Brbara Nascimento da Silveira

Histologia OI

Biologia Celular Parte I

A Clula: Conceitos Gerais Sobre Componentes e Compartimentalizao

Funcional
Toda clula tem uma quantidade de componentes variveis, que vo estar em
estruturas chamadas organelas membranosas (compartimentos) + compartimentos
proteicos organizados (citoesqueleto, ribossomos etc) + citossol (soluo rica em ptns
e componentes que envolvem os compartimentos mambranosos).

1. Membrana Plasmtica Estrutura geral

Apresenta molculas que podem ser sensibilizadas e podem ser estimuladas para toda a
clula, para determinado tipo de funo. A constituio geral :

- Lipidios de membrana: Toda MP formada por uma bicamada lipdica, constituda por
duas camadas de lipdios: folheto externo( voltado para o MEC) e folheto interno (voltado para
o citoplasma).

- As protenas de membrana vo estar associadas aos folhetos da bicamada lipdica de

varias formas, podendo atravessar completamente os dois folhetos ou ento estar no folheto
externo ou interno
 - Glicoclice: Conjunto de cadeias de carboidratos, associado apenas ao folheto externo da
MP.

a) Lipdios de membrana
Os lipdios formam uma bicamada lipdica na MP, onde teremos o folheto externo
(extracelular) e interno (citoplasmtico). Iremos encontrar trs classes principais de lipdios de
membrana: fosfolipdios (mais abundantes) , colesterol e glicolipdios.

Fosfolipdios:

A cabea do fosfolipdio polar e hidroflica e as caudas so hidrofbicas (apolares). A

disposio dos fosfolipdios tem a cabea , no caso do folheto externo, voltada para o MEC e
para o citossol no caso do folheto interno, e as caudas para a regio central da bicamada
lipdica.

Cada cabea e cada cauda formada por diferentes compostos de fosfolipidios. A

cabea formada por: um glicerol, um fosfato e um grupamento especfico do grupamento
fosfato. A cauda formada por 2 cidos graxos.

Fosfatidil- inositdeos: no folheto interno da MP, apresentam uma famlia de

fosfolipdios cujo precursor o fosfatidil-inositol, que vo participar de eventos de sinalizao
celular.

Colesterol

Exclusivo de membrana de clulas animais, abundante nas MP e nas membranas de

organelas e compartimentos. Ele vai ter uma poro rgida, caracterizada por uma serie de
anis e uma cauda nica formada por um acido graxo. Isso faz com que as molculas de
colesterol estejam orientadas da mesma forma que a camada de fosfolipdios.

Confere rigidez s membranas, devida presena da bicamada lipdica, e permite o

livre transito das ptns em um mesmo plano. O anel rgido confere a rigidez MP. Vrias clulas
vo apresentar pequenas regies especificas da MP que so denominadas de rafts lipdicos.

Rafts lipdicos: Pequenas regies da MP que se apresentam um pouco mais espessa

que a bicamada, que se deve presena de molculas de esfingomielinas
(esfingolipdios) e colesterol e possuem ptns com funes especificas que os
estabilizam nessa regio. Geralmente so reas mais espessas, devido ao maior
comprimento das caudas dos esfingolipdios.

Glicolipdios

Tem esse nome porque eles tm uma cabea com radicais glicdicos (aucares) e uma
cauda de duas cadeias de cidos graxos. Vo estar presentes apenas no folheto externo da
bicamada lipdica e fazem parte do glicoclice, que tambm restrito ao folheto externo da
MP. A maioria dos glicolipdios esto nos neurnios.
A MP tem uma diversidade e qualidade muito grande de lipdios de membrana por
folheto. O folheto externo muito diferente do interno em termos de constituio de
seus fosfolipidios. Isso caracteriza a assimetria da bicamada lipdica.
fosfatidil-colina e esfingomielina : predominantes no folheto externo;
fosfatidil-serina e fosfatidil-etanolamina : apenas no folheto interno;
colesterol : presente em ambos os folhetos.

Aspecto trilaminar das Membranas Microscopia Eletrnica de Transmisso

O aspecto das membranas, todas tero o mesmo aspecto ao ME: o aspecto trilaminar,
que se d pela presena de duas partes escuras (eltron-densas) e uma camada clara (eltron-
lucente, que se d em funo de menor concentrao de componentes estruturais e portanto,
a menor captao de eletrons).

Cabeas dos lipdios voltados para o meio extracelular ou citosslico, vo captar maior
quantidade de tetrxido de smio (fixador para ME), tornando essa parte mais eltron-
densas.

As caudas dos fosfolipidios, voltadas para a parte central, no captam tanto terxido
de smio e portanto ao ME iro aparecer mais claras (eltron-lucente).

Os lipdios de membrana podem se movimentar e causar a fluidez da membrana

plasmtica, mas a mudana mais recorrente o flip-flop( flipagem), quando os lipdios se
movimentam de um folheto para outro. No muito frequente em MP e sim em outras
membranas internas. Esse mecanismo geralmente deflagrado por enzimas, a qual so as
flipases.
Transporte Atravs da Bicamada Lipdica

- Difuso simples: passagem direta de pequenas molculas atravs da bicamada lipdica; o

ndice de difuso varia enormemente, dependendo em parte do tamanho da molcula ou
principalmente de sua relativa solubilidade em lipdios. Quanto menor a molcula e quanto
mais solvel ela for em lipdios, mais rapidamente ela se difundir atravs de uma bicamada
lipdica. Molculas que geralmente atravessam a bicamada lipdica o fazem por difuso
simples, ou por serem pequenas, ou lipossluveis, gasosas ou no sendo gases.

b) Protenas de membrana
So elas que do a caracterstica funcional de vrios tipos celulares. Determinam
muitas vezes a funo especifica de uma clula. Elas tm funo estrutural e organizam o
transporte de vrias molculas, e proporcionam o reconhecimento de vrias molculas, de
modo a proporcionar a sinalizao celular. A classificao se d quanto disposio na
bicamada lipdica: protenas integrais e protenas perifricas.

Protenas integrais: firmemente associadas bicamada atravs de ligaes covalentes

com lipdios da bicamada. Essas ligaes covalentes torna a extrao dessas protenas muito
difceis. Elas tm uma diferente associao com a bicamada, que permite termos de dois tipos:

- Integrais transmembranares: atravessa completamente a bicamada lipdica uma ou vrias

vezes. A molcula de uma ptn pode ter varias regies, relacionadas de maneiras diferentes
bicamada. Isso chamado de domnio. Ela tem um nico domnio transmembranar, quando
apenas uma regio que atravessa a bicamada. Consequentemente, ela ter uma parte da
molcula voltada para o MEC e uma para o meio citosslico, que so os domnios extracelular
e citosslico, respectivamente. Ela ser classificada como uma ptn integral transmembranar de
passagem nica. Aquela que tem vrias pores que atravessam a bicamada, ter vrios
domnios transmembranares e varias regies voltadas para o MEC e para o meio citosslico e
portanto ter vrios domnios extracelulares e citosslicos. Assim, ela ser uma ptn integral
transmembranar de passagem mltipla.

- Integrais no transmembranares: esto restritas a apenas um dos folhetos da bicamada,

atravs de ligaes com lipdios de membrana. Essas ligaes so covalentes, forte, o que
torna a ligao difcil de ser extrada. Porm, por no atravessar completamente a bicamada,
ela classificada como uma ptn integral no transmembranar.

Protenas perifricas: Esto aderidas a um dos folhetos da MP, e a ligao frouxa por
conta das ligaes inicas, tornando a extrao das ptns mais fcil.

Toda ptn de membrana tem uma quantidade varivel de radicais glicdicos. Quando
sintetizada, elas recebem do REG os radicais glicdicos. A adio de radicais glicdicos
chamada de glicosilao, evento que comea do REG e terminado no ap de golgi.
Classificao das protenas quanto a sua funo

A grande maioria tem funo de transporte :

- Protenas Transportadoras (carreadoras): transportam solutos que se acoplam a um sitio

especifico na molcula de ptn que vai transportar de um lado para outro o determinado
soluto. Quando um soluto se associa a um sitio de uma ptn transportadora, ela se modifica
estruturalmente durante o exerccio do transporte, pelo fato do soluto se acoplar a um
determinado sitio da molcula transportadora. Realizam o transporte passivo ou difuso
facilitada (equilibra o soluto dos dois lados da membrana : vai contra a concentrao de
gradiente) ou transporte ativo, o qual necessita da energia de outra molcula que vai
proporcionar o movimento do soluto de um lado para outro.

O transporte ativo pode ser pela clivagem de uma molcula para utilizar sua energia,
gerando ATP para realizar o transporte do soluto. Geralmente so enzimas que clivam o ATP,
chamadas de ATPases, ou bombas, pois ela utiliza da clivagem do ATP para o bombeamento de
uma molcula de um lado para outro da membrana. chamado de transporte ativo primrio.
No transporte acoplado, utiliza a energia de gradiente de concentrao de um soluto a ser
transportado e ele quem vai proporcionar o transporte acoplado dele e de outro soluto
simultaneamente. Por isso, o transporte acoplado um transporte ativo secundrio.

As ptns carreadores podem ser classificadas em uniportes (realiza o transporte

de um nico soluto, em uma nica direo), simportes (Movimento de dois solutos
diferentes em uma mesma direo) ou antiportes (Movimento de dois solutos diferentes em
direes opostas).

A bomba de sdio e potssio esto presentes em todas as clulas. O sdio sai da

clula, e o potssio entra na clula. (3 sodios para fora e 2 potassio para dentro).
Regies da membrana plasmtica = Domnios da membrana plasmtica (essencialmente em
clulas epiteliais): Esses domnios podem ter quantidades diferentes de ptns de membrana, as
quais devem estar confinadas a esses domnios para que haja uma harmonia no desempenho
funcional da clula. Em clulas epiteliais, temos:

Domnio apical: oposto ao domnio basal

Domnios laterais: entre o apical e o basal

Domnio basal: local onde a clula se apoia sobre o substrato

Os domnios laterais e basal so contnuos = domnio basolateral. Existe uma barreira fsica
(junes de ocluso) que impede a passagem das ptns de um domnio para outro.

Ex: Nos entercitos (cel absortiva) realizam a absoro de nutrientes como a glicose, essas
clulas possuem ptns carreadoras na sua MP do seu domnio apical e tbm ptns do domnio
lateral e basal. Essa ptn carreadora de glicose, estando no domnio apical, faz com que a
glicose seja transportada do lmen intestinal para o citoplasma da clula, e estando na clula,
a glicose vai ser transferida para outra clula para que atinja a corrente sangunea. Logo, cada
ptn de cada domnio tem sua funo de transportar a glicose, at que ela chegue ao sangue.

- Protenas Canais: delimitam canais aquosos que permitem o fluxo de determinado soluto
em uma direo. Permite a passagem de molculas com dimetro pequeno. Realizam
transporte passivo. A maioria so canais inicos e so seletivos, que permitem alternadamente
a sada desses ions e alteram a permeabilidade e a natureza das cargas eltricas das
membranas.

Criofratura: (Freeze-Fracture) Mtodo quantitativo de visualizao de protenas integrais

transmembranares. preciso congelar as clulas, pois a membrana fraturada no meio da
bicamada lipdica, separando os dois folhetos. Ao separar a membrana, tem-se duas
superfcies de visualizao:

Face E - superfcie interna do folheto externo (extracelular) da membrana , menor quantidade

de partculas em relevo (protenas integrais transmembranares).

Face P- superfcie externa do folheto interno (protoplasmtico) da membrana, maior

quantidade de partculas em relevo (protenas integrais transmembranares).

c) Glicoclice
Conjunto de molculas de carboidratos associados exclusivamente ao folheto externo da
membrana plasmtica. Formado por:

- cadeias de oligossacardeos associadas a glicoprotenas da membrana plasmtica;

- cadeias de oligossacardeos associadas a glicolipdios da membrana plasmtica;

- cadeias de polissacardeos de proteoglicanos(complexos macromoleculares formados por

uma ptn central a qual est ligada a varias cadeias de longos polissacardeos, so
polissacardeos de cadeia longa) de membrana plasmtica.
Glicoptn: ptn com radicais oligossacardeos

Proteoglicano: uma ptn na qual esto associados glicosaminoglicanos.

No se sabe ao certo a funo do glicoclice, mas todas as clulas tem em sua membrana.,
mas:

Clulas epiteliais intestinais (microvilos), tem funo de proteo contra enzimas digestivas;

Eritrcitos (hemcias) - sistema AB0 de grupos sanguneos

Leuccitos - reconhecimento inicial por protenas receptoras (selectina: reconhecem

carboidratos na superfcie de leuccitos e permite que o leuccito possa passar e realizar a
diapedese. O glicoclice dos leuccitos permite o reconhecimento e interao inicial para que
eles realizem a diapedese) no endotlio de vnulas para subsequentes eventos de diapedese

MECANISMOS DE TRANSPORTE DE MACROMOLCULAS/PARTCULAS MAIORES ATRAVS DA

MEMBRANA PLASMTICA:

Endocitose: Determinada rea da MP que sofre invaginao ou ento ao redor da

partcula a ser capturada e os poros da invaginao se fundem criando uma vescula de
transporte.

Fagocitose: internalizao de grandes partculas, mediante o desdobramento da MP

ao redor das partculas a serem destinadas a ser internalizadas. Ocorre a expanso da
MP por sobre a partcula destinada a ser internalizada. Isso feito pelos macrfagos
ou os neutrfilos. Formao de grandes projees largas da membrana plasmtica
(pseudpodos), com a participao dos filamentos de actina do citoesqueleto; A
fagocitose um mecanismo deflagrado pelo reconhecimento especfico do material a
ser internalizado por receptores da membrana plasmtica; Com a internalizao do
material, os pseudpodos se fecham e se forma um fagossoma (ou vacolo fagoctico),
que se funde a uma outra vescula (lisossoma ou endossoma) para subsequente
processamento inicial do material fagocitado.

Pinocitose: internalizao de pequenas partculas e geralmente solubilizadas. Existem

dois tipos de pinocitose:

- Pinocitose de fase fluida: ocorre o tempo todo, internalizando pequenas molculas de

interesse para seu consumo, por isso chamada de constitutiva.

- Endocitose mediada por receptores: h receptores especficos. Toda molecula que se liga ao
receptor, essa molcula chamada de ligante. No domnio citossolico, vao se ligar ptns
adaptadoras, as quais vao se ligar molculas de clatrina e vo se associando e formando a rede
de clatrina. Dinamina : protena que se organiza como um anel ao redor do pedculo da
vescula revestida em formao e a estrangula, fazendo com que ela se destaque da
membrana plasmtica. Exemplo de Endocitose Mediada por Receptores Endocitose de
Lipoprotenas de Baixa Densidade (LDL low-density lipoproteins). Defeitos nas molculas
associao com a formao de placas de ateroma em vasos sanguneos

Em ambos os casos, iremos notar a formao de uma depresso da MP, que vai se
aprofundando at que tenham os corpos fundidos at formar um vacolo. A clatrina uma ptn
que se organiza para formar uma rede que se adere ao folheto interno da MP e traciona a MP,
na qual se encontram molculas a serem fagocitadas, formando uma depresso revestida por
clatrina. medida que as bordas da depresso revestida vo se aproximando, se fundem e
essa depresso se libera da MP e fica livre no citossol, constituindo uma vescula revestida por
clatrina. As molculas de clatrina so formadas por trisqulios (formados por 3 cadeias
pesadas e 3 cadeias leves)

Etapas da pinocitose: Formao de uma depresso revestida por clatrina (coated pit, 1 e 2)->
aproximao das bordas da depresso revestida (3) -> formao de uma vescula revestida por
clatrina (coated vesicle, 4).

OBS: Nem todas as vesculas de pinocitose tm envoltrio de clatrina. Cavolas : vesculas de

pinocitose formadas a partir de rafts lipdicos, estabilizados por protenas denominadas
caveolinas. Envolvidas em eventos de transcitose ( transferncia de solutos entre duas regies
da membrana plasmtica, sem que haja consumo do soluto pela clula durante o transporte).
Por ex., transcitose de substncias por clulas endoteliais dos capilares sanguneos.

Endossomas

Compartimentos membranosos distribudos pelo citoplasma, dotados de pH ~ 6 (mantido por

uma H+-ATPase em sua membrana), encarregados da recepo de materiais endocitados e da
reciclagem de receptores envolvidos em endocitose. Os endossomas esto subdivididos em
endossomas iniciais (mais superficialmente localizados) e endossomas tardios (mais
profundamente situados). Aos poucos, os endossomas iro se tornar lisossomas.

Possveis destinos de protenas receptoras transmembranares que foram endocitadas. Trs

vias derivadas dos endossomas so mostradas:

Receptores so devolvidos mesma regio da membrana plasmtica da qual eles vieram

(reciclagem, 1);

Receptores so devolvidos a uma diferente regio da membrana plasmtica (transcitose, 2);

Receptores que no so retidos em endossomas podem ser degradados em lisossomas

(degradao, 3).

b) Exocitose: vesculas de transporte com material destinado a abastecer o MEC ou a MP,

essas vesculas de transporte se encaminham para a MP na qual se fundem e liberam o
contedo para o MEC. Eliminao de macromolculas para o meio extracelular atravs
da fuso de vesculas de transporte com a membrana plasmtica. Contedo de
vesculas de secreo sendo eliminado para o meio extracelular.
MEMBRANA PLASMTICA E SINALIZAO CELULAR
Temos eventos de sinalizao celular dependentes de molculas de sinalizao na
superfcie celular, que gera uma cascata de eventos que envolve vrias molculas. Essa funo
pode estar relacionada ao metabolismo, sequencia gnica do ncleo ou de movimentao
celular.

As clulas so dotadas de duas classes de receptores, na qual a maioria est na

superfcie celular, mas tambm encontramos receptores dentro da clulas, intracelulares
(geralmente para molculas hidrofbicas, na qual elas se ligam para serem transportadas no
MEC: citossol ou nucleo). A maioria dos receptores est na MP como receptores de superfcie
celular os quais geram sinais no interior da clula-alvo

a) Sinalizao Parcrina: as molculas liberadas por uma clula vo sensibilizar

receptores em clulas adjacentes.
b) Sinalizao Endcrina: depende do transporte da molcula sinalizadora pela corrente
sangunea, que ir atingir um rgo bem distante.
c) Sinalizao Sinptica: os neurotransmissores proporcionam uma ligao qumica em
receptores de membranas em clulas adjacentes.
d) Sinalizao dependente de contato (autcrina): A clula elabora uma molcula
sinalizadora que vai estimular a prpria clula que a produziu. A clula que produziu
suas prprias molculas sinalizadoras possuem receptores para eles. Ento ela mesma
se estimula.

Essa sinalizao determina vrios estmulos, que vo deflagrar a clula em eventos que vo
determinar a vida da clula. A clula viva se mantem vivel naquele microambiente em que ela
est e para isso necessrio manter esse microambiente para que ela se mantenha, se
prolifere e se divida e se aperfeioe em relao a determinada funo. Existem estmulos que
fazem com que ela sofra uma especializao gradativa, para sofrer diferenciao. Se a clula
ficar privada de estmulos, a clula sofre suicdio, que leva morte da clula (apoptose).
Assim, os estmulos podem dar trs destinos clula:

- Proliferao celular

- Diferenciao celular

- Apoptose

Receptores de superfcie Celular

a) Receptores acoplados a canais inicos: os receptores so canais inicos e quando os
receptores se ligam aos seus ligantes, o canal se abre. Geralmente ocorre em neurnios.
Permite a passagem de ions atravs de canais em sua poro central e esto envolvidos no
processo de sinalizao sinptica.

b) Receptores acoplados protena G (ptn integral no transmembranar): a ptn G possui 7

dominios transmembranares. A ptn G est acoplada a lipdios do folheto interno da MP e
formada por 3 subunidades, sendo portanto uma ptn trimrica. A subunidade alfa (maior),
uma beta e uma gama (formam o complexo beta gama).

A subunidade alfa vai ter um stio ao qual uma molcula de nucleotdeo se liga, o GTP.
O GTP trocado eventualmente por uma molcula de GDP (menos um fosfato), quando a ptn
G estiver INATIVA, a qual mantem as 3 subunidades juntas. Quando ela for ativada, esse GDP
sai e o GTP entra e a subunidade alfa se separa das subunidades beta e gama, configurando o
estado ATIVO da ptn G.

PTN G ATIVA: GTP e subunidades separadas

PTN G INATIVA: GDP e subunidades juntas

Via do AMPc
Uma vez ativa, a ptn G vai mediar vrios tipos de sinalizao, uma delas vai utilizar um
mediador intracelular, formado dentro da clula. Esses mediadores so geralmente referidos
como segundos mensageiros, pois o primeiro mediador (primeiro mensageiro) o ligante que
se ligou ao receptor no sitio de receptor acoplado ptn G. Os segundos mensageiros, iremos
encontrar uma molcula que clivada da molcula do ATP, atravs da adenilil-ciclase. Quando
a adenilil ciclase cliva as molculas de ATP, d origem a um segundo mensageiro, o AMP
cclico. Quando ativada, a adenilil- ciclase transforma uma molcula de ATP em AMP cclico,
aumentando a quantidade do mesmo em uma clula. Para degradao do AMPc em 5-AMP,
pela ao da enzima fosfodiesterase de AMPc.

Ento... O AMPc formado a partir da ao da enzima adenilil-ciclase (protena

integral transmembranar da membrana plasmtica) sobre o ATP (trifosfato de adenosina), e
degradado (hidrolisado) pela ao da enzima fosfodiesterase de AMPc e

O AMPc vai estimular uma enzima citosslica, a ptn- QUINASE-A ( adiciona radicais
fosfato a seus substratos, a ptn), ou PKA. A PKA medeia a maioria dos efeitos do AMPc. A PKA
tem quatro subunidades (2 catalticas inativas e 2 subunidades reguladoras) . Quando ocorre a
produo do AMPc sobre ao da adenilil ciclase, o AMPc vai se ligar s subunidades
reguladoras da PKA e vai provocar a liberao das subunidades catalticas, que vo ficar
ativadas, para ir de encontro a algum substrato para fosforilar.

Assim...

1. A molcula de sinalizao se liga a um receptor ligado a protena G. Quando se liga, vai

ativar a ptn G que quando ativa, troca o GDP pelo GTP e separa a subunidade alfa das demais e
vai ativar a adenilil-ciclase.

2. Uma vez ativa a adenilil-ciclase, ela vai clivar molculas de ATP, produzindo AMPc, o qual vai
aumentar de concentrao no citossol e vai se ligar subunidades reguladoras da PKA e libera
as subunidades catalticas, que por sua vez vo entrar no ncleo da clula e vai provocar a
transcrio de sequencias gnicas.

3. Para que as sequencias genicas sejam ativadas, tem que haver uma ativao via sequencia
do DNA nuclear, que o elemento de resposta ao AMPc (= CRE).
4. Para que o CRE seja estimulado, a ele tem que se ligar uma ptn que tem que ser ativada pela
PKA, que a ptn de ligao ao CRE, o CREB.Uma vez a CREB fosforilada (ativada), ela recebe
uma ptn ao fosfato, que a CBP (ptn de ligao ao CREB).

5. Assim, o CRE ativo, vai estimular a transcrio de outros genes presentes no genoma da
clula. Inmeros hormnios so mediados pelo AMPc.

Outros tipos de ptg G que vo mediar outra via de sinalizao, a qual dependente da
hidrlise de lipdios do folheto interno da bicamada, que so os fosfatidil-inositdeos. O
fosfatidil-inositol (PI) fosforilado fosfatidil-inositol-monofosfato (PIP) que depois
fosforilado fosfatidil-inositol- bifosfato(PIP2). O PIP2 quando for modificado, vai ser atacado
(hidrolisado) por uma enzima de membrana, a fosfolipase C- , e o resultado vai ser a origem
do diacil-glicerol (vai estimular a ptn quinase C) e o inositol-bifosfato - IP3 (vai promover o
aumento da concentrao citosslica do clcio, fazendo que o clcio seja o mensageiro
tercirio). Estes sero segundos mensageiros.

O fosfatidil-inositol-bifosfato (PIP2) o substrato da enzima fosfolipase C-

transmembranar da membrana plasmtica); uma vez hidrolisado, o PIP2 d origem a 2
derivados: o diacilglicerol, que ativa a protena-quinase C (ou PKC, por ser dependente de
clcio) e o inositol-trifosfato (IP3), que promove a liberao de clcio a partir do retculo
endoplasmtico agranular. Portanto, o diacilglicerol e o IP3 so os mensageiros secundrios,
e o Ca 2+ pode ser considerado um mensageiro tercirio.

Via de sinalizao mediada por Clcio

1. A molcula de sinalizao do receptor acoplado ptn G, quando ativo, vai ativar a ptn G,
que vai trocar GDP por GTP e a ptn G ativa, vai ativar a fosfolipase C- , que vai atuar sobre o
PIP2 originando o diacilglicerol e o IP3, o qual o primeiro permanecer no folheto interno da
MP e o ultimo se tornar solvel no citossol e ser direcionado para o REL, pois o REL o local
de conteno de ions clcio.

2. O clcio tem um controle muito rgido em termos de concentraes, sendo mantido preso
(armazenado) no interior do REL. Na membrana do REL, iremos encontrar ptns receptoras
canais para o IP3, que ao se ligar vai provocar a abertura de um canal atravs do qual os ions
clcio vao escapar para o citossol, fazendo com que haja o aumento da concentrao
citosslica de clcio.

3. O clcio vai ativar diferentes sistemas enzimticos especficos para diferentes funes. Por
fim, o clcio vai se ligar protena-quinase-C, dependente da ligao do clcio para sua
atiavao.

4. Uma vez ativa, a ptn quiase C vai se ligar ao diacilglicerol para complementar sua ativao e
ativa tanto pelo clcio, quanto pelo diacil-glicerol, ela vai fosforilar seus alvos.

Ex: no fgado, o hormnio antidiurtico vai estimular os hepatcitos a promover a degradao

do glicognio e o hormnio antidiurtico vai provocar a liberao do clcio e estimular enzimas
que levem degradao do glicognio. No musculo liso, a acetilcolina vai estimular a
contrao do musculo, pela ativao da via do clcio.
Embora o clcio atue como mediador intracelular em vrios mecanismos metablicos, a
concentrao citosslica de clcio deve ser mantida sempre baixa, em funo de altas
concentraes citosslicas de clcio ativarem sistemas enzimticos que podem levar morte
celular.

Para tanto, existem diversos mecanismos nos diversos tipos celulares que evitam o aumento
excessivo da concentrao de clcio citosslico:

Membrana plasmtica: trocador Na+-Ca2+ e Ca2+-ATPase;

RE agranular: Ca2+-ATPase

Citossol: molculas de ligao ao Ca2+

Mitocndrias: antiporte H+-Ca2+ - Receptores acoplados enzimas

O clcio tem muita afinidade pela ptn calmodulina, formando o complexo clcio-calmodulina,
que vai ativar vrios mecanismos, entre eles enzimas que so dependentes de sua ativao
pela ligao com esse complexo. So ptns quinases que so so ativadas mediante ligao do
complexo clcio-calmodulina. Muitos efeitos do Ca2+ so mediados por fosforilaes de
protenas catalisadas por protena-quinases dependentes do complexo Ca2+-calmodulina, as
CaM-quinases, as quais fosforilam vrias protenas reguladoras de genes, entre outras .

c) Receptores acoplados enzimas: receptores que funcionam como enzima. Entre os

principais exemplos, temos o do tipo tirosina-quinase e uma vez ativos, vao realizar a
fosforilao de resduos de tirosina e os receptores de tirosina-quinase, uma vez ativados, eles
vao fosforilar a si mesmos. Uma vez fosforilados, os domnios tirosina-quinase servem para a
ancoragem de diferentes protenas de sinalizao intracelular, as quais formam diferentes
complexos de sinalizao que, em seguida, podem se difundir ao longo de mltiplas vias de
sinalizao.

O receptor do tipo quirosina quinase no ativo, so encontrados como ptns integrais

transmembranares. Eles sero ativados quando tiver o ligante, que vai se ligar ao mesmo
tempo a duas subunidades do receptor de tirosina quinase, ele vai juntar duas subunidades do
receptor e vai ativar o receptor tirosina-quinase. Os receptores do tipo tirosina-quinase so vao
ser ativados quando houver a chegada do ligante, e o ligante se liga tanto a um monmero,
quanto a outro, formando-se um dmero.

A formao do dmero dependente da chegada do ligante. O ligante vai fazer que um

monmero e outro se aproximem, fazendo a formao do receptor propriamente dito na MP.
E dessa maneira que o receptor ativado.

Ocorrendo a dimerizao do receptor, tem a ativao de cada um do componente do dmero,

e cada um vai fosforilar o outro. Com isso, vao se ligando as ptns nos domnios citoplasmticos
havendo ativao de vrios outros sistemas enzimticos ocorrendo sequencia gnica ou
funo regular mais especifica.
Via de sinalizao JAK-STAT

Quando uma citocina chega e promove a dimerizao dos receptores, Receptores para
citocinas ativam a via de sinalizao JAK-STAT. Estes receptores esto associados a tirosina-
quinases citoplasmticas denominadas de Janus-quinases (JAKs), as quais fosforilam e ativam
protenas reguladoras de genes denominadas de STATs (transdutores de sinais e ativadores da
transcrio, signal transducers and activators of transcription), localizadas no citossol. Quando
ativadas, as STATs se deslocam para o ncleo e se ligam aos dominios de tirosina-quinase,
onde promovem a transcrio de diferentes genes.

MEMBRANA PLASMTICA ESPECIALIZAES DA SUPERFCIE CELULAR

1. Consideraes Gerais:

Clulas em organismos multicelulares interagem entre si e com a matriz extracelular atravs

de diferentes dispositivos - junes intercelulares e junes entre as clulas e a matriz
extracelular;

Mecanismos de coeso governam a arquitetura do corpo (formato, foras e organizao e

orientao da estrutura interna dos tipos celulares).

Junes intercelulares ocorrem predominantemente em tecidos epiteliais, mas tambm

esto presentes entre clulas no-epiteliais (por ex., clulas musculares cardacas, neurnios,
entre outros).

Um tecido ter uma quantidade varivel de componentes que vai constituir a matriz
extracelular, a qual importante componente estrutural de todos os tecidos.

As junes intercelulares permitem a interao das clulas umas com as outras e com o MEC e
presentes principalmente nos domnios laterais, onde iremos encontrar o estabelecimento de
vrios tipos de junes intercelulares (diferentes tipos de ptns celulares) e apicais.

a) Junes de Ocluso:

As junes de ocluso vedam o espao intercelular e proporcionam a formao de

barreiras de permeabilidade entre meios diferentes, controlando o transito de substancias.
Tambm so chamadas de znulas de ocluso. Existem essencialmente em clulas epiteliais e
vedam o espao intercelular, ocorrendo principalmente entre clulas epiteliais altas. Ex: no
revestimento intestinal, temos clulas cilndricas e portanto altas, que correm o permetro
apical.

A estrutura da juno de ocluso determinado por uma fileira de ptns integrais

transmembranares, interligadas de maneira aleatria, anastomosadas. Essa fileira faz com que
haja uma aproximao entre os folhetos externos das MP das clulas adjacentes, de modo que
promova o vedamento do espao intercelular, determinado pelas ptns integrais
transmembranares. Teremos as ptns da famlia das claudinas e das ocludinas:

Claudinas: so mais abundantes e so elas que determinam o grau de permeabilidade relativo

que a juno de ocluso vai determinar. Associado isso, temos junes de ocluso com
quantidades de fileiras anastomosadas diferentes e quanto maior a quantidade de fileiras de
ptns, menor ser a permeabilidade para as substancias passarem pela clula.

Ocludinas: Em menor quantidade, mas sem funo definida.

As ptns das junes de oclusao possuem poucas ptns associadas, que em termos
gerais, auxiliam na manuteno posicional das ptns das junes de ocluso. Entre essas ptns,
iremos encontrar 3 ptns:

- ZO1, ZO2 e ZO3, as quais se auxiliam claudinas e ocludinas, colaborando para a manuteno
das mesmas.

- Complexo afadina-nectina: se associa ptn ZO1, envolvido na organizao estrutural das

junes de ocluso e de outros tipos de junes;

- JAMs: molculas de adeso juncional, associadas ptn ZO1 e afadina.

As junes de ocluso podem ser vistas por criofratura e no ME, onde h grande
aproximao de uma membrana e outra.

As junes de ocluso formam verdadeiras barreiras com diferentes permeabilidades

entre clulas, de acordo com a maior ou menor quantidade de ptns. A passagem de
susbstancias entre os citoplasmasmas das clulas chamado de transporte transcelular e a
passagem de substancias por entre as clulas, temos os transporte paracelular. As junes de
ocluso controlam rigidamente o transporte paracelular.

As junes de ocluso colaboram na definio dos domnios de membrana plasmtica

de clulas epiteliais. As ptns so confinadas em seus domnios, graas presena das junes
de ocluso, pois as ptns poderiam trafegar ao longo de toda MP, caso no houvesse as junes
que impedisse esse trafego livre. Isso controla a harmonia funcional da clula. A qualidade
diferente dos domnios de membrana reflete na polaridade celular. As clulas epiteliais so
polarizadas, devido aos domnios apical, basal e lateral das clulas.

Papel das Junes de Ocluso na Manuteno do Transporte Transcelular : Protenas

transportadoras confinadas em diferentes domnios da membrana plasmtica -> Transferncia
vetorial de substncias (nutrientes) atravs do citoplasma de clulas epiteliais (transporte
transcelular)

b) Junes de Ancoragem / adeso:

Tem esse nome porque servem como local de ancoragem para diferentes
componentes do citoesqueleto, alm de manter a adeso entre as clulas, sem ocluir o espao
intercelular. O citoesqueleto promove a sustentao e movimentao da clula e essencial
na diviso celular. Os elementos do citoesqueleto permitem a sustentao e aguenta os
estresses mecnicos ao qual a clula est sujeita. Possui componentes estruturais gerais:

- Ptns integrais transmembranares, onde os domonios extracelulares associam-se uns aos

outros e os domnios intracelulares vao se associar com o segundo componente geral, que so
as ptns de associao do citoesqueleto.
- Ptns de associao aos elementos do citoesqueleto (protenas de ancoragem intracelular).

Existem dois tipos:

Juno de adeso do tipo clula-clula (cintures de adeso e desmossomas)

Cinturo de adeso

Percorre todo o permetro apical da clula. Teremos como constituintes: ptns integrais
transmembranares (E-caderinas) e ptns de associao dos elementos do citoesqueleto.

As E-caderinas tm esse nome por serem dependentes do clcio e promovem adeso e

por serem de clulas epiteliais. As caderinas de uma membrana interagem com as caderinas da
membrana da clula adjacente. No domnio citosslico das caderinas vamos encontrar as ptns
de associao ao citoesqueleto, as cateninas.

As cateninas so as e cateninas, que vao se ligar aos domnios citossolicos das E-

caderinas e essas cateninas so as ptns de associao ao citoesqueleto. Filamentos de actina
se ancoram s cateninas. Os filamentos de actina somente se ancoram aos cintures de
adeso, mas no fazem parte do cinturo de adeso. O filamento de actina forma uma rede
tridimensional no citoplasma apical de clulas epiteliais, chamado de trama terminal.

Trama terminal = rede de filamentos de actina associada aos cintures de adeso. No

eixo de cada microvilo, temos um feixe de filamentos de actina que parte da trama terminal
que entra no eixo de cada microvilo, para sustenta-los.

Papel dos Cintures de Adeso da Morfognese de Estruturas/rgos Tubulares a

Partir de Camadas Epiteliais: As camadas epiteliais planas comeam a se invaginar em direo
ao tecido conjuntivo e isso se d pela interao dos filamentos de actina da trama terminal
com filamentos de miosina, tambm presentes na trama terminal. Essa interao vai fazer com
que o citoplasma apical das clulas cilndricas se encolha e o citoplasma basal se dilata,
proporcionando uma invaginao daquela camada epitelial pra dentro do tecido conjuntivo. As
bordas se aproximam, criando um tubo epitelial.

Desmossomas

So junes pontuais, restritas, espalhados por todo o domnio lateral da clula.

Funo de unir as clulas e colaborar com as traes que as clulas venham a sofrer. Tambem
servem de locais de ancoragem para os componentes do citoesqueleto, so que os filamentos
intermedirios (componente do citoesqueleto) que iro se ancorar aos desmossomas.

Componentes Estruturais de um Desmossoma:

Protenas integrais transmembranares: protenas da famlia das caderinas - desmoglenas e

desmocolinas;

Protenas de ancoragem e de associao ao citoesqueleto: placoglobinas, placofilinas, e

desmoplaquinas - estas protenas formam uma placa eltron-densa associada ao folheto
interno da membrana plasmtica, e a qual se ancoram filamentos intermedirio.
 Doenas autoimunes comprometem frequentemente a pele, como as de carter
bolhoso que se formam bolhas entre as clulas epiteliais. Essa doena ocorre quando
desenvolve anticorpos contra os desmossomas, e entre as clulas fica um espao formando
bolhas, pois h extravasamento do plasma.

Citoqueratinas: grande famlia de ptns de filamentos intermedirios em clulas

epiteliais.

Complexo juncional: conjunto formado pela sequncia de trs junes intercelulares

no permetro apical: juno de ocluso, cinturo de adeso e desmossoma.

Junes de adeso do tipo clula-matriz (hemidesmossomas e contatos focais):

Hemidesmossomas

Junes encontradas no domnio basal de clulas epiteliais, unindo-as lamina basal.

Sero locais para ancoragem de filamentos intermedirios.

Componentes:

Protenas integrais transmembranares: integrinas 64 e antgeno do penfigoide bolhoso 2

(APB2 ou colgeno do tipo XVII);. As integrinas so molculas que apresentam subunidades e
, constituindo um dmero e estando ativas, as integrinas tem seus ligantes aos quais elas se
ligam e se desligam, permitindo a adeso ou des-adeso da clula na matriz extracelular. A
APB2 tem esse nome devido doena autoimune penfigoide bolhoso, que ocorre bolhas entre
a epiderme e derme ocorrendo tambm na cavidade oral, contra essa ptn que se forma o
antgeno, pois a clula se separa.

Protenas de associao ao citoesqueleto: plectina e antgeno do penfigoide bolhoso 1 (APB1

ou distonina); estas protenas formam uma placa eltron-densa associada ao folheto interno
da membrana plasmtica do domnio basal.

Filamentos intermedirios de citoqueratinas se encontram ancorados placa eltron-densa

dos hemidesmossomas;

Os domnios extracelulares das integrinas e do APB2 se associam a molculas da lmina

basal.

Contatos focais

Ocorre em clulas no epiteliais e se formam e se desfazem que permitem a migrao das

clulas atravs de substratos de matriz extracelular.

Componentes do contato focal:

Protenas integrais transmembranares: integrinas;

Protenas de associao ao citoesqueleto: vinculina e talina (principais), entre outras.

Contatos focais permitem a ancoragem de feixes de filamentos de actina membrana
plasmtica.
c) Junes comunicantes (do tipo GAP):

Permite a comunicao do citoplasma de clulas adjacentes. Ptns formam canais aquosos,

permitindo a passagem de pequenas molculas. Permite o acoplamento inico entre clulas
do mesmo tecido, atravs de passagem de ions pelos canais.

Componentes de uma juno comunicante:

- Canais denominados de conexons, formados pela associao concntrica de seis protenas

denominadas de conexinas (21 tipos em seres humanos); as conexinas se associam
concentricamente e delimitam um canal aquoso.

- Cada conexon de uma membrana plasmtica se acopla a um conexon da outra membrana

plasmtica, formando um canal hidroflico entre duas clulas adjacentes.

- Cada juno comunicante possui um nmero varivel de canais estabelecidos pela associao
dos conexons.

Papel das junes comunicantes no acoplamento inico das clulas, permitindo a passagem de
ons inorgnicos e pequenas molculas que passem no dimetro do poro hidroflico
estabelecido entre cada dois conexons.
Especializaes do Domnio Apical da Membrana Plasmtica
Microvilos (ou Microvilosidades)

Especializaes em formato digitiforme, relacionadas ao aumento da superfcie de absoro

celular; so prolongaes da MP.

Eixo formado por um feixe de filamentos de actina; abundantes na superfcie apical; no so

visveis individualmente.

Planura estriada epitlio intestinal e borda em escova- tbulos proximais do rim.

Clios

Projees da superfcie apical de algumas clulas epiteliais (epitlio das vias respiratrias,
epitlio da tuba uterina e do tero) destinadas movimentao de partculas.

Eixo formado por um arranjo especializado de microtbulos (= axonema); so visveis

individualmente. O axonema d movimentao aos clios.

Estereoclios

Longos microvilos presentes na superfcie apical de algumas clulas epiteliais; funo

idntica dos microvilos (aumento da superfcie de absoro)

Eixo formado por um feixe de filamentos de actina. Encontrados em clulas do revestimento

do trato masculino.

MECANISMOS DE SECREO E SNTESE CELULAR DE MACROMOLCULAS

I. CONSIDERAES GERAIS

Todas as clulas so capazes de sintetizar uma serie de macromolculas, compostas de

organelas e compartimentos citoplasmticos, responsveis pelas snteses de suas prprias
macromolculas (ptns de membrana, [plasmtica e de compartimentos], protenas solveis
[destinadas aos lmens dos compartimentos ou ao meio extracelular], protenas do citossol, e
lipdios de todas as membranas).

SECREO CELULAR X EXCREO CELULAR

Os termos so opostos. Secreo configura a eliminao de alguma macromolcula

que tenha funo no organismo. Se a substancia a ser eliminada no tenha serventia, a uma
excreo.

Dois tipos de VIAS DE SECREO CELULAR:

- Via de secreo constitutiva: presente em TODAS as clulas, e ocorre continuamente

com a finalidade de abastecimento da membrana plasmtica com protenas e lipdios de
membrana e do meio extracelular com protenas solveis.
 - Via de secreo regulada: presente apenas em clulas especializadas na secreo de
substncias mediante um estmulo externo. So basicamente clulas secretoras.

Em ambas as vias, teremos a elaborao de ptns e lipdios ao nvel do RE, as quais so

conduzidas ao aparelho de golgi, e do aparelho de golgi vo surgir vesculas de transporte
contendo materiais de secreo (grnulos de secreo) que vo conter em sua estrutura
componentes que o levem para a via de secreo constitutiva ou regulada e iro para a MP.

Na via de secreo constitutiva, o granulo segue para a MP, tem sua membrana fundida com a
MP onde as ptns e lipdios se incorporam MP. Ao interior do granulo, existem molculas que
so destinadas ao MEC e que fazem parte da matriz extracelular e com isso quando ocorre a
fuso das membranas do granulo com a MP, h interao do MEC com de molculas
destinadas MEC.

Na via de secreo regulada, caso a clula receba estimulo externo (hormnio,

neurotransmissor, fator de crescimento...) essa sinalizao vai deflagrar a via de sinalizao
intracelular que vai estimular a clula a produzir determinada macromolcula. Essa via vai
estimular uma sequencia genica, que vai sinalizar o RNAm que vai decodificar determinada
ptn. Quando o granulo dessa secreo chega MP, tem sua membrana fundida com a MP e
libera o contedo granular no MEC. Essa secreo s foi eliminada mediante estimulo externo
que chegou na superfcie do receptor.

Para a sntese e secreo dessas macromolculas, teremos os: RIBOSSOMAS,

RETCULO ENDOPLASMTICO (RE) e APARELHO DE GOLGI.

a) Ribossomas

Responsveis pela traduo das ptns que uma vez traduduzidas pelo RNAm, so
transformadas em aminocidos.

b) Reticulo Endoplasmtico

Maior compartimento, aps o ncleo, responsvel pela segregao das ptns que so
produzidas pelos ribossomas e segregao de lipdios, membranas dos compartimentos
envolvidos nas vias de secreo e glicosilao inicial destas macromolculas. A membrana do
RE continua ao envoltrio externo da membrana nuclear. O conjunto de membranas do RE
vai formar duas regies:

-Retculo endoplasmtico granular (REG, retculo endoplasmtico rugoso ou RER):

Possui membranas achatadas, delimitando cisternas, que possui ribossomos que ficam na
superfcie citosslica. reas de REG so continuas reas de membrana nuclear externa, assim
como o lmen do REG continua com o lmen do REL.

Ribossomas- pequenas estruturas eltron-densas s eletromicrografias. So complexos

enzimticos formados por ptns de diferentes tipos de RNA ribossomal que se associam ao
citossol, podendo ficar livres ou associadas superfcie citossolica da membrana de REG. Cada
ribossomo constitudo por uma subunidade maior e outra menor. Elas geralmente ficam
separadas no citossol e s se unem quando estiverem engajadas na sntese de ptns. Se houver
RNAm disponvel para traduo, essas subunidades se unem e formam um ribossomo
completo. Cada ribossomo vai ter 4 sitios de ligao: 1 para o RNAm e os outros 3 para RNAt:

stio A (stio aminoacil)- onde o RNAt chega trazendo um aminocido relacionado a seu
anticdon, correspondente ao cdon na sequncia do RNAm;

stio P (stio peptidil) - para ocorre a formao da ligao peptdica entre o aminocido
recm-chegado e a cadeia polipeptdica que est em formao.

stio E (stio de sada, exit) - para onde o RNAt, j tendo transferido seu AA para a
cadeia polipeptdica, finalmente direcionado e sai do ribossoma.

Polirribossoma: havendo associao de subunidades ribossomais ao RNAm, forma-se o

polirribossoma. Os ribossomas engajados em sntese de ptns forma uma cadeia, formando os
polirribossomas, que podem estar livres no citossol ou associados superfcie citosslica do
REG. Vrios ribossomas so engajados na extremidade 5 e so desmembrados na extremidade
3 do RNAm.

Assim, polirribossomas so Molculas de RNAm em traduo. livres no citossol ou associados

superfcie citosslica do REG , onde vrios ribossomas so engajados na extremidade 5 e
so desmembrados na extremidade 3 do RNAm.

Sntese de Protenas: temos a participao do RNAt, o qual na extremidade 3 a molcula

mantem o AA a ser incorporado na cadeia polipeptdica. Tem o cdon que vai se ligar ao
anticdon e cada RNAt traz o aa especifico ao cdon que o RNAm vai apresentar ao longo de
sua sequencia.

No inicio da sntese, o RNAt iniciador, tem preso sua molcula um AA inicial da cadeia
polipeptdica, a metionina, que estando presa ao RNAt, o RNAt vai reconhecer um cdon
especifico na molcula de RNAm, chamado de cdon de iniciao (AUG). O RNAt iniciador
trazendo a metionina, ele se encaixa na metade do sitio p de unidade ribossomal menor, a
qual se associa com uma molcula de RNAm. Quando o RNAt iniciador encontrar o AUG, a
subunidade maior se acopla subnunidade menor e ai a sntese proteica se incia de fato.

Com o RNAt no sitio P, o sitio A est montado e vazio esperando a chegada do RNAt que
traga o anticdon correspondente ao proximo cdon da sequencia ao qual esta molcula de
RNAm esta trazendo. O novo RNAt se acopla ao ribossoma do sitio A, trazendo um AA e que
vai ser adicionado metionina que j estava no RNAt iniciador, formando a primeira ligao
peptdica, formando varias ligaes peptdicas, formando uma cadeia polipeptdica, conforme
mais e mais AA vao chegando.

O RNAt chega no sitio A trazendo um novo AA. A cadeia polipeptica que esta presa ao
RNAt no sitio P, se liga ao RNA recm chegado ao RNAt que est no sitio A, formando uma
nova ligao peptdica, que feita por uma enzima presente na subunidade maior: a peptidil-
transferase, a qual transfere a cadeia polipeptdica para o novo AA que chega com o RNAt que
acoplou-se. A subunidade maior ir se deslocar da menor, desfazendo temporariamente a
regulao dos stios A, P e E. Quando ocorre esse deslocamento, o RNAt que j cedeu seu AA,
passa para o sitio E e a cadeia polipeptdica fica presa ao AA que a retm. E no sitio A fica
vazio, espera de um novo RNAt.

Os ribossomas ficam entre o citoplasma e a superfcie citossolica da membrana do RE. Ora

estaro sintetizando ptns livres no citossol ou ptns associadas ao REG. Dependendo do
posicionamento dos ribossomas, as ptns que estiverem sintetizando, tero diferentes destinos.
Geralmente, ribossomas livres vo sintetizar ptns a permanecerem no citoplasma, ou ento
destinadas MTC, peroxissoma ou ncleo. As ptns com esse destino so ptns sintetizadas por
ribossomas livres.

Se houver ptns destinadas ao REG, essas ptns vo ser direcionadas para as organelas
destinadas s vias de secreo, ou para a MP, lisossomas ou para o MEC.

TODA PROTEINA TEM SUA SINTESE INICIADA NO CITOSSOL, porem se essa sntese vai ou
no terminar no citossol, vai depender, pq as ptns podem ter diferentes destinos. Isso vai
depender das sequencias de AA especial, chamadas de sequencia-sinal, que vao direcionar as
ptns para seu destino.

Ptns destinadas ao ncleo, mtc e peroxissomas, vo ter sequencias sinais que vo

direcion-las para essas organelas. Essas ptns tero sua sntese iniciada e terminada no
citossol. Ela vai ser direcionada ao seu destino aps o termino de sua traduo. Assim, essas
ptns vo ser translocadas, sendo chamadas de TRANSLOCAO PS-TRADUCIONAL.

Ptns que sero segregadas para o RE, iro possivelmente fazer parte das organelas da via
de sntese, ou da MP, ou serem eliminadas como ptns de secreo, so ptns que tem que ser
segregadas no REG, que tem sua sntese iniciada no citossol, que parada temporariamente,
pois a sequencia sinal dessa ptn vai impedir temporariamente que sua sntese, embora iniciada
no citossol no termine l. Essa parada, vai conduzir o ribossoma ate a superfcie citossolica da
membrana do REG. Quando o ribossoma se acoplar membrana do REG, a ptn vai ter sua
sntese reiniciada e vai ser injetada atravs da membrana do REG para dentro do lmen do
REG, quando ento sua sntese vai terminar. Ou seja, ao mesmo tempo em que ela est sendo
sintetizada, ela tambm est sendo segregada (translocada). Chamamos de TRANSLOCAO
COTRADUCIONAL.

PARTCULA DO RECONHECIMENTO DO SINAL (PRS) RECONHECIMENTO DE PROTENAS

EM SNTESE A SEREM SEGREGADAS NO RETCULO ENDOPLASMTICO GRANULAR (REG)

Reconhece a sequencia sinal de AA hidrofbicos em cadeias polipeptdicas nascentes, que

devam ser segregadas no REG. Uma vez havendo o surgimento dessa sequencia sinal, a PRS se
acopla ela e ao ribossoma e ela que vai levar o ribossoma e a cadeia polipeptdica cuja
sntese esta temporariamente interrompiada, at a superfcie do REG.

Hiptese do sinal- mecanismo de reconhecimento de uma sequencia sinal de AA

hidrofbicos, pela PRS. Esse mecanismo permite que uma vez que a ptn seja reconhecida pela
PRS, seja levada ate a membrana citossolica do REG, para que a ptn tenha sua sntese
reiniciada e seja segregada. Quando a sequencia sinal surge, a traduo para
temporariamente, para dar tempo da PRS reconhecer a sequencia sinal. Quando ela
reconhecer, ela tem um sitio ao qual se acopla a subunidade ribossomal maior. A PRS leva o
ribossoma ate a superfcie citossolica do REG, e l existe uma ptn receptora de PRS e uma ptn
ao qual o ribossoma vai se acoplar com sua subunidade maior. Essa ptn o complexo Sec-61,
que serve de ptn receptora para o ribossoma e ao mesmo tempo vai ser responsvel por
permitir a translocao da cadeia polipeptdica do citossol para o REG. medida que o
ribossoma se acopla ao Sec-61, ela se solta de seu receptor e volta para o citossol para pegar
mais sequencia sinal. Assim, acoplado ao Sec-61, o ribossomo reinicia a sntese de ptn e
comea a injet-la atravs da membrana plasmtica do REG. (TRANSLOCAO
COTRADUCIONAL).

A sequncia-sinal serve como uma sequncia para a introduo da cadeia polipeptdica na

membrana do REG, iniciando a translocao da protena em sntese; portanto, a sequncia-
sinal atua como uma sequncia de iniciao de transferncia (sequncia start-transfer).

Sntese de protenas solveis (protenas tornadas livres no lmen do REG aps a clivagem
da sequncia-sinal, que sero destinadas ao lmen de alguma organela da via de secreo
(REG/REL, Golgi, lisossomas) ou ao meio extracelular (via grnulos de secreo)

Peptidase do sinal- corta o peptdeo sinal da cadeia polipeptdica nascente, tendo somente
esta sequencia de AA hidrofbicos em sua molcula e tendo sido montado apenas para
reiniciar a translocao da ptn atravs do reticulo, quando a ptn termina sua sntese, ela no
continua com nenhum domnio no reticulo, ela liberada no lmen do REG, tornando-se uma
ptn livre no lmen, e portando uma ptn SOLVEL. Ptns solveis podem ter diferentes destinos.

Possibilidades de Destino de uma Protena Solvel Inicialmente Segregada no Lmen do REG

Protenas solveis inicialmente segregadas no lmen do REG podem se tornar

protenas especficas do lmen do REG (por ex., enzimas)
Do Golgi, protenas solveis podem seguir no lmen de vesculas de secreo
(constitutiva ou regulada) e finalmente lanadas no meio extracelular (protenas de
secreo)
Protenas solveis inicialmente segregadas no lmen do REG podem deixar o REG no
lmen de vesculas de transferncia advindas do REG e lanadas no lmen dos
compartimentos do Golgi, tornando-se protenas solveis especficas desses
compartimentos do Golgi
Do Golgi, protenas solveis podem seguir para os lisossomas, tornando-se hidrolases
lisossomais

Translocao e Insero de uma Protena Integral Transmembranar de Passagem nica

(Single-Pass) na Membrana do REG

Pts de membrana podem ter um ou mais domnios transmembranares, que ficam imersos
na bicamada lipdica das membranas, podendo ento ser de passagem nica ou mltipla.

A ptn da sequencia sinal vai ser responsvel por reconhecer a ptn a ser segregagda e
funcionar como start-transfer. Uma vez a ptn introduzida na membrana do reticulo pela Sec-
61, a ptn continua sendo sintetizada pelo ribossomo.
 Poder surgir uma outra possvel sequencia nos AA hidrofbicos e em surgindo uma nova
sequencia de AA, conforme a ptn for sendo deslocada ao longo da membrana e a cadeia
polipeptdica for passando pelo eixo da bicamada lipdica, essa sequencia de AA hidrofbicos
vai parar na membrana do RE. Neste ponto onde a pnt est sendo translocada, a translocao
vai parar, mas a traduo no. Essa parada da transferncia vai configurar um futuro domnio
transmembranar da membrana e este domnio fica responsvel pela parada da transferncia
durante a sntese proteica. Assim, esse peptdeo ser dominado como parada de translocao,
ou stop-transfer.

Translocao e Insero de Protenas Integrais Transmembranares de Passagem Mltipla

(Multi-Pass) na Membrana do REG

A sequencia sinal inicial vai servir como uma sequencia start-transfer para introduzir a ptn
na membrana do RE fazendo com que haja o reinicio da sntese. Da mesma maneira continua a
sntese da ptn, e depois surge uma nova sequencia de AA hidrofbicos, que vai parar a
translocao, servindo como uma sequencia strop-transfer e continua a sntese de ptn. No
final das contas, nesse caso, a sequencia sinal esta no meio da sequencia polipeptdica e no
no final e ento ela no pode ser clivada seno haver perda da cadeia, ento ela vai acabar se
tornando um domnio transmembranar a fazer parte da ptn, que serviu como sequencia sinal e
como strat-transfer.

Assim, essa ptn ter mais de um domnio transmembranar, e ela ser uma ptn integral
transmembranar de passagem mltipla. Durante a sntese de uma ptn multi-pass, cada
domnio transmembranar alterna a funo, tendo comeado a primeira sequencia de AA
hidrofbicos com a sequencia sinal start-transfer a seguinte stop-transfer, alternadamente.
Cada sequencia de AA hidrofbicos que forem surgindo na cadeia polipeptdica de uma futura
ptn integral transmembranar multi-pass vai ter esses domnios durante a montagem de uma
ptn funcionando com seus domnios de maneira alternada.

Possibilidades de Destino de Protenas Integrais Transmembranares Segregadas no REG

Da mesma maneira que ptns solveis saem do RE do lumen de vesculas de transferncia,

as ptns de membrana tambm vao sair do reticulo atravs de uma vescula de transferncia,
que se forma atravs do RE, trazendo uma ptn de membrana que vai se fundir com o primeiro
compartimento do golgi e quando se fundir, incorpora sua membrana com a membrana desse
compartimento, e incorpora tambm as ptns de membrana membrana desse
compartimento e no golgi, o transito de vesculas de transferncia, passando de sculo para
sculo, vai posicionar ptns de membrana de maneiras diferentes.

No ap de golgi vo surgir os grnulos destinados a formar os lisossomas e os grnulos

destinados a liberar ptns solveis e os grnulos vao ter em suas membranas ptns integrais
transmembranares e quando o granulo se aproximar da MP e tiver sua membrana fundida,
esses grnulos sero incorporados MP, que o que ocorre na via de secreo constitutiva.

Protenas integrais transmembranares inicialmente segregadas na membrana do REG

podem permanecer como protenas integrais transmembranares da membrana do RE
 Protenas inicialmente segregadas no REG podem seguir para o Golgi e se tornar
protenas integrais transmembranares dos compartimentos do Golgi
Do Golgi, protenas podem seguir para lisossomas, tornando-se protenas integrais
transmembranares de lisossomas
Do aparelho de Golgi, protenas seguem na membrana de vesculas de secreo
(constitutiva ou regulada) e se tornam protenas integrais transmembranares da
membrana plasmtica

Glicosilao N-Ligada

As ptns durante a sua sntese com ribossomas associados ao RE (ou seja, durante sua
segregao), todas as ptns tem radicais glicdicos associados suas molculas, e por isso so
ditas glicoprotenas (protenas muito glicolisadas). Essa adio de radicais glicdicos, que
chamamos de glicosilao. Essas ptns so glicosiladas durante a sua sntese (translocao) no
REG, e essa translocao bastante especfica, pois ela vai ser feita exatamente a um resduo
de um AA. Existe um AA ao qual as cadeias de oligossacardeos (pequena cadeia de
carboidratos simples associados em pequena quantidade) que adicionada toda vez que
durante a sntese de ptn surgir um determinado AA, que a ASPARAGINA (N). A asparagina
o AA ao qual sero add cadeias de oligossacardeos, e toda vez que aparecer uma cadeia
polipeptdica, ela sero add a asparagina. J que a asparagina que vai receber a cadeia
oligossacardica que ocorre no REG durante o momento de translocao da ptn, chamamos de
glicosilao N-ligada. Sempre que aparecer a asparagina na cadeia, sero adicionados
oligossacardeos.

Como acontece? Bom, na membrana do REG existe um lipdio especifico, o qual o

dolicol-fosfato. Ele atravessa quase toda a bicamada lipdica da membrana do REG, e ele que
sustenta as cadeias de oligossacardeos e ele quem vai ceder a cadeia oligossacardica para
que ela possa ser transferida enzimaticamente para a cadeia polipeptdica em processo de
sntese. Essa transferncia da cadeia polipeptdica para o resduo de asparagina um evento
enzimtico, realizado por uma enzima na membrana do REG, que vai fazer a transferncia do
radical glicdico (oligossacardio) para a cadeia polipeptdica. Essa enzima a oligossacaril-
transferase.

Quando h a transferncia do oligossacardeo para o resduo de asparagina, esse

oligossacardeo ter 14 glicidios em sua composio, os quais so 2 residuos de N-acetil-
glicosamina, 9 residuos de manose e 3 residuos terminais de glicose.

Os oligossacardeos so obtidos atravs do citossol e o dolicol recolhe os vrios

glicdios do citossol e vai tendo em sua molcula a moldagem progressiva da cadeia
oligossacardica. Esses glicdios que vao montar a cadeia, so cedidos por vrios substratos,
principalmente nucleotdeos. Quando chegar +- na metade da configurao do
oligossacardeo, o dolicol vai trocar de posio na bicamada e vai colocar os glicdios da
metade da cadeia que esto no citossol, para dentro do lmen do REG. Assim, o dolicol
realizou flip-flop ( muito mais comum nesse caso). A manosidase remove manose e a
glicosidase remove glicose e no final das contas, o oligossacardeo fica apenas com 2 N-acetil-
glicosaminas e 3 manoses.
 As ptns so produzidas tanto no citossol (sua sntese sempre iniciada l, mas se ela
vai terminar la ou no, depende de suas sequencias-sinal). Quando uma ptn produzida, ela
precisa adquirir uma configurao molecular especifica, que faz com que ela seja dobrada.
Para isso, existem as chaperonas moleculares, que so ptns que se associam cadeia
polipeptdica j em formao, antes mesmo dela terminar as chaperonas j vao moldando a
molcula de ptn. O dobramento pelas chaperonas podem ser totais ou parciais. A maioria das
chaperonas pertence famlia das protenas do choque trmico (Hsp heat shock proteins).
Tambem existem chaperonas no REG.

Via da ubiquitina-proteassoma

a via de degradao de centenas ou milhares de protenas (protenas

reguladoras, ou protenas mal formadas/mal dobradas, ou protenas aberrantes) no
citossol. Caso ocorra algum defeito na produo das ptns, no dobramento, na
arrumao, na configurao etc. sero destinadas destruio, pela via da ubiquitina-
proteassoma. Para que as ptns mal formadas sejam destrudas, elas precisam ser
reconhecidas pela ptn ubiquitina, a qual existe em todas as clulas e ela quem vai se
ligar s ptns a serem degradadas. Ir ocorrer uma Poliubiquitinilao da protena-alvo
(marcao da protena-alvo com vrias molculas de ubiquitina) e ento uma vez
poliubiquitinalada, a ptn mal formada conduzida a um grande complexo proteico, o
proteassoma, constitudo por varias cadeias de polipeptideos associados (Receptores
para a ubiquitina no proteassoma favorecem a ligao da protena a ser destruda com
o proteassoma). medida que ela passa atravs do proteassoma, a protena clivada
dentro do proteassoma em pequenos peptdeos, ao qual ela entra por um orifcio e
seus fragmentos saem por um outro orifcio, onde se formam pequenos peptdeos ou
AA livres, que sero utilizados para a sntese de novas ptns.

No REG, tambm temos chaperonas, as quais podem ser solveis(calreticulina) ou

integrais transmembranares (calnexina). A calnexina organiza o dobramento das ptns
de membrana e tbm pts solveis. A glicosilao parece atuar na definio para o
dobramento das protenas. Aps a adio do oligossacardeo, uma das glicoses vai
servir como isca para a calnexina, a qual vai identificar a ptn a ser dobrada e vai
liberar essa ptn a medida que ela for dobrada. Se a ptn for bem dobrada, ela perde a
glicose de sua extremidade, mas caso o dobramento no ocorra, ela recebe uma nova
glicose de modo que permita o reconhecimento desse oligossacardeo pela calnexina.
Protenas mal-dobradas no lmen do REG so translocadas para o citossol, onde so
deglicosiladas, ubiquitiniladas, e finalmente degradadas em proteassomas.

- Retculo endoplasmtico liso ou agranular (REL ou REA).

Conjuntos de tbulos e vesculas anastomosados e de superfcie lisa, sem ribossomas

associados superfcie citosslica de sua membrana. Esses tbulos, quando cortados em
cortes longitudinal e transversal, se mostram extremamente anastomosados, formando uma
rede difusa. As funes gerais so:
- Regio de formao de vesculas de transporte de protenas e lipdios do REG para o aparelho
de Golgi (RE de transio). RE de transio REL, de onde partem as vesculas de transferncia
em direo ao aparelho de golgi, levando os produtos recm organizados no RE para o golgi.

- Sequestro/liberao de Ca2+ do/para o citossol: o REA evita altas concentraes de clcio

mantidos no citossol. Existem canais de CA que se abrem mediante os receptores de IP3,
liberando-os para o citossol, da mesma maneira que no REL existem ATPases que coloca o
clcio para dentro de novo.

- Sntese de lipdios de membranas: sintetizados na membrana do REA.

Existem clulas em quem o REL mais desenvolvido, como o caso de clulas

secretoras de hormnios esteroides, os quais so produzidos por clulas em que possuem
grande quantidade de REL, pois varias enzimas de molculas de colesterol esto no REL, e
essas enzimas modificam as molculas de colesterol, como ocorre nas clulas de Leydig
(testculos e tbulos seminferos, produzem a testosterona); clulas da teca interna dos
folculos ovarianos (produzem os hormnios estrgenos) ; clulas da regio cortical da
glndula suprarrenal.

Os hepatcitos do fgado tambm so ricos em REL, o qual tem varias funes:

- na membrana do REL, encontraremos enzimas da famlia citocromo P450, a qual inativa

vrios compostos txicos (medicamentos, hormnios, inseticidas...), adicionando ou
removendo radicais nesses compostos txicos.

- tambm h enzimas que degradam o glicognio, o qual uma forma de armazenamento de

glicose. Os grnulos de glicognio ficam associados ao REL pois nele que ha enzimas que
quebram o glicognio, proporcionando a disponibilizao de glicose.

- no REL que ocorre a modificao de uma molcula intil para o organismo, a bilurrubina
(obtida pela degradao das hemcias, no qual uma parte da hemoblobina transformada em
bilirrubina), um dos componentes da bile a bilirrubina, e para que ela seja eliminada,
necessrio que a molcula de bilirrubina seja convertida de uma forma insolvel para uma
forma solvel para que ela seja excretada pelos hepatcitos, e isso que o REL faz, a torna
solvel, pois h uma enzima que adiciona um radical solvel essa molcula, tornando-a
solvel tambm.

Outro lugar em que o REL tambm muito desenvolvido, nas clulas musculares
estriadas esquelticas e cardacas. Nessas reas, o REL denominado de reticulo
sarcoplasmtico, que uma rede anastomosada de vrios tbulos. Essa rede de tbulos
anastomosados, fica disposta ao redor dos filamentos contrateis, as miofibrilas. As fibras
musculares, o REL sequestra e libera os ions clcio, que fundamental para a contrao
muscular.

Sntese de Fosfolipdios de Membrana na Membrana do REA

Essa sntese de lipdios ocorre essencialmente no folheto citosslico da membrana do

REL. As reaes de sntese de lipdios de membrana esto restritas a esse folheto. Chamamos
na MP de folheto interno e externo, mas as membranas dos compartimentos, a referencia tem
que ser o citossol e o lmen (folheto citosslico e luminal).

Essa sntese tem inicio a partir de cidos graxos so poucos solveis no citossol, que so
transportados por ptns de ligao de cidos graxos, que os insere no folheto citosslico da
bicamada, com o primeiro precursor, o acido fosfatidico, que vai dando origem ao diacil-
glicerol, e depois h adio do grupamento especfico da cabea do fosfolipdio (por ex., colina
na fosfatidilcolina).Em resumo: A sntese ocorre exclusivamente no folheto citosslico da
membrana do REA. Transferncia de cidos graxos (AGs) por protenas transportadoras de AGs
at a membrana do REA - adio de 2 AGs ao glicerol-fosfato para produo de cido
fosfatdico (AF)-> perda do fosfato e converso do AF em diacilglicerol (DAG) - adio do
grupamento especfico da cabea do fosfolipdio (por ex., colina na fosfatidilcolina).

Como a sntese ocorre apenas no folhto citossolico, o luminal permanece na dele, ento
para equilibrar, deve-se fazer o flip-flop, atravs de uma flipase chamada escramblase.

c) Aparelho de Golgi

Finalizao da sntese e secreo das molculas. Ocorre glicosilao terminal das

molculas inicialmente segregadas no RE e definio dos destinos destas molculas
(membrana plasmtica lisossomas meio extracelular), alm da elaborao de grnulos ou
vesculas de secreo.

Conjunto de vrios sculos achatados, formando uma pilha de golgi, sendo que cada
sculo delimita uma cisterna. Durante os saculos do golgi, as molculas sofrero modificaes,
e vao sair do golgi a partir da superfcie cncava (face trans).

Face cis -> Face cncava; face de recepo de molculas previamente organizadas no RE,
recebe vesculas de transporte a partir do RE de transio;

Face trans -> Face convexa; face voltada geralmente para uma das superfcies da clula
(ou domnio de membrana plasmtica), de onde partem as molculas prontas para seus
destinos: MP, lisossomas ou MEC.

O Apareho de golgi difere em quantidade nas clulas, trabalhando nos eventos de sntese
de macromolculas. Dependendo da necessidade funcional que a clula apresente, o aparelho
de golgi ser tanto mais envolvido, quanto maior forem as necessidades dessa sntese de
macromolculas. O ap de golgi constitudo por um conjunto de vrios sculos achatados
sobrepostos, dessa maneira ele um conjunto de compartimentos. De acordo com o
posicionamento de cada sculo, teremos os seguintes compartimentos:

Compartimentos do aparelho de Golgi

Rede cis-Golgi (cis-Golgi network, CGN): recebe as macromolculas previamente

organizadas no RE. As vesculas de transferncia do RE saem e se fundem com a
membrana da rede cis-golgi, quando vo descarregar as macromolculas, estejam elas
na membrana ou no lmen.
Cisterna cis
 Cisterna medial
Cisterna trans
Rede trans-Golgi (trans-Golgi network, TGN): rede anastomosada de membranas, as
membranas delimitam espaos e assume a configurao de uma rede. Est voltado
para a face trans. Quando a ptn sai do RE, sinal de dois aspectos: ela ainda sofrera
modificaes adicionais do ap de golgi ou ela ter um destino mais adiante, que requer
que ela siga uma via de secreo saindo do RE e indo pro golgi.

As extremidades do golgi so geralmente dilatadas, pois a partir dessas extremidades

que vo brotar vesculas que vo levar as macromolculas de um sculo para outro.

Compartimentos do Aparelho de Golgi Distribuio Funcional

 Cada sculo do golgi vai apresentar funes especificas relacionadas ao seu conjunto
de enzimas. O golgi o sitio essencial para eventos adio e remoo de carboidratos
(glicosilao). A glicosilao N-ligada o primeiro passo de adio e remoo de carboidratos,
e outras modificaes vo acontecer no golgi, que em termos gerais, por conta do golgi estar
envolvido essencialmente nos eventos finais na modificao de carboidtaros de lipdios e ptns,
assumimos que ocorre a glicosilao terminal. Todas as enzimas atuantes na glicosilao
(glicosil-transferases e glicosidases) e em outros mecanismos bioqumicos do Golgi so
protenas integrais transmembranares dos compartimentos do Golgi.

Teremos enzimas que adicionem e que retirem carboidratos aos seus substratos. As
que adcionam, so geralmente chamadas glicosil-transferases, e as que retiram, clivam os
carboidratos dos substratos so genericamente chamadas de glicosidades. Ao longo do golgi,
existem inmeras enzimas, na qual a grande maioria delas so ptns integrais
transmembranares. Em cada subcompartimento, encontraremos reaes especificas.

Na rede cis golgi, ocorre um evento bioqumico fundamental para a formao dos
lisossomas, pois vai haver a marcao daquelas ptns que sero futuras enzimas dos lisossomas,
ou seja, vai haver a marcao das futuras hidrolases lisossomais. A ptn sera marcada com um
radical fosfato, que configura uma fosforilao especifica nos carboidratos das futuras enzimas
lisossmicas. Essa marcao importante para que futuramente ela seja levada at o
lisossoma.
 Na cisterna-cis, ocorre essencialmente remoo de resduos de manose, grande parte
da manose removida quando as ptns passam pela cisterna-cis, por ao de glicosidades
especificas.

Cisternas mediais: os oligossacardeos tero mais resduos de manose removidos e

sero adicionados glicdios de N-acetil-glicosamina.

Cisternas-trans: adio de dois carboidratos - galactose e NANA (acido N-acetil-

neuraminico).

Rede trans-golgi: ocorre eventos especficos, de moo que quando a ptn chega aqui,
basicamente semi-prontas, elas vao sofrer poucas modificaes, ocorrendo sulfatao de
tirosinas e carboidratos.

Proteoglicano: tem uma ptn central que forma seu eixo, ao qual vai estar ligada uma
quantidade varivel de cadeia de polissacardeos, denominados de glicosaminoglicanos (GAGs,
que so polissacardeos de cadeia longa). Os GAGs vo fazer parte do glicoclice da clula.
medida que varias cadeias de GAGs vo sendo organizadas associadas uma ptn, vai havendo
a montagem de proteoglicano, que pode ser destinado matriz extracelular, neste caso
solvel no lumen da cisterna do golgi, ou ento parar na MP como um proteoglicano de
membrana, com seus GAGs voltados para o MEC e fazendo parte do glicoclice.

A maioria dos oligossacardeos das ptns, por apresentarem uma variedade de

carboidratos em sua composio, so ditos de carboidratos complexos (manose, galactose
etc). H oligossacardeos com alto nvel de manose em suas pores terminais, e ento eles
quase no sofrem modificaes ao longo do aparelho de golgi.

OBS: Glicosilao N-ligada -> adio de oligossacardeos a resduos de asparagina;

ocorre no REG. Alm de ser adicionado na asparagina, ela caracterizada pela transferncia de
uma cadeia de oligossacardeos inteira.

Glicosilao O-ligada -> adio de oligossacardeos a resduos de serina e treonina;

ocorre no Golgi. Apenas um carboidrato de cada vez adicionado na enzima, vai havendo a
montagem de um oligossacardeo. O nome se d pelo fato do Oxignio se ligar ao AA.

Clula caliciforme -> clula epitelial encontrada no revestimento dos tratos digestrio e
respiratrio, especializada na secreo de glicoprotenas (muco). Glicoptns so ptns que
possuem muitos radicais glicdicos e isso faz com que elas sejam encontradas em vrios tipos
de secrees, que se deve aos radicais glicdicos associados essas ptns. O termo muco um
termo genrico para uma secreo, que seja rica em molculas ricas em carboidratos e tbm
em GAGs (glicdios de cadeia longa e que compem grande viscosidade secreo). Vo ser
dotadas de grande quantidade de organelas de sntese, incluindo REG ,e golgi bem
desenvolvido. Os grnulos de secreo aparecem na regio apical e so eliminados por
exocitose. O muco diminui o atrito do intestino com o bolo fecal, e no trato respiratrio, o
muco lubrifica as vias respiratrias e captura impurezas do ar para serem expulsas para fora.

A rede trans-golgi, ultimo subcompartimento do golgi que esta localizado na parte

trans, vai definir os destinos das macromolculas solveis/de membrana que a chegam:
- membrana plasmtica (protenas integrais transmembranares e lipdios de membrana -> via
de secreo constitutiva); ptns de membrana na rede trans-golgi vao partir a partir de grnulos
de secreo e indo em direo MP, e quando os grnulos de secreo se fundirem, vai
incorporar esses grnulos MP, fazendo com que esses lipdios e ptns faam parte da MP.

- lisossomas (enzimas [hidrolases] lisossomais e protenas da membrana dos lisossomas); Os

lisossomas so grnulos de secreo especificas com enzimas hidrolases. As enzimas
destinadas ao lisossomas sero veiculadas at o endossoma para serem destinadas aos
lisossomas.

- protenas solveis de secreo (vias de secreo constitutiva e regulada) para o meio

extracelular. No interior do granulo, h ptns solveis que iro para o MEC, liberados por meio
de um estimulo especifico (regulado pela via de secreo regulada).

Topologia da Via de Secreo

O lmen do retculo endoplasmtico e dos sculos do aparelho de Golgi equivalente sob o

ponto de vista topolgico ao meio extracelular. Observe que os domnios das protenas
integrais transmembranares (devidamente glicosiladas) transportadas do REG para o Golgi, e
do Golgi para a superfcie celular, mantm-se na mesma posio nas respectivas membranas.
O lumen de qualquer organela equivalente ao MEC e isso dado pela posio preservada
pelos lipdios e ptns de membrana na sua mesma posio durante o trajeto da via de secreo,
o que reitera a topologia da via de secreo.

Noes Gerais sobre Transporte Vesicular entre Compartimentos

Celulares

Dentro do ap de golgi, de cada sacuko brota uma vescula que se funde com o prximo saculo
e assim por diante, ento temos um transito vesicular. Do golgi, surgem vesculas que vao
partir para 3 destinos possveis, e ento devemos saber que esse trafego vesicular, temos
sempre compartimentos dos quais vao brotar vesculas de suas membranas, trazendo
macromolculas de seu lumen ou de sua membrana, que so de compartimentos doadores
(compartimento-alvo, ao qual ter sua membrana fundida e seus elementos so fundidos).

As vesculas de transporte vo se formar em locais especficos, s custas de envoltrios

especficos. Existem pelo menos 3 tipos de envoltrios proteicos formados por ptns especificas
envolvidos no transporte vesicular:

Clatrina: rede trans-Golgi -> endossomas/lisossomas; rede trans-Golgi -> membrana

plasmtica (vesculas da via de secreo regulada); membrana plasmtica -> endossomas
(endocitose). Tambem esta envolvida na formao de grnulos de secreo da via de secreo
regulada.

COPI: transporte entre sculos do Golgi; rede trans-Golgi -> membrana plasmtica (vesculas
da via de secreo constitutiva); transporte retrgrado entre os sculos do Golgi, e do Golgi
para o RE. A COP I vai ser responsvel pelo transporte entre os saculos do golgi, entre um
saculo e outro. MOleculas de cop I se organizam em rede, tracionando as vesculas da rede
trans-golgi.

COPII: RE -> rede cis-Golgi.Faz o transito de molculas do reticulo para o golgi, atravs dos
elementos de transio.

H ptns que so residentes do RE e esto misturadas s ptns solveis. Essas ptns residentes do
RE, podem ir para o golgi, porm h ptns receptoras que reconhecem ptns residentes do REG,
e esse reconhecimento determinado por uma sequencia de AA, a sequencia KDEL, a qual
tem 4 AA (K= lisina; D = aspartato; E = glutamato; L = leucina). Essa sequencia identifica numa
cadeia polipeptdica, as ptns residentes do REG e para isso existe um mecanismo de
recuperao de ptns que tenham escapados do RE. Assim, as ptns receptoras que esto na
membrana do golgi, vo reconhecer a sequencia KDEL e essa ptn receptora se ligando
sequencia KDEL da ptn escapadora, vai fazer com que ela volte ao REG, recuperando-a. A COPI
responsvel por fazer esse retorno retrogrado da ptn. Isso feito constantemente do golgi
para o RE, quando uma ptn foge de seu lugar.

Grnulos de Secreo (ou Vesculas de Secreo)

Zimogenio- precursor de enzimas.

A exocitose de um contedo granular feito atravs da fuso da membrana do granulo de

secreo com a MP de uma superfcie celular. A exocitose a liberao de um contedo para o
MEC. Apenas o contedo granular eliminado, e no o granulo de secreo!!!

MECANISMOS DE FUSO DE VESCULAS

As ptns SNARES governam e regulam os mecanismos de fuso de vesculas nos

compartimentos-alvos. As SNARES so receptores para ptns SNAP.

SNAP, por sua vez, uma sigla para PTN de adeso ao NSF solvel. O NSF uma ptn solvel no
citoplasma, que uma ATPase, e tem esse nome pq ela sensvel a uma droga (NSF= fator (ou
protena) sensvel N-etil-maleimida (N-ethylmaleimide sensitive fusion protein)
Toda vescula destinada a se fundir a um compartimento alvo, ela tem na sua membrana uma
SNARE que vai se fundir com outra SNARE o compartimento alvo. A SNARE da membrana das
vesculas se chama V-SNARE, que vai se fundir com a membrana dos compartimentos-alvos (T-
SNARES).

Primeiro h a necessidade da aproximao da vescula com a membrana do compartimento

alvo, mediada pelas ptns Rab, que formam uma famlia de GTPases, que se utlizam do GTP
para exercer suas funes. Quando a aproximao terminada, vai ocorrer a ancoragem da
vescula com a membrana do compartimento alvo, em que ocorre a associao da V-SNARE
com a tSNARE, e as vesculas da tSNARE com a VSNARE se entrelaam e se fusionam e a o
contedo da vescula descarregado do compartimento aps a fuso da membrana da
vescula com a membrana do compartimento alvo. Aps a fuso, a funo delas provocar a
fuso das membranas.

A entra o NSF, o qual vai desfazer o entrelaamento entre a tSNARE e a vSNARE na membrana
e a vai haver a fuso do NSF com as ptns SNARES que juntas vao desfazer esse
entrelaamento, fazendo com que elas sejam novamente reutilizadas em eventos de fuso de
vesculas com compartimentos alvos.

LISOSSOMAS
Compartimentos envolvidos por membrana, preenchidos com enzimas hidrolticas solveis
(hidrolases cidas) que controlam a digesto de macromolculas.

As hidrolases lisossomais de diferentes tipos so mantidas ativas no interior dos

lisossomas em um pH ~ 4,5-5,0; este pH mantido graas a uma H+-ATPase (bomba de H+) da
membrana dos lisossomas.

A principal hidrolase presente nos lisossomas a fosfatase cida.

A maioria das protenas de membrana dos lisossomas altamente glicosilada, de modo a

proteger a membrana contra a ao das hidrolases.

Funo de digerir, degradar produtos internalizados pelas clulas ou at mesmo

degradar componentes da prpria clula em situaes especiais. Ou seja, eles esto envolvidos
em eventos de digesto intracelular, graas presena de hidrolases em seu interior, as quais
so mantidas ativas em um pH em torno de 5 dentro dos lisossomas, que mantido graas
uma ATPase na membrana dos lisossomas, que bombeia constantemente prtons H+.

Os lisossomas so muito semelhantes a qualquer granulo de secreo, isso faz com

que eles sejam difceis de serem visualizados em tcnicas de visualizao de rotina. Quando
eles esto em atividade, ou seja, quando esto digerindo, dito que ele um lisossoma
secundrio. Assim, para melhor visualizao deles, faz-se a marcao citoquimica para a
fosfatase cida quando ele est digerindo substratos pela enzima especifica, e quando houver
essa degradao haver deposio do material de forma eletron-densa, permitindo a
visualizao dos lisossomas.

Funes dos Lisossomas na Digesto Intracelular

- Endocitose (de fase fluida ou mediada por receptor)

- Fagocitose (ingesto de partculas maiores) atravs da emisso de pseudpodos ou por

fagossoma, que levado at um fagossoma, quando se forma um fagolisossoma e as enzimas
comeam a digerir. Aps a passagem por endossomas, eles sero formados em lisossomas.

- Autofagia : destruio de organelas velhas que no servem mais clulas. formado um

autofagossoma que direcionado ao lisossoma.

As enzimas lisossomais so marcadas para tal na rede cis golgi e vamos observar que
na rede cis golgi ocorre um evento de fosforilao nas enzimas lisossmicas. Hidrolases
lisossomais so identificadas como tais a partir da presena de um marcador, a manose-6-
fosfato (M6P); na rede cis-Golgi (CGN), um fosfato adicionado ao carbono 6 de um resduo
de manose do oligossacardeo da protena. A adio de um radical fosfato ao carbono 6 dos
resduos de manose dos oligossacardeos feita por uma enzima, a N-ACetil-Glicosamina-
transferase. E essa adio faz com que agora seja chamado de manose-6-fosfato e permite que
elas sejam identificadas como futuras hidrolases lisossomais.

Hidrolases lisossomais apresentam uma regio sinalizadora em sua molcula,

reconhecida por um stio especfico da enzima GlcNAc-fosfotransferase; esta mesma enzima
catalisa a transferncia de um fosfato da UDP-GlcNAc para o carbono 6 do resduo terminal de
manose do oligossacardeo da protena.

Na membrana da rede trans-Golgi (TGN), existem receptores para manose-6-fosfato,

os quais reconhecem a M6P no oligossacardeo das hidrolases lisossomais e se ligam a esse
resduo, permitindo o direcionamento das hidrolases lisossomais para os endossomas iniciais.

As pequenas vesculas que partem da rede trans-Golgi contendo hidrolases lisossomais

em direo aos endossomas iniciais so consideradas como lisossomas primrios, destinados a
abastecer endossomas e fagossomas. Conforme os lisossomas primrios se fundem aos
endossomas iniciais (contendo algum material a ser digerido), estes vo se tornando
endolisossomas (perodo de transio), e progressivamente vo adquirindo hidrolases e
protenas tpicas de lisossomas, at sua converso a lisossomas secundrios (com atividade
digestria). Quando o lisossoma primrio se fundir com a membrana do endossoma, a
hidrolase lisossomal se destaca de seu receptor e fica livre dentro do endossoma, e ai o fosfato
que serviu com o identificao, esse fosfato removido, e a remoo do fosfato do carbono 6,
faz com que as enzimas lisossmicas passem a ser enzimas lisossmicas tpicas.

Uma vez tendo atingido os endossomas, as hidrolases perdem o fosfato do carbono 6

dos resduos de manose dos oligossacardeos. Os receptores para M6P so reciclados do
endossoma para a rede trans golgi com o auxlio do revestimento retrmero.

Importncia Clnica dos Lisossomas

Doenas do Armazenamento Lisossmico (resultantes de defeitos que provocam o acmulo de

substratos no-digeridos em lisossomas, com diversas consequncias patolgicas, mais
frequentemente no sistema nervoso) Exemplos:
 doena das incluses celulares (I-cell disease) (ausncia de hidrolases em lisossomas
de fibroblastos);

doena de Gaucher (deficincia da enzima glicocerebrosidase);

doena de Tay-Sachs (deficincia da enzima hexosaminidase): enzimas no so

reconhecidas por manose6fosfato, no h direcionamento de enzimas para os lisossomas,
fazendo com que eles fiquem vazios.

INCLUSES CITOPLASMTICAS
Materiais ou substratos de diferentes naturezas (lipdios, pigmentos, cristais proteicos,
glicdios, entre outros), de natureza no-viva, armazenados temporariamente no citoplasma
em quantidades variveis em diferentes tipos celulares. De alguma maneira, essas incluses
sero utilizadas pela clula.

a. Gotculas Lipdicas

Formadas por triglicerdeos e steres de colesterol; presentes em diferentes tipos celulares.

Clulas adiposas so especializadas no acmulo de lipdios. Tecido adiposo armazenam
gotculas lipdicas.

Gotculas lipdicas armazenam lipdios neutros (triacilglicerdeos e steres de colesterol),

sintetizados a partir de enzimas da membrana do retculo endoplasmtico. Estes lipdios
neutros so depositados entre as duas monocamadas da membrana do RE, se agregam em
uma gotcula tridimensional, a qual finalmente brota da membrana do retculo, circundada por
uma monocamada de fosfolipdios e protenas associadas. Conforme esses lipdios vo sendo
sintetizados, eles vo se acumulando, eles vo se juntando gradativamente e formam uma
gotcula lipdica. medida que essa gotcula aumenta, ela se destaca, levando ao seu redor
um folheto que envolve cada gotcula lipdica, com uma srie de ptns associadas.

b. Grnulos de Glicognio

Pequenos agregados de grnulos eltron-densos com aspecto semelhante a amoras.

Frequentemente presentes em clulas musculares e em hepatcitos (clulas funcionais do
fgado). O glicognio vai aparecer em quantidades variveis nas clulas que o armazenam. No
hepatcito, a quantidade de glicognio armazenada grande. Ficam associados na membrana
do REL, pois na membrana dele que as enzimas o clivam para gerar glicose. Esses grnulos
no possuem membranas envoltrias.

c. Cristais (ou Cristaloides)

Estruturas de natureza geralmente proteica, de formato geomtrico ou poligonal, sem funo

definida ou conhecida.

d. Grnulos de Lipofuscina

Grnulos contendo material no-digerido por hidrolases lisossomais e retidos

temporariamente no citoplasma de diferentes tipos celulares (corpos residuais); comuns no
envelhecimento celular (senescncia). Representam lisossomas que tiveram seus materiais
no digeridos em seu interior. Alguns autores consideram como um lisossoma tercirio.
medida que no ocorra a digesto do material dentro dos lisossomas, eles so mantidos
dentro dele e a so chamados de grnulos de lipofuscina.