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TEMA I.

INTRODUCCIN AL ESTUDIO DE LOS AGENTES


BIOLGICOS.

Relacin de los aspectos ms significativos del origen de la vida.


Desarrollo histrico de los conocimientos sobre los agentes
biolgicos.
La historia de muchos conceptos incorporados actualmente en la doctrina de la microbiologa
es un relato de los intentos de resolver los problemas del origen de la vida, la putrefaccin de
los materiales orgnicos muertos y la naturaleza de los cambios comunicables en los cuerpos
de los hombres y animales vivientes.
El hombre durante su incesante actividad transformadora sobre la naturaleza ha debido
enfrentarse a dos tipos de Agentes biolgicos: los que capturan y devoran a sus vctimas
(predadores) y los que viven dentro o sobre sus tejidos (parsitos).
Todos conocemos por experiencia, las enfermedades infecciosas generaciones tras
generaciones, las sociedades humanas han tenido que luchar como mejor han sabido con los
problemas prcticos que plantea este tipo de enfermedad, y en tanto, los sacerdotes, filsofos
y mdicos con concepciones cada vez ms cientficas, se esforzaron en la tarea quizs ms
dura, de interpretarlas de acuerdo con las ideas de la poca.
La disciplina Agentes biolgicos tiene como objetivo de estudio, las bacterias, los virus, los
hongos y los parsitos (protozoarios, helmintos y artrpodos), capaces de agredir directa e
indirectamente al hombre, as como la respuesta especfica e inespecfica de ste frente a la
agresin.
Durante muchos siglos, el hombre pudo observar a simple vista los seres macroscpicos que
lo parasitaban, lo que permiti a los mdicos antiguos describir las afecciones provocadas por
artrpodos y helmintos. Sin embargo la inmensa mayora de los agentes microscpicos a la
observacin directa y su papel como causa de enfermedad, slo fue postulado
hipotticamente por algunos geniales pensadores
Para una mayor comprensin del desarrollo histrico de la teora microbiana de la
enfermedad infecciosa, lo dividiremos en una serie de perodos lgicos los cuales a veces se
superponen, pero agrupan las verdades histricas que marcaron los distintos descubrimientos.

Perodo pre morfolgico.

La prolongada etapa previa al descubrimiento del microscopio se caracteriz por la


formulacin de hiptesis y teoras que trataban de explicar las enfermedades infecciosas del
individuo y la colectividad (epidemias). Las primitivas ideas tuvieron un carcter mgico y
religioso, pero desde Hipcrates se evidenci el deseo de sustituir por una causa ms mediata,
la explicacin demasiado simplista de la enfermedad atribuida a una venganza de los dioses.
Pareca evidente que la infeccin pasaba de una persona a otra por el aire, y por una
asociacin natural de ideas se lleg a la conclusin, de que la propagacin de la infeccin era
anloga a la difusin en el aire de los olores desagradables procedentes de las heridas

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supuradas y de los cadveres. Las ideas hipocrticas sobre las miasmas o emanaciones
contagiosas, fueron sustituidas por las teoras sobre la implicacin de diminutos seres vivos
en la produccin y transmisin de la enfermedad.
El principio del contagio por criaturas invisibles fue registrado por Varro (116-27 a.n.e.),
Lucrecio (95-55 a.n.e.), Plinio (23-79 a.n.e.), Galeno (131-201 a.n.e.).
En el siglo XIII, Roger Bacn (ms de un milenio ms tarde), postul que las enfermedades
eran producidas por animlculos invisibles y ms tarde Fracastori de Verona en 1546, escribi
que las enfermedades transmisibles eran causadas por semillas de enfermedad a travs del
contacto directo, por medio de objetos sucios o a travs del aire. Esta clara expresin de la
teora microbiana de la enfermedad se adelant a su tiempo y tuvo que esperar al desarrollo
cientfico y tcnico de la sociedad para su confirmacin experimental a travs del
microscopio.

Perodo morfolgico.

Aunque el conocimiento de los lentes de aumento se retrotrae a la poca de Arqumedes,


fueron las necesidades del comercio martimo durante el desarrollo del capital comercial, las
que produjeron notorios avances en la ciencia de la ptica. En el siglo XVII, el holands
Anton Van Leeuwenhook, fue capaz de observar las bacterias a travs de lentes tallados por l
mismo. El descubrimiento del microscopio compuesto por Hooke, en 1678, dot a la ciencia
del instrumento que permitira el estudio de los microbios, pero su aplicacin hubo de esperar
casi dos siglos. En 1876 Meller describi algunos detalles de la estructura de las bacterias y
en 1838, Ehrenberg comenz las publicaciones sobre clasificaciones morfolgicas.
La etiologa microbiana de las enfermedades establecida con el auxilio del microscopio,
surgi cuando en 1850, Roger y Davaine observaron bacilos en la sangre de los animales que
moran de ntrax. En 1872, Obermeier descubri la asociacin de una espiroqueta con la
fiebre recurrente y demostr por primera vez, la presencia de un microorganismo patgeno en
la sangre de un ser humano.
En 1880, Lavern observ en los hemates de los enfermos de paludismo los parsitos
causantes de la enfermedad. En esa poca los trabajos de Erlich desarrollaron los mtodos
para colorear las bacterias fijadas sobre lminas de vidrio, utilizando pigmentos de anilina y
Gram descubri la tcnica de coloracin que permiti dividir a las bacterias en dos grupos de
gran importancia prctica: Grampositivas y Gramnegativas.
El perfeccionamiento del microscopio compuesto a comienzos del siglo XX, permiti
observar algunas estructuras de la clula microbiana. En 1940, el microscopio de fases
facilit el estudio de las clulas vivas y dos dcadas ms tarde, el microscopio electrnico
revel la existencia delas mnimas partculas capaces de provocar enfermedad: los virus.

Perodo fisiolgico.

En 1859, Pasteur dio al traste con los mantenedores e la teora de la generacin espontnea, al
demostrar que los caldos calentados y protegidos el aire, no permitan el crecimiento de los
microorganismos. Con este descubrimiento, en 1875, pudo probar que la fermentacin
alcohlica de los frutos y granos era causada por microbios, comenzando la poca en que los
estudios bioqumicos llamaron la atencin de numerosos investigadores.

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Durante el perodo morfolgico, el diagnstico de las enfermedades contagiosas no se bas
en trabajos con cultivos puros de bacterias. En 1878, Lister haba obtenido cultivos puros de
lactobacillus mediante diluciones sucesivas en caldos, pero fue Koch quien desarroll los
mtodos de cultivo en medios slidos, con lo que obtuvo cepas aisladas que permitieron
identificar a las especies por la morfologa de sus colonias y por sus actividades fisiolgicas
sobre diversos sustratos. Los ltimos 20 aos del siglo XIX, constituyeron la edad de oro de
la bacteriologa. Para el ao 1900, casi todas las bacterias causantes de enfermedades haban
sido descritas.
La introduccin a la prctica de los filtros de Chamberland y de Berkefeld, facilit la
investigacin bioqumica de las toxinas, enzimas y otros productos del metabolismo
microbiano. Este perodo fisiolgico se ha extendido hasta nuestros das. La biotecnologa
moderna permite obtener una gran cantidad de sustancias tiles al hombre, fabricadas por
microorganismos: antibiticos, hormonas, alimentos. No debemos dejar de mencionar en este
perodo, la contribucin de los estudios sobre fisiologa microbiana al desarrollo de los
mtodos de esterilizacin y desinfeccin, utilizados en la lucha contra las infecciones. Los
trabajos de Lister y de Pasteur, aplicando tales descubrimientos, viabilizaron el advenimiento
de la asepsia quirrgica y dela antisepsia.

Perodo inmunolgico.

En 1878, Jenner public sus observaciones y experimentos sobre la vacuna contra la viruela.
Durante la dcada de 1880, Pasteur desarroll una serie de inmunizaciones para la profilaxis
de algunas enfermedades: ntrax, rabia; sentando las bases cientficas de la ciencia
inmunolgica. Para tratar de explicar la aparicin y el aumento de la resistencia del
organismo despus de padecer la enfermedad o recibir una vacuna, se elaboraron dos teoras:
la celular de Metchnikov que haca residir los mecanismos de resistencia en las clulas
fagocticas; y la humoral de Erlich, Bordet y otros, que centraban en los anticuerpos el efecto
protector. Las verdades relativas contenidas en ambas teoras han sido avaladas por la ciencia
contempornea. En los albores del siglo XX, los trabajos de Richet, Von Pirquet, Schick y
otros, sentaron las bases para el estudio de los fenmenos de alergia e hipersensibilidad que
aparecen como respuesta alterada del organismo a la introduccin de sustancias extraas.
Aunque el embrin de la ciencia inmunolgica se gest en el seno de la microbiologa, al
crear sus principales mtodos para el diagnstico de las enfermedades infecciosas; esta
ciencia rebasa en la actualidad el marco del estudio de la respuesta a los agentes infecciosos y
de las lesiones que estos provocan indirectamente.

Perodo quimioterpico.

Los mdicos antiguos realizaron mltiples intentos para curar las enfermedades infecciosas
con el empleo de diversas sustancias vegetales y minerales. En 1632, la condesa de Chinchon
introdujo en Europa la corteza del rbol de quina, que utilizaban los indios peruanos contra
las fiebres paldicas. A principios del siglo XX, Erlich, buscando el proyectil mgico que
poseyera toxicidad selectiva contra los microorganismos y no afectara al enfermo, descubre y
emplea compuestos arsenicales (Salvarsn) para el tratamiento de la sfilis.
La era moderna de los antibiticos y quimioterpicos se desarroll recin despus que
Domagk inform en 1935, que el Prontosil, un derivado de la anilina, tena un efecto

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espectacular sobre las infecciones por Estreptococos, descubriendo despus que dicha
sustancia era convertida por el organismo en sulfanilamida, que era el principio activo del
medicamento. En 1940, Florey y Chain lograron introducir en la prctica mdica el primer
antibitico: la penicilina, descubierto por Fleming en 1929.
Estas drogas fueron consideradas como la aparente panacea que liquidara para siempre las
infecciones, pero pronto aparecieron los fenmenos de resistencia de los microorganismos y
de sensibilizacin de los pacientes, como consecuencia del uso indiscriminado de tales
medicamentos, situacin que se mantiene en la actualidad y que es motivo de numerosas
investigaciones.

Perodo virolgico.

Aunque ya en 1892, Ivanovsky haba descubierto que el agente de la enfermedad de la planta


del tabaco conocida como mosaico, era invisible y pasaba a travs de los filtros que retenan a
las bacterias; fue necesario esperar por el perfeccionamiento de la tcnica, para el desarrollo
de la virologa. En Cuba en el ao 1900, los trabajos experimentales de la comisin del
ejercito de ocupacin norteamericano, permitieron probar la validez de la hiptesis de Carlos
Juan Finlay sobre la etiologa viral de la fiebre amarilla. Ya en 1898, Loffler y Frosh haban
sealado que el agente filtrable que provoca la fiebre aftosa en el ganado, era un virus animal.
Los bacterifagos fueron descubiertos en 1916-17 por Twort y d Herelle, pero no fue hasta la
dcada de 1950, en que Enders, Wellwe y Robins, perfeccionaron los mtodos de cultivo de
tejidos y clulas, los cuales, junto al microscopio electrnico, la ultracentrifugacin, y la
aplicacin de tcnicas bioqumicas e inmunolgicas sofisticadas, permitieron el estudio de los
virus. En 1955, Fraenkel- Conrat y Williams aislaron la protena y el ARN del virus del
mosaico del tabaco, y al ao siguiente, Gierer y Schramm demostraron que el cido nucleico
separado de la protena, era todava infeccioso.

Perodo gentico.

La inmensa mayora de los descubrimientos de la gentica moderna y de la biologa


molecular, estn basados en trabajos experimentales realizados con microorganismos. En
1928, Griffith observ la transformacin de cepas avirulentas de neumococos en virulentas,
por un factor que Avery, Mc Leod y Mc Carthy identificaron como ADN, en 1944. La
transmisin de material gentico mediante la conjugacin entre bacterias, fue descrita por
Lederberg y Tatum en 1946; y en 1952, Zinder y Lederberg descubren el fenmeno de la
transduccin de material gentico entre las bacterias, mediante bacterifagos. En 1961, Jacob
y Wolman describieron la primera estructura gentica extracromosmica, el episoma y ms
tarde fueron descubiertos los plasmidios, factores ambos de gran importancia en la
transmisin de informacin gentica entre los microorganismos y con grandes implicaciones
en los mecanismos de resistencia a los agentes antimicrobianos. A fines de la dcada del 70,
Starlinger, Cohen y otros, publicaron su trabajo sobre transposones identificados en los
microorganismos como segmentos lineales de ADN capaces de insertarse en diversos sitios
del cromosoma.
La aplicacin de los conceptos concernientes a la regulacin gentica se ha materializado en
los trabajos que utilizan sistemas microbianos, los cuales permitirn en un futuro predecible,
proveer un conocimiento de los mecanismos de control que operan, tanto en la diferenciacin

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celular normal, como anormal, incluyendo el cncer. La manipulacin de las estructuras
cromosmicas por la ingeniera gentica, plantea grandes perspectivas a la humanidad.

Relaciones ecolgicas. Los agentes biolgicos de importancia


mdica
Para la medicina existe toda una serie de organismos importantes porque son capaces de
provocar enfermedades o producir sustancias tales como antibiticos que resultan
beneficiosos. Estos agentes son estudiados por dos ciencias denominadas Microbiologa y
Parasitologa.
La Microbiologa estudia los microorganismos ms pequeos, generalmente monocelulares
con el objeto de conocer su forma, estructura, reproduccin, fisiologa e identificacin, as
como sus interrelaciones beneficiosas o no para el hombre y los animales. Segn su objeto
de estudio se divide:

Bacteriologa.
Micologa.
Virologa.

La Parasitologa segn su objeto de estudio se divide en:

Protozoologa.
Helmintologa.
Artropodologa.

Los agentes biolgicos de importancia mdica que sern objeto de estudio son:

Virus.
Bacterias.
Hongos.
Protozoos.
Helmintos.
Artrpodos.

Relaciones ecolgicas.

La ecologa se ocupa de la actividad de los organismos vivos como individuos y como


especie, de su manera de alimentarse y reproducirse, de las condiciones ambientales
necesarias para su bienestar y de los enemigos con los que tiene que enfrentarse.

Estadios intermediarios entre la vida libre y la parasitaria.

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Se conoce como animal de vida libre a aquel que no tiene vinculaciones vitales con otros
seres Ej. los rumiantes.
El parsito es el organismo que tiene que vivir dentro o encima de otro a expensas de l
durante una parte de su vida o toda su existencia, se trata generalmente de seres vivos ms
potentes que pueden suministrarle proteccin o nutricin Ej. Ascaris lumbricoides en el ser
humano.

Entre la vida libre y la parasitaria existen diversos estadios graduales tales como:

Comensalismo: Cuando un organismo se beneficia de otro sin reportarle beneficio ni


daarlo.
Mutualismo: Es cuando un organismo se ayuda de otro y viceversa.
Simbiosis: Cuando ambos organismos se benefician uno del otro.

El parsito y el hospedero.

El modo de vida parasitaria, constituye otro mtodo de obtencin de alimentos a partir de


otros tejidos vivos, a expensas del cual se nutre producindole o no lesiones aparentes o
inaparentes al hospedero que es aquel organismo que alberga al parsito brindndole apoyo o
nutricin.

Modos y tiempos del parasitismo.

Todo parsito tiene que hacer su parasitismo por una de las tres razones siguientes:

Parasitismo obligado: Es cuando el organismo tiene que parasitar para vivir. Son los de
mayor importancia y segn el tiempo y el momento de su ciclo evolutivo de parasitismo
se puede clasificar en:

- Permanentes. (Necator)
- Peridicos. (Mosca)
- Temporarios. (Mosquito)

Parasitismo facultativo: Cuando el parsito tiene la facultad de vivir indistintamente en


la naturaleza libre o parasitando.

Parasitismo accidental: Cuando el organismo se encuentra parasitando a otro husped


para el cual no est adaptado. A estas formas de parasitismo pueden agregarse los
parsitos extraviados que se alojan en un hospedero que no es habitual en l y los
parsitos errticos que se sitan en un rgano diferente a aquel en que se localizan
regularmente.

Localizacin de los parsitos en el hospedero.

Los parsitos que no rebasan la superficie externa del hospedero ni la luz de sus cavidades
naturales abiertas al exterior (odo, fosas nasales, boca, etc.) son llamados ectoparsitos. A su

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vez aquellos que se sitan en el interior del hospedero se denominan endoparsitos, pudiendo
tener estos ltimos una localizacin intra o extracelular.
Tipos de hospederos.

Al estudio de los hospederos se le llama xenologa y mediante ella se ha conocido que


pueden clasificarse en:
Definitivo.
Intermediario.
Habitual.
Vicariante.

Hospedero definitivo: Es el que alberga la forma adulta del parsito.


Hospedero intermediario: Es el que aloja la forma larvaria de un parsito, es conocido
tambin como Vector biolgico. Ej. Mosquito Aedes.
Hospedero habitual: Es aquel que de manera normal o habitual, aloja a un determinado
parsito.
Hospedero vicariante: Es el que en ausencia del hospedero habitual y en condiciones
especiales puede servir de hospedero a un parsito dado.

Interrelacin parsito- hospedero- medio ambiente.

La interrelacin entre el parsito, los hospederos y el medio ambiente, es tan estrecha que
permite al primero, aprovechar los sistemas nutritivos y de defensa del segundo, logrando con
sto, evolucionar desde el punto de vista biolgico, hasta formas que se consideran
perfectas, pues en ellos ya no aparecen estructuras tales como la boca, apndices
locomotrices, etc., debido a que el parsito se ha acostumbrado o adaptado al hospedero de
una forma tal que en su informacin gentica se van perdiendo estructuras sin uso, a la vez
que aparecen otras capaces de permitir una mejor fijacin al hospedero Ej. los ganchos de la
Taenia saginata, o racionalizar de tal manera sus sistemas que slo est presente lo esencial
Ej. sistemas digestivos y nerviosos de la Fasciola heptica. La adaptacin de un parsito a
uno, o un grupo de hospederos provoca la aparicin de variantes morfolgicas o biolgicas de
las especies.
Las adaptaciones morfolgicas ya han sido mencionadas, pero de las biolgicas diremos que
tienen gran importancia los llamados tropismos. Estas adaptaciones son ms que fenmenos
invariables que aparecen en los parsitos como respuesta a la accin de variaciones fsico-
qumicas del medio ambiente.

Los tropismos pueden clasificarse:

Segn el estmulo provoque atraccin o repulsin en:

Positivo.
Negativo.

Segn el estmulo en:

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Fototropismo (luz).
Termotropismo (temperatura).
Hidrotropismo (agua).
Geotropismo (tierra).
Histotropismo (tejidos).

Ciclo biolgico o evolutivo.

El ciclo biolgico o evolutivo de un parsito es toda la trayectoria del mismo desde los
primeros estadios vitales hasta las formas parasitarias adultas dentro y fuera del hospedero.

Segn su ciclo evolutivo los parsitos pueden ser:

De evolucin directa o MONOXENOS: Son los que no tienen hospederos


intermediarios. Ej. Sfilis, Blenorragia (de hombre a hombre).
De evolucin indirecta o HETEROXENOS. Los heteroxenos pueden ser:

Diheteroxenos: Son los que tienen dos hospederos diferentes, uno definitivo que
alberga la forma adulta y otro intermediario que alberga a las larvas. Ej. Wuchereria
bancrofti, cuyos hospederos definitivos e intermediarios son el hombre y el mosquito.
Poliheteroxenos: Son los que tienen un hospedero definitivo y dos intermediariois
sucesivos que albergan a dos formas larvarias diferentes.
Diheteromonoxenos: Son los que pueden indistintamente realizar una evolucin
directa en un solo hospedero, o indirecta en dos hospederos (definitivo y el
intermediario).

Focos naturales. Biocenosis

Se llaman focos naturales a determinadas zonas del mundo donde existen caractersticas
similares de temperatura, humedad, presin, etc. que facilitan el desarrollo de la fauna
parasitolgica. Estas zonas faunianas o focos pueden estar determinadas geogrficamente por
los distintos continentes y pases en dependencia del parsito de que se trate.
La biocenosis es un concepto muy estrechamente ligado a estas zonas naturales o focos y se
define como la asociacin en una misma rea alimenticia de organismos pertenecientes a
especies diferentes.

Los Agentes biolgicos de importancia mdica.

Virus: Son agentes submicroscpicos, constituidos por un ncleo central de cido nucleico,
protegidos por una cubierta proteica que a su vez puede hallarse rodeada por una envoltura
lipoproteica. Solamente contienen un tipo de cido nucleico, ya sea ADN o ARN. Son
intracelulares obligados.

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Clamidias: Son elementos muy pequeos, parsitos obligados intracelulares, que se
multiplican mediante un ciclo de desarrollo caracterstico produciendo inclusiones
citoplasmticas en las clulas del hospedero. Son susceptibles a algunos antimicrobianos. Los
distintos miembros del grupo se identifican por su virulencia para diferentes hospederos, por
las lesiones que provocan y por su estructura antignica.

Mycoplasmas: Son las clulas de menor tamao, capaces de vivir en forma independiente.
Algunas tienen menor tamao que los grandes virus y atraviesan filtros que retienen a todas
las bacterias, diferencindose estas ltimas por la carencia de pared celular y por la presencia
de esteroles en la membrana citoplasmtica. En consecuencia los Mycoplasmas no son
susceptibles a los antibiticos que interfieren con la sntesis de la pared.

Rickettsias: Son pequeas bacterias pleomrficas, parsitos obligados intracelulares, que


poseen una membrana citoplasmtica generalmente permeable a ciertos cofactores
indispensables para su desarrollo. Necesitan de un artrpodo que acte como vector para su
perpetuacin en la naturaleza y para su transmisin al hospedero humano, generalmente
provocan enfermedades graves acompaadas de una erupcin exantematosa.

Bacterias: Son clulas pequeas protegidas de una pared celular compleja que les permite
sobrevivir en diferentes ambientes. En algunas especies, la pared est rodeada de una cpsula
externa gelatinosa.

Espiroquetas: Estas se distinguen fcilmente de otros microorganismos, tanto por su


morfologa, como por su manera de desplazarse, son clulas alargadas en forma de espiral
que se desplazan por rotacin alrededor de su eje longitudinal.

Hongos: Pueden verse tanto en forma de levadura como de mohos (hongos filamentosos),
inclusive pueden alterar su estructura de acuerdo a las condiciones ambientales.

Protozoos: Son organismos unicelulares, con una organizacin muy compleja, presentando
varias caractersticas comunes con las clulas humanas.

Helmintos: Presentan simetra bilateral y son invertebrados. Se van a dividir en dos Phylum
de importancia en la medicina:

Nematelmintos.
Platelmintos.

Artrpodos: Animales invertebrados que tienen su cuerpo cubierto por un esqueleto


quitinoso que lo protege, presentan sistema nervioso. Las especies de importancia mdica son
ectoparsitos y muchos intervienen en la transmisin de enfermedades actuando como vector.
hongos, protozoos, helmintos y artrpodos, haciendo nfasis en los que por su importancia
para la medicina representan un peligro para la salud humana al producir todo tipo de
enfermedades infecciosas.

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TEMA II. AGRESIN Y RESPUESTA.

El proceso infeccioso.
La inmunologa ha alcanzado una gran importancia en el desarrollo de las Ciencias
Mdicas actuales, es conocido que la inmunidad y la infeccin son inseparables.
La inmunologa naci del estudio de cmo los animales mediante medios naturales o
artificiales, se valoran inmunes contra las infecciones microbianas y toxinas.
El mundo est lleno de microorganismos y por tanto da a da nos ponemos en contacto con
muchos de ellos y a qu se debe que no nos enfermemos con ms frecuencia? Esto se debe
a los mecanismos que participan en la defensa del organismo que pueden ser especficas e
inespecficas. A su vez a travs de la vacunacin tambin protegemos a las personas para
evitar que se enfermen.

Infeccin e infestacin. Proceso infeccioso. Enfermedad infecciosa.

Infeccin y proceso infeccioso reflejan el conjunto de eventos biolgicos que ocurren en el


macroorganismo al ser agredido, con xito, por el agente patgeno.

INFECCIN: Es la entrada y desarrollo o multiplicacin de un agente infeccioso


(endoparsito) en el organismo de una persona o animal y la aparicin o no de
enfermedad.

INFESTACIN: es el desarrollo y reproduccin de ectoparsitos en la superficie


corporal de animales e incluso del hombre y sus ropas. No es sinnimo de No es sinnimo
de infeccin, indica la presencia, el alojamiento, el desarrollo y la reproduccin de
artrpodos y helmintos.

Nosotros estamos rodeados de microorganismos, algunos patgenos y otros


potencialmente patgenos y si no fuera por una serie de mecanismos que posee nuestro
organismo, pereceramos. A su vez los microorganismos tienen sus mecanismos para
romper nuestras barreras y penetrar a las clulas, rompiendo el equilibrio normal y
produciendo enfermedad. Por lo tanto la salud se produce cuando estos mecanismos estn
en equilibrio.
Los mecanismos de defensa del hospedero, contra un agente infeccioso pueden estar
situados localmente (superficie) pueden ser sistmicos (humorales o celulares) y ambos
pueden ser especficos o inespecficos.

Proceso Infeccioso y enfermedad:

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El proceso infeccioso: Es la propiedad que tienen los microorganismos de ponerse en
relacin con el hospedero, constituyendo la entrada, desarrollo y multiplicacin de un
agente inaparente (no hay signos ni sntomas de la enfermedad).

La enfermedad: Es la lucha entre el agente infeccioso y el husped, terminando con una


infeccin aparente o enfermedad infecciosa.

Infeccin no es sinnimo de enfermedad.

Propiedades agresivas de los agentes biolgicos

Patogenicidad: Capacidad que tienen los microorganismos de producir


enfermedad.

Virulencia: Capacidad que tienen algunos microorganismos de producir


enfermedad cuando se introducen en el hospedero en pequeas cantidades.

Toxigenicidad: Capacidad que tienen los microorganismos de producir sustancias


txicas. Estas pueden ser exotoxinas y endotoxinas.

EXOTOXINAS ENDOTOXINAS

Excretadas por los microorganismos vivos. Liberadas al ser desintegrada.

Polipptidos. La pared de los microorganismos Gram (-)


(lipopolisacridos).

Inestable. Se destruyen a 60C. Estable a 60C durante horas.


Antignica, estimula la formacin de antitoxina. No estimula la formacin de antitoxina, pero s
estimula la formacin de Acs.
Se convierten en toxoides atxicos. Son antignicos
por la accin del calor, formalina etc. No se convierten en toxoides

Muy txicas, mortales para los animales de laboratorio Poco txicas, mortales para los animales de
en microgramos o menos. laboratorio en dosis de cientos de microgramos.

No producen fiebre en el hospedero. Producen fiebre en el hospedero con frecuencia

Ej. toxina de la difteria, Cl botulinum, Cl. tetani, etc. Ej. endotoxinas de E. coli, neisserias, etc.

NO
OTRAS PROPIEDADES:

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Expoliacin: Algunos parsitos para su alimentacin y desarrollo sustraen del
hospedero sustancias necesarias, Ej. sangre, etc.

Obstruccin: En algunas ocasiones los parsitos pueden apelotonarse y producir


oclusin intestinal.

Irritacin: Algunos parsitos pueden provocar irritacin crnica del intestino


aumentando la secrecin intestinal y dar diarreas, y hasta sndrome disenteriforme.
Traumatismo: Algunos parsitos pueden lesionar la mucosa intestinal con alguna
de sus estructuras.

Comprensin: Propiedad de algunos parsitos de comprimir rganos e impedir su


normal funcin.

Invasividad: Propiedad que tienen los microorganismos de entrar en los tejidos del
hospedero, multiplicarse y de ah diseminarse. Entre los factores que intervienen en
la invasividad se encuentran, enzimas extracelulares, componentes de superficie y
otros desconocidos Ej. microorganismos invasivos: Yersinia pestis, ntrax, TB, etc.

Enzimas extracelulares:

- Colagenasa: Desintegra el colgeno factor de diseminacin.


- Coagulasa: Forma fibrina alrededor de las lesiones estafiloccicas, protegen al
microorganismo factor de resistencia.
- Hialuronidasa: Hidrolizan el A. Hialurnico factor diseminacin.
- Fibrinolisina o estreptocinasa: Disuelve la fibrina factor de diseminacin.
- Hemolisinas y leucocidinas: Disuelve glbulos rojos, blancos y clulas tisulares.

Respuesta inespecfica y especfica.

El hospedero ante la agresin de un agente extrao Ej. microorganismo, responde a travs


de sus mecanismos de defensa que pueden ser: inespecficos, que actan contra gran
cantidad de microorganismos o cuerpos extraos y especficos, contra el microorganismo
especfico que agredi (respuesta inmune)

Mecanismos de defensa.

Mecanismos de defensa de hospedero.

Inespecficos Actan contra cualquier microorganismo.


Especficos Contra el microorganismo especfico que la origin (respuesta inmune)

Mecanismos de defensa inespecficos.

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Piel: Integridad
A. grasos. (Ph cido)
1) Barrera tisular Sudor ( Lisozima. y ph cido)
F . Normal.

Mucosa: Integridad.
A. mucociliar.
Lgrimas (lisozima).
Acidez estomacal.
Bilis.
Acidez vaginal.
F. Normal.

Mecanismos Reflejo de la tos.


adicionales Pelos de la nariz.

2) Respuesta Leucocitos P.M.Ns. (polimorfonucleares)


fagocitaria Monocitos fagocitarios (macrfagos)
Macrfagos fijos del S R E, tejido linfoide de hgado, Bazo,
mdula, pulmn

Es facilitada por:
-Espacios tisulares pequeos (ej. alvolo)
-Superficies rugosas.
-Anticuerpos (opsoninas)

Durante la fagocitosis se producen diferentes etapas:

1. Reconocimiento del microorganismo.


2. La ingestin del microorganismo facilitada por los lisosomas y se forma el
fagosoma.
3. Digestin del elemento extrao y formacin de vacuola digestiva.
4. Finalmente, expulsin del cuerpo residual.

Si el microorganismo llega a los tejidos, encuentra a los macrfagos fijos del S R E, Ej.
pulmn (macrfago alveolar), hgado (clulas de Kupffer), bazo (sinusoides), etc.

3) Constituyentes bioqumicos Polipptidos bsicos.


de los tejidos Betalisinas.

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Poliaminas.
Fagocitinas.

4) Respuesta inflamatoria. Como se sabe cualquier dao que se produzca en un tejido


desencadena una respuesta inflamatoria.

Vasodilatacin.
Vasoconstriccin.
Flujo sanguneo.
Marginacin de leucocitos.
Diapdesis.

Esta comienza por:

1- Vasodilatacin de los capilares locales.


2- De los cuales escapa el plasma.
3- El lquido de edema se acumula en el rea de la lesin.
4- La fibrina ocluye los linfticos.
5- PMNs se pegan a la pared de los capilares y emigran hacia el
restante.
6- Se produce finalmente la fagocitosis por los macrfagos
mononucleares.

5) Complemento (C).

El complemento es un conjunto de protenas sricas que se encuentran en el suero en


pequeas cantidades inactivas cada una y que al activarse, actan en forma secuencial y
existen dos vas, la clsica y la alterna inespecfica.

Cuando se produce la entrada de un microorganismo en cualquier parte del cuerpo, junto


con la salida de lquidos y clulas producto de la vasodilatacin, llegan los componentes
del complemento de los cuales es el C 3 el que se activa primero, inicindose as un proceso
continuo y autocalaltico de activacin de los segmentos componentes del sistema.
La activacin de C3 lleva aparejada la formacin de fragmentos C3 b, el que se fija a las
membranas de un microorganismo, produciendo eliminacin del mismo por uno de estos
mecanismos.

1- Activacin de otros componentes del Complemento hasta C 4 lo cual produce la


lisis del microorganismo.
2- Facilita la fagocitosis de los PMNs pues stos poseen receptores para C 3 b por tanto
la ingestin es dirigida hacia la clula que la posea.

Existen 2 vas Clsica especificada.

14
Alterna inespecfica o de la properdina.

6) Interfern: Los interferones son un conjunto de protenas de bajo peso molecular


producidas por clulas epiteliales, leucocitos y linfocitos. El interfern es producido y
liberado por las clulas al principio de la infeccin viral y su accin se ejerce sobre las
clulas sanas que al ponerse en contacto con l elabora una protena antiviral, inhibe de
forma selectiva la autoduplicacin viral. La accin del interfern es especfica de especie
y no virus especfica.

7) Fiebre.

8) Interferencia microbiana. La piel y las mucosas tienen un conjunto de


microorganismos que las protegen y se denomina flora microbiana normal, la cual
interfiere con el establecimiento y multiplicacin de agentes patgenos.
8) Insusceptibilidad congnita o inmunidad natural. Fenmeno poco conocido que
impide que una especie o un individuo padezca una enfermedad determinada.

Cuando recibimos la agresin de un agente extrao, Ej. un microorganismo, respondemos


a travs de nuestros mecanismos de defensa, especficos e inespecficos.
Entre los mecanismos de defensa inespecficos tenemos que lo primero que encuentra el
agente agresor es la piel y las mucosas.
En la piel, la integridad de la misma, impide la entrada; a su vez el sudor con su Ph cido y
enzimas como la lisozima, tratan de evitar la penetracin, as como los cidos grasos con
su acidez. Tambin la flora normal por un proceso de competencia de nutrientes o por la
produccin de sustancias antimicrobianas contribuye a su eliminacin.
As tambin sucede en las mucosas, la integridad de las mismas, enzimas como la lisozima
que se encuentra en las lgrimas, la acidez de la mucosa estomacal y vaginal, en la mucosa
respiratoria el aparato mucociliar que expulsa con el mucus todos los cuerpos extraos y al
igual que la piel, su flora normal.
Otros mecanismos adicionales como los pelos de la nariz que impiden el paso de los
microorganismos y el reflejo de la tos que los expulsa.
La respuesta fagocitaria: Si a pesar de los mecanismos anteriores los microorganismos
logran rebasar las defensas locales, encuentran los elementos inmunolgicos que se ponen
en juego fundamentalmente con dos tipos de fagocitos: los PMNs y los fagocitos
mononucleares.

Mecanismo de defensa especfico del hospedero: Respuesta inmune.

Inmunidad: Abarca todos los mecanismos fisiolgicos que permiten reconocer aquellas
sustancias o elementos ajenos a s mismo y las respuestas que llevan a su neutralizacin y
eliminacin.

Clasificacin de la inmunidad: La inmunidad se clasifica segn el tipo de efector en:

Respuesta inmune humoral mediada por anticuerpos (linfocito B)

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Respuesta inmune celular mediada por clulas especficamente sensibilizadas
(linfocitos T).

Tambin se clasifica atendiendo a la participacin del organismo en la elaboracin de la


respuesta en:

Artificial y Natural y a su vez en :


Activa y Pasiva.

La activa es cuando los efectores son elaborados por el propio organismo y pasiva cuando
los efectores son transferidos de un organismo a otro.

Activa Pasiva
Contacto previo con el antgeno No requiere contacto con el antgeno
Los anticuerpos son propios Los anticuerpos son ajenos
El comienzo de la actividad es tardo El comienzo de la inmunidad es inmediato
Dura mucho tiempo Dura poco tiempo

El sistema inmune acta a travs de: anticuerpos y clulas sensibilizadas.

Principales caractersticas del sistema inmune:

1. Especificidad
2. Heterogenicidad
3. Memoria

Especificidad: El desarrollo de respuesta inmune contra un organismo X, no confiere


proteccin contra otro no relacionado: Ej. despus de un ataque con sarampin el
organismo es inmune a una segunda infeccin, pero es susceptible al ataque por otros
virus, de modo tal que el organismo humano puede diferenciar los microorganismos unos
de otros.

Heterogenicidad: Se desprende de lo anterior, ya que para cada antgeno se desarrolla la


respuesta de anticuerpos especficos, por lo que el nmero de respuestas es ilimitado dado
el nmero de diferentes sustancias que pueden ser consideradas extraas a nuestro
organismo.
El individuo tiene que reconocer lo ajeno de lo propio. La falla en distinguir lo propio
de lo no propio puede conducir a la respuesta contra componentes del propio organismo..
Se ha postulado que los componentes propios circulantes durante el perodo prenatal
pueden instruir al sistema inmune, desarrollndose as una falta de respuesta o tolerancia
a lo propio (formacin fetal).

Memoria: Cuando inyectamos toxoide de estafilococos por primera vez a un conejo, se


obtiene varios das despus, una respuesta de anticuerpos en sangre que aumenta y luego

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decrece. Si inyectamos el mismo toxoide por segunda vez, uno o dos meses despus al
mismo conejo, se obtiene una respuesta de anticuerpos ms rpida y abundante.
Podemos inferir que despus del primer contacto, qued una poblacin de clulas de
memoria que reconocen al antgeno.
Mecanismos de defensa del hospedero a nivel de superficie.
Adhesin y penetracin de los microorganismos a clulas
epiteliales.
Mecanismos de defensa a nivel de superficie.

Cuando un agente biolgico determinado se pone en contacto con un hospedero, por lo


general la puerta de entrada es a nivel de piel y mucosas; de ah que esos sitios constituyan
la primera barrera del hospedero para evitar que el agente pueda penetrar y producir dao.

Hay que tener en cuenta tres aspectos:

a) Produccin local de factores qumicos.


b) Interferencia microbiana (flora normal)
c) Mecanismos de arrastre de los microorganismos (vas de salida de los
microorganismos del cuerpo)

a) Produccin local de factores qumicos:

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Factores Contienen Accin Resultado

Sudor Destruye las paredes


Saliva lisozima bacterianas sobre Lisis
Lgrimas la estructura del
Secrecin nasal peptidoglucano
Previene la adherencia de
Saliva glicolpidos microorganismos Eliminacin del
patgenos a microorganismo por
clulas la saliva
epiteliales
lactoperoxidasa Antibacteriana Interviene en el metabolismo
Leche materna microbiano
lipasa Antiparasitaria Lisis de protozoarios: Giardia
lamblia y E. histolytica.
Retarda acceso de V.cholerae
Mucosa estomacal HCL Bacteriosttico y Salmonella al intestino

Piel cidos grasos de Antibacteriano Lisis


cadena
larga
Retarda colonizacin del
Vagina Ph cido Bacteriosttico microorganismo patgeno

b) Interferencia microbiana (Funcin de la flora normal)

1. Compite con los patgenos por los nutrientes. Ej. Estreptococo viridans.
2. Produce cidos grasos: Estos bajan el ph e inhiben la colonizacin de los patgenos
Ej. bacterias anaerobias que retardan desarrollo de Salmonella.
3. Producen sustancias germicidas Ej. colicinas (destruyen bacterias por bloqueo de la
fosforilacin oxidativa). Son sustancias bactericidas de tipo antibitico.
4. Produce lpidos cutneos antibacterianos Ej. Propionibacterium acnes produce
lpidos que interfieren con el crecimiento de Estafilococos y Estreptococos en piel.
5. Producen sustancias txicas ej. Piocinas

c) Mecanismos de arrastre: Existe una gran cantidad de funciones normales que actan
coordinadamente para disminuir la carga bacteriana del cuerpo. Ej.

Piel - Decamacin.
- Eliminacin de microorganismos a travs del sudor y las secreciones sebceas.

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Conjuntivas- Eliminacin de microorganismos a travs de las lgrimas.
Tractus respiratorio- Eliminacin de partculas grandes que penetran por las fosas
nasales, a travs de la tos, estornudo o deglucin. Los microorganismos (el 90 % se
une al mucus) son expulsados tambin a travs de los mecanismos anteriores.

Tractus digestivo: a travs de la defecacin se elimina 10 12 bacterias por da.

Tractus urinario: fluido de la orina.

Salivacin

Adhesin y penetracin de los microorganismos a clulas epiteliales.

La piel intacta no es afectada por los microorganismos en la mayora de las infecciones


por lo tanto penetran principalmente a travs de las mucosas, ya sea por la movilidad que
tienen algunos microorganismos porque poseen flagelos, por lesiones previas de la
mucosa, o porque los microorganismos son capaces de adherirse a las clulas epiteliales
que para muchos de los patgenos este es el primer paso que se produce en una infeccin,
otros consideran que es el primer determinante de virulencia de un agente patgeno.
Primeramente estos microorganismos tienen que vencer los tres mecanismos antes
mencionados, si logran vencerlos, se establecen en el epitelio mucoso.

Sitios de unin de los microorganismos. Sistema de receptores.

Para que se produzca la adhesin tiene que existir una correlacin entre los factores de
superficie del microorganismo (sitios de fijacin) y los receptores de las clulas epiteliales.

Adhesinas:

Fimbrias.
Flagelos.
Lipoproteico + protena M.
Fibronectina (glucoprotena)
Glucanos de sacarosa.
Glucanos y dextranos.
Hemaglutinina.

Fimbrias: Los gonococos y la E. coli poseen fimbrias, el primero se fija a la mucosa


uretral e impide su eliminacin por la corriente de orina, la E. coli se fija a la membrana
del epitelio urinario.

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Flagelos: a travs de los flagelos las Salmonellas y otros microorganismos entricos se
fijan al epitelio de la mucosa intestinal

Acido lipoproteico + protena M: Favorecen la adherencia del Estreptococo B hemoltico


a las clulas epiteliales. La porcin lipdica del cido lipoproteico acta como ligando.

Fibronectina: Se encuentra en las clulas del epitelio bucal donde sirve de unin al
Estreptococo hemoltico.

Glucanos de sacarosa: El Estreptococo mutans se considera un agente cariognico


importante, sintetiza glucanos de sacarosa que promueven la adherencia de las bacterias
entre s y a la superficie dentaria.

Glucanos y dextranos: Sirven para ver los Estreptococos productores de endocarditis a


los tejidos de las vlvulas cardacas.

Hemaglutininas. El virus de la gripe tiene receptores especficos para la clula de la


mucosa respiratoria unindose al N acetil murnico.

Sitios de unin en las clulas epiteliales. Dinmica de receptores.

Las clulas epiteliales poseen receptores constituidos por carbohidratos como: D mannosa,
L fructuosa, D galactosa, que no se saben dnde estn localizados pero que pueden ayudar
a la adhesin de los microorganismos, pero existen otros carbohidratos que s permiten
que se unan que son las llamadas adhesinas ( fimbrias, flagelos, fibronectina y otros)

Significacin de la penetracin a las clulas epiteliales.

La adhesin a las clulas epiteliales no va necesariamente seguida de su penetracin. Hay


microorganismos en que la infeccin se realiza en la superficie de las clulas
epiteliales.

Ej.

C. diphteriae
B. pertussis
V. cholereae
E. coli enteropatgena

Otros penetran en el interior de las clulas quedando protegidos de los mecanismos de


defensa por Acs de la fagocitosis y los antibiticos Ej.

20
Shigella
Toxoplasma

Otros que se diseminan Ej.

Salmonella

Como consecuencia de lo anterior, se puede observar:

Erosin y ulceracin de la mucosa.


Destruccin de la sustancia intercelular (por enzimas del microorganismo)
Destruccin y muerte de las clulas epiteliales (por un producto extracelular txico, ej.
Shigella dysenteriae)

Cmo se defiende el hospedero contra la adhesin?

A travs de:

Flora normal: se adhiere a la mucosa y cubre los receptores

Fibronectina: protege receptores de la mucosa oral e impide penetracin de


microorganismos Ej. bacterias Gram ()

Inmunoglobulina A: Impide la adherencia de bacterias a las mucosas. Potencia el efecto


bacteriosttico de la protena fijadora de hierro (lactoferrina) que se encuentra en
abundancia en las secreciones. La lactoferrina priva a los microorganismos, del hierro
necesario para la vida.

Antgeno- Anticuerpo- Complemento.


Cuando el sistema inmune de un individuo determinado se pone en contacto con un agente
extrao (agente biolgico), se activan una serie de mecanismos que dan lugar a una
respuesta..
Humoral
Agresin Mecanismos Respuesta
Celular

Efectores

Los antgenos e inmungenos son sustancias orgnicas, de estructura compleja y extraas al


organismo, que son capaces de inducir una respuesta inmune cuando son introducidas en el
organismo de un hombre y son capaces de combinarse con los efectores de la respuesta. Ej.
protenas, polipptidos, polisacridos, cidos nucleicos y otros.

21
NO TODO ANTGENO ES BUEN INMUNGENO

Inmungeno: Toda sustancia que es capaz de desencadenar la respuesta inmune y


combinarse con los efectores de la respuesta inmune.

Antgeno: Toda sustancia que es capaz de combinarse con los efectores de la respuesta
inmune.

Caracteres generales de los inmungenos

Deben ser reconocidos como extraos o no propios.


Son macromolculas con PM mayor de 10 000 daltons.
Complejidad qumica.
Cantidad ptima para poder inducir una respuesta inmune.
La mejor va de administracin es la parenteral.
Solubilidad.

Haptenos:
Sustancias extraas al organismo.
Bajo peso molecular.
Poca complejidad estructural.
Hidratos de carbono
Pptidos Protena (Portador) Inmungeno
Lpidos

Aumenta su peso molecular y


Complejidad estructural

Puede estimular el sistema inmune


Determinante antignico

La especificidad inmunolgica de un inmungeno est determinada por grupos determinantes


en la superficie de la molcula. Son fragmentos especficos de una molcula, capaces de
desencadenar la respuesta inmunolgica, o sea la formacin de anticuerpos o clulas con los
que reacciona. Son aquellas porciones de molculas antignicas que determinan la
especificidad de las reacciones antgeno - anticuerpo.

Antigenicidad: Capacidad de una sustancia para combinarse con un anticuerpo o con una
clula especficamente sensibilizada.

Inmunogenicidad: Capacidad de una sustancia para estimular el desarrollo de la respuesta


inmune (humoral, celular o ambas).

22
Clasificacin de los antgenos

Autoantgenos o antgenos singnicos: Son los antgenos propios de un sujeto.


Ej. espermatozoides, cristalino, tejido cerebral.
Aloantgenos o isoantgenos o antgenos alognicos: Son antgenos diferentes
entre individuos de la misma especie. Ej. Grupos sanguneos.
Xenoantgenos o antgenos xenognicos: Son antgenos diferentes entre
individuos de distintas especies. Ej. los antgenos de otras especies en relacin
al hombre (antgenos bacterianos, virales y otros).

Anticuerpos: Son protenas que se forman en respuesta a un inmungeno y reaccionan


especficamente con l. Solamente los vertebrados sintetizan anticuerpos.

Las inmunoglobulinas (Ig) son protenas especializadas que portan actividad de anticuerpos,
o sea la propiedad de combinarse especficamente con la sustancia que provoc su formacin.
Se encuentran en el suero sanguneo, lquidos extravasculares, secreciones exocrinas y en la
superficie de los linfocitos.

Las inmunoglobulinas comprenden el 20 % de las protenas del suero y en la electroforesis


emigran a la zona designada como gamma.

Estructura y funciones de las inmunoglobulinas

La actividad funcional de las inmunoglobulinas slo puede ser entendida sobre la base del
conocimiento de su estructura.

Cada Ig est formada por una unidad bsica o monmero, compuesta por 4 cadenas
polipeltdicas.

2 cadenas H (heavy) pesadas, idnticas entre s (PM 55000 daltons)


2 cadenas L (light) ligeras, idnticas entre s (PM 22500 daltons)

Cada cadena polipeptdica tiene una porcin NH 3 terminal (regin variable) y una porcin
COO terminal (regin constante). El antgeno reacciona con la regin variable y la regin
constante est involucrada con las reacciones biolgicas.

Los sitios de fijacin del antgeno estn formados slo por un pequeo nmero de
aminocidos de las regiones variables (v) de las cadenas H y L.

Existen cinco (5) clases de inmunoglobulinas (IgG, IgA, IgM, IgD e IgE) definidas por
diferencias en la secuencia de aminocidos en las regiones de las cadenas pesadas constantes.

Propiedades fsicas y biolgicas de las Inmunoglobulinas.

Clase Concentracin PM (x1000) Funcin biolgica

23
en el suero
(mg x 100 mL)
Fija el C', atraviesa
IgG 1000 - 75 % 150 la placenta, 2da
en respuesta inmune
Fija el C', acta como
IgA 200 - 15 % 170
anticuerpo secretor
Fija el C', 1ra en
IgM 120 - 10 % 890
respuesta inmune
Presenta receptores
IgD 3 - 0,2 % 150
en linfocitos
Presente en
IgE 0,05 - 0,004 % 196
reacciones anafilcticas

Proceso fsico - qumico de la interaccin antgeno - anticuerpo

Es algo parecido a lo que ocurre entre una enzima y su substrato.


Debe existir complementariedad espacial.
Depende de la concentracin relativa en que se encuentren ambas estructuras.

Ag Ab Ag Ab

Intervienen:
pH
temperatura
iones
fuerzas (electrostticas, Coulmbicas, Van de Waals, enlaces de H2

Avidez y afinidad de los anticuerpos

Afinidad: Es la fuerza de combinacin del sitio activo del anticuerpo con un determinante
antignico aislado, de los muchos que puede poseer un antgeno.

Avidez: Es la fuerza de combinacin entre los distintos anticuerpos de un suero inmune y la


molcula antignica completa que puede poseer muchos determinantes antignicos diferentes.

Sistema de Complemento (C'). Concepto. Caractersticas generales. Formas de


activacin.

El C' es el primer mediador humoral de la activacin Ag - Ab y constituye el 15 % de la


fraccin globulnica del plasma. Consiste de 20 protenas diferentes que se encuentran
normalmente como molculas inactivas en la circulacin, las cuales interactan unas con
otras, con el anticuerpo y con las membranas celulares.

24
Existen 2 mecanismos diferentes que conducen a las reacciones del C': va clsica y va
alternativa. Despus de su activacin conduce a diferentes procesos biolgicos: lisis de
clulas, bacterias, virus; hasta la participacin directa en la respuesta inflamatoria.

La va alternativa del C' puede servir como una primera lnea de defensa en el husped no
inmunizado, funcin que desempea independientemente de la fagocitosis (sobre todo en
infecciones por bacterias Gram negativas).

La actividad del C' depende de 9 protenas sricas que actan en secuencia, cuando una de
ellas se activa es capaz de activar a la otra como "cascada". El componente final C' 9 tiene la
capacidad de abrir un hueco en la clula provocando la lisis o muerte de la misma.
La activacin de este sistema tambin conduce a otras funciones biolgicas que son
importantes en la salud y en la enfermedad.

Activacin del C' (va clsica)

Los activadores son: Inmunocomplejos (Ag - Ab) con participacin de las IgG e IgM y
agregados de Igs.

La activacin ocurre en tres etapas:

1. Etapa de reconocimiento.
2. Etapa de activacin.
3. Etapa de ataque a la membrana.

Etapa de reconocimiento

Es necesaria la reaccin Ag - Ab (IgG, IgM).


Se une al fragmento Fc el componente C'1 que est formado por tres protenas (q, r, s).
C'1q constituye la pieza de unin del Complejo C'1qrs al fragmento Fc de la Ig.

Activacin del C' (va alterna)

Los activadores son: endotoxinas de bacterias Gram negativas, polisacridos, algunas


bacterias Gram positivas, IgA, IgE e IgG (la 4). Estos activan el Sistema de la Properdina,
que es un activador de C'3 y desde C'3 a C'9 procede igual que en la va clsica.

Diferencias entre la Va Clsica y Alterna para la Activacin del C'.

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Va Clsica Va Alterna

Desencadenada por la reaccin Ag - Ab No requiere reacciones Ag Ab

Intervienen: IgA, IgE, IgG (la 4),


Participan las IgG (3 clases) e IgM endotoxinas, polisacridos, bacterias
Gram negativas
Intervienen todas las protenas del C' Activan el sistema
Properdina-proactivador de C'3
Ms lenta Ms rpida

Propiedades biolgicas del C'

Mediadores de la inflamacin

Quimiotaxis (atrae fagocitos al sitio de la inflamacin). Mediada por C'3a, C'5a,


C'5,6,7.
Anafilotoxina. Mediada por C'3a, C'5.

Inmunoadherencia y opsonizacin. Reconoce al agente extrao y facilita la


fagocitosis. Mediada por C'3b comportndose como opsonina.
Inmunocitolisis. Provoca cambios en la osmolaridad que da como resultado la
lisis celular. Mediada por C'8, C'9.

rganos y Clulas del Sistema Inmune.


Ontogenia de la respuesta inmune

Primordio o clula madre (mdula sea)

nueva clula madre

megacariocito plaquetas
serie eritroide eritrocitos
serie mieloide monocito macrfago

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granulocito - neutrfilos
- eosinfilos
- basfilos
-mastocitos o clulas
cebadas
serie linfoide clulas B B timo dependientes 30 %
B timo independientes
clulas T TH cooperante
(70 % ) Ts supresor
timo independiente TC citotxico
THT hipersensibilidad retardada

rganos inmunocompetentes:

a) rganos centrales

Timo: Se deriva de la 3ra y 4ta bolsa bronquial como evaginacin central durante la 6 ta
semana de vida intrauterina. Tiene la tasa ms alta de produccin celular. Es el primer
rgano en producir linfocitos (linfocitos timo dependientes). Est constituido por
clulas epiteliales y linfocitos. Al timo llegan linfocitos indiferenciados provenientes de
la mdula sea, que en este rgano maduran y se conviertes en clulas
inmunocompetentes.
Medula sea: acta como rgano linfoide central y controla la maduracin de los
linfocitos responsables de la inmunidad humoral o mediada por anticuerpos.
Bolsa de Fabricio: es el equivalente de la mdula sea en las aves.

b) rganos perifricos

Bazo
Ganglios linfticos
Tejido linfoide asociado al tubo digestivo

En los rganos perifricos se "almacenan" y "ejecutan su funcin" las clulas previamente


maduradas en los rganos centrales.
En los ganglios linfticos y en el bazo, las reas estn separadas en:

Timo dependiente Timo independiente

Clulas T Clulas B

Pobladas por linfocitos que maduran Pobladas por linfocitos que maduran
en el timo en la mdula sea en los mamferos y
en la Bolsa de Fabricio en las aves

27
Linfocitos T Linfocitos B

Inmunidad Celular Inmunidad Humoral

Clulas inmunocompetentes:

Las clulas que participan en la respuesta inmune son: linfocitos T, linfocitos B, plasmocitos,
macrfagos, polimorfonucleares, mastocitos, eosinfilos y basfilos.

Linfocitos T:

Maduran en el timo. Son clulas timo dependiente.


Participan en la vigilancia inmunolgica.
Guardan memoria inmunolgica.
Emiten factor de colaboracin.
Tienen larga vida. Duran aos.
Tienen actividad reguladora: inductoras, supresoras.
Citotxicas.
Productoras de linfoquinas.
Participan en la inmunidad celular.

Linfocitos B:

Maduran en la mdula sea. Son clulas timo independiente.


Tienen corta vida.
Participan en la inmunidad humoral.

Plasmocitos:

Sintetizan inmunoglobulinas.

Diferencias entre los linfocitos B y linfocitos T

Linfocito B Linfocito T

Morfologa Indistinguibles al Menor


microscopio ptico (mayor)
Presentan microvellosidades Lisos
Superficie celular:
Marcadores - Igs (IgM, IgD) Receptor para antgeno

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- Receptor FC y C
Forma de conteo Inmunofluorescencia con Forma rosetas con
anti - Ig eritrocitos de carnero
Frecuencia en el 50 % 50 %
bazo
Frecuencia en 30 % 70 %
sangre
Clulas plasmticas formadoras Linfocitos comprometidos
Maduracin de anticuerpos inmunolgicamente
humoral celular - humoral

Dinmica de la respuesta inmune. Inmunidad celular.

La expresin de la inmunidad requiere la interaccin cooperativa entre las distintas


poblaciones celulares.
En estos mecanismos de interaccin el papel del macrfago como clula accesoria est bien
establecido. Su participacin incluye 3 eventos fundamentales:

1) Procesamiento del antgeno: El 90 % del antgeno se degrada por enzimas


lisozmicas y el 10 % restante permanece en la membrana.

2) Presentacin del antgeno: Despus del procesamiento, el antgeno deviene ms


inmunognico y el linfocito lo reconoce a travs de su receptor.

3) Liberacin de mediadores: Luego del reconocimiento del antgeno, el macrfago


libera interleukina 1 (IL 1) que:

Estimula la maduracin de las clulas T receptora del segundo mediador:


interleukina 2 (IL 2).
Estimula la liberacin de IL 2, lo cual da origen a una completa activacin
multiplicacin de las clulas T.

La completa activacin de las clulas T se traduce por:

Liberacin de mediadores solubles (linfokinas).


Clulas T efectoras (citotxicas).

Dinmica de la respuesta inmune. Inmunidad humoral.

En el desarrollo de la respuesta inmune humoral, o sea mediada por anticuerpos, se ha


demostrado la participacin de las clulas T (linfocitos T) como cooperantes en el mecanismo
de inmunorespuesta. La participacin de las clulas T fue claramente esclarecida por Chaman
y colaboradores.
Como ya vimos, la activacin de las clulas T requiere a su vez la interaccin con clulas
presentadoras de antgeno (macrfagos), de modo que transitoriamente los tres tipos celulares

29
(linfocitos T, macrfagos y linfocitos B) estn involucrados en la respuesta humoral, lo cual
se conoce con el nombre de cooperacin celular.
El mecanismo de activacin de las clulas B es complejo y no muy bien comprendido, pero la
hiptesis ms aceptada en el momento actual propone los siguientes pasos:

1) Activacin de los linfocitos TH a travs de la interaccin con el macrfago (proceso ya


visto en la respuesta celular).

2) Formacin de un puente con el antgeno que involucra el receptor del linfocito T H y el


receptor del linfocito B (Ig). Despus del contacto se libera por el antgeno, un factor
soluble especfico (ASSF) que induce a la clula B a la activacin, transformndola en
blstica y con expresin de receptores en su superficie.

3) Liberacin del factor de crecimiento por las clulas B que estimula al linfocito B a la
proliferacin. Este factor puede ser liberado tambin por TH.

4) La fase de maduracin ocurre bajo el factor de maduracin de las clulas B y tambin


puede ser liberado por TH y su accin es la transformacin en clulas plasmticas
formadoras de anticuerpos.

Respuesta Inmune en infecciones por agentes invasivos y


toxignicos.

Hipersensibilidad. Concepto. Tipos de hipersensibilidad.

Fenmeno mediante el cual el sistema inmune de un individuo responde ante una sustancia
extraa de una forma alterada que trae como consecuencia lesiones hsticas. Tiene
memoria y especificidad inmunolgica.

Tipos de inmunidad Caractersticas.

Clasificacin segn Clasificacin segn Clasificacin segn el tipo


tiempo y aparicin tipo de efector de reaccin

30
Inmediatas Anticuerpos I Anafilctica
II Citotxica
III Complejos txicos (Ag-Ab)
V Estimulatoria
Retardadas Clulas especializadas, IV Retardada
sensibilizadas

Hipersensibilidad Tipo I o Anafilctica

Son producidas por sustancias activas liberadas por algunas clulas de los tejidos como:
clulas cebadas o basfilos.
Dependiendo del modo o va de administracin del antgeno, las manifestaciones clnicas
pueden ser:

)a Generalizadas
)b Localizadas por aparatos
Aparato respiratorio: obstruccin bronquial y edema de la laringe.
Aparato digestivo: nusea, vmito, diarrea, clicos abdominales.
Aparato cardiovascular: hipotensin, shock.
Piel: prurito, eritema, ronchas.

Factores involucrados en este tipo de reaccin:

Anticuerpos: homocitotrpicos por su capacidad de fijacin al tejido autlogo.


Incluye la IgE y en menor proporcin IgG. Tambin son llamados anticuerpos
reagnicos.
Antgenos: muchos antgenos son capaces de inducir anticuerpos IgE. Ej.
protenas heterlogas (antisueros, enzimas, hormonas, extracto de polen, ciertos
alimentos, polisacridos y hierro), agentes diagnsticos (iodo, bromonaftilamina
y algunos medicamentos, como los antibiticos).
alimentos: alergia, gastrointestinal
inhalantes: rinitis alrgica
medicamentos: reacciones medicamentosas
Clulas: basfilas o cebadas. Son capaces de unir anticuerpos, a travs de
receptores especficos en la superficie celular, por el fragmento Fc de la Ig.

Despus de la interaccin Ag Ab, se desencadenan una serie de cambios bioqumicos que


incluye la distorsin fsica de la Ig y despus se liberan aminas vasoactivas, que trae como
consecuencia la contraccin del msculo liso y aumento en la permeabilidad capilar. Ej. asma
bronquial, dermatitis atpica (localizadas) y choque anafilctico a la penicilina
(generalizada).

Hipersensibilidad Tipo II o Citotxica

31
Puede ocurrir por 2 mecanismos: que el anticuerpo se una al antgeno de las membranas
celulares (clula husped) o que el antgeno primario se adsorba a las membranas celulares y
luego el anticuerpo se una a l.

Despus que el anticuerpo formado se ha unido al antgeno pueden ocurrir 2 cosas:

a) Lisis: dependiendo del C. Ej. incompatibilidad ABO


independiente del C. Ej. pnfigo

b) Bloqueo: estimulacin de clulas o destruccin de clulas. Ej. anemias hemolticas,


leucopenia y trombocitopenia.

Hipersensibilidad Tipo III o de los Complejos Txicos (Ag Ab)

En una primera fase, despus de formado el anticuerpo y combinado con su antgeno


especfico dentro del husped, se forma el inmunocomplejo (Ag Ab). Este inmunocomplejo
se localiza en tejidos especficos del organismo.
Este complejo o macromolcula se hace extrao al organismo y se forman sustancias
humorales y factores celulares que reaccionan con el inmunocomplejo y el tejido donde se
encuentra ste, ocasionando dao celular. Ej. glomerulonefritis post estreptoccica.

Hipersensibilidad Tipo V o Estimulatoria

Este tipo de hipersensibilidad se desencadena en presencia de anticuerpos que estimulan a la


clula (tiroides) para que sintetice de forma no controlada sustancias que produca
normalmente (tirosina). La unin del antgeno y el anticuerpo a receptores especficos en la
membrana celular, desencadenan la reaccin.

Hipersensibilidad Tipo IV o Retardada

Es una reaccin de antgenos especficos sin intervencin de anticuerpos ni C (intervienen


clulas y linfoquinas).
La reaccin tpica es la llamada reaccin retardada a la tuberculina porque es de lenta
aparicin y puede apreciarse despus de 24 horas.
La reaccin consiste en inyectar un derivado proteico purificado (PPD) del bacilo tuberculoso
por va intradrmica en el antebrazo. En las prximas 24 a 72 horas se realiza la lectura
buscando induracin. Histolgicamente hay vasodilatacin, edema e infiltracin de PMN,
linfocitos TH y monocitos.
Esta es una reaccin de hipersensibilidad contra los constituyentes del bacilo tuberculoso e
indica que hubo un contacto previo con el microorganismo.
Mecanismos inmunolgicos de defensa del hospedero frente a la agresin por agentes
invasivos y toxignicos.

Respuesta humoral

32
1. Opsoninas: Opsonizacin mediada por anticuerpos (facilitan la fagocitosis). Los
anticuerpos reconocen al antgeno de la bacteria y atraen macrfagos y clulas asesinas
(killer), que facilitan la fagocitosis por stas clulas.
La fagocitosis es la defensa fundamental contra la invasin de los microorganismos,
favorecida por el cambio de carga superficial que stas sufren debido a la interaccin con
el anticuerpo.
2. Lisis: Bacteriolisis mediada por el C. La formacin del inmunocomplejo (Ag Ab)
activa la va clsica del C, lo que da como resultado la inmunocitolisis.
3. Neutralizacin: Ocurre la inmovilizacin por anticuerpos neutralizantes.
4. Produccin de antitoxinas: La liberacin de sustancias txicas (toxinas) da lugar a la
formacin de anticuerpos antitoxinas, que bloquean la accin de las mismas.

Respuesta celular

1. Macrfagos:
aumentan en la capacidad fagoctica
aumentan en el nmero de fagolisosomas y su contenido enzimtico
por lo tanto, aumentan la capacidad para digerir las bacterias fagocitadas.

2. Linfocitos: segregan factor activador de los macrfagos responsables de los cambios en


ellos.

3. Clulas asesinas:
K (killer): tienen receptor para IgG y el anticuerpo acta como un puente.
NK (asesina natural): matan sin necesidad de contacto previo con el antgeno;
lisan directamente a las clulas, pero sin especificar; requieren contacto clula
clula (beso inmunolgico).

La inmunidad celular antibacteriana se produce para bacterias que tienen vida intracelular. Ej.

M. tuberculosis, Brucella y otras.

Mecanismos de inmunidad en algunas infecciones por N. meningitidis.

1. Anticuerpos bactericidas especficos: infecciones subclnicas, vacunacin especfica de


grupos.
2. IgG pasivos de la madre al feto.
3. Papel de los PMN fagocitosis.
4. Deficiencias en C (C6 C7 C8)

33
Mecanismos de inmunidad en algunas infecciones por Clostridium tetani, S. aureus, etc.
(txica).

1. Produccin de antitoxina tetnica (anticuerpos neutralizantes).


a) Profilaxis, vacunacin con toxoide (activa),
b) Administracin de antitoxina tetnica (pasiva).

Mecanismos de inmunidad en algunas infecciones por lepra y tuberculosis.


1. Inmunidad celular (macrfagos linfocitos), formacin del granuloma.

Mecanismos de inmunidad en algunas infecciones por sfilis y candidosis (inmunidad


celular).

1. La inmunidad que se crea es pobre, por lo que se ven ataques subsecuentes despus de
cada infeccin. Se supone que aparecen IgG.

La infeccin viral como forma particular de interaccin


hospedero - parsito.
Los virus constituyen un grupo de agentes biolgicos que causan gran diversidad de
enfermedades, afectan diferentes rganos y sistemas, por lo tanto su patogenia vara en cada
uno de ellos y de hecho el organismo utiliza diferentes mecanismos para contrarrestar sus
efectos, pero ellos poseen una serie de propiedades que les permiten escapar de ellos.
Debido a que los virus son parsitos intracelulares obligados al mecanismo de replicacin
viral difiere significativamente del de las bacterias. Mecanismos por los cuales se transmiten
los virus al nivel celular.

Virus. Concepto y estructura.


Son los agentes infecciosos ms pequeos que estudiaremos.
Poseen como genoma un solo tipo de cido nucleico: ARN ADN.
Tienen vida intracelular obligada.
Son resistentes a los antibiticos.

Fases de la replicacin viral.


1. Adhesin.
2. Penetracin.
Mecanismo similar a la pinocitosis.
Inyectando el genoma (fagos).
3. Desnudamiento.
4. Eclipse.
Replicacin del genoma viral.
Transcripcin en ARNm.
Sntesis de los componentes virales.
5. Maduracin y salida.

34
Gemacin de la membrana celular o de la membrana nuclear (vacuolar). Se observa
en los virus envueltos.
Ruptura o lisis de la clula infectada. Se observa en los virus desnudos.

Replicacin viral.

Los virus slo se multiplican en el interior de una clula viva y sta puede efectuarse en el
ncleo o en el citoplasma.
Los virus ARN generalmente se multiplican en el citoplasma, con excepcin de los
retrovirus (SIDA).
Los virus ADN generalmente se multiplican en el ncleo, con excepcin de los
poxvirus.
No todos los virus completan los pasos de la replicacin.

Diseminacin.

Muchos virus producen enfermedad en sitios distantes a su puerta de entrada. Ej. enterovirus,
los cuales penetran por tracto digestivo y producen enfermedad en el SNC.

El tropismo celular de los virus depende de receptores especficos situados en la superficie de


las clulas. Ej. el virus de la rabia se fija a receptores de acetilcolina que hay sobre las
neuronas.

Se conocen 3 vas de diseminacin viral:

Tipo I: Que tambin se denomina extracelular. En este tipo la clula infectada es lisada y las
partculas virales activas (cido nucleico) se esparcen en forma extracelular hacia las clulas
no infectadas vecinas y distantes. Ej: en el virus de la Influenza y los adenovirus.

Tipo II o Intercelular: El virus se disemina de una clula a otra a travs de los puentes
intercelulares sin contacto con el medio extracelular por Ej: virus de la varicela.

Tipo III o nuclear: tambin se conoce como diseminacin vertical, en este tipo el genoma
del virus se integra al genoma de la clula del hospedero y en la divisin celular est pasando
junto con la clula por el ncleo. Ej: los retrovirus.

Estos tres tipos de diseminacin son transmisiones al nivel celular.

A nivel del hospedero la diseminacin puede ser:

Local: es aquella en la que la infeccin viral est confinada a la superficie de la mucosa de un


rgano. Ej: rinovirus en el caso del epitelio respiratorio y los rotavirus en el epitelio
intestinal.

Hematgena primaria: cuando el virus es inoculado directamente a la circulacin


sangunea con la diseminacin directa a los rganos. Ej: los arbovirus, virus de la hepatitis B.

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Hematgena secundaria: la infeccin y replicacin viral inicial ocurren en la superficie de
una mucosa y despus va seguida de la diseminacin hematgena a los rganos. Ej:
sarampin, paperas.

Neural: ciertos virus inoculados en sitios perifricos se diseminan por el sistema nervioso.
Ej: virus de la rabia (rhabdovirus).

Propiedades de los virus que les permiten escapar de los mecanismos de


defensa del hospedero.

a) Plasticidad serolgica: Existen algunos virus, como es el virus de la influenza, que sufre
cambios genticos que le permiten cambiar su estructura con frecuencia y dar lugar a
recombinacin gentica, que vara dando lugar a diferentes pandemias y dificulta que el
individuo cree inmunidad.

b) Disfraz: Las protenas virales en la superficie de la clula infectada por virus pueden
unirse a materiales normales del hospedero por lo que ocultan sus antgenos al aparato
inmunolgico. Ej: el virus del herpes.

c) Latencia: Los virus pueden quedar latentes (inactivos) en la clula infectada y as


protegerse de los mecanismos inmunolgicos.

d) Formacin de inmunocomplejos no neutralizantes.

e) Modulacin de antgenos virales por anticuerpos (determinantes antignicos


similares).

f) Algunos virus causan inmunosupresin. Ej. el virus del SIDA.

g) Diseminacin intracelular: en los tipos de diseminacin II y III, no hay exposicin


extracelular a los mecanismos de defensa humorales, ni celulares, por lo tanto la respuesta
del hospedero es menor o est ausente.

Mecanismos de Defensa contra los virus: Humorales y Celulares.

A- Mecanismos humorales de defensa.

La inmunidad mediada por anticuerpos es la predominante en la reinfeccin. Presenta las


siguientes caractersticas:

Depende en gran medida de la puerta de entrada del virus y su rgano de choque.


Las infecciones con los virus cuya puerta de entrada est alejada del rgano de
choque, se caracterizan por tener un perodo de incubacin prolongado. Ej. los virus
del sarampin, parotiditis, rubola y poliomelitis.

36
En las enfermedades virales con un perodo de incubacin corto (Ej. catarro comn e
influenza), los virus no pasan a travs del sistema sanguneo debido a que su rgano
de choque o diana, coincide con la puerta de entrada al organismo.

En este tipo de infeccin, aun cuando existan altos niveles de anticuerpos


circulantes en la sangre, estos son relativamente inefectivos, sobre todo cuando
son de los tipos IgG e IgM, debido a la escasa permeabilidades la mucosa
respiratoria para ellos.
Sin embargo, se ha encontrado que la IgA presente en las secreciones nasales es
la responsable de la actividad neutralizante contra los virus de corta incubacin.
En los virus que atraviesan el sistema sanguneo, la IgG y la IgM, son las
inmunoglobulinas ms eficaces.

La inmunidad viral es ms duradera que la bacteriana.

1. En la neutralizacin sin C. La neutralizacin se produce por las Ac G, M y A que han


demostrado que neutralizan la infectividad de virtualmente casi todos los virus conocidos,
la reaccin es altamente especfica pero solo es efectiva con el virus extracelular (tipo I).

2. Neutralizacin facilitada por C. El C slo puede lisar algunos virus con cpside por
lisis directa. Ej: retrovirus. El recubrimiento de viriones con factores del C tambin
puede facilitar su fijacin y digestin por las clulas fagocticas.

3. Lisis de la clula infectada por virus. Las clulas infectadas que tienen antgenos
codificadas por el virus en su superficie son susceptibles a la citolisis por el Ac y el C
principalmente por la va alterna.

4. Opsonizacin: El recubrimiento de los virus extracelulares por Acs IgG y por C o para
ambas puede facilitar la fagocitosis y la destruccin intracelular por macrfagos o por
PMNs.

A. Inhibicin de enzimas.

El virus de la influenza tiene una enzima, la neuroaminidasa, que rompe al receptor viral y
facilita la penetracin del virus. Los Acs contra la neuroaminidasa limitan la replicacin viral.

B. Mecanismos celulares de defensa.

La inmunidad mediada por clulas es la predominante en la infeccin primaria por agentes


virales.

Entre ellos la reaccin de hipersensibilidad retardada empleando pruebas cutneas o la


transformacin blstica de linfocitos son reacciones mediadas por clulas que parecen ser
importantes en la resistencia del hospedero.

37
I. La citotoxidad celular. Las clulas infectadas por virus pueden ser lisadas por linfocitos
sensibilizados o en algunos casos por macrfagos activados o an por PMNs.

II. Produccin de linfoquinas o linfocinas. Los linfocitos sensibilizados liberan linfocinas


como respuesta a los Ag virales. Ej: Interfern. Tambin atraen a PMNs, macrfagos
que pueden en forma inespecfica destruir a los virus o a las clulas infectadas por
virus.

III. Interferones. Los Interferones gamma y beta son antivirales.

IV. Restriccin del hospedero. Los macrfagos de cepas de ratones resistentes a la


infeccin por el virus de la hepatitis del ratn por lo general no permiten o restringen
la replicacin viral.

V. Fagocitosis. En algunos enterovirus la resistencia a la infeccin y la enfermedad est


dada por la fagocitosis de estos virus por los macrfagos y menos comnmente por
los neutrfilos.

C. Otros factores no especficos como la fiebre, hipotermia, hipoxia, acidosis, pueden


afectar la replicacin viral, (se ha visto experimentalmente).

Inmunidad a protozoos y helmintos.

En las infecciones por protozoos, se ha observado un incremento de todas las


inmunoglobulinas.
Menos del 5 % del total de las inmunoglobulinas reacciona especficamente con el
inmungeno protozoario.
Los helmintos presentan un complejo ciclo de vida que explica las limitaciones en el
estudio de la respuesta inmune. Sin embargo, se ha encontrado altos niveles de IgG,
por lo que se ha pensado que la hipersensibilidad Tipo I pudiera estar implicada en su
patognesis.

38
TEMA III. BACTERIOLOGA MDICA.

Importancia de las bacterias como agentes etiolgicos de


enfermedades infecciosas.
Las bacterias se encuentran por todas partes, en el suelo, en el aire, en el agua y
particularmente en todo tipo de materia orgnica muerta. Son microorganismos unicelulares
que se reproducen por divisin simple, es decir, fisin binaria. Unas pocas como las
chlamydias y las rickettsias, son parsitos intracelulares obligados. Desempean un
importante papel en los procesos metablicos de la materia viva, descomponiendo los
substratos orgnicos procedentes de las plantas y de los animales, mineralizndolos y
restituyndolos a la naturaleza para su nuevo aprovechamiento. Mientras todas las plantas y
animales superiores resuelven sus requerimientos energticos a travs de las vas metablicas
muy estereotipadas, en las bacterias encontramos una gran diversidad de procesos
bioqumicos que les permiten sobrevivir a expensas de compuestos muy simples. Las
bacterias productoras de enfermedades tienen casi requerimientos metablicos complejos,
que las obligan a vivir de las materias vivas, mediante su adaptacin al modo de vida
parsito, por haber perdido la capacidad de sintetizar algunos compuestos esenciales.

Bacteriologa mdica. Su importancia.

El estudio de la bacteriologa permite comprobar los principios de la biologa, porque las


bacterias poseen muchos caracteres que las hacen sujeto ideal para la investigacin de los
fenmenos biolgicos. Pueden cultivarse fcilmente en tubos o matraces, lo que requiere
menos espacio y manutencin que las plantas o los animales. Crecen rpidamente y se
reproducen a un ritmo extraordinario, algunas especies de bacterias producen casi 100
generaciones en un perodo de 24 horas.
En ninguna parte se aprecia mejor la diversidad biolgica como en los microorganismos, los
cuales no se pueden observar a simple vista. En forma y funcin, ya sea en la propiedad
bioqumica o mecanismo gentico, el anlisis de microorganismos lleva a los lmites de
comprensin de los fenmenos biolgicos. Por tanto, la necesidad de originalidad- prueba del
valor de una hiptesis cientfica puede cumplirse con la microbiologa. Una hiptesis til
deber proporcionar una base para generalizar y la diversidad microbiana proporciona un
campo donde este reto est siempre presente.
La prediccin, consecuencia prctica de la ciencia, es un producto creado por una mezcla de
tcnica y teora. La bioqumica y gentica proporcionan los medios requeridos para el anlisis
de los microorganismos. A su vez la microbiologa extiende los horizontes de estas
disciplinas cientficas.
Una divisin biolgica mayor separa a los eucariotes, organismos que poseen un ncleo
rodeado por membrana de los procariotes, organismos donde el DNA, no tiene una
separacin fsica del citoplasma, los procariotes, adems, no contienen ribosomas 80S u
organoides unidos a membrana, como el ncleo, las mitocondrias, los lisosomas, el retculo
endoplsmico o los cuerpos de Golgi, y carecen de la estructura 9 + 2 flagelar fibrilar o ciliar
caracterstica de las clulas eucariticas. Los eucariotes y procariotes son organismos debido
a que contienen todas las enzimas requeridas para su replicacin y poseen el equipo biolgico

39
necesario para la produccin de energa metablica. As eucariotes y procariotes se distinguen
de los virus, que dependen de las clulas husped para efectuar estas funciones tan necesarias.
Muchas son las aplicaciones de la bacteriologa, en el ambiente, en los procesos industriales,
en el control de los insectos causantes de enfermedades, en la depuracin microbiana de
aguas residuales, etc; todos stos con fines beneficiosos para el hombre, sin embargo,
tambin en la guerra biolgica, con el empleo deliberado de organismos vivos o de sus
toxinas para causar la muerte o incapacidad.
El inters y la investigacin en torno a la guerra biolgica cumplen 2 fines importantes: 1ro la
preparacin para la defensa y 2do que pudiera considerarse accidental, pero los mtodos y
conocimientos adquiridos al protegernos para la guerra biolgica aumentarn nuestra
posibilidad de controlar las enfermedades debido a causas naturales.

Las bacterias como agentes etiolgicos de enfermedades infecciosas.

Aun antes de que Pasteur demostrara experimentalmente que las bacterias eran la causa de
algunas enfermedades, muchos observadores haban presentado pruebas de la teora de los
grmenes como agentes productores de enfermedades. Fracastori de Verona (1483-1553)
sugiri ya que las enfermedades podan deberse a organismos invisibles que se transmitan de
una persona a otra. En 1792 Anton Van Plenciz, de Viena, no slo estableci que la causa de
enfermedad eran agentes vivos, sino que supuso que grmenes diferentes provocaban
distintas enfermedades y Oliver Wendell; mdico famoso y hombre de letras, insisti en que
la fiebre puerperal era contagiosa y se originaba probablemente por un germen que se
transmita de unas madres a otras.
Existen pocas enfermedades infecciosas cuyo agente etiolgico no se conozca. El hecho de
que algunas infecciones microbianas no estn dominadas puede deberse, bien a nuestro
defecto del conocimiento de factores predisponentes en el husped o a otros aspectos de la
patogenia, tales como la accin sinrgica de los microorganismos.

La clula bacteriana.

Resulta casi imposible comprender lo que sucede en el interior de la clula viva, si se carece
de los conocimientos sobre la accin enzimtica; obtenidos en los cursos de bioqumica. Para
comenzar nuestro estudio sobre la clula bacteriana, debemos considerarla como una
pequesima bolsa repleta de enzimas, capaz de desarrollar un intercambio energtico con el
medio, que puede ser ms de cien veces mayor con respecto al mismo peso de tejido
humano.

Morfologa de las bacterias. Clasificacin (segn morfologa):

Las bacterias pueden tener algunas de las tres formas:

a) Esfricas o redondas. (cocos)


b) Cilindroideas o en forma de bastn. (bacilos)
c) Espirales encorvados a manera de tirabuzn. (espirilos)

40
Estructura de la clula procaritica.

La clula procaritica es ms simple que la clula eucaritica a cualquier nivel con una
excepcin: la pared celular puede ser ms compleja.

Estructuras externas

1.- Membrana celular


2.- Pared celular
3.- Cpsulas y glicoclix
4.- Flagelos
5.- Fimbrias (Pilis, Pelos)

Estructuras internas

1.- Nucleoides
2.- Ribosomas
3.- Grnulos (Citoplasmticos)
4.- Mesosomas
5.- Cromatforos

Estructuras externas

Membrana celular.

Envoltura flexible que rodea al citoplasma, es visible en las micrografas electrnicas de


cortes bacterianos finos. Las membranas de los procariotes se distinguen de las membranas
de las clulas eucariticas por la ausencia de esteroles, siendo la nica excepcin los
micoplasmas, los cuales incorporan en sus membranas a los mismos al crecer en medios que
contienen esteroles.

Composicin:

a) Fosfolpidos
b) Polipptidos

Funciones:

- Permeabilidad selectiva y transporte activo de solutos al interior de la clula.


- Transporte de electrones y fosforilacin oxidativa, en especies aerobias.
(Respiracin.)
- Excrecin de exoenzimas hidrolticas.
- Porta las enzimas y las molculas transportadoras que intervienen en la biosntesis de
DNA, polmeros de la pared celular y lpidos de membrana.
- Porta los receptores de membrana y otras protenas de los sistemas quimiotcticos y
otros de traduccin sensorial.

41
Pared celular.

Envoltura rgida entre la membrana y la cpsula, diferente en las bacterias Gram (+) y las
bacterias Gram (-).

Composicin:

Gram (+)

- Murena-Peptidoglicano-Mucopptido (responsable de la integridad estructural de la


pared)
- Acidos teicoicos (Forman hasta el 50% del peso seco de la pared)
Son polmetros hidrosolubles que contienen residuos de Ribitol o Glicerol.

Gram (-)

- Murena-Peptidoglicano-Mucopptido.
- Lipoprotenas.
- LPS (Es muy txico para los animales y se les denomina endotxinas debido a que
slo es liberado cuando las clulas bacterianas son lisadas.
- Las bacterias Gram (-) tambin presentan la membrana exterior, tpica capa formada
por fosfolpidos, LPS y protenas, que tiene como funcin:

Transporte de pequeas molculas como Vit. B 12


Receptores de fagos.
Replicacin DNA y divisin celular.
Barrera a grandes molculas de ah la resistencia de las bacterias Gram (-) a
los antibiticos.

Funciones:

- Proteccin osmtica: (La presin osmtica interna de las bacterias es muy grande,
flucta entre 5 a 20 atmsferas, como resultado de una concentracin de solutos
adquiridos mediante transporte activo. En casi todos los medios esta presin sera
suficiente para hacer explotar la clula si no fuera por la presencia de paredes celulares
con enorme resistencia a la tensin. La pared celular bacteriana debe su resistencia a la
murena.
- Divisin celular, funcionando como un primordio para su propia biosntesis.
- Carcter tintoreal.
- Morfologa.
- Varias capas de la pared celular, son sitios de determinantes antignicos primordiales
de la superficie celular.
- La pared celular es en general permeable sin selectividad especfica, sin embargo la
membrana externa bloquea el paso de molculas relativamente grandes.

42
Protoplastos y esferoplastos: Las bacterias habitualmente se lisan en agua o suero cuando la
capa de peptidoglucano de la pared celular rgida de la envoltura celular se disuelve con
lisozima o por medio de otros agentes. Sin embargo cuando se le estabiliza con soluciones
hipertnicas de sacarosa o de sales (0,2 a 0,5, segn el microorganismo) se libera un cuerpo
esfrico carente de pared y osmticamente sensible que se conoce como protoplasto. Cuando
se retienen los componentes de la envoltura, el cuerpo osmticamente sensible se denomina
esferoplasto. En general las bacterias Gram (+) producen protoplastos, mientras que, los
microorganismos Gram (-) originan esferoplastos, dado que retienen de manera inevitable,
algunos componentes de la membrana externa.

Cpsula.

Envoltura mucilaginosa ms externa, por fuera de la pared celular. Muchas bacterias


sintetizan grandes cantidades de un polmero extracelular cuando se desarrollan en su
ambiente natural. Con una sola excepcin (el cido poli-D-glutmico de la cpsula de
Bacillus anthracis), todo este material extracelular, es un polisacrido. Cuando el polmero
forma un condensado, una capa bien definida rodea estrechamente a la clula, se le llama
cpsula; cuando el polmero forma una maraa de fibras que se extienden fuera de la clula,
se le conoce como glicoclix. En ocasiones se forman masas de polmeros que parecen estar
totalmente separadas de la clula pero en las cuales las clulas pueden estar atrapadas; en
estos casos se puede referir al polmero extracelular, simplemente como una envoltura
mucoide. El polmero extracelular es sintetizado por enzimas localizadas en la superficie
externa de las clulas bacterianas.

Composicin:

- Polisacridos.
- A veces cido hialurnico.
- En algunas bacterias est constituida por polipptidos.

Funciones:

Protege a las bacterias de la fagocitosis a menos que estn recubiertas de anticuerpos


anticapsulares, por lo que contribuye a la invasividad de las bacterias patgenas.
El glicoclix, tiene una funcin importante en la adherencia de las bacterias a la superficie de
su medio, incluyendo a las clulas de sus huspedes vegetales o animales.

Flagelos.

Apndices delgados, flexibles y largos, miden de 12 a 30 nm de dimetro. Se conocen varios


tipos de flagelos: montricos (un slo flagelo polar), loftricos (penacho de flagelos polares),
pertricos (flagelos distribuidos alrededor de toda la clula)

Composicin:

43
- Protena (Flagelina.)

Funciones:

- Movilidad
(Se originan en el CITOPLASMA y no en la pared celular.)

Fimbrias. (pilis o pelos)

Apndices muy finos, rgidos y cortos. Muchas bacterias Gram(-) lo presentan. Se conocen 2
tipos de pilis:

- Pili ordinario (adhesin de una bacteria a la clula del husped)


- Pili sexual (responsable de la unin de clula donadora y aceptora en la conjugacin
bacteriana).

La virulencia de ciertas bacterias patgenas, no slo depende de la produccin de toxinas,


sino tambin de los antgenos de colonizacin, que en la actualidad se han reconocido
como simples pilis que dan a las clulas propiedades adherentes. En las cepas de E. coli
enteropatgena, tanto las enterotoxinas como los antgenos de colonizacin (pilis) estn
determinados genticamente por plsmidos transmisibles.
Un grupo de cocos Gram (+), los estreptococos, portan una capa de fimbrias que son el sitio
del principal antgeno de superficie, la protena M. El cido lipoteicoico contenido en estas
fimbrias, es el responsable de la adherencia de los estreptococos del grupo A a las clulas
epiteliales del husped.

Estructuras internas: (las clulas procariticas carecen de plstidas autnomas


como las mitocondrias y los cloroplastos.)

1. Nucleoide.- Fibrilla de ADN que constituye un cromosoma circular nico de


aproximadamente 1 mm de longitud cuando est desenrollado, con un peso molecular
alrededor de 2 a 3 x 109. Las micrografas electrnicas revelan la ausencia de membrana
nuclear y de sistema mittico. El ncleo procaritico puede verse con microscopio ptico
en material teido. Es Feulgen- positivo indicando la presencia de DNA.
FUNCION: Hereditaria

2. Ribosoma.- Partculas de ARN donde se realiza la sntesis proteica. El nmero de


ribosomas vara de acuerdo con las condiciones de crecimiento: las clulas de crecimiento
rpido en un medio rico, contienen mucho ms ribosomas que las de crecimiento lento en
medio pobre.

3. Grnulos Citoplasmticos.- los grnulos identificados por procedimientos adecuados de


tincin, indican la acumulacin de reservas de alimentos, lo que incluye polisacridos,
lpidos y polifosfatos. Los grnulos varan con el tipo de medio y el estado funcional de
las clulas. El glucgeno es el principal material de almacenamiento de las bacterias
entricas (40 % del peso seco de algunas especies). De manera similar, algunas especies

44
de Bacillus y Pseudomonas acumulan 30 % o ms de su peso como poli hidroxibutirato.
Finalmente estn los polifosfatos, tambin conocidos como grnulos de tincin
metacromtica de Babes- Ernst o grnulos de volutina, que se encuentran en el
Corynebacterium diphtheriae, en el bacilo de la peste (Yersinia pestis), en micobacterias
(por ej: Mycobacterium tuberculosis) y otros. Los grnulos de volutina se tien de
diferentes colores, que varan del rojo al azul (es decir de forma metacromtica), con azul
de toluidina y azul de metileno.

4. Mesosoma.- Invaginaciones de la membrana celular. Habitualmente se observan como


sacos citoplasmticos asociados a la membrana en las clulas Gram (+) que contienen
estructuras laminares, tubulares o vesiculares. Por microscopa electrnica en cortes
delgados se ha demostrado la fijacin de los mesosomas tanto a la cromatina de DNA
como a la membrana. FUNCIN: Divisin celular.

5. Cromatforos.- Laminillas de pigmentos fotosintticos. FUNCIN: Fotosntesis en las


bacterias fotosintticas.

Esporas:

Algunas bacterias son capaces de formar esporas, como las pertenecientes a los gneros
BACILLUS y CLOSTRIDIUM, la espora es una clula bacteriana en reposo rodeada de
gruesas capas resistentes al calor y agentes qumicos.
Se forma en el citoplasma bajo condiciones ambientales adversas (Esporulacin) es liberada
por destruccin de la clula original y en condiciones nutricionales favorables, puede
activarse para producir una clula bacteriana nica (Germinacin).
Por sto la formacin de esporas en las bacterias se considera un mecanismo de resistencia y
no una forma de reproduccin, ya que no aumenta el nmero de individuos.

Divisin celular.

Las bacterias se producen o multiplican por fisin binaria o biparticin. Despus del
alargamiento de la clula, se forma una membrana citoplsmica transversa y
subsiguientemente una nueva pared celular. En las bacterias, la membrana transversa y la
pared celular, crecen a partir de las capas ms externas hacia el interior, un proceso en el cual
los mesosomas del tabique se hallan ntimamente involucrados. Los ncleos cuyo nmero se
ha duplicado antes de la divisin, se distribuyen equitativamente entre las dos clulas hijas.
Aunque las bacterias carecen de un huso acromtico, la membrana transversa se forma de tal
modo, que separa a los dos cromosomas homlogos formados por replicacin cromosmica.
Esto se logra mediante la fijacin del cromosoma a la membrana celular. De acuerdo con un
modelo, la terminacin de un ciclo de replicacin de DNA desencadena aparentemente la
sntesis de membrana entre los sitios de fijacin de los dos cromosomas homlogos que son
desplazados por el crecimiento invaginante de la membrana transversa. Contina el depsito
de nuevo material celular, originando el estiramiento y el doblamiento final de la envoltura
celular.

45
Agrupaciones bacterianas.

Al permanecer unidas temporalmente las clulas despus de dividirse, pueden formar ciertos
grupos caractersticos. Dependiendo del plano de la divisin y del nmero de divisiones, a
travs de las cuales las clulas permanecen unidas, pueden ocurrir los siguientes arreglos:

Cocos:

Parejas (diplococos)
Cadenas (Estreptococos)
Racimos (Estafilococos)
Grupos de 4 clulas (Ttradas)
Grupos de 8 clulas (Sarcinas)

Bacilos:

- Parejas (Diplobacilos)
- Cadenas (Estreptobacilos)
- Hileras paralelas (Palizadas o letras chinas)

Fisiologa bacteriana. Medios de cultivo.


La poblacin de microorganismos en la bisfera es aproximadamente constante: su
crecimiento se encuentra contrabalanceado por la muerte. La supervivencia de cualquier
grupo microbiano dentro de su nicho depende en gran parte de la competencia con xito
por los nutrientes y de la conservacin de una reserva de clulas vivientes durante la
privacin nutricional. Cada vez est ms claro que muchos microorganismos existen en
consorcios formados por representantes de diferentes gneros. Otros microorganismos,
caracterizados a menudo como clulas nicas en el laboratorio, forman colonias cohesivas
en el ambiente natural.
La mayor parte de los conocimientos con que se cuenta de la fisiologa microbiana, se han
derivado del estudio de lneas celulares aisladas que crecen en condiciones ptimas. De
todas maneras cabe recordar que muchos microorganismos compiten en el ambiente
natural mientras estn en tensin nutricional, circunstancia que puede producir un estado
fisiolgico bastante distinto al observado en un laboratorio. Debe reconocerse que
cualquier nicho microbiano vacante del ambiente se llenar con prontitud. Los
procedimientos de salud pblica para eliminar a los microorganismos patgenos mediante
depuracin de su nicho probablemente tendrn menos xito que los mtodos para dejar el
nicho ocupado por competidores no patgenos que tienen xito para hacerlo.
El trabajo que realizan las clulas bacterianas para crecer, multiplicarse e interrelacionarse
con el ambiente, requiere de una fuente energtica que excepto en las formas
fotosintticas, proviene de la degradacin de compuestos qumicos, que en el caso de las
bacterias patgenas al hombre, son suministradas por los tejidos del hospedero.

46
Las clulas bacterianas al igual que las clulas de todos los organismos vivos, realizan una
serie de transformaciones qumicas, mediante reacciones enzimticas, que en su conjunto
constituyen el metabolismo celular. Las posibilidades metablicas de una clula
determinan la calidad y cantidad de nutrientes requeridos y le aseguran la capacidad para
producir trabajo (biosntesis, transporte, movimiento). El metabolismo de las clulas
est sujeto a mecanismos de regulacin que permiten una distribucin del flujo de energa
y materia que, respetando el principio de mxima economa, resulta en un aumento
ordenado de todos los componentes celulares, siendo esta la definicin de crecimiento.

Fisiologa bacteriana.

Metabolismo: Es la totalidad de las reacciones qumicas llevadas a cabo en las clulas


vivas.
Por medio de estas reacciones se obtiene la energa del medio que se consume en las
biosntesis y el crecimiento, as como en actividades secundarias, como la movilidad, la
luminiscencia y la produccin de calor.
La energa puede ser obtenida del medio en forma de luz Fotosntesis
O a travs de la oxidacin de sustancias qumicas Quimiosntesis
Si la sustancia qumica oxidada es inorgnica, el organismo es llamado Litotrfico
Si es orgnico se llama: Organotrfico.
Las reacciones por medio de las cuales la energa adquirida es usada para la sntesis
celular, se conoce como: Anabolismo.
Las reacciones de liberacin de energa responsable de la degradacin de las sustancias
qumicas son agrupadas bajo el termino de: Catabolismo.
Las reacciones metablicas en las clulas vivas son exergnicas. (con liberacin de
energa).
En las bacterias no fotosintticas el ATP se genera por reacciones de oxido- reduccin.
Diferentes grupos de bacterias son capaces de emplear tipos diferentes de donadores y
aceptores de hidrgeno de tal manera que en el metabolismo microbiano podemos
encontrar los tres tipos de oxidacin biolgica:}

1) Respiracin Aerobia. El aceptor final de hidrgeno es el oxgeno molecular.


2) Respiracin Anaerobia. El aceptor final del hidrgeno es un compuesto inorgnico
(Nitrato, Sulfato, Carbonato, etc.,)
3) Fermentacin. El aceptor final de hidrgeno es un compuesto orgnico.

Nutricin Bacteriana:

La Nutricin Bacteriana es la provisin de nutrientes para el crecimiento.

Factores ambientales que afectan el crecimiento:

1: Nutrientes
a) Donadores de Hidrgeno (Glucosa)
b) Aceptores de Hidrgeno (Oxgeno molecular)
c) Fuente de C

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d) Fuente de Nitrgeno (Amoniaco)
e) Minerales (S)
f) Factores de crecimiento (La clula no puede sintetizar A.A, Vitaminas, etc.)

2.- Concentracin de iones hidrgeno (Ph):

La mayora de los microorganismos crecen mejor en un Ph de 6 a 8. Algunos necesitan Ph


bajo y otros altos.

3.- Temperatura:

- Psicroflicos (10 20 C)
- Mesoflicos (30 37 C)
- Termoflicos (40 60 C)

4.- Aereacin:

Los Aerobios obligados slo crecen en presencia de O2.


Los Anaerobios obligados slo crecen en ausencia de O2.
Los Facultativos se desarrollan en presencia o ausencia de O2.
Los Microaerfilos slo crecen a bajas tensiones de O2.

5.- Otros factores:

- Presin Osmtica.
- Concentracin salina.

Curva de crecimiento. Fases.

Al inocular un medio de cultivo lquido con clulas bacterianas viables, (tomadas de un


cultivo que previamente ha crecido hasta la saturacin), y se incuba a una temperatura
adecuada, de los datos obtenidos durante diferentes perodos de tiempo (abscisas) sobre la
concentracin de bacterias por mililitro de medio (ordenadas) se obtiene una curva similar
a la mostrada en el grfico, la cual puede ser dividida para su estudio en cuatro fases
principales:
La fase de latencia (A) representa el perodo de adaptacin de las bacterias al nuevo
ambiente que han sido inoculadas.
En la fase de crecimiento logartmico (B) las clulas disponen de nutrientes abundantes
que les permiten sintetizar nuevo material a un ritmo constante, por lo que la masa
aumenta en forma exponencial. La fase estacionaria (C) indica el agotamiento de
nutrientes y/o la acumulacin de metabolitos txicos, que determinan un cese total del
crecimiento. Por ltimo durante la fase de muerte la tasa de mortalidad adquiere un nivel
sostenido aunque pueden persistir algunas clulas que logran sobrevivir a expensas de los
nutrientes liberados por las bacterias que mueren.

El cultivo de los microorganismos clasificacin de los medios de cultivo.

48
En los laboratorios de microbiologa clnica y sanitaria, el personal tcnico procede a
elaborar diariamente una serie de compuestos nutritivos, los cuales tienen la finalidad de
proporcionar a los diferentes microorganismos que se investigan, una fuente de alimentos,
donde cada especie halle los nutrientes especficos de acuerdo con sus exigencias
nutricionales, de esta forma el germen dispondr de los alimentos suficientes que le
permiten desarrollarse y multiplicarse a la vez que realizan el conjunto de sus actividades
fisiolgicas habituales.
Estos nutrientes pueden ser simples o complejos y reciben el nombre de medios de
cultivo.

Clasificacin de los medios de cultivos.

Segn su estado fsico.

Lquidos (caldos)
Slidos. (se le agrega agar o gelatina en proporciones adecuadas para obtener un
material gelificado).
Semislidos. (se le agrega agar o gelatina en proporciones adecuadas para obtener un
material gelificado en menor proporcin.)

Segn su composicin.

naturales
Simples artificiales.
Sintticos.
Vivos.

Simples: Se utilizan tal y como se encuentran en la naturaleza, (leche, jugos, vegetales,


papas), cuando sufren modificaciones por ejemplo: obtencin de caldo, pierde su
condicin de simple natural para convertirse en simple artificial.

Sintticos: En stos se encuentran todas las sustancias nutritivas que requieren los grupos
bacterianos. Casi siempre se suministran deshidratados, basta slo aadirle agua (cantidad
requerida). Ej: Caldo corazn, medio de Kligler, medio de Mac Conkey, SS agar, etc. En
estos medios es importante que SIEMPRE se le ajuste el Ph.

Vivos: Aqu tenemos: Cultivo de tejidos, embriones de pollo, etc.

Segn su finalidad y objetivos.

Enriquecimiento: Favorece el desarrollo de una especie determinada que por


encontrarse en pequeas cantidades simultneamente con otras bacterias se hayan en
desventaja. Ej: Selenito de Sodio, Caldo Tetrationato, Agua de Peptona Alcalina.

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Selectivos: Resultan especficos para un solo tipo de germen no pudiendo desarrollarse
en ellos, ninguna de las dems especies. Ej: SS agar.

Diferenciales: Cada una de las especies que en l se puedan desarrollar, habrn de


producir determinadas reacciones bioqumicas evidentes las cuales se ponen de
manifiesto posteriormente. Ej: Kligler, Mac Conkey, TCBS, etc.

Universales: En l se desarrollan la mayora de los microorganismos. Ej: Agar Sangre.

Aislamiento de bacterias en cultivo puro.

Para lograr identificar una especie bacteriana es necesario, ante todo, aislarla en un cultivo
puro que slo contenga a la progenie de una clula de dicha especie. Para ello es necesario
sembrar una porcin de la muestra sobre la superficie de un medio slido para separar a
las bacterias de modo tal, que en el sitio en que queda confinada cada una de ellas, se
desarrolla una colonia.

Colonias bacterianas.

La colonia bacteriana contiene tericamente, un cultivo puro, y tanto sus caractersticas


morfolgicas, como las transformaciones que produce sobre el medio de cultivo empleado,
tienen valor diagnstico. A partir de una colonia aislada, podemos inocular otros medios y
realizar diferentes pruebas que nos conduzcan a la identificacin de la especie.

Clasificacin de las bacterias. Gentica bacteriana.


En clnica, el propsito inmediato de la clasificacin bacteriana es la identificacin de
patgenos. Esta informacin permite seleccionar el tratamiento farmacolgico dirigido de
manera especfica a su erradicacin. Bajo estas circunstancias, las normas para la
excelencia de las tcnicas de clasificacin bacteriana son resultados rpidos e
identificacin inequvoca de patgenos potenciales.
La mayor parte de las bacterias no son patgenas y la comprensin de la biologa de los
grupos principales, incrementa el conocimiento de condiciones que pueden favorecer la
eliminacin de subconjuntos relativamente pequeos de microorganismos que causan
enfermedad. Conforme aumenta el conocimiento de las bacterias, las propiedades que
comparten y en las que difieren han dado origen a sistemas de clasificacin que en general
permiten clasificar una bacteria recin identificada dentro de un grupo de
microorganismos bien caracterizados. La creacin y aplicacin de estos sistemas forman la
ciencia de la taxonoma y la sistemtica.
Para establecer ciertos grupos de organismos que comprendan los que son semejantes
entre s y diferentes de otros, es requisito previo fundamental el conocimiento completo de
los caracteres de dichos organismos. Las propiedades principales que se utilizan para
establecer estos grupos e identificar las especies, se han mencionado en las actividades
docentes anteriores. Comprenden: la morfologa o anatoma de la clula; los
caracteres de cultivo, por ejemplo, la manifestacin de ciertas cualidades fisiolgicas,

50
como son los que se refieren a la influencia del oxgeno y la temperatura, actividades
bioqumicas; constitucin antignica de la clula (propiedades serolgicas) y
capacidad patgena.
Por otro lado y desde los tiempos de Pasteur y Koch. Conocen los bacterilogos el hecho
de que una misma especie bacteriana puede presentar desviaciones en su morfologa y
fisiologa normales. Esto podra inducir a perplejidad, porque como sabemos, la identidad
de un microorganismo se determina por comparacin de los caracteres que presenta con
los establecidos previamente para su especie.

Clasificacin de las bacterias. Especie, tipo, cepa.

Las plantas y los animales superiores poseen una riqueza de rasgos morfolgicos y
fisiolgicos que facilitan su clasificacin en grupos de individuos que presentan entre si un
elevado nivel de similitud fenotpica, lo que permite diferenciarlos de otros grupos.
La reproduccin sexual entre dos individuos de una poblacin, confirma la pertenencia a
una especie determinada. La simplicidad de los procariotes, impide que las reglas
taxonmicas utilizadas por los botnicos y zologos, sean aplicables en la clasificacin de
las bacterias.

ESPECIE TIPO CEPA

La determinacin de especies es motivo de grandes polmicas.

Se considera como especie a una poblacin que:

1. Tiene un origen comn.


2. Est adaptada a un hbitat determinado.
3. Posee un metabolismo celular y establece relaciones semejantes con otras especies.
4. Presenta homogeneidad gentica y similitud fenotpica general en sus rasgos
morfolgicos y fisiolgicos.

No obstante si nos atenemos a estas normas son muy pocas las especies bacterianas que se
encuentran bien definidas.
Aun dentro de los individuos de una especie, se producen diferencias entre los grupos en
diferentes tipos o variedades.

- Segn su estructura antignica (serovar)


- Susceptibilidad a los bacterifagos (fagovar)
- Actividad bioqumica (quimiovar)

CEPA: Conjunto de clulas bacterianas que tienen un origen comn, por haber sido
obtenida a partir de un cultivo puro.

Tipo de clasificacin de las bacterias.

Las claves o clasificaciones artificiales.

51
Aquellos en que los rasgos distintivos de cada especie se arreglan en una orden tal que
permiten identificacin rpida basada en exclusiones sucesivas.
Clasificacin de Murray.

til para la prctica mdica ya que incluye a las bacterias patgenas ms frecuentes, se
basa en lo siguiente:

- Caracteres morfolgicos y tintoreales:

- Cocos
- Bacilos
- Espirilos
- Gram (+)
- Gram (-)
- BAAR

- Crecimiento en presencia o no de O2

- Aerobios
- Anaerobios

Clasificacin filogentica.

Una clasificacin filogentica agrupa a tipos que se encuentran emparentados, es decir que
tienen un ancestro comn.
Las especies originadas por evolucin divergente de un ancestro comn se agrupan en un
solo gnero.
Los gneros con un origen comn son agrupados en una sola familia.
El reconocimiento de relaciones filogenticas en los organismos superiores es ayudado
grandemente por la existencia de restos fsiles de ancestros comunes y por la multitud de
caractersticas morfolgicas que puedan estudiarse.
La carencia de fsiles de bacterias, imposibilita emplear esta clasificacin.

Clasificacin por computacin.

La era de las computadoras ha creado el mtodo de introduccin de 100 o ms propiedades


taxonmicas en una mquina para que sta las agrupe acorde a sus similitudes.
De este modo, la cepa que ocupe una posicin promedio en cada grupo, puede ser
considerada como especie tipo.

Clasificacin gentica.

52
Mediante tcnicas empleadas en las investigaciones de biologa molecular e ingeniera
gentica, se emplean como indicadores de identidad, la composicin de bases nitrogenadas
del ADN, siendo la relacin G/C la ms empleada.

Nomenclatura bacteriana.

Siguiendo las tradiciones taxonmicas, las bacterias se designan con nombres en latn en
que el primero escrito con mayscula designa al gnero y el segundo con minscula a la
especie:

Staphylococos aureus
Salmonella typhi
Streptococo pneumoniae
Echerichia coli
Neisseria meningitidis
Neisseria gonorrhoeae

Gentica bacteriana. Variaciones, transferencia de genes. Ingeniera


gentica.

Los microorganismos no son estables en sus caractersticas, ya sea en la asimilacin de


ciertas sustancias, en su comportamiento frente a las drogas, etc.
Aunque todos los miembros de una colonia se producen de una clula ocurren cambios y
stos se deben al mecanismo gentico de las bacterias y es precisamente la gentica
bacteriana lo que vamos a estudiar ahora.
El Cromosoma Bacteriano es una estructura continua de DNA de aproximadamente 1 mm
de longitud. En la actualidad se conocen bien la estructura de DNA gracias a los trabajos
de Watson y Crick. Consiste en una doble hlice formada por 2 tiras de polinucletidos
complementarios en cada uno de los cuales las bases de purina y pirimidina estn
dispuestas a lo largo de un espinazo de grupos alternantes de desoxirribosa y fosfato. Las
dos tiras se mantienen unidas por puentes de Hidrgeno entre las bases vecinas y slo
estos puentes se forman entre la A-T y G-C.

Replicacin de cromosoma:

Las tiras complementarias se separan actuando cada una de ellas como un templete o
plantilla sobre el cual se ensambla una tira complementaria. El orden de sucesin de las
bases en la nueva tira es dictado rgidamente por las posibilidades de formacin de los
puentes de Hidrgeno donde quiera que el templete lleve adenina la nueva cadena tendr
timina y as sucesivamente. En consecuencia la replicacin, lleva a la formacin de dos
nuevas hlices y cada una identifica a la original.
El cromosoma bacteriano se replica siguiendo un orden a lo largo de su estructura
empleando en una secuencia especfica a las que se llama punto de origen o replicacin,
este punto es el que se adhiere al mesosoma de la membrana celular.

53
El cromosoma se subdivide para su funcin en segmentos cada uno de los cuales
determina el orden de sucesin de los A.A. y por tanto la estructura de una protena. Estas
protenas como enzimas, componentes de membrana y otras estructuras celulares
determinan las propiedades del organismo.

GEN: No es ms que un segmento de DNA cromosmico que determina la estructura de


una protena discreta.
La Gentica es la ciencia de la herencia, existen dos fenmenos biolgicos bsicos que
intervienen en el mecanismo de la herencia.

1. La muy frecuente estabilidad del tipo, es decir, la similitud entre descendientes y


progenitores.
2. La rara aparicin de variaciones hereditarias.

La base fsica de ambos fenmenos se encuentra en el GEN (factor gentico que controla
las propiedades de los organismos.
La sustancia qumica de los cromosomas, responsable tanto de la autoreproduccin como
de la funcin de los genes es el ADN.

GENOTIPO: Conjunto de genes que posee una clula.

FENOTIPO: Conjunto de las propiedades observables.

Variaciones biolgicas.

Los cambios o variaciones que ocurren en las propiedades de las clulas pueden ser de dos
tipos:

a) Variaciones Fenotpicas. (Modificaciones):

Son cambios temporales provocados por factores ambientales que no comparten


alteraciones de los genes. Estas variaciones transitorias cesan cuando desaparece el
estmulo ambiental que las provoca. Pueden variar de esta forma los caracteres
morfolgicos, de cultivo, y las propiedades fisiolgicas o bioqumicas.

b) Variaciones Genotpicas. (Mutaciones):

Las mutaciones son cambios en la secuencia de nucletidos de un gen, que provocan


alteraciones permanentes en los caracteres hereditarios.

La secuencia de nucletidos puede alterarse por:

1. Sustitucin de un par de bases por otro.


2. Ruptura de las uniones fosfato-azcar por supresin, inversin o insercin de
segmento.

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Normalmente las mutaciones son raras, y por lo comn slo una entre millones de clulas
llega a ser una mutante.
Las mutaciones pueden ocurrir espontneamente o ser inducidas por determinados agentes
mutgenos como:

- Radiaciones
- Sustancias qumicas, etc.

Mecanismos de transmisin del material gentico:

En las bacterias no hay fusin real de clulas sexuales para formar un cigote como ocurre
en los organismos eucariticos. En lugar de ellos, parte del material gentico de una clula
donadora es transferido a una clula receptora. El ADN proveniente del exterior y el
material gentico de las clulas receptora se aparean y recombinan por ruptura y reunin
inmediatamente despus de la transferencia. Durante las divisiones celulares posteriores,
el cromosoma recombinante es segregado en el interior de una sola clula.

Existen 3 mecanismos de transferencia intercelular:

1.- TRANSFORMACIN:

Una clula receptora competente capta ADN soluble del medio, liberada por la clula
donadora.

2.- TRANSDUCCIN:

La clula receptora incorpora el ADN transportado por un bacterifago (virus de las


bacterias) que se ha multiplicado en la clula donadora.

3.- CONJUGACIN:
La clula receptora capta ADN por contacto celular directo con la clula donadora.

Las bacterias son huspedes de pequeos elementos genticos extracromosmicos


llamados Plasmidios o Plsmidos.
Los Plsmidos no son esenciales para la clula bajo condiciones ordinarias de crecimiento.
Su presencia se identifica cuando los genes que llevan le confieren nuevas propiedades al
husped y entonces por lo general son designadas por estas propiedades.

Los Plsmidos ms frecuentes son:

1.- LOS FACTORES SEXUALES : Son los mediadores de la transferencia


cromosmica. Estos factores provocan la formacin de un pili sexual por el cual se une a
la clula receptora.

2.- LOS FACTORES COL: Transportan genes que provocan que sus huspedes
produzcan lisinas (protenas que son toxinas letales para las bacterias coliformes).

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3.- LOS FACTORES DE RESISTENCIA: (FACTOR R) Estos transportan genes que le
confieren a la clula husped resistencia a diferentes agentes antimicrobianos, como los
antibiticos. Un slo plsmido puede transportar genes separados para la resistencia a:

- Estreptomicina
- Cloranfenicol
- Tetraciclinas
- Sulfanamidas

4. LOS PLSMIDOS PENICILINASA DE LOS ESTAFILOCOCOS: Estos


plsmidos transportan un gen que origina que la clula bacteriana produzca una
penicilinasa potente, hacindola resistente por lo tanto a la penicilina. Difieren de los
factores R en que no son capaces de transmitirse por conjugacin. Sin embargo,
pueden ser transportados de clula a clula por transduccin.

Mecanismos genticos de la resistencia a las drogas antimicrobianas.

Las bacterias pueden hacerse resistentes a las drogas antimicrobianas por cualquiera de los
siguientes tres mecanismos genticos:

A.- Por mutacin: En todas las poblaciones bacterianas aparecen espontneamente


mutantes resistentes a las drogas. Posteriormente la presencia de la droga sirve como
medio selector de las mismas.

B.- Por recombinacin: Una vez que aparece una mutacin resistente a las drogas, sta
puede ser transferida a otras clulas por:
- Transformacin
- Transduccin
- Conjugacin

C.- Por adquisicin de Plsmidos: Los plsmidos pueden contener genes que le
confieren a la clula resistencia a diferentes agentes antimicrobianos.
En las bacterias Gram(-) la transferencia de factores R de una clula a otra se realiza por
conjugacin.
En las bacterias Gram (+) los plsmidos son trasportados de clulas a clulas por
transduccin.

Ingeniera gentica.

La ingeniera es la aplicacin de la ciencia a las necesidades de la sociedad. En aos


recientes, la ingeniera basada en la gentica bacteriana ha transformado a la biologa. El
avance tecnolgico esencial se deriva de la propiedad de las enzimas restrictivas de
escisin del DNA en sitios determinados por una secuencia especfica de oligonucletidos
para crear fragmentos de restriccin. Tcnicas relativamente simples permiten la
separacin de estos fragmentos de acuerdo con su tamao. La especificidad de nucletidos

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requerida para la particin con enzimas restrictivas, permite que los fragmentos que
contienen genes o partes de genes se unan por covalencia a plsmidos (vectores) que
ms adelante pueden ser insertados en huspedes bacterianos. Las colonias bacterianas o
clonas que contienen genes especficos, pueden ser identificados por hibridacin de DNA
o RNA, con probadores qumicos o radioqumicos. De otro modo productos protenicos
codificados por esos genes, pueden ser reconocidos por su actividad enzimtica o por
tcnicas inmunolgicas.
Estos ltimos procedimientos han mejorado en forma importante por la notable
selectividad que se logra con los anticuerpos monoclonales (anticuerpos que se forman de
una sola clona de clulas, por ejemplo, en un tumor de clulas plasmticas como el
mieloma), que se unen a determinantes antignicos especficos en los productos
protenicos. As las tcnicas de ingeniera gentica pueden usarse para aislar casi cualquier
gen con propiedades bioqumicas identificables.
Los genes aislados pueden usarse para diversos propsitos. La mutagnesis dirigida a un
sitio puede identificar y alterar la secuencia de DNA de un gen. De este modo es posible
determinar residuos de nucletidos esenciales para la funcin gentica y, si se desea,
modificarlos. Con tcnicas de hibridacin, el DNA puede utilizarse como probador que
reconoce cidos nucleicos correspondientes a la secuencia de su propio DNA. Por
ejemplo, un virus latente en tejido animal puede detectarse con un DNA probador aunque
no se observe actividad viral. Los productos protenicos de genes virales aislados, ofrecen
grandes oportunidades como vacunas debido a que pueden prepararse sin genes que
codifiquen la replicacin del cido nucleico viral. Adems, protenas como la insulina que
tienen funciones tiles, pueden obtenerse en cantidades abundantes en bacterias que
expresan los genes clonados. Por lo tanto la ingeniera gentica prev la obtencin de
protenas de gran utilidad a bajo costo, permitiendo la produccin de hormonas, interfern,
antibiticos, nutrientes, protenas, etc.
Tambin se pronostica la posibilidad de alterar el genotipo de un organismo, o con lo que
pudiera obtenerse especies de gran valor econmico.
Desgraciadamente mientras unos se empean en utilizar la ingeniera gentica para el bien
de la humanidad otros como los imperialistas, se ocupan de utilizar esta ciencia como un
arma biolgica.

Esterilizacin y desinfeccin.
El bienestar y la prosperidad del hombre dependen en gran medida de su dominio sobre las
poblaciones microbianas. Muchas prcticas de la vida cotidiana como la depuracin del
agua, la pasteurizacin de la leche o la refrigeracin de los alimentos, tienen por objeto
este importante aspecto del control de las poblaciones microbianas. Las razones
principales para la aplicacin de estos procedimientos de lucha contra los
microorganismos son:

1) Prevenir las transmisin de enfermedades e infecciones.


2) Evitar la descomposicin y el deterioro de algunos productos.
3) Evitar la contaminacin.

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La inhibicin o destruccin de los microorganismos puede conseguirse con el empleo de
agentes fsicos o de productos qumicos. Los procedimientos empleados tienen por
fundamento someter los organismos a la accin de un producto qumico que les sea nocivo
o a una condicin fsica desfavorable. Algunas de estas condiciones se limitan a inhibir el
crecimiento y la actividad metablica, mientras que otras destruyen efectivamente las
clulas. Existe una multitud de agentes que sirven para controlar las poblaciones
microbianas, pero la naturaleza de su efecto es variable, y cada uno de ellos tiene limitada
su aplicacin en la prctica.

La esterilizacin. Usos y mtodos de control.

El trmino esterilizacin implica el uso de agentes qumicos o fsicos para eliminar todos
los microorganismos viables de un material.
Para realizar la esterilizacin sobre algn objeto debemos seleccionar el mtodo ms
adecuado.
Antes de pasar a describir los mtodos de esterilizacin debemos definir algunos trminos
que usualmente se emplean en relacin con los agentes antibacterianos y que son de gran
importancia para su futuro vocabulario mdico.

BACTERICIDAS:
Agente que mata las bacterias. La accin bactericida difiere de la bacteriostasis
nicamente en que es irreversible; es decir, el microorganismo muerto no puede
reproducirse ms, an cuando sea retirado del contacto con el agente. En algunos casos el
agente causa lisis (disolucin) de las clulas; en otros casos las clulas permanecen
intactas e inclusive pueden continuar metablicamente activas.

BACTERIOSTATICOS:
Agente que inhibe la multiplicacin bacteriana. (accin reversible, o sea, se reanuda en
cuanto se retira el agente).

ESTERIL:
Libre de vida de cualquier clase. La esterilizacin puede efectuarse por filtracin (en el
caso de lquidos o aire) o por tratamiento con agentes microbicidas. Dado que el criterio
de muerte para los microorganismos es su incapacidad para reproducirse, el material
estril puede contener clulas microbianas metablicamente intactas.

SPTICO:
Caracterizado por la presencia de microorganismos perjudiciales en el tejido vivo.

ASPTICO:
Caracterizado por la ausencia de microorganismos perjudiciales (La asepsia se consigue
adoptando precauciones de esterilizacin, instrumentos esterilizados, etc.).

ANTISPTICO:
Que tienen la propiedad de matar microorganismos perjudiciales en tejidos vivos.

58
DESINFECTANTE:
Tienen la propiedad de matar organismos infecciosos especialmente en superficies
inanimadas. Es demasiado txica para aplicarla directamente a los tejidos.

Modos posibles de accin de los agentes antibacterianos.

Los agentes antibacterianos actan de diferentes formas sobre los agentes biolgicos, as
tenemos:

a) Coagulacin de las protenas. (alterando sus propiedades).

b) Rompimiento de la membrana o P.C. Las sustancias que se concentran en la


superficie celular pueden alterar las propiedades de la membrana impidiendo su
funcin normal. Los agentes que destruyen o impiden la sntesis de la pared traen
consigo la lisis osmtica de la clula.

c) Remocin de grupos sulfhidrilos libres:


Muchas enzimas y coenzimas importantes no pueden funcionar a menos que sus
grupos sulfhidrilo terminales permanezcan libres y reducidos.
Los agentes oxidantes interfieren con el metabolismo celular, ligando grupos
sulfhidrilos vecinos para dar uniones disulfuro. Los metales pesados tambin causan
dao considerable al combinarse con los grupos sulfhidrilos.

d) Antagonismo qumico:
Es la interferencia de un agente qumico en la reaccin normal entre una enzima
especfica y su substrato. El antagonismo acta por combinacin con alguna parte de la
holoenzima ( ya sea con el activador mineral, con la apoenzima proteica, o con la
coenzima).

Reversin de la accin antibacteriana.

- Por remocin del agente. (eliminndolo)


- Por inactivacin del agente.
- Protegiendo la clula contra la lisis osmtica.
- Por reversibilidad por substrato.

Remocin del agente: Cuando las clulas que se encuentran inhibidas por la
presencia de un agente bacteriosttico son separadas, lavadas completamente en la
centrfuga y resuspendidas en un medio de cultivo fresco, reanudan su
multiplicacin normal.
Inactivacin del agente: Los agentes a menudo son inactivados por la adicin al
medio de una sustancia que se combine con ellos impidiendo su combinacin con

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constituyentes celulares. Por ejemplo el in mercrico puede ser inactivado por la
adicin al medio de compuestos sulfhidrlicos como el cido tiogliclico.
Proteccin contra la lisis osmtica: La lisis osmtica se puede impedir haciendo
el medio isotnico para los protoplastos bacterianos desnudos, para lo cual se
requieren concentraciones de 10 a 20 % de sacarosa; en tales condiciones los
protoplastos inducidos por la penicilina permanecen viables y continan creciendo
como formas L.
Reversibilidad por substrato: Cuando un antagonista qumico del tipo anlogo
forma un complejo disociante con la enzima, es posible desplazarlo mediante una
concentracin elevada de substrato normal; tales casos son llamados de inhibicin
competitiva. La relacin entre la concentracin del inhibidor y la concentracin
del substrato que revierte la inhibicin recibe el nombre de ndice antibacteriano, el
cual generalmente es muy alto (100 a 10,000), indicando una afinidad mucho
mayor de la enzima por su substrato normal.

Agentes fsicos.

a) Calor. La aplicacin del calor es el mtodo ms simple para esterilizar materiales, a


condicin de que el material por s mismo no sufra dao por el calor. Una temperatura
de 100oC matar a todas las formas bacterianas en dos a tres minutos, excepto a las
esporas; para matar a estas se requiere una temperatura de 121oC durante 15 minutos.

Calor hmedo.

- Ebullicin en agua: La prctica de la ebullicin para la desinfeccin es muy


sencilla. Slo es necesario recordar que las esporas pueden permanecer vivas an
despus de varias horas de ebullicin. (Primera desventaja). Otra desventaja es que
los objetos mojados son muy propensos a recontaminarse al ser extrados del
recipiente de ebullicin.

- Vapor libre: (nunca sobrepasa los 100C). El vapor libre se emplea algunas veces
para realizar la esterilizacin fraccionada o tindalizacin. Este mtodo consiste en
una exposicin al vapor libre durante 30' en tres das sucesivos.

1er. Da: Se eliminan todas las clulas vegetativas que haya, pero no tiene efecto sobre
las esporas. Durante todo el da se les permite germinar.

2do. Da: Se eliminan las clulas vegetativas formadas.

3er. Da: Medida de precaucin.

- Vapor a presin: (autoclave).

Un autoclave consiste en una cmara cilndrica en la que se introduce vapor a presin


superior a la atmosfrica.

60
El vapor a presin es ms caliente que el agua en ebullicin o vapor libre, cuando ms alta
es la presin del vapor, mayor es la temperatura resultante. Alcanza una temperatura de
121C = 15 de presin = 1 kg/cm2 por este mtodo se matan las esporas.
Calor seco.

(Se utiliza para esterilizar materiales que deben permanecer secos). Se utilizan
temperaturas excesivas aplicadas por largos perodos de tiempo. El calor acta
desnaturalizando las protenas, los cidos nucleicos de la clula y fragmentando las
membranas celulares.

- Flameado:

Consiste en someter directamente a la llama de un mechero, el material que se vaya a


esterilizar como asas de platino las cuales se llevan a la llama hasta que adquieran un color
rojo intenso.
Este mtodo se utiliza para esterilizar esptulas, varillas, pipetas, bocas de los tubos, etc.

- Horno:

El horno cosiste en una cmara cerrada en la que circula aire caliente impulsado por un
ventilador a fin de lograr una esterilizacin segura mediante la carbonizacin de los
constituyentes celulares. (160oC a 170oC durante una hora o ms)

Objetos que pueden ser esterilizados en Horno:

- Jeringuillas
- Placas cultivo
- Pipetas
- Instrumentos metlicos (espculos)
- Diversos polvos y aceites que no pueden esterilizarse por calor hmedo debido a su
impermeabilidad a la humedad ej: Aceite mineral.

b) Radiaciones.

- Radiaciones Ultravioletas: Su accin esterilizante se debe a la produccin de


perxidos en el medio que a su vez actan como agentes oxidantes.

Estos rayos ultravioletas producen tambin alteraciones qumicas en el ADN celular.


Los rayos ultravioleta se emplean para las infecciones por agentes patgenos en la
atmsfera, por ejemplo:

- Quirfanos
- Salas hospitalarias
- Cubculos de preparacin de medios de cultivo, etc.

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- Radiaciones Ionizantes: (rayos X, gamma, catdicos, beta) (Destruyen ADN) Se
emplean en:

- Suturas quirrgicas
- Guantes
- Catteres
- Envases plsticos
a) Filtracin.

Un medio muy til de esterilizacin de lquidos que no pueden ser esterilizados por otros
medios como:

- Solucin de azucares
- Sueros, etc.

Agentes qumicos.

Los desinfectantes son letales para todo tipo de clula. Debido a su inespecificidad, no es
sorprendente que las bacterias desarrollen muy poca resistencia a estos agentes. No
obstante muchos de ellos son demasiado txicos para los tejidos y slo se emplean en
superficies y objetos inanimados.
Entre estos agentes qumicos tenemos:

- Alcoholes
- Fenol y sus derivados
- Iones de metales pesados
- Agentes oxidantes
- Detergentes
- Derivados del furano
- Colorantes
- Gases

a) Alcoholes:

Los alcoholes son corrientemente utilizados en la desinfeccin. Estos agentes tienen


propiedades tenso activas (disolventes de los lpidos) y coagulan las protenas.
Sin embargo tambin producen deshidratacin (propiedad que interfiere con sus otras
propiedades antimicrobianas).
Debido a su poder deshidratante se prefiere utilizar el alcohol etlico en solucin acuosa al
70%. Los concentrados ms fuertes 95% 100% absoluto son menos efectivos.
Como agente coagulante tiende a combinarse de forma inespecfica con materia orgnica
extraa y puede producir un grueso revestimiento de cogulos alrededor de los
microorganismos.
Como disolventes de los lpidos es til para la limpieza de la piel antes de las inyecciones
hipodrmicas.

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b) Fenoles:

El fenol y muchos compuestos fenlicos son agentes antibacterianos fuertes. A altas


concentraciones desnaturalizan las protenas, a bajas concentraciones actan como agentes
tenso activos.
c) Iones de metales pesados: Las sales de mercurio plata y cobre desnaturalizan las
protenas a altas concentraciones pero son demasiados perjudiciales para los tejidos
vivos como para ser usados de esta forma. Comnmente se emplean a bajas
concentraciones y de esta forma actan combinndose con los grupos sulfhidrilos. El
mercurio se puede usar con seguridad externamente, combinndolo con compuestos
orgnicos (por ejemplo mercurocromo, mertiolate). Excepto cuando se utilizan sobre
superficies limpias de la piel, estos mercuriales orgnicos son de valor prctico
dudoso, ya que se inactivan rpidamente por accin de la materia orgnica extraa.

d) Agentes oxidantes: Los agentes oxidantes fuertes inactivan a las clulas oxidando
grupos sulfhidrilos libres. Entre estos tenemos:

- Perxido de H2
- Permanganato de K
- Iodo
- Cloro
- Hipoclorito.
- Compuestos que liberan cloro lentamente (cloruro de cal)

e) Detergentes: Los compuestos que tienen la propiedad de concentrarse en la interfase


son llamados agentes tensoactivos o detergentes. La interfase entre la membrana de
una clula bacteriana que contiene lpidos y el medio acuoso que la rodea, atraen
especialmente a una clase particular de compuestos tensoactivos, de manera especfica
a los que tienen un grupo liposoluble y uno hidrosoluble. Los hidrocarburos de cadena
larga son muy liposolubles, mientras que los iones cargados son muy solubles en agua;
un compuesto que posea ambas estructuras puede en esta forma concentrarse en la
superficie de la clula bacteriana. Se conocen dos tipos generales de agentes
tensoactivos o detergentes: aninicos y catinicos.

- Detergentes aninicos: Son los detergentes en los cuales el hidrocarburo de cadena


larga tiene carga negativa, estos incluyen a los jabones y productos sintticos similares
a los jabones. Los detergentes sintticos tienen ventaja de solubilidad y costo sobre los
jabones naturales (obtenidos por saponificacin de grasas animales). Las sales biliares
son notables por el hecho de disolver completamente las clulas neumoccicas,
proporcionando as un medio til para su identificacin.
- Detergentes catinicos: Puede hacerse que el residuo soluble en grasa tenga una carga
positiva combinndolo con un tomo de nitrgeno cuaternario.

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f) Agentes alquilantes: Numerosos agentes reaccionan como compuestos en la clula
para sustituir tomos lbiles de hidrgeno con radicales alquilo. Los dos agentes de
este tipo que se usan comnmente con fines de desinfeccin son:

- Formaldehdo (esporicida) (vendido como solucin acuosa al 37%)


- Oxido de etileno (este gas se inactiva volvindolo no explosivo, mezclndolo con CO 2
al 90 % o con un fluorocarburo; el xido de etileno constituye el de4sinfectante ms
confiable disponible para superficies secas. Se usa extensamente en la desinfeccin de
instrumentos quirrgicos y materiales que deben colocarse en cmaras especiales de
vaco con dicho fin)

g) Colorantes: Actividad especfica al manifestarse contra unos agentes y otros no. La


incorporacin de un colorante a un medio de cultivo lo vuelve selectivo. En pacientes
su uso es local pues es rpidamente neutralizado por los sueros y otras protenas.

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Los cocos pigenos. Estafilococos, Estreptococos, Enterococos.
Las enfermedades infecciosas del hombre, pueden agruparse siguiendo diversos criterios,
uno de ellos sera conforme a la forma en que se transmiten o contagian con ms
frecuencia y de la puerta de entrada ms comn de los agentes patgenos en el organismo.
No obstante algunos microorganismos tienen la propiedad de afectar ms de una parte del
organismo y pueden ingresar en ste por diversas vas, siendo ste el caso de los cocos
pigenos, microorganismos que comenzaremos a estudiar en el da de hoy.

Los estafilococos.

Son clulas esfricas Gram.(+), generalmente agrupadas en racimos irregulares, crecen


con facilidad en diversos medios de cultivos y son metablicamente muy activos,
fermentan muchos carbohidratos y producen pigmentos que van desde el blanco al
amarillo intenso. Algunos son miembros de la flora normal de la piel y mucosas del
humano, en tanto que otros provocan supuraciones, formacin de abscesos, diversas
infecciones pigenas y an septicemias mortales
Los Estafilococos patgenos generalmente son hemolticos y coagulan el plasma y
producen diversas enzimas y toxinas extracelulares. Producen tambin algunas cepas
intoxicacin alimentaria causada por una enterotoxina termoestable.
Estos microorganismos desarrollan rpidamente cepas resistentes hacia muchos de los
agentes antimicrobianos y plantean por esta causa problemas de tratamiento de difcil
solucin.
El gnero Staphylococcus tiene por lo menos 20 especies. Staphylococcus aureus es un
microorganismo positivo a la coagulasa y patgeno de gran importancia para el ser
humano y es causante de muchas infecciones graves. Los estafilococos negativos a la
coagulasa constituyen parte de la flora humana normal. Staphylococcus epidermidis
produce a veces infecciones de los dispositivos protsicos y de vas urinarias en mujeres
jvenes.

Morfologa e identificacin:

Cocos Gram. (+) agrupados en racimos.


Los estafilococos son clulas esfricas de cerca de 1 m de dimetro distribuidas en
grupos irregulares. En los cultivos lquidos se encuentran tambin cocos aislados, en
pares, en ttradas y en cadenas. Los cocos jvenes se tien intensamente con la coloracin
de Gram, al envejecer muchas clulas se vuelven Gram (-). Los estafilococos son
microorganismos NO mviles, y NO forman esporas. Bajo la influencia de ciertas

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sustancias qumicas (por ejemplo, penicilina), experimentan lisis o cambian a formas L,
pero NO las afectan las sales biliares NI la optoquina.

Cultivo y caractersticas del crecimiento:

Se desarrollan en medios de cultivo simples, bajo condiciones aerobias o microaeroflicas,


aunque algunos son anaerobios obligados (peptococcus). Crecen con mayor rapidez a
37oC, formando colonias de tamao mediano y producen pigmentos que van desde el
blanco (S. albus), hasta el amarillo dorado (S. aureus. (forman mejor el pigmento a
temperatura ambiental) (20- 25 oC)
En agar sangre pueden causar hemlisis completa de los hemates alrededor de sus
colonias. Son capaces de crecer en presencia de 9% de cloruro de sodio. Producen catalasa
lo que los distingue de los estreptococos. Fermentan con lentitud muchos carbohidratos
produciendo cido lctico pero no gas. Son relativamente resistentes a la desecacin, el
calor (soportan 50 oC durante 30 minutos), son inhibidos por ciertas sustancias como el
hexaclorofeno en solucin al 3 %.
Muchas cepas aisladas en los hospitales, son resistentes a la penicilina (producen
lactamasa) y pueden ser causa de graves epidemias en ese medio. Para distinguir unas
cepas de estafilococos de otras y poder determinar la forma en que transmiten del personal
y los pacientes hospitalizados infectados a los pacientes recientemente admitidos, se
emplea la tipificacin por bacterifagos.

Toxinas y enzimas.

Los estafilococos pueden producir enfermedad tanto por su capacidad para multiplicarse y
extenderse con amplitud por los tejidos, como por la produccin de sustancias
extracelulares. Algunas de estas sustancias son enzimas; otras se consideran toxinas
aunque pueden funcionar como las anteriores. Muchas toxinas se encuentran bajo control
gentico de los plsmidos; Algunas estn incluso bajo control tanto cromosmico como
extracromosmico. En otros casos no se ha podido definir aun bien el mecanismo del
control gentico

1. Catalasa: Convierte el perxido de hidrgeno en agua y oxgeno.


2. Coagulasa: Coagula el plasma oxalatado o citratado en presencia de un factor
contenido en el suero humano. Se considera que la produccin de coagulasa es
sinnimo del potencial invasor patgeno.
3. Exotoxina: Material filtrable, termolbil, letal para los animales por inoculacin
parenteral, que provoca necrosis de la piel y contiene diversas hemolisinas solubles
que pueden ser separadas por electroforesis, as tenemos:

- Hemolisina alfa: (es una protena heterloga que puede producir lisis de los
eritrocitos y lesionar las plaquetas y es probablemente idntica a los factores
mortales y dermonecrticos de la exotoxina. Puede tener tambin una accin muy
poderosa sobre el msculo liso vascular)
- Hemolisina beta. (degrada a la esfingomielina y es txica para muchas clases de
clulas, incluso los eritrocitos humanos).
- Hemolisina gamma

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- Hemolisina delta.

4. Leucocidina: Mata a los leucocitos de diversas especies animales. No est clara su


funcin en la patogenia, porque los estafilococos patgenos no matan quizs a los
leucocitos y pueden ser fagocitados con tanta eficacia como las variedades no
patgenas. Sin embargo, son capaces de lograr una multiplicacin intracelular muy
activa, en tanto que los microorganismos no patgenos tienden a morir dentro de las
clulas. Los anticuerpos contra la leucocidina pueden desempear una funcin en la
resistencia a las infecciones recurrentes por estafilococos.
5. Enterotoxinas: Hay por lo menos 6 toxinas solubles designadas de la A a la F
producidas por casi 50 % de las cepas de S. aureus. Estas enterotoxinas son
termoestables (resisten la ebullicin durante 30 minutos) y resistentes a la accin de las
enzimas intestinales. Causas importantes del envenenamiento con alimentos, las
produce S. aureus cuando crece en alimentos constituidos por carbohidratos y
protenas. Quizs el gen de la produccin de enterotoxina se encuentre sobre el
cromosoma, pero puede haber un plsmido que lleve la protena y que regule la
produccin activa de esta toxina. La ingestin de 25 g de enterotoxina B por el
hombre da por resultado vmitos y diarreas. Probablemente el efecto emtico de la
enterotoxina sea el resultado de la estimulacin del sistema nervioso central (centro del
vmito) una vez que la toxina ha actuado sobre los receptores neurales del intestino.
Las enterotoxinas se pueden investigar por pruebas de precipitina (difusin en gel)
6. Hialuronidasa: Enzima que desdobla el cido hialurnico, (constituyente
importante de la sustancia intracelular del tejido conjuntivo).
7. Estafiloquinasa: Transforma el plasmingeno en plasmina (enzima proteoltica que
digiere a la fibrina y otras protenas).
8. Proteinasas.
9. Lipasas.
10. lactamasas.
11. Toxina exfoliativa est constituda por lo menos por dos protenas que producen la
descamacin generalizada , que bajo el control de un plsmido causa el sndrome de
la piel escaldada (formacin de vesculas). Hay anticuerpos especficos que protegen
al sujeto contra la accin exfoliativa de la toxina.
12. Otras toxinas postuladas responsables del sndrome del shock por intoxicacin se ve
en mujeres que utilizan tampones durante la menstruacin. La mayor parte de las
cepas de S. aureus aisladas de pacientes con sndrome de shock txico, producen una
toxina llamada toxina 1 del sndrome de shock txico (TSST-1), (toxic shock
syndrome toxin 1), que es la misma que la enterotoxina F y la exotoxina C pirgena.
En el hombre esta toxina produce fiebre, shock, y afeccin de muchos sistemas,
incluso erupcin cutnea descamativa; no se cuenta con pruebas directas de que la
toxina sea la nica causa del sndrome de shock txico. En los conejos la TSST-1
produce fiebre, aumento de la sensibilidad a los efectos de los lipopolisacridos
bacterianos y otros efectos biolgicos semejantes a los del sndrome de shock txico,
pero no ocurren en este animal, ni la erupcin cutnea ni la descamacin.

Patogenia.

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Los estafilococos especialmente epidermidis, forman parte de la flora normal de la piel
humana y de los sistemas respiratorio y digestivo. De 40 a 50 % de los seres humanos son
portadores nasales de S. aureus tambin se les encuentra con regularidad en el aire y en
las ropas personales, las ropas de cama y otros fmites de los ambientes humanos.
La patogenicidad de una cepa dada de estafilococo es la resultante de los factores y toxinas
extracelulares antes mencionadas, aunadas a las propiedades invasivas de la cepa.
En un extremo tenemos la intoxicacin alimentaria, atribuible a la ingestin de la
enterotoxina preformada, en el otro extremo, la bacteriemia y abscesos estafiloccicos
diseminados en todos los rganos. Es manifiesta la contribucin potencial de las diversas
sustancias extracelulares a la patogenia a causa de la naturaleza de sus acciones
individuales.
Las cepas invasoras y patgenas de S. aureus tienden a producir coagulasa, pigmento
amarillo, y a ser hemolticas. Los estafilococos no invasores y no patgenos, como S.
epidermidis, tienden a ser negativos a la coagulasa y no hemolticos. Es raro que estos
microorganismos produzcan supuracin, pero pueden infectar a las prtesis ortopdicas o
cardiovasculares. S. saprophyticus es, de manera tpica, un microorganismo no
pigmentado, resistente a la novobiocina y no hemoltico; produce infecciones de las vas
urinarias en mujeres jvenes.

Diagnstico de laboratorio.

Muestras:

- Exudados superficiales recogidos con hisopos.


- Pus.
- Sangre para hemocultivo.
- Aspirado traqueal.
- LCR.
(en fin las muestras dependen de la localizacin del proceso).

1. Observacin microscpica: (no es posible distinguir entre los microorganismos


saprofitos y los patgenos)
2. Cultivo en agar sangre: Se aprecian colonias tpicas en 18- 24 horas de incubacin a
37C donde puede observarse la hemlisis y la pigmentacin, aunque stas en
ocasiones pueden aparecer tardamente incubando a temperatura de laboratorio. Las
muestras que contaminadas con flora mixta se pueden cultivar en medios que
contengan 7,5 % de NaCl; la sal inhibe a la mayor parte de los otros microorganismos
normales, pero no a S. aureus.
3. Prueba de la coagulasa: Se mezcla plasma de conejo (o humano) citratado y diluido
1:5 con un volumen igual de caldo de cultivo y se incuba a 37C. Se incluye como
testigo un tubo con plasma mezclado con caldo estril. Si se forman cogulos en plazo
de 1 a 4 horas, la prueba ser positiva. Todos los estafilococos positivos a la coagulasa
se consideran patgenos para el hombre. Las infecciones de los dispositivos protsicos
pueden ser causados por S. epidermidis negativa a la coagulasa.
4. Prueba de la catalasa: Se coloca una gota de solucin de perxido de hidrgeno en
una lamina y se aade a la misma una pequea cantidad de material bacteriano

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desarrollado. La formacin de burbujas (liberacin de oxgeno), indica prueba positiva.
Esta puede realizarse tambin vertiendo solucin de perxido de hidrgeno sobre el
crecimiento en placa.
5. Prueba de la termonucleasa: (DNAasa)
6. Cultivo en telurito: (puede sustituir la coagulasa).
7. Pruebas serolgicas y de tipificacin: Se pueden identificar anticuerpos contra el
cido teicoico de las infecciones profundas prolongadas (por ejemplo, endocarditis
estafiloccica), y a veces las distinguen del cuadro de bacteriemia estafiloccica pero
tienen poco valor prctico. Son tiles los patrones de sensibilidad a los antibiticos
para investigar las infecciones por S. aureus y para determinar si los S. epidermidis de
los hemocultivos representan bacteriemia causada por la misma cepa, sembrada desde
un mismo nido de infeccin. La tipificacin por bacterifagos es til en epidemiologa
en los brotes graves de infecciones por S. aureus como podra suceder en un hospital.

Los estreptococos.
Los estreptococos son bacterias esfricas Grampositivas que forman, de modo
caracterstico, pares o cadenas durante el crecimiento. Se encuentran ampliamente
distribuidos en la naturaleza, algunos son miembros de la flora normal del hombre, en
tanto que otros estn asociados a importantes enfermedades humanas atribuibles en parte a
la infeccin por el propio microorganismo y en parte a una sensibilizacin hacia ellos.
Producen una gran variedad de sustancias y enzimas extracelulares.
Los estreptococos son un grupo heterogneo de bacterias y ningn sistema es suficiente
para clasificarlos. Veinte especies que incluyen Streptococcus pyogenes (grupo A),
Streptococcus agalactiae (grupo B), y enterococos (grupo D), se caracterizan por
combinaciones de diversas peculiaridades: caractersticas del crecimiento de la colonia,
patrones de hemlisis en agar sangre (hemlisis alfa, beta o ausencia de la misma),
composicin antignica de sustancias de la pared celular especfica de grupo y reacciones
bioqumicas. Los tipos de Streptococcus pneumoniae (neumococos) se clasifican
adicionalmente por la composicin antignica de los polisacridos capsulares.
Las enfermedades estreptoccicas y sus complicaciones supurativas o no, constituyen un
problema que afecta frecuentemente a la poblacin escolar, adolescentes y adultos
jvenes.
Universalmente se han realizado estudios en los cuales se seala que el diagnstico,
tratamiento correcto y temprano de las infecciones estreptoccicas constituyen la actividad
esencial en la prevencin de la cardiopata reumtica.

Forma e identificacin:

A. Microorganismos tpicos: Los cocos individuales son esfricos u ovoides y se


disponen en cadenas. La longitud de la cadena vara mucho y est condicionada por
factores ambientales. Los estreptococos son Grampositivos, sin embargo, a medida que
el cultivo envejece y mueren las bacterias, pierden su positividad y aparecen como
Gramnegativos; este hecho puede ocurrir despus de incubacin toda la noche.
Algunos estreptococos elaboran como sustancia capsular un polisacrido comparable
al que se encuentra en los neumococos. La mayor parte de las cepas de los grupos A, B

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y C, poseen cpsulas compuestas de cido hialurnico. Estas estructuras son ms
fcilmente apreciables en cultivos jvenes. Impiden la fagocitosis. La pared celular del
estreptococo contiene protenas (antgenos M,T,R,), carbohidratos (especficos de
grupo) y peptidoglucano. Los pilis semejantes a vellos, sobresalen a travs de la
cpsula de los estreptococos del grupo A. Los pilis consisten en parte, de protena M y
estn cubiertos con cido lipoteicoico. Este ltimo es importante en la unin de los
estreptococos de las clulas epiteliales.

B. Cultivo: La mayor parte de los estreptococos crecen en medios slidos formando


colonias discoidales de 1 a 2 mm de dimetro. Las cepas capsuladas del grupo A
frecuentemente dan lugar a colonias mucoides. Peptoestreptococcus se desarrolla bajo
condiciones anaerobias. La mayora de los estreptococos crecen en medios formando
hemlisis, as tenemos:

- hemolticos. (Destruccin completa de los hemates alrededor de las colonias,


transparentes)
- alfa hemolticos. (Destruccin parcial de los hemates, es verdosa).
- Gamma hemolticos. (Cuando NO existe hemlisis).

C. Caractersticas del crecimiento: La energa es obtenida fundamentalmente de la


utilizacin de azcares. El crecimiento de los estreptococos tiende a ser pobre, tanto en
medios slidos como en caldo, a menos que se les enriquezca con sangre o lquidos
tisulares diversos. Los requerimientos nutricionales varan ampliamente para las
distintas especies. Las especies patgenas para el hombre son ms estrictas ya que
requieren la presencia de diversos factores de crecimiento. El crecimiento y la
hemlisis se incrementa en presencia de CO2 al 10%.

D. Variacin: Las variantes de una misma cepa de estreptococo pueden dar lugar a
colonias con diferencias morfolgicas; sto es particularmente marcado entre cepas del
grupo A, las cuales pueden dar lugar a colonias enmaraadas y a colonias lustrosas.
Las colonias enmaraadas estn formadas por microorganismos que elaboran mucha
protena M; tales microorganismos tienden a ser virulentos y a ser relativamente poco
sensibles a la fagocitosis de los leucocitos humanos. Las colonias lustrosas tienden a
producir poca protena M y a menudo son avirulentas.

Estructura antignica.

Los estreptococos hemolticos pueden ser clasificados serolgicamente en grupos de la A a


la Z y algunos grupos pueden ser subdivididos en tipos. Se encuentran varias sustancias
antignicas.

1. Antgeno especfico de grupo de la pared celular: (Carbohidrato C): Sustancia que


proporciona la base para el agrupamiento serolgico (A- Z), segn Rebeca Lancefield.
2. Protena M: Sustancia relacionada ntimamente con la virulencia de los estreptococos
del grupo A.

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3. Sustancia T: Permite la diferenciacin de ciertos tipos de estreptococos por
aglutinacin con antisueros especficos. Este antgeno NO se relaciona con la
virulencia.
4. Protena R: Otro antgeno ms de superficie.
5. Nucleoprotenas: Posiblemente forme la mayora del cuerpo celular de los
estreptococos. (se les denomina tambin sustancias P)

Toxinas y enzimas.

Ms de 20 productos extracelulares antignicos son elaborados por el grupo A de


estreptococos entre ellos tenemos:

1. Estreptoquinasa: (Fibrinolisina), transforma el plasmingeno del suero humano en


plasmina, enzima proteoltica que digiere a la fibrina y otras protenas. Este proceso de
digestin puede ser interferido por inhibidores no especficos presentes en el suero, as
como por un anticuerpo especfico, la antiestreptocinasa. La estreptocinasa, se ha
administrado por va endovenosa parta el tratamiento de embolias pulmonares y de
trombosis venosas.
2. Estreptodornasa: (Desoxirribonucleasa estreptoccica), despolimeriza el ADN. Los
exudados purulentos generalmente deben su viscosidad a las
desoxirribonucleoprotenas. Se utilizan mezclas de estreptocinasas y estreptodornasas
en el desbridamiento enzimtico, dichas enzimas ayudan a fluidificar exudados y
facilitan la remocin de pus y de tejido necrtico, con lo que los antimicrobianos
tienen mejor acceso a las lesiones, recuperndose con mayor rapidez las superficies
infectadas. Un anticuerpo a las Dnasas, se desarrolla despus de las infecciones
estreptoccicas, especialmente despus de infecciones cutneas con pioderma.
3. Hialuronidasa: Enzima que desdobla el cido hialurnico, (constituyente importante
de la sustancia intercelular del tejido conjuntivo). As pues la hialuronidasa favorece la
diseminacin de los microorganismos infectantes (factor de diseminacin). Las
hialuronidasas son antignicas y especficas para cada bacteria o tejido del cual se
obtengan; despus de una infeccin debida a un organismo productor de hialuronidasa
se encuentran anticuerpos especficos en el suero del paciente.
4. Toxina eritrgena: Es soluble y es destruida mediante la ebullicin durante 1 hora.
Provoca el exantema que se produce en la escarlatina. Solamente las cepas que
elaboran esta toxina, producen esta enfermedad. La toxina es elaborada solamente por
estreptococos lisgenos. Las cepas desprovistas del fago moderado NO producen la
toxina. Un estreptococo NO toxignico, despus de la conversin lisgena, producir
la toxina eritrgena.
5. Difosfopiridin-nucleotidasa: Enzima relacionada con la capacidad del
microorganismo para matar leucocitos. Algunas cepas producen proteinazas y
amilasas.
6. Hemolisinas: Capacidad de lisar los hemates in vitro en diverso grado. Los
Estreptococos hemolticos del grupo A producen 2 hemolisinas:

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Estreptolisina O con actividad hemoltica solamente cuando est reducida.
Estreptolisina S responsable de la hemlisis que se produce en las placas de agar
sangre.

Clasificacin:

Durante muchos aos, la clasificacin de los estreptococos en categoras mayores se ha


basado en una serie de observaciones:

- Morfologa de la colonia y reacciones hemolticas en agar sangre.


- Especificidad serolgica de la sustancia especfica de grupo de la pared celular
(clasificacin de Lancefield) y de otros antgenos capsulares o de la pared celular.
- Reacciones bioqumicas y resistencia a factores fsico y qumicos.
- Caractersticas ecolgicas.

En la dcada de los 80, se usaron pruebas bioqumicas adicionales y de gentica molecular


para estudiar las relaciones de especies de estreptococos entre s. Combinacin de los
mtodos anteriores han permitido la clasificacin de estreptococos con propsitos de
conveniencia clnica y epidemiolgica, pero es estn introduciendo nuevos mtodos que
han hecho evolucionar la divisin de estreptococos con el resultado de que se describen
varias clasificaciones. En algunos casos nombres de especies diferentes se han usado para
describir los mismos microorganismos y en otros ejemplos, algunos miembros de la
misma especie se han incluido en otra especie o clasificado por separado. Por ejemplo
ahora el gnero Enterococcus incluye algunas especies que antes pertenecan a
estreptococos del grupo D. Por lo tanto la clasificacin de los estreptococos se resume
como un enfoque lgico. As tenemos:

A. Hemlisis: (despus de incubar toda la noche en agar con sangre de carnero al 5 %)

Estreptococos hemolticos. (slo las que muestran hemlisis beta)


Estreptococos no hemolticos. (las de alfa hemlisis)

Sin embargo, es ms prctico considerar estreptococos y enterococos como beta


hemolticos, alfa hemolticos y no hemolticos. La clasificacin del patrn hemoltico se
usa de manera primaria con estreptococos y no para otras bacterias patgenas que en
forma tpica producen diversos tipos de hemolisinas.

B. Sustancias especficas de grupo (clasificacin de Lancefield). Extractos con cido


caliente o enzimas contienen carbohidratos especficos de grupo. Estos carbohidratos
dan reacciones de precipitina con antisueros especficos que facilitan su clasificacin
en A-H y K-Z. En general la tipificacin se hace slo en los grupos A-D, F y G que son
patgenos para el hombre y para los que hay reactivos que permiten la identificacin
usando aglutinacin simple o reacciones cromticas.

72
C. Polisacridos capsulares: La especificidad antignica de los polisacridos capsulares,
se usa para clasificar S. pneumoniae en 83 tipos (American System) y para tipificar
estreptococos del grupo B (S. agalactiae).

D. Reacciones bioqumicas: Las pruebas bioqumicas incluyen fermentacin de


azcares, presencia de enzimas y susceptibilidad o resistencia a ciertos agentes
qumicos. Las pruebas bioqumicas con frecuencia se usan para clasificar estreptococos
despus del crecimiento de las colonias y cuando ya se han observado sus propiedades
hemolticas. Se prefieren para especies que en forma tpica no reaccionan con las
preparaciones de anticuerpos comunes para sustancias especficas de grupo, grupos
A,B,C,F y G. Por ejemplo los estreptococos viridans son alfa hemolticos o no
hemolticos y no reaccionan con los anticuerpos de uso comn para la clasificacin de
Lancefield. La separacin de estreptococos en especies, requieren una serie de pruebas
bioqumicas.

Clasificacin de estreptococos de inters mdico particular:

Los estreptococos y Enterococos siguientes tienen importancia mdica. (se incluyen los
nombres de especies menos comunes para aclarar clasificaciones previas y actuales)

1. Streptococcus pyogenes. (La mayor parte de los estreptococos que contienen


antgeno grupo A son Streptococcus pyogenes y hemolticos. Streptococcus pyogenes
es el patgeno humano principal relacionado con invasin local y generalizada y
trastornos inmunitarios post estreptoccicos)
2. Streptococcus agalactiae. (Son estreptococos grupo B miembros de la flora normal de
vas genitales y una causa importante de sepsis neonatal y meningitis)
3. Grupos C y G. (estos estreptococos se encuentran en ocasiones en la nasofaringe y
pueden causar sinusitis, bacteriemia o endocarditis)
4. Enterococcus faecalis (E. faecium, E. durans). (los enterococos reaccionan con
antisueros grupo D, forman parte de la flora intestinal normal)
5. Streptococcus bovis. (Estn dentro de los estreptococos grupo D no enteroccicos,
forman parte de la flora intestina, en ocasiones causan endocarditis)
6. Streptococcus anginosus. (Otros nombres de especie para este estreptococo son S.
milleri, S. intermedius, y S. constellans. Forman parte de la flora normal. Pueden
clasificarse como estreptococos viridans.)
7. Estreptococos grupo N. (Slo en raras ocasiones son patgenos para el hombre)
8. Estreptococos E, F,G,H, y K-Z. (Estos estreptococos se encuentran de manera
primaria en animales con ciertas excepciones ya mencionadas)
9. Streptococcus pneumoniae. (se estudiaran mas adelante y de forma separada)
10. Streptococcus viridans. (Incluyen S. mitis, S. mutans, S. salivarius, S. sanguis (grupo
H) y otros. Son los miembros ms abundantes de la flora normal de vas respiratorias
superiores y tienen importancia en la conservacin de la salud de las membranas
mucosas de esta rea). Pueden alcanzar el torrente sanguneo cuando ocurre un
traumatismo y son causa principal de endocarditis en vlvulas cardacas anormales.
Algunos estreptococos viridans (S. mutans, por ejemplo) sintetizan polisacridos
grandes como dextranos y levanos a partir de sacarosa y contribuyen de manera
importantsima a la gnesis de la caries dental.)

73
11. Peptoestreptococos. ( numerosas especies) ( Proliferan slo bajo condiciones
anaerobias o microaeroflicas y en forma variable producen hemolisinas. Son parte de
la flora normal de la boca, vas respiratorias superiores, intestino y vas genitales
femeninas. A menudo participan con muchas otras especies bacterianas en infecciones
anaerobias mixtas en abdomen, pelvis, pulmn o cerebro)

Patogenia.

A la infeccin por estreptococos estn unidos una diversidad de procesos patolgicos.


Influyen grandemente en el cuadro clnico de la enfermedad las propiedades biolgicas del
organismo infectante, la naturaleza de la respuesta del husped, as como la puerta de
entrada de la infeccin. Las infecciones pueden ser divididas en varias categoras.

A. Enfermedades atribuibles a la invasin por Estreptococos hemolticos del grupo


A (S. pyogenes).

- Erisipela.
- Fiebre puerperal.
- Infeccin generalizada.

B. Atribuibles a la infeccin local.

- Faringitis estreptoccica.
- Pioderma estreptoccica. (Imptigo).

C. Endocarditis infecciosa

- Endocarditis bacteriana aguda (vlvulas cardacas normales o anormales).


- Endocarditis bacteriana subaguda (vlvulas cardacas anormales).

D. Otras infecciones. Diversos estreptococos, particularmente los Enterococos, provocan


a menudo infecciones del aparato urinario. En el aparato genital normal de la mujer y
en la boca, as como en el intestino, e encuentran estreptococos anaerobios
(Peptoestreptococos), stos pueden provocar lesiones supurativas por si mismas o con
otros anaerobios, particularmente con Bacteroides. Pueden presentarse tales lesiones
en las heridas, en las mamas, en la endometritis post parto, despus del rompimiento
de alguna vscera abdominal, o en las supuraciones crnicas del pulmn; tales
supuraciones tienen generalmente un olor ftido. Diversos estreptococos (grupos C-L
y O) que normalmente se encuentran en animales inferiores pueden tambin provocar
infecciones ocasionales en el hombre. Los estreptococos del grupo B son parte de la
flora vaginal normal en 5 a 25 % de las mujeres. La infeccin con estos estreptococos
durante el primer mes de vida puede causar sepsis fulminante, meningitis o sndrome
de insuficiencia respiratoria. Al parecer la ampicillina intravenosa intraparto evita la
colonizacin de lactantes cuyas madres transportan estreptococos del grupo B.

E. Enfermedades post estreptoccicas.

74
- Fiebre reumtica.
- Glomerulonefritis.

Diagnstico de laboratorio.

A Muestras: Las muestras que se van a obtener dependen de la naturaleza de la


infeccin estreptoccica. Se obtiene un frotis de garganta, pus o sangre para cultivo. El
suero sirve para la determinacin de anticuerpos.
B Frotis teidos.
C Cultivos.
D Pruebas de deteccin de antgenos.
E Pruebas serolgicas.

Inmunidad:

La resistencia contra las enfermedades estreptoccicas es especfica de tipo pero NO de


grupo, as pues, el husped que se ha recuperado de una infeccin por estreptococo del
grupo A tipo M, es relativamente resistente a la infeccin por estreptococos del mismo
tipo, pero es completamente sensible a las infecciones por otros grupos A. La protena M
interfiere en la fagocitosis, pero los estreptococos son aniquilados por los leucocitos
humanos en presencia de un anticuerpo especfico de tipo contra la protena M.
La inmunidad para la toxina eritrgena se basa en la presencia de antitoxina en la sangre.
Esta inmunidad antitxica protege contra el exantema de la escarlatina, pero carece de
efecto sobre la infeccin por estreptococos.
El anticuerpo contra la estreptolisina O (antiestreptolisina O) se desarrolla despus de
infecciones; bloquea la hemlisis por estreptolisina O, pero no indica inmunidad. Ttulos
altos ( >250 unidades) indican infecciones recientes o repetidas y se encuentran con mayor
frecuencia en individuos reumticos que en quienes padecen infecciones estreptocccicas
no complicadas.

Neumococos.
Los neumococos (S pneumoniae) son diplococos Grampositivos, frecuentemente
lanceolados y agrupados en cadenas; poseen una cpsula formada por polisacridos que
permite una fcil tipificacin con antisueros especficos. Pueden ser lisados con facilidad
por agentes tensoactivos, por ejemplo las sales biliares. Probablemente los agentes
tensoactivos eliminan o inactivan a los inhibidores de las autolisinas de la pared
microbiana. Estos microorganismos son habitantes del aparato respiratorio superior del
hombre y pueden causar neumona, sinusitis, otitis, bronquitis, bacteriemia, meningitis y
otros procesos infecciosos.

Morfologa e identificacin.

A Microorganismos tpicos: Los tpicos diplococos lanceolados Grampositivos se


observan generalmente en cultivos jvenes. En esputo o pus se observan tambin cocos
aislados y formando cadenas. Con la edad, los microorganismos se vuelven

75
Gramnegativos y tienden a lisarse espontneamente. La autolisis de los neumococos es
notablemente acelerada por los agentes tensoactivos.

B Cultivo: Se desarrollan en medios de cultivo enriquecidos con sangre. Forman


colonias pequeas y redondas, al principio cupuliformes, que desarrollan mas tarde una
meseta central con bordes elevados, rodeadas de una zona de hemlisis incompleta
verdosa (hemlisis alfa). Son facultativos. Se diferencian de otros cocos hemolticos
por su solubilidad en bilis, inhibicin por la optoquina y su patogenicidad para el ratn
por va intraperitoneal.
C Caractersticas del crecimiento: La mayor parte de la energa es obtenida por la
fermentacin de la glucosa, fenmeno que se acompaa de una rpida produccin de
cido lctico, lo cual limita el crecimiento; la neutralizacin intermitente con lcalis, da
por resultado un crecimiento masivo.

D Variacin: Cualquier cultivo de neumococos contiene unos cuantos microorganismos


incapaces de producir polisacridos capsulares, los cuales dan lugar a colonias rugosas;
sin embargo, la mayor parte son bacterias productoras de polisacridos, dando lugar a
colonias lisas. Puede lograrse que las formas rugosas predominen, haciendo crecer el
cultivo en presencia de suero antipolisacrido especfico de tipo.

E Transformacin: Cuando los neumococos de un tipo que no produce cpsulas de


polisacridos crecen en presencia de DNA extrado de un tipo de neumococo que s la
forma, se producen neumococos encapsulados del ltimo tipo. Se han llevado a cabo
reacciones de transformacin similares que incluyen cambios en la resistencia a
frmacos.

Estructura antignica.

A Estructura de los componentes: El polisacrido capsular es inmunolgicamente


diferente y permite la diferenciacin en ms de 80 tipos serolgicos. El polisacrido es
un antgeno que provoca inicialmente una respuesta de clulas B. la porcin somtica
del neumococo contiene una protena que es caracterstica de cada tipo y un
carbohidrato especfico de grupo que es comn para todos los neumococos. El
carbohidrato puede ser precipitado por la protena C reactiva, sustancia que se
encuentra en el suero de algunos pacientes.
B Reaccin de hinchazn o quellung: Cuando se mezclan neumococos de un tipo
determinado con suero antipolisacrido especfico del mismo tipo (o con antisuero
polivalente) en un portaobjetos, la cpsula se hincha notablemente. Esta reaccin es
til para la identificacin rpida y la tipificacin del microorganismo, ya sea en esputo
o en cultivos. Un suero polivalente que contiene anticuerpos a ms de 80 tipos de
neumococos (omnisuero), es buen reactivo para determinacin microscpica rpida
de la posible presencia de neumococos en esputo fresco.

Patogenia.

76
La patogenicidad del microorganismo depende de sus propiedades invasivas y est
relacionada con la presencia de su cpsula, que impide la ingestin de los organismos
encapsulados por los fagocitos.

A Tipos de neumococos: En los adultos, los tipos 1 al 8 son responsables de cerca de 75


% de los enfermos de neumona neumoccica y de ms de la mitad de todas las
muertes en bacteriemias neumoccicas, en los nios, los tipos 6, 14, 19, y 23, son la
causa ms frecuente.
B Produccin de enfermedad: Los neumococos producen enfermedad por su capacidad
de multiplicacin en los tejidos; no producen toxinas de significacin aunque se habla
de la neumolisina O, de propiedades similares a la estreptolisina O. La virulencia
del microorganismo es funcin de su cpsula, la cual previene o retarda la ingestin de
clulas encapsuladas por los fagocitos. Un suero que contenga anticuerpos contra
polisacrido especfico de tipo protege contra la infeccin; si tal suero es absorbido con
el polisacrido especfico de tipo, se pierde su poder protector. Los animales o seres
humanos inmunizados con un tipo dado de polisacrido neumoccico son despus
inmunes a este tipo y poseen anticuerpos precipitantes y opsonizantes para este tipo de
polisacrido. Se ha planteado tambin la presencia de enzimas como la
neuroaminidasa para los neumococos que colonizan el tracto respiratorio y las
proteasas que actan degradando las inmunoglobulinas (IgA secretora, IgG e IgM) se
piensa que estas enzimas desempean un papel importante al facilitar la colonizacin
bacteriana sobre las superficies mucosas.
C Prdida de la resistencia natural: La mucosa respiratoria normal debe poseer gran
resistencia natural contra el neumococo, ya que entre 40 y 70 % de las personas
normales son en una u otra poca de su vida portadoras de neumococos virulentos.
Entre los factores que disminuyen la resistencia natural y predisponen a la infeccin
neumoccica son:

1. Anormalidades del aparato respiratorio: Otras infecciones (por ejemplo virosis) que
lesionan las clulas superficiales; acumulaciones anormales de moco (por ejemplo en
alergias, asma), lo cual protege a los neumococos de la fagocitosis; obstruccin
bronquial (por ejemplo en la atelectasia) y lesiones del aparato respiratorio debidas a
irritantes que alteran el manto mucociliar.

2. Intoxicacin alcohlica o medicamentosa, que abate la actividad fagocitaria, deprime


el reflejo de la tos y facilita la aspiracin de material extrao.

3. Dinmica circulatoria anormal (por ejemplo, en la congestin pulmonar,


insuficiencia cardaca)

4. Desnutricin, debilidad general, anemia de clulas falciformes, hipoesplenismo,


nefrosis, deficiencia del complemento.

Los neumococos penetran por las vas respiratorias superiores a partir de las excreciones
respiratorias de personas infectadas.

77
Generalmente constituyen una infeccin de tipo endgeno, ya que los factores
predisponentes son ms importantes en la produccin de la enfermedad que la adquisicin
del microorganismo.

El neumococo es el principal agente causal de neumonas bacterianas. Tambin


produce: Meningitis, Septicemias, Otitis, Sinusitis.

Diagnstico de laboratorio.

Se extrae sangre para cultivo y se obtiene esputo para la demostracin de neumococos en


frotis y cultivo. Es imprctico buscar anticuerpos en el suero. El esputo puede ser
examinado de diferentes maneras.

1. Frotis teidos: Los frotis hechos a partir del esputo rojo herrumbroso, teidos por la
tcnica de Gram, muestran organismos tpicos, muchos neutrfilos polimorfonucleares
y bastantes eritrocitos.
2. Pruebas de hinchazn de la cpsula: El esputo fresco emulsionado mezclado con
antisuero, da hinchamiento de las cpsulas (reaccin de hinchazn) para identificacin
de neumococos y posible tipificacin. El exudado peritoneal tambin se puede usar
para pruebas de hinchamiento de la cpsula.
3. Cultivo: El esputo se cultiva en agar sangre y se incuba en CO2.
4. Inyeccin intraperitoneal de esputo a ratones de laboratorio: Los animales
mueren en 18 a 24 horas; la sangre del corazn da un cultivo puro de neumococos.
Esta forma de cultivo para neumococos es muy sensible pero rara vez se utiliza porque
es necesario conservar una colonia de ratones.
5. La meningitis neumoccica, deber diagnosticarse mediante examen y cultivo rpido
del L.C.R.

Inmunidad.

La inmunidad a la infeccin por neumococos es especfica de tipo y depende de los


anticuerpos al polisacrido capsular y de lo intacto de la funcin fagocitaria. En las
vacunas pueden inducir anticuerpos contra los polisacridos capsulares.

78
Las Neisserias.
Las enfermedades infecciosas del hombre, pueden agruparse siguiendo diversos criterios,
uno de ellos sera conforme a la forma en que se transmiten o contagian con ms
frecuencia, (por ejemplo por contacto sexual) y de la puerta de entrada ms comn de los
agentes patgenos en el organismo. No obstante algunos microorganismos tienen la
propiedad de afectar ms de una parte del organismo y pueden ingresar en ste por
diversas vas, siendo ste el caso de las neisserias.
La familia Neisseriaceae incluye a las especies de Neisseria y Branhamella catarrhalis, lo
mismo que a las especies de Acinetobacter y de Kingella y Moraxella. Las Neisserias son
un grupo de cocos Gram(-) que se agrupan en parejas. Algunos son habitantes normales
del aparato respiratorio, otros, gonococo y meningococo, producen importantes patologas
humanas y su localizacin caracterstica es intracelular (dentro de los leucocitos
polimorfonucleares). Gonococos y meningococos estn estrechamente relacionados, tienen
una homologa de DNA de 70 %, y se distinguen con algunas pruebas de laboratorio y por
sus caractersticas especficas: los meningococos tienen cpsula de polisacridos en tanto
que los gonococos no, y los primeros rara vez tienen plsmidos en tanto que cuentan con
ellos la mayor parte de los gonococos. Lo que es ms importante, ambas especies se
distinguen por las presentaciones clnicas ordinarias de las enfermedades que producen: de
manera tpica los meningococos se encuentran en las vas respiratorias superiores y
producen meningitis, en tanto que los gonococos producen infecciones genitales. Sin
embargo, se sobreponen los espectros clnicos de las enfermedades producidas por
gonococos y meningococos. El estudio de las neisserias patgenas, en especial los
gonococos, ha contribuido en gran medida a los conocimientos obtenidos sobre las bases
moleculares de las enfermedades causadas por agentes patgenos de las mucosas.

Morfologa e identificacin.

A Microorganismos tpicos: Diplococos Gram (-) arrionados, inmviles con un


dimetro aproximado de 0,8 mm.

B Cultivo: A las 48 horas de cultivo en medios enriquecidos (por ejemplo Mueller


Hinton modificado de Thayer- Martn), gonococos y meningococos forman colonias

79
mucoides, convexas, resplandecientes y elevadas, con un dimetro de 1 a 5 mm. Las
colonias son transparentes u opacas, no pigmentadas y no hemolticas.

C Caractersticas del crecimiento:

- Aerobios facultativos.
- Producen indofenoloxidasa.
- Fermentan diferentes carbohidratos y producen cido pero no gas, y los patrones de
fermentacin de los mismos son un medio para distinguirlas.
- Los no patgenos (sicca, flava, catarrhalis etc), crecen en medios de cultivo simples a
temperatura ambiente.
- Los patgenos (gonorrhoeae, meningitidis), necesitan:
- Atmsfera hmeda y rica en CO2 .
- Temperatura adecuada. (35- 37C).
- Crecen mejor en medios que contienen sustancias orgnicas complejas como sangre
calentada. (agar chocolate), hemina, protenas animales.
- El crecimiento se inhibe por la accin de ciertos constituyentes txicos del medio, por
ejemplo, cidos grasos o sales.
- Mueren con rapidez a causa de la desecacin, luz, sol, calor hmedo y muchos
desinfectantes.
- Producen enzimas autolticas que dan por resultado tumefaccin y lisis rpida in vitro
a 25C y a Ph alcalino.

Neisseria gonorrhoeae.

Los gonococos fermentan slo la glucosa y difieren de otras neisserias desde el punto de
vista antignico. Suelen producir colonias ms pequeas que otras neisserias. Los
gonococos aislados de muestras clnicas o conservados por subcultivo selectivo forman
colonias pequeas tpicas que contienen bacterias con pili. En subcultivo no selectivo se
forman tambin colonias de mayor tamao que contienen gonococos sin pili.

Estructura antignica.

N. gonorrhoeae es heterognea desde el punto de vista antignico y capaz de cambiar sus


estructuras de superficie in vitro y posiblemente in vivo para evitar las defensas del
husped. Las estructuras de superficie consisten en lo siguiente:

A Pili: Estos son los apndices en forma de vellos que se extienden hasta varias micras
desde la superficie del gonococo. Fomentan la fijacin a las clulas del husped y la
resistencia a la fagocitosis. Estn constituidos por protenas llamadas pilinas. Las
pilinas de casi todas las cepas de N. gonorrhoeae son diferentes desde el punto de vista
antignico y una sola cepa puede elaborar muchas formas distintas de estructuras
antignicas de pilina.
B Por (protena I): Se extiende por toda la membrana del gonococo. Se encuentra en
trmeros que forman poros en la superficie, por los cuales entran a las clulas algunos
nutrimentos. Cada cepa de gonococo expresa slo un tipo de Por, pero cada una de las

80
protenas de las diferentes cepas es distinta desde el punto de vista antignico. La
tipificacin serolgica de la Por mediante reacciones de aglutinacin con anticuerpos
monoclonales, ha distinguido 18 serovares del tipo porA y 28 serovares del tipo PorB.
(La serotipificacin se efecta slo en los laboratorios de referencia).
C Opa (protena II): Esta protena funciona en la adherencia de los gonococos dentro de
las colonias y para la fijacin de stos a la clula del husped. Una parte de la molcula
de Opa se encuentra en la membrana gonoccica exterior, y el resto se encuentra sobre
la superficie. Una cepa de gonococo puede expresar uno, dos, tres o ningn tipo de
Opa, aunque cada cepa tiene 10 o ms genes para Opas diferentes.
D Rmp (protena III): Esta protena est conservada en la antigenicidad de todos los
gonococos; es una protena modificable por reduccin (Rmp) y cambia su peso
molecular aparente cuando se encuentra en estado reducido. Se une con Por en la
formacin de poros en la superficie celular.
E Lipopolisacrido (LPS): En contraste con el de los bacilos Gramnegativos
intestinales, el LPS gonoccico no tiene cadenas laterales O antignicas largas y es
llamado algunas veces lipooligosacrido. Los gonococos pueden manifestar ms de
una cadena de LPS antignicamente diferente de manera simultnea. La toxicidad de
las infecciones gonoccicas se debe en gran medida a los efectos endotxicos del LPS.
F Otras protenas: Diversas protenas constantes desde el punto de vista antignico de
los gonococos tienen funciones pobremente definidas en la patogenia. La Lip (H8) es
una protena de superficie expuesta que se puede modificar con calor, al igual que la
Opa. La Fbp (protena ligada al hierro), semejante en peso molecular a la Por, se
expresa cuando es limitada la provisin de hierro, por ejemplo en caso de infeccin
humana. Los gonococos elaboran una proteasa de la IgA1 que desdobla e inactiva a la
IgA1, inmunoglobulina importante de la mucosa del ser humano. Los meningococos,
Haemophilus influenzae y neumococos, tambin elaboran una proteasa IgA1 similar.

Heterogeneidad gentica y antignica.

En los gonococos han evolucionado mecanismos para cambiar con frecuencia de una
forma antignica (pilina, Opa o LPS) a otra de la misma molcula. Este cambio tiene lugar
en uno de cada 103 gonococos, tasa extremadamente rpida de cambio para bacterias.
Dado que pilina Opa y LPS son antgenos expuestos en la superficie de los gonococos,
tienen importancia en la respuesta inmunitaria a la infeccin. El rpido cambio de la
molcula de una forma antignica a otra, ayuda a los gonococos a eludir el sistema
inmunitario del husped.
El mecanismo de cambio para la pilina, que se ha estudiado con cuidado, es diferente del
mecanismo para la Opa.
Los gonococos tienen mltiples genes para codificar pilina, pero slo un gen se inserta en
el sitio de expresin, de donde los gonococos pueden remover todo o parte de este gen
para pilina y reemplazarlo por todo o parte de otro gen para esta sustancia. Este
mecanismo les permite a los gonococos, expresar muchas molculas de pilina con
estructuras antignicas diferentes en el transcurso del tiempo. El mecanismo de cambio de
Opa comprende al menos en parte, la adicin o eliminacin del DNA, de una o ms de las
repeticiones pentamricas codificadoras que proceden a la secuencia que codifica al gen
estructural de Opa. Se desconoce el mecanismo de cambio del LPS.

81
Los gonococos contienen varios plsmidos; 95 % de las cepas poseen un plsmido
criptico, pequeo de funcin desconocida. Otros dos plsmidos contienen genes que
codifican la produccin de lactamasa, que les confiere resistencia a la penicilina. Estos
plsmidos son transmisibles por conjugacin entre gonococos; tienen semejanza con un
plsmido encontrado en H. influenzae productor de penicilinasa y es posible que los
adquieran de Haemophilus u otros microorganismos Gramnegativos. Cinco o veinte por
ciento de los gonococos contienen un plsmido con genes que codifican la conjugacin; la
frecuencia es ms elevada en reas geogrficas donde son muy comunes los gonococos
productores de penicilinasa. En forma experimental en gonococos se ha desarrollado
resistencia a la tetraciclina en altas concentraciones mediante la insercin de un gen
estreptoccico que codifica para la resistencia a ese antibitico, dentro del plsmido
conjugativo.

Patogenia.

- Producen enfermedad por su propiedad invasiva, pero al parecer slo las bacterias con
pili son virulentas.
- No se desarrolla inmunidad siendo comn la reinfeccin.
- Se adquiere por contacto sexual.
- Hombre: Produce uretritis que se puede extender a prstata y epiddimo, si persiste
puede dejar una secuela como la estrechez uretral.
- Mujer: Infeccin asintomtica, a veces flujo mucopurulento y diseminacin a trompas
de Falopio (salpingitis) y torrente circulatorio (septicemia, artritis supurativa)
- En recin nacidos de madres infectadas se produce conjuntivitis purulenta (oftalma
neonatorum) que progresa a la ceguera.
- La bacteriemia gonoccica produce lesiones cutneas (en especial ppulas y pstulas
hemorrgicas) en manos, antebrazos, pies y piernas, tenosinovitis y artritis supurativa,
por lo general de tobillos, rodillas y muecas. La endocarditis gonoccica es una
infeccin poco comn pero grave. Los gonococos producen a veces meningitis e
infecciones oculares en adultos, estas infecciones tienen manifestaciones semejantes a
las producidas por los meningococos.

Diagnstico de laboratorio

1. Muestras:

- Pus.
- Sangre para hemocultivo.
- Secrecin uretral.
- Exudado Endocervical.
- Exudado conjuntival.
- Masaje prosttico.
- Mucosa rectal.
- Lquido sinovial.

82
2. Frotis: Observacin microscpica. (Diplococos arrionados Gram.(-). (Dentro de los
piocitos). Esto plantea un diagnstico presuntivo
3. Cultivo en agar chocolate y Thayer Martin: Se aprecian colonias tpicas en 18- 24
horas de incubacin.
4. Positividad a la prueba de la oxidasa.
5. Coaglutinacin.
6. Inmunofluorescencia.
7. Fermentacin de azcares.
8. Serologa: El suero y el lquido genital contienen anticuerpos IgG e IgA contra los pili,
las protenas de la membrana exterior y el LPS del gonococo. Algunas IgM de los
sueros humanos son bactericidas para los gonococos in vitro. En personas infectadas se
pueden identificar anticuerpos contra las vellosidades y las protenas de la membrana
exterior del gonococo mediante prueba de mancha inmunitaria,
radioinmunoinvestigacin y ELISA. Sin embargo, estas pruebas carecen de utilidad
como auxiliares diagnsticos por diversos motivos: la heterogenicidad antignica de
los gonococos, el retraso en el desarrollo de los anticuerpos en caso de infeccin aguda
y un gran nivel de fondo de anticuerpos en la poblacin sexualmente activa.

Neisseria meningitidis.

Estructura antignica.

Se han identificado cuando menos 13 serogrupos de meningococos por medio de la


especificidad inmunolgica de sus polisacridos capsulares. Los serogrupos ms
importantes que acompaan a la enfermedad en el hombre son:
- A
- B
- C
- Y
- W-135.

Se encuentran antgenos meningoccicos en la sangre y el LCR de pacientes que sufren la


enfermedad activa. Los brotes y los casos espordicos ocurridos en el hemisferio
occidental durante la ltima dcada, han sido causados principalmente por los grupos B,
C, W-135 y Y; los brotes en el sur de Finlandia y Sao Paolo en Brasil, fueron causados por
los grupos A y C; los de frica se debieron principalmente al grupo A. Los
microorganismos del grupo C y, en especial, los del grupo A, se relacionan con
enfermedad epidmica.
Las protenas de la membrana exterior de los meningococos se han dividido en 5 clases
segn su peso molecular. Todas las cepas tienen protenas de la clase 1, 2 o 3; stas son
anlogas a las protenas Por de los gonococos, y son las causantes de la especificidad de
serotipos de los meningococos. Ayudan a formar poros en la pared celular meningoccica.
Se han definido hasta 20 serotipos; los serotipos 2 y 15 se han relacionado con la
enfermedad epidmica. La protena Opa (clase 5) es equivalente es equivalente a la
protena Opa de los gonococos. Los meningococos tienen pili, pero, a diferencia de los
gonococos, no forman tipos de colonias distintivas que indiquen bacterias con pili. El LPS

83
meningoccico es el causante de muchos de los efectos txicos que ocurren en la
enfermedad que produce.

Patogenia.

El ser humano es el nico husped natural para el meningococo. Los nios y adultos
jvenes son muy susceptibles a las infecciones meningoccicas. Puede originar epidemias
en reas cerradas donde existe hacinamiento.
La va de entrada es la nasofaringe. En ella los microorganismos se fijan a las clulas
epiteliales con ayuda de las vellosidades; pueden formar parte de la flora transitoria sin
producir sntomas. Desde la nasofaringe los microorganismos pueden llegar a la sangre y
producir bacteriemia; quiz los sntomas produzcan la impresin de infeccin de las vas
respiratoria superiores. La meningococemia fulminante es ms grave, con fiebre elevada y
erupcin hemorrgica. Puede haber coagulacin intravascular diseminada y colapso
circulatorio ( sndrome de Water-house-Friderichen).
La meningitis es la complicacin ms comn de la meningococemia. Suele iniciarse de
manera sbita con cefalalgia intensa, vmitos y cuello rgido, y progresa hasta el coma en
plazo de unas cuantas horas.
Durante la meningococemia ocurre trombosis en muchos vasos sanguneos pequeos y
diversos rganos, con infiltracin perivascular y hemorragias petequiales. Puede haber
miocarditis intersticial, artritis y lesiones cutneas. En caso de meningitis, se inflaman de
manera aguda las meninges, con trombosis de los vasos sanguneos y exudacin de
leucocitos polimorfonucleares, de modo que la superficie del cerebro queda cubierta por
un exudado mucopurulento espeso.
No se sabe lo que transforma a la infeccin asintomtica de la nasofaringe en
meningococemia y meningitis, pero el fenmeno se puede prevenir mediante anticuerpos
sricos bactericidas especficos contra el serotipo infeccioso. La bacteriemia por Neisseria
meningitidis se ve favorecida por la ausencia de anticuerpos bactericidas (IgM e IgG),
inhibicin de la accin bactericida srica por un anticuerpo IgA de bloqueo, o una
deficiencia del complemento (C5, C6, C7 O C8). Los meningococos se someten
fcilmente a fagocitosis en presencia de opsonina especfica.

Diagnstico de laboratorio

1. Muestras:
- Sangre para Hemocultivo. (meningococemias).
- LCR. Para frotis y cultivo (meningoencefalitis).
- Exudado nasofarngeo (portadores).
- Puncin de petequias para frotis y cultivo.
- Suero (pruebas serolgicas).
- Gota gruesa.

2. Frotis. (Observacin microscpica.)


- LCR.
- Puncin de petequias.

84
- Gota gruesa.

3. Cultivo.
- Agar chocolate.
- Thayer Martin.

4. Prueba de la oxidasa.
5. Fermentacin de azcares.
6. Determinacin de grupos serolgicos.
7. Aglutinacin de lminas con sueros especficos.
8. Pruebas serolgicas. Determinar Acs a los polisacridos meningoccicos del paciente
mediante pruebas de aglutinacin con ltex o de hemaglutinacin o por su actividad
bactericida.
Inmunidad.

La inmunidad a la infeccin meningoccica se relaciona con la presencia de anticuerpos


bactericidas especficos dependientes de complemento en el suero. Estos anticuerpos se
producen despus de infecciones subclnicas por diferentes cepas, o de inyeccin de
antgenos y son especficos de grupo, especficos de tipo o ambos. Los antgenos
inmunizantes para los grupos A, C, Y y W-135 , son los polisacridos capsulares. El
antgeno inmunizante para el grupo B est menos bien definido y puede incluir a protenas
de la membrana. Quiz los lactantes tengan inmunidad pasiva gracias a los anticuerpos
IgG que les transfirieron sus madres. Los nios menores de 2 aos de edad, no producen
anticuerpos de una manera digna de confianza cuando se inmunizan con polisacridos de
meningococos o de otras bacterias.

85
Los bacilos Gram (+)
Las bacterias anaerobias desempean sin duda un papel importante en muchas
enfermedades infecciosas de riesgo mortal, aunque su significacin queda aun por
determinar en algunos cuadros clnicos. Las infecciones anaerobias pueden afectar
cualquier regin anatmica del cuerpo siempre que las condiciones de los tejidos sean
apropiadas para ello. Los anaerobios participan comnmente en abscesos de cualquier
rgano (cerebro, pulmn, hgado trompas y ovarios) y la fuente de infeccin puede ser
endgena o exgena,
En tiempos pasados y antes del triunfo de la revolucin moran muchas personas por
enfermedades infecciosas, en muchos casos, las causas eran desconocidas, sin embargo, en
otras, aunque estas causas se conocieran no se tenan los recursos monetarios para pagar la
atencin medica la cual era para los privilegiados o la clase pudiente.
Los gobiernos existentes, no se preocupaban por la salud del pueblo, sin embargo, al
triunfar la revolucin, sta fue una de las primeras ramas que se empez a desarrollar, la
salud del pueblo y por el pueblo.
La medicina preventiva ha sido algo muy importante, porque lo esencial no es tener
hospitales para ingresar enfermos, sino evitar precisamente que las personas enfermen y
mueran inclusive por enfermedades muy peligrosas. As es como fue desapareciendo en
gran escala, el ttanos y la difteria entre otras enfermedades infecciosas, aunque todava
suelen verse casos espordicamente y precisamente nuestra clase de hoy va a referirse
entre otras a los agentes causales de estas enfermedades.

Bacilos Gram (+). Los clostridios. Caractersticas. Clasificacin.

Caractersticas generales.

B. cereus
aerobios B. subtilis.
B. anthracis.
esporulados
Cl. botulinum.

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Anaerobios Cl. tetani. Cl. perfringes
Cl. g. gaseosa Cl. novyi
Cl. septicum

Bacilos gram (+)

C. diphtereae
aerobios C. vaginalis (G. vaginalis)
no esporulados Listeria

anaerobios Actinomices

Los bacilos Grampositivos formadores de esporas son las especies de los gneros Bacillus
y Clostridium. Estos bacilos son cosmopolitas y debido a que forman esporas, pueden
sobrevivir en el ambiente por muchos aos. El gnero Bacillus es aerobio, mientras que
los clostridios son anaerobios obligados.
De las numerosas especies de ambos gneros, Bacillus y Clostridium, la mayor parte no
causan enfermedad y no se han estudiado en la microbiologa mdica. Sin embargo, varias
especies, causan enfermedades importantes en el hombre. El ntrax, padecimiento
prototipo en la historia de la microbiologa, es causado por Bacillus anthracis. El ntrax
sigue siendo una enfermedad importante de los animales y en ocasiones, del hombre y
Bacillus anthracis poda ser tambin, un agente principal de guerra biolgica.

Bacillus.

Los microorganismos del gnero Bacillus son bacilos Gram (+), grandes, que se agrupan
formando cadenas, forman esporas y son aerobios.
La mayora de los miembros de este gnero son organismos saprofitos. (organismos que se
forman en las sustancias putrefactas) como Bacillus cereus y subtilis , prevaleciendo en el
suelo, el agua, el aire y sobre vegetales diversos. B. cereus puede desarrollarse en los
alimentos, produciendo una enterotoxina que provoca envenenamiento alimentario. Tales
microorganismos pueden en ocasiones producir enfermedades en personas con
alteraciones inmunitarias por ejemplo: meningitis, endocarditis, endoftalmitis,
conjuntivitis o gastroenteritis aguda. Bacillus anthracis el cual causa el ntrax, es el
principal patgeno del gnero.

Bacillus anthracis

Patogenia.

El ntrax es primariamente una enfermedad del ganado lanar, bovino y equino,


afectando al hombre solo ocasionalmente. La infeccin se adquiere generalmente por la
entrada de esporas a travs de la piel o mucosas lesionadas y raras veces por la inhalacin

87
de esporas a los pulmones. En el hombre las excoriaciones de la piel predisponen a la
infeccin.
Las esporas germinan en los tejidos en el sitio de entrada y los bacilos se propagan por va
linftica a la sangre, multiplicndose libremente las bacterias.
En el hombre el ntrax da lugar a una infeccin de la piel que se conoce como Pstula
maligna.
Se presenta primero una ppula despus de penetrar el microorganismo o la espora. Esta
ppula rpidamente se transforma en vescula, despus en pstula y finalmente en una
ulcera necrtica a partir de la cual, la infeccin puede propagarse dando lugar a una
septicemia.
Otro tipo de ntrax (Neumona primaria), resulta de la inhalacin de esporas del polvo de
lana, cuero y pelo (enfermedad de los cargadores de lana), que es a menudo mortal.

Bacilos anaerobios esporulados.

Los Clostridios son bacilos grandes, mviles, Gram (+) anaerobios, que forman esporas,
pueden descomponer las protenas, formar toxinas o ambas cosas, Su hbitat natural es
el suelo o el intestino de los animales y el hombre, la mayora de las especies son
organismos saprofitos del suelo. Entre los patgenos se encuentran los causantes del
Botulismo, del Ttanos y de la Gangrena gaseosa.

Morfologa e identificacin.

A. Organismos tpicos: Bacilos Gram (+) grandes esporulados, las esporas son
generalmente mayores que el dimetro de los bacilos. En Cl. tetani la espora se
localiza en un polo del bacilo, dndole la apariencia de palillo de tambor, en las
diversas especies la espora se encuentra colocada ecuatorial, subterminal o terminal.
La mayora de los clostridios son mviles y poseen flagelos peritricos.
B. Cultivo: Crecen solamente en condiciones de anaerobiosis.
C. Forma de las colonias. Son variables para las diferentes especies y la mayora
producen hemlisis en gelosa sangre.
D. Caractersticas del crecimiento. La caracterstica ms importante de los bacilos
anaerobios, es su incapacidad para utilizar el oxgeno como aceptor final de hidrgeno;
carecen de citocromo y citocromooxidasa y son incapaces de destruir el perxido de
hidrgeno porque carecen de catalasa y peroxidasa. Por ello el H 2O2 tiende a
acumularse hasta alcanzar concentraciones txicas Pueden fermentar diversos
azucares; muchos digieren a las protenas. La leche es acidificada por algunos,
digerida por otros, en tanto que un tercer grupo (por ejemplo C. perfringes) provoca en
dicho medio la llamada fermentacin tormentosa, es decir, con el cogulo
disgregado por el gas. Diferentes especies producen una gran variedad de enzimas.
E. Caractersticas antignicas: Los Clostridios comparten antgenos, pero tambin
parecen poseer antgenos especficos solubles que permiten agruparlos por medio de
pruebas de precipitacin.

Clostridium botulinum.

88
Este microorganismo es de distribucin mundial, se le encuentra en el suelo y
ocasionalmente en heces de animales. Las esporas de C. botulinum, son particularmente
resistentes al calor, soportando una temperatura de 100C cuando menos durante tres a
cinco horas; esta resistencia al calor disminuye en Ph cido o en concentraciones elevadas
de sal.
Producen enfermedad por elaboracin de una potente toxina termolbil, la cual se destruye
en 1 minuto por ebullicin y en 10 minutos por calentamiento entre 75 a 85C.
Hay 8 tipos antignicos de toxina botulnica (A-H). Los tipos A, B y E son los mas
frecuentemente asociados con la enfermedad en el humano.
Las esporas de C. botulinum germinan en alimentos envasados al vaco o ahumados, en
los que existen condiciones de anaerobiosis. El Botulismo es una intoxicacin resultante
de la ingestin de alimentos en los cuales se ha desarrollado el C. botulinum y ha
producido la toxina.
La toxina acta bloqueando la produccin o liberacin de Acetilcolina en las sinapsis
y uniones neuromusculares, produciendo una parlisis flccida.

La enfermedad se manifiesta por:

Perturbaciones visuales.
Ronquera o incapacidad para deglutir.
Parlisis bulbar.
Paro respiratorio o cardiaco y
Muerte.
Los sntomas gastrointestinales, no son regularmente prominentes; no hay fiebre. El
paciente permanece completamente consciente hasta poco antes de la muerte. La tasa de
mortalidad es elevada. Los pacientes que se recuperan no forman antitoxina en sangre.
Ocasionalmente los lactantes durante los primeros meses de la vida, desarrollan debilidad,
signos de parlisis y prueba electromiogrfica de botulismo. C. botulinum y la toxina
botulnica se hallan en las heces, pero no en el suero, se cree que C. botulinum se
desarrolla en el intestino y produce la toxina. La mayor parte de estos lactantes se
recuperan con tratamiento de sostn solamente. Sin embargo, el botulismo en los lactantes,
puede ser una de las causas del sndrome de muerte sbita neonatal. La alimentacin con
miel se ha considerado como una causa posible de botulismo infantil.

Clostridium tetani.

Es de distribucin mundial en el suelo y en las heces de caballos y de otros animales. Se


han distinguido varios tipos de C. tetani por sus antgenos flagelares especficos; todos
ellos comparten un antgeno O (somtico) comn, que puede estar enmascarado y todos
producen el mismo tipo antignico de neurotoxina, tetanospasmina. Las formas L de C.
tetani tambin producen tetanospasmina.

Patogenia.

Produce enfermedad mediante la elaboracin de una toxina que causa el aumento de la


excitabilidad refleja por acumulacin de Acetilcolina en las terminaciones nerviosas.

89
Cl. tetani penetra por lesiones de piel o mucosas contaminadas con polvo o heces de
humanos y animales. En esta rea de tejido muerto (heridas, cordn umbilical, suturas
quirrgicas), las esporas germinan, las formas vegetativas se reproducen y fabrican la
toxina tetnica. Esta pasa a la circulacin sangunea y acta sobre el tejido nervioso de la
mdula espinal y de los nervios perifricos dando por resultado los espasmos musculares.
El ttanos se caracteriza por contracciones tnicas y convulsiones de los msculos
voluntarios, llegando a afectar los msculos de la mandbula (trismus) las cuales se
contraen de tal forma que el paciente no puede abrir la boca.

Gangrena gaseosa. Patogenia.

Diferentes especies de clostridios pueden causar la Gangrena gaseosa:


Cl. perfringes (welchii).
Cl. novyi.
Cl. septicum.

Estos viven en el suelo y en el intestino de los animales. Su patogenicidad esta dada por su
propiedad invasiva y elaboracin de toxinas y enzimas:

1. Toxina alpha (lecitinasa) de Cl. perfringes, descompone la lecitina, que es un


constituyente de las membranas celulares.
2. Toxina theta. Tiene efectos hemolticos y necrosantes.
3. Colagenasa. Digiere al colgeno.
4. Hialuronidasa. Desdobla al cido hialurnico.
5. Desoxirribonucleasa. Despolimeriza al ADN.
6. Enterotoxinas. Elaboradas por algunas cepas de Cl perfringes, indica una
hipersecrecin marcada de lquidos en el intestino delgado, con la prdida de lquidos
y electrolitos por la diarrea. Aun no se ha establecido el mecanismo exacto, pero al
parecer no implica la estimulacin de la adenilato ciclasa o la guanilato ciclasa.
Las esporas de Cl. de la Gangrena gaseosa penetran por heridas de piel o mucosas
contaminadas con polvo o heces humanas. Germinan en presencia de tejido necrtico y se
multiplican al mismo tiempo que fermentan los carbohidratos existentes en los tejidos y
producen gas. En la gangrena gaseosa generalmente hay infeccin pigena asociada que
contribuye a disminuir el potencial de oxido reduccin tisular.
La distensin gaseosa de los tejidos y la falta de riego sanguneo junto con la secrecin de
toxina necrotizante y la hialuronidasa, favorecen la diseminacion de la infeccin.
La necrosis del tejido se extiende dando oportunidad a un mayor crecimiento bacteriano,
anemia hemoltica, toxemia grave y muerte.
En la gangrena gaseosa la regla es la infeccin mixta. C. perfringes se presenta en el
aparato genital en 5 % de las mujeres. Pueden presentarse infecciones uterinas por
Clostridios consecutivamente al aborto provocado, la bacteriemia clostridial es frecuente
en pacientes con neoplasias
El Cl. perfringes puede desarrollarse en determinados alimentos donde produce
enterotoxinas que al ser ingeridos producen envenenamiento alimentario.

90
Diagnostico de laboratorio.

Productos patolgicos.

Exudado de la herida contaminada, pus, tejidos.


Alimentos.

Examen microscpico: En los frotis teidos se pueden observar bacilos gram (+)
grandes, en ocasiones pero no siempre, esporulados. La situacin de la espora
(terminal, subterminal o central), facilita la identificacin de la especie de Clostridium.
Cultivo: En condiciones anaerobias.
Demostracin de la toxina: La identificacin final se basa en la produccin de
toxinas y su neutralizacin por la antitoxina especfica in vivo o in vitro.
Corynebacterias, Listeria y Actinomices.

Los bacilos Grampositivos que no forman esporas, son un grupo variado de bacterias.
Muchos miembros del gnero Corynebacterium y sus equivalentes anaerobios, las especies
del gnero Propionobacterium, forman parte de la flora normal de la piel y membranas
mucosas del hombre. Otras corynebacterias se encuentran en animales y plantas. C
diphtheriae, es el miembro ms importante del grupo, ya que produce una exotoxina
potente que causa la difteria humana. Listeria monocytogenes y Erysipelothrix, se
encuentran en su mayor parte en animales y en ocasiones, causan enfermedad grave en el
hombre.

C. diphthereae.

Morfologa.

Son bacilos Gram (+) en forma de palillo de tambor, dispuestos en palizadas o en forma de
letra china, no son esporulados.
Presentan distribuidos en su interior grnulos metacromticos de volutina.

Cultivo y caractersticas del crecimiento.

Se cultivan en agar sangre telurito, donde las colonias presentan coloraciones que van del
gris al negro, debido a que el telurito es reducido intracelularmente. En el medio de suero
coagulado de Lffler, las colonias son pequeas, granulares y grisceas, con bordes
irregulares
Son aerobios estrictos. Producen cido de la glucosa, forman cistinasa y carecen de ureasa.
Para determinar la capacidad de producir toxina de un bacilo diftrico aislado se realiza
una prueba de virulencia in vitro. Consiste en cultivar el bacilo sospechoso, cerca de una
tira de papel de filtro saturado de antitoxina en un medio de cultivo especial de agar.
Despus de 48 horas de incubacin, la toxina difunde en el medio y donde se encuentra a
la antitoxina, se produce un precipitado que forma unas lneas radiales.

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Patogenia

El C. diphteriae tiene como husped natural al hombre. Este agente se presenta de manera
natural en vas respiratorias, heridas o en la piel de personas infectadas o de portadores
normales. Se transmite por gotitas o contacto, en individuos susceptibles; luego, los
bacilos virulentos proliferan en las membranas mucosas o en abrasiones cutneas y
comienzan a producir toxina.. Su patogenicidad es el resultado de la accin de la toxina
elaborada por los microorganismos. La adquisicin de determinado fago, que se reduce a
profago, conduce a la toxigenicidad (conversin lisognica). La toxina cuando se absorbe
causa:

Destruccin del epitelio y formacin de una seudomembrana.


Lesiones txicas a distancia con degeneracin parenquimatosa, infiltracin grasa y
necrosis en miocardio, tejido nervioso y otros rganos parenquimatosos (hgado,
riones, suprarrenales).

Las complicaciones ms importantes de difteria se refieren al miocardio (miocarditis) y al


sistema nervioso (parlisis del velo del paladar, de los msculos oculares o de las
extremidades, as como a obstruccin respiratoria por extensin de la seudomembrana.)
Para conocer si una persona tiene inmunidad (presencia de antitoxina en sangre y tejidos,
se utiliza la reaccin de Schick.
Esta es una reaccin cutnea basada en el hecho de que la toxina diftrica es muy irritante
cuando se inyecta intradrmicamente y a menos que sea neutralizada por la antitoxina
circulante da lugar a una marcada reaccin local.

Listeria monocitogenes.

Bacilo Gram (+), corto, no esporulado que puede encontrarse formando parte de la flora
normal de la vagina. Crece bien en medios enriquecidos con sangre donde produce zonas
de hemlisis. En agar triptosa produce colonias verde azules, crece a temperatura de 37C
pero tambin puede crecer a 25C. Aerobio o microaeroflico,. Se distribuye mundialmente
en el hombre, animales, suelo y plantas. Al examen directo presenta una tpica disposicin
difteroide en palizadas.
La relacin causal de epidemias de listeriosis con alimento contaminado, sugiere que la
forma natural de infeccin por este microorganismo es por va gastrointestinal.

Puede producir:

Septicemia con abscesos focales en el hgado.


Meningoencefalitis con o sin bacteriemia.
Puede estar asociado a un linfoma con o sin inmunodeficiencia.
Septicemia intrauterina con fallecimiento.
Abscesos o granulomas ampliamente diseminados en el tracto genital de mujeres
grvidas y en el recin nacido de una a cuatro semanas.
Faringitis febril.

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Enfermedad diseminada (neumona, empiema y endocarditis).

Actinomices israelii.

Bacilo Gram (+), ramificado (se inclua antes entre los hongos filamentosos), anaerobio.
Forma parte de la flora indgena de la cavidad bucal y del tracto gastrointestinal, no se ha
aclarado lo que transforma el estado de portador de los microorganismos en bacterias
invasivas.
La lesin tpica consiste en un absceso con necrosis central, rodeado por tejido de
granulacin y por tejido fibroso, el pus a menudo contiene grnulos de azufre y puede
drenar hacia el exterior a travs de los fistidios. La diseminacin a sangre es rara.
La lesin inicial en la mitad de los enfermos es cervicofacial afectando:

Cara.
Cuello.
Lengua.
Mandbula.

La quinta parte de los enfermos puede presentar Actinomicosis pulmonar (infeccin


pulmonar granulomatosa que se caracteriza por lesiones pigenas con tractus sinuosos
interconectados que contienen grnulos con microcolonias con elementos hsticos. La
actinomicosis plvica se ha presentado particularmente en mujeres que utilizan
dispositivos intrauterinos.

93
Enterobacterias.
Las Enfermedades Diarreicas Agudas (EDA), constituyen un serio problema cuando se
presentan en nios. El control de las EDA, el conocimiento de sus agentes etiolgicos, el
rpido tratamiento y sobre todo las mejoras higinico sanitarias y la educacin popular
posibilitan que cada ao ocurran menos muertes por esta causa, sin embargo, en los pases
en desarrollo, las EDA como primera causa de muerte ocupan un lugar significativo, de
ah que el conocimiento de los agentes etiolgicos sea de gran importancia en el
diagnstico de la enfermedad.
Las Enterobacterias constituyen una familia de bacilos Gram (-), no esporulados,
anaerobias o aerobias facultativas, mviles merced a flagelos peritricos, que carecen de
citocromooxidasa, poseen una gran actividad metablica, fermentan una gran variedad de
carbohidratos, poseen una estructura antignica compleja, producen diversas toxinas y
otros factores de virulencia. En la actualidad se han descrito por lo menos 27 gneros y
102 especies, as como 8 grupos entricos.
Son organismos ubicuos que se encuentran en el suelo, el agua y la vegetacin. Algunas
forman parte de la flora normal del intestino del hombre y los animales, otras son
generalmente patgenas para el hombre.

Sobre la base de su capacidad de utilizar la lactosa, podemos dividir a las


enterobacterias en tres grupos:

1. Fermentan rpidamente la lactosa: coliformes (Echerichia coli, Enterobacter,


Klebsiella pneumoniae).

2. No fermentan la lactosa: Salmonella, Shigella, Proteus.

3. Fermentan lentamente la lactosa. Arizona, Serratia, Providencia, Citrobacter, Hafnia.

Estructura antignica.

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Las enterobacteriaceas tienen una estructura antignica compleja. Se clasifican por medio
de ms de 150 antgenos somticos O termoestables (LPS), ms de 100 antgenos K
termolbiles (capsulares) y ms de 50 antgenos H (flagelares). En Salmonella typhi los
antgenos capsulares se llaman antgenos Vi.

Toxinas y enzimas.

La mayor parte de las bacterias gramnegativas poseen LPS complejos en las paredes
celulares. Estas sustancias, endotoxinas, tienen diversos efectos fisiopatolgicos. Muchas
bacterias intestinales Gramnegativas producen tambin exotoxinas de importancia clnica.

Salmonellas

Los organismos del gnero Salmonella son bacilos Gram (-) mviles, anaerobios
facultativos, que no fermentan la lactosa, patgenos para el hombre y los animales por va
oral.

Morfologa e identificacin.

Bacilos Gram (-).


Anaerobios facultativos.
No esporulados.
La mayora son mviles merced a flagelos peritricos.
Crecen fcilmente en los medios de cultivo ordinarios.
No fermentan la lactosa, sacarosa ni salicilina.
Forman cido y generalmente gas a partir de la glucosa, excepto Salmonella typhi.
Son resistentes a la congelacin en agua y ciertos agentes qumicos como el verde
brillante, desoxicolato sdico, y tetrationato sdico.
En los medios de cultivo (SS), forman colonias:
- Redondas.
- Convexas.
- Transparentes.
- Bordes regulares.

Las especies de Salmonellas pueden ser identificadas por reacciones bioqumicas y


anlisis antignico.

Estructura antignica

Antgeno "H" o flagelar (se inactiva por calentamiento a temperatura superior a 60C).
Antgeno "O" somtico (forma parte de a pared de la clula bacteriana (LPS), y son
resistentes al calentamiento prolongado a 100C).

95
Antgeno "Vi" o capsular (presentes en la extrema periferia de la bacteria, se destruye
por calentamiento durante 1 hora a 60C).
Los cultivos que poseen antgeno "Vi" son ms virulentos que los que no lo poseen.

Toxinas: Como en todas las bacterias Gram (-), la membrana de las Salmonellas contiene
LPS. Se liberan por lisis de las clulas y actan como endotoxinas. Ya ha sido demostrada
una enterotoxina termolbil, prcticamente idntica a la del clera.

Patogenia.

Los organismos entran por va oral y pueden producir 3 tipos de enfermedades:

1. Las fiebres intestinales o fiebre tifoidea (S. typhi) y paratifoidea (S. paratyphi).
Penetran en los linfticos intestinales linfa sangre tejido linfoideo donde se
multiplican.
2. Septicemias.
3. Enterocolitis por irritacin violenta de las mucosas.

Shigellas

Bacilo Gram (-).


Inmvil.
Anaerobio facultativo.
Que con pocas excepciones no fermentan la lactosa.
El hbitat natural se limita al intestino del hombre donde produce disentera
bacilar.

En los medios de cultivo (SS), forman colonias muy parecidas a las de Salmonella, o sea:

Redondas.
Convexas.
Transparentes.
Bordes regulares.
Forman cidos a partir de carbohidratos pero no gas (excepto newcastle y manchester).

Se conocen 4 grupos fundamentales y diversos tipos, entre ellas:

Grupo Tipo

A (1-10)
B (1-6)
C (1-15)
D (1)

Estructura antignica.

96
Es completa, la mayora comparten los antgenos "O" con otros bacilos entricos.

Clasificacin: Esta basada en sus caractersticas bioqumicas y antignicas.

Toxinas: Todas liberan mediante autolisis su antgeno somtico. Shigella A produce la


toxina Shiga (neurotxica, enterotxica y citotxica)

Patogenia.

Despus de una incubacin corta (1-4 das) se presenta:

Dolor abdominal.
Clicos.
Diarreas.
Fiebre.
Ya que el gnero Shigella invade mucosa intestinal (leon terminal y colon) produciendo
infeccin local, necrosis, formacin de ulceras que sufren infeccin sobreaadida por otros
microorganismos entricos.
Las heces son lquidas y contienen moco y sangre. Despus de las primeras evacuaciones
se acompaan de tenesmo.
Las enfermedades producidas por Shigella dysenteriae pueden ser graves e inclusive
mortales.
Lo principal es la acidosis y deshidratacin. Shigella dysenteriae y flexneri, elaboran
enterotoxinas, neurotoxinas y citotoxinas.

Inmunidad.

Se presenta respuesta serolgica especifica de tipo (IgA que limita la reinfeccin pero
puede producirse).

Echerichia coli.

Es la especie de enterobacteria que ms abunda en el intestino humano como miembro de


la flora normal. Puede provocar EDA si en la infeccin intervienen cepas productoras de
enterotoxinas (E. coli enteropatgena), afectando sobre todo a los lactantes y nios
pequeos, tambin pueden afectar a los adultos (diarrea de los viajeros). La enterotoxina
de E.coli enteropatgena es una exotoxina que activa la adenilciclasa aumentando la
concentracin de AMPc que da por resultado una hipersecrecin intensa y prolongada del
agua y cloruros e inhibe la resorcin de sodio trayendo como resultado la diarrea
explosiva. Esta enterotoxina es similar a la del Vibrin que produce el clera.
En los ltimos anos cepas de E. coli no pertenecientes a los serotipos enteropatgenos
reconocidos pero aislados en pacientes con diarrea, han producido probablemente una
enterotoxina termolbil y/o termoestable. Adems se sabe que algunos serogrupos invaden
las clulas epiteliales del intestino grueso y producen un sndrome clnico similar al
causado por Shigellas. Aunque no es practica para uso de rutina en el laboratorio la prueba

97
estndar de invasividad determina la capacidad del microorganismo de producir
queratoconjuntivitis en los ojos de los cobayos (Prueba de Sreny).
Ya se conocen otras dos cepas de E. coli que tambin pueden producir cuadros diarreicos,
ECEH la cual puede producir verdaderos cuadros de diarrea con sangre e inclusive llegar a
producir el sndrome hemoltico urmico y la ECEA.

ECEP.

Guardan relacin con diarrea estival de los lactantes, brotes de diarrea en salas de cuna
y las epidemias de diarrea infantil en diversas comunidades.

Bacilo Gram (-)


Mvil.
No encapsulado.
Anaerobio facultativo.
Fermenta glucosa y lactosa.
Produce gas.
No produce sulfdrico.
Forma colonias planas y no viscosas en medios diferenciales.
Produce hemlisis en gelosa sangre.
Produce indol a partir del triptfano.
Decarboxila la lisina.
Fermenta el manitol.
Puede cultivarse en clulas Hep2.

ECEI.

Produce enfermedad inflamatoria de la mucosa y submucosa intestinal, similar a la


producida pr Shigella.

Bacilo Gram (-).


Inmvil.
Anaerobio facultativo.
Fermenta glucosa y la lactosa tardamente.
No produce gas.
No produce sulfdrico.
Produce indol.
Posee la capacidad de depender de plsmidos para invadir la mucosa (fimbrias).
Los antgenos O de ECEI pueden mostrar reacciones cruzadas con los
antgenos O de Shigella.

ECEH.

98
Se identific en 1982 cuando surgi un brote de colitis hemorrgica en los Estados Unidos
y se demostr que haba sido causado por un serotipo especfico de E.coli O 157: H 7.
tambin causa el Sndrome hemoltico urmico y la Prpura trombocitopnica trombtica.

Bacilo Gram (-)


Mvil.
No encapsulado.
Anaerobio facultativo.
Fermenta glucosa y lactosa.
Produce gas.
No produce sulfdrico.
Produce indol a partir del triptfano.
Decarboxila la lisina.
Fermenta el manitol.
No fermenta el SORBITOL.
Elabora citotoxinas potentes llamadas toxina I y II (similares a las de Shiga, por
su semejanza a la toxina Shiga de Shigella dysentereae tipo 1). Se conocen
tambin como verotoxinas 1 y 2.
La elaboracin de la toxina depende de la presencia de algunos fagos que porta la
bacteria.
Tienen un plsmido que permite la expresin de un nuevo tipo de fimbrias que
intervienen en la adherencia de la bacteria a la mucosa intestinal.

ECET

Constituye causa importante de diarrea de los viajeros y diarrea deshidratante en los


lactantes y nios en pases subdesarrollados.

Bacilo Gram (-)


Mvil.
No encapsulado.
Anaerobio facultativo.
Fermenta glucosa y lactosa.
Produce gas.
No produce sulfdrico.
Forma colonias planas y no viscosas en medios diferenciales.
Produce hemlisis en gelosa sangre.
Produce indol a partir del triptfano.
Decarboxila la lisina.
Fermenta el manitol.
Producen enterotoxina similar a la del clera (LT y ST) o ambas (LT/ST)

Se diagnostica por la produccin de enterotoxinas.

99
ECEA

Causa importante de diarrea infantil en pases subdesarrollados. Tiene un perodo de


incubacin de 20 a 48 horas.

Se diagnostica en clulas Hep2 (producen patrn agregativo caracterstico, esta es


una caracterstica que depende de plsmidos.
El plsmido de virulencia de ECEA tambin codifica una nueva enterotoxina ST

Vibrionaceas y Pseudomonas.

Vibrium cholereae, Vibrium comma. (agente causal del clera)

El clera constituye una enfermedad infecciosa que parece haber tenido su origen en los
deltas de los ros Ganges y Brahmaputra en Bangladesh.
Aunque en el sudeste de Asia se ha mantenido endemo epidmica, ha ocasionado distintas
pandemias desde la primera mitad del siglo XIX, constituyendo la actual, la sptima,
iniciada en 1961 en las islas Clebes, lo que ha tenido una amplia difusin al afectar
alrededor de 98 pases con un comportamiento un tanto impredecible.
Sus consecuencias en la salud se traducen por su contagiosidad, severidad y mortalidad si
no se toman las medidas de control adecuadas. Por otra parte sus repercusiones
econmicas, se expresan en los gastos de la atencin medica de enfermos, afectacin
salarial y laboral, as como su influencia sobre el comercio, turismo y otros.
La experiencia acumulada hasta el presente ha demostrado que es imposible evitar la
introduccin del clera en un pas, sin embargo, s es posible contener su propagacin con
un fuerte sistema de vigilancia epidemiolgica, as como medidas de prevencin
adecuadas.

Bacilo Gram (-) curvo, en forma de coma (2-4 mm de longitud).


Mvil (presenta flagelo polar).
Produce enterotoxina que causa el clera.
Anaerobio facultativo.
No esporulado.
Produce citocromooxidasa (oxidasa +).
Produce la enzima catalasa.
Prueba del hilo mucoide (+)
Habitantes normales del ambiente acutico.
La mayor parte de las infecciones adquiridas se debe al contacto con el ambiente
acutico o a la ingestin de alimentos del mar.
En condiciones adecuadas proliferan rpidamente (en menos de 30 minutos).
Son sensibles a Ph bajo y mueren rpidamente en soluciones por debajo de Ph 6.

100
Son resistentes a las condiciones alcalinas (crecen bien a Ph entre 8,5 y 9,5).
Crecen bien en 6 % de Cloruro de sodio.

V. cholereae y vibriones relacionados producen el clera en el hombre. Otros vibriones


pueden producir septicemias o enteritis.
Se pueden distinguir dos biotipos que producen la misma sintomatologa (V. clera clsico
y V. clera El Tor, este ltimo se caracteriza por formar una hemolisina soluble y
resistencia a diversos agentes fsicos y qumicos).

Vibrio clera O 139.

En Octubre de 1992, se desat en Madrs, India una epidemia de una enfermedad


similar al clera, las cepas elaboraban la toxina pero no aglutinaban con el antisuero
O1. Este cambio fue inesperado pues hasta la fecha se crea que slo V. clera
toxignico del serogrupo O1 era capaz de causar el clera epidmico.

Bacilo Gram (-).


Similar al serogrupo O1 en sus caractersticas bioqumicas, toxignicas y
morfolgicas, excepto en su aglutinacin al antisuero O1.
Aglutina bien con antisuero especfico O 139.
Produce citocromooxidasa (oxidasa +).
Produce la enzima catalasa.
Prueba del hilo mucoide (+).
Produce enterotoxina que causa enfermedad similar al clera.
La inmunidad adquirida contra el serogrupo O1 no protege contra infecciones por
el O 139, (tampoco las vacunas)

Patogenia.

El V. clera vive exclusivamente en el hombre. Su patogenicidad depende de su


toxigenicidad, por elaboracin de una potente enterotoxina. La susceptibilidad es
universal.
Penetra por va oral con el agua y alimentos contaminados con heces de personas
enfermas.
Produce la enfermedad llamada clera. En ella hay multiplicacin de vibriones en el
intestino delgado y liberacin de enterotoxinas. Dicha toxina provoca un aumento de la
actividad de la adenilciclasa y de la concentracin de AMPc con hipersecrecin de agua y
cloruros en la mucosa del intestino delgado.

Inmunidad.

Un ataque de clera es seguido de inmunidad a la reinfeccin pero la duracin y el grado


real de dicha inmunidad se desconoce. Despus de la infeccin aparecen en el hombre,
anticuerpos especficos en la luz intestinal (IgA secretoria). La vacunacin por inyeccin
de suspensiones densas de V. clera muertos puede conferir proteccin limitada.

101
Diagnstico de laboratorio.

Productos patolgicos.

Heces fecales.
Vmitos.

Examen microscpico.

La observacin en campo oscuro permite distinguir los bacilos en forma de comas


mviles, aunque no es un mtodo muy recomendado.

Cultivo.

- Agua de Peptona Alcalina. (enriquecimiento)


- Medio selectivo especial.

Pruebas bioqumicas.

- Oxidasa.
- Catalasa.
- Cuerda.
- Fermentacin de azucares.
- Formacin de Indol.
- Capacidad de reducir nitratos a nitritos.

Serologa.

Por reacciones de aglutinacin en lminas mediante antisueros especficos.

Determinacin del biotipo.

- Por su capacidad de producir hemlisis.


- Resistencia a determinados agentes.

Aeromonas.

Bacilo Gram (-) de vida libre.


Mvil (presenta flagelo polar).
Produce citocromooxidasa (oxidasa +).
Produce enterotoxina que causa enfermedad similar al clera.
Anaerobio facultativo.

102
No esporulado.
Produce la enzima catalasa.
Aeromona hydrphila es la especie ms importante que causa enfermedad en el
hombre.
Produce hemlisis en agar sangre.
Predomina en agua dulce y en ocasiones en animales de sangre fra (reptiles,
anfibios, peces).
Produce diarreas e infecciones extraintestinales.
No crecen en 6% de Cloruro de sodio (lo que lo diferencia del V. clera)

Plesiomonas.

Bacilo Gram (-).


Mvil (presenta flagelo polar).
Produce citocromooxidasa (oxidasa +).
Comn en reas tropicales y subtropicales.
Produce diarrea.
Algunas cepas comparten antgenos con Shigella sonnei (D).
Existe en animales de sangre fra y caliente.

Pseudomona aeruginosa.

El genero Pseudomona est compuesto por bacilos Gram (-), mviles que difunden a
travs del medio. Se encuentran ampliamente distribuidos en el suelo, el agua, las aguas
negras y el aire y es frecuente descubrirla en los ambientes hmedos hospitalarios. Puede
colonizar al ser humano normal, en el cual es un microorganismo saprfito.
Se presenta frecuentemente en pequea proporcin en la flora intestinal normal. Otras
especies de Pseudomonas ocurren en el medio pero rara vez producen enfermedades.
Crece con facilidad en los medios de cultivo, no fermenta la lactosa y forma colonias lisas
de color verdoso fluorescente y de olor aromtico "dulzn". De las colonias difunde un
pigmento verde azul hacia el medio. Algunas cepas tienen actividad hemoltica.
Es patgena slo cuando es introducida en zonas que carecen de las defensas normales y
produce enfermedad. Es muy resistente a los antibiticos. Presentan una gran
susceptibilidad a las infecciones por este microorganismo, los lactantes y prematuros,
pacientes quemados y los que han sufrido intervenciones quirrgicas o diagnsticas.
Causa infecciones de heridas donde originan un pus verde azuloso, de ah su nombre
comn (bacilo piocinico), causa tambin meningitis, septicemias infecciones urinarias
neumonas, otitis y conjuntivitis.

RESUMIENDO:

Bacilo Gram (-).

103
Mvil (presenta flagelo polar).
Se encuentra de manera aislada en parejas y ocasionalmente, en cadenas cortas.
AEROBIO obligado.
Crece con facilidad en diversos medios de cultivos.
Produce en ocasiones un olor dulzn o de uvas.
Algunas cepas producen hemlisis en gelosa sangre.
Crece bien a una temperatura que oscila entre 37 a 42C (su crecimiento a 42C
ayuda a ditinguirla de otras especies de Pseudomona).
Produce citocromooxidasa (oxidasa +).

Produce los siguientes pigmentos:

Piocianina (pigmento azuloso no fluorescente, que se difunde en el agar)


Pioverdina (pigmento fluorescente, que imparte un color verdoso al agar)
Piorrubina (pigmento que imparte un color rojo al agar)
Piomelanina (pigmento que imparte un color negro al agar)

Diagnstico de laboratorio.

Productos patolgicos.

- Pus.
- LCR.
- Sangre.
- Orina.
- Esputo.
- Secreciones conjuntivales.

Examen microscpico.

Bacilos Gram (-).

Cultivo.

En agar sangre forma colonias irregulares pigmentadas a menudo hemolticas.

Pruebas bioqumicas.

- Produccin de pigmentos.
- Prueba de oxidasa.
- Crecimiento a 42C.
- Motilidad.
- Reduccin de nitratos a nitritos.

104
Determinacin de Piocianotipos.

Proteus, Yersinia y otras enterobacterias.

Proteus.

Morfologa: Bacilos Gram (-).

Cultivo y caractersticas del crecimiento.

Los organismos del grupo Proteus crecen en medios de cultivo simples, donde sus
colonias tienden a extenderse o diseminarse por la superficie (spread). Hidrolizan
rpidamente la urea.

Especies:

P. mirabilis.
P. vulgaris.
M. morganii.
P. rettgeri.

Patogenia.

Se encuentran en la flora indgena intestinal. Son resistentes a los antibiticos (excepto P.


mirabilis que es sensible a la penicilina). Causan infecciones urinarias, septicemias y
lesiones purulentas en diferentes rganos.
Diagnstico de laboratorio.

Productos patolgicos.

- Orina.
- Sangre.
- Pus.
- etc.

Examen microscpico.

Bacilos Gram (-).

Cultivo.

Las muestras pueden sembrarse en agar nutriente o en agar sangre donde sus colonias
forman spread.
En el medio diferencial de Mc Conkey produce colonias blancas o incoloras, ya que no
ataca la lactosa. Son mviles.

105
Pruebas bioqumicas. Se determina:

- Fermentacin de azucares.
- Hidrlisis de la urea.
- Produccin de indol.
- Produccin de sulfidrico.
- Crecimiento en citrato.

Yersinia.

El genero Yersinia fue incorporado recientemente a las enterobacterias. La especie mas


conocida (Y. pestis) es el agente etiolgico de la Peste o Plaga, grave enfermedad
transmitida al hombre por una pulga, aunque tambin puede transmitirse al hombre por
microgotas en su forma neumnica.
Las otras especies patgenas (Y. pseudotuberculosis y Y. enterocoltica) provocan
afecciones menos graves que la Peste, afectando al tubo digestivo, con compromisos de
los ganglios linfticos mesentricos.
Yersinia enterocoltica es un miembro ocasional de la flora intestinal humana. Se
desarrolla mejor a 25C. Puede producir diarrea febril en el perro y el humano con
diseminacin de persona a persona por contacto ntimo. El dolor abdominal intenso puede
sugerir apendicitis y conducir a intervencin quirrgica. Puede haber iletis, adenitis
mesentrica, abscesos hepticos o esplnicos y raramente bacteriemia o endocarditis.
Los cerdos y los perros pueden constituir fuentes de infeccin. La diseminacin epidmica
puede ocurrir a travs del agua o alimentos contaminados.

Campylobacter jejuni. (antes Vibrio) fetus.

Hasta hace poco ha surgido como una causa comn de enteritis aguda. Puede aislarse de
heces en cultivos microaeroflicos incubados a 42C en un medio que contenga
Vancomicina, Polimixina B y Trimetropin.
El perodo de incubacin es de 2-10 das. No produce vmitos pero s diarreas y fiebre.
El microorganismo crece en yeyuno e leon.

Bacilo Gram (-) en forma de coma o alas de gaviota.


Mvil (presenta flagelo polar).
No forman esporas.
Microaerfilico.
Termoflico.
Produce citocromooxidasa (oxidasa +).
Produce la enzima catalasa.
Habitan en numerosas especies animales, incluyendo fundamentalmente animales
domsticos.
Causa comn de enteritis en el hombre.

106
Los bacilos gram(-) pequeos.
Las brucellas

Las enfermedades infecciosas de los animales tienen importancia para el hombre


principalmente, por las prdidas econmicas que ocasionan y por la posibilidad de que los
agentes etiolgicos se transmitan a las personas.
Las zoonosis son las enfermedades infecciosas de los animales que pueden transmitirse al
hombre. A medida que hemos ido estudiando las enfermedades infecciosas hemos visto
como algunas como el ntrax pueden ser transmitidas por animales, independientemente
del husped natural o del tipo de organismo que causa la infeccin. todas las zoonosis
tienen algunos caracteres comunes que son los siguientes:

1. Son riesgos inherentes a la profesin o actividad de las personas que estn en estrecho
contacto con animales o con sus productos, por ejemplo: veterinarios, ganaderos y
carniceros.
2. Rara vez se transmiten de persona a persona.
3. Las manifestaciones clnicas son anlogas.

107
Las brucellas son pequeos cocobacilos Gram (-), aerobios, inmviles, no esporulados y
con relativa inactividad metablica. Son parsitos obligados de los animales y del hombre,
siendo caracterstica su localizacin intracelular. Presentan, adems, cpsula.
Se conocen diferentes especies de Brucellas entre ellas tenemos:

1. Br. melitensis infecta a las cabras.


2. Br. suis infecta a los cerdos.
3. Br. canis infecta a los perros.
4. Br. abortus infecta al ganado vacuno.

La enfermedad en el hombre llamada Brucellosis (fiebre de Malta, fiebre ondulante), est


caracterizada por una fase septicmica aguda seguida por un estadio crnico que puede
prolongarse muchos aos y llegar a afectar diferentes rganos y tejidos.

Forma e identificacin:

A. Organismos tpicos: El aspecto en cultivos jvenes vara desde cocos a bacilos de 1,2
m. de largo, predominando las formas cocobacilares cortas. Los organismos son
Gram (-) pero a menudo se tien irregularmente. Puede demostrarse la presencia de
cpsula en las variantes lisas y mucoides. Estos organismos son inmviles y no
esporulados.
B. Cultivo: En medios enriquecidos, aparecen colonias pequeas, convexas y lisas a los 2
a 5 das.
C. Caractersticas del crecimiento: Las brucellas estn adaptadas a un hbitat
intracelular y sus requerimientos nutritivos son complejos. Algunas cepas han sido
cultivadas en medios sintticos compuestos por 18 aminocidos, vitaminas, sales y
glucosa. Los productos patolgicos recientemente obtenidos de fuentes animales o
humanas se inoculan generalmente en agar soya tripticasa. Br. abortus requiere 5- 10
% de CO2 para su crecimiento. Las dems especies crecen bien sin CO 2. Las brucellas
utilizan diversos carbohidratos, pero no producen cido ni gas en cantidades
suficientes como para aprovechar estas pruebas en su clasificacin. Algunas cepas
producen catalasa y oxidasa. Muchas cepas producen cido sulfidrico, los nitratos son
reducidos a nitritos. Son moderadamente sensibles al calor y a los cidos. Mueren
en la leche durante la pasteurizacin.

Patogenia.

Las brucellas viven en animales. Producen enfermedades por su capacidad invasiva,


intervienen en la aparicin de las lesiones, la liberacin de endotoxinas por autolisis de los
microorganismos.
Las brucellas son poco activas metablicamente y se adaptan con facilidad a vivir
intracelularmente.
Penetran por piel y mucosas (ingestin de leche contaminada) a partir de tejidos,
secreciones y excreciones de animales infectados.
Los adultos que manipulan animales son los mas expuestos a la infeccin brucelsica.

108
Las brucellas producen la brucellosis (fiebre ondulante, fiebre de Malta), enfermedad
febril caracterizada por una fase septicmica aguda con formacin de ndulos
granulomatosos en rganos parenquimatosos (ganglios, hgado, bazo, medula sea, etc),
seguida por un estadio crnico que puede prolongarse muchos aos y llegar a afectar
diversos tejidos con formacin de abscesos (osteomielitis, meningitis, colecistitis, etc).

Diagnstico de laboratorio.

Muestras:

Sangre para cultivo.


Material de biopsia para cultivo.
Suero para reacciones serolgicas.

Cultivo:

En medios enriquecidos:
Caldo Soya Tripticasa.
Agar Soya Tripticasa.
Medio difsico de Castaeda.
(Se incuba en 10 % de CO2.).

Serologa: Para demostrar los Acs aglutinantes.

Los haemophilus.

Es un grupo de bacilos gram (-) pequeos, que necesitan medios de cultivo enriquecidos
generalmente con sangre para su aislamiento.
Algunos forman parte de la flora microbiana normal del hombre, otros Haemophillus
influenzae son causantes de enfermedades humanas.

Haemophilus influenzae.

Se encuentra en las mucosas de las vas respiratorias del hombre. Es una causa importante
de meningitis en nios y en ocasiones produce infecciones de las vas respiratorias en
nios y adultos.

Morfologa: Bacilos Gram (-) pequeos.

Cultivo y caractersticas del crecimiento.

Se desarrollan en medios de cultivo enriquecidos con sangre calentada (agar chocolate) y


una atmsfera rica en CO2. El Haemophilus influenzae requiere para su crecimiento los
factores nutricionales X (hemina) y V (nuclesido de nicotinamida).

109
Estructura antignica:

Poseen polisacridos capsulares que permiten determinar 6 tipos (A- F) por prueba de
hinchazn de la cpsula (prueba de Neufeld) frente al antisuero especfico.

Patogenia:

Existen diversas especies de Haemophillus, algunos forman parte de la FN del hombre y


otros son importantes microorganismos patgenos. El H. influenzae puede encontrarse
normalmente en la nasofaringe, su patogenicidad depende de su capacidad invasiva, ya
que no produce exotoxina.
La presencia de la cpsula est relacionada con la virulencia, al proteger al organismo de
la fagocitosis.
La mayora de las enfermedades causadas por H. influenzae ocurren en nios menores de
tres aos y son debidas al serotipo b. El microorganismo penetra por la mucosa del aparato
respiratorio superior a partir de personas infectadas. El H. influenzae es uno de los
principales agentes causales de meningitis en los nios as como de laringotraquetis,
otitis, sinusitis, bronquitis y neumonas (primaria o secundaria a un proceso viral).

Diagnstico de laboratorio.

Productos patolgicos:

LCR.
Pus.
Sangre.
Esputo.
Etc.

Examen microscpico: Bacilos Gram (-) pequeos.

Prueba de Neufeld: Hinchazn de la cpsula (A- F).

Cultivo:

Agar chocolate, se incuba a 37C en una atmsfera rica en 10 % de CO2, durante 24 a 48


horas.

Requerimientos nutricionales:

Determinan la necesidad de los factores V y X. Para ello se siembra el microorganismo en


un medio sin sangre y si crece no requiere factor X.
La necesidad del factor V se establece mediante el fenmeno de satelitismo, consiste en
inocular estafilococos sobre una siembra del microorganismo. Despus de la incubacin a
37C durante 4 horas, si las colonias del microorganismo son mayores mientras ms cerca

110
se encuentran de la colonia de estafilococo, indica que requieren factor V, ya que los
estafilococos liberan abundantemente dicho factor en el medio.

Bordetella pertussis.

Morfologa: Bacilos Gram (-) pequeos.

Cultivo y caractersticas del crecimiento:

Se cultiva en el medio especial de Bordet Gengou (agar- papa- sangre- glicerol), donde
forman colonias pequeas, lisas, convexas, con un lustre perlado en 36 a 72 horas. Dichas
colonias pueden estar rodeadas por un estrecho halo de hemlisis.
La B. pertussis vive en el hombre. Los microorganismos encapsulados son violentos y por
desintegracin liberan una endotoxina que interviene en la produccin de lesiones. Penetra
por la va respiratoria a partir de pacientes. Causa la tosferina. La mayora de los casos de
enfermedad ocurren en nios pequeos. Los microorganismos se adhieren y multiplican en
el epitelio superficial de la trquea y los bronquios, donde interfiere en el movimiento
ciliar. No invade la sangre. La endotoxina irrita las clulas superficiales y crea sntomas
catarrales (tos paroxstica y linfocitosis).

Legionella pneumophila.

Es la bacteria causal del brote epidmico (que ha recibido tanta publicidad) de una
enfermedad respiratoria que atac a las personas que asistieron a una convencin de
legionarios estadounidenses en Filadelfia en 1976, se han diagnosticado
retrospectivamente otros brotes que ocurrieron en 1965 o antes y en todo el mundo. Desde
1947 han aparecido infecciones espordicas con sntomas o sin ellos.
Las legionellas se tien mal, aparentemente es Gram (-) y se aslan con frecuencia de
biopsia de pulmn pero rara vez de liquido pleural, sangre o esputo.
La infeccin NO se contrae por el contacto con los pacientes enfermos, sino que se
requiere del ambiente por aspiracin de aerosoles o polvo asociados o con excavaciones
del suelo.
Hay cuando menos 4 tipos antignicos.
La infeccin asintomtica puede ser comn y se descubre slo por la elevacin de los Acs
especficos. La enfermedad clnica puede manifestarse por la aparicin brusca de fiebre
alta, escalofros, malestar, tos seca, hipoxia, diarrea y postracin o delirio. El Rx de trax
revela consolidacin a menudo multilobar irregular. Puede haber leucocitosis,
hiponatremia, hematuria y pruebas de funcionamiento heptico anormales. Durante las
epidemias, las tasas de mortalidad han sido entre el 10 y el 20 %.
El diagnstico puede basarse en un notable incremento en el titulo de Acs sricos a los
Ags de la legionella lo cual se descubre por IF o por tincin inmunofluorescente del
microorganismo en el tipo pulmonar obtenido por biopsia o en la necropsia. El diagnstico
rara vez se hace por el crecimiento del microorganismo a partir de especmenes obtenidos
en vida.

111
La legionella es susceptible in vitro a diferentes medicamentos antimcrobianos. La
eritromicina (500 mg) por va EV cada 6 horas ha sido eficaz en el tratamiento de la
infeccin humana as como de la enfermedad experimental en los cobayos.

Bacteroides.

Es un gran grupo de anaerobios estrictos, no esporulados, formado por bacterias Gram (-)
que son muy pleomrficas.
Crecen en forma rpida en medios de cultivo complejos.
Los polisacridos capsulares, parecen ser factores de virulencia importantes.
Son habitantes normales de la parte alta del sistema respiratorio, sistema genital y sistema
digestivo. Constituyen mas del 95 % de la flora fecal normal. Las especies mas
frecuentemente encontradas son:

Bacteroides fragilis (intestino grueso).


Bacteroides melaninognicus ( orofaringe).
Bacteroides oralis.

Puede causar infecciones en:

Pulmn.
Encfalo.
Peritoneo.
Pelvis.
Lesiones ulcerativas de piel y mucosas.

Las bacterias espirilares. Chlamydias.


Las espiroquetas constituyen un grupo grande y heterogneo de organismos espirilares
mviles. Son bacilos de pared delgada, flexible y forma helicoidal. Se desplazan mediante
ondulacin de un filamento axial que est enrollado a lo largo del cuerpo celular. Tres
gneros contienen patgenos importantes para la especie humana: Treponema, Borrelia y
Leptospira.

Treponema pallidum:

La Sfilis es una enfermedad infecto contagiosa, de evolucin esencialmente crnica(de


varios aos).

112
An cuando antes de 1905, algunos investigadores haban observado el Treponema, fueron
en el ao sealado Schaudinn y Hoffman, quienes comunicaron con toda certeza su
hallazgo.
Si bien existen evidencias de haberse padecido la enfermedad desde tiempos
inmemoriales, adquiere carcter epidmico y pandmico desde el descubrimiento de
Amrica. La contrajo la tripulacin de Coln desde el primer viaje, difundindose
rpidamente por toda Europa.
La palabra Sfilis proviene del nombre de un pastor llamado Sfilo, quien contrajo la
enfermedad como castigo de los dioses.

Morfologa e identificacin:

A Microorganismos tpicos: Es una bacteria espirilar, flexible, activamente mvil, que


miden alrededor de 0,2 m de ancho y 5 a 15 m de largo. Sus vueltas de espira estn
a 1 m una de otra. Las espirales son tan delgadas que no se ven con facilidad a menos
que se use la Inmunofluorescencia o la iluminacin de campo oscuro. No se tien bien
con los colorantes de anilina, aunque reducen el nitrato de plata a plata metlica, la
cual se deposita sobre su superficie en tal forma que los treponemas pueden ser
observados en los tejidos. (Impregnacin argntica de Levaditi). Los treponemas
generalmente se reproducen por fisin transversal y los microorganismos resultantes
pueden quedar adheridos uno al otro durante cierto tiempo.
B Cultivo: Treponema Pallidum es patgeno para el hombre pero no ha podido ser
cultivada en medios artificiales, pero s en cultivo de clulas de conejo cola de
algodn. Los treponemas no patgenos por ejemplo la cepa de Reiter pueden cultivarse
in vitro en condiciones de anaerobiosis.
C Caractersticas del crecimiento: Debido a que no ha podido lograrse el cultivo de T.
pallidum, no se han podido efectuar estudios sobre su fisiologa. La cepa de Reiter
crece en un medio definido de 11 aminocidos, vitaminas, sales minerales y
seroalbmina. En lquidos apropiados de suspensin y en presencia de sustancias
reductoras, T. pallidum puede permanecer mvil por tres a seis das a 25C; en sangre
total o en plasma almacenados a 4C, los microorganismos permanecen viables por
cuando menos 24 horas, lo cual es de posible importancia en las transfusiones de
sangre.
D Reacciones a los agentes fsicos y qumicos: La desecacin mata a las espiroquetas
rpidamente, as como lo hace la elevacin de la temperatura a 42C. Los treponemas
pierden su movilidad y mueren rpidamente por efecto de los arsenicales trivalentes, el
mercurio o el bismuto; esta accin mortal es acelerada por las temperaturas altas y es
parcialmente reversible y los microorganismos pueden ser reactivados por compuestos
que contengan grupos SH (por ejemplo, la cistena o el BAL [dimercaprol] ). La
penicilina es treponemicida en pequeas concentraciones, pero la velocidad de muerte
es lenta, quiz debido a la inactividad metablica y la lenta velocidad de crecimiento
del microorganismo (se ha estimado el tiempo de generacin en 30 horas). En la sfilis
no se ha demostrado resistencia a la penicilina.
E Variacin: Se ha postulado para T. pallidum un ciclo vital que incluye etapas
granulares y cuerpos esfricos cistoideos, adems de la forma espiroquetal. La
capacidad que en ocasiones muestra T. pallidum para atravesar los filtros
bacteriolgicos he sido atribuida a la filtrabilidad de la etapa granular.

113
Patogenia.

El T. Pallidum vive exclusivamente en el hombre y su patogenicidad depende de sus


caractersticas invasivas.. Esta enfermedad puede ser congnita o adquirida por contacto
sexual. Tambin se puede adquirir por va transplacentaria y por medio de transfusiones.

A Sfilis adquirida: Se adquiere por contacto sexual y la lesin infecciosa se localiza en


la piel y mucosas de los rganos genitales. Sin embargo, en 10 a 20 % de los pacientes,
la lesin primaria es intrarrectal, perianal o bucal. Puede presentarse en cualquier parte
del cuerpo. Es probable que T. Pallidum penetre a travs de las mucosas intactas o de
una excoriacin de la epidermis. Las espiroquetas se multiplican localmente en el sitio
de entrada, algunas se diseminan a los ganglios linfticos locales y alcanzan la
corriente sangunea. De 2 a 10 semanas despus de la infeccin aparece en el sitio de
entrada una ppula que se desintegra para formar una lcera de base limpia y dura
(chancro duro). Esta lesin primaria cura espontneamente, varias semanas ms tarde
se desarrollan las lesiones secundarias, stas consisten en un exantema mculo
papuloso rojo en todas partes del cuerpo (que incluye palmas de las manos y plantas de
los pies, ppulas hmedas y plidas (condilomas) en la regin ano genital, axilas y
boca. Pude haber tambin meningitis sifiltica, coriorretinitis, hepatitis, nefritis (del
tipo de complejo inmunitario) o periostitis. Las lesiones secundarias tambin sanan
espontneamente. Tanto las lesiones primarias como secundarias son ricas en
espiroquetas y muy infecciosas; las lesiones contagiosas pueden ocurrir dentro de los
primeros tres a cinco aos despus de la infeccin, pero a partir de entonces el
individuo ya no es infeccioso. La infeccin puede permanecer subclnica, pasando el
paciente por el estadio primario, por el secundario, o por ambos, sin sntomas ni
signos: sin embargo, tales individuos pueden desarrollar las lesiones terciarias tardas.

B Sfilis terciaria: Aproximadamente 30 % de los individuos con infecciones sifilticas


evolucionan espontneamente hacia la recuperacin total sin tratamiento. En otro 30 %
la infeccin no tratada permanece latente (lo cual puede ponerse de manifiesto
principalmente por las reacciones serolgicas positivas). El resto de los enfermos
evoluciona hacia el perodo terciario, caracterizado por el desarrollo de lesiones
granulomatosas, (llamados gomas) en la piel, huesos e hgado, cambios degenerativos
del SNC, o lesiones cardiovasculares. En todas las lesiones terciarias los treponemas
son muy raros y por lo tanto NO son contagiosas. La exagerada respuesta del tejido
debe atribuirse a alguna forma de hipersensibilidad hacia los organismos infectantes.
Sin embargo ocasionalmente se encuentran treponemas en los ojos o el sistema
nervioso central en la sfilis tarda.

C Sfilis congnita: Una mujer sifiltica embarazada puede transmitir el microorganismo


al feto a travs de la placenta a partir de la 10 a la 15 semanas de gestacin. Algunos
de los fetos infectados mueren dando lugar al:

- Aborto.
- Otros nacen muertos.

114
Unos cuantos nacen vivos pero desarrollan los signos de Sfilis congnita durante la
infancia como:

- Queratitis intersticial.
- Dientes de Hutchinson.
- Nariz en silla de montar.
- Tibia en sable. (periostitis)
- Y otras anomalas del SNC.

El tratamiento adecuado a la madre durante el embarazo, previene la sfilis congnita. El


ttulo de reaginas en la sangre del nio, asciende con la infeccin activa; pero baja con el
tiempo si los anticuerpos slo fueron transmitidos pasivamente por la madre. En la
infeccin congnita, el nio elabora anticuerpos IgM antitreponemas.

D Enfermedad experimental: El conejo puede ser infectado experimentalmente, en la


piel, testculos y ojos con Treponema pallidum humano. El animal desarrolla un
chancro rico en espiroquetas y el microorganismo persiste en los ganglios linfticos, el
bazo y la mdula sea durante toda la vida del animal aunque no haya enfermedad
progresiva.

Diagnstico de laboratorio.

A Productos patolgicos:

- Exudados o lquidos tisulares de las lesiones superficiales tempranas para la


demostracin de Treponema pallidum. (campo oscuro).

- Suero para pruebas serolgicas.

B Examen microscpico: Observacin en campo oscuro buscando las espiroquetas


mviles caractersticas.

C Inmunofluorescencia: Se extiende lquido de tejidos o exudado en un portaobjetos, se


seca al ambiente, se enva al laboratorio. Se fija, se colorea con suero antitreponemas
marcado con fluorescena y se examina con el microscopio de IF para observar las
tpicas espiroquetas fluorescentes.

D Pruebas serolgicas para Sfilis:

Pruebas de antgenos NO treponmicos.


Pruebas con anticuerpos treponmicos.

Inmunidad.

Un individuo con sfilis activa o pian, parece ser resistente a una superinfeccin por T.
pallidum. Sin embargo, si la sfilis temprana o el pian, son tratados prontamente y en

115
forma adecuada, la infeccin es erradicada y el individuo se hace otra vez completamente
susceptible. Las diversas respuestas inmunitarias por lo general no erradican la infeccin
ni detienen su progreso.

Leptospiras.

Morfologa e identificacin.

Microorganismos tpicos: Son bacterias espirilares, delgadas, flexibles, de 5 a 15 m de


longitud, que a menudo tienen uno de sus extremos encurvados, Sus vueltas de
espira estn muy apretadas, encontrndose de 0,1 a 0,2 m una de otra. Tienen un
activo movimiento de rotacin, pero hasta la fecha no se les ha descubierto flagelos.
Las micrografas electrnicas muestran un fino filamento axial y una membrana
delicada. La espiroqueta es tan delicada que en el campo oscuro puede aparecer
solamente como una cadena de cocos diminutos.

B Cultivo: Las leptospiras crecen mejor en condiciones aerobias entre 28 y 30C. Se


desarrollan en medios de cultivo semislidos enriquecidos con suero fresco de conejo.
(Fletcher u otros), donde producen colonias redondas de 1 a 3 mm de dimetro en seis
a diez das. Tambin pueden aislarse por inoculacin intraperitoneal de cobayos y de la
membrana corioalantoidea de huevos embrionados.
C Requerimientos para el crecimiento: Obtienen su energa de la oxidacin de los
cidos grasos de cadena larga y no pueden utilizar aminocidos o carbohidratos como
fuentes energticas importantes. Su recurso principal para la obtencin del nitrgeno
son las sales de amonio. El microorganismo puede sobrevivir durante largos perodos
en agua, particularmente a Ph alcalino.

Patogenia.

Las leptospiras tienen como hbitat natural a los animales (roedores, cerdo, ganado, etc).
La infeccin humana es el resultado de la ingestin de agua o alimentos contaminados con
orina y/o heces de animales infectados por el microorganismo, menos frecuentemente los
organismos pueden penetrar por piel o mucosas. Despus de un perodo de incubacin de
una a dos semanas, se presenta una iniciacin febril variable durante las cuales las
espiroquetas se encuentran en la circulacin sangunea. El microorganismo se establece
entonces en los rganos parenquimatosos (hgado, rin, etc), produciendo hemorragias y
necrosis que se manifiestan por: ictericia, insuficiencia renal, sangramiento y anemia. El
padecimiento a menudo es bifsico. Despus de una mejora inicial, se desarrolla la
segunda fase cuando sube el ttulo de anticuerpos IgM. Se manifiesta con frecuencia como
una meningitis asptica, con cefalea intensa, rigidez del cuello y pleocitosis en el LCR.
La hepatitis y la nefritis tambin pueden recurrir y es posible que haya lesiones en piel,
msculos y ojo. El grado y distribucin de la invasin de rganos varan en los diferentes
padecimientos producidos por distintas leptospiras en las diversas partes del mundo.
Muchas infecciones son leves o subclnicas. En los individuos con leptospirosis, es
particularmente frecuente, la hepatitis. La orina del hombre puede contener espiroquetas
en la segunda y tercera semana de la enfermedad.

116
Inmunidad.

Despus de la infeccin sigue una inmunidad slida especfica del serovar, pero pueden
producirse reinfecciones con serovares diferentes.

Diagnstico de laboratorio.

A Productos patolgicos.

- Sangre. Para observacin microscpica, cultivo e inoculacin a animales (cobayos).


- Suero. Para reacciones de aglutinacin.

B Observacin microscpica.

- Sangre.
- Orina.

El examen microscpico al campo oscuro o frotis gruesos teidos con Giemsa, muestran
ocasionalmente leptospiras en sangre recin obtenida de enfermos con infeccin temprana.
El examen de orina en campo oscuro sometida a centrifugacin puede ser positivo.

C Cultivo. Los medios de cultivo para aislamiento de leptospiras deben contener suero
de conejo al 10 % (son lquidos o semislidos). El crecimiento es lento y es necesario
conservar los cultivos varias semanas.

D Inoculacin a animales. Una tcnica muy sensible para el aislamiento de leptospiras


consiste en la inoculacin intraperitoneal en cricetos o cobayos jvenes de plasma y
orina recin obtenidos. A los pocos das las espiroquetas pueden ser demostradas en la
cavidad peritoneal; a la muerte del animal (8 a 14 das), se observan lesiones
hemorrgicas con espiroquetas en muchos rganos.

E Serologa. Durante la infeccin por leptospiras, se desarrollan lentamente anticuerpos


aglutinantes que alcanzan ttulos muy altos (1: 10,000 o mayores), alcanzando su
mximo de cinco a ocho semanas despus de la infeccin. El anticuerpo leptospiral
puede descubrirse mediante pruebas macroscpicas de aglutinacin en portaobjetos,
utilizando leptospiras muertas o por aglutinacin microscpica de microorganismos
vivos. La absorcin cruzada de los sueros puede permitir la identificacin de una
respuesta de anticuerpo especfica para un serovar. La aglutinacin de suspensiones
vivas es ms especfica para el serovar y puede ir seguida por lisis. En ocasiones se
utiliza la hemaglutinacin pasiva de eritrocitos con leptospiras adsorbidas.

Chlamydias.

Constituyen un grupo de parsitos intracelulares que estn ntimamente relacionados con


las bacterias Gram.(.-).

117
Se dividen en 2 especies: trachomatis y psitacii, sobre la base de:

Su composicin antignica,
Inclusiones intracelulares sensibles a las sulfonamidas y
Produccin de enfermedad.

Todas muestran caractersticas morfolgicas semejantes, comparten un antgeno comn y


se multiplican en el citoplasma de sus clulas husped mediante un ciclo distintivo de
desarrollo

Al principio eran consideradas como virus por su parasitismo intracelular, sin embargo, se
diferencian en varias caractersticas:

1. Poseen ADN y ARN.


2. Se multiplican por fisin binaria.
3. Tienen pared celular rgida semejante al tipo de pared celular de las bacterias, pero que
carece de cido murmico y no es susceptible a la accin de la lisozima.
4. Poseen ribosomas y los virus NO.
5. Tienen diversas enzimas activas metablicamente; por ejemplo: liberan CO 2 a partir de
la glucosa. Algunos pueden sintetizar folatos.
6. Su crecimiento puede ser inhibido por mltiples antimicrobianos, en especial
tetraciclinas y eritromicinas.

Las Chlamydias pueden considerarse bacterias Gram (-) que carecen de algunos
mecanismos para la produccin de energa metablica y no pueden sintetizar ATP. Este
defecto las obliga a una existencia intracelular, donde la clula husped proporciona los
intermediarios ricos en energa.

Tienen un ciclo de reproduccin en tres fases:

- Adherencia.
- Penetracin.
- Transformacin del cuerpo inicial y formacin de cuerpos elementales hijos.

Todas comparten una sucesin general de etapas en su reproduccin. La partcula


infecciosa es una clula pequea (cuerpo elemental) de aproximadamente 0,3 m de
dimetro con un nucleoide denso al paso de los electrones; ste es ingerido por la clula
husped por fagocitosis. A partir de la membrana superficial de la clula husped, se forma
una vacuola alrededor de la pequea partcula. Esta partcula pequea se reorganiza en una
de mayor tamao (cuerpo reticular, cuerpo inicial) que mide aproximadamente 0,5 a 1 m,
la cual se encuentra desprovista de nucleoide denso a los electrones. Con la vacuola unida
a la membrana, crece de tamao el cuerpo reticulado y se divide repetidas veces por fisin
binaria. Finalmente, la vacuola completa se encuentra llena de pequeas partculas
derivadas de la fisin binaria de los cuerpos reticulares para formar una inclusin en el
citoplasma de la clula husped. Las pequeas partculas recin formadas pueden liberarse

118
de la clula husped para infectar a otras clulas. El ciclo de desarrollo requiere de 24 a 48
horas.

La Chlamydia trachomatis produce:

- Tracoma: Infeccin ocular que sigue un curso crnico y evoluciona hacia la ceguera.
Se conoce desde la antigedad. Fue bien descrita en el papiro de Ebers, el cual se
escribi en Egipto hace 3,800 aos. Es una queratoconjuntivitis crnica que comienza
con cambios inflamatorios agudos en la conjuntiva y en la crnea y que progresa hasta
producir fibrosis y ceguera.

Los inmunotipos D a K de C. trachomatis son causa comn de enfermedades venreas e


infeccin ocular como:

- Conjuntivitis de inclusin: Se debe a una autoinoculacin con secreciones genitales y


se le llam inicialmente conjuntivitis de las piscinas. Tambin puede ser adquirida a
travs del paso por el canal del parto.
- Neumona neonatal: (contrada al pasar por el canal del parto).
- Uretritis NO gonoccica.
- Raramente produce epididimitis en varones.
- En mujeres causa: cervicitis, salpingitis y enfermedad inflamatoria plvica.

Los inmunotipos L1 a L3 de C. trachomatis producen el Linfogranuloma venreo


(LGV), que es una enfermedad sexualmente transmitida que se caracteriza por adenitis
inguinal supurativa que es comn en clnicas tropicales.

Mycoplasma.

Se trata de clulas muy pequeas que carecen de pared celular estando limitadas solamente
por una membrana citoplasmtica, lo que las hace adoptar formas dismiles (esfricas,
piriformes, filamentosas). La especie ms importante para la medicina es el Mycoplasma
pneumoniae, que provoca una infeccin respiratoria conocida como Neumona atpica
primaria.

Rickettsias.

Pequeos cocobacilos pleomrficos que se tien mal con el colorante de Gram pero
pueden observarse al microscopio coloreados por tcnicas especiales. Las clulas tienen
todas las estructuras de las bacterias Gram (-) pero son parsitos intracelulares.
Las Rickettsias son parsitos naturales de los artrpodos pudiendo afectar a los animales
superiores y al hombre, produciendo el tifus epidmico y diversas reacciones febriles.

119
Flora normal del cuerpo humano.
Un nmero indeterminado de microorganismos suelen hallarse en forma transitoria o
permanente en diferentes zonas anatmicas del cuerpo humano, tanto en reas externas
(piel, mucosas, etc), como en reas internas (faringe, intestino, vagina, etc), sin que esto
signifique necesariamente que estn produciendo a esos niveles cuadros infecciosos.
Estos microorganismos son considerados como miembros de la flora microbiana normal.
El trmino flora microbiana normal se refiere a la poblacin de microorganismos que
residen en piel y membranas mucosas de personas normales sanas. Es dudoso si existe una
flora viral normal en el hombre.
La piel y las mucosas hospedan siempre a una gran variedad de microorganismos, los cuales
pueden ser divididos en 2 tipos:

120
- Flora residente.
- Flora transitoria.

La flora residente. Est compuesta de tipos relativamente fijos de microorganismos, los


cuales se encuentran constantemente en un sitio dado a una edad dada. Si se les transforma,
se restablece inmediatamente con rapidez.
Ej: Lavado de las manos en el acto quirrgico.

La flora transitoria. Est formada por microorganismos no patgenos o potencialmente


patgenos hospedados en la piel o las mucosas durante horas, das o semanas, provienen del
ambiente, no producen enfermedad y no se establecen por si mismos permanentemente sobre
la superficie.
Los miembros de la flora transitoria son generalmente de poca significacin, sin embargo, si
la flora residente sufre alteraciones, los microorganismos transitorios pueden colonizar,
proliferar y producir enfermedad.

Papel de la flora residente.

Los microorganismos que estn siempre presentes en la superficie del cuerpo son
comensales. Su presencia no es esencial para la vida ya que se pueden criar animales libres
de grmenes que carecen completamente de una flora microbiana normal.
Sin embargo la flora residente de algunos sitios desempea un papel definido en el
mantenimiento de la salud y de las funciones normales.
Algunos miembros residentes de la flora intestinal sintetizan vitamina K y ayudan a la
absorcin de los nutrientes.
En las mucosas y la piel, la flora residente normal, puede prevenir su colonizacin por
bacterias patgenas y finalmente la produccin de enfermedad mediante el proceso de
interferencia microbiana.
Por otro lado los miembros de la flora normal pueden por si mismos causar enfermedades
bajo ciertas condiciones. Ej:

- Cndida albicans.
- Enterobacterias.
- Estreptococo viridans.
Estos microorganismos por estas razones se les denomina oportunistas.

Flora normal de la piel.

Debido a su constante exposicin y contacto con el ambiente, la piel es capaz de albergar


microorganismos transitorios. Sin embargo, existe una flora residente constante y bien
definida, modificada en diferentes sitios anatmicos por las secreciones, el hbito de llevar
ropa o la proximidad de las mucosas (boca, nariz y reas perianales).
Los microorganismos que predominan son:

- Bacilos difteroides (aerobios o anaerobios).


- Estafilococos aerobios (S. epidermidis) y estafilococos anaerobios (peptococos).
- Bacilos Gram (+) aerobios.

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- Estreptococos alfa hemolticos (viridans).
- Estreptococos faecalis (enterococos).
- Bacilos coliformes Gram (-).
- Acinetobacter.
- A veces hongos y levaduras en los pliegues de la piel.
- Algunas mycobacterias cido resistentes no patgenas en reas ricas en secreciones
sebceas como: genitales externos, odo externo, etc.

Flora normal de la boca y de la parte alta del sistema respiratorio.

En el momento del nacimiento son estriles aunque pueden contaminarse a su paso por el
canal vaginal.

4 a 12 horas despus del nacimiento se establecen:

- Estreptococo viridans.

En los primeros meses de la vida:

- Estafilococos (aerobios y anaerobios).


- Diplococos Gram (-).
- Difteroides.
- Ocasionalmente lactobacilos.

Cuando comienza la denticin:

- Espiroquetas anaerobias.
- Bacteroides.
- Fusobacterias.
- Vibriones anaerobios.
- Lactobacilos.

En el adulto:

- Actinomicetos (amgdalas).
- Levaduras (boca).

Los organismos que predominan en el sistema respiratorio alto, particularmente en la faringe


son:

- Estreptococos (no hemolticos y alfa hemolticos).


- Neisserias.
- Estafilococos.
- Difteroides.
- Algunas especies de haemophillus.
- Neumococo.
- Mycoplasma.

122
- Bacteroides.

Fosas nasales.

- Corynebacterias.
- Estafilococos (aureus y epidermidis).
- Estreptococos.

Papel de la flora normal de la boca en las caries dentales.

Flora normal del intestino.

Al nacer: es estril pero pronto son introducidos con el alimento.

En nios amamantados:
- Estreptococos lcticos.
- Lactobacilos.

Despus de la ablactacin:
- Coliformes.
- Cndida albicans, etc.

Flora normal de la Uretra.

La porcin anterior de la uretra de ambos sexos contiene un nmero pequeo de los mismos
tipos de organismos hallados en la piel y el perin.

Flora normal de la vagina.

Al nacer:

- Lactobacilos de Doderlein, los que persisten mientras el Ph es cido. Ph neutro (hasta


la pubertad, mezcla de cocos y bacilos.

Pubertad:

- Los Lactobacilos reaparecen contribuyendo al Ph cido.

Menopausia:

Los Lactobacilos disminuyen y reaparece la flora mixta

La flora normal incluye:

- Clostridios.

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- Estreptococos anaerobios.
- Estreptococos hemolticos del grupo B.
- Bacterias coliformes.
- Cndidas s/p.

Flora normal de la conjuntiva:

- Difteroides (Corynebacterium xerosis).


- Neisserias.
- Bacilos Gram (-) pequeos (Moraxellas).
- Estafilococo epidermidis.
- Estreptococos no hemolticos.

Infecciones nosocomiales. Concepto, clasificacin.


Las infecciones nosocomiales son las que se adquieren dentro del hospital y que pueden
manifestarse durante el internamiento del paciente o despus del mismo.
Su incidencia constituye un indicador de la calidad de la atencin mdica.
Estas infecciones son causa frecuente de morbilidad y mortalidad para los pacientes que se
encuentran hospitalizados, sin olvidar que tambin pueden afectar al personal que all
labora y al personal de la comunidad que de cualquier modo interacta con este medio.
La magnitud de esta problemtica difiere en funcin de la complejidad del servicio de
asistencia, evalundose el incremento de riesgo de adquisicin de una infeccin, entre
otros factores, por la gravedad de la enfermedad de base del paciente que all se encuentra
y la agresividad de los mtodos de diagnstico y tratamiento.
As los pacientes ingresados en servicios de Cuidados Intensivos, Neonatales, de Dilisis y
Hemodilisis, Oncologa, Hematologa y otros, deben ser objeto de una particular
atencin.
Las definiciones que se recomienda utilizar, para hacer comparable los trabajos de los
investigadores de esta rama en el mundo, son las emitidas por el Centro para el Control de
Enfermedades de Atlanta, Georgia, en Estados Unidos (Center for Disease Control)(CDC),
donde se define como nosocomial a cualquier infeccin en la que:
No existen evidencias de que se encontraba presente o en perodo de incubacin al
momento del ingreso al hospital.
Aparece despus de egreso y se relaciona con la hospitalizacin.
La infeccin de recin nacido que se adquiere como resultado del paso a travs del canal
del parto.

No se considera nosocomial:

1. La infeccin que ocurre como complicacin o extensin de otra presente al


momento del ingreso, a menos que:
Se evidencie un cambio de patgeno.
Los datos clnicos sugieran nueva infeccin.

124
2. La infeccin en un nio que se sepa o se demuestre que ha sido adquirida por va
transplacentaria (herpes simple, toxoplasmosis, rubeola, citomegalovirus y sfilis) y
que comienza precozmente tras el nacimiento.

En realidad, la evidente relacin con la hospitalizacin es suficiente para el diagnstico de


sepsis nosocomial, independientemente del momento de aparicin, durante la estada o
despus del egreso.
Hacemos la observacin, que para infecciones del plano operatorio se consideran
intrahospitalarias aquellas que se presenten en los 30 das siguientes a la intervencin y
hasta el ao, en el caso que se haya colocado una prtesis o implante.
Cada infeccin tiene sus caractersticas propias y deber ser valorada individualmente, por
ejemplo,es razonable considerar como IIH, la infeccin endgena de un paciente,
independientemente de si el organismo causal era portado por el paciente antes de su
admisin al hospital o fue adquirido posteriormente, si el desarrollo de la enfermedad
puede ser atribuido a procederes ejecutados en el hospital.

Antecedentes histricos:

El problema de las IIH se hizo patente desde el comienzo de los hospitales como
instituciones de caridad, en el ao 325 d.n.e., pero su presencia ligada a la ciruga es tan
antigua como las intervenciones quirrgicas de trepanacin de crneo, reducciones de
fracturas y otras, practicadas por el hombre desde hace 3000 aos a.n.e.
La historia de la medicina tiene destacadas presencias, que dedicaron su quehacer al
conocimiento y prevencin de las IN, ejemplos son Semmelweis (1818-1865), toclogo
hngaro, que fue el primero en exigir el lavado escrupuloso de las manos y uso del agua
clorada, para evitar las infecciones en su servicio de Maternidad; Louis Pasteur (1822-
1895) que estudi el proceso de fermentacin en la cerveza y los vinos y demostr que se
deba a los microorganismos procedentes del ambiente y de manera muy avanzada para su
poca, plante que la causa de la putrefaccin en el tejido animal se deba a la presencia de
estos mismos grmenes; Jos Lister (1827-1912) eminente cirujano ingls que public el
estudio El principio antisptico en la prctica quirrgica y Roberto Koch (1843-1910)
bacterilogo alemn, que demostr que las bacterias constituan un agente causal de
infecciones y public en 1877 La causa de infeccin en las heridas.
El conocimiento del problema mediante estudios aislados, se inicia ms recientemente, en
la dcada de los 50, con los estudios de focos de infeccin en los hospitales, por
investigadores de Inglaterra, Escocia, y del CDC de Atlanta. Posteriormente, en los aos
60 se llevan a cabo estudios ms sistemticos y organizados y es en la dcada de los 70 en
que surgen en muchas partes del mundo Programas de Vigilancia y Control de las
Infecciones Nosocomiales.
En Cuba, los precursores de la antisepsia fueron los doctores Raymundo Menocal y
Gabriel Casuso, cirujanos que a finales del siglo XIX implantaron en el pas, las tcnicas
descritas por Lister.
En pocas ms recientes se fueron dando pasos que nos permitieron estar a la altura del
desarrollo internacional, y as podemos mencionar las investigaciones realizadas en las
dcadas de los aos 60 -70, donde se logra el conocimiento de la incidencia de la IIH en
Institutos y Hospitales del pas.

125
En 1968 se crea el primer Comit de Prevencin de la Infeccin Hospitalaria en el
Hospital Clnico Quirrgico Enrique Cabrera , que ya en el 1970, el Ministerio de Salud
Pblica, hace extensivo a todos los hospitales del pas.
En el ao 1974-1975, en la Ciudad de la Habana, se estructura la funcin de la Enfermera
de Vigilancia Epidemiolgica, que pas a constituir uno de los pilares ms importantes en
este campo.
En 1983 se aprueba el Programa de Prevencin y Control de las Infecciones
Hospitalarias, que se aplic con carcter nacional y se cre por resolucin ministerial, un
grupo de expertos llamado, Grupo Nacional para la Prevencin y Control de la Infeccin
Hospitalaria. En 1984 se publica el Reglamento y Normas Nacionales para la
Prevencin y Control de la Infeccin Hospitalaria. Estos documentos que constituyen
instrumentos de trabajo, han sido actualizados peridicamente.

Mtodos de control y lucha contra la infeccin intrahospitalaria o nosocomial.

La vigilancia epidemiolgica responde a dos o tres modelos segn los diversos


pases.
El modelo americano se basa en el epidemilogo clnico que lleva a cabo una
vigilancia fundamentada en los informes del laboratorio y en el estudio de los
enfermos directamente, basndose en estudios de incidencia.
El modelo del Reino Unido, se basa en los aislamientos significativos que se
realizan de marcadores microbianos y se lleva directamente por el microbilogo
clnico.

En la prctica, el microbilogo avezado puede dar la alerta en la identificacin de nuevas o


potenciales infecciones, as como en la identificacin de brotes epidmicos donde se
consigue la identificacin del agente causal, pero como no a todos los pacientes
infectados, se les realiza cultivo, ni todos los agentes infecciosos pueden ser fcilmente
identificados, basar la vigilancia exclusivamente en los cultivos microbiolgicos, no es
suficiente para el control de la infeccin y las informaciones disponibles en el laboratorio
de microbiologa deben ser completadas por las informaciones clnicas.
El Laboratorio puede tomar parte activa en la prevencin de la IIH, slo si en el hospital
existe un programa de control organizado, con un Comit que formula la poltica
hospitalaria con relacin a los factores implicados en el tema y un equipo
multidisciplinario de trabajo sensibilizado con la situacin.
La constitucin de este equipo, el papel especfico de cada trabajador, y su tiempo de
dedicacin, depende del tamao y naturaleza de la institucin y de la naturaleza del
programa local y nacional.
En Cuba, el trabajador base de este programa es usualmente un personal de enfermera
especialmente entrenado, que se conoce con el nombre de Enfermera Vigilante
Epidemiolgica, que en estrecha coordinacin con el microbilogo, epidemilogo, y el
resto de personal involucrado, llevan en la prctica las tareas de este Programa,
unificndolas en el trabajo de los Comits de Control y Prevencin de la IIH.
En general, se plantean mtodos de lucha contra la infeccin que se aplican en los
hospitales, y que el conocido esquema de Eickhoff clasifica como mtodos de eficacia
demostrada, de posible utilidad y de ineficacia probada.

126
Entre los mtodos de eficacia demostrada destaca la esterilizacin, el lavado de manos, el
sistema cerrado de recogida de orina, los cuidados del catter endovenoso, algunos tipos
de profilaxis antimicrobiana perioperatoria y la utilizacin restringida de equipos de
terapia respiratoria.
Los mtodos cuya eficacia es dudosa, aunque pueden ser tiles en la clnica son, el
aislamiento de los enfermos y la educacin y concienciacin del personal de los
hospitales.
Entre las actuaciones de ineficacia probada incluyen procedimientos tan difundidos como
la desinfeccin de suelos, paredes y superficies, la nebulizacin ambiental con
desinfectantes, el uso de rayos ultravioletas, el flujo laminar, la quimioprofilaxis en ciruga
limpia, el uso de filtros en sueros endovenosos y el muestreo microbiolgico ambiental.
Existe consenso en sealar el gasto econmico improcedente debido al empleo de estas
medidas ineficaces y muy costosas.
Entre los procederes microbiolgicos, tanto el muestreo ambiental, como otros estudios
microbianos, deben ser empleados cuando permitan comprobar las sospechas clnicas y
apoyar el pensamiento epidemiolgico y nunca deben ser utilizados de manera
indiscriminada y mucho menos para demostrar deficiencias higinicas, realizndose el
estudio slo de aquellas muestras que sean importantes para las actividades de vigilancia y
control, ya que de otro modo, lo nico que se logra es atiborrar los laboratorios de trabajo,
con resultados a los cules no se les puede dar una posterior interpretacin.
Un ejemplo tpico de falsear la informacin de los resultados microbiolgicos es lo que
ocurre en la vigilancia epidemiolgica de la resistencia de las bacterias a los
antimicrobianos, cuando cepas bacterianas de una misma especie y con el mismo
antibiotipo, resultan aisladas repetidamente de una misma fuente, y el reconocimiento de
la repeticin del dato, con fines de descartarlo en los informes de carcter epidemiolgico,
se hace un problema difcil a resolver en la prctica, a menos que se haya contemplado en
el proceso de informatizacin del laboratorio.

Sitios de infeccin, fuentes y vehculos de infeccin y vas de transmisin:

A. Los sitios ms frecuentes de infeccin intrahospitalaria son:


(El orden de frecuencia vara en dependencia del tipo de institucin)
Infeccin de la herida quirrgica: Se les divide en infecciones de la incisin
quirrgica (incisionales) e infecciones que afectan a estructuras adyacentes que
fueron invadidas o expuestas durante una operacin (a veces denominadas
infecciones profundas)
Infeccin urinaria: Se considera la bacteriuria asintomtica y la bacteriuria
sintomtica.
Infeccin respiratoria.
Bacteriemia o septicemia primaria.
Infeccin del catter: Se distinguen aqu cuatro situaciones, la contaminacin, la
colonizacin, la infeccin clnica y las infecciones bacterimicas por catter.
El diagnstico de infeccin intrahospitalaria de estos sitios y otros no mencionados por
menos frecuentes, debe estar avalado por los criterios establecidos por los organismos
internacionales y adoptados para su uso local.

127
B. Las fuentes y vehculos de infeccin son:

La flora indgena del paciente, que produce una infeccin endgena.


Agentes provenientes de otro paciente (infeccin cruzada), que pueden
transmitirse por contacto directo, por el personal del hospital y por objetos de uso
contaminados.
La flora indgena del personal del hospital y visitantes, o microorganismos que
estos acarreen como portadores, o por su eventual situacin de enfermos, y que
lleguen al paciente por contacto directo o por objetos de uso contaminados.
Microorganismos presentes en los alimentos, el agua o el medioambiente.

C. Las vas de transmisin. Se contemplan cuatro vas:

El contacto directo.
La va area.
La va oral.
La va parenteral.

Conociendo las mltiples causas que estn presentes en la posibilidad de adquirir una
infeccin hospitalaria, y las diversas localizaciones en que se puede manifestar sta, se ha
propuesto el establecimiento de un programa por objetivos de lucha contra la infeccin,
donde la vigilancia, tanto epidemiolgica, como microbiolgica se ejerce sobre los riesgos
especficos y as tenemos la vigilancia sobre pacientes sometidos a los riesgos de la
ventilacin asistida, de cateterismos endovenos, sonda vesical, o a los mtodos diliticos,
por mencionar algunos de los ms frecuentes.

Agentes etiolgicos en las Infecciones Intrahospitalarias.

Los microorganismos que con ms frecuencia causan IIH y a su vez los ms estudiados
son bacterias del tipo de las E. coli, P. aeruginosa, Enterococcus spp, S. aureus,
estafilococos coagulasa negativa y Enterobacter spp. Se han reportado tambin bacterias
anaerobias, Legionella spp y agentes micticos, virales y parasitarios. Dentro de los
hongos la Candida albicans es la especie ms encontrada, otras especies de Candida , los
Aspergillus spp, la Torulopsis y otros hongos son aislados con menos frecuencia.
La etiologa viral de una infeccin nosocomial, aunque sospechada, es pocas veces
confirmada, fundamentalmente por la dificultad que implica el realizar estos diagnsticos
etiolgicos.
Las infeciones nosocomiales virales se localizan con mayor frecuencia en el tractus
respiratorio y el gastro intestinal, son producidas por agentes virales como el Virus
Sincitial Respiratorio, Citomegalovirus, Virus del Herpes Simple y Rotavirus.
El riesgo de adquirir una infeccin nosocomial por rubeola, sarampin y varicela, es alto
entre los trabajadores de la salud susceptibles o no inmunizados Tambin la hepatitis viral
puede ser adquirida, por contacto con sangre positiva a antgenos de la hepatitis de
pacientes y de donantes y aunque reducido, no podemos olvidar el riesgo tanto para
trabajadores como para pacientes, de la adquisicin del Virus del SIDA.

128
Las IIH producidas por parsitos son relativamente pocas en comparacin con los otros
agentes microbianos, y la mayora de las veces han sido estudiados por causar infecciones
en pacientes con SIDA, dentro de estos tenemos al Pneumocystis carinii, el Toxoplasma
gondii, y el Cryptosporidium spp.

El Laboratorio de Microbiologa en funcin de la prevencin y control de la IIH.

Los Laboratorios de Microbiologa tienen varias funciones:

Realizar la identificacin de los microorganismos responsables de infecciones


nosocomiales y determinar los patrones de resistencia a los distintos
antimicrobianos
Aplicar mtodos para el establecimiento de microorganismos como responsables
de brotes epidmicos y en caso de epidemias realizar cultivos para establecer
patrones de colonizacin
Tomar parte en la planificacin del programa del hospital de prevencin y control
de infecciones y en la educacin del personal de todas las categoras, que all
labora, en los correctos procederes de higiene.

Valorar las posibles muestras a estudiar, describiendo su procedencia de los sitios de


infeccin, las fuentes y vehculos de infeccin y las vas de transmisin y as como son de
heterogneas las muestras a estudiar, lo son tambin los procederes de laboratorio y la
competencia microbiolgica comienza con el pensamiento lgico en la seleccin de las
muestras y las correctas instrucciones para la recoleccin de las mismas y su conservacin
y traslado al laboratorio.
La recoleccin y transporte de muestras puede exponer al personal del laboratorio y del
hospital a contraer una IIH. Por eso en todos los procederes se tienen que cumplir las
normas de bioseguridad y respetar las Precauciones Estndar, diseadas para reducir el
riesgo de transmisin de patgenos transmitidos por sangre y tambin por otros patgenos.
Es indispensable la correcta seleccin del mtodo de siembra, de los medios de cultivo, las
condiciones de incubacin y de las etapas en el proceso de identificacin de un supuesto
agente etiolgico, para la interpretacin acertada de los resultados.
El laboratorio debe ser capaz de aislar y reconocer hasta en especie a la mayora de los
microorganismos productores de infecciones nosocomiales, incluyendo a los anaerobios,
pero identificaciones ms detalladas, pueden ser importantes en algunos tipos de
microorganismos. Una decisin es, hasta donde llegar en el diagnstico.
Si bien la mayora de los diagnsticos etiolgicos para la atencin mdica al paciente,
resultan suficientes con el aislamiento del agente, su biotipificacin , su serotipificacin y
el estudio de su resistencia antimicrobiana; los intereses de una investigacin
epidemiolgica pueden exigir la caracterizacin ms exhaustiva de una cepa o de un grupo
de cepas, con tcnicas ms sofisticadas, y que incluyan el completo anlisis antignico, la
susceptibilidad a los bacterifagos, la susceptibilidad y produccin de bacteriocinas, la
tipificacin molecular por anlisis del ADN cromosomal u otras tcnicas enzimticas y
moleculares y diagnsticos virales y fngicos, que pueden ser esenciales y si no es posible
su realizacin en el hospital, se deben coordinar en Centros de Referencia, pero slo deben

129
ser utilizados con objetivos epidemiolgicos bien definidos y nunca de manera
indiscriminada.

A.- Estudios de diagnstico y vigilancia de la IIH

I.- Medio ambiente animado:

1.- Pacientes

El buen diagnstico de la infeccin del paciente, es el proceder ms importante a realizar


por el laboratorio. Para esto se siguen los procedimientos y normas vigentes en los
laboratorios de las instituciones hospitalarias y como ya hemos sealado, en la mayor
parte de los aislamientos, es suficiente con la identificacin del microorganismo en especie
y el estudio de su resistencia antimicrobiana, que generalmente se hace por el mtodo de
difusin de Bauer y Kirby.
El trabajador del laboratorio debe estar alerta ante la aparicin de microorganismos
similares de muestras de ms de un paciente, ya que este hallazgo podra dar el aviso de la
ocurrencia de un brote.
Una situacin particular se presenta en el estudio de una pequea proporcin de pacientes,
ingresados principalmente en ciertos departamentos especiales como una unidad de
cuidados intensivos, o de transplante de rganos, a los que puede ser necesario someter a
un monitoreo continuo (vigilancia microbiolgica), para detectar la aparicin de
microorganismos patgenos potenciales. El nmero de sitios del cuerpo a examinar deben
ser limitados por consideraciones practicas, a aquellos que revelen hallazgos de inters y
usualmente esta vigilancia se efecta sobre las secreciones recolectadas a travs de la
traqueostomia y lugares donde se ha implantado una cnula u otro dispositivo.
El objetivo es determinar la colonizacin del sitio por patgenos potenciales y vigilar la
diseminacin de cepas particulares de microorganismos entre los pacientes.

2.- Personal

El examen de muestras de miembros saludables del equipo de salud, de quienes no se


sospecha sean responsables de infecciones entre los pacientes, es rara vez de inmediato
valor como medida preventiva, pero ocasionalmente se realizan por propsitos educativos.
La bsqueda de portadores de Streptococcus del grupo A en faringe, ha cesado en la
mayora de los hospitales porque cuando se sigue el propsito de reducir activamente el
nmero de portadores, se incrementa la frecuencia de cepas altamente resistentes.
En el caso de realizarse cultivos del personal, es importante explicar cules son los
objetivos de dichos cultivos, ya que en ocasiones estos pueden ser motivo de inquietud y
malestar entre los trabajadores.
Los sitios ms muestreados incluyen reas de la piel, las fosas nasales, la faringe y el
intestino bajo.
El cultivo de manos del personal es importante si se sospecha transmisin cruzada entre
diversos pacientes.
Las muestras de las manos producen un pequeo nmero de estafilococos que pueden
haber sido transitoriamente adquiridos de fuentes externas, por eso las manos no deben ser
muestreadas de rutina, sino cuando alguna lesin est presente. Sin embargo en

130
determinadas situaciones, el aislamiento repetido de la misma cepa de estafilococos de las
manos, en ausencia de un portador nasal, puede indicar que el sujeto es un portador
perianal.
El aislamiento de microorganismos de la superficie del cuerpo o de una secrecin, no
necesariamente indica que sea un microorganismo establecido en ese sitio, puede ser un
contaminante de una fuente externa o de otro sitio de la misma persona. La significacin
de un hallazgo particular puede, dependiendo del sitio de la muestra y del nmero de
microorganismos presentes, estar en relacin con la reiteracin del aislamiento y an as,
las interpretaciones no son siempre fcilmente realizadas.
Las actividades mdicas implican riesgos reconocidos para adquirir hepatitis viral, SIDA y
tuberculosis. La influenza, enfermedades por meningococos, sarampin, varicela, herpes
simple, rotavirus, rubeola y patgenos intestinales, pueden tambin ser un problema en
circunstancias particulares. Las medidas higienico sanitarias, sean las habituales o las
descritas como Precauciones Estndar, disminuirn de manera importante los riesgos de
adquirirlas y es ms importante el uso del servicio de salud de los trabajadores, para
detectar personas que tengan una enfermedad infecciosa, o que sean portadores, que los
estudios de rutina.
La presente opinin es que los portadores deben ser estudiados solo cuando la fuente de
una infeccin especfica est bajo investigacin.

II.- Medio ambiente inanimado

1.- Aire y superficies

Los muestreos de aire para evaluacin microbiolgica no deben ser ejecutados de manera
rutinaria, pero pueden ser requeridos en alguna ocasin por sospecha por infecciones por
Legionella spp y Aspergillus spp, o para monitorear salones de operaciones.
Las muestras del medio ambiente pueden ser requeridas para detectar un reservorio de
microbios que pueda tener significacin en la ocurrencia de un episodio de infeccin, en
este caso el objetivo es detectar una cepa microbiana particular, pero su deteccin no lleva
automticamente a la conclusin que la infeccin de esa fuente contaminada fue
responsable del brote. Se necesita establecer que la infeccin de esa fuente y no de otra,
pudo llegar causar la infeccin a todos o a la mayora de los pacientes implicados. En
oportunidades se hacen aislamientos de fuentes ambientales alternativas a las cuales es
imposible dar explicacin.
Cuando el muestreo es requerido, ste puede ser realizado por el mtodo de placa
expuesta, que es un mtodo gravimtrico o por tcnicas volumtricas ms sofisticadas,
para las que existen equipos de varias firmas comerciales.
En todos los casos, es deseable contar con un patrn microbiano del local, realizado en
condiciones ideales y que va a servir como punto de comparacin.
Los conteos altos de microorganismos en el aire, generalmente son atribuibles a la
presencia de demasiadas personas en el lugar, a un excesivo movimiento del personal y a
deficiencias de climatizacin. Factores todos que pueden ser fcilmente detectados por
observacin.
No se recomienda el mtodo bacteriolgico como procedimiento de rutina en el control de
ambiente de salones de operaciones, ni de otros ambientes especiales, a menos que por
cuestiones muy bien definidas, sea imposible utilizar otro mtodo de control.

131
En todos los casos es desaconsejable su uso con propsitos educativos.
Las superficies tienden a ser irregularmente contaminadas y los resultados de los estudios
bacterianos son difciles de evaluar.
Las muestras de rutina de superficies generales tales como pisos, paredes y artculos que
no estn en contacto directo con el paciente o el personal, dan resultados que solo pueden
ser relacionados con riesgos definidos de infeccin. Si es necesario, deben ser realizados
conteos cuantitativos o semicuantitativos de la contaminacin por unidad de rea de
superficie y el rea debe ser suficientemente grande, para minimizar el efecto de la
contaminacin irregular.
La posibilidad de asociar contaminacin del medio con una falla de la tcnica de
desinfeccin es mayor cuando el patgeno es un bacilo Gram negativo. Con los cocos
Gram positivos es usualmente imposible distinguir entre contaminacin por va area o
por contacto.
Las pruebas para la presencia de patgenos especficos sobre las superficies, solo sirve
para propsitos limitados.

2.- Equipos de esterilizacin

Todos los equipos de esterilizacin deben ser controlados peridicamente con la


observacin del cumplimiento de los parmetros fsicos requeridos para su buen
funcionamiento (temperatura, tiempo, presin) y con los controles qumicos inherentes a la
naturaleza de cada proceso.
El uso del monitoreo bacteriolgico debe estar confinado a los procesos en los cuales los
adecuados monitoreos fsicos y qumicos no son practicables y al estudio inicial y
posteriormente al chequeo peridico de procesos que estn siendo regularmente
monitoreados desde el punto de vista fsico y qumico, con el objetivo de detectar posibles
errores tcnicos que no hayan sido puestos de evidencia por los controles fsicos y
qumicos de rutina.
Los sistemas de esterilizacin por vapor y gas de oxido de etileno deben ser estudiadas por
lo menos una vez por semana con una preparacin de esporas vivas.
Estos estudios bacteriamos usualmente se realizan con preparaciones con un nmero
conocido de esporas de bacterias vegetativas. Estos dispositivos de prueba son colocados
en el equipo en forma similar al material a procesar.
Las cepas bacterianas apropiadas para uso como indicadores biolgicos son especficas de
acuerdo a las caractersticas del proceso de esterilizacin y as se utilizan para las
autoclaves esporas de Bacillus stearothermophilus (No. NCTC 10003) y para la
esterilizacin en horno (calor seco) y esterilizacin por oxido de etileno, esporas de
Bacillus subtilis ( No. NCTC 10073).

3.- Soluciones desinfectantes.

La contaminacin de desinfectantes y antispticos ha sido implicada en brotes de IN, pero


los anlisis bacterianos de estos componentes requieren medios especializados que no se
encuentran de rutina en la mayora de los laboratorios de microbiologa clnica y cuando
se sospecha contaminacin de estos productos comerciales estriles se debe notificar de
inmediato al personal de control de infecciones.

132
En la prctica hospitalaria se recomienda el muestreo regular de las diluciones en uso,
de los desinfectantes que se estn aplicando siguiendo el mtodo de Kelsey y Maurer.

4.- Catteres:

Catteres y agujas pueden cultivarse usando mtodos semicuantitativos, como los


planteados por Maki y en situaciones especficas se utilizan mtodos cuantitativos como
el de Cleri.
Los resultados de estos mtodos, unidos a la observacin de signos locales o generales de
infeccin, avalados por los hallazgos de los cultivos de sangre, permiten hacer la
distincin entre contaminacin, colonizacin, infeccin clnica del catter o infeccin
bacterimica, considerando como:

Contaminacin del catter: cultivos positivos de la extremidad del catter, a una cifra no
significativa, en cultivos cuantitativos o semicuantitativos, en ausencia de signos locales o
generales de infeccin
Colonizacin del catter: presencia de un cultivo positivo de la extremidad del catter,
en cantidad significativa (>15 unidades formadoras de colonias (UFC) por la tcnica
semicuantitativa, >1000 UFC/ml en la tcnica cuantitativa), en ausencia de signos
generales de infeccin atribuibles al catter. Localmente puede existir un eritema, pero sin
supuracin local franca. La colonizacin puede provenir de un foco a distancia a los
mismos microorganismos que son aislados del catter
Infeccin clnica del catter: presencia de un cultivo positivo de la extremidad del
catter (> 15 UFC por la tcnica semicuantitativa, >1000 UFC/ml en la tcnica
cuantitativa) en presencia de signos generales o locales de infeccin, con evidencia de
alguno de los sntomas cuando se retira el catter
Infecciones bacterimicas del catter: presencia de un cultivo positivo de la
extremidad del catter (>15 UFC por la tcnica semicuantitativa, >1000 UFC/ml en la
tcnica cuantitativa), asociado a una bacterimia secundaria por el mismo microorganismo
aislado del catter, en ausencia de otros focos infecciosos a ese microorganismo
Si no es posible retirar el catter, una infeccin del catter puede ser tambin identificada,
si la sangre tomada por el catter, contiene ms de 5 a 10 veces el mismo microorganismo
que la sangre tomada en periferia.

5.- Alimentos y otras muestras:

Puede ser necesario el muestreo de un nmero de otras sustancias que la experiencia ha


demostrado que pueden resultar contaminadas, estas incluyen la leche humana, alimentos
para nios, jabones y otros productos.
Un acpite aparte merece el estudio de las aguas utilizadas en los servicios de Dilisis y
Hemodilisis. Al agua utilizada en la preparacin del dializado y al fluido obtenido al
final del tratamiento se les debe hacer conteos de colonias para determinar el parmetro de
satisfactorio.
El cultivo del agua es particularmente importante en casos de brotes de infecciones
producidas por Legionella spp, a partir de sistemas de climatizacin contaminados.

Estudios de brote de IIH.

133
Para decidir el estudio de un brote de IIH, lo primero es conocer cuando estamos en esta
situacin y sto se define por la presencia de dos o ms casos en una sala, servicio o
institucin de salud, que guarden relacin entre s y que se compruebe que son producidos
por una fuente comn, en un perodo limitado de tiempo y que excede los lmites de la
incidencia habitual.
Solo una pequea proporcin de IIH forma parte de un brote definido y ese debe ser
reconocido rpidamente.
Por otra parte, una epidemia de infeccin hospitalaria es definida cuando existe un
aumento significativo de la tasa esperada de la infeccin en cuestin, superior a la que se
haba encontrado (p<0,05).
Si solamente un agente etiolgico est involucrado en la epidemia, el objetivo de la
investigacin epidemiolgica ser la identificacin de la fuente de infeccin y el
mecanismo de transmisin del agente, y ambos tienen que ser avaladas por criterios
microbiolgicos.
Por definicin, todas las epidemias intrahospitalarias son prevenibles, lo que resalta la
importancia de la investigacin de las mismas lo ms pronto posible, pero a pesar de la
vigilancia epidemiolgica activa y el establecimiento de medidas de control, los brotes
epidmicos siempre ocurrirn por la presencia de pacientes susceptibles expuestos a
graves riesgos.
Para la decisin de las muestras a tomar durante un brote epidmico es muy importante
tener en cuenta el tipo de infeccin, el nmero de pacientes involucrados, su relacin
epidemiolgica, el personal involucrado en su cuidado y los posibles mecanismos de
transmisin, incluyendo: las manos del personal, los instrumentos, medicamentos,
catteres, procedimientos o intervenciones comunes a todos ellos.
Brotes o epidemias pueden ser identificados gracias al aislamiento de una cepa nica, de
un grupo de pacientes infectados con un microorganismo adquirido o no en el hospital.
La identificacin de estas cepas en especie y el hallazgo de un nico patrn de resistencia
pueden ser suficientes para establecer la presencia de un brote con relacin a una cepa
nica. Sin embargo cuando una especie de un organismo es un miembro frecuente de la
flora indgena o ambiental se requieren de mtodos ms complejos de diferenciacin.
Al emplear dichos mtodos debe de tenerse presente un objetivo epidemiolgico, ya que
de lo contrario es posible obtener resultados confusos y hasta conflictivos; debe de tenerse
en cuenta la variabilidad del mtodo, por lo que las pruebas de tipificacin deben
realizarse bajo las mismas condiciones y en el mismo tiempo, incluyendo controles con
cepas no relacionadas en el brote. Entre los mtodos utilizados se incluyen:
biotipificacin, infeccin por fagos, bacteriocinas, serotipificacin, anlisis de DNA
plasmdico, o cromosmico, hibridacin con sondas de DNA, electroforesis de protenas,
anlisis de RNA ribosomal, y amplificacin de DNA por el mtodo de la reaccin en
cadena de la polimerasa (PCR).
Estos mtodos son usados para subdividir grupos de microorganismos, generalmente
miembros de una especie, de manera que sea posible precisar si poseen el mismo patrn
tipo o no. Cuando los microorganismos difieren en esta caracterizacin, se asume son
epidemiolgicamente distintos; as es posible eliminar infecciones o fuentes de infecciones
que no son relevantes en el incidente bajo investigacin. Cuando los organismos tienen el
mismo patrn tipo, tomamos como evidencia la relacin epidemiolgica.

134
Ninguna aseveracin es siempre verdadera, y la fuerza de la evidencia en pro o en contra
de la relacin de la cepa, depende de dos caractersticas del sistema de tipaje usado.

1) Discriminacin: Esto es la habilidad del sistema de dividir organismos en un gran


nmero de tipos. Donde el uso de sistemas de tipaje con bajo poder de discriminacin,
puede dar lugar a falsas atribuciones de infecciones a fuentes de las cuales ellas no fueron
emanadas. Tambin si se encuentra una alta proporcin de cepas no tipables, el sistema de
tipaje puede tener poco valor.

2) Reproducibilidad: Desdichadamente no existe una totalmente reproducibilidad de los


sistemas de tipaje. De la carencia de reproducibilidad, a menos que sta sea reconocida,
puede resultar que aislamientos epidemiolgicamente relacionados, sean considerados
como diferentes entre s.
Adems de cambios genticos, puede ocurrir variacin fenotpica en clones de organismos
en el medio natural y en algunos mtodos de tipaje hay tambin variaciones tcnicas
incontrolables.

El tipaje de las cepas es requerido:

En brotes o sospecha de brotes de infeccin, para definir la extensin del brote,


detectar contactos asintomticos infectados y revelar reservorios ambientales del
microbio causal.
En estudios continuos de situaciones definidas, para determinar hasta donde una
infeccin ha sido diseminada y las diferentes vas y evaluar las medidas preventivas a
instaurar.
En la vigilancia microbiana de pacientes bajo control especial, en servicios de
cuidados intensivos, transplante y otros; en orden de ser capaz de reaccionar
tempranamente cuando exista una tendencia a la acumulacin de patrones idnticos.

Mapa Microbiano del Hospital.

Con los resultados que obtiene el laboratorio del procesamiento de las muestras de las
diferentes procedencias hospitalarias, se confecciona el mapa microbiano de la unidad, que
est dado por los elementos siguientes:

Microorganismos: se definen tipos y patrones de resistencia a los antimicrobianos.


reas: Se individualizan los diferentes servicios o especialidades.
Fechas: Se determinan tendencias en el tiempo.
Estos elementos permitirn el conocimiento dinmico de la circulacin de
microorganismos en los diferentes servicios, sus patrones de resistencia antimicrobiana y
apoyan las medidas efectivas que se deban tomar, si fuera necesario.
Una recoleccin metdica de estos resultados puede conducir a los anlisis de frecuencia y
tipos de infeccin que estn ocurriendo bajo condiciones diferentes y en varios momentos,
lo cual resulta muy valioso para el conocimiento de situaciones mdicas particulares, as
como para la epidemiologa hospitalaria y la ejecucin de investigaciones sobre este tema.

135
Naturaleza del medio y de la poblacin bacteriana:

En el ambiente de los hospitales y en menos escala en los lugares donde acuden enfermos
(policlnicas, consultorios), concurren todos los elementos explicados anteriormente: aire,
agua, alimentos, cuyo conjunto conforma el ambiente inanimado que guarda ntima relacin
con las infecciones nosocomiales y puede contribuir a la aparicin de casos espordicos o
brotes de enfermedades, proporcionando focos de contacto y transmisin por vehculo
comn. Sin embargo; no se debe prestar una excesiva atencin a la presencia de microbios en
los objetos del ambiente inanimado, y menos an, considerar que tal presencia representa de
por s, evidencia de un foco peligroso de infeccin. Tal supuesto puede conducir a malgastar
recursos humanos y materiales en medidas de control ambiental que nada resuelven. En tales
casos puede haber necesidad de hacer un mayor nfasis sobre la prevencin y control de la
propagacin por contacto directo a travs del ambiente animado (enfermos, mdicos,
enfermeras, tcnicos y auxiliares), que constituyen el principal foco de transmisin de la
infeccin hospitalaria.

Muestras para la investigacin bacteriolgica. Requisitos.

El propsito fundamental del laboratorio de microbiologa mdica, es el aislamiento e


identificacin de los microorganismos que causan enfermedad en el hombre y determinar
su susceptibilidad in vitro a los agentes antimicrobianos.
No existe otro laboratorio en el cual las fuentes de los especmenes y sus tipos sean tan
diversos y por lo tanto, sea tan importante la recoleccin y el transporte de las muestras.
El xito de los procedimientos de los laboratorios de microbiologa y parasitologa
mdicas diagnsticas, dependen en gran medida del modo como se obtienen las muestras y
de las condiciones en que las mismas llegan al laboratorio. En algunos lugares, se comete
el grave error de dejar en las manos del personal auxiliar menos preparado, el importante
proceso de obtener las muestras y transportarlas al laboratorio.
El personal del laboratorio no debe aceptar muestras inadecuadas, sin embargo, no siempre
se puede determinar si la misma es adecuada o no a partir de su aspecto.
En aquellos casos que se considere que la muestra pueda ser de una dudosa utilidad o de
mala calidad, debe comunicarse a la unidad de cuidados del paciente (informe verbal o
escrito), indicando la naturaleza de la deficiencia y solicitando la recoleccin de una nueva
muestra.
Hay oportunidades en que sta no es factible y se proceder a estudiar la recibida, pero con
conocimiento del mdico de asistencia, de la razn por la cual no se aceptaba, con el fin de
que la interpretacin de los resultados sea la ms adecuada.
Es muy importante que el microbilogo transmita su actitud de preocupacin por el
cuidado del paciente, y que sus planteamientos no sean considerados como una restriccin
de la disponibilidad de los servicios del laboratorio de Microbiologa, sino la intencin de
brindar la informacin ms til y reducir la posibilidad de informacin que pueda resultar
engaosa.
Muchos malentendidos entre los mdicos de asistencia y los microbilogos pudieran
minimizarse, si de antemano se acuerdan las normas de recoleccin y transporte de las

136
muestras para estudio microbiano. Estas normas deben revisarse peridicamente con el
personal de enfermera y mdico.
Las tcnicas que se utilizan para la recoleccin de las muestras para estudio bacteriano,
dependern de la naturaleza del problema diagnstico y de la enfermedad en cuestin.
Para el diagnstico de las afecciones micticas, se pueden obtener diversas muestras,
segn el tipo de micosis y la regin afectada. Para las micosis superficiales y subcutneas,
las muestras por lo general son partes del cuero cabelludo, de la piel y uas. Para las
micosis profundas, el material depender del agente que se sospeche y su localizacin.
Los mtodos que se emplean en la obtencin de muestras para estudios virolgicos, no
difieren mucho de los que se emplean para los estudios bacterianos. Sin embargo, es
importante tener presente la inestabilidad de muchos virus cuando la temperatura excede
de 4 C. Es preciso, por lo tanto un mayor control en el mantenimiento de la temperatura
durante la conservacin o envo de una muestra. Para su transporte pueden utilizarse
termos o neveras porttiles con hielo seco.
El diagnstico de la mayora de las enfermedades producidas por parsitos intestinales se
realiza por medio del examen de las heces fecales, que debern ser recogidas en
recipientes limpios que permitan su fcil transporte. Las heces obtenidas del suelo o de
excusados no son satisfactorias debido al peligro de que estn contaminadas con larvas
saprfitas y otros organismos del suelo o con orina que puede destruir los trofozoitos, si
stos se encontraran en la muestra.
Si las muestras se envan inmediatamente al laboratorio y pueden procesarse lo ms pronto
posible, no necesitan preservativos; pero si por el contrario, se conoce que va a existir
demora en el inicio del proceder analtico, deben ser conservadas en soluciones
preservativas.

Otras muestras que con frecuencia se obtienen en los casos de parasitismo intestinal
son:

Helmintos o progltides que pueden expulsarse con materia fecal o sin sta. Pueden
colocarse en un frasco con solucin salina, agua alcohol o formalina.
Muestra de la regin perianal tomada con cinta adhesiva transparente. Importante
en el diagnstico de la oxiurasis.
Muestras obtenidas por sigmoidoscopa.
Algunos parsitos pueden encontrase en alguna fase de su ciclo biolgico en
material distinto de las heces fecales. Por ejemplo, E. histolytica en el hgado,
mucosa intestinal u otros tejidos. (Estudio de la muestra del material
correspondiente).
Muestras de secrecin duodenal y biliar. Muy importante en el diagnstico de
Giardia lamblia, cuando los exmenes de las heces fecales son negativos.

Otros parsitos:

Para el diagnstico de la malaria y de otros hemoparsitos resulta de importancia el


examen de la sangre perifrica, realizando los mtodos de extensin de la muestra:
gota gruesa y frotis.
La sangre venosa con anticoagulantes es utilizada para el examen de microfilarias.

137
Las muestras de exudados y otras secreciones que se obtienen con hisopos estriles
constituyen el medio habitual para diagnosticar infecciones causadas por diversos
parsitos y se obtienen de: crvix, vagina, prstata, lesiones abiertas, lceras,
biopsias, punciones etc.

Otras muestras:

Tanto en los diagnsticos de enfermedades bacterianas, micticas, virales y parasitarias, no


podemos olvidar la importancia de la muestra de suero sanguneo para los estudios sricos
correspondientes, buscando la presencia o un ttulo de anticuerpos.
Para la obtencin de las muestras de ambiente, agua leche y alimentos se emplearn
tcnicas especiales de acuerdo a la investigacin solicitada. En el caso de la muestra de
leche depender tambin del lugar de origen de la misma (establo, lechera, planta
pasteurizadora, medios de transporte, expendios etc.). En los casos de muestras de
alimentos, para el estudio de un brote de origen alimentario, es preciso descubrir el
alimento infectante, el agente causal (microorganismo o toxina) y las circunstancias que
dieron lugar al brote, por lo cual se determinar en cada caso, las clases de muestras que se
requerirn para la determinacin de la infeccin o de la intoxicacin alimentaria.

Consideraciones generales.-

Entre las consideraciones generales que debemos tener presente para la seleccin y
recoleccin de los especmenes, podemos sealar:

Tener una idea clara de los objetivos para los cuales se toma la muestra: aislamiento e
identificacin de un agente etiolgico, titulacin de anticuerpos, determinacin de las
fuentes de contaminacin del agua o alimentos, las causas de una intoxicacin, etc.
La muestra debe ser representativa:
La muestra se obtendr de la regin anatmica de donde pueda ser encontrado el
microorganismo.
Considerar el estado de la enfermedad.
Las muestras para estudios de ambiente, agua, leche, y otros alimentos, se tomarn de
acuerdo con el tipo de investigacin solicitada, siempre representando el proceso o la
situacin en estudio.

La cantidad de la muestra colectada ser la adecuada para realizar todos los estudios
solicitados.
Siempre que sea posible, debemos obtener la muestra antes del inicio de la terapia
antimicrobiana.
En algunos tipos de muestras se utilizarn frascos con sustancias neutralizantes de los
antimicrobianos que contengan los productos en estudio. Ejemplos: Cloro en el agua,
antibiticos en sangre.
Observar medidas, para evitar que se contamine la muestra.
Instruir claramente a los pacientes.
Emplear contenedores estriles y en caso necesario, el medio de transporte adecuado.
Enviar las muestras rpidamente al laboratorio.

138
Suministrar suficiente informacin al laboratorio.

La solicitud del examen al laboratorio de Microbiologa, debe suministrar toda la


informacin que se necesita para los correctos procederes analticos y para la adecuada
interpretacin de los resultados. Debe incluir la siguiente informacin:

Nombre del paciente.


Edad y sexo del paciente.
Sala, cama o habitacin, si el paciente est ingresado.
Nmero de historia clnica u otro dato que permita identificar y localizar al paciente.
Sitio anatmico especfico de donde desea realizar el cultivo.
Diagnstico clnico o dato relevante de la historia clnica del paciente.
Si requiere cultivos especiales.
Si el paciente ha recibido algn antimicrobiano, sealarlos.
En las muestras para estudio microbiano de ambiente, agua, leche y otros alimentos, la
identificacin debe incluir: en las muestras de agua y de leche, la naturaleza de la
fuente, la localidad de donde fue obtenida y la temperatura del medio; en las muestras
de alimentos se incluirn datos sobre su origen, ingredientes utilizados en la
preparacin, manipulacin previa, conservacin, temperatura de conservacin y fecha
y hora de preparacin.
Nombre y apellidos del mdico que indica.
Fecha y hora de la recoleccin.

Desdichadamente, muchos recipientes donde se depositan las muestras, llegan al


laboratorio, sin etiquetas o con etiquetas que no estn confeccionadas adecuadamente.
Cada muestra debe llevar una etiqueta firmemente pegada, con una leyenda clara y con
impresin hecha de tal forma que no se borre durante el almacenamiento y transporte, ya
que el envase puede permanecer en un ambiente hmedo que le cause deterioro.
Debe contener la siguiente informacin:

Nombre y apellidos del paciente.


Sala, cama , habitacin, nmero de historia clnica.
Mdico de asistencia.
Fecha y hora.
Clase de muestra.
Examen que se desea.

Un aspecto muy importante relacionado con las muestras, es la definicin del momento
ptimo para su obtencin, el cual puede estar basado en el tipo del proceso infeccioso y
en la capacidad, organizacin y habilidad del personal del laboratorio para colectar las
muestras.
Debido a las caractersticas de trabajo de los laboratorios, stos, generalmente, estn ms
capacitados para recibir las muestras durante la jornada laboral diurna, fundamentalmente

139
en horarios de la maana. Las muestras que necesariamente tienen que ser obtenidas en
horarios avanzados de la tarde y durante la noche, y que no sern sembradas dentro de las
dos horas siguientes a su obtencin, podran no producir resultados confiables si no se
procede de manera adecuada durante la conservacin y transporte de la muestra.
En estos casos, puede ser necesaria la utilizacin de un medio de transporte, pues
conocemos que los microorganismos, crecen, se reproducen y mueren rpidamente. Los
medios de transporte se han creado para detener o prevenir los tres procesos.
Resultados errneos o incompletos pudieran producirse si alguno de estos procesos
ocurre antes de que la muestra comience a procesarse en el laboratorio.
Se conocen bajo la denominacin de procedimientos de rutina del laboratorio, aquellos
que se hacen en forma continua mientras que el laboratorio tiene sus procedimientos
establecidos en forma permanente; en este caso, lo importante ser la coordinacin para
lograr que las muestras lleguen en forma satisfactoria y que el laboratorio tenga la
capacidad para elaborarlas.
La marcha analtica de algunos especmenes no se encuentran entre los procedimientos
antes sealados, debido a que requieren equipos, medios de cultivo, colorantes y otros
reactivos especiales o de uso no frecuente en el laboratorio que se deba encargar del
procesamiento de la muestra. En estos casos, el mdico de asistencia deber consultar con
el microbilogo, acerca de la posibilidad de realizar el examen.
Los casos que con mayor frecuencia pudieran presentarse son:

1. Cultivos de virus.
2. Pruebas para estudio del poder bactericida del suero.
3. Campo oscuro para deteccin de espiroquetas y otras bacterias.
4. Hemocultivos especiales para cultivar hongos y formas L.
5. Recuperacin de chlamydias, rickettsias, leptospiras y otros organismos poco
frecuentes.

Se obtendrn las muestras correspondientes, y de ser posible se crearn las condiciones para
realizar el estudio en el laboratorio o se realizarn las coordinaciones pertinentes para enviar
la muestra al laboratorio que pueda procesarla.
Como conclusin de estas reflexiones sobre la muestra para estudio microbiano, quisiera
destacar el hecho de que el mdico de asistencia espera la informacin de los laboratorios de
microbiologa y parasitologa mdicas diagnstica, para ayudar a salvar a su paciente; y
hemos visto que es en las manos de la persona encargada de seleccionar, obtener y transportar
las muestras donde se encuentra parte de esta gran responsabilidad.

Uso adecuado del recurso microbiolgico en el diagnstico de las


enfermedades infecciosas.

El aumento de la incidencia y severidad de las enfermedades infecciosas es uno de los


conflictos a enfrentar en el campo de la infectologa clnica, constituyen un importante
problema de Salud Pblica en todas las regiones del planeta y representan un reto para el
mdico de asistencia, que necesita de la cooperacin estrecha del microbilogo y del
epidemilogo para un manejo y un pronstico satisfactorio.

140
A pesar de los esfuerzos realizados en el mundo con el fin de yugular dichas enfermedades,
stas continan siendo una de las principales causas de morbilidad y mortalidad. En la
actualidad, existe, adems, un persistente aumento del nmero de pacientes con
enfermedades de base o tratamientos que con frecuencia condicionan la aparicin de
infecciones oportunistas.
Ante la presencia de una enfermedad infecciosa, el laboratorio puede contribuir a establecer
su diagnstico mediante pruebas que podemos agrupar en cuatro categoras:

1. Demostracin del agente en muestras de los productos patolgicos del paciente.


2. Demostracin de una respuesta significativa de anticuerpos en el paciente.
3. Demostracin de sensibilidad cutnea significativa (evidencia de hipersensibilidad a
los antgenos de un agente infeccioso).
4. Demostracin de alteraciones en determinaciones del laboratorio clnico.

De estas pruebas, al laboratorio de microbiologa le competen:

El diagnstico del agente causal por medio de:

La visualizacin, el aislamiento y la identificacin del agente.


La demostracin de alguno de los antgenos del microorganismo,
La deteccin de genes especficos del agente en muestras del paciente mediante
hibridacin de ADN con ADN o de ADN con ARN y
La demostracin de respuesta inmune.

Las pruebas de laboratorio para contribuir con la seleccin racional del tratamiento
antimicrobiano.

Cuando el laboratorio est ubicado dentro de las instalaciones mdicas generales, debe
ofrecer al mdico de asistencia, con rapidez y exactitud, la informacin referente a la
presencia o ausencia de un agente microbiano, que puede estar especfica o potencialmente
implicado en un proceso de enfermedad infecciosa que est afectando a un paciente y,
adems, completar prontamente la informacin, con los resultados relativos a las pruebas de
resistencia in vitro a los antimicrobianos.
Con el uso adecuado del recurso microbiolgico podemos lograr:

Diagnstico y orientacin para el correcto tratamiento de pacientes individuales.


Vigilancia microbiolgica a:

Poblaciones abiertas: Los datos microbiolgicos figuran entre los primeros que
sugieren la existencia de enfermedades epidmicas en la comunidad.
Poblaciones cerradas: Un nmero poco comn de ejemplares de un solo patgeno o
un cuadro poco comn de susceptibilidad a los antimicrobianos puede indicar un
brote de infeccin nosocomial.
Pacientes en riesgo: Prediccin de aparicin de infeccin nosocomial (prevenibles e
inevitables).

141
Cuando nos enfrentamos a un paciente con un cuadro clnico sugestivo de una enfermedad
infecciosa; corresponde al mdico de asistencia, hacer un diagnstico presuntivo, indicar los
exmenes de laboratorio e iniciar tratamiento. l sabe cules son las pruebas que solicitar,
cmo y cuando tomar las muestras y cmo interpretar los resultados.
En el momento de solicitar los exmenes, debe informar al laboratorio sobre su impresin
diagnstica y los antecedentes de la teraputica antibitica del paciente.
Estos elementos permiten orientar el trabajo del laboratorio de Microbiologa, pues es bien
conocido que en el mismo no hay un solo mtodo disponible que permita observar y aislar
todos los microorganismos patgenos o diferenciarlos de los no patgenos.
Las tcnicas usadas para este fin variarn segn el sndrome clnico y el tipo de agente que se
est considerando: virus, bacteria, hongo u otro parsito.
Al personal del laboratorio, jerarquizado por el microbilogo jefe, le corresponden los
detalles tcnicos de los diferentes procederes analticos, desde las consideraciones sobre las
muestras hasta suministrar la ms precisa, adecuada y rpida informacin sobre el agente
infeccioso.
El xito de los exmenes microbiolgicos depende en gran medida del modo como se
obtienen las muestras, de la rapidez y de las condiciones con que las mismas llegan al
laboratorio. La rotulacin apropiada de las muestras es un factor importante en el uso
adecuado del recurso microbiolgico. (Ver folleto titulado: La muestra para estudio
microbiano.).
Muchas veces los procederes analticos se pueden inutilizar por falta de cuidado y por el
empleo de mtodos defectuosos en la recoleccin y manejo de las muestras. Con el fin de
superar estos errores, dichos mtodos deben estar normados y figurar en los manuales del
laboratorio y del personal de enfermera. Debe revisarse peridicamente con participacin del
personal del laboratorio, de enfermera y mdico.
Entre los procedimientos ms importantes en la marcha analtica de una muestra para estudio
microbiano, se encuentran los exmenes microscpicos de los productos patolgicos frescos,
teidos o sin teir, con el fin de demostrar la presencia de un agente infeccioso en la muestra.
Frecuentemente no se emplean estos mtodos y se pierde la importante informacin que
brinda este recurso, de gran ayuda para el diagnstico.
Algunos de los exmenes microscpicos directos no slo nos ofrecen las ventajas antes
sealadas, sino que tambin nos permiten predicciones de los resultados de los cultivos.
Como ejemplo muy til podemos citar, los exmenes directos en la deteccin de bacteriuria.
El examen en campo oscuro debe realizarse a toda muestra de orina que llegue con
indicacin de cultivo. Estos resultados tienen un valor predictivo de cultivos negativos de
95,5% y una especificidad de 97,3%, con el consiguiente ahorro en recursos materiales y
humanos.
Otro propsito importante de los laboratorios de microbiologa es tratar de demostrar la
presencia de un agente infeccioso mediante la preparacin de cultivos bajo condiciones
ambientales que sean adecuadas para el crecimiento de una amplia variedad de
microorganismos.
La decisin de cuntos y cules mtodos y medios de cultivo se usarn en cada laboratorio y
frente a cada caso, queda a cargo de las normas de trabajo y en gran parte, a la experiencia
del director del laboratorio. Para estas definiciones, son indispensables las valoraciones sobre
el tipo de poblacin que atiende, las funciones del laboratorio y los datos que aportan los
mdicos de asistencia.

142
Uno de los pasos ms decisivos en estos estudios es la observacin de los primocultivos, que
debe realizarse a simple vista y con ayuda de aumento, siempre con buena iluminacin. Esta
importante tarea debe realizarla el personal ms calificado y con ms experiencia, auxiliado
por un miembro del equipo tcnico.
Si despus de la inspeccin de los cultivos, los microorganismos representan los normales de
la regin anatmica de donde se obtuvo la muestra, la identificacin con pruebas adicionales,
resulta superflua.
Si la muestra procediera de una regin que es normalmente estril o que la presencia del
microorganismo no es normal, el laboratorio debe establecer la identificacin de la cepa
aislada.
En algunos casos, la identificacin debe establecerse hasta gnero y especie, en otros, resulta
suficiente conocer que se trata de un miembro de un gnero determinado. Si la cepa procede
de un paciente en circunstancias especiales o fuera necesario por razones epidemiolgicas,
higinicas o profilcticas, es posible que se requieran ms pruebas para la identificacin del
microorganismo, que nos permitan una caracterizacin ms exhaustiva.
En nuestro laboratorio de Microbiologa peditrica, tenemos establecido la realizacin de
diferentes niveles de identificacin a las cepas aisladas; estando en dependencia de las
caractersticas del paciente del cual procede y del tipo de muestra de la cual se obtuvo.
El personal del laboratorio no siempre tiene que reflejar las clasificaciones taxonmicas ms
exactas y es muy importante que conozca los diferentes sinnimos que pueden aplicarse al
microorganismo que identifican.
La deteccin inmunoqumica de antgenos solubles en los productos patolgicos se ha
convertido en un examen frecuente en algunos laboratorios de Microbiologa y nos brinda la
posibilidad de poder detectar la presencia de los antgenos microbianos, an en aquellas
muestras donde no se han observado ni aislado los microorganismos. La sensibilidad y la
sencillez tcnica, son ventajas de estas pruebas.
Son muy diversos los mtodos que se pueden emplear para detectar los antgenos solubles y
ninguno por s slo puede recomendarse para todos los antgenos bacterianos, sino que cada
uno debe evaluarse independientemente y aplicarse como mtodo para cada antgeno.
Los inmunoanlisis de enzima (IAE) incluyendo los anlisis inmunoabsorbentes ligados a
enzimas (ELISA) y las pruebas de aglutinacin (LA y COA), se usan para detectar antgenos
de agentes infectantes (bacterias, hongos, virus, parsitos), presentes en muestras clnicas.
Las pruebas de inmunofluorescencia (IF), directas e indirectas son mtodos que nos
permiten identificar antgenos, se describen en otros captulos de este libro y aparecen
enunciadas en los captulos correspondientes a diferentes microorganismos causantes de
infecciones bacterianas, micticas, virales y parasitarias.
El desarrollo y aplicacin de nuevos mtodos de biologa molecular, que son capaces de
detectar o identificar, de manera rpida y con alta sensibilidad y especificidad a
microorganismos o algunas de sus caractersticas, cambian sustancialmente la prctica de los
laboratorios de microbiologa clnica, en su objetivo de diagnosticar infecciones.
Estos procedimientos de diagnstico molecular tienen como principio bsico, la hibridacin
de una sonda de cido nucleico caracterizada, a una secuencia especfica de cido nucleico
en una muestra de prueba, seguida por deteccin del hbrido apareado.
Otra responsabilidad importante de los laboratorios de Microbiologa clnica es la realizacin
de las pruebas que contribuyen al uso racional de los antimicrobianos, entre los que tenemos
los mtodos que nos permiten conocer, in vitro, la sensibilidad y resistencia de las cepas

143
aisladas frente a las drogas antimicrobianas y la demostracin de la produccin o no, de
enzimas que inactivan a dichas drogas.
Para la realizacin de todas estas pruebas, se seleccionarn aquellas drogas que sern tiles
in vivo frente al microorganismo aislado, segn las caractersticas de resistencia propias o
naturales del grupo al que pertenece y teniendo en cuenta las caractersticas del paciente y de
la regin anatmica de la cual se aisl.
Con el fin de que estas pruebas de laboratorio contribuyan adecuadamente al tratamiento
antimicrobiano, deben poder ofrecer
la informacin lo ms rpido posible, unido a la exactitud, reproducibilidad y buenos
controles.
Otros procedimientos de laboratorio que pueden ofrecer un auxilio importante en el
diagnstico de las enfermedades infecciosas, son las pruebas serolgicas.
Los cultivos de ciertas bacterias, hongos, parsitos y virus pudieran no ser satisfactorios por
diferentes causas: no desarrollo del mtodo adecuado, terapia antimicrobiana previa a la
toma de la muestra o cronicidad de la enfermedad. Bajo estas circunstancias, la deteccin
de anticuerpos especficos y no especficos puede resultar una gran ayuda en el diagnstico y
en la epidemiologa.
Debemos recordar que la demostracin de un anticuerpo especfico indica exposicin
efectiva (por infeccin o por vacunacin) en algn momento, pero pudiera no tener relacin
con la infeccin actual, por lo cual es necesario ser muy cuidadoso en la indicacin precisa y
en la interpretacin adecuada de los resultados de este recurso indirecto.
Con frecuencia es necesario demostrar un aumento en la concentracin de anticuerpos en la
segunda de dos muestras de sangre, obtenidas del paciente con un intervalo de tiempo
determinado.
Al utilizar las pruebas serolgicas como recurso de ayuda diagnstica de las enfermedades
infecciosas, debemos tener presente algunas consideraciones con relacin a las mismas:

Las pruebas varan en su sensibilidad.


Las pruebas varan en su especificidad.
Los antgenos varan en su inmunogenicidad.
Los pacientes varan en su capacidad de respuesta frente a los estmulos antignicos.

El diagnstico serolgico es pocas veces tan til clnicamente como el aislamiento y la


identificacin del agente causal, pero sin embargo, en algunos momentos, es el nico recurso
con que se cuenta.
Con el estmulo antignico de un agente infeccioso, el hospedero puede presentar
hipersensibilidad, que se pone de manifiesto por una reaccin cutnea. El uso de pruebas que
apliquen antgenos conocidos puede servir de ayuda en algunos diagnsticos. En el uso
adecuado de este recurso, resultan de vital importancia: la realizacin correcta del proceder
tcnico, el uso de controles, el mtodo de lectura y la interpretacin adecuada de los
resultados obtenidos.
La mayora de los procedimientos del laboratorio de microbiologa clnica, son lentos y con
frecuencia el mdico de asistencia utiliza el informe microbiolgico como elemento que
confirma o excluye su hiptesis clnica y la teraputica empleada.
Con el avance cientfico tcnico que se ha producido en las dos ltimas dcadas; se han
introducido en la prctica, procedimientos tcnicos, que pueden minimizar el tiempo del

144
diagnstico de laboratorio microbiolgico, adems de ser ms simples y econmicos. No slo
me refiero a la aplicacin de los procederes de las tcnicas moleculares aplicadas al
diagnstico microbiolgico, sino tambin a la introduccin de micromtodos, de la
instrumentacin y de la automatizacin en estos diagnsticos.
Pero no podemos olvidar que con el empleo racional y adecuado de los procedimientos
convencionales y tradicionales, se puede minimizar el tiempo de demora de los informes del
laboratorio y hacerlos, por lo tanto, ms tiles. En este sentido nos resultan de gran ayuda:

La realizacin de las pruebas rpidas convencionales que histricamente han sido


empleadas en los laboratorios de microbiologa clnica y que ya se han analizado en otra
parte de este texto (exmenes directos, deteccin de antgenos solubles, uso de
fluorescencia, pruebas bioqumicas etc.).
Las notificaciones preliminares de los resultados con utilidad clnica, que permitirn
confirmar o reevaluar una impresin diagnstica o hacer cambios en el programa
teraputico
La estrecha comunicacin entre el mdico de asistencia y el microbilogo.

Tenemos la experiencia de que al mdico de asistencia puede resultarle ms importante ir


conociendo que un bacilo Gram negativo o un coco Gram positivo est presente en la
muestra de un paciente, que esperar varios das hasta que se identifique completamente el
microorganismo.
En este sentido es muy importante que el personal del laboratorio y el mdico de asistencia
recuerden que ocasionalmente el informe preliminar puede ser modificado. Igual conducta
de notificacin debemos realizar cuando detectamos la aparicin de microorganismos
potencialmente patgenos para la comunidad o para la instalacin hospitalaria.
En este ltimo caso la rpida comunicacin no ser slo con el mdico de asistencia sino
tambin con la Comisin de Control y Prevencin de la Infeccin Hospitalaria, cumplindose
una de las funciones del laboratorio de Microbiologa al apoyar la vigilancia, la prevencin y
el control de estas infecciones.
Con mucha frecuencia nos encontramos que estas funciones no se llevan a cabo
adecuadamente, debido, entre otros factores, a que una gran parte de la capacidad de los
laboratorios de Microbiologa en el medio hospitalario est forzada por un gran nmero de
muestras indicadas de rutina. Vemos tambin que, desafortunadamente, en muchos hospitales
se descarga la responsabilidad del control de infecciones en una gran cantidad de muestras
tomadas sin ninguna lgica y que no conducen a un objetivo definido.
Como resultado de esta mala utilizacin del recurso microbiolgico se obtiene una gran
cantidad de aislamientos sin importancia, y que a menudo no se pueden interpretar, entre los
que se encuentran los relativos a los niveles de contaminacin de pisos, paredes, aire y otros
elementos intiles; pero sin embargo, a veces se tiene poco conocimiento sobre las
infecciones adquiridas en el hospital.
Los procedimientos microbiolgicos que tanto nos pueden ayudar, pudieran convertirse en
factores distorsionantes al ser mal indicados o realizados de forma inadecuada, pues podran
demorar el reconocimiento de los brotes o llevar a intiles investigaciones de epidemias que
no existen.

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Los resultados que emite el laboratorio de Microbiologa no deben quedar como elementos
dispersos, es necesaria la integracin de los mismos a los pacientes y stos al medio
hospitalario.
Resulta indispensable para el personal del laboratorio y para los mdicos que usan el recurso,
conocer cules son las posibilidades analticas con que cuenta, cules son sus limitaciones y
cules los laboratorios que puede recomendar o a los que puede enviar los especmenes para
los estudios que no pueda realizar.
Como conclusin podemos sealar que, no basta con la indicacin precisa del examen
microbiolgico y un correcto proceder analtico, sino que es necesaria la conjuncin de las
acciones del mdico de asistencia y del microbilogo, lo cual repercutir favorablemente en
los resultados de las pruebas de laboratorio, su interpretacin y su aplicacin en el campo de
las enfermedades transmisibles, independientemente de los recursos materiales con que
cuente el laboratorio que realiza los estudios.
Adems, con la introduccin de nuevos procedimientos; como los micromtodos, la
instrumentacin, la automatizacin y los mtodos de biologa molecular y su impacto en la
prctica, se han producido cambios en el diario quehacer y en los resultados obtenidos en los
laboratorios de microbiologa y parasitologa mdicas.

TEMA IV. MICOLOGA MDICA.

El hombre vive sirvindose de los hongos y especficamente de las levaduras desde hace
muchos siglos, para fermentar zumos de frutas, para esponjar el pan y para hacer sabrosos
y nutritivos ciertos productos alimenticios.
Su importancia es mayor que en tiempos pasados porque podemos emplearlos en nuestra
industria en procesos fermentativos ms diversos y adems para sintetizar ciertas
protenas, grasas y vitaminas.

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No todos los hongos son beneficiosos, existen hongos perjudiciales como los
fitopatgenos que ocasionan daos econmicos en la agricultura, (recordar el moho azul
del tabaco).
El descubrimiento de la relacin causal de algunos hongos con enfermedades infecciosas,
precedi en muchos aos a los trabajos de Pasteur y Koch con bacterias patgenas. A pesar
de su inicio temprano, la micologa mdica nunca ha recibido tanta atencin como la
bacteriologa. Esto tal vez pueda atribuirse a la naturaleza relativamente benigna de las
micosis ms comunes, la rareza de las ms graves y a la base morfolgica de la
identificacin de estas formas estructurales complejas.

Propiedades generales de los hongos. Clasificacin. Hongos filamentosos


y levaduriformes. Cultivo y caractersticas del crecimiento. Formas de
reproduccin. Esporas. Clasificacin y caractersticas. Tipos de micosis.
Tanto los hongos como las bacterias se hallan en todas partes y son causa frecuente de
enfermedades en los animales y plantas, pero de las miles de especies conocidas, menos de
100 son las que producen procesos patolgicos y de aqu slo el 10 % son las que
producen enfermedades en el hombre.
Los hongos patgenos por lo regular no producen toxinas y provocan enfermedades
crnicas con lesiones de tipo granulomatosas, rebeldes al tratamiento. Es adems una
suerte que slo unos pocos hongos (Dermatofitos), se puedan transmitir de persona a
persona o de animales al hombre.

Propiedades generales.

Son organismos eucariticos, no fotosintticos, que poseen una pared celular compuesta de
quitina, que se reproducen de forma sexual y asexual, son inmviles y pueden ser
filamentosos y levaduriformes.

Formas de adquirir las enfermedades causadas por hongos.

Las enfermedades causadas por hongos segn la forma de adquirirlas pueden ser:

Endgenas.
Exgenas.

En endgenas, el agente etiolgico se encuentra formando parte de la flora microbiana


normal del individuo y slo produce enfermedades cuando existen factores predisponentes
tales como:

Enfermedades crnicas debilitantes.


Diabetes.
Tratamiento prolongado con corticoides o antibiticos de amplio espectro.

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El agente etiolgico en las enfermedades exgenas, se halla en la mayora de los casos en
el suelo y el hombre las adquiere accidentalmente.

Tambin podemos decir que las enfermedades producidas por hongos pueden adquirirse
por varias formas:

Inhalacin (Histoplasma s/p).


Traumtica (Cromomicosis).
Contacto (Dermatofitos).
Oportunistas (Candida s/p).

Clasificacin de los hongos segn su reproduccin.

Los hongos segn su reproduccin se clasifican de la siguiente forma:

Hongos perfectos:

- Ficomicetos.
- Ascomicetos.
- Basidiomicetos.

Hongos imperfectos:

- Deuteromicetos.

Los hongos que presentan los dos tipos de reproducciones (sexual y asexual) se les llama
"hongos perfectos"
Los hongos que presentan un slo tipo de reproduccin (asexual) se les llama "hongos
imperfectos".

Morfologa.

Los hongos pueden ser:

* Filamentosos.
* Levaduriformes.

Filamentosos: Constituido por filamentos denominados hifas que pueden ser tabicadas o
no. Al conjunto de hifas ramificadas y entrelazadas se le llama "Micelio" que puede ser
areo o vegetativo.
El micelio areo es superficial, da lugar a las esporas y su funcin es reproductora.
El micelio vegetativo es profundo, crece dentro del substrato o medio de cultivo y su
funcin es nutritiva.

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Los hongos filamentosos se desarrollan lentamente en 1 a 2 semanas, a temperatura
ambiente, formando colonias macroscpicas de aspecto algodonoso, velludo o
pulverulento. Se cultiva en medio de Saboureaud y se incuba a temperatura ambiente.

Levaduriformes: Estn constituidos por clulas individuales ovales o redondas


(blastosporas).
Estos hongos al reproducirse por gemacin, en ocasiones no llegan a separarse formando
estructuras alargadas llamadas pseudohifas. Crecen ms rpido que los hongos
filamentosos (1 a 4 das) a 37C, e incluso a temperatura ambiente en medios de cultivos
simples (entre ellos el de Saboureaud), dando colonias de aspecto cremoso.

Cultivo y caractersticas del crecimiento.

Los hongos de importancia mdica crecen en condiciones aerbicas, a una temperatura entre
22 y 37C en medios de cultivo que contengan compuestos nitrogenados y carbohidratos,
ajustados a un Ph 6,0 y 6,5. Algunas especies requieren factores de crecimiento (Vitaminas,
AA) y microelementos minerales.

En los medios de cultivo lquidos:

Crecen formando un sedimento en el fondo, o


Creando una pelcula sobre la superficie.

En los medios de cultivo slidos:

Forman colonias redondeadas que se expanden concntricamente y pueden


adoptar un aspecto pulverulento, algodonoso, coriceo, granular, cremoso, etc.

Algunas especies elaboran pigmentos que colorean el micelio areo o el vegetativo y se


difunden en el medio de cultivo.

Reproduccin.

Los hongos se reproducen sexual y asexualmente por esporas, las que tambin pueden
constituir elementos de resistencia.
Las esporas de los hongos filamentosos nacen a partir del micelio areo y sus
caractersticas se emplean para la identificacin de los hongos.
Las esporas sexuales se reproducen por fusin de dos clulas y las asexuales se forman
por diferenciacin de las hifas.

Entre las esporas sexuales tenemos:

Cigosporas. Esporas sexuales que se forman en algunos ficomicetos, los extremos de


dos hifas se aproximan y fusionan su contenido dando lugar a una clula en reposo de
paredes gruesas, llamadas cigosporas. Ej: Rhizopus, Mucor.

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Ascosporas. De la fusin resulta la formacin de un saco o asca que contiene los
productos meiticos en la forma de 4 u 8 esporas (ascosporas). Las esporas asexuales
(conidios) nacen externamente en las puntas de las hifas. Ej: (Penicillium, Aspergillus,
Piedra negra).

Basidiosporas. Como consecuencia de la fusin sexual se forma un rgano claviforme


llamado basidio; la superficie de ste lleva 4 productos meiticos (basidiosporas). Las
esporas asexuales (conidios) nacen externamente en la punta de las hifas.

Entre las esporas asexuales se incluyen:

Clamidosporas. Conidios tlicos formados como clulas, de pared gruesa dentro de


una hifa. Permanecen como parte del micelio, y sobreviven despus que el micelio
restante ha muerto y se ha desintegrado.

Conidias. Se producen en hifas especializadas, llamadas conidiforos. Los conidios


pequeos y unicelulares son llamados microconidios. Las grandes y multicelulares se
llaman macroconidias.

Artrosporas. Conidios tlicos formados por segmentacin y desarticulacin de un


filamento de un micelio septado para formar clulas separadas. Estos conidios
propiamente se llaman artroconidios.

Esporangiosporas. Esporas asexuales que se forman en el interior de un saco llamado


esporangio. Las especies terrestres se forman en la punta de un filamento que recibe el
nombre de esporangiforo. Estas estructuras son caractersticas de los ficomicetos.

Blastosporas. Conidios blsticos simples producidos como yemas, que despus se


separan de la clula madre. Se les denomina acretadamente, blastoconidio.

Clasificacin clnica de las micosis.

Pitiriasis. (Giti).
1.- Micosis superficiales Piedra
Dermatofitosis.

2.- Micosis cutneas Cndidiasis.

Cromomicosis. (Piel)
3.- Micosis subcutneas. Micetoma. (Piel- TCS)
Esporotricosis. (Linfticos)
Rinosporidiosis

Histoplasmosis. (Resp.)
4.-Micosis profundas. Criptococosis. (Resp.) (oportunista)

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Candidiasis. (Resp.) (oportunista)
Coccidiodosis. (Resp.)

Dermatofitos. Caractersticas, clasificacin, patogenia y datos


de laboratorio.
Los dermatofitos constituyen un grupo de hongos que afectan los tejidos queratinizados,
(pelo, piel y uas), causadas por varias especies pertenecientes a los gneros:

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Trichophyton. (pelo, piel, uas)
Microsporum. (pelo, piel).
Epidermophyton. (piel, uas)

Se reproducen asexualmente, aunque actualmente se ha podido demostrar en algunos de


ellos que tambin presentan reproduccin sexual.
Las infecciones por dermatofitos se conocen con el nombre de tias, no representando
para el paciente una situacin grave aunque s bastante frecuente.

Patogenia.

La mayora de los dermatofitos son de distribucin universal, aunque algunos son ms


frecuentes en unas zonas que en otras. Dentro de las infecciones humanas que se
transmiten por contacto con el suelo, animales o el hombre tenemos:

T. rubrum.
T. tonsurans.
M.audinii.
E. floccosum.

Entre los hongos que tienen como husped natural los animales, e infectan al hombre se
encuentran:

M. canis.
M. nanum.

Hay hongos que se encuentran en el suelo e infectan los humanos como:

M. gypseum.

Los dermatofitos pueden causar diversas afecciones entre las que sealaremos:

Tia corporal.
Tia de los pies.
Tia ceflica.
Tia de la barba.
Onicomicosis.
La infeccin es favorecida por: humedad, calor, edad, composicin qumica de la piel,
sudoracin, predisposicin gentica, etc.
Producen enzimas queratolticas que digieren el pelo, la epidermis y las uas, segn el
gnero.

Diagnstico de laboratorio. Identificacin.

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1. Recoleccin de muestras: raspado de piel pelo y uas.

2. Examen directo: Examen de las lesiones micticas bajo una lmpara de luz
ultravioleta (lmpara de Wood), donde en los casos positivos se observa, fluorescencia
verdosa en los pelos. Observacin microscpica: El examen de los pelos demuestra si
hay afectacin interior y exterior.

3. Cultivo. Se siembra el raspado de las lesiones en el medio de Saboureaud.

4. Pruebas para la identificacin de especies.

Pitiriasis versicolor.

La tia versicolor es una infeccin leve, en general asintomtica. La proliferacin dentro


del estrato crneo cutneo de grupos de clulas en gemacin, esfricas, con pared gruesa y
de hifas cortas y dobladas de Malazzesia furfur, por lo general no causa otros signos
patolgicos que escamas finas a toscas. Las lesiones aparecen principalmente en trax,
espalda, abdomen, cuello y parte superior de los brazos; adems varan de despigmentadas
a color caf rojizo y slo tienen importancia por su aspecto poco esttico.
El tratamiento consiste en sulfuro de selenio al 1% aplicado cada tercer da durante 15
minutos, lavando despus.

Aspergillus.

La aspergilosis ampliamente definida, es un grupo de micosis, con causas diversas y


patognesis distinta. Aspergillus fumigatus es un moho ubicuo que se encuentra sobre la
vegetacin en descomposicin. Puede colonizar y luego invadir a los tejidos en la crnea
traumatizada, en quemaduras, o en conducto auditivo externo (otitis externa). Esta y otras
especies de Aspergillus se transforman en invasores oportunistas en las personas con
deficiencia inmunitaria (por ejemplo en pacientes con enfermedad granulomatosa crnica,
pero NO en pacientes con SIDA, o en las personas con anormalidades anatmicas del
aparato respiratorio (aspergilosis pulmonar). Diversas especies de Aspergillus producen
aflatoxinas en los alimentos (man).
Puede ocurrir aspergilosis pulmonar en distintas formas. Una de ellas es una bola de
hongos que est desarrollndose en una cavidad previa (por ejemplo, cavidad tuberculosa,
cavidad paranasal, bronquiectasia), en la cual el hongo no invade a los tejidos. Tales
enfermos por lo regular slo requieren tratamiento para el trastorno subyacente. Pueden
dar respuestas significativas de anticuerpos contra los antgenos de Aspergillus..
Una segunda forma es el granuloma activamente invasivo con Aspergillus que se disemina
en el pulmn, dando lugar a una neumona necrosante o a hemoptisis y diseminacin
secundaria a otros rganos. Esto ocurre primordialmente en las personas con
inmunodeficiencia o con inmunosupresin y requiere tratamiento activo antimictico. Una
tercera forma es la aspergilosis pulmonar alrgica, con asma eosinoflica, cifras altas de
IgE y slo mnima invasin de tejidos, pero con broncogramas anormales.

Cromomicosis.

153
La Cromomicosis es una infeccin granulomatosa crnica, de evolucin muy lenta que
afecta la piel y T.C.S, caracterizada por la formacin de ndulos cutneos verrucosos y
producida por diferentes hongos filamentosos de la familia DEMATIACEAE. (Fonsecaea
pedrosoii, Fonsecaea compactum, Phialophora verrucosa y Cladosporium carrionii) que
forman colonias pardas o negras.

Diagnstico de laboratorio.

Recoleccin de la muestra.
Observacin microscpica. (esclerotes, hifas).
Pruebas bioqumicas (licuefaccin de la gelatina, hidrlisis de la casena, digestin del
almidn).
Microcultivo (tipo de esporulacin).

Patogenia.

Estos hongos se encuentran en forma saproftica en el suelo y en la vegetacin. Se


introducen en la piel mediante traumatismos por lo que la infeccin se asocia ms
frecuentemente con los agricultores.
La enfermedad se desarrolla lentamente en un perodo de meses o aos con formacin de
ndulos que se extienden a lo largo de los linfticos y llegan a cubrir parte de la
extremidad. Puede presentarse elefantiasis y obstruccin de los vasos linfticos.

Candida sp, Histoplasma sp, Criptococo sp.


Las micosis profundas son causadas por hongos patgenos u oportunistas que infectan a
personas inmunodeprimidas. Estas micosis afectan al organismo en forma grave y pueden
ser mortales.
Las micosis profundas son causadas por microorganismos que viven libres en la
naturaleza, en el suelo o en material orgnico en putrefaccin y que con frecuencia estn
limitadas a ciertas regiones geogrficas. En tales zonas muchas personas adquieren la

154
micosis, pero la mayora slo desarrollan sntomas menores o ninguno, slo una minora
de los enfermos progresa a la enfermedad completamente desarrollada y grave o mortal.
Las reacciones inmunitarias mediadas por clulas del husped son de importancia capital
en la determinacin del resultado de estas infecciones.
En las micosis generales, la reaccin tpica en los tejidos es un granuloma crnico con
grado variable de necrosis y formacin de abscesos.

Cndida.

La candidiasis es una micosis causada por diferentes especies del gnero Candida que se
caracteriza por producir una infeccin aguda o subaguda y crnica, en la cual el hongo
puede ocasionar lesiones en la boca, vagina, piel, uas, bronquios o pulmones y
ocasionalmente septicemia, endocarditis o meningitis. La Candida puede comportarse
como oportunista, y puede producir adems, micosis cutneo- mucosa y profundas.

Formas clnicas:

Candidiasis de las mucosas.


Vulvo vaginitis.
Anal o perianal.
Perleche o boquera (algodoncillo)

Candidiasis cutnea.
Intertrigo.
Lesiones cutneas generalizadas.

Candidiasis de las uas.


Oniquia.
Paroniquia.

Candidiasis broncopulmonar.

Candidiasis generalizada.
Septicemia.
Meningoencefalitis.
Endocarditis.
Patogenia.

Cndida albicans pertenece a la flora normal de:


Boca.
Vagina.
Intestino.

Produce infeccin de tipo endgena cuando hay factores predisponentes como:

155
Embarazo.
Tratamiento prolongado con antibiticos de amplio espectro.
Inmunodepresin primaria o secundaria.
Diabetes sacarina.

Cndida puede producir infeccin en la sangre, (mecanismo de produccin de


pseudohifas), tromboflebitis, endocarditis o infeccin en los ojos y otros rganos cuando
es introducida por va endovenosa (catteres, agujas, hiperalimentacin, toxicomana, etc.)

Patogenia.

Caractersticas........INVASIVA. (Pseudohifas)

Susceptibles:

Personas que utilizan pldoras anticonceptivas.


Obesos
Los que permanecen en lugares hmedos.
Ancianos.
Recin nacidos.
Drogadictos.
Etc.

Endgeno

Mecanismo de transmisin
Exgeno

Puerta de entrada..................Piel y mucosas.

Enfermedades que produce:

Piel Mucosas Sangre


A. Boca. La infeccin bucal (algodoncillo) ocurre primordialmente sobre la mucosa de la
boca en lactantes y aparece como parches adherentes que consisten primordialmente
en pseudomicelios y epitelio descamado, con slo mnimas erosiones de la membrana.
La proliferacin de Cndida es incrementada por corticoesteroides, antibiticos,
hiperglicemia e inmunodeficiencia.

156
B. Genitales femeninos. La vulvovaginitis se parece al algodoncillo, pero produce
irritacin, prurito intenso y secrecin. La prdida del Ph cido normal de la vagina,
predispone a la vulvovaginitis por Cndida. El Ph cido es conservado normalmente
por la flora normal. La diabetes, el embarazo, la progesterona y la antibioticoterapia
predisponen a la enfermedad.

C. Piel. La infeccin de la piel ocurre principalmente en las partes hmedas del cuerpo,
como las axilas, pliegues interglteos, ingle o pliegues submamarios; es muy comn
en los individuos obesos y diabticos. Estas zonas se vuelven de color rojizo y exudan
lquido, pudiendo desarrollar vesculas. La infeccin por Cndida de los espacios
interdigitales de las manos se observa con frecuencia despus de la inmersin
prolongada en agua; es muy comn en las amas de casa, cocineros, en los manejadores
de verduras y de pescado, etc.

D. Uas. La hinchazn enrojecida dolorosa del pliegue de las uas se parece a la


paroniquia pigena, puede conducir al engrosamiento y a la formacin de surcos
transversos de las uas y finalmente a la prdida de las mismas.

E. Pulmones y otros rganos. La infeccin por Cndida puede ser un invasor secundario
de los pulmones, riones y otros rganos donde alguna enfermedad previa se hallaba
presente (por ejemplo, tuberculosis o cncer). En la leucemia no controlada y en los
enfermos quirrgicos o con inmunosupresin, las lesiones de Cndida pueden ocurrir
en muchos rganos. La endocarditis por Cndida (con frecuencia debida a C.
parapsilosis) ocurre particularmente en los toxicmanos o sobre prtesis valvulares. En
ocasiones se desarrolla candiduria despus de sondeos urinarios, pero tiende a remitir
de manera espontnea.

F. Candidiasis crnica mucocutnea. En los nios, este trastorno es un signo de


deficiencia de la inmunidad celular.

Diagnstico de laboratorio.

Recoleccin de la muestra.

Hisopo. (Mucosas).
Bistur. ( Raspados cutneas).
Esputo. (Broncopulmonar).
Generalizadas. (Sangre) endocarditis, septicemia.

Observacin microscpica: Clulas redondas u ovaladas de paredes delgadas, en


ocasiones gemantes, que aparece como una levadura Grampositiva en gemacin, que
mide 2 a 3 x 4 a 6 m y tambin como clulas Grampositivas alargadas en gemacin,
semejantes a hifas (pseudohifas)

157
Cultivo: En medio de Saboureaud a temperatura ambiente de 48- 72 horas. A 37C, se
acelera el crecimiento. Se desarrollan colonias blandas, color cremoso, que tienen un
olor a levadura. El desarrollo superficial consiste en clulas ovales en gemacin. El
desarrollo sumergido consiste en pseudomicelios.

Pruebas para identificacin de especies.

Tubo germinativo.
Fermentacin de azcares.

Histoplasma capsulatum.

La histoplasmosis es la micosis sistmica de mayor importancia en nuestro pas donde se


han presentado brotes de mayor o menor envergadura, as como casos espordicos de
personas que han estado en contacto con el ambiente de cuevas o cavernas, cuyo suelo rico
en guano de murcilago, le sirve de hbitat natural al hongo. Tambin en heces de pjaros
y palomas puede encontrarse el Histoplasma.

Caractersticas y clasificacin.

Histoplasma capsulatum (Emmonsiella capsulata), es un hongo con dimorfismo


dependiente de la temperatura. Incubado a temperatura inferior a la de 35C crece en
forma filamentosa con aspecto algodonoso de color blanco, que se va tornando color caf
con leche, mientras que a 37C, crece como una levadura de colonias pequeas, cremosas
y de color blanquecino.

Muestras provenientes del paciente.


Levaduriforme
Dimorfo Agar sangre a 37C

-Suelo-tierra-filamentos-fragmentos miceliales
Microconidios y macroconidios.

-Saboureaud a temperatura ambiente

La forma filamentosa produce microconidias y macroconidias tuberculadas


(clamidosporas). Se ha descubierto un ciclo reproductivo sexual, que llev a su
reclasificacin y cambio de gnero (Emmonsiella).

Patogenia.

Los microconidios son inhalados de una fuente exgena, penetran en los alvolos
pulmonares, donde se convierten en pequeas clulas levaduriformes gemantes que son
fagocitados por los macrfagos alveolares y pueden diseminarse dentro de ellos por el

158
torrente sanguneo localizndose en el SRE provocando una reaccin inflamatoria con
infiltrado de neutrfilos y linfocitos. La infeccin aguda pulmonar es la forma ms
frecuente y se caracteriza por la formacin de pequeos tubrculos de clulas epiteloides
que dan un moteado tpico en las imgenes radiogrficas, acompaando a un cuadro
clnico febril con signos de localizacin broncopulmonar. Este proceso evoluciona
favorablemente, pero con sntomas indistinguibles de la tuberculosis cavitaria. La
histoplasmosis sistmica afecta a un escaso nmero de pacientes, en los cuales se ven
comprometidos, adems de los pulmones, otros rganos, pudiendo evolucionar de formas
aguda o progresiva, siendo esta ltima de suma gravedad. En raras ocasiones se han
descrito lesiones primarias de piel y mucosas a consecuencia de una inoculacin directa.
Resumiendo Patogenia:

Caractersticas del germen......Invasivo. .


Paleadores de guano.
Susceptibilidad......Universal.....Factor ocupacional Militares.
Espelelogos.

Puerta de entrada.....Tracto respiratorio superior.....(Inhalacin)

Forma infectante y transmisin-------microconidias y fragmentos de micelio que se


encuentran en la tierra enriquecida con materia orgnica en descomposicin.
Enfermedades que produce:
Asintomtica (95 %)
Histoplasmosis pulmonar aguda

Sintomtica

Histoplasmosis pulmonar crnica. (cavitaria)

Histoplasmosis diseminada.

El diagnstico de la Histoplasmosis puede hacerse de la siguiente forma:

Presuntivo.
Clnico.
Epidemiolgico.
Radiolgico.
Serolgico.
Certeza------Diagnstico de laboratorio. (examen directo y cultivo).
Diagnstico de laboratorio.

La observacin microscpica de materiales patolgicos (Esputo, LCR, sangre, mdula


sea, biopsias de tejidos), conteniendo macrfagos llenos de levaduras, constituyen un

159
elemento diagnstico importante, pero no es frecuente. El cultivo de estos materiales
muestra resultados positivos transcurridas varias semanas, debido al lento crecimiento de
este agente.
La prueba cutnea de histoplasmina es positiva en aquellas personas que han padecido la
infeccin a veces inaparente, y ste se mantiene por muchos aos, por lo que su valor
diagnstico es mnimo. Durante la infeccin pueden detectarse anticuerpos precipitantes
por inmunodifusin o contrainmunoelectroforesis a partir de la tercera semana. La llamada
banda de precipitacin que aparece tempranamente y desaparece poco tiempo despus de
la recuperacin, indica una infeccin activa.

Criptococcus.

Es una levadura que se caracteriza por una amplia cpsula de carbohidratos en cultivos y
lquidos de los tejidos. Ocurre ampliamente diseminada en la naturaleza y se halla en un
nmero muy grande en las heces secas de las palomas. La enfermedad en el humano por lo
general es oportunista.

Morfologa e identificacin.

En el LCR, o en los tejidos, el microorganismo es redondo u ovoide, midiendo de 4 a 12 m


de dimetro, a menudo en gemacin y rodeado por una amplia cpsula cuyo tamao puede
ser de dos o tres veces el dimetro de la clula.. En agar de Saboureaud a temperatura
ambiente las colonias color crema son lustrosas y mucoides. Los cultivos no fermentan los
carbohidratos, pero asimilan la glucosa, maltosa, sacarosa y galactosa (pero no la lactosa). La
urea es hidrolizada. Como contraste a los Criptococcus no patgenos, C. neoformans se
desarrolla bien a 37C en la mayor parte de los medios de laboratorio, siempre y cuando no
contengan ciclohexamida. La compatibilidad de los serotipos A y D o B y C da lugar a
micelios y basidiosporas de Filobasidiella neoformans o F. bacillispora.

Estructura antignica.

Cuatro tipos serolgicos de polisacridos capsulares (A,B,C,D), han sido identificados. El


antgeno capsular puede disolverse en el LCR, el suero o la orina y es posible identificar al
carbohidrato con antisueros especficos, por aglutinacin con ltex (partculas recubiertas con
el anticuerpo) y con otras pruebas. Esta identificacin constituye un diagnstico confiable.
Adems varias pruebas serolgicas pueden detectar anticuerpos antipolisacridos. La
presencia de estos anticuerpos no significa un aumento de la resistencia a la recurrencia.

Patogenia.

La infeccin en el humano ocurre a travs del sistema respiratorio y es asintomtica o est


asociada con sntomas pulmonares inespecficos y con sntomas vagos. La inhalacin masiva
de clulas puede resultar en la enfermedad generalizada progresiva en una persona normal.
Sin embargo habitualmente Criptococcus constituye una infeccin oportunista. En personas
inmunodeficientes o con inmunosupresin, la infeccin pulmonar puede diseminarse en
forma general establecindose en el SNC y en otros rganos. La manifestacin clnica ms

160
comn es una meningitis crnica de lento desarrollo con remisiones y exacerbaciones
espontneas frecuentes.

La meningitis puede parecerse a:

Tumor enceflico.
Absceso del encfalo.
Enfermedad degenerativa del SNC.
Cualquier meningitis por hongos o Mycobacterias.

Diagnstico de laboratorio. (Productos patolgicos)

LCR.
Esputo.
Orina.
Suero.
Exudados.
Examen microscpico: Se colorea con tinta china, observndose clulas
levaduriformes encapsuladas.
Cultivo: El cultivo de las muestras sembrado en el medio de Saboureaud e
incubado a 37 C, produce un crecimiento de aspecto cremoso y de color blanquecino.
Serologa: Aglutinacin con ltex (para detectar antgenos capsulares).

Revisin bibliogrfica

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163
* Mdico. Especialista de 2do grado en Microbiologa.
Profesor Asistente de la Asignatura Agentes Biolgicos.

** Mdico. Especialista de 2do grado en Microbiologa.


Profesora Auxiliar de la Asignatura Agentes Biolgicos. Investigadora Auxiliar.

164
*** Mdico Especialista de 1er grado en Microbiologa.
Profesor Asistente de la Asignatura Agentes Biolgicos.

**** Mdico. Especialista de 2do grado en Microbiologa.


Profesor Asistente de la Asignatura Agentes Biolgicos.

***** Mdico. Especialista de 2do grado en Microbiologa.


Profesor Auxiliar de la Asignatura Agentes Biolgicos.
Investigador Titular. Consultante del Departamento de Microbiologa, Hospital
Peditrico de Centro Habana.

****** Mdico. Especialista de 2do grado en Microbiologa.


Profesor Auxiliar de la Asignatura Agentes Biolgicos.

165