior a los sntomas;
su positividad indica capacidad de contagiar la
infeccin a otros); b) HBeAg: (antgeno temprano de
superficie) (es la protena que ancla el ADN viral a la
cpside; su presencia indica replicacin del virus); c)
Anti-HBsAg (anticuerpos contra el antgeno de
superficie), su positividad indica que el paciente es
inmune a la infeccin por el VHB bien sea por
vacunacin o infeccin pasada y no puede contagiar; d)
Anti-HBc: (anticuerpos totales contra el antgeno core),
su positividad indica que el paciente tiene o ha tenido
infeccin en el pasado; e) IgM anti-HBc (anticuerpo de
clase inmunoglobulina M con especificidad frente a
HBc) se detecta al inicio de los sntomas; indica
infeccin aguda, puede permanecer por 6 meses y
desaparecer, predominando una respuesta tipo IgG, que
no es inducida por la vacunacin; detecta infeccin
crnica y no indica inmunidad. IgM anti-HBc puede ser
el nico marcador del perodo de "ventana" (momento
en que el HBsAg desaparece y el anti-HBsAg no se
detecta an) [8].
Conocer la prevalencia de anticuerpos (anti-HBsAg),
permite confirmar el real contacto con estos agentes
virales, as como, la identificacin de poblaciones
susceptibles, donde se requiere implementar medidas de
prevencin; como la vacunacin, debido a que es la
forma ms efectiva para evitar el contagio contra esta
grave enfermedad, quedando las personas protegidas
hasta en ms del 95%.
Caso contrario, estos podran contraer la hepatitis B,
y tendran un 90% de probabilidad de padecer una
infeccin crnica de por vida, as como tambin, uno de
cada cuatro de estos nios tendr una enfermedad de
hgado grave que puede evolucionar hasta el cncer
cuando sea adulto [9,10].
Otros factores, adems de la vacunacin, que
contribuyen a disminuir la incidencia de la infeccin
aguda son el control sistemtico de las donaciones de
sangre o el cribado serolgico de las gestantes en el
tercer trimestre del embarazo, as como otras
actividades preventivas, de efectividad variable,
dirigidas a evitar o limitar los comportamientos de alto
riesgo como el consumo de drogas por va parenteral
con material no desechable, las relaciones sexuales de
riesgo sin preservativo, la exposicin a tatuajes y
piercing en condiciones no higinicas o las actividades
clnicas denominadas procedimientos invasivos en
condiciones no seguras [11].
El objetivo principal de este estudio fue evaluar la
Inmunidad al virus de la Hepatitis B en nios y
comunidad educativa de la Escuela Bsica San Alfonso
en el estado Zulia.
Materiales y mtodos.
Se realiz un estudio descriptivo, de corte
transversal, en la poblacin escolar y la comunidad
educativa de la Escuela Bsica San Alfonso, ubicada en
el municipio Maracaibo del Estado Zulia, durante el
periodo comprendido de Mayo a Julio del 2012. La
muestra de estudio estuvo representada por 83 personas,
de las cuales 61 eran nios en edades de 10 a 12 aos,
que cursaban quinto (5) y sexto grado (6) y 22 adultos
(docentes y personal administrativo).
Procedimientos serolgicos: Se tomaron en condiciones
aspticas 5 ml de sangre completa, por puncin venosa,
para la obtencin del suero, y
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almacenado a -20 C hasta su procesamiento. La
evaluacin serolgica se realiz utilizando el kit de
UMELISA anti-HBsAg, para la deteccin
anticuerpos totales anti-HBsAg. Este
inmunoenzimtico est diseado para la deteccin
cuantitativa de anticuerpos anti-HBsAg. Se prepar una
curva estndar de 25 y 50 UI/L de anti-HBsAg. En una
cubeta de dilucin se mezcl la solucin de HBsAg con
cada una de las muestras, el control negativo y los
estndar de 25 UI/L y 50 UI/L y se incub a 37 C
durante 16-24 h en cmara hmeda. Posteriormente, se
homogeniz la mezcla preincubada, se transfiri 10 mL
de la misma a cada pocillo de las tiras de reaccin y se
incubaron 2 h a 37 C en cmara hmeda; luego se
realizaron 6 lavados en un lavador automtico,
TecnoSUMA. Se aadi el conjugado y se incub 2 h
en las condiciones previamente descritas; luego se
realiz otro ciclo de lavados y se adicion el sustrato,
cuya hidrlisis durante 30 min a 37 C en cmara
hmeda gener un producto fluorescente. Las muestras
que contenan anti-HBsAg bloquearon
determinantes antignicos del HBsAg, inhibiendo la
reaccin y ocurriendo una reduccin de la seal, siendo
proporcional a la concentracin de anti-HBsAg. La
validacin e interpretacin de los resultados se realiz
automticamente en un lector TecnoSUMA, y el
programa paquete de Software para lectores de tiras.
Los niveles de anti-HBsAg protectores son por encima
de 10 UI/L.
Consideraciones ticas: Para incluir a los nios en el
estudio se les comunic de forma oral y escrita a los
representantes, toda la informacin referente a las
hepatitis virales, su prevencin y diagnstico, con la
finalidad de obtener voluntariamente por escrito,
mediante el Modelo de Consentimiento Informado, su
autorizacin para que su hijo fuera incluido en el
estudio. Esta investigacin fue aprobada por el Comit
de tica de la institucin participante.
Anlisis estadstico. Los datos obtenidos de las pruebas
serolgicas y de la informacin recolectada en la ficha,
de sobre los datos personales de los participantes, fueron
ensayo ordenados y analizados estadsticamente mediante el
programa SPSS statistics (versin 19). Se aplicaron las
medidas de estadstica descriptivas, como las tablas de
contingencia y frecuencias. Los resultados obtenidos
fueron expresados en valores absolutos y porcentajes.
Se utiliz la prueba del Chi-cuadrado para establecer las
asociaciones entre las variables estudiadas. Los niveles
de anti-HBsAg fueron calculados con un intervalo de
confianza del 95%. El valor de p<0,05, fue tomado
como significacin estadstica.
Resultados y discusin.
Se analizaron los resultados de 83 individuos, el
73,50 % (61) estuvo representado por los nios
escolares y el 26,50 % (22) por el personal de la
comunidad educativa. De los 61 nios, 38
correspondieron al sexo femenino (62,30 %) y 23 al
los masculino (37,70 %) y de los 22 docentes y personal
administrativo, 16 correspondieron al sexo femenino
(72,70 %) y 6 al masculino (27,30 %), observndose un
predominio del sexo femenino en ambos grupos. Del
total de muestras (83) procesadas para la deteccin de
Anticuerpos contra el Antgeno de superficie del virus
de la hepatitis B, el 71,10 % (59) resultaron positivo al
anti-HBsAg y el 28,90% (24) presentaron valores No
detectables. Al discriminar en dos grupos se observ
que en los 61 nios, el 56,60% (47) resultaron positivo
al anti-HBsAg y el 16,90% (14) mostraron resultados
con valores No detectables. En cuanto a los 22
integrantes de la comunidad educativa el 14,50% (12)
obtuvieron resultados positivo y el 12 % (10) arrojaron
resultados No detectables, encontrndose diferencia
significativa (p<0,04). Estos resultados son similares a
los encontrados por Bellos y col, donde el 92,5% de los
nios resultaron seroprotegidos y al comparar cada
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grupo estudiado observaron que existen diferencias
estadsticamente significativas (p=0,04) (6).
Al evaluar la inmunidad contra el virus de la
hepatitis B en el total de los nios estudiados (61), se
presentan una prevalencia relativamente elevada de
inmunidad protectora debida a vacunacin efectiva
frente al VHB y 78 (76,5 %) mostraron una respuesta de
anticuerpos protectora (anti-HBs >= 10 mUI/ml) debida
a la vacunacin frente al VHB [12].
Esto contrasta con el estudio sobre Marcadores
serolgicos y moleculares de infeccin por el virus de la
hepatitis B en 1298 estudiantes universitarios
colombianos, donde encontr un 67,90 % de
susceptibles, una baja cobertura de vacunacin y
ausencia de hepatitis B oculta [13]. As como tambin,
coincide con los hallazgos encontrados en un estudio
sobre la durabilidad de la respuesta inmune contra el
VHB, donde los nios presentaron una elevada
proporcin de seroproteccin e hiper-respuesta y se
demostr la alta inmunogenicidad [14].
Tabla 1. Distribucin de estudiantes y personal de la
comunidad educativa segn sexo. Escuela Bsica San
Alfonso. Ao 2.012
evidencio que el 22,95 % tenan anti-HBsAg en niveles
No detectables y el 77,05 resultaron positivo. Estos
resultados se corresponden con los reportados en el
trabajo sobre los nios adoptados de Rusia y Ucrania,
Conclusiones.
La inmunizacin activa contra virus de la hepatitis B
es necesaria para prevenir la enfermedad clnica,
impedir el desarrollo de portadores y la transmisin del
virus a personas susceptibles.
Los resultados revelan que el 71,10% de los individuos
estudiados tienen una concentracin de anticuerpos
contra el Antgeno de superficie del virus de la Hepatitis
B en niveles protectores (10 mUI por ml) y el 28,90%
no estn inmunes contra ste virus, presentando niveles
No detectables de anti-HBsAg .
El 77,05% de los nios en edades de 10 a 12 aos
mostraron evidencia de seroproteccin a la infeccin del
virus de la hepatitis B y el 22,95% no present
inmunidad a sta enfermedad.
Palabras clave: Hepatitis B, Inmunidad, Vacuna,
Seroproteccin, anti-HBsAg.

Estudiantes Docente/Adm. Total Referencias:

Sexo n % n % n %
1. Pereira Z, Mendoza-Sassi R. Respuesta
Femenino 38 62,30 16 72,70 54 65,06 inmunitaria a la vacuna de la hepatitis B en
pacientes hemodializados en Brasil y sus factores
Masculino 23 37,70 6 27,30 29 34,94
asociados. Revista mdica de Chile, 2012 Jul;
Total 61 100 22 100 83 100 140(7): 882-888.
2. Comit Regional de Hepatitis del estado Zulia.
Fuente: Laboratorio de Salud Pblica
Manual para la prevencin, vigilancia, control y
tratamiento de hepatitis virales. Zulia, Venezuela;
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Positivo No detectables Total 2: 1-123.
Grupos n % n % n % 4. Idrovo V, Surez C, lvarez P. Epidemiologa e
historia natural de la hepatitis B. Rev Col
Gastroenterol. 2009 Mar; 24 Supl 1: 4-12.
Estudiantes 47 56,60 14 16,90 61 73,50 5. Bedoya A, Leal M, Torrez E, Busquet E.,
Docente/Adm. 12 14,50 10 12,00 22 26,50 Guerrero R, Marrn T. et al. Evolucin de la
infeccin por virus de la hepatitis B en un Centro
Total 59 71,10 24 28,90 83 100,00 Penitenciario de Jvenes: 1987-98. Rev Espaola
Fuente: Laboratorio de Salud Pblica de Sanidad Penitenciaria, 2012; 2(2).
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Marcadores Serolgicos de Hepatitis B en pacientes que acuden al Laboratorio

Regional de Salud Pblica del estado Zulia. Priodo 2010-2013
Serology Markers of Hepatitis B in patients attending the Regional Public Health Laboratory of
Zulia state. Period 2010-2013

Martnez Daz Olga Josefinaa, Gotera Zambrano Jennifer Lucilaa, Mrquez Velarde Angelinaa,
Mvarez Montes Alibeth Rossanaa, Bermdez Indira Natalya, Fereira Troconiz Maritza Josefinaa,
Millano Mara Ia, Mrquez Machado Noraa; Gmez Mara del Carmena, Castillo Elina Margaritaa.
a
Laboratorio Regional de Salud Pblica.
olgamynestorf@gmail.com.

Introduccin millones con infeccin heptica crnica. Cada ao

El virus de Hepatitis B (VHB) es una causa comn
de enfermedad heptica en todo el mundo. La infeccin
causada por este virus, constituye un importante
problema de salud y es el tipo ms grave de hepatitis
viral. El cuadro clnico de la infeccin es diverso y
puede presentarse de forma asintomtica o subclnica,
de forma anictrica con sntomas gastrointestinales
leves, enfermedad aguda con ictericia prolongada o
como una hepatitis fulminante aguda. [1,2]. Las
potenciales rutas de transmisin del VHB son
determinados por los fluidos corporales, por lo tanto, la
exposicin a sangre y el contacto sexual son modos
relativamente eficientes de transmisin de la infeccin,
dado que el virus se encuentra en altas concentraciones
en sangre, suero, exudados serosos [3].
Una vez que el virus es transmitido, transcurre el
perodo de incubacin que oscila entra 60 y 110 das,
luego de este tiempo se inicia la infeccin aguda,
apareciendo en suero diferentes marcadores serolgicos
del VHB tales como: Antgeno de superficie (HBs-Ag),
Anticuerpos frente al antgeno de superficie (Anti-HBs-
Ag), Antgeno e (HBe-Ag), Anticuerpos frente al
antgeno e (Anti-HBe), Antgeno del core (HBc-Ag),
Anticuerpos frente al antgeno del core (Anti-HBc).
Otros antgenos del VHB: Pre-S1, Pre-S2 y HBx-Ag, de
inters escaso para la aplicacin clnica [4-7].
Se calcula que en el mundo hay unos 2000 millones
de personas infectadas por el VHB y ms de 350
mueren unas 600.000 personas a causa de los efectos
agudos o crnicos de la hepatitis B. La mayor
prevalencia para esta enfermedad est en los continentes
asitico y africano [8]. En Venezuela se presenta un
nivel de prevalencia intermedia (1-5%), encontrndose
el mayor nmero de casos en los estados Zulia, Barinas,
Amazonas y Delta Amacuro [9]; as mismo, existen
focos de alta endemicidad en comunidades indgenas de
dichas regiones, como por ejemplo la Etnia Yucpa, del
estado Zulia, en donde la prevalencia oscila entre 5,6%
y 9,6% [10]. Existen diferentes grupos de personas de
alto riesgo para contraer la enfermedad, se pueden
mencionar los receptores de transfusiones de sangre,
dializados, pacientes oncolgicos, pacientes
inmunosuprimidos por el VIH, entre otros. Un grupo
importante de estudio corresponde a la poblacin
gestante (riesgo intermedio en Venezuela), de all la
importancia de conocer la presencia del virus en
embarazadas, por el riesgo de infeccin vertical que
ocurre entre 10% y 40% de casos [11]. Existen
investigaciones que plantean que la infeccin por virus
de la hepatitis B (VHB) tiene mayor riesgo de
transmisin perinatal entre los diferentes agentes
causales de hepatitis virales. Esta se relaciona con el
estado serolgico de la madre, las gestantes positivas
con HBsAg, tienen probabilidad de trasmitir la
enfermedad a sus bebes en un 10% y un 40%; adems si
tienen en suero el AgHBe y ADN viral positivo,
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alcanzan una tasa de transmisin del 70% al 90%. Los lo que corresponde a la seroprevalencia real, dado que
nios que adquieren la infeccin por virus de la este marcador indica infeccin pasada, 220 (1,50%)
hepatitis B (VHB) por va perinatal tienen un riesgo casos positivo a HBs-Ag, lo cual corresponde a
hasta del 90% para desarrollar hepatitis B crnica con incidencia o nuevos casos, 118 (0,80%) positivo para
progresin a cirrosis heptica o a cncer hepatocelular los tres marcadores HBs-Ag/Anti-HBc/Anti HBc IgM,
[12]. En este contexto, y debido a lo importante que los cuales podran ser motivo de infeccin activa.
representa este problema de salud, tomando en cuenta la (Tabla I). Estos datos coinciden con los aportados por la
importancia de la morbilidad del VHB, se plantea como Organizacin Mundial de la Salud (OMS) [3], donde
objetivo determinar la prevalencia de los marcadores cataloga a Venezuela dentro de una prevalencia
serolgicos para Hepatitis B en pacientes que acuden al intermedia (2-7%). Aunque la data de prevalencia de
Laboratorio Regional de Salud Pblica del estado Zulia. Hepatitis B en Latinoamrica es incompleta, Tanaka y
col., encontraron la seroprevalencia ms alta de anti-
Materiales y Mtodos. HBc en Repblica Dominicana (21.4%), seguida por
Durante el Periodo Noviembre 2010 a Marzo del
2013, se evaluaron 14.68 pacientes que asistieron al
Laboratorio Regional de Salud Pblica (LRSP) del
estado Zulia, sin distincin de edad, sexo y condicin
social, a los cuales se les determin los marcadores
serolgicos para Hepatitis B, estos fueron: AgHBs,
antiHBc, y antiHBC IgM. A cada paciente se le tom
una muestra de sangre venosa, recolectadas en tubos sin
anticoagulante para la obtencin del suero. Los
marcadores serolgicos fueron determinados mediante
Brasil (7.9%), Venezuela (3.2%) y Argentina (2.1%).
tcnica de Ultramicroelisa de la Casa Comercial SUMA
La ms baja prevalencia de esta investigacin, fueron
(Cuba, La Habana). Los casos que resultaron positivos
halladas en Mxico (1.4%) y Chile (0.6%). En Brasil
se refirieron a la consulta de Gastroenterologa del
variaba de 21% en Manaus a 1.2% en Fortaleza [13].
Servicio Autnomo Hospital Universitario de
La Tabla II resume los resultados obtenidos en las
Maracaibo, para su posterior seguimiento y evaluacin
1.352 muestras en funcin de la edad y sexo de los
clnica por parte del mdico especialista.
sujetos estudiados. Se observa que, la positividad
Anlisis Estadstico: Los datos recopilados son
registrada para anti-HBc (1014) y HBsAg (220), fue
expresados en valores absolutos y porcentajes, y
mayor para los pacientes del sexo masculino
mediante el paquete estadstico GraphPad Prism 6, se
(626/77,3% y 146/18-04% respectivamente.
realiz la prueba del ji-cuadrado para hacer
La prevalencia de anti-HBc total es superior al 50%
comparaciones con una significancia de p<0,05.
en todos los sujetos evaluados y crece progresivamente
en relacin a la edad, a excepcin de lo observado en el
Resultados y Discusin.
grupo masculino de 7-14 (28,57%) y 15-19 aos (40%).
De las 14.681 muestras analizadas, se pudo observar
El incremento de la seroprevalencia conforme a la edad
que 1.014 casos (6,91%), fueron positivo a Anti-HBc,
hace posible inferir transmisin sexual y parenteral,
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coincidiendo con estudios realizados en Venezuela por
Pozo y col en el ao 2007 [14], observando el riesgo
que corren los individuos en la edad productiva y
reproductiva del pas. La prevalencia de HBsAg estuvo
presente en ambos sexos, con porcentaje menores al
50%, de igual modo, se observ con el grupo de
positivo a los tres marcadores.
La positividad general, en el sexo masculino
(59,83%) es mayor que en el femenino (40,16%). Las
proporciones son relativamente semejantes en el grupo
de 0 a 19 aos, sin embargo, a partir de este grupo, la
positividad fue mayor en el masculino, datos similares a
lo por lo reportado por diversos investigadores
[1,15].Aunque se observa en esta investigacin que el
patrn de transmisin de esta enfermedad es bajo de
acuerdo con las cifras mundiales, as como lo menciona
Valdespino y col en el 2007 [16], es preocupante que
1.014 personas evaluadas han sufrido la infeccin por
este virus. Asimismo, 220 padecen el estado de portador
crnico y esto alerta sobre el nmero de individuos que
pueden ser fuente de infecciones nuevas. Sin dejar de
mencionar los 118 casos de hepatitis activa detectadas
en los aos evaluados.
La Tabla III muestra la prevalencia de los
marcadores serolgicos, con respecto a los aos de
estudios; en el ao 2011 y 2012 se observan el mayor
nmero de casos positivos tanto para Anti-HBc , HBs-
Ag y Anti-HBc/ HBs-Ag/Anti-HBc IgM. Es importante
destacar que, los datos de este trabajo son consistentes
con una transmisin no controlada de las infecciones de
transmisin sexual, como es el caso del VHB. Se pudo
observar que al pasar los aos el nmero de casos va en
aumento y resulta preocupante que para el ao 2013 se
han detectado 296 casos, es decir, casi la mitad de los
casos reportados en los aos anteriores, lo que hace
inferir que al final del ao el nmero de casos superara
los aos anteriores.
Con respecto a las poblaciones de riesgo, el 68,17%
corresponde a pacientes VIH positivo, y un 31,82%
eran mujeres gestantes. Cabe destacar, que se resaltaron
estas dos poblaciones, dado a las implicaciones que
tiene la infeccin causada por este virus en ambos
grupos, con el propsito de dar a conocer la prevalencia
del VHB. Al detectar los marcadores serolgicos en las
embarazadas, contribuye a la inmunoprofilaxia de los
recin nacidos, esta medida reduce la infeccin neonatal
y evita las complicaciones agudas o crnicas. Con
respecto al grupo de pacientes VIH positivo en
coinfeccin con VHB, esto representa un riesgo
potencial de progresin a hepatopata crnica, cirrosis y
carcinoma hepatocelular. Se pudo observar que 47/392
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(11,98%), eran positivo para HBsAg, lo que indica
presencia de casos nuevos, 325/392 (82,90%) a Anti-
HBc y 20/392 (5,10%)
AntiHBc/HBsAg/AntiHBcIgM.
La prevalencia de coinfeccin VIH-VHB, resulta por
encima del 50%, estos hallazgos pudieron ser frecuentes
en virtud a las similares vas de trasmisin. Estos
resultados difieren con lo reportado por Lpez y col,
2012 [17], donde encontraron 3,96% de coinfeccin en
la poblacin estudiada. En el caso de las mujeres
embarazadas, se observ que un nmero importante de
la poblacin evaluada, 14/183 (22,95%) resultaron
portadoras del HBsAg, a pesar de la baja incidencia de
madres AgHBs+ tienen gran riesgo de trasmisin
vertical. El despistaje de este marcador resultara ser
beneficioso para sus hijos, garantizndole
inmunizacin activa y pasiva inmediatamente despus
del parto. Adems, 161/183 (87,97%) fueron positiva
para Anti-HBc y 8/183 (4,37%)
AntiHBc/HBsAg/AntiHBcIgM. Estos resultados
contrastan con lo encontrado por Meza y col, 2009 [18],
donde la prevalencia de HBsAg fue de 0% y para el
Anti-HBc de 2,8%, al igual por lo reportado por
Lizarzabal y col, 2010 [19], donde se detect un 0,08%
de AgHBs y 0,13% de Anti-HBc.
Conclusiones.
La necesidad de investigar acerca de este tema radica
en que en los ltimos aos, la infeccin causada por el
VHB, ha sido identificada como un problema
potencial. Sin embargo, a pesar del hecho de que la
infeccin por el VHB parece significativamente ms
grave en trminos de morbilidad y mortalidad que el
virus de inmunodeficiencia humana, ha sido muy poco
el nfasis que se ha hecho en cuanto a la prevencin de
esta infeccin. Los datos arrojados en
investigacin, sirven para poder determinar la presencia
de la infeccin por este virus en la poblacin en estudio,
y esto posteriormente ayudar a contribuir con la
ejecucin de acciones encaminadas a fomentar todas
a aquellas medidas y/o acciones que permitan prever
infecciones de este tipo en la poblacin en general. Se
pueden proponer algunas acciones de salud pblica,
como fortalecer la vigilancia epidemiolgica de las
hepatitis virales, fomentar las acciones de prevencin de
infecciones de transmisin sexual, intensificar la
vacunacin contra VHB en nios de acuerdo con el
una
esquema de vacunacin actual, incrementarse la
prevencin de la transmisin sangunea de VHB, sobre
todo en bancos de sangre.
De forma adicional, con el propsito de tener un rpido
descenso de la transmisin se podran incorporar
acciones de vacunacin en adolescentes, adultos y,
sobre todo, en grupos de alto riesgo.
Palabras clave: Hepatitis B, Antgeno de Superficie,
Anticuerpos frente al antgeno del Core.
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file:///C:/Users/nestor/Desktop/trabajo%20de%20h
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AGRONOMA
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Respuesta del cultivo de frjol (Vigna unguiculata) variedad Catatumbo a la

inoculacin con cepas micorrzicas nativas, bajo condiciones de invernadero
en el estado Zulia, Venezuela
Answer of bean (Vigna unguiculata) crop, Catatumbo variety, to the inoculation with native
mycorhizal strain under glasshouse conditions in Zulia state, Venezuela

Acosta Katiuska, Petit Belkis, Edwin Caldera, Richard Bermudez

Ctedra de Microbiologa Agrcola. Laboratorio de Microbiologa Agrcola, Unidad Tcnica Fitosanitaria.
Facultad de Agronoma-Universidad del Zulia. Venezuela
kacosta@fa.luz.edu.ve

Introduccin: La biotecnologa agrcola es una herramienta a travs del uso de los microorganismos presentes en suelos
agrcolas permite favorecer el rendimiento vegetal. Dentro de esta el uso de la inoculacin con micorrizas ha permitido un
mayor grado de desarrollo de la raz; incrementar crecimiento vegetal, aumentar supervivencia de plntulas, bajar los
aportes de fertilizantes, aumentar la resistencia al estrs abitico y bitico. Con la finalidad de evaluar la respuesta del
cultivo frjol inoculadas con cepas de micorrizas. Metodologa: Se sembr la variedad Catatumbo en macetas de 2 Kg.
con 20 gr. de inoculantes constituido por races colonizadas, hifas y esporas, se mezcl con los primeros 5 cm. del suelo
estril, sembrando las semillas de frjol variedad catatumbo. Las plntulas de una semana fueron fertilizadas, plantas no
inoculadas fueron consideradas como testigos. Se evaluaron 4 tratamientos: micorrizas, fertilizacin,
micorrizas+fertilizacin y testigo. Ser subdividieron en 2 grupos para medir la capacidad colonizadora de las micorrizas al
inicio (20 das) y el resto de las plantas fueron cosechadas a los 55 das para medir la colonizacin en estado avanzado de
desarrollo del cultivo, materia seca, protena cruda y contenido de nutrimento en follaje y vaina. Resultados: Los
tratamientos produjeron diferencias significativas (P<0.05). El inculo mostr una colonizacin significativa, siendo los
mayores niveles de colonizacin en la etapa temprana de desarrollo vegetal El tratamiento que indujo incrementos
significativos en los valores de las variables en estudio corresponde a la inoculacin combinada con la fertilizacin,
mostrando las plantas micorrizadas fertilizadas y las micorrizadas un comportamiento similar, con variaciones menores
en la concentracin de nutrimentos en el tejido vegetal. Conclusin: Esta diferencia en relacin al contenido de
nutrimentos nos indica una adecuada suplencia de elementos bsicos para una satisfactoria nutricin del frjol en la
Planicie de Maracaibo, como producto de la micorrizacion.

Palabras clave: frjol, Vigna unguiculata, micorrizas, colonizacin, efectividad

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Respuesta del cultivo de yuca (Manihot esculenta) a la micorriziacion

con cepas nativas de Glomus spp
Answer of Cassava (manohot esculenta) crop to the inoculation with Glomus spp. native mycorhizal
strain

Acosta Katiuska, Petit Belkis, Richard Bermdez, Gustavo Garcs, Carlos Carvajal, Emildo Carmona
Laboratorio de Microbiologa Agrcola. Unidad Tcnica Fitosanitaria.
Facultad de Agronoma Universidad del Zulia.
kacosta@fa.luz.edu.ve

Introduccin: En la bsqueda de alternativas para la produccin de alimentos que permitan preservar el ambiente, surge
la necesidad del aprovechamiento de los insumos biolgicos, donde las micorriza juegan un papel importante como
promotoras del desarrollo y nutricin de la plantas. La presente investigacin caracterizo la poblacin micorrzicas nativa
interactuarte con el cultivo de yuca (Manihot esculenta) sembrados en granjas de la Parroquia Domitila Flores del
municipio San Francisco del estado Zulia. Metodologa: El ensayo experimental se realiz a nivel de vivero en la Unidad
Tcnica Fitosanitaria de la Facultad de Agronoma de la Universidad del Zulia. Para tal fin se prepararon una mezcla de
sustrato a base de 50 gr se inculo de Glomus sp nativas (200-250 esporas /gr suelo) mezclado con suelo estril, se
sembraron tubrculos de yuca previamente desinfectadas y acondicionadas en solucin azucarada, manteniendo plantas
sin inocular como testigo. Las plantas fueron mantenidas hasta los 50 das de desarrollo para ser cosechadas y medir las
variables: nmero de raz (NR), nmero de hojas (NH), longitud de la raz (LR), masa fresca de la raz (MFR), dimetro
de raz y porcentaje de colonizacin micorrzal (PCM). Resultados: Se observaron diferencias significativas en las
variables de estudio con respuesta a la inoculacin del inculo evaluado mostrando una alta capacidad colonizadora con
una presencia abundantes de vesculas (40-50/fragmento de raz) y arbsculos intracelulares, as esto fue correlacionado
con una mayor dimetro y nmero de races, en las plantas micorrizadas con Glomus manihoti, comportamiento similar
fue apreciado para la variables masa fresca, siendo las plantas inoculadas las que mostraron mayores valores indicando
diferencias de un 46 % en el peso en comparacin con las plantas testigo, lo cual pudiera incidir en un mayor anclaje de la
planta, aumentando las capacidad exploratoria del suelo.

Palabras clave: yuca, Manihot esculenta, micorrizas.

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Evaluacin de micorrizas nativas en el cultivo de Heliconia bihai

Evaluation of native mycorhiza of crop Heliconian bihai

Acosta Katiuska, Petit Belkis, Gonzlez Yojani, Ferrer Anyely, Urdaneta Vicelly, Adriana Nava.
Laboratorio de Microbiologa Agrcola. Unidad Tcnica Fitosanitaria.
Facultad de Agronoma Universidad del Zulia.
kacosta@fa.luz.edu.ve

Introduccin: El uso de la inoculacin con cepas micorrzicas se ha potencializado como una alternativa en lograr
mejoras de la productividad y rendimientos de los cultivos; as como tambin, reducir la necesidad de uso de
agroqumicos en plantas de inters ornamental. se evalu la poblacin micorrzica nativa interactuarte en plantaciones
silvestres y establecidas del cultivo Heliconias spp. ubicadas en el Sector las Misiones del Municipio Machiques de
Perij del estado Zulia. Metodologa: El ensayo experimental se realiz en laboratorio de Microbiologa Agrcola de la
Unidad Tcnica Fitosanitaria de la Facultad de Agronoma de la Universidad del Zulia. Se tomaron muestras de suelo a
15 cm de profundidad, se colocaron bolsas plsticas y fueron procesadas usando la metodologa de Phillips y Hayman
(1970) para la determinacin de la colonizacin de las races y la extraccin de esporas del suelo por el mtodo
Gerdemann y Nicolson (1963). Para determinar el porcentaje de infeccin micorrizal (PIM) se realizaron observaciones
microscpicas en las races teidas; para determinar la presencia en los tejidos de hifas, vesculas y /o arbsculos
caractersticos de los hongos micorrzico versculo arbuscular. Resultados: Se evalu porcentaje de colonizacin y
esporas micorrizal, encontrndose que los gneros de micorrizas con mayor incidencia en las colonizacin del sistema
radical de las plantas de Heliconia bihai correspondieron a Glomus spp. y Entomosphora spp, los cuales mostraron un
porcentaje de colonizacin del 67% y 55% respectivamente. Conclusin: La colonizacin de Glomus spp. en el sistema
radicular de Heliconia bihai, pudiera potencializar y establecer la eficiencia de este hongos como inculos nativos para
este cultivo.

Palabras clave: Heliconia bihai,, micorrizas, Glomus, Entomosphora

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Control de la mancha negra en plantas de Rosas spp. micorrizadas en condiciones

de Invernadero
Effect of micorrhyzation on dark spot control in rose plants under greehouse conditions

Acosta Katiuska, Petit Belkis, , Adriana Nava; Gonzlez Yojani, Urdaneta Vicelly
Laboratorio de Microbiologa Agrcola. Unidad Tcnica Fitosanitaria. Facultad de Agronoma Universidad
del Zulia. kacosta@fa.luz.edu.ve

Introduccion: El uso de microorganismos rizosfericos capaces de causar un antagonismo como alternativa para el control
de patgenos de plantas ha despertado gran inters, asi se ha descrito que las micorrizas reduce la sintomatologa ya que
mejora del estado nutricional en plantas proporcionando una mejor situacin fisiolgica, lo que le permite a su vez
combatir de forma ms efectiva al patgeno confirindole una mayor resitencia/tolerancia frente a patgenos. En la
presente investigacion se evaluo la incidencia de la mancha negra producida por Marssonina rosae en plantas de rosas
spp. inoculadas con hongos micorrizicos. Metodologia: El ensayo experimental se realiz a nivel de vivero en la Unidad
Tcnica Fitosanitaria de la Facultad de Agronoma de la Universidad del Zulia. Se prepararon mezclas de sustrato a base
de 50 gr se inculo de Glomus mossae y Scutellosphora spp. (200-250 esporas /gr suelo) mezclado con suelo estril, se
sembraron estacas 5 cm de grosor y 10 cm de longitud, previamente desinfectadas con hipoclorito de sodio 10%, y
acondicionadas en solucin azucarada. A los 45 das de desarrollo las plantas fueron inoculadas con el patgeno.
Evalundose 4 tratamientos: A (plantas micorrizadas con Glomus mossae) B: (plantas inoculadas con Scutellosphora spp.)
C: (Plantas micorrizas + patgeno) y D: (plantas sin inocular como testigo). Las plantas fueron mantenidas 6 meses en
condiciones de invernadero, para evaluar el Porcentaje de colonizacin (PIM), Nmero de hojas (NH) nmero de brotes
(NB), nmero de botones florales (NBF) y el grado de incidencia de la enfermedad (IE). Resultados: Se observaron
diferencias P:<0,01 en las variables de estudio con respuesta a la inoculacin, mostrando niveles de 45- 50% de
micorrizacin, siendo los niveles superiores con la cepa de Glomus mossae la cual alcanz niveles de 65%, con alta
presencia de vesculas (40/fragmento de raz) y arbsculos intracelulares. as esto fue correlacionado con una mayor
produccin de brotes y botines florales;, sin embargo, para la incidencia de la enfermedad no hubo diferencias
significativas entre los inculos. Por lo que es necesario para que se manifieste la proteccin que la simbiosis est
establecida antes de que se produzca el ataque del patgeno, garantizando una colonizacin efectiva por la micorriza.

Palabras clave: rosa spp, micorrizas, mancha negra

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Estrategia tecnolgica en la produccin de inoculantes micorrizicos en rubros de

inters agrcola del estado Zulia
Technological strategy in the production of micorrhizal inoculant in agronomic interest crops in
Zulia state

Acosta Katiuskaa, Bermdez Richarda, Petit Belkisa, Gutirrez Wernerb, Caldera Edwinb, Villalobos Yajairab
a
Catedra de Microbiologa Agrcola. Laboratorio de Microbiologa Agrcola. Unidad Tcnica Fitosanitaria.
b
Departamento de Botnica. Facultad de Agronoma. Universidad del Zulia. Kacosta@fa.luz.edu.ve
Richardbermudez@fa.luz.edu.ve

Muchas prcticas de la agricultura moderna, caracterizada por el elevado empleo de insumos, adems de resultar en altos
rendimientos, han trado consigo inestabilidad para los sistemas agrcolas de produccin. Algunas manifestaciones de
esto son: la contaminacin ambiental, la reduccin o prdida de las poblaciones de enemigos naturales de plagas, la
prdida de fertilidad de los suelos, el surgimiento de nuevas plagas, el descenso de los rendimientos de cosechas, la
necesidad de niveles ms altos de agroqumicos para mantener los rendimientos. En este sentido, en el laboratorio de
Microbiologa Agrcola de la Unidad Tcnica Fitosanitaria fue iniciado los estudios de cepas micorrizas autctonas de
suelos donde se siembra rubros de inters agrcola para nuestra regin, como alternativas de manejo agroecolgicos. Estos
estudios presentaban un enfoque principalmente competitividad y efectividad de las cepas nativas de los hongos
micorrizgenos arbusculares (MVA). Las investigaciones estaban enfocadas principalmente al estudio del desarrollo de
plantas de inters agrcola como: frijol, pimentn, guayaba, pltano, tomate, lechosa, entre otras, y hemos ido
incorporando plantas ornamentales. A la fecha, se tienen registradas cerca de 20 especies de MVA. Sin embargo, es
importante continuar fomentando la investigacin acerca de las micorrizas en trminos de su adecuacin, de sus
interacciones con otros organismos, la competencia, el parasitismo, la depredacin; de su diversidad, especificidad hacia
determinadas especies de hm, y mucho ms, es todava incipiente.

Palabras clave: micorrrizas, agroecolgico, rubros agrcolas.

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Evaluacin del contenido de protena cruda y nutrimentos del cultivo de frjol

(Vigna unguiculata) inoculadas con micorrzicas nativas y comerciales
Evaluation content of nutrient of bean (Vigna unguiculata) crop to the inoculation with native and
commercial mycorhizal

Acosta Katiuska, Petit Belkis, Werner Gutierrez, Richard Bermudez Yajaira Villalobos, Nerio Delgado
Ctedra de Microbiologa Agrcola. Laboratorio de Microbiologa Agrcola, Unidad Tcnica Fitosanitaria. Facultad
de Agronoma-Universidad del Zulia. Venezuela.
kacosta@fa.luz.edu.ve

Introduccin: Materiales y mtodos:

El uso de cepas de hongos micorrzicos se ha
potencializado como una alternativa para lograr mejoras
de la productividad y rendimientos de los cultivos, as
como tambin, reducir la necesidad de uso de
agroqumicos [1].Logrndose un mayor grado de
desarrollo de la raz; incrementar el crecimiento vegetal,
aumentar supervivencia de las plntulas, bajar los
aportes de fertilizantes, y aumentar la resistencia al
estrs abitico y bitico. Sin embargo, dentro de esta
herramienta la seleccin de las mejores cepas de
micorriza arbuscular es una clave importante para un
eficiente desarrollo micorrzico en el cultivo [2].
En las leguminosas este grupo de microorganismos
se han evaluado y correlacionado directamente con el
proceso de fijacin de nitrgeno, revistiendo especial
inters ya que esto juega un papel fundamental para la
planta al mejorar la absorcin de nutrientes,
especialmente del nitrgeno y fsforo. Caracterstica
importante ya que la mayora de los suelos de la regin
zuliana muestran una baja fertilidad natural. As se ha
visto que el frjol no responde a la fertilizacin
nitrogenada, pero si a la aplicacin de fuentes
fosforadas, importantes para la actividad nodular de las
leguminosas, significando una herramienta posible para
utilizar en aquellos suelos con baja fertilidad, donde la
planta busca estrategias que le permitan tolerar y evadir
las condiciones edficas crticas, desarrollando una
eficiencia nutricional la cual le permite producir mayor
cantidad de biomasa por cada nutrimento suministrado.
Los inculos de micorrizas fueron obtenidos en
presentacin mixta de los hongos Glomus clarum,
Glomus manihotis y Scutellospora spp., y para la
obtencin de los inculos de micorrizas nativas se
recolectaron muestras de suelo, aproximadamente a
unos 5-10 cm de profundidad, para ser analizadas por la
metodologa de Gerdeman y Nicolson (1963). Las
semillas fueron desinfectadas y acondicionadas
sumergindolas por 1 hora en una solucin concentrada
de sacarosa, para garantizar una mejor adherencia a las
mismas del inculo a utilizar. Una vez germinadas, las
plntulas de una semana de edad que correspondan al
tratamiento con micorrizas comerciales fueron
acondicionadas con la aplicacin de 1gr de la mezcla
completa 12-60-12. As tambin se mantuvieron
plantas sin inocular con simple acondicionamiento y
plantas sin tratamiento alguno. Las plantas fueron
distribuidas en los siguientes tratamientos:
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Tabla 1. garantizando la infectividad y efectividad en el

Tratamiento Caractersticas momento del establecimiento en campo [5,6].
MN T1 Plantas inoculadas con cepas Los valores mximos de PCF y PCV fueron
micorrzicas nativas Glomus sp
MC T2 Plantas inoculadas con cepas alcanzados por las plantas micorrizadas con valores de
micorrzicas comerciales Glomus 24,2580% protena cruda de follaje, sin embargo, la
clarum, Glomus manihotis y
Scutellospora diferencia en la disminucin en el contenido de protena
MCA T3 Plantas inoculadas micorrzicas cruda fue ms notoria al compararlas con las plantas
comerciales y acondicionadas
A T4 Plantas acondicionadas testigos la cuales solo alcanzaron valores para esta
T T5 Plantas controles sin variable de 18,297 y 14,126%, lo que genera una
acondicionamiento y sin
inoculacin (Testigo). diferencia de 40,11% con respecto a las plantas del
tratamiento T1.
El porcentaje de colonizacin micorrizal se evalu Con relacin a la evaluacin del contenido de
por el mtodo de McGonigle y col., (1990). Se evalu minerales en las plantas de frijol se observ que el
la colonizacin del hongo micorrzico siguiendo el porcentaje de nitrgeno y porcentaje de potasio (tabla 1)
mtodo de Phillips y Hayman (1970). El efecto mostraron diferencias significativas. Las plantas
tratamiento fue determinado por anlisis de varianza correspondientes a los tratamientos micorrizados
(ANOVA) usando un anlisis completamente lograron obtener los valores ms altos para la
aleatorizado. Las diferencias entre los tratamientos acumulacin de N y K en follaje, siendo las inoculadas
fueron confirmadas por la prueba de Tukey (HSD), con cepas nativas las que acumularon mayor contenido
utilizando el paquete estadstico SAS 2000, con un nivel de estos elementos con niveles de 4,42 % y 3,67 %
de significancia del 95%. respectivamente.

Resultados y Discusin
Los mayores niveles de porcentaje de colonizacin Tabla 1. Porcentaje de nitrgeno, potasio y fosforo en el
follaje del cultivo frjol (Vigna unguiculata (L.) Walp)
micorrizal, con valores de 85.250 %, en las plantas inoculado con cepas micorrzicas nativas y comerciales
inoculadas con micorrizas nativas, se observ que
%PN % PK %PP
T T T
cuando las plantas son inoculadas y acondicionadas, se
observa una disminucin en los niveles de colonizacin. T1 4,420a T1 3,6726a T1 0,852a

T3 3,873b T2 3,3900ab T2 0,792a

Estos resultados muestran que contrariamente a lo que
se ha sealado por no se apreci correlacin con la T2 3,743b T3 2,8757ab T3 0,770a

prdidas en la capacidad de colonizacin (3,4),

T4 3,1650c T4 2,2417b T4 0,664b
pudindose considerar que las dosis de la mezcla
utilizadas no fueron suficiente para inhibir la T5 2,769d T5 1,997 b T5 0,498c

infectividad y agresividad del hongo de colonizar los

Medias desviacin estndar seguidas con letras
tejidos radicales de la planta, mostrando un nivel
distintas son significativamente diferentes (P0,05). T:
compensatorio a la micorrizacin en el suelo. As, se ha tratamiento
sealado que existen grupos de micorrizas que necesitan
Ganancias para estos elementos en frjol a travs de
niveles de fertilizacin previos para potencializar el
la reinoculacin de cepas nativas con valores de 3,927
inculo aplicado y favorecer la micorrizacin,
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% de nitrgeno y de 6,15 % para el caso de potasio; estas diferencias se ampliaron alcanzado valores
representado ganancias que van del 15-21% en N y de diferenciales de 25-33% para N, P y Zn (tablas 12, 14 y
un 24 % en K, de manera que la micorrizacin 17) y de un 40-60% en los minerales como el K, Ca,
proporciona fuentes de nitrgeno adicionales a la Mg, Fe, Mn, y ( tablas 13, 15,16,18 y 19).
derivada por la fijacin biolgica de nitrgeno Con relacin a este punto se ha sugerido que el
[7].pudiendo ser adquirido desde sustancias orgnicas 80% del fsforo tomado por las plantas micorrizadas
por descomposicin [8,910].seala incrementos en puede llegar a suplir las necesidades de este elemento,
frjol comn a travs de la inoculacin mixta de 4,60 gr as como tambin provee a la plantas de otros macro y
de nitrgeno y 6,85 gr de potasio en comparacin con micronutrientes sealndose incrementos en soya,
frjol no inoculado donde los valores alcanzados fueron garbanzo, frjol comn en la adquisicin como
de 3,8 gr N a 4,10 gr K. Sealandose porcentaje de los nitrgeno, potasio, magnesio, cobre, calcio, boro y zinc
macroelementos N, P, K inferiores a los apreciados en que se encuentra presentes en el suelo en baja
esta investigacin, en el frijol variedad catatumbo concentraciones en su forma soluble y son activamente
inoculado con cepas nativas y comerciales, asi indica absorbidos por las hifas del hongo y transportados al
niveles de nitrgeno de 2,88y de 2,49 respectivamente. hospedero [11]. Aumento en la absorcin de Zn en
Por ltimo, para la variable porcentaje de fsforo no leguminosas micorrizadas, correlacionados con
se detectaron diferencias significativas entre los incrementos en la colonizacin hifal, nodulacin,
tratamientos T1, T2y T3. Las concentraciones de absorcin de fsforo y fijacin de nitrgeno [12].
fsforo variaron entre 0,852- 0,770. Sin embargo, Tabla 2. Porcentaje de nitrgeno, potasio y fosforo en
vainas del cultivo frjol (Vigna unguiculata (L.) Walp)
numricamente se aprecia que la micorrizacin con
inoculado con cepas micorrzicas nativas y comerciales.
cepas nativas aumento los niveles de fsforo en los
tejidos del frijol, al ser comparada con las plantas T T T
%NV %PV %KV
testigos, brind una ganancia de un 22% para este T1 89,9250 a
T1 1,9378 a
T1 0.,9378a
elemento en las planta micorrizadas. Se ha confirmado
T2 88,2678ab T2 1,7960ab T2 0.71150a
que las micorrizas asisten a las leguminosas en el
T3 87,7200ab T3 1,5793ab T3 0.67533b
aprovechamiento de fsforo, independientemente de la
T4 64,4340b T4 0,7375b T4 0,508
presencia o no, de bacterias fijadoras de nitrgeno., T5 62,698c T5 0,672c T5 0,436

obtenindose ganancias entre un 40 100% de fsforo,

en plantas leguminosas inoculadas con cepas Tabla 3. Porcentaje de calcio, magnesio, hierro y
manganeso en vainas del cultivo frjol (Vigna
seleccionadas de micorrizas. unguiculata (L.) Walp) inoculado con cepas
Situacin similar se present con relacin a la micorrzicas nativas y comerciales.
evaluacin del contenido de minerales en las vainas, el T %Ca T %Mg T %FeV T %Mn
V V V
anlisis de varianza mostr diferencias significativas, a T1 1.003a T1 0.5866 T1 209.29a T1 60.734a
pesar de que las plantas micorrizadas por cepas nativas 2a
T2 0.985a T2 0.5822 T2 203.80a T3 58.728b
y comerciales exhibieron valores similares para el 8a
T3 0.725b T3 0.5453 T3 182.37b T2 52.189c
contenido de N, K, P, Ca, Mg, Fe y Mn, logrndose 5b
obtener diferencias bajas de 2-3 % entre estos T4 0.592c T4 0.592c T4 110,91c T4 43.711d

tratamientos, pero al compararse con las plantas testigo T5 0,487 5 0,487 c T5 83.46d T5 42.779d
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Se ha sealado valores nutricionales para Vigna
unguiculata (L) Walp de 76 mg/100g de contenido de
calcio y de 5,7 mg/100g de hierro, segn anlisis
nutricional indicado por FONAIAP [13]. Y de 4,83 de
Zn, 100,81 mg/100g de calcio, 118,31 mg/100g de
magnesio y de 75,92 mg/100g de hierro [14].
Apreciando el comportamiento diferente de la
variedad Catumbo del frijol, confirma que el grado de
efectividad en la micorrrizacin vara segn el grupo de
hongos que estn interactuando con la planta hospedera,
ya que utilizados cepas comerciales integradas por
Gigaspora margarita y Entrophopora colombiana y
Glomus manihotti como biofertilizantes en Vigna
unguiculata, estas resultaron ser mejores inoculantes,
que la inoculacin que con cepas nativas. Y resalta la
necesidad de hacer seleccin del material a utilizar
como biofertilizantes, que este posea una capacidad
reproductiva alta que los propgulos germinen con un
mayor grado de efectividad, que las hifas sean capaces
de colonizar el tejido del hospedero sino tambin que
sea capaz de persistir en el suelo con un grado de
supervivencia, sin tener necesidad de reinocularlo en el
suelo [15,4]. Por lo que el grado de compatibilidad que
mostr la variedad Catatumbo a cepas comerciales, es
un factor importante para la seleccin de la cepa a
utilizar en el sistema suelo-planta [16].
Por lo que es necesario realizar estos ensayos a nivel
de campo para comprobar realmente el efecto y
potenciabilidad, y as verificar la persistencia de los
mismos en condiciones in situ, hacindose evaluaciones
en el tiempo de manera de visualizar la permanencia,
persistencia en el tiempo y funcionabilidad al
introducirlo bajo las condiciones edficas y climticas
donde se establece este rubro. Por lo que abre la
posibilidad de incrementar el rendimiento del cultivo de
frjol, utilizando o la combinacin de cepas nativas de
micorriza seleccionadas en el propio hbitat donde se
siembra el cultivo, ya que estas estn aclimatadas o
adaptadas a esas condiciones de suelos especficas,
permitindoles exhibir una gran ventaja sobre las
plantas no micorrizadas, brindando una alternativa en
suelos de baja fertilidad, promoviendo la productividad
de las leguminosas y de esta forma reducir el uso de
fertilizantes, sin embargo la produccin limitante de
inoculantes, influye sobre el uso extensivo en las
leguminosas y as exhibir una gran ventaja sobre las
plantas no micorrizadas, brindando una alternativa en
suelos de baja fertilidad, promoviendo la productividad
de las leguminosas y de esta forma reducir el uso de
fertilizantes; sin embargo, la produccin limitante de
inoculantes, influye sobre el uso extensivo en las
leguminosas.
Conclusin
Esta diferencia en cuanto a la acumulacin de
minerales en los tejidos vegetales de las plantas
inoculadas en comparacin con las plantas testigos,
marcan una contribucin significativa en la simbiosis
establecida nos da una idea de la importancia de la
suplencia de elementos bsicos para una adecuada y
satisfactoria nutricin de las plantas inoculadas con las
cepas de micorrizas efectivas. Esto ha sido atribuido a
la especializacin de las races micorrizadas en la
absorcin de nutrientes, que permite incrementar la
superficie de absorcin y por lo tanto su capacidad de
captacin de nutrientes y agua siempre ser mayor, a
diferencias de las plantas no micorrizadas, las cuales
exhiben ineficiencia en sus rganos de absorcin
[18,19]. Por lo que abre la posibilidad de incrementar
el rendimiento del cultivo de frjol, utilizando o la
combinacin de cepas nativas de micorriza
seleccionadas en el propio hbitat donde se siembra el
cultivo, ya que estas estn aclimatadas o adaptadas a
esas condiciones de suelos especficas. Generando
diferencias de un 20- 30 % en la acumulacin de
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nutrimentos en el follaje y en las vainas de un 25-33%
para el contenido de N, P y Zn y de un 40-60% en
contenido de K, Ca, Mg, Fe, Mn de las plantas
inoculadas con cepas micorrzicas nativas.
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Efecto de la inoculacin de hongos beneficos en fase de vivero en lechosa

(carica papaya l.).
Effect of fungi inoculation of benefitsnursery phase in papaya (Carica papaya L.).

Burgos Mara Esthera, Pereira Ydelfonsob, Valbuena Ma. Eugeniab,

Chacn Ana Marac, Acosta Katiuskad y Petit Belkid, Prez Evelyne
a
1Instituto Nacional de Investigaciones Agrcolas, Maracaibo, estado Zulia, Venezuela.
b
Instituto Autnomo Regional de Ambiente, Gobernacin Bolivariana del estado Zulia.
c
Instituto Universitario de Tecnologa de Maracaibo. d Universidad del Zulia, Facultad de Agronoma,
Laboratorio de Microbiologa. e Centro Socialista de Investigacin y Desarrollo Frutcola y Apcola-
CORPOZULIA.
mburgos.inia.zulia@gmail.com

Introduccin: Dentro de los frutales, la lechosa (Carica papaya L.) tiene gran importancia econmica y alimenticia, por
lo que es necesario aplicar un manejo agronmico adecuado al cultivo con la finalidad de incrementar la productividad.
Pudindose lograr esto con la aplicacin de microorganismos presentes en el suelo utilizados como biofertilizantes tienen
un triple papel como suministradores de nutrientes, fitohormonas y antagonistas de hongos fitopatgenos. Con el objetivo
de Evaluar agronmicamente el efecto de los hongos Trichoderma harzianum y Micorrizas (Glomus manihotis y
Scutellospora fulgida), como estimuladores del crecimiento en la produccin de plntulas de Lechosa (Carica papaya,
L.), se llev a cabo esta investigacin bajo condiciones de umbrculo en el Centro Socialista de Investigacin y Desarrollo
Frutcola y Apcola, (CORPOZULIA) y los anlisis de laboratorio en la Universidad del Zulia, Facultad de Agronoma,
laboratorio de Microbiologa Agrcola. Metodologa: El diseo experimental utilizado fue completamente aleatorizado,
conformado por 6 tratamientos, con 12 repeticiones. Las variables evaluadas fueron Altura de la Planta (AP), Grosor del
Tallo (GT), Nmero de Hojas (NH), Peso de la Raz (PR), Longitud de la Raz (LR), Peso Seco (PS), Contenido de
Fsforo (CF) y de Nitrgeno (CN). Resultados: Todas las plantas de Lechosa (Carica papaya L.), inoculadas con los tres
hongos (G. manihotis, S. fulgida y Trichoderma) respondieron positivamente, el desarrollo vegetativo de las mismas fue
mayor en comparacin con el testigo. Conclusiones: En este trabajo se observ que en la medida que los hongos se
establecan en el sustrato se observ un efecto marcado sobre el desarrollo de las plntulas. Al compararlas con el testigo
se observa una gran diferencia, aunque en comparacin entre los tratamientos la diferencia no fue significativa.

Palabras clave: Carica papaya, Micorrizas, Plntulas, Trichoderma

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Caracterizacin de cepas nativas de Beauveria bassiana asiladas de plantaciones del

cultivo caf (Hypothenemus hampei) en 3 municipios del Estado Falcn. Venezuela.
Characterization of native strains of Beauveria bassiana isolated from plantations of coffee crop
(Hypothenemus hampei) in 3 municipalities of Falcon State Venezuela

Rodrguez Naila, Garcs Englys, Noguera Alfredo, Gonzlez Mercedes, Madriz Solsire y Bermdez Yetliza
Laboratorio de Biocontroladores Jos Leonardo Chirino Coro- Estado-Falcn del INSAI.
jaivick@gamil.com

Introduccin: En la bsqueda de cultivos libres de agrotxicos y de mayor calidad los hongos entomopatgenos se han
convertido en una alternativa para ayudar a solucionar los problemas del uso incontrolado de agroqumicos en la
agricultura. Con el objetivo de caracterizar las cepas del entomopatgenos Beauveria bassiana se realizaron aislamientos
en los municipios Bolvar, Miranda y Petit del Estado Falcn. Metodologa: Se tomaron muestras de granos en
plantaciones de caf a los cuales se le observaba un punto blanco en forma de talco en la corteza, indicio este de la
presencia del hongo Beauveria bassiana. Estas muestras fueron llevadas al laboratorio de Biocontroladores Jos
Leonardo Chirino Coro- Estado-Falcn del INSAI, donde fueron primeramente desinfectados con hipoclorito al 1%,
luego lavados con agua destilada estril, seguidamente se procedi a tomar una muestra con ayuda de una aguja
entomolgica de la parte que tena la coloracin blanquecina, teniendo cuidado de tomar un solo conidio del hongo y se
sembr en agar potato dextrosa (PDA) se realizaron 5 rplicas, se colocaron en incubacin con una temperatura de 21 2
C por un tiempo de 14 das. Resultados: se lograron aislar 5 cepas las cuales se caracterizaron por presentar una
apariencia algodonosa a polvorienta, blanca cremosa y a nivel microscpico se observaron conidios hialinos, redondeados
y unicelurares. Esto se realiz con la finalidad de obtener cepas potenciales para el control biolgico de una de las
principales plagas que afectan el cultivo de caf, la broca del grano de caf Hypothenemus hampei (Ferrari).
Conclusiones: El uso de cepas nativas aisladas de hongos entomopatgenos permitir obtener mejores condiciones de
estabilidad y facilidad en su reproduccin, lo cual conlleva a una mejor efectividad del hongo sobre el insecto plaga. Sin
embargo es necesaria que estas cepas sean evaluadas a nivel de campo para probar su efectividad.

Palabras clave: entomopatgenos, Beauveria bassiana, caf

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PARASITOLOGA
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Prevalencia de enteroparsitos en habitantes de una comunidad rural

del estado Bolvar, Venezuela
Prevalence of enteroparasites inhabitans from rural communiy of Bolvar State, Venezuela

lvarez Eneida, Rojas Jessika, Blanco Ytalia, Amaya Ivn, Devera Rodolfo
Grupo de Parasitosis Intestinales, Departamento de Parasitologa y Microbiologa, Escuela de Ciencias de la
Salud, Universidad de Oriente, Ncleo Bolvar, Ciudad Bolvar, Estado Bolvar, Venezuela.
rodolfodevera@hotmail.com

Introduccin. Las parasitosis intestinales constituyen un problema de salud pblica, especialmente en los pases donde
prevalecen zonas deprimidas social y econmicamente. En julio de 2011 se realiz un estudio transversal para determinar
la prevalencia de parsitos intestinales en una muestra de habitantes de la comunidad rural La Carolina del estado
Bolvar. Metodologa. De cada habitante participante se obtuvo una muestra fecal la cual fue analizada mediante las
tcnicas de examen directo, Kato, sedimentacin espontnea y coloracin de Kinyoun. Resultados y discusin. De los
115 habitantes evaluados, 97 resultaron parasitados para una prevalencia de 84,3%. Segn la edad todos los grupos fueron
afectados por igual (2 =0,812 g.l.: 6 p>0,05) aunque la mayor cantidad de casos (52 habitantes) se encontraron en el
grupo de 0-9 aos. Ambos gneros fueron afectados por igual (p>0,05). Se observ 54,6% de poliparasitismo y 45,4% de
monoparasitismo. Nueve especies de enteroparsitos fueron identificados, siendo los protozoarios ms prevalentes
(94,8%) que los helmintos. De los protozoarios Blastocystis spp. fue el parsito ms prevalente con 65,2%. No se aislaron
coccidios intestinales. Las asociaciones parasitarias ms comunes fueron entre protozoarios, destacndose la de
Blastocystis spp con Giardia intestinalis (22,6%) y la de Blastocystis spp. con Endolimax nana (15,1%). Conclusin. Se
determin una elevada prevalencia de parsitos intestinales (84,3%) en la comunidad rural La Carolina del estado
Bolvar, sin diferencias con relacin a la edad y el gnero.

Palabras clave: parsitos intestinales, Blastocystis spp., comunidad rural.

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Estudio clnico - epidemiolgico de parasitosis intestinal en nios y adolescentes de

una comunidad rural del estado Falcn - Venezuela
Clinical epidemiological study of intestinal parasitosis in children and teenagers of a rural
community in the state of Falcn Venezuela

Humbra de Heyliger Leylaa, Toyo Mariellys, Cazorla Dalmiro, Morales Pedro

a
Universidad Nacional Experimental Francisco de Miranda.

Introduccin: La parasitosis intestinal contina siendo un problema de salud pblica en pases subdesarrollados y en vas
de desarrollo, donde existe un nivel de vida pobre e inadecuadas condiciones higinicas sanitarias. El objetivo de este
estudio fue determinar las caractersticas clnicas-epidemiolgicas de esta patologa en nios y adolescentes de una
comunidad rural del estado Falcn, Venezuela. Metodologa: Entre Marzo-Julio de 2011, se evaluaron 133 muestras
fecales mediante anlisis coproscpico (MIF, Kinyoun, Kato-Katz) y 113 por tcnica de Graham. La evaluacin clnica se
realiz mediante examen fsico e interrogatorio a padres y representantes. Para la identificacin del nivel socioeconmico
y factores de riesgo se utiliz el mtodo de Graffar modificado y ficha encuesta-epidemiolgica, respectivamente.
Resultados y discusin: La prevalencia global para parasitosis intestinal fue de 70,7% (94/133). Los mtodos
coproscpicos permitieron identificar 10 especies de parsitos y/o comensales, siendo Blastocystis spp (54,9%);
Cyclospora cayetanensis (23,3%) y Cryptosporidium sp. (20,3%) los protozoarios ms frecuentes y entre los helmintos
Enterobius vermicularis (23%). El prurito anal (p=0,01) y secrecin vaginal (p= 0,03) fueron los sntomas
significativamente asociados con enterobiasis. El mtodo Graffar revel que la mayora de los individuos parasitados
pertenecan al estrato IV de pobreza. Los factores de riesgo asociados con la parasitosis intestinal, tal como lo sugieren sus
elevados Odds Ratios (OR), fueron: no lavarse las manos antes y despus de la comida [(OR= 53,67; OR= 64,5
(enterobiasis)], prurito anal [(OR= 3,25 (enterobiasis)], hacinamiento [OR= 3,7 (enterobiasis)], la disposicin de excretas
en campo raso (OR= 3,59), jugar con mascota (OR= 2,97) y la poca frecuencia de higiene del hogar (OR= 2,59).
Conclusin: Se concluye que los factores potenciales que hacen posible el mantenimiento endmico de parasitosis
intestinal en nios y adolescentes de Arenales estn relacionados directamente con las condiciones socioeconmicas de
pobreza y la carencia o deficiente aplicacin de medidas higinicas sanitarias.

Palabras clave: Parasitosis intestinal, epidemiologa, manifestaciones clnicas, nios y adolescentes, Venezuela.
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Cryptosporidium spp. y otros enteroparsitos de inters mdico en muestras de agua

del rio Orinoco en las adyacencias de Ciudad Bolvar
Cryptosporidium spp. and other enteric parasites of medical interest in water samples of the
Orinoco River in the vicinity of Ciudad Bolivar

Amaya Ivn, Rodrguez Nathalia, Marcano Arelis, Rojas Jos

Departamento de Parasitologa y Microbiologa. Escuela de Ciencias de la Salud
Dr. Francisco Battistini Casalta. Universidad de Oriente, ncleo Bolvar

Introduccin: Las enfermedades diarreicas causadas por el consumo de agua y alimentos contaminados por
enteropatgenos continan siendo causa importante de morbilidad en los pases con escaso nivel de desarrollo. La causa
ms frecuente de diarreas es la bacteriana, que representa del 60 al 85% de los casos, los parsitos representan el 10% y un
5% estn producidas por virus. Aunque habitualmente cursa de forma benigna, pueden aparecer complicaciones, siendo
excepcional la mortalidad asociada esta enfermedad. Este estudio tuvo como objetivo; determinar la presencia de
enteroparsitos de inters mdico en muestras de agua del ro Orinoco, Ciudad Bolvar, estado Bolvar durante el periodo
Mayo a Agosto de 2012. Metodologa: Se utiliz un estudio de tipo prospectivo-descriptivo y de campo, regido por las
normas COVENIN. Se investigaron 60 muestras entre los meses mayo-agosto 2012; del agua del ro Orinoco, en Ciudad
Bolvar, Estado Bolvar, para evidenciar la presencia de enteroparsitos de inters medico; muestras que fueron
procesadas en el laboratorio de coproparasitologa del departamento de Parasitologa y Microbiologa de la Escuela de
Ciencias de la Salud de la Universidad de Oriente Ncleo Bolvar. Resultados: Se encontr que 75,0% se encontraban
contaminadas por enteroparsitos. Cryptoporidium spp. (35,0%), fue el parsito ms frecuente, seguido de Entamoeba
spp. (33,3%) y Giardia spp. (15,00%). Con respecto al pH y porcentaje de materia orgnica de las muestras evaluadas se
obtuvo un promedio de 6,1 y de 39.6% respectivamente, coincidiendo los valores de pH ms bajos y materia orgnica
ms altos en las muestras de agua con mayor contaminacin parasitaria. Conclusin: La contaminacin parasitaria de las
aguas del ro Orinoco fue alta, relacionndose con el aumento de materia orgnica y acidificacin de los cuerpos de agua.

Palabras clave: Enteroparsitos Ro Orinoco Cryptosporidium spp.

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Cryptosporidium spp. y otros enteroparsitos en aguas de consumo del geritrico

Narciso Fragachan. Ciudad Bolvar, estado Bolvar
Cryptosporidium spp and other intestinal parasites in drinking water of Geriatric Narciso
Fragachan. Ciudad Bolivar, Bolivar State

Blanco Ytalia, Amaya Ivn, Urbez Arnaldo, Devera Rodolfo

Dpto. Parasitologa y Microbiologa. Escuela de Ciencias de la Salud Dr. Francisco Battistini Casalta.
Universidad de Oriente, ncleo Bolvar

Introduccin: Las parasitosis intestinales por protozoos y helmintos constituyen una de las formas de infeccin ms
comunes alrededor del mundo; y aunque la tasa de letalidad es baja, estas infecciones constituyen un importante
problema de salud pblica debido a su alta prevalencia y a sus implicaciones sanitarias. Este estudio tuvo como objetivo
determinar la presencia Cryptosporidium spp. y otros enteroparsitos en aguas de consumo del Geritrico Narciso
Fragachan en Ciudad Bolvar, estado Bolvar. Metodologa: Se utiliz un estudio de tipo prospectivo-descriptivo y de
campo, regido por las normas COVENIN. Se investigaron 40 muestras entre los meses mayo-agosto 2012; del agua de los
tanques y filtros del geritrico, en Ciudad Bolvar, estado Bolvar, para evidenciar la presencia de Cryptosporidium spp. y
otros enteroparsitos de inters medico; muestras que fueron procesadas en el laboratorio de coproparasitologa del
departamento de Parasitologa y Microbiologa de la Escuela de Ciencias de la Salud de la Universidad de Oriente
Ncleo Bolvar. Resultados: El parsito ms frecuente fue a Entamoeba coli (56,5%), seguido de Endolimax nana (31%),
Cryptosporidium spp se ubic en el tercer lugar de frecuencia (22,5%), seguido de Giardia intestinalis. (16,5%)
Conclusiones: Se verific una alta frecuencia de contaminacin con enteropatgenos que ponen en riesgo sanitario a los
adultos mayores de la institucin estudiada.

Palabras clave: Parasitosis intestinales adultos mayores contaminacin hdrica Entamoeba coli Cryptosporidium
spp
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Control de calidad externo en el diagnstico de la Malaria en laboratorios pblicos de

Ciudad Bolvar, estado Bolvar
External quality assessment in the diagnosis of malaria in public laboratories in Ciudad Bolivar,
Bolivar State

Blanco Ytalia, Linero, Luis E., Amaya Ivn, Devera Rodolfo

Dpto. Parasitologa y Microbiologa. Escuela de Ciencias de la Salud Dr. Francisco Battistini Casalta.
Universidad de Oriente, ncleo Bolvar

Introduccin: La malaria sigue siendo un problema de salud pblica en ms de 100 pases, implicando un riesgo para
ms de 2.400 millones de personas, el 40% de la poblacin mundial est expuesta; Venezuela, no escapa a esta situacin,
presentando cifras crecientes ao a ao, no solo de morbilidad sino de mortalidad. El objetivo de esta investigacin fue
aplicar un programa de control de calidad externo para el diagnstico de malaria en centros asistenciales pblicos de
Ciudad Bolvar - estado Bolvar. Metodologa: Durante el periodo septiembre de 2012 a Mayo de 2013, donde se
convoc a participar a todos los laboratorios pblicos que hicieran el diagnstico de rutina de malaria, slo 6 (67%)
aceptaron participar en el programa. De este grupo se encuestaron 20 bioanalistas, distribuidos en los 6 laboratorios
denominados por letras de la A a la F. Para valorar el desempeo de las diferentes partes en el funcionamiento del
laboratorio clnico se dise y utiliz un instrumento para recolectar informacin sobre cumplimiento de protocolos
estandarizados para diagnstico de malaria de la Organizacin Mundial de la Salud y de las instancias competentes del
Ministerio del poder popular para la Salud. La validacin correspondi a expertos en el rea, con un nivel de significancia
estadstica de 95%. Cont con el aval de la Direccin de Malariologa del Instituto de Salud Pblica del estado Bolvar. Se
emplearon tems dirigidos a las diferentes fases del proceso de diagnstico (pre-analtica, analtica y post-analtica).
Adems se estudi la efectividad diagnstica mediante la observacin por parte de los bioanalistas participantes de
lminas previamente identificadas. Resultados: La calificacin general del desempeo de los laboratorios fue regular, se
identificaron problemas de diagnstico microscpicos referidos a errores en la positividad de las lminas, identificacin de
estadios evolutivos y diferenciacin de especies. Conclusin: Se evidenciaron fallas de seguimiento de protocolos en
todos los laboratorios estudiados y poca efectividad diagnstica en el reconocimiento de estadios parasitarios.

Palabras clave: Diagnstico malrico Control de calidad externo laboratorios - Clnicos pblicos
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Evaluacin del efecto del glucantime en aislados clnicos venezolanos

provenientes de pacientes con leishmaniasis cutnea difusa
Glucantime effect evaluation on clinical Venezuelan isolates from patients with cutaneous diffuse
leishmaniasis

Orue Andreaa, Rodrguez Norisb, Mendoza-Len Alexisc

a
Laboratorio de Bioqumica Celular, b IVIC; Laboratorio de Ingeniera Gentica, Instituto de Biomedicina,
UCV; c Laboratorio de Bioqumica y Biologa Molecular de parsitos, IBE-UCV

Introduccin: En Venezuela se ha reportado la presencia de las formas clsicas de la leishmaniasis, al igual que casos de
leishmaniasis cutnea difusa (LCD); causada en el Viejo Mundo por la especie Leishmania (Leishmania) aethiopica y en
el Nuevo Mundo por L. (L.) amazonensis. La clnica de esta afeccin es muy similar a la lepra, presentndose diferentes
lesiones no ulcerosas, nodulares o en placas, que se extienden por extensas superficies del cuerpo. La densidad parasitaria
es muy elevada a nivel de las lesiones y su evolucin es crnica confundindose a menudo con infecciones causadas por
parsitos resistentes a antimoniales pentavalentes. En este trabajo, evaluamos la posible resistencia a antimoniales de un
par de aislados de Leishmania provenientes de pacientes con diagnstico de LCD, que recibieron durante aos (10 aos)
diversos tratamientos contra la leishmaniasis en el Instituto de Biomedicina-UCV. Metodologa: DNA total de
promastigotes de diferentes especies de referencia de Leishmania spp., al igual que el DNA de los aislados indicados, fue
obtenido y utilizado en un ensayo de PCR para su identificacin empleando la sonda L280. 1 Posteriormente, se llev a
cabo una evaluacin in vitro e in vivo utilizando infecciones experimentales en ratones BALB/c, del efecto de glucantime
sobre estos aislados clnicos. Resultados: Los aislados en estudio fueron identificados como L. (L.) amazonensis. De
igual forma, se determin que los mismos eran susceptibles a glucantime en experimentos in vitro. Los experimentos in
vivo confirmaron el este resultado, encontrndose que los ratones presentaban una disminucin en el tamao de las
lesiones al ser tratados durante 20 das consecutivos con la droga. Conclusin. Los resultados indicados nos permiten
concluir que estos aislados de pacientes con LCD no son resistentes a glucantime y probablemente, los fallos teraputicos
se deban a caractersticas propias de los pacientes. Financiamiento: CDCH-UCV.

Palabras clave: Glucantime, leishmaniasis cutnea difusa, Leishmania, resistencia

Referencias.
Oru A. et al. (2008). Revista de la Soc. Venezolana de Microbiol. 28:6-13
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Prevalencia de coccidios y Microsporidios intestinales en una comunidad indigena de

Perij, Venezuela.
Prevalence of intestinal coccidia and Microsporidia in an indigenous community of Perij,
Venezuela

Rivero Zulbeya, Bracho Angelaa, Huerta Karenb, Gonzlez Jorelysb, Uribe Ismaelb
a
Docentes de Prctica Profesional de Parasitologa de la Escuela de Bioanlisis de LUZ. bLicenciados en
Bionlisis

Introduccin: Los coccidios y Microsporidios intestinales son microorganismos intracelulares obligados causantes de
diarreas en personas inmunocomprometidas, se tienen pocas referencias de la situacin en individuos inmunocompetentes.
Metodologa: Con la finalidad de determinar la prevalencia de coccidios y Microsporidios intestinales en individuos de
una comunidad indgena, se analizaron 145 muestras fecales de personas de ambos sexos, aparentemente sanas, con
edades comprendidas entre 5 meses y 86 aos de la comunidad Yukpa de Sherepta en la Sierra de Perij, Estado Zulia,
Venezuela. Se analiz una muestra fecal por individuo, la cual fue sometida al exmen macroscpico y microscpico con
solucin salina fisiolgica y lugol, concentracin por formol-ter, coloraciones de Kinyoun y Gram-Cromotropo.
Resultados: Se identific Isospora belli en 3 individuos (2,07%), Cryptosporidium spp. en 2 (1,38%), Cyclospora
cayetanensis en 1 (0,69%) y esporas de Microsporidios en 5 personas (3,45%). La mayora de los infectados con coccidios
y Microsporidios intestinales (9/11) presentaron asociaciones con otras especies parasitarias, principalmente protozoarios.
Un alto porcentaje (54,54%) de los portadores de coccidios y Microsporidios, present muestras de consistencia diarreica
o liquida con moco; tratandose adems de personas incluidas en grupos de riesgo para sta parasitosis (nios y ancianos).
Conclusiones: Se resalta la necesidad de efectuar el diagnostico mediante coloraciones especiales de coccidios y
Microsporidios intestinales, an en individuos inmunocompetentes, como los indgenas estudiados.

Palabras clave: Coccidios intestinales, Microsporidios, Indgenas.

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Prevalencia de Blastocystis spp. y otros enteroparsitos en habitantes del Municipio

Sucre. Estado Zulia. Venezuela.
Prevalence of Blastocystis spp. and other intestinal parasites in habitants of Sucre Municipality.
Zulia State. Venezuela.
Rivero Zulbeya, Bracho Angelaa, Uribe Ismaelb, Montao Shellyb, Vilchez Antonietab, Villalobos Rafaelc.
a
Docentes de Prctica Profesional de Parasitologa de la Escuela de Bioanlisis de LUZ, bLicenciados en
Bioanlisis, cDocente de Medicina Tropical de la Escuela de Medicina de LUZ.

Correspondencia autor principal: Rivero Zulbey

Email: zulbeyrivero@gmail.com

Introduccin. temporal de lugol. El resto de la muestra se preserv

Los protozoarios constituyen un grupo numeroso e
importante dentro de los parsitos intestinales, variando
su prevalencia y patogenicidad de acuerdo a ciertos
factores propios del agente o del hospedero [1].
Blastocystis spp. es uno de ellos, siendo considerado un
protozoario emergente [2]. La prevalencia mundial de
Blastocystis spp. en pases sub-desarrollados seala
cifras superiores al 50% [2]; en Amrica latina es uno
de los parsitos intestinales mayormente reportado [1] .
En vista de su elevada frecuencia y algunas incgnitas
relacionadas con sus variantes morfolgicas, se decidi
determinar la prevalencia de Blastocystis spp., y otros
enteroparsitos en habitantes del municipio Sucre,
estado Zulia, Venezuela.
Material y mtodos.
Se diseo un estudio de naturaleza descriptiva,
prospectiva, no experimental [3]. La poblacin en
estudio estuvo representada por todos los individuos del
Municipio Sucre que asistieron a las Jornadas Cvicas
realizadas en dicha entidad en Marzo 2012. El
municipio Sucre esta ubicado en el extremo Sur del
Lago de Maracaibo, con una superficie de 1.174 km.
La muestra estadstica la constituyeron 68 individuos,
de cualquier edad y sexo, que aportaron su muestra
fecal durante la jornada. En el sitio de recoleccin de las
muestras se realiz el examen fsico-qumico y
macroscpico, as como, el examen al fresco con
solucin salina fisiolgica al 0,85% y coloracin
con formol salino al 10%; para ser trasladadas a
Maracaibo y realizar en el Laboratorio de Parasitologa
de la Escuela de Bioanlisis de LUZ, la tcnica de
concentracin de Ritchie (Formol-ter). Para relacionar
las variables en estudio; se utiliz el programa
estadstico SPSS, versin 10.0, mediante la prueba de
Chi cuadrado (2) con correccin de Yates, a un nivel
de significancia p 0,05.
Resultados y discusin.
Aportaron su muestra fecal 68 individuos, 32 del
sexo femenino y 36 del sexo masculino, con un rango
de edades entre 7 meses y 70 aos. Del total de
individuos estudiados, se obtuvo una prevalencia
general de parasitados del 60,29% (41/68). 35
individuos estaban poliparasitados (85,36%), mientras
el resto solo present una especie parasitaria (14,64%).
El mayor porcentaje de parasitados fu representado por
el sexo masculino con 33,82%, mientras que el sexo
femenino present un 26,47% de parasitados, sin
diferencia estadsticamente significativa entre ellos. La
especie que predomin fue el cromista Blastocystis spp.,
con un 35,29%, seguido de Endolimax nana, quien
dentro de los comensales intestinales present la mayor
prevalencia con 20,58%. El patgeno Giardia
intestinalis represent un 14,70%, el complejo
Entamoeba (E. histolytica/dispar/moshkovskii) 13,23%,
Entamoeba coli 13,23% e Iodamoeba butschlii con un
1,47% de prevalencia. Entre los helmintos, se
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detectaron Ascaris lumbricoides y Trichuris trichiura
con un 30,82% y 26,07% respectivamente. Cuando se
realiz el anlisis de especies de enteroparsitos por
grupo etario (Tabla 1); se observa que el estrato 0-10
aos fue el grupo donde el taxn Blastocystis spp.
present el mayor nmero de casos (18), as mismo
ocurri con el resto de las protozoosis y helmintiasis,
que fueron ms frecuentes en este grupo etario, aunque
no se detect diferencia significativa entre los grupos
estudiados.
Tabla 1. Prevalencia de Blastocystis sp., y otros
enteroparsitos segn grupo etario en individuos del
Municipio Sucre. Estado Zulia. 2012.*
Grupo Etario
Especie
Total
11 a 20
casos) en las heces de consistencia pastosa. En las heces
diarreicas y liquidas solo se encontr un caso de la
forma vacuolar en cada consistencia. No se observaron
formas ameboides, granulares ni quistes del parsito en
las muestras evaluadas. Al analizar las asociaciones ms
frecuentes entre ste cromista y otros parsitos, se
evidenci que las principales fueron Blastocystis spp.+
Endolimax nana y Blastocystis spp + G. intestinalis +
T. trichiura, como puede apreciarse en la Tabla N 2. El
Municipio Sucre presenta un clima hmedo y tropical lo
que proporciona un suelo hmedo y ptimo para la
evolucin y propagacin de diferentes formas
evolutivas parasitarias, lo que podra explicar la alta
prevalencia de parsitos patgenos y comensales
intestinales que refleja el presente estudio. Se observo

21 a 30
0 a 10

31

Parasitaria un predominio de casos de protozoosis (67) sobre las

helmintiasis (39); a pesar de estar incluidos en el
Blastocystis spp. 18 2 1 3 24 estudio un nmero importante de nios. En trminos
Endolimax nana 10 2 0 2 14 generales esto puede relacionarse con el hecho de una
Giardia menor exposicin de los individuos adultos con los
9 1 0 0 10
intestinalis suelos contaminados en comparacin con los nios;
** Complejo pero un mayor riesgo de transmisin hdrica, la va ms
8 0 0 1 9
Entamoeba sugerida de contaminacin humana con protozoarios
Entamoeba coli 7 2 0 0 9 [4,5]. Adems, muchos de los nios infectados con
Iodamoeba helmintos, tambin los estaban por protozoarios. En los
1 0 0 0 1
butschlii individuos estudiados predomin el poliparasitismo,
Ascaris esto refleja una alta susptibilidad a las enteroparasitosis
18 1 1 1 21
lumbricoides asociadas a las pobres condiciones socio-sanitaria en las
Trichuris cuales habita la poblacin, lo cual favorece los ciclos
14 2 1 1 18
trichiura continuos de infestacin de helmintos y protozoarios
*Incluidas las asociaciones parasitarias [6]. Al evaluar la presencia de Blastocystis spp., se
**Complejo Entamoeba: E. histolytica/E.dispar/E.moshkovskii
(no se efectuaron tcnicas especficas para diferenciar entre observ un predominio de este cromista, siendo el taxn
ellas y no se observaron trofozotos hematfagos que ms frecuentemente con un 35,29%, lo que coincide
confirmasen a E. histolytica)
p0,05 con numerosas investigaciones realizadas nacional e
internacional [2,7-9]. Al correlacionar las variables de
grupo etario y parasitosis intestinal, el estrato de 0 a 10
Al evaluar las variantes morfolgicas de
aos present el mayor nmero de individuos
Blastocystis spp. y la consistencia de la muestra fecal,
parasitados para todas las especies detectadas en el
se detect la forma avacuolar (15 casos) y vacuolar (12
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presente estudio. Un estudio que se llev a cabo en la
Isla de Guaraguao del Estado Anzotegui, la poblacin
de 1 a 12 aos presento una alta incidencia de parsitos
intestinales reportando un 91,2% [10]. Esto pudiera
explicarse porque este grupo se considera ms
susceptible a las parasitosis intestinales debido a la
carencia de medidas higinicas (tpico de la infancia),
una mayor posibilidad de movimiento y juego en la
escuela o en entornos contaminados [11]. En la presente
investigacin el parasitismo disminuy, al incrementar
observar que E. nana se encontr relacionado al
cromista en 10 individuos. Esta asociacin ha sido
descrita por otros autores [14,15] y se piensa est
condicionada porque ambos microorganismos presentan
el mismo mecanismo de transmisin.
Tabla 2. Asociaciones entre Blastocystis spp y otros
enteroparsitos detectadas en los habitantes del
Municipio Sucre Estado Zulia. 2012.

Frecuencia
la edad de los individuos estudiados. Distintos
Especies Parasitarias %
investigadores sugieren que a medida que aumenta la
edad en las personas sintomticas, los valores de
infeccin disminuyen, mientras que en los B. spp + E. nana 4 20,0

asintomticos, la infeccin tiende a aumentar por la B. spp + G. intestinalis + T.t 2 10,0

edad, situacin dada porque los pacientes podran B. spp + A.l + T.t 1 5,0
generar una respuesta inmune despus de un primer
B. spp + Complejo Entamoeba 1 5,0
contacto con los parsitos, por lo que se constituiran en
B. spp + G. intestinalis 1 5,0
portadores asintomticos [12]. En cuanto a la relacin
entre la consistencia de la muestra y la forma evolutiva B. spp + A.l + * Complejo Entamoeba 1 5,0
encontrada de Blastocystis spp., se encontr en mayor B. spp + A.l + G. intestinalis 1 5,0
frecuencia de las forma avacuolar y vacuolar en heces
B. spp + E.nana + A.l 1 5,0
pastosas y en todas las consistencias fecales en general,
B. spp + E.coli + T.t 1 5,0
demostrando que son las variantes ms comunes
reportadas en humanos. Hernndez y cols [13], tambin B. spp + E.coli + E.nana 1 5,0

refieren el predominio de formas vacuolares en B. spp + E.nana + T.t 1 5,0

pacientes sintomticos y asintomticos estudiados en el B. spp + E.nana + I. butschlii 1 5,0
estado Carabobo, Venezuela. En relacin a la
B. spp + E.nana + Complejo Entamoeba + A.l 1 5,0
epidemiologa de Blastocystis spp. en la comunidad
B. spp + E.nana + E.coli + * Complejo Entamoeba 1 5,0
estudiada, se pudo observar que el parsito en escasas
ocasiones se encontr como parasitosis nica (16,67%), B. spp + E.nana + A.l + T.t 1 5,0
pues en la mayora de los casos se encontr asociado a B. spp + E.coli + Complejo Entamoeba + A.l + T.t 1 5,0
otros parsitos comensales y/o patgenos. Tal situacin
ha sido descrita anteriormente por Amaya y cols. [14],
Al:Ascaris lumbricoides, Tt: Trichuris trichiura
quienes tambin refieren su hallazgo del parsito en p0,05
29,52% como parsito nico y 70,48% asociado a otros
enteroparsitos. Al analizar las especies ms
frecuentemente asociadas a Blastocystis spp., se pudo
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Conclusiones.
Blastocystis spp. sigue siendo un parsito
controversial, la informacin en la literatura en relacin
a diversos aspectos relacionados con su morfologa,
biologa y posible papel patgeno no son concluyentes.
Sin embargo, en la presente investigacin se confirma la
elevada frecuencia de las formas avacuolares y
vacuolares en la muestra fecal, as como una alta
asociacin de este microorganismo con E. nana. En
relacin al resto de los enteroparsitos detectados en la
comunidad, por las elevadas prevalencias
poliparasitismo observado, se concluye que poseen
deficientes hbitos higinico-sanitarios y condiciones
geogrficas y ecolgicas propicias para la diseminacin
de las parasitosis intestinales.
Palabras clave: Blastocystis spp., enteroparsitos,
consistencia fecal.
Referencias:
1. Devera R, Hernndez J, Ramsay M, Requena I,
Salazar C. Prevalencia de Blastocystis hominis en
vendedores ambulantes de comida del municipio
Caron, Estado Bolvar, Venezuela. Cad Sade
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2. Snchez A, Barrios E, Sardia A, Araque W,
Delgado V. Infeccin experimental de aislados
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2012; 40:67-77.
3. Arias F. El proyecto de investigacin. Introduccin
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Episteme, Caracas. Venezuela. 2006 pp. 32.
4. Agudelo-Lpez S, Gmez-Rodrguez L, Coronado
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Betancur L, y cols. Prevalencia de parasitosis
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7. Cazorla D, Acosta M, Acosta M, Morales P.
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VIROLOGIA
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Seroprevalencia de VSR en pacientes peditricos con rinitis alrgica y asma bronquial

Seroprevalence of RSV in pediatric patients with bronchial allergic rhinitis and asthma

Larreal Yraimaa, Arias Juliab, Reyes Paolac, Espina LMa, Valero Na.
a
Instituto de Investigaciones clnicas Dr. Amrico Negrette. Facultad de Medicina. Universidad del
Zulia.bPrctica Profesional de Inmunologa. Escuela de Bioanlisis. Facultad de Medicina. LUZ. c Servicio de
Pediatra. Hospital General del Sur. Maracaibo.

Introduccin: La rinitis alrgica y el asma bronquial son procesos inflamatorios crnicos de las vas respiratorias y
aunque los mecanismos que expliquen la relacin entre ambas no han sido completamente establecido, diversos estudios
han descrito la asociacin entre la infeccin por virus sincicial respiratorio (VSR) en la infancia temprana y el desarrollo
posterior de asma bronquial. La presente investigacin planteo como objetivo, determinar la prevalencia de VSR en
pacientes con asma bronquial y rinitis alrgica. Metodologa: Se estudiaron 56 pacientes asmticos con rinitis alrgica
entre 7 y 15 aos de edad. Los pacientes fueron encuestados sobre inicio de la enfermedad, caractersticas y frecuencia de
las crisis asmticas, manifestaciones clnicas y su impacto en la calidad de vida, se tomaron muestras sanguneas para
determinar anticuerpos IgG anti-VSR por la tcnica de ELISA. Resultados: Del total de los pacientes la mayora fueron
varones (74,07%) y escolares (70,37%). En el 64,2 % de los casos se refiri inicio de episodios de broncoespasmo antes
de los 2 aos de edad y el 67,8% de los pacientes presentaban crisis asmtica para el momento del estudio. En cuanto a la
rinitis alrgica, segn la clasificacin del taller rinitis alrgica y su impacto en asma (ARIA) el grupo intermitente leve
represent el 42,86 %. Con respecto a la inmunidad para VSR, el 89,28 % de los pacientes evaluados presentaron
anticuerpos IgG anti-VSR. Conclusiones: Este estudio muestra la alta seroprevalencia de VSR en nios con asma y rinitis
alrgica lo que sugiere que la infeccin previa por este virus pudiese ejercer un papel importante en la fisiopatologa de
estas enfermedades.

Palabras clave: VSR, Asma bronquial, Rinitis alrgica, Anti-VSR.

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Diversidad genotpica del virus de la hepatitis B en pacientes venezolanos co-

infectados con el virus de la inmunodeficiencia humana
Genotypic diversity of Hepatitis B Virus in Venezuelan patients co-infected with Human Immunodeficiency
Virus

Jaspe Rossana C.a, Sulbarn Yoneira F.a, Loureiro Carmen La, Martnez Nahirb, Devesa Marisola,
Rodrguez Yesseimaa, Torres Jaime R.b, Rangel Hctor R.a y Pujol Flor H.a
a
Laboratorio de Virologa Molecular, Centro de Microbiologa y Biologa Celular, Instituto Venezolano de
Investigaciones Cientficas, Apdo 20632, Caracas 1020-A, Venezuela.
a
Seccin de Infectologa, Instituto de Medicina Tropical, UCV, Caracas, Venezuela.

Introduccin: La infeccin por el virus de la hepatitis B (VHB) es ms frecuente en pacientes infectados con el virus de
la inmunodeficiencia humana (VIH) que en la poblacin general, debido a que estos virus comparten las mismas rutas de
transmisin. El propsito de este estudio fue evaluar la diversidad gentica del VHB en pacientes venezolanos
coinfectados o no con VIH-1. Metodologa: Se realiz el anlisis filogentico utilizando secuencias del antgeno de
superficie del VHB (o cpside) provenientes de 80 pacientes infectados con VHB y 28 pacientes coinfectados con VIH-1.
Resultados: Se encontraron diferencias en la distribucin genotpica del VHB entre pacientes mono-infectados y
coinfectados con VIH-1. En ambos grupos de pacientes el subgenotipo F3 fue el ms comn (12/28 en pacientes
coinfectados con VIH vs. 48/80 en pacientes mono-infectados con VHB); sin embargo, el subgenotipo F1b fue el
segundo encontrado en pacientes coinfectados con VIH (10/28 vs. 5/80, p<0.001), mientras que en los pacientes mono-
infectados con VHB fue el subgenotipo F2 (2/28 vs. 13/80). No se encontr relacin gentica entre los aislados
venezolanos del VHB F1b con aislados de otros pases de Latino Amrica, como Argentina o Chile, donde este genotipo
es comn. Adicionalmente, se encontr un VHB genotipo G (VHB/G) en un paciente coinfectado con VIH-1. El
clonamiento y secuenciacin confirm la circulacin de slo este genotipo (sin coinfeccin con otro genotipo del VHB).
Este aislado posee una insercin de 36 pb en la regin de la cpside, como esperado pero un nico codn de terminacin
en la regin pre-cpside (codn 28: G1896A). Conclusin: Estos resultados representan la primera descripcin de
caracterizacin molecular del VHB en pacientes venezolanos coinfectados con VIH, adems del primer reporte de un
VHB genotipo G en Venezuela.

Palabras clave: VHB, VIH, genotipos, VHB genotipo G

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Caracterizacin molecular de los virus dengue circulando en Venezuela

Durante el periodo 2007-2013
Molecular characterization of dengue viruses circulating in Venezuela
during the period 2007-2013

Moros Zoilaa, Pea Josa, Guerrero Davidb, Celis Argeliaa, Ramrez lvaroa, Pagano Francescaa,
Vizzi Esmeraldaa, Liprandi Ferdinandoa.
a
Laboratorio Biologa de Virus, Centro de Microbiologa y Biologa Celular. Instituto Venezolano de
Investigaciones Cientficas, Caracas. b Instituto Nacional de Higiene Rafael Rangel, Caracas.

Introduccin: El virus del Dengue (VD), es el agente causal de la fiebre del dengue (FD) considerada la ms importante
enfermedad viral transmitida al hombre por artrpodos. En Venezuela, en la ltima dcada ha ocurrido un significativo
aumento en la actividad del dengue, habindose convertido en un grave problema de salud pblica. Actualmente circulan
los 4 serotipos del VD ocasionando una hiperendemicidad con riesgo aumentado de casos de infeccin severa. Es
importante monitorear los VD circulantes por ensayos que nos permitan identificar la aparicin de nuevas variantes virales
eventualmente relacionadas con cambios en los patrones epidemiolgicos. El objetivo principal del presente trabajo fue el
evaluar molecular y filogenticamente, cepas del VD de los cuatro serotipos, con la finalidad de identificar los genotipos
circulantes en el pas y su relacin filogentica con aislados de otras regiones. Metodologa: Se amplific y secuenci el
gen de la envoltura (E) de 110 aislados de VD obtenidos de muestras positivas para infeccin por VD, provenientes de
distintas regiones del pas, mediante el uso de cebadores especficos. Se compararon estas secuencias con las reportadas
en el GenBank. Resultados: Se identificaron genticamente los genotipos de los VD circulantes en Venezuela durante el
periodo de estudio encontrndose que el genotipo circulante para VD-1 es el genotipo V, VD-2 genotipo SE
Asitico/Americano, VD-3 genotipo III, VD-4 genotipo II. Conclusiones. El anlisis filogentico de la protena E de las
muestras de este estudio y el de otros aislados seleccionados del GenBank demostr que en Venezuela actualmente para
cada serotipo de VD se observa la presencia de un solo genotipo viral. Se observaron algunos cambios puntuales en la
secuencia de aminocidos en algunas de las cepas analizadas dentro de cada serotipo. Se evidenci un posible intercambio
de cepas circulantes en Venezuela, Brasil y Colombia.

Palabras clave: Virus dengue, filogenia, genotipificacin del dengue

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Alta frecuencia de infeccin oculta por el virus de la hepatitis B en pacientes

venezolanos co-infectados con el virus de la inmunodeficiencia humana
High frequency of occult hepatitis B virus infection Venezuelan patients co-infected with Human
Immunodeficiency Virus

Sulbarn Yoneira F.a, Jaspe Rossana C.a, Loureiro Carmen L.a, Rangel Hctor R. y Pujol Flor H.a
a
Laboratorio de Virologa Molecular, Centro de Microbiologa y Biologa Celular, Instituto Venezolano de
Investigaciones Cientficas, Apdo 20632, Caracas 1020-A, Venezuela.

Introduccin: La infeccin oculta (IOB) por el virus de hepatitis B (VHB) se caracteriza por la presencia de viremia
(ADN VHB) en ausencia del antgeno de superficie (HBsAg). Se ha demostrado transmisin del virus por derivados
sanguneos de pacientes con IOB. La IOB generalmente cursa con baja viremia y por ende el diagnstico requiere de un
PCR sensible para detectar el ADN viral. En este estudio se quiso explorar la frecuencia de IOB en pacientes venezolanos
infectados con el virus de inmunodeficiencia humana (VIH). Metodologa: En 44 pacientes infectados con VIH-1 y con
HBsAg negativo, se determin la presencia o ausencia del anticuerpo anticore (anti-HBc), utilizando un ELISA comercial,
as como del ADN viral mediante amplificacin por PCR en dos rondas. Metodologa: La prevalencia de IOB fue del 18
% (8/44). Los pacientes con deteccin de ADN viral ms anti-HBc positivo se definieron como IOB residual y aquellos
con anti-HBc negativos como IOB silente. La IOB residual se detect en 3/19 pacientes (16%) y la IOB silente en 5/25
(20%). Esta prevalencia es similar a la reportada en otros pases de Latino Amrica (14-19%) y mayor que la reportada en
donantes de sangre en Venezuela (4,3%). El anlisis filogentico de la regin parcial del gen de superficie mostr al
subgenotipo F2a como el ms comn (75%) encontrado en estos pacientes. En dichas secuencias no se encontraron
sustituciones aminoacdicas relacionadas al fenotipo de infeccin oculta [M75T, Y100S, P178R], a mutantes de escape de
la vacuna [G145R o C124Y/R, C137, K141Y, D144A] a fallos de secrecin del HBsAg o a variantes de la polimerasa
[YMDD]. Conclusin: La alta frecuencia de IOB en pacientes venezolanos infectados con VIH-1 sugiere la necesidad de
realizar un diagnstico molecular del VHB en estos pacientes.

Palabras clave: Infeccin oculta, VHB, VIH, genotipos

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Evaluacin de la actividad anti-rotaviral de compuestos naturales obtenidos

de Calotropis gigantea
Evaluation of the anti-rotaviral activity of natural compounds obtained from Calotropis gigantea

Bustamante Josa, Roa Anaa, Fraile Silviaa, Fernndez ngela, Gonto Reinaa, Estrada Omarb,
Michelangeli Fabina y Ruiz Marie Christinea
a
Centro de Biofsica y Bioqumica, b Centro de Medicina Experimental -IVIC, Caracas, Venezuela

Introduccin: El rotavirus es el primer agente causal de diarrea en recin nacidos y nios en todo el mundo y se estima
que es responsable de la muerte de ms de 500.000 infantes cada ao, mayormente en pases subdesarrollados. Los
resultados de las investigaciones realizadas en nuestro pas indican que la infeccin por rotavirus representa un problema
sanitario agudo entre los venezolanos, por lo que surge la necesidad de desarrollar nuevas drogas antivirales. El objetivo
de esta investigacin consisti en evaluar la actividad anti-rotaviral de un extracto etanlico de la hoja de Calotropis
gigantea. Metodologa: Se desarrollaron varios protocolos experimentales. En tres de ellos se determin la sntesis de la
protena viral VP6 luego de incubar las clulas infectadas durante todo el ciclo de replicacin (0-18 horas post infeccin),
durante las etapas tempranas del ciclo viral (0-1 hpi) o durante las etapas posteriores a la entrada del virus a la clula (1-18
hpi). Un cuarto protocolo se aplic para estudiar el efecto del extracto sobre las primeras interacciones virus-clula previas
a la entrada. Tambin se evalu citotoxicidad del extracto y compuestos activos aislados sobre clulas MA104.
Resultados: El extracto etanlico aplicado desde 0 a 18 hpi inhibi la infeccin con una concentracin inhibitoria mxima
media (IC50) de 9,8 g/mL. Su fraccin activa fue E1 con IC50 de 3,7 g/mL para 0-18 hpi, de 4,1 g/mL para 0-1 hpi y
18,3 g/mL para 1-18 hpi. Un anlisis fitoqumico revel la existencia de al menos cuatro triterpenos activos frente a la
infeccin por rotavirus: -amirina3-O-ramnosa, - amirina3-O-ramnosa, -amirina y - amirina. -amirina y - amirina
parecieron actuar en igual medida con IC50 de 2,5 g/mL y 2,3 g/mL, respectivamente, para 0-1 hpi. Conclusin: Estos
compuestos parecen eficaces para inhibir la entrada del virus a la clula y pueden ser interesantes por su actividad
antiviral.

Palabras clave: Rotavirus, productos naturales, antivirales, Calotropis gigantea

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Aichi virus aislados en nios con diarrea aguda en la ciudad de Maracay,

durante el periodo 2012-2013
Detection of Aichi virus from children with diarrhea in Maracay city (Venezuela)
during the years 2012-2013

Pez Maraa, Fernndez Rixioa, Blanco Rutha, Breamadrid Albertob, Vizzi Esmeraldaa
a
Laboratorio Biologa de Virus, Centro de Microbiologa y Biologa Celular. IVIC. Carretera Panamericana Km
11. Caracas. Venezuela. b Fundacin Hospital Estadal de Los Samanes. Dpto. Laboratorio. Maracay. Edo Aragua

Introduccin. La gastroenteritis es uno de los padecimientos ms comunes a nivel mundial y una importante causa de
muerte, que afecta todas las edades pero principalmente la infancia. La mayora de los episodios son causados por virus,
algunos ya reconocidos, otros potencialmente asociados a cuadros diarreicos, con un papel an por definir. Entre ellos,
virus Aichi perteneciente a la familia Picornaviridae, e inicialmente asociado a gastroenteritis por consumo de ostras, ha
sido involucrado en diarreas humanas en varios continentes. Recientemente fue detectado en ros urbanos contaminados
con aguas residuales en Caracas (Venezuela), indicando la circulacin de virus Aichi en nuestra poblacin. Sin embargo,
se desconoce la tasa de circulacin en la poblacin venezolana y el significado clnico de este hallazgo. Objetivo.
Determinar la prevalencia de este agente en episodios de gastroenteritis humanas infantiles en una muestra de poblacin
venezolana. Materiales y Mtodos. Muestras de heces de 229 nios con diarrea fueron recolectadas en el Hospital Los
Samanes y Hospital Militar de la ciudad de Maracay (Estado Aragua), en el perodo comprendido entre los meses de
marzo 2012-marzo 2013. La deteccin de virus Aichi fue realizada mediante el ensayo molecular basado en dos rondas de
reaccin polimersica en cadena (PCR), previa extraccin y retrotranscripcin del genoma viral. Resultados. Se
obtuvieron 61 muestras (27%) positivas para virus Aichi. La edad mediana de los sujetos infectados con virus Aichi fue
similar a la de los afectados por diarreas por otras causas, as como tambin la distribucin por grupo etario, por sexo y
por severidad de la sintomatologa. Conclusin. Los resultados indican una amplia circulacin de virus Aichi en la
poblacin infantil y su participacin en episodios de diarrea aguda.

Palabras clave: Diarrea, virus Aichi, PCR, poblacin venezolana

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Infeccin en humanos por rotavirus P[14] y su relacin con los antgenos

de grupo histo-sanguneo
Human infection rotavirus P[14] and histo-blood group antigen

Fernndez Rixio, Angulo Luis, Vizzi Esmeralda

Laboratorio Biologa de Virus, Centro de Microbiologa y Biologa Celular. Instituto Venezolano de
Investigaciones Cientficas (IVIC). Carretera Panamericana Km 11. Caracas.

Introduccin: Los rotavirus (RV) de grupo A son la causa ms comn de gastroenteritis infantil. La entrada del virus a la
clula blanco es mediada por la interaccin del dominio VP8* de la protena VP4 con su receptor. Estudios recientes
sugieren que antgenos de grupo histo-sanguneo del hospedero (HBGA, por sus siglas en ingls) puedan funcionar como
ligandos para el dominio VP8* de rotavirus tipo P[14], poco comunes en infecciones en humanos. Este aspecto parece ser
clave para el salto de especie animal/humano. La importancia de los HBGAs como factores de susceptibilidad a la
infeccin por rotavirus an est por definirse. Objetivo: Determinar el grupo sanguneo ABO y el estatus secretor de
sujetos infectados con RV de tipo P[14]. Materiales y Mtodos: ADN genmico extrado desde cinco muestras de heces
de nios con diarrea causada por RV P[14], fueron sometidas a anlisis molecular por PCR/RFLP de los genes del sistema
ABO y FUT-2. El dominio VP8* del gen VP4 de los RV P[14] fue analizado mediante secuenciacin automatizada.
Resultados: Tres (60%) de los 5 individuos infectados con RV de tipo P[14] mostraron un genotipo AA y AO1, acorde al
grupo sanguneo A, frecuencia superior a la esperada en base a la poblacin analizada. Dos de 5 (40%) revelaron un
genotipo O1VO1V (grupo sanguneo 0). Todos revelaron un genotipo secretor (Se+), 4 de ellos en la condicin homocigota
(Se/Se) y uno en heterocigosis (Se/se). El anlisis de la secuencia aminoacdica deducida de VP8* de RV P[14], agrup
las cepas en el genogrupo PIII, junto con RV de origen animal/humano en base al perfil de afinidad para HBGAs. Los
sitios aminoacdicos involucrados en la interaccin con el antgeno A fueron conservados. Conclusin: El resultado
obtenido sugiere una correlacin entre el HBGA de tipo A y la infeccin en humanos por RV P[14].

Palabras clave: diarrea, antgenos de grupo histo-sanguneo, P[14], susceptibilidad.

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Deteccin de Bocavirus humanos en nios venezolanos con diarrea aguda

Detection of human bocavirus in Venezuelan children with acute diarrhea

Angulo Luis, Fernndez Rixio, Blanco Ruth, Vizzi Esmeralda

Laboratorio Biologa de Virus, Centro de Microbiologa y Biologa Celular. IVIC.
Carretera Panamericana Km 11. Caracas. Venezuela.

Introduccin: Bocavirus humano (HBoV) es un miembro de la familia Parvoviridae, descrito por primera vez en el 2005,
en asociacin con enfermedades respiratorias y gastrointestinales. Su relacin con la diarrea humana an no ha sido del
todo aclarada. Cuatro especies de este virus (HBoV1-4) han sido reportadas a nivel mundial. Se desconoce su prevalencia
en Venezuela. En este estudio se plantea evaluar la presencia de HBoV en nuestro pas, analizar los aislados de HBoV
desde el punto de vista molecular y estudiar su papel en las diarreas infantiles. Metodologa: Para la deteccin viral se
amplific una regin parcial del gen NS1, utilizando una reaccin en cadena de la polimerasa-anidada (nested-PCR, por
sus siglas en ingls), previa extraccin del genoma de ADN, a partir de 50 muestras fecales de nios con diarrea aguda, y
47 de nios sanos, menores de 12 aos, de los estados Aragua y Miranda. Los productos de PCR fueron sometidos a
secuenciacin automatizada. El anlisis filogentico se realiz utilizando el mtodo de unin al vecino y el modelo de
sustitucin de Kimura-2-parmetros (programa MEGA 5.1). La significancia de las diferencias fue evaluada mediante la
prueba exacta de Fisher (2 colas) utilizando el software Epi Info 3.5.1. Resultados: Fue detectada la presencia de HBoV
en 8 (16%) de las muestras analizadas a partir de nios con diarrea, de los cuales cuatro (50%) eran menores de dos aos.
Ningn nio sano result infectado, resultando una diferencia estadsticamente significativa (P=0.005) respecto al grupo
con diarrea. El estudio filogentico agrup 6 de los 8 aislados en la especie 2 (HBoV2), y dos en la especie 1 (HBoV1).
Conclusin. Los resultados demuestran la presencia de HBoV en Venezuela, principalmente la especie 2, como descrito
en otros pases, y sugieren una asociacin significativa con la diarrea aguda infantil, afectando principalmente edades
tempranas.

Palabras clave: diarrea aguda infantil, Bocavirus humano, Venezuela

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Diagnstico del virus de papiloma humano (VPH) mediante hibrido de captura y PCR
en mujeres que asisten a la consulta de despistaje de cncer cervico-uterino y VPH.
Maracaibo- Venezuela
Diagnosis of human papillomavirus (HPV) by hybrid capture and PCR in women attending
screening consultation of cervical cancer and HPV. Maracaibo, Venezuela

Castellanos Mara E.b, Mindiola Raimya, Costa de Leon Lucianab, Monsalve Franciscab,
Suarez Dayany, Atencio Ricardoa, Carrero Yenddyc, Gil Daibel
a
Laboratorio Regional de Referencia Virolgica. Facultad de Medicina. La Universidad del Zulia.
b
Ctedra de Virologa Escuela de Bioanlisis. Facultad de Medicina. La Universidad del Zulia.
c
Prctica Profesional de inmunologa. Escuela de Bioanlisis Facultad de Medicina La Universidad del Zulia

Introduccin: El cncer de cuello uterino (CaCu) es una de las principales causas de mortalidad a nivel mundial, este se
ha relacionado con la presencia del virus de papiloma humano (VPH) siendo el mismo la principal infeccin de
transmisin sexual en Venezuela y responsable de displasias o neoplasias intraepiteliales cervicales (lesin precursora de
cncer cervico-uterino). El ADN del virus ha sido detectado en un 99,7% en el tejido cervical cancergeno, se sabe que
para que el cncer se desarrolle la presencia del VPH ha sido clave. El VPH se ha clasificado en 2 grupos: de bajo riesgo
(BR) y de alto riesgo (AR) segn el potencial oncognico para el desarrollo de las lesiones neoplsicas en el cuello
uterino. La investigacin tiene como objetivo diagnosticar el virus del papiloma humano mediante hbrido de captura y
PCR. Metodologa: Se seleccionaron 53 mujeres que asistieron a la consulta de despistaje de cncer cervico uterino y
VPH. De acuerdo al historial clnico el 62,92% (36/53) de las pacientes presentaron lesiones en el cuello uterino y 32,18%
(17/53) fueron consideradas sanas (sin presencia de lesin), las lesiones con mayor prevalencia fueron las de bajo grado
(NIC I y NIC II). Resultados: Se observ que con el hbrido de captura 39,62% (21/53) de las pacientes resultaron
positivas para la presencia de VPH, mientras que para PCR lo fueron el 54,72% (29/53), los genotipos ms comunes
detectados por ambas tcnicas fueron los de alto riesgo. Conclusin: Las tcnicas moleculares en la deteccin de VPH
han demostrado ser sensibles y especficas, permitiendo dar a conocer la prevalencia del VPH y los principales genotipos
circulantes en determinadas poblaciones, as como su relacin en ser precursor de diferentes lesiones y CaCu.

Palabras clave: virus del papiloma humano (VPH), cncer de cuello uterino, PCR, hbrido de captura.
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Deteccin de Herpes Simple tipo II en mujeres indgenas del estado Zulia.

Detection of Herpes Simplex II for indigenous women in Zulia state.

Costa de Len Lucianaa, Monsalve Franciscaa, Carrero Yenddyb, Castellanos Mara E.a, Porto Leticiac,
Atencio Ricardoc, Luzardo Ana1a, Nuez Milangya, Silva Sabrinaa
a
Ctedra de Virologa Escuela de Bioanlisis. Facultad de Medicina. La Universidad del Zulia.
b
Prctica Profesional de inmunologa. Escuela de Bioanlisis Facultad de Medicina La Universidad del Zulia.
c
Laboratorio Regional de Referencia Virolgica. Facultad de Medicina. La Universidad del Zulia

Introduccin: Las infecciones de transmisin sexual (ITS) representan un problema de salud pblica, por sus
complicaciones y secuelas si no se realiza un diagnstico y tratamiento precoz. Estas infecciones se adquieren por
contacto sexual, afectan a personas de cualquier edad, incluso a los recin nacidos que pueden infectarse en el tero o al
atravesar el canal del parto. La investigacin se plante la deteccin de herpes simple tipo II en mujeres indgenas del
estado Zulia. Metodologa: Se seleccionaron 50 mujeres indgenas de distintas zonas del estado Zulia. Se tom una
muestra de hisopado cervical, la cual fue analizada a travs de Reaccin en Cadena de la Polimerasa (PCR); adems les
fue realizado un estudio citolgico para el despistaje del diagnstico clnico. Resultados: Del total de pacientes estudiadas
el 22% resulto positivo para infeccin por virus de herpes simple tipo II con edades comprendidas entre 20-43 aos, sin
sintomatologa, ni lesiones aparentes visiblemente. El 69,23% de las pacientes estudiadas presentaron inflamatorio leve
por diagnostico citolgico. Conclusin: A pesar de la ausencia de manifestaciones clnicas el 22% de las pacientes
resultaron positivas, lo que indica la presencia de una infeccin subclnica del virus herpes simple tipo II. Tomando en
cuenta que el VHS2 es considerado un factor predisponente en la gnesis de las lesiones de cuello uterino, los resultados
citolgicos no ponen en evidencia ningn tipo de neoplasia lo que podra sugerir que a posteriori las pacientes
desarrollaran algn tipo de lesin.

Palabras clave: Herpes, PCR convencional, ITS

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Varicela Zster como expresin de infeccin primaria por Virus de la Varicela:

Reporte de un caso
Varicella Sozter as primary infection with Varicella Virus: A case report

Franco-Soto J.a , Leal C.b, Rosso E.b, Snchez S.b, Sandoval Y.b.
Hospital Dr. Patrocino Peuela Ruiz. San Cristbal-Estado Tchira.
a
Infectlogo Pediatra Del Hspital Central de San Cristbal, Presidente de la filial Tchira de la Sociedad
Venezolana de Pediatra y Puericultura.
b
Estudiantes del 3er ao de Medicina de la Universidad de Los Andes. Extensin Tchira.

La varicela es una enfermedad eruptiva muy comn en la infancia. La reactivacin del virus de la varicela desde un
ganglio nervioso produce lesiones vesiculares llamadas zster. La incidencia de herpes zster es de 1 caso por cada 1.000
habitantes cada 2 aos, la incidencia anual es de 1 a 3 casos por cada 1000 habitantes en menores de 50 aos. La
frecuencia de herpes zster aumenta con la edad, aunque nios que han tenido varicela durante el primer ao de vida o
vida intrauterina tienen un mayor riesgo de desarrollar herpes zster. La incidencia de zster es menor despus de la
vacunacin contra la varicela que de la infeccin natural. El Virus de Herpes Humano tipo 3 (VHH3) se caracteriza por
que la infeccin primaria genera lesiones vesiculares costrosas (varicela) y como infeccin secundaria forma herpes
zster, aun no se han descrito casos de VHH3 como infeccin primaria del virus de la varicela ya que siempre debe haber
un contacto previo con dicho agente, debido a su tan baja incidencia se reporta el siguiente caso de una nia de 4 aos de
edad que presenta 4 das de evolucin, quien ingresa con un exantema vesiculopustular drmico doloroso, como expresin
cutnea compatible con varicela zster en el dorso de su miembro superior derecho, fiebre de 38,5 C y dolor localizado
sin antecedente de importancia a la varicela. Diagnstico diferencial imptigo ampolloso, y se le indico tratamiento con
oxacilina, aciclovir y clindamicina obtenindose una excelente evolucin, citndose como recomendacin se cita la
profilaxis temprana contra la varicela previniendo asi el desarrollo del herpes zoster posterior.

Palabras clave: Virus, varicela, exantema, dermatoma, preescolar.

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Sindrome de inmunodeficiencia adquirida en nios wayu del estado Zulia

Arelis Lleras de Torres, Hctor Villalobos, Cecilia Bernardoni, Lizmar Torres,

Karla Acero, Carlos Torres
Fundacin INNOCENS, Departamento peditrico hospital universitario de Maracaibo.
Universidad del Zulia. Venezuela.

Introduccion: En Latinoamrica, se estima que el cinco por ciento del total de las personas que viven con VIH/SIDA son
indgenas. En Venezuela, el Censo de Comunidades Indgenas 2001 registr 32 etnias, encontrndose la mayor
concentracin de indgenas en el estado Zulia (90%). La presente onvesygadcion tiene como objetivos determinar la
frecuencia de nios indgenas infectados con el VIH que asisten a la consulta de la Fundacin Innocens en el Estado Zulia.
Analizar las caractersticas clnico-epidemiolgicas de los casos y establecer medidas de prevencin. Materiales y
Metodos: se revisan las historias clnicas de 179 nios que asisten a la consulta VIH/SIDA de la Fundacin Innocens en
el Departamento Peditrico del Hospital Universitario de Maracaibo durante el periodo enero 1998 a junio 2011. Se llena
una ficha de recoleccin de datos que recoge la siguiente informacin: grupo etnico, edad, sexo, municipio de
procedencia, tipo de transmisin, orfandad, estado inmunolgico y virolgico actual y tipo de adherencia al tratamiento.
Resultados: Se registran 43(24%) nios indgenas todos pertenecientes a la etnia Wayuu con infeccin VIH SIDA,
23(53.48%) sexo femenino y 20 (46.51%) masculino, la mayora procede del Municipio Maracaibo 26 casos (60.46%). El
grupo etario predominante fue el de 4-6-aos 14 (32.55%). En 84% de los casos el tipo de transmisin fue vertical. Sin
inmunosupresin encontramos 30 (69.76%) de los nios y cargas virales indetectables se observan en 21(48.43%) casos.
Se detecto orfandad en 24 nios (55.81%). Fallas en la adherencia al tratamiento se observo en 25 (58.13%) nios.
Conclusiones una cuarta parte de los nios que ingresan a la consulta son indgenas Wayuu que adquieren la infeccin
por transmisin materno fetal, los centros poblados mas grandes registran el mayor nmero de casos ya que all hay
acceso al diagnstico. A pesar de las diferencias lingsticas hay cumplimiento parcial del tratamiento. Se deben realizar
campaas educativas para este tipo de poblacin en sus lugares de origen, para informar sobre la enfermedad, prevencin,
diagnstico y control prenatal para evitar la transmisin vertical y orientacin familiar para apoyar a los nios hurfanos.

Palabras clave: Sindrome, Inmunodeficiencia, Wayoo

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Papel de la inmunidad en la infeccin por VPH en mujeres venezolanas

Role of immunity in HPV infection in Venezuelan women

Callejas M, Dianaa Carrero Yenddya, Tellez Luisc, Alaa Freddyd, Silva Chiquinquirae
Mosquera Jesusb
.a
Laboratorio Regional de Referencia Virolgica, Universidad del Zulia, bSeccin Inmunologa Instituto
Investigaciones Clnicas LUZ, cDepartamento Microbiologa Facultad de Medicina ULA, dSMO Universidad
del Zulia, eCtedra Anatoma Patolgica Facultad de Medicina LUZ.
enmanuel2312@yahoo.com

Introduccin. inmunitario que resultan ms intensos y manifiestos en

El cncer de cuello uterino es una de las neoplasias
ms prevalentes en el mundo. Segn la Organizacin
Mundial de la Salud es la segunda causa de mortalidad
femenina por cncer. La mayor incidencia y mortalidad
de esta patologa se presenta en los pases en vas de
desarrollo donde los programas de prevencin y
deteccin precoz no han sido exitosos (Ferlay J, 2002).
En Espaa, el cncer invasor de cuello uterino es el
sexto ms frecuente y constituye el 4,8% de los
cnceres en la mujer, (Miarro R, 2000) una de las tasas
ms bajas del mundo, entre 3,4 y 12,2 casos por
100.000 mujeres/ao.(De Sanjos S, 2006). En
Venezuela sigue mantenindose como la segunda causa
de muerte por tumor maligno en la mujer segn los
anuarios de estadstica del Ministerio de Salud y es el
tumor ms frecuente en las mujeres jvenes y de edad
media. Los factores de riesgo identificados
corresponden a antecedentes ginecobsttricos y aspectos
socioculturales: tales como la no escolaridad, bajo nivel
socioeconmico, deficiencias nutricionales, tabaquismo,
inicio de las relaciones sexuales a edad temprana,
elevada promiscuidad, alta paridad (5 o ms partos), y
el primero antes de los 18 aos. Otros factores de riesgo
estn relacionados con deficiente higiene genital,
inflamacin cervico vaginal persistente, consumo
prolongado de anticonceptivos orales, e infecciones
producidas por Herpes virus simple tipo 2, tricomonas,
clamidias y Virus de Papiloma Humano. Debe sealarse
que la transformacin celular neoplsica se asocia a la
posibilidad de induccin de estmulos del sistema
Cncer de Cuello Uterino (CaCu) por la participacin
de agentes biolgicos en el proceso de carcinognesis.
A la expresin de antgenos tumorales se le superpone
los de origen microbiolgico y preferentemente los del
VPH. Existen adems fenmenos de modulacin del
sistema inmunitario/inflamatorio inducidos por la
secrecin de citoquinas, quimioquinas y/o factores de
crecimiento producidos por las clulas del CaCu y del
tejido circundante (Oliveros J, 2006 Rodrguez D.
2006).
Observaciones clnicas han permitido establecer un
importante papel del VPH en el origen de las lesiones
pre-invasivas de cuello uterino. Se ha podido demostrar
que este virus es el agente desencadenante de ms del
95% de los cnceres cervicales y de las lesiones
cervicales de alto grado. Est bien establecido que las
oncoprotenas E6 y E7 codificadas por el virus estn
involucradas en la transformacin celular y que la
infeccin por s misma no es suficiente para desarrollar
un cncer. Existen factores ambientales y propios del
husped involucrados en los procesos de transformacin
celular. Por lo que en este contexto, se ha planteado que
una respuesta inmunitaria anormal con alteracin en los
procesos de regulacin pudieran ser los responsables de
la mayora de las lesiones neoplsicas a nivel del cuello
uterino. Se ha destacado la participacin de ciertas
citocinas que actan como seales intracelulares y que
regulan la respuesta inflamatoria, las cuales son
secretadas despus de una estimulacin antignica. Las
anomalas en la regulacin del compartimento
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linfocitario T con especial nfasis en el equilibrio entre
las subpoblaciones Th1, Th2 y Th17 puedan participar
en la patogenia del paso de Neoplasia Intraepitelial
Cervical (NIC) a cncer extraepitelial. La produccin in
situ de citocinas reviste mayor importancia que la
sistmica y puede determinar diferentes efectos. As
encontramos que de acuerdo al perfil de citocinas es
posible obtener efectos proinflamatorios, inflamatorios
y quimiotcticos. (Giannini SL y col. 1998)
Como se ha referido, el proceso de transformacin
celular a nivel de cervix puede deberse a mltiples
causas, ya sean cambios a nivel local, traumas, injuria e
infecciones principalmente de etiologa viral donde el
VPH juega un papel fundamental. El proceso de
respuesta inmunitaria/inflamatoria puede desempear
diferentes funciones en la biologa del crecimiento
neoplsico. Las caractersticas de los factores solubles
producidos por las clulas inflamatorias perfilan el
proceso de crecimiento tumoral y del sustrato
peritumoral. Se producen citoquinas y factores de
crecimiento que segn su patrn pueden favorecer o
inhibir la supervivencia y crecimiento de las clulas
tumorales. Con base a los planteamientos anteriores se
decidi investigar el perfil de expresin de citoquinas y
factores de crecimiento en el crvix uterino de pacientes
con displasia del tejido cervical y su relacin con la
infeccin por VPH.
Materiales y Mtodos.
La muestra poblacional objeto de estudio estuvo
constituida por 500 mujeres de las cuales fueron
seleccionadas 183 que acudieron a la consulta
ginecolgica rutinaria y a travs de jornadas de
pesquiza de CaCu en diferentes centros dispensadores
de salud del Municipio Maracaibo y San Francisco del
Estado Zulia, Venezuela. Se tomaron en cuenta las
pautas establecidas por la Asociacin Mdica Mundial
(AMM) a travs de la promulgacin de la Declaracin
de Helsinki como una propuesta de principios ticos
para investigacin mdica en seres humanos, as mismo
el Comit de Biotica de la Facultad de Medicina de la
Universidad del Zulia y Biotica y Bioseguridad del
Fondo Nacional de Ciencia y Tecnologa (FONACIT)
aprob el presente protocolo.
El examen fsico ginecolgico fue realizado por el
mdico gineco-obstetra, el cual incluy inspeccin de
genitales externos, colocacin del especulo para
visualizar el cuello uterino, una toma citolgica
cervico-vaginal (CCV) y una exploracin colposcpica.
Aquellas pacientes a las cuales se les detect alguna
atipia celular, fueron sometidas a la siguiente toma de
muestra: Utilizando una pinza de Schumacher para
biopsia uterina, se tom un fragmento de tejido,
colocndolo en formalina al 10%, e incluyndolo en
parafina para la realizacin de cortes de 6 que fueron
teidos posteriormente con hematoxilina eosina para
identificar cambios histopatolgicos. Otro fragmento de
tejido se utiliz para la determinacin de IL-2, IFN-,
TNF-, IL-4 e IL- 6. IL-2R, IL-10, TGF-1 y GM-CSF
y VEGF por tcnicas de inmunohistoqumica, estos
fragmentos fueron includos en el componente OCT
(Tissue Tek; Miles Inc Diagnostic, Kankakee, II, USA)
congelados con hielo seco y acetona para ser
almacenados a -70 C hasta su procesamiento. Se
realizaron cortes de 4 micras de grosor en un criostato
(Shandon, Pittsburg, Pennsylvania, USA) de cada una
de las biopsias de cuello uterino congeladas, tanto de las
pacientes con lesin de cuello uterino como de las
controles. Para evaluar la expresin de las citoquinas,
los cortes de tejido se fijaron con acetona fra durante 5
minutos, luego de un lavado de 10 minutos con buffer
fosfato pH 7.2 (PBS), se incubaron durante una hora
con los respectivos anticuerpos monoclonales, previa
dilucin de los mismos Despus de lavar los tejidos
durante 10 minutos en PBS, se incubaron con un
anticuerpo secundario previa dilucin. A todas las
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secciones de tejido despus de lavadas con PBS durante
10 minutos, se les agreg una solucin
parafenilendiamina en PBS y glicerol para evitar la
rpida disminucin de la fluorescencia al ser observada
en un microscopio con epifluorescencia (OLYMPUS,
BX-MAX 50, NY, USA) usando un objetivo de 40X.
Los controles negativos estuvieron representados por
anticuerpos monoclonales del mismo isotipo pero no
dirigidos a antgenos relevantes en el tejido. Los
controles negativos estuvieron representados
anticuerpos monoclonales del mismo isotipo pero no
dirigidos a antgenos relevantes en el tejido.
Para el diagnstico molecular del VPH se tom una
muestra de la zona de transicin escamocolumnar, en
los pacientes como en los controles utilizando para ello
una torunda de alginato la cual fue colocado en un tubo
esteril Estas se guardron a -20 C hasta su
procesamiento.
La deteccin del ADN del VPH se realiz mediante
la amplificacin genmica por la Tcnica de Reaccin
en Cadena de la Polimerasa (PCR) utilizndose para
ello el Kit VPH-Fast del Laboratorio PHARMA-GEN
(Espaa). Utilizndose para ello primers especficos a la
secuencia de 450pb la cual representa la regin L1 de
marco abierto de lectura (ORF) del virus. En base a esto
el fragmento L1 fue sometido a cortes con enzimas de
restriccin (PHARMA GEN- VPH-FAS), PSA I y II
para obtener el genotipo especfico del virus.
Se emple el programa Prisma de la compaa
Graphpad para realizar el anlisis estadstico de los
datos obtenidos luego del procesamiento de las
muestras. Se cont el nmero clulas positivas por
campo de 400X de biopsias de cuello uterino (15
campos aprox). Las clulas positivas se contaron tanto
en el estroma como en el epitelio y se obtuvo el
promedio de clulas observadas por campo. Los
resultados se presentan como promedio + 1 desviacin
estndar. El anlisis estadstico se realiz comparando
el promedio de clulas positivas para las diferentes
de citocinas entre los grupos de sujetos estudiados (casos
vs. controles) y comparando la presencia del VPH con
las diferentes citoquinas estudiadas, utilizando ANOVA
ms post test de Bonferroni. Se consideran
significativos los valores de p 0.05
Resultados y Discusin.
La existencia de displasia se asocia a un significativo
por aumento de la expresin de citocinas y factores de
crecimiento tanto en el epitelio como en el estroma.. Se
aprecia un aumento progresivo de las clulas
productoras de IFN- e IL-10 y disminucin de las de
IL-2, sin modificarse la expresin de la IL-4.
Simultneamente se observa un estado incrementado de
produccin de las citoquinas proinflamatorias TNF e
IL-6 en el tejido displsico.
La existencia de displasia se asocia a un incremento
de la expresin de TGF- y VEGF que aumenta
conforme progresa su grado. La presencia de VPH no
determina el patrn de expresin ni el nmero de
clulas productoras de citoquinas y factores de
crecimiento en el tejido displsico.
Tomado en conjunto, nuestros resultados demuestran
la expresin de diferentes citoquinas y factores de
crecimiento en las clulas del epitelio y estroma
cervical que presentan diferentes grados de displasia.
Teniendo en cuenta que hemos observado la expresin
de citoquinas relevantes en la regulacin de la respuesta
inmunitaria con aumento de las mediadoras de la
inflamacin como IFN e IL-6, de la respuesta
linfocitaria T de patrn Th1 como IFN-, la no
implicacin de la ms caracterstica del patrn th2 o IL-
4 y el aumento de la inmunomoduladora IL-10, no
puede dejarse de sealarse la posible relevancia de la
respuesta inmune inflamatoria en la patogenia de la
transformacin displasica y en su caso carcinomatosis.
No es posible establecer el significado exacto de cada
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uno de estos hallazgos pero tomados en conjunto
soportan el concepto de desencadenamiento y/o
utilizacin de los mediadores solubles o citoquinas de la
inflamacin durante el proceso biolgico displasico.
Los diferentes patrones de expresin de estas citoquinas
en los distintos estadios displasicos sugieren el
progresivo desencadenamiento de un entorno
proinflamatorio con generacin de sealizaciones que
no favorecen la eficiencia defensiva de la respuesta
inmunitaria, As se observa un progresivo aumento de
IFN- e IL-10 con disminucin de la IL-2. Esta
interpretacin todava se favorece mas por el progresivo
incremento de la citoquina supresora TGF-. Adems
en trminos de predominio biolgico de un entorno
protumoral debe sealarse el incremento del VEGF.
Nuestros datos indican que la presencia VPH es un
factor que se asocia a modificaciones del patrn de
expresin de estas molculas en el tejido displsico,
pero no es el factor condicionante esencial.
Por lo tanto la displasia epitelial cervical uterina se
asocia a una marcada presencia de clulas en el tejido
que expresan molculas del sistema
inmunitario/inflamatorio implicadas en la regulacin de
su respuesta y en control del crecimiento celular y
vascular. En futuros trabajos, algunos de los cuales ya
los hemos puesto en marcha pretenderemos conocer las
caractersticas de las clulas productoras de estas
citoquinas y factores de crecimiento y pretender
establecer su significacin biolgica en la patogenia del
CaCu.
Palabras clave: VPH, Citocinas, Displasias, Cncer,
Respuesta inmunitaria.
Referencias.
1. Ferlay J., Bray F, Pisani P. and Parkin D.M.
GLOBOCAN 2002: Cancer Incidence, Mortality and
Prevalence Worldwide IARC CancerBase No. 5.
version 2.0, IARCPress, Lyon, 2004. Disponible.
http://www-dep.iarc.fr/
2. Miarro R, Black RJ, Martnez C, Navarro C, Garau
I, Izarzugaza I. Cancer incidence and Mortality in
Spain- Patterns and Trends. IARC Technical Report
2000; 36: 27.
3. De San Jos, Palacio V, Tafur LA, Vzquez S,
Espitia VE, Vzquez F. Prostitution, HIV, and
cervical neoplasia: a survey in Spain and Colombia.
Cancer Epidemiol Biomarkers Prev 1993; 2:531-5.
4. Oliveros J, Prez N, Montiel L, Meza N. Anuario de
Mortalidad 2006. Ministerio del Poder Popular para
la Salud Disponible:
http://www.msds.gov.ve/ms/modules.php?name=Ne
ws&file=article&sid=1346
5. Rodrguez, D. 2006. El Cncer mata a 3 zulianas
cada 24 horas. Panorama. Maracaibo Venezuela. 2
de julio de 2006. Primer cuerpo, columna 1. Pg. 1-
12. Ejemplar N 30-901
6. Giannini S.L, Al-Saled W, Piron H, Jacobs N, Doyen
J, Boniver J & Delvenne P. Cytokine expression in
squamous intraepithelial lesions of the uterine cervix:
implications for the generation of local
immunosuppresion Clin Exp Immunol.
1998;113:183-189
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Mujeres e Infecciones de Transmisin Sexual. Una experiencia de Investigacin en

Mrida-Venezuela
Women and Sexually Transmitted Infections. A hands-on research experience in Mrida, Venezuela

Luis Tllez* a, Elvia Michelli ab, Jos Andrs Mendozaa,

Silvana Vielma , Maria Eugenia Noguerac, Diana Callejasd, Maria Eugenia Cavazzae, Mara Correntif
a
a
Universidad de Los Andes Laboratorio de Microbiologa y Salud Pblica Edo. Mrida; b Universidad de
Oriente, Escuela de Ciencias, Departamento de Bioanlisis; c Universidad de Los Andes. Departamento de
Ginecologa y Obstetricia; d Universidad del Zulia. Laboratorio Regional de Referencia Virolgica; e Instituto
de Biomedicina. MPPS; f Instituto de Oncologa y Hematologa. MPPS.

*Correspondencia autor principal

Email: letellezenator@gmail.com

Introduccin. El cncer cervical (CC) ha sido asociado
a infecciones de transmisin sexual (ITS), su relacin
con la infeccin por VPH fue evidenciada hasta la
dcada de 1970. Surgi la hiptesis propuesta por el
Doctor Harold zur Hausen de que el CC podra ser
causado por infecciones con el virus identificado en los
condilomas acuminados (1). En el ao 2009, al Dr. zur
Hausen se le otorg el Premio Nobel de Medicina por
esta novedosa idea, y por demostrar la presencia del
genoma de VPH en tejido de CC (2). La infeccin
cervical por genotipos VPH de alto riesgo oncognico
(VPH AR), est estrechamente ligada al diagnstico de
lesiones pre-invasoras, todos los casos de CC invasivo
diagnosticados alrededor del mundo, contienen ADN de
los mismos 13 genotipos de VPH AR (3). Existe
evidencia slida que relaciona la infeccin por VPH con
la oncognesis directa inducida fundamentalmente por
los genotipos de VPH AR VPH16 y 18 (4, 5-7); por lo
tanto, dichas infecciones son consideradas el principal
factor de riesgo asociado al desarrollo de lesiones
cervicales de alto grado, y a la produccin de cncer
invasivo de clulas escamosas; estimndose que
aproximadamente entre el 10,00% y 20,00% de las
mujeres infectadas por VPHAR, eventualmente
mostrarn la progresin de lesiones intraepiteliales de
bajo grado a las de alto grado y a CC (8). Estudios
realizados en el transcurso de los ltimos diez aos, han
mostrado que la prevalencia de la infeccin por VPH en
nuestro pas es superior al 25,00%, tanto en mujeres
asintomticas para patologa cervical como en las que
tienen algn grado de anormalidad citolgica
diagnosticada (9-11). As mismo, en la poblacin
venezolana se han identificado numerosos co-factores
asociados al riesgo de adquisicin de infecciones por
VPH, y su progresin a lesiones cervicales premalignas
y malignas, como otras ITS, el uso de anticonceptivos
orales por ms de 5 aos, hbito tabquico y elevada
paridad (5 embarazos a trmino o ms) (12, 13). El
presente estudio tuvo como objetivo detectar y
genotipificar la infeccin por VPH, evaluar su
asociacin con lesiones preinvasoras e invasoras de
crvix y la presencia de factores asociados: ITS:
Chlamydia trachomatis, Treponema pallidum, Virus de
Inmunodeficiencia Humana tipo 1 (VIH-1), Virus de
Hepatitis B y C.
Material y mtodos. Se incluyeron 409 mujeres entre
15 y 69 aos que asistieron a la consulta ginecolgica
del Instituto Autnomo Hospital Universitario de Los
Andes (IAHULA) de Mrida, entre agosto 2007 y
agosto 2012. Previo consentimiento informado, se
aplic un instrumento de recoleccin de datos; se
realiz la evaluacin ginecolgica, colposcopa, y se
tom muestras para citologa; se recolectaron cepillados
cervicales y se tomaron muestras sanguneas para la
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identificacin serolgica de las infecciones por T. mediante este mtodo fue positiva en 18 mujeres lo que
pallidum, VIH y por los virus de las Hepatitis C y B representa un 4,4 % de la muestra estudiada. En la
mediante tcnica de ELISA. Para el aislamiento de Tabla N 2 se observan los genotipos encontrados en las
ADN se utiliz un estuche comercial, luego fue pacientes positivas para esta infeccin.
cuantificado y almacenado a -20C hasta su
procesamiento. Se estandariz tcnica de reaccin en Tabla N 2 Genotipos identificados en 153 Mujeres
positivas para infeccin por VPH mediante el empleo
cadena de la polimerasa (PCR nested-mltiple) para la
de PCR Multiplex. Mrida. 2007-2012
deteccin y genotipificacin de VPH, la cual amplifica %
una regin conservada de los genes E6/E7 (14), y se VPH Frecuencia % acumulado
utiliz conjuntamente la tcnica de Captura Hibrida 2 18 83 46,64 46,64

(DIGENE) (15), la deteccin de C. trachomatis se 16 61 34,28 80,92

31 2 1,12 82,04
realiz por una PCR que amplifica una secuencia
45 2 1,12 83,16
conservada, contenida en un plsmido crptico. Se hizo
52 2 1,12 84,28
una campaa de difusin masiva dirigida a la 56 1 0,56 84,84
prevencin de la adquisicin de ITS. 58 2 1,12 85,96
Resultados y discusin. La deteccin de VPH se 6 Y 11 25 14,04 100
TOTAL 178 100 100
muestra en la tabla N1. Fuente: Base de datos Epi Info 2007-2012 Laboratorio de
Microbiologa y Salud Pblica del Edo. Mrida 2013

Tabla N 1 Deteccin de Infeccin por VPH mediante

Un 80,92% de los VPH encontrados correspondieron a
el empleo de tcnicas moleculares Captura Hbrida 2 y
Reaccin en Cadena de la Polimerasa (PCR) Multiplex. genotipos de alto riesgo 18 y 16, de estos el de mayor
Mrida. 2007-2012
frecuencia fue el VPH18 con un 46,64% sobre 178
Deteccin %
Frecuencia % genotipos encontrados en 153 mujeres. En la tabla N 3
VPH acumulado
SI 153 37,40% 37,40% se observan las infecciones nicas y mixtas por VPH.

No 256 62,60% 100,00%

Tabla N 3 Infecciones nicas y Mixtas por Genotipos
Total 409 100,00% 100,00% de VPH en 153 Mujeres positivas para infeccin.
Mrida. 2007-2012
Fuente: Base de datos Epi Info 2007-2012 Laboratorio de
Microbiologa y Salud Pblica del Edo. Mrida 2013 VPH Unicas % Mixtas % Total
18 48 58,54 35 36,47 83
De 153 mujeres que resultaron positivas por diagnstico 16 31 37,80 30 31,25 61
molecular para la infeccin por VPH, 98 (60,05%) se 31 0 0,00 2 2,08 2
detectaron mediante la utilizacin de PCR formato 45 0 0,00 2 2,08 2
multiplex. El 60,8 % de las mujeres positivas para 52 1 1,22 1 1,04 2
56 1 1,22 0 0,00 1
infeccin fueron menores de 35 aos de edad, y de stas
58 1 1,22 1 1,04 2
la mitad (50%) correspondieron a mujeres muy jvenes 6 Y 11 0 0,00 25 26,04 25
menores de 25 aos de edad. En la poblacin estudiada TOTAL 82 100,00 96 100,00 178
Fuente: Base de datos Epi Info 2007-2012 Laboratorio de
se detect infeccin por VPHAR mediante el uso de
Microbiologa y Salud Pblica del Edo. Mrida 2013
Captura Hbrida 2 en 46 mujeres lo que representa un
En la tabla N 4 se muestra la deteccin de Chlamydia
11,2 % de la muestra total, la infeccin por VPHBR
trachomatis.
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Tabla N 4 Deteccin de Chlamydia trachomatis Tabla N 6 Treponema pallidum (IgM) mediante

mediante el empleo de Reaccin en Cadena de la Inmunoensayo enzimtico (ELISA). Mrida. 2007-2012
Polimerasa (PCR). Mrida. 2007-2012 T. pallidum
Frecuencia % % acumulado
IgM
C. trachomatis % Si 15 3,7 3,7
Frecuencia %
PCR acumulado
No 394 96,3 100
Si 42 10,3 10,3 Total 409 100 100
Fuente: Base de datos Epi Info 2007-2012 Laboratorio de
Microbiologa y Salud Pblica del Edo. Mrida 2013.
No 367 89,7 100 A continuacin se presenta la co-infeccin VPH/T. pallidum.

Total 409 100 100

Tabla N 7 Co-infeccin por VPH/Treponema
Fuente: Base de datos Epi Info 2007-2012 Laboratorio de pallidum mediante el empleo de Reaccin en Cadena de
Microbiologa y Salud Pblica del Edo. Mrida 2013 la Polimerasa (PCR) e Inmunoensayo Enzimtico
(ELISA) respectivamente. Mrida. 2007-2012.
A continuacin se presenta la co-infeccin VPH/C.
Treponema Pallidum (IgM)
trachomatis VPH Si No Total
Si 6* 147 153
Tabla N 5 Co-infeccin por VPH/Chlamydia % Fila 3,9 96,1 100
trachomatis mediante el empleo de Reaccin en Cadena % Columna 40 37,3 37,4
de la Polimerasa (PCR). Mrida. 2007-2012 No 9 247 256
% Fila 3,5 96,5 100
Chlamydia trachomatis PCR % Columna 60 62,7 62,6
VPH Si No Total Total 15 394 409
% Fila 3,7 96,3 100
Si 18 * 135 153
% Columna 100 100 100
% Fila 11,8 88,2 100 Fuente: Base de datos Epi Info 2007-2012 Laboratorio de
Microbiologa y Salud Pblica del Edo. Mrida 2013.*
% Columna 42,9 36,8 37,4 p=0,0447(2)
No 24 232 256
% Fila 9,4 90,6 100 De 153 mujeres positivas para infeccin por VPH, 6
% Columna 57,1 63,2 62,6 (3,90%) presentaron co-infeccin con Treponema
Total 42 367 409 pallidum, observndose una relacin estadsticamente
% Fila 10,3 89,7 100 significativa (p= 0,0447 2).
Fuente: Base de datos Epi Info 2007-2012 Laboratorio de
Microbiologa y Salud Pblica del Edo. Mrida 2013.
*p=0,36(2) Grfico N 1 Marcadores Serolgicos para Virus
Hepatitis B (AgSVHB/anticoreVHB) mediante
Inmunoensayo enzimtico (ELISA). Mrida. 2007-2012
De 153 mujeres positivas para infeccin por VPH, 18
(11,80%) presentaron co-infeccin con Chlamydia
trachomatis, observndose una relacin
estadsticamente significativa (p= 0,3625, test 2)
En la tabla N 6 se muestra la deteccin de IgM anti
Treponema pallidum.

Fuente: Base de datos Epi Info 2007-2012 Laboratorio de

Microbiologa y Salud Pblica del Edo. Mrida 2013
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A continuacin se presenta la co-infeccin VPH/VHB. Tabla N 9 Co-infeccin por VPH/VIH mediante PCR
y ELISA respectivamente. Mrida. 2007-2012
Tabla N 8 Co-infeccin por VPH/VHB mediante
PCR y ELISA respectivamente. Mrida. 2007-2012.
Serologa VIH
AgSVHB Anticore VHB
VPH (PCR) Si No Total
VPH Si No Total SI No Total
Si 1* 152 153 6** 147 153 Si 2* 151 153
% Fila 0,7 99,3 100 3,9 96,1 100 % Fila 1,3 98,7 100
% Columna 20 37,6 37,4 40 37,3 37,4
No 4 252 256 9 247 256 %Columna 50 37,3 37,4
% Fila 1,6 98,4 100 3,5 96,5 100
No 2 254 256
% Columna 80 62,4 62,6 60 62,7 62,6
Total 5 404 409 15 394 409 % Fila 0,8 99,2 100
% Fila 1,2 98,8 100 3,7 96,3 100 %Columna 50 62,7 62,6
% Columna 100 100 100 100 100 100 4 405 409
Total
Fuente: Base de datos Epi Info 2007-2012 Laboratorio de % Fila 1 99 100
Microbiologa y Salud Pblica del Edo. Mrida %Columna 100 100 100
2013.*p=0,3820(Fisher), ** p=0,0037 (2).
Fuente: Base de datos Epi Info 2007-2012 Laboratorio de
Microbiologa y Salud Pblica del Edo. Mrida
2013.*p=0,4798 (Fisher).
De 153 mujeres positivas para infeccin por VPH, 7
(4,60%) presentaron co-infeccin estadsticamente De 153 mujeres positivas para VPH, 2 (1,30%)
significativa con VHB, 1 (0,70%) con positividad para presentaron correlacin con pruebas reactivas para el
el marcador AgSVHB (p= 0,3820 Fisher) y 6 (3,90%) anticuerpo contra el Virus de la Inmunodeficiencia
con positividad para el marcador anticoreVHB Humana (VIH), observndose una relacin
(p= 0,0037 2). De 409 mujeres estudiadas, 6 (1,50 %) estadsticamente significativa (p= 0,4798 Fisher). En
resultaron positivas para el anticuerpo contra el Virus relacin al reporte citolgico, 23/153 (15,03%) de las
de la Hepatitis C (VHC), 2 de ellas (1,30%) presentaron mujeres ADN-VPH positivas mostraron cambios
co-infeccin con VPH, en este caso no se observ una sugestivos de infeccin por VPH, Un 91,30% (21/23)
relacin estadsticamente significativa. LIEBG. El anlisis estadstico no mostr asociacin
De la muestra estudiada, 4 mujeres (1,00 %) resultaron significativa entre los resultados del reporte citolgico
reactivas para el anticuerpo contra el Virus de la sugestivo de infeccin y la deteccin general del ADN
Inmunodeficiencia Humana (VIH) mediante ELISA. de VPH, ni con la deteccin de ADN de VPHAR. La
En la tabla N 8 se presenta la co-infeccin VPH/VIH. infeccin por VPH18 fue la ms reportada en pacientes
con LIEBG, tanto en infeccin individual 8/15
(53,33%), como en mixta (VPH 18/16: 3/12;
VPH18/31: 2/12; VPH18/58: 1/12). La correlacin
mostr asociacin significativa entre LIEBG y las
infecciones mltiples por VPHAR (p=0,0415 Fisher).
De 47 biopsias cervicales tomadas se detect en 29 la
presencia de ADN de VPH (61,70%), el reporte ms
frecuente fue cambios coilocticos (17/29), seguido por
NICI (5/29), NICIII/Ca in situ (3/29) y finalmente
NICII (1/29). Los genotipos identificados fueron VPH
 Revista de la Sociedad Venezolana de Microbiologa 2013; 33: suplemento 1 pp
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18 y 16, tanto en infecciones individuales como mixtas.
Al correlacionar la histopatologa sugestiva de VPH y la
deteccin general de VPH no se encontr significancia
estadstica (p=0,5519). Sin embargo, al relacionar las
infecciones mixtas por VPH16/18 y los reportes
histolgicos NICI y cambios coilocticos se encontr
significancia (p=0,3000 Fisher y p=0,0015 2)
respectivamente. De las pacientes positivas para ADN
de VPH (153), 76 (49,67%) mostraron colposcopas
anormales, encontrndose en mayor nmero atipias
menores (73/76; 96,05%) que mayores (20/76; 26,32%).
El anlisis mostr asociacin significativa entre
infeccin por VPH y colposcopas anormales (p=0,0019
2). Al analizar la asociacin entre VPHAR y
alteraciones colposcpicas, se observ que VPH 18 y 16
fueron los ms frecuentes en pacientes con colposcopa
anormal, tanto en infeccin individual (22/48; 45,83% y
16/31, 51,61%, respectivamente), como en infecciones
mixtas (14/29; 48,28%). Se observ significancia entre
infecciones mixtas VPH18/16 y colposcopa anormal,
especialmente con atipias DZT (dentro de La Zona de
transicin) con un valor de p=0,3007; 2 corregido de
Yates. De las mujeres que resultaron positivas para
infeccin con VPH, el 64,05% refiri haber tenido dos o
ms parejas en su historia sexual. A pesar de que la
mayor frecuencia se encontr en ms de una pareja en
el pasado, no hubo una relacin estadsticamente
significativa entre la deteccin de VPH y este
antecedente epidemiolgico. El 84,31% refiri tener
una pareja en la actualidad, lo que se relacion de
manera estadsticamente significativa con la deteccin
de VPH en las muestras cervicales de estas mujeres,
(p=0,0786; 2 corregido de Yates). El 50,00% refiri
utilizar mtodos anticonceptivos de barrera, seguido por
el uso de los mtodos hormonales con un 41%. No se
encontr una relacin estadsticamente significativa
entre la deteccin de VPH y el uso referido de mtodos
anticonceptivos.
Grfico N 2 Variable Fumar en Mujeres positivas para
infeccin por VPH. Mrida. 2007-2012.
Fuente: Base de datos Epi Info 2007-2012 Laboratorio de
Microbiologa y Salud Pblica del Edo. Mrida 2013
De las 153 mujeres que resultaron positivas para
infeccin con VPH, el 26,8% refiri fumar, y un 73,2%
neg dicho hbito. Se encontr una relacin
estadsticamente significativa entre la deteccin de VPH
y el hbito tabquico (OR 1,4629, IC 95% 0,8864-
2,4065; p=0,1420, 2 corregido de Yates), no se
encontr relacin significativa con respecto al nmero
de cigarrillos diarios. El porcentaje de deteccin de la
infeccin viral obtenido a partir de los ensayos de
biologa molecular aplicados, fue de 37,40%,
destacando que el 85,00% de estos reportes VPH
positivos se presentaron en mujeres con citologa
normal, hallazgo que es considerado superior al
registrado en la poblacin general alrededor del mundo,
(9,00 -13,00%); as mismo, el porcentaje de infecciones
por VPH determinado contrasta con la estimacin
descrita por la Organizacin Mundial de la Salud
(OMS), la cual report que para el ao 2008, en
Amrica la prevalencia de infeccin por VPH fue del
15,60% en la poblacin general (16). En la presente
investigacin se report una elevada frecuencia de
genotipos de VPH AR en la poblacin estudiada, tanto
en infecciones mixtas como individuales; as mismo,
destaca que VPH18 fue el genotipo viral ms
frecuentemente detectado en las muestras estudiadas,
seguido por VPH16. La distribucin relativa de estos
genotipos en las mujeres incluidas en la presente
investigacin es similar a los datos publicados
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previamente en la ciudad de Mrida, Venezuela, en el
cual se evidenci el predominio de infecciones por
VPH18 sobre los otros genotipos evaluados (17). Se
estableci la co-infeccin cervical de VPH con otras
ITS, hubo una asociacin significativa entre VPH y C.
trachomatis, Treponema pallidum, VHB y VIH. Las
ITS representan un co-factor importante para la
progresin de lesiones cervicales asociadas a infeccin
por VPH, a grados severos (18). Se ha reportado que
mujeres que cursan con infeccin de cuello uterino por
VPH, suelen ser tambin positivas para infeccin por C.
trachomatis, teniendo alto riesgo de desarrollar CC
(19). Numerosos estudios sugieren que la ocurrencia
dual de infecciones por VPH y VIH pueden incrementar
la incidencia de CC y del Sndrome de
Inmunodeficiencia Humana (SIDA) en las pacientes
que las sufran (20). Se evidenci asociacin entre el
hbito de fumar y la presencia de infeccin por VPH, Se
ha demostrado que el fumar cigarrillos continuamente
est asociado con un significativo, pero moderado
incremento del riesgo de adquisicin de una infeccin
por VPH, su cronicidad, as como la probabilidad de
que favorezca el desarrollo de malignidad en el tejido
infectado. (21)
Conclusiones. Los resultados anteriormente
presentados muestran que en la poblacin femenina de
la ciudad de Mrida hay un elevado porcentaje de
infeccin por VPH, as como una asociacin
significativa de la infeccin viral y co-factores clnico-
epidemiolgicos, los cuales contribuyen a elevar el
riesgo de desarrollar lesiones cervicales, que pueden
progresar y finalmente producir un CC.
Palabras clave. Infecciones de transmisin sexual,
cncer cervical, Reaccin en cadena de la polimerasa
(PCR).
Agradecimiento. Este trabajo recibi financiamiento
de los proyectos FONACIT-G-2005000408 y Misin
Ciencia LUZPROLAB N 2007001088.
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BIOLOGA MOLECULAR

Distribucin de los grupos filogenticos y factores de virulencia en aislados de

Escherichia coli uropatgena productoras de -lactamasas de espectro expandido
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Distribution of phylogenetic groups and virulence factors in uropathogenic Escherichia coli--

Lactamase-Extended-Spectrum Producing

Milln Beatriza, Milln Yshetha, Hernndez Ericka,b,c, Araque Maraa.

a
Laboratorio de Microbiologa Molecular. Facultad de Farmacia y Bioanlisis. Universidad de Los Andes,
Mrida, Venezuela. b Departamento de Microbiologa y Parasitologa, Facultad de Medicina, Universidad de
Los Andes, Mrida, Venezuela, c Laboratorio de Salud Pblica del estado Mrida, Venezuela.

Introduccin: Escherichia coli es el agente causal del 80% de las infecciones del tracto urinario (ITU), y su capacidad
patognica se debe a la presencia de distintos genes de virulencia que poseen. Filogenticamente E. coli se clasifica en
cuatro grupos A, B1, B2 y D que se obtienen amplificando mediante una reaccin en cadena de la polimerasa (PCR)
mltiple los genes chuA, yjaA y el fragmento de ADN TspE4.C2. El objetivo de este trabajo es caracterizar los grupos
filogenticos de E. coli y determinar la presencias de factores de virulencia que codifican para la fimbria (fimH),
adhesinas (papAH), la capsula (KpsMt II), sistemas de captacin de hierro (fyuA), islas de patogenicidad (PAI) y protenas
que intervienen en la infectividad (usp). Metodologa: Se analizaron 30 cepas de E. coli uropatgenas (ECUP)
productoras de -lactamasas de espectro expandido aisladas de pacientes con ITU adquiridas en la comunidad. Se dise
una PCR mltiple para detectar los genes de virulencia KpsMt II, PAI y fimH, mientras que los genes papAH, usp y fyuA
fueron amplificados mediante PCRs simples. Resultados: Las cepas ECUP analizadas, pertenecan indistintamente al
grupo filogentico (GF) A y B2 y en menor proporcin al grupo D. Los genes de virulencia con mayor prevalencia
fueron los genes fyuA y fimH y el menos frecuente fue el papAH. El gen fyuA se detect en los tres GF y hubo diferencias
importantes en la prevalencia de los genes usp y KpsMTII en las cepas de los GF A y B2. Las 29 cepas ECUP que
contenan genes blaCTX-M se distribuyeron invariablemente en diferentes GF y patrones genotpicos. Conclusin: La
asociacin del perfil patognico y los grupos filogenticos de las cepas ECUP analizadas arroj que las pertenecientes al
grupo A tenan menos genes asociados que las cepas de los grupos B2 y D, y que la presencia del gen blaCTX-M en dicha
coleccin no afect su indistinta distribucin en los diferentes patrones genotpicos y grupos filogenticos.

Palabras clave: Escherichia coli, uropatgeno, Beta-lactamasas, grupos filogenticos, genes de virulencia.

Estrategia para la caracterizacin molecular del gen hemaglutinina y neuraminidasa

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del virus influenza A

A strategy for molecular characterization of hemagglutinin and neuraminidase genes
of influenza virus A

Loureiro Carmen Luisaa, Campos Yelitzab, Garzaro Domingo J.a, Guevara Denissea, Pujol Flor H.a
a
Lab. Virologa Molecular. Centro de Microbiologa y Biologa Celular. Instituto Venezolano de
Investigaciones Cientficas. Apdo. 20632, Caracas 1020-A, Venezuela, b Centro Mdico Paso Real
Charallave, Venezuela e Instituto de Biomedicina. Universidad Central de Venezuela, Caracas, Venezuela.

Introduccin: La influenza A es un agente etiolgico importante de enfermedad respiratoria aguda en el mundo. El virus
de influenza A est constituido por 8 segmentos de ARN simple de polaridad negativa (0.89-2.3Kb). La hemaglutinina
(HA) y la neuraminidasa (NA), exhiben la mayor variabilidad a nivel de aminocidos y permiten clasificar las cepas en 17
subtipos HA y 9 subtipos NA. La pandemia causada por A (H1N1) pdm09 ilustr la necesidad de disponer de una
tecnologa que nos permita caracterizar el virus a nivel molecular. El objetivo de este trabajo es disear una estrategia para
la amplificacin y caracterizacin molecular de los genes HA y NA. Metodologa: Un total de 15 cepas AH1N1 y 3 cepas
AH3N2 fueron procesadas por RT-PCR multifragmento para amplificar los 8 segmentos de influenza A. En una segunda
ronda se realizaron amplificaciones usando cebadores especficos para los genes Ha y Na. Resultados: Esta estrategia fue
eficiente para la amplificacin de los 8 genes de Influenza A, lo cual permite en una segunda ronda estudiar el gen de
inters. Para los genes de Ha y Na, se obtuvieron fragmentos de aproximadamente 1700-pb y 1400-pb respectivamente.
Conclusiones: El anlisis filogentico de estas secuencias permiti: 1) adjudicar el subtipo de la cepa infectante, 2)
analizar la presencia de aminocidos claves en esas protenas, tales como los que confieren resistencia a ozeltamivir y 3)
comparar estas cepas con las cepas circulantes en otros pases, 4) la deteccin especfica de la A(H1N1)pdm09. La
implementacin de este mtodo permiti el anlisis de los genes de Ha y Na por secuenciacin, aportando informacin
relevante debido a la necesidad de monitorear las variantes genticas que circulan en humanos y animales.

Palabras clave: Influenza A, Hemaglutinina, Neuraminidasa, RT-PCR multifragmento

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Deteccin de Genes qnrB19 que median la resistencia transferible de quinolonas

asociados a -lactamasas de espectro extenso en Salmonella Give y Salmonella
Heidelberg en Venezuela
Detection of transferable quinolone resistance determinant qnrB19 associated with extended-
spectrum -lactamases in Salmonella Give and Salmonella Heidelberg in Venezuela

Gonzalez Fanny, Araque Mara

Laboratorio de Microbiologa Molecular, Departamento de Microbiologa y Parasitologa, Facultad de
Farmacia y Bioanlisis, Universidad de Los Andes, Mrida, Venezuela.
fannyg@ula.ve; araquemc@ula.ve

Introduccin: La resistencia de Salmonella a quinolonas y -lactamicos reduce las opciones teraputicas en casos de
salmonelosis invasiva, convirtindose en un serio problema de salud pblica. En este estudio se determin la coexistencia
de genes que median la resistencia transferible de quinolonas y la presencia de -lactamasas de espectro extenso (BLEE)
en cuatro cepas de Salmonella no tifoideas. Metodologa: Durante el 2011, 2 cepas de S. Give fueron aisladas de
pacientes peditricos con gastroenteritis y 2 aislados de S. Heidelberg se aislaron de carne de pollo crudo. Estas cepas
presentaron susceptibilidad reducida a ciprofloxacina, sensibilidad al cido nalidixico y un fenotipo compatible con la
presencia de BLEE. La deteccin de los genes gyrA, gyrB y gyrC que determinan la resistencia cromosomal a quinolonas,
los determinantes de resistencia transferible a quinolonas (qnrA, qnrB, qnrS, qnrD, aac(6)-Ib y qepA) y los genes
blaBLEEs (TEM, SHV y CTX-M) fueron realizados por PCR y analizados por secuenciacin. El estudio de plsmidos se
realiz por Southern Blot y patrones de restriccin (HindIII y PstI). La transferencia de genes se evalu por
transformacin en cepas de Escherichia coli HB101. Resultados: Los genes blaTEM-1 + blaSHV-12 fueron detectados en S.
Give SG9611 y los genes blaTEM-1 + blaCTX-M-2 en las otras tres cepas S. Give SG9811, S. Heidelberg SH7511 y SH7911.
Independientemente del origen, serovars y presencia de BLEE, los genes qnrB19 fueron detectados en las cuatro cepas
analizadas. Todos los determinantes de resistencia fueron transferidos por transformacin y localizados en plsmidos de
13 y 19 kb. Conclusin: Estos resultados destacan la circulacin de genes qnrB19 asociados con blaTEM-1, blaSHV-12 y
blaCTX-M-2 en S. Give and S. Heidelberg in Venezuela. El reconocimiento de los factores clnicos y epidemiolgicos que
incrementan la resistencia antimicrobiana, as como el estudio de los mecanismos moleculares involucrados, pueden
conducir al uso racional de los antibiticos y evitar la diseminacin de cepas de Salmonella multirresistentes.

Palabras clave: Salmonella, qnrB19, Beta-lactamasas, Venezuela.

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Relacin de las islas de patogenicidad SPI-1 Y SPI-2 de Salmonella enterica con el

sistema plasmingeno/plasmina en la dinmica de invasin del hospedero humano
Relationship of pathogenicity islands SPI-1 and SPI-2 of Salmonella enterica with plasminogen /
plasmin system in the dynamics of human host invasion

Velasco Juditha, Araque Maraa, Ayala-Serrano Juanb, Dvila-Vera Delsyc, Pea-Contreras Zulmac,
Mendoza-Briceo Rosa Virginiac, Aviln Luisanad
a
Departamento de Microbiologa y Parasitologa. Facultad de Farmacia y Bioanlisis. Universidad de Los
Andes, Mrida-Venezuela. b Centro de Biologa Molecular Severo Ochoa CSIC-UAM, Campus de
Cantoblanco, Madrid-Espaa. c Centro de Microscopa Electrnica Dr. Ernesto Palacios Pr,
Universidad de Los Andes, Mrida - Venezuela. d Laboratorio de Enzimologa de Parsitos, Facultad de
Ciencias, Universidad de Los Andes, Mrida - Venezuela.
judithvelasco2005@yahoo.es

Introduccin: Salmonella es un patgeno de impacto epidemiolgico que puede causar desde una gastroenteritis
autolimitada hasta infeccin sistmica, gracias a su capacidad de invasin celular y de sobrevivencia intrafagoctica y en
clulas epiteliales, caractersticas de virulencia mediada por los genes localizados en las islas de patogenicidad 1 y 2 (SPI1
y SPI2). Por otra parte, algunos patgenos bacterianos invasivos han desarrollado una variedad de estrategias para
interactuar con el sistema plasmingeno/plasmina para su diseminacin a travs de los tejidos del hospedero. Sin
embargo, en Salmonella se desconoce la relacin entre estos dos mecanismos que podran potenciar su poder invasivo. En
este estudio se determin la participacin de la SPI-1 y SPI-2 de cepas de S. enterica no tifoideas (SNT) en la activacin
del sistema plasmingeno/plasmina del humano. Metodologa: Se evaluaron cepas de SNT de origen clnico y sus
derivadas mutantes, con delecin de los genes invG/invE de la SPI-1 y ssaJ/ssaK de la SPI-2 y como cepa control S.
Typhimurium SL-1344. La unin de plasmingeno (Plg) a las cepas se determin mediante monitoreo de la actividad
enzimtica de la plasmina formada sobre el sustrato cromognico S-2251. Resultados: El anlisis comparativo de la
capacidad de interaccin con el Plg humano revel que la mutacin en SPI1 y SPI2 no influy en la capacidad de
Salmonella de unir Plg. Conclusiones: Los hallazgos de este estudio permitieron determinar, que dos mecanismos de
virulencia descritos en S. enterica, como son la invasin y sobrevivencia intracelular, mediada por los genes de la SPI-1 y
la SPI-2, y la diseminacin de estos microorganismos en el hospedero a travs de la interaccin con el sistema fibrinoltico
humano, actan de manera independiente y que se activan estimulados por la relacin ntima con el enterocito o por la
libre disponibilidad de la bacteria en el torrente sanguneo.

Palabras clave: Salmonella no tifoidea, islas de patogenicidad, plasmingeno, plasmina

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Deteccin molecular de adenovirus tipo 40 y 41 en nios con gastroenteritis aguda en la

ciudad de Maracay (Edo. Aragua) durante el periodo 2012-2013
Molecular detection of adenovirus types 40 and 41 in children with acute gastroenteritis in
Maracay city (Edo. Aragua) during the years 2012-2013

Blanco Ruth, Fernndez Rixio, Pez Mara, Vizzi Esmeralda

Laboratorio Biologa de Virus, Centro de Microbiologa y Biologa Celular. Instituto Venezolano de
Investigaciones Cientficas. Caracas, Venezuela.

Introduccin: La infeccin por adenovirus es una de las principales causas de gastroenteritis aguda (GEA) infantil en
todo el mundo. Se ha descrito que los tipo 40 y 41 de adenovirus, pertenecientes al subgnero F, pueden ser responsables
de hasta un 20% de ellas. En Venezuela, la morbi-mortalidad por GEA infantil representa alrededor del 60% de todas las
notificaciones semanales del pas. Sin embargo, existen pocos estudios en relacin a la epidemiologa y tipos de
adenovirus asociados con GEA. La investigacin planteo como objetivo evaluar con ensayos moleculares la prevalencia
de infeccin por adenovirus entricos en nios con GEA de la poblacin venezolana e identificar el tipo de virus
involucrado. Metodologa: La deteccin de adenovirus se realiz a partir de 117 muestras de heces de nios recolectadas
en la ciudad de Maracay, previa extraccin del genoma viral. Una reaccin en cadena de la polimerasa, capaz de
amplificar una regin de 301 pares de bases (pb) del gen que codifica para el hexn del virus, fue utilizada en
combinacin con el anlisis de polimorfismo de longitud de los fragmentos de restriccin (PCR/RFLP), descrita
previamente. La digestin con la enzima de restriccin SalI generaba dos fragmentos, de 191 y 110 pb en el producto de
PCR obtenido a partir de los adenovirus del subgnero F, mientras que la enzima HinfI permita discriminar entre los tipos
40 y 41 al generar fragmentos de 180 y 121 pb. Resultados: Adenovirus del subgnero F fueron detectados en 26 (22%)
de las muestras estudiadas, de los cuales 23 (88,5%) resultaron ser del tipo 41 y 3 (11,5%) del tipo 40. Conclusiones: Los
resultados moleculares sugieren una mayor prevalencia de infeccin por adenovirus entricos en las GEA respecto a lo
descrito anteriormente en la poblacin infantil venezolana, siendo el tipo 41 responsable de la mayora de stas
infecciones.

Palabras clave: Gastroenteritis aguda, adenovirus entricos, PCR/RFLP, adenovirus tipo 41

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Secuencias repetitivas de DNA como marcadores moleculares en la

identificacin de Leishmania spp. provenientes de muestras clnicas
DNA repetitive sequences as molecular marker in the identification of Leishmania spp.
from clinical samples

Hidalgo Marianaa, Oru Andreaa, Garca Alzate Robertob, Lander Orlanab,c, Martnez Nahirc,
Crdova Leopoldoc , Calderon Lizc, Balda Lorena Lorenac, Ovalles Valentinac, Surez Jos Antonioc,
Torres Jaimec, Rodrguez Norisd , Mendoza-Len Alexisb
a
Centro de Microbiologa, IVIC. b Instituto de Biologa Experimental, Facultad de Ciencias;
c
Instituto de Medicina Tropical, Facultad de Medicina; d Instituto de Biomedicina,
Facultad de Medicina, UCV

Introduccin: El diagnstico temprano y preciso de la leishmaniasis, una enfermedad producida por parsitos del gnero
Leishmania, al igual que la evaluacin de la efectividad de medidas teraputicas, contina siendo un problema clnico
importante. La identificacin de marcadores moleculares especficos del parsito y su uso en el diseo de ensayos de PCR
ha sido una herramienta apropiada para abordar esta problemtica. Previamente, hemos diseado ensayos de PCR
altamente sensibles y especficos para la identificacin diferencial de las especies de Leishmania que conforman los
subgneros Leishmania y Viannia respectivamente, utilizando secuencias repetitivas de DNA como marcadores
moleculares ej: los genes de tubulina, DNA-500 y DNA-L280. La evaluacin de estos ensayos en la deteccin de
Leishmania spp. en muestras clnicas (biopsias) y el diseo de un protocolo piloto para la aplicabilidad de estas pruebas en
la consulta clnica del Instituto de Medicina Tropical de la UCV forman parte del objetivo del trabajo. Metodologa:
DNA total de promastigotes de diferentes especies de referencia de Leishmania spp., al igual que el DNA de material
clnico fue aislado y utilizado para la amplificacin por PCR de los marcadores mencionados, siguiendo la metodologa
previamente descrita. Resultados: Los resultados muestran que un ensayo mltiple de PCR, utilizando los marcadores
sealados, permite la identificacin de cepas de referencia de Leishmania spp. a nivel de subgnero. El mismo ensayo
permiti la confirmacin del diagnstico en muestras provenientes de biopsias de animales experimentales y de muestras
clnicas. Conclusiones. Se dise un ensayo de mltiple PCR que permite la identificacin del parsito Leishmania a
partir de muestras clnicas.
Financiamiento: CDCH-UCV.

Palabras clave: Leishmania spp., diagnstico, PCR

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Deteccin Fenotpica y Molecular de GES, MBL Y KPC en aislados clnicos de

Pseudomonas aeruginosa en Cuman, estado Sucre
Phenotypic and molecular detection of GES, MBL and KPC in clinical isolates of Pseudomonas
aeruginosa in Cumana, Sucre State

Rodulfo Hectorinaa, Arcia Anlenysa, Carreo Numirina, Teixeira Bertinellysa,

Guzmn, Militzab, De Donato Marcosa
a
Lab. Gentica Molecular, IIBCAUDO, b Bacteriologa Clnica del Departamento de Bioanlisis,
Universidad de Oriente, Ncleo de Sucre, Cuman.

Introduccin: La resistencia en Pseudomonas aeruginosa es consecuencia de mecanismos intrnsecos y adquisicin de

determinantes de resistencia de otras bacterias. En los ltimos aos se han reportado en diferentes pases P. aeruginosa
productoras de genes que codifican para enzimas betalactamasas tipo GES, MBL y KPC hospitales, por ello, es
importante detectar los diferentes determinantes de resistencia en cepas intrahospitalarias de P. aeruginosa en el hospital
de Cumana, estado Sucre. Metodologa: Se evaluaron fenotpicamente 85 cepas aisladas e identificadas en el Hospital
Universitario Antonio Patricio de Alcal (HUAPA) de Cuman. Estas cepas se re-identificaron segn el esquema para
bacilos gramnegativos no fermentadores. La susceptibilidad antimicrobiana se realiz mediante mtodo de difusin en
agar, segn Instituto de estndares clnico y de laboratorio (CLSI), ensayando los antibiticos: piperacilina, piperacilina-
tazobactan ceftazidima, cefepima, aztreonam, imipenem, meropenem amikacina, gentamicina, tobramicina, netilmicina,
ciprofloxacina, norfloxacina, ofloxacina y levofloxacina. Se realizaron mtodos confirmatorios para la presencia de
enzimas MBL, GES y KPC en las cepas que presentaron fenotipos caractersticos, adems de la confirmacin por PCR de
las mismas. Resultados: El 51,1% de las mismas fueron resistentes a ciprofloxacina, resaltndose que ms del 90%
presento resistencia a todas las fluoroquinolonas evaluadas. Los betalactamicos con mayor frecuencia de resistencia
fueron meropenem (36,5%), imipenem (35,0%), piperacilina (32,8%) y piperacilina-tazobactan (32,1%); mientras que
para aminoglucsidos la mayor frecuencia de resistencia fue para tobramicina (30,7%) y amikacina (29,9%). De los
mecanismos de resistencia a betalactmicos las MBL se detectaron en el 29,2% de las cepas, siendo identificadas como
bla VIM por PCR, adems de identificarse los genes bla GES con 2,2% y 1,1% de bla KPC. Conclusiones: Estos resultados
demuestran la necesidad de investigacin y vigilancia epidemiolgica constante para evitar la diseminacin de cepas con
fenotipos de multirresistencia en el centro asistencial evaluado, resaltndose adems, que el uso de mtodos fenotpicos
confirmatorios en combinacin con PCR permiten determinar los mecanismos de resistencia presentes en los aislados
clnicos del HUAPA, facilitando la aplicacin de medidas de control al respecto.

Palabras clave: Pseudomonas aeruginosa, KPC, GES, MBL, resistencia

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Implementacin de una prueba de reaccin en cadena de la polimerasa utilizando

ADN satlite de Trypanosoma cruzi para el diagnstico de la infeccin en vectores
Implementation of polymerase chain reaction using DNA satellite of Trypansoma cruzi for diagnosis of
infected vectors

Berrizbeitia Mariolgaa,b, Estaba Anstasisc, Pozo Arlethd, Jorquera Aliciad, Guzmn Militzac, Rodulfo Hectorinab
a Postgrado en Biologa Aplicada, Ncleo de Sucre, Universidad de Oriente (UDO), b Instituto de Investigaciones en
Biomedicina y Ciencias Aplicadas, Universidad de Oriente (UDO), Cuman, Venezuela, c Departamento de Bioanlisis,
Ncleo de Sucre, Universidad de Oriente (UDO), d Centro de Investigaciones en Ciencias de la Salud, Universidad de
Oriente, Ncleo de Anzotegui, Barcelona, Venezuela.

Introduccin: Uno de los aspectos fundamentales en el diagnstico y epidemiologa de la enfermedad de Chagas, es el

seguimiento de la infeccin de los triatominos. En Venezuela los vectores ms comunes transmisores de la enfermedad
son R. prolixus, T. maculata y P. geniculatus. El objetivo del presente trabajo fue estandarizar e implementar una prueba
de alta sensibilidad y especificidad, como es la reaccin en cadena de la polimerasa (PCR), para el diagnstico molecular
de T. cruzi en triatominos. Metodologa: Se analizaron las heces preservadas en papel de filtro de 30 insectos reduvdeos,
15 infectados y 15 sin infeccin, previamente identificados y donados por el Laboratorio de Referencia Nacional de
Inmunodiagnstico de Chagas (Maracay, Venezuela). El ADN total de las muestras de heces fue extrado y purificado
empleando columnas de la casa comercial Qiagen. La reaccin de PCR se llev a cabo utilizando los cebadores TCZ3 y
TCZ4 que amplifican fragmentos especficos de ADN del parsito de 168pb, 360pb y 550pb. El criterio de positividad de
la prueba fue la observacin de la banda de 168pb que indica la presencia de ADN de T. cruzi. Resultados: La prueba de
PCR estandarizada fue 100% sensible y 93,75% especfica. Asimismo, los valores predictivos positivo y negativo de la
misma fueron 94% y 100%, respectivamente. La prueba de PCR estandarizada utilizando el par de cebadores TCZ3 y
TCZ4 proporciona una herramienta de diagnstico molecular de extraordinario desempeo y representa una herramienta
disponible actualmente en el estado Sucre, para el diagnstico de vectores infectados por T. cruzi. Conclusin: Este
trabajo constituye un aporte de las escasas investigaciones que validan el empleo de este par de cebadores para el
diagnstico de la infeccin por T. cruzi a partir de las heces de los vectores.

Palabras clave: T. cruzi, PCR, diagnstico, vectores, TCZ3, TCZ4

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Comparacin entre PCR Convencional y PCR en Tiempo Real para el Diagnstico

Diferencial de Esporotricosis y Leishmaniasis.
Comparison of conventional PCR and real-time PCR for differential diagnosis of
sporotrichosis and leishmaniasis

Rodrguez-Brito Sabrinaa, Camacho Emmaa, Mendoza Mireyab y Nio-Vega Gustavoa

a
Centro de Microbiologa y Biologa Celular, Instituto Venezolano de Investigaciones Cientficas, Caracas,
Venezuela. b Laboratorio de Micologa, Instituto de Biomedicina, Caracas, Venezuela.

Introduccin: La esporotricosis y la leishmaniasis son infecciones subcutneas que presentan manifestaciones clnicas
similares, pero son producidas por diferentes agentes etiolgicos. La esporotricosis es una infeccin fngica subcutnea
causada por diferentes especies de Sporothrix mientras que la leishmaniasis es una infeccin parasitaria causada por
Leishmania spp, un parsito unicelular transmitido por picaduras de mosquitos del gnero Phlebotomus. Debido a la
similitud de las lesiones clnicas producidas por ambos microorganismos y los diferentes mtodos que permiten su
diagnstico, el presente estudio tiene por objetivo evaluar y comparar dos tcnicas moleculares con el fin de tener un
nico mtodo para la deteccin de ambas infecciones o incluso la coinfeccin de ambos agentes. Metodologa: Multiplex
PCR en tiempo real y multiplex PCR convencional fueron comparadas para el diagnstico diferencial de Sporothrix spp.
and Leishmania spp. La deteccin de Sporothrix spp. se evalu mediante el uso de una secuencia de ARNr 18S, mientras
que Leishmania spp. se evalu por el uso de primers previamente reportados que amplifican un producto de 120 pb de
minicrculos del kinetoplasto (kDNA). Para determinar el nivel de sensibilidad de cada ensayo se realizaron diluciones
seriadas de ADN tanto de S. schenckii como de L. mexicana. Resultados: Multiplex PCR en tiempo real fue capaz de
detectar 200 fg de ADN por reaccin de cada microorganismo, mientras que multiplex PCR convencional fue capaz de
detectar 20 pg de cada microrganismo por reaccin. Anlisis de curva de melting en PCR en tiempo real revel que
Sporothrix spp. mostr un pico a 82.6 C mientras que Leishmania spp. mostr un pico diferente a 84.5 C. Conclusin:
La tcnica de Multiplex PCR en tiempo real es ms sensible y rpida que la PCR convencional en la deteccin simultnea
de Sporothrix y Leishmania

Palabras clave: Sporothrix spp., Leishmania spp., Diagnstico molecular

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Diseo de Clones para la expresin de protenas de Rotavirus

Cloning Design for the expression of Rotavirus proteins

Bohrquez Visier Ana P., Gonzlez Jos Miguel, Moros Zoila, Vizzi Esmeralda, Zambrano Jos L.
Instituto Venezolano de Investigaciones Cientficas. Centro de Microbiologa y Biologa Celular.
Laboratorio Biologa de Virus Caracas.

Introduccin: La infeccin por rotavirus (RV) es una de las causas ms comunes de gastroenteritis en nios menores de 5
aos a nivel mundial. La morfognesis del virus es un proceso complejo que involucra la formacin de sitios de
replicacin en el citoplasma llamados viroplasmas, dentro de estas estructuras se ha reportado la presencia de protenas
celulares efectoras de vas de estrs celular. Las protenas virales asociadas a estas estructuras son VP1, VP3, VP2, VP6,
NSP2, NSP5. La protena NSP4 se encuentra asociada al retculo endoplasmtico (RE), la cual funciona como receptor
intracelular de VP6 anclando los viroplasmas al RE. Otra protena importante en el ciclo replicativo de RV es la protena
NSP1 que se encuentra distribuida en el citoplasma y tiene funcin de bloquear la actividad del interfern. La interaccin
de las protenas de RV con protenas involucradas en las rutas de estrs celular, es poco conocida. La investigacin
planteo como objetivo, clonar y expresar las protenas virales NSP1, NSP2, NSP4, NSP5 y VP6 de RV OSU de rotavirus
con el fin evaluar las posibles interacciones con protenas celulares. Metodologa: Las protenas virales fueron
amplificadas por RT-PCR a partir de la semilla OSU y luego insertadas en el vector de expresin pFLAG-CMV-4. La
integracin de los fragmentos fue evaluada mediante PCR, restriccin enzimtica y secuenciacin automatizada.
Resultados: Los resultados del anlisis de las secuencias obtenidas, adems de los ensayos de restriccin y la
amplificacin de los genes que codifican para las protenas virales a partir de aislados transformados confirman la
obtencin de los clones para la expresin de las protenas de rotavirus. Conclusin: La obtencin de clones que expresan
protenas de rotavirus permitir realizar ensayos de identificacin y de interaccin con protenas celulares, los cuales
amplan el conocimiento sobre el ciclo de replicacin viral y las posibles vas de sealizacin celular involucradas.

Palabras clave: rotavirus, clon, PCR, pFLAG-CMV-4

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Estudio Comparativo de la Expresin de ki67 y p53 en Lesiones Intraepiteliales de

Cuello Uterino y la Infeccin por Virus de Papiloma Humano
Comparative expression of ki67 and p53 in cervical intraepithelial lesions and infection with
Human Papilloma Virus

Cavazza Mara Eugeniaa, Bentez Vanessaa,b, Avila Mairac, Ortiz Dianad, Correnti Mariac
a
Laboratorio de Microbiologa Molecular, Instituto de Biomedicina, MPPS-UCV. b Servicio de Anatoma
Patolgica, Hospital Vargas de Caracas. c Laboratorio de Gentica Molecular , Instituto de Oncologa y
Hematologa MPPS-UCV

Introduccin. celular, son ms agresivos y propensos a progresar en

Actualmente el virus del papiloma humano (VPH)
ha venido aumentando su incidencia y prevalencia a
nivel mundial, despertando as un gran inters clnico
concebido a la investigacin sustentando y aplicando
nueva tecnologa y tcnicas de diagnstico para la
deteccin del mismo, las cuales nos ha permitido
descubrir gran parte de la conformacin
comportamiento de este virus [1]. El VPH se han
implicado en la gnesis de varios
particularmente el carcinoma escamoso del cuello
uterino y de la regin ano genital y, en algunos casos,
en la produccin de canceres orales y larngeos entre
otros [2]. Los estudios epidemiolgicos sugieren que el
carcinoma del cuello uterino (CaCu) est producido por
un agente transmitido por va sexual, y el VPH es el
culpable [3]. En Venezuela y el mundo el CaCu
representa la segunda causa de muerte en la poblacin
femenina, y en la mayora de los casos la infeccin por
VPH est presente aumentando as el riesgo a padecer
de esta patologa [4]. El VPH es la infeccin de
transmisin sexual ms frecuente en el mundo con un
80% aproximadamente. Se han identificado
aproximadamente 100 tipos genticamente distintos de
VPH [5], los cuales estn divididos en VPH de bajo
riesgo entre los cuales los ms comunes son el VPH
tipo 6 y 11 solo muy pocos evolucionan a algn tipo de
cncer y clnicamente tienden a formar verrugas, y los
de alto riesgo ms comunes el VPH tipo 16 y 18 los
cuales son los que tienen una mayor proliferacin
cncer o alguna neoplasia intraepitelial [3]. Este virus
puede detectarse mediante diversas tcnicas como el
estudio citolgico, histolgico y molecular. Estudios
recientes han empleado la tcnica de
inmunohistoqumica para estudiar y analizar a travs de
marcadores oncognicos la proliferacin celular que
y pueda existir en los diferentes estadios de las lesiones
asociadas al VPH ya sea de bajo o alto riesgo [6]. El
canceres, objetivo de este trabajo fue evaluar la asociacin del
diagnstico histolgico con un ensayo
inmunohistoqumico y molecular, para la deteccin del
Virus de Papiloma Humano.
Materiales y Mtodos.
Se seleccionaron 39 biopsias de cuello uterino
correspondientes a pacientes del sexo femenino, del
Servicio de Anatoma Patolgica del Hospital Vargas de
Caracas. Las muestras fueron fijadas en formol y
procesadas rutinariamente incluyndolas en parafina
siendo coloreadas con la tincin de hematoxilina
eosina, y diagnosticadas con la clasificacin del sistema
Bethesda.
Posteriormente, se realizaron 4 cortes los cuales
fueron desparafinados con xilol durante toda la noche
para, al da siguiente se lavaron con PBS y se inhibi la
peroxidasa endgena con 3% H2O2 en metanol, se
bloque con suero normal de caballo 1:30 incubando
durante 30min, se incubo con anticuerpo Ki67
(concentracin 1:100) y p53 (concentracin 1:25)
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durante 90 min, luego se incub el anticuerpo las de bajo grado, encontrando tambin una diferencia
biotilinado (BHAM 1:100) durante 30 min., incubar estadsticamente significativa con un valor de P <0,001.
Complejo Streptavidina durante 15 min. Y se revel con Demostrando estos datos que mientras mayor es el
sustrato de peroxidada NovaRED kit (vector). Para la grado de la lesin, el nivel de proliferacin celular
cuantificacin inmunohistoqumica, se contaron 20 aumenta progresivamente.
campos en cada lmina, tomando en cuenta el epitelio
plano estratificado y glandular del cuello uterino. La
purificacin de ADN de las muestras se realiz
mediante el kit comercial de QUIAGEN, Luego de
obtenido el ADN se realiz la genotipificacin de VPH
por PCR hibridacin reversa (estuche INNO-LiPA-
VPH). El resultado fue interpretado luego de verificar
los nmeros de bandas reactivas resultantes del proceso
de hibridacin. Las sondas que amplia este kit para
Figura 1. Comparacin del ensayo inmunohistoqumico
VPH de bajo riesgo son tipo 6, 11, 40, 43, 44, 54 y 70; para los marcadores Ki67 y p53 con diagnstico
de alto riesgo 16, 18, 31, 33, histolgico de LIE bajo y alto grado
A: Ki 67 (LIE de bajo grado) B: p53 (LIE de bajo
35,39,45,51,52,56,58,59,68,73,82 y para los de probable grado)
alto riesgo 26, 53, 66, 69, 71, 74. Los datos se C: Ki 67 (LIE de alto grado) D: p53 (LIE de alto grado)

procesaron por el sistema estadstico INSTAT-3 versin

La tipificacin encontrada en las 39 muestras de
software 3.02 (GraphPad Software, San Diego, CA),
biopsias de cuello uterino fue la siguiente para un total
mediante un anlisis de varianza (ANOVA, p< 0,05).
de 20 casos diagnosticados como LIE de bajo grado por
histologa el 5% (1/20) fue inhibido, 15% (3/20) fueron
Resultados y Discusin
negativas, 40% (8/20) correspondi a VPH de bajo
Para la comparacin de Inmunohistoqumica con el
riesgo oncognico, 15% (3/20) VHP de alto riesgo
diagnstico Histopatolgico (Bajo y Alto grado) se
oncognico y 25 % (5/20) presentaron una
tomaron en cuenta las 39 biopsias de cuello uterino, 20
genotipificacin mixta (VPH de bajo y alto riesgo
muestras diagnosticadas como LIE de bajo grado y 19
oncognico) ( Figura 2).
como LIE de alto grado, todas marcadas con los
De 19 casos diagnosticados como LIE de alto grado
anticuerpos Ki 67 y p53.
o Carcinoma in situ por histologa el 26,31% (5/19) fue
En la figura 1 se observ que los niveles para Ki67
inhibido, 5,26% (1/19) fueron negativas, 0% (0/19)
encontrados en el epitelio de cuello uterino fueron
correspondi a VPH de bajo riesgo oncognico, 63,15%
mayores en las Lesiones de alto grado histolgico (NIC
(12/19) VPH de alto grado oncognico y 5,26% (1/19)
II, NIC III, Carcinoma in situ), en contraste con las
presentaron una genotipificacin mixta (VPH de bajo y
Lesiones de bajo grado histolgico(Infeccin por VPH,
alto riesgo oncognico).
NIC I), encontrando una diferencia estadsticamente
De un total de 29 casos positivos para VPH por
significativa con un valor de P <0,001, al igual que para
genotipificacin obtuvimos 40 genotipos los cuales se
el ensayo con p53 donde se observ una tendencia a
distribuyeron de la siguiente manera en las Lesiones
aumentar en las Lesiones de alto grado con respecto a
intraepiteliales de bajo grado 14/25 (56%)
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correspondieron a genotipos de bajo riesgo oncognico
y 11/25 (44%) correspondieron a genotipos de alto
riesgo oncognico; y en las Lesiones intraepiteliales de
alto grado 1/15 (6,67%) correspondieron a genotipos de
bajo riesgo
correspondieron a genotipos de alto riesgo oncognico.
Los genotipos ms resaltantes fueron VPH tipo 11 con
un 32,5% (13/40), VPH tipo 18 con 12,5% (5/40), VPH
tipo 31 10% (4/40) y los VPH tipo 33,35 y 52 cada uno
con un 7,5% (3/40) (Fig. 3).
70
Porcentaje por Genotipificacin
en LIE de bajo y alto grado. En nuestro estudio se
obtuvo que la expresin de las protenas Ki67 y p53
aument conforme increment el grado de la Lesin,
aprecindose as un mayor ndice de inmunoexpresin
oncognico y 14/15 (93,33%) en las Lesiones de alto grado como Carcinoma in situ.
se evidencio que existe una relacin entre los ndices de
proliferacin celular y el grado histolgico en las
Lesiones de Cuello Uterino. En un estudio realizando
doble marcaje de p16/Ki67 se observaron resultados
similares en cuanto a la relacin existente entre LA
falta de regulacin de la proliferacin celular y la
infeccin por VPH , incluso este doble marcaje fue
propuesto como un sistema predictivo de las lesiones de

60
50 LIE de alto grado [7].
40 BG
30 AG En el estudio de la neoplasia cervical estos ndices
20
10 de proliferacin podran ser relevantes ya que, en la
0
Inhibido Negativo Genotipo BR Genotipo AR Genotipo Mixto (BR
y AR) carcinognesis del cuello uterino estn involucradas las
oncoprotenas de VPH, que alteran el control del ciclo
Figura 2. Comparacin del diagnstico histolgico con
la genotipificacin para VPH celular e inducen una proliferacin celular masiva y
BG: Bajo Grado Histolgico BR: Bajo Riesgo descontrolada. Este hecho quedara reflejado en la
Oncognico
AG: Alto Grado Histolgico AR: Alto Riesgo expresin inmunohistoqumica excesiva del antgeno de
Oncognico proliferacin celular Ki-67, tanto en las lesiones
intraepiteliales de bajo grado como en las de alto grado
Genotipificacin por INNO-LiPA en LIE de Bajo y Alto grado [8,9].
60 Algunos autores, como Kuo y col., refieren que la
50
expresin de p53 puede ser reflejada en epitelios
Porcentaje %

40 Histologa BG
30 Histologa AG normales, es decir sin ningn tipo de lesin. Sin
20 Total
embargo, en nuestra investigacin la cantidad de clulas
10
0 que presentaron la inmunoexpresin para p53 fue
Tipo Tipo Tipo Tipo Tipo Tipo Tipo Tipo Tipo Tipo Tipo Tipo Tipo
6 11 40 16 18 31 33 35 39 52 53** 56 66** significante, ya que se evidenci un aumento de esta
Genotipos
protena a la vez que el grado de la lesin progresaba,
Figura 3. Genotipificacin (INNO-LiPA) especfica lo cual concuerda con los resultados de otros
usando el sistema de hibridacin reversa y su relacin
con LIE de bajo y alto grado investigadores [10].En este estudio se evidenci que Ki-
67 y p53 se correlacionan bien con el diagnstico
La expresin de diversas protenas dependientes de histopatolgico y pueden ser marcadores tiles para el
genes en el epitelio cervical, puede ser evaluada a travs diagnstico clnico [10,11].
de la tcnica de inmunohistoqumica. Mediante esta Estudios previos han proporcionado evidencia de
tcnica, se han examinado protenas como p53 y Ki 67 una asociacin entre VPH y el desarrollo de Lesiones
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intraepiteliales. A travs de las pruebas moleculares
evidenciamos que existe una gran correlacin con el
diagnstico histolgico sobre todo en las lesiones de
alto grado donde el 63,1% de los genotipos fueron de
alto riesgo oncognico, sustentando as la histopatologa
[4].
Conclusiones
Los genotipos predominantes fueron VPH 11 de bajo
riesgo oncognico y VPH 18 de alto riesgo oncognico,
de igual manera se obtuvo un total de 30,3% (6/39) de
infeccin mixta, la cual es de gran importancia ya que
puede estar implicado el aumento de la incidencia del
CaCu [12]. En conclusin podemos considerar que,
conocer el genotipo del virus actualmente
fundamental para poder tomar las decisiones clnicas
correctas en los pacientes que poseen infeccin con
Virus de Papiloma Humano.
Agradecimientos: Trabajo financiado por el proyecto
Misin Ciencias G-2007001088. MPPCTI y el Servicio
Autnomo Instituto de Biomedicina-MPPS-UCV.
Palabras clave: VPH, Ki67, p53, cncer de cuello
uterino
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Evaluacin del Sistema GeneXpert MTB/RIF para el diagnstico rpido de

Mycobacterium tuberculosis. Centro de Referencia Bacteriolgica SAHUM.
Maracaibo, Venezuela
Evaluation of MTB/RIF GeneXpert System for rapid diagnosis of Mycobacterium tuberculosis,
Maracaibo, Venezuela

Perozo-Mena Aa,b; Romay Zc; Farria Nc.

a
Prctica Profesional de Bacteriologa. Escuela de Bioanlisis. La Universidad del Zulia.
b
Centro de Referencia Bacteriolgica SAHUM. c Programa Regional de Tuberculosis HGS.

Introduccin: El diagnstico bacteriolgico tradicional para la identificacin de especies de Mycobacterium se basa

principalmente en el cultivo, este mtodo es laborioso, requiere de personal entrenado y los resultados tardan hasta 12
semanas. Actualmente se han desarrollado tcnicas rpidas como el PCR en tiempo real, capaces de proporcionar
resultados directo de muestras en aproximadamente de 2 a 3 horas. El objetivo de este trabajo es evaluar el sistema
GeneXpert MTB/RIF para la identificacin de especies de M. tuberculosis y determinar su susceptibilidad a Rifampicina.
Metodologa: A 90 muestras de esputo con baciloscopia positiva, se les realiz la tcnica de PCR, cuyos resultados
fueron comparados con el mtodo tradicional. Resultados: De las 90 muestras estudiadas, 84 (93,33%) dieron PCR
positivo para M. tuberculosis, al comparar estos resultados con el cultivo se obtiene que 55 cultivos fueron positivos para
M. tuberculosis, 5 para Micobacterium complejo avium-intracellulare y 1 para Mycobacterium scrofulaceum; 13 cultivos
fueron negativos y 16 se contaminaron. 73 (86,90%) muestras positivas por PCR fueron sensibles a Rifampicina, mientras
que 11 fueron resistentes. Estos resultados indican una muy buena correlacin entre el sistema MTB/RIF GeneXpert y el
cultivo, ya que las especies distintas a M. tuberculosis (6), dieron la amplificacin por PCR negativa, por otra parte, el
PCR muestra ms susceptibilidad que el cultivo, ya que 29 muestras con lmina positiva no crecieron o se contaminaron
en el cultivo probablemente debido a problemas inherentes a la tcnica. Es importante resaltar la presencia de cepas
resistentes a Rifampicina detectadas por este mtodo, ya que, generalmente este antibitico se utiliza como marcador de
multiresistencia. Actualmente, la susceptibilidad de estas cepas se est confirmando por mtodos tradicionales.
Conclusin: Est tcnica permite obtener resultados confiables y en un perodo de tiempo muy corto al compararlo con el
cultivo tradicional, uno de los inconvenientes de la tcnica es su costo.

Palabras clave: GeneXpert; MTB/RIF; M. tuberculosis; resistencia rifampicina; PCR tiempo real.
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Genotipificacin del Virus de Papiloma Humano mediante la PCR multiplex en

mujeres atendidas en el hospital de la Villa del Rosario de Perij
del estado Zulia. Venezuela
Genotyping of Human Papillomavirus by multiplex PCR in women treated at the hospital in the
town of Rosario of Perij in Zulia state Venezuela.

Castellanos Mara Eb, Costa de Len Luciana b, Mindiola Raimya, Gil Daibel, Monsalve Franciscab,
Porto Leticiaa, Callejas Dianaa,b, Suarez Dayany.
a
Laboratorio Regional de Referencia Virolgica. Facultad de Medicina. La Universidad del Zulia.
b
Ctedra de Virologa Escuela de Bioanlisis. Facultad de Medicina. La Universidad del Zulia

Introduccin: El Virus de Papiloma Humano (VPH), es un virus con propiedades oncognicas que est asociado al 99%
del cncer uterino. Las infecciones por este virus estn relacionadas con factores, como: el nmero de parejas sexuales, la
frecuencia de intercambio sexual y la presencia de verrugas genitales en la pareja. El Propsito fue diagnosticar los
diferentes genotipos del VPH circulantes en mujeres atendidas en el Hospital Villa del Rosario de Perij del Estado Zulia.
Metodologa: Se recolectaron 94 muestras de mujeres que asistieron a la consulta de despistaje de cncer de cuello
uterino. Se verific la calidad de la muestra mediante amplificaciones del gen beta-globina. La deteccin del VPH se
realiz mediante el uso de los primer: MY09/MY11, GP5+/GP6+ y E6/E7, dirigidos a la regin L1 del virus, las muestras
positivas se sometieron a una PCR Multiplex para la tipificacin. Resultados: De las 94 muestras estudiadas, el 52,1%
(49) resultaron positivas para la deteccin del ADN del VPH, obtenindose para cada par de primers diferente incidencia:
GP: 37,2%, MY: 28,7% y E6/E7: 13,8%. Se genotipificaron los casos positivos observndose mayor prevalencia del
genotipo de alto riesgo 18 con un 10,6%; mientras que el genotipos de bajo riesgo con mayor frecuencia fue el 6/11 con
un 4,3%. Conclusiones: El empleo de tcnicas de biologa molecular, en este caso el uso de la PCR convencional y
multiplex permite el diagnstico del Virus de Papiloma Humano disminuyendo los falsos negativos; observndose una
elevada incidencia de esta ITS en la comunidad estudiada; siendo los genotipos de alto grado los de mayor frecuencia.

Palabras clave: VPH, PCR convencional, PCR Multiplex, ITS

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Genotipos de Helicobacter pylori y su asociacin con concentraciones de pepsingenos

y gastrina en pacientes sintmaticos en Cuman, Venezuela.
Helicobacter pylori genotypes, its association with pesinogens and gastrin concentrations in
sintomatic patients

Luz Bettina Villalobos de Ba, Mara Eugenia Cavazza P b. Diana Ortiz-Princz b

a Universidad de Oriente, Ncleo de Sucre. Postgrado en Biologa Aplicada; b Instituto de Biomedicina,
Laboratorio de Microbiologa Molecular

*Correspondencia autor principal

Email:Lbvillalobosb@yahoo.com

Introduccin. citotxica. El gen cag A esta localizado en una isla de

Helicobacter pylori ha sido asociado a patologas patogenicidad (PAI) de 40 kb que se ha transferido
gstricas, lceras, linfoma gastroduodenal y es horizontalmente a partir de una fuente no conocida (3).
considerado un factor de riesgo para el desarrollo de El PAI cag codifica el sistema de secrecin tipo IV, a
cncer gstrico. La infeccin por H pylori, inicia una travs del cual CagA es llevada hasta la clula. La
serie de eventos en los que inicialmente se produce una estructura del gen vacA permite variantes en la
destruccin de la superficie mucosa epitelial actividad vacualizante de las cepas, Posee una regin
denominada gastritis crnica activa. En el inicio seal (s), una regin media (m) y una regin intermedia
progresa profundizando la inflamacin de la mucosa a (i). las cepas m1s1 son consideradas las ms toxicas. El
una forma de gastritis crnica severa profunda y objetivo de este trabajo fue establecer la relacin de las
posteriormente a una gastritis crnica atrfica con concentraciones de pepsingenos y gastrina con los
prdida de glndulas antrales o fndicas; presencia de genotipos de H. pylori.
desarrollndose luego metaplasia intestinal, displasia y
adenocarcinorna (1). La cuantificacin srica de Materiales y mtodos.
pepsingenos se ha utilizado como un marcador Se evaluaron 69 pacientes que asistieron a la
bioqumico no invasivo para el monitoreo de la consulta del Servicio de gastroenterologa del Hospital
secrecin pptica obtenindose informacin del estado Antonio Patricio de Alcal con indicacin endoscpica,
de la mucosa gstrica (2), Igualmente la cuantificacin quienes manifestaron mediante previa autorizacin por
de los niveles de gastrina, que regula la secrecin de escrito su consentimiento para la toma de la muestras
cido, se ven afectada cuando los procesos sanguneas y de las biopsias siguiendo los lineamientos
inflamatorios afectan a las glndulas gstrica del Comit de Biotica del Servicio Autnomo Instituto
provocando una aclorhidria o una hipergastrinemia. de Biomedicina del MPPS-UCV Se tomaron biopsias
Entre los factores que afectan la severidad de la gstricas para la deteccin por Reaccin en Cadena de
infeccin estn las variantes fenotpicas de H. pylori la polimerasa (PCR) las variantes allicas del gen vacA
que permiten la identificacin de cepas con capacidad y la presencia del gen cag A (4) y el estudio histolgico.
de virulencia, la citotoxina vacuolizante codificada por Las concentraciones de pepsingeno I, pepsingeno II
el gen vacA, el cual est presente en la mayora de las y gastrina se realizaron en suero sanguneo tomado de
cepas de H. pylori (3), y la protena de alto peso los pacientes, La evaluacin de pepsingeno I, II y
molecular asociada al gen cagA que es tambin gastrina en el suero de los pacientes se realiz mediante
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la utilizacin de la tcnica de ELISA con anticuerpos de
captura especficos adsorbidos en la microplaca
(ELISA Kit, BIOHIT, Finland) y para la deteccin se
utilizaron anticuerpos marcados con peroxidasa. Una
vez realizadas las curvas de calibracin, las
concentraciones de PG1 menores de 25 g/l en los
sueros, fue tomado como indicativo de gastritis atrfica
en la mucosa del corpus. Una razn de PepI/PepII < 2,5
se consider que los pacientes eran positivos para una
gastritis atrfica moderada o severa, Los pacientes
positivos para Helicobacter pylori y con valores
menores de gastrina <2.0 pmol/L, sugiri dos
posibilidades: 1) la mucosa antral estaba atrfica
(gastritis antral severa o moderada) y/o 2) el estmago
est fuertemente cido, que impide la liberacin de la
gastrina por las clulas G antrales. (BIOHIT).
Resultados y discusin.
Histologa. Segn el estudio de las biopsias por
histologa, el 82,6 % de los pacientes estaban infectados
por la bacteria. En ningn caso se evidenci metaplasia
y el 100% evidenci alguna forma de gastritis cuya
clasificacin origin la distribucin de los pacientes en
4 grupos histolgicos siguiendo la clasificacin de
Sidney (1994) Grupo 1: pacientes con gastritis crnica
leve (n=20), Grupo 2, gastritis crnica activa (n=12),
Grupo 3, gastritis crnica moderada (n= 27), Grupo 4,
gastritis leve (n=10). En ninguno de estos pacientes se
observ lesiones malignas.
Pepsingenos y gastrina. Se consider que los
pacientes con concentraciones de pepsingeno I
menores de 25 g/L eran positivos para una gastritis
atrfica, de acuerdo a lo establecido por los fabricantes
del estuche de prueba por ELISA. Los valores
observados en el total de los pacientes oscilaron entre
4,365 256,4 g/L. siendo el promedio de 67,69 g/L
+54,8. De acuerdo a estos puntos de corte, se estableci
que el 15,94% de los pacientes estuvieron por encima
de los valores normales, 42,08% dentro del rango
normal y el 26,1% por debajo del punto de corte
establecido que indicara pacientes con atrofia. Los
pacientes con gastritis leve crnica mostraron
promedios (79,126 g/L+ 71,78); el grupo con gastritis
crnica activa obtuvieron un promedio (69,36g/L +
47,43), los pacientes del grupo gastritis cnica modera
(67,46 g/L+43,61) y el grupo diagnosticado con
gastritis leve (43,52 g/L+ 36,56). Una vez realizados
los anlisis para la determinacin de los ttulos del
pepsingeno II en los pacientes, se calcul la razn
entre los valores obtenidos de pepsingeno I y
pepsingeno II para poder observar el valor de corte
establecido para pacientes con gastritis atrfica
avanzada es de (<2,5) siendo el promedio de la razn
observado de 5,05+ 6,64. Segn las indicaciones del
fabricante de la prueba, una razn por debajo de 2,5 se
considerara como un posible diagnstico positivo para
pacientes con atrofia de cuerpo y razones entre 2,5 y 30
se consideraran normales. Con estos puntos de corte
se diagnosticaron 33,33% (23/69) de los pacientes con
atrofia de cuerpo avanzada, 63,76% (44/69) normales y
2,89% (2/69) sobre los valores normales. Los pacientes
con gastritis crnica leve tuvieron una razn promedio
de (4,61+2,72), los del grupo diagnosticado con gastritis
crnica moderada razn promedio de pepI/pepII de
(4,94 +8,46). Se observ que los pacientes con gastritis
leve presentaron el promedio ms elevado de la razn
pepsingeno I/II (7,38+ 10,06), los pacientes
catalogados con patologa de gastritis crnica activa el
valor ms bajo (4,06+ 1,13). Esto coincide con el
diagnstico histolgico, ya que los pacientes con una
gastritis crnica, tienen un proceso inflamatorio que
puede haber daado las clulas principales del epitelio
estomacal productoras de los pepsingenos I y II. En
trminos generales se puede decir que las razones
observadas pep I/pep II podran dar evidencia
fisiolgica de atrofia en el cuerpo. La utilizacin slo
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de pep I para la determinacin de la patologa no es
eficaz, puesto que la concentracin de pepI aumenta en
la gastritis y disminuye en la gastritis atrfica, por lo
tanto la razn pep I/pep II decrece en ambas patologas
dando un resultado ms certero en el diagnstico. Los
estudios que se han realizado en la utilizacin de
pepsinogenos son muy heterogneos, mientras la
mayora valida el mtodo (5), otros establecen que no
son tan funcionales, pues los resultados son
influenciados en sus puntos de corte por otros factores.
Se ha establecido que los puntos de corte de los
pepsingenos y/o su razn para la deteccin de atrofia,
lesiones precancerosas o cncer gstrico pueden variar
entre las poblaciones, ya sea por diferencias genticas,
prevalencia y caractersticas de la infeccin por
Helicobacter pylori u otros microorganismos, estilos de
vida y tambin la definicin local de atrofia. (6) (7).Para
las concentraciones de gastrina, se consideraron
pacientes positivos para mucosa antral atrfica, aquellos
pacientes con valores <2,0 mol/L, de acuerdo a las
indicaciones del fabricante del estuche. Los valores
observados en el total de los pacientes oscilaron entre
0,075 -36,42 pmol/L, con un promedio de 1,970 pmol/+
4,716, segn estos resultado 64/69 (92,3%) de los
pacientes estaran con algn tipo de gastritis que
incluira principalmente atrofia en el antro. Los
pacientes con gastritis crnica activa y gastritis crnica
moderada, mostraron promedios de (1,62 pmol/L +
1,68, y 1,29 pmol/L + 1,65) respectivamente. Se
observ que pacientes que histolgicamente libres de
atrofia antral, tenan valores de gastrina por debajo de
1pmol/L, lo que coincide con nuestros resultados. (8).
Los bajos niveles de gastrina 17 en el suero se explican
no slo por la prdida de clulas G antrales, sino
tambin por la inhibicin por retroalimentacin de la
liberacin de gastrina 17 a partir de la clulas antrales
que producen una excesiva acidez intragastrica (9),
causando una errada interpretacin de atrofia antral.
Tambin se ha determinado que un efecto antagonico
entre atrofia del cuerpo y atrofia del antro podra alterar
los valores de gastrina (6). La Prueba estadstica de
ANOVA de una sola va realizada para establecer
diferencias entre los cuatro grupos para las
concentraciones de pepsingenos y gastrina, seal que
no hubo diferencias significativas entre ellos.
Indicando que las concentraciones, medidas en el suero
de los pacientes, no seran determinantes para establecer
el grado de la gastritis o atrofia. Genotipos. La
determinacin por PCR de los genes que codifican para
la toxina vacuolizante VacA o la citotoxina CagA,
mostr que 42 de los 69 pacientes (51%) fueron
positivos para por lo menos uno de estos dos estos
genes. El 33,33% (23/69) mostraron poseer el gen vacA.
El 27,33% (19/69) de los pacientes que fueron positivos
para ambos genes. Amplificacin para las distintas
formas allicas del gen vacA. En referencia a la
frecuencia de combinacin de los diferentes tipos
allicos de vacA y regiones medias en las biopsias
gstricas evaluadas, se observ que la combinacin ms
frecuente fue m1s1 con el 61,90% (26/42). Se destaca la
observacin que en 14 pacientes de un total de 42
(33,33%) (14/42) present infecciones con ms de una
cepa de Helicobacter pylori, siendo la ms frecuente la
combinacin m1s2 + m2s2. La frecuencia del gen cagA
en las muestras de biopsia de los pacientes positivos
para amplificacin fue de 19/42 (45,23%) con un
predominio de las cepas cagA negativas, solo se
observ asociado a cepas vacA positivas. El 35,71 %
(15/42) de los pacientes positivos por PCR para la
genotipificacin de Helicobacter pylori tenan infeccin
mixta, con predominio de la combinacin
m1s2+m2s2cagA- con el 11,90% (5/42). La correlacin
de Spearman entre los genotipos m1s1, m2s2, m2s1 y
pepsingeno 1 y gastrina no fue significativa, el
genotipo m2s2 mostro una correlacin significativa
(P<0,05; =0,252) con la razn pepI/pepII. La
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correlacin de Spearman entre el genotipo
m1s1+m2s1de Helicobacter pylori, mostr asociacin
significativa entre las pruebas diagnsticas de la razn
pepI/pepII (P<0,05 =0,252). Los otros dos genotipos,
m1s1+m1s2, m1s1+m2s2, no mostraron correlaciones
con ninguno de los mtodos de diagnsticos empleados
en este estudio. El gen cagA mostr una relacin
inversa y significativa con la disminucin de la razn
pepI/pepII (P<0,05, p=-0,250*), Esto significara que la
produccin de la citotoxina producto de este gen
ocasionara dao tanto en la regin del fondo como la
regin antral del estmago. Es importante resaltar que el
gen cagA mostr una relacin directa y significativa
(P<0,05; =0,253) con el genotipo m1s1+m2s2, ya que
el gen cagA tiende estar asociado al genotipo m1s1, es
posible que esta combinacin se vea favorecida por esta
Se ha establecido que los genotipos de vacA varan en
su toxicidad de acuerdo a la combinacin de los alelos y
se encuentran asociados al gen cagA el efecto patgeno
pude resultar an ms severo, en este estudio las
correlaciones entre los alelos de vacA y la razn pep
I/pep II y pep I, demuestra que la colonizacin por
Helicobacter pylori puede estar ocurriendo tanto el
antro como en el fondo, afectando a las clulas
principales que producen los pepsingenos, pero
especialmente las clulas principales de las glndulas
oxnticas del fondo productoras de pepsingeno I, es
decir que los bajos niveles de pepsingeno I y la razn
pep I/pep II se deben a la presencia de la bacteria. El
genotipo m2s2 mostr relacin significativa con pep
I/pep II, si bien este genotipo se dice ser poco activo
para la produccin de la toxina vacuolizante, se ha
observado en pacientes con lcera gstrica y dispepsia
funcional (10), que sugiere que el genotipo puede estar
presente con otros genes como son las de la regin
intermedia (1) que se ubica entre las regiones m y s
siendo el que regula la actividad de toxina vacuolizante.
(11). La correlacin inversa entre el gen cag A y la
razn pepI/pepII, explica que la citotoxina producida
por el gen cagA afectara tanto a las clulas de las
glndulas oxnticas productoras de pepI como al resto
de las clulas gstricas que producen pepII, entre ms
baja la razn, ms inflamacin y dao se puede estar
produciendo por la accin de la citotoxina, lo que
ameritara un estudio invasivo. Los genotipos
combinados encontrados en el presente estudio
m1s1+m2s1 pueden relacionarse con la razn pep I/pep
II, estableciendo que estos genotipos combinados son
activos, principalmente por la presencia de m1s1.
Quizs esta asociacin de genotipos sea sinrgica para
modular la actividad de m1s1 con otro genotipo menos
activo, otra hiptesis que se puede establecer es que
m1s1 acte con el genotipo asociado para la adherencia
y colonizacin en el estmago, que resultara exitoso,
pues tendra efectos patognico que se manifiestan en
la razn Pep I//Pep II indicativo de gastritis antral
atrfica. Otros genotipos combinados m1s1+m1s2 y
m1s1+m2s2, no se relacionaron estadsticamente con
los pepsingenos y gastrina, a pesar de estar presente el
genotipo m1s1, es posible que estas combinaciones sean
poco activas o que estn ms adaptadas a favorecer la
persistencia de la bacteria en el estmago. En este
estudio, siguiendo las indicaciones del Gastropanel
(BIOHIT, Finland), se debera haber observado 36,23%
(25/69) de los pacientes con gastritis atrfica, aunque
histolgicamente no fue confirmado. Los valores
predictivos ayudaran en el establecimiento del posible
el tratamiento y la verificacin del estado de la mucosa
sin necesidad de endoscopia, comparando las
concentraciones sricas de los pepsingenos y gastrina.
An ms, la utilizacin de biomarcadores predictivos
permite la deteccin inclusive en pacientes
asintomticos de estadios tempranos de cncer gstrico
limitados a la mucosa, lo que facilitara su tratamiento
(12). Si bien en este estudio no se encontr la relacin
de los distintos genotipos con la severidad del grado
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inflamatorio observado en la histologa que si ha sido
confirmado con otros trabajos (13,14), es posible que
factores derivados de la multicolonizacin de los
pacientes estudiados con cepas diversas de H. pylori
hayan participado en la no demostracin de esta
asociacin, la competencia entre las cepas que
colonizan un determinado nicho, posiblemente no
favorecen la expresin de factores proinflamatorios
como seran la ureasa, la cicloxigenasas entre otros.
Otro factor que puede considerarse es la propia
respuesta inmunolgica del individuo a la infeccin
(15). En un futuro es posible que la erradicacin de la
enfermedad, sea precedida del estudio genmico de las
cepas y la evaluacin integral del paciente, donde la
medicina de sistemas determine el mejor tratamiento.
Conclusiones.
Aunque en el estudio no se diagnostic por
histologa pacientes con atrofia, las concentraciones de
pepsingeno I, razn pepsingeno I/pepsinogeno II y
Gastrina 17, podrn estimarse como valores ms
predictivos que indicativos de la progresin de la
enfermedad por Helicobacter pylori, pues todos los
pacientes presentaron gastritis en diversos grados.
La utilizacin de biomarcadores como la cuantificacin
de los niveles sricos de Gastrina17 para determinar
dao en el antro y el cuerpo sin necesidad de
endoscopia, es una alternativa en el estudio no invasivo
de la mucosa gstrica de los pacientes.
En este estudio las concentraciones sricas de la razn
pepI/pepII se correlacionaron con los genotipos,
m1s1+m2s1, caracterizado por ser activos en la
produccin de toxinas.
-La importancia del estudio de los factores de virulencia
en conjunto que las concentraciones de pepsingenos y
gastrinas, es que sirvan como marcadores para que en
un futuro permitan establecer estrategias de prevencin
de patologas severas en poblaciones susceptibles.
Proyecto parcialmente financiado por Misin Ciencias
GN2007001425, UDO CINS N C.I. 2-010101-
1248/05.
Agradecimiento: Expresamos nuestro agradecimiento
al personal mdico y enfermeras del Servicio de
Gastroenterologa del Hospital Universitario Antonio
Patricio de Alcal en Cuman estado Sucre por su
valiosa colaboracin en la realizacin de esta
investigacin
Palabras clave: Helicobacter pylori, gastritis,
genotipos, pepsingenos y gastrina.
Referencias.
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Deteccin de genes de Helicobacter pylori en nios venezolanos con dolor abdominal

recurrente: una infeccin para vigilar de cerca
Detection of Helicobacter pylori genes in Venezuelan children with recurrent abdominal pain: an
infection to monitor closely

Ortiz-Princz Dianaa*, Villalta Beatrizb, Urresterazu Mara Isabelc, Serrano Norisc,

Cavazza Mara Eugeniaa
a
Laboratorio de Microbiologa Molecular Instituto de Biomedicina, b Servicio de Gastroenterologa
Hospital Elas Toro de Caracas, c Laboratorio de Microbiologa Instituto de Biomedicina.

Introduccin. desarrollar adenocarcinoma gstrico [7]. El gen babA,

El dolor abdominal recurrente (DAR) es una de las
ms frecuentes causas de consulta peditrica y la
infeccin por H. pylori es uno de los factores
etiolgicos que contribuyen a la aparicin de este
sntoma. H. pylori es un bacilo curvo Gram negativo
que coloniza la mucosa gstrica [1], la infeccin es
principalmente adquirida en la infancia y permanece por
dcadas en el individuo. En muchos casos las personas
permanecen asintomticas, sin embargo, alrededor del
20% progresan a enfermedades preneoplsicas
pudiendo desarrollar neoplasias gstricas [2]. La
gastritis crnica, gastritis atrfica, el desarrollo de
lceras y el cncer gstrico son patologas asociadas a la
infeccin por este agente [3]. Es por ello que la Agencia
Internacional de Cncer (IARC) lo catalog como
carcingeno humano tipo I en 1994 [4]. El riesgo a
desarrollar patologas gstricas severas se ve
incrementado por la combinacin de variantes allicas
que presenta el gen vacA de H. pylori as como la
presencia del gen cagA (5,6). El gen vacA est presente
en todas las cepas de H. pylori, pero la combinacin de
sus alelos m1/s1 es ms virulenta que la m2/s2
provocando mayor vacuolizacin de la clula epitelial
por la accin de su citotoxina VacA, incrementando as
el riesgo de desarrollo de lceras gstricas y
adenocarcinoma [5,6]. Por otra parte, el gen cagA
codifica para un sistema de secrecin tipo IV a travs
del cual la bacteria inyecta la protena CagA al interior
de la clula epitelial, aumentando el riesgo de
le confiere a la bacteria mayor adhesin a la clula
epitelial, coadyuvando as a la persistencia de la
infeccin [8]. Pocos estudios se han realizado para
evaluar la prevalencia de infeccin por H. pylori en
nios nivel mundial y en Venezuela son escasos. Est
claro que existe una alta seroprevalencia de infeccin en
adultos que vara del 70% al 90% en pacientes
sintomticos. Estudios previos de nuestro grupo de
investigacin han mostrado prevalencia de infeccin,
determinada por la presencia de antgenos en heces, que
vara del 10 al 90% en nios de diferentes comunidades
de la etnia Warao [9] y de 30 a 50% en nios
sintomticos que han asistido a diferentes centros
clnicos [10], observndose diferencias de acuerdo a las
condiciones socioeconmicas. El objetivo de este
trabajo fue determinar la prevalencia de infeccin por
H. pylori en pacientes peditricos con dolor abdominal
recurrente y evaluar la presencia de las variantes
allicas del gen vacA y presencia de los genes cagA y
babA, relacionando estos hallazgos con las patologas
gstricas encontradas.
Material y mtodos.
Se evaluaron 83 nios (8,1 4,7 aos) balanceados
en sexo que asistieron al Servicio de Gastroenterologa
del Hospital Peditrico Elas Toro de Caracas. Se
incluyeron en el estudio aquellos nios con DAR que
presentaron alguna gastropata con presencia sugestiva
o previamente comprobada de H. pylori y que por
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criterio mdico requirieron someterse a estudio
endoscpico de las vas digestivas superiores y toma de
biopsias gstricas para su evaluacin. Se excluyeron los
pacientes que hubieran recibido tratamiento con
antibiticos o inhibidores de la bomba de protones,
durante al menos 3 meses previos a la realizacin del
estudio o que tuvieran algn sangramiento de las vas
digestivas. El estudio fue prospectivo y de campo. La
inclusin de cada paciente en el estudio fue previo
consentimiento informado de sus representantes,
aprobacin del comit de Biotica del Instituto de
Biomedicina y autorizacin del Servicio de
Gastroenterologa del Hospital Elas Toro.
Cada nio fue evaluado en el Servicio de
Gastroenterologa del hospital y en el estudio
endoscpico se tomaron 3 biopsias de antro gstrico
destinadas a: cultivo, Reaccin en Cadena de la
Polimerasa (PCR), para la deteccin de genes de H.
pylori, y anatoma patolgica.
Cultivo de H. pylori: Una biopsia de antro de cada
paciente fue sembrada en placas con agar columbia
(OXOID, England) ms 7% de sangre humana y
suplemento selectivo de antibiticos para H. pylori
(OXOID, England), segn indicaciones del fabricante.
Fueron incubadas en estufa a 37C en condiciones de
anaerobiosis al 5% de CO2 durante diez das. H. pylori
fue identificado por sus caractersticas fsicas y las
pruebas bioqumicas de catalasa, oxidasa y ureasa
positivas.
Extraccin de ADN de cultivo de H. pylori y biopsias
gstricas: Los pellets bacterianos fueron obtenidos de
los cultivos y el ADN fue aislado utilizando el kit
AxyPrep de Axygen. El ADN genmico a partir de
biopsias gstricas fue obtenido utilizando el kit de
extraccin PureLink de Invitrogen, siguiendo
instrucciones del fabricante.
PCR para la identificacin de genes de H. pylori: los
cebadores utilizados para cada gen identificado en este
estudio fueron los siguientes: ureC
5GGATAAGCTTTTAGGGGTGTTAGGGG3,5GCT
TACTTTCTAACACTAACGCGC3 (294 pb) (11),
vacA s1/s2 5ATGGAAATACAACAAACACAC3,
5CTGCTTGAATGCGCCAAAC3(259/286 pb) (5),
vacA m1/m2 5CAATCTGTCCAATCAAGCGAG3,
5GCGTCAAAATAATTCCAAGG3 (567/642 pb) (5),
cagA3 5ACCCTAGTCGGTAATGGGTTA3,
5GTAATTGTCTAGTTTCGC3 (642 tipo A, 756 tipo
B y D, 810 tipo C) (7) y babA
5AATCCAAAAAGGAGAAAAAGTATGAAA3,
5TGTTAGTGATTTCGGTGTAGGACA3 (832pb)
[8].
La mezcla de reaccin se llev a cabo en un volumen
final de 25 l: 2,5 l de buffer 10X, 0,2 mmol de cada
deoxinucleotido trisfosfato, 25 pmol de cada cebador, 4
mmol de cloruro de magnesio, 1,25 U de Taq DNA
polimerasa, 100 ng de la muestra de ADN y 10,35 l de
agua desionizada estril. Las reacciones de PCR se
llevaron a cabo en 35 ciclos. La visualizacin de los
productos amplificados se realiz mediante una
electroforesis en gel de agarosa al 2% teido con
bromuro de etidio.
Evaluacin anatomopatolgica: un grupo de pacientes
fue evaluado por el Servicio de Anatoma Patolgica
del hospital, para lo cual una biopsia de cada uno d
estos pacientes fue incluida en parafina para su estudio
basndose en el sistema Sydney de clasificacin para la
conclusin diagnstica.
Recoleccin de datos socioeconmicos: se determin
el nivel socioeconmico de cada nio utilizando la
escala de Graffar modificada por Hernn Mndez
Castellano, Fundacredesa [12].
Resultados y discusin.
Al determinar el nivel socioeconmico de los nios
evaluados, se encontr que la mayora pertenece a los
estratos sociales ms bajos; el 45% de los nios
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evaluados pertenecieron al nivel IV de la escala de (12/19) de los nios infectados a los que se les detect
Graffar, 33,6% al nivel III, 10,7% a los niveles II y V el gen cagA, presentaron la variante allica s1/m1 de
no encontrndose ningn caso perteneciente al nivel I. vacA (tabla 2), es decir las formas ms virulentas de la
Es ampliamente reportado que la prevalencia de bacteria. Se ha descrito que las cepas vacA s1/m1 son
infeccin por H. pylori es mayor en pases ms virulentas que las s2/m2 por su capacidad de
subdesarrollados ya que est asociada con las inducir vacuolizacin en el interior de la clula epitelial,
condiciones higinicas inadecuadas, el hacinamiento y provocando dao celular y activacin de la cascada
el consumo de aguas contaminadas [13]. inflamatoria [3,7]. El gen cagA forma parte de una Isla
Se evaluaron las muestras de 26 nios por PCR: 11 de Patogenicidad que codifica para la protena CagA;
cultivos y 15 biopsias. Los resultados globales se protena de excrecin que es inyectada, a travs del
muestran en la tabla 1. En el 26,9% (7/26) de los nios sistema secretor tipo IV, en el interior de la clula
evaluados, no se detectaron genes de H. pylori, el epitelial donde es fosforilada por las tirosn kinasas del
73,1% (19/26) restante fue positivo para la infeccin. husped y de esta manera activa cascadas de
De estos casos positivos para H. pylori, el 73,69% sealizacin celular induciendo la transcripcin de
(14/19) fueron cagA+ y 21% (4/19) babA+. Estos citocinas pro inflamatorias, factor de transcripcin
resultados muestran una alta prevalencia de infeccin en nuclear NF-kB y provocando cambios en la estructura
el grupo de nios evaluados encontrndose tambin un del citoesqueleto celular [15]. La combinacin de estos
alto porcentaje de cepas cagA+. Est bien establecido
Gen Alelos de del gen vacA
que los factores de virulencia de la cepa infectante
cagA
determinan el curso de la infeccin y el desarrollo de las
s1/m1 s1/m2 s2/m2 s1s2/m1m2
patologas gstricas [14].
cagA+ 85,7% - 7,1% 7,1%
n=14 (12/14) (1/14) (1/14)
Tabla 1. Prevalencia de H. pylori, genes cagA y
cagA- 40% 20% 40% -
babA en cultivos y biopsias de pacientes peditricos
n=5 (2/5) (1/5) (2/5)
del Hospital Elas Toro de Caracas.
dos factores de virulencia aumenta el riesgo a

Prevalencia Prevalencia genes cagA y babA desarrollar patologas gstricas severas.

Hp
cagA- cagA+ babA- babA Tabla 2. Tipificacin del gen vacA de acuerdo a la
+ presencia del gen cagA en cultivos y biopsias de los
Hp 26,9% - - - - nios evaluados en el Hospital Elas Toro de Caracas.
- (7/26)

Se obtuvieron los resultados de Anatoma Patolgica

Hp 73,1 26,31% 73,69% 79% 21%
de 57 nios. Los reportes indicaron que la mayora de
+ (19/26) (5/19) (14/19) (15/19) (4/19)
los pacientes presentaron, para el momento del estudio,
gastritis crnica activa leve 29,8% (17/57), seguido de
gastritis crnica activa folicular de leve a moderada
Al relacionar las variantes allicas del gen vacA con 22,8% (13/57), gastritis crnica activa moderada con
la presencia del gen cagA, se encontr que el 85%
eosinofilia de leve a moderada 22,8% (13/57), gastritis
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crnica activa leve con eosinofilia 15,7% (9/57), la zona Andina de Venezuela existe una alta tasa de
gastritis crnica activa severa 3,5% (2/57), incidencia de cncer gstrico y alta mortalidad. El
encontrndose un 3,5% (2/57), que present gastritis cncer gstrico es la cuarta causa de cncer en el mundo
crnica folicular severa con cambios reparativos y un y la segunda causa de mortalidad por cncer [16],
1,7% (1/57), que present gastritis crnica activa con siendo la infeccin por H. pylori, sus factores de
metaplasia. De estos 57 nios con diagnstico virulencia y el establecimiento de la infeccin uno de
anatomopatolgico, se realiz la deteccin de genes de los factores etiolgicos descritos en los eventos de la
H. pylori por PCR a 14 nios, de los cuales, el 14,28% cascada que va desde lesiones pre-neoplsicas al
(2/14) no estaban infectados con H. pylori presentando desarrollo de cncer gstrico [14]. La prevencin y la
estos dos casos gastritis crnica activa leve y con deteccin temprana de los factores de riesgo as como la
eosinofilia, gastropatas benignas que no incrementan el comprensin de las diferentes fases de la cascada
riesgo de desarrollar cncer. El 85% (12/14) restante fue precancerosa, son estrategias que contribuiran
H. pylori positivo, siendo 21,42% (3/14) cagA- favorablemente a la disminucin de la incidencia de
detectndose distintas combinaciones de los alelos del enfermedades gstricas severas en nuestra poblacin.
gen vacA: s1m1, s1m2 y s2m2 respectivamente. Este
grupo de pacientes present gastritis crnica activa leve.
El resto de los pacientes estaban infectados con cepas
de H. pylori cagA+ tipo A y B, vacA s1/m1,
representando el 64,27% (9/14) (tabla 3). Cabe destacar
que el 42,84% (6/9) de este grupo present gastritis
crnica activa folicular moderada y severa lo cual
implica dao epitelial importante, hiperplasia nodular y
alto contenido de infiltrado de clulas inflamatorias;
estas lesiones son consideradas preneoplsicas con
riesgo aumentado de desarrollar neoplasias gstricas
[14]. La infeccin con cepas cagA+ s1m1 estn
asociadas con lesiones precancerosas y el posterior
desarrollo de cncer gstrico, mientras que la gastritis
no atrfica o gastritis superficial est asociada con
cepas cagA- s2m2 y no incrementan el riesgo de cncer
[14]. Por otra parte, los tipos encontrados de cagA
fueron A y B, que estn asociados con la presencia de
gastritis severa atrfica [7].
Es importante destacar que el promedio de edad de
los pacientes evaluados fue de 8 aos, encontrndose no
solo una alta prevalencia de infeccin de cepas
virulentas de H. pylori sino adems patologas gstricas
severas con riesgo a desarrollar lesiones neoplsicas. En
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Tabla 3. Prevalencia de H. pylori, tipificacin del gen Palabras clave: Helicobacter pylori, gen cagA, gen
vacA y deteccin de los genes cagA y babA de acuerdo vacA, gen babA, dolor abdominal recurrente.
a las patologas gstricas encontradas en los nios
evaluados en el Hospital Elas Toro de Caracas.
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cagA- s1/m2 7,14% 7,14%
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babA- (1/14) (1/14) 241.
cagA+ tipo A 14,28% 7,14% 7,14% 28,57 5. Atherton J, Cao P, Peek R, Murali K, Tummuru R,
s1/m1 babA- (2/14) (1/14) (1/14) % Blaser M, et al. Mosaicism in vacuolating
(4/14)
7,14% 7,14% 7,14% 21,42
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s1/m1 babA+ (1/14) (1/14) (1/14) % Chem. 1995; 270(30):17771-17777.
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cagA+ tipo B 14,28% 14,28 cancer beyond. Nat Rev Cancer. 2010; 10(6):403-
s1/m1 babA- (2/14) %
(2/14) 414.
Total 50% 7,14% 28,57% 14,28 7. Yamaoka Y, Kodama T, Kashima K, Graham DY,
(7/14) (1/14) (4/14) % Sepulveda AR. Variants of the 3' region of the
(2/14)
cagA gene in Helicobacter pylori isolates from
patients with different H. pylori-associated
GCAL: Gastritis crnica activa leve, GCAE: Gastritis crnica diseases. J Clin Microbiol. 1998; 36(8):2258-2263.
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moderada, GCA folic. Sev: Gastritis crnica activa folicular J, Kato M, Asaka M. Clinical relevance of the
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clinical isolates. J Clin Microbiol. 2001;
Conclusiones: 39(7):24632465.
9. Ortiz D, Cavazza ME, Rodrguez OL, Hagel I,
Los resultados de este trabajo muestran una alta
Correnti M, Convit J. Prevalence of Helicobacter
prevalencia de infeccin por cepas virulentas de H. pylori infection in Warao lineage communities of
Delta Amacuro States, Venezuela. Mem Inst
pylori en nios, asociada con el desarrollo de patologas
Oswaldo Cruz. 2003; 98(6):721-725.
gstricas severas. El desarrollo de tcnicas de biologa 10. Ortiz D, Daoud G, Daoud N, Cavazza M,
Urresterazu MI, Serrano N, Correnti M.
molecular como herramientas en la deteccin y
Evaluacin de los niveles de IgA secretora en
genotipificacin de H. pylori, contribuye a generar un nios con gastritis crnica infectados con
Helicobacter pylori. Arch Ven Pueric Ped. 2002;
diagnstico rpido y eficaz as como tambin a indicar
65(2): 44-49.
el tratamiento adecuado y realizar monitoreo de la 11. Tomasini M, Zanussi S, Sozzi M, Tedeschi R,
Basaglia G and De Paoli P. Heterogeneity of cag
infeccin, lo cual es fundamental en poblaciones de alto
genotypes in Helicobacter pylori isolates from
riesgo para contribuir a minimizar el nmero de casos human biopsy specimens. J Clin Microbiol. 2003;
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que en un futuro puedan desarrollar cncer gstrico.
12. Mndez H, Lpez M, Benahm C, Maza D,
Gonzlez I. Estudio nacional de crecimiento y
desarrollo humanos de la Repblica de Venezuela,
Agradecimientos: este trabajo fue financiado por
tomo III. Caracas: Ministerio de la Secretara de la
Proyecto Fonacit G-2007001425. Repblica de Venezuela, Centro de Estudios
Biolgicos para el Crecimiento y Desarrollo de
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Secuenciacin de los genes 16S rRNA y rpoB para la identificacin de aislados clnicos
de micobacterias no tuberculosas
16S rRNA and rpoB gene sequencing for identification of clinical isolates of nontuberculous
mycobacteria

Torres-Coy Jessa*, De La Guardia Carolinab, Goodridge Amadorb, De Waard Jacobusa, Lleonart Ricardo b
a
Laboratorio de Tuberculosis. Servicio Autnomo Instituto de Biomedicina. Universidad Central de
Venezuela. Caracas, Venezuela. b Instituto de Investigaciones Cientficas y Servicios de Alta Tecnologa
INDICASAT-AIP. Ciudad del Saber, Panam.

*Correspondencia autor principal

Email: jesustorrescoy@gmail.com

Introduccin: crecimiento (rpidas o lentas), produccin de pigmentos

El gnero Mycobacterium est constituido por un (fotocromgenas, escotocromgenas y no pigmentadas),
amplio rango de especies que conforman un morfologa de las colonias y pruebas bioqumicas [5].
heterogneo grupo en trminos de metabolismo, nicho No obstante, estas pruebas demandan mucho tiempo
ambiental y patologas de importancia clnica que (inclusive hasta semanas) y a menudo no permiten
afectan al hombre y a los animales [1]. El trmino de diferenciar entre especies estrechamente relacionadas
Micobacterias No Tuberculosas (MNT) o micobacterias [3,5]. Cabe destacar que la identificacin de
atpicas es empleado para hacer referencia a aquellas micobacterias es esencial debido a que el tratamiento
especies de micobacterias que no pertenecen ni al antimicrobiano es especie-especfico [4]. Con el
complejo M. tuberculosis ni al complejo M. leprae [2]. advenimiento de la biologa molecular se ha logrado
En los ltimos 15 aos se ha reportado un incremento desarrollar tcnicas que han permitido una
en el nmero de infecciones producidas por MNT, que identificacin rpida, fiable y sencilla de micobacterias
en conjunto se denominan micobacteriosis y cuyas hasta el nivel de especie. Una de stas es la desarrollada
afecciones ms frecuentes son las del tipo pulmonar, en 1993 por Telenti y colaboradores denominada como
cutnea y diseminada [3,4]. El establecimiento de las PRA-hsp65 (del ingls PCR-Restriction Enzyme
micobacteriosis se debe principalmente a que las Analysis) la cual consiste en la amplificacin por PCR y
personas afectadas presentan sndromes de posterior digestin enzimtica de un fragmento de 440
inmunodeficiencia adquirida (VIH-SIDA), estados pb del gen polimrfico hsp65 que codifica para una
severos de inmunodepresin (tales como artritis, protena de choque trmico de unos 65kD [6] y de la
psoriasis, fibrosis qustica, lupus, entre otros) o cual hay disponible una base de datos con patrones de
antecedentes de alguna patologa pulmonar subyacente restriccin depositados de casi todas las especies de
(como bronquiectasia o tuberculosis previa) [3]. En micobacterias y que se denomina PRASITE
Venezuela se han aislado frecuentemente a partir de (http://app.chuv.ch/prasite/index.html,).
infecciones de tejido blando posterior a intervenciones La secuenciacin del gen 16S rRNA que codifica
quirrgicas plsticas y en procedimientos estticos para la subunidad risbosomal 16S y del gen rpoB, el
como mesoterapia, liposuccin, acupuntura, entre otros cual codifica para la subunidad de la RNA polimerasa
[4]. La identificacin de micobacterias se basa en las representan potenciales herramientas para la
caractersticas del cultivo como la velocidad de identificacin de micobacterias sobre todo en
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laboratorios que disponen de un secuenciador [5]. La
tcnica de secuenciacin cuenta con diversas bases de
datos de fcil y libre acceso como
(http://blast.ncbi.nlm.nih.gov/Blast.cgi) y la base de
datos para la diferenciacin ribosomal del gen
16S rRNA en microorganismos de importancia clnica
RIDOM (http://www.ridom-rdna.de). El objetivo de
esta comunicacin es describir el uso
secuenciacin del gen 16S rRNA y rpoB como
complemento para la identificacin de aislados clnicos
de MNT de Venezuela cuyos resultados con la tcnica
PRA-hsp65 fueron no concluyentes.
Materiales y mtodos:
Utilizamos 26 cepas no identificadas por PRA-hsp65
(tcnica empleada de rutina en nuestro laboratorio) que
pertenecen a la coleccin del Laboratorio
Tuberculosis del Instituto de Biomedicina en Caracas,
Venezuela, las cuales fueron aisladas durante los aos
2004 hasta abril del 2013 a partir de 15 secreciones
respiratorias, 9 muestras de piel y tejido blando, 1
hemocultivo y 1 contenido gstrico. Las cepas fueron
reactivadas en medio Lowenstein-Jensen y cultivadas a
37 C y una vez crecidas se realiz la extraccin de
ADN genmico segn Telenti y col., 1993 [6]. Una
secuencia parcial de 764 pb del gen rpoB fue
amplificada utilizando los iniciadores Myco-F (5-
GGCAAGGTCACCCCGAAGGG-3`) y Myco-R (5`-
AGCGGCTGCTGGGTGATCATC-3`) [7]
secuencia parcial de 1535 pb del gen 16S rRNA fue
amplificada con los iniciadores pA
AGAGTTTGATCCTGGCTCAG-3) y pH
AAGGAGGTGATCCAGCCGCA-3) [8].
productos de amplificacin fueron purificados con el kit
Wizard SV Gel and PCR Clean Up System (Promega).
La secuenciacin se realiz con el equipo 3130
(Applied Biosystems) y el kit BigDye Terminator v3.1
Cycle Sequencing (Applied Biosystems) en el Instituto
de Investigaciones Cientficas y Servicios de Alta
Tecnologa INDICASAT-AIP en Ciudad del Saber,
BLAST Panam. Las secuencias fueron editadas y ensambladas
con el programa CLC Main Workbench 6
(www.clcbio.com) y comparadas con las secuencias
depositadas en la base de datos de GenBank del Centro
Nacional para Informacin Biotecnolgica de los
de la Estados Unidos (NCBI, por sus siglas en ingls) usando
el programa estndar BLAST y la base RIDOM.
Resultados y discusin:
Repitiendo la tcnica de PRA-hps65 en las 26 cepas
bacilos cido-resistentes, obtuvimos unos patrones de
restriccin que no se correspondan con aquellos
depositados en PRASITE, esto debido a que no existan
los patrones o porque las caractersticas fenotpicas
de convencionales como pigmentacin y velocidad de
crecimiento fueron discordantes con los patrones
disponibles en PRASITE.
Los resultados de la secuenciacin de los genes 16S
rRNA y rpoB permitieron agrupar las cepas en tres
grupos, a saber: un primer grupo representado por la
concordancia entre los resultados de la secuenciacin de
los genes 16S rRNA y rpoB, un segundo grupo en
donde no hubo concordancia en la identificacin de la
especie determinada con la secuencia de ambos genes y
el tercer grupo el cual fue identificado como
actinomicetales.
y una Dentro del grupo donde hubo concordancia de
resultados entre las secuencias de los genes 16S rRNA y
(5- rpoB identificamos 11 cepas de las cuales 8 son de
(5- crecimiento rpido (4 M. conceptionense,
Los 2 M. fortuitum y 2 M. mucogenicum) y 3 de
crecimiento lento (2 M. intracellulare y 1 M. szulgai).
M. conceptionense fue aislada por primera vez en 2006
a partir de un paciente que present ostetis
postraumtica [9]. Desde entonces, se ha reportado tres
aislamientos a partir de un absceso subcutneo, una
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ciruga de implantes mamarios y una liposuccin [10]. base PRASITE para que este a disponibilidad junto con
En nuestro estudio los aislamientos fueron a partir de las otras cuatro que actualmente se encuentran
dos esputos y dos secreciones de tejido blando. Estos depositadas. Con respecto a la cepa LTF 2713
aislados no fueron identificados anteriormente por encontramos que puede tratarse de un nueva especie
PRA-hsp65 debido a que el patrn de M. miembro del complejo M. terrae (conformado por las
conceptionense es similar al de M. senegalense tipo 1, especies: M. terrae, M. triviale y
de hecho fenotpica y genticamente ambas especies M. nonchromogenicum) en vista al resultado obtenido
estn estrechamente relacionadas y pertenecen al con el gen rpoB. Finalmente dentro de este grupo
denominado grupo de M. fortuitum [9]. Las otras encontramos de particular inters que dos cepas
especies de crecimiento rpido M. fortuitum y M. presentaron un 99% de homologa (1308/1325 pb) con
mucogenicum, son frecuentemente aisladas en M. wolinsky por 16S rRNA y un 97% con M. jacuzzii
laboratorios clnicos asocindose con en infecciones de (708/32 pb) con el gen rpoB. M. jacuzzii es una especie
piel y tejido blando posterior a tratamientos quirrgicos que fue aislada por primera vez en Israel en al ao 2006
y/o cosmticos [4,11]. Estas especies tienen alta por Rahav y colaboradores [12] y actualmente no se
variabilidad en el gen hsp65, por lo cual generan encuentra bien caracterizada ya que su patrn de
problemas en la identificacin por PRA-hsp65 ya que restriccin no se encuentra disponible en la base de
hay varios tipos, o lo que se denomina PRA variantes de PRASITE, por lo cual estos resultados sugieren que
la especie. M. szulgai y M. intracellulare son especies estas dos cepas pueden tratarse de dos nuevos casos
que estn implicadas frecuentemente en infecciones clnicos donde se asla M. jacuzzi o por el contrario se
pulmonares crnicas e indistinguibles a la tuberculosis tratan de dos subespecies relacionadas con M. wolinsky.
sobre todo en pacientes inmunocomprometidos [11]. En
nuestro estudio estas especies no fueron de fcil Tabla 1. Resultados de secuenciacin de las cepas sin
concordancia entre los genes 16S rRNA y rpoB.
identificacin por PRA-hsp65 debido que sus patrones
Cepa Tipo de 16S rRNA rpoB
de restriccin se diferencian a la de otras especies muestra
relacionadas por menos de 10 a 15 pb lo que ocasiona LTF Tejido Complejo M. chimaera
860 blando MAC (*)
una errnea interpretacin.
LTK Secrecin Complejo M. intracellulare
El segundo grupo de cepas es aquel en donde hubo
238 respiratoria MAC (*)
resultados discordantes y no concluyentes entre los LTF Tejido M. arupense M. nonchromogenicum

genes 16S rRNA y rpoB (Tabla 1). Los anlisis de la 2713 blando
LTG Hemocultivo M. wolinsky M. jacuzzii
cepa LTF 860 la identifican como una MNT de
466
crecimiento lento (complejo M. avium por 16S rRNA y LTG Piel y tejido M. wolinsky M. jacuzzi
M. chimaera por el gen rpoB), lo cual se contradice con 2003 blando

la naturaleza de crecimiento rpido y no pigmentada de (*) MAC= complejo de especies formado por M. avium subs. avium;
M. avium subs. paratuberculosis y M. colombiense.
la misma, esto ha de suponer preliminarmente que
puede tratarse de un nuevo miembro del complejo MAC El tercer grupo de cepas fueron identificadas como

o una nueva especie estrechamente relacionada con miembros del orden Actinomicetales, el cual incluye

ste. La cepa LTK 238, mostro ser un nuevo PRA bacterias que son filogenticamente diversas pero

variante de M. intracellulare la cual depositaremos en la morfolgicamente similares que se caracterizan por

exhibir estructuras filamentosas y ramificadas
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semejantes a los hongos y que al fragmentarse generan Conclusiones:

bacilos o formas cocoides [13]. Se tratan de bacilos Estudios previos han reportado que la tcnica de
dbil cido-resistentes que son aislados a partir de PRA-hsp65 an cuando es rpida, reproducible y fiable
muestras clnicas y que pueden ser confundidos como en comparacin con los test bioqumicos o fenotpicos
micobacterias en exmenes directos de baciloscopia con presenta algunas limitaciones que pueden conducir a
la coloracin de Ziehl Neelsen y porque generan un una errnea interpretacin en la identificacin de
producto de PCR con el gen hsp65 [13]. Los aislados micobacterias [1]. Existen tres razones por la cual esta
identificados dentro de este grupo se describen en la tcnica puede fallar: la primera es que una especie
Tabla 2 y 3. puede tener varios patrones como ocurre con el
complejo MAC o el grupo M. fortuitum, la segunda es
Tabla 2. Caractersticas de los aislados que un patrn puede corresponder a varias especies (en
identificados por secuenciacin como miembros
de otros gneros de Actinomicetales. En este caso las caractersticas de crecimiento aportan
parntesis se indica el porcentaje de homologa valiosa informacin) y la ltima razn es que el patrn
obtenida por comparacin con la base de
BLAST (http://blast.ncbi.nlm.nih.gov/Blast.cgi) no se encuentra disponible ya que puede corresponder
al de una nueva especie o al de un nuevo PRA-variante
Cepa Tipo de muestra Resultado
16S rRNA de alguna especie ya descrita. En nuestra coleccin de
LTF 2921 Tejido blando Corynebacterium sp. cepas aproximadamente el 8% de los aislados clnicos
(99%)
LTF 4143 Secrecin respiratoria Tsukamurella sp. (99%) para identificar son de difcil interpretacin por PRA-
LTG 349 Secrecin respiratoria Tsukamurella sp. (99%) hsp65, por lo cual empleamos el uso de la
LTJ 1053 Tejido blando Nocardia sp. (99%)
secuenciacin como herramienta complementaria para
estos casos. La secuenciacin del gen 16S rRNA ha
Tabla 3. Caractersticas de los aislados sido usada como mtodo estndar para la identificacin
identificados por secuenciacin como miembros de aislados inusuales de micobacterias [7,17]. Sin
de otros gneros de Actinomicetales.
embargo el solo uso de este blanco no es suficiente ya
Cepa Resultado Infecciones relacionadas o sitios que su poder discriminatorio no resuelve la clasificacin
rpoB donde ha sido aislado en humanos o
animales de todos los aislados [7,17]. La suposicin comn de
LTF Corynebacteriu Sangre, celulitis, peritonitis, heridas que las bacterias aisladas de diferentes fuentes son
2921 m amycolatum de piel, endocarditis, variedad de
(99%) sitios estriles [14] miembros de la misma especie si tienen menos de 5-15
LTF Tsukamurella Contaminante ambiental asociado a:
4143 paurometabola hemodilisis, cncer de mam, pb de diferencias en la secuencia del gen 16S rRNA o si
(94%) infecciones del torrente sanguneo
relacionadas con el catter, tienen una secuencia de homologa >97% no es
leucemia, sarcoma de Erwing,
Quimioterapia [15] aplicable a las micobacterias debido a que presentan
LTG Tsukamurella Contaminante ambiental asociado a:
349 pulmonis (98%) Transplante de mdula sea, secuencias estrechamente relacionadas entre ellas
linfoma de Burkitt, insuficiencia
renal crnica, pacientes con
[7,17,18]. El gen rpoB ha sido propuesto para la
inmunodeficiencia, hemodilisis
[15]
identificacin y filogenia de micobacterias debido a que
LTJ Nocardia nova Infeccin pulmonar, osteomielitis, presenta mayor poder discriminatorio especialmente
1053 (97%) enfermedades sanguneas
diseminadas a cerebro, piel y entre las especies de crecimiento rpido [7, 17,18].
tejidos subcutneos, ojos
(especialmente la retina), vlvulas Nuestros resultados arrojaron la posibilidad de obtener
cardacas, hgado, riones,
articulaciones y huesos. Infeccin nuevas especies o subespecies (Tabla 1) que necesitan
del sistema nervioso central [16]
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una mayor caracterizacin con otros blancos gnicos
como sodA y recA [18]. El uso de las secuencias de los
genes 16S rRNA y rpoB nos permiti identificar con
seguridad a nivel de especies los aislados del grupo con
resultados concordantes y los aislados de
actinomicetales los cuales previamente haban sido
catalogados en el laboratorio como micobacterias
(Tabla 2). Concluimos que a pesar de que la tcnica de
secuenciacin es compleja y no todos los laboratorios
de microbiologa clnica en nuestro pas cuentan con el
equipamiento necesario fomentamos su uso debido al
valor adicional que implica la identificacin de
micobacterias para el establecimiento de un tratamiento
clnico adecuado para el paciente. En este mismo
contexto la secuenciacin permite corregir las fallas que
se presentan en la interpretacin de los patrones
generados por PRA-hps65 por parte del operador.
Palabras clave: Secuenciacin, Micobacterias,
gen 16S rRNA, gen rpoB, PRA-hsp65.
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BACTERIOLOGA
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Patrones de resistencia de cepas de Staphylococcus aureus aisladas en atletas con

capacidades especiales adscritos a Fundadeporte,
Estado Carabobo, periodo 2011-2012
Patterns of resistance of isolated strains of Staphylococcus aureus in athletes with special capacity
appointed to Fundadeporte, Estado Carabobo, during the period 2011 2012

Belandria Emma, Portillo Gerardo, Seijas Jessica

Universidad de Carabobo.

Introduccin: Staphylococcus aureus coloniza de forma habitual al menos el 30% de las personas, principalmente en la
mucosa nasal, distinguindose as dos tipos de portadores (el persistente y el intermitente) y el no portador. Se ha
establecido un tipo de contagio indirecto en individuos no expuestos a factores de riesgo, que involucra contaminacin por
S. aureus presentes en objetos inanimados como toallas o equipos deportivos; por lo que el objetivo de la investigacin
fue determinar la frecuencia de portadores nasales de S. aureus en atletas con capacidades especiales adscritos a
Fundadeporte. Metodologa: El estudio se realiz en 70 individuos, de ambos sexos, en las disciplinas deportivas de
gimnasia, futbol, natacin, baloncesto y atletismo. A los que se le tom muestra de ambas fosas nasales, seguido de
identificacin por el mtodo convencional y la prueba de susceptibilidad antimicrobiana para determinar resistencia a
Meticilina, resistencia inducible a Clindamicina y comportamiento ante otros antimicrobianos. Resultados: Del total de
los atletas evaluados, se demostr una frecuencia total de portadores nasales de 25,7% (18/70), destacando la gimnasia
como la disciplina deportiva con mayor porcentaje de portadores (50%), seguida natacin y atletismo (40%) y una
prevalencia de no portadores de 74,2% (52/70). Se encontr que 77,78% (14/18) son cepas resistentes a Meticilina, y que
el 16,6% (3/18) de las cepas aisladas presentan resistencia inducible a Clindamicina. En el comportamiento ante otros
antimicrobianos resalta de las cepas SARM una sensibilidad del 100% a Gentamicina y Vancomicina, resistencia del
100% a Mupirocina y Trimetropin-sulfametoxazol, de igual manera un 100% de sensibilidad en las cepas SASM ante
todos los antimicrobianos utilizados. Conclusin: existen un alto porcentaje de atletas portadores de SAMR procedentes
de la comunidad, as como resistencia frente a antibiticos, lo que podra dificultar la terapia antimicrobiana.

Palabras clave: S. aureus, Resistencia bacteriana, Atletas con capacidades especiales.

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Estados vaginales bsicos en mujeres embarazadas durante el tercer

trimestre de gestacin
Basic vaginal states in pregnant women during the third trimester of pregnancy

Babino Cynthiaa, Snchez Kiralbab, Quintero Elianab

a Hospital Materno Infantil Dr. Samuel Daro Maldonado, b Universidad de Los Andes.

Introduccin: El estudio morfolgico del contenido vaginal permite la identificacin de cinco estados vaginales bsicos
(EVBs) en funcin de la relacin del valor numrico de Nugent y la reaccin inflamatoria, esta categorizacin genera el
ms alto valor predictivo actual para el diagnstico de vaginosis bacteriana (VB), vaginitis y sus variables ms
prevalentes. Con el objeto de determinar los EVBs (MN, MN+RIV, MI, VB, VMI) en un grupo de embarazadas durante
el ltimo trimestre de gestacin, se evaluaron 40 mujeres que acudieron al control prenatal en la consulta de Ginecologa y
Obstetricia del Hospital Sor Juana Ins de la Cruz, Mrida-Venezuela. Metodologa: De acuerdo a la metodologa
propuesta por Ortega y cols. (2010), se recolectaron dos hisopados vaginales para tincin de Gram y Giemsa.
Adicionalmente se realiz examen al fresco y cultivo de secrecin vaginal en agar sangre, agar vaginal, Mac Conkey,
Manitol Salado, Thayer Martin y Man Rogosa Sharpe. El aislamiento, cuantificacin e identificacin microbiolgica se
realiz mediante la metodologa convencional. El anlisis sistematizado del contenido vaginal para la determinacin de
los EVBs, se bas en los criterios de Nugent y la valoracin de la respuesta inflamatoria vaginal. Resultados: En la
poblacin evaluada 12 (30%) presentaron MN, 17 (42,5%) MN+RIV, 2 (5%) casos correspondi a MI, 1(2,5%) present
VB y 8 (20%) gestantes VMI. Los lactobacilos constituyeron la flora predominante en el 67,5% de las gestantes y
Candida spp. fue el patgeno ms comn en esta poblacin (22,5%,); la literatura seala que durante el tercer trimestre de
gestacin la prevalencia de candidiasis se duplica y es recurrente. Trichomonas vaginalis se detect en 4,5%.
Conclusin: Se encontr asociacin significativa entre Lactobacillus spp., Candida spp. y EVBs. MN+RIV se present
con mayor frecuencia (42,5%).

Palabras clave: Estados vaginales bsicos, Lactobacillus spp., Gardnerella vaginalis, embarazo, Nugent, BACOVA
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Resistencia a aminoglucsidos y quinolonas en cepas de Klebsiella pneumoniae

aisladas de dos Unidades de Cuidados Intensivos.
Aminoglycosides and quinolone resistance in Klebsiella pneumoniae strains isolated from two
Intensive Care Units.

Gonzlez Anaa, Nieves Beatriza, Oteo Jessb, Campos Josb, Bautista Vernicab, Lara Noeliab,
Sez Davidb y Fernndez Sarab.
a
Laboratorio de Investigaciones en Bacteriologa Roberto Gabaldon, Facultad de Farmacia y Bioanlisis,
Universidad de Los Andes. Mrida, Venezuela. b Centro Nacional de Microbiologa,
Instituto de Salud Carlos III. Majadahonda, Madrid, Espaa

Introduccin: La resistencia de los aminoglucsidos y quinolonas en las enterobacterias se ha convertido en un grave

problema para el tratamiento de las infecciones causadas por estas bacterias en las unidades de cuidados intensivos en los
hospitales a nivel mundial. El objetivo de este estudio fue determinar los diferentes patrones de resistencia a los
aminoglucsidos y quinolonas as como los genes que codifican esta resistencia en las cepas de K. pneumoniae aisladas
de dos unidades de cuidados intensivos del HULA. Metodologa: Se trabaj con 40 cepas de K. pneumoniae
multirresistentes aisladas de neonatos y pacientes hospitalizados en las UARN y UCIA del HULA. Mrida, Venezuela.
Se determin la sensibilidad a los antimicrobianos mediante la prueba de difusin del disco en agar. La CMI se determin
a travs del mtodo E-test. La determinacin de los genes aac (3)-IIa, aac(6)-Ib, armA, rmt, qnrA, qnrB y qnrS) se llev a
cabo por reaccin en cadena de la polimerasa y posteriormente fueron secuenciados. Resultados: Se observ que el
100% de las cepas aisladas en el 2007 eran portadoras del gen aac6, mientras que la mayora de las cepas aisladas de la
misma unidad y de la UCIA en el ao 2009 se mostraron portadoras de los genes aac6 y aac3. En relacin a la resistencia
observada a las quinolonas se observ que el 88,8% (8/9) cepas de Klebsiella aisladas de la UCIA eran resistentes y
portaban el gen qnrB, pero no portaban los dems genes qnrA y qnrS. Conclusiones Se observaron altos porcentajes de
resistencia en la UARN a los aminoglucsidos en las cepas aisladas en los diferentes periodos mediadas principalmente
por los genes aac(3)-IIa y aac(6)-Ib. Mientras la resistencia a quinolonas se present principalmente en las cepas aisladas
de la UCIA mediadas por el gen qnrB.

Palabras clave: Klebsiella pneumoniae, resistencia, aminoglucsidos, quinolonas

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Deteccin de Integrones Clase 1 en aislados de Klebsiella pneumoniae Adherentes y

Citotxicas asociadas a cuadros de Diarrea Infantil
Detection of Class 1 Integrons in Klebsiella pneumoniae isolates associated cytotoxic Adherent and
Childhood Diarrhea cases

Martnez de P. Fanny
Ctedra de Microbiologa, Escuela de Bioanlisis, Universidad Central de Venezuela.

Introduccin. Las diarreas son un problema de salud pblica a nivel nacional y el aumento en la resistencia observado en
los aislados de K. pneumoniae asociados a cuadros de diarreas infantil generaran un problema aun mayor, por lo que nos
planteamos como objetivo de nuestra investigacin evaluar la presencia de BLEE e Integrones clase I en aislados
adherentes y citotxicos obtenidos de nios menores de cinco aos del Hospital JM de los Ros de la Ciudad de
Caracas. Metodologa: Se utilizaron quince aislados de K. pneumoniae seleccionados de un grupo de 25 nios a los cuales
no se les detect ningn patgeno conocido como responsable del cuadro diarreico. Se determin el perfil de resistencia
mediante difusin del disco, conjugacin en medio slido para el aislamiento de plsmidos por el mtodo de lisis alcalina
y a travs de la reaccin en cadena de la polimerasa se determin la presencia de integrones clase 1. Resultados: El
anlisis fenotpico evidenci BLEE con actividad ceftazidimasa, se logr la transferencia de un plsmido de alto peso
molecular que representa un 40% de los aislados. Se demostr la presencia del gen codificante para integrasa I en un 84%
de los aislados. Conclusiones. En este trabajo se evidencia un aumento en la resistencia K. pneumoniae asociada a
cuadros de diarrea infantil, demostrando inclusive la presencia de BLEE, mecanismos que no observbamos en los aos
90; de la misma manera el hallazgo de integrones clase 1 sugiere que las cepas de K. pneumoniae tienen los elementos
genticos que le permiten almacenar genes de resistencia.

Palabras clave: Integrones, BLEE, Diarreas, Klebsiella pneumoniae.

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Evaluacin del sistema automatizado Microscan Autoscan-4 en la deteccin de

mecanismos de resistencia a carbapenems en aislados de enterobacterias
Evaluation of automated Microscan Autoscan-4 system in the detection of carbapenems
resistance mechanism in isolated of Enterobacterias

Mrquez Danielaa, Aguilar Fannya Torres-Castillo Luis Carlosa

a
Ctedra de Microbiologa. Escuela de Bioanlisis. Universidad Central de Venezuela

Introduccin: Existen diversos mecanismos de resistencia a carbapenems en la familia Enterobacteriaceae. El de mayor

impacto clnico y epidemiolgico lo constituyen las carbapenemasas, seguidos por otras combinaciones como BLEE o
AmpC con impermeabilidad. Esta resistencia se ha convertido en un problema a nivel mundial y es por ello que se desea
evaluar el sistema automatizado Microscan en la deteccin rpida y eficaz de estos microrganismos capaces de
comprometer rpidamente la salud del paciente. La presente investigacin persigue evaluar el sistema automatizado
Microscan Autoscan-4 en la deteccin de mecanismos de resistencia a carbapenems en enterobacterias con resistencia o
sensibilidad disminuida en aislados provenientes de mltiples centros de salud del rea Metropolitana de Caracas y del
interior del pas durante el periodo comprendido entre Enero y Junio 2012. Metodologa: Se analizaron 42 aislados de
enterobacterias provenientes de diferentes centros hospitalarios a nivel nacional. La susceptibilidad antimicrobiana se
evalu siguiendo los criterios del CLSI 2012. La deteccin fenotpica de carbapenemasas se realiz a travs del Test de
Hodge Modificado y sinergia con el cido fenil bornico. La deteccin genotpica de carbapenemasas se realiz mediante
PCR utilizando primers especficos para el gen blaKPC. Se evalu el sistema automatizado analizando diferentes grupos
de aislados en el mismo. Resultados: El 76% de los aislados fueron positivos para el gen blaKPC. El sistema
automatizado demostr tener una buena correlacin entre los halos obtenidos por el mtodo de difusin en disco y la
concentracin mnima inhibitoria y aport alarmas correspondientes a la sospecha de carbapenemasas. Conclusiones: El
sistema automatizado Microscan es efectivo en la determinacin de microrganismos con resistencia a los carbapenems, y
aporta al microbilogo alarmas pertinentes para la revisin e investigacin profunda del perfil de resistencia.

Palabras clave: enterobacterias, carbapenemasas KPC, Mecanismos de resistencia a carbapenems, Sistema automatizado
Microscan.
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Deteccin de -lactamasas de Espectro Extendido (BLEE) en cepas de

Escherichia coli de Origen Nosocomial
Detection of -lactamases Spread Spectrum (lee) in Escherichia coli strains of
Nosocomial Origin

Luque V. Fabiola., Rivas D. Daniela y Alvirez V. Mara E.

Universidad de los Andes. Laboratorio de Bacteriologa Anaerbica Roberto Gabaldn. Departamento de
Microbiologa y Parasitologa. Facultad de Farmacia y Bioanlisis. Mrida. Venezuela

Introduccin: Las infecciones nosocomiales implican un problema de salud pblica, encontrndose agravadas por la
resistencia bacteriana, estas infecciones se adquieren en diferentes reas de hospitalizacin, cuidados intensivos, salas post
operatorio de cualquier ente de salud, estos lugares son ms vulnerables para la proliferacin de microorganismos, lo que
trae como consecuencia el fracaso teraputico. Como consecuencia del uso de antimicrobianos en forma indiscriminada
surgen y se diversifican a travs del tiempo las enzimas - lactmasas, que se encuentran en la actualidad como el
principal y ms eficiente mecanismo desarrollado por las bacterias para contrarrestar el efecto del frmaco. La -
lactmasas de espectro extendido (LEE), son capaces de hidrolizar eficientemente cefalosporinas de tercera y cuarta
generacin como cefotaxima y cefttazidima; monobactmicos como el aztreonam; excepto imipenen y cefamicinas. El
objetivo de esta investigacin se bas en la determinacin de eta-lactamasas de espectro extendido en cepas de
Escherichia coli de origen nosocomial provenientes de diferentes reas del Instituto Autnomo Hospital Universitario de
los Andes Mrida, Estado Mrida desde el ao 2009 hasta el 2012. Metodologa: Dicho estudio se llev a cabo en el
laboratorio de Microbiologa anaerobia Dr. Roberto Gabaldn del departamento de Microbiologa y Parasitologa
perteneciente a la Facultad de Farmacia y Bioanlisis. En este estudio se identificaron 30 cepas de E. coli, provenientes
de un total de 70 cepas de Enterobacterias aisladas de pacientes en diferentes reas de hospitalizacin, que posteriormente
fueron evaluadas para determinar los perfiles de susceptibilidad a travs del mtodo de Kirby-Bauer y la deteccin de
LEE a travs del mtodo de difusin del doble disco. Resultados: se obtuvieron 10 cepas productoras de LEE con
diferentes perfiles de susceptibilidad (antibiotipo), y es importante sealar que algunas cepas pudieron mantenerse a travs
del tiempo y trasladarse a diferentes reas dentro del recinto hospitalario.

Palabras clave: Escherichia coli, infecciones nosocomiales, eta-lactamasas de espectro extendido, Resistencia
bacteriana
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Cepas de Klebsiella pneumoniae productoras de carbapenemasas tipo KPC de

pacientes atendidos en el Servicio autnomo Hospital Universitario
Antonio Patricio de Alcal de Cuman
KPC type carbapenemases producing Klebsiella pneumoniae strains from patients attending the
Autonomous Service Universitary Hospital Antonio Patricio de Alcala of Cumana

Alfonso Lorenab, Rodulfo Hectorinaa, Guzmn Militzab, Gonzales Irisb, Arcia Anlenysa,
Garca Josb, De Donato Marcosa.
a
Laboratorio de Gentica Molecular, IIBCAUDO, b Bacteriologa Clnica del Departamento de Bioanlisis,
Universidad de Oriente, Ncleo de Sucre, Cuman

Introduccin: La resistencia a los carbapenmicos en enterobacterias es un problema de salud pblica emergente a nivel
mundial. Entre los principales mecanismos que confieren resistencia a este grupo de antimicrobianos se encuentran las
metalobetalactamasas (MBL), alteracin de porinas y las carbapenemasas pertenecientes a la clase A de Ambler, grupo 2f
de Bush, donde se destaca la enzima KPC. En este estudio se evalu la presencia de K. pneumoniae productoras de KPC
aisladas de pacientes atendidos en el Servicio Autnomo Hospital Universitario Antonio Patricio de Alcal.
Metodologa: Se estudiaron 42 cepas de K. pneumoniae recolectadas durante el periodo junio-noviembre del 2013. A los
aislados se les realizaron pruebas de susceptibilidad antimicrobiana mediante el mtodo de difusin en agar y mtodos de
screening y confirmatorios para -lactamasas de espectro extendido (BLEE), MBL y carbapenemasas; as como la prueba
de reaccin en cadena de la polimerasa (PCR) para determinar el gen blaKPC. Resultados: Se encontraron seis cepas con
resistencia intermedia a imipenem y siete a meropenem, solo dos cepas fueron resistentes a imipenem y tres a meropenen.
En cuanto a los mecanismos fenotpicos se encontraron 23 cepas productoras de BLEE y tres de KPC. No se encontraron
cepas productoras de MBL. Las cepas productoras de KPC fueron multiresistentes, presentaron el mismo fenotipo de
resistencia, y fueron aisladas de tres servicios diferentes, dos tenan procedencia intrahospitalaria y una comunitaria. La
prueba de PCR revel la existencia del gen blaKPC en los tres aislados. Conclusiones: Los resultados de la presente
investigacin revelan la emergencia del mecanismo en cepas de K. pneumoniae tanto intrahopitalaria como comunitaria,
razn por la cual se sugiere reforzar las medidas de prevencin para lograr controlar su diseminacin

Palabras clave: Carbapenemasas, enzima KPC, gen blaKPC

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Relacin entre el origen hospitalario o comunitario de cepas de Staphylococcus aureus

resistentes a meticilina y sus caractersticas fenotpicas y genotpicas en un centro
hospitalario de Maracaibo
Relation between hospital or community origin of strains of Staphylococcus aureus resistant to
methicillin and their phenotypic and genotypic characteristics in a hospital in Maracaibo

Castellano Maribela, Perozo Armindob, Rodrguez Josirec

a
Ctedra de Bacteriologa General. Departamento de Microbiologa. Escuela de Bioanlisis. La Universidad
del Zulia. b Ctedra de Prctica Profesional de Bacteriologa. Centro de Referencia Bacteriolgica Servicio
Autnomo Hospital Universitario de Maracaibo. Departamento de Microbiologa. Escuela de Bioanlisis. La
Universidad del Zulia. c Laboratorio de la Ctedra de Bacteriologa General. Departamento de Microbiologa.
Escuela de Bioanlisis. La Universidad del Zulia.

Introduccin: El SCCmec es un elemento gentico mvil que contiene el gen mecA que codifica una protena fijadora de penicilina
(PBP2a) y sus reguladores. Adems, sirve como sitio para la integracin de otros determinantes de resistencia, tales como
transposones y plsmidos. En cepas de Staphylococcus aureus resistentes a meticilina (SAMR) de origen hospitalario se han
identificado cuatro tipos de SCCmec (I, II, III y IV); mientras que las cepas SAMR de origen comunitario poseen el tipo IV con
algunas variantes que difieren del SCCmec de las cepas nosocomiales. Objetivo: El presente estudio se realiz para examinar la
susceptibilidad antimicrobiana, produccin de leucocidina de Panton-Valentine (PVL), el origen de las cepas (hospitalario o
comunitario) y tipo de SCCmec presente en cepas SAMR aisladas de 71 pacientes tratados en un hospital durante un perodo de tres
meses. Metodologa: Las pruebas de susceptibilidad antimicrobiana para todos los aislamientos se realizaron mediante el mtodo de
difusin en agar y el mecA, PVL y los tipos de SCCmec se determinaron usando la reaccin en cadena de polimerasa (PCR).
Resultados: Treinta y nueve 39 cepas correspondieron a cepas comunitarias con SCCmec tipo IV (55%), 29 al SCCmec tipo I (41%),
2 al SCCmec tipo IA (3%) y 1 al SCCmec IIIB (1%) (todas de origen hospitalario). Veinticinco cepas (35,21%) resultaron positivas
para PVL, todas de origen comunitario y portadoras del SCCmec tipo IV. Treinta y dos cepas (45,07%) expresaron multi-resistencia
Todos los aislamientos SAMR fueron sensibles a la vancomicina, teicoplanina, linezolid, tigeciclina y moxifloxacina. Conclusiones:
No se encontr asociacin estadsticamente significativa entre la presencia del gen PVL, la resistencia antimicrobiana, el tipo de
SCCmec y el origen de las cepas (p>0,05). Hasta la fecha, ningn marcador puede sustituir la epidemiologa descriptiva en el
reconocimiento del origen de las cepas SAMR.

Palabras clave: S. aureus meticilino-resistente (SAMR); SCCmec; resistencia; PVL, origen hospitalario y comunitario
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Epidemiologa de Enterobacteriaceae productoras de Carbapenemasas KPC

en un Hospital de Maracaibo. Perodo 2009-2013
Carbapenemase-producing KPC Enterobacteriaceae Epidemiology
in a Maracaibo Hospital. 2009-2013

Gmez-Gamboa Lilianaa*, Perozo-Mena Armindob, Bermdez-Gonzlez Josc, Nez Danielad,

Marn Milagrosd y Morales Everc
a
Escuela de Medicina, Universidad del Zulia; b Escuela de Bioanlisis, Universidad del Zulia; c Departamento de
Biologa, Universidad del Zulia; d Maestra en Diagnstico Bacteriolgico, Universidad del Zulia.
*Correspondencia autor principal
Email: lgomez@fmed.luz.edu.ve.

Introduccin. Material y mtodos.

Los antibiticos carbapenemes representan
generalmente los ltimos recursos para el tratamiento de
infecciones nosocomiales producidas por bacterias
Gram negativas multiresistentes. Es preocupante que
esta situacin est siendo amenazada en todo el mundo
por la aparicin de cepas con resistencia a estos
antibiticos [1]. La resistencia a los carbapenemes
puede involucrar varios mecanismos combinados,
siendo la produccin de -lactamasas con capacidad de
hidrolizar especficamente a los carbapenemes el ms
frecuente [2,3]. Las Carbapenemasas representan la
familia ms verstil de -lactamasas [4], dentro de las
cuales las KPC tienen el mayor potencial para
diseminacin debido a su localizacin en plsmidos [5].
Adicionalmente, los patgenos productores de
carbapenemasas ocasionan infecciones difciles de tratar
y con altas tasas de mortalidad debido a la resistencia a
mltiples antibiticos [1], por lo que el conocimiento
epidemiolgico local y la caracterizacin de la
resistencia se han convertido en una necesidad
imperiosa para seleccionar las medidas adecuadas y
definir terapias empricas en hospitales [5]. Observando
este panorama, se decidi caracterizar fenotpica y
genotpicamente las cepas de Enterobacteriaceae
productoras de Carbapenemasas (EPC) aisladas de un
hospital de la regin Zuliana, Venezuela.
Se realiz una investigacin descriptiva, transversal,
no experimental [6]. La muestra estuvo representada
por todas las EPC tipo KPC aisladas de cultivos de un
Hospital, desde 2009 hasta 2013. El cultivo
bacteriolgico de las muestras fue procesado en el
Servicio de Bacteriologa del Hospital Dr. Adolfo Pons
del I.V.S.S., mientras que la deteccin del gen de
resistencia mediante PCR se realiz en el Laboratorio
de Biologa Molecular del Centro de Referencia
Bacteriolgica (CRB) del Servicio Autnomo Hospital
Universitario de Maracaibo (SAHUM). Aislamiento e
identificacin de cepas de Enterobacteriaceae: las
muestras fueron procesadas de acuerdo a los
procedimientos de microbiologa clnica descritos por la
Sociedad Americana de Microbiologa [7]. La
identificacin a nivel de especies de los miembros de la
familia Enterobacteriaceae se confirm siguiendo los
esquemas diagnsticos propuestos por varios autores [8-
10]. Caracterizacin Fenotpica de la Resistencia a
Carbapenemes: la resistencia a los carbapenemes se
determin por el mtodo de difusin del disco en agar,
siguiendo las recomendaciones del Instituto para la
Estandarizacin de los Laboratorios Clnicos, segn sus
siglas en ingls CLSI [11]. La deteccin fenotpica de la
produccin de Carbapenemasas tipo KPC se realiz a
travs del mtodo de discos combinados, utilizando
Amoxicilina/cido clavulnico (AmC) y cido bornico
(300 g) a una distancia mxima de 20 mm entre los
discos de Meropenem (Mem), Imipenem (Ipm) o
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Ertapenem (Etp), de tal forma que la presencia de Figura 1. Enterobacteriaceae productoras de Carbapenemasas
KPC en un Hospital de Maracaibo. Venezuela. Perodo 2009-
sinergismo sugiri la presencia de enzimas 2013.
carbapenemasas tipo KPC [12,13]. Adicionalmente, se
realiz el Ensayo confirmatorio de Hodge modificado La primera K. pneumoniae productora de KPC fue

para la deteccin de produccin de Carbapenemasas aislada en Carolina del Norte en 1996 (Estados Unidos,

[11]. Deteccin genotpica de la produccin de EEUU). El primer brote fuera de los EEUU fue descrito

Carbapenemesas tipo KPC: se realiz un mtodo de en Tel Aviv (Israel) en 2006 y el pas Europeo en el

lisis alcalina de extraccin rpida. La amplificacin del cual se han reportado ms casos hasta el momento es

gen blaKPC se realiz mediante PCR, utilizando las Grecia, mientras en Italia y Francia se ha descrito un

secuencias completas del gen blaKPC F y blaKPC R, con incremento rpido en el nmero de casos [17]. En el

primers oligonucletidos. La deteccin de amplificados presente estudio se encontr un porcentaje de

se realiz mediante electroforesis con gel de agarosa al produccin de carbapenemasas similar al reportado por

1% en TBE 0,5x. [14]. otras investigaciones, donde las prevalencias de KPC

estuvieron entre 1,2% y 3,3% en EEUU, mientras en

Resultados y discusin. Francia estuvo entre 3 y 5%. Sin embargo, otros

Durante un perodo de cinco (5) aos, se procesaron estudios en ambos pases han obtenido prevalencias

23143 cultivos de superficies ambientales, jabn y inferiores, desde 0,03% hasta 0,16% [17,18]. Ms

pacientes procedentes de los diferentes servicios del recientemente han sido reportados casos aislados en

Hospital. La resistencia conferida por Colombia, China, Grecia, Brasil y Argentina [17]. En

serinocarbapenemasas fue nula en aos anteriores, ya Caracas, Venezuela se detect 1,9% de carbapenemasas

que todos los estudios reflejaron 100% de sensibilidad a KPC en E. cloacae y K. pneumoniae [16], mientras que

los carbapenemes en Venezuela [15]. Esto demuestra en Maracaibo, desde el 2009 se han reportado

cun variante puede ser la situacin en diferentes prevalencias variables, entre 8,04% y 25% en pacientes

perodos de tiempo, en relacin con el uso de hospitalizados del SAHUM [19-22] y en el Hospital Dr.

antibiticos y la aparicin de nuevos mecanismos de Adolfo Pons, la prevalencia de KPC para 2009 fue

resistencia [16]. En el perodo de estudio, fueron 3,65% [23]. El problema ha comenzado a tener

aisladas 360 cepas de EPC tipo KPC (360/23143) a prevalencias alarmantes, ya que un estudio en China

partir de las muestras de cultivos del Hospital, report 32,6% de EPC [24]; mientras que, el pas donde

obteniendo una prevalencia global de 1,56 % (Ver las enterobacterias han mostrado mayor resistencia a

Figura 1). carbapenmicos (46%) es Grecia [25]. En la presente

investigacin, los ms altos porcentajes de KPC se
registraron en pacientes del sexo masculino (54,4%),
recin nacidos (31,39%) y adultos entre 31 y 59 aos
(28,06%). Sin embargo, el mayor porcentaje se present
en general en pacientes adultos entre 18a y 90a
(61,39%). Al analizar por chi cuadrado el estado de
portacin y compararlo con el gnero y la edad de los
participantes, se obtuvo que las diferencias encontradas
no son estadsticamente significativas (p<0,05), por lo
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que la nica asociacin existente entre estas
circunstancias es el azar. De los 360 cultivos positivos
para KPC, la mayora fueron secreciones traqueales
(43,89%), seguidos de hemocultivos (13,61%) y 5% de
urocultivos. Es importante resaltar que en el presente
estudio el 49,44% de los pacientes fueron portadores
respiratorios, mientras que el 4,72% fueron portadores
rectales; por lo que se hace imprescindible el control de
estos portadores, debido a que constituyen una fuente
importante de transmisin. Tambin es importante
destacar que las EPC tipo KPC fueron aisladas de
muestras del tracto respiratorio (0,56%) y de las uas
(0,56%) del personal de salud que atiende a los
pacientes de esta unidad, de muestras ambientales
(mesones, pisos, conexiones del ventilador) y a partir
del jabn para el lavado de manos (1,67%); los cuales
constituyen otras fuentes de diseminacin de la KPC.
Los pacientes con una colonizacin con KPC no
reconocida sern reservorios para la transmisin y
brotes de la misma. Por lo tanto, adems de las prcticas
de control de infecciones, deben realizarse cultivos de
vigilancia a todos los pacientes y personal de salud en la
misma unidad donde se confirma la KPC y g/mL). Estos resultados son similares a los descritos
adicionalmente, todos los pacientes positivos deben ser
colocados en precauciones de contacto [26]. Por otra
parte, a nivel mundial se han detectado carbapenemasas
tipo KPC tambin en K.oxytoca, Serratia spp.,
Enterobacter spp., Salmonella spp., C.freundii, E. coli,
S. marcescens y P. aeruginosa [27]. En la presente
investigacin, las carbapenemasas KPC fueron
detectadas principalmente en K. pneumoniae (75,83%),
K. oxytoca (8,33%) y E. cloacae (6,39%); sin embargo,
es importante destacar que tambin fueron detectadas en
E. coli, E. aerogenes, P. agglomerans, C. freundii, C.
ginellii, M. morganii, S. marcescens y A. hydrophila.
Con respecto a la distribucin de las KPC aisladas en el
presente estudio segn servicios del Hospital, el 68,89%
de las cepas fueron aisladas de la UCI, 7,78% de
Hospitalizacin Medicina Interna y 6,39% y 3,89% de
Hospitalizacin Pediatra y Reten respectivamente.
Pruebas de susceptibilidad a los antibiticos en las
EPC aisladas: el 100% de las cepas fueron resistentes a
las penicilinas, al aztreonam, a las cefalosporinas de
primera, segunda, tercera y cuarta generacin. La
resistencia a las combinaciones con inhibidores de -
lactamasas (AmC, Sam y Tzp) fue superior al 80% y la
resistencia a los carbapenemes fue igualmente alta
(superior al 80%). El promedio de resistencia a los
aminoglucsidos fue superior al 50% (Gm 61,91%, Nn
77,68%, An 57,26% y Net 45,77%). La resistencia al
cido nalidxico (Na) fue de 64,19%, mientras que la
resistencia a las fluoroquinolonas fue superior al 75%
(Cip 76,76% y Lvx 75,04%). El 69,63% de las cepas
aisladas mostraron resistencia al
Trimetoprim/sulfametoxazole (Sxt), 74,69% a
Tetraciclina (Te) y 62,89% al Cloranfenicol (C). El
menor porcentaje de resistencia se observ frente a
Tigecilina, Tgc (13,79%) y slo una de las cepas
aisladas mostr resistencia a Colistin, Cl (0,28%) tanto
por el mtodo del disco como por E-test (CIM 48
por otras investigaciones [28,29,30], incluyendo las
contrapartes aisladas en el CRB-SAHUM para el ao
2011 [21], pero diferentes a otros estudios que
obtuvieron alta sensibilidad frente a An y 57,1% a Mem
[31,32]. Es importante resaltar que desde su aparicin
en el 2009, se han evidenciado cambios en la
susceptibilidad a los antibiticos de las cepas KPC
aisladas en el Hospital estudiado; aumentando la
resistencia a los aminoglucsidos (Gm, An y Net) y Tgc
pero disminuyendo la resistencia frente a Sxt, Te, Na,
fluoroquinolonas y C y se detect por primera vez
resistencia a Cl, similar a lo obtenido en Grecia, donde
esta droga es frecuentemente utilizada [30]. Deteccin
fenotpica de la presencia de carbapenemasas: la
deteccin de produccin de carbapenemasas basada
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solamente en los ensayos de susceptibilidad no es fcil,
por lo que se han propuesto una serie de ensayos no
moleculares confirmatorios para la deteccin de estas
enzimas, como la sinergia de doble disco entre cido
clavulnico o tazobactam y cualquier carbapenem [12].
Adems, se han estandarizado varias estrategias con la
adicin de inhibidores reversibles de enzimas clase C,
como Cloxacilina, Oxacilina y cido Bornico. Los
derivados del cido bornico, pero no de oxacilina,
inhiben enzimas KPC y al resto de los miembros de la
familia de carbapenemasas clase A. El uso de mtodos
basados en estos inhibidores resulta en reducciones
significativas de los resultados falsos positivos, adems
de la distincin de cepas productoras de
carbapenemasas clase A de aquellas productoras de
otras clases de carbapenemasas [33]. Por otra parte, el
ensayo de Hodge modificado (MHT) puede ayudar en
la confirmacin de la presencia de carbapenemasas,
pero no detecta exclusivamente el tipo KPC [12]. En la
presente investigacin, todos los aislamientos de EPC
tipo KPC mostraron resultados positivos con este
mtodo. Sin embargo, algunos investigadores han
reportado con el mtodo de Hodge modificado, tasas de
falsos positivos superiores al 25% entre no productores
de carbapenemasas (productoras de CTX-M-2, CTX-M-
15 y CTX-M-59) con susceptibilidad uniformemente
disminuida a ETP o hiperproductores de AmpC. La
adicin de zinc al medio de cultivo ha mostrado mejorar
la sensibilidad de este mtodo [34]; sin embargo,
Nordmann et al, 2013 [35] consideran que esta tcnica
consume mucho tiempo y debe ser descartada.
Adicionalmente, este ensayo puede carecer de
sensibilidad para detectar actividad de carbapenemasa
en Enterobacter spp. En la presente investigacin,
ninguna de las cepas KPC mostr resultados positivos
con el mtodo del disco combinado utilizando AmC
entre los carbapenemes, posiblemente debido a que las
carbapenemasas KPC son dbilmente inhibidas por el
cido clavulnico y el tazobactam [36]. Por el contrario,
en el presente estudio todos los aislamientos de EPC
tipo KPC fueron inhibidos por 300 g de cido
bornico frente a imipenem y meropenem. Por otra
parte, otros ensayos no moleculares han sido propuestos
para deteccin de actividad de carbapenemasa, pero
ninguno de ellos alcanza el 100%, como son el Ensayo
Indirecto de Carbapenemasas, deteccin utilizando
espectrofotmetros UV y de masa y el Ensayo Carba
NP, que detecta todas las carbapenemasas conocidas en
Enterobacteriaceae (pertenecientes a las clases A, B y
D de Ambler), as como tambin cualquier nueva
carbapenemasa emergente, a diferencia de las tcnicas
moleculares [35]. Deteccin genotpica de
carbapenemasas: las tcnicas moleculares continan
siendo el gold standard para la identificacin precisa
de los genes de carbapenemasas. [35]. En la presente
investigacin se realiz la PCR para deteccin del gen
blaKPC a 102 cepas de EPC (28,33%) que resultaron
positivas (96 K. pneumoniae, 5 E. aerogenes y 1 P.
agglomerans) (Figura 2).
Figura 2. Electroforesis para deteccin del gen blaKPC mediante
PCR en cepas de Enterobacteriaceae productoras de
carbapenemasas de un Hospital de Maracaibo. Venezuela.
2009-2013.
Los tipos de carbapenemasas varan de acuerdo a los
diferentes pases. En India predomina NDM-1, mientras
que en Estados Unidos, Grecia, Israel, China, Francia y
Venezuela predomina notablemente el tipo KPC; el tipo
OXA-48 predomina en Turqua, Tunes y Marruecos
[16,28,37]. Desde su deteccin por primera vez en
1996, se han hecho varios reportes de KPC alrededor
del mundo, incluyendo pases de Amrica Latina, por lo
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que es necesario enfatizar la necesidad de programas de
vigilancia local y prevenir la amplia diseminacin de
estas cepas [34,38,40]. Aunque en Venezuela son
escasos los datos que demuestran resistencia a los
carbapenemes en Enterobacteriaceae, la presente
investigacin sugiere que las EPC tipo KPC estn
emergiendo en los hospitales de nuestro pas desde
2009, lo que representa un impacto importante en la
organizacin de la atencin en salud venezolana. Los
resultados obtenidos en esta investigacin deben alertar
a las autoridades mdicas para establecer la deteccin
temprana e implementacin de medidas de control de
infecciones efectivas en hospitales [40]. La
identificacin de mecanismos de resistencia ayudar en
la determinacin de la epidemiologa, factores de riesgo
y estrategias teraputicas apropiadas para los
aislamientos resistentes a carbapenemes [32]. La
aparicin de EPC en todo el mundo es hoy en da un
importante problema de salud mdica y pblica, ya que
puede conducir a callejones teraputicos sin salida.
Afortunadamente, existen estudios que muestran la
contencin exitosa de las EPC mediante la aplicacin de
medidas, siendo las ms importantes los cultivos de
vigilancia activa, la separacin de los portadores y la
asignacin de personal de enfermera especializado
[41]. El tratamiento de las infecciones ocasionadas por
KPC es difcil debido a la panresistencia. Basados en
los datos de susceptibilidad, colistin y tigeciclina se
utilizan comnmente para el tratamiento de estas
infecciones. Sin embargo, adems del incremento de
informes de resistencia a stos antibiticos [17,30], un
estudio revel altos porcentajes de falla en los casos de
monoterapia con estos frmacos, mientras que su
combinacin con un carbapenem o un aminoglucsido
result ser ms eficaz, logrando mayores tasas de xito
con combinaciones que contienen carbapenem [41]. Por
otra parte, tambin se ha utilizado como tratamiento
frente a las EPC, Etp con doripenem o Mem,
obteniendo una respuesta exitosa sin recada durante el
seguimiento [42]. Igualmente la Fosfomicina ha sido
utilizada exitosamente y tambin se ha demostrado
sinergismo utilizando su combinacin con otros
agentes, como los aminoglucsidos [17,43].
Conclusiones.
Las cepas de Enterobacteriaceae presentaron un bajo
porcentaje de produccin de Carbapenemasas tipo KPC.
El sitio de colonizacin ms frecuente fue el tracto
respiratorio y el estado de portador rectal fue bajo. Las
cepas de EPC tipo KPC aisladas fueron altamente
resistentes a los antibiticos y se aisl por primera vez
en cinco aos en esta institucin, una cepa resistente a
Colistin. La mayora de los mtodos fenotpicos
empleados en el presente estudio permitieron confirmar
la presencia de Carbapenemasas en todas las cepas de
Enterobacteriaceae aisladas y la presencia del gen
blaKPC confirm que las carbapenemasas que circulan
en cepas de Enterobacteriaceae de nuestro medio son
del tipo KPC.
Palabras clave: Enterobacteriaceae, carbapenemasas,
KPC.
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Resistencia antimicrobiana de cepas de Staphylococcus spp. en muestras clnicas

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Antimicrobial resistance of Staphylococcus spp. in clinical samples

Peraza Kirstena; Orelln Yidab

a
Universidad de Oriente; b Docente Universidad de Oriente, Ncleo Bolvar

Introduccin: Staphylococcus spp. son los microorganismos ms frecuentemente aislados en las distintas muestras
biolgicas: exudados, material purulento, puncin - aspiracin o heridas quirrgicas, estos microorganismos patgenos
hospitalarios comunes han mostrado un incremento en los niveles de resistencia frente a distintos antibiticos. El objetivo
de esta investigacin fue evaluar la resistencia antimicrobiana de cepas de Staphylococcus spp. en muestras clnicas. Se
realiz un estudio de campo descriptivo, prospectivo de corte transversal. Metodologa: La muestra estuvo conformada
por 167 especmenes aislados en el Laboratorio Bacteriolgico Dr. Scrates Medina, Escuela de Ciencias de la Salud
Dr. Francisco Virgilio Battistini Casalta, Universidad de Oriente, Ncleo Bolvar; Ciudad Bolvar, Estado Bolvar, en el
perodo Junio 2010- Marzo 2011. Las muestras fueron inoculadas en agar sangre, agar EMB de Levine y caldo
Thyoglicolato e incubadas 24 horas a 35C. Se realiz las pruebas de coagulas y manitol salado en caso de ser positivas se
report S. aureus, las cepas coagulasa negativa se inocularon en agar DNasa luego de 24 horas de incubadas en caso
opalescencia del medio se confirm cuales cepas eran S. aureus. El resto se report S. coagulasa negativo. El
antibiograma se realiz por el mtodo de difusin segn recomendacin del NCCLS (2011) los antibiticos probados
fueron: oxacilina, eritromicina, clindamicina, ciprofloxacina, gentamicina, amicacina, levofloxacina, linezolid,
tetraciclina. Resultados: S. aureus se aisl en el (77,8%) de los casos. (44,4%) en infecciones de heridas quirrgicas,
(17,5%) abscesos de miembros inferiores y (15,9%) en otros tipos de muestra. Staphylococcus coagulasa negativa se aisl
en (22,%) de los casos todos provenientes catter venoso central. El 68,3% de los S. aureus aislados fueron resistentes a
eritromicina, el 50,8% a oxacilina, 47,6% a clindamicina, 46% a Ciprofloxacina. Se detect resistencia inducible a
clindamicina en el 47% de los casos, Respecto a Staphylococcus coagulasa negativo, 13% fueron resistentes a
clindamicina, 11,1% a tetraciclina y 3,2% a oxacilina, no hubo casos de multirresistencia.

Palabras clave: resistencia antimicrobiana, Resistencia de Staphylococcus spp., muestras clnicas.

Aislamientos Bacterianos Multidrogorresistentes en una Unidad de Cuidados

Intensivos. Caso: Hospital Vargas de Caracas
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Multidrug-resistant bacterial isolates inside an Intensive Care Unit.

Case: Vargas Hospital of Caracas

Gonzlez Karlab, Suarez Fabiolab, Rosas Angelyb, Correa Doryannaa, Rodrguez Jos Luisa,
Moreno Maybac y Toledo Libiac
a
Laboratorio Microbiologa Hospital Vargas de Caracas. b Residencia Asistencial en Bacteriologa Clnica
Hospital Vargas de Caracas. c Departamento de Epidemiologa Hospital Vargas de Caracas

Introduccin: Las bacterias multidrogorresistentes (MDR) han aumentado en la ltima dcada, convirtindose en un
problema de salud pblica a nivel mundial, ya que se asocian a un mayor ndice de morbimortalidad, sobre todo en
aquellos pacientes en estado de salud crtico, como los que son ingresados a las Unidades de Cuidados Intensivos (UCI).
Es de resaltar que en Venezuela las bacterias MDR, no son de notificacin obligatoria, por lo que se desconoce la realidad
del problema. Es por ello que se plantea determinar la frecuencia de aislamientos bacterianos MDR de los pacientes de la
UCI del Hospital Vargas de Caracas entre el 15 de Noviembre de 2012 y el 15 de Mayo de 2013. Metodologa: Se
analizaron bacteriolgicamente 198 muestras. A las diferentes bacterias aisladas tanto grampositivas como gramnegativas
se les determin el perfil de susceptibilidad por el mtodo de difusin del disco en agar descrito por Bauer y Kirby, y se
les realiz la deteccin fenotpica de los mecanismos de resistencia a las diferentes familias de antibiticos. Los resultados
positivos fueron confirmados mediante PCR de punto final. Tambin fueron calculadas las tasas de resistencia y
microbiolgicas de dichos aislamientos. Resultados: Se encontr una tasa de resistencia de 56,5%, siendo Acinetobacter
baumannii el microorganismo ms frecuente, con una tasa de aislamiento de 27,8% y un patrn de resistencia de 86,1%;
seguido de las enterobacterias con una tasa de aislamiento del 19,1% y un patrn de resistencia del 55,5%; y
Pseudomonas aeruginosa con una tasa de aislamiento del 4,6% y un patrn de resistencia del 16,2%. La confirmacin
molecular arroj BLEE tipo TEM y CTX-M1, y Carbapenemasas tipo KPC en enterobacterias y Carbapenemasas tipo
OXA23 en Acinetobacter baumannii. Conclusiones: Dada la alta tasa de resistencia bacteriana encontrada en la UCI
queda en evidencia el importante papel que juegan tanto el laboratorio de bacteriologa como los organismos de salud
competentes en la vigilancia epidemiolgica, para detectar y controlar estos brotes epidmicos.

Palabras clave: bacterias multidrogorresistentes, Unidad de Cuidados Intensivos, vigilancia epidemiolgica.

Staphylococus aureus como agente causal de Facitis Necrotizante Cervical

Odontognica
Staphylococcus aureus as a causative agent of Cervical Necrotizing fasciitis odontogenic
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Perozo Mara, Bustamante Eloy, De la Fuente Venus, Gudio Ronar

Postgrado de Ciruga Bucomaxilofacial
Universidad Gran Mariscal de Ayacucho - Hospital General del Oeste

Introduccin: La Fascitis Necrotizante Cervical Odontognica es una complicacin poco frecuente de las
infecciones odontognicas pero una de las ms letales, debido a su alta capacidad invasiva y su rpida
evolucin. En estudios realizados en la dcada de los 80 y 90 se aislaban cepas de Streptococcus spp. en
muestras tomadas de tejido de estas lesiones, pero estudios ms recientes alojan resultados donde se
manifiestan cepas de Staphylococcus aureus como el agente causal de dicha complicacin, lo cual queda
evidenciado en un caso tratado en el servicio de Ciruga Bucamaxilofacial del Hospital General del Oeste.
Metodologa: Se presenta un caso de una paciente de 56 aos de edad, con antecedente mdico contributario
de HTA controlada, quien acude a consulta presentando aumento de volumen en regin cervical izquierda,
disfagia, odinofgia, dolor a la palpacin, parestesia de hemilabio izquierdo con exudado purulento activo y
ftido del cual se toma muestra para cultivo y estudio histopatologico. Resultados: La muestra cultivada,
arroja como resultado la presencia de Staphylococcus aureus y como el agente causal de la Fascitis
Necrotizante Cervical y de una alta resistencia a la antibioticoterapia protolizada. Conclusiones: Queda
evidenciado, que es el Staphylococcus aureus el microorganismo responsable de esta complicacin
odontognica. De igual modo, es indispensable el estudio paraclnico de esta patologa, mediante cultivos para
el correcto plan de tratamiento y combatir con efectividad esta complicacin, venciendo la rapidez de su
evolucin.

Palabras clave: Fascitis Necrotizante / Staphylococus aureus / Infeccin Odontognica

Bacteremia asociada a catter por Mycobacterium porcinum

Catheter-associated bacteremia by Mycobacterium porcinum
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Da Mata-Jardn Omairaa, Ferrara Giuseppea,b, Maestre Jessb, Ogeerally Janethb, Rebolledo Anaa,
Fernandez-Figueiras Sandraa
a
Instituto Nacional de Higiene Rafael Rangel, b Centro Mdico Loira

Introduccin: Mycobacterium porcinum es una micobacteria no tuberculosa de crecimiento rpido (MNTCR), la cual
esta agrupada dentro del complejo de M. fortuitum. Se describe un caso de bacteremia asociada a catter (BAC), por M.
porcinum. Metodologa: Los patrones de restriccin fueron comparables con especies del complejo M. fortuitum, la
digestin adicional con BsaH1, permiti identificar la especie como M. porcinum. En el anlisis de la secuencia parcial
del gen rpob se observ similaridad >99% con lo reportado en cepas de M. porcinum, confirmando el resultado observado
en hsp65-PRA. una digestin adicional con la enzima BsaH1, la secuenciacin parcial del gen rpob y anlisis de
similaridad en GenBak. Se determin la sensibilidad frente a antibiticos mediante el mtodo de microdilucin en caldo.
Resultados: Los patrones de restriccin fueron comparables con especies del complejo M. fortuitum, la digestin
adicional con BsaH1, permiti identificar la especie como M. porcinum. En el anlisis de la secuencia parcial del gen rpob
se observ similaridad >99% con lo reportado en cepas de M. porcinum, confirmando el resultado observado en hsp65-
PRA. Ambos aislados mostraron sensibilidad frente a amikacina, ciprofloxacina, linezolid, moxifloxacina, imipenem y
meropenem; y resistencia frente a claritromicina, doxiciclina, tobramicina y Trimetoprim-sulfametoxazol. Conclusiones:
A pesar de que las BAC causadas por MNTCR no son comunes en comparacin con otros patgenos, es de importancia
tomar en consideracin en el diagnstico bacteriolgico. Dentro de las especies MNTCR que han sido aisladas como
causantes de este tipo de infecciones es frecuente encontrar reportes de especies del complejo de M. fortuitum, pero son
pocos los reportes de M. porcinum, esto se pudiera explicar porque la identificacin o diferenciacin de esta especie del
complejo de M. fortuitum no es sencilla, sobre todo basado solo en las pruebas bioqumicas. Sin embargo con la
introduccin de las tcnicas de biologa molecular ha permitido la reclasificacin e identificacin dentro de estos
complejos de MNTCR. PRA-hsp65 es una prueba con suficiente precisin para la identificacin de esta especie.

Palabras clave: Mycobacterium porcinum, PRA-hsp65, bacteremia asociada a catter, rpob

Gangrena de Fournier en paciente con Diabetes Miellitus Tipo 2:

A propsito de un caso
Fournier's Gangrene in a patient with type 2 Diabetes Miellitus: Report of a case
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Leal Claudiaa, Rosso Emperatriza, Snchez Samanthaa, Prez Juanb

Hospital Universitario Dr. Jos Mara Vargas San Cristbal- Estado Tchira.
a
Estudiantes del 3er ao de medicina, Universidad de Los Andes (ULA) Extensin Tchira.
b
Mdico Cirujano egresado de la Universidad de Los Andes (ULA) Extensin Tchira, Medico
interno en el Hospital Central San Cristbal

La gangrena de Fournier o tambin llamada gangrena perineal, es una infeccin necrosante subcutnea de las regiones
perianal, perineal, genital y del tercio inferior abdominal, con punto de partida genitourinario, colorrectal o idioptico;
ocasionada por el sinergismo de microbios (generalmente bacilos gramnegativos y cocos grampositivos) tanto anaerobios
como aerobios, entre los cuales se encontraron: Escherichia coli, Pseudomonas aeruginosa, Staphylococcus aureus,
Klebsiella spp, Enterococcus spp y Bacteroides spp, siendo estos parte de la flora normal del paciente, encontrndose en
mayor proporcin la Escherichia coli; ocasionando que la respuesta inmune sea ms compleja originando
inmunosupresin. Debido a que es una infeccin de avance rpido (2-3cm/h) provoca una alta mortalidad. Tiene mayor
incidencia en pacientes masculinos en relacin con los femeninos con una proporcin de 10:1; sus factores predisponentes
hasta en el 90-95% de los casos, tales como: diabetes, alcoholismo, cncer, virus de la inmunodeficiencia humana (VIH),
desnutricin, fallo renal, vasculitis, tumores malignos, la cual comienza con infeccin local, en las mujeres se presenta
como una infeccin necrotisante del perin o de la vulva, suele ser secundario a abscesos de las glndulas de Bartolino,
episiotoma, histerectoma o bloqueos cervicales. A continuacin se presenta el caso de una paciente femenina de 82 aos
de edad, hipertensa, la cual padece de diabetes mellitus tipo 2, motivo por el cual presenta inmunosupresin y disminucin
del flujo sanguneo, quien cursa un proceso infeccioso en regin perineal de 16 das de evolucin, caracterizada por
eritema en regin genital y perianal con salida de secrecin purulenta no ftida, lo cual ocasiono descompensacin aguda
de la diabetes mellitus expresada en estado hiperglicmico cetosico, ameritando infusin continua de insulina al momento
de su ingreso a hospitalizacin; adicional a su estado vulnerable presenta complicaciones tales como: anemia normoctica
normocrmica e hipoalbuminemia, ocasionadas por la infeccin.

Palabras clave: Gangrena de Fournier, hipertensin, diabetes, nefropata, infeccin.

Deteccin fenotpica de betalactamasas de espectro extendido (BLEE) y

betalactamasas tipo AmpC en aislados clnicos de Acinetobacter baumannii
Phenotypic detection of extended spectrum (BLEE) and type AmpC betalactamases in clinical isolates of
Acinetobacter baumannii
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Gonzlez Amaiz Gabriela,b*, Takiff Howardb, Marcano Brbaraa.

a
Servicios de Laboratorio. Centro Mdico Dr. Hernndez Cisneros. Porlamar. Isla de Margarita;
b
Laboratorio de Gentica Molecular. Centro de Microbiologa y Biologa Celular (CMBC).
Instituto Venezolano de Investigaciones Cientficas (IVIC). Caracas.

*Correspondencia autor principal

Email: presidenciahc@hotmail.com

Introduccin. deteccin fenotpica de BLEE y AmpC en un grupo de

En la actualidad, Acinetobacter baumannii es
resistente a la mayora de los antibiticos
betalactmicos, en especial a penicilinas
cefalosporinas particularmente en pacientes que se
encuentran recluidos en unidades de cuidado intensivos
[1,2]. Algunos estudios [3, 4, 5] han sugerido que la
sobreexpresin de una cefalosporinasa cromosmica
tipo AmpC, es el mecanismo ms frecuente de
resistencia a betalactmicos. La hperproduccin de
AmpC confiere resistencia a cefalosporinas de primera,
segunda, tercera, cuarta generacin y monobactmicos
(aztreonam), sin afectar a cefamicinas (cefoxitina) o
carbapenmicos (imipenem, meropenem, ertapenem)
[6]. Las cloxacilina y el aztreonam, as como el cido
bornico y sus derivados, cido fenil-bornico (AFB),
inhiben a las betalactamasas del tipo AmpC, mientras
que el cido clavulnico, sulbactam y tazobactam no
son buenos inhibidores [7]. Las betalactamasas de
espectro extendido (BLEE) tienen la capacidad de
hidrolizar y causar resistencia o sensibilidad disminuida
a penicilinas, oximino-cefalosporinas (cefotaxima,
ceftriaxona, ceftazidima, cefepima) y monobactamicos,
pero no a cefamicinas ni carbapenmicos, siendo
inhibidas por el cido clavulnico [8].
Se han desarrollado diversas pruebas fenotpicas
para la deteccin de BLEE y AmpC, la mayora basadas
en la actividad inhibitoria del cido clavulnico y el
cido fenil-bornico [9]. Entre ellas destaca la tcnica
de sinergia de doble disco. Por tal motivo en el presente
estudio se plante, utilizar el test de doble disco para la
aislados clnicos de A. baumannii.
y Materiales y mtodos.
En el presente estudio se evaluaron 245 aislados
clnicos de A. baumannii previamente genotipificados
mediante amplificacin y secuenciacin del gen que
codifica para el 16S del ARNr, realizado en el CMBC-
IVIC. La deteccin fenotpica de BLEE fue llevada a
cabo utilizndose el test de sinergia de doble disco
descrito por Jarlier et al., 1988 [10], el cual se basa en la
utilizacin de inhibidores de betalactamasas en un
antibiograma convencional. Se realizo por difusin en
agar empleando una placa de Mueller-Hinton (OXOID)
la cual se inocul con una suspensin bacteriana
ajustada al patrn 0,5 de la escala de Mc Farland. Sobre
ella se colocaron los discos (Becton Dickinson) de
carga estndar (30 g) de cefotaxima, ceftazidima y
cefepime a una distancia de 10 mm (de centro a centro)
de un disco de amoxicilina /cido clavulanico (20/10
g) colocado en el centro. Para detectar la presencia de
AmpC tambin se utiliz el test de sinergia de doble
disco emplendose como inhibidor de betalactamasa un
disco de cido fenil-bornico (300 g) colocado en el
centro de la placa y alrededor del mismo a una distancia
de 10 mm (de centro a centro) los discos de cefotaxima
y ceftazidima y cefepime. En ambos casos, las placas se
incubaron a 37C durante 24 horas. Transcurrido el
tiempo de incubacin, se considero sinergia positiva
cuando se observo una ampliacin o distorsin del halo
de inhibicin de cefotaxima, ceftazidima y/o cefepime
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en la zona de interseccin con amoxicilina/clavulnico presencia de BLEE. En un bajo nmero de cepas

(BLEE) o con el AFB (AmpC). (9,4%) no fue posible detectar la presencia de BLEE y
de AmpC. Posiblemente, debido a que la deteccin en el
Resultados y Discusin. laboratorio va a depender de su expresin fenotpica la
La utilizacin del test de doble disco permiti cual est condicionada por la cantidad de enzima
detectar fenotpicamente la presencia de BLEE en el producida por la bacteria, a dems de la presencia o no
80% de las cepas analizadas (196/245) y en el 69.8% de otros mecanismos de resistencia [11,12].
(171/245) las betalactamasas tipo AmpC. El test de La deteccin de los mecanismos de resistencia tiene
sinergia fue negativo en el 9.4% (23/245) de las cepas una gran repercusin clnica y epidemiolgica,
evaluadas. El 65.3% (145/222) de los aislados existiendo an hoy da cierta discusin sobre cul es la
presentaron simultneamente betalactamasas de mejor tcnica fenotpica para este fin. No obstante, el
espectro extendido (BLEE) y betalactamasas tipo test de sinergia de doble disco es un mtodo sencillo y
AmpC. En el 22.9% (51/222) de cepas, fueron econmico lo cual lo convierte en un instrumento de
detectadas fenotpicamente solo la presencia de BLEE y gran utilidad para la evaluar, fenotpicamente la
en el 11.8% (26/222) las betalactamasas tipo AmpC. De presencia de las betalactamasas de espectro extendido
los 196 aislados con deteccin fenotpica de BLEE, los (BLEE) y betalactamasas tipo AmpC. Optimizndose
discos de cefepime, cefotaxime y ceftazidime los resultados obtenidos con esta tcnica mediante el
permitieron detectarlas en el 95.4% (187/196), 13.7% uso de los discos de cefotaxime y cefepime, ya que los
(27/196) y 6.1% (12/196) de las cepas, respectivamente. mismos mejoran el efecto sinrgico con el cido
En cuanto a las betalactamasas tipo AmpC los discos de clavulnico y el cido fenil-bornico.
cefepime, cefotaxime y ceftazidime permitieron
evidenciar su presencia en el 83.0% (142/171), 33.9% Conclusin.
(58/171) y 11.1% (19/171) de los aislados, El test de doble disco es un mtodo sencillo y
respectivamente. econmico el cual puede ser aplicado en los
Si bien, diversas betalactamasas tanto de amplio laboratorios de microbiologa clnica para la deteccin
espectro como de espectro extendido han sido descritas fenotpica de BLEE y AmpC en cepas A. baumannii.
en A. baumannii, la principal resistencia a Las enzimas BLEE y AmpC estuvieron presentes en
betalactmicos est relacionada con la hperproduccin la mayora de los aislamientos clnicos de A. baumanni
de la cefalosporinasa cromosmica (AmpC) asociada a analizados.
la presencia de ISAba1 en el promotor del gen blaampC. El uso de los discos de cefotaxima y cefepima
Algunos estudios han demostrado que mejoran el efecto sinrgico con los inhibidores (cido
aproximadamente el 50% de los aislamientos clnicos clavulnico y cido fenil-bornico) incrementndose el
de A. baumannii presentan una hperproduccin de porcentaje de deteccin fenotpica de dichas enzimas.
AmpC [3,4]. Esto podra explicar el elevado porcentaje
de aislados clnicos de A. baumannii (69,8%) en los Palabras clave: A. baumannii, Betalactamasas, AmpC,
BLEE, test de doble disco.
cuales se logr realizar la deteccin fenotpica de
AmpC, obtenidos en nuestro estudio. Sin embargo, en el
Referencias:
80% de los aislamientos clnicos se logro detectar la
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1. Vila J, Marco F, Marcos M A, Abdalla S, Vergara 7. Navarro F, Calvo J, Cantn R, Fernndez-Cuenca

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Infecciones odontognicas resistentes por Enterococcus spp. nosocomiales.

Reporte de 3 casos.
Odontogenic infections resistant nosocomial Enterococcus spp. Report 3 cases.
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Castillo H.a, Contreras C.a, Gagliardi-Lugo A.b, Huartaja J.c

a Internode Ciruga Bucal y Maxilofacial de la Universidad Gran Mariscal de Ayacucho. Hospital General del Oeste Dr.
Jos Gregorio Hernndez. b Residente de 3er ao Postgrado de Ciruga Bucal y Maxilofacial de la Universidad Gran
Mariscal de Ayacucho. Hospital General del Oeste Dr. Jos Gregorio Hernndez.
c Especialista y adjunto del Postgrado de Ciruga Bucal y Maxilofacial de la Universidad Gran Mariscal de Ayacucho.

Hospital General del Oeste Dr. Jos Gregorio Hernndez.

Introduccin: Las Infecciones Odontognicas (IO) son una entidad patolgica polimicrobiana, con presencia de
microorganismos tales como Streptococcus viridans, Peptostreptococcus spp., Prevotella spp., Porphyromonas spp. y
Fusobacterium spp., consiguiendo en su primeras etapas aerobios y anaerobios facultativos causando anaerobiosis en el
medio realizando lisis tisular. Las IO se tratan con mtodos conjuntos a la antibioticoterapia, como la terapia endodntica,
el tratamiento quirrgico, incluido la incisin y drenaje, cambiando el ecosistema microbiolgico y aumentando la
eficacia del antimicrobiano. Existen reportados varios antibiticos que por su espectro de accin son efectivos en las IO,
como las penicilinas, cefalosporinas, entre otros. los cuales son considerados los antibioticos de primera lnea ante una IO
hasta obtener un antibiograma. La aparicin de resistencias antimicrobianas se pueden producir por, alteracin del sitio
diana de un frmaco, incapacidad de un medicamento para alcanzar su objetivo y la eliminacin activa del mismo. Los
enterococcus spp son cocos grampositivos, anaerobios facultativos, forman parte de la flora normal del tracto
gastrointestinal y han adquirido cada vez ms importancia como patgenos nosocomiales. Se presentan 3 casos clnicos en
los cuales los pacientes fueron trabajadores de instituciones hospitalarias e iniciaron su cuadro clnico con infeccin en
una unidad dentaria, de este modo la infeccin se disemino por continuidad agravando el estado clnico del paciente y
fueron tratados con antibioticoterapia tradicional, a lo cual no se observo mejora, por lo que se le realizo el
correspondiente estudio histopatolgico, antibiograma y colocacin de dren tipo penrose para su resolucin. El objetivo
del presente trabajo es reportar 3 casos clnicos de IO resistentes por enterococcus nosocomiales, atendidos en el servicio
de Ciruga Bucomaxilo Facial del Hospital General del Oeste Conclusin: Los enterococcus spp pueden colonizar el
tracto gastrointestinal proveyendo un reservorio continuo para la diseminacin y resistencia antimicrobiana por lo cual es
importante hacer un antibiograma para poder determinar la presencia o no de enterococcus spp resistentes, en especial
aquellos pacientes que se encuentran trabajando en ambiente hospitalarios, ya que estn ms propensos a sufrir
infecciones por Staphylococcus aureus, Pseudomonas aeruginosa y Acinetobacter baumannii

Palabras clave: Infeccin odontognica, Enterococcus spp., Nosocomial, Antibioticoterapia, Resistencia microbiana.

Infeccin de seno maxilar complicada con fistula bucosinusal por

Klebsiella pneumoniae. Revisin de la literatura y reporte de caso
Maxillary sinus infection complicated with oroantral fistula for Klebsiella pneumonia.
Review of the literature and case report.
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Contreras C.a, Castillo H.a, Peserico P.b, Bustamante E.c, Gudio R.d
a
Interno de Ciruga Bucal y Maxilofacial de la Universidad Gran Mariscal de Ayacucho. Hospital General del
Oeste Dr. Jos Gregorio Hernndez. b Residente de 1er ao Postgrado de Ciruga Bucal y Maxilofacial de la
Universidad Gran Mariscal de Ayacucho. Hospital General del Oeste Dr. Jos Gregorio Hernndez.
c
Residente de 2do ao Postgrado de Ciruga Bucal y Maxilofacial de la Universidad Gran Mariscal de
Ayacucho. Hospital General del Oeste Dr. Jos Gregorio Hernndez. d Especialista y adjunto del Postgrado
de Ciruga Bucal y Maxilofacial de la Universidad Gran Mariscal de Ayacucho. Hospital General del Oeste
Dr. Jos Gregorio Hernndez.

Introduccin: El Seno Maxilar (SM) es una cavidad neumtica del hueso maxilar, con forma piramidal de base medial y
vrtice hacia el hueso cigomtico. A travs del ostium maxilar, drena en el meato medio a fosas nasales, comunicndose
con las respectivas estructuras anatmicas adyacentes. Tambin, el piso del SM posee una delgada cortical de 1-6mm
aproximadamente y en reas solo membrana sinusal, presentando estrecha relacin con los pices radiculares maxilares.
Adems, las afecciones sinusales son causadas por reacciones alrgicas o infecciones recurrentes del tracto respiratorio
superior, clasificadas en agudas o crnicas. Por su parte, la sinusitis crnica puede desarrollarse por obstruccin
osteomeatal, debido a deformidades anatmicas del cornete medio, bulla etmoidal, proceso unciforme, causando estadios
inflamatorios crnicos de la mucosa sinusal. Posteriormente, disminuye la accin ciliar epitelial, causando acumulo
mucoso excesivo, hipoxia y la prxima instauracin infecciosa. En la microbiologa del tracto respiratorio, se evidencia
Klebsiella pneumoniae, de familia Enterobacteriaceae, son bacilos gramnegativos, anaerobio facultativo, encapsulado,
clnicamente presenta crecimiento mucoide y ser causal de neumonas. Se presenta un caso de fistula oroantral a causa de
infeccin del SM por Klebsiella pneumoniae, del servicio de Ciruga Bucomaxilo Facial, Hospital General del Oeste Dr.
Jos Gregorio Hernndez (HGO), Caracas, Venezuela. Conclusin: Es inusual, la formacin de fistula oroantral por
infeccin del SM y con predominio en el cultivo bacteriano de Klebsiella pneumoniae, aunque por la anatoma delgada
del piso sinusal, la cronicidad del proceso y antibioticoterapia sin protocolo, crea un medio propicio para el proceso
fistuloso palatino.

Palabras clave: Seno maxilar, fstula oroantral, sinusitis crnica, klebsiella pneumoniae.

Vigilancia de Leptospirosis humana basada en la aplicacin de mtodos serolgicos y

moleculares
Molecular and Serological Laboratory Based Human Leptospirosis Surveillance

Moros V Rosalba, Lpez Eneida, Cardona Marta N., Gmez Keyla M., Rivera-Olivero Ismar A.,
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Prez Jos Lus, Morales Richard, Rodrguez Juan Carlos y Rechimuzzi Giannina.
Laboratorio de Inmunoserologia Bacteriana. Departamento de Bacteriologia. Instituto Nacional de Higiene
Rafael Rangel. Caracas. Venezuela.

Introduccin: En Venezuela la leptospirosis es un problema de salud pblica, pero persiste el sub-diagnstico y sub-
registro, aun cuando en 2002 es incluida en el programa de vigilancia de sndromes febriles icterico-hemorrgicos, de
notificacin obligatoria. El objetivo del estudio fue determinar el comportamiento de la leptospirosis utilizando las
herramientas para la vigilancia de laboratorio en el centro nacional de referencia del Instituto Nacional de Higiene Rafael
Rangel (INHRR). Metodologa: En el periodo 1998 - 2012 se analizaron 18.700 sueros de pacientes de todo el pas, con
clnica y epidemiologa compatibles con leptospirosis. El diagnstico de laboratorio se realiz mediante la prueba
serolgica de referencia (MAT), y pruebas complementarias: Macro-aglutinacin del Antgeno Termorresistente (TR)
producido en el INHRR, y la tcnica molecular PCR con iniciadores G1/G2 y B64I /B64II. Para fortalecer el diagnstico
y vigilancia epidemiolgica se realiza investigacin orientada al desarrollo de tcnicas serolgicas como ELISA y
tcnicas de tipificacin molecular VNTR y campo pulsado para identificar aislados de Leptospira spp. Resultados: Con
la MAT se hallaron 3.051 pacientes positivos (16,31%), confirmndose 1.338 (7,15%) casos de leptospirosis, siendo 85%
hombres. La seropositividad anual estuvo entre 10% y 31%, con mayor frecuencia entre Agosto y Octubre, aunque en
algunos aos fue asociada al fenmeno climatolgico conocido como vaguada. La mayor frecuencia de seropositividad
(77,3%) fue hacia el serogrupo Icterohaemorragiae. Los aislados de pacientes, identificados por tipificacin serolgica y
molecular corresponden a los serovares: Copenhageni, Georgia, Canicola y Lousiana/Cynopteri. El ADN de Leptospira
se detect en muestras de suero, orina y tejido postmortem en 4,3% de los casos, esta baja positividad probablemente es
debida a la calidad y tipo de muestra, y/o antibioticoterapia. Ensayos preliminares muestran 90% de sensibilidad del
ELISA. Conclusin: Es necesario desarrollar herramientas de mayor sensibilidad en fase aguda para fortalecer el
diagnstico e investigacin.

Palabras clave: leptospirosis, Leptospira spp, vigilancia, biologa molecular

Rickettsiosis: enfermedad emergente en Venezuela. Estudio seroepidemiolgico y

confirmacin molecular
Rickettsia spp: emerging disease in Venezuela. Serological and molecular confirmation

Moros V Rosalbaa, Rivera-Olivero Ismar Aa, Torres Coy Jessa, Gmez Keylaa, Cardona Martaa,
Prez Jos Luis, Morales Richarda, Balzano Leandro y Carballo Jeismar
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a
Instituto Nacional de Higiene Rafael Rangel
*Correspondencia autor principal
Email: rosamorosvela@gmail.com
Introduccin.
Las Rickettsiosis son enfermedades zoonticas,
transmitidas solo por artrpodos, producidas por
bacterias intracelulares estrictas, cocobacilares, del
gnero Rickettsia, Orden Rickettsiales [1]. El gnero
Rickettsia est conformado por diferentes especies
agrupadas en dos biogrupos: Grupo Tifus (con dos
especies, R typhi y R prowazekii) y Grupo de Fiebres
Manchadas (GFM), conformado por ms de 20
especies. Las Rickettsiosis, clnicamente se incluyen
dentro de los sndromes ictricos hemorrgicos y
febriles prolongados (SFIH), presentando diferentes
manifestaciones clnicas de grado variable, que se
confunden con otras patologas. Ocasionan graves
problemas de salud pblica, que han afectado a la
humanidad y algunas especies de animales desde
tiempos antiguos, sin embargo es reciente su
identificacin como enfermedades infecciosas
emergentes o re-emergentes [1,2]. En Amrica son
poco estudiadas y por lo tanto el personal de salud
posee un escaso conocimiento de las enfermedades
rickettsiales y las Rickettsiosis, aunado a que el
diagnstico de laboratorio es difcil y existen escasos
mtodos especficos para su deteccin, pues estas
bacterias requieren de cultivos celulares y NBS-3,
siendo riesgoso su mantenimiento [3]. Por lo tanto, la
produccin de antgenos de Rickettsias que permitan
elaborar pruebas de ELISA, aglutinacin Ltex,
Western Inmunoblott, etc, est limitada a pocos
laboratorios en el mundo con las condiciones
requeridas [1,3]. En 1994 la Organizacin Mundial de
la Salud (OMS) recomend la prueba serolgica
inmunofluorescencia indirecta (IFI) como referencia
para el diagnostico serolgico de estas enfermedades
[4]. La prueba serolgica de Weil-Felix exhibe una
baja especificidad y sensibilidad que esta alrededor del
50-60%; sin embargo, en los pases donde se
desconocen estas patologas y hay escasas herramientas
para diagnstico, es de gran utilidad en el nivel de
atencin primario [1,2]. Otras pruebas, tales como la
visualizacin de frotis de sangre perifrica no son
mtodos recomendables, ni sensibles para el
diagnstico, porque es nfima la posibilidad de
detectar Rickettsias, ya que estas invaden clulas
nucleadas, principalmente fibroblastos, macrfagos,
clulas dendrticas, endotelio linftico y en especial
clulas endoteliales, pues las adhesinas de estas
bacterias reconocen receptores en clulas endoteliales
[2]. El hallazgo de casos Rickettsiosis confirmados por
primera vez en Venezuela entre los aos 2005 y 2006
[5,6], mediante la tcnica serolgica de referencia,
evidenci que es una patologa emergente, que ha
permanecido enmascarada en el grupo de SFIH sin
diagnstico. La implementacin de la prueba
serolgica de referencia de IFI ha permitido fortalecer
la vigilancia de laboratorio de sndromes ictrico-
hemorrgicos de etiologa desconocida ejecutada en el
centro nacional de referencia en salud pblica en
Venezuela. El diagnstico serolgico y diferenciacin
de infecciones recientes o pasadas es complejo en fase
aguda, por lo que los mtodos moleculares basados en
la reaccin de la cadena de la polimerasa (PCR) han
permitido el desarrollo de herramientas sensibles,
especficas y rpidas para la identificacin de aislados
de Rickettsias a partir de muestras clnicas y en
artrpodos. Aunque la investigacin ha arrojado
posibles blancos genmicos para la identificacin
molecular, se requiere la estandarizacin y validacin
de la tcnica de PCR con iniciadores para diferentes
blancos moleculares que permitan realizar el
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diagnstico y dilucidar los casos de Rickettsiosis. El Resultados y discusin.

objetivo del presente estudio fue evaluar la casustica Los resultados de la prueba IFI deben interpretarse
de Rickettsiosis humana generada mediante serologa como seropositividad hacia los biogrupos, ya que cada
y confirmar algunos casos por la tcnica molecular uno de los antgenos tiene reaccin serolgica cruzada
PCR, junto a los datos epidemiolgicos generados en con las especies que le conforman, es decir, cuando se
la pesquisa. observa fluorescencia especifica hacia R. rickettsii, se
traduce como seropositividad hacia alguna de las
especies del biogrupo GFM, y cuando se observa
Material y mtodos.
fluorescencia especfica para el antgeno R typhi, como
A travs de la vigilancia de laboratorio en el periodo
positividad hacia alguna de las dos especies del GT, R.
2005-2010 y el estudio retrospectivo en el periodo
typhi o R prowazekii. Mediante la prueba de IFI se
2002-2004, realizados en el Instituto Nacional de
detect una seropositividad total de 33,42 % (255/740)
Higiene Rafael Rangel (INHRR), se procesaron 740
para Rickettsias, que incluye 182 (24,59%) de casos
muestras de suero de pacientes con SFIH, provenientes
por infecciones activas (casos de Rickettsiosis) y los
de diferentes estados del Pas, con epidemiologia
pacientes positivos con ttulos de anticuerpos IgG 64
compatible con zoonosis, que resultaron negativos en el
256 (Tabla 1), que podran corresponder a ttulos de
diagnstico diferencial que incluye Dengue, Hepatitis,
anticuerpos anti-Rickettsias por infeccin pasada o a
Leptospirosis, y en ocasiones Fiebre Amarilla. Estas
casos en evolucin; por lo que se solicit muestras de
muestras de suero fueron procesadas por la tcnica
segundos sueros con 15-20 das de diferencia para
serolgica de Weil Felix (Remel) y la prueba de
evaluar la cintica y lograr observar cambios en los
referencia de inmuno-fluorescencia indirecta (IFI),
ttulos. En algunos casos no se observan anticuerpos
utilizando antgenos comerciales de Rickettsia typhi y
del tipo IgM, detectndose solo la presencia de
Rickettsia rickettsii (marca Focus). Se usaron
anticuerpos anti-Rickettsias del tipo IgG, por lo que
anticuerpos secundarios anti-IgG- y anti-IgM-
los ttulos de anticuerpos IgG 512 aunados a la
marcados con Fluorescena (Sigma) y sueros controles
clnica y epidemiologia, indican infeccin activa o caso
positivos para ambos patgenos provenientes del
de Rickettsiosis [2,8]. En los casos de pacientes que
CDC, Atlanta en dilucin 1:128. Adicionalmente se
resultaron IFI negativa, pero con datos clnicos
conservaron a -20 C las muestras de plasma y clulas
sugestivos, fecha reciente de inicio de la enfermedad y
blancas obtenidas de sangre con EDTA, as como
datos epidemiolgicos indicando contacto con animales
algunos sueros, para su procesamiento por la tcnica
domsticos, picadas de garrapatas o pulgas, residencia
de PCR. Se utilizaron clulas infectadas como
rural o presencia de roedores, tambin se solicit
controles positivos (CDC, Atlanta) para la
muestras de segundos sueros para su evaluacin. La
estandarizaron de la PCR, con los blancos genmicos
prueba de macro- aglutinacin de Weil Felix se realiz,
basados en secuencias de genes groEL, htrA, gltA y
como prueba complementaria inicial, a los sueros de
ompB. Se realiz la validacin de la PCR con los
pacientes negativos a Leptospirosis y otras patologas
iniciadores groEL utilizando ADN obtenido de
virales, con datos clnicos y epidemiolgicos
clulas blancas y plasma de 40 pacientes con resultados
sugestivos. Los casos de Rickettsiosis no representan
serolgicos de IFI y Weil Felix.
la incidencia de la patologa en el Pas, pero la elevada
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casustica evidencia la posibilidad de que las
Rickettsiosis constituyan un problema de salud pblica
a nivel nacional, siendo necesario fortalecer el estudio
de las mismas en diferentes niveles para poder ejercer
las medidas de vigilancia y control epidemiolgico.
Mediante la prueba IFI se logr determinar que los
casos de Rickettsiosis fueron atribuibles en 55,49%
(101/182) a Rickettsias del biogrupo de fiebres
manchadas y el 44,51 % (81 /182) al biogrupo Typhi.
Los casos del biogrupo Typhi, podran ser causados por
Rickettsia typhi, debido al comportamiento clnico y
epidemiolgico observado en los pacientes, ya que la
especie R prowazekii est asociada al Tifus epidmico,
el cual se presenta con alta mortalidad y es
transmitido por los piojos del cuerpo. Sin embargo, a
travs de serologa por IFI no pueden ser
identificadas, ya que esto solo es posible a travs de
tcnicas de biologa molecular, que incluyen
secuenciacin.
Se logr analizar los datos clnicos de 52,74%
(96/182) de los casos de Rickettsiosis en el periodo
estudiado, ya que se observ falta de informacin en las
historias recibidas. Las manifestaciones clnicas ms
frecuentes en los casos de Rickettsiosis con datos
clnicos, fueron: Fiebre (83,33%), sndrome neurolgico
o cefalea intensa (59,38%), hepato-esplenomegalia
(51,04%), sndrome hemorrgico (13,54%), erupcin en
piel o exantema (28,13 %), adenopata (27,1%), tos y/o
edema pulmonar (7,29%), ictericia (29,17%), dolor
abdominal (38,5%), vmitos (31,25%), nauseas
(26,04%) y diarrea (15,63%). Estos datos reflejan
parcialmente la complejidad de las manifestaciones
clnicas que se presentan en los casos de Rickettsiosis,
en concordancia con lo reportado en la literatura [1,9] a
pesar de las fallas en el llenado de la ficha clnico-
epidemiolgica. Esto sugiere la importancia de
considerar esta patologa, principalmente cuando hay
fiebre alta, exantema, adenopatas y sndrome
neurolgico sin rigidez de nuca.
Tabla 1. Casustica de Rickettsiosis, 2002-2010
N muestras
Resultado IFI* Descripcin
(%)
Ttulos
IgM e IgG 64 o 182 (24,59 %)
IgG 512 Positivos Casos
de Rickettsiosis
Ttulos
73 (9,86 %)
IgG 64 256 Positivos:
Infeccin pasada
o en evolucin
Negativos 485 (65,54%)
Total analizados 740
* Resultados de IFI en muestras de sueros usando antgenos
de Rickettsia rickettsii y R typhi. Los ttulos de anticuerpos
son el inverso de la dilucin del suero de paciente. Ttulos de
anticuerpos 64 son positivos. Los casos de Rickettsiosis son
la suma de los positivos obtenidos por cada antgeno.
La distribucin de casos segn los grupos etarios, se
realiz con los datos disponibles para los aos 2007 al
2010, en los que se detectaron mediante IFI 116 casos
de Rickettsiosis. La mayor proporcin fue detectada en
el segmento de poblacin de jvenes (18-29 aos) y
adultos (39-59 aos), representando estos el 68,10% del
total de casos en ese periodo. Pero en este grupo, los
jvenes conforman el 25,0% y la mayor proporcin
corresponde a los adultos con el 43,10%. Mientras que
el grupo de nios (0-11 aos) y adolecentes (12-17
aos) representan cada uno el 13,8% de los casos. Esta
distribucin es similar a lo reportado en otros pases
para las enfermedades rickettsiales, en la cual la
poblacin adulta tiene un mayor riesgo de adquirir la
enfermedad, probablemente asociado a la actividad
laboral y recreacional, as como es menor la proporcin
en el grupo de nios [9,10].
Las muestras clnicas de pacientes con SFIH
provienen de todas los Estados, por lo que se
diagnosticaron casos en todo el territorio, observndose
mayor proporcin de casos y demanda del diagnstico
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en el Distrito Capital y los Estados Bolvar, Carabobo,
Miranda, Tchira y Zulia. La distribucin de casos de
ambos biogrupos es similar en las diferentes zonas
geogrficas, pero se requieren estudios con biologa
molecular para identificar las especies de Rickettsia que
prevalecen en cada regin. A partir del ao 2005 hubo
aumento progresivo en el nmero de muestras
analizadas, la deteccin de casos de Rickettsiosis y
seropositividad (Figura 1). Este comportamiento se
atribuye a la labor de divulgacin del INHRR para el
reconocimiento de esta patologa en nuestro Pas y al
diagnstico de laboratorio oportuno en casos de SFIH, a
los que se les aplica el algoritmo para el diagnstico
diferencial, que incluye la Rickettsiosis despus que el
anlisis de Leptospirosis resulta negativo.
En el ao 2010 se evaluaron 224 muestras de suero,
casi el doble de los aos anteriores, y se detectaron 64
(29%) casos de Rickettsiosis y 23 (10,27%)
seropositivos con ttulos anticuerpos IgG anti-
Rickettsias 64 256, que podran corresponder a
infeccin pasada o en evolucin, que no lograron
definirse con la evaluacin de una segunda muestra
pues no fue enviada para su anlisis.
Figura 1. Seropositividad de Rickettsiosis por ao
Resultados anuales de IFI en muestras de sueros de pacientes
usando antgenos de Rickettsia rickettsii y R typhi. Los casos
de Rickettsiosis son la suma de los positivos obtenidos por
cada antgeno. Las cifras sobre la barra clara corresponden al
nmero de casos de cada ao.
La evaluacin segn el gnero fue posible con los
datos disponibles para el ao 2010, donde se observ
similar proporcin de casos de Rickettsiosis entre el
gnero masculino y femenino. Sin embargo, esta
pesquisa debe profundizarse para incluir los aos
anteriores y obtener datos ampliados de la distribucin
segn el gnero
El anlisis mediante la tcnica molecular de PCR
convencional se realiz con 40 muestras de clulas,
plasma y/o suero de pacientes diagnosticados mediante
IFI, en su mayora con resultados de la prueba de Weil-
Felix. Se seleccionaron casos de Rickettsiosis, casos
sospechosos (IFI negativos con Weil-Felix positivo) y
negativos para realizar la validacin de la tcnica de
PCR, con los juegos de iniciadores previamente
estandarizados con los controles positivos. La
estandarizacin de los iniciadores para los genes htrA,
gltA, groEL y ompB, utilizando los controles positivos,
evidenci los productos esperados en diferentes
ensayos. La validacin de la tcnica de PCR utilizando
los iniciadores groEL, permiti observar los productos
esperados en el 75% de las muestras clnicas evaluadas
en concordancia con los resultados de la prueba de
referencia IFI (Tabla 3). Los productos esperados son
un amplicn de 217 pb para Rickettsia del GFM y dos
amplicones que corresponden a 217 pb y 72 pb cuando
se trata de Grupo Tifus. El gen groEL se encuentra
presente en multicopia en todas las especies de
Rickettsia, codificando para una protena chaperona de
60KDa implicada en situaciones de estrs y
supervivencia celular [11] De esta manera, los
resultados generados mediante la prueba serolgica de
referencia de inmunofluorescencia indirecta junto a la
corroboracin mediante PCR groEL, confirma la
presencia de Rickettsias como patgenos emergentes en
Venezuela, ocasionan problemas de salud pblica a
nivel nacional, pero evidenciados con mayor nfasis en
los estados mencionados. La evaluacin de las muestras
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PCR PCR
Resultado Serologa
positivos negativos identificar las especies que causan enfermedades, lo
11 04 cual aporta valiosa informacin para futuras medidas de
IFI positivas GFM
WF positivo o NP control epidemiolgico.
(Casos Rickettsiosis GFM)
Palabras clave: Rickettsia, Rickettsiosis, molecular,
IFI positiva Grupo Tifus sero-epidemiolgico
WF positivo o NP 13 01
(Casos Rickettsiosis GT)
Referencias:
IFI negativos 1. Raoult, D and Roux, V. Rickettsioses as
WF positivo o NP 06 01
paradigms of new or emerging infectious disease.
(Casos sospechosos)
Clin Microbiol Rev.1887; 10: 694-719.
0 04 2. Didier Raoult and Philippe Parola 2004. Rickettsial
IFI negativa y WF negativo Disease. ed Informa Healthcare, London New
York.
Total analizadas (%) 30 (75%) 10 3. Organizacin Panamericana de la Salud. 2004.
clnicas con los iniciadores htrA, gltA y ompB, aun no Consulta OPS/OMS de expertos sobre
Rickettsiosis en las Americas. Informe Final.
es reproducible en muestras clnicas, por lo que debe Disponible (Online): www.paho.org
continuarse el proceso de estandarizacin e 4. Organizacin Mundial de la Salud. 1993. Global
surveillance of rickettsial diseases: Memorandum
investigacin. from WHO meeting. Bulletin of the WHO 71
Tabla 3. Validacin de la PCR para gen groEL con la (3/4): 293-296
tcnica Inmunofluorescencia Indirecta 5. Moros R, Lopez E et al Hallazgo de enfermedad
por Rickettsia sp en Venezuela VITAE 2005; 25,
Resultados de la PCR con los iniciadores para el gen groEL en [Revista digital], Oct/Dic 2005.
muestras clnicas de plasma o clulas blancas de 40 pacientes 6. Moros R. Lpez E et al, First study of human
diagnosticados mediante serologa con la prueba IFI como rickettsial disease in Venezuela. 20 th Meeting of
Casos de Rickettsiosis, pacientes sospechosos o negativos. the American Society for Rickettsiology. 2006;
GMF: Grupo Fiebres Manchadas. WF: Prueba complementaria [Abstract]. Disponible en: http://www.vet.k-
de Weil-Felix. NP: No procesados.
state.edu/depts/itc/conted/archive/2006/asr/
7. Seijo A, Picollo M y col, Fiebre manchada por
Conclusiones. Rickettsias en el Delta del Paran, una enfermedad
emergente. Medicina. 2007 (Buenos Aires)
La elevada casustica de Rickettsiosis y deteccin de
[Revista digital]. 67: 723-726.[ acceso el 24 de
casos en todos los estados sugieren que es un problema agosto de 2013], Disponible:
http://www.medicinabuenosaires.com/revistas/vol6
de salud pblica en el Pas y los casos se enmascaran
7-07/n6-2/v67_6-2_p723_726_.pdf
con otros SFIH de etiologa desconocida. Los datos de 8. Centers for Disease Control and Prevention. 2000.
Guidelines Indirect immunofluorescence assay
frecuencia de manifestaciones clnicas permiten
(IFA) for the detection of human antibodies to
visualizar la complejidad para el diagnstico y la Rickettsia.
9. Chapman A and Tick Borne Rickettsial Disease
necesidad de que se aplique el algoritmo para los SFIH
Working Group. Diagnosis and Management of
a nivel nacional, requirindose mayor formacin en Tickborne Rickettsial Diseases: Rocky Mountain
Spotted Fever, Ehrlichioses, and Anaplasmosis -
estas reas. Mediante la PCR se confirmaron los
United States. MMWR, CDC [Revista Digital],
resultados de obtenidos por IFI. La aplicacin de la 2006/55(RR04); 1-27. [Acceso 15 enero 2009].
Disponible en:
PCR representar un aporte importante para el
10. Chapman A, Murphy SM et al, Rocky Mountain
diagnstico y tratamiento oportuno, en los casos de Spotted Fever in United State, 1997-2002. Vector
Borne and Zoonotic Disease; 2007; 6(2): 170
difcil resolucin mediante la tcnica de referencia de
11. Lee JH, Park HS, Jang WJ, Koh SE, et al.
IFI, as como permitir fortalecer la investigacin de Differentiation of rickettsiae by groEL gene
analysis. J Clin Microbiol 2003; 41:29522960.
esta patologa en nuestro Pas, ya que se lograra
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Susceptibilidad antimicrobiana a grmenes anaerbios aislados en el Hospital de

Clinicas Caracas. 2009- 2013
Antimicrobial susceptibility of anaerobic bacteria isoalted in the Hospiatl Clinicas Caracas. 2009 -
2013

Vierma Herimar, Pea Jessy, Ferrer Josefina, Salazar Maringela, Papatzikos Juana
Hospital de Clnicas Caracas.Venezuela
masana312@hotmail.com
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Introduccin: Se estudiaron un total de ciento cuarenta y uno (141)

Los microorganismos anaerobios son parte
importante de la flora que reside en las membranas
mucosas, cuya alteracin puede condicionar la ruptura
de las barreras fisiolgicas y, por tanto, facilitar el
acceso de esta flora a localizaciones habitualmente
estriles provocando un proceso infeccioso. A pesar de
que los clnicos cada vez estn ms familiarizados con
este tipo de infecciones, el hecho de que existan ciertas
dificultades tcnicas para el aislamiento de este grupo
de microorganismos a partir de muestras clnicas,
fundamentalmente a la hora del transporte y manejo de
dichas muestras, puede conllevar a que no se puedan
recuperar bacterias anaerobias como agentes etiolgicos
de algunos sndromes infecciosos con las consiguientes
implicaciones teraputicas [1].
Las especies del genero Clostridium ocasionan en el
hombre cuadros especficos asociados a la produccin
de toxinas, como el ttanos, el botulismo, la gangrena
gaseosa, entre otros; mientras que, el resto de las
bacterias anaerobias y a veces tambin algunas especies
de Clostridium spp., causan cuadros inespecficos. Las
infecciones por anaerobios son en su mayora de origen
endgeno, suelen ser polimicrobianas y mixtas, y se
asocian a tasas significativas de morbilidad
mortalidad. El impacto de una terapia emprica
adecuada en la evolucin de las infecciones por
anaerobios, como las bacteriemias, ha sido puesto de
manifiesto por diversos autores [2,3].
Los patrones de resistencia de la mayora de las
bacterias anaerobias han cambiado en estas ltimas
dcadas, en especial en el grupo Bacteroides fragilis,
adems, se ha detectado emergencia de resistencia a los
antibiticos tradicionalmente activos como los -
lactmicos con inhibidores de -lactamasas, los
carbapenemes.
Materiales y mtodos
aislamientos de bacterias anaerobias recuperados de
muestras clnicas entre enero del 2009 y septiembre del
2013 en el Hospital de Clnicas Caracas.
Dichas muestras fueron cultivadas en los medios
Wilkins-Chalgren Agar (Oxoid) y Phenylethil Alcohol
(PEA) (Criterion) suplementados con 5 % de sangre
desfibrinada, incubadas en anaerobiosis con sobres
GENbox anaer (BioMrieux) a 37C durante 48 horas.
La identificacin fue realizada utilizando el sistema
Vitek 2C (BioMrieux) con su tarjeta ANC siguiendo
las especificaciones del fabricante, partiendo de un pase
fresco en el medio Wilkins-Chalgren Agar (Oxoid)
suplementado con 5 % de sangre desfibrinada.
Se evalu la actividad in vitro de cefoxitina,
imipenem, meropenem, clindamicina, metronidazol y
piperacilina/tazobactam por el mtodo de E-TEST
siguiendo las especificaciones del fabricante y los
parmetros establecidos por el CLSI 2013 [16] en el
documento M100-S23 para la interpretacin de los
resultados, utilizando el medio Wilkins-Chalgren Agar
(Oxoid) suplementado con 5% de sangre desfibrinada.
Para el monitoreo de las pruebas de sensibilidad se
utiliz como control la cepa Bacteroides fragilis ATCC
y 25285.
Resultados y Discusin
Se aisl un total de 141 cepas de diferentes bacterias
anaerobias descritas en la tabla 1, a partir de secreciones
abdominales (35,9%), sangre (25,6%), abscesos
(21,8%) y secreciones de heridas (16,7%). Los
grmenes ms frecuentemente aislado fueron
Bacteroides stercoris (17,02%), Bacteroides fragilis
(7,8%) y Propionibacterium acnes (7,8%). En la tabla 2
podemos observar el porcentaje de sensibilidad
obtenido para cada especie de microorganismos
anaerbicos aislados.
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En el grupo de Bacteroides spp. Se observ mayor

resistencia a clindamicina, seguido de imipenem, Microorganismo Aislamientos

coincidiendo esto con Calvo y col. (2005) [13]. Todas Bacteroides fragilis 12
Bacteroides melaninogenicus 6
las cepas de Bacteroides melaninogenicus fueron
Bacteroides ovatus 6
resistentes a clindamicina, manteniendo buena Bacteroides stercoris 24
sensibilidad a metronidazol (100%) y a Bacteroides thetaiotaomicron 2
Clostridium bifermentans 3
piperacilina/tazobactam exceptuando Bacteroides
Clostridium clostridioforme 1
thetaiotaomicron. Para cefoxitin se observ diferencias Clostridium perfringens 7
entre los porcentajes de sensibilidad dependiendo de la Clostridium ramosum 1
especie siendo las ms resistentes Bacteroides ovatus y Eggerthella lenta 9
Fusobacterium nucleatum 7
Bacteroides stercoris, de igual forma con lo reportado
Fusobacterium varium 5
por Litterio col. (2004) en Argentina [15]. Parvimonas micra 9
Para el grupo Clostridium spp. se observ un 100% Peptostreptococcus anaerobius 4
Peptostreptococcus asaccharolyticus 4
de sensibilidad para todos los antibiticos evaluados
Finegoldia magna 4
exceptuando Clostridium bifermentans que present un (Peptostreptococcus magnus)
Prevotella bivia 7
67% de sensibilidad a clindamicina y Clostridium
Prevotella buccae 1
clostridioforme que fue resistente a cefoxitin, Prevotella intermedia 6
clindamicina e imipenem. Prevotella melaninogenica 6
Propionibacterium acnes 12
Todas las especies de Fusobacterium fueron
Veillonella sp. 5
sensibles a los antibiticos ensayados a excepcin de Total 141
Fusobacterium varium que presento un 80% de Para las especies de Prevotella spp. se observ

sensibilidad para metronidazol. buena sensibilidad para todo los antibiticos probados a

Tabla 1.- Bacterias anaerbicas aisladas de muestras
clnicas en el Hospital de Clnicas Caracas entre 2009 y
2013.
excepcin de la clindamicina donde la sensibilidad fue
variable dependiendo de la especie.
Propionibacterium acnes present 100% de
resistencia para metronidazol, conservando 100% de
sensibilidad al resto de los antibiticos.
Veillonella spp. present 20% de resistencia para
clindamicina y metronidazol, Eggerthella lenta un 33%
para cefoxitin y Parvimonas micra un 78% de
resistencia a clindamicina.
El mayor nmero de cepas aisladas provenan de
secreciones abdominales y sangre, lo que concuerda
con lo sealado por Betriu y col (2008) [4] que destaca
que la mayora de infecciones por bacterias anaerobias
corresponden a infecciones intraabdominales. Hoy en
da existen discrepancias en cuanto a variaciones en la
incidencia de bacteriemias por anaerobios. En
publicaciones recientes se ha destacado el aumento de
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la frecuencia de bacteriemia por anaerobios en diversos sensibilidad, seguido del cefoxitin. Dentro del grupo de
hospitales [14]. los Bacterioides spp., ya podemos observar sensibilidad
disminuida a los carbapenems.
Tabla 2.- Porcentaje de sensibilidad por
microorganismo anaerbico vs. Antibitico. Recomendamos continuar evaluando los perfiles de
susceptibilidad de las bacterias anaerobias aisladas en el
centro, con fines epidemiolgicos y teraputicos, para
ANTIBIOTICO % de sensibilidad
as poder detectar cualquier tendencia o cambio dentro
MICROORGANISMO FOX CC IMP MEM MZ TZP
de los patrones de susceptibilidad.
Parvimonas micra 100 22 100 100 100 100
Bacteroides 100 55 100 100 100 100
fragilis Referencias
Bacteroides 100 0 10 100 100 100
melaninogenicus 1. San Juan Garrido R, Daz Pedroche C y Lpez
Bacteroides ovatus 50 33 67 50 100 100 Medrano F. Infecciones por anaerobios. Medicine
Bacteroides 57 69 92 100 100 100 2006; 9(51): 3319-3328.
stercoris 2. Nguyen MH, Yu VL, Morris AJ, McDermott L,
Bacteroides 50 50 100 100 100 0 Wagener MW, Harrell L, et al. Antimicrobial
thetaiotaomicron resistance and clinical outcome of Bacteroides
Clostridium 100 67 100 100 100 100 bacteremia: findings of a multicenter prospective
bifermentans observational trial. Clin Infect Dis. 2000; 30: 870
Clostridium 0 0 0 100 100 100 6.
clostridioforme
3. Salonen JH, Eerola E, Meurman O. Clinical
Clostridium 100 100 100 100 100 100
perfringens significance and outcome of anaerobic bacteremia.
Clostridium 100 100 100 100 100 100 Clin Infect Dis. 1998; 26: 14137.
ramosum 4. Betriu C, Culebras E, Gmez M, Lpez F,
Eggerthella lenta 67 100 100 100 100 100 Rodrguez-Avial I, Picazo JJ. Resistance trends of
Fusobacterium 100 100 100 100 100 100 the Bacteroides fragilis group over a 10-year
nucleatum period, 1997 to 2006, in Madrid, Spain. Antimicrob
Fusobacterium 100 100 100 100 80 100 Agents Chemother. 2008; 52: 268690.
varium 5. Fernandez Canigia L, Castello L, Di Martino A,
Peptostreptococcus 100 100 100 100 100 100 Greco G, Legaria MC, Litterio M, Predari SC,
anaerobius Rollet R, Rossetti A, Carloni G, Sarchi MI,
Peptostreptococcus 100 0 100 100 0 100 Bianchini H. Susceptibility trends of Bacteroides
asaccharolyticus
Finegoldia magna 100 100 100 100 100 100
fragilis group isolates from Buenos Aires,
Argentina. Rev Argent Microbiol 2007; 39: 156-
Prevotella bivia 100 100 100 100 50 100 60.
Prevotella buccae 100 0 100 100 100 100 6. Gal M, Brazier JS. Metronidazole resistance in
Prevotella 100 83 100 100 100 100 Bacteroides spp. carrying nim genes and the
(Bacter.) selection of slow-growing metronidazole-resistant
intermedia mutants. J Antimicrob Chemother 2004; 54: 109-
Prevotella 100 67 100 100 100 100 16.
(Bacter.) 7. Hecht DW. Evolution of anaerobe susceptibility
melaninogenica testing in the United States. Clin Infect Dis 2002;
Propionibacterium 100 100 100 100 0 100
35 (Suppl 1): S28-35.
acnes
Veillonella sp. 100 80 100 100 80 100 8. Hecht DW. Anaerobes: antibiotic resistance,
clinical significance, and the role of susceptibility
testing. Anaerobe 2006; 12: 115-21.
FOX cefoxitin, CC clindamicina, IMP imipenem, MEM 9. Knnen E, Wade W. Propionibacterium,
meropenem, MZ metronidazol, TZP piperacilina/tazobactam Lactobacillus, Actinomyces, and other non-spore-
forming anaerobic gram-positive rods. En: Murray
PR, Baron EJ, Jorgensen JH, Landry ML, Pfaller
Frente al total de cepas estudiadas clindamicina fue MA (editores). Manual of Clinical Microbiology,
9th edition. Washington DC, ASM Press, 2007, p.
el antimicrobiano que presento un menor porcentaje de 872-88.
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10. Nguyen MH, Yu VL, Morris AJ, McDermott L,
Wagener MW, Harrell L, Snydman DR.
Antimicrobial resistance and clinical outcome of
Bacteroides bacteremia: findings of a multicenter
prospective observational trial. Clin Infect Dis
2000; 30: 870-6.
11. Aldridge K, Ashcraft D, Cambre K, Pierson C,
Jenkins S, Rosenblatt J Multicenter survey of the
changing in vitro antimicrobial susceptibilities of
clinical isolates of Bacteroides fragilis group,
Prevotella, Fusobacterium, Porphyromonas, and
Peptostreptococcus species. Antimicrob. Agents
Chemother.2001; 45: 1238-1243.
12. Bianchini H, Fernndez Cangia L, Bantar C,
Smayevsky J. Trends in antimicrobial resistance of
the Bacteroides fragilis group: a 20 year study at a
medical center in Buenos Aires, Argentina. Clin.
Infect. Dis.1997; 25 (Suppl 2): 268-269.
13. Calvo A, Rodrguez C, Bertuglia F, Andrade O,
Marques N. Resistencia bacteriana en anaerobios:
Evaluacin de tres aos de experiencia mediante
la tcnica de E- test. 2005. XII Congreso de la
Asociacin Panamericana de Infectologa.
http://caibco.ucv.ve
14. Lassman B, Gustafon D, Wood C, Roseblant J.
(2007). Reemergence of anaerobic bacteremia.
Clin Infect Dis. 44: 895-900.
15. Litterio M, Bianchini H, Carloni G, Di Martino A,
Fernandez L, Greco G, Legaria C, Rollet R,
Rossetti A, Predari S, Castello L. Actividad in
vitro de 10 antimicrobianos frente a bacterias
anaerobias. Estudio multicentrico, 1999-2002.
Revista Argentina de Microbiologia. 2004; 36:130-
135.
16. Clinical and Laboratory Standards Institute.
Methods for antimicrobial susceptibility testing of
anaerobic bacteria; approved standard, 2013;
M100-S23. Wayne, PA, USA.
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Comparacin de mtodos inmunolgicos para la deteccin de E. coli O157:H7 en

alimentos
Comparison of inmunological methods for the detection of E. coli O157:H7 in food

De Oliveira Lauraa, Blasco Patriciaa y Gmez Patricia M.a

a
Gerencia de Investigacin y Soporte Analtico, Empresas Polar.

Introduccin: E. coli O157:H7, ha surgido en los ltimos aos como un patgeno emergente causante de diversos brotes
transmitidos a travs de alimentos como carnes, jugos y vegetales crudos. Por su importancia en la industria de alimentos,
se han desarrollado diversos mtodos que permiten detectarla, incluso cuando se encuentra en bajas concentraciones en la
matriz de inters. En Venezuela, no existe una norma que describa un mtodo para la deteccin de este patgeno, aunque
en el mercado se pueden encontrar diversas metodologas basadas en tcnicas moleculares o inmunolgicas. En este
estudio se plante comparar 4 metodologas rpidas inmunolgicas para determinar cul de ellas presentaba el mejor
desempeo. Metodologa: En primer lugar se compar la eficiencia en la deteccin utilizando un cultivo puro del
microorganismo y posteriormente en matrices artificialmente inoculadas con este serotipo de E. coli. Los mtodos
incluidos fueron: Singlepath de Merck, VIP para EHEC de Biocontrol, Reveal E. coli O157:H7 Test System de
Neogen y TECRA E. coli O157 Visual Immunoassay de 3M. Resultados: En las pruebas con los cultivos puros todos
los mtodos mostraron un buen desempeo con indicadores de exactitud, especificidad y sensibilidad superiores a 80%.
Sin embargo, cuando se analizaron las muestras de alimentos artificialmente inoculados, los indicadores de desempeo
bajaron en todos los casos, presumiblemente debido a la interferencia de la matriz y a la lesin de las clulas.
Conclusiones: Al realizar el clculo de los indicadores de exactitud, especificidad y sensibilidad, tomando en cuenta todas
las muestras analizadas, se determin que los kits Reveal y Singlepath obtuvieron valores superiores a 80%, por lo
cual cualquiera de estos dos mtodos podra ser utilizado para la deteccin de este patgeno en alimentos.

Palabras clave E. coli O157:H7, mtodos inmunolgicos, comparacin, alimentos.

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Deteccin de genes stx1 y stx2 en cepas de E. coli enterohemorrgica y verificacin de

su expresin mediante la deteccin de verotoxina utilizando un mtodo inmunolgico
Detection of genes stx1 and stx2 in enterohemorrhagic E. coli strains and verification of their
expression through the detection of verotoxin using an immunological method

De Oliveira Lauraa, Blasco Patriciaa y Gmez Patricia M.a

a
Gerencia de Investigacin y Soporte Analtico, Empresas Polar.

Introduccin: El grupo de virulencia de E. coli enterohemorrgica se caracteriza por producir verotoxinas. Existen dos
prototipos de esta toxina que son designadas Stx1 y Stx2. El serotipo O157:H7 es el miembro ms comn de este grupo;
sin embargo, existen otros serotipos capaces de producir la toxina. Esta toxina ha causado numerosas infecciones
alimentarias en los ltimos tiempos, por lo que resulta de mucha utilidad poder conocer si una cepa tiene o no la capacidad
de producirla, para lo cual se han desarrollado mtodos inmunolgicos que detectan la presencia de la toxina y mtodos
moleculares que detectan la presencia de los genes stx1 y stx2. Sin embargo, la produccin de toxinas puede depender de
diversos factores y no nicamente de la presencia de los genes. Es por ello que se plante como objetivo de este estudio,
comparar la deteccin de los genes stx1 y stx2 mediante un mtodo molecular y la expresin de la toxina mediante un
mtodo inmunolgico en distintas cepas de E. coli enterohemorrgica. Metodologa: se evaluaron 29 cepas de E. coli
cuyos serotipos han sido reportados como portadores de los genes stx1 y stx2, 1 cepa de E. coli aislada de alimentos y una
cepa de Aeromonas hidrophyla utilizando la metodologa SureFood STEC. Resultados: Se observ que el mtodo
detect un 25% de cepas con los genes stx1 y/o stx2, las cuales deberan producir verotoxinas. Para determinar esta
capacidad, se evaluaron estas mismas cepas con el mtodo inmunolgico Ridascreen Verotoxin observndose la
produccin de toxina nicamente en una de las cepas de E. coli O157:H7. Conclusiones: Es posible que el mtodo no
sea suficientemente sensible, que no estn presentes en estas cepas otros genes partcipes de la produccin de toxinas o
que se requiera la presencia de factores presentes en los alimentos para observar su expresin

Palabras clave E. coli, mtodos inmunolgicos, mtodos moleculares, verotoxina, expresin de genes.
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MICOLOGA
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Susceptibilidad antifngica de especies de Candida aisladas de pacientes ingresados en

la Unidad de Cuidados Intensivos del Hospital Universitario de Coro Dr. Alfredo
Van Grieken, Estado Falcn, Venezuela
Antifungal susceptibility of Candida species isolated from patients admitted to the Intensive Care
Unit, University Hospital of Coro Dr. Alfredo Van Grieken Falcon state, Venezuela

Sal Yotsabeth, Hernndez Rosaura

Laboratorio de Micologa, Centro de Investigaciones Biomdicas. Universidad Nacional Experimental
Francisco de Miranda, Coro, edo. Falcn, Venezuela.

Introduccin: A pesar de la relevancia que tienen las infecciones fngicas invasoras por Candida spp. en pacientes
recluidos en unidades de cuidados intensivos (UCI), es escasa la informacin sobre el perfil de susceptibilidad y especies
aisladas en nuestro medio. Metodologa Se evaluaron muestras de 60 pacientes ingresados en la UCI: 98 hemocultivos,
48 urocultivos cuantitativos, 46 secreciones traqueales y 2 puntas de catter. Las muestras fueron sembradas en agar
cromognico y la identificacin de los aislados se realiz mediante sus caractersticas macroscpicas de crecimiento y por
mtodos convencionales. La susceptibilidad antifngica fue evaluada por el mtodo de difusin en agar Etest
(itraconazol, caspofungina, anfotericina B) y el mtodo de difusin en disco (fluconazol, voriconazol) (M44-A, CLSI).
Resultados: Se aislaron 37 levaduras (73% de urocultivos en recuento significativo, 24,3% de secrecin traqueal y 2,7%
de punta de catter). C. tropicalis fue la especie ms frecuente (43,2%) seguida de C. glabrata (21,6%) y C. albicans
(13,5%), evidencindose una distribucin diferente a lo reportado en la literatura. El uso de agar cromognico permiti
detectar infecciones mixtas en muestras de orina y secrecin traqueal, aislndose el complejo Trichosporon asociado a
otras especies de Candida solo en urocultivos. El 51,4% de los aislados result sensible a itraconazol y el 100% lo fue
para caspofungina y anfotericina B. La sensibilidad a fluconazol y voriconazol se estim en 73% y 89,2%,
respectivamente. Conclusin: La frecuencia observada de candiduria, sugiere que el urocultivo cuantitativo pudiera
emplearse como estudio rutinario en pacientes crticos, a fin de establecer estrategias teraputicas y profilcticas
adecuadas.

Palabras clave: Candida spp. susceptibilidad, itraconazol, caspofungina, anfotericina B, fluconazol, voriconazol.
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Aislamiento e Identificacin de la microbiota fngica en libros de la Biblioteca

Prof. Jos M. Forero de la Escuela de Bioanlisis-UCV
Isolation and identification of the fungal microbiota of books from
Prof. Jose M. Foreros library of Bioanalisis-UCV

Capote Anaa, Contreras Stephanya, Torres Joela*, Romero Hildaa

a
Ctedra de Micologa, Escuela de Bioanlisis-Universidad Central de Venezuela

Introduccin: Los hongos son microorganismos ubicuos que pueden ser beneficiosos y perjudiciales. En las bibliotecas
son causantes del biodeterioro de recursos bibliogrficos, conllevando a la prdida de valiosos ejemplares; adems, son
potentes alrgenos que ocasionan efectos nocivos en las personas que all hacen vida. Se evalu la microbiota fngica de
libros de la Biblioteca de la Escuela de Bioanlisis-UCV en noviembre 2012. Metodologa: Se recolectaron muestras,
mediante hisopado, en 3 reas: archivo-mvil (A), oficina (B) y depsito (C), maana y tarde, muestreando una superficie
de 125cm2/rea; el hisopado se suspendi en 3ml de SSF estril y se inocul 1ml de ste en placas Petrifilm 3M , por
duplicado, se incubaron a 25C durante 72 horas y subsecuentemente se contaron las colonias fngicas; stas se aislaron
en PDA y posteriormente se identificaron siguiendo los mtodos micolgicos convencionales. Se registr la temperatura
(T) y humedad relativa (HR) en cada rea. Resultados: El contaje de colonias/125cm2, en la maana fue: A: 78, B: 36, C:
51; en la tarde: A: 54, B: 57 y C: 63. La T registrada fue de 24,8C en la maana y 27,5C en la tarde; la HR fue de 60%
en ambos turnos. Los hongos identificados con mayor frecuencia en la maana, fueron en A: Basidiomycetes spp. (9),
Cladosporium spp. (5) y Aspergillus niger (4); B: Basidiomycetes (3) y C: Verticillium spp. (11); y en la tarde en A:
Basidiomycetes spp. (9), A. niger (4); B: Basidiomycetes spp. (12), A. niger (4), Ramicloridium schulzeri (3) y C: A. niger
(10), A. versicolor (10), Basidiomycetes spp. (5) y Basidiobolus ranarum (4). Conclusin: El contaje de colonias fue
mayor en la tarde (174) que en la maana (165), al igual que la variedad de gneros fngicos, entre los que se hallaron
microorganismos cuyo poder patgeno es bien conocido, tanto para la salud humana como para los libros.

Palabras clave: Biblioteca, Libros, Identificacin, Hongos.

.
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Determinacin de la microbiota fngica en libros enfermos de la Biblioteca

Prof. Jos M. Forero de Bioanlisis-Universidad Central de Venezuela
Determination of the fungal microbiota from ill books of the
Prof. Jos M. Foreros library, Bioanalisis-Universidad Central de Venezuela
.
Contreras Stephany, Capote Ana, Torres Joel, Romero Hilda
Ctedra de Micologa. Escuela de Bioanlisis. Universidad Central de Venezuela

Introduccin: Venezuela se encuentra en una zona tropical que garantiza condiciones de humedad y temperatura para la
proliferacin fngica. En el caso especfico de las bibliotecas, la luz y la ventilacin permiten que partculas fngicas
dispersas en el aire se depositen sobre libros, aunado a una inconstancia en el mantenimiento de estos ambientes, se
favorece un medio adecuado para que los hongos produzcan dao al material bibliogrfico y de oficina. Se evalu la flora
fngica asociada a las lesiones de libros enfermos de la biblioteca de la Escuela de Bioanlisis-UCV. Metodologa: se
recolectaron muestras, por hisopado humedecido en SSF estril, de lesiones en libros ubicados en el archivo mvil (Am) y
en el depsito (D), en noviembre de 2012, durante la maana y registrando la temperatura (T) y humedad relativa (HR),
por rea. El hisopo se suspendi en 3 mL de SSF estril y de sta se sembr, por agotamiento, 200 L en placas con PDA,
incubando a 25 C durante 72 horas. Se realiz el contaje de colonias/placas y stas se aislaron en tubos con PDA para su
posterior identificacin, siguiendo la metodologa convencional. La T fue de 25,2 y 24,6 C para Am y D,
respectivamente; la HR fue de 60,5 % para ambos ambientes; se cuantificaron 25 colonias en los libros de Am y 3 en los
del D. Resultados: el gnero con mayor predominio en el Am fue Aspergillus, siendo la especie ms frecuente A.
versicolor, seguido por hongos de la clase Basidiomycetes. En D, se aisl A. versicolor, Curvularia lunata y Malbranchea
pulchella, en la misma proporcin. Conclusin: estos hongos hallados en las reas deterioradas de los libros de la
biblioteca, sugieren estar potencialmente involucrados en el deterioro del papel, bien sea por su capacidad de producir
ciertas enzimas o estableciendo una relacin simbitica con otros microorganismos.

Palabras clave: hongos, bibliotecas, libros enfermos.

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Aislamiento y susceptibilidad antifngica de especies de Candida obtenidas del

ambiente y personal que labora en la Unidad de Cuidados Intensivos, Hospital
Universitario de Coro Dr. Alfredo Van Grieken, Estado Falcn, Venezuela
Isolated and susceptibility antifungal of Candida species obtained from environment and workers in
the Intensive Care Units, University Hospital Dr. Alfredo Van Grieken, Falcn state, Venezuela

Sal Yotsabeth, Humbra Leyla, Hernndez Rosaura

Laboratorio de Micologa, Centro de Investigaciones Biomdicas. Universidad Nacional Experimental
Francisco de Miranda, Coro, edo. Falcn, Venezuela

Introduccin: Las infecciones nosocomiales por especies de Candida son causa importante de morbilidad y
mortalidad especialmente en pacientes crticos, siendo relevante establecer la fuente potencial de infeccin en
ambientes hospitalarios. El objetivo de este estudio fue aislar e identificar especies de Candida en equipos
mdicos, mobiliarios y manos del personal de una unidad de cuidados intensivos y evaluar su susceptibilidad
a fluconazol y voriconazol. Metodologa: Se obtuvieron muestras mediante hisopado con hisopo estril,
humedecido en caldo cerebro corazn con cloranfenicol; se realiz siembra inicial en agar cromognico para
Candida spp.. y ambos medios fueron incubados a 37C durante 48 horas; los caldos negativos fueron dejados
en incubacin hasta los 8 das y posteriormente fueron sembrados en agar cromognico e incubados en las
mismas condiciones anteriores. La identificacin se realiz mediante las caractersticas de crecimiento en
agar cromognico, produccin de clamidoconidias, hidrlisis de la urea y asimilacin de carbohidratos.
Resultados: La susceptibilidad a fluconazol y voriconazol fue evaluada mediante el mtodo de difusin del
disco (CLSI M44-A). De mobiliario y equipos mdicos se obtuvieron 26 aislados y de las manos del personal
11. C. parapsilosis fue la especie ms frecuente (54,1%) seguida de C. tropicalis (10,8%), C. famata (10,8%),
C. glabrata (2,7%), C. guilliermondii (2,7%); adems, se aislaron otras levaduras diferentes a Candida spp.
(18,9%). El 64,9% de los aislados fue sensible a fluconazol, 8,1% sensible dosis dependiente y 27%
resistente; mientras que 78,4% fue sensible a voriconazol, 2,7% mostr sensibilidad intermedia y 18,9%
result resistente. C. parapsilosis. Conclusin: se considera factor de riesgo potencial en la transmisin
horizontal de infeccin en pacientes hospitalizados y est relacionada con candidemias por el uso de catteres
y dispositivos endovenosos; esto sugiere que deben mejorarse las normas de higiene hospitalarias en el
ambiente y personal de salud.

Palabras clave: Candida spp., cuidados intensivos, voriconazol, fluconazol.

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Deglicosilacin qumica y enzimtica del exoantgeno de Histoplasma capsulatum para

mejorar la especificidad del diagnstico de histoplasmosis
Chemical and enzymatic deglycosylation of Histoplasma capsulatum exoantigen to improve the
specificity of diagnosis of histoplasmosis

Fernndez Kimberlya,b, Garca Johanaa,b, Alvarado Primaveraa

a
Laboratorio de Micologa, Instituto de Biomedicina. b Facultad de Medicina, Escuela de Bioanlisis.
Universidad Central de Venezuela

Introduccin: La Histoplasmosis es una micosis sistmica de distribucin mundial, causada por el hongo dimorfo
Histoplama capsulatum, se encuentra en suelos templados y hmedos con alto contenido de nitrgeno, particularmente
aquellos contaminados con deyecciones de aves y murcilagos. La enfermedad se adquiere por inhalacin de
microconidias de la fase micelial del hongo, afectando as a adultos, nios y animales. El diagnostico se basa en la
realizacin del examen directo, cultivo, estudios histoplatolgicos y pruebas serolgicas. El diagnstico requieren de un
personal capacitado para la observacin del microorganismo, por otra parte, el cultivo presenta baja sensibilidad y en
relacin a las pruebas serolgicas se han utilizado los antgenos H y M de 120 y 94kDa, encontrando una alta reactividad
cruzada con otros agentes micticos. El objetivo de este trabajo fue evaluar exoantgenos glicosilados y deglicosilados de
H. capsulatum. Metodologa: se utiliz el ensayo de ELISA indirecto y la deglicosilacin por mtodos qumicos
utilizando metaperiodato de sodio y mtodos enzimticos evaluando el kit de EDEGLY. El ensayo fue validado con
muestras de sueros de pacientes con histoplasmosis, sueros heterlogos y sueros de pacientes sanos como controles
negativos. Resultados: se obtuvo un punto de corte en ELISA utilizando el exoantgeno glicosilado de 0,333, con una
sensibilidad del 59%, especificidad del 100% y una reaccin cruzada con sueros de paracoccidioidomicosis de 64%. Para
el exoantgeno deglicosilado qumicamente se obtuvo un punto de corte de 0,302 en ELISA, con una sensibilidad de 66%
y 100% de especificidad, mostrando una disminucin de la reactividad cruzada con sueros de pacientes con
paracoccidioidomicosis del 4%. Actualmente, se evala el exoantgeno con el kit de EDEGLY para la deglicosilacin
enzimtica. Conclusin: Estos resultados confirman que al utilizar el ensayo de ELISA y el exoantgeno deglicosilado
qumicamente se logra un diagnostico sensible, especifico y rpido de la histoplasmosis.

Palabras clave: Histoplasma capsulatum, ELISA, Deglicosilacin,

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Determinacin de Malassezia en piel sana de nios y adolescentes con HIV/SIDA

Determination of Malassezia in healthy skin of children and adolescents with HIV / AIDS

Fernndez Colmenares, P.a Delmonte, M. L.a, Gonzlez de Morn, E.a, Robertz, Sa,
Bermdez, Y.a, Parody, N.a
a
Facultad de Medicina, Escuela de Bioanlisis, Ctedra de Micologa, La Universidad del Zulia
fer_priscila@hotmail.com

Introduccin. morbilidad y mortalidad de los pacientes infectados por

La colonizacin fngica de la piel est representada
por levaduras no lipoflicas y lipoflicas. Las especies
lipoflicas tienen una amplia distribucin en reas de la
piel con abundantes glndulas sebceas, (pecho, odos,
espalda, cara y cuero cabelludo). Esta densidad es alta
en individuos sanos a partir de la pubertad por el
incremento de la actividad de las glndulas sebceas y
decrece con la edad, debido a la reduccin en el nivel de
lpidos de la piel. Bajo la influencia de ciertos factores
estos organismos pueden volverse patgenos
ocasionar diversas enfermedades Los
predisponentes endgenos incluyen: la piel grasa,
hiperhidrosis, herencia, tratamiento
corticosteroides, mal nutricin e inmunodeficiencias.
Las especies de Malassezia estn relacionadas con
procesos sistmicos habindose aislado de peritonitis,
tejido pulmonar y, especialmente, en hemocultivo de
sujetos con catteres venosos centrales y sometidos a
alimentacin parenteral. Los grupos ms expuestos para
desarrollar una sepsis por Malassezia
principalmente los prematuros y lactante que reciben
alimentacin rica en lpidos a travs de un catter
venoso central; tambin se ha aislado ocasionalmente de
nios o adultos con las mismas caractersticas y
portadores de enfermedades subyacentes
(anemia aplsica, enfermedad de Crohn, trasplante de
medula sea, nutricin parenteral, etc.). Se ha reportado
que sujetos con condiciones predisponentes estas
levaduras pueden causar infecciones sistmicas, en
inmunocomprometidos pueden provocar sepsis. Las
infecciones oportunistas han sido la principal causa de
el virus de la inmunodeficiencia humana (VIH). Este es
un retrovirus humano con genoma ARN y el nico con
enzima transcriptasa en reversa, existiendo dos tipos:
HIV-1 y HIV-2. El que afecta mayormente a los
humanos es HIV-1. Resulta interesante realizar
investigaciones sobre el gnero Malassezia y sus
implicaciones en diversos procesos patolgicos. As
como tambin sobre su comportamiento como flora
normal de piel en una poblacin con un sistema
y inmunolgico deficiente como lo son los pacientes con
factores HIV/SIDA, esta enfermedad afecta a ms 65.000.000 de
personas en el mundo y cerca de 14.000 casos aparecen
con cada da. Es por ello que el presente trabajo se plantea
como objetivo determinar la colonizacin en piel sana
por especies del gnero Malassezia en nios y
adolescentes con VIH/SIDA.
Material y mtodos.
Se realiz un estudio a 80 nios y adolescentes
VIH/SIDA con piel sana en edades comprendidas entre
son 1 a 15 aos, los cuales asistan peridicamente a la
consulta de la fundacin INNOCENS del Hospital
Universitario de Maracaibo, Estado Zulia durante el
perodo Enero-Octubre 2011. Dicha institucin es una
organizacin no gubernamental sin fines de lucro creada
graves en Junio de 1994, dedicada a la prevencin de la
infeccin del VIH-SIDA y al tratamiento integral del
nio y de la madre que sufre dicha infeccin para lo
cual cuenta con recursos y programas especficos. Los
pacientes bajo estudio tenan un diagnostico confirmado
de infeccin por VIH-SIDA a travs de pruebas de
laboratorio, segn logaritmo de la organizacin mundial
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de la salud. Para la obtencin de las muestras se elabor
un informe de consentimiento basado en las normas
propuestas en la declaracin de Helsinki. El comit de
tica de la Fundacin INNOCENS del Hospital
Universitario de Maracaibo aprob el desarrollo de esta
investigacin. Todos los padres y representantes de los
nios seleccionados firmaron un informe de
consentimiento luego de explicarle el propsito del
trabajo. Los datos de inters fueron recolectados en una
ficha especfica por cada nio y adolescente, tomando
en cuenta aspectos farmacolgicos e higinicos. Las
muestras fueron tomadas mediante el mtodo de la
impronta con cinta adhesiva transparente, de cuero
cabelludo, pabelln auricular, pecho, espalda, muslo,
antebrazo, palma de la mano e inoculas en el medio con
base de goma Spondia dulcis e incubadas a 32C por 14
das. La identificacin de las especies se realiz
siguiendo las claves descritas por Guho y cols. Y el
test de difusin en tween propuesto por Guillot y
colaboradores, la prueba de la catalasa, y la utilizacin
de triptfano como fuente nica de nitrgeno. Los
resultados obtenidos en la presente investigacin fueron
analizados a travs del programa estadstico SPSS
versin 17, en donde se aplic un anlisis de tablas de
frecuencias absolutas. En la identificacin de las
diferencias estadsticas de las variables estudiadas se
realizaron tablas de contingencia y se efectuaron las
Pruebas de Chi cuadrado y el anlisis de correccin de
Spearman y de Pearson. Se tomo el 99.99% como
ndice de confiabilidad estadstico (p <0,0001).
Resultados y discusin.
El gnero Malassezia forma parte de la flora habitual
de la piel de los humanos [1,2], con capacidad para
provocar infecciones sistmicas en huspedes
inmunocomprometidos [1,3,4]. Diferentes
investigaciones [5,6] reportan una gran variabilidad en
cuanto a la frecuencia de colonizacin de la piel por
Malassezia en nios y adolescentes, con cifras que van
de 0,7% a 31%. En Espaa Martin [7] de un total de
150 muestras procesadas aisl un 15, 3% de especies de
Malassezia. Datos similares fueron obtenidos en este
trabajo en el cual un 28.75% de los individuos fueron
positivos de un total de 80 pacientes estudiados, en
contraste con el 87% de positividad encontrada por
Bergbrant y Broberg [8], Los tratamientos
antirretrovirales de gran actividad (TARGA) cuyo uso
comenz a difundirse a partir de 1996 han probado ser
eficaces para controlar la progresin de la enfermedad
producida por el VIH y prolongar la supervivencia tanto
en adultos como en nios [9]. En los ltimos aos se ha
puesto de manifiesto la aparicin de un sndrome
caracterizado por la distribucin anmala de la grasa
subcutnea y visceral en los pacientes con infeccin por
VIH de patogenia incierta hasta el momento, pero
probablemente relacionada con el tratamiento
antirretroviral [10]. Actualmente, no se dispone de una
definicin nicamente aceptada para este cuadro, lo que
dificulta su estudio. Se ha descrito una prevalencia muy
variable entre los distintos estudios (2%-84%),
calculndose que aproximadamente el 50% de los
pacientes tienen algn rasgo de lipodistrofia entre los 12
y 18 meses de tratamiento [11]. Se podra especular que
la alteracin de las grasa en los pacientes HIV/SIDA
podra estar influyendo en el bajo nmero de
aislamientos del gnero Malassezia en la poblacin
evaluada en este trabajo, ya que como se ha sealado
son levaduras obligatoriamente lipoflicas [12,13,14].
De 47 aislamientos obtenidos en esta investigacin
todos correspondieron a Malassezia sympodialis. En
revisiones publicada por Gueho [15] se seala que
Malassezia sympodialis parece ser la especie ms
comn en piel sana. Otros estudios [13,15] tienen la
misma orientacin indicando que la especie
primordialmente aislada en piel sana es M. sympodialis,
debido a que es nutricionalmente menos selectiva que
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otras especies, crece ms y con mayor rapidez y
muestra un mejor ndice de conservacin en Dixon a 31
C. Resultados que difieren con los hallados por
Rodrguez y cols. [16] en los cuales todos los aislados
identificados correspondieron a Malassezia furfur.
Leeming confirma en su estudio a Malassezia furfur
como el componente principal de la flora normal de
piel [17]. La poblacin evaluada se dividi en 4 grupos
etarios de 1 a 3 aos, de 4 a 7, de 8 a 11 y de 12 a 15,
destacndose el grupo de 4 a 7 aos por estar
constituido por un mayor nmero de pacientes y por
presentar ms aislamientos de M. sympodialis con un
total de 26 que correspondi al 55,3%, A pesar que en
la edad puberal se asla un alto porcentaje de
Malassezia debido a la elevada actividad de las
glndulas sebceas, los resultados obtenidos en esta
investigacin difieren, ya que en el grupo de 12 a 15
aos se obtuvieron solo 4 aislamientos (8,5%). Es
importante mencionar que este grupo etario estaba
conformado por un bajo nmero de pacientes.
Por otra parte, varios autores [1,13,18] han
publicado que no hay diferencias estadsticas
significativas de colonizacin por Malassezia entre el
sexo masculino y el femenino, datos que son semejantes
a los obtenidos en este estudio, en donde el sexo
masculino present 11 aislamientos 47,8% y el
femenino 12 un 52,2%. La correlacin entre las
especies de Malassezia, edad y sexo de los sujetos ha
sido observada con una baja recuperacin en infantes a
discrepancia de lo que ocurre en la pubertad, pero sin
diferencias entre mujeres y hombres [18]. Se ha
sealado que en individuos sanos, las especies de
Malassezia varan de acuerdo a la regin corporal
estudiada. En 1999, Crespo [19] llevo a cabo un estudio
el cual M. sympodialis fue la especie predominante en
piel sana a nivel de tronco y junto a M. globosa en la
regin facial en menor proporcin [7]. Hernndez en un
trabajo realizado a partir de escamas de piel del
conducto auditivo externo, observ que la especie ms
frecuente fue M. restricta seguida de M.globosa y M.
sympodialis (20). Los resultados obtenidos en la
presente investigacin sealan un predominio de
Malassezia sympodialis en pabelln auricular con 12
aislamiento (25, 5 %), seguido en forma descendiente
de pecho (21.3 %) espalda (19.1 %), cuero cabelludo
(14.9 %), muslo, palma de la mano y antebrazo con un
porcentaje de 6.4 % respectivamente.
Conclusiones.
La piel sana es una barrera contra agresiones
mecnicas, qumicas, toxicas, calor, frio, radiaciones
UV y microorganismos patgenos. La piel humana
normal se encuentra colonizada por mltiples
microorganismos que viven como saprfitos en la
superficie, en las fisuras, entre las escamas de estrato
corneo y dentro de los folculos pilosos, los cuales en
algunas ocasiones pueden volverse patgenos. La flora
cutnea est conformada por bacterias, hongos y
parsitos y se dividen en dos grandes grupos: la flora
residente y la flora transitoria. La piel es el rgano que
con mayor frecuencia se altera en la infeccin por el
VIH. Durante estos aos, de acuerdo con las
modificaciones en la evolucin de infeccin, se ha
conocido nuevas enfermedades y presentaciones
atpicas de dermatosis clsicas. El gnero Malassezia es
un tema controversial y con resultados tan dispares en la
literatura que nos lleva a formularnos preguntas como:
Cul es el papel real que juegan las diferentes especies
de Malassezia como factores gatillantes o coadyuvantes
en la patologa dermatolgica?, Hay especies ms
patgenas que otras?, Existen realmente efectos
adversos del tratamiento antirretroviral que afectan la
colonizacin por Malassezia? Establecindose la
necesidad de seguir realizando nuevas investigaciones
que permitan aclaran estas y otras interrogantes.
 Revista de la Sociedad Venezolana de Microbiologa 2013; 33: suplemento 1 pp
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X Congreso Venezolano de Microbiologa Ada Martnez de Gallardo
Palabras clave: Malassezia, HIV, SIDA, nios,
adolescentes.
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157-70.
18. Asja Prohic. Malassezia yeasts as commensals on
human skin. Departament of dermatology sarajero
university clinica center.
19. Gillian M. The lipophilic yeasts: state of the art
and prospects. Med Mycol 2000; 1: 9-16.
20. Hernndez F, Mndez L, Bazar E, Arvalo A,
Valera A, Lpez R. Especies de Malassezia
asociadas a diversas dermatosis y a piel sana en
poblacin Mexicana
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Micoteca del Instituto Nacional de Higiene Rafael Rangel: 58 aos preservando la

biodiversidad fngica de inters mdico en Venezuela
Mycology library of the Instituto Nacional de Higiene "Rafael Rangel": 58 years, preserving
biodiversity of medically important fungi in Venezuela.

Panizo Mara Mercedesa, Reviakina Veraa, Dolande Maribela, Ferrara Giuseppea, Garca Natalya,
Alarcn Vctora, Cordero Gladysb
a
Departamento de Micologa. b Gerencia de Docencia e Investigacin.
Instituto Nacional de Higiene Rafael Rangel. Caracas, Repblica Bolivariana de Venezuela.

La Micoteca del Instituto Nacional de Higiene Rafael Rangel (INHRR), fue creada en el ao 1955, como una necesidad
para el desarrollo de la Seccin de Micologa, fundada dos aos antes. Es la coleccin de hongos autctonos ms grande y
representativa del pas, ya que conserva cepas fngicas de inters mdico, epidemiolgico, industrial e histrico. Est
localizada en el Departamento de Micologa y desde el ao 2003, forma parte de la Coleccin de Cultivos de Hongos,
Virus y Lneas Celulares del INHRR. Con el apoyo del Ministerio de Ciencia y Tecnologa (MCT), a travs del Fondo
Nacional de Ciencia y Tecnologa (FONACIT), y en acuerdo suscrito con el Centro Venezolano de Colecciones de
Microorganismos (CVCM), se cre el primer nodo de servicio, denominado INHRR-CVCM, responsable de la
preservacin, manipulacin y distribucin de virus animales, hongos, levaduras y cultivos celulares preservados en sus
colecciones, con independencia financiera y funcional. Los hongos se hallan preservados por duplicado bajo los mtodos
de agua por Castellani y aceite mineral, lo que permite mantener prcticamente dos colecciones al mismo tiempo,
asegurando as su permanencia. Cuenta con aproximadamente 2.500 cepas pertenecientes a 68 gneros y 135 especies de
hongos levaduriformes, filamentosos y actinomicetos. Posee un rea totalmente equipada, procesos de preservacin y
mantenimiento optimizados, base de datos semi-automatizada, personal calificado y est en continuo crecimiento, ya que
est ubicada en un centro de referencia nacional en diagnstico micolgico. La conservacin de hongos microscpicos es
fundamental, debido a su importancia en el funcionamiento de los ecosistemas y a su impacto en la vida del hombre. Esta
Micoteca garantiza la preservacin ex situ de la biodiversidad fngica; sus caractersticas la consolidan como una unidad
cnsona con las exigencias de los mbitos cientfico, tecnolgico y docente, para el desarrollo de investigaciones
cientficas, particularmente en el rea de medicina.

Palabras clave: Micoteca, coleccin de cultivos, biodiversidad, preservacin ex situ, hongos.

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Susceptibilidad in vitro a 5 antifngicos de aislamientos del Complejo Fusarium solani

provenientes de lceras corneales
In vitro susceptibility to five antifungal agents of Fusarium solani species complex isolates from
corneal ulcers

Duarte Andrenaa,b, Panizo Mara Mercedesb, Ferrara Giuseppeb,c, Lage Lisetd, Rondn Annye,
Useche Andrenaf, Infante Javierg, Reviakina Verab, Dolande Maribelb,h
a
Instituto de Medicina Tropical, Universidad Central de Venezuela, Caracas. b Departamento de Micologa,
Instituto Nacional de Higiene Rafael Rangel; Caracas. c Clnica Loira, Caracas. d Seccin de Micologa,
Servicio Autnomo Instituto de Biomedicina, Ministerio del Poder Popular para la Salud, Caracas. e Seccin
de Micologa, Hospital Universitario de Caracas, Caracas. f Hospital Militar Coronel Elbano Paredes Vivas,
Maracay, estado Aragua. g Sanitas Venezuela, Caracas. h Clnica Santa Sofa, Caracas.
Repblica Bolivariana de Venezuela.

Introduccin: El complejo Fusarium solani (CFS) se encuentra distribuido abundantemente en la naturaleza. Causa un
amplio espectro de infecciones en los humanos y se caracteriza por presentar una escasa actividad frente a los
antifngicos. El objetivo de este trabajo fue determinar la susceptibilidad in vitro a 5 antifngicos en aislamientos del CFS
provenientes de lceras corneales. Metodologa: Se utilizaron 30 aislamientos clnicos de este complejo, preservados en
la Micoteca del Departamento de Micologa del Instituto Nacional de Higiene Rafael Rangel (INHRR) y se les
determin la Concentracin Mnima Inhibitoria (CMI) por la tcnica de microdilucin en caldo, descrita en el documento
M38-A2 del CLSI (Clinical and Laboratory Standards Institute), con modificaciones en el procedimiento de preparacin
del inculo, el cual se realiz por densitometra. Los antifngicos utilizados fueron anfotericina B (AB), itraconazol (IZ),
posaconazol (POS), voriconazol (VOR) y fluconazol (FZ). Resultados y Discusin: Todos los aislamientos del CFS
exhibieron elevadas CMI frente a los antifngicos probados, siendo VZ (rango 1 - >16 g/mL) y AB (rango 2 - >16
g/mL) los que presentaron mejor actividad, con respecto a IZ (100% de los aislamientos CMI >16 g/mL), POS (96,7%
aislamientos con CMI >16 g/mL) y FLU (100% de los aislamientos con CMI >128 g/mL); estos resultados fueron
similares a los reportados a nivel mundial para este complejo. Conclusiones: Este estudio aporta informacin importante
sobre el comportamiento del CFS frente a los antifngicos de uso comn en la prctica clnica por primera vez en
Venezuela. Es imprescindible conocer la actividad de estas drogas para tomar decisiones y orientar una conducta
teraputica adecuada. La realizacin de las pruebas de susceptibilidad, utilizando el mtodo M38-A2, es muy laboriosa
para ser aplicada en la prctica diaria de laboratorios de microbiologa. Se recomienda su uso en laboratorios de
referencia, con fines de investigacin y/o para la realizacin de estudios epidemiolgicos

Palabras clave: Complejo Fusarium solani, pruebas de susceptibilidad in vitro, antifngicos, documento M38-A2
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Aislamiento y susceptibilidad a fluconazol y voriconazol de Candida spp. obtenidas de

pacientes con micosis superficiales evaluados en el Laboratorio de Micologa, Centro
de Investigaciones Biomdicas, Universidad Nacional Experimental Francisco de
Miranda, Coro, estado Falcn, Venezuela
Isolation and susceptibility to fluconazole and voriconazole of Candida spp. by patients with
superficial mycosis evaluated by the Center of Biomedical Research at the Laboratory of Mycology
of the Francisco de Miranda University in Coro, state of Falcn, Venezuela

Sal Garca Yotsabeth, Humbra de Heyliger Leylaa, Hernndez Valles Rosaura.

a
Universidad Nacional Experimental Francisco de Miranda.

Introduccin: En los ltimos aos se ha reportado un incremento notable en el aislamiento de especies de Candida
diferentes a C. albicans en muestras de pacientes con micosis superficiales, observndose una mayor resistencia al
tratamiento con los azoles. La investigacin planteo como objetivo determinar la frecuencia y susceptibilidad antifngica
in vitro de especies de Candida causantes de micosis superficiales. Metodologa: Se evaluaron 477 pacientes durante 18
meses. Se recolectaron muestras de descamaciones de piel y detritus de uas mediante raspado con bistur estril; las
muestras de mucosa, se tomaron con hisopos estriles. Se realiz examen microscpico directo con KOH al 40%
(muestras de piel y ua) y con coloracin Gram y Giemsa (muestras de mucosa); la visualizacin microscpica de
levaduras se consider criterio de positividad. Las muestras fueron cultivadas en agar lactrimel a temperatura ambiente;
luego, se realiz subcultivo en agar cromognico para Candida spp. suplementado con cloranfenicol e incubado a 37C
durante 48 horas. Los aislados fueron identificados mediante las caractersticas macroscpicas de crecimiento en agar
cromognico y por mtodos convencionales. La susceptibilidad a fluconazol y voriconazol se evalu por el mtodo de
difusin del disco (M44-A, CLSI). Resultados: En 3,8% (n= 18) de los pacientes se aisl Candida spp. 88,8% (n= 16) en
muestras de ua y 11,1% de regin inguinal (n= 2). C. parapsilosis fue la especie ms frecuente (44,4%), seguida de C.
tropicalis (33,3%) y C. albicans (11,1%). El agar cromognico permiti detectar infecciones mixtas en dos pacientes con
onicomicosis: C. krusei y C. parapsilosis en un caso y C. tropicalis ms C. parapsilosis en el otro. El 88,9% de los
aislados fue susceptible a fluconazol y voriconazol sugiriendo un patrn de sensibilidad aceptable frente a estos
antifngicos. Conclusin: El uso rutinario del agar cromognico permite la deteccin de infecciones mixtas por especies
de Candida en especial aquellas que muestran resistencia intrnsica a los azoles, lo cual permite instaurar una terapia
antifngica adecuada y eficaz en el menor tiempo posible. La susceptibilidad a fluconazol y voriconazol sugiere el uso de
estos en la terapia antifngica para el tratamiento de micosis superficiales causadas por especies de Candida.

Palabras clave: Micosis superficiales, Candida spp, susceptibilidad, fluconazol, voriconazol.

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Aeromicologa de un ambiente climatizado en la Universidad del Zulia

Aeromycology in an environment air-conditioned at the University of Zulia

Escalona Villegas Wilmarya*, Silva Alvarado Ricardo Alonsoa,b, Daz Laugenyc, Yegres Jos Franciscob,
Navas Yamarte Patriciab, Oberto Perdign Laire, Montiel Marynesa.
a
Unidad de Investigaciones en Microbiologa Ambiental, La Universidad del Zulia; b Laboratorio de
Investigacin y Apoyo Docente Santa Ana, Universidad Nacional Experimental Francisco de Miranda,
c
Laboratorio de Microorganismos fotosintticos, La Universidad del Zulia.

Introduccin: La calidad de aire en ambientes climatizados es influenciada por partculas suspendidas en la atmsfera
(polvo, granos de polen, y actividad microbiana de bacterias y hongos), siendo estas ltimas dependientes de la existencia
de sustancias orgnicas. El objetivo de esta investigacin se bas en evaluar la Aeromicobiota bacteriana y mictica
conjuntamente con los factores fisicoqumicos (temperatura y humedad relativa) en un ambiente climatizado en La
Universidad del Zulia. Metodologa: La temperatura y humedad relativa se monitorearon con un termohigrmetro
(Boeco/Alemania), y la cuantificacin micolgica se realiz por la tcnica gravimtrica propuesta por Omeleansky y la
tcnica de impactacin con un equipo HiAir Air Sampler System (Himedia, India), en tanto que la cuantificacin
bacteriana, se realiz bajo el mismo protocolo. Las placas y tiras se trasladaron al laboratorio, sometindolas a periodos de
incubacin de 25C por cinco das (cuantificacin de hongos) y 35+/- 2C (cuantificacin bacteriana). Resultados: Los
valores de temperatura y humedad relativa oscilaron entre 22-27C y 42-46%, respectivamente. Se cuantific por el
mtodo gravimtrico una carga bacteriana con un valor menor a 2000 UFC/m3 ubicndose en un nivel alto de acuerdo al
estndar Isiaq Task Group TG 42. En la cuantificacin de hongos por el mtodo gravimtrico el valor fue menor a 500
UFC/m3 y por el mtodo de impactacin el valor cuantificable fue menor a 2000 UFC/m3 considerando intermedio y alto
de acuerdo al promedio establecido por la misma normativa. En esta investigacin la carga bacteriana fue mayor en
comparacin con la carga fngica, no obstante estos dos parmetros microbiolgicos se ubicaron en un nivel alto.
Conclusin: Se hace necesario evaluar los agentes fngicos de predominancia, as como regular la concentracin fngica
y bacteriana, ya que estos agentes en altas concentraciones pueden contribuir al detrimento del material impreso, paredes
y artculos de madera, adems de considerarse un riesgo de salud ocupacional.

Palabras clave: calidad, biodeterioro, Aeromicobiota, gravimtrica, agentes fngicos..

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Agentes Fngicos predominantes en espacios cerrados. Problema de importancia laboral

Indoors predominant Fungal Agents. Labor major problem

Escalona Villegas Wilmarya*, Silva Alvarado Ricardo Alonso a,b, Daz Laugenyc, Yegres Jos Francisco b,
Navas Yamarte Patriciab, Oberto Perdign Lairet, Montiel Marynesa.
a
Unidad de Investigaciones en Microbiologa Ambiental, La Universidad del Zulia; b Laboratorio de
Investigacin y Apoyo Docente Santa Ana, Universidad Nacional Experimental Francisco de Miranda,
c
Laboratorio de Microorganismos fotosintticos, La Universidad del Zulia.

Introduccin: La calidad de aire sufre modificaciones en relacin a los factores fisicoqumicos (temperatura y humedad
relativa), adems de la existencia de nutrientes bsicos que en conjunto permiten el desarrollo y reproduccin de hongos,
considerndose un problema de salud pblica debido a que un 80% de las partculas suspendidas en el aire corresponde a
esporas fngicas. El objetivo se bas en identificar agentes fngicos predominantes en espacios cerrados. Metodologa:
Se midi la temperatura y humedad relativa con un termohigrmetro y los agentes fngicos se aislaron por la tcnica
gravimtrica y de impactacin. Se evaluaron las caractersticas macroscpicas de las colonias en anverso y reverso y
finalmente se mont una lmina por medio de la tcnica de cinta adhesiva en el caso de hongos miceliales y un frotis con
tincin simple para las levaduras. Resultados: Se obtuvieron valores de temperatura y humedad relativa con un valor
promedio de 25C y 43,6%. Los hongos miceliales correspondieron a Aspergillus spp. (66,0%), seguido en forma
descendente por Fusarium spp. (14,7%), Rhizopus spp. (8,8%), Paecilomyces (8,1%) y Penicillium spp. (2,2%). Entre
las levaduras, los gneros encontrados fueron Candida spp. (70,7%), Rhodotorula spp. (20,7%) y Tricosporom spp.
(8,5%). Se identificaron diversos gneros fngicos siendo Aspergillus spp. el gnero ms predominante con un 66,0% en
los hongos miceliales y Candida spp/ con 70,7% en las levaduras. Conclusiones: Estos gneros han sido descritos como
patgenos alergnicos para el ser humano, los cuales al interactuar con el hospedador generan daos asociados al tracto
respiratorio, conjuntiva ocular y tejido drmico, considerndose que los mismos al estar en gran concentracin en
espacios cerrados representan un riesgo a la salud publica ocupacional.

Palabras clave: calidad, agentes fngicos, salud pblica, impactacin, alergnicos.

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Anlisis de la composicin de la pared celular de Sporothrix schenckii

y Sporothrix brasiliensis
Cell wall composition analysis of Sporothrix schenckii and Sporothrix brasiliensis

Barreto Laura, Villalobos-Duno Hctor y Nio-Vega Gustavo

Instituto Venezolano de Investigaciones Cientficas, Centro de Microbiologa y Biologa Celular,
Laboratorio de Micologa. Apartado 20632, Caracas 1020A, Venezuela.
gnino@ivic.gob.ve

Introduccin: Sporothrix spp. es el agente etiolgico de la esporotricosis, micosis endmica subcutnea cuya prevalencia
ha aumentado durante los ltimos aos principalmente en pacientes inmunocomprometidos. Es un hongo dimrfico, cuyas
fases micelial y levaduriforme se pueden encontrar in vitro cultivndolo a 25C y 37C respectivamente o variando el
medio de cultivo. Factores como la aireacin, pH y fuente de carbono pueden tambin influenciar en la transicin
morfolgica. Este hongo se encuentra distribuido en la naturaleza asociado principalmente a materia orgnica. Hallazgos
previos han demostrado que la pared celular de S. schenckii est conformada por glucanes lcali-solubles e insolubles
encontrados en ambas fases morfolgicas del hongo. Los glucanes lcali-solubles de la levadura de S. schenckii estn
unidos por enlaces -(1,3) (44%), -(1,6) (28%) y -(1,4) (28%), mientras que los glucanes insolubles estn conformados
por los enlaces -(1,3) (66%), -(1,6) (29%) y -(1,4) (5%). El objetivo de este trabajo es analizar las posibles variaciones
en la composicin qumica de la pared celular entre cepas virulentas y no virulentas de Sporothrix schenckii y Sporothrix
brasiliensis, Metodologa: la composicin y estructura de los polisacridos de las fracciones de la pared celular fueron
obtenidas a travs de la separacin alcalina y empleando ensayos bioqumicos, RMN de 13C y 1H as como anlisis
infrarrojos. Igualmente se presentarn los resultados de la bsqueda de genes involucrados en la sntesis y degradacin de
la pared celular. Resultados: Datos bioqumicos e in silico concuerdan con la presencia de protenas relacionadas con el
metabolismo de los glucanes -(1,3), -(1,4) y -(1,6), No se encontraron genes relacionados con la sntesis y degradacin
de -1,3-glucan. Conclusin: Se observ la presencia bioqumica y estructural de la quitina, sin embargo, a pesar del bajo
contenido de quitina en la pared celular, se han identificado un gran nmero de quitina sintasas y quitinasas

Palabras clave: Sporothrix, Pared Celular, glucanes.

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Caracterizacin de aislamientos del complejo Sporothrix spp. provenientes de

diferentes regiones de Venezuela
Characterization of Venezuelan fungal isolates related to sporotrichosis

Len-Navarro Ia, Camacho Ea, Mendoza Mb y Nio-Vega Ga

a
Centro de Microbiologa y Biologa Celular, Instituto Venezolano de Investigaciones
Cientficas, Caracas, Venezuela.
b
Laboratorio de Micologa, Instituto de Biomedicina, Caracas, Venezuela

Introduccin: La esporotricosis es una micosis que involucra los tejidos cutneos y subcutneos, a menudo con
asociacin de los ndulos linfticos y cuyos agentes etiolgicos forman parte del complejo Sporothrix. 5 especies de este
complejo son de importancia clnica: S. brasiliensis, S. globosa, S. luriei, S. mexicana y S. schenckii sensu stricto. La
enfermedad afecta a personas de todas las edades, gneros y est supeditada a la frecuencia de los contactos con el hongo.
Hasta el 2006 se haba considerado a S. schenckii como el nico agente etiolgico de la enfermedad. Estudios de filogenia
molecular demostraron la existencia de diferentes linajes genticos dentro de sta especie y establecieron las
caractersticas fenotpicas claves para la diferenciacin entre las especies del complejo Sporothrix. Metodologa: A 30
aislamientos de la micoteca del Laboratorio de Micologa del Instituto de Biomedicina, Caracas, se les determin el
aspecto macro y microscpico mediante evaluacin visual directa de los cultivos y cultivo en lmina segn el mtodo de
Riddell, respectivamente. Su termotolerancia se evalu incubando cada aislamiento en placas con medio Papa dextrosa a
23, 30C y 37C. La capacidad de asimilar ciertos carbohidratos (glucosa, sacarosa y rafinosa), se llev a cabo inoculando
cada aislamiento en pozos de microplacas. Y secuencias parciales amplificadas del gen de calmodulina fueron analizadas
con el programa MEGA 5 para determinar la presencia de los agentes responsables de esta micosis en Venezuela.
Resultados: Se identificaron 20 aislamientos como Sporothrix schenckii , 9 Sporothrix globosa y 1 Ophiostoma
stenoceras. As mismo, la presencia de Sporothrix globosa se determin en 7 estados del pas mientras que S. schenckii se
encontr, hasta el momento, en 5 estados venezolanos. Conclusin: Tal informacin es crtica al momento de suministrar
la terapias ms efectiva, puesto que se ha reportado que las especies de este complejo presentan diferentes susceptibilidad
a las drogas antifngicas

Palabras clave: Complejo Sporothrix, Ophiostoma stenoceras, esporotricosis, termotolerancia, asimilacin de

carbohidratos, anlisis filogentico, Venezuela.
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Estudio de la susceptibilidad de Sporothrix schenckii y Sporothrix brasiliensis, contra

compuestos fotosensibilizadores.
Susceptibility study of Sporothrix schenckii and Sporothrix brasiliensis against photosensitizer
compounds

Villalobos-Duno Hctora, Nio-Vega Gustavoa y Zoltan Tamarab

a InstitutoVenezolano de Investigaciones Cientficas, Centro de Microbiologa y Biologa Celular,
Laboratorio de Micologa. Apartado 20632, Caracas 1020A, Venezuela.
b
Instituto Venezolano de Investigaciones Cientficas, Centro de Qumica, Laboratorio de Fotoqumica.
Apartado 20632, Caracas 1020A, Venezuela

Introduccin: La terapia fotodinmica (TFD) es un enfoque poco invasivo, en el que un compuesto fotosensibilizador
(FS) se activa por la exposicin a la luz visible. La activacin del FS resulta en produccin de especies reactivas de
oxgeno y otras molculas reactivas, cuya presencia en el sitio deseado conduce al dao de las clulas blanco. Sporothrix
brasiliensis y Sporothrix schenckii son hongos patgenos de humanos capaces de causar infecciones subcutneas
(esporotricosis) causando heridas que podran degenerar completamente los miembros, e incluso ser fatal, especialmente
en pacientes inmunosuprimidos. Estudios recientes demuestran que no slo el nmero de casos reportados, sino tambin la
incidencia de las formas clnicas ms severas o atpica de la enfermedad estn aumentando. Metodologa: En este trabajo,
probamos la sensibilidad in vitro de S. brasiliensis y S. schenckii al tetrasulfonato de fenil porfirina, en ausencia de centro
de metalico (TPPS4) o cargados con zinc (TPPS4Zn), empleando el estandar de McFarland y conteo de UFC para estimar
las condiciones optimas de exposicin. Resultados: La asociacin de TPPS4 y TPPS4Zn a luz durante 10 min. dio lugar a
una disminucin de supervivencia dosis dependiente, para todas las cepas ensayadas. La eliminacin completa de todas las
cepas se logr con 50,0 mg/l de ambos FS. La exposicin a la luz o FS solos no alter la viabilidad de las cepas
evaluadas. La reduccin del Log10(UFC) para todas las cepas ante los FS fue ms drstica en presencia de TPPS 4,
causando la disminucin de 99,9999% UFC para todas las cepas en 25 mg/l, mientras que TTPS 4Zn slo alcanz este
valor para S. schenckii 4821 y 4822 (cepas no virulentas). Conclusion: La alta susceptibilidad mostrada por todas las
cepas probadas, principalmente contra TPPS4 nos llevan a proponerlo como agente antifngico alterntivo, en contra de
estos hongos de importancia mdica en Amrica Latina.

Palabras clave: Terapia Fotodinmica, Sporothrix, fotosensibilizador.

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Susceptibilidad a los Antifngicos de aislados clnicos del Complejo Candida

haemulonii en pacientes de un Hospital Universitario, Maracaibo, Venezuela
Antifungal Susceptibility of Candida haemulonii Complex Clinical Isolated in a University Hospital
Patient, Maracaibo, Venezuela

Perozo-Mena Aa,b, Calvo Bc, Bonilla Xb, Hernndez Mc.

a
Prctica Profesional de Bacteriologa. Escuela de Bioanlisis. La Universidad del Zulia.
b
Centro de Referencia Bacteriolgica SAHUM. c Servicio de Infectologia SAHUM.

Introduccin: Candida haemulonii (Van Uden & Kolspinski, 1962). Es denominado complejo C. haemulonii desde 1993.
Fue identificado por primera vez en muestras clnicas del Servicio Autnomo Hospital Universitario de Maracaibo
(SAHUM), en Noviembre 2011, observndose rpido incremento de su frecuencia, por lo que se decide estudiar la
susceptibilidad de este microorganismo a los agentes antifngicos. Metodologa: La susceptibilidad a Anfotericina B, 5-
Fluorocitosina, Fluconazol y Voriconazol, se realiz mediante el sistema VITEK 2; mientras que para Caspofungina se
utiliz el mtodo de E-test; a 371 cepas todas aisladas de pacientes internados en el SAHUM, entre Noviembre 2011 y
Junio 2013. Resultados: Los ms altos porcentajes de susceptibilidad correspondieron a 5-Fluorocitosina (99,69%) y
Caspofungina (95,41%); Voriconazol presento un 19,76% de resistencia mientras que los niveles ms altos de resistencia
fueron para Anfotericina B y Fluconazol, 91,92% y 89,52%, respectivamente. Conclusin: Complejo C. haemulonii se
debe considerar como un patgeno importante dentro de nuestra institucin, especialmente por el patrn de
multiresistencia que presenta, lo que limita ampliamente sus opciones teraputicas.

Palabras clave: C. haemulonii, susceptibilidad, antifngicos, Venezuela

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Perfil de susceptibilidad in vitro de aislados clnicos de Microsporum canis a

griseofulvina, itraconazol, voriconazol, terbinafina y anfotericina B
Susceptibility of Microsporum canis clinical isolated to griseofulvin, itraconazole, voriconazole,
amphotericin B and terbinafine

Useche Andrenaa, Ferrara Giuseppea, Panizo Mara Mercedesa, Solano Mara Alejandrab, Ruz Angelab,
Duarte Andrenaa, Infante Javiera, Alarcn Vctora, Garca Natalya, Dolande Maribela
a
Departamento de Micologa. Instituto Nacional de Higiene Rafael Rangel
b
Servicio de Dermatologa. Hospital Universitario de Caracas

Introduccin: Las dermatofitosis son las micosis superficiales ms frecuentes en el humano y son causados por hongos
de los gneros: Trichophyton, Microsporum y Epidermophyton. En Venezuela son el principal motivo de consulta
dermatolgica, constituyendo un verdadero problema de salud pblica por su alta morbilidad. El objetivo del estudio fue
conocer el perfil de susceptibilidad in vitro de los aislados clnicos de Microsporum canis de pacientes peditricos que
asisten a la Consulta de Micologa del Servicio de Dermatologa del Hospital Universitario de Caracas. Metodologa: A
los aislamientos, se les determino la resistencia a cinco antifngicos, segn el mtodo descrito en el documento M38-A2
del Clinical and Laboratory Standards Institute (CLSI). Resultados: De un total de 50 aislados de Microsporum canis, el
rango de los valores de concentracin mnima inhibitoria (CMI) en ug/mL para Griseofulvina, Itraconazol, Voriconazol,
Terbinafina y Anfotericina B fueron respectivamente: <0,03 - 0,125; <0,0019 - 0,0039; <0,0019 - 0,0078; <0,0019 -
0,0156 y 0,125 - 0,5 g/ml, observando que el Voriconazol fue el antifngico ms activo, aunque Itraconazol,
Griseofulvina y Terbinafina tambin presentaron una buena actividad. Por mtodo visual se determinaron los puntos de
corte epidemiolgicos (PCE) para los 5 antifungicos obtenindose los siguientes datos: Griseofulvina 0,06 ug/mL,
Itraconazol 0,039 ug/mL, Voriconazol 0,039 ug/mL, Terbinafina 0,0156 g/ml y Anfotericina B 0,5 ug/mL, estos
datos determinaron la susceptibilidad de los aislados a todos los antifngicos en estudio, demostrando una alta potencia in
vitro para el tratamiento de Tinea capitis.

Palabras clave: Dermatofitosis, Microsporum canis, Tinea capitis, Susceptibilidad, Antifungicos y CMI
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Prevalencia y distribucin de candidemia aisladas en el laboratorio clnico

Csar Snchez-Font
Prevalence and distribution of candidemia isolated in the clinical laboratory Csar Snchez-Font

Bonilla Olga, Gonzlez Rossmary, Morao Adriana, Pinto Andrealicia, Borrero Lizeth, Thomas Carla,
Snchez Csar Oscar a
a Coordinacin del rea de Bacteriologa y Micologa Laboratorio Snchez- Font . Valencia, Venezuela

*Correspondencia autor principal

Email:olgakrolina28@hotmail.com

Introduccin. sistema National Nososcomial Infections Surveillance

Candida spp. es un hongo levaduriforme que habita
en el 50% de la poblacin sana formando parte de la
microbiota habitual en el tracto respiratorio superior, en
el tubo digestivo, tracto genital y en piel. Este gnero
posee ms de cien especies siendo C. albicans, C.
tropicalis, C. Krusei, C. glabrata, C. parapsilosis, las
de mayor aislamiento. Sin embargo; todas las especies
pueden causar el mismo tipo de enfermedad, lo cual
depender del estado inmune del paciente [1]. Los
tratamientos con antibiticos de amplio espectro, los
frmacos inmunosupresores, las inmunodeficiencias
primarias o adquiridas, el empleo de catteres
intravenosos, la alimentacin parenteral, la permanencia
en el rea de hospitalizacin y Unidades de Cuidados
Intensivos (UCI), entre otras causas, constituyen los
principales factores predisponentes en el desarrollo de
una infeccin fngica. [2]. La candidemia representa
uno de los factores ms importantes en el incremento de
infecciones intrahospitalarias en la actualidad, las cuales
pueden causar la muerte al paciente [3]. El aumento de
las infecciones fngicas invasoras y nosocomiales se ha
observado en las ltimas tres dcadas a nivel mundial.
Un ejemplo de ello se observ en la dcada de los 80,
donde la incidencia de candidemia aument en Estados
Unidos cuyo porcentaje de todas las infecciones
sanguneas causada por hongos fue 5,4% para esa
fecha y en 1990 se encontr un 9,9% de acuerdo a los
datos obtenidos por los hospitales que participaron en el
(NNIS) [3,4,5].
En Venezuela en un estudio realizado desde 1984
hasta el 2010 en varios centros ubicados en los
diferentes estados del pas, coloc a la candidiasis
sistmica como la tercera micosis profunda
representando el 17,4% de las micosis diagnosticadas
durante este perodo. Desde el ao 2006, el reporte de
candidiasis como micosis oportunista ha venido
incrementndose. Este aumento ha estimulado el
estudio tanto de la identificacin del agente causante de
la infeccin as como el estudio de la susceptibilidad
hacia a los antifngicos [6]. La implementacin del
tratamiento antifngico adecuado dentro de las 12 a 24
horas de obtener un hemocultivo positivo es de vital
importancia, ya que permitira disminuir en forma
significativa la mortalidad asociada a la candidemia. El
desarrollo de nuevos antifngicos y su uso clnico, trajo
como consecuencia cambios epidemiolgicos, como la
aparicin de cepas con resistencia secundaria y la
sustitucin de especies sensibles por otras con
resistencia intrnseca, esto ltimo relacionado con la
utilizacin de los triazoles, como itraconazol y
fluconazol, en terapia emprica, y profilaxis en
pacientes inmunocomprometidos. Se han estandarizado
varias tcnicas para la evaluacin de la susceptibilidad
de Candida hacia los antifngicos, con el fin de detectar
la resistencia in vitro y correlacionarla con la clnica del
paciente. La identificacin adecuada de las levaduras
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hasta el nivel de especie, en conjunto con las pruebas de morfologa macroscpica y microscpica en agar harina
susceptibilidad, contribuye a la instauracin del de maz (Difco, EE.UU), se realizaron otras pruebas
tratamiento adecuado y eficaz para el paciente. Para ello como produccin de tubo germinal en suero,
se utilizan en los laboratorios de Micologa clnica los sensibilidad a cicloheximida en agar Mycosel,
mtodos de referencia tanto del Clinical and Laboratory termotolerancia, as como identificacin por el sistema
Standards Institute (CLSI) y el European Commitee for automatizado Vitek 2 YST (bioMrieux, Francia).
Antimcrobial Susceptibility Testing (EUCAST) que Para las pruebas de susceptibilidad se utilizaron tiras
permiten conocer la Concentracin inhibitoria mnima E-TEST (bioMrieux, Francia) para fluconazol y
(CIM) frente a las diferentes especies de Candida, lo voriconazol y tarjetas para sensibilidad YS01
cual da al clnico la orientacin hacia la mejor opcin (bioMrieux, Francia) equipo automatizado. Siguiendo
teraputica [2,7,8]. En el laboratorio Csar Snchez- las recomendaciones del fabricante en cada una de las
Font se reciben no slo muestras de pacientes que se metodologas utilizadas. Como control de calidad se
encuentra en una clnica con todas las especialidades, utilizaron Candida parapsilosis ATCC 22019 y
hospitalizacin y Unidades de Cuidados Intensivos Candida krusei ATCC 6258.
tanto para adulto como para nios y neonatos, sino que Cada aislamiento fue interpretado como susceptible (S),
tambin se procesan hemocultivos que proceden de susceptible dosis dependiente (SDD), intermedio (I) o
otras instituciones: oncolgicas, de trasplantes as resistente (R), siguiendo los nuevos puntos de corte
como de hospitales de cuarto nivel. Por lo tanto, el clnicos y puntos de cortes epidemiolgicos para azoles
objetivo de este estudio es conocer la prevalencia y establecidos recientemente por la CLSI. [8,9].
distribucin de Candida spp. aislada en este tipo de
muestra. Tabla 1. Interpretacion de las Concentraciones Minimas
Inhibitorias (CMI)
CMI g/mL
Material y mtodos.
Especie de Fluconazol Voriconazol
Se revisaron retrospectivamente los 1554 registros
Candida S S SDD R S SDD R
de pacientes hospitalizados y ambulatorios que se le
solicit estudio de hemocultivo durante el perodo enero C. albicans 2 4 4 0,125 0,25-0,50 1

2012 hasta mayo 2013. Las muestras se depositaron en C. parapsilosis 2 4 8 0,125 0,25-0,50 1

frascos de hemocultivos (BacT/ALERT FN, FA, PF C. tropicalis 2 4 8 0,125 0,25-0,50 1

dependiendo de la edad del paciente) las cuales se C. glabrata - 32 64 NPCE*

S I R
encubaron por siete das en un equipo automatizado
C. krusei RN* 0,50 1 2
(BacT/ ALERT 3D) as como hemocultivos (BIO)
NPCE*: No existe actualmente punto de corte para este
manuales que se encubaron por siete das en estufa de microorganismo. RN*: Resistencia natural

352 C con pases diarios a placas de medios de cultivo

Resultados y discusin.
agar Sangre, GC, MacCONKEY y Sabouraud. Los
Un total de 1554 hemocultivos que fueron
hemocultivos que resultaron positivos para levadura
procesados slo 57 (3,66%) fueron positivos para
fueron subcultivados en placas conteniendo el medio
Candida spp. los resultados de la distribucin de
Sabouraud, despus de una incubacin de 24 a 48 horas
especies de Candida aisladas en los hemocultivos se
se identificaron por mtodo convencionales, incluyendo
pueden apreciar en la Tabla 1.
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De los 57 cultivos positivos, 31 correspondieron a La distribucin de las especies de Candida en cuanto

Candida spp. Este resultado coincide con el realizado a los servicios mdicos externos e internos
por Calvo y col (2010), donde obtuvieron el 3,6% de respectivamente fueron: 23 aislamientos (40%)
positividad para esta levadura, adems de observar un referidos de un instituto oncolgico peditrico, 13
predominio de especies de Candida como agente causal (23%) ambulatorios, 6 (10%), hospital tipo IV, 13
de fungemia [4]. Dolante y col (2008), en un estudio (23%) hospitalizacin, 2 (4%) UCI. En la figura 1 se
realizado en seis centros clnicos del pas, hall a C. presenta la distribucin de las especies de Candida en
tropicalis como el principal agente aislado en muestras cada uno de los servicios. Se observa un 40% de
de hemocultivo [2]. Esto podra explicarse debido al Candida spp. en pacientes proveniente de un Instituto
incremento de pacientes inmunocomprometidos y los Oncolgico Peditrico, 10% en hospitales de IV nivel.
factores predisponentes sobre todo el uso profilctico de El 23% de las especies de Candida se aislaron de
antifngicos de primera lnea ocasionando la aparicin pacientes hospitalizados, 4% en terapia intensiva y un
y seleccin de cepas diferente a C. albicans. Sin 23% a nivel ambulatorio.
embargo, se debe tomar en cuenta que la distribucin
de las especies de Candida puede variar de un centro
hospitalario a otro, debido precisamente a los grupos de
riesgos y la extensin de la poblacin susceptible, de
ah la importancia en el conocimiento y seguimiento de
la epidemiologia local. Contrario a estos hallazgos,
existen estudios multicentricos realizados en
Latinoamrica y Europa donde el principal agente
aislado es C. albicans en este tipo de muestra y en
segundo lugar a C. parapsilosis [5,10]. Figura 1. Distribucin de especies de Candida de
acuerdo al servicio mdico.
Tabla 1. Distribucin de especies de Candida aisladas Es frecuente observar candidemia en pacientes
en los hemocultivos. Laboratorio Snchez-Font hospitalizados, principalmente en las Unidades de
Total de Porcentaje Cuidados Intensivos. Diversos autores coinciden que las
Especie aislada muestras % especies de Candida se aslan entre 42 y 54% de los
Candida spp. 16 28 casos, sobre todo C. parapsilosis en el servicio de
C. parapsilosis 10 17 oncologa peditrica [3]. Sin embargo este estudio
C. albicans 10 17 arroj a C. pelliculosa como la ms frecuente en el
C. pelliculosa 9 16 grupo de pacientes oncolgicos. Esta Candida se ha
C. tropicalis 5 9 encontrado en varias frutas, en vegetales y otros
C. krusei 3 5 componentes orgnicos. Sin embargo hoy en da es
C. famata 2 4 considerada como invasora y oportunista y ha sido
C. glabrata 2 4 ocasionalmente reportada como agente nosocomial de
Total general 57 100 fungemia en pacientes peditricos
inmunocomprometidos [1,11]. En cuanto a la
susceptibilidad de las cepas encontradas frente a
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fluconazol y voriconazol se observ cinco cepas (30%) en el grupo etario entre 18 y 99 aos. Esto
resistentes a fluconazol: 2 C. parapsilosis y 3 C. krusei, obedece a que el servicio que mayor cantidad de
esta ltima es resistente natural a este antifngico. Este aislamiento de Candida fue el Instituto Oncolgico
resultado coincide con la mayora de la bibliografia Peditrico. En cuanto a la distribucin por gnero fue
encontrada donde se observado la resistencia a 18(32%) mujeres y 39 (68%) en hombres.
fluconazol en especies diferentes a Candida albicans y Conclusiones.
esto se deba principalmente al uso profilctico o Los agentes predominante de candidemia fueron las
emprico de este azol. [1,2,12,13]. Para voriconazol se especies de Candida no albicans en todos los servicios
encontr 100% de sensibilidad. Cabe acotar que los tanto a nivel de hospitalizacin como ambulatorio. La
puntos de cortes epidemiolgicos (ECV) as como su mayor parte de los aislamientos se encontr en el grupo
clasificacin utilizada en esta investigacin son de etario de 0 hasta 17 aos, principalmente en el sexo
acuerdo a los datos obtenidos por CLSI recientemente masculino (68%) y en el servicio referido de una
para C. albicans, C. parapsilosis, C. glabrata, C. krusei institucin oncolgica peditrica. Se encontr 5 cepas
y C. tropicalis, para las dems especies no existen resistentes a fluconazol de las cuales 3 tienen resistencia
evidencia o datos suficientes que permitan establecer su natural a este antifngico. Por lo tanto, resalta la
clasificacin en Sensible, Sensible Dosis Dependiente, importancia que tiene el recabar toda la informacin
Intermedio o Resistente [8]. Ver tabla 3 y 4. posible para identificar correctamente las especies de
Tabla 3. Sensibilidad de las especies de Candida a Candida y conocer su comportamiento frente a los
Fluconazol
antifngicos ms frecuentes contribuyendo al bienestar
Especie de
Candida S SDD R del paciente y al conocimiento de la epidemiologia de
n/% n/% n/% nuestro centro.
C. parapsilosis 8 (80) - 2 (20)
C. albicans 10 (100) - - Palabras clave: Candidemia, Epidemiologa,
Susceptibilidad antifngica
C. tropicalis 5 (100) - -
2
C. glabrata - (100) -
Tabla 4.
Referencias:
3 Sensibili
C. krusei - - (100) dad de 1. Garmendia Y, Vergara V, Rodrguez Y, Bentez
las E, Morales M, Lpez R, Torres L. Candida en el
especies de Candida a Voriconazol departamento de neonatologa de la Maternidad
"Concepcin Palacios". Enero.-junio de 2006. Act
Especie de
Cient de la Soc Venz de Bioanal Espec 2006; 9(2):
Candida S SDD R
53-57.
n/% n/% n/% 2. Dolande M, Revikina V, Panizo M, Macero C,
Moreno X, Calvo A, Selgrad S y col. Distribucin
C. parapsilosis 10(100) - - y sensibilidad a los antifngicos de aislamientos
clnicos de Candida en seis centros de salud del
C. albicans 10(100) - -
rea metropolitana de Caracas, Venezuela (aos
C. tropicalis 5(100) - - De 2003-2005). Rev Iberoam Micol 2008; 25:17-21.
3. Esteves A, Martnez E, TenorioI, Arroyo S,
acuerdo
C. krusei 3(100) - - Moncada D, Arenas G. Prevalencia de
a la hemocultivos positivos para Candida sp.
Distribucin de levaduras aisladas de pacientes
distribucin por grupo de edad, se encontraron
internados en un hospital de segundo nivel de la
hemocultivos positivos en 9 (16%) en recin nacidos Ciudad de Mxico. Dermatologa Rev Mex 2009;
53(1): 3-6.
hasta 1 ao de edad, 31 (54%) entre 2 a 17 aos y 17
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Determinacin de agentes fngicos en colecciones religiosas de madera policromada

del siglo XVIII en una iglesia del estado Falcn
Determination of fungal agents in polychrome wooden religious collections of the XVIII century in
a Falcon state church

Guian Carmena, Torrealba Nataliaa, Oberto-Perdign Lairet b, Yegres Jos Francisco b, Silva Ricardo-Alonsob
y Navas-Yamarte Patriciab*
a
Conservacin y restauracin de bienes y muebles UNEFM; b Laboratorio de Investigacin y Apoyo Docente
Santa Ana UNEFM.
patynavas81@gmail.com

Introduccin. especialmente, cuando los mismos son expuestos a una

El patrimonio cultural es un componente insuficiente ventilacin [4]. Por otra parte, es bien
fundamental de la identidad de los pueblos y de su sabido que los hongos constituyen uno de los mayores
diversidad, la naturaleza particular de este patrimonio, grupos de seres vivos y existe una gran cantidad de
su carcter irrepetible, comporta la obligacin moral de ellos que afectan a las infraestructuras, materiales de
transmitirlo a las generaciones presentes y futuras y la maderas, impresos, entre otros [5]. Es importante
necesidad de sensibilizar a los profesionales del sector, destacar, que la determinacin ambiental de hongos
ciudadanos y representantes pblicos con respecto a su puede ser utilizado como un parmetro relevante dentro
gnesis, historia, vulnerabilidad e imprescindible tutela de la evaluacin de la calidad del medio ambiente [5],
[1]. aunado a esto hay que tomar en cuenta el papel que
La imaginera policromada ofrece una tendencia deben jugar los museos o salas de exposicin y
clara y general de la realidad humana, caracterstica de depsitos de obras de arte dentro de los programas de
la sensibilidad del barroco, que huye de las formas proteccin del ambiente y patrimonio propio, con la
clsicas, enfocndose en las visiones del martirio y el finalidad de aportar soluciones a la problemtica
dolor [2]. Las amenazas naturales de las obras de arte, existente [3], evitando as el deterioro de los bienes
son las propias del ciclo continuo de desintegracin y culturales. Casigua es una poblacin sensibilizada con
reconstruccin que tiene lugar en la tierra, estos peligros su patrimonio, la cual ha impedido la desaparicin y
aumentan cuando la insensibilidad, ignorancia, traslado indebido de este conjunto artstico que carece
vandalismo o el propio desarrollo de la civilizacin, de cualquier estudio diagnstico o proyecto de
afecta a los bienes culturales [1]. La presencia de consolidacin [6]. El objetivo de esta investigacin se
microorganismos en materiales orgnicos e inorgnicos, bas en determinar la flora fngica causante del
se ve favorecida por el ambiente que los rodea, lo cual detrimento en las colecciones religiosas de material
permite crear un microclima optimo para el desarrollo policromado del siglo XVIII en una iglesia del estado
de organismos fngicos y bacterianos, contribuyendo Falcn.
estos al biodeterioro de monumentos, estructuras o
piezas de arte, repercutiendo a un efecto lesivo y Materiales y mtodos.
antiesttico [3]. Gran parte de las colecciones exhibidas La Iglesia de Casigua, se encuentra ubicada en
en los museos son de naturaleza orgnica, coordenadas 844'55" N y 7230'55" E, en formato
caracterizndose por su significativo incremento en DMS (grados, minutos, segundos) o 8.74861 y -72.5153
relacin al contenido de higroscopicidad y (en grados decimales). Su posicin UTM es YQ76 y su
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referencia Joint Operation Graphics es NC18-16 [7]. oscilaron entre 31C y 68% respectivamente. Estos
En relacin a la infraestructura, la iglesia de Casigua resultados se pueden comparar con algunos trabajos
cuenta de doce espacios, en el cual reposan dieciocho relacionados al estudio de la concentracin fngica en
piezas religiosas elaboradas a base de madera espacios cerrados, los cuales han estado por encima a lo
policromada del siglo XVIII, en donde doce mostraron establecido al estndar mtodo Isiaq Task Group TG-42
un dao aparente. En el espacio donde reposan las [10]. Uno de los ms recientes, data de la
piezas religiosas, se midieron parmetros fsico- aeromicrobiologa evaluada en el archivo central de la
qumicos (temperatura y humedad relativa) con un Universidad Pedaggica y Tecnolgica de Colombia, en
termo-higrmetro (Boeco/Alemania). Conservando la donde determinaron una concentracin fngica elevada
integridad de cada una de las piezas policromadas, se con valores promedios de temperatura de 18,8 oC y
tomaron pequeas muestras con un bistur estril y otras humedad relativa de 55,4% [11]. En otro estudio
con un hisopo previamente humedecido; las muestras se realizado en la Ciudad de Valencia-Venezuela,
colocaron en recipientes apropiados y se trasladaron al evaluaron la concentracin fngica en Bibliotecas,
Laboratorio de Investigacin y Apoyo Docente Santa encontrando altos valores cuantificables de hongos y
Ana (LIADSA/UNEFM). Una vez en el laboratorio, las registrando valores promedios de Temperatura y
muestras se inocularon sobre la superficie de Agar Papa Humedad Relativa entre 25,2-29,6oC y 48,2 y 63,1%
Dextrosa (PDA) (Himedia, India), incubndolas a respectivamente [12]. Los estudios realizados en
temperatura ambiente (26-28C), por un lapso de siete estructuras culturales y el dao causado por
das. Posterior al periodo de incubacin, se realizo una microorganismo ha sido poco, no obstante un trabajo
cuantificacin de colonias (Unidades Formadoras de relacionado al biodeterioro de un monumento
Colonias, UFC), las cuales se repicaron nuevamente en arquitectnico San Antonio de Padua Clarines,
agar (PDA) con incubacin de 26-28C durante cinco Anzotegui, Venezuela, reportaron parmetros de
das, este procedimiento se efectu con la finalidad de temperatura y humedad relativa, de 29C y 70%
obtener cultivos puros. Posterior al mismo, se respectivamente [3], sin embargo, se hace necesario
analizaron las caractersticas macroscpicas anverso aclarar que estos valores fsicos y qumicos, se tomaron
(Borde, aspecto, consistencia, superficie, tipo de en un espacio abierto. La humedad relativa alta,
crecimiento y exudado) y reverso (coloracin, tipo de produce en materiales inertes aumento en volumen y
crecimiento y pigmentacin). Finalmente se hizo una peso, relajamiento de los adhesivos y debilitamiento de
visualizacin microscpica mediante la tcnica de cinta las estructuras, creando de esta forma un microclima
adhesiva con suspensin en una gota de azul de apto para el desarrollo de los agentes fngicos presentes
lactonefol [8]. Para la identificacin dicotmica de en el espacio [1]. Si a la humedad relativa, se le suma
gnero, se sigui el protocolo propuesto por Da Silva y una temperatura elevada, la accin perjudicial se
col., 1998 [9]. duplica o triplica ya que las estructuras presentes
pueden tener daos mayores como el
Resultados y discusin. resquebrajamiento, alabeos, salteados de color,
Los valores promedios de temperatura y humedad desconchados, entre otros, lo cual lleva a una perdida
relativa en el espacio donde se encontraban las doce original de la estructura [1]. Es importante mantener
piezas de material policromado con daos aparentes constante los valores de temperatura y humedad relativa
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sobre todo en espacios cerrados y ms aquellos donde

reposan objetos de arte cultural de notada importancia
as como materiales impresos de registro histrico [1].
Por otra parte, se hizo una cuantificacin de las
Unidades Formadoras de Colonias (UFC), en cada una
de las piezas evaluadas, notndose que no en todas las
muestras evaluadas hubo crecimiento (Tabla 1). As
mismo, se observo una mayor proliferacin de UFC en
aquellas piezas que presentaron mayores daos en su
estructura tal como la pieza 1, 2, 6, 8, 10 y 11. Aquellas
piezas que no estaban tan afectadas los porcentajes de
UFC fueron ms bajos y aquellas que no tenan clara
identificacin de daos aparentes no presentaron
crecimiento de UFC (Tabla 1). Figura 1. Prevalencia porcentual de generos fungicos
aislados en las piezas evaluadas.
Tabla 1. Unidades Formadoras de Colonias (UFC) con Estos resultados son comparables a los de Lemus-
niveles porcentuales en cada una de las piezas
evaluadas Espinoza y col., 2012, en el cual reportaron a
N Imagen seleccionadas UFC Aspergillus spp; y Curvalaria spp. como principales
1 Nuestra Seora De Beln n= 25 (28,1%)
agentes micticos presente en el biodeterioro de un
2 Santa Ana n= 11 (12,4%)
monumento religioso arquitectnico San Antonio de
3 San Cayetano n= 4 (4,5%)
Padua, en Anzotegui-Venezuela, sin embargo este
4 Santa Rita n= 0
trabajo se relacion mas con la estructura y no con
5 Inmaculada n= 0
n= 10 (11,2%) piezas de arte resguardadas en espacios cerrados [3].
6 San Nicols De Bari
n= 0 Por otra parte, las piezas evaluadas, estaban
7 San Francisco
8 Nuestra Seora Del Rosario n= 10 (11,2%) resguardadas en vitrales, en el cual los hongos han

9 San Jos n= 4 (4,5%) tenido la capacidad de ingresar al interior y colonizar su

10 San Antonio n= 10 (11,2%) nicho, esto probablemente se debe a las condiciones de
11 Nuestra Seora Del Carmen n= 9 (10,1%) conservacin para estas obras de madera policromada,
12 San Joaqun n= 6 (6,8%)
adems de presentar parmetros fsicos, qumicos y
ventilacin inapropiada que han permitido que estos
Los agentes fngicos aislados en forma prevalente
microorganismos contribuyan a generar daos aparentes
correspondieron a Aspergillus spp. (55,05%), seguido
adems de contribuir al biodeterioro de las piezas de
de Rhizopus spp. (21,34%), Mucor (11,23%), Alternaria
arte-religioso. Aspergillus es el gnero con mayor
spp. (7,86%), Curvularia spp. (2,24%) y Fusarium spp.
prevalencia en espacios cerrados y abiertos, asimismo
(2,24%) (Figura 1).
se implica marcadamente en el dao que genera en
infraestructuras y en todo material inerte que le brinde
condiciones aptas para su desarrollo. Por su parte
Rhizopus, a condiciones ptimas de temperatura y
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humedad relativa, es capaz de generar daos a diversos
materiales ocasionando manchas de coloraciones pardas
producto de la acidificacin en el soporte [13]. Se hace
necesario, intensificar el estudio orientado a una
cuantificacin de carga fngica en todo el espacio para
establecer criterios relacionados a la presencia de
hongos en el rea donde se encuentran las piezas de arte
ya que las mismas son importantes desde el punto de
vista social, religioso y cultural.
Conclusiones.
La temperatura y humedad relativa se registraron
elevadas (31C y 68% respectivamente), lo cual
presume que estos parmetros proporcionan una
condicin apta para que los hongos interacten con las
piezas de madera policromada. Por otra parte, las
condiciones de ventilacin sumada a las condiciones de
mantenimiento y conservacin de las piezas no son las
exigentes. Los agentes fngicos aislados de forma
prevalente correspondieron a Aspergillus spp. (55,05%),
seguido de Rhizopus spp. (21,34%), Mucor spp.
(11,23%), Alternaria spp. (7,86%), Curvularia spp.
(2,24%) y Fusarium spp. (2,24%). Estos
microorganismos fngicos, contribuyen al detrimento
de las piezas, lo cual lleva a un biodeterioro, estando
implicados algunos de estos en daos a infraestructura,
madera y material impreso existente en espacios
cerrados.
Palabras clave: biodeterioro, imaginera policromada,
higroscopicidad.
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Municipio Muroa. 2004-2005.
http://es.getamap.net/mapas/venezuela/zulia/_cas
igua/ (acceso 7 de agosto de 2013).
8. Sols ER. Estudio micolgico del aire en reas
ocupacionales y exteriores del laboratorio de
investigacin en productos naturales ubicado en
el edificio T-10 en la ciudad Universitaria en
zona 12 y el laboratorio ubicado en zona 1 del
centro de informacin y asesora toxicolgica del
Departamento de toxicologa de la facultad de
ciencias y farmacia de la Universidad de San
Carlos de Guatemala. Universidad de San Carlos
de Guatemala.
9. Da Silva, Carlos y otros (1998) Gua para la
identificacin de hongos, actinomicetos y algas
de inters mdico. Editorial Sarvier, Sao Pablo,
Brasil.
10. Isiaq-Cib Task Group Tg 42. (2004).
Performance Criteria Of Buildings For Health
And Comfort. Cib Number 292.
11. Toloza DL, Lizarazo LM, Blanco JO.
Concentracin y composicin microbiana en el
ambiente de la biblioteca central Jorge Palacios
Preciado de la Universidad Pedaggica y
Tecnolgica de Colombia, Tunja, Colombia. Actu
Biol. 2012. 34 (97).
12. Medina L, Tuozzo A, Herrera J, Perozo Y,
Gonzlez L. Estudio de hongos en bibliotecas de
la Universidad de Carabobo. Desarrollo
Cientfico y Humanstico. 3 (1): 17.
13. Calvo MA, Adelantado C, Corcuera E.
CRITERIOS principales caractersticas de los
hongos causantes de alteraciones en materiales
celulsicos. PH Boletn del Instituto Andaluz del
Patrimonio Histrico. 2005. 53: 18-23.
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Aislamientos micolgicos en el Laboratorio de Microbiologa del Hospital Vargas de

Caracas, Enero Diciembre 2012
Mycological isolates in the bacteriology laboratory at the Vargas Hospital of Caracas

Suarez Fabiolaa, Correa Doryannaa, Rosas Angelyb, Gonzlez, Karlab y Martnez Jos
a
Laboratorio Microbiologa Hospital Vargas de Caracas
b
Residencia Asistencial Bacteriologa Clnica

Introduccin: El presente estudio tuvo como objetivo determinar la prevalencia de hongos levaduriformes y filamentosos
involucrados en micosis profundas y enfermedad fngica invasora. Metodologa: Se analizaron 1352 muestras divididas
en dos grupos: 1091 muestras del sistema respiratorio y 261 muestras de otros sitios anatmicos remitidas al Laboratorio
de Microbiologa del Hospital Vargas de Caracas, Distrito Capital, Venezuela, en el perodo Enero a Diciembre de 2012.
Se realiz un estudio retrospectivo, mediante la revisin de libros de trabajo. Resultados: De las 1091 muestras del
sistema respiratorio los agentes etiolgicos ms frecuentes fueron Candida albicans y Candida spp. seguidas de
Aspergillus spp. y Penicillum spp. Solo hubo un aislamiento de Paracoccidiodes brasiliensis en una muestra de esputo.
De las 261 muestras de otras partes anatmicas los agentes causales ms frecuentes fueron Candida spp. Candida
albicans, y 9 Criptococcus spp. aislados de sangre y lquido cefalorraqudeo las cuales fueron las muestras ms
predominantes. Se obtuvieron 7 aislamientos de Histoplasma capsulatum en mdula sea. Conclusiones: La enfermedad
fngica invasora causada por especies de Candida fue la micosis ms frecuente sin dejar a un lado la importancia de los
casos de micosis profundas que se presentaron en este centro durante el periodo del ao 2012.

Palabras clave: aislamientos, micolgicos, hospital, Vargas

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Paraccoccidioidomicosis crnica. Revisin de la experiencia nacional:

a propsito de un caso
Chronic Paraccoccidioidomycosis. Review of national experience: Report of a case

Hernndez Mileidy, Aguilera Greana, Alfonzo Eulimar*, Ramrez Danissa, Solrzano Carmen,
Rodrguez Carmen, Snchez Mairena, Mndez Yureima, Paredes Carmen, Pulido Orangel
Prez de Salazar Celina.
Servicio de Microbiologa, Instituto Autnomo Hospital Universitario de Los Andes, Mrida

* Correspondencia: Eulimar Alfonzo

Email: euli100@gmail.com

Introduccin. Andes (I.A.H.U.L.A.) por presentar disnea progresiva

Paracoccidioidomicosis, micosis profunda
sistmica, endmica en pases de Amrica Latina. El ltimos 20 das. Dicha disnea se acompaa de tos seca,
agente causal de esta micosis es un hongo dimrfico,
Paracoccidioides brasiliensis y P. lutzii, este ltimo con
caractersticas filogenticas y morfolgicas
comparables con P. brasiliensis [1]. La infeccin puede
manifestarse de forma aguda, en la niez y juventud, o
de manera crnica, en el adulto. La forma crnica se
caracteriza por cursar con un perodo de latencia
prolongado; compromete inicialmente a los pulmones,
produciendo enfermedad pulmonar primaria, a menudo
asintomtica, pudiendo diseminarse por va linftica y
hematgena a cualquier rgano o sistema [2].
El objetivo de realizar este reporte es poner en
evidencia, una vez ms, una micosis sistmica endmica
en nuestro pas, como es la Paracoccidioidomicosis,
diagnosticada en la regin de Los Andes, y destacar la
posibilidad de realizar un diagnstico preciso por medio
de procedimientos sencillos y de bajo costo. Asimismo,
revisar la literatura de autores nacionales y resaltar la
contribucin de estos, al conocimiento del agente causal
y de la micosis que produce.
Descripcin del caso:
Paciente masculino de 50 aos de edad, natural de
Colombia, procedente de Tucanizn, estado Mrida, el
cual consulta en mayo 2013 en la emergencia del
Instituto Autnomo Hospital Universitario de Los
de 6 meses de evolucin, que ha progresado en los
persistente. Adems, anorexia y odinofagia que
dificultaban la ingesta de alimentos. Prdida de peso de
15-20 Kg en 2 meses, astenia y adinamia.
Hbitos psicobiolgicos: agricultor; msico de
profesin (instrumento de cuerda); tabaquismo severo
de 1 cajetilla/diaria, durante 25 aos; alcoholismo
acentuado; consumo de tabaco de mascar chim;
introduccin de palitos de madera en la boca.
Al examen fsico: frecuencia cardiaca de 90
pulsaciones/minuto, frecuencia respiratoria de
26/minuto. Temperatura axilar: 37C. Tensin arterial:
120/80 mmHg. Peso: 49 Kg. Talla: 1,65 mts. Piel:
disminucin del tejido celular subcutneo y masa
muscular. No adenopatas palpables. Boca: edema del
labio inferior; lengua y pilares anteriores con edema
indurado; en tercio distal de la lengua: lesin ulcerada,
indurada de 2 x 3 cm de dimetro, con fondo irregular,
petequial, granular fina y bordes infiltrados,
festoneados, dolorosa de manera espontnea que se
exacerbaba a la palpacin; en comisura labial izquierda:
lesin ulcerativa, de 2 cm de dimetro, con
caracterstica similar a la anterior. Segn refiri el
paciente, la lesin ulcerativa en lengua tena unos 6
meses de evolucin. Trax: presencia de tirajes
universales. A la auscultacin pulmonar presentaba
murmullo vesicular disminuido en ambos campos
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pulmonares, con crepitantes gruesos en tercio medio y
bases bilaterales. Abdomen: no hepatoesplenomegalia.
Resto del examen fsico: conservado.
Paraclnicos pertinentes: VSG: 10 mm/hora. Hipoxemia
leve. Hematologa completa, transaminansas,
bilirrubina, glicemia, protenas totales y fraccionadas,
funcin renal, dentro de parmetros normales.
Radiologa de trax: infiltrado intersticial mixto difuso,
reticular grueso, con ndulos, y en las bases patrn
destructivo en panal, adems de fibrosis con predominio
en los campos medios; ndice cardiotorcico: > 0,5 y
arterias pulmonares prominentes, que corresponden
muy probablemente con una forma residual y a un Cor
pulmonale. Ecocardiograma: Ventrculo izquierdo no
dilatado, con funcin sistlica levemente deprimida.
Cavidades derechas severamente dilatadas, con funcin
sistlica conservada; insuficiencia tricuspdea severa.
Hipertensin pulmonar severa. VIH: seronegativo.
Se realizaron raspados profundos del fondo de las
lesiones en boca para el estudio micolgico. En los
exmenes directos con KOH (20%) y tinta Parker negra,
y coloracin de Giemsa, se observaron: levaduras
multibrotantes anisomtricas, compatibles con P.
brasiliensis (figura 1). El cultivo de dichas muestras se
efectu en los medios de Lactrimel y Agar Sabouraud
con antibitico, incubados a 25C y 37C, con
crecimiento de P. brasiliensis. La serologa por la
tcnica de inmunodifusin fue positiva para
Paracoccidioides. Recibi tratamiento con Itraconazol,
evidencindose mejora progresiva.
Discusin.
La paracoccidioidomicosis es una micosis profunda
sistmica crnica, producida por P. brasiliensis y P.
lutzii. Fue descrita por primera vez por Lutz (1908) en
Brasil. En Venezuela, el primer reporte de esta entidad
mictica fue en 1937, por el anatomopatlogo, Dr.
O`Daly, y desde entonces, existen algunos estudios en
los cuales reflejan la presencia de esta micosis en
pacientes provenientes de diferentes regiones
geogrficas y climatolgicas del territorio nacional
[1,2,3,4,5,6].
En el Instituto Nacional de Higiene Rafael Rangel,
considerado como centro de referencia nacional,
encuentran que la Paracoccidioidomicosis es la segunda
micosis sistmica en nuestro pas, diagnosticada por
estudio serolgico entre los aos 2002-2006, luego de la
histoplasmosis. Sin embargo, en los datos publicados
entre 1984-2010 por los Grupos de Trabajo de
Micologa (presentes en varios estados de Venezuela),
se encuentra que la Paracoccidioidomicosis ocupa el
primer lugar entre las micosis sistmicas [5,6]. En
estudios epidemiolgicos, el porcentaje de reactores
positivos a la prueba intradrmica de Paracoccidioidina,
est reportado entre un 10,2% y 90,1% [7,8].
La paracoccidioidomicosis es una micosis
mayormente observada entre la poblacin adulta,
particularmente entre los 30-60 aos de edad
[1,2,3,5,10]; con un 21% de los casos entre los mayores
de 60 aos [21] Asimismo, se asocia a hbitos
tabquicos y alcohlicos acentuados [1,10]. Aspectos
epidemiolgicos reportados, que son concordantes con
el presente caso clnico, el cual era masculino de 50
aos de edad, con tabaquismo y alcoholismo
acentuados.
Tradicionalmente se consideraba que el hbitat en el
medio rural, y en particular con el oficio de agricultor,
eran una condicin predisponente para la
Paracoccidioidomicosis [1,2]. Aunque, en nuestro pas
se ha reportado esta micosis asociada a diversas
ocupaciones, como albailes, jardineros, choferes,
estudiantes, panaderos, comerciantes, mineros, entre
otros, encontrndose la agricultura en una frecuencia
entre 29-52% [1,9]. La explicacin a este hecho pudiera
estar relacionado a los diversos cambios de oficios y de
hbitat de los pacientes, asociado al prolongado perodo
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de latencia de esta micosis [1,3,9]. El caso presentado Multifocal, con afectacin de ms de un rgano o tejido,
guarda relacin con lo planteado en la literatura, nacido y en los cuales se observa con mayor frecuencia el
en Colombia, proveniente de Tucanizn, estado Mrida, compromiso muco-cutneo, reportada en un 51-89% de
cuyos habitantes viven de la agricultura, oficio que l la poblacin venezolana y la Residual, con
mismo ejerca. manifestaciones secundarias a efectos cicatriciales [4,9].
Se sostiene que la va inhalatoria es la puerta de El caso clnico que se presenta corresponde a una forma
entrada para el hongo [1,9]. Aunque, tambin existe la Crnica Multifocal, con presencia de signos
hiptesis de que pueda adquirirse por inoculacin radiolgicos pulmonares con fibrosis e hipertensin
directa, situacin que se ha insinuado en casos aislados pulmonar crnica y Cor pulmonale, adems de signos
como por ejemplo el reportado por Casbarro y col., ecocardiogrficos de cavidades derechas dilatadas e
(2001), cuyo paciente eventualmente ejerca el oficio de insuficiencia tricuspdea, que pudieran corresponder a
fakir, durante el cual sostena hojillas entre los labios, efectos de una fibrosis pulmonar secundaria a la
coma vidrio (aunque no revel si los ingera) y infeccin. Desafortunadamente, contamos con escasos
adems, caminaba sobre vidrio molido. Dicho paciente reportes clnicos nacionales que apoyen lo planteado en
present afeccin en boca, esfago, estmago, este caso [9].
pulmones y en las regiones plantares de los pies. El compromiso mucocutneo, se manifiesta
Asimismo, el caso reportado por Tejos y col., (2003), frecuentemente en cavidad oral, con lesiones
con lesin verrugosa nica en la cara plantar del primer ulcerativas, con bordes infiltrados, festoneados, con
dedo del pi derecho; cursaba adems con importante fondos hemorrgicos, granulomatoso, tal como se
compromiso de una enfermedad broncopulmonar manifest en el paciente reportado [3,10]. En menor
obstructiva crnica, que luego de la evaluacin por frecuencia, las lesiones pueden ser exofticas,
neumonologa sta no fue concluyente para dicha verrugosas o en placa, con aspecto aframbuesado, con
micosis. En el presente caso reportado, se piensa que la puntos hemorrgicos, superficie granular fina, por lo
va inhalatoria pudo haber sido la puerta de entrada al general ubicadas faringe y laringe. An menos
hongo, aunque el hbito de mascar chim y de frecuente, puede haber lesiones en orificios nasales y
colocarse palitos de madera en la boca, no descarta este regin anal; todas las lesiones se acompaan de edema
hecho. infiltrativo. En pacientes con infeccin por VIH/SIDA,
En la Paracoccidioidomicosis se han descrito dos las lesiones son ulcerativas extensas, placas, ppulas
formas clnicas: la forma Aguda y Subaguda, que ocurre mltiples, entre otras [3,10].
en pacientes en edad peditrica y adulto-jven, con un La toma de la muestra clnica para el diagnstico de
compromiso severo del sistema fagoctico mononuclear, Paracoccidiodomicosis puede ser sencilla,
y una frecuencia observada en un 3% [9]. La forma particularmente si el paciente presenta compromiso
Crnica, ms frecuentemente observada, se presenta en mucocutneo, debido a la accesibilidad de la muestra
la edad adulta, de evolucin insidiosa, con clnica a estudiar, tal como en el caso reportado. El
manifestaciones clnicas inespecficas y a su vez sub- hongo, por ser un agente causal de una micosis
clasificada en: Crnica Unifocal, con afectacin de un profunda, no se encontrar cubriendo la superficie de la
rgano, generalmente el pulmn, con una frecuencia de lesin, como por ejemplo en el caso de una candidiasis
un 48% segn Oliveros y col., (2007); Crnica oral. El procedimiento frecuentemente utilizado para la
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toma de muestra, es la biopsia incisional [3,10]. Sin

embargo, se puede realizar un raspado profundo de la
misma o escarificacin de la lesin, ideal con una cureta
metlica, con el fin de conseguir exfoliar el tejido
afectado y garantizar la obtencin del hongo en la
misma, para su posterior estudio micolgico [2]. En el
presente caso, se aplic este procedimiento para la toma Figura 1. Levaduras multibrotantes anisomtricas,
compatibles con P. brasiliensis A) Examen directo con
de la muestra clnica y no se requiri de dispositivos
KOH y Tinta Parker (40X), B y C) Coloracin con
complicados; no implic un elevado costo, ni se expuso Giemsa (100X)
al paciente a los riesgos secundarios de una biopsia;
Conclusiones.
adems, garantiz su pronto procesamiento y el
La Paracoccidioidomicosis es una entidad mictica
diagnstico micolgico preciso para el inicio del
endmica en diferentes regiones de nuestro pas, por lo
tratamiento oportuno y especfico.
que la utilizacin de exmenes directos a partir de una
El examen microscpico directo de la muestra se ha
correcta toma de muestra acompaada de la
considerado la prueba de oro para el diagnstico
determinacin de anticuerpos por la tcnica de
definitivo de esta entidad mictica, se puede realizar
inmunodifusin para hongos permite el diagnstico
entre lmina y laminilla con KOH (10-40%), ideal
certero de la paracoccidioidomicosis.
asociado con tinta Parker de color negro para colorear el
hongo, y glicerina (50%) para evitar la formacin de
Palabras clave: Paracoccidioides,
cristales a causa del hidrxido y observar
Paracoccidioidomicosis, Micosis, Micosis sistmica.
adecuadamente las levaduras (figura 1). Aunque la
coloracin de Giemsa o Whrigt no son ideales para Referencias.
Paracoccidioides, se pueden observar los protoplasmas 1. Dawaher, J., Colella, M., Rosell, A., Prez, C.,
Olaizola, C., Newman, W. y col.:
coloreados (figura 1) [1,2,4]. En el estudio
Paracoccidioidomicosis: clnica, epidemiologa y
histopatolgico de las muestras clnicas se pueden tratamiento. Kasmera; 2012; 40:170-71.
2. Romn, Z., Barroeta, S., Meja, M.,
realizar tinciones con Grocott, cido perydico de
Paracoccidioidomicosis en el estado Lara. Derm
Schiff (PAS), Hematoxilina-eosina, etc. [1,2,4]. El Ven. 1986; 24:35-39,.
3. Varn, G., Pacheco, A., Lazarde, J., Aislamiento e
crecimiento en el medio de cultivo es lento, pudiendo
Identificacin Micolgica de Paraccocidioides
crecer en Agar Sabouraud, Agar Lactrimel entre otros brasiliensis de una lesin bucal. Reporte de un
caso. Act Odontol Ven; 2005; 43:. Disponible en:
[4]. Sin embargo, su sensibilidad es menor en relacin
file:///C:/Documents%20and%20Settings/Administ
al examen directo [1,4], ya que en ocasiones el rador/Escritorio/artculosParacoccidiodomicosis/
4. Oliveros, R,; Domnguez, A,; Snchez, C, Di-
crecimiento es inhibido si existe flora bacteriana o
Liberti, D.: Diagnstico de paracoccidioidomicosis
mictica asociada. El estudio serolgico por la tcnica en el Laboratorio de Micologa de la Universidad
de Carabobo durante 14 aos (1992-2005). Rev.
de inmunodifusin en agar ha resultado una herramienta
Soc. Ven. Microbiol. 2007; 27: 3-10.
fundamental para el diagnstico de esta entidad en 5. Revikina, V., Panizo, M., Dolande, M., Selgrad,
S., Diagnstico inmunolgico de las micosis
particular por su comportamiento sistmico [5].
sistmicas durante cinco aos 2002-2006. Rev Soc
Ven Microbiol; 2007; 27:112-19.
6. Martnez, D., Hernndez, R., Alvarado, P.,
Mendoza, M. Las micosis en Venezuela: casustica
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de los Grupos de Trabajo en Micologa (1984-
2010). Rev Iberoam Micol; 2013; 30: 39-46.
7. Cavallo M., Daz A., Jimnez R., Katiraee B.,
Rojas O. Estudio epidemiolgico de la
paracoccidioidomicosis en la comunidad de guapa
municipio Andrs Eloy Blanco estado Lara
Venezuela octubre 2001-febrero 2002. Rev Soc
Venez Microbiol. 2002; 22(2):158-163.
8. Pavillard, A., Mota, J., Prez, R., Prez-Ybarra, L.,
Len, J. Reactividad de la prueba drmica con
paracoccidioidina e histoplasmina en agricultores
del estado Aragua. Com y Salud; 2009; 7: 52-60.
9. Taronna, I., Incerto, A., Mata, S., Masi, R.,
Reymundez, M., Lannelli, A. Aspectos clnicos-
epidemiolgicos de la Paracoccidioidomicosis en
Venezuela: Revisin de 268 casos. Cent Md.;
1996; 41: 14-18.
10. Casbarro, C., Jimnez, C., Tinoco, P., Machado E.
Paracoccidioidomicosis sistmica con implicacin
de la cavidad bucal: reporte de un caso en paciente
venezolano. Act odontol Ven; 2001; 39.
Disponible en: www.actaodontologica.com
11. Tejos, L., Prez, R., Cavallera, E., Oliver, M.
Paracoccidioidomicosis: presentacin inusual.
Dermat ven; 2003; 41: 11-22.
12. Guillarte, C., Pardi, G., De Stefano, A., Hernndez,
M. Casustica de las micosis de la cavidad bucal
(2002-2006) - Laboratorio de la Ctedra de
Microbiologa, Facultad de Odontologa, U.C.V.
Act Odont Ven; 2010; 48. Disponible en:
G:\artculosParacoccidiodomicosis\VENEZUELA\
Casuistica en boca UCV.htm
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CMI de Fluconazol asociada a especies de Candida aisladas en recin nacidos con

candidemia en la Unidad de Alto Riesgo Neonatal del IAHULA-Mrida
MIC of fluconazole associated to Candida species isolated in candidemia of Newborns in the High-
Risk Neonatal Unit's of the IAHULA-Mrida

Sanchez Mairenaa, Prez de Salazar Celinab, Rosales Carlac, Hernndez Jos Gregoriod, Moreno Alexanderb,
Salazar Oduarb, Daz Clarab, Carrero Sarelieb.
a
Postgrado de Microbiologa Clnica, Facultad de Farmacia y Bioanlisis, U.L.A. b Laboratorio de Micologa,
Facultad de Farmacia y Bioanlisis, U.L.A. c Unidad de Alto Riesgo Neonatal, Instituto Autnomo Hospital
Universitario de Los Andes. d Laboratorio de Sndromes Gastrointestinales y Urinarios, Facultad de Farmacia
y Bioanlisis, U.L.A.

Introduccin: Las candidemias en recin nacidos representan una elevada causa de morbimortalidad entre la poblacin
inmunosuprimida, especialmente en una unidad de cuidados intensivos. Como tratamiento antifngico en la mayora de
los centros asistenciales del pas, se dispone de Fluconazol y Anfotericina B, y de estos, el Fluconazol es mejor tolerado y
con menos efectos secundarios. Se plantea como objetivo comprobar la asociacin entre la Concentracin Mnima
Inhibitoria (CMI) de Fluconazol con las especies de Candida aisladas de hemocultivos en recin nacidos de la Unidad de
Alto Riesgo Neonatal del Instituto Autnomo Hospital Universitario de los Andes, entre Mayo 2009Diciembre 2010.
Metodologa: Investigacin de campo, diseo no experimental, descriptivo, transversal. A 346 recin nacidos con
candidemia, sin tratamiento antifngico, ingresados en la Unidad de Alto Riesgo Neonatal del I.A.H.U.L.A., previa firma
del consentimiento informado, se aislaron e identificaron las especies de Candida involucradas mediante el uso de
CHROM agar Candida y prueba de filamentacion; mientras que la susceptibilidad (S) y resistencia (R) a fluconazol se
detect por Concentracin Mnima Inhibitoria (CMI) con tiras de E-test en agar Meller-Hinton modificado, segn el
CLSI. Resultados: Se diagnosticaron 95 casos de candidemia de los cuales se aislaron las siguientes especies: C.
parapsilosis (60/63,2%); C. albicans (18/18,9%); C. glabrata (6/6,3%); C, krusei (3/3,2%); C. lusitaniae (3/3,2%); C.
tropicalis (2/2,1%); C. guilliermondii (2/2.1%) y C. famata (1/1.1%). En relacin al fluconazol, C. parapsilosis resulto:
S/29 (48,3%), R/20 (33,3%) y Susceptibles Dosis Dependiente (SDD)/11 (18,3%); C. albicans resulto: SDD/5 (27,78%) y
R/4 (22,2%); C. glabrata: SDD/1 (16,67%), y R/2 (33.3%); C. krusei: R/3 (100%); C. lusitaniae: S/3 (100%); C.
tropicalis: R/1 (50%), C. guillermondii: R/1 (50%); y C. famata: S/1 (100%). Conclusiones. 1.- Predominan otras
especies diferentes a C. albicans. 2.- Entre las especies aisladas, aproximadamente la mitad estaban en el rango de SDD o
R al Fluconazol.

Palabras clave: Candidemia, Neonatos, Fluconazol

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Aeromicota presente en un ambiente cerrado de actividad laboral en una

Universidad de Coro, Falcn
Aeromicota preset in a closed environment of work activity in a university of Coro, Falcn

Cuenca Talavera Jessica(*),Richard de Yegres Nicole, Yegres Jos Francisco, Navas Yamarte Patricia,
Oberto Perdign Lairet, Silva Ricardo Alonso
Laboratorio de Investigacin y Apoyo Docente Santa Ana. Ciencias de la Salud. Universidad Nacional
Experimental Francisco de Miranda. Falcn, Coro-Venezuela

*Correspondencia autor principal

Email: cuenca_jessica@hotmail.com

Introduccin. Materiales y mtodos.

En el aire existe una gran cantidad de partculas
fngicas de dimensiones relativamente grandes, que
constituyen al grupo de los hongos aerfilos [1,2]; estos
se encuentran ampliamente distribuidos en el
ecosistema, y los mismos son capaces de desarrollarse
sobre cualquier substrato inerte que les aporte partculas
enrgicas biodegradables [2]. Por otra parte, el
desarrollo fngico est supeditado a condiciones
bioclimticas como temperatura, humedad relativa y
precipitacin [4], las cuales influyen de manera
determinante en la colonizacin, proliferacin y
propagacin hacia los espacios cerrados [5].
Los hongos contribuyen al detrimento de material
impreso adems de relacionarse a daos patolgicos en
individuos que asisten por largos intervalos de tiempo a
espacios cerrados [6,7], o en aquellas personas que
presentan fallas a nivel del sistema inmunitario,
considerndose un problema de salud pblica
asistencial. En Venezuela, han sido poco los trabajos en
relacin a la Aeromicota en espacios cerrados de
actividad laboral. El objetivo del presente trabajo
consisti en evaluar la aeromicota en areas
ocupacionales del Vicerrectorado Administrativo de la
Universidad Nacional Experimental Francisco de
Miranda (UNEFM), Falcn-Venezuela.
El Vicerrectorado Administrativo de la Universidad
Nacional Experimental Francisco de Miranda
(UNEFM), se encuentra ubicado en el tercer piso del
edificio rectoral, cuya sede est en la calle norte entre
Avenida Manaure y calle Toledo, del municipio
Miranda, Coro-Falcn. Las muestras fueron colectadas
en 2 estadios mensuales (diciembre 2011 y febrero
2012).
Determinacin de la climatizacin: con un termo-
higrmetro digital marca BOECO/Alemania, se
monitoreo la temperatura y humedad relativa [5] en
todas las reas estudiadas.
Toma de muestra y cuantificacin: Para la
cuantificacin fngica se implement la tcnica de
gravimetra y la tcnica de impactacin con succin de
aire a travs de un equipo HIAIR/Himedia. Las
muestras tomadas en placas (gravimetra) y en tiras
plsticas (Impactacin) se trasladaron al laboratorio
(LIADSA/UNEFM) en donde se incubaron a 28C por
cinco das. Posterior al perodo de incubacin, se realiz
una cuantificacin de las Unidades Formadoras de
Colonias (UFC) en cada placa y tira, para lo cual se
sac un valor promedio en el caso de los duplicados y
se determin la totalidad de UFC por m3 siguiendo el
clculo sugerido por Reist Parker y tabulando los
resultados obtenidos al estndar internacional Isiaq
Task Group TG 42 para determinar las condiciones del
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ambiente cerrado en relacin a la carga fngica
existente [8,9].
Aislamiento de colonias fngicas: posterior a la
cuantificacin, se procedi a un aislamiento de colonias,
las cuales fueron repicadas en Agar Papa Dextrosa (Hi
media, India) con periodos de incubacin de 9 das a
una temperatura de 28oC. Este procedimiento se realiz
con la finalidad de obtener cultivos puros [5], y
establecer una identificacin dicotmica de los gneros
micticos existentes, siguiendo el estndar sugerido por
Da Silva y col., 1998 [10].
Resultados y discusin.
El valor mnimo de Humedad Relativa (HR) en el
primer muestreo fue de 47,4% y el valor mximo de
60,1%, registrndose un 57% de HR como valor
promedio. En el segundo muestreo, se midieron
nuevamente parmetros correspondientes a la HR, en el
cual su nivel mnimo se registr en 48,2% y el mximo
en 56,5%, con un promedio total de 51,2%. La
temperatura promedio entre los dos muestreos fue de
25,5C y 26,4C respectivamente. Medina y col. (1999)
en un estudio similar, efectuado en bibliotecas de la
Universidad de Carabobo, obtuvieron valores
promedios de temperatura y humedad relativa de 26,6
C y 57,06% respectivamente [11]. Por otra parte,
Hartung y Rodrguez (1996), refieren una temperatura
promedio en espacios cerrados climatizados de 19,6C
con una HR de 49,55% [12]. La humedad relativa fuera
de parmetros establecidos, es de gran importancia ya
que permite la proliferacin de agentes fngicos,
permitiendo su esporulacin, para que se dispersen en
grandes concentraciones en el ambiente (externo e
interno) y tengan mayor factibilidad de colonizar
substratos de materia orgnica lo cual contribuye a su
supervivencia y al biodeterioro de materiales existentes
[5], entre los que se incluyen archivos, colecciones
impresas, obras de arte, entre otros [12,13].
En relacin a la cuantificacin se obtuvo un
promedio de 290 UFC/m3 por la tcnica gravimtrica y
144,02 UFC/m3 mediante la tcnica de impactacin. A
pesar de que no existe una normativa internacional que
establezca valores permisibles de concentracin fngica
en espacios cerrados, la ISIAQ task Group TG 42
(2004), reporta cinco niveles promedios para considerar
un espacio cerrado adecuado para el confort y bienestar
de trabajadores y residentes en base a la concentracin
de hongos [9].
En esta investigacin, los valores cuantificables de
UFC/m3 ubica el espacio evaluado en un nivel
intermedio en relacin a lo sugerido por la normativa
ISIAQ task group TG-42. La existencia de hongos en
espacios internos, se puede considerar un factor
importante relacionado a patologas de individuos que
residen por largos perodos de tiempo en el mismo [5],
debido a que pueden generarse reacciones alrgenas,
adems que mucho de ellos pueden actuar como agentes
oportunistas sobre todo con aquellos individuos que
presentan fallas a nivel del sistema inmunitario
[5,14,15].
Estos resultados son comparables a los obtenidos por
Toloza y Lizarazo (2011), cuando evaluaron la
aeromicrobiologa en el Archivo Central de la
Universidad Pedaggica y Tecnolgica de Colombia,
obteniendo un promedio total de 281UFC/m3 (nivel
intermedio); sin embargo, los valores de temperatura
fueron inferiores al reportado en esta investigacin
(18,8C) con una HR similar de 55,4%.
En Guatemala, Sols para el ao 2011, evalu la
aeromicologa de dos laboratorios, registrando una
carga fngica de 1517,6UFC/m3 (laboratorio 1) y
641UFC/m3 (laboratorio 2), considerndose por la
Isiaq-cib task group tg 42 en un nivel alto.
En un estudio de aeromicologa en Bibliotecas de la
Universidad de Carabobo, Venezuela, Medina y col.
(1999) reportaron promedios cuantificables de carga
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fngica de 2000 UFC/m3, ubicndose en un nivel alto
en relacin a lo establecido por el mtodo descrito por
Isiaq Task Group TG-42.
Los agentes aislados en el primer muestreo
correspondieron al gnero Aspergillus (53,2%), seguido
de forma descendente por Cladosporium spp. (20,7%),
Fusarium spp. (14,4%), Penicillium spp. (4,0%),
Chrysonilia spp. (4,0%), Alternaria spp. (1,8%) y
Curvularia spp. (1,8%). En comparacin con el
segundo muestreo los resultados fueron similares
exceptuando el registro de dos gneros que no se
encontraron durante el primer muestreo, de esta forma
los agentes aislados correspondieron a Aspergillus spp.
(84,5%), seguido por Cladosporium spp. (5,5%), Mucor
spp. (2,7%), Alternaria spp. (2,4%), Fusarium spp.
(1,8%), Penicillium spp. (1,3%), Chrysonilia spp.
(1.2%) y Acremonium spp. (0,5%) (Figura 1).
90
80
70
60
50
40
30
20
10
0 por la ingesta de aflatoxinas, colonizacin en tejidos e
1 2 3 4 5 6 7 8
1= Aspergillus spp.; 2=Cladosporium spp.; 3=
Fusarium spp.; 4= Penicillium spp.; 5= Chrysonilia
spp.; 6= Alternaria spp.; 7= Curvularia spp.; 8= Mucor
spp.; 9= Acremonium spp..
Figura 1. Porcentajes de gneros aislados en los dos
muestreos (diciembre 2011 y febrero 2012).
Estos resultados son comparables con los de Borrego
y col. (2008), donde predomin el gnero Aspergillus
en ambientes internos de dos depsitos estudiados,
ocurriendo de forma similar en las muestras analizadas
en esta investigacin. No obstante, estos valores
difieren a los reportados por Medina y col. (1999), con
una investigacin realizada en la biblioteca de la
Universidad de Carabobo, donde reporta con altos
porcentajes al gnero Geotrichum (27,5%), seguido por
Cladosporium spp. (24,48%) y Aspergillus spp.
(15,04%).
El favorecimiento de los agentes fngicos, se
relaciona con la variacin de los factores bioclimticos
(temperatura y humedad relativa), adems de estar
ligado a las condiciones de limpieza e higiene del lugar.
En este sentido, la temperatura y humedad relativa
mostr variaciones significativas, las cuales no se
ajustan a los valores recomendados por la normas ISO
en relacin a la calidad de aire en ambientes cerrados
[16]. Estos valores deben ser regulados conjuntamente
con otras condiciones como lo es la ventilacin y
factores de limpieza y remocin de polvo, ya que as se
evita la carga fngica en parmetros elevados, sobre
todo en espacios cerrados laborables.
Aspergillus spp. es un agente mictico frecuente en
el medio ambiente, por lo que puede tener una marcada
participacin como contaminante en el espacio interior
y exterior [17]. Sin embargo, tambin es responsable de
infecciones oportunistas que pueden generar afeccin al
humano y a los animales. En ocasiones puede ocasionar
patologas como otomicosis, queratitis, sndrome toxico
9 incluso tener capacidad de diseminacin de focos
iniciales de infeccin a sitios distales [18].
Cladosporium spp. fue aislado en los dos muestreos,
y el mismo se encuentra presente comnmente en el aire
y de forma especfica en temporada de sequa, lo cual se
manifiesta en los resultados obtenidos en el primer
muestreo correspondiente a esta estacin. Este hongo al
igual que Alternaria spp. es predominante en todo los
espacios (interiores y exteriores), que en ocasiones
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pueden tener marcada participacin en generar
patologas respiratorias en personas que se someten a
espacios con altas concentracin de estos agentes
micticos implicado en asmas e incluso en la fiebre del
heno [17]. En climas clidos puede producir infecciones
cutneas, subcutneas y queratitis, siendo
importancia el desarrollo lento que van manifestando
por lo que se considera una patologa mictico de largo
plazo.
Fusarium spp. se registr en las dos tomas de
muestras, el mismo se caracteriza por ser filamentoso,
hialino, septado, adems de ser saprofito del suelo y
agente fitopatgeno de importancia. Este agente
etiolgico, puede manifestar infecciones localizadas en
los humanos (queratitis) y otras infecciones
diseminadas que se hacen prevalentes en pacientes con
manifestaciones deficientes a nivel del sistema
inmunolgico [1].
Penicillium spp. fue uno de los agentes micticos
que estuvo presente en los dos muestreos, el mismo se
considera un contaminante comn en los ambientes
internos/cerrados, adems de ser oportunista en
pacientes inmunodeficientes [1]
Conclusiones.
El agente aislado con mayor frecuencia en los dos
muestreos correspondi al gnero Aspergillus el cual
puede participar como agente contaminante e infeccioso
con mayor prevalencia en personas con fallas a nivel del
sistema inmunolgico, adems de diversas patologas
como otomicosis, sndrome toxico por aflatoxina, entre
otros.
Los hongos ambientales pueden generar
biodeterioro a nivel del material impreso como en la
infraestructura (paredes, piso, techo) y otros materiales
existentes en el lugar. Se recomienda de esta forma
mejorar las condiciones bioclimticas y de limpieza del
lugar para monitorear la existencia y prevalencia de los
agentes micticos encontrados durante los dos
muestreos.
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15. Sols ER. Estudio micolgico del aire en reas
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investigacin en productos naturales ubicado en el
edificio T-10 en la ciudad Universitaria en zona
12 y el laboratorio ubicado en zona 1 del centro de
informacin y asesora toxicolgica del
Departamento de toxicologa de la facultad de
ciencias y farmacia de la Universidad de San
Carlos de Guatemala. Universidad de San Carlos
de Guatemala.
http://biblioteca.usac.edu.gt/tesis/06/06_3102.pdf
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Sensibilidad Candida spp. aisladas de pacientes inmunosuprimidos a antifngicos

sistmicos
Susceptibility of Candida species from immunosuppressed
Patients with systemic antifungals

Dimas Irais, Cermeo Julman

Escuela de Ciencias de la Salud Dr. Francisco Battistini Casalta,
Universidad de Oriente. Ncleo Bolvar.
Ciudad Bolvar. Venezuela.

Introduccin: Las pruebas de sensibilidad in vitro a los agentes antifngicos se ha convertido en una necesidad
especialmente en los pacientes que presentan inmunosupresin, en los cuales las infecciones por Candida spp. son
frecuentes. Se determin la Concentracin Mnima Inhibitoria (CMI) in vitro de Candida spp. frente a anfotericina B,
fluconazol, itraconazol y voriconazol en cepas aisladas de mucosa oral, de pacientes con VIH, oncolgicos, con leucemia
y diabticos. Metodologa: Se realiz un estudio descriptivo. Previo consentimiento informado se recogieron datos de
inters epidemiolgico-clnico y se tomaron muestras de mucosa oral de pacientes del Complejo Hospitalario Ruiz y
Pez. Las cepas obtenidas fueron previamente identificadas mediante CHROMagar , Api 20C y Api 32C de
bioMerieux. La CMI de los aislados se realiz mediante E-Test. Resultados: Se obtuvieron 92 aislados,
correspondientes a Candida albicans (73,9%), Candida tropicalis (16,3%), Candida krusei (6,5%) y Candida
parasilopsis (3,3%). La mayora de las cepas aisladas de C. albicans fueron sensibles in vitro a anfotericina B (100%),
voriconazol (95,6%) fluconazol (95,6%) e itraconazol (80,9%). C. krusei fue resistente a fluconazol y sensible a
anfotericina B, itraconazol y voriconazol. Conclusin: Se demuestra una mayor sensibilidad in vitro frente a los
diferentes antifngicos sistmicos en los aislamientos de Candida spp.

Palabras clave: Anfotericina B, Candida spp, Concentracin Mnima Inhibitoria, fluconazol, voriconazol, Itraconazol.
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Querion Celso. A propsito de cuatro casos

Celso Kerion. A report of four cases

Yoerlinda Materana, Beatrz Quiroza, Alexander Morenob, Oduar Salazarb, Jos Goyo Rivasc, Sarelie Carrero b,
Ana Carolina Gonzlezd, Clara Dazb, Celina Prez de Salazarb.
a
Postgrado en Microbiologa Clnica, Facultad de Farmacia y Bioanlisis, (U.L.A.), Mrida. bLaboratorio de
Micologa, Facultad de Farmacia y Bioanlisis, Universidad de Los Andes (U.L.A.), Mrida. cServicio de
Pediatra, del Instituto Autnomo Hospital Universitario de Los Andes (I.A.H.U.L.A.), Mrida. dLaboratorio
de Investigaciones en Bacteriologa Anaerbica, Facultad de Farmacia y Bioanlisis, U.L.A., Mrida.

Introduccin. Tinea capitis, es una infeccin del pelo del cuero cabelludo causada principalmente por dermatofitos del
gnero Mycrosporum. Esta micosis presenta dos formas clnicas: a) No inflamatoria, seca, benigna, escamosa, b)
Inflamatoria o Querion Celso, con eritema, pstulas y abscesos. Se plantea como objetivo presentar cuatro casos de Tinea
capitis con evolucin trpida. Reporte de casos. Cuatro casos de Tinea capitis presentaron lesiones iniciales con zona de
tonsura y descamacin. Recibieron tratamientos mltiples, entre ellos esteroides tpicos y/o infiltrados en cuero
cabelludo. Caso 1: procedente de El Viga, Edo. Mrida, 2 meses de evolucin, con zona nica de tonsura (10cm de
dimetro), en lnea media de la regin biparietal, con descamacin, inflamacin y mltiples ndulos subcutneos en cuero
cabelludo. Cultivo: Microsporum canis. Caso 2: procedente de El Viga, Edo. Mrida, 3 meses de evolucin, con alopecia
difusa en todo el cuero cabelludo, dolorosa, acompaada de secrecin seropurulenta, mltiples ndulos inflamatorios
confluyentes, con descamacin difusa e inflamacin. Cultivo: M. canis. Caso 3: procedente de Tucan, Edo. Mrida, de 3
meses de evolucin, con zona nica de tonsura, de 13x6cm en regin media biparietal, dolorosa, con abundante secrecin
seropurulenta. Cultivo: Tichophyton tonsurans. Caso 4: procedente de Barinas, Edo. Barinas, de 8 meses de evolucin,
con lesin de tonsura, de 5cm de dimetro en regin parietal derecha, acompaada de signos de inflamacin en dicha
zona. Cultivo: M. canis. Discusin. El Querion de Celso, es una forma clnica supurativa de la tinea capitis con
inflamacin debida a una reaccin de hipersensibilidad por presencia del hongo. Conclusin. Los cuatro casos fueron
considerados como Querion Celso por presentar las caractersticas clnicas iniciales como son la presencia de signos de
inflamacin intensa y el drenaje de pus por los orificios foliculares.

Palabras clave: Tinea capitis, Querion Celso, zona de tonsura.

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Aerobiologa de un espacio climatizado

Indoor air conditioner aerobiology

Silva Alvarado Ricardo Alonsoa, b*, Escalona Villegas Wilmarya, Daz Laugenyc, Yegres Jos Franciscob,
Navas Yamarte Patriciab, Oberto Perdign Lairet, Montiel Marynesa.
a
Unidad de Investigaciones en Microbiologa Ambiental, La Universidad del Zulia; b Laboratorio de
Investigacin y Apoyo Docente Santa Ana, Universidad Nacional Experimental Francisco de Miranda, c
Laboratorio de Microorganismos fotosintticos, La Universidad del Zulia.
ricar757@gmail.com

Introduccin. fngica en un ambiente climatizado del edificio grano de oro

La calidad de aire en espacios cerrados se ve
influenciada por partculas suspendidas en la atmsfera entre
las que destaca el polvo, granos de polen y la actividad
microbiana de hongos y bacterias, siendo estas ltimas
dependientes de la existencia de sustancias orgnicas, las
cuales sirven como fuente nutricional para su permanencia
[1,2]. En las ltimas dcadas se ha venido presentando un
problema asociado a los espacios cerrados (Sndrome del
Edificio Enfermo), reconocido, por la Organizacin
Mundial de la Salud, como una enfermedad que comprende
edificios en donde un porcentaje de ms del 20% de las
personas, que residen largos intervalos de tiempo en el
mismo, experimentan efectos agudos sobre la salud y el
bienestar, generando patologas como sequedad e irritacin
en las vas respiratorias, cefalea, irritacin en la conjuntiva
ocular, fatiga mental, resfriados persistentes
hipersensibilidades inespecficas, en donde las causas no
estn bien definidas pero desaparecen con frecuencia al
abandonar el edificio [3]. La calidad del aire en el interior de
un edificio es funcin de una serie de parmetros que
incluyen la calidad del aire exterior, la compartimentacin,
el diseo del sistema de aire acondicionado, las condiciones
en que este sistema trabaja y se revisa y la presencia de
fuentes contaminantes y su magnitud. Los microorganismos
existentes pueden actuar como agentes oportunistas sobre
todo en personas con fallas a nivel del sistema inmunolgico
o en adultos mayores y poblacin infantil, considerndose
esto como un riesgo a la salud pblica [4]. El objetivo del
presente trabajo se bas en cuantificar la carga bacteriana y
de la F.E.C. en la Universidad del Zulia.
Material y mtodos.
Se midi la temperatura y humedad relativa con un
termohigrmetro (Boeco, Alemania). Se cuantificaron las
bacterias y hongos en once compartimentos de un ambiente
climatizado con actividad administrativa en La Universidad
del Zulia. La cuantificacin se realiz por la tcnica de
gravimetra propuesta por Omeleansky [2], colocando
duplicados de placas en cada espacio con extracto malta
suplementado con 1% de glucosa (para la captura de hongos
y levaduras) y agar nutritivo (para la captura de bacterias), al
mismo tiempo se cuantific la presencia de hongos y
levaduras por el mtodo de succin (impactacin) con un
equipo succionador de aire HiAir Air Sampler System
e (Himedia, India) [4]. Las muestras fueron recolectadas a una
altura de 1,5m (nivel respiratorio) por un lapso de 20min y
9min para la tcnica de sedimentacin e impactacin,
respectivamente [1,2]. Posterior a la colecta las placas y tiras
con micropozo de agar extracto malta, se incubaron a 28C
(temperatura ambiente) por cinco das y el agar nutritivo se
incub a 35+/- 2C por 24-48hrs. Las Unidades Formadoras
de Colonias (UFC) fueron cuantificadas en cada caso y se
promediaron en base a las oficinas existentes en el espacio
evaluado, lo cual se contrasto con el mtodo estndar,
sugerido por Isiaq task group TG-42 (2004) [5]. La
caracterizacin morfolgica de las bacterias se realiz
mediante la tincin simple en las colonias aisladas en agar
nutritivo. Por otra parte, las colonias crecidas en el medio
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extracto malta (crecimiento micelial y levaduriforme) se las investigaciones existentes, reportan estudios micolgicos
repicaron en cultivos puros, lo cual permiti evaluar las del aire ms que aerobacterologa, pero debido a la
caractersticas macroscpicas de las colonias en anverso antigedad del edificio y a las personas que laboran y
(borde, aspecto, consistencia, superficie, tipo de crecimiento residen largos perodos de tiempo en el mismo, se hizo
y exudado), y tambin se evalu el crecimiento reverso necesario evaluar la carga bacteriana, ya que estos agentes
(coloracin, tipo de crecimiento y pigmentacin); finalmente pueden asociarse a infecciones respiratorias y drmicas. Este
se mont una lmina con la tcnica de cinta adhesiva con estudio es comparable con el de Toloza y col (2012), en una
suspensin en azul de lactofenol para hongos de crecimiento investigacin sobre la concentracin y composicin
micelial y un frotis en el caso de las levaduras [6], en ambos microbiana en el ambiente de la biblioteca Jorge Palacios
casos la visualizacin se efectu en el microscopio ptico Preciado de la Universidad Pedaggica y Tecnolgica de
(Olimpus) a travs del objetivo 40X. Colombia donde reportaron una concentracin bacteriana
entre 141,6 y 235,2 UFC/m3, siendo el mismo significativo
Resultados y discusin. ya que ubica el espacio en relacin a la carga bacteriana en
Los valores de temperatura y humedad relativa oscilaron un nivel intermedio de acuerdo al mtodo estndar sugerido
entre 22-27C y 42-46%, respectivamente, con un valor por Isiaq Task Group TG-42 [10]. Por otra parte, De La
promedio de 25C y 43,6%. Estos valores estn acordes con Rosa y col (2000), evaluaron la calidad microbiolgica de
los estndares establecidos por la Sociedad Americana de aire de una zona limpia en una industria farmacutica,
Ingenieros en refrigeracin y condiciones del aire encontrando valores permisibles en el espacio. En
(ASHRAE, por sus siglas en ingls) quienes establecen una Venezuela, los estudios registrados, sealan concentracin
temperatura interior en verano entre 23 y 26 C y una fngica sin la concentracin bacteriana [11].
humedad relativa entre 20 y 60%, como condiciones
aceptables de trabajo en espacios cerrados (preferiblemente
del 30 al 50%) [7]. Las bacterias y hongos no solo se pueden
asociar a patologas en humanos, animales y plantas, sino
que tambin se consideran a nivel ambiental, causa principal Tabla 1. Cuantificacin de colonias bacterianas en las zonas
analizadas en un ambiente climatizado de la FEC-LUZ.
del detrimento de colecciones y archivos [7], estos agentes
microbianos adems pueden actuar como microbio- Compartimentos UFC/m3
1 5,0
deteriorantes, generando daos en los documentos, sobre
2 20,5
todo cuando el espacio climatizado presenta alteraciones
3 3,5
fsicas y qumicas de temperatura y humedad relativa (22C
4 4,0
y 65% respectivamente), ya que facilitan su colonizacin en
5 9,0
el papel existente [8,9].
6 9,5
Se cuantific por el mtodo gravimtrico una carga
7 4,0
bacteriana en todo el espacio de menos de 2000 UFC/m3,
8 4,0
presentando diferentes concentraciones cuantificable entre
9 13,0
cada uno de los espacios evaluados (Tabla 1), no obstante, a 10 55,0
pesar de las variaciones existentes, el ambiente en forma 11 5,0
general, se ubica de acuerdo al estndar establecido por Isiaq 132,5
Task Group TG-42 (2004) en un nivel alto. La mayora de UFC/m3 = Unidades Formadoras de Colonias por metros
cbicos. 1= oficina 1; 2 = Archivo; 3= Unidad de
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Administracin; 4 = Unidad de apoyo al investigador; 5 = 2000 UFC/m3 excediendo los valores permisibles de acuerdo
direccin; 6 = Sala de reuniones; 7= Depsito y Comedor;
a la normativa Isiaq Task Group TG-42 lo cual permite
8 = Secretaria Ejecutiva; 9 = Recepcin; 10= Baos; 11 =
Pasillo principal. ubicarlo dentro de un nivel muy alto [14].
La cuantificacin bacteriana se registr en mayor
Las formas bacterianas predominantes en orden
concentracin que la cuantificacin fngica, ubicndose en
descendientes correspondieron a diplococos (31,15%),
ambos casos en un nivel alto en relacin a estos dos
seguido de estreptococos (22,95%), bacilos (21,31%),
parmetros microbiolgicos. Los contaminantes presentes en
monococos (18,03%) y estafilococos (6,55%). A pesar de
el ambiente penetran en el organismo por inhalacin y por
que en el aire no existe una flora autctona, es bien sabido
tanto afectan inicialmente el tracto respiratorio, pudiendo
que el mismo permite la diseminacin y dispersin de estos
tambin ser absorbidos y afectar a otros rganos o
organismos en el ambiente. Estudios han demostrado que en
acumularse en distintos tejidos [15].
el aire se aslan frecuentemente bacterias esporuladas de los
De forma general, se evaluaron once oficinas dentro del
gneros Bacillus, Clostridium y Actinomicetos, como
ambiente climatizado y el gnero Aspergillus (micelial) y la
tambin es bastante frecuente aislar bacilos pleomrficos
levadura Candida spp, estuvieron presentes en todos los
Gram positivos (Corynebacterium) y los cocos Gram
espacios evaluados encontrndose el valor ms alto para
positivos (Micrococcus y Staphylococcus). Otras bacterias
ambos en el rea de depsito y comedor (Tabla 3). En la
encontradas en menor proporcin corresponden a
Unidad de Apoyo al Investigador (oficina 4) (Tabla 3), se
Flavobacterium y Alcaligenes las cuales tienden a disminuir
encontraron todos los agentes fngicos (miceliales y
en relacin a la altura [12].
levaduriformes), considerndose este espacio con mayor
En la cuantificacin de hongos por el mtodo gravimtrico
prevalencia en relacin a los agentes etiolgicos
el valor fue menor a 500 UFC/m3 considerndose intermedio
identificados. Por su parte, Penicillium spp. solo se encontr
en relacin al mtodo estndar Isiaq Task Group TG-42, no
en archivo y la Unidad de Apoyo al Investigador, en tanto
obstante por el mtodo de impactacin el valor fue menor a
que en Direccin, estuvieron presentes casi todos los agentes
2000 UFC/m3 ubicndose en un nivel alto, pero al igual que
micticos exceptuando Penicillium spp. y Trichosporon spp.
la concentracin bacteriana, se apreciaron variaciones entre
cada uno de los cubculos existentes en el ambiente
Tabla 2. Cuantificacin de colonias fngicas por zonas en un
climatizado (Tabla 2). En la tcnica de impactacin los
ambiente climatizado de la FEC-LUZ.
valores fueron mayores en comparacin con la tcnica de
Colonias
gravimetra, esto se debe a que por impactacin el equipo
Colonias (UFC/m3)
succionador de aire HiAir tiene capacidad de absorber 40 (UFC/m3) por
Oficinas impactacin Gravimetra
litros de aire a 4100 rpm. Sin embargo, la tcnica
1 5,5
gravimtrica sigue siendo una de las ms tiles y aceptables
2 88,88 2,5
[12]. Estos resultados son comparables a un estudio
3 6
realizado en Guatemala, donde cuantificaron hongos en dos
4 94,44 3
laboratorios encontrando carga fngica de 1517,6 UFC/m3 5 122,22 2,5
(Laboratorio 1) y 641 UFC/m3 (Laboratorio 2), donde ambos 6 5,5
espacios se ubicaron en un nivel alto [13]. Por otra parte, 7 105,55 17
Medina y col., en el ao 1999 llevaron a cabo un estudio 8 119,44 3,5
micolgico del aire en las bibliotecas de la Universidad de 9 3,5
Carabobo, reportando una cuantificacin por encima de 10 11
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11 3 aspiradas y de esta manera puedan causar infeccin en el

530,53 63 pulmn y en los senos paranasales [18].

1= oficina 1; 2 = Archivo; 3= Unidad de
Administracin; 4 = Unidad de apoyo al investigador; 5
= direccin; 6 = Sala de reuniones; 7= Depsito y Tabla 3. Porcentajes de mohos y levaduras aisladas en las
Comedor; 8 = Secretaria Ejecutiva; 9 = Recepcin; 10= oficinas de un ambiente climatizado.
Baos; 11 = Pasillo principal.
Genero Aspergillus Fusarium Rhizopus Paecilomyces
n= 202(66,0) n= 45(14,7) n= 27(8,8) n= 25(8,1)
rea
Los hongos miceliales correspondieron a Aspergillus 1 4,4 0 18,5 0
(66,0%), seguido en forma descendente por Fusarium spp. 2 23,2 0 22,2 36,0
3 8,9 13,3 0 16,0
(14,7%), Rhizopus spp. (8,8%), Paecilomyces spp. (8,1%) y 4 7,9 13,3 14,8 4,0
Penicillium spp. (2,2%) (Tabla 3). Entre las levaduras, los 5 10,3 8,8 22,2 4,0
6 1,9 17,7 0 0
gneros encontrados fueron Candida spp. (70,7%), 7 27,2 17,7 18,5 12,0
Rhodotorula spp. (20,7%) y Tricosporom spp. (8,5%) (Tabla 8 9,4 4,4 3,7 24,0
9 1,4 17,7 0 0
3). Una idea de los niveles microbiolgicos habituales en 10 1,4 6,6 0 4,0
zonas de trabajo se muestra en un estudio realizado a lo 11 3,4 0 0 0
1= oficina 1; 2 = Archivo; 3= Unidad de Administracin; 4
largo de tres aos en ms de 1700 edificios de Estados = Unidad de apoyo al investigador; 5 = direccin; 6 = Sala
Unidos, en el que se analizaron los niveles de hongos en de reuniones;
7= Depsito y Comedor; 8 = Secretaria Ejecutiva; 9 =
estos ambientes interiores y en el exterior. Este informe Recepcin; 10= Baos; 11 = Pasillo principal.
mostr una concentracin media de hongos en los interiores
analizados de 80 UFC/m3, con valores mnimos de 0 y Conclusiones.
mximos de hasta 10. 000 UFC/m3. Los ms comunes eran Los organismos dispersos en el aire tienen una gran
Cladosporium spp., Penicillium spp. y Aspergillus spp., importancia biolgica y econmica debido a que los mismos
encontrados en el 62 por ciento de los edificios [16]. son capaces de propiciar enfermedades en plantas, animales
Estudios han sugerido que los ambientes internos y el hombre, en tanto que por otra parte pueden actuar como
presentan caractersticas ms favorables, en comparacin entes biodeteriorantes sobre todo en material impreso
con los externos para el desarrollo de Aspergillus niger y haciendo uso de sus componentes estructurales entre los
Penicillum spp. Igualmente demuestran la presencia de cuales destaca la conformacin de celulosa. En los
Cladosporium spp. entre los gneros predominantes, en este ambientes climatizados no solo prevalecen los agentes
tipo de ambientes. La presencia de hongos cultivables en micticos, sino que las bacterias tambin tienen capacidad
estos ambientes podra tener implicaciones importantes en la de generar patologas en humanos. En esta investigacin se
liberacin de alrgenos a partir de esporas viables y la aisl mayor concentracin de carga bacteriana en
patogenicidad de los hongos viables en individuos comparacin con la concentracin fngica, no obstante estos
inmunomprometidos [17]. dos parmetros microbiolgicos se ubicaron en un nivel alto
Se ha demostrado que Aspergillus spp., as como otros de acuerdo a lo establecido por Isiaq Task Group TG-42. En
gneros fngicos y levaduras, son patgenos oportunistas este sentido es necesario evaluar los agentes fngicos y
que se encuentra ampliamente distribuido en el ambiente, bacterianos de predominancia, as como intervenir el
suele afectar a pacientes con mecanismos de defensa ambiente estudiado de forma que se regule la alta
comprometidos y entre los factores patgenos se encuentra concentracin de estos agentes en el espacio laboral, esto
el pequeo tamao de sus conidias que permite que sean argumentado que el mismo puede perjudicar a las personas
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que laboran por largos periodos de tiempo en el mismo y 6. Barnett HL, Hunter BB. 1987. Ilustrated genera of
imperfect fungi. 3rd edition, Burguess Publishing Co.
puede generar un problema de salud pblica laboral.
Minneapolis.
7. Ministerio del Trabajo y Asuntos Sociales Espaa.
Actualizada. Instituto de Seguridad e Higiene en el
Tabla 4. Porcentajes de mohos y levaduras aisladas en las
Trabajo. NTP 243: Ambientes Cerrados: Calidad del
oficinas de un ambiente climatizado.
Aire.
Genero Penicillium Candida Rhodotorula Trichosporon
http://www.insht.es/InshtWeb/Contenidos/Documentac
n= 7(8,1) n= 58(70,7) n= 17(20,7) n= 7(8,5) ion/FichasTecnicas/NTP/Ficheros/201a300/ntp_243.pd
rea f (acceso 23 de julio de 2013).
1 0 3,4 5,8 28,5 8. Gregory PH. The Microbiology of the atmosphere.
2 42,8 5,1 5,8 14,2 1961. 251pp.
3 0 5,1 5,8 0 http://archive.org/stream/microbiologyofat00greg#page
4 57,1 8,6 5,8 28,5 /250/mode/2up (acceso 23 de julio de 2013).
5 0 12,0 11,7 0 9. Pelczar MJ, Chan EC, Krieg NR. 1993. Microbiology:
6 0 8,6 11,7 0 concepts and applications. 1a Edic. Ed. Mc Graw-Hill,
7 0 24,1 23,5 0 New York.
8 0 13,7 17,6 28,5 10. Toloza DL, Lizarazo LM, Blanco JO. Concentracin y
9 0 1,7 0 0 composicin microbiana en el ambiente de la biblioteca
10 0 15,5 11,7 0 central Jorge Palacios Preciado de la Universidad
11 0 1,7 0 0 Pedaggica y Tecnolgica de Colombia, Tunja,
1= oficina 1; 2 = Archivo; 3= Unidad de Administracin; 4 = Colombia. Actu Biol. 2012. 34 (97).
Unidad de apoyo al investigador; 5 = direccin; 6 = Sala de http://www.sci.unal.edu.co/scielo.php?script=sci_arttex
reuniones; t&pid=S0304-35842012000200010&lng=es&nrm=iso
7= Depsito y Comedor; 8 = Secretaria Ejecutiva; 9 = (acceso 28 de mayo de 2013).
Recepcin; 10= Baos; 11 = Pasillo principal. 11. De La Rosa MC, Ullan C, Prieto MP, Mosso MA.
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