Biologa de Animales II

Estudi de la respuesta elctrica en ojo compuesto de Acocil por medio del

electrorretinograma.
Mendez Vega Gil Alina Marissa1
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Facultad de Ciencias, Universidad Nacional Autnoma de Mxico, Ciudad de Mxico.

RESUMEN.
El electrorretinograma refleja el funcionamiento de las capas de la retina (medias y externas). Este
funcionamiento se aprecia por los cambios que se presentan cuando el ojo del organismo responde a
estmulos luminosos mediante potenciales. En el presente trabajo se estudia cmo responden los
fotorreceptores del ojo compuesto del acocil ante un estmulo luminoso por medio de un
electrorretinograma.

Palabras clave: Electrorretinograma. Fotorreceptores. Ojo compuesto de acocil.

INTRODUCCION. modelo al acocil (Kuwabara & Naka, 1957a). El

El acocil es un crustceo bentnico que, por su
ojo compuesto del acocil (Fig. 1) est
anatoma, facilidad de manejo y por todo el
compuesto de tres capas: el cono cristalino, la
conocimiento que se ha obtenido de l ha
capa receptora y la proximal a la membrana
llegado a ser ampliamente utilizado como
basal.
modelo en neurofisiologa (Barrera Mera, 2013).
Este organismo presenta un ganglio cerebroide
dividido en tres partes, una de las cuales es el
protocerebro que es el encargado de procesar
la informacin visual prcticamente en su
totalidad. Este se divide en tres partes en el
ganglio ptico que se encarga del
procesamiento de la informacin que es recibida
por los fotorreceptores de la retina, el
protocerebro lateral que se localiza en los tallos
pticos y el medial (Vizcarra, 2006 y Nelson,
2014).
La respuesta elctrica del ojo compuesto de
crustceos fue estudiada inicialmente por Ruck Fig. 1. Microfotografa del ojo compuesto de Procambarus.
& Jahn en 1954 y por Hanaoka y colaboradores C: capa del cono cristalino, R: capa de receptores, B:
membrana basal, N: fibra nerviosa (Kuwabara & Naka,
en 1957 ya especficamente usando como
1957a).

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El cono cristalino es una capa situada entre la
crnea y el receptor. La capa receptora se
puede dividir en dos partes: interna y externa, la
externa corresponde a la parte distal de la
retinula y la parte interna surge de la parte basal
de la clula. La parte interior tambin contiene el
rabdomo, que est rodeado por siete clulas de
la retinula. La regin proximal est formada por
fibra nerviosa que procede hacia el ganglio
ptico.
En un artculo publicado por Naka y Kuwabara
en 1956 se registr un electrorretinograma
(ERG) de la superficie corneal del ojo del acocil
(Fig. 2) en donde encontraron que este
constaba de dos componentes
denominaron H-I y H-II. H-I respondi slo
cuando la iluminacin estaba encendida,
mientras que la amplitud de H-II se mantuvo
durante el estmulo (Kuwabara & Naka, 1957a).
Fig. 2. Electrorretinograma de acocil obtenido por Naka y
Kuwabara (Miranda & Moreno, 2016).
Cuando se inserta un electrodo en la crnea del
ojo se puede registrar la respuesta elctrica de
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los receptores cuando reciben el estmulo
luminoso. Esta respuesta es la que se ver
reflejada en el ERG y las caractersticas del
registro que se obtiene dependen del nmero de
receptores que se activan (Miranda & Moreno,
2016).
El ERG no es ms que una suma de
biopotenciales provocados en la retina por un
estmulo luminoso (Peneca et.al., 2005).
OBJETIVOS.
Observar la correlacion entre los componentes
del ERG HI y HII con respecto al pulso de luz,
los cambios en el ERG cuando se est
adaptando la retina a la luz y a la obscuridad.
que
MATERIAL Y MTODOS.
El ejemplar se obtuvo del acuario de la Facultad
de Ciencias UNAM vivo, de aproximadamente
10 cm y se mantuvo en hielo mientras el equipo
era preparado.
Preparacin del sistema de registro.
Se conect la sonda de alta impedancia con los
electrodos para el registro del ERG al
amplificador IsoDAM8A. Se prepar tambin en
Bridge8 con el transductor de luz. La lmpara se
coloc fuera de la jaula de Faraday y por dentro
solo se coloc la fibra ptica. Todos los
dispositivos anteriores quedaron lejos de la
preparacin ya que solo eran nicamente tiles
para tener una referencia del pulso en el
programa de captura. Se calibr el sistema de
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iluminacin, se coloc la sonda de alta Finalmente se insert la punta del electrodo en
impedancia con la pinza para fmur y el clip de la crnea y se comenzaron los registros. (Fig.
tierra se conect con un caimn a la orilla de la 4).
jaula. El electrodo para el ERG se conect en la
terminal roja y se sujet con el sujetador de
acrlico para electrodos. Se coloc finalmente el
microscopio estereoscpico sobre la regin que
contena la preparacin (Fig. 3).

Fig. 3. Dispositivo de montaje para el registro del ERG

(Miranda & Moreno, 2016)
Fig. 4. Preparacin biolgica y respuesta esperada (Miranda
& Moreno, 2016).
Preparacin biolgica.
Primero se utiliz una intensidad luminosa
Se utiliz la cabeza del acocil que se aisl
media aplicando pulsos de 10 segundos,
parcialmente sumergida en solucin Van
despus se utiliz una intensidad luminosa alta.
Harreveld. Esta se coloc en una caja Petri
sobre un aro de plastilina. Se coloc la punta RESULTADOS.
libre de la fibra ptica cerca de la regin ceflica Se obtuvo el registro del ERG usando intensidad

y el electrodo de referencia (pin-caimn) sujet luminosa media e intensidad luminosa alta (Fig.

un alfiler de acero que se mantuvo sumergido 5). Analizando por separado cada toma, cuando

en la solucin salina donde descansaba la se utiliz una intensidad de luz media se pudo

preparacin. Despus se coloc el microscopio observar que cuando se encenda la luz no se

estereoscpico sobre la preparacin. Con el generaban picos en el registro del ERG pero

aplificador IsoDAM8A encendido en la posicin cuando se apagaba la luz los picos si se

Probe select se revis si pasaba la seal. generaban (Fig. 6).

Al utilizar una intensidad de luz alta, cuando se
encendi se produjo un pico y despus ya no se

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produjeron ms (Fig.7). La frecuencia era mayor
cuando la intensidad luminosa era mnima y
aumentaba cuando la intensidad era mayor
(Fig. 8).

ERG

(a) (b) (c)

Pulso
de luz
Fig. 5. Registro
del ERG
utilizando dos tipos
de intensidad
luminosa.
Intensidad luminosa
media (a y b); Intensidad luminosa alta (c).

Con luz

Sin luz

Fig. 6. Registro de ERG utilizando intensidad luminosa baja. Cuando no se aplicaba el estmulo se generaron picos (indicados con
flechas) pero cuando se encenda la luz se dejaban de registrar los picos (indicado con la llave). La frecuencia en los periodos en los que
no se aplicaba el estmulo era ms rpida a comparacin de aquellos en los que si se aplicaba el estmulo que era ms lenta. En los dos
estmulos con intensidad de luz media se obtiene el mismo resultado.

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Con
luz

Sin luz

Fig. 7. Registro de ERG utilizando intensidad luminosa alta. Cuando se encendi la luz se pudo aprecian que se gener un pico en
respuesta al estmulo (flecha y crculo) y luego ya no se observ nada. Cuando no se tena luz se pueden observar la presencia de
algunos picos. Al igual que con la intensidad de luz media, la frecuencia en los periodos en los que no se aplicaba el estmulo era ms
rpida a comparacin de aquellos en los que si se aplicaba el estmulo que era ms lenta.

Influencia de intensidad luminosa sobre la frecuencia.

Frecuencia

Intensidad luminosa

Fig. 8. Influencia de la intensidad luminosa en la frecuencia. Cuando la intensidad luminosa es nula o muy baja, la frecuencia
es muy alta pero cuando se tiene una intensidad luminosa muy alta la frecuencia es muy baja. (en este caso la frecuencia es medida en
tiempo)

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DISCUSION. pueden ser las respuestas a ese estimulo de luz

En los artrpodos la respuesta de los
extra. Tambin es importante recordar que la
fotorreceptores es una despolarizacin
intensidad luminosa influye en la respuesta que
generalmente. Segn un estudio realizado por
se genere.
Naka & Kuwabara el componente HI se da
El acocil es un organismo que es atrado
cuando las clulas fotorreceptoras responden
mayoritariamente por intensidades luminosas
ante el estmulo luminoso mientras que el HII es
bajas. Cuando estas intensidades bajas se
una amplitud mantenida durante el estmulo
presentan el organismo sale a realizar sus
luminoso (Kuwabara & Naka, 1957). Esto
actividades (Fanjul & Hiriart, 1998). Esto podra
ltimo se puede apreciar en la Fig. 7 en donde
estar relacionado al aumento de frecuencia
se obtuvo un pico justo cuando se encendi la
dependiendo de la intensidad de luz que se
luz que sera el componente HI y despus ya no
tenga. Con intensidades luminosas bajas la
se produjo ningn pico que sera el componente
frecuencia es menor ya que es cuando la visin
HII en donde se mantiene la amplitud durante el
del acocil es mejor y cuando la intensidad
estmulo.
luminosa aumenta la frecuencia se ve
Con la intensidad luminosa baja no se observ
aumentada ya que el ojo del organismo no
lo que Naka & Kuwabara nos muestran en sus
funciona tan bien como lo hace con intensidades
resultados del ERG del acocil, por el contrario,
bajas de luz.
se presentaron picos antes de que se
encendiera la luz a intensidad media y ningn CONCLUSION.
Por medio del ERG se pudo observar cmo es
pico cuando se aplic el estmulo. Lo mismo
que funciona la retina del acocil.
ocurri en la intensidad alta, a pesar de que, si
Al comparar los resultados obtenidos con los ya
se observa el pico de respuesta ante el estmulo
publicados se pudieron apreciar ciertas
luminoso, cuando no se tiene luz se pueden
diferencias que nos ayudaron a ver que es
observar picos. Esto pudo haber ocurrido
importante seguir cada paso del protocolo ya
porque en el protocolo utilizado se indicaba que
que se pueden tener variantes que afecten
se deba de adaptar el ojo del acocil a la
nuestros resultados.
oscuridad cubriendo la preparacin lo cual no se
Con este trabajo se demuestra en parte porque
realiz y todo el tiempo estuvo la preparacin
este organismo se considera un buen modelo
expuesta a la luz aparte de la que se utilizaba
para este tipo de estudios.
de la lmpara y los picos que observamos

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circadianas en el acocil Procambarus
REFERENCIAS. clarkii, tesis maestra, Universidad
Nacional Autnoma de Mxico.
Barrera-Mera, B. (2013). El acocil y
otros invertebrados en las Peneca, R., Francisco, M., Santiesteban,

neurociencias Arch Neurocien (Mex). R., Carrero, M. & Mendoza, C. (2005).

Electrorretinograma. Valores normales
Fanjul, M.L., Hiriart, M., Fernndez, F. con diferentes protocolos de estudio.
(1998). Biologa Funcional de los marzo 19, 2017, de Instituto de
Animales. Siglo Veintiuno Editores, Neurologa y Neurociruga La Habana,
Mxico. Cuba Sitio web:
http://bvs.sld.cu/revistas/oft/vol18_2_05/of
Kuwabara, M. & Naka, K. (1957a). Two
t04205.pdf
components of the e.r.g. from the
compound eye of the cray-fish.
Vizcarra, B. Efecto de la D-glucosa sobre
Miranda, M. & Moreno, E. (2016). Manual los mecanismos responsables de la
de Prcticas de Biologa de Animales II. gnesis del electrorretinograma (ERG) en
Mxico: Las Prensas de Ciencias. la retina del acocil Procambarus clarkii en
condiciones in vitro, tesis licenciatura,
Nelson, J. (2014). El RNA mensajero
Universidad Nacional Autnoma de
de la hormona hiperglucemiante de
Mxico.
crustceos presenta oscilaciones