NOMBRE: Andres Felipe Bedoya

Laverde
CODIGO: 25523360

CFTR

El CFTR o regulador de la conductancia transmembrana de la fibrosis qustica es un canal

que transporta iones de cloro hacia el espacio extracelular, el nombre de este canal se
debe a que las mutaciones en el gen con el mismo nombre (CFTR) producen la aparicin
de la fibrosis qustica una patologa que afecta en su mayor parte a la poblacin
caucsica. La fibrosis qustica es una enfermedad que altera la fisiologa del movimiento
del cloro y se presenta en las personas de maneras en las que hay una acumulacin de
moco, este trastorno es potencialmente mortal y se da cuando ambos alelos codificantes
estn daados
ESTRUCTURA,
la protena proviene especficamente en las clulas epiteliales de los mamferos, esta
protena tiene un marco de lectura abierto grande que predeca una Polipptido de 1480
aminocidos. Su caracterstica ms obvia es la presencia de varias secuencias helicoidales
hidrfobas que atraviesan la membrana, las cuales Indican que era probablemente que
fuese una protena de membrana integral. en la Bsqueda de protenas las secuencias
revelaron una homologa con un grupo de transporte activo de Protenas. La homologa de
secuencia primaria se restringi a regiones de Aproximadamente 150 residuos que
constituyen pliegues de unin a nucletidos, Adems, existen potenciales similitudes en la
estructura secundaria en Las disposiciones de las hlices transmembrana predichas de las
cuales Puede ser seis en cada mitad de la molcula. Una caracterstica que es nica para
una gran Y clase diversa de transportistas procariotas y eucariotas es la aposicin De
estos dos dominios, y por lo tanto el trmino de sper familia ha sido Aplicado.
FUNCION.
Los canales CFTR se encuentran en la membrana apical de las clulas epiteliales de todo
el cuerpo, donde juegan un papel vital en el transporte de molculas y electrolitos. Los
canales se abren y cierran, en un proceso dinmico llamado "gating", para transportar
cloruro (Cl-) Y el bicarbonato (HCO3-) de las clulas epiteliales. El flujo de iones Cl- tiene
un impacto significativo en la homeostasis inica e hidratacin de las secreciones en
rganos incluyendo los pulmones, el hgado, el pncreas, el tracto digestivo, el tracto
reproductivo y la piel.
La conductancia transmembrana de fibrosis qustica Regulador (CFTR) se considera como
un cAMP / PKA / ATP Cl-canal regulado que tambin controla la funcin de otras protenas
de membrana. Aparte del los ya conocido efectos de los efectos de CFTR sobre la
conductancia de Na + epitelial, tambin se ha informado anteriormente que el CFTR
inhibeCa-2 activadas por Ca2, en el endotelio de la arteria pulmonar Y las clulas acinares
parotdeas aisladas, por un mecanismo desconocido. Adems de esto, los canales de
aniones regulados por el volumen fueron inhibidos por la expresin de CFTR. Estudios
adicionales demostraron que la regulacin negativa de CFTR dio como resultado una
Regulacin negativa de cAMP, Ca2 y de volumen regulado a la conductancia del cloro.
SINTESIS
el gen CFTR est fuertemente plegado sobre si mismo en un SUPER enrollamiento de ADN
que forma el cromosoma. La expresin del gen CFTR se inicia mediante seales celulares
que instruyen al cromosoma para que este se desenlace y pueda revelar el gen CFTR
luego Una copia porttil del gen se hace en forma de ARN mensajero-La cadena de mRNA
pasa a travs de un poro nuclear en el citoplasma para comenzar el proceso de
traduccin. Los ribosomas tienen la funcin de leer y traducir la secuencia del ARNm a una
cadena poli peptdica de aminocidos. Cuando se lee la seal final o el codn de
detencin, el ribosoma libera la cadena polipptidica con un CFTR completamente
extendido, que se pliega para formar un canal CFTR inmaduro. Despus de la traduccin
de protenas, la protena CFTR inmadura sufre modificaciones postraduccionales en el
aparto de Golgi, esta protena inmadura puede sufrir varios tipos de modificaciones
postraduccioales incluyendo fosforilacion y la palmo ilacin de la cual se hablar ms
adelante. Durante este proceso, la estructura tridimensional de la protena contina
desarrollndose a travs de una serie de modificaciones qumicas que ocurren en el
aparato de Golgi para su correcto funcionamiento. Esto culmina con una protena que ha
sufrido ya sus modificaciones postraduccionales y que esta lista para ejercer su funcin
como canal, pero es necesario trasportarla a la membrana plasmtica y se hace de
manera que se empaqueta en una vescula para su transporte a la superficie celular.
Despus de la modificacin postraduccional, el CFTR se envasa en vesculas para su
transporte a la superficie celular. Esto se llama trfico de protenas. Finalmente, la vescula
que transporta protena CFTR se fusiona con la membrana, permitiendo la expresin
superficial de CFTR. El CFTR puede comenzar inmediatamente a funcionar como un canal
inico.
El plegado y la maduracin de CFTR normal y deltaF508- CFTR son algo diferentes. En
ambos casos, el plegamiento comienza cuando el complejo oligosacrido transferasa
(complejo OST) se une a la protena CFTR o deltaF508-CFTR recin sintetizada a travs de
secuencias de consenso que se insertan co-traduccionalmente en el retculo endoplsmico
Ramificado de 14 unidades Este proceso se conoce como N-glicosilacin o ncleo-
glicosilacin Entonces, la mayor parte del deltaF508- CFTR se degrada a travs de la
ubiquitinacin dependiente de la protena 8 de choque trmico. A diferencia del deltaF508-
CFTR, el CFTR prosigue en la ruta de plegado a travs de una interaccin de sus residuos
N-glicosilo. El resto glicano es reconocido por cualquier Glucosidasa I y II, que recubre
secuencialmente dos residuos de glucosa. Las Glucosidasas exactas que participan en
este proceso son desconocidas. La estructura oligosacrida monoglucosilada es entonces
reconocida por la lectina Calexina.
MPT
Palmitoilacion es una modificacin postraduccional covalente, que tpicamente es
reversible Conocida por regular diversos aspectos de la biognesis de protenas de
membrana de Particular importancia para los mecanismos que subyacen. En numerosas
protenas de membrana, incluyendo ion Y un transportador de la misma familia de genes
que CFTR,la Palmitoilacion ha demostrado mediar la maduracin Ms all del ER, en la
localizacin en la membrana plasmtica, el canal inico Fosforilacin, el reciclado de la
superficie celular y la protena de Activacin. Debido a que la mutacin comn en CF
interrumpe muchos De estos mismos procesos, la identificacin de sitios especficos para
Palmitoilacion puede proporcionar una nueva visin de la Funcin de mutantes de tipo
salvaje y comnmente observados Formas de CFTR. Del mismo modo, el hallazgo de CFTR
mltiple Sitios de metilacin sugiere una regulacin previamente relevante para la
biognesis y / o ion de con Actividad para el canal. La metilacin de protenas es bien
reconocida por Su funcin epigentica durante la modificacin de las histonas, y hay
Tambin una creciente apreciacin de las formas en que el grupo metilo Pueden influir en
los procesos pertinentes a la patogenicidad del CFTR, Localizacin de protenas,
interacciones protena-protena o Estabilidad en la membrana plasmtica.
PURFICACION
Las clulas se lisaron en un tampn fosfato que contena20% de glicerol, de NaCl,
arginina, cido glutmico y ATP con MgCl2 y EDTA Inhibidor de Proteasa usando una
prensa francesa. Las clulas lisadas lisados se sedimentaron a 4000 rpm seguido de ultra
centrifugacin A 40.000 rpm durante 6-18 h. La fraccin de membrana se recogi y se
solubiliz usando una Dounce y tampn de fosfato como anteriormente se hizo, Con de
NaCl y de Fos-colina 14. La mezcla de extraccin se sediment a 20 000 rpm en un rotor,
y el sobrenadante Diluido a una concentracin final de Fos-colina 14 mediante la adicin
de fosfato 25 Que contiene 20% de glicerol, de NaCl, de arginina, cido glutmico y
ATP.Con un prelavado de Resina Nquel Una plataforma giratoria a 48C durante la noche.
El lisado y la resina fue por centrifugacin a 800 rpm en un rotor de cuchara oscilante a
48C y el sobrenadante no unido se decant. La resina se aplic a una columna y se lav
Fosfato que contiene 20% de glicerol, NaCl, de arginina, de cido glutmico, ATP y Fos-
colina 14. La elucin fue Obtenida por gravedad usando gradientes escalonados y dos o
un AktaCromatografa con imidazol. Las fracciones fueron dot blotted, Se reunieron y se
concentraron hasta 10 ml o menos, seguido por el tamao Por cromatografa de exclusin
usando tampn de elucin, NaCl, MgCl, glicerol al 15% DDM sin imidazol. El Agrupado Las
fracciones se realizaron sobre dodecilsulfato sdico-Electroforesis en gel de poliacrilamida
(SDS-PAGE) para Westernblotting y coloracin con Coomassie Blue. La concentracin total
de la Protena se evalu mediante el ensayo de BCA de precipitacin. Tambin se utiliz un
protocolo de purificacin alternativo con DDM.
ESTRUCTURA PRIMARIA
 REFERENCIAS
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LIU, F., ZHANG, Z. Y CHEN, J.

Dephosphorylated, ATP-free human cystic fibrosis transmembrane conductance regulator (CFTR)
En el texto: (Liu, Zhang and Chen, 2017)
Bibliografa: Liu, F., Zhang, Z. and Chen, J. (2017). Dephosphorylated, ATP-free human cystic fibrosis
transmembrane conductance regulator (CFTR).