Anda di halaman 1dari 6

Qu es un punto isosbstico en espectroscopa y qu revela

A menudo ocurre que cuando registramos los espectros UV-visible(*)


de una sustancia en diferentes condiciones y superponemos los
espectros para compararlos, observamos que todos se cortan en uno
o varios puntos. Estos puntos se llaman isosbsticos, nombre que
viene a significar igual extincin en referencia al coeficiente de
extincin o absorcin molar, de la ley de Beer (ms abajo
hablamos de ella).

El punto o los puntos isosbsticos (pues pueden aparecer varios)


corresponden a una longitud de onda determinada, cumplindose
que para esa longitud de onda la absorbancia total de la muestra no
cambia aunque esta experimente una reaccin qumica o cambio
fsico. As pues, un punto isosbstico es un valor de la longitud de
onda para el que la absorbancia se mantiene constante aunque se
modifiquen algunas variables como la temperatura, el pH, etc.

Veamos un ejemplo. La imagen siguiente representa 8 espectros UV-


visible de un cido orgnico monoprtico dbil que
llamaremos HA registrados en diferentes condiciones de pH. Lo que
se ha hecho es ir agregando pequeas cantidades de un cido
fuerte o una base fuerte a otras tantas disoluciones de HA para
cambar sus valores de pH. El espectro azul corresponde a la
disolucin ms bsica; el rojo a la ms cida.

En lo que sigue explicaremos por qu surgen puntos isosbsticos.


Como se sabe, en disolucin el cido HA estar en equilibrio con su
base conjugada A de este modo:

HA + H2O A + H3O+

Si a una disolucin de HA le agregamos cierta cantidad de un cido


fuerte inorgnico, por el principio de Le Chtelier sabemos que el
equilibrio se desplazar hacia la izquierda. Efectivamente, los iones
H3O+ provenientes del cido fuerte se combinarn con A para dar
ms HA. Y, al contrario, si agregamos un hidrxido, sus iones
OH reaccionarn con los H3O+ y eso provocar que HA se disocie ms
para restablecer el equilibrio. Es decir, se generar ms especie A.

En cualquier caso, lo que debe quedar claro es que cuando


registramos un espectro del cido HA, lo que obtenemos en
realidad es la suma de dos espectros: el de la especie HA
propiamente y el de la especie A en equilibrio con
HA. (En espectroscopa visible, el espectro de una especie
protonada se diferenciar muy bien del de la especie sin protonar si
ambas presentan colores muy diferentes, como es el caso, segn se
observa en el espectro). Como el espectro que se observa es la suma
de los espectros de ambas especies, la forma del espectro observado
va a depender de la proporcin relativa de las especies HA y A,
proporcin que, como decimos, depende del pH:

Para fijar ideas, supongamos que el espectro rojo se ha obtenido en


condiciones de pH muy bajo y que, por tanto, es el espectro de la
especie HA pura, sin apenas presencia de A. Y que el

espectro azul es el de la especie A pura. (De hecho, muy
probablemente se ha trabajado para que sea as.)

Punto isosbstico
El punto en el que los espectros azul y ojo se cortan, sealado con un
asterisco en la figura, se llama punto isobstico, como hemos dicho.
Para entender su significado tenemos que hacer primero algunas
consideraciones.

En un espectro UV-visible, la altura de la curva (medida en el eje


Y) para un valor determinado de longitud de onda (medido en el eje
X) es el valor de la absorbancia a esa longitud de onda. Por ejemplo,
en el punto isosbstico de la imagen anterior, que aparece a poco
ms de 500 nm de longitud de onda, la absorbancia es algo mayor
de 0,3.

En general, la magnitud absorbancia (A) viene definida por la ley de


Beer:

A=cl

donde es el llamado coeficiente de absorcin molar,


que depende de la longitud de onda a la que se mide la
absorbancia; c es la concentracin en disolucin de la especie
absorbente y l es la longitud del camino ptico que recorre la
radiacin dentro de la muestra.

Concentracin total de las especies HA y A


Observemos de nuevo el equilibrio

HA + H2O A + H3O+

Supongamos que en el momento en que preparamos la disolucin del


cido HA lo hicimos pesando la cantidad adecuada ara que este cido
tuviera en disolucin una concentracin c. Ahora bien, en realidad, en
disolucin esa ser su concentracin total, ya que parte de esta
sustancia estar en forma de HA y parte en forma de A. En cualquier
caso, siempre se va a cumplir esta relacin:

c = cHA + cA

Esto es as porque por cada molcula de HA que se rompe se forma


una de A. Por lo tanto, el nmero total de ambos tipos de molculas
ser constante.

Concentraciones de las especies en las disoluciones que dan lugar a


los espectros rojo y azul
En el caso de la disolucin que da lugar al espectro rojo, como hemos
dicho, todo el cido HA se encuentra propiamente en la forma HA.
Por tanto, el espectro rojo se ha registrado de una disolucin en la
que la concentracin de HA es la total, c. Un modo de probar
matemticamente lo razonado es aplicar la ecuacin anterior para
este caso: .

c = cHA + cA = cHA+ 0 = cHA

Correspondientemente, en el caso de la disolucin que da lugar al


espectro azul, podemos decir por el mismo razonamiento anterior que
la concentracin de A ser, igualmente, c.

Ley de Beer para las disoluciones que dan lugar a los


espectros rojo y azul
La aplicacin de la ley de Beer expuesta ms arriba a las
disoluciones que dan lugar a los espectros rojo y azul nos dar estas
expresiones generales:

AHA = HA cHA l

AA = A cA l

Pero haciendo uso de las conclusiones que hemos sacado sobre las
concentraciones cHA y cA en las disoluciones que dan lugar a los
espectros rojo y azul, las expresiones anteriores se convierten en:
AHA = HA c l

AA = A c l

Por otra parte, en el punto isosbestico las absorbancias son iguales.


Entonces podemos igualar las dos expresiones anteriores
para AHA y A;

HA c l = A c l

de donde se deduce inmediatamente que:

HA = A

lo que confirma lo que habamos adelantado: para la longitud de


onda correspondiente al punto isosbstico los coeficientes de
absorcin molar de las especies en equilibrio son iguales.

Todos los espectros se cortan en el mismo punto


Ahora vamos a demostrar algo ms: que si los espectros de las
disoluciones de pH extremos se cortan en un punto, todos los
espectros de las disoluciones de pH intermedios se deben cortar
tambin en el mismo punto..

Supongamos una disolucin de pH intermedio en la que coexistan las


especies HA y A. Existe una ley llamada de aditividad de las
absorbancias segn la cual si no existen interacciones
intermoleculares significativas entre ambas especies (como es el
caso), la absorbancia total, A (que es la que observamos en el
espectro) se puede expresar como la suma de las absorbancias de las
especies existentes:

A = AHA + AA

Aplicando a las absorbancias de las especies HA y A la ley de Beer:

A = HA cHA l + A cA l

Vamos a particularizar esa frmula para calcular la absorbancia


total de cualquiera de las disoluciones a la longitud de onda
del punto isosbstico. Como hemos demostrado ms arriba que en
dicho punto se cumple esto:

HA = A

la frmula para la absorbancia total de cualquier disolucin en


el punto isosbstico podremos escribirla as:

A = HA cHAl + HA cA l

Pero recordemos que en todo momento se ha de cumplir:

c = cHA + cA
y, por tanto:

cA = c cHA

Sustituyendo el valor anterior de cA en la expresin de


la absorbancia total a la que habamos llegado:

A = HA cHAl + HA(c cHA)l

Simplificando:

A = HA c l

que es exactamente el mismo valor de absorbancia calculado ms


arriba para la absorbancia de la especie HA pura, el cual que
recordemos que era:

AHA = HAcl

Por lo tanto, y en general, a la longitud de onda del punto


isosbstico, la absorbancia total, A, de cualquiera de las
disoluciones del cido, a cualquier valor de pH y por tanto para
cualquier proporcin relativa HA/A, ser la misma que la de la
especie HA en ese mismo punto. .

Diremos finalmente que la aparicin de puntos isosbsticos


cuando se registran varios espectros de disoluciones de una
misma sustancia en distintas condiciones suele ser la mejor
prueba de que en esas disoluciones coexisten dos o ms
especies en equilibrio.

(*) Los puntos isosbsticos no solo aparecen en espectroscopa


UV-visible. Pero hemos tomado el ejemplo de esta tcnica porque en
los espectros UV-visible se observan especialmente bien.

un punto isosbstico es una longitud de onda, un nmero de onda o


una frecuencia especfica en la que la absorbancia total de una
muestra se mantiene constante durante una reaccin qumica o un
cambio de estado de la muestra. En este punto, todas las especies
qumicas tienen la misma capacidad de absorcin molar. Este punto
representa una coordenada en un diagrama isosbstico para los que
el espectro de absorcin de dos especies se cruzan, esta ltima
afirmacin se verifica si se muestran las absorciones molares. En
otras palabras, el punto isosbstico es una longitud de onda para la
que estas sustancias tienen el mismo coeficiente de extincin.

Dos sustancias pueden tener varios puntos isosbsticos en el mismo


espectro.

Para la reaccin:
analtico de la concentracin es la misma en todos los puntos:

La absorbancia de la mezcla de reaccin es:

O en el punto isosbstico, los dos son absortividades molares


idnticos:

Por lo tanto, la absorbancia

no depende de la magnitud de la reaccin.

Aplicaciones

En la cintica qumica, los puntos isosbsticos se utilizan como puntos


de referencia en el estudio de las velocidades de reaccin, la
absorbancia a estas longitudes de onda es constante durante toda la
reaccin. Contrariamente a una idea comnmente aceptada, la
existencia de un punto de isosbstico no prueba que hay una
conversin cuantitativa de una especie a otra, o de un equilibrio entre
dos nicas especies. La observacin de un puntos isosbsticos slo
indica que la estequiometra de la reaccin no cambia durante la
reaccin qumica, y no hay reaccin secundaria se produce durante el
perodo de anlisis.

Los puntos isosbsticos se utilizan en medicina en una tcnica de


laboratorio llamada de oximetra para determinar la concentracin de
hemoglobina, independientemente de la saturacin. La
oxihemoglobina y desoxihemoglobina tienen puntos isosbsticos a
590 y 805 nm.

Los puntos isosbsticos tambin se utilizan en la qumica clnica, tal


como el mtodo de garanta de calidad, para verificar la exactitud de
una longitud de onda de un espectrofotmetro. Esto se hace midiendo
el espectro de una sustancia estndar para dos condiciones de pH
diferentes. Las sustancias utilizadas como estndar incluyen
dicromato de potasio, bromotimol azul y rojo Congo. La longitud de
onda determinada para un punto isosbstico no depende de la
concentracin del compuesto usado y, como tal, se hace una
referencia muy fiable