Anda di halaman 1dari 9

PENDAHULUAN

Bacillus subtilisis Gram-positif bakteri endospora biasanya ditemukan di


dalam tanah dan tanaman. Telah banyak digunakan dalam penelitian
laboratorium selama beberapa dekade (Moszer, Jones, Moreira, Fabry, & Danchin,
2002; Sonenshein, Hoch, & Losick, 2002) .B. subtilisstrains terisolasi dari alam
yang merupakan senyawa antimikroba mampu menghasilkan struktur yang
berbeda.

Produksi antimikroba potensial OFB. Subtilis pernah dikenal selama 50


tahun. Sebagian besar antimikroba yang dihasilkan oleh B. Subtilis adalah dalam
bentuk peptida seperti subtilin, subtilosin A, ericin dan sublancin. Mereka
menunjukkan sangat kaku, hidrofobik dan / atau struktur siklik (Katz & Demain,
1977). Bakteriosin yang dihasilkan oleh B. Subtilis demonstrating berbagai
kegiatan antimikroba termasuk agen anti-jamur, agen anti-virus, anti-
ameobocytic agen dan agen anti Mycoplasma (Awais, Pervez, Yaqub, & Shah,
2010; Stein, 2005; Zhao et al., 2013)

produksi bakteriosin oleh Bacillus subtiliscould dasarnya dipengaruhi oleh


suhu, pH dan komposisi media yang kompleks (Aftab, ul Haq I, & Baig, 2012; Khochamit,
Siripornadulsil, Sukon, & Siripornadulsil 2015; Motta & Brandelli, 2008). Media yang
kompleks biasanya mendukung pertumbuhan melimpah dan bakteriosin relatif tinggi.
Namun, perlunya mencari cara baru untuk memanfaatkan makanan limbah industri
mendorong menggunakan alternatif yang mungkin termasuk produk sampingan seperti susu
(Amiali, Lacroix, & Simard, 1998;
Guerra & Pastrana, 2002). Fitur yang paling penting dari whey adalah konten
mereka peptida yang dapat bertindak sebagai zat atau prekursor yang
bakteriosin biosintesis (De Vuyst, 1995). Tujuan dari Penelitian yang (a). untuk
menentukan sifat antimikroba bakteriosin yang diproduksi oleh yang baru
isolated B. subtilisstrain melawan diuji patogen (b) untuk menganalisis pengaruh
sumber karbon di media,pH, perubahan suhu dan waktu inkubasi pada
antimikroba produksi dan (c) untuk mengkarakterisasi zat antimikroba oleh SDS-
PAGE.

BAHAN DAN METODE

1. Bahan

Ektrak ragi, Nutrient Agar, Nutrient Broth, glucose, dan peptone

2. strain bakteri

dalam penelitian ini, total 13 bacillus yang diisolasi dari tanah dan sempel
kentang dari kabupaten sukarya, turkey disaring untuk memproduksi agen
antimikroba. Bakteri memproduksi jumlah tertinggi agen antimikroba dari agen
diperiksa terhadap bakteri patogen. Dulu dipelihara dalam nutrient broth yang
mengandung 50% gliserol untuk penyimpanan jangka panjang. Makanan bawaan
patogen (Listeria monocyctogenes, Bacillus cereus, Staphylococcus aureus,
Escherichia coli O157: H7, Salmonella Typhimurium, Salmonella enteritidis,
Pseudomonas aeruginosa) diperoleh dari koleksi kultur di Departemen food
Teknik di Sakarya University.

3. identifikasi molekuler bakteri

identifikasi molekuler bakteri dilakukan dalam laboratorium eksternal


(Refgen, Ankara, Turki) melalui 16S rDNA urutan gen. Sebanyak 1.431 pangkalan
ditentukan dalam pengkodean yang sesuai dengan penomoran 11-1506 E. coli.
digunakan 2 Program untuk menyelaraskan dan membandingkan urutan dengan
semua diendapkan
urutan di GenBank (www.blast.ncbi.nlm.nih.gov/Blast.cg). Untuk mengetahui
hubungan strain dengan strain Bacillus, evolusi Analisis dilakukan di MEGA6
(Tamura, Stecher, Peterson, Filipski, & Kumar, 2013). Sejarah evolusi adalah
disimpulkan dengan menggunakan metode Maximum Likelihood berdasarkan
pada Model Tamura-Nei (Tamura & Nei, 1993). Pohon dengan tertinggi log
kemungkinan (? 1868,0046) ditampilkan. Pohon awal (s) untuk heuristik yang
pencarian diperoleh secara otomatis dengan menerapkan Neighbor- Bergabung
dan BioNJ algoritma untuk matriks jarak berpasangan diperkirakan menggunakan
Maximum Composite Kemungkinan (MCL) pendekatan, dan kemudian memilih
topologi dengan unggul nilai log kemungkinan. Pohon itu ditarik ke skala, dengan
panjang cabang diukur dalam jumlah substitusi per situs. Analisis ini melibatkan
10 nukleotida urutan. posisi kodon termasuk adalah 1st2nd3rdNoncoding.
Semua posisi yang mengandung kesenjangan dan data yang hilang tersingkir.
analisis evolusioner dilakukan di MEGA6 (Tamura et al., 2013).

4. Media dan kondisi kultur

Budaya benih dibudidayakan di termos 100mL mengandung 20 mL


nutrien borth dalam inkubator pengocokan pada 33C, 125 rpm selama 24 jam.
medium produksi untuk bakteriosin dibangun oleh sedikit
memodifikasi media yang diberikan oleh Avci et al. (2016) yang terdiri dari 10 g
glukosa, 5 g ekstrak ragi, 5 g pepton, 1 g K2HPO4, 0,1 g
MgSO4 7H2O dalam 1 L air suling (medium basal). pH awal
dari themedium disesuaikan dengan 7.0 dengan 2 mol / NaOH L atau 2 mol / L
HCl dan ditransfer ke labu Erlenmeyer 100 ml sebagai 30ml bagian sebelumnya
sterilisasi pada 121 C selama 15 menit. Sebuah kultur digunakan biji segar 5% (v
/ v) memiliki 2,0 OD (600 nm). Pengaruh suhu adalah ditentukan dengan
menginkubasi strain pada berbagai suhu yang bervariasi dari 30 sampai 50 C.
Dalam rangka untuk menguji pengaruh pH pada produksi, media basal disiapkan
pada pH yang berbeda (4e11). media dasar dengan berbagai konsentrasi
glukosa (0, 10, 15, 20 g / L) siap untuk mengetahui pengaruh konsentrasi
glukosa pada produksi. Pengaruh bubuk pada produksi antimikroba diuji pada
tingkat 10, 15 dan 20 g / L menggunakan media dasar tanpa glukosa.
Konsentrasi yang sama dari solusi kaldu bubuk juga diuji di media basal tanpa
nitrogen sumber (ekstrak ragi dan pepton) dan glukosa. kecuali untuk suhu,
semua percobaan produksi dilakukan
keluar 35? C selama 24 jam dalam gemetar pada 125 rpm. Pertumbuhan bakteri
diukur secara spektrofotometri pada 600 nm (Khochamit et al., 2015). Untuk
aktivitas antimikroba analisis, budaya broth was disentrifugasi pada 10.000 rpm
selama 15 menit untuk menghapus sel-sel. Supernatan yang mengandung
antimikroba disaring melalui 0,45 filter membran mm (Millipore-Merck,
Darmstadt, Jerman) untuk eksperimen lebih lanjut.

Aktivitas penelitian antimikroba

Salmonella Typhimurium dipilih sebagai organisme indikator untuk menguji


aktivitas antimikroba. Indikator strain yang dibudidayakan dalam Tryptic Soy
Broth pada suhu 37C selama 18 jam . Aktivitas antimikroba terhadap organisme
indikator diuji dengan metode difusi cakram seperti yang dijelaskan oleh
Khochamit et al. (2015) dengan beberapa modifikasi. Secara singkat, 50 mL
cultur indikator itu diusap diatas Tryptic Soy Agar dan terus selama 1 jam untuk
penyerapan cultur dengan agar-agar. 6mm kertas saring steril (Whatman No.1)
ditempatkan ke piring aseptik dan 5 ml sampel antimikroba diaplikasikan di
tengah kertas saring. Pelat diinkubasi pada suhu 37 C selama 24 jam. Diameter
zona hambat diukur.

konsentrasi penghambatan minimum antimikroba yang dihasilkan oleh Bacillus


sp. ZBP4 ditentukan terhadap berbagai patogen, termasuk, Listeria
monocyctogenes, Bacillus cereus, Staphylococcus aureus, E. coli O157: H7, S.
Typhimurium, S. enteritidis dan Pseudomonas aeruginosa. Untuk tujuan ini, sel
supernatan bebas diperoleh dengan budidaya bakteri dalam medium dasar pada
suhu 33 C selama 24 jam dengan serial pengenceran dua kali lipat (2n) dengan
air deionisasi steril. Kemudian, aktivitas antimikroba dari masing-masing
pengenceran terhadap patogen bakteri ditentukan dengan menggunakan
metode difusi cakram seperti yang dijelaskan sebelumnya. Bakteri diinkubasi
pada 37 C, kecuali monocyctogenes L. yang diinkubasi pada suhu 30C, selama
24 jam. Kegiatan antimikroba dihitung sebagai arbitrary unit per ml (AU / mL)
menggunakan rumus; 2n x 1000 mL / jumlah sampel yang digunakan dalam mL.
Dimana, 2n adalah diambil sebagai tingkat pengenceran tertinggi yang memberi
zona hambat.

Pengendapan Ammonium Sulfat dan Tricine-SDS-PAGE analisis

Protein dalam sel supernatan bebas diendapkan dengan menggunakan amonium


sulfat. Tiga konsentrasi yang berbeda amonium sulfat (40, 60, dan 80%) diuji
untuk menentukan konsentrasi optimum untuk presipitasi terbaik dari zat
antimikroba. Percobaan dilakukan pada suhu 4C dengan pengaduk magnetik
(magnetic steerer) dengan penambahan lambat dari amonium sulfat sampai
mencapai konsentrasi yang diinginkan. Kemudian pada 4 C semalam untuk
menghasilkan protein diikuti dengan sentrifugasi pada 9000 rpm selama 30
menit. Pelet dilarutkan dalam 100 mM tris- HCl penyangga (pH 7,0) dan didialisis
buffer yang sama pada 4 C selama 48 jam menggunakan 1000 MWCO dialisis
tubing (Spectrum Labs, CA, USA). Larutan buffer kadang-kadang berubah selama
prosedur. aktivitas antimikroba dari protein diendapkan ditentukan dengan
metode difusi cakram terhadap S. Typhimurium dan L. monocytogenes
(Tambahan 1). Tricine-natrium dodesil sulfat elektroforesis gel poliakrilamida
(Tricine-SDS-PAGE) dari protein diperoleh pada 60% konsentrasi amonium sulfat
yang optimal dilakukan untuk estimasi antimikroba pada gel.

Statistika

Semua eksperimen diulang tiga kali. analisis dua arah varians dilakukan dengan
menggunakan SPSS (Versi 11.5, SPSS Inc.AMERIKA SERIKAT). Berarti
dibandingkan dengan menggunakan uji Duncan Pengelompokan di P 0,05.

HASIL DAN DISKUSI

3.1. Identifikasi strain

The ZBP4 isolat adalah aerobik, berbentuk batang, grampositive dan


bentuk

endospora. Toleransi garam bakteri juga telah ditentukan dan menemukan


bahwa hal itu bisa tumbuh hingga 9,0% garam. 16S rDNA

Studi mengungkapkan bahwa itu adalah salah satu anggota dari genus
Bacillus. SEBUAH

dendogram filogenetik itu disusun dengan menggunakan kedua terdekat


dan sebagian besar anggota jauh dari genus Bacillus untuk mengetahui lokasi
strain kami di antara genus. Anggota terdekat adalah Bacillus subtilis dengan
kesamaan 99,4%. Di samping itu, B. thuringiensis dan B. cereus adalah yang
paling jauh yang memiliki kesamaan dari 92,9% dan 93,4%, masing-masing
(Gambar. 1). gen 16S rDNA urutan Bacillus sp. ZBP4 diajukan ke GenBank (Aksesi
tidak. KX811594).

3.2. Produksi zat antimikroba oleh Bacillus sp. ZBP4

3.2.1. Tentu saja waktu produksi antimikroba

sampel periodik diambil selama pertumbuhan Bacillus sp. ZBP4 dalam


media basal untuk menunjukkan hubungan antara pertumbuhan sel dan produksi
antimikroba (Gambar. 2.). Berdasarkan data, pertumbuhan produksi antimikroba
terkait telah dimulai dari fase eksponensial (4 h) antimikroba maksimum
produksi diamati selama 24e26 h dari bakteri pertumbuhan. Namun, selama
periode kemudian pertumbuhan, diameter zona penghambatan mulai secara
signifikan mengurangi (p <0,05). Beberapa Studi menunjukkan hubungan antara
peptida antibiotik diproduksi oleh Bacillus spp. dan tingkat pertumbuhan sel
yang berkaitan dengan optimalnKondisi pertumbuhan (Haavik 1975, Awais et al.
(2010).seperti contoh, produksi peptida antimikroba diamati oleh Awais et al.
(2010) hanya selama fase pertumbuhan yang cepat dari B. subtilis. Itu penelitian
ini menunjukkan pengamatan yang sama, fase cepat pertumbuhan untuk B.
subtilis, sel-sel maksimal mengkonsumsi nutrisi disajikan dalam medium dan
menghasilkan jumlah maksimum metabolit antimikroba. Produksi antimikroba
berhenti setelah berkepanjangan kali inkubasi, seperti yang ditunjukkan oleh
zona yang lebih kecil inhibisi.

Bacillus sp. ZBP4 dibudidayakan pada berbagai suhu mulai dari 30 sampai
50? C untuk menentukan suhu optimum untuk produksi antimikroba (Gambar. 3).
Dalam studi ini, kita mengasumsikan bahwa diukur zona hambat terhadap S.
Typhimurium berkorelasi dengan jumlah antimikroba dalam budaya. Dengan
demikian, produksi metabolit antimikroba hanya diamati pada suhu antara 30
dan 39? C. Sedangkan produksi antimikroba terbaik Suhu dilaporkan sebagai 33?
C, pertumbuhan sel mencapai tingkat maksimum pada 35? C. Pada suhu
budidaya lebih tinggi dari 39? C, produksi antimikroba telah berhenti meskipun
masih ada beberapa pertumbuhan. Dalam sebuah penelitian serupa, Khochamit
et al. (2015) comparably melaporkan bahwa zat antimikroba yang dihasilkan
oleh Bacillus spp. terdeteksi ketika budaya ditumbuhkan di hampir kisaran yang
sama suhu (30, 37 dan 42? C) tapi tidak ada yang diamati pada 50? C seperti
pada penelitian ini. Demikian pula, mereka juga mengamati pertumbuhan
bakteri yang lebih rendah dan aktivitas antibakteri pada 42? C dari pada suhu
yang lebih rendah. Hilangnya aktivitas antimikroba pada 42? C bisa karena
degradasi zat antimikroba oleh protease ekstraseluler (Bizani & Brandelli, 2002)
atau penghentian sintesis antimikroba di bawah kondisi pertumbuhan yang tidak
cocok. Pada 50? C, budaya mampu tumbuh ringan tetapi tidak mampu
menghasilkan zat antimikroba, menunjukkan bahwa hubungan antara produksi
antimikroba dan fungsi fisiologis biasa diamati kecuali bakteri di bawah stres
panas. Pengaruh pH awal pada produksi antimikroba B. subtilis ZBP4 diberikan
pada Gambar. 4. Zona tertinggi penghambatan (10,75 1,75 mm) diamati
ketika pH awal medium adalah 8,0. Strain mampu tumbuh dan menghasilkan
antimikroba bahkan pada pH 11,0 di mana 8,25 zona hambat 0,5 mm telah
diukur. Pertumbuhan bakteri adalah maksimum pada pH 7.0, meskipun, produksi
antimikroba lebih rendah (zona inhibisi pada pH yang 9,0 1,15 mm). Sebagai
pH menurun, produksi antimikroba menurun secara signifikan serta
pertumbuhan (p <0,05). Pada pH 5.0 ada pertumbuhan bakteri tetapi tidak ada
produksi antimikroba terdeteksi. Namun; tidak aada produksi pertumbuhan atau
pertumbuhan terdeteksi pada pH 4.0. Studi terkait menunjukkan pentingnya pH
dan suhu variasi pada produksi zat antimikroba oleh Bacillus sp. (Cladera-
Olivera, Caron, & Brandelli, 2004; Motta & Brandelli, 2008). Serupa dengan hasil
penelitian ini, maksimum aktivitas antimikroba dilaporkan pada nilai pH awal
antara 6,0 dan 8,0 (. Cladera-Olivera et al, 2004; Motta & Brandelli, 2008).
Kemungkinan untuk temuan saat ini, mereka tidak bisa menentukan keterkaitan
antara produksi antimikroba dan pertumbuhan bakteri yang optimal.

Pengaruh konsentrasi substrat pada produksi


antimikroba

Pengaruh glukosa pada produksi antimikroba adalah diuji pada berbagai


konsentrasi glukosa mulai dari 0 sampai 20 g / L (Tabel 1). Dalam media tanpa
glukosa, produksi antimikroba adalah yang tertinggi di mana 10,3 zona 1,5
mm inhibisi adalah diukur. Di sisi lain, hasil serupa telah diamati di media yang
mengandung glukosa pada semua konsentrasi yang diuji. Meskipun tidak ada
korelasi yang diamati antara jumlah glukosa di media dan produksi antimikroba,
ada sedikit peningkatan pertumbuhan sel dengan meningkatkan jumlah
konsentrasi glukosa (p> 0,05). Yang paling biosintesis antibiotik diatur oleh
mekanisme bersama dengan kegiatan kelaparan diinduksi lain seperti sporulasi,
pengembangan kompetensi genetik dan produksi enzim turunan ekstraseluler
(Katz & Demain, 1977; Losick, Youngman, & Piggot, 1986). Dalam studi ini, tidak
adanya gula sederhana seperti glukosa mendorong produksi antibiotik yang lebih
tinggi dibandingkan dengan glukosa tinggi yang mungkin karena gizi
menekankan. Selain itu, para peneliti juga menunjukkan bagaimana kelaparan
stres dirangsang antimikroba paralel produksi untuk endospora pembentukan
diklarifikasi atas di subtitle yang berkaitan pengaruh waktu pada produksi
antimikroba (Marahiel, 1992). ketika mikroorganisme terbatas untuk sumber
energi mereka (biasanya sumber karbon) katabolisme erat dikombinasikan untuk
anabolisme dan biomassa tinggi hasil (antimikroba atau produksi polimer
ekstraseluler) pada sumber karbon selesai (Saier, Fagan, Hoischen, & Reizer,
1993). Dibandingkan dengan mereka dengan budaya karbon berlebih, karbon
Keterbatasan pameran tingkat umumnya rendah konsumsi karbon dan hasil yang
tinggi dari biomassa dan dengan demikian memiliki efisiensi pertumbuhan
energik tinggi (Pennock & Tempest, 1988; Teixeira de Mattos, & Neijssel, 1997).
Demikian pula, Dauner, Storni, dan Sauer (2001) menunjukkan bahwa efisiensi
energik pertumbuhan subtilis B. berkurang secara signifikan dalam budaya
tumbuh di bawah kelebihan glukosa dibandingkan dengan budaya tumbuh di
bawah batasan glukosa.

Pengaruh bubuk whey pada produksi antimikroba juga telah diuji


menggunakan dua media yang berbeda. Pada seri pertama eksperimen, media
basal yang disiapkan menggantikan glukosa dengan 10, 15 dan 20 g / L whey
bubuk yang digunakan dalam produksi antimikroba. Seperti dapat dilihat dari
Tabel 1, secara signifikan yang sama jumlah antimikroba telah diproduksi
sebagai dengan glukosa menengah (p> 0,05). Pertumbuhan bakteri juga secara
signifikan sama seperti di media glukosa. Meningkatkan konsentrasi bubuk whey
tidak memiliki efek pada produksi serta pertumbuhan. Pada seri kedua dari
ekstrak percobaan, ragi, pepton dan glukosa telah dihapus dari media basal dan
10, 15, atau 20 g / L whey bubuk ditambahkan. Pertumbuhan bakteri adalah
cukup rendah dibandingkan dengan percobaan sebelumnya. Namun, zona dari
hambatan tidak berubah, yaitu, mereka sama seperti yang diukur dalam
percobaan sebelumnya (Tabel 1) (p> 0,05). Laktosa, yang merupakan sumber
karbon utama dalam bubuk whey, dapat dihidrolisis hanya oleh mikroorganisme
tertentu sintesis laktase atau b-galaktosidase (enzim laktosa hidrolisis). Bacillus
subtilis, yang memiliki b-galaktosidase, dapat memanfaatkan laktosa sebagai
karbon sumber, dengan satu studi yang menunjukkan bahwa 60 dari 130 strain
subtilis B. diproduksi glukonat dari media laboratorium yang mengandung 2%
laktosa (Stauffer & Leeder, 1978). Selain itu, Cagri-Mehmetoglu, Kusakli, dan Van
de Venter (2012) juga disajikan bahwa meningkatkan populasi sel vegetatif dan
penurunan nilai pH diamati dalam larutan whey bubuk juga menegaskan
hidrolisis dari laktosa. Dengan cara yang sama, pH dari medium fermentasi
menurun dari 7,0 ke 5.7e5.5 dalam 24 jam selama pertumbuhan Bacillus sp.
ZBP4 pada bubuk whey (data tidak ditampilkan).

3.3. Efek antimikroba dari Bacillus sp. ZBP4 pada beberapa pathogens

Efek penghambatan zat antimikroba byBacillussp. ZBP4 diamati terhadap


Gram positif dan Gram negatif bakteri (Tabel 2). Menurut temuan, zat
antimikroba yang terisolasi memiliki efek penghambatan pada kedua Gram
negatif dan bakteri positif diuji dalam penelitian ini. Penghambatan tertinggi
adalah diamati monocytogenes againstListeria, E. coliO157: H7 and Bacillus
cereus diikuti oleh Salmonella Typhimurium dan

Staphylococcus aureus. Namun, yang untuk Pseudomonas pertumbuhan


aeruginosacould tidak dihambat oleh zat antimikroba. Dalam makhluk setuju
dengan penelitian ini, penelitian lain juga diamati efek penghambatan yang
sama zat antimikroba yang dihasilkan byb. spektrum yang luas subtilisagainst
bakteri Gram positif dan beberapa bakteri gram negatif. Sebuah novelBacillussp.
regangan BP6 memiliki aktivitas antimikroba terhadap berbagai patogen bawaan
makanan termasuk Micrococcus luteus, B. cereus, Vibrio parahaemolyticus, S.
aureus, L. monocytogenes, dan E. coliO157. The dimurnikan bakteriosin BP6
terkena sebuah band tunggal 20,7 kDa pada SDS-PAGE. (Lim Kim, 2009).
Bakteriosin fromB. subtilisKIBGE IB-17 telah dilaporkan untuk memiliki efek
penghambatan terhadap Micrococcussp., S. aureus, B. stearothermophilus,
Enterococcus faecalis, L. monocytogenes, E. coli dan S. typhiA (Ansari, Aman,
Siddiqui, Iqbal, & Qader, 2012).

3.4. elektroforesis gel

Protein diperoleh endapan amonium dan dialisis yang diselidiki


berdasarkan berat molekulnya menggunakan Trisin Metode SDS-PAGE. The pita
protein pada jalur pertama di poliakrilamid gel dalam gambar menunjukkan
protein standar dan band pada kedua dan jalur ketiga menunjukkan protein
dalam media yang tanpa atau dengan amonium presipitasi (80%), masing-
masing (Gambar. 5). Namun, tidak ada bukti yang cukup untuk mengkonfirmasi
bahwa band dengan sekitar 23, 29 dan 30 kDa berat molekul milik bakteriosin
yang dihasilkan byBacillussp. ZBP4. Dalam studi masa depan, yang diendapkan
protein dengan amonium sulfat akan lebih dimurnikan menggunakan metode
gelfiltration dan urutan asam amino murni zat antimikroba diprediksi akan
terungkap.

3.3 .Efek antimicrobials dari bacillus sp .Pada beberapa foodborne

zbp4 patogen penghambatan zat bybacillussp efek dari antimicrobial


.Zbp4 terpantau terhadap gram positif dan gram negatif bakteri ( tabel 2 )
.Menurut penemuan , penghambatan zat antimicrobial terpencil tersebut
memiliki efek positif dan negatif di kedua gram bakteri diuji dalam studi .
Tertinggi inhibisi terpantau againstlisteria monocytogenes , e . Colio157: h7
andbacillus cereus diikuti oleh salmonella typhimurium dan

Staphylococcus aureus.however , pertumbuhan ofpseudomonas


aeruginosacould tidak akan terhambat oleh antimicrobial substances.in yang
setuju dengan penelitian ini , studi lain juga diamati penghambatan mirip efek
antimicrobial zat yang dihasilkan byb .Subtilisagainst lebar spektrum bakteri
gram positif dan beberapa gram negatif bacteria.a novelbacillussp .Ketegangan
bp6 telah antimicrobial kegiatan terhadap berbagai foodborne patogen termasuk
micrococcus luteus , b. cereus , vibrio parahaemolyticus , s. aureus , l.
monocytogenes , dan e. colio157.the disucikan bacteriocin bp6 terkena satu
band dari 20.7 kda di sds-page . ( lim; amp & amp; kim , 2009 ) .bacteriocin
fromb .Subtiliskibge ib-17 telah dilaporkan ke memiliki efek micrococcussp
terhadap penghambatan . , s. aureus , b. stearothermophilus , enterococcus
faecalis , l. monocytogenes , e. coli ands .Typhia ( ansari , aman , siddiqui , iqbal ,
& amp; ; amp qader , 2012 ) . ~

3.4 .Gel elektroforesis protein diperoleh dengan amonium endapan dan


cuci darah adalah menyelidiki berdasarkan berat molekul menggunakan metode
trisin sds-page . Protein thefirst band di jalur di polyacrylamide gel dalam
gambar menunjukkan standar protein dan band di kedua dan ketiga jalur
menunjukkan protein dalam media tanpa atau dengan amonium ( curah hujan 80
% ) , masing masing ( gambar .5 ) .Dan , tidak ada bukti yang cukup untuk
memastikan bahwa band dengan sekitar 23 , 29 dan 30 kda berat molekul milik
bacteriocins diproduksi bybacillussp .Zbp4 .Dalam studi yang akan datang , yang
diendapkan protein oleh amonium sulfat akan lebih disucikan gelfiltration
menggunakan metode dan asam amino urutan murni antimicrobial zat
diperkirakan akan terungkap . ~

Kesimpulan

Produksi antimikroba oleh bacillus sp baru. ZBP4 telah diselidiki antimikroba


yang memiliki efek penghambatan pada s typhymurium maksimal pada 33 c dan
ph 8,0.keterbatasan nutrisi dalam medium meningkatkan produksi antimikroba.
Solusi bubuk kaldu digunakan sebagai media proses efek yang sama pada
produksi zat anti mikroba oleh basilus sp. Zbp4 di bandingkan dengan produksi
dalam media basal. Produk limbah ini dapat digunakan sebagai media alternatif
untuk menghasilkan antimikroba ekonomis. Disamping s. typhymurium,anti
mikroba dari ketegangan juga menghambat pertumbuhan berbagai gram negatif
dan gram patogen bawaan makanan yang positif. Spektrum antimikroba yang
luas dari bakteri bisa membuatnya potensi untuk keperluan indusri.