TUGAS K3

SOP (Standar Operasional

Prosedur)
Pewarnaan Gram

DISUSUN OLEH :

Nama : Lale Nurkhaeratul Musdiqah

NIM : P07 134 114 072

KEMENTERIAN KESEHATAN REPUBLIK

INDONESIA
POLITEKNIK KESEHATAN MATARAM
JURUSAN ANALIS
SOP Pewarnaan Gram (Lale N.M) | 1
 2015/2016

Kementerian Kesehatan Nomor SOP

REPUBLIK INDONESIA
POLTEKKES KEMENKES MATARAM Tgl Pembuatan : 26 November 2016

Tgl revisi :-

Tgl efektif :-

Disahkan oleh : Direktur

Nama SOP : SOP Pewarnaan Gram

DASAR HUKUM KUALIFIKASI PELAKSANA

1. a.

KETERKAITAN PERALATAN / PERLENGKAPAN

SOP pewarnaan Gram di Laboratorium oleh 1. Kaca objek

Mahasiswa 2. Bak pewarnaan
3. Pipet tetes
4. PZ
5. Cat gram 1 (Gentian violet)
6. Cat gram 2 (Lugols iodine)
7. Cat gram 3 (Etanol 96%)
8. Cat gram 4 (Safranin)
9. Air
10. Lampu spirtus
11. Ose
12. Spesimen / Media (padat / cair)

PERINGATAN PENCATATAN DAN PENDATAAN

Apabila prosedur pengecatan gram ini dilakukan

dalam waktu yang tidak tepat (terlalu kurang atau
terlalu lebih mengambil waktu) serta tidak
melakukanya dengan baik akan di dapatkan
sediaan yang kurang optimal untuk identifikasi
jenis bakteri di dalam Laboratorium

DATA KEGIATAN

1. Nama SOP : Pewarnaan Gram di Laboratorium

2. Jenis Kegiatan : Rutin

3. Penanggung Jawab : Sub Unit Laboratorium

a. Produk : Penanggung jawab Lab

b. Kegiatan : Pewarnaan Gram

4. Scope / ruang lingkup : Program Studi D-III dan D-IVAnalis Kesehatan

SOP Pewarnaan Gram (Lale N.M) | 2

 IDENTIFIKASI KEGIATAN

Nama Kegiatan : Pengecatan gram untuk identiikasi bakteri di laboratorium Mikrobiologi POLTEKKES

Langkah Awal : Mahasiswa menyiapkan segala jenis alat dan bahan yan diperlukan dalam kegiatan
pewarnaan gram di dalam Laoratorium Mikrobiologi Politeknik Kesehatan Kemenkes
Mataram khususnya jurusan Analis Kesehatan

Langkah Utama : Praktikan melakukan pewarnaan gram dengan membuat sediaan dan mengecatnya
menggunakan cat gram 1, cat gram 2, cat gram 3 dan cat gram 4

Langkah Akhir : Praktikan melakukan pemeriksaan terhadap sediaan yang di dapatkan setelah
mengecat gram

IDENTIFIKASI LANGKAH

Langkah awal Mahasiswa melakukan persiapan sebelum melakukan pewarnaan gram dengan
menyiapkan alat serta bahan yang dibutuhkan dalam prosedur pewarnaan gram di
dalam Laoratorium Mikrobiologi Politeknik Kesehatan Kemenkes Mataram khususnya
jurusan Analis Kesehatan

Langkah Utama Praktikan melakukan pewarnaan gram dengan membuat sediaan dan mengecatnya
menggunakan cat gram 1 (Gentian Violet) , cat gram 2 (Lugols Iodine) , cat gram 3
(Etanol 96%) dan cat gram 4 (Safranin)

Langkah akhir Praktikan mendapatkan sediaan yang sudah dilakukan pewarnaan gram dan
melakukan pemeriksaan/identifikasi terhadap sediaan tersebut dibawah mikroskop
dengan perbesaran 100x lensa objektif

SOP Pewarnaan Gram (Lale N.M) | 3

 Mutu baku Mutu Baku.

No. Kegiatan Sub Penanggung Mahasiswa Kelengkapan Waktu Output

Unit jawab Lab Ket
Lab

1 Praktikan menyiapkan alat Alat-alat 5 menit

dan bahan yang laboratorium
dibutuhkan untuk
melakukan
pengecatan/pewarnaan
gram

2 Praktikan menghilangkan Kaca objek 1 menit

lemak pada kaca objek Lampu spirtus
dengan melewatkannya
pada nyala api spirtus

3 Praktikan meneteskan PZ Kaca objek 10 detik

pada kaca objek sebanyak PZ
1 tetes Pipet tetes

4 Praktikan menyentuhkan
ujung ose steril (sudah di Ose
bakar pada nyala api) Lampu spirtus 2 Menit
pada spesimen atau Spesimen atau
sampel diduga media(padat/cair)
mengandung bakteri atau Kaca objek
pada koloni bakteri yang
yang tumbuh pada media
(padat/cair) yang akan
diamati dan
meletakkannya pada kaca
objek dengan PZ dan
dihomogenkan

5 Setelah sediaan kering,

praktikan meletakkan Bak pewarnaan
sediaan pada bak Cat gram 1 1 menit
pewarnaan kemudian Stopwatch
menggenangi sediaan
dengan cat gram 1
(Gentian violet)

6 Praktikan membilas 10 detik

sediaan dengan air Air mengalir
mengalir

7 Praktikan menggenangi Bak pewarnaan 1 menit

sediaan dengan cat gram Cat gram 2
2 (Lugols iodine) Stopwatch

8 Praktikan membilas 10 detik

sediaan dengan air Air mengalir
mengalir

9 Praktikan menggenangi Bak pewarnaan 30 detik

sediaan dengan cat gram Cat gram 3
3 (Etanol 96%) Stopwatch

SOP Pewarnaan Gram (Lale N.M) | 4

1 Praktikan membilas 10 detik
0 sediaan dengan air Air mengalir
mengalir

11 Praktikan menggenangi Bak pewarnaan 1 menit

sediaan dengan cat gram Cat gram 4
4 (Safranin) Stopwatch

1 Praktikan membilas
2 sediaan dengan air Air mengalir 10 detik
mengalir

1 Tunggu hingga sediaan

3 kering, kering anginkan Tissue 2 menit
dengan meletakkan tissue
di bagian bawah sediaan

1 Melakukan identifikasi
4 terhadap sediaan yang Sediaan jadi
sudah diwarnai dengan cat Mikroskop 5 menit
gram (golongkan apakah Oil imersi
bakteri termasuk bakteri
gram positif atau gram
negatif)

SOP Pewarnaan Gram (Lale N.M) | 5