Universidad Nacional Agraria la Molina

Facultad de pesquera

Departamento de Acuicultura e Industrias Pesquera

DOCENTE: ING. NANCY MARTINEZ ORDINOLA

CURSO: MICROBIOLOGA PESQUERA

PRACTICA: EQUIPOS Y MATERIALES UTILIZADOS EN EL

LABORATORIO DE MICROBIOLOGIA

FECHA: 28/03/17

INTEGRANTES:
CICLO: 2017-I

2017

INTRODUCCION

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la microbiologa es una ciencia de mucha importancia en la vida del hombre. Ya que
posee un campo muy amplio de conocimiento y de poder manejar los diversos
materiales - equipos del laboratorio de microbiologa. stos ltimos deben estar limpios
para la realizacin de experimentos con diversos organismos o sustancias qumicas.

En el presente informe se realiza una descripcin y explicacin de los principios en los

que se basan los instrumentos y materiales que deben estar presentes en todo
laboratorio abocado a la microbiologa, con el objetivo de utilizarlos con recaudo y
precaucin por los posibles problemas que podra generar su mala e irresponsable
manipulacin.

2
I. REVISION BIBLIOGRAFICA

I.1 EQUIPOS DEL LABORATORIO

I.1.1. AUTOCLAVE:
Para lograr una esterilidad confiable el mtodo estndar es el
vapor saturado, en autoclave, a una temperatura de 121 C
durante 15 minutos. En el caso de descontaminacin el tiempo
puede extenderse a 30 minutos. Los recipientes a colocar en la
autoclave no deben estar totalmente llenos y deben tener tapas
flojas para permitir la ebullicin libre y la liberacin del aire
disuelto. Este mtodo se utiliza para esterilizar medios de cultivos
y soluciones. En el caso de lquidos, stos no deben formar
emulsiones con el agua.
Tambin se utiliza para esterilizar ropa de cama o material textil
en general, siempre que el autoclave est provisto de un sistema
de secado por vaco. (Lpez y Torrez, 2006).

Figura 1:
autoclaves
Fuente:
laboratorio
UNALM

3
I.1.2. ESTUFA DE CULTIVO O ESTUFA DE INCUBACIN
Son ideales para un proceso de cultivo de bacterias, hongos,
clulas y esterilizacin. Rango de temperatura desde ambiente
+ 5 a 90

Figura 2: estufa de cultivo

Fuente: laboratorio UNALM

I.1.3. H
O
R
NO O ESTUFA DE ESTERILIZACION:
Es el proceso de eliminacin o muerte de todos los
microorganismos que contiene un objeto o sustancia, y que se
encuentran acondicionados de tal forma que no pueden
contaminarse nuevamente.
La temperatura de esterilizacin puede variar entre los 160
C, 2 horas a 180 C 1 hora.
El papel y el algodn no deben esterilizarse a ms de 170 C,
ya que se carbonizan. (Lpez y Torrez, 2006).

I.1.4. BALANZA
Nos brinda el peso exacto de cantidades muy pequeas de los
insumos de los
laboratorios.

Figura 3: Balanza
analtica
I.1.5. CMARA FLUJO LAMINAR Fuente: intermet
Es un recinto que
emplea un
ventilador para forzar el paso de aire a travs de un filtro y

4
 proporcionar aire limpio a la zona de trabajo libre de
partculas de hasta 0.1 micras. Posee una nica cara libre que
da acceso al interior, donde se localiza la superficie de
trabajo, que normalmente permanece estril.

Figura 4:
I.1.6. cmara flujo
BAO
laminar
MARA:
Fuente:
laboratorio
UNALM

Es un equipo que se utiliza

en el
laboratorio para
realizar pruebas
serolgicas y procedimientos de incubacin, aglutinacin,
inactivacin, biomdicos, farmacuticos y hasta industriales.
Los rangos de temperatura en los cuales normalmente son
utilizados estn entre la temperatura ambiente y los 60 C.
Tambin se pueden seleccionar temperaturas de 100 C.

Figura 4:
Equipo
Bao
Maria
Fuente:
Internet

I.1.7. PEACHIMETRO:

El pH-metro es un sensor utilizado en el mtodo

electroqumico para medir el pH de una disolucin.

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 I.1.8. CENTRIFUGA:
Es un equipo del laboratorio, la cual genera movimientos de
rotacin a una muestra gracias a la fuerza centrfuga, tiene
como objetivo separar los componentes que constituyen una
sustancia.
Generalmente se utiliza para el proceso de sedimentacin de
los componentes lquidos y slidos.

I.1.9. MICROSCOPIO:

Figura 5:
microscopio
I.1.10. LICUADORA:
Fuente:
Sirve para homogenizar las
Internet
muestras.

I.2. MATERIALES DE LABORATORIO:

Hay diversos materiales para el laboratorio stos son:

AGUJA Y ASA DE KOLLE

MECHEROS BUNSEN
PLACAS PETRI
TUBO DE ENSAYO
MATRACES
PROBETAS
PIPETAS
PORTAOBJETOS Y CUBREOBJETOS
FRASCO DE DILUCIONES
ESPATULA DE DRIGALSKY
VASOS DE PRECIPITADO

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Figura 6: Figura 7: Placas Figura 7:
Mechero Petri Esptula de
Bunsen Drigalsky
Fuente:
Fuente: Internet Fuente:

II. MATERIALES Y MTODOS:

Al no ser esta una prctica experimental, sino de reconocimiento de las
reglas del laboratorio y de la explicacin de los materiales y equipos que se
encuentran en ste.

En la prctica se vieron dos puntos importantes:

II.1. COMO INGRESAR AL LABORATORIO:

Al cempezarr la prctica se explic que todo laboratorio de

microbiologa poseen dos reas: zona sucia y una zona limpia.
La zona sucia es aquella en la que dejamos nuestros objetos
personales y luego procedemos a la
desinfeccin de nuestras manos, nos
colocamos los gorros, tapabocas y
guantes.
La zona limpia es aquella en la que se
trabajar, es el laboratorio en s mismo.

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 II.2. CON QU INSTRUMENTOS Y/O MATERIALES TRABAJAR
EN EL LABORATORIO:
En esta parte se nos describi y explic el funcionamiento de los
materiales e instrumentos ya mencionados en la seccin I del
presente informe.

III. FOTOS

Foto 2: tubos de prueba

Fuente: foto tomada en el laboratorio

Foto 1: microscopio
Fuente: foto tomada en el laboratorio

Foto 3: balanza
Fuente: foto tomada en el laboratorio

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 Foto 4: jarra anaerobia Foto 5: bombilla de succin,
Fuente: foto tomada en el esptula y asa de Kolle
laboratorio Fuente: foto tomada en el
laboratorio

Foto 7: probeta
Foto 6: pipetas embaladas y Fuente: foto tomada en el
descubiertas laboratorio
Fuente: foto tomada en el
laboratorio

Foto 8: placa petri y tubos de vidrio

Fuente: foto tomada Foto 9: laboratorio
en el abrelatas
Fuente: foto tomada en el
laboratorio
9
 Foto 11: mechero Bunsen
Foto 10: Bao Mara Fuente: foto tomada en el laboratorio
Fuente: foto tomada en el
laboratorio

Foto 12: centrfuga

Fuente: foto tomada en el Foto 13: gabinete
laboratorio microbiolgico
Fuente: foto tomada en el
laboratorio
Foto 14: estufa o incubadora de cultivo
Fuente: foto tomada en el laboratorio

IV. CONCLUSIONES:
El Material De Laboratorio
Ms Importante Es El Asa De Kolle, Nos Sirve Como Una Extensin

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 De Las Manos Y El Equipo De Laboratorio Ms Importante Es La
Autoclave, Ya Que Ah Se Realiza La Esterilizacin Y La
Eliminacin De Microorganismos.

V. RECOMENDACIONES:

Mejorar el instrumental del laboratorio, ya que hay equipos antiguos

y algunos sin usar porque les faltan piezas o por la falta de un
trasformador de voltaje para poder instalarlos.

VI. CUESTIONARIO:
1. Qu es esterilizacin?

La esterilizacin se define como el proceso mediante el cual se destruye

todos los microorganismos viables presentes en un objeto o superficie,
incluidas las esporas bacterianas. El concepto de esterilidad expresa una
condicin absoluta: un determinado objeto o superficie est estril o no est
estril. Puesto que la esterilidad no puede demostrarse de manera absoluta
sin causar la destruccin completa de todas las unidades esterilizadas, se
define la esterilidad en trminos probabilsticas y se considera que un
producto critico es estril cuando la probabilidad de que una unidad esteril
contenga algn microorganismo en forma activa o latente es igual o menor
de 1 entre un milln (SAL [sterility assurance level] o coeficiente de
seguridad de esterilidad de 10-6). (Hernndez, Celorrio, Lapresa y Solano,
2014).

No existe un procedimiento de esterilizacin y desinfeccin aplicable a todos

los casos. El mtodo de esterilizacin ser seleccionado para cada caso
teniendo en cuenta la naturaleza fsica del objeto y la naturaleza biolgica
del contaminante. Como rara vez se conoce la poblacin de
microorganismos sobre un objeto que debe ser tratado, debemos presuponer

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que se encuentran presentes las formas microbianas ms resistentes: las
endosporas. (Lpez y Torrez, 2006).

El mtodo de esterilizacin a emplearse debe ser previamente valorado.

Actualmente existen valores tabulados de tiempo de exposicin, temperatura

y concentracin de principios activos para los mtodos de esterilizacin ms
usados que nos permiten elegir el ms adecuado para cada caso. En la
eleccin debe tenerse en cuenta tambin el uso posterior que le ser dado (o
no) al objeto a esterilizar. (Lpez y Torrez, 2006).

El paso previo e imprescindible para una correcta esterilizacin es la

limpieza exhaustiva del material a esterilizar. A travs de un proceso
mecnico se elimina, por arrastre, la suciedad visible y la materia orgnica
de una superficie u objeto, reduciendo el nmero de microorganismos y
protegiendo los instrumentos contra la corrosin y el desgaste. (Hernndez,
Celorrio, Lapresa y Solano, 2014).

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2. Describa las principales formas de esterilizacin:
1. Calor hmedo:
la desnaturalizacin y coagulacin se facilita en presencia de agua
pues se rompen los puentes de hidrgeno entre los grupos C=O----
HN que constituye la estructura secundaria y se agrega (tambin
mediante puente de hidrgeno) una molcula de agua a cada extremo
de esas uniones rotas. Las protenas en soluciones ms diluidas
coagulan a menor temperatura que las concentradas.
Esterilizar exclusivamente en calor hmedo: medios de cultivos,
recipientes contaminados, material de goma, y todo elemento que no
resista las altas temperaturas del calor seco. (Lpez y Torrez, 2006).

Ventajas del calor hmedo:

1) Rpido calentamiento
2) Buena penetracin
3) Corto tiempo de esterilizacin
4) Bajo deterioro del material expuesto (Por menor temperatura y
menor tiempo)
5) No deja residuo txico
6) Econmico.

1.1. Autoclave:
Es el mtodo ms utilizado y uno de los ms eficaces,
cmodo y barato. El agua a temperatura elevada mata a los
microorganismos ya que desnaturaliza y coagula sus
protenas. (Arlos, 2008).
La autoclave utiliza vapor a presin superior a la normal. As,
la temperatura del vapor de agua asciende a 121C. El vapor
saturado penetra en los recipientes tomando contacto con los
microorganismos a destruir, all se condensa liberando calor.
El calentamiento es rpido por la gran cantidad de calor
latente del vapor de agua, que libera al condensarse sobre la
superficie del objeto. (Lpez y Torrez, 2006).
El tiempo que se necesita depende de la naturaleza del
microorganismo, el medio, la cantidad. Lo calculado es
121C durante 20 minutos para que la esterilizacin sea eficaz
y para conseguir esta temperatura hay que aumentar la
presin. (Arlos, 2008).

1.2. Tindalizacin:

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 Es una esterilizacin con vapor (tambin calor hmedo) pero
fraccionado, se hace con materiales que no soportan
temperaturas tan altas como las de la autoclave. Subimos la
temperatura hasta 90 100C y despus se incuba para que
las formas vegetativas crezcan y se vuelve a poner el calor a
90 100C para que mueran todas las formas adultas, se para
y se vuelve a poner a 90 100C. (Arlos, 2008).

1.3. Pasteurizacin:
Es una forma tambin de esterilizacin con calentamientos
inferiores a 100C (durante 30 minutos, a 60 70 y no a 75
durante 15 minutos). (Arlos, 2008).

2. Calor seco:
Deshidrata las bacterias, virus, etc. y facilita la coagulacin o
desnaturalizacin de las protenas. Se requieren mayores
temperaturas para producir dao irreversible (muerte). Se acepta que
el calor seco acte oxidando los constituyentes intracelulares. En el
proceso de esterilizacin son prioritarios los procesos oxidativos y de
fusin de membranas por sobre la desnaturalizacin. Resulta lento
por la menor
eficacia del calor seco y por la lentitud del transporte del calor
(conveccin y radiacin). Esterilizar exclusivamente a calor seco:
Cera, vaselina, talco, recipientes cerrados hermticos de vidrio o
metlicos sin filo. (Lpez y Torrez, 2006).

2.1. Flameado:
Pasar dos o tres veces por la llama del mechero de Bunsen
varillas de vidrio, bocas de tubos, frascos y similares.
Las asas y otros utensilios metlicos se someten a la llama
directa hasta calentarse al rojo.
Las pinzas se sumergen en alcohol y luego se secan a la
llama.
Estos mtodos son instantneos y no mantienen la esterilidad
en el tiempo. (Lpez y Torrez, 2006)

2.2. Horno:

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Esterilizan objetos de vidrio, metal y para algunas sustancias
grasas, insolubles en agua, no voltiles que permiten este
sistema. Es menos eficaz que el calor hmedo y el tiempo de
exposicin depende de la temperatura del aire. (Arlos, 2008).

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3. Esterilizacin por filtracin:

3.1. Filtracin:
se utiliza para medios de cultivo, sueros y soluciones que se
alteren con el calor. En la mayora de los filtros hay tres
factores principales que intervienen en la retencin de
partculas (bacterias, virus, protenas, etc.):
a. Efecto mecnico de filtro, segn el tamao del
poro.
b. Repulsin o atraccin elctrica
c. Absorcin y adsorcin
(Lpez y Torrez, 2006).

3.2. Ultrafiltracin:
para separacin y medicin de virus. Membranas de steres
de celulosa biolgicamente inertes que no retienen partculas
por adsorcin por lo tanto la retencin de partculas depende
principalmente del tamao de los poros. (Lpez y Torrez,
2006).
En general la filtracin es un mtodo eficaz para filtrar
lquidos. Arlos, 2008).

3.3. Campanas de filtracin:

son filtros con los que se hace una presin para que el filtrado
sea ms rpido con un matraz kitazato, es un sistema practico
y adecuado sobre todo cuando se requiere esterilizar lquidos
que no permiten ser sometidos a elevadas temperaturas.
(Arlos, 2008).

4. Radiacin electromagntica:

Se dividen en dos grupos:

Radiaciones Ionizantes: rayos x y rayos alfa, beta y gamma
Radiaciones no ionizantes: ultravioleta

4.1. Radiaciones ionizantes:

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 Tienen suficiente energa para ionizar las molculas
produciendo radicales hidroxilos [OH-] que son muy
reactivos, y as destruyen el ADN, protenas y matan a las
clulas (microbios). Tienen un gran poder de penetracin lo
que permite que se puedan utilizar para la esterilizacin de
productos despus de que estos estn embalados. (Arlos,
2008).

4.2. Radiaciones no ionizantes:

Como los rayos UV, es una radiacin absorbida por los

compuestos intracelulares produciendo la excitacin de los
electrones de las molculas y modificando su reactividad.
(Arlos, 2008).
solamente para aire o para superficie o capas muy delgadas de
lquidos pues no penetra. Se usa para consultorios, salas,
laboratorios, cmaras, quirfanos. No atraviesan el vidrio. Las
ondas UV tienen suficiente energa para causar roturas en el
ADN, produciendo la muerte del organismo expuesto. Las
cmaras de siembra vienen equipadas con una lmpara de luz
UV para mantener el rea estril, la cual se debe apagar
cuando se ingresa a la cabina por la peligrosidad a la
exposicin de las radiaciones (quemaduras, eritemas, cncer
de piel). (Lpez y Torrez, 2006).

5. Mtodos qumicos:

La esterilizacin qumica se utiliza mucho para instrumental mdico

que no se ha de someter a las altas temperaturas de autoclave, y para
zonas cerradas donde sea necesario la ausencia de microorganismos
(p.ej. el quirfano). (Arlos, 2008). los mtodos ms usados son:

5.1. xido de etileno:

Gas lquido a temperatura inferior a 10.8C. tiene el

inconveniente de que es muy toxico e irritante y muy
inflamable incluso aunque se use a muy baja concentracin.

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 Se suele usar mezclado con CO2, que facilita su
manipulacin, pero no reduce su capacidad microbiocida.
Tiene una importante capacidad de penetracin, puede
atravesar paquetes de ropa, embalajes e incluso algunos
plsticos.
El inconveniente es que se necesitan varias horas de
exposicin porque su accin es muy lenta y se necesita
tambin bastante tiempo para su aireacin. Para esterilizar
con xido de etileno se utilizan unas especies de autoclaves
que controlan la temperatura y humedad del gas. Su
mecanismo de accin es inactivando encimas mediante una
reaccin de los grupos sulfhidrilos. Tambin es un mtodo
ms caro. (Arlos, 2008).

5.2. Glutaraldehido:

Liquido oleoso, incoloro que en solucin acuosa al 2 por

ciento es microbiocida y se utiliza en los hospitales para
esterilizar instrumentos urolgicos, con lentes, aparatos de
terapia, endoscopia, etc. (Arlos, 2008).

5.3. Formaldehido:

Gas estable a elevada presin y temperatura. Es muy toxico y

sus vapores son muy irritantes para las mucosas. Se usa para
esterilizar algunos instrumentos y en forma de gas se utiliza
para esterilizar zonas cerradas. Uno de sus inconvenientes es
su escaso poder de penetracin. Su actividad microbiocida es
debida a su capacidad de inactivas componentes celulares
como protenas y cidos nucleicos. (Arlos, 2008).

VII. BIBLIOGRAFIA:

18
 LOPEZ, L. y TORREZ, C. (2006). Preparacin de material para el
trabajo en microbiologa: limpieza y esterilizacin. Facultad de
Agroindustrias-Universidad Nacional del Nordeste.
ALORS, ROSARIO. Estructura para un laboratorio de
microbiologa. [Documento en lnea]. Revista digital innovacin y
experiencias educativas. N 3. (feb. 2008). [consulta: 23-08-2016].
ISSO 1988-6047.
HERNNDEZ, JESS; CELORRIO, JOS; LAPRESTA, CARLOS
y SOLANO, VICTOR. Enfermedades infecciosas y microbiologa
clnica. [Documento en lnea]. Volumen 34, Numero 7 (Ago./Sep.
2016). [consulta: 23-08-2016]. ISSN 0213-005X.

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