ANALISIS KUALITATIF : PARAMETER RETENSI

Kromatografi gas sebagai pemisah tidak sama kecuali sebagai alat analisis reagen murni, atau
untuk mendeteksi 200 konstituen dalam minyak bumi, tetapi identifikasi yang tersisa untuk
kecerdikan analis.
Perbandingan sifat retensi dengan sampel yang diketahui menggunakan beberapa kolom lebih
dari satu suhu hampir beberapa dijadikan sebagai ciri khas percobaan. Tetapi, metode ini
secara umum, membutuhkan kesabaran tak terbatas jika tidak ada persediaan bahan kimia
murni yang tidak terbatas. Dalam arti negatif, tidak adanya puncak yang tidak ada
hubungannya kini dianggap sebagai salah satu indikasi terbaik kemurnian reagen.
Idealnya, harus tepat untuk mengidentifikasi suatu senyawa dari waktu retensi yang dibaca
langsung pada grafik perekam. Namun, waktu retensi sendiri adalah nilai yang kecil karena
tergantung pada banyak faktor lain selain senyawa alam. Tujuannya adalah untuk
menemukan parameter yang paling baik yang akan mengidentifikasi senyawa. Kita akan
mempertimbangkan beberapa parameter tersebut.
Koefisien distribusi, K, adalah konstanta kesetimbangan yang merupakan karakteristik dari
komponen dan fase cair pada suhu tertentu. Oleh karena itu, bisa berfungsi sebagai parameter
untuk mengidentifikasi. Namun, nilai K jarang ditentukan dalam praktek (kecuali untuk studi
teoritis) karena ada cara yang lebih mudah untuk mengidentifikasi komponen.
Volume retensi, VR, tidak tergantung pada laju aliran, F (sedangkan t R berbanding terbalik
dengan F). Laju aliran yang paling mudah diukur dengan penghitung arus gelembung sabun
pada akhir alat. Dengan demikian gas pembawa pada saat itu adalah pada tekanan dan suhu
kamar, dan rupanya jenuh dengan uap air dari alat aliran. Oleh karena itu, laju alir yang benar
pada suhu kolom, Tc, adalah:

di mana PH2O adalah tekanan uap air pada suhu alat aliran. Adalah sebagai berikut:

Tetapi,volume retensi ini diukur pada tekanan outlet kolom (biasanya atmosfer) mengingat
gas pembawa dalam kolom di bawah tekanan yang lebih tinggi. Pada saat gas melewati
kolom, tekanan berkurang secara terus menerus (tetapi tidak linear) dari tekanan inlet, Pi dan
tekanan outlet, Po. Oleh karena itu volume (dan laju aliran dalam ml/menit) harus
ditingkatkan dalam mode terbalik pada tekanan tersebut. Jika kolom dioperasikan dengan
penurunan tekanan yang besar dan jika laju alir diukur di outlet kolom, laju alir rata-rata
menjadi jauh lebih rendah daripada laju yang diukur. Akibatnya hanya sebagian dari kolom
dapat beroperasi pada efisiensi maksimum, dan bagian yang mungkin hanya bagian terakhir
sebelum outlet, seperti yang ditunjukkan pada Gambar 7-10.
Dalam rangka untuk menentukan nilai retensi volume, kita harus menentukan tekanan rata-
rata, P, dalam kolom. Dengan kombinasi yang cocok dari hukum gas, hubungan antara
kecepatan dan tekanan gradien, dengan persyaratan angka konstan, dapat ditunjukkan bahwa:

di mana j adalah penurunan tekanan faktor koreksi. Nilai yang dipilih j yang diberikan dalam
Tabel 7-5.

koreksi" volume retensi, VR, adalah ini:

Operasi selanjutnya disebut "penyesuaian". Mengingat dari Persamaan 4-6, bahwa

volume retensi diukur meliputi volume fase gerak yang terkandung dalam kolom (ruang
mati), VM. Volume ini adalah sama untuk semua komponen dan harus dikurangkan dari
volume retensi yang diukur. Dengan demikian "Penyesuaian" dengan Volume retensi VR,:
Kedua koreksi merupakan penggabungan dalam mendefinisikan volume retensi bersih, VN:

Akhirnya, karena volume retensi juga tergantung pada volume fase diam dalam kolom
(Persamaan 4-6), volume retensi bersih per gram untuk fase cair, yang disebut volume retensi
spesifik, Vg, dengan persamaan:

di mana dR dan da adalah jarak (cm) yang diukur pada tabel dari injeksi ke puncak maksimum
komponen dan puncak udara, berturut-turut. CS adalah kecepatan grafik (cm/min) dan Wz
adalah berat (g) dari fasa cair dalam kolom.

Vg, seperti K, adalah konstanta kesetimbangan yang benar, tergantung pada sifat zat terlarut
dan pelarut, dan suhu kolom. Kedua konstanta berbeda karena unit yang digunakan berbeda.

Contoh / Soal 7-1. Data retensi untuk pentana pada kolom yang khusus diberikan di bawah ini.
menghitung volume retensi spesifik dan koefisien distribusi.

Volume retensi , tR 4,50 menit

Waktu udara maksimum, ta 30 detik
Laju aliran pada 100C, Fc 75 mL/menit
Suhu kolom, Tc 100C
Berat Fase Liquid, WL 4,2 g
Densitas fase liquid pada 100C 0,95 g/ mL
Tekanan Inlet, Pi 1185 torr
Tekanan outlet, Pt 740 torr
Dari tabel 7-6 dan Pi /Po =1,60, j=0,756
Dari persamaan 7-8 dan 7-9:

Dari persamaan 7-6:

Dari Persamaan 4-6 (VR = VM +KVS):

Dari GLC:

Hubungan antara Vg dan K berasal dari combinasi persamaan 4-6 dan 7-10:

Volume retensi spesifik, atau koefisien partisi, merupakan sarana yang dapat diandalkan untuk
identifikasi, tetapi tabel dalam jumlah besar dari data yang diperlukan banyak sekali
kombinasi dari senyawa, fase cair, dan suhu. Banyak data tersedia, juga tersebar dalam
literatur. Sebuah fraksi besar dari data yang tidak dapat dipercaya, atau rincian penting yang
hilang. Ada, namun, beberapa pertimbangan teoritis berguna dan pengamatan empiris yang
menghapus beberapa dari data yang tidak dipercaya tersebut dari identifikasi masalah.

Retensi relatif. Sebuah pemeriksaan ulang Persamaan 7-9 akan menunjukkan bahwa
dalam rangka menjalankan kromatogram dengan beberapa komponen, jika semua kondisi
percobaan tetap sama, maka:

dimana subscript mengacu pada dua komponen dan udara, dan , adalah retensi relatif
1 2

komponen 1 yang berhubungan dengan komponen 2. Yang terakhir mungkin senyawa standar
yang telah disebutkan. Seperti K, adalah bentuk dari konstanta kesetimbangan, tetapi mudah
ditentukan dari dua pengukuran jarak pada tabel. Situasi yang sangat menarik ini dirusak oleh
fakta bahwa kita harus memilih dan menyepakati substansi standar. Standar harus siap
tersedia, harus memiliki waktu retensi dekat (tetapi mudah diselesaikan) dari komponen
sampel, dan secara kimiawi kompatibel dengan sampel. Jelas, tidak ada substansi tunggal
akan memenuhi semua persyaratan.
 Indeks retensi. Dalam sistem ini, diperkenalkan oleh Kovats, retensi relatif adalah
berkenaan dengan rangkaian normal-hidrokarbon parafin sebagai zat standar. Index retensi, I,
didefinisikan sebagai:

di mana i,pz adalah retensi relatif dari senyawa i, sebanding dengan n-paraffin dengan atom
karbon z, dan pz + 1,yz adalah retensi relatif dari dua n-parafin dengan z+1 dan z adalah atom
karbon. Menurut definisi, I untuk semua n-parafin adalah 100z untuk semua fase cair pada
semua suhu. Nilai I untuk semua senyawa lainnya tergantung pada sifat dari fase cair serta
sifat dari senyawa. I/100 adalah (pecahan) jumlah atom karbon dalam hipotesis n-paraffin
yang memiliki waktu retensi yang sama dengan senyawa tersebut.
Telah diamati (didukung oleh bunyi hukum termodinamika) untuk deret homolog dari
plot n-parafin untuk log (tR -ta) versus I adalah garis lurus, memberikan suatu kumpulan
kondisi operasi yang khas untuk kolom tertentu. Data untuk dua n-paraffins cukup untuk
menetapkan garis lurus ini: karena itu nilai I untuk senyawa lain dapat dibaca dari grafik
seperti yang terlihat dalam contoh berikut.
Contoh / Soal 7-2. Waktu retensi beberapa zat dalam kolom tertentu adalah:
Substance tR, sec tR ta, sec

Udara 1.2 -
Propana 32.8 31.6
Cpd X 51.2 50.0
n-Pentana 80.7 79.5

(a) Berapakah indeks retensi, I, dari n-butana pada kolom ini?

Nilai I n-butana adalah 400 pada semua kolom, menurut definisi.
(b) Berapakah indeks retensi Cpd X pada kolom ini?
i. Solusi menggunakan Persamaan 7-14.

(Perhatikan bahwa dua parafin yang diberikan adalah C-3 dan C-5;. Oleh karena itu log
pz+2,yz dibagi dengan 2.)
ii. Solusi grafik. Buatlah sebuah tabel dan plot yang sesuai, Gambar 7-11
(c) Apakah senyawa X adalah butana? Ini adalah elusi dari kolom, seolah-olah itu butana.
Sifat ini konsisten dengan butana, tetapi tidak ada bukti. Senyawa yang sama harus
dikromatografi pada beberapa kolom lain dari berbagai polaritas. Nilai I konsisten pada 400
merupakan bukti yang masuk akal.

Sistem ini memiliki sejumlah keuntungan: (1) rangkaian didefinisikan dengan baik,
standar tersedia memiliki rentang didih lebar untuk digunakan; (2) nilai I relatif tidak sensitif
(kebal) terhadap suhu; dan (3) informasi struktural tambahan dapat diperoleh dengan
mencatat perubahan indeks retensi, I, ketika senyawa diukur pada fase sangat polar dan
nonpolar. Nilai I terkait dengan struktur (sifat kelompok fungsional dan posisinya). Kovats
dan lainnya telah menyiapkan tabel memberikan nilai I parsial untuk kelompok fungsional
umum dan ciri dari posisi. (Lihat, misalnya, referensi Schomberg pada akhir bab ini.). I
parsial nilai tampaknya aditif untuk molekul secara keseluruhan, tetapi ada banyak
pengecualian.
Pada keadaan yang baik, data kromatografi meninggalkan unsur ketidakpastian dalam
identifikasi komponen sampel kecuali sampel sudah ditandai jenisnya. Dalam kasus yang
sama sekali tidak dikenal, atau ketika identifikasi tertentu diperlukan, prosedur paling aman
adalah dengan menganalisis komponen dipisahkan dengan teknik lain, seperti spektrometri
massa atau spektrofotometri inframerah.

ANALISIS KUANTITATIF

Detektor Integral memberikan sinyal yang berbanding lurus dengan beberapa jumlah
besar dari jumlah komponen yang telah dielusi, misalnya, volume gas atau volume titran.
Kalibrasi tidak menimbulkan masalah bagi jenis detektor. Dengan detektor diferensial,
penafsiran tidak begitu sederhana.
Bagi mereka detektor yang memberikan sinyal yang sebanding dengan konsentrasi
sesaat, kita harus menghitung jumlah yang ditemukan dalam setiap kenaikan volume, atau,
dengan kata lain, kita harus menemukan area di bawah puncak yang lebih tepatnya daerah
antara kurva dan dasar hipotesis .
di mana R adalah respons seketika yang sesungguhnya (sinyal) dari detektor dan RM adalah
respon molar (area/mol). Jika jumlah yang akan dinyatakan dalam gram lebih baik daripada
mol, mungkin lebih mudah menggunakan faktor berat, F, yang biasanya didefinisikan dalam
mode terbalik dengan persamaan:

Perhatikan bahwa area dapat ditentukan dalam unit (kotak dari setiap dimensi di atas kertas,
berat kertas grafik, milivolt . waktu, milivolt . volume, dll), asalkan respon detektor
ditentukan dalam satuan yang sama.
Pengukuran Area. Dalam prakteknya, daerah diukur dengan salah satu dari beberapa
teknik:
1. Potong puncak dengan gunting dan timbang kertas. Menentukan berat kertas per satuan
area dalam percobaan terpisah.
2. Gunakan planimeter, alat mekanis menggabungkan interkoneksi tuas yang daerah
menumpuk pada piringan sebagai batas dilalui oleh penanda yang terpasang.
3. Perkirakan daerah dengan triangulasi. Menggambar garis singgung pada titik belok pada
sisi puncak, dan menghitung luas segitiga yang dibentuk dengan garis dasar, seperti pada
Gambar 7-12.

4. Ukur tinggi puncak dan lebar puncak pada setengah tinggi, kemudian kalikan dua nilai
tersebut.
5. Gunakan aksesori mekanik atau elektronik untuk perekam yang secara otomatis akan
mengintegrasikan daerah. (Beberapa perangkat beroperasi secara langsung dari detektor-lihat
Bab 25.)
Dari beberapa perbandingan teknik yang telah dibuat, sebuah studi yang dilakukan
oleh Varian Aerograph adalah yang paling berguna. Sebuah campuran delapan komponen
dijalankan sepuluh kali dan mengintegrasi daerah dengan beberapa metode. Hasilnya,
diberikan presisi (standar deviasi relatif), dan waktu yang diperlukan ditunjukkan pada Tabel
7-6.
 Salah satu metode ini mungkin baik, asalkan faktor kalibrasi (R M atau F) ditentukan
dengan cara yang sama. Penyelesaian tidak lengkap (tumpang tindih) puncak biasanya
diperlakukan dengan menjatuhkan tegak lurus depan sinyal minimum untuk garis dasar dan
membagi daerah yang sesuai.
Hal ini mungkin lebih sulit untuk menentukan faktor kalibrasi yang tepat dari daerah
puncak. Dari pembahasan detektor, jelas bahwa faktor yang berbeda diperlukan untuk
masing-masing komponen dan kondisi untuk operasi detektor harus tetap konstan. Kalibrasi
absolut dari detektor memang sulit dan membutuhkan penyiapan sampel yang diketahui
komposisinya dengan hati-hati atau pengukuran jumlah yang tepat dari zat murni.
Normalisasi. Ketika kromatogram mewakili seluruh sampel, metode normalisasi
merupakan metode yang sangat baik. Untuk pendekatan pertama, fraksi dari total luas tiap
puncak adalah sama dengan komposisi pecahan sampel.

Dimana Ai, adalah area komponen i. Namun, jika respon molar atau faktor berat diketahui,
dapat diperhitungkan untuk akurasi yang lebih baik

Perhatikan bahwa dalam metode normalisasi (Persamaan 7-I8 atau 7-19) penggunaan nilai
relatif, untuk respon molar (RMR) atau faktor berat (RWR) sama baiknya dengan nilai
absolut. Nilai-nilai relatif jauh lebih mudah untuk menentukan (Persamaan 7-2 dan Tabel 7-3
dan 7-4).
Contoh Soal 7-3. Sebuah sampel yang mengandung benzena, heptana, dan 2-
metilheksana memberikan kromatogram tiga puncak dengan daerah 35, 58, dan 13 "kotak"
untuk puncak masing-masing. Hitung persentase komposisi. (Lihat tabel data pada bagian
atas halaman 105.)
 Jika puncak begitu tajam (sempit) bahwa daerah tidak dapat diukur secara akurat,
diperbolehkan untuk menggunakan ketinggian puncak untuk mengukur jumlah, memberikan
faktor kalibrasi yang ditentukan dengan tepat. Teknik ini terutama berlaku untuk analisis
berulang seperti yang diperlukan untuk pengendalian proses.