Anda di halaman 1dari 10

Amila Khairina

240210100018

VI. PEMBAHASAN

Pada praktikum kali ini praktikan mengamati bentuk bakteri dan


khamir. Tujuan dari praktikum ini adalah agar mahasiswa dapat
membedakan bentuk bakteri dan khamir. Pengamatan bakteri dan khamir
tersebut dilakukan melalui mikroskop. Untuk akhirnya dapat mengamati
bakteri dan khamir praktikan harus melakukannya sesuai prosedur.

Pada pengamatan bakteri, pertama-tama praktikan melakukan


pengamatan pada objek gelas yang telah dioleskan Ose suspense bakteri
kemudian memfiksasikannya. Ini dilakukan untuk membuat film. Kemudian
setelah film jadi,praktikan melakukan pewarnaan gram. Pewarnaan gram ini
dilakukan untuk mengidentifikasi mikroorganisme dan mengetahui jenis &
bahaya mikroorganisme itu sendiri. Pada pewarnaan gram ini diteteskan
pewarna kristal violet, lugol, alkohol 95%, dan safranin. Untuk tiap-tiap
penetesan, ditetapkan waktu sebelum dibilas dengan air agar larutan tersebut
menyerap. Pewarna kristal violet dibiarkan selama satu menit, lugol
dibiarkan selama satu menit, alkohol 95% dibiarkan selama 10-20 detik, dan
safranin selama 20 detik. Setelah itu barulah bakteri dapat diamati pada
mikroskop.

Pewarnaan gram adalah pewarnaan diferensial yang sangat berguna


dan paling banyak digunakan dalam laboratorium mikrobiologi, karena
merupakan tahapan penting dalam langkah awal identifikasi. Pewarnaan ini
didasarkan pada tebal atau tipisnya lapisan peptidoglikan di dinding sel dan
banyak sedikitnya lapisan lemak pada membran sel bakteri. Jenis bakteri
berdasarkan pewarnaan gram dibagi menjadi dua yaitu gram positif dan
gram negatif. Bakteri gram positif memiliki dinding sel yang tebal dan
membran sel selapis. Sedangkan bakteri gram negatif mempunyai dinding
sel tipis yang berada di antara dua lapis membran sel.

Bakteri gram positif berwarna ungu karena dinding sel bakteri


tersebut dapat mempertahankan zat warna ungu dari larutan kristal violet
Amila Khairina
240210100018

ketika dicuci dengan alkohol. Sedangkan bakteri gram negatif berwarna


merah karena dinding sel bakteri gram negatif tidak dapat mempertahankan
zat warna ungu dari larutan kristal violet ketika dicuci dengan alkohol dan
menyerap zat warna ke dua yaitu larutan safranin yang berwarna merah.
Dinding sel bakteri gram negatif mengandung substansi lemak yang jauh
lebih tinggi dari pada dinding sel bakteri gram positif, sehingga ketika
dicuci dengan alkohol terjadi ekstraksi senyawa lipid dan mengakibatkan
permeabilitas dinding sel bakteri gram negatif membesar. Akibatnya zat
warna pertama yaitu larutan kristal violet yang telah masuk ke dalam
dinding sel bakteri gram negatif kehilangan zat warna tersebut.

Hal-hal yang perlu diperhatikan dalam pewarnaan gram adalah sbb:

Fase yang paling kritis dari prosedur di atas adalah tahap dekolorisasi
yang mengakibatkan CV-iodine lepas dari sel. Pemberian alkohol jangan
sampai berlebih yang akan menyebabkan overdecolorization sehingga sel
gram positif tampak seperti gram negatif. Namun juga jangan sampai terlalu
sedikit dalam penetesan alkohol (underdecolorization) yang tidak akan
melarutkan CV-iodinesecara sempurna sehingga sel gram negatif seperti
gram positif.

Preparasi pewarnaan gram terbaik adalah menggunakan kultur muda yang


tidak lebih lama dari 24 jam. Umur kultur akan berpengaruh pada
kemampuan sel menyerap warna utama (CV), khususnya pada gram positif.
Mungkin akan menampakkan gram variabel yaitu satu jenis sel, sebagian
berwarna ungu dan sebagian merah karena pengaruh umur. Walaupun ada
beberapa species yang memang bersifat gram variabel seperti pada genus
Acinetobacter dan Arthrobacter.
Amila Khairina
240210100018

4.1. Tabel Pengamatan Bakteri

Hasil Gra Jenis Bakteri


Perbesara Bentu
Kode Bakteri Pewarnaa m+/
n k
n -
A Lactobacillus
Bacillu acidophilus
s
160/0,17 Ungu (batang (+)
)

B Bifidobacteriu
Bacillu m
s
10/0,25 Ungu (+)
(batang
)

C Lactobacillus
bulgaricus
Bacillu
s (+)
16x20 Ungu
(batang
)

D Streptococcus
thermophilus

Coccus
16x40 Ungu (+)
(bulat)

Tabel pengamatan di atas menunjukan bahwa sample A adalah


Lactobacillus acidophilus, sample B adalah Bifidobacterium, sample C
adalah Lactobacillus bulgaricus, dan sampel D adalah Streptococcus
thermophilus. Semua jenis bakteri ini adalah termasuk ke dalam golongan
Amila Khairina
240210100018

positif, karena saat diamati dibawah mikroskop warna yang ditimbulkan


adalah ungu. Semua jenis bakteri ini juga adalah salah satu dari delapan
genera umum dari bakteri asam laktat.

Menurut tabel diatas didapatkan bahwa sample A itu adalah jenis


bakteri Lactobacillus acidophilus. Bakteri ini berbentuk bacillus (batang).
Yang merupakan gram positif karena menimbulkan warna ungu.
Lactobacillus acidophilus adalah salah satu dari delapan genera umum
dari bakteri asam laktat. Tiap genus dan spesies nya mempunyai
karakteristik yang berbeda. Namun, secara umum mereka merupakan
bakteri gram positif berbentuk kokus atau batang, bersifat non motil, dan
nonspora yang memproduksi asam laktat sebagai produk utama dari
metabolisme fermentasi dan menggunakan laktosa sebagai
sumber karbon utama dalam memproduksi energi. L. acidophilus dapat
tumbuh baik dengan oksigen ataupun tanpa oksigen, dan bakteri ini dapat
hidup pada lingkungan yang sangat asam sekalipun, seperti pada pH 4-5
atau dibawahnya dan bakteri ini merupakan bakteri homofermentatif yaitu
bakteri yang memproduksi asam laktat sebagai satu-satunya produk
akhir. Bakteri ini merupakan bakteri Lactobacillus yang dikenal sangat baik,
umumnya bakteri ini ditemukan di dalam gastro intestinal manusia, hewan,
mulut, dan vagina.

Setelah praktikan memakai sample B untuk mengamati bakteri,


didapatkan hasil yaitu bakteri sample B termasuk ke dalam klasifikasi
bakteri gram positif, karena warna yang ditimbulkan adalah ungu.
Pengamatan melalui mikroskop menunjukan bahwa bakteri sample B
termasuk jenis bakteri Bifidobacterium . Bifidobacterium itu tidakbsa berdiri
sendiri, karena membutuhkan pendamping. Jenis bakteri ini menurut
literatur adalah berbentuk bacillus (batang), tetapi saat praktikum
didapatkan bentuknya coccus (bulat). Ini mungkin terjadi karena banyak
kontaminan yang sudah mengkontaminasi objek gelas, sehingga yang
terlihat di mikroskop adalah berbentuk coccus (bulat). Meskipunn bunsen
Amila Khairina
240210100018

selalu dinyalakan, tetepi bukan berarti kontaminan tidak akan ada. Banyak
faktor yang menyebabkan ini terjadi. Bentuk ini dapat dilihat pada
perbesaran 10/0,25. Meskipun saat di mikroskop warna yang timbul adalah
warna merah, bukan berarti bakteri sample B ini termasuk bakteri gram
negatif, karena mungkin ini disebabkan oleh pengaturan cahaya yang
berlebihan pada mikroskop. Tetapi setelah dilihat pada objek gelas yang
ditimbulkan adalah warna ungu. Ini dibuktikan oleh timbulnya warna ungu
pada film yang telah dilakukan pewarnaan gram.

Sample C adalah termasuk jenis bakteri Lactobacillus bulgaricus.


Dari tabel pengamatan yang telah ada, bakteri jenis ini berbentuk bacillus
(batang). Terlihat jelas dari nama bakterinya. Bentuk ini didapat pada
perbesaran 16x20. Bakteri ini juga termasuk ke dalam golongan gram
positif, karena warna yang ditimbulkan adalah ungu. Lactobacillus
bulgaricus atau biasa disebut bakteri probiotik biasa ditemukan dalam
komposisi yoghurt. Bakteri ini adalah satu-satunya bakteri yang tidak akan
rusak oleh organisme makhluk hidup lainnya. (Metchnikoff,2007)

Berdasarkan tabel pula, sample D adalah bakteri jenis Streptococcus


thermophilus. Dilihat dari namanya jelas bakteri ini berbentuk coccus
(bulat). Bakteri ini termasuk gram positif karena saat dilihat di bawah
mikroskop, warna yang ditimbulkan adalah warna ungu. Dapat dilihat
dengan perbesaran 16x40. Streptococcus thermophilus biasa dipakai untuk
pembuatan yoghurt,keju mozarella,dll. Karena sifatnya bakteri yang
menguntungkan, maka dari itu bakteri jenis ini aman dipakai untuk
dikonsumsi manusia.

Pada pengamatan bentuk khamir yang telah dilakukan, praktikan


memakai khamir berupa Sacharomyces cereviceae. Khamir biasa disebut
juga dengan sebutan Yeast atau ragi dalam bahasa Indonesia. Dan ragi yang
kita amati saat pengamatan bentuk khamir adalah ragi yang biasa dipakai
untuk pembuatan roti. Prosedur yang dipakai tidak terlalu sulit. Pertama-
Amila Khairina
240210100018

tama objek gelas dibersihkan dengan kapas yang sudah diberi alkohol 70%
kemudian dikeringkan. Lalu satu Ose suspense khamir dioleskan pada
permukaan objek gelas dan bentuk khamir diamati di bawah mikroskop.

Hasil yang didapat melalui pengamatan di bawah mikroskop adalah


khamir dapat dilihat pada perbesaran 160/0,17. Pada mikroskop warna yang
terlihat dari khamir tersebut adalah warna coklat dan kira-kira bentuk jenis
khamir yang terlihat di mikroskop adalah berbentuk silindrikal. Selnya pun
berkoloni.
Amila Khairina
240210100018

VII. KESIMPULAN

Lactobacillus acidophilus, Bifidobacterium, Lactobacillus


bulgaricus, dan Streptococcus thermophilus adalah jenis bakteri
gram positif dan salah satu dari delapan genera umum dari bakteri
asam laktat;

Bakteri gram positif berwarna ungu karena menyerap zat warna dari
larutan kistal violet;
Bakteri gram negatif berwarna merah karena menyerap zat warna
safranin;
Dinding sel bakteri gram positif memiliki lapisan peptidoglikan yang
lebih tebal di bandingkan dengan bakteri gram negatif;
Bakteri gram negatif tidak dapat mempertahankan zat warna ungu
ketika dicuci oleh alkohol.
Khamir jenis Sacharomyces cereviceae berbentuk silindrikal.
Amila Khairina
240210100018

DAFTAR PUSTAKA

Fardiaz, S. 1992. Mikrobiologi Pangan 1.Gramedia Pustaka Utama, Jakarta.

Buckle, K.A., R. A. Edwards, G. H. Fleet, M. Wootton. 1987. Ilmu Pangan.


Universitas Indonesia, Jakarta.

Sumanti, Debby dan Een Sukarminah. 2008. Diktat Penuntun Mikrobiologi


Pangan I. Universitas Padjajaran, Jatinangor.

http://ekmon-saurus.blogspot.com/2008/11/bab-5-morfologi-mikroba.html

Diakses p ada : 3 Maret 2011 (22:28)

http://id.wikipedia.org/

Diakses pada : 4 Maret 2011 (23:15)


Amila Khairina
240210100018

LAMPIRAN JAWABAN PERTANYAAN

1. Sebutkan kemungkinan jenis bakteri dan khamir sesuai dengan


penglihatan di mikroskop (dilihat dari bentuk dan pewarnaan
gram)!
Jawab :

1. Khamir Saccaromyces oryzae berbentuk ovoidal

2. Bakteri berbentuk Lactobacillus acidophilus coccus (bulat) dan


berwarna ungu (gram positif)

3. Bakteri Bifidobacterium berbentuk coccus (bulat) dan berwarna


ungu (gram positif)

2. Mengapa pada bakteri harus dilakukan pewarnaan gram


sebelum dilihat dibawah mikroskop?

Jawab :

Karena bentuk bakteri yang identik atau mirip, sehingga


pewarnaan gram ini penting untuk mengidentifikasi bentuk
bakteri dan mengetahui bahaya dari bakteri itu sendiri. Maka
dibedakan menjadi dua jenis,yaitu gram positif dan gram
negatif.

3. Sebutkan fungsi pewarna Kristal violet dan safranin pada


pewarnaan gram!
Amila Khairina
240210100018

Jawab :
Safranin akan mewarnai sel gram negatif menjadi berwarna
merah, sedangkan gram positif tidak terpengaruh safranin
hanya berfungsi sebagai pengontras saja.
Kristal Violet akan mewarnai seluruh permukaan sel bakteri
gram positif maupun gram negatif.

Anda mungkin juga menyukai