CAPTULO 3.

- BIENESTAR ANIMAL Y FACTORES QUE INFLUYEN EN LA

EXPERIMENTACIN ANIMAL

3.1.- Principios generales. tica. Las 3 Rs

Los principios generales para el bienestar animal son: las 3 erres y el balance
tico.

El principio de las 3 Rs debe su nombre a las tres alternativas que se tienen que
considerar antes de trabajar con animales: REFINAR, REDUCIR y REEMPLAZAR.

Para poder REFINAR nos tenemos que preguntar: con qu trabajo? (especie
elegida, cepa, estandarizacin animal y modelo experimental) y cmo trabajo?
(metodologa, analgesia, anestesia y eutanasia). El refinamiento es la utilizacin de
tcnicas no invasivas que reduzcan el dolor o estrs, o que aumenten el bienestar.
Uso adecuado de analgsicos y anestsicos. Mejorar las condiciones de
estabulacin. Personal entrenado. Adecuado mtodo de eutanasia.

REDUCIR implica no slo el nmero de animales sino tambin la variabilidad

mediante estandarizaciones de procedimientos y diseos experimentales. La
reduccin implica cualquier estrategia que resulta en utilizar un menor nmero de
animales para conseguir la misma cantidad de informacin. Adecuado diseo
experimental. Anlisis estadstico idneo. Planificar la estrategia de I + D. Utilizar
sistemas in vitro para datos iniciales o screening. Aprovechar los distintos rganos
de un animal para diversas lneas de investigacin. Harmonizacin internacional de
protocolos. Realizar bsquedas bibliogrficas para evitar hacer ensayos ya
publicados. Utilizar mtodos ms sensibles y especficos (p.e. animales
transgnicos).

REEMPLAZAR la experimentacin con animales cuando sea posible utilizando

mtodos alternativos. El reemplazo mediante la utilizacin pues de mtodos en los
que no se utilizan animales, incluyendo cultivos celulares y de rganos. Utilizar
modelos muy inferiores en la escala gentica (invertebrados, plantas,
microorganismos). Informacin para evitar duplicaciones innecesarias. Modelos
matemticos. Modelos de simulacin. Tcnicas fsico-qumicas. Embriones (antes de
que el SN est desarrollado). Estudio en humanos (epidemiolgicos, con riesgo
mnimo).
El balance tico defiende que antes de aprobar un experimento se tiene que
considerar el dao (nmero de animales + sufrimiento duracin e intensidad-) que
se va a producir en contraposicin a los beneficios (docentes y de investigacin)
que puede aportar/que aportar.

3.2.- Transporte, instalaciones y condiciones ambientales de ubicacin de

los animales

Disponer de unas instalaciones bien diseadas, construidas, equipadas y

mantenidas, resulta imprescindible para garantizar el bienestar de los animales y la
obtencin de resultados vlidos y reproducibles.

Dentro de una instalacin para animales de laboratorio tiene que haber tres tipos
de zonas: zona destinada a al produccin o mantenimiento, zona para el trabajo
con animales y zona de servicios, garantizndose una adecuada separacin entre
estas reas.

En las reas para mantenimiento de los animales podemos diferenciar:

las zonas de cuarentena o de aislamiento de animales enfermos
las zonas de produccin
las zonas de mantenimiento
las zonas de experimentacin

Una vez llegan a nuestra instalacin desde el centro proveedor responsable,

mediante un transporte adaptado a sus caractersticas, debern pasar por un
perodo de cuarentena, segn la especie, controles sanitarios aportados por el
centro de procedencia, mtodo de transporte utilizado y duracin del mismo.

Las zonas de trabajo con animales deben estar separadas de las zonas de
mantenimiento pero suficientemente cerca como para que los animales no tengan
que recorrer demasiado espacio.

Son reas de servicio los vestuarios, los almacenes, la zona de lavado, la zona de
instalaciones, la zona de almacenamiento y eliminacin de residuos, la zona
administrativa y los pasillos.
3.3.- Nutricin y alimentacin: requisitos nutritivos, tipos de dietas y
regmenes alimenticios

La importancia de la nutricin y alimentacin en los animales de laboratorio radica

en tres aspectos:
condiciona el mantenimiento de la salud y desarrollo del animal
condiciona el bienestar animal
una mala alimentacin puede dar lugar a interpretaciones errneas
en la investigacin.

Los animales necesitan ingerir nutrientes comunes a todos ellos, con independencia
de la especie y del modelo experimental. Los macronutrientes son las protenas, los
hidratos de carbono y las grasas. Los micronutrientes, los minerales y las
vitaminas. Al formular una dieta tenemos que estar seguros que los animales van a
recibir el aporte adecuado de los nutrientes que necesitan (que depender de cada
especie).

La nutricin puede influenciar: el crecimiento, el rendimiento reproductivo y/o

productivo, el estado de salud, el metabolismo y el grado de bienestar.

En muchos experimentos farmacolgicos o toxicolgicos se mide la respuesta a

travs del crecimiento, tamao de camada, composicin corporal, anlisis
sanguneos, cambios patolgicos, por tanto una nutricin inadecuada puede
provocar artefactos en los resultados.

En cuanto a la dieta, se tienen que tener en cuenta factores externos: composicin

del alimento, cantidad y calidad y factores internos del animal como la capacidad
de metabolizar adecuadamente lo que les administramos. La dieta tiene que
considerarse segn la ingesta del animal que puede depender de la edad y del
modelo utilizado.

La eleccin de la dieta depender en cada caso del nivel de definicin de los

componentes y concentracin de los mismos, de los problemas de alimentacin por
parte del animal, de la posibilidad de esterilizar y/o de la necesidad de incorporar
otros productos.
Existen diferentes tipos de dietas: sobre dosificadas (ms cantidad de un
compuesto o producto), deficientes (deficientes en algn compuesto), o carentes
(sin algn compuesto).

Los regmenes que ms se utilizan en experimentacin animal son: ad libitum (el

animal tiene libre acceso al alimento las 24 horas del da, alimentacin restringida
(implica una restriccin diettica moderada, sin que se produzcan deficiencias de
ningn nutriente o implique desnutricin del animal), alimentacin horaria o
controlada (se permite a los animales que consuman toda la comida que quieran
pero slo durante perodos fijos del da) y la alimentacin a al par (consiste en
tener un grupo control que ingiera la misma cantidad de alimento que el grupo
experimental, el cual tiene una alimentacin restringida).

3.4.- Microbiologa y enfermedades del animal de laboratorio. Influencia en

la investigacin

Las tcnicas para generar y mantener animales libres de contaminacin micorbiana

constituyen una herramienta para obtener animales de calidad y caractersticas
microbiolgicas definidas o libres de organismos que puedan interferir en la
investigacin.
Los animales que carecen completamente de organismos asociados se denominan
axnicos o libres de grmenes; los holoxnicos son los animales que poseen una
flora convencinal o no modificada; los animales asociados a organismos conocidos
se denominan gnotobiotas. La introduccin microbiana intencionada suele
designarse como asociacin, a diferencia de la contaminacin que es accidental.

Tipos de animales de experimentacin en funcin de su condicin

sanitaria y atendiendo a su forma de obtencin (Ziga JM y cols, 2001)

Tipos de animales Caractersticas y forma de obtencin

Gnotobiticos Se conoce su flora microbiana. Se obtienen por cesaria
asptica, se desarrollan y permanecen siempre en
aisladores.
Axnico Estriles, carecen de agentes patgenos. Criados y
mantenidos en aisladores.
Gnotoxnicos Proceden de axnicos, pero albergan los organismos
que se les ha implantado. Se cran y mantienen en
aisladores.
Agnotobiticos Nunca se cran en aisladores. El tiempo puede influir en
 su categora.
Heteroxnicos Libres de grmenes patgenos. Se obtienen por cesrea
asptica, son criados y mantenidos en condiciones
ambientales especialmente concebidas para evitar una
contaminacin por agentes patgenos especficos para
su especie.
Holoxnicos Criados y mantenidos en condiciones ambientales no
(convencionales) definidas, pueden ser portadores de infecciones,
latentes o no.
Neoholoxnicos Axnicos o heterxenicos, recriados en instalaciones de
alta o baja calidad.

El estado de salud del animal de laboratorio puede ejercer una profunda influencia
en los resultados experimentales, alterando la respuesta inmunitaria, alteraciones
fisiolgicas (p.e. reproduccin) o del comportamiento, contaminacin potencial de
cultivos celulares y otros productos biolgicos, susceptibilidad a otras causas de
enfermedad, etc., a la vez que puede disminuir la vida media del animal.

Para evitar el riesgo de infeccin, las instalaciones se disean con diversas barreras
fijas para prevenir cualquier fuente de contaminacin. Corresponde a la direccin
de la unidad de produccin y experimentacin definir qu organismos son
inaceptables en la barrera. No existe un mtodo universalmente aceptado en
cuanto al control sanitario de los animales de experimentacin pero s se han
publicado recomendaciones como las de la Federacin Europea de Asociaciones de
Animales de Laboratorio (FELASA), que contienen listas con los organismos de
importancia para cada especie de laboratorio y sus respectivos mtodos de anlisis.
Los centinelas son animales microbiolgicamente definidos que se mantienen junto
con los inmunodeficientes con el objeto de usarlos para los controles sanitarios,
estos se sacrifican peridicamente para controles sanitarios. La desventaja de los
centinelas es que dependiendo del agente infeccioso, pueden requerir largo tiempo
de exposicin antes de contagiarse y en ciertos casos no llegan a contagiarse. La
informacin obtenida en el control microbiolgico permite evaluar el funcionamiento
de las barreras.

Las causas de las enfermedades que afectan a animales de laboratorio pueden ser:
infecciosas (patgenos, oportunistas, zoonosis, flora normal)
nutricionales y metablicas
degenerativas y de edad avanzada
neoplasias
hereditarias y ambientales
Las enfermedades pueden ser clnicas (presentan sintomatologa) o subclnicas
(inaparentes). Las enfermedades subclnicas pueden tener efectos negativos en la
investigacin ya que al no presentar sintomatologa son ms difciles de detectar.
Las principales patologas de los animales de experimentacin pueden agruparse
en:
enfermedades del sistema respiratorio
sintomatologa general: disnea, secrecin nasal y ocular, olfateo y estornudos,
inapetencia y prdida de peso, postura encorvada, mal aspecto de pelaje,
cromodacriorrea (lgrimas rojas rata-)

enfermedades del sistema digestivo

enteritis
sintomatologa general: anorexia y depresin del estado general, retraso del
crecimiento/prdida de peso, diarrea, deshidratacin, mal estado del pelaje,
arqueamiento del lomo, distencin abdominal, mortalidad variable.

parasitosis intestinales
ectoparsitos (caros)
sintomatologa general: prurito variable, dematitis alopcica, descamativa, costrosa,
localizacin variable.

enfermedades del sistema nervioso

sintomatologa general: alteraciones de la marcha, paresia, parlisis de 1/3 posterior,
temblores, ataxia, inclinacin de la cabeza, torneo, convulsiones, epistotonos,
incontinencia urinaria.

Segn la enfermedad concreta y el animal de experimentacin tendremos

diferentes cuadros clnicos, histopatologas e interferencias en la investigacin. Por
tanto es de suma importancia mantener unos controles sanitarios para garantizar la
fiabilidad y la reproductividad de los resultados experimentales. Se verificar
peridicamente el estado de los animales mediante examen fsico y exploracin
(conducta en jaula, peso del animal, piel, regin ano-genital, ojos).

Los animales se mantendrn en cuarentena antes de alojarlos definitivamente en el

estabulario. La cuarentena es muy importante para detectar enfermedades previas
y para que los animales puedan aclimatarse de forma que se garantice su
adaptacin fisiolgica y nutricional antes del comienzo del experimento.
3.5.- Factores que influyen en el comportamiento

La homeostasis sera el estado en que se encuentra el animal cuando est en

armona consigo mismo (conducta y fisiologa) y con el entorno. La homeostasis
implica que los aspectos del medio interno (temperatura corporal, glucosa en
sangre, contenido en agua del cuerpo, etc.) y del ambiente (la posicin que se
ocupa en un grupo social, etc.) se mantendrn en un nivel constante o al menos
predecible.

El estrs es la alteracin de la homeostasis del animal en condiciones extremas. Por

tanto cualquier situacin que provoque estrs puede modificar la conducta del
animal ya que la conducta es un medio importante para obtener y mantener la
homeostasis, del medio interno y externo. Las fuentes de estrs pueden ser fsicas,
como el dolor, el hambre, fro etc. o psicolgicas como el hacinamiento o el
aislamiento y mixtas.

Es de suma importancia conocer y tener un control de todos esos factores cuando

los datos que recogemos del experimento son variables de la conducta del animal,
ya que pueden ser variables extraas que no estn influyendo en los resultados.