Anda di halaman 1dari 8

Persiapan biokompatibel enterotoksin tahan panas subunit B-sapi nanopartikel serum albumin

untuk meningkatkan pemberian obat tumor bertarget melalui panas- labil enterotoksin subunit
B mediasi

Abstrak: enterotoksin subunit B (LTB) labil panas-adalah protein non-katalitik dari


pentameric sebuah subunit dari Escherichia coli. Berdasarkan fungsinya mengikat secara
khusus untuk ganglioside GM1 di permukaan sel, sebuah novel nanopartikel (NP) yang
terdiri dari campuran sapi albumin serum (BSA) dan LTB dirancang untuk pengiriman
ditargetkan dari 5-fluorouracil ke sel-sel tumor. BSA-LTB NP yang ditandai dengan
penentuan mereka ukuran partikel, polidispersitas, morfologi, obat efisiensi enkapsulasi, dan
perilaku pelepasan obat in vitro. Internalisasi fluorescein isothiocyanate-berlabel BSA-LTB
NP ke dalam sel diamati menggunakan pencitraan neon. Hasil penelitian menunjukkan bahwa
BSA-LTB NP disajikan distribusi ukuran yang sempit dengan rata-rata diameter
hidrodinamik dari sekitar 254 19 nm dan potensi rata zeta kira- imately -19,95 0,94 mV.
Selain itu, sekitar 80,1% dari obat yang dikemas dalam NP
dan dirilis pada pola biphasic. The 3- (4,5-dimethylthiazol-2-yl) -2,5- diphenyltetrazolium
bromide (MTT) assay menunjukkan bahwa BSA-LTB NP menunjukkan aktivitas sitotoksik
lebih tinggi dari
non-target NP (BSA NP) dalam sel SMMC-7721. Hasil pencitraan neon membuktikan
bahwa,
dibandingkan dengan BSA NP, BSA-LTB NP sangat bisa meningkatkan serapan seluler. Oleh
karena itu,
Hasil penelitian menunjukkan bahwa BSA-LTB NP bisa menjadi nanocarrier potensi untuk
meningkatkan pengiriman ditargetkan
5-fluorouracil ke sel-sel tumor melalui mediasi LTB.
Kata kunci: labil panas enterotoksin subunit B, nanopartikel, bovine serum albumin,
5-fluorouracil
pengantar
Kanker adalah kelas penyakit yang ditandai dengan pertumbuhan sel out-of-control. Ada
lebih dari 100 jenis kanker yang berbeda, dan masing-masing diklasifikasikan berdasarkan
jenis sel yang
awalnya terpengaruh. Meskipun pengobatan klinis untuk kanker telah dibuat cukup
kemajuan dengan perbaikan teknik bedah, aplikasi luas technol- baru
ogy, dan pengembangan klinis obat baru, kanker tetap menjadi rumit medis
Masalah yang belum bisa diatasi dan yang mengancam kesehatan manusia dan kehidupan. 1

Pengobatan konvensional kanker umumnya meliputi reseksi bedah, radioterapi,


dan kemoterapi. Meskipun reseksi bedah sangat membantu untuk menghilangkan tumor
terlihat jaringan, itu tidak cocok untuk berurusan dengan beberapa gejala, seperti tumor tak
terlihat, darah tumor yang menyerang melalui darah atau kelenjar getah bening, dan kanker
terminal. Radioterapi hanya bekerja dalam mengobati beberapa jenis kanker jika mereka
terlokalisasi pada satu area kecil dari tubuh. Selain itu, juga dapat digunakan sebagai bagian
dari terapi adjuvant untuk mencegah kekambuhan tumor setelah menghapus tumor ganas
primer pembedahan. Bahkan, radioterapi juga menyebabkan serangkaian komplikasi serius,
terutama termasuk jaringan kerusakan dekat daerah untuk diradiasi, kelelahan, yang
merugikan

konsekuensi dari peradangan kulit, rambut rontok, dan gastrointestinal


reaksi testinal. Meskipun obat-obat kemoterapi yang
2-4
efektif membunuh sel tumor, ada beberapa kelemahan,
termasuk distribusi selektif, toksisitas obat, dan unex-
efek samping pected ke jaringan normal, yang membatasi klinis mereka
penggunaan cal. Umumnya, sulit untuk mencapai memuaskan
5,6

efek terapi dalam pengobatan kanker dengan konvensional


metode pengobatan, sehingga ini sangat mendesak bahwa lebih aktif dan
cara yang efektif untuk melawan kanker ditemukan.
Dalam nanoteknologi, partikel mencakup kisaran antara
1 dan 500 nm dalam ukuran dan biasanya menunjukkan transformasi yang baik
portation dan sifat biologis khusus. Dengan cepat
pengembangan teknik untuk nanopartikel (NP) persiapan
tion, NP sebagai alat utama dalam pengobatan kanker yang ditargetkan memiliki
diteliti secara luas. Mengingat bentuk dan ukuran,
NP dapat dengan mudah digabungkan dan terakumulasi di dalam tumor
sedangkan jaringan untuk waktu yang lama, dikenal sebagai permeabilitas ditingkatkan
dan efek retensi, karena kelainan yang baru terbentuk
pembuluh tumor dalam bentuk dan arsitektur. Pada saat yang sama,
7

bioavailabilitas in vivo meningkat dengan encapsulating


obat yang sukar larut dalam NP. Secara khusus, rilis
obat bisa dikendalikan tergantung pada difusi lambat atau
degradasi biomaterial, dan paruh obat bisa
berkepanjangan. Namun, NP memiliki beberapa kekurangan yang
8-11

membatasi aplikasi mereka. Sebelum mencapai situs target, NP


mudah phagocytized oleh sistem retikuloendotelial
dan akumulasi dalam sistem kaya non retikuloendotelial
organ sasaran seperti hati dan limpa, yang mengarah ke serius
efek samping dan konsentrasi obat rendah di berpenyakit
organ. Oleh karena itu, perlu untuk konjugasi tertentu
12-14

penargetan molekul (spesifik ligan, seperti monoklonal


antibodi) pada permukaan NP untuk mencapai sasaran aktif
Terapi dengan mengikat dengan molekul permukaan sel tertentu.
Ligan umum digunakan termasuk agen surfaktan tertentu,
folat, protein transferin, dan polipeptida.
15-19

Rakit lipid, terutama terdiri dari kolesterol dan GM1,


yang membubarkan dalam membran sel dan menunjukkan pergeseran lateral,
kondusif untuk interaksi antara protein dan con-
Perubahan formational dan berpartisipasi dalam transduksi sinyal,
bahan transportasi, dan fungsi fisiologis lain. Ini
20,21

telah menunjukkan bahwa, ketika toksin kolera B subunit


(CTB) sebagai penanda khusus terikat untuk ganglioside GM1
di rakit lipid, baik dalam sel tumor dan normal sel-sel ganas,
lebih CTB-GM1 kompleks membran yang invaginated
dan mereka lebih diangkut menuju endoplasma
retikulum dan menyebabkan kematian sel dengan reorganisasi
sitoskeleton aktin. Hal ini juga telah menyarankan bahwa
22

jumlah GM1 dalam membran sel-sel kanker lebih besar


dari sel normal, karena rakit spesifik GM1-mengikat racun
seperti CTB bisa menjadi antikanker terapi baru ligan yang
menargetkan organisasi rakit lipid.
23-26

Panas-labil enterotoksin subunit B (LTB) adalah non-katalitik


protein dari subunit pentameric Escherichia coli.
27-29

Seperti CTB, LTB mengikat khusus untuk penta- bercabang


sakarida bagian dari entitas domain penduduk lipid-memerintahkan
(ganglioside GM1) pada permukaan menargetkan sel. Pada
30-33

dasar kompatibilitas yang baik dari bovine serum albumin


(BSA) dengan jaringan tumor dan spesifisitas tumor-penargetan
LTB, kami merancang NP baru terdiri dari BSA dan LTB
untuk pengiriman target 5-fluorouracil (5-FU) ke sel-sel tumor.
Studi seluler sistematis dan in vitro pencitraan fluoresensi
pengamatan dilakukan untuk mengkonfirmasi tumor-penargetan
kemampuan BSA-LTB NP.
Bahan dan metode
bahan
BSA dan fluorescein isothiocyanate (FITC) dibeli
dari Sigma-Aldrich (St Louis, MO, USA), LTB adalah hadiah
dari Vaksin Nasional dan Institut Serum (Beijing, Rakyat
Republik Cina), 5-FU dibeli dari Nantong
Jinghua Pharmaceutical Co, Ltd (Nantong, Republik Rakyat
Cina). Bahan kimia lainnya yang dibeli adalah analitis
kelas dan diperoleh dari Sigma-Aldrich.
Persiapan Bsa-lTB NP
Sepuluh miligram BSA dan 1 mg LTB dilarutkan dalam
0,5 mL asam asetat (0,5%, v / v) untuk mencapai homogen
solusi protein. BSA-LTB NP disusun oleh cepat
menjatuhkan 1,0 mL alkohol anhidrat ke dalam 0,5 mL
solusi protein pada 37 C sampai fenomena opalescence
muncul. Untuk mempersiapkan 5-FU dimuat NP, 1 mg dari 5-FU adalah
ditambahkan ke dalam larutan protein untuk mendapatkan NP obat-loaded
sebelum penambahan alkohol anhidrat. etanol adalah
dihapus oleh penguapan rotary. Kemudian, 8% glutaraldehid
dalam air (0,5 uL per mg BSA dan LTB) ditambahkan ke
menginduksi silang partikel. Proses silang itu
dilakukan di bawah pengadukan suspensi dari waktu ke waktu
periode 24 jam. NP diendapkan dan dipisahkan
dari sistem dengan sentrifugasi (16.000 rpm, 20 menit),
dibilas bersih dengan air deionisasi, dan beku-kering
untuk analisa lebih lanjut.
karakterisasi Bsa-lTB NP
Diameter, polidispersitas, dan potensi zeta hidrodinamika
5-FU-loaded NP BSA-LTB ditentukan oleh dinamis
hamburan cahaya menggunakan Brookhaven Zetasizer (Brookhaven
Instrumen Corporation, Holtsville, NY, USA). Morfologi
BSA-LTB NP diamati menggunakan elektron transmisi
mikroskop (JEM-1200EX; JEOL, Tokyo, Jepang).
Identifikasi LTB dengan
immunofluorescence
BSA NP dicampur atau unblended dengan LTB yang exten-
sively dicuci dan diinkubasi dengan-LTB anti (sumber kelinci,
Santa Cruz Bioteknologi, Inc., Dallas, TX, USA) untuk 1
jam. NP ini dicuci tiga kali untuk menghalangi
antibodi terikat dan kemudian diinkubasi dengan berkoresponden
ing antibodi sekunder FITC-conjugated selama 30 menit.
NP dikumpulkan oleh sentrifugasi pada 12.000 rpm
selama 10 menit, turun pada slide, dan diamati di bawah
mikroskop fluorescent (DMI4000B; Leica Microsystems,
Wetzlar, Jerman). Seperti ditunjukkan dalam Gambar 2, hijau jelas
fluoresensi diamati pada BSA-LTB NP, sementara tidak ada
fluoresensi jelas diamati pada BSA NP. Ini
Data menunjukkan bahwa LTB berhasil dicampur dengan BSA
dan membentuk NP matriks.
5-FU rilis dari Bsa-lTB NP
The siap NP obat-loaded tanpa dialisis disentrifugasi
di 15.000 rpm selama 15 menit. Supernatan dikumpulkan
dan disaring melalui 0,45 um Millipore Filter (EMD Millipore,
Billerica, MA, USA) dan absorbansi filtrat pada 256 nm
ditentukan menggunakan spektrofotometer ultraviolet-visible
(model 1601; Shimadzu, Kyoto, Jepang). enkapsulasi terdistribusikan
siensi (EE%) dihitung menggunakan persamaan di bawah ini:
EE
W
W
W
total
bebas
total
%
%,
=
-
100
[1]
mana W jumlah obat menambahkan awal dan W
total gratis

jumlah obat yang tersisa di supernatan.


Jumlah yang sesuai beku-kering 5-FU-loaded
BSA-LTB NP dikemas dalam kantong dialisis (molekul
Berat [Mw] 3.000-4.000) dicelupkan dalam 50 ml
fosfat-buffered saline (PBS) dan terguncang terus-menerus di
100 rpm pada 37 C. Pada titik waktu tertentu (0, 0,5, 1, 2, 4, 6,
8, 12, 24, dan 48 jam), 5 mL larutan luar dialisis
Tas dikumpulkan untuk spektrofotometer ultraviolet-visible
analisis dan diganti dengan volume yang sama dari PBS. Itu
jumlah kumulatif dirilis 5-FU dihitung dan
persentase akumulatif obat diplot terhadap waktu.
budaya sel
Manusia baris sel karsinoma hepatoseluler SMMC-7721
dibeli dari Institut Biokimia dan Sel
Biologi Chinese Academy of Sciences (Shanghai, Rakyat
Republik Cina) dan berbudaya di Dulbecco Modified
Elang Menengah (HyClone ; Thermo Fisher Scientific,
Waltham, MA, USA) yang mengandung 10% serum janin sapi
(HyClone) dan penisilin / streptomisin (100 unit / mL dan
100 mg / mL, masing-masing) (Gibco Life Technologies /
;

Invitrogen, Carlsbad, CA, USA). Semua sel dipertahankan


pada 37 C dalam suasana lembab dari 5% CO 95% udara.
2,

Dalam serapan seluler vitro


The ambilan FITC-label NP (FITC-BSA
NP dan FITC-BSA-LTB NP) diamati oleh terbalik
mikroskop fluorescent (LSM510; Carl Zeiss Meditec
AG, Jena, Jerman) dan dihitung oleh lempeng pembaca
(Synery-2; Biotek, Winooski, VT, USA). Secara singkat, conflu-
sel ent SMMC-7721 dipanen dan ditangguhkan di
media bebas serum dengan kepadatan 5 10 / mL. sel-sel
4

yang dibagikan ke dalam lempeng 96-baik dan diinkubasi


dengan NP FITC-label. Setelah 6 jam, sel dicuci
tiga kali untuk menghapus NP gratis. Internalisasi
FITC-label NP ke dalam sel diamati menggunakan fluorescent
mikroskop dan intensitas fluoresensi dalam sel adalah
diukur menggunakan pembaca lempeng. Fluoresensi dari
FITC gembira di 485 nm dan dipancarkan pada 528 nm. cel- yang
Kemampuan penyerapan lular untuk FITC-BSA NP dianalisis di
waktu yang sama sebagai kontrol.
In vitro uji viabilitas sel
A 3- (4,5-dimethylthiazol-2-yl) -2,5-diphenyltetrazolium
bromide (MTT) assay dilakukan untuk menyelidiki sel
Status viabilitas. Sel SMMC-7721 dengan kepadatan 5 10 / mL
4

yang unggulan ke piring 96-baik (100 uL masing-masing dengan baik) dan


diinkubasi selama 24 jam pada suhu 37 C di bawah 5% CO dan 95% O
2 2.

Medium digantikan oleh media bebas serum di


Kehadiran baik gratis 5-FU, 5-FU-loaded BSA NP, atau
5-FU-loaded BSA-LTB NP, dan diinkubasi selama 72 jam.
Media itu kemudian dibuang dan diganti dengan
200 uL media bebas serum yang mengandung MTT (0,2 mg / mL;
Sigma-Aldrich) dan diinkubasi selama 6 jam pada suhu 37 C pada 5% CO 2

dan 95% O Kemudian, supernatan disedot, 150 uL


2.

dimetil sulfoksida ditambahkan ke masing-masing, dan absor-


Bance diukur pada 490 nm.
Penelitian apoptosis sel
Sel SMMC-7721 diinkubasi dengan baik gratis 5-FU,
5-FU-loaded BSA NP, atau 5-FU-loaded BSA-LTB NP untuk
48 jam. Setelah pengobatan, sel-sel dikumpulkan dan ditangguhkan
di Nicoletti penyangga (Beijing 4A Biotech Co, Ltd Beijing,
Republik Rakyat Cina) yang mengandung propidium iodida (PI)
dan FITC-label Annexin V (AV-FITC). Konten DNA adalah
ditentukan pada penyortir sel fluorescence- diaktifkan (FACSCali-
bur ; BD, Franklin Lakes, NJ, USA). Sel-sel yang mengalami
apoptosis diwakili oleh rasio sel AV-positif
dan sel PI-positif.
Hasil dan Diskusi
Sifat fisikokimia NP
Ukuran partikel dan polidispersitas BSA- 5-FU-dimuat
LTB NP dalam air deionisasi ditentukan oleh dinamis
hamburan cahaya. Mean diameter hidrodinamik adalah
254 19 nm dan polidispersitas adalah 0,15 0,06 untuk BSA-LTB
NP. Potensi rata zeta NP adalah -19,95 0,94 mV,
mengungkapkan permukaan negatif dari NP. Gambar 3 menunjukkan
bahwa 5-FU-loaded BSA-LTB NP juga monodis-
persed bola dan efisiensi enkapsulasi 5-FU adalah
80,1%.
Dalam studi pelepasan obat in vitro
In vitro profil pelepasan obat dari BSA-LTB NP media
dengan pH yang berbeda dibandingkan dan hasilnya ditampilkan di
Gambar 4. in vitro pelepasan 5-FU dari BSA-LTB NP
itu biphasic, yaitu, rilis meledak awal diikuti oleh
rilis konstan lambat. Jumlah total akumulatif
obat dilepaskan dari NP dalam waktu 48 jam dalam media yang berbeda
pH kurang dari 40%. Hal ini mungkin karena 5-FU adalah hidro sebuah
fobia obat yang rentan untuk memisahkan dan endapan di dalam
NP, sehingga mengurangi laju pelepasan obat. Kapan
5-FU-loaded BSA-LTB NP diinkubasi dengan media di
pH 7,4, rilis cepat diamati antara 0 dan 4 jam,
yang diikuti oleh rilis kumulatif 17,9%, karena
untuk difusi permukaan 5-FU ke dalam larutan. A halus,
proses yang lambat-release terjadi antara 4 dan 48 jam.
Rasio rilis selama 48 jam pertama dicatat
lebih dari 38,7% dari obat total, dan surplus dirilis
selama waktu inkubasi lebih lama. Rilis tingkat 5-FU
34,35

dari inti NP terutama tergantung pada kelarutan


obat dalam rilis media dan difusi tingkat. Bahkan,
peningkatan laju pelepasan dari 33,2% di pH 5,6-38,7%
pH 7,4 lebih dari 48 jam adalah disebabkan kelarutan yang lebih tinggi
5-FU dalam larutan alkali dari dalam larutan asam.
Bsa-lTB NP untuk pengiriman obat tumor yang ditargetkan melalui lTB mediasi
Dalam serapan seluler vitro
Internalisasi NP FITC-label ke SMMC-7721
sel diamati menggunakan mikroskop fluorescent dan kuantitas produk
fied oleh pembaca lempeng. Kami menemukan bahwa FITC-label
BSA-LTB NP ditingkatkan secara signifikan internalisasi
NP ke dalam sel dibandingkan dengan FITC-label BSA NP.
Seperti ditunjukkan dalam Gambar 5A, baik FITC-label BSA dan BSA-
LTB NP terakumulasi dalam sitoplasma ketika diinkubasi
dengan SMMC-7721 selama 6 jam. Namun, sel diperlakukan dengan
FITC-label BSA-LTB NP menunjukkan neon meningkat
Intensitas dibandingkan dengan sel diperlakukan dengan BSA NP, nyarankan-
gesting yang FITC-label NP BSA-LTB dapat diinternalisasikan
lebih efisien daripada BSA NP. Untuk mempelajari lebih lanjut endo yang
Mekanisme cytosis, internalisasi NP ke dalam sel adalah
dievaluasi dengan menentukan perbedaan intensitas fluorescent
antara NP awalnya ditambahkan dan NP terinternalisasi dalam
sel. Rasio neon relatif (RFR%) dihitung menggunakan
persamaan di bawah ini:
RFR%
.
=

FI
FI
ernalized
total
int
100
[2]
di mana FI intensitas neon dari awalnya ditambahkan
total

FITC-NP dan FI adalah intensitas neon dari FITC-


diinternalisasi

NP terinternalisasi dalam sel.


Analisis spektrum fluoresensi (Gambar 5B) mengungkapkan bahwa
kedua NP menunjukkan sifat yang tergantung konsentrasi pada
serapan intraselular. FITC-label BSA-LTB NP menunjukkan
Konsentrasi FITC intraseluler lebih tinggi dari FITC-label
BSA NP, menunjukkan bahwa penambahan LTB bisa signifikan
cantly meningkatkan uptakes sel tumor dari NP. Untuk menyimpulkan,
selama kontak awal dengan sel, LTB di NP mungkin mengikat
GM1 di rakit lipid untuk membentuk kompleks membran GM1-lipid
terlokalisasi di leaflet luar membran sel, yang berarti
yang NP diinternalisasikan ke dalam sel dengan cepat. Menginvestigasi
efek bersaing dari LTB pada internalisasi seluler
BSA-LTB NP, sel diinkubasi dengan FITC-label
BSA NP dan BSA-LTB NP, masing-masing, di con- Media
yang memuat konsentrasi yang berbeda gratis LTB selama 6 jam pada
37 C. Sebuah LTB bersaing studi pada serapan intraseluler
juga lebih membuktikan bahwa transportasi aktif BSA-LTB
NP ke dalam sel terhambat dengan meningkatnya penambahan gratis
LTB di media (Gambar 5C). Sebaliknya, penambahan gratis
LTB di media menyebabkan efek meningkatkan jelas pada
internalisasi BSA NP.
studi kelayakan seluler
Efek sitotoksik gratis 5-FU, 5-FU-BSA NP, dan
5-FU-loaded BSA-LTB NP terhadap sel SMMC-7721
diperkirakan in vitro oleh MTT assay. Sel diperlakukan
dengan berbagai konsentrasi 5-FU mulai 3,75-30
ug / mL. Seperti yang ditunjukkan pada Gambar 6, pengobatan SMMC-7721
sel dengan 5-FU-loaded BSA-LTB NP menyebabkan signifikan
penurunan viabilitas sel pada 24, 48, dan 72 jam dibandingkan
dengan yang dari 5-FU-loaded BSA NP. 50% dari maksimal
konsentrasi hambat (IC nilai di sel diperlakukan dengan
50)

5-FU-loaded NP BSA-LTB yang 23 mg / mL pada 48 jam


dan 15,3 mg / mL pada 72 jam dibandingkan dengan 30 ug / ml pada
48 jam dan 21,7 mg / mL pada 72 jam di sel diperlakukan dengan
5-FU-loaded BSA NP. Baik 5-FU-loaded BSA-LTB atau
BSA NP memiliki efek sitotoksik jelas pada SMMC-7721
Sel-sel pada 24 jam. Sebaliknya, nilai-nilai IC dari gratis 5-FU
50
18,5 mg / mL pada 48 jam dan 14,7 mg / mL pada 72 jam.
5-FU juga tidak memiliki efek sitotoksik jelas di SMMC-7221
Sel-sel pada 24 jam.
apoptosis sel dan nekrosis
Untuk menganalisis lebih lanjut apoptosis sel SMMC-7721
diinduksi oleh gratis 5-FU, 5-FU-loaded BSA NP, dan 5-tahun-
dimuat BSA-LTB NP, Annexin V-FITC / PI assay pewarnaan
dilakukan dan sel apoptosis dan nekrotik yang
diukur dengan sitometri. Persentase awal
apoptosis, akhir apoptosis, nekrosis, dan sel-sel hidup yang ditampilkan
pada Gambar 7. Arus cytometry analisis mengungkapkan bahwa rasio
sel AV-positif dan PI-positif yang diobati dengan 5-tahun
BSA-LTB NP adalah 36,1%, dibandingkan dengan gratis
5-FU-diperlakukan sel (46,9%). Perlu dicatat bahwa rasio
pecahan AV-positif dan PI-positif dalam sel diperlakukan dengan
5-FU-loaded BSA-LTB NP adalah nyata lebih tinggi dari itu
di sel diperlakukan dengan 5-FU-BSA NP (18,1%). Hasil dari
flow cytometry konsisten dengan hasil MTT.
Kesimpulan
LTB sebagai grup penargetan berhasil dicampur dengan
BSA untuk mempersiapkan NP biokompatibel untuk terapi kanker.
BSA-LTB NP menunjukkan monodispersity baik, negatif
biaya, dan ukuran partikel homogen. encapsulating yang
efisiensi 5-FU dan pola rilis diselidiki
in vitro. MTT assay menunjukkan bahwa BSA-LTB NP dipamerkan
aktivitas sitotoksik yang lebih tinggi daripada yang non-target (BSA NP)
dalam sel SMMC-7721. Hasil pencitraan neon terbukti
bahwa, dibandingkan dengan BSA NP, BSA-LTB NP bisa sangat
meningkatkan serapan seluler. Hasil ini menunjukkan bahwa BSA-
LTB NP mungkin aktif pembawa tumor-penargetan menjanjikan
calon melalui LTB mediasi