25

LAMPIRAN A: PEMBUATAN MEDIA PERTUMBUHAN, REAGEN

SALKOWSKI DAN LARUTAN MC FARLAND

a. Media Pertumbuhan (Bric et al, 1991).

Yeast extract 5 g + agar 20 g + Nacl 5 g + Trypton 10 g + NaCl 0,5 g + 5 mM L-
Tryptopan dilarutkan dalam 1 liter aquades dan diukur pH sampai 7,5 jika belum
mencapai ditambahkan NAOH lalu di autoklaf.

b. Media Luria Bertani Cair (Bric et al, 1991).

Yeast extract 5 g + Nacl 5 g + Trypton 10 g + NaCl 0,5 g + 5 mM L-Tryptopan
dilarutkan dalam 1 liter aquades dan diukur pH sampai 7,5 jika belum mencapai
ditambahkan NAOH lalu di autoklaf.

c. Pembuatan reagen Salkowski (Gordon & Weber, 1951).

150 ml H2SO4 + 250 ml aquades + 7,5 ml FeCl3 6 H2O

d. Komposisi Larutan Mc Farland (Bresson dan Borges, 2004).

H2SO4 1% 9,5 ml + BaCl 1,175 % 0,5 ml

Universitas Sumatera Utara

 26

LAMPIRAN B: PENENTUAN KURVA STANDAR IAA (INDOLE ACETIC

ACID)

Gambar 4. Persamaan Garis Kurva Standar IAA

Nilai absorban dari setiap konsentrasi dimasukkan ke dalam tabel yang akan
ditentukan persamaan kurva standarnya.
Tabel 4. Nilai Persamaan Garis Regresi Kurva Standar IAA
x y x2 y2 xy
0,1 0,021 0,01 0,000441 0,0021
0,4 0,151 0,16 0,022801 0,0604
0,8 0,344 0,64 0,118336 0,2752
1,2 0,516 1,44 0,266256 0,6192
1,4 0,611 1,96 0,373321 0,8554
x= 3,9 y= 1,643 x2 = 4,21 y2=0,781155 xy= 1,8123
= 0,78 = 0, 3286

Untuk mencari persamaan garis regresi kurva maka nilai absorban (y) dari setiap
konsentrasi IAA (x) dimasukkan ke dalam rumus:

Universitas Sumatera Utara

 27

= 0,999

a =
= 0,3286- 0,454 (0,78)
= - 0,025

y = a + bx
y = bx a

Sehingga diperoleh persamaan garis kurva standar adalah y = 0, 454 x 0,025

Untuk mencari konsentrasi sampel, substitusikan nilai absorban dari setiap sampel ke
persamaan garis kurva standar diatas.
Tabel 5. Analisis Konsentrasi IAA Secara In vitro dengan Metode Kolorimetri
Isolat Konsentrasi IAA(ppm)
Hari ke-2 Hari ke-4 Hari ke-6
Md 1 1,002 0,374 0,110
Md 2 0.616 0,594 0,577
Md 3 0,982 0,640 0,389
Md 4 0,843 0,396 0.352
Md 5 0,878 0,618 0,281
Md 6 0,931 0,411 0,266
Md 7 0,566 0,411 0,398
Bj 1 0,539 0,713 0,821
Bj 2 0,207 1,050 1.090
Bj 3 0,266 0,786 1,044
Bj 4 0,248 0,566 0,696
Bj 5 0,257 0,596 0,700

Universitas Sumatera Utara

LAMPIRAN C: DATA PENGAMATAN NILAI ABSORBAN SETIAP ISOLAT

Tabel 6. Pengukuran Nilai Absorban Setiap Isolat

Isolat Absorbansi hari ke-2 Rata- Absorbansi hari ke-4 Rata- Absorbansi hari ke-6 Rata-
U1 U2 U3 rata U1 U2 U3 rata U1 U2 U3 rata
Md 1 0,439 0,368 0,484 0,430 0,144 0,146 0,147 0,145 0,025 0,027 0,025 0,025
Md 2 0,256 0,255 0,256 0,255 0,245 0,245 0,246 0,245 0,381 0,087 0,244 0,237
Md 3 0,421 0,421 0,421 0,421 0,271 0,253 0,275 0,266 0,152 0,152 0,152 0,152
Md 4 0,314 0,412 0,350 0,358 0,155 0,155 0,156 0,155 0,123 0,126 0,158 0,135
Md 5 0,385 0,257 0,481 0,374 0,257 0,255 0,256 0,256 0,104 0,103 0,103 0.103
Md 6 0,347 0,419 0,430 0,398 0,150 0,149 0,189 0,162 0,098 0,096 0,096 0,096
Md 7 0,202 0,197 0,297 0,232 0,162 0,162 0,162 0,162 0,156 0,156 0,156 0,156
Bj 1 0,036 0,075 0,550 0,220 0,311 0,303 0,285 0,299 0,378 0,315 0,352 0,348
Bj 2 0,079 0,065 0,091 0,069 0,526 0,406 0,424 0,452 0,517 0,467 0,427 0,470
Bj 3 0,025 0,091 0,092 0,078 0,319 0,390 0,287 0,332 0,416 0,459 0,472 0,449
Bj 4 0,066 0,120 0,080 0,088 0,222 0,229 0,247 0,232 0,332 0,256 0,286 0,291
Bj 5 0,015 0,212 0,051 0,082 0,217 0,226 0,295 0,246 0,275 0,265 0,340 0,293

28
Universitas Sumatera Utara
LAMPIRAN D: DATA PENGAMATAN TERHADAP TINGGI, PANJANG AKAR DAN BERAT BASAH KECAMBAH PADI

Tabel 7. Pengukuran Terhadap Tinggi, Panjang Akar, dan Berat Basah Kecambah Padi
Perlakuan Tinggi Tanaman (cm) Panjang Akar (cm) Berat Basah (gr)
U1 U2 U3 U4 U5 U6 U1 U2 U3 U4 U5 U6 U1 U2 U3 U4 U5 U6
Kontrol 15,5 16 15,5 15,5 15,5 15,5 5 5 6 5 6 6 0,1 0,1 0,1 0,1 0,1 0,1
15,5 16 15,5 16 15,5 15,5 5 5 6 5 5 6 0,1 0,1 0,1 0,1 0,1 0,1
15,5 16 15,5 15,5 15,5 16 6 5 6 5 6 6 0,1 0,1 0,1 0,1 0,1 0,1
Rata-rata 15,5 16 15,5 15,6 15,5 15,6 5,3 5 6 5 5,6 6 0,1 0,1 0,1 0,1 0,1 0,1
Total 15,61 5,48 0,1
Rata-rata
Md 1 26 24,5 25 26 26 26 11 9 11 11 11 11 0,2 0,2 0,2 0,2 0,2 0,2
26 24,5 25 26 26 26 11 8 9 11 11 11 0,2 0,2 0,2 0,2 0,2 0,2
26 24,5 25 26 26 26 11 11 9 11 11 11 0,2 0,2 0,2 0,2 0,2 0,2
26 24,5 25 26 26 26 11 9,3 9,6 11 11 11 0,2 0,2 0,2 0,2 0,2 0,2
25,58 10,48 0,2
Bj 2 15 14 15 15 15 14,5 7 7 8 7 8 7 0,1 0,1 0,1 0,2 0,1 0,1
14 9 15 15 15,5 15 7 7 8 7 8 7 0,2 0,1 0,1 0,1 0,1 0,1
15 9 13 15 15 15 8 7 8 8 7 7 0,2 0,2 0,2 0,1 0,1 0,2
Rata-rata 14,6 10,6 14,3 15 15,16 14,83 7,3 7 8 7,3 7,6 7 0,16 0,13 0,13 0,13 0,1 0,13
Total 14,08 7,36 0,13
Rata-rata
Bj 3 16,5 23 22 23 22 24 8 12 8 8 8 8 0,2 0,15 0,15 0,15 0,15 0,2
15 23 22 23 22 24 8 8 8 8 8 12 0,15 0,15 0,15 0,15 0,15 0,15
15 23 24 23 22 24 8 8 8 8 8 12 0,15 0,15 0,15 0,15 0,15 0,1
Rata-rata 15,5 23 22,6 23 22 24 8 9,3 8 8 8 10,6 0,16 0,15 0,15 0,15 0,15 0,15
Total 21,68 8,65 0,15
Rata-rata

29
Universitas Sumatera Utara
 30

LAMPIRAN E. DOKUMENTASI PENELITIAN

a b
Gambar 5. Kecambah Padi Pada Media Agar Steril (a) dan IAA Sintesis dengan
Penambahan Reagen Salkowski (b).

a b
Gambar 6. Mikro Sentrifugator (a) dan Spektrofotometer (b).

Md 4 Md 7
Bj 5

Bj 2
Md 3

a b
Gambar 7. Isolat Awal Bakteri Endofit dari Lokasi Medan (a) dan Binjai (b).

Universitas Sumatera Utara

 31

a b
Gambar 8. Biakan Murni Bj 2 (a) dan Biakan Murni Md 2 (b).

a b c d
Gambar 9. Media Cair yang Belum Diinokulasi Bakteri Endofit (a), Kultur
Bakteri dengan Waktu Inkubasi Dua Hari (b), Empat Hari (c), dan
Enam Hari (d).

a b
Gambar 10. Supernatan yang Telah Diberi Reagen Salkowski (a) dan Tanpa
Reagen Salkowski (b).

a b
Gambar 11. Uji Biokimia, Uji TSIA (a) dan Uji Sitrat (b).

Universitas Sumatera Utara