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UNIVERSIDAD DE CHILE
FACULTAD DE CIENCIAS AGRONMICAS
DEPARTAMENTO DE SANIDAD VEGETAL

CONTROL BIOLGICO DE ENFERMEDADES


DE LAS PLANTAS EN CHILE
BIOLOGICAL CONTROL OF PLANT DISEASES IN CHILE

Jaime R. Montealegre A. - Luz Mara Prez R.


Editores

Santiago de Chile - 2013


4

Editores:
Jaime R. Montealegre A.
Luz Mara Prez R.
CONTROL BIOLGICO DE ENFERMEDADES DE LAS PLANTAS EN CHILE

Para citar:
Montealegre, J.R. y Prez, L.M. (editores) 2013. Control biolgico de enfermedades de las
plantas en Chile. Santiago, Chile, Facultad de Ciencias Agronmicas, Universidad de Chile.
147 p.

Responsable edicin: Pedro Calandra B.

Diseo de portada: Luz Mara Prez R., Jaime R. Montealegre A. y Valeria Arriagada G.

Dactilografa: Catalina Nez V.

Compilacin: Denisse Espinoza A.

Derechos Reservados
Se autoriza la reproduccin parcial de la informacin aqu contenida, siempre y cuando se
cite esta publicacin como fuente.

Inscripcin N 233.220
del Registro de Propiedad Intelectual

ISBN: 978-956-19-0826-0

Universidad de Chile
Facultad de Ciencias Agronmicas
Departamento de Sanidad Vegetal
Avda. Santa Rosa 11315, La Pintana, Santiago Chile

Versin digital disponible en:

http://www.agren.cl/control_biologico_de_enfermedades_de_las_plantas_en_chile

Santiago de Chile 2013


5

PRLOGO

Para satisfacer la demanda creciente de alimentos de la poblacin mundial, es


fundamental el control de plagas y enfermedades que afectan a las plantas cultivadas que
se utilizan para tal fin. Una de las herramientas de manejo disponible para lograr este
objetivo, es la utilizacin de biocontroladores, la cual ha contribuido a una produccin ms
ecocompatible y menos contaminante. Tambin existe una demanda de los consumidores
por productos de mayor calidad y que contengan cada vez menos residuos de plaguicidas
qumicos.

El xito productivo y posicionamiento internacional de la industria agrcola y forestal


chilena ha contribuido a tomar las medidas necesarias para optimizar los recursos, que
permitan cumplir con las normativas de sustentabilidad y exigencias de los pases
importadores y con las demandas de los consumidores.
El libro Control biolgico de enfermedades de las plantas en Chile muestra el
desarrollo de la investigacin y utilizacin en Chile de agentes de biocontrol. Los captulos
que forman parte de este libro constituyen un compendio de los hallazgos de lneas de
investigacin an en desarrollo, las que se encuentran centradas principalmente en aquellos
patgenos ms importantes en cultivos de relevancia econmica para el pas. Abarca
experiencias tanto a nivel de laboratorio como ensayos y aplicaciones a nivel de campo,
incluyendo sus principales regulaciones legales, informacin sobre los recursos econmicos
aportados por agencias gubernamentales y privadas que han permitido el desarrollo y la
formacin de nuevos emprendimientos que han resultado en productos de uso comercial en
el pas.
Se espera que el contenido presentado, no slo sea de utilidad en la docencia de pre
y postgrado, sino que adems esperamos sea un estmulo para investigadores que quieran
contribuir a nuevos desarrollos en el mbito del control biolgico de patgenos de plantas.
Los editores agradecen la confianza de los autores que contribuyeron a hacer
realidad este libro y a la Facultad de Ciencias Agronmicas de la Universidad de Chile por
dar visibilidad a su contenido en esta publicacin digital, permitiendo con ello el libre acceso
a los potenciales lectores interesados en el Control biolgico de enfermedades de las
plantas.

Jaime R. Montealegre A.
Luz Mara Prez R.

Santiago de Chile, Julio de 2013.


6

TABLA DE CONTENIDO

Pg.

PRLOGO 5

CONTEXTO DE LA SITUACION DEL CONTROL BIOLGICO EN CHILE. 13


Jaime R. Montealegre A.
Resumen 13
Summary 13
Antecedentes generales de la agricultura chilena 14
Breve historia del uso de biocontroladores de enfermedades de plantas 14
Situacin actual de los biocontroladores utilizados 15
Microorganismos y cultivos evaluados en Chile 15
Literatura citada 19

BASES MOLECULARES DEL CONTROL BIOLGICO Y SU DESARROLLO EN


CHILE 21
Luz Mara Prez R.
Resumen 21
Summary 21
Introduccin 21
Metabolitos secundarios de plantas y su uso potencial para el biocontrol 22
La relacin entre la respuesta de hipersensibilidad (HR) y los aspectos
moleculares del biocontrol 23
Capacidad biocontroladora de hongos del gnero Trichoderma: su relacin con
la HR y con isoenzimas de quitinasas 25
Mutantes: una alternativa para la obtencin de mejores biocontroladores 25
Literatura citada 27

CONTROL BIOLGICO EN FRUTALES 33

CONTROL BIOLGICO DE Botrytis cinerea EN ESPECIES FRUTALES EN


CHILE 35
Bernardo A. Latorre G.
Resumen 35
Summary 35
Introduccin 35
Aspectos epidemiolgicos 36
Control integrado 37
Microorganismos antagonistas 37
Utilizacin de estrategias de control biolgico 39
Literatura citada 40

CONTROL BIOLGICO DE ENFERMEDADES DE LA MADERA DE LA VID 45


Jaime R. Montealegre A.
Resumen 45
Summary 45
Introduccin 45
Biocontrol in vitro de Ilyonectria macrodidyma en Vitis vinifera mediante el uso
de bioantagonistas fungosos y bacterianos 46
Literatura citada 47
7

Pg.

CONTROL BIOLGICO DE PATGENOS EN POSTCOSECHA DE FRUTAS 49


Marisol Vargas
Resumen 49
Summary 49
Introduccin 49
Control de las enfermedades en postcosecha 49
Control biolgico de patgenos en postcosecha 50
Control biolgico de patgenos de postcosecha en Chile 51
Uso de Trichoderma para el control biolgico de patgenos de postcosecha 53
Uso de hongos extremfilos para el control biolgico de patgenos de
postcosecha 53
Literatura citada 54

CONTROL BIOLGICO EN HORTALIZAS 59

CONTROL BIOLGICO DE Rhizoctonia solani (Khn) EN EL CULTIVO DEL


TOMATE 61
Jaime R. Montealegre A.
Resumen 61
Summary 61
Introduccin 61
Biocontrol de R. solani en tomates mediante el uso de bioantagonistas
fungosos silvestres y mutantes 62
Biocontrol de R. solani en tomates mediante el uso de bioantagonistas
bacterianos 62
Biofungicidas comerciales en el mercado chileno para el biocontrol de R. solani
en tomate 63
Literatura citada 63

CONTROL BIOLGICO DE Phytophthora EN TOMATES Y PIMIENTOS


DESARROLLADOS BAJO INVERNADERO 65
Ximena A. Besoain C.
Resumen 65
Summary 65
Introduccin 65
Control biolgico en Chile 66
Literatura citada 67

CONTROL BIOLGICO DE Pyrenochaeta lycopersici EN TOMATES 69


Ximena A. Besoain C.
Resumen 69
Summary 69
Introduccin 69
Control biolgico de la Raz corchosa 70
Desarrollo de mutantes de Trichoderma 70
Ensayos bajo condiciones de invernadero 71
Literatura citada 71
8

Pg.

CONTROL BIOLGICO DE FUSARIOSIS EN TOMATE EN CHILE 73


Rodrigo A. Herrera C.
Resumen 73
Summary 73
Introduccin 73
Fusariosis que afectan al tomate en Chile 73
Aspectos epidemiolgicos de Fusarium en tomate. 74
Desarrollo de Bioantagonistas fungosos para el control de Fusarium en tomate
en Chile 74
Literatura citada 77

CONTROL BIOLGICO DE ENFERMEDADES FUNGOSAS EN DIFERENTES


HORTALIZAS 79
Mauricio Lolas C. y Claudio Sandoval B.
Resumen 79
Summary 79
Introduccin 79
Desarrollo de Biocontroladores 80
Literatura citada 83

CONTROL BIOLGICO EN CEREALES 87

CONTROL BIOLGICO DE LA PUDRICIN RADICAL, O MAL DEL PI DEL


TRIGO, EN LA ZONA SUR DE CHILE 89
Orlando Andrade V.
Resumen 89
Summary 89
Introduccin 89
Identificacin de suelos supresivos a la pudricin radical de trigo en Chile 91
Caracterizacin microbiolgica de suelos supresivos y conductivos a la
pudricin radical del trigo en el sur de Chile 92
Capacidad biocontroladora de aislamientos seleccionados por su alto grado de
antagonismo de Ggt bajo condiciones de campo 93
Literatura citada 96

CONTROL BIOLGICO EN ESPECIES FORESTALES 99

CONTROL BIOLGICO EN ESPECIES FORESTALES EN CHILE 101


Eugenio Sanfuentes V.S., Gastn Gonzlez V. y Salom Zalda F.
Resumen 101
Summary 101
Introduccin 101
Control biolgico en especies forestales 103
Control Biolgico (CB) en plantaciones forestales 103
CB en viveros forestales 105
a) CB de Macrophomina phaseolina 105
b) CB de Botrytis cinerea 106
c) CB de Fusarium circinatum 107
Literatura citada 109
9

Pg.

CONTROL BIOLGICO EN DIFERENTES ESPECIES MEDIANTE EL


USO DE BACTERIAS 113

BIOCONTROL DE ENFERMEDADES BACTERIANAS MEDIANTE LA


UTILIZACIN DE BACTERIAS 115
Jaime R. Montealegre A. y Luz Mara Prez R.
Resumen 115
Summary 115
Introduccin 115
Control mediante Bacillus subtilis 115
Control mediante Pseudomonas 115
Literatura citada 116

MERCADO, LEGISLACIN Y NORMATIVAS 119

SITUACIN DEL CONTROL BIOLGICO EN CHILE: MERCADO,


LEGISLACIN Y PERCEPCIN DE LOS AGRICULTORES 121
Eduardo Donoso C.
Resumen 121
Summary 121
Introduccin 121
Demanda mundial 122
Control biolgico en Chile 124
Regulaciones de Plaguicidas en Chile 125
Descripcin y clasificacin de Insumos Ecolgicos presentes en Chile 127
Estudio comparativo de la legislacin 130
Registro de productos 131
Percepcin de Agricultores sobre el uso de bioplaguicidas 132
Consideraciones finales 134
Literatura citada 136
Literatura consultada 137

MARCO NORMATIVO DE REGISTRO DE PLAGUICIDAS DE USO AGRCOLA


Y FORESTAL EN CHILE 139
Ignacio Figueroa C.
Resumen 139
Summary 139
Introduccin 139
Cuerpos legales 139
Proceso de Registro 143
Consideraciones finales 143

INDICE DE MICROORGANISMOS BIOCONTROLADORES 145


10

AUTORES QUE CONTRIBUYEN EN ESTE LIBRO

Orlando Andrade V., Ing. Agrnomo, Ph.D.


Profesor Adjunto; Escuela de Agronoma, Facultad de Recursos Naturales, Universidad
Catlica de Temuco.
Av. Rudecindo Ortega 02950, Temuco Chile
E-mail: oandrade@uct.cl

Ximena A. Besoain Canales, Ing. Agrnomo, Mg., Dr.


Profesor Titular; Facultad de Agronoma, Pontificia Universidad Catlica de Valparaso, San
Francisco s/n, La Palma, Quillota Chile.
E-mail: xbesoain@ucv.cl

Eduardo Donoso C., Ing. Agrnomo, M.Sc.


Profesor Asistente; Escuela de Agronoma, Facultad de Ciencias Agrarias y Forestales
Universidad Catlica del Maule, Campus San Isidro, Km 6 Los Niches, Curic Chile.
E-mail: edonoso@bionativa.cl

Ignacio Figueroa Cornejo, Ing. Agrnomo


Encargado de Seccin Inocuidad, Subdepartamento Vias y Vinos, Inocuidad y
Biotecnologa, Servicio Agrcola y Ganadero, Divisin de Proteccin Agrcola y Forestal,
Santiago - Chile
E-mail: plaguicidas@sag.gob.cl

Gastn Gonzlez Vargas, Ing. Agrnomo, M.Sc.


Gerente; Biocaf Ltda.
Camino a Coronel, Concepcin Chile
E-mail: gaston.gonzalez@biocaf.cl

Rodrigo A. Herrera Cid, Ing. Agrnomo


Instructor; Departamento de Sanidad Vegetal, Facultad de Ciencias Agronmicas,
Universidad de Chile.
Santa Rosa 11315, La Pintana. Santiago Chile.
E-mail: rherrera@uchile.cl

Bernardo A. Latorre G., Ing. Agrnomo. Ph.D.


Profesor Titular; Departamento de Fruticultura y Enologa, Facultad de Agronoma e
Ingeniera Forestal, Pontificia Universidad Catlica de Chile.
Vicua Mackenna 4860, Santiago Chile.
E-mail: blatorre@uc.cl

Mauricio Lolas C., Ing. Agrnomo. M.S., Ph.D.


Profesor Asociado; Departamento de Produccin Agrcola, Laboratorio de Patologa Frutal,
Facultad de Ciencias Agrarias, Universidad de Talca
2 Norte 685, 3465548, Talca Chile.
E-mail: mlolas@utalca.cl
11

Jaime R. Montealegre Andrade, Ing. Agrnomo


Profesor Titular; Departamento de Sanidad Vegetal, Facultad de Ciencias Agronmicas,
Universidad de Chile.
Santa Rosa 11315, La Pintana. Santiago Chile.
E-mail: jmonteal@uchile.cl

Luz Mara Prez Roepke, Bioqumico, Dr. en Ciencias


Asesoras e Inversiones Biostrategy Limitada. Santiago Chile.
E-mail: biostrategy.perez2@gmail.com

Claudio Sandoval B., Ingeniero Agrnomo, M.S., Dr.


Profesor Asociado; Departamento de Produccin Agrcola, Laboratorio de Fitopatologa,
Facultad de Ciencias Agrarias, Universidad de Talca.
2 Norte 685, 3465548, Talca Chile.
E-mail: csandoval@utalca.cl

Eugenio Sanfuentes Von Stowasser, Ing. Forestal, Mg., Dr.


Profesor Asociado; Laboratorio de Patologa Forestal, Departamento de Silvicultura.
Facultad de Ciencias Forestales/Centro de Biotecnologa, Universidad de Concepcin.
Concepcin Chile.
E-mail: esanfuen@udec.cl

Marisol Vargas, Ing. Agrnomo, Dr.


Profesor Asistente; Departamento de Produccin Vegetal, Facultad de Agronoma,
Universidad de Concepcin
Vicente Mndez 595, Chilln Chile
E-mail: marisolvargas@udec.cl

Salom Zalda Flores, Ing. Forestal, Dr.


Laboratorio de Patologa Forestal. Centro de Biotecnologa, Universidad de Concepcin.
Concepcin Chile.
E-mail: szaldua@gmail.com
12
13

CONTEXTO DE LA SITUACIN DEL CONTROL BIOLGICO EN


CHILE
Context of the situation of the biological control in Chile

Jaime R. Montealegre A.
Departamento de Sanidad Vegetal, Facultad de Ciencias Agronmicas, Universidad de Chile
Santa Rosa 11315, La Pintana. Santiago-Chile.
E-mail: jmonteal@uchile.cl

Resumen
La investigacin en el uso de biocontroladores de enfermedades de plantas en Chile
se ha incrementado significativamente a partir de 1992. Ha estado enfocada
fundamentalmente al desarrollo de agentes fungosos de biocontrol, destacndose hongos
del gnero Trichoderma ya sean nativos o mejorados; no obstante lo anterior, tambin se ha
investigado el uso de bacterias dentro de las cules destacan aquellas del gnero Bacillus.
Los principales patgenos en donde se ha investigado son de tipo fungoso entre los que se
pueden mencionar: Botrytis cinerea, Rhizoctonia solani, Fusarium spp., Erwinia carotovora,
Phytophthora spp. y Pyrenochaeta lycopersici entre otros, que afectan a los cultivos
agrcolas y tambin forestales.
Los 17 productos biolgicos registrados en el Servicio Agrcola y Ganadero que se
comercializan en Chile, aun cuando mayoritariamente no son el resultado de las
investigaciones realizadas en el pas, muestran el inters en utilizar agentes de biocontrol en
los programas de manejo de enfermedades.
Las principales limitantes y desafos del biocontrol de enfermedades de plantas en
Chile se discuten en este captulo.

Summary
The research on the use of biocontrol agents of plant diseases in Chile significantly
increased since 1992. It has been focused on the development of fungal biocontrol agents,
being wild or mutant Trichoderma strains the most studied. Also, some bacteria have been
tested as those belonging to the genus Bacillus. The main pathogens studied have been
fungi such as Botrytis cinerea, Rhizoctonia solani, Fusarium spp., Erwinia carotovora,
Phytophthora spp. and Pyrenochaeta lycopersici. Also, some pathogens affecting forestry
species have been studied.
The chilean increasing interest for the use of biocontrol agents is reflected in the 17
biological products already registered by SAG, that are commercialized for the control of
several plant diseases. However, few of these registered products have been developed in
Chile.
The main limitations and challenges for the use of biological control of plant diseases in
Chile are discussed.
14

Antecedentes generales de la agricultura chilena


Segn datos del ODEPA (2012a), Chile posee una poblacin de 15.116.435
habitantes, siendo la agricultura un rubro muy importante en la economa nacional,
contribuyendo con un 8,8 % del empleo total (ODEPA 2012b). El PIB de Chile en 2010, era
de 257.900 millones de dlares americanos, de este total, el silvoagropecuario primario (que
no incorpora el valor agregado por la agroindustria u otros eslabones de la cadena)
representa menos del cuatro por ciento de la produccin (Ministerio de Agricultura de Chile
2012). Segn antecedentes del censo agropecuario, en 2007 la superficie dedicada a suelos
de cultivo era de 2.053.709,99 ha; de este total, la mayor superficie corresponde a cultivos
anuales y permanentes con 1.305.326,67 ha., siendo las frutas frescas y frutos secos que se
exportan los rubros ms importantes, aportando un valor de US$ FOB: 3.672.589.07 al PIB
(ODEPA 2012c).

Breve historia del uso de biocontroladores de enfermedades de plantas


El control biolgico de enfermedades de las plantas en Chile se inicia con la evaluacin
y comercializacin en el pas de Agrobacterium radiobacter K 84, bacteria que se utiliza para
el biocontrol de Rhizobium radiobacter (A. tumefaciens) hasta nuestros das y que
actualmente se comercializa con el nombre de Biobacter 84 G. Con posterioridad en la
dcada de los 80, investigadores de la Universidad Austral de Chile e INIA Carillanca (Luigi
Ciampi y Carmen Fernndez), investigan y publican en el American Journal of Potato
Research (5): 315-332 un paper sobre el uso de Pseudomonas fluorescens para el control
de Pseudomonas solanacearum en papas (Ciampi et al. 1989). En relacin al uso de
bioantagonistas como controladores de malezas, con anterioridad a esa fecha, se introdujo a
Chile desde Alemania el hongo Phragmidium violaceum (Schulz) Winter (Oehrens y
Gonzlez 1974), siendo este un excelente ejemplo del uso de un biocontrolador exitoso para
controlar dos especies de malezas importantes presentes en Chile (Rubus constrictus y R.
ulmifolius).
El primer curso de Control biolgico de enfermedades de las plantas, dictado en la
Universidad de Chile en 1992, donde participaron Profesores de EMBRAPA Sao Paulo y de
Bento Goncalves de Brasil, y de la Facultad de Ciencias Agronmicas, Depto. de Sanidad
Vegetal de la Universidad de Chile, permiti iniciar el desarrollo de grupos de investigacin
en biocontrol de enfermedades de las plantas en Chile y la formacin de acadmicos en
esta disciplina.
Esto se ha reflejado en un promedio de 1,48% de participacin de proyectos de
investigacin en control biolgico de enfermedades de plantas en los US$ 561.107.348
invertidos entre 1990 y 2010 en el rea agropecuaria (excluyendo acuicultura), en
comparacin con la inexistencia de participacin antes de ese perodo (Datos obtenidos por
el autor a partir de http://www.odepa.gob.cl/odepaweb/servicios-formacion/Boletines/
BInsumos0611.pdf). Especficamente, entre los aos 1990 y 1999 se adjudicaron 796
proyectos en los fondos FDI, FIA, FONDECYT, FONDEF, FONTEC, INNOVA y SAG, dentro
de los cuales, 7 fueron del rea de control biolgico de enfermedades y nemtodos en
plantas (US$ 1.766.868 (0,82% del total de recursos invertidos)), lo que significa que el
0,87% de los proyectos aprobados correspondieron a esta lnea. Posteriormente, entre los
aos 2000 y 2009 se financiaron 948 proyectos dentro de los cuales 16 proyectos
correspondieron a esta rea con un monto de inversin de U$ 6.452.044, lo que significa
una participacin del 1,69%. Por lo tanto, en una dcada el nmero de proyectos aument
en un 228% y la participacin en los fondos asignados, en un 376%.
15

Un anlisis de la situacin del uso de biocontroladores en Chile se haba realizado con


anterioridad en el contexto de un curso dictado en la Universidad de Chile (Montealegre,
2005).

Situacin actual de los biocontroladores utilizados


Actualmente en Chile, existen 423 fungicidas registrados en el Servicio Agrcola y
Ganadero, de los cuales el 4,02% corresponden a formulados en base a biocontroladores
de enfermedades en plantas. As se tiene que de 4 productos comercializados en el 2003,
hoy se encuentran 17 biofungicidas con autorizacin SAG vigente al 27 de febrero de 2012
(Binab T Pellet (T. harzianum y T. polysporum), Binab T WP (T. harzianum y T. polysporum),
Serenade Dust (Chile) (Bacillus subtillis), Serenade Sulfo Dust (Chile), Serenade Azo,
Serenade Max (Mxico), Fruitsan (Lactobacillus acidofillus Tauern S.A. Chile), Fruit Plus
(Cryptococcus albidus - S. Africa), TrichoD WP (T. harzianum ATTCC 20847-T22
Colombia), Trichonativa, 3 TAC (T. harzianum, T. viride, T. longibrachiatum. Avance
Biotechnologies, Chile), 3 TAEX (Chile pinturas Renner), Biobacter 84 G (A. radiobacter -
BIOGRAM Chile), Nacillus (B. subtilis, B. licheniformis), Trichoderma Suspension (T.
harzianum Cepa T3 Los Robles), Trichoderma Pasta (T. harzianum Cepa T3 Los Robles),
Harztop (T. harzianum Cepa 22 - BIOGRAM Chile) (SAG Pgina web actualizada el 27 de
febrero de 2012 y leda el 29 febrero del mismo ao). En el Cuadro 1 se presentan las
caractersticas de los biocontroladores comercializados actualmente en Chile y registrados
en el SAG.

Microorganismos y cultivos evaluados en Chile


El anlisis de las memorias de ttulo de Ingeniero Agrnomo desarrolladas en el
perodo 2000-2011 en tres universidades chilenas (Universidad de Chile, Universidad
Austral de Chile y Universidad de Talca), permiten concluir que los microorganismos ms
investigados corresponden a Trichoderma spp. y a Bacillus spp. dentro de los
biocontroladores, y a Rhizoctonia solani, Botrytis cinerea y Erwinia carotovora dentro de los
fitopatgenos, y que los cultivos en que ms se ha trabajado corresponden a hortalizas,
principalmente el tomate (Cuadro 2).
Al analizar 781 trabajos presentados en los ltimos 12 aos (perodo 2000-2011) en
los Congresos de la Sociedad Chilena de Fitopatologa, se encuentra que el 12%
corresponde a investigaciones desarrolladas en biocontrol, siendo los biocontroladores ms
investigados Trichoderma spp. y Bacillus spp. en el cultivo del tomate, vid y forestales para
el control de los fitopatgenos Botrytis cinerea y R. solani (16% y 14%, respectivamente)
(Cuadro 2).
16

Cuadro 1. Biocontroladores registrados en Chile

Nombre
N Biocontrolador Cultivo Fitopatgenos a controlar
comercial

1 Agrobacterium Biobacter 84 G Almendro, cerezo, Agrobacterium tumefaciens Biovar 1 y


radiobacter Cepa duraznero, damasco, 2
K84 ciruelo, nectarin, nogal,
frambueso, arndano y
rosal
2 B. subtilis, B. Nacillus Cerezo, duraznero, Pseudomonas syringae pv. syringae,
licheniformis y B. nectarin, damasco, Xanthomonas campestris pv.
brevis ciruelo, vid, tomate, vesicatoria, Clavibacter michiganensis
peral, avellano, subsp. michiganensis, Pseudomonas
arndano y kiwi syringae pv. tomato, Acetobacter sp. y
Xanthomonas arboricola
3 Bacillus subtilis / Serenade Sulfo Vid Botrytis sp., odio, pudricin cida
Azufre Dust (conjunto de hongos, bacterias y
levaduras)
4 Bacillus subtilis Serenade Aso Vid, manzano, frutilla, Botrytis sp., Erysiphe necator,
cepa QST713 arndano y frambuesa Aspergillus niger, Alternaria sp.,
Cladosporium herbarum, Rhizopus
arrhizus, Penicillium sp., Acetobacter,
Venturia inaequalis, V. pyrina y
Sphaerotheca macularis
5 Bacillus subtilis Serenade Dust Vid Botrytis sp., odio, pudricin cida
cepa QST713 (conjunto de hongos, bacterias y
levaduras)
6 Bacillus subtilis Serenade Max Vid, manzano, frutilla, Botrytis cinerea, Erysiphe necator,
cepa QST713 arndano y frambuesa Aspergillus niger, Alternaria sp.,
Cladosporium herbarum, Rhizopus
arrhizus, Penicillium sp., Acetobacter,
Venturia inaequalis, V. pyrina y
Sphaerotheca macularis
7 Cryptococcus Fruit Plus Peral, manzano Botrytis cinerea y Penicillium
albidus expansum
8 Lactobacillus Fruitsan Vid, arndano, fram- Botrytis spp.
acidofilus buesa, frutilla y tomate
9 T. harzianum y T. Binab-T Pellet Almendro, cerezo, Chondrostereum purpureum, Ver-
polysporum ciruelo, damasco, ticillium sp., Rhizoctonia sp., Fusarium
manzanos, perales, sp., Botrytis sp., Phomopsis sp.,
durazno, nectarines y Sclerotium sp., Sclerotinia sp.,
vides. Phytium sp., Armillaria sp.,
Heterobasidium annosum, Lentinus
lepideus, Ceratocystis ulmi e
Hymenomycete
10 T. harzianum y T. Binab-T WP Duraznero, nectarino, Fusarium sp., Botrytis sp., Verticillium
polysporum ciruelo, almendro, sp., Rhizoctonia sp., Phomopsis sp.,
manzano, peral, vides, Sclerotium sp., Sclerotinia sp.,
meln, sanda, tomate, Phytium sp., Heterobasidium sp.,
papa, lechuga, espinaca, Chondrostereum purpureum,
arndano, frutilla y Hymenomycete, Armillaria mellea,
frambuesa Lentinus sp. y Ceratocystis sp.
17

11 T. harzianum, T. Trichonativa Manzano, peral, cerezo, Botrytis cinerea, Alternaria spp.,


virens y T. parce- durazno, nogal, avellano, Venturia inaequalis, Phytophthora
ramosum palto, olivo, naranjo, spp., Phytium spp., Rhizoctonia solani,
mandarino, limonero, Sclerotinia sclerotiorum, Armillaria
pomelo, vid, pimentn, mellea, Fusarium spp., Cladosporium
aj, brcoli, repollo, spp. y Sclerotium rolffsi.
coliflor, clavel,
arndanos, frambuesa,
frutilla, tomate, lechuga,
proteceas, remolacha y
pino radiata.
12 T. harzianum, T. 3 TAC Lechuga, vid, kiwi, Fusarium sp., Phytium sp., Alternaria
viride y T. longi- tomate, frambueso, sp., Botrytis sp., Erysiphe sp., Botrytis
bratum frutilla, cerezo, guindo, sp., Sclerotinia sp., Bremis sp.,
ciruelo, manzano, peral, Phytophthora sp., Septoria sp. y
cebolla y arndano. Cercospora sp.
13 T. harzianum, T. 3 TAEX Manzano, peral, Chondrostereum sp., Fusarium sp.,
viride y T. duraznero, guindo, Botrytis sp., Heterobasidium sp.,
longibratum cerezo, olivo, kiwi, Alternaria sp., Penicillium sp.,
arndano, vid y pino Fusicocum sp., Fomitiporella sp.,
Gloephylium sp., Coriolus sp. y
Aspergillus sp.
14 Trichoderma Trichoderma Manzano, vid, arndano, Phytophthora cactorum. Sellado de
harzianum (Cepa Pasta peral, cerezo, durazno, heridas y cortes de poda.
T3 Los Robles) ciruelo y kiwi
15 Trichoderma Trichoderma Vid, arndano, frutilla, Botrytis cinerea y Phythopthora
harzianum (Cepa Suspensin frambuesa, manzano y cactorum.
T3 Los Robles) cerezo.
16 Trichoderma TrichoD WP Vid Botrytis cinerea
harzianum Cepa
ATTCC 20847-T22
17 Trichoderma Harztop Vid, arndano, frutilla, Botrytis cinerea, Mildew, Verticillium,
harzianum Rifai, frambuesa, tomate, Esclerotinia, Rhizoctonia solani,
cepa T-22 lechuga, aj, pimentn, Phytium spp., Fusarium spp. y
duraznero, nectarino, Phytophthora spp.
ciruelo, damasco,
almendro, nogal, li-
monero, naranjo, olivo,
palto, trigo, avena,
cebada, maz y manzano
18

Cuadro 2. Antecedentes de memorias de ttulos de Ingeniero Agrnomo desarrolladas en


tres Universidades y trabajos de investigacin presentados en el Congreso Chileno de
Fitopatologa en el perodo 2000-2011.

Memorias de N de % Participacin por % Participacin por


Antagonistas
Ttulo/Trabajos Trabajos Cultivo Patgeno

Memorias U. de 17 El antagonista Tricho- 64,7% de los trabajos Rhizoctonia solani es el


Chile* derma fue el ms estu- ejecutados se han patgeno ms importante,
diado, con una participa- realizados en el con un 41 % del total, le
cin del 76,5% del total. cultivo del Tomate. siguen Botrytis cinerea y
Fusarium spp. ambos con
un 18% aproximadamente.
Memorias U. de 45 Hay una recopilacin de 45 Un 64 % de los Los hongos tienen una
Talca Memorias, de las cuales 30 trabajos ejecutados importante participacin,
son estudios sobre corresponden a que asciende a un 78%.
Trichoderma sp., repre- hortalizas, flores y
sentando un 67% del total. frutilla.
La bacteria bioantagonista Los rboles frutales
Bacillus sp. tiene una par- representan el 29%.
ticipacin del 13% aprox.
Memorias U. 17 Los antagonistas bacteria- Un 47% de los Erwinia carotovora y
Austral de Chile nos tienen una gran im- trabajos son en el Rhizoctonia solani repre-
portancia, la que asciende cultivo de la papa y sentan un 65% de los
a un 76% de participacin luego vienen las calas estudios efectuados.
en un total de 17 trabajos y la frutilla con un
ejecutados. 24%.
Congresos de 93 Con respecto a los traba- Un 36% de partici- Botrytis cinerea (16%) y
Fitopatologa** jos sobre antagonistas, el pacin corresponde al Rhizoctonia solani (14%)
ms estudiado correspon- cultivo del tomate, son los ms importantes,
den al gnero Tricho- luego la vid con un con un 30% de trabajos
derma sp. (35%) y luego 15% y por ltimo los presentados.
viene Bacillus sp. (23%), rboles forestales con
con lo cual ambos repre- 10%, representando
sentan un 58%. un 61% del total.
* Informacin de los ltimos 12 aos (2000-2011), con un nmero de 1077 memorias de Ing. Agrnomo reali-
zadas. Del total, 17 corresponden a control biolgico, que representan menos del 2%.
** En los ltimos 12 aos (2000-2011) se han presentado un total de 781 trabajos en los Congresos Chilenos de
fitopatologa, de estos 93 corresponden a trabajos en control biolgico (12%).

En funcin de los antecedentes presentados se puede concluir que la investigacin


sobre el uso de biocontroladores de enfermedades de plantas en Chile se ha incrementado
significativamente a partir del Primer Curso de Enfermedades de Plantas realizado en 1992.
Ha estado enfocada fundamentalmente al desarrollo de agentes fungosos de biocontrol,
destacndose hongos del gnero Trichoderma ya sean nativos o mejorados; no obstante lo
anterior, tambin se ha investigado el uso de bacterias dentro de las cules destacan
aquellas del gnero Bacillus. Los principales patgenos en donde se ha investigado son de
tipo fungoso entre los que se pueden mencionar: Botrytis cinerea, Rhizoctonia solani,
Fusarium spp., Erwinia carotovora, Phytophthora spp. y Pyrenochaeta lycopersici entre
otros, en especies de cultivos agrcolas y forestales. Los proyectos de investigacin y
desarrollo han sido financiados fundamentalmente por Agencias del Estado de Chile
(FONDECYT, FIA, Innova CORFO, entre otras).
Los 17 productos biolgicos registrados en el Servicio Agrcola y Ganadero que se
comercializan en el pas, aun cuando mayoritariamente no son el resultado de las
19

investigaciones realizadas en el pas, muestran el inters en utilizar agentes de biocontrol en


los programas de manejo de enfermedades.
Las principales limitantes y desafos del biocontrol de enfermedades de plantas en
Chile se relacionan con la introduccin y uso de productos importados con insuficiente o
nula investigacin en el pas, dudosa calidad y efectividad de las formulaciones, propaganda
engaosa sobre forma de control y nivel de efectividad de ciertos productos que se ofrecen
en el mercado ya sea como biofungicidas o biobactericidas.

Literatura citada
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20
21

BASES MOLECULARES DEL CONTROL BIOLGICO Y SU


DESARROLLO EN CHILE
Molecular basis of the biological control and its development in Chile

Luz Mara Prez R.


Asesoras e Inversiones Biostrategy Limitada.
E-mail: biostrategy.perez2@gmail.com

Resumen
Los estudios realizados en Chile, que involucran ensayos a nivel molecular, la
correlacin de estos con los mecanismos de biocontrol y su aplicacin posterior en ensayos
de invernadero y de campo, se analizan en funcin de los estudios realizados con
metabolitos que participan en la relacin planta fitopatgeno, con los sistemas enzimticos
y protenas que se inducen en la respuesta de hipersensibilidad, con la secrecin y nmero
de quitinasas producidas por los biocontroladores, y la obtencin de mutantes mejoradas en
su capacidad biocontroladora.

Summary
Studies run in Chile involving assays at the molecular level of biocontrol mechanisms
and their further application in greenhouse and field trials, are analyzed on the basis of
metabolites involved in plant phytopathogen interaction as well as on the enzyme systems
and proteins involved in the hypersensitive response of plants, including secretion and
number of chitinases produced by biocontrol agents and obtainment of mutants improved in
their biocontrol ability.

Introduccin
El estudio de las bases del control biolgico se inicia en Chile utilizando diferentes
modelos de interaccin planta - patgeno, con el objeto de establecer en primer trmino
cuales eran aquellas molculas o metabolitos que pudieran ejercer una accin disuasiva y/o
txica para insectos y microorganismos. Ms adelante, el anlisis de la respuesta de
hipersensibilidad (HR) estudiada en algunos modelos Planta-Hospedero, sirven de base
para los estudios sobre los mecanismos moleculares y molculas especficas que participan
en el biocontrol, para la seleccin de biocontroladores y para el mejoramiento de la
capacidad antagnica, de aquellos previamente seleccionados.
Los resultados de estos estudios han permitido ir comprendiendo como se desarrollan
relaciones de compatibilidad e incompatibilidad en los diferentes modelos estudiados,
incluyendo las que favorecen o impiden la infeccin o infestacin de un determinado tejido
vegetal, y como algunos de los mecanismos de defensa contra patgenos que utilizan los
sistemas vegetales, son anlogos a los que utilizan los biocontroladores en su actividad
antagnica.
22

La aplicacin de estos conocimientos al control biolgico ha permitido avanzar en


nuevas estrategias con relacin a proponer una solucin a problemas especficos de una
especie vegetal en su interaccin con determinados patgenos.

Metabolitos secundarios de plantas y su uso potencial para el biocontrol


A fines de la dcada de los 70 aparece uno de los primeros trabajos chilenos
relacionados con los aspectos moleculares involucrados en la interaccin planta-hospedero
(Corcuera et al. 1978), utilizando como modelo la interaccin entre un cido hidroxmico
aislado del maz y Erwinia carotovora. La participacin de los cidos hidroxmicos entre los
que se encuentra el DIMBOA, los que se encuentran presentes en cebada, maz y trigo,
permite explicar la resistencia de estos cultivos a la infestacin por fidos (Argandoa et al.
1980, Argandoa et al. 1981). Usando este modelo de estudios, se obtienen antecedentes
sobre el efecto que tiene el contenido de cidos hidroxmicos en la planta, su distribucin y
concentracin como disuasivo de la infestacin por el fido Schizaphis graminum
(Argandoa et al. 1980, Argandoa et al. 1983, Ziga et al. 1983, Argandoa y Corcuera
1985). El efecto de alcaloides indlicos como la gramina, y tambin su rol como disuasivos
de fidos, se establece en la misma poca (Corcuera 1984, Ziga et al. 1985, Ziga y
Corcuera 1986, Argandoa et al. 1987).
El efecto de los cidos hidroxmicos y de los alcaloides indlicos como potenciales
controladores de pestes, patgenos y malezas se sugiere en un par de revisiones (Niemeyer
y Prez 1994, Corcuera 1993).
Un intento adicional en la bsqueda de metabolitos con potencial uso en el biocontrol
de patgenos, se realiza usando cepas bacterianas mutantes (Bernal et al. 2002), en las que
se identifica una molcula termoestable con caractersticas semejantes a las descritas para
lipopptidos cclicos, con actividad antibitica como las que presentan las iturinas.
No obstante la abundante informacin existente en torno a los metabolitos
mencionados, la investigacin en torno a stos y a su potencial aplicacin en el control
biolgico de diferentes patgenos, no fue continuada por ninguno de los grupos que se
haba dedicado a su estudio. Estos grupos de investigacin derivaron sus estudios hacia la
fisiologa de plantas y hacia estudios qumicos de los metabolitos. Sin embargo, es
importante reconocer que estos grupos de investigacin fueron pioneros en el uso de
modelos vegetales y su interaccin con patgenos de diferente naturaleza, incentivando a
otros investigadores a incursionar en esta rea.
Un resumen de las interacciones estudiadas con sus correspondientes referencias se
encuentra en el Cuadro 1.

Cuadro 1. Interacciones planta patgeno analizadas en el contexto de metabolitos


secundarios.

Planta Patgeno y/o insecto Referencia


Zea mays Erwinia spp. Corcuera et al., 1978
Zea mays Metopolophium dirhodum Argandoa et al., 1980
Triticum aestivum Schizaphis graminum Argandoa et al., 1981
Zea mays Schizaphis graminum Argandoa et al., 1983
Argandoa y Corcuera, 1985
Hordeum vulgare Rhopalosiphum padi Ziga y Corcuera, 1986
23

La relacin entre la respuesta de hipersensibilidad (HR) y los aspectos


moleculares del biocontrol.
La respuesta defensiva de una planta frente a un microorganismo patgeno puede
producirse a travs de mecanismos moleculares semejantes a los que puede utilizar un
microorganismo capaz de antagonizar a un fitopatgeno. En trminos generales, las plantas
pueden modificar su metabolismo, inducir sistemas enzimticos para sintetizar metabolitos
antimicrobianos como las fitoalexinas, e inducir protenas relacionadas con patognesis (PR)
para defenderse de un patgeno. A su vez, los microorganismos tambin pueden inducir
sistemas enzimticos, sintetizar metabolitos secundarios con actividad antibitica e inducir
protenas con diferentes funcionalidades, para adaptarse a diferentes condiciones
ambientales y fuentes de carbono. Estas similitudes metablicas sugirieron que el estudio en
paralelo de la respuesta HR en plantas, y de la induccin y secrecin de sistemas
enzimticos en microorganismos con potencial actividad biocontroladora, podra permitir
identificar elementos comunes entre ambos sistemas: el tipo y la actividad biolgica de
molculas que participan en la defensa de la planta pueden tener un equivalente en los
microorganismos biocontroladores, en cuyo caso podran estar relacionados con su nutricin
y desarrollo.
La interaccin planta hospedero ha sido estudiada en Chile usando diferentes
modelos que incluyen a insectos, bacterias y hongos como hospederos de diferentes
especies vegetales. Entre estas interacciones encontramos:
Plantas de cebada (Hordeum vulgare) o de maz (Zea mays) con el fido Schizaphis
graminum, cuyos ensayos realizados a nivel de laboratorio, permitieron establecer que
se produca una respuesta de hipersensibilidad en la planta, detectada a nivel
molecular a travs del incremento de enzimas oxidativas (Cabrera et al. 1994, Cabrera
et al. 1995, Argandoa et al. 2001), de la induccin de la va fenilpropanoide (Chaman
et al. 2001), y de la sntesis de inhibidores de proteinasas (Casaretto y Corcuera 1995,
Casaretto y Corcuera 1998).
Plantas de four-oclock (Mirabilis jalapa) o de tabaco (Nicotiana tabacum) con la
bacteria Clavibacter michiganensis subsp. Michiganensis, cuyos estudios tambin
fueron realizados a nivel de laboratorio, mostraron la presencia de lesiones necrticas
caractersticas de HR en ambas plantas, como consecuencia de la produccin de un
compuesto extracelular, termoestable, semejante a las producidas por una harpin y
PopA de bacterias Gram negativas (Alarcn et al. 1998).
Fuera de establecer la presencia de una HR en los sistemas estudiados, estos
grupos de trabajo no siguieron profundizando en estas interacciones con miras a
analizar la sntesis de otro tipo de molculas y sus efectos, sobre los patgenos
usados.
Plntulas de Citrus limon con Alternaria alternata o con Trichoderma harzianum, en la
que se analiza la respuesta de hipersensibilidad (HR) desarrollada contra estos hongos
aislados del consorcio fumagina. Inicialmente se estableci el tipo de enzimas que
secretaba Alternaria alternata (Prez et al. 1991), los fragmentos pcticos que se
producan como consecuencia de la hidrlisis de la pared celular de plntulas de
limonero por enzimas pectinolticas del hongo (Fanta et al. 1992), la presencia de
receptores para un tamao bien definido de estos oligosacridos, y su relacin con la
activacin de los sistemas defensivos (Prez et al. 1993, Roco et al. 1993). A su vez,
T. harzianum era capaz de secretar principalmente celulasas, generando
oligosacridos derivados de la celulosa vegetal. Estos estudios permitieron demostrar
24

la sntesis de fitoalexinas como consecuencia de la activacin de la va fenilpropanoide


en la planta en respuesta no slo a A. alternata, sino que tambin a las enzimas
pectinolticas secretadas por este hongo (Quaas et al. 1988, Prez et al. 1993, Quaas
et al. 1993, Prez et al. 1994a). La activacin de la va fenilpropanoide y la sntesis de
fitoalexinas en plntulas de limonero inoculadas con T. harzianum no era detectable,
concordante con la morfologa que presentaban las plntulas de ctricos inoculadas
con A. alternata o con T. harzianum (Prez et al. 1994b).
El dao producido en la superficie del tejido vegetal y la generacin de elicitores
(producto del efecto de sistemas enzimticos de A. alternata sobre el tejido vegetal y
su reconocimiento por receptores de la planta) permitieron establecer la participacin
de calcio en etapas tempranas de la transduccin de seales para generar la HR, y a
su vez comprobar su funcin como elicitor (Castaeda y Prez 1996). Adicionalmente,
se estableci que el metabolismo de fosfoinositidos (Ortega y Prez 2001), la
calmodulina, IP3 y protenas quinasa (Ortega et al. 2002), participaban en la
transduccin de seales, no as una protena G (Ortega et al. 2005), permitiendo
proponer un modelo para la va de transduccin de seales. Finalmente, el hallazgo de
la sntesis de PR como quitinasas y glucanasas en plntulas de Citrus limn
inoculadas con A. alternata, complet los antecedentes sobre la respuesta HR. Las
quitinasas y glucanasas sintetizadas en las plntulas de limonero durante la respuesta
defensiva fueron capaces de inhibir el desarrollo de A. alternata (Fanta et al. 2003).
Los resultados del efecto de estas PR sobre el desarrollo de este fitopatgeno, forman
parte de los elementos que sirven de base para el estudio de los sistemas enzimticos
que pueden utilizar microorganismos biocontroladores. De esta forma, mientras
quitinasas y glucanasas se inducen durante la HR en la planta para controlar el
desarrollo del patgeno, en el biocontrolador se podran inducir para utilizar al
patgeno como fuente de carbono y de otros nutrientes.
Plantas de Fragaria chiloensis con Botrytis cinerea. En esta interaccin, se establece la
expresin de genes en esta variedad de frutilla resistente a este patgeno, FcPR5 y
FcPRIO, aun cuando todava no se ha identificado cuales protenas son codificadas
por estos (Gonzlez et al. 2010).

Un resumen de las interacciones planta-patgeno estudiadas, en el contexto de la


respuesta de hipersensibilidad, junto a las referencias correspondientes, se encuentra en el
Cuadro 2.

Cuadro 2. Interacciones planta patgeno analizadas en el contexto de la respuesta de


hipersensibilidad.

Planta Patgeno y/o insecto Referencia


Hordeum vulgare Schizaphis graminum Cabrera et al., 1994; 1995
Casaretto y Corcuera, 1995; 1998
Argandoa et al., 2001
Chaman et al., 2001
Mirabilis jalapa Clavibacter michiganensis subsp. Alarcn et al., 1998
michiganensis
Nicotiana tabacum Clavibacter michiganensis subsp. Alarcn et al., 1998
michiganensis
Citrus limon Alternaria alternata Prez et al., 1993
Ortega et al., 2001
25

Ortega et al., 2002


Fanta et al., 2003
Ortega et al., 2005
Citrus limon Alternaria alternata Fanta et al., 1992
Trichoderma harzianum Prez et al., 1994a y 1994b
Lycopersicon Fusarium solani Prez et al., 2001b
esculentum Trichoderma harzianum
Fragaria chiloensis Botrytis cinerea

Capacidad biocontroladora de hongos del gnero Trichoderma: su relacin


con la HR y con isoenzimas de quitinasas
Los estudios a nivel molecular de hongos del gnero Trichoderma se comenzaron a
realizar en paralelo con los estudios moleculares en los sistemas modelo (Gutirrez et al.
1998, Garca et al. 2000, Roco y Prez 2001, Besoan et al. 2001, Montealegre et al. 2005),
junto a la bsqueda de nuevas cepas de hongos y de bacterias biocontroladoras
(Montealegre et al. 2002, Montealegre et al. 2003).
Los hallazgos de la induccin de protenas PR como quitinasas y glucanasas en la HR
desarrollada por plntulas de limonero inoculadas con A. alternata y el efecto de estas
enzimas sobre el desarrollo de A. alternata (Fanta et al. 2003), sugirieron que este tipo de
enzimas podra estar involucrada en el biocontrol. Es as como al desarrollar a T. harzianum
en medios de cultivo con paredes de diferentes fitopatgenos, se estableci su capacidad
para secretar quitinasas, glucanasas y proteasas. En aquellos casos en que T. harzianum
secretaba un mayor nmero de isoenzimas en presencia de paredes de un determinado
fitopatgeno, exista una relacin directa entre nmero de isoenzimas y capacidad para
controlar a ese fitopatgeno. Un ejemplo de este hallazgo se encuentra en los resultados de
biocontrol realizados contra Pyrenochaeta lycopersici usando diferentes cepas silvestres de
T. harzianum, donde la multiplicidad de isoenzimas de quitinasas secretadas por la cepa
Th11 se relaciona directamente con su capacidad para controlar a dicho patgeno (Prez et
al. 2001a, Prez et al. 2002, Prez 2005).
La induccin de quitinasas y de glucanasas tambin se evalu en plntulas de tomate,
luego de inocularlas con Fusarium solani, o con Trichoderma harzianum, o con ambos
(Prez et al. 2001b). Se estableci que ambos microrganismos inducan quitinasas en la
planta pero a tiempos diferentes. Las quitinasas inducidas luego de la inoculacin conjunta,
correspondan solamente a las relacionadas con la inoculacin con T. harzianum, situacin
en la que las plntulas de tomate se mantenan sanas. Sin embargo, los ensayos de
antagonismo directo de T. harzianum enfrentado a F. solani mostraron una inhibicin parcial
del desarrollo del patgeno, sugiriendo la necesidad de contar con microorganismos con una
mayor capacidad antagnica.

Mutantes: una alternativa para la obtencin de mejores biocontroladores


La necesidad de contar con cepas con una mejor actividad biocontroladora y con un
mayor espectro de accin, llev a la generacin de mutantes a travs de tratamiento de
cepas silvestres de Trichoderma con cloruro de guanidinio (Zaldvar et al. 2001, Prez y
Morales 2003, Prez et al. 2007), o con luz ultravioleta o a travs de fusin de protoplastos
(Besoan et al. 2007). Estos mutantes se ensayaron para el control de Rhizoctonia solani y
de Phytophthora nicotianae (Arias et al. 2006) y de Pyrenochaeta lycopersici La mutante de
26

T. harzianum Th650-NG7 que mostr un incremento en su capacidad para secretar


quitinasas, mejor su mayor capacidad para biocontrolar a R. solani (Prez et al. 2007),
correlacionando nuevamente una mayor capacidad quitinoltica con un mejor efecto
biocontrolador, hecho que se ha demostrado no solamente a nivel de laboratorio, sino
tambin a nivel de invernadero y de campo (Montealegre et al. 2007 y 2009a). El anlisis del
patrn isoenzimtico de quitinasas y glucanasas secretadas por otros mutantes obtenidos
(Hinojosa et al. 2009), han permitido la seleccin de aquellos que posteriormente tambin se
ensayaron a nivel de invernadero y de campo para controlar a Rhizoctonia solani, a
Phytophthora nicotianae, y a Pyrenochaeta lycopersici (Arias et al. 2006, Montealegre et al.
2007, Prez et al. 2007, Montealegre et al. 2009a, Montealegre et al. 2010).
Adicionalmente, a algunos de mutantes obtenidos se les analiz su sensibilidad a
fungicidas (Herrera et al. 2007) con la finalidad de establecer si podan ser usados en forma
conjunta con algunos productos qumicos en el control de algunos fitopatgenos, buscando
disminuir el uso de productos qumicos y manteniendo un alto grado de efectividad. Tambin
se les estableci sus condiciones de supervivencia en diferentes tipos de suelo
(Montealegre et al. 2009b), y se les confront con diferentes bacterias patognicas de
plantas (Pea et al. 2009).
Un resumen de las interacciones biocontrolador (silvestre y/o mutante)-patgeno
estudiadas, con sus correspondientes referencias, se encuentra resumido en el Cuadro 3.

Cuadro 3. Interacciones biocontrolador otros microorganismos analizadas en el contexto


molecular

Biocontrolador Patgeno Referencia

Paenibacillus lentimorbus Rhizoctonia solani Montealegre et al., 2002


Montealegre et al., 2005
Trichoderma harzianum Alternaria alternata Roco y Prez, 2001
Trichoderma harzianum Fusarium oxysporum Prez y Morales, 2003
Trichoderma harzianum Phytophthora nicotianae Arias et al., 2006
Trichoderma harzianum Phytophthora parasitica Besoan et al., 2001
Trichoderma harzianum* Pyrenochaeta lycopersici Prez et al., 2001a
Prez et al., 2002
Prez, 2005
Besoan et al., 2007
Trichoderma harzianum* Rhizoctonia solani Montealegre et al., 2002
Montealegre et al., 2005
Arias et al., 2006
Prez et al., 2007
Montealegre et al., 2007
Montealegre et al., 2009a y 2009b
Montealegre et al., 2010
Trichoderma spp. Rhizoctonia solani Garca et al., 2000
Trichoderma spp. Agrobacterium tumefaciens, Pea et al., 2009
Clavibacter michiganensis,
Erwinia carotovora,
Pseudomonas syringae pv.
syringae
P. syringae pv. tomato
*Incluye mutantes
27

Literatura citada
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CONTROL BIOLGICO EN FRUTALES


34
35

CONTROL BIOLGICO DE Botrytis cinerea EN ESPECIES


FRUTALES EN CHILE
Biological control of Botrytis cinerea in fruit crops in chile

Bernardo A. Latorre G.
Facultad de Agronoma e Ingeniera Forestal, Pontificia Universidad Catlica de Chile
E-mail: blatorre@uc.cl

Resumen
El control biolgico se reconoce como una alternativa de control, amigable con el
ambiente, la salud humana y animal, til para el manejo de las enfermedades producidas
por B. cinerea en especies frutales. Existen numerosos microorganismos posibles de
emplear con estos propsitos. No obstante, Bacillus spp. y Trichoderma spp. son los
principales agentes antagnicos de B. cinerea actualmente utilizados en Chile. La accin
antagnica de estos microorganismos se ha evaluado, tanto en Chile como en otros lugares,
obtenindose resultados consistentes bajo condiciones de laboratorio, invernadero y de
campo. Sin embargo, la agresividad de B. cinerea en uva de mesa y otros frutales, que a
menudo conduce al desarrollo de severas epifitias en muy breve tiempo, ha limitado su uso.
Bajo estas circunstancias, el grado control obtenido con agentes antagnicos suele ser
insuficiente para responder a las exigencias del mercado internacional (ej., prevalencia
<0,5% de pudricin gris en uva de mesa). Por lo tanto, el control biolgico se debe emplear
conjuntamente con otras estrategias de control en el manejo de la pudricin gris. A pesar de
los numerosos trabajos de investigacin sobre control biolgico de B. cinerea en Chile,
parece necesario continuar e intensificar estas investigaciones con el propsito de mejorar
cada vez ms su eficacia contra B. cinerea es especies frutales.

Summary
Biological control is accepted as an environmental friendly alternative, including human
and animal health, for the control of diseases produced by B. cinerea in fruit crops. Bacillus
spp. and Trichoderma spp. are among the microorganisms that may biocontrol this disease,
being both used in Chile. Their antagonic activity has been tested both in Chile and other
countries, where consistent results have been obtained at the laboratory, greenhouse and
field levels. However, agresivity of B. cinerea in tablegrapes and other fruit crops resulting in
severe epidemies in short time periods, have limited biocontrol strategies because of
unsufficient control degrees to answer the international market requirements (i.e. <0.5%
prevalence of gray rot in tablegrapes). Thus, biological control of B. cinerea shoud be used
along with other strategies at the present time, being a must to continue and intensify
research on this topic to improve management and control of gray rot in fruit species.

Introduccin
Botrytis cinerea Pers. ex Fr. (teleomorfo Botryotinia fuckeliana (de Bary) Whetzel) es
un hongo polfago, necrtrofo, agente causal de la pudricin gris que afecta numerosos
cultivos econmicamente importantes en Chile. Presenta un amplio rango de plantas
36

hospederas y a menudo coloniza residuos vegetales que persisten en el huerto. Se


encuentra ampliamente distribuido, predominando en ambientes templados y hmedos.
Casi sin excepcin, la pudricin gris es una enfermedad muy destructiva en rboles
frutales (frutales de carozo y pomceas), en frutales menores (arndano, frambueso y
frutilla), vides (uva de mesa y de vino) y otros cultivos en Chile. Por ejemplo, ha limitado la
produccin y reducido la calidad de la uva de mesa, a menudo con prdidas totales de la
produccin (Capellini et al. 1986, Latorre 2007).
Varias estrategias de control se han propuesto para el control de la pudricin gris, las
que incluyen medidas culturales y fsicas, saneamiento, uso de fungicidas y control
biolgico. Las estrategias de control qumico, basadas en el uso de fungicidas, han tenido
gran aceptacin, por parte de los agricultores, para el manejo de esta enfermedad en
huertos frutales. Sin embargo, el control qumico presenta algunas restricciones, entre las
cuales se destaca: a) La presencia de razas de B. cinerea resistentes, las que han sido
reportadas en Chile, respecto de fungicidas con diferentes modos de accin (Carreo y
lvarez 1990, Latorre et al. 1994, 2002b, Esterio et al. 2007), b) La preocupacin
manifestada por la opinin pblica respecto del efecto que el uso de pesticidas pudiera tener
en la contaminacin del ambiente y sobre la salud humana y animal (Crane et al. 2006) y c)
Las crecientes restricciones impuestas por los mercados de exportacin, en algunos casos
tolerancia cero de residuos, de la fruta chilena. Esto ha obligado a desarrollar nuevas
estrategias de control.
En este contexto, el control biolgico es una herramienta importante en el manejo de la
pudricin gris. Se considera ambientalmente amigable, reduce el excesivo uso de fungicidas
sintticos y minimiza el riesgo de desarrollo de razas de B. cinerea resistentes a fungicidas.
El objetivo de este captulo es analizar el control biolgico en el manejo de enfermedades
producidas por B. cinerea en especies frutales, focalizada en el manejo de la pudricin gris
de la vid, que corresponde al cultivo frutal con mayor importancia econmica en Chile,
destinado a uva de mesa, elaboracin de vino y pisco (Zoffoli y Latorre 2011).

Aspectos epidemiolgicos
Botrytis cinerea es un patgeno de alto riesgo epidemiolgico, capaz de desarrollar
enfermedades de naturaleza policclica en numerosos cultivos en zonas templadas y
hmedas. Contribuyen al alto riesgo epidemiolgico: a) el amplio rango de plantas
hospederas que incluye sobre 200 especies cultivadas y malezas, b) la posible presencia de
inculo en restos vegetales senescentes y c) la produccin de esclerocios como estructuras
de sobrevivencia, los que persisten en restos vegetales infectados. Adems, presenta un
corto ciclo biolgico y una alta capacidad reproductiva por medio de conidias, las que en el
huerto, son diseminadas eficientemente por el viento, por el salpicado producido por las
lluvias y eventualmente por algunos insectos (Elmer y Michailides 2007). Se asume que el
inculo siempre existe en huertos frutales, lo que a menudo genera altas presiones de
inculo durante los periodos crticos del cultivo en primavera y verano. Botrytis cinerea
presenta gran variabilidad gentica; sin embargo, se desconoce el estadio sexual en Chile.
En uva de mesa, son crticos para el desarrollo de la pudricin gris los estadios
fenolgicos de floracin y envero a cosecha (Latorre et al. 2001). La presencia de ambientes
templados y hmedos en estos periodos genera un alto riesgo de infeccin, siendo
necesario aplicar alguna estrategia de control preventivo. Favorecen el desarrollo de la
pudricin gris la presencia de follaje o frutos mojados por ms de 6 h a temperaturas entre
37

15 y 25C, aproximadamente (Broome et al. 1995, Latorre y Rioja 2002a, Latorre et al.
2002a).
Durante la floracin, tanto en uva de mesa como otros frutales, es posible el desarrollo
de infecciones latentes, las que se reactivan junto con la maduracin de la fruta. Al mismo
tiempo, se produce una abundante colonizacin de restos florales senescentes, pudiendo
aportar inculo para infecciones posteriores durante la cosecha y postcosecha (Latorre y
Vsquez 1996, Elmer y Michailides 2007).
En resumen, un buen conocimiento de la biologa e epidemiologa de B. cinerea es
necesario para una correcta planificacin del manejo de la pudricin gris. Tiene importancia
conocer los periodos crticos del cultivo, las pocas de mayor riesgo de infeccin y estimar la
presin de inculo existente en el huerto. En funcin de estos antecedentes, se podr optar
por el uso de una estrategia biolgica, sola, en conjunto o alternada con otras estrategias de
control.

Control integrado
Actualmente, el control de las enfermedades causadas por B. cinerea en frutales
requiere de varios tratamientos qumicos y se reconoce la importancia de utilizarlos junto
con medidas de control cultural y saneamiento del cultivo. Por ejemplo, entre cuatro y seis
tratamientos con fungicidas por temporada se aplican en los periodos crticos (floracin y
envero a cosecha) de la vid en Chile (Latorre et al. 2001). Sin embargo, para obtener un alto
nivel de control, se reconoce que el deshoje de la vid es indispensable, ya que, permite
evitar microambientes hmedos, muy favorables a la infeccin, alrededor de los racimos
(Broome et al. 1995). Por lo tanto, los tratamientos con fungicidas ms las medidas
culturales, aplicadas en forma simultnea o alternadas, son las estrategias ms efectivas
para controlar la pudricin gris, en especial cuando las condiciones ambientales son muy
favorables. Sin embargo, cuando las condiciones ambientales son leves o moderadamente
favorables, es posible integrar estrategias biolgicas, en reemplazo de algunos tratamientos
qumicos, reduciendo as el uso de fungicidas sintticos (Shtienberg 2007a,b).
Se han desarrollado modelos predictivos que permiten estimar el riesgo de pudricin
gris de la vid, basado en un anlisis de la temperatura y humedad alrededor de los racimos
(Avils et al. 1995, Broome et al. 1995). De este modo es posible pronosticar la ocurrencia
de pudricin gris. Esta es una herramienta que es aconsejable integrarla en la toma de
decisiones sobre el tipo de estrategia de control a emplear en un determinado momento. El
control biolgico se debera utilizar con un riesgo de infeccin leve, privilegiando el control
qumico cuando existan ambientes muy propicios para el desarrollo de pudricin gris. En
ambos casos, el control cultural se debe integrar al control qumico o biolgico.

Microorganismos antagonistas
Existe un amplio conocimiento mundial de los antagonistas de B. cinerea, que incluye
ejemplos de hongos filamentosos, levaduriformes y algunas bacterias (Cuadro 1). Estos
microrganismos son potencialmente tiles contra B. cinerea. Sin embargo, la mayora se ha
evaluado en laboratorio y muy pocos bajo condiciones de campo. La disponibilidad de
productos formulados en Chile es escasa y los productos existentes tienen como
antagonista especies de Trichoderma o Bacillus (Cuadro 1).
38

Cuadro 1. Microorganismos antagonistas de Botrytis cinerea y productos formulados con


registro en Chile para su uso preventivo contra la pudricin gris en frutales y vides.

Uso comercial en
Microorganismos antagonistas1 Referencias bibliogrficas
Chile2

Bacterias
Bacillus amyloliquefaciens Mari et al., 1996.
Bacillus megaterium Rojas y Wong, 2011.
Bacillus licheniformis Rojas y Wong, 2011.
Bacillus pumilus Mari et al., 1996.
Bacillus subtilis Lisboa, 2003; Vergara, 2003; Serenade
Ravello, 2006; Rojas y Wong, 2011.
Chryseobacterium indologenes Moline et al., 1999.
(syn Flavobacterium indologenes)
Enterobacter cloacae Leonelli, 2006.
Klebsiella movilis Leonelli, 2006.
(syn Enterobacter aerogenes)
Lactobacillus acidophilus Fruitsan
Pseudomonas putida Moline et al. 1999.
Pseudomonas syringae Janisiewicz y Marchi, 1992.
Rahnella aquatilis Calvo et al., 2010.
Serratia liquefaciens Whiteman y Stewart, 1998; Garca
et al., 2001.
Stenotrophomonas maltophilia Leonelli, 2006.
(syn Pseudomonas maltophilia,
Xanthomonas maltophilia)
Hongos filamentosos
Clonostachys rosea Sutton et al., 1997; Valdebenito-
(=Gliocladium roseum) Sanhuenza et al., 1997; Cota et al.,
2008; Zalda y Sanfuentes, 2010.
Trichoderma atroviridae Card et al., 2009.
Trichoderma harzianum Ricard y Ricard, 1997; Harman et Binab-T, Harztop,
al. 1996; Esterio y Auger, 1997; 3Tac, Tricho-D,
Latorre et al., 1997; Alvarez, 1998; Trichodex;
Lisboa, 2003; Vergara, 2003; Trichonativa
Ponce, 2002; Ravello, 2006; Trichoderma
Donoso et al., 2007; Guerra, 2007. Suspension
Trichoderma longibrachiatum Ponce, 2002. 3Tac
Trichoderma parceramosum Ponce, 2002; Donoso et al., 2007. Trichonativa
(syn T. atroviride Bissett)
Trichoderma polysporum Binab-T,
Trichoderma virens Ponce, 2002; Donoso et al., 2007. Trichonativa
Trichoderma viride Ponce, 2002. 3Tac
Fusarium semitectum Dal Bello et al. 2011.
Ulocladium atrum Castillo y Krausz, 2006.
Hongos levaduriformes
Aureobasidium pullulans Raspor et al., 2010; Robiglio et al.,
2011; Seplveda et al., 2011a.
Candida oleophila Raspor et al., 2010.
Cryptococcus laurentii Calvo et al., 2010.
(syn Rhodotorula laurentti)
Cryptococcus albidus Robiglio et al., 2011. Fruit Plus
(syn. Rhodotorula albida)
39

Pichia anomala Haissam, J.M. 2011.


(syn Hansenula anomala )
Pichia guilliermondii Raspor et al., 2010; Seplveda et
al., 2011a.
Rhodotorula glutinis Calvo et al., 2010.
Rhodotorula mucilaginosa Robiglio et al., 2011.
Saccharomyces boulardii Serey et al., 2006. Perenteryl3
Saccharomyces cerevisiae Robiglio et al., 2011; Nally et al.,
2012.
Schizosaccharomyces pombe Nally et al., 2012.
(syn Saccharomyces pombe)
1
Nombres segn se indican en: J.P. Euzby. 2012. List of Prokaryotic names with standing in nomenclature.
www.bacterio.cict.fr; Index Fungorum, www.indexfungorum.org y Mycobank, www.mycobank.org.
2
Productos comerciales registrados a marzo de 2012 en el Servicio Agrcola y Ganadero, Ministerio de Agricultura,
Gobierno de Chile.
3
Probitico, formulado como Perenteryl (Merck, Alemania) con fines farmacolgicos.

Binab-T, preparado comercial en base a T. harzianum, fue uno de los primeros


productos de origen biolgico desarrollado hacia fines de los aos 70 (Ricard y Ricard
1977), aun comercializado en Chile. Posteriormente varios productos, siempre formulados
con diferentes especies y razas de Trichoderma, se han registrado y recomendado para el
control preventivo de B. cinerea en especies frutales en Chile (Cuadro 1).
La efectividad antagnica de Trichoderma spp. contra B. cinerea en especies frutales,
especialmente en vid, se ha demostrado en numerosas investigaciones realizadas tanto en
condiciones de laboratorio como de campo en Chile (Harman et al. 1996, Esterio y Auger
1997, Latorre et al. 1997, lvarez 1998, Ponce 2002, Lisboa 2003, Vergara 2003, Henrquez
2006, Ravello 2006, Donoso et al. 2007, Guerra 2007).
Al mismo tiempo, existen antecedentes locales que demuestran la actividad
antagnica contra B. cinerea de especies de Bacillus, otras bacterias (Lisboa 2003, Vergara
2003, Leonelli 2006, Riquelme 2010, Rojas y Wong 2011) y algunas levaduras
(Aureobasidium, Pichia y Saccharomyces) (Serey et al. 2006; Seplveda et al. 2011a,b)
(Cuadro 1).

Utilizacin de estrategias de control biolgico


El control biolgico es una alternativa al control qumico de B. cinerea en vides y otros
frutales en Chile. Las recomendaciones sugeridas para el uso de productos biolgicos
suelen ser similares a las recomendaciones consideradas para los fungicidas sintticos. Por
diversas razones, este criterio de uso puede conducir a resultados variables e
insatisfactorios, ya que desconoce que la accin antagnica, contra B. cinerea u otros
patgenos, depende de las condiciones ambientales (ej., temperatura, humedad relativa y
agua libre) prevalentes en la superficie de la planta, al momento de la aplicacin. A su vez,
la viabilidad del producto formulado es esencial para garantizar una correcta accin
antagnica de los productos biolgicos. Estos productos, tienen una corta vida de estantera,
perdiendo viabilidad an bajo las mejores condiciones de almacenamiento, lo que puede
afectar la efectividad antagnica del producto formulado (Elad and Stewart 2007, Leggett et
al. 2011).
Los productos biolgicos carecen de accin instantnea (knock-down), cualidad que
caracteriza a muchos fungicidas sintticos. Por este motivo, los biocontroladores se deben
40

integrar, preventivamente, a otras estrategias de control y se deben utilizar cuando el


ambiente permita el buen establecimiento, multiplicacin y colonizacin del agente biolgico
en el sitio de accin. Slo bajo estas condiciones se puede esperar que el biocontrolador
ejerza la actividad antagnica esperada.
La efectividad del control biolgico se obtiene nicamente al mantener un umbral
poblacional mnimo en el sitio de accin. Bajo dicho umbral, el control biolgico pierde
efectividad. Por este motivo, en huertos frutales, los biocontroladores se emplean en altas
concentraciones (ej., 1-2 L/ha de Trichodex, 5-8 kg/ha de Serenade, 3-4 L/ha de Fruitsan) y
utilizando altos volmenes (1500-2000 L/ha) de modo de inundar en forma rpida y total el
sitio de accin. De esta manera se logra una accin de pre-infeccin (preventiva) con
resultados muchas veces similares o mejores que los posibles de obtener con un fungicida
sinttico (Latorre et al. 1997, Latorre 2011). Los productos biolgicos no tienen accin de
post-infeccin (curativa), la accin antagnica es localizada antes que sistmica y la
persistencia en la planta es limitada. Por ejemplo, la poblacin total de T. harzianum
aplicada en uva de mesa disminuy en forma relativamente rpida en flores y bayas de uvas
cv. Thompson Seedless tratadas con un producto formulado y no formulado. La vida media
se estim en alrededor de 20 das, pero an 19, 28 y 33 das despus de la aplicacin se
detect presencia de T. harzianum en bayas, hojas y flores, respectivamente (Latorre et al.
1997).
Se puede concluir que el control biolgico se reconoce como una alternativa de
control, amigable con el ambiente, la salud humana y animal, til para el manejo de las
enfermedades producidas por B. cinerea en especies frutales. Existen numerosos
microorganismos posibles de emplear con estos propsitos, entre los que se encuentran
Bacillus spp. y Trichoderma spp., los que se usan actualmente en Chile. La accin
antagnica de estos microorganismos se ha evaluado, tanto en este pais como en otros
lugares, obtenindose resultados consistentes bajo condiciones de laboratorio, invernadero
y de campo. Sin embargo, el uso de estos biocontroladores se ha visto limitado por la
agresividad de B. cinerea en uva de mesa y en otros frutales, la que conduce a menudo al
desarrollo de epidemias severas en muy breve tiempo. Bajo estas circunstancias, el grado
de control obtenido con agentes antagnicos suele ser insuficiente para responder a las
exigencias del mercado internacional (ej., prevalencia <0,5% de pudricin gris en uva de
mesa), de ah que actualmente se deba emplear el control biolgico conjuntamente con
otras estrategias de control en el manejo de la pudricin gris. Por lo tanto, parece necesario
continuar e intensificar las investigaciones para mejorar cada vez mas la eficacia del control
biolgico contra B. cinerea es especies frutales en Chile,

Literatura citada
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45

CONTROL BIOLGICO DE ENFERMEDADES DE LA MADERA


DE LA VID
Biological control of the vine wood diseases

Jaime R. Montealegre A.
Departamento de Sanidad Vegetal, Facultad de Ciencias Agronmicas, Universidad de
Chile. Santa Rosa 11315, La Pintana. Santiago-Chile.
E-mail: jmonteal@uchile.cl

Resumen
Los hongos que producen Enfermedades de la madera de la vid en Chile han adquirido
importancia, lo que se ha reflejado en el inicio de trabajos de investigacin tanto in vitro
como a nivel de campo evaluando el nivel de control de estos con cepas de Trichoderma
harzianum tanto nativas como mejoradas y con un producto comercial. Los ensayos han
incluido formulaciones lquidas y slidas, siendo estas ltimas las que muestran el mayor
efecto residual en el suelo, lo que se expresa en un mayor rendimiento en parronales que
poseen antecedentes de Pie negro de la vid. Tambin se ha evaluado in vitro el efecto de
bacterias bioantagonistas nativas obtenindose buenos resultados en el control de
Ilyonectria macrodidyma entre otros hongos asociados a enfermedades de la madera de la
vid.

Summary
Fungi producing vine wood diseases have become important in Chile triggering the
development of research work both in vitro and at the field level testing wild and mutant
Trichoderma harzianum strains as well as commercial products for their biocontrol. Trials
have included liquid and solid formulations showing the latter the highest persistence in the
soil, which resulted in a higher yield of the vineyard. Wild antagonistic bacteria have been
also tested in vitro against Ilyonectria macrodidyma, one of the fungi associated with vine
wood diseases, with good preliminary biocontrol results.

Introduccin
Dentro de los fitopatgenos que producen Enfermedades de la madera de la vid en
Chile, destacan las especies de Ilyonectria macrodidyma (Halleen, Schroers & Crous) P.
Chaverri & C. Salgado 2011 (Cylindrocarpon macrodidymum) e Ilyonectria liriodendri
(Halleen, Rego & Crous) Chaverri & C. Salgado 2011 (C. liriodendri); siendo ms frecuente
encontrar la primera especie afectando tanto a plantas como tambin colonizando suelos
cultivados con Vitis vinifera. La enfermedad provocada por estas especies de hongos en la
vid se conoce con el nombre vulgar de Pie negro de la vid (Montealegre et al. 2009). El
control de estos fitopatgenos que se efecta en Chile es normalmente de tipo preventivo,
hacindose hincapi en la produccin de plantas sanas y aplicacin preventiva de fungicidas
del grupo de los benzimidazoles principalmente. No obstante lo anterior y considerando que
el inculo se encuentra disponible principalmente en el suelo, tambin se ha investigado el
efecto de algunos biocontroladores fungosos tanto in vitro como en el campo.
46

Biocontrol in vitro de Ilyonectria macrodidyma en Vitis vinifera mediante el


uso de bioantagonistas fungosos y bacterianos
Los antecedentes de trabajos de investigacin in vitro del efecto de cepas de
Trichoderma sp. silvestres, de las mutantes de Trichoderma harzianum Th12A10.1 y ThF2-1
y del producto comercial Trichonativa para el control de Rhizoctonia solani se tomaron como
base y se aplicaron en el control de Ilyonectria macrodidyma. La metodologa de
antagonismo directo (Dennis y Webster 1971) y las desarrolladas por el autor y Pinto (2012)
permitieron establecer que las cepas que controlaron mejor al patgenos correspondieron a
T. harzianum 82, 83, 84 y 85, previamente aisladas de suelos cultivados con uva de mesa
en la III Regin de Chile desde donde tambin se aisl la cepa de Ilyonectria macrodidyma.
Estas cepas tuvieron un efecto inhibitorio superior al 80%, mientras que las cepas mutantes
Th12A10.1 y ThF2-1 y Trichonativa inhibieron en un 70%. Estos resultados difieren de los de
Riquelme (2006), quien no encontr diferencias estadsticas cuando evalu el efecto de
otras cepas de Trichoderma sp. en el control in vitro de Cylindrocarpon spp. (Ilyonectria
spp.).
A su vez, el uso de Bacillus subtilis, permiti obtener hasta un 70% de inhibicin de
crecimiento de Ilyonectria macrodidyma in vitro. En la actualidad el autor de este captulo
desarrolla un proyecto de investigacin para determinar la efectividad in vivo de bacterias
endfitas sobre el control de este patgeno en Vitis vinifera.
Considerando los resultados obtenidos in vitro por el autor de este captulo, se han
efectuado ensayos de campo en parronales de uva de mesa que presentaban disminucin
de rendimiento, y con presencia en el suelo de altas poblaciones de Ilyonectria
macrodidyma. Para ello, se utilizaron aplicaciones al suelo de la cepa silvestre de T.
harzianum 83, y de la cepa mutante ThF2-1 (Besoain et al. 2007) formuladas como pellets
de alginato de sodio (formulacin slida), comparndolas con el producto comercial
formulado en forma lquida Trichonativa. Se evalu incremento del rendimiento respecto al
control y rendimiento total por planta durante dos temporadas (Montealegre et al. 2012),
determinndose un aumento del rendimiento de frutos en los tratamientos en comparacin
con el testigo siendo siempre mejor la formulacin slida con T. harzianum 83 o con ThF2-1
que con Trichonativa, probablemente debido a un mejor establecimiento y persistencia del
biocontrolador.
Un experimento similar efectuado en otro parronal de uva de mesa del cv. T. Seedless
donde se aplicaron 2 tratamientos que incluyeron las cepas Trichoderma harzianum 83 y T.
harzianum ThF2-1, tambin se obtuvo incremento del rendimiento, esta vez siendo mayor
para el tratamiento ThF2-1 que para Trichoderma harzianum 83 (Montealegre et al. 2010).
Los resultados obtenidos sugieren que la aplicacin al suelo de biofungicidas a base de
Trichoderma sp., permiten obtener un mayor rendimiento de las plantas.
Considerando la importancia de los hongos que producen Enfermedades de la madera
de la vid en Chile, se ha hecho necesario iniciar trabajos de investigacin tanto in vitro como
a nivel de campo evaluando el nivel de control de estos con cepas de Trichoderma
harzianum tanto nativas como mejoradas comparndolas con el producto comercial
Trichonativa. Se han evaluado formulaciones slidas y lquidas y se ha determinado el
efecto residual en el suelo. Los resultados obtenidos permiten concluir que existe una mayor
persistencia en el suelo de formulaciones slidas, lo que se expresa en un mayor

Comunicacin personal: Gabriel Pinto V., Licenciado en Agronoma, Fac. de Cs. Agronmicas,
Universidad de Chile.
47

rendimiento en parronales que poseen antecedentes de Pie negro de la vid. Tambin se ha


evaluado in vitro el efecto de bacterias bioantagonistas nativas obtenindose buenos
resultados en el control de Ilyonectria macrodidyma entre otros hongos que producen
enfermedades de la madera de la vid.

Literatura citada
Besoain XA, Prez LM, Araya A, Lefever Ll, Sanguinetti M, Montealegre JR. 2007. New
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Escuela de Agronoma, Talca. 55 p.
48
49

CONTROL BIOLGICO DE PATGENOS EN POSTCOSECHA DE


FRUTAS
Biological control of post-harvest pathogens in fruits

Marisol Vargas
Facultad de Agronoma, Universidad de Concepcin, Vicente Mndez 595, Chilln, Chile
E-mail: marisolvargas@udec.cl

Resumen
El control biolgico de patgenos en postcosecha se encuentra en etapas preliminares
de desarrollo en Chile. Este captulo entrega la informacin inicial sobre el uso de levaduras
y hongos extremfilos que pueden resistir las temperaturas de almacenamiento de uva y
manzana.

Summary
Biological control of post-harvest pathogens is at initial development steps in Chile.
This chapter delivers initial information on the use of yeasts and extremophile fungi that
could resist grape and apple storage temperatures.

Introduccin
Chile se ha situado como el principal proveedor de fruta fresca a Amrica del Norte y
Europa durante los meses de contraestacin, siendo la uva y manzana las principales frutas
exportadas (ODEPA 2011). Estas frutas, por su condicin de perecederas, requieren de
tecnologas adecuadas para su conservacin (fro, atmsfera controlada, etc.), las que
permiten preservar sus caractersticas organolpticas y calidad, durante el tiempo de
almacenaje y durante su transporte a destinos de ultramar, y as satisfacer las demandas de
los consumidores en perodos distintos a los de la cosecha de estas frutas.
Las frutas pueden ser afectadas durante la postcosecha por diversos patgenos,
siendo los ms importantes los hongos por su alta incidencia (Barkai-Golan 2001). Para las
principales frutas de exportacin en Chile, uva de mesa y manzana, las enfermedades ms
importantes en postcosecha son la Pudricin gris ocasionada por el hongo Botrytis cinerea
Pers, siendo este patgeno una limitante para la produccin de uva de mesa en el pas
(Latorre 2007), y la Pudricin azul ocasionada por el hongo Penicillium expansum Link.
Este ltimo adems de ocasionar prdidas econmicas por las pudriciones, es productor de
la micotoxina patulina (Wilson y Nuovo 1973, Brause et al. 1996, Bandoh et al. 2009), las
que pueden constituir un grave peligro para la salud humana como animal (Ciegler et al.
1971).

Control de las enfermedades en postcosecha


Para el control de enfermedades en postcosecha se integran prcticas de manejo,
tales como: evitar la produccin de heridas durante la cosecha y embalaje de la fruta, la
sanitizacin de las plantas de embalaje y la aplicacin de fungicidas previo al
50

almacenamiento. Debido a las fuertes restricciones internacionales en el uso de fungicidas


en postcosecha, se ha autorizado a un nmero limitado de ingredientes activos cuyo uso
frecuente y excesivo ha generado resistencia en los patgenos disminuyendo por tanto la
eficacia del control (Latorre et al. 1994, Latorre et al. 2002, Esterio et al. 2007, Leroux 2007).
Adems, la creciente preocupacin pblica en relacin a la presencia de residuos de
fungicidas en la fruta (Muri 2009), ha estimulado la bsqueda de nuevas alternativas de control
de enfermedades de postcosecha.
En este contexto, el control biolgico ha surgido como una alternativa interesante para
el control de patgenos en postcosecha de frutos y ha sido motivo de mltiples
investigaciones y revisiones durante los ltimos 20 aos (Wilson y Wisnieswski 1989,
Spadaro y Gullino 2004, Droby 2006, Wisniewski et al. 2007, Droby et al. 2009, Sharma et
al. 2009).

Control biolgico de patgenos en postcosecha


El perodo de postcosecha presenta caractersticas muy favorables para el desarrollo
de patgenos, de ah que la aplicacin de mtodos de control biolgico (Mari y Guizzardi
1998) surge como una alternativa aplicable. El manejo de las condiciones de
almacenamiento de las frutas y verduras, como el uso de cmaras de fro y/o atmsfera
controlada, en ambientes restringidos, donde se pueden controlar las condiciones
ambientales, tales como la temperatura, humedad relativa y la composicin del aire, puede
hacer ms controlable el uso de biocontroladores. Los antagonistas pueden ser aplicados en
la fruta utilizando las instalaciones que se emplean para la aplicacin de fungicidas, y en
estas condiciones de espacios reducidos se puede propiciar un contacto ntimo entre el
agente de control biolgico y el patgeno, lo que mejora la actividad antagonista (Wilson y
Wisniewski 1989). Adems, el alto valor que tienen los productos cosechados hace viable el
incluir mtodos de control, que an cuando su costo fuese superior a los habituales,
resultan econmicamente factibles.
Existen dos vas a seguir para el control biolgico con microorganismos antagonistas
en postcosecha; una de ellas es estimular y manejar a los antagonistas que se encuentran
presentes en la superficie de los frutos, y la otra va, es introducir artificialmente a los
antagonistas que deben cumplir con ciertos requisitos (Wilson y Wisniewski, 1989)
aplicndolos sobre la fruta. La segunda va ha sido la ms estudiada.
Los principales microorganismos antagonistas usados para el control de patgenos en
postcosecha son las levaduras (Droby et al. 2009), dada su habilidad para colonizar
rpidamente la superficie de los frutos en forma natural o artificial y persistir en ellos a
niveles efectivos compitiendo con el patgeno por espacio y nutrientes, su capacidad de
desarrollarse bajo una amplia gama de condiciones ambientales, incluidas las condiciones
de cmaras de fro y atmsfera controlada adems de mostrar una gran tolerancia a los
fungicidas usados en postcosecha.
Las levaduras antagonistas pueden ejercer el control de los patgenos mediante
varios mecanismos de accin, en los que destacan: parasitismo (Wisniewski et al. 1991),
produccin de enzimas hidrolticas (Masih y Paul 2002, Saligkarias et al. 2002, Bar-Shimon
et al. 2004, Chanchaichaovivat et al. 2008), produccin de siderforos (Calvente et al. 1999,
Calvente et al. 2001), produccin de metabolitos antifngicos, como las toxinas killer
(Santos y Marquina 2004), la induccin de resistencia del husped (Wilson et al. 1994,
Ippolito et al. 2000, Droby et al. 2002, El-Ghaouth et al. 2003) y competencia por espacio y
nutrientes (El-Ghaouth et al. 1998, Spadaro et al. 2002, Vero et al. 2002), siendo este ltimo
51

el mecanismo ms importante utilizado para el biocontrol. Recientemente, nuevos


mecanismos de accin estn siendo investigados con el fin de determinar su importancia en
el control biolgico de patgenos de postcosecha, estos son: la formacin de biopelculas
(Ortu et al. 2005) y la resistencia de los antagonistas al estrs oxidativo (Castoria et al. 2003,
Liu et al. 2011, Torres et al. 2011).
Algunas alternativas para el control de los patgenos en postcosecha se indican a
continuacin: BiosaveTM (Ecoscience, EEUU), formulado en base a una cepa de la bacteria
Pseudomonas syringae; ShermerTM (Bayer CropScience), formulado en base a la levadura
Metschnikowia fructicola; BoniprotectTM (Bioferm GMBH, Austria), formulado en base a la
levadura Aureobasidium pullulans y CandifrutTM (Sipcam Inagra S.A., Espaa), formulado en
base a la levadura Candida sake. Existen adems dos formulaciones que combinan la
levadura Candida saitoana con productos naturales: InovaCoatTM, la cual combina la
levadura con quitosano e InovaCureTM, la cual contiene lisozima. La combinacin de
levaduras con productos naturales ha aumentado los niveles de control de los patgenos a
niveles similares a los logrados con los tratamientos qumicos (Droby et al. 2009).

Control biolgico de patgenos de postcosecha en Chile


La Facultad de Agronoma, de la Universidad de Concepcin, ha iniciado una lnea de
investigacin sobre el potencial de las levaduras como agentes de biocontrol de B. cinerea
en uva de mesa. Para ello se aislaron levaduras epfitas de uva y manzana, estableciendo
un cepario de ms de 500 levaduras, y se han estudiado y seleccionado aquellas que tienen
actividad de control in vitro e in vivo frente a B. cinerea. Vargas et al. (2010) evaluaron la
actividad de biocontrol de levaduras en manzana Fuji en condiciones de almacenamiento
de la fruta (0-1C) y demostraron que la levadura Aureobasidium pullulans 174b1 es capaz
de inhibir la pudricin por B. cinerea en manzanas que han estado almacenadas por 21 das
a 0C y luego han sido expuestas a una temperatura de 20C (Figura 1). Tambin
determinaron que cuando esta levadura se aplic 24 48 horas antes que el patgeno en
las heridas en la fruta la incidencia de B. cinerea se redujo a 4,2%, comparado al 35% de
incidencia cuando la aplicacin de la levadura se realiz slo 2 horas antes que el patgeno
o con el 100% de incidencia en el tratamiento control sin levadura (Figuras 2 y 3).

Figura 1. Inhibicin de la pudricin por B. cinerea en manzanas Fuji tratadas con levadura,
A: manzana control sin tratar; B: manzana tratada con levadura. La fruta se almacen a 0C
por 21 das y luego a 20C por 3 das.
52

Figura 2. Efecto del tiempo de colonizacin del antagonista en la fruta en la incidencia de la


pudricin de B. cinerea. La fruta se almacen a 0C por 21 das y luego a 20C por 3 das.

Figura 3. Inhibicin de la pudricin gris en manzanas Fuji tratadas con levaduras, A: control
sin levadura; Aplicacin de la levadura; B: 2h; C: 24 h; D: 48 h, previo a la inoculacin con
B. cinerea. La fruta se almacen a 0C por 21 das y luego a 20C por 3 das.

Este mismo grupo de investigacin seleccion tres aislados de levaduras (m11, me99
y ca80) con actividad antagonista frente a B. cinerea en uva de mesa (Seplveda et al.
2010). Los aislados fueron identificados mediante anlisis PCR-RFLP de la regin ITS del
ADN ribosmico, correspondiendo a las especies Aureobasidium pullulans (aislados me99 y
ca80) y Pichia guilliermondii (aislado m11) (Seplveda et al. 2011a). Adems, se estudiaron
algunos de los mecanismos de accin utilizados por las levaduras para el biocontrol.
Seplveda et al. (2011a, b) determinaron que los tres aislados de levaduras seleccionados
(m11, me99 y ca80) produjeron metabolitos antifngicos a pH 4,2, las enzimas hidrolticas
quitinasa y -1,3-glucanasa en presencia de paredes de B. cinerea como nica fuente de
carbono (Figura 4) y una baja resistencia al estrs oxidativo; los aislados me99 y ca80
produjeron siderforos y el aislado m11 mostr la capacidad de formar biopelculas.
53

A. B.

Figura 4. Actividad -1,3-glucanasa (A) y actividad quitinasa (B) de las levaduras (m11,
me99, ca80) cultivadas con paredes de B. cinerea, en medio YNB.

Uso de Trichoderma para el control biolgico de patgenos de postcosecha


Los hongos del gnero Trichoderma tambin se han evaluado para el control de
patgenos de postcosecha en frutas. La evaluacin del producto comercial Trichonativa,
(Donoso et al. 2011) formulado en base a tres especies de Trichoderma, logr disminuir la
incidencia y severidad de la pudricin gris en uva Thompson Seedless y Red Globe,
almacenada por 45 das a 0C, comparado con fruta que recibi el tratamiento convencional
en el huerto, cuando se aplic la formulacin de Trichoderma al final de floracin y cinco
das previo a la cosecha.
Ravello (2006) evalu una cepa nativa de Trichoderma harzianum (Queule) aplicada
en floracin en manzano Fuji para el control de Moho azul, Pudricin amarga, Corazn
mohoso, Pudricin Ojo de Buey y Botritis calicinal. Sin embargo, tras cinco meses de
almacenaje a 0C con siete das a temperatura ambiente no tuvo un efecto de control en la
prevencin de las pudriciones.

Uso de hongos extremfilos para el control biolgico de patgenos de


postcosecha
Algunas cepas nativas de hongos extremfilos aisladas desde zonas fras de Chile han
mostrado eficacia en el biocontrol de patgenos de postcosecha. Radrign et al. (2009),
evaluaron estas cepas para el biocontrol de Colletotrichum sp. y Aspergillus sp., en
manzanas y uvas respectivamente, almacenadas a 23C por 15 das y 100% de humedad.
Determinaron que dos cepas inhibieron la accin de Colletotrichum sp. en manzana y otra
cepa control a Aspergillus spp. en uva. Este grupo de investigacin evalu tambin la
eficacia de estos hongos extremfilos aplicados en postcosecha de manzanas Fuji, Pink
Lady y Scarlett, frente a B. cinerea, P. expansum, Neofabrea alba, Botryosphaeria sp. y
Colletotrichum sp. Despus de cinco meses de almacenaje en fro determinaron que
algunas cepas controlaron a los patgenos al mismo nivel que el tratamiento qumico y que
otras lo superaban (Radrign et al. 2010). Lamentablemente, no han descrito a qu especies
corresponden estos potenciales agentes de biocontrol.
54

En conclusin, el control biolgico de patgenos en postcosecha en Chile, se


encuentra en etapas preliminares de desarrollo, existiendo solamente informacin preliminar
sobre el uso de levaduras y hongos extremfilos que pueden resistir las temperaturas de
almacenamiento de uva y manzana.

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58
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CONTROL BIOLGICO EN HORTALIZAS


60
61

CONTROL BIOLGICO DE Rhizoctonia solani (Khn) EN EL


CULTIVO DEL TOMATE
Biological control of Rhizoctonia solani (Khn) in tomato crops

Jaime R. Montealegre A.
Departamento de Sanidad Vegetal, Facultad de Ciencias Agronmicas, Universidad de Chile
Santa Rosa 11315, La Pintana. Santiago-Chile.
E-mail: jmonteal@uchile.cl

Resumen
Este captulo incluye informacin de la investigacin realizada en Chile, que ha
demostrado la factibilidad de controlar Rhizoctonia solani en tomate utilizando cepas nativas
y/o mejoradas de Trichoderma harzianum, o bacterias como Paenibacillus lentimorbus y
Bacillus subtilis. Adicionalmente, existen bioantagonistas comerciales disponibles en el
mercado que han sido recomendados para el control de este patgeno como: Harztop (T.
harzianum Cepa 22), Binab T WP (T. harzianum y T. polysporum), Tricho D WP (T.
harzianum).

Summary
This chapter includes information on the Chilean research that supports the feasibility
for the biological control of Rhizoctonia solani, using wild or mutant Trichoderma harzianum
strains, or bacteria such as Paenibacillus lentimorbus and Bacillus subtilis. Also, commercial
bioantagonists available in the market, are recommended for the control of this pathogen:
Harztop (T. harzianum strain 22), Binab T WP (T. harzianum and T. polysporum), Tricho D
WP (T. harzianum).

Introduccin
Rhizoctonia solani (Khn) es uno de los fitopatgenos que afecta al tomate en Chile
(Latorre 2004) en el estado fenolgico de plntula produciendo cada de almcigos. En
plantas jvenes puede causar cancros en la base del tallo y dependiendo del nivel de
ataque, puede producir ocasionalmente la muerte de estas. En caso de ataques previos a la
floracin, el patgeno slo produce cancros en la zona del cuello del tallo, los que
generalmente causan un dao menor en las plantas.
La informacin sobre los grupos de anastomosis de cepas de R. solani presentes en
el pas es reducida y slo se limitan a datos de la V Regin, donde se han detectado los
grupos GA-4 y GA-2-1 (Montealegre et al. 2003). Por esta razn, la gran mayora de los
trabajos de investigacin sobre control biolgico de R. solani desarrollados en Chile, tanto in
vitro como in vivo, se han realizado con cepas pertenecientes a estos grupos de
anastomosis cuando se ha utilizado inculo artificial. De los dos grupos de anastomosis
presentes en Chile, las cepas del GA 4 son mucho ms agresivas en tomates que las del
GA 2-1. De acuerdo con Sneh et al. (1991), las cepas del grupo GA 4 son aisladas
comnmente de suelo y plantas infectadas de regiones ms calurosas, lo que coincide con
las temperaturas ptimas encontradas in vitro para el desarrollo del micelio de las cepas de
62

Rhizoctonia solani de los grupos de anastomosis utilizadas en los ensayos, las que fueron
de 20 y 22C para los GA 2-1 y GA 4, respectivamente (Madrid, 2002).
Los microorganismos que se han utilizado para el control biolgico de R. solani en
Chile, son fundamentalmente hongos del gnero Trichoderma, dentro de los cuales
destacan cepas silvestres de Trichoderma polysporum (Madrid, 2002) y de T. harzianum
tanto silvestres (Escobar et al. 2004) como mutantes obtenidos por luz UVA, UVB,
Nitrosoguanidina y fusin de protoplastos (Arias et al. 2006, Montealegre et al. 2010,
Besoain et al. 2007) mejorados en su capacidad de producir enzimas (Prez et al. 2007). La
obtencin de cepas mutantes ha permitido mejorar la efectividad de cepas silvestres
incrementando la capacidad de secrecin enzimtica involucrada en la degradacin de la
pared celular de los patgenos, tales como quitinasas y glucanasas (Besoain et al. 2007,
Prez et al. 2007) Tambin se han evaluado bacterias de los gneros Bacillus y
Paenibacillus (Montealegre et al. 2003). Los ensayos de efectividad in vitro se han realizado
en condiciones de temperatura y pH ptimos (cercanos al neutro) para el desarrollo de la
cepa de R. solani utilizada (Madrid, 2002).
En los aos recientes, tambin se han desarrollado en el pas algunos biofungicidas
comerciales a base de especies de hongos del gnero Trichoderma y bacterias del gnero
Bacillus para el biocontrol de R. solani en tomates.

Biocontrol de R. solani en tomates mediante el uso de bioantagonistas


fungosos silvestres y mutantes
Los trabajos de investigacin efectuados en invernadero bajo condiciones
semicontroladas y en invernaderos fros a nivel de campo desarrollados en la zona de
Quillota (V Regin de Chile), incluyeron la evaluacin de la efectividad de mutantes de
Trichoderma harzianum con mayor capacidad antagnica para controlar R. solani y otros
fitopatgenos del sistema radical en tomate: Th650-NG7, Th11A80.1, Th12A40.1,
Th12C40.1, Th12A10.1 y ThF2-1 (Besoan et al. 2007, Montealegre et al. 2007, Prez et al.
2007). Adicionalmente, Th650-NG7 mostr un incremento no slo en la secrecin de
enzimas hidrolticas, sino tambin en el nmero de isoenzimas (Prez et al. 2007).
Los resultados de los experimentos realizados usando a los biocontroladores en
formulaciones slidas, muestran que las cepas Th11A80.1, Th12A10.1 y Th650-NG7
previnieron un 100% la mortalidad de las plantas causada por R. solani en el cv. 92.95 del
tomate y de un 40% en el cv. Gndola, en los ensayos de invernadero. La reduccin de
mortalidad tambin se reflej en el menor desarrollo de cancros y un mayor desarrollo de
races, peso fresco y seco de la parte area de las plantas.
En ensayos de campo donde se us el cv. Fortaleza de tomate no mostr mortalidad
de plantas producidas por R. solani; mientras que el mutante ThF2-1 (obtenido por fusin de
protoplastos) redujo significativamente el nivel de cancros, y el mutante Th12A10.1 indujo a
producir una mayor cantidad de frutos de primera calidad cuando se aplic en dos
oportunidades, siendo similar al tratamiento comercial donde se utiliz Trichonativa.

Biocontrol de R. solani en tomates mediante el uso de bioantagonistas


bacterianos
El biocontrol de R. solani tambin se ha evaluado con bioantagonistas bacterianos
usando cepas de Bacillus subtilis y Bacillus (Paenibacillus) lentimorbus (Montealegre et al.
63

2003, Santander et al. 2003). Ambas bacterias controlaron el desarrollo de R. solani in vitro,
y se estableci que su mecanismo de accin no involucraba la utilizacin de enzimas
hidrolticas que degradan las paredes celulares. Tambin se determin que estas bacterias
poseen una buena capacidad colonizadora de las races de plantas de tomate. Otros
experimentos realizados donde se compar la aplicacin de estos bioantagonistas pre y
post aplicacin de bromuro de metilo y/o solarizacin, demostraron que cuando antes de su
aplicacin se utiliza bromuro de metilo y/o solarizacin ellos actan mejor (Santander et al.
2003).

Biofungicidas comerciales en el mercado chileno para el biocontrol de R.


solani en tomate
Dentro de los biofungicidas autorizados por el SAG (consulta efectuada el 29 de
febrero de 2012) y que en su etiqueta son recomendados para el control de R. solani, se
encuentran: Harztop (T. harzianum Cepa 22), Binab T WP (T harzianum y T. polysporum),
Tricho D WP (T. harzianum, recomendado para el control de R. solani en frutillas y berries
en general) y Trichonativa (control de cada de almcigos). De este listado el autor de este
captulo ha utilizado como tratamiento control el producto comercial Trichonativa en sus
trabajos de investigacin obteniendo un buen control, siendo este biofungicida similar o
levemente inferior a los bioantagonistas fungosos evaluados ya sea silvestres o mutantes.
En conclusin, la investigacin realizada en Chile ha demostrado que es factible
controlar Rhizoctonia solani en tomate utilizando cepas nativas y/o mejoradas de
Trichoderma harzianum. Tambin se han obtenido buenos resultados en ensayos realizados
con bacterias como Paenibacillus lentimorbus y Bacillus subtilis. Adems existen en el
mercado bioantagonistas comerciales recomendados para el control de este patgeno
como: Harztop (T. harzianum Cepa 22), Binab T WP (T. harzianum y T. polysporum), Tricho
D WP (T. harzianum).

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65

CONTROL BIOLGICO DE Phytophthora EN TOMATES Y


PIMIENTOS DESARROLLADOS BAJO INVERNADERO
Biological control of Phytophthora in tomatoes and peppers under greenhouse
conditions

Ximena A. Besoan C.
Facultad de Agronoma, Pontificia Universidad Catlica de Valparaso, Quillota, Chile.
E-mail: xbesoain@ucv.cl

Resumen
Este captulo muestra la influencia de la temperatura y del pH tanto en el desarrollo de
biocontroladores como de Phytophthora nicotianae y Phytophthora capsici sealando que
no existen coincidencias exactas entre las temperaturas y pH de sus desarrollos ptimos y,
por lo tanto, a las temperaturas ptimas de desarrollo de P. nicotianae y de P. capsici los
ndices de control no fueron los esperados. Este hecho impuls el desarrollo de mutantes
con los que se obtuvo un mejor control.

Summary
This chapter shows the influence of temperature and pH in the development of
biocontrol agents and of Phytophthora nicotianae and Phytophthora capsici, where no
coincidence exist between optimal temperature and pH values for their development, thus
explaining the unexpected biocontrol effect. The development of Trichoderma-derived
mutants to accomplish better biocontrol results is also included.

Introduccin
La Pudricin del cuello y races del tomate y pimiento es producida por diferentes
especies del gnero Phytophthora, entre las ms frecuentes se encuentran P. nicotianae
Breda de Haan (=P. parasitica) y P. capsici Leonian, esta ltima muy importante para el
cultivo del pimiento (Capsicum annuum L.), en donde causa la enfermedad conocida como
Tristeza del pimiento (Latorre 2004). En tomate (Lycopersicon esculentum Mill.), lo ms
frecuente es encontrar una severa pudricin del cuello y pudricin de races causada por P.
nicotianae, la que Bruna y Tobar (2004) han reportado su presencia en las regiones de
Valparaso, Metropolitana y OHiggins, alcanzando una mayor relevancia en cultivos de
tomate bajo invernaderos fros en las provincias de Quillota y Limache (Regin de
Valparaso).
En los ltimos aos, debido a una condicin de monocultivo, las aplicaciones de
bromuro de metilo ms cloropicrina no han sido del todo efectivas, debido a una rpida re-
colonizacin del sustrato principalmente por seudohongos del gnero Phytophthora. Es
importante sealar que, a partir del ao 2015, el bromuro de metilo no podr ser empleado
en Chile (PNUMA 2006). Si bien estas enfermedades pueden ser controladas mediante el
uso de fungicidas sistmicos que ejercen un control curativo, estos no son tan eficientes
para el control de enfermedades que presentan un rpido desarrollo como la Tristeza del
pimentn. Considerando estos antecedentes, surge la necesidad de contar con
66

bioantagonistas como una estrategia de control biolgico para enfrentar este tipo de
enfermedades. En relacin al control biolgico empleado en otros pases para el control de
especies de Phytophthora se encuentra Myrothecium roridum para el control de P.
cinnamomi agente causal de la Tristeza del palto (Gees y Coffey 1989), o especies de
Penicillium para el control de Pudricin al cuello de azaleas (Fang y Tsao 1995).
Trichoderma harzianum controla el dao causado por P. cactorum en plntulas de manzano
(Smith et al. 1989) y T. asperellum como alternativa al bromuro de metilo para el control de
enfermedades del suelo en pimiento (Czeslaw y Stanislaw 2009). En Chile, existen
antecedentes de la accin de T. harzianum sobre el patgeno P. parasitica en plantas de
tomate (Besoain et al. 2001), y del efecto in vitro de T. longibrachiatum sobre P. capsici
(Gonzlez et al. 2004).

Control biolgico en Chile


Los trabajos efectuados en la Facultad de Agronoma de la Pontificia Universidad
Catlica de Valparaso, utilizaron las especies Phytophthora nicotianae (aislado de
referencia M2, N IMI 382780) y P. capsici (aislado de referencia 630, N IMI 382782).
Se consider que el efecto inhibitorio de T. harzianum sobre P. capsici puede variar
segn la temperatura, el pH y el tipo de medio de cultivo empleado. Los resultados
mostraron que tanto los aislados del Phytophthora como de T. harzianum, disminuyeron su
crecimiento en forma significativa a temperaturas inferiores a los 15C y mostraron un
ptimo entre 25 y 30C.
El pH para el desarrollo de colonias de Phytophthora nicotianae oscila entre 5,5 y 6, y
se ve afectado en la medida que este pH es superior a 6,5 mientras que las cepas de
Trichoderma mostraron un crecimiento ptimo alrededor de pH 6,5, existiendo un menor
desarrollo de las colonias a pH igual o superior a 7 y a pH igual o menor a 6. Estos
resultados, comparados con el hecho de que los suelos en las provincias de Quillota y
Limache poseen un pH entre 7 y 8, sugieren que las cepas de nativas de Trichoderma
presentan una cierta desventaja en relacin a Phytophthora nicotianae que se desea
controlar. Esta situacin se consider para el desarrollo de mutantes que pudieran ser ms
efectivas en el control del patgeno.
Todos los trabajos de antagonismo directo realizados in vitro (Garca 2001)
consideraron la inhibicin miceliar de cepas nativas y mutantes de T. harzianum sobre
aislados de P. nicotianae donde las cepas nativas Th34 y Th291 se destacaron sobre el
control. De igual forma las cepas mutantes Th291A40.1, Th11A40.1 obtenidas a travs de
luz cercana a ultravioleta (UV-A (Araya 2005)) inhibieron a Phytophthora capsici, mejorando
la actividad inhibitoria de los aislados nativos parentales.
Para establecer el mecanismo por el que se estaba produciendo el antagonismo, se
evalu el nivel de biocontrol a travs de metabolitos voltiles de las cepas nativas de
Trichoderma, se observ que algunos aislados poseen un buen efecto inhibitorio de
Phytophthora nicotianae. Los aislados que presentaron el mejor efecto inhibitorio (ThV,
Th291 y Th11) se analizaron en cuanto a su capacidad para secretar metabolitos difusibles,
donde todos mostraron un porcentaje de inhibicin superior al 80%.
Los ensayos in vitro continuaron con trabajos realizados bajo condiciones controladas
de invernadero. La cepa Th291 disminuy el ndice de dao de la enfermedad por
Phytophthra nicotianae, y present un comportamiento similar a los tratamientos con
bromuro de metilo cuando se evalu altura de planta y dimetro del tallo (Besoain et al.
67

2001). Se debe destacar que en este caso se aplic un alto nivel de inculo (1*105
propgulos ml-1) de P. nicotianae, situacin que raramente ocurre a nivel de campo. El alto
nivel de inculo utilizado en este caso, fue para obtener un alto nivel de dao (Kannwischer
y Mitchell 1981, Davis 1989). Otro ensayo realizado con P. capsici para el control biolgico
de la Tristeza del pimentn, tambin efectuado con la misma carga de inculo utilizada para
P. nicotianae (Vegas 2007), mostr que la cepa ThF2-1 (Besoan et al. 2007) fue la que
logr un mejor control, siendo superior al bromuro de metilo.
Los ensayos de campo efectuados en invernaderos fros para evaluar el nivel de
control de cepas nativas de T. harzianum sobre P. nicotianae mostraron que la cepa Th291
fue efectiva solamente si el suelo naturalmente infectado con Phytophthora, era esterilizado
previamente con bromuro de metilo. Por otra parte, los ensayos que incluyeron cepas
mutantes mostraron buenos resultados con las cepas ThF5-8 y Th11C80.3, las que
disminuyeron en forma significativa el dao causado por P. nicotianae, obtenindose
resultados similares al Testigo sano.
Los antecedentes presentados muestran que la temperatura y el pH influyen tanto en
el desarrollo de los biocontroladores como de Phytophthora nicotianae y Phytophthora
capsici, no existiendo coincidencias exactas entre las temperaturas y pH de sus desarrollos
ptimos y, por lo tanto, los ndices de control no fueron los esperados. Este hecho impuls el
desarrollo de mutantes con los que se obtuvo un mejor control.

Literatura citada
Araya 2005. Caracterizacin biolgica y bioqumica de mutantes de Trichoderma harzianum,
y su efecto sobre Phytophthora nicotianae (P. parastica) y Pyrenochaeta lycopersici.
Taller de Licenciatura. Ing. Agr. Pontificia Universidad Catlica de Valparaso, Facultad
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Fang JG, Tsao PH. 1995. Efficacy of Penicillium funiculosum as a biological control agent
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Phytophthora parasitica y su efecto en el control de pudricin al cuello en el cultivo de
tomate (Lycopersicon esculentum) bajo invernadero. Taller de Licenciatura. Ing. Agr.
Quillota, Universidad Catlica de Valparaso, Facultad de Agronoma. 88p.
Gees R, Coffey MD. 1989. Evaluation of a strain of Myrothecium roridum as a potencial
agent against Phytophthora cinnamomi. Phytopathology 79: 1079-1084.
Gonzlez G, Lolas M, Sandoval C, Muoz C. 2004. Evaluacin in vitro del efecto inhibitorio
de Trichoderma longibrachiatum sobre Phytophthora capsici agente causal de la
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Kannwischer ME, Mitchell DJ. 1981. Relationships of number os spores of Phytophthora
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capa de ozono. Sptima edicin. Secretara del ozono Programa de las Naciones Unidas
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Smith V, Wilcox W, Harman G. 1989. Biological control of Phytophthora root and crown rot of
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Universidad Catlica de Valparaso, Facultad de Agronoma. 40 p.
69

CONTROL BIOLGICO DE Pyrenochaeta lycopersici EN TOMATES


Biological control of Pyrenochaeta lycopersici in tomatoes

Ximena A. Besoain C.
Facultad de Agronoma, Pontificia Universidad Catlica de Valparaso, Quillota, Chile.
E-mail: xbesoain@ucv.cl

Resumen
Las cepas nativas de Trichoderma harzianum Th11, Th12, Th291 y Th650 pueden
controlar a la Raz corchosa del tomate causada por Pyrenochaeta lycopersici, y la
solarizacin previa del suelo tiene un efecto potenciador del efecto inhibitorio de estas cepas
nativas sobre el patgeno, sugiriendo que el biocontrol de P. lycopersici con cepas nativas
se deber enfrentar a travs de una estrategia de manejo integrado. Los mutantes de
Trichoderma harzianum obtenidos de estas cepas nativas a travs de UV-A y UV-C,
mostraron un desarrollo superior a las cepas parentales a 15C, al igual que el mutante de
fusin de protoplastos ThF4-4. Se discute la evaluacin de estos mutantes en condiciones
de invernadero y de campo, como el uso combinado de cepas de Trichoderma harzianum,
tanto nativos como mejorados, con Bacillus subtilis.

Summary
The Trichoderma harzianum wild strains Th11, Th12 and Th650 could control tomato
corky root cause by Pyrenochaeta lycopersici, and that previous soil solarization potentiates
the inhibitory effect of wild T. harzianum strains on the pathogen, suggesting that biocontrol
of P. lycopersici should consider an integrated management strategy. Mutants of
Trichoderma harzianum obtained after UV-A or UV-C irradiation of wild strains as well as the
ThF4-4 protoplast fusion mutant, showed a development higher than the corresponding
parental strains at 15C. Evaluation of these mutants at greenhouse and field conditions, and
the combined use of wild and mutant Trichoderma strains with Bacillus subtilis, is discussed.

Introduccin
La Raz corchosa o Corky root, es una enfermedad importante que afecta al cultivo del
tomate (Lycopersicon esculentum Mill.) a nivel mundial. Su presencia ha sido descrita en
diversos pases como: Estados Unidos, Espaa, Francia, Inglaterra, Italia, Grecia, Turqua y
Chile (Gerlach y Schnieder 1964, Last y Ebben 1966, Olavarra y Besoain 1990, Bourbos y
Barbopoulou 2005, Amenduni et al. 2008, Bayraktar y Oksal 2011). El principal agente
causal de esta enfermedad corresponde al hongo Pyrenochaeta lycopersici, el que fue
determinado en 1991 en Chile (Olavarra y Besoan 1990), asociado a este patgeno como
secundario, se encuentra Colletotrichum coccodes (Araya, 1994). La raz corchosa se
encuentra principalmente en la Regin de Valparaso, provincia de Quillota, donde afecta al
cultivo para primor desarrollado en primavera en invernaderos fros, aun cuando en cultivos
al aire libre no tendra importancia (Estay y Bruna 2002). Tambin, se ha detectado en el
Valle de Azapa, Regin de Arica y Parinacota, donde el tomate es producido a lo largo de
todo el ao.
70

Un aspecto importante es que esta enfermedad se desarrolla bajo una condicin de


monocultivo y produce prdidas econmicas (Duimovic 1991).

Control biolgico de la Raz corchosa


Considerando la necesidad de reemplazar el uso del bromuro de metilo y el
compromiso de Chile de ir reduciendo el consumo de este gas hasta eliminarlo
completamente el ao 2015, el desarrollo del control biolgico constituye una alternativa
para el control de esta enfermedad. Se trabaj inicialmente con diferentes aislados nativos
de Trichoderma, correspondientes a las especies T. harzianum y T. koningii, y sobre la base
de las evaluaciones preliminares, se seleccionaron las cepas de T. harzianum Th11, Th12,
Th15, Th16 y Th21 para una segunda evaluacin, y finalmente las cepas Th11, Th12 y Th16
para el control de la Raz corchosa del tomate, bajo condiciones controladas de invernadero
(Pardo 1999), usando tanto la metodologa de incorporacin de Trichoderma descrita por
Sivan et al. (1987), como el uso de pellets de alginato de sodio (Montealegre y Larenas
1995). Las cepas Th11 y Th12 contrarrestaron el dao causado por esta enfermedad y
permitieron obtener un mayor peso seco de las plantas tratadas (Prez et al. 2002, Besoain
et al. 2003).
Adicionalmente, tanto a las cepas de Trichoderma seleccionadas como a cinco cepas
de P. lycopersici se les determin su temperatura y pH ptimo de desarrollo, junto al efecto
de salinidad y produccin de metabolitos voltiles y difusibles (Raggi 2001, Prez et al.
2002, Besoain et al. 2003). Los resultados mostraron que exista coincidencia en la
temperatura y pH ptimo de desarrollo tanto para los bioantagonistas y patgeno, entre 25
30C y pH 5,5 6,0, respectivamente. Bajo los 15C, temperatura en la que se produce el
ataque de P. lycopersici (Shishkoff y Campbell 1990), tanto el patgeno como el
biocontrolador disminuyeron significativamente su desarrollo.
Considerando los resultados obtenidos del efecto de las temperaturas sobre las cepas
de T. harzianum y P. lycopersici evaluadas, en la principal zona productora de tomates de
primor en Chile, provincia de Quillota, las temperaturas del suelo son bajas (10 y 15C) a
inicio del cultivo (junio-agosto) lo que contribuye a aumentar el problema de Raz corchosa;
por lo mismo en investigaciones posteriores se consider desarrollar mutantes que tuvieran
un mejor comportamiento biocontrolador a estas bajas temperaturas.
En relacin al pH, las cepas del gnero Trichoderma disminuyen su crecimiento a pH
mayores de 6,0 lo que constituye una limitante desde el punto de vista de la efectividad ya
que los suelos de la principal zona productora de cultivo forzado de tomates en Chile,
poseen un pH neutro a bsico (7 a 8). Este aspecto tambin fue considerado para el
desarrollo de nuevas cepas mutantes.

Desarrollo de mutantes de Trichoderma


Se obtuvieron mutantes de Trichoderma a travs del uso de nitrosoguanidina,
exposicin de cepas a luz cercana a ultravioleta (UV-A), a luz ultravioleta (UV-C), y de fusin
de protoplastos Tambin se investig el control a travs del uso de Bacillus, y la tcnica de
solarizacin.
La mayora de los mutantes generados por la luz UV-A y UV-C se desarrollaron mejor
que las cepas nativas, a temperaturas alrededor de 15C, destacando aquellos provenientes
de la cepa parental Th12. Los mutantes obtenidos por fusin de protoplastos (Besoain et al.
71

2007) usando las tcnicas previamente descritas (Sivan et al. 1990, Stasz et al. 1988, Bae y
Knudsen 2000), permiti establecer que la cepa ThF1-2 logr el mejor desarrollo a 15C,
adems de lograr una mayor inhibicin de cepas de P. lycopersici en relacin a otras cepas
nativas y mutantes. Por otro lado, la cepa mutante ThF4-4 obtenida mediante la fusin de
protoplastos de las cepas nativas ThV y Th12 fue capaz de inhibir en forma significativa el
desarrollo de colonias de P. lycopersici mediante la accin de metabolitos voltiles.

Ensayos bajo condiciones de invernadero


Los ensayos realizados bajo condiciones controladas de invernadero, para evaluar
tanto cepas nativas como mutantes de Trichoderma empleando suelo naturalmente
infectado con P. lycopersici, permitieron observar un efecto inhibitorio tanto de la cepa nativa
ThV como de la cepa ThF4-4 obtenida mediante la tcnica de fusin de protoplastos
(Besoain et al. 2007).
Los ensayos efectuados bajo condiciones de invernadero fro, permitieron demostrar
que la cepa nativa Th650 de T. harzianum, logr disminuir la incidencia de la enfermedad.
Adicionalmente, si la aplicacin de la cepa se combina con solarizacin, su efecto se
potencia. Una situacin similar ocurre con tratamientos en base a Bacillus subtilis.
La Raz corchosa causada por P. lycopersici podra ser controlada en parte por las
cepas nativas de T. harzianum Th11, Th12, Th291 y Th650. El uso de solarizacin potencia
el efecto inhibitorio de estas cepas nativas. Por lo mismo, el control con cepas nativas de T.
harzianum se deber enfrentar a travs de una estrategia de manejo integrado. Los
mutantes UV-A y UV-C, con un desarrollo superior a las cepas parentales a 15C, debern
ser evaluados en condiciones de invernadero y de campo, al igual que el mutante de fusin
de protoplastos ThF4-4. Adicionalmente, se podr evaluar a futuro el uso combinado de
cepas de Trichoderma harzianum, tanto nativas como mejoradas, con Bacillus subtilis.

Literatura citada
Amenduni M, Collela C, DAmico M, Bubici G, Cirulli M. 2008. Effect of an organic
amendment on corky root susceptibe and resistant tomatoes. Acta Horticulturae
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73

CONTROL BIOLGICO DE FUSARIOSIS EN TOMATE EN CHILE


Biological control of tomato fusariosis in Chile

Rodrigo A. Herrera C.
Departamento de Sanidad Vegetal, Facultad de Ciencias Agronmicas, Universidad de Chile
Santa Rosa 11315, La Pintana. Santiago-Chile.
E-mail: rherrera@uchile.cl

Resumen
Este captulo entrega informacin sobre el uso de Trichoderma como controlador
biolgico de Fusarium spp., discute su uso dentro de un programa de control preventivo, y
considera que este tipo de biocontrolador puede actuar adicionalmente sobre varios otros
patgenos. Tambin sugiere su implementacin con otras estrategias de control integrado.

Summary
This chapter provides information on the use of Trichoderma as a biocontrol agent of
Fusarium spp., discusses its use within a preventing control program and considers that this
type of biocontrol agent could also act on several other pathogens. It also suggests its use
along with other integrated management strategies.

Introduccin
El tomate (Lycopersicon esculentum) es una de las hortalizas ms cultivadas a nivel
mundial y en Chile es una de las hortalizas de mayor importancia econmica, siendo el
tercer cultivo hortcola en superficie, con 6.309 Ha en total, 5.357 cultivadas al aire libre y
1.052 Ha bajo invernaderos fros, destinndose el 67% del total a consumo fresco. La
produccin total equivale a 300.000 ton y un rendimiento promedio de 71.400 Kg/Ha (INE
2007). Chile tiene el ms alto consumo per cpita de Sudamrica con 29 Kg.
El tomate en Chile se cultiva de forma intensiva para la produccin de fruto fresco,
pasta, semilla, conservas, etc., producindose tanto en invernadero como al aire libre
(Apablaza 2000). El cultivo es afectado por enfermedades tanto de origen bacteriano como
fungoso (Apablaza 2000, Latorre 2004), siendo las de mayor importancia econmica a nivel
mundial, las producidas por hongos del gnero Fusarium que invaden los vasos xilemticos
de tallos, races y otros rganos, provocando las enfermedades conocidas como Fusariosis
(Agrios 2005).

Fusariosis que afectan al tomate en Chile


El hongo Fusarium oxysporum, en sus formas especiales (f. sp.) lycopersici (Sacc.)
Snyder & Hans. (Fol) y radicis-lycopersici Jarvis & Shoemaker (Forl), es uno de los
patgenos ms importantes del cultivo (Carbonel et al. 1994, Katan et al. 1997). La f. sp.
lycopersici presenta 3 razas (1, 2 y 3), de las que no se tienen antecedentes de cules
estaran presentes en Chile.
74

En Chile, adems de F. oxysporum en tomate, Montealegre et al. (2003) describieron


la presencia de Fusarium solani provocando sntomas de marchitez.

Aspectos epidemiolgicos de Fusarium en tomate. Fol es una enfermedad de clima


clido, que requiere temperaturas de suelo elevadas (entre 22 a 32C, con un ptimo de
28C), preferentemente en suelos cidos y arenosos. Los das cortos y una reducida
intensidad de luz, tambin contribuyen al desarrollo de la enfermedad (Apablaza 2000). Para
Forl, la temperatura ptima de desarrollo es de aproximadamente 18C (Manzies et al.
1990). Ambas formas especiales pueden presentarse en el cultivo desde la almaciguera.
Permanecen viables en el suelo, sin hospedero, durante varios aos como clamidosporas.
Fusarium oxysporum se disemina a travs de semilla infectada, suelo contaminado y
plntulas enfermas desde la almaciguera. Tambin por arrastre de suelo por maquinaria y
agua de riego (Apablaza 2000). La gravedad de la enfermedad depende de la agresividad
de las cepas y por sobre todo cuando las races han sufrido algn estrs ya sea hdrico,
trmico o por la presencia de nematodos.
El control de enfermedades del suelo se realiza an en Chile efectuando fumigacin
con bromuro de metilo y excepcionalmente utilizando prcticas culturales. Las posibilidades
de sustituir o disminuir el uso de productos qumicos en el control de enfermedades
producidas por hongos del suelo abren una ventana a la investigacin de tcnicas
alternativas como el control biolgico y el uso de biocontroladores. En Chile, se han
desarrollado numerosos estudios de laboratorio e invernadero en los ltimos aos, con el fin
de desarrollar alternativas de manejo en base a control biolgico de las enfermedades que
tienen como origen el suelo en el cultivo del tomate y en especial de las Fusariosis. Las
investigaciones se han basado principalmente en la bsqueda y desarrollo de cepas de
hongos bioantagonistas como Trichoderma y bacterias del gnero Bacillus (Herrera 2005).

Desarrollo de Bioantagonistas fungosos para el control de Fusarium en tomate


en Chile
La desinfeccin del suelo, mediante productos qumicos y principalmente utilizando
bromuro de metilo, es an muy usada en la produccin intensiva de hortalizas en Chile. El
uso de control qumico rompe el equilibrio ecolgico del suelo contaminando el medio
ambiente, genera situaciones de riesgo para la salud humana y animal, es de alto costo y
muchas veces no se obtienen los resultados esperados. Debido a lo anterior,
constantemente se hacen los esfuerzos para desarrollar nuevas alternativas, orientadas a
encontrar estrategias de control para patgenos del suelo.
Tanto en Chile como a nivel mundial, el hongo ms usado para biocontrol ha sido
Trichoderma spp., ya que muestra diversas ventajas como agente de control biolgico,
debido a su rpido crecimiento y desarrollo, y la produccin de una gran cantidad de
enzimas capaces de degradar a otros organismos, cuya secrecin se induce con la
presencia de hongos fitopatgenos. Puede desarrollarse en una amplia gama de sustratos,
lo cual facilita su produccin masiva para uso en la agricultura. Su gran tolerancia a
condiciones ambientales extremas y hbitats donde otros hongos son causantes de diversas
enfermedades, le permiten ser un eficiente agente de control. De igual forma puede
sobrevivir en medios con contenidos significativos de pesticidas y otros qumicos. Adems,
su gran variabilidad se constituye en un reservorio de posibilidades de control biolgico bajo
diferentes sistemas de produccin y cultivos (FIA 2008).
75

El efecto biocontrolador de este hongo no slo se reduce a la capacidad de inhibir el


crecimiento de patgenos de las plantas, sino que tambin puede inducir la resistencia
sistmica y localizada para una gama de patgenos, y competencia por nutrientes. Adems,
ciertas cepas tienen influencia sustancial sobre el crecimiento de la planta y el desarrollo de
sta (Roco y Prez 2001), lo que se observ adems, en los trabajos realizados por
Gonzlez et al. (2004), donde si bien el control de patgenos radicales no fue bueno por el
bioantagonista, se observaron plantas con un mayor desarrollo radical.
La inexistencia de informacin sobre la introduccin de bioantagonistas en ambientes
complejos, como es la rizsfera, requiere de informacin de parmetros que permitan la
sobrevivencia y la capacidad biocontroladora. Dentro de estos parmetros se pueden
considerar la textura del suelo, el contenido de agua, el pH, la temperatura, la salinidad, los
metales pesados, los pesticidas, otros microorganismos y la historia del cultivo (Hagn et al.
2003, Berg et al. 2005), los que se han estudiado (Antal et al. 2000; Kredics et al. 2000,
Kredics et al. 2004, Begoude et al. 2007; Naar y Kecskes 1998, Kredics et al. 2001) debido a
que pueden considerarse como factores de estrs que pueden influir en el xito o fracaso
del control biolgico por Trichoderma (Paulitz y Belanger 2001).
En Chile, se han llevado a cabo trabajos in vitro e in vivo, para caracterizar las cepas
de Trichodermas seleccionadas como buenos bioantagonistas, determinando el patrn
isoenzimatico de las enzimas hidrolticas implicadas en el control biolgico (endoquitinasa,
-1,3-glucanasas y proteasas), secretadas por este hongo (Prez et al. 2002), temperatura
de desarrollo ptimo, tipo de suelo, conductividad elctrica, pH ptimo del medio
(Montealegre et al. 2009) y su capacidad de tolerancia o sensibilidad a fungicidas que se
usan en la produccin de tomate con el objetivo de disminuir las dosis de agroqumicos en
este cultivo (Herrera et al. 2012). Adems para potenciar el efecto de los bioantagonistas se
ha estudiado el uso combinado de tcnicas para manejo integrado como el uso de
biocontroladores fungosos y solarizacin (Gonzlez et al. 2004, Montealegre et al. 2005).
Por otro lado, a partir de los aislamientos de cepas nativas de Trichoderma, se han obtenido
cepas mutantes, mediante nitroso guanidina, UV y fusin de protoplastos, con el objetivo de
incrementar las caractersticas bioantagonistas y seleccionarlos por la disminucin de su
sensibilidad a los fungicidas tradicionales que se aplican en los programas de control para
las enfermedades del suelo, por lo mismo podra recomendarse la aplicacin de estos
bioantagonistas dentro de un programa de control integrado de Fusarium, ya sea aplicados
por s solos o en combinacin con solarizacin (Besoain et al. 2007, Montealegre et al. 2009,
Herrera et al. 2012).
La utilizacin de biofungicidas en Chile, en forma comercial, se inici con la
introduccin del uso de Trichoderma harzianum y T. polysporum (Binab T, Polvo Mojable)
para el control de Chondroestereum purpureum y otros hongos en la dcada del 80. Con
posterioridad se introdujo al mercado T. harzianum (Trichodex 25 WP) utilizado
preferentemente para el control de Botrytis cinerea (Montealegre 2005).
En los ltimos aos se han desarrollado cepas nativas para el control de Fusarium spp,
en tomate y para otras enfermedades en una amplia gama de cultivos. Estas cepas nativas
combinadas han demostrado un alto nivel de control, logrando un 70% de sobrevivencia de
plantas de tomate inoculadas con Fusarium solani en comparacin con un 40% de
sobrevivencia de plantas aplicadas con productos comerciales con cepas importadas
(Cuadra 2001). Actualmente estas cepas nativas se estn distribuyendo comercialmente en
el mercado en Chile, con los nombres comerciales que se indican en el Cuadro 1.
76

Cuadro 1. Formulados comerciales de Trichoderma spp. en el mercado chileno


recomendados para el control biolgico de Fusariosis.

Nombre
Biocontrolador Cultivo Fitopatgenos a controlar
comercial
3 TAC T. harzianum, Lechuga, vid, kiwi, tomate, Fusarium sp., Pythium sp.,
T. viride y frambueso, frutilla, cerezo, Alternaria sp., Botrytis sp., Erysiphe
T. longibratum guindo, ciruelo, manzano, sp., Botrytis sp., Sclerotinia sp.,
peral, cebolla y arndano. Bremia sp., Phytophthora sp.,
Septoria sp. y Cercospora sp.

Binab-T WP T. harzianum y Duraznero, nectarino, Fusarium sp., Botrytis sp.,


T. polysporum ciruelo, almendro, Verticillium sp., Rhizoctonia sp.,
manzano, peral, vides, Phomopsis sp., Sclerotium sp.,
meln, sanda, tomate, Sclerotinia sp., Phytium sp.,
papa, lechuga, espinaca, Heterobasidium sp.,
arndano, frutilla y Chondrostereum purpureum,
frambuesa. Hymenomycete, Armillaria mellea,
Lentinus sp. y Ceratocystis sp.

Harztop Trichoderma Vid, arndano, frutilla, Botrytis cinerea, Mildew,


harzianum Rifai, frambuesa, tomate, Verticillium, Esclerotinia,
cepa T-22 lechuga, aj, pimentn, Rhizoctonia solani, Pythium spp.,
duraznero, nectarino, Fusarium spp. y Phytophthota spp.
ciruelo, damasco,
almendro, nogal, limonero,
naranjo, olivo, palto, trigo,
avena, cebada, maz y
manzano.

Trichonativa T. harzianum, Manzano, peral, cerezo, Botrytis cinerea, Alternaria spp.,


T. virens y durazno, nogal, avellano, Venturia inaequalis, Phytophthora
T. parceramosum palto, olivo, naranjo, spp., Pythium spp., Rhizoctonia
mandarino, limonero, solani, Sclerotinia sclerotiorum,
pomelo, vid, pimentn, aj, Armillaria mellea, Fusarium spp.,
brcoli, repollo, coliflor, Cladosporium spp. y Sclerotium
clavel, arndano, rolffsi.
frambuesa, frutilla, tomate,
lechuga, proteceas,
remolacha y pino radiata.

El uso de Trichoderma, como controlador biolgico de Fusarium spp. se puede


considerar dentro de un programa de control preventivo. El uso de este tipo de
biocontrolador puede actuar adicionalmente sobre varios otros patgenos, e implementarse
con otras estrategias de control integrado.
No obstante lo anterior, se hace indispensable continuar con los estudios que permitan
obtener cepas con mayor efectividad, mayor persistencia y adaptables a distintas
condiciones del medio y por otro lado, realizar investigaciones detalladas de las
interacciones entre los microorganismos y la planta husped, para seguir mejorando el
control biolgico de las enfermedades, reduciendo as el uso de compuestos qumicos.
77

Literatura citada
Agrios G. 2005. Plant Phytopathology. Fifth Edition. Elsevier Academic Press. 948 p.
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79

CONTROL BIOLGICO DE ENFERMEDADES FUNGOSAS EN


DIFERENTES HORTALIZAS
Biological control of fungal diseases in different vegetables

Mauricio Lolas C. y Claudio Sandoval B.


Laboratorio de Fitopatologa, Facultad de Ciencias Agrarias, Universidad de Talca, 2 Norte
685, 3465548 Talca, Chile)
E-mail: mlolas@utalca.cl

Resumen
Este captulo resume la investigacin desarrollada en el laboratorio de Fitopatologa de
la Universidad de Talca, lo que ha permitido el desarrollo de biocontroladores para ser
utilizados en la prevencin de enfermedades causadas por Fusarium solani; F. oxysporum;
diferentes especies de Phytophthora, Venturia inaequalis y B. cinrea. Estos
biocontroladores actualmente se recomiendan para el manejo de enfermedades que afectan
a las hortalizas de la Regin del Maule y de Chile, y se comercializan por la empresa Bio
Insumos Nativa.

Summary
This chapter summarizes the research of the Phytopathology Laboratory of the
Universidad de Talca, that allowed the development of biocontrol agents to be used in the
prevention of diseases caused by Fusarium solani; F. oxysporum; different Phytophthora
spp., Venturia inaequalis and B. cinerea, which are recommended for the management of
vegetables diseases in Maule Region and Chile, and commercialized by Bio Insumos Nativa.

Introduccin
Los hongos fitopatgenos descritos en Chile como agentes causales de enfermedades
de hoja y fruto en hortalizas corresponden principalmente a especies de los gneros
Alternaria; Botrytis; Colletotrichum; Phytophthora y Fusarium, as como aquellos que causan
Mildi tales como Peronospora y Bremia (Cuadro 1).
Las prdidas econmicas causadas por estos fitopatgenos no han sido cuantificadas
en su totalidad anualmente; sin embargo, se estima que en ciertas localidades alcanza un
valor significativo, que perjudica notablemente a sus productores. Tradicionalmente, las
recomendaciones tcnicas para prevenir y/o combatir las enfermedades en hortalizas de
hoja y fruto han incluido uso de variedades resistentes, rotacin de cultivos, enmiendas
orgnicas y aplicacin de fungicidas. Estos ltimos han sido privilegiados por sus resultados
inmediatos y efectivos, los cuales han desplazado otras medidas de control, lo que ha
significado que se utilicen programas fitosanitarios, donde las aplicaciones de fungicidas son
realizadas peridicamente en base a un calendario o a los estados fenolgicos del cultivo.
Con la implementacin de sistemas productivos de mayor sustentabilidad, como lo son
la produccin orgnica y biodinmica, se han realizado esfuerzos para introducir el uso de
biocontroladores los que son utilizados en forma preventiva en el control de algunas
80

enfermedades que afectan las hortalizas en Chile. La produccin de biocontroladores en el


pas es una industria emergente que an necesita desarrollo y aseguramiento de la calidad
de sus procesos, para constituirse en una herramienta competitiva frente a los fungicidas y
otras alternativas de control. Actualmente, son pocas las compaas que se dedican a este
rubro, y son pocos los productos de origen chileno que han sido registrados en el Servicio
Agrcola y Ganadero de Chile (SAG), nica entidad gubernamental que legalmente puede
hacerlo.

Cuadro 1. Hongos fitopatgenos descritos en Chile como agentes causales de


enfermedades en hortalizas de hoja y de fruto*.

HORTALIZAS
HOJA/FLOR FRUTO
Alternaria sp. (Endivia; Espinaca; Radicchio); A. Alternaria alternata (Aj; Berenjena; Meln;
alternata (Acelga; Achicoria; Albahaca); A. Pimentn; Sanda; Tomate; Zapallo de Guarda;
brassicae, A. brassicicola (Repollo; Betarraga; Zapallo Italiano); A. brassicae, A. brassicicola
Col China; Repollito de Bruselas); A. cinerariae (Brcoli; Coliflor); A. cucumerina (Pepino; Sanda;
(Alcachofa) Zapallo de Guarda; Zapallo Italiano)
Botrytis cinerea (Albahaca; Cilantro; Endivia; Botrytis cinerea (Aj; Berenjena; Coliflor; Meln;
Espinaca; Lechuga; Perejil; Repollo; Col China; Pepino; Pimentn; Sanda; Tomate; Zapallo de
Repollito de Bruselas, Esprrago); B. allii Guarda; Zapallo Italiano)
(Cebolla)
Bremia lactucae (Lechuga) Colletotrichum coccodes; C. gloeosporioides (Aj;
Cercospora beticola (Acelga, Achicoria); C. Berenjena; Pimentn; Tomate)
coriandri (Cilantro)
Cladosporium macrocarpum (Espinaca) Fusarium oxysporum f.sp. melonis (Meln); F.
spp. (Pepino; Sanda; Zapallo de Guarda; Zapallo
Oidium sp. (Acelga; Lechuga; Radicchio)
Italiano); F. moniliforme (Zapallo de Guarda;
Peronospora schachtii (Acelga); P. spinaciae Zapallo Italiano; Esprrago)
(Espinaca); P. parasitica (Repollo; Col China;
Macrophomina phaseolina (Pepino; Sanda)
Repollito de Bruselas)
Rhizoctonia solani (Acelga; Apio; Berenjena; Phytophthora capsici (Aj; Pepino; Pimentn); P.
Brcoli; Cilantro; Lechuga; Meln) spp. (Meln; Zapallo de Guarda; Zapallo Italiano);
P. infestans (Tomate); P. nicotianae var.
Sclerotinia sclerotiorum (Apio; Brcoli; Cebolla; parasitica (Tomate)
Cilantro; Endivia; Espinaca; Lechuga; Meln)
Septoria apiicola (Apio); S. petroselini (Perejil); S.
betae (Betarraga)
Stemphylium botryosum (Cebolla; Esprrago;
Lechuga)
*Acelga (Beta vulgaris var. cycla); Achicoria (Cichorium intybus); Aj (Capsicum annuum); Albahaca (Ocimum basilicum);
Alcachofa (Cynara scolymus); Apio (Apium graveolens var. dulce); Berenjena (Solanum melongena); Betarraga (Beta
vulgaris var. hortensis); Brcoli (Brassica oleracea var. italica); Cebolla (Allium cepa); Cilantro (Coriandrum sativum); Col
China, Coliflor (Brassica oleracea var. botrytis); Endivia (Cichorium endivia); Esprrago (Asparagus officinalis); Espinaca
(Spinacea oleracea); Lechuga (Lactuca sativa); Meln (Cucumis melo); Pepino (Cucumis sativus); Perejil (Petroselinum
crispum); Pimentn (Capsicum annuum); Radicchio (Cichorium intybus var. foliosum); Repollito de Bruselas (Brassica
oleracea var. gemmifera); Repollo (Brassica oleracea var. capitata); Sanda (Citrullus lanatus); Tomate (Lycopersicon
esculentum); Zapallo de Guarda (Cucurbita maxima); Zapallo Italiano (Cucurbita pepo). Fuente: Acua, 2008.

Desarrollo de Biocontroladores
En este contexto, el Laboratorio de Fitopatologa de la Facultad de Ciencias Agrarias
de la Universidad de Talca, aisl, identific y determin la capacidad biocontroladora de
81

aislados de distintas especies del gnero Trichoderma para el control de enfermedades


fungosas en esprrago, tomate, pimentn, lechuga y manzano. En este proyecto ejecutado,
se recolectaron distintos aislados de Trichoderma en diferentes sectores de la Regin del
Maule, incluyendo sectores cordilleranos, reservas forestales, secano costero y huertos
comerciales. Las especies identificadas, tales como T. harzianum (cepa Queule); T.
longibrachiatum (cepa Soto); T. hamatum (cepa Tubo); T. virens (Cepa Sherwood) y T.
parceramosum (cepa Trailes) se sometieron a pruebas de eficacia en biocontrol, tanto in
vitro como in vivo, en condiciones controladas de invernadero y campo de la Estacin
Experimental Panguilemo de la Universidad de Talca y en unidades de validacin con
productores de la Regin. Todas las cepas fueron evaluadas para el biocontrol de los
hongos fitopatgenos Fusarium oxysporum f. sp. radicis-lycopersici; F. solani; Rhizoctonia
solani; Botrytis cinerea y Sclerotinia sclerotiorum, causantes de enfermedades de
importancia econmica en tomate, brcoli, pimentn, lechuga y esprragos (Cuadro 1).
Uno de los ejemplos ms notables sobre control biolgico por hongos de
enfermedades fungosas foliares en hortalizas, materia de este captulo, lo constituye la cepa
nativa Sherwood de T. virens. Ya comprobada su gran actividad in vitro contra diferentes
aislados de distintos huspedes de B. cinerea, y a modo de ejemplo especfico, se presenta
a continuacin un trabajo sobre su eficacia en ensayos de campo sobre el moho gris en
lechuga, la cual constituye una enfermedad de importancia econmica para agricultores
hortaliceros de la Regin del Maule. Los resultados de este estudio mostraron la menor
incidencia de moho gris en el ensayo realizado con la cepa nativa Sherwood, ya sea
actuando sola (40,8%) o en forma conjunta con la mezcla benomilo + captan (43,6%). Sin
embargo esta menor incidencia no fue significativamente diferente con los otros tratamientos
que se efectuaron a excepcin del testigo (85,3%).
En relacin a la altura de planta no existieron diferencias significativas (P<0,05) entre
los tratamientos, lo que indica que las plantas tratadas tanto por biocontroladores del gnero
Trichoderma sp. como por la mezcla fungicida no tuvieron un efecto sobre esta variable. Con
respecto al peso de planta, si hubieron diferencias significativas entre los distintos trata-
mientos (P<0,05), siendo las plantas tratadas con benomilo ms captan, y los biocontrolado-
res Sherwood y Tricodex 25%WP aplicados en conjunto con la mezcla fungicida, las con
mayor peso comparadas con el testigo y con Tricodex 25%WP solo (Cuadro 2).

Cuadro 2. Evaluacin del efecto de aplicaciones de T. virens cepa Sherwood, Trichodex


25%WP y una mezcla fungicida benomilo ms captan para el control de B. cinerea sobre la
altura y peso de plantas de lechuga cultivadas en un sistema hidropnico con piscinas con
solucin nutritiva.

Tratamientos Altura de planta (cm) Peso de planta (g)


T. virens cepa Sherwood 21,5 160,1 ab
Trichodex 25%WP 20,5 152,6 b
benomilo + captan 20,7 171,5 a
T. virens cepa Sherwood + benomilo + captan 21,4 173,4 a
Trichodex 25%WP + benomilo + captan 21,1 171,4 a
Testigo 18,5 150,3 b
Significancia N.S. *
Letras distintas en la columna indica diferencias estadsticamente significativas entre los tratamientos segn
el test de HSD Tukey (* P< 0,05). N.S. indica No Significativo.
82

La Figura 1 muestra que existieron diferencias significativas entre el nmero de


lechugas comercializables procedentes del tratamiento testigo con las del resto de los
tratamientos (P<0,001) que consideraron a los biocontroladores. La cepa Sherwood y
Trichodex 25%WP solo o aplicado en conjunto con los fungicidas, y los fungicidas
comerciales benomilo ms captan, presentaron un mayor porcentaje de plantas
comercializables, entre un 84 y 90%. Las plantas utilizadas como testigo fueron
severamente afectadas por el hongo Botrytis cinerea, obtenindose slo un 15% de plantas
comercializables.

100
a a
a
Plantas comercializables (%)

a
80 a
Sherw ood
Trichodex
60
Benomilo
Sherw ood+Benomilo
40
Trichodex+Benomilo
b Testigo
20

Tratamientos

Figura 1. Calidad de plantas de lechuga inoculadas con B. cinerea y tratadas con T. virens
cepa Sherwood, Trichodex 25% WG o una mezcla fungicida, expresada en porcentaje de
plantas comercializables.

Por lo tanto, la cepa nativa Sherwood de T. virens es activa para el control in vitro de
B. cinerea, y adems controla efectivamente a este hongo fitopatgeno en plantas de
lechuga cultivadas en invernadero en un sistema hidropnico.
Los resultados de investigacin logrados en el laboratorio de Fitopatologa de la
Universidad de Talca permitieron: a) demostrar a los agricultores la efectividad de los
biocontroladores utilizados, quienes introdujeron su uso en sus planes normales de manejo,
b) generar una demanda constante por estos microorganismos evaluados, c) desarrollar un
sistema semi-continuo de produccin de las distintas cepas de Trichoderma, para satsfacer
las demandas tanto de proyectos de investigacin como de los agricultores, d) establecer las
bases preliminares para una produccin comercial local de las cepas de Trichoderma..
Todo lo anterior ha permitido el desarrollo de biocontroladores para ser utilizados en la
prevencin de enfermedades causadas por Fusarium solani; F. oxysporum; diferentes
especies de Phytophthora, Venturia inaequalis y B. cinerea, los que actualmente son
comercializadas por la empresa Bio Insumos Nativa, empresa establecida a partir de los
proyectos ejecutados por el Laboratorio de Fitopatologa de la Universidad de Talca. Los
productos biocontroladores actualmente estn registrados en el Servicio Agrcola y
83

Ganadero (SAG), siendo Trichonativa, el producto que se recomienda para ser usado en el
manejo de enfermedades que afectan las hortalizas de la Regin del Maule y de Chile.

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87

CONTROL BIOLGICO EN CEREALES


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CONTROL BIOLGICO DE LA PUDRICIN RADICAL, O MAL DEL


PI DEL TRIGO, EN LA ZONA SUR DE CHILE
Biological control of wheat Take-all in southern Chile

Orlando Andrade V.
Escuela de Agronoma, Facultad de Recursos Naturales, Universidad Catlica de Temuco.
Av. Rudecindo Ortega 02950, Temuco, Chile
E-mail: oandrade@uct.cl

Resumen
Los estudios y resultados presentados en este captulo concluyeron con la
identificacin de suelos supresivos a la pudricin radical del trigo, causado por el hongo
ascomycete Gaeumannomyces graminis var. Tritici (Ggt) en suelos agrcolas del sur de
Chile. Esta informacin constituye la primera referencia para el pas sobre la existencia de
suelos con propiedades de inhibicin natural de esta enfermedad. Si bien los diferentes
biocontroladores de Ggt evaluados bajo condiciones controladas de invernadero en suelo
estril y natural, demostraron una notable capacidad para inhibir la infeccin radical llegando
incluso hasta un 100% de control, las posteriores evaluaciones en campo resultaron con
magnitudes de control variables e inconsistentes. Al seleccionar dentro de estos mismos
biocontroladores, aquellos que posean altos niveles de tolerancia a dos fungicidas
comnmente empleados como desinfectantes de semilla de trigo, triadimenol y triticonazole,
para ser empleados como tratamientos complementarios en campo, los resultados fueron de
impacto relativo y baja consistencia, no logrando los antagonistas igualar o superar a los
tratamientos con fungicida a la semilla, excepto cuando se emple una mezcla de
biocontroladores bacterianos complementariamente al tratamiento con triadimenol a la
semilla.

Summary
Studies and results shown in this chapter allowed to identify suppresive soils againt
wheat Take all caused by the ascomycete fungus Gaeumannomyces graminis var. tritici
(Ggt) in Chilean southern soils. This information is the first reference for the country on the
existence of soils with natural inhibitor properties of this disease. Up to 100% inhibition of
root infection was achieved using different selected biocontrol agents under controlled
greenhouse conditions; however, results at the field level were variable and inconsistent.
Biocontrol agents, highly tolerant to triadimenol and triticonazol used for seed disinfection,
also showed low biocontrol impact at the field level, except when used with bacterial mixtures
in addition to seed disinfection with triadimenol.

Introduccin
La pudricin radical del trigo (Triticum aestivum L.), causada por el hongo ascomicete
Gaeumannomyces graminis (Sacc.) von Arx & Olivier var. tritici Walker (Ggt), es una de las
enfermedades ms severas que afectan a este cultivo en la mayora de las reas
productoras de este cereal en el mundo (Huber y McCay-Buis 1993, McMillan et al. 2011).
90

Produce significativas prdidas de rendimiento y calidad de grano en prcticamente los


cinco continentes (Hornby 1998).
En Chile, la pudricin radical o mal del pi del trigo fue descrita por primera vez el ao
1940, por el Dr. Alberto Graf, en el sur del pas. La enfermedad se presenta con particular
severidad en suelos de trumao (andisoles), desde la Regin del Bo-Bo (36 40 S 72 O)
a la regin de Los Lagos (4040 S 7238 O) (Andrade 2004). Coincidentemente, en esta
rea se produce sobre el 90% del trigo del pas, cultivo que se encuentra en un alto
porcentaje dentro de la rotacin. La alta severidad que alcanza la enfermedad en la principal
rea productiva de trigo en Chile, est explicada en gran parte por un sistema productivo
tradicional basado en rotaciones con cultivos anuales y una agricultura mixta. Respecto de
los cultivos anuales, un alto porcentaje corresponde a cereales, principalmente trigo y avena
adems de cebada y triticale y, una alta presencia de gramneas para alimentacin animal
en el caso de la agricultura mixta. Junto con lo anterior, las pocas alternativas productivas
que impone el clima en gran parte de esta zona, se traduce en que las rotaciones sean ms
bien cortas lo que, sumado a las temperaturas moderadas a fras que limitan la velocidad de
descomposicin del rastrojo, al alto contenido de materia orgnica de estos suelos (8- 15%)
(Campillo et al. 2001) y a la predominancia de siembras de otoo e invierno, hace que se
generen condiciones altamente favorables para la expresin de la enfermedad.
A pesar de haber transcurrido ms de 150 aos desde la primera descripcin de la
enfermedad en el sur de Australia, esta patologa an no cuenta con medidas de control
efectivas (Hornby 1998, Cook 2003). La rotacin de cultivos es, probablemente, la nica
alternativa que permite reducir en forma significativa el impacto de la enfermedad. Sin
embargo, por diversos aspectos tcnicos y econmicos, no siempre es factible de realizar y
su efecto bajo diversas condiciones de suelo y clima es variable (Paulitz et al. 2010).
Hacia mediados de los aos 80, junto con el desarrollo de fungicidas sistmicos, el
control qumico del patgeno surgi como una interesante alternativa. Sin embargo, a pesar
de algunos avances reportados en esta rea de la investigacin, la situacin relacionada con
el control qumico de Ggt es an insatisfactoria (Hornby 1998). La mayor parte de los
trabajos relacionados con el control qumico de la pudricin radical han estado dirigidos a los
tratamientos de la semilla, an cuando tratamientos al suelo con esterilizantes (Heim et al.,
citado por Hornby 1998), tratamientos con fungicida al suelo (Andrade 1995) y tratamientos
foliares (Hornby 1998) tambin han sido reportados con un xito variable.
La identificacin de suelos naturalmente supresivos a la pudricin radical del trigo, en
los cuales es posible aislar y transferir factores biticos inhibitorios de la enfermedad, es
considerado de gran relevancia en la bsqueda de organismos con potencial biocontrolador
del agente causal, lo cual ha sido empleado como estrategia por numerosos investigadores
(Hornby 1998). Esta supresin natural es atribuida principalmente a una microflora
antagonista que se desarrolla bajo condiciones de monocultivo de trigo (Cook y Weller
1987). An as, las caractersticas y probables formas de desarrollo de los diferentes tipos
de supresin observados en dichos suelos son variables (Hornby 1998). Existen igualmente
otras teoras propuestas como explicacin a la inhibicin natural de la enfermedad en
algunos suelos. Una de ellas se refiere a la mayor disponibilidad de manganeso (Mn) en los
suelos, por efecto de bajas poblaciones de bacterias oxidativas de este elemento (Huber y
McCay-Buis 1993). En estos casos, los suelos supresivos a la pudricin radical del trigo
presentan altos niveles de Mn disponible y elevada actividad biolgica, lo cual mantendra a
este elemento en forma disponible para la absorcin de las plantas permitindoles de esta
forma, una adecuada funcin de sus mecanismos de defensa. Como complemento de lo
anterior, se seala que la mayor expresin de la enfermedad en otros suelos coincidira con
91

el hecho de ocurrir en suelos alcalinos, de baja fertilidad (Hornby 1998), condiciones bajo las
cuales el Mn se encuentra normalmente inmovilizado y por tanto son deficitarios en este
elemento. Otros autores sealan sin embargo, que no existe suficiente evidencia que
permita aseverar o rechazar esta teora, a lo menos para el caso de Inglaterra, donde la
deficiencia de Mn es comn en la mayora de los suelos cultivados con trigo (Hornby 1998).
Contrario a lo anterior, la mayora de los suelos Andisoles del sur de Chile donde el trigo es
ampliamente cultivado, poseen un alto contenido de Mn y an as, la pudricin radical
alcanza un alto nivel. Resultados obtenidos por Campillo y Andrade (2001), demostraron
que la variacin observada en el contenido de Mn en suelos sometidos a esterilizacin, no
tuvo efecto sobre la expresin de la enfermedad en suelos supresivos como tampoco en
suelos conducentes a la pudricin radical del trigo.
As, las evidencias a favor de una microflora antagonista seleccionada a travs del
monocultivo de trigo, aparecen bastante ms consistentes como la causal de la expresin de
supresividad en muchos suelos a travs del mundo (Hornby 1998). Bacterias pertenecientes
al gnero Pseudomonas han generado gran inters debido a que varios aislamientos de
esta especie han expresado un significativo nivel de antagonismo sobre Ggt in vitro
(Borneman and Becker 2007), antagonismo ejercido a travs de mecanismos como la
antibiosis basada en la produccin de compuestos antibiticos como 2,4-
diacetylfluoroglucinol y fenazina-1-cido carboxlico (Weller et al. 2002), el secuestro del
hierro en suelos deficientes de este elemento y, la competencia (Cook y Weller 1987).
Bacillus sp. es otro gnero bacteriano en que varios aislamientos obtenidos desde suelos
supresivos, han demostrado igualmente una alta eficacia como antagonistas del agente
causal de la pudricin radical del trigo. Tambin existen evidencias sobre miembros del
gnero Streptomyces, asociados a suelos naturalmente supresivos a Ggt, con un alto grado
de antagonismo sobre este agente fitopatgeno derivado de sus propiedades como
productor de compuestos antibiticos (Andrade et al. 1994 a y b). Por otro lado, dentro del
grupo de los hongos, miembros de los gneros Didymella, Penicillium, Gliomastix,
Paecilomyces, Trichoderma y Phialophora (Mathre et al. 1998), han sido reportados como
antagonistas de Ggt.
En el presente captulo se resumen los estudios realizados en Chile en la
identificacin, primero, de suelos naturalmente supresivos de la pudricin radical o mal del
pi del trigo y, posteriormente, la caracterizacin microbiana de dichos suelos y el efecto de
antagonistas aislados desde esos suelos bajo condiciones controladas de invernadero y en
ensayos de campo.

Identificacin de suelos supresivos a la pudricin radical de trigo en Chile


Los estudios y anlisis realizados permitieron identificar a lo menos cinco suelos,
dentro de un total de 20 evaluados, con un alto nivel de supresividad de esta enfermedad.
La mayora de estos suelos se caracterizaba por poseer un largo historial de cultivo de trigo
con bajo nivel tecnolgico. Tambin se identificaron algunos suelos supresivos en los que
cultivo de trigo se haba intercalado con praderas, situacin que ha sido reportada en
trabajos desarrollados en Australia (Wildermuth 1980).
La transferencia de una mnima cantidad de suelo natural al mismo suelo pero
previamente esterilizado, ha sido un mtodo ampliamente empleado para identificar este
fenmeno de inhibicin natural de la pudricin radical del trigo (Andrade et al. 1994 a y b,
Hornby 1998, Weller et al. 2002, Borneman y Becker 2007). Esta inhibicin ha sido atribuida
a la presencia de factores supresivos de microorganismos o grupos de estos presentes en
92

esa mnima cantidad de suelo transferido (Weller et al. 2002, Borneman and Becker 2007),
la que no produca alteracin alguna en las caractersticas fsico-qumicas del mismo y
reproduca muy bien la supresin observada en el campo (Rovira y Wildermuth, 1981).
Nuestro estudio reprodujo el fenmeno de supresividad en dos pruebas independientes, con
dos suelos clasificados como supresivo y conductivo.
Las caractersticas fisicoqumicas de los suelos evaluados, no evidenciaron ninguna
relacin con sus propiedades supresivas o conductivas, excepto en el caso del contenido de
Mn donde los dos suelos conductivos evaluados, presentaron contenidos ms altos de este
micronutriente que los suelos supresivos. Estos resultados son contrarios a la teora de que
la conductividad de ciertos suelos est dada por bajos contenidos de Mn+2, lo cual inhibe los
mecanismos de defensa de las plantas (Huber and McCay-Buis 1993). Los suelos del sur de
Chile se caracterizan por ser mayoritariamente altos en el contenido de Mn y, an as, la
expresin de la pudricin radical del trigo es muy severa. Trabajos desarrollados por
Campillo et al. (2001) en el contexto de estos mismos estudios, determinaron que las
variaciones en el contenido de Mn no afectan la expresin de la enfermedad
independientemente del carcter supresivo o conductivo del suelo. Estudios relacionados a
enfermedades distintas de la pudricin radical del trigo s han relacionado la supresividad de
los suelos con sus propiedades fsicoquimicas (Chung et al. 1984, Dfago et al. 1990, Tivoli
et al. 1990). Especficamente, se ha encontrado una correlacin positiva entre Trichoderma
koningii y elementos como hierro, nitrgeno como nitrato, boro, cobre, magnesio soluble y el
porcentaje de arcilla; y una correlacin negativa entre el antagonismo a Ggt y el pH y fsforo
disponible en el suelo (Duffy et al. 1997); o bien, una correlacin positiva entre el agente
biocontrolador de Ggt P. fluorescens cepa 2-79, con el pH del suelo, porcentaje de arena y
concentracin de nitrgeno amoniacal, sodio, azufre como sulfato y zinc (Ownley et al.
1991).

Caracterizacin microbiolgica de suelos supresivos y conductivos a la


pudricin radical del trigo en el sur de Chile
Los suelos se analizaron con relacin al nmero y tipo de aislados (bacterianos y
fungosos), y para cada aislado se estudi su capacidad antibitica sobre Ggt, y su
capacidad de oxidacin de Mn y de produccin de siderforos. Adicionalmente, se identific
cada aislado usando el sistema Biolog Microstation (Biolog Inc., USA).
Nuestros estudios permitieron concluir que desde todos los suelos evaluados, tanto
supresivos como conductivos a la pudricin radical del trigo, se obtuvieron aislamientos
bacterianos y fungosos con propiedades antibiticas contra Ggt, oxidativos de Mn y
productores de siderforos. Solamente la propiedad antibitica de los aislamientos present
variaciones significativas entre los suelos supresivos y conductivos, siendo sta mayor en
cuanto a nmero, especies y expresin, en los suelos supresivos. No ocurri lo mismo en el
caso de organismos oxidativos de Mn ni de productores de siderforos.
Tambin se estableci que algunos de ellos mostraban propiedades antagnicas a Ggt
en ensayos realizados bajo condiciones de suelo estril en invernadero. La expresin
antagnica de los aislamientos bacterianos en suelo estril, fue superior en el caso de los
organismos provenientes de suelos supresivos, respecto de los conductivos, al disminuir en
mayor grado la infeccin radical y aumentar significativamente el peso de la materia seca.
En el caso de los aislamientos fungosos, stos presentaron propiedades antagnicas
significativamente superiores a los organismos bacterianos, y tanto la variedad de especies
como el nmero de stas fue siempre superior en el caso de los suelos supresivos.
93

La identificacin de los aislados permiti detectar dos bacterias sin antecedentes


previos en la literatura, que mostraban una alta capacidad biocontroladora: G (-)
Flavobacterium indologenes y G (+) Rhodococcus erythropolis. Entre los restantes
biocontroladores identificados se encuentran principalmente hongos como Trichoderma
koningii, Trichoderma spp. y Penicillium, los que coinciden con los mejores biocontroladores
descritos a nivel mundial para esta enfermedad. Tambin se identific a Gliocladium y
Verticillium, que presentaron una alta efectividad como biocontroladores en suelo estril, y
que se encuentran descritos como biocontroladores efectivos de otras enfermedades.
Se puede concluir entonces, que los suelos supresivos presentan efectivamente
poblaciones antagnicas a Ggt en mayor nmero y variedad, lo cual coincide con
numerosos estudios relacionados con esta temtica. Lo anterior reafirma la importancia de
detectar suelos con propiedades supresivas a la enfermedad, de tal forma de aumentar las
probabilidades de obtener antagonistas efectivos. La presencia de estos suelos en Chile era
desconocida hasta antes de los estudios realizados por nuestro grupo de investigacin, el
que por primera vez aisl y se determin la presencia de organismos altamente antagnicos
contra Ggt en este tipo de suelos del sur de Chile.

Capacidad biocontroladora de aislamientos seleccionados por su alto grado de


antagonismo de Ggt bajo condiciones de campo
Los 15 mejores aislamientos seleccionados en funcin de su capacidad
biocontroladora, se evaluaron bajo condiciones de campo. Se consider 15 ensayos con los
aislamientos individuales y en mezcla y, con tratamientos complementarios con
desinfectantes de semilla. Todos los ensayos fueron replicados en tres suelos conductivos a
la pudricin radical del trigo, de la Regin de la Araucana en la zona sur de Chile (Quino,
Lliuco y General Lpez). Estos 15 biocontroladores fueron previamente evaluados por su
grado de tolerancia a triadimenol y triticonazole, ambos pertenecientes al grupo de
fungicidas inhibidores de esteroles, de tal forma de elegir aquellos que ofrecieran las
mejores expectativas para tratamientos complementarios con fungicida y biocontroladores a
la semilla o al surco. Estos ingredientes activos haban demostrado grados variables de
eficacia y consistencia en disminuir los indicadores de infeccin radical en trigo, en
numerosos estudios de campo realizados en suelos del sur de Chile, razn por la cual se
decidi incorporarlos para evaluar la eventual accin adicional en una estrategia de control
de la enfermedad. Todos los ensayos fueron inoculados artificialmente con un aislamiento
patognico de Gaeumannomyces graminis var. tritici, obtenido desde races de plantas de
trigo severamente afectadas por pudricin radical. El inculo de Ggt fue preparado de
acuerdo a lo descrito por Andrade (1994 a y b) y distribuido manualmente en cada surco de
siembra.
La mayora de los hongos antagonistas presentaron un alto grado de tolerancia al
ingrediente activo triadimenol. Los aislamientos Trichoderma koningii PDARVS10-6,
Penicillium sp. MALTS7-3 y otros dos aislamientos de Trichoderma sp., resultaron con los
grados ms altos de tolerancia a este fungicida, con valores de EC50 superiores a 6.000
ppm. Respecto del fungicida triticonazole, slo el antagonista Mucor sp. PDASTS10-4
obtuvo el mayor grado de tolerancia a este ingrediente activo, con un valor superior a 6.000
ppm. A su vez, la mayora de los antagonistas bacterianos present una alta tolerancia a
ambos ingredientes activos fungicidas, excepto la especie Flavobacterium indologenes la
cual result sensible a ambos fungicidas.
94

Estos resultados permitieron realizar una segunda seleccin de los bioantagonistas a


ser evaluados en los ensayos de campo:
- Biocontroladores fungosos: Trichoderma koningii PDARVS10-6; Penicillium sp. MS7-3, y
Mucor sp. PDASTS10-4.
- Biocontroladores bacterianos: Pseudomonas aurantiaca PDAS7-8 y Pseudomonas
fluorescens SACTS16-5.
La evaluacin individual de los biocontroladores de Ggt mostr resultados variables:
En la localidad de Quino, los tres antagonistas fungosos y uno bacteriano,
Pseudomonas fluorescens SACTS16-5, lograron aumentar en forma
estadsticamente significativa el rendimiento de grano, an cuando esto no
correlacion con una disminucin en la infeccin radical que en esta localidad fue
bajo.
En el suelo de General Lpez, el aislamiento fungoso Penicillium sp. MALTS7-3,
logr un incremento significativo del rendimiento aunque no afect la expresin de la
infeccin radical.
En el suelo de Lliuco no se apreci un efecto significativo de los biocontroladores en
los parmetros productivos ni de infeccin.

Los ensayos que incluyeron tratamientos a la semilla con fungicidas y biocontroladores


tolerantes a stos, mostraron un incremento estadsticamente significativo en el rendimiento
en comparacin al testigo sin desinfeccin e inoculado, en aquellos tratamientos que
consideraban agentes de biocontrol fungosos ms uno de los dos fungicidas, triadimenol o
triticonazole, a la semilla.
Los tratamientos con biocontroladores bacterianos y fungicidas a la semilla mostraron
que Pseudomonas aurantiaca PDAS7-8 y Pseudomonas fluorescens SACTS16-5, lograron
aumentar significativamente el rendimiento y disminuir de igual forma la infeccin radical,
cuando se aplicaron junto con triticonazole a la semilla. Al emplear triadimenol a la semilla,
slo Pseudomonas aurantiaca PDAS7-8 logr incrementar el rendimiento. An as, ambos
disminuyeron la infeccin radical en forma significativa. No obstante lo anterior, en ninguno
de los tres suelos se observ que el empleo de algn biocontrolador junto con fungicida a la
semilla, lograra mejorar los indicadores de productividad e infeccin que obtuvieron esos
mismos tratamientos pero sin biocontroladores.
La evaluacin de mezclas de antagonistas junto a semilla tratada con alguno de los
fungicidas, permiti obtener un aumento significativo de los rendimientos en dos de los tres
suelos evaluados:
En el suelo de la localidad de Quino, la mezcla de ambos biocontroladores
bacterianos y de semilla tratada con triadimenol, logr aumentar el rendimiento de
grano y disminuir en forma significativa la infeccin radical. Incluso el incremento fue
superior al tratamiento que slo consider el mismo fungicida a la semilla.
En la localidad de Lliuco, todos los tratamientos con mezclas de antagonistas y
semilla desinfectada con fungicida, obtuvieron un rendimiento significativamente
superior y un indicador de infeccin significativamente inferior, al testigo inoculado y
sin fungicida. Sin embargo, ninguno de esos tratamientos logr un rendimiento
superior al obtenido por la sola desinfeccin de semilla con cualquiera de los dos
fungicidas.
95

En el suelo de General Lpez, ninguno de los tratamientos con mezcla de


biocontroladores logr aumentar los parmetros productivos o reducir el indicador de
infeccin.

Los resultados obtenidos con biocontroladores fungosos resultaron ms efectivos en


disminuir el dao por Ggt, en comparacin a los aislamientos bacterianos, en dos de las tres
localidades, aumentando el rendimiento en un 36-54% en el caso de Quino, y en un 60% en
General Lpez, respecto del testigo inoculado y sin biocontroladores. Estos hongos
antagonistas disminuyeron el dao causado por la pudricin radical del trigo en tres
temporadas de ensayos de campo, aunque en magnitudes y consistencia variables.
Resultados obtenidos por otros autores, sealan aumentos de rendimiento de un 65% con T.
koningii en USA (Duffy et al. 1996); sobre un 20% con aislamientos hipovirulentos de Ggt en
Francia (Lucas et al. 1986, citado por Hornby, 1998); de un 33-45% con un aislamiento de
Phialophora sp. en Australia (Wong et al. 1996); y sobre un 70% con otro aislamiento de
Phialophora sp. en USA (Mathre et al. 1998).
Los biocontroladores bacterianos por su parte, slo lograron aumentar
significativamente el rendimiento en la localidad de Quino, pero en menor magnitud (15-
19%) al logrado por los aislamientos fungosos. Otros estudios en el extranjero sealan
aumentos de rendimiento de un 20% con aislamientos de Pseudomonas (Weller y Cook
1983, Pierson y Weller 1994, Wong 1994), y Bacillus (Wong 1994). La inconsistencia de
estos resultados en las tres localidades evaluadas, representa una vez ms el comn
denominador en este tipo de ensayos (Hornby 1998).
En relacin a los dos fungicidas evaluados, stos lograron por s solos, disminuir
significativamente la infeccin en las tres localidades, aumentando el rendimiento en un
55,5% en promedio para el caso de triadimenol, y en un 64,1% para el caso de triticonazole.
Ambos productos haban demostrado previamente, en varios ensayos de campo, efectividad
en disminuir el dao por la pudricin radical. Triadimenol fue uno de los primeros productos
qumicos en demostrar un cierto grado de efectividad en disminuir el dao por esta
enfermedad (Hornby 1998). En USA se ha demostrado igualmente esta cualidad de este
ingrediente activo, aunque se han observado diferencias en su efectividad en USA, Canad
e Inglaterra (Hornby 1998). Son escasos los antecedentes en la literatura acerca de
triticonazole y su efecto sobre Ggt. Una referencia de Wong y Worrad (1989) seala un buen
efecto del fungicida en ensayos de invernadero y campo, pero en prados.
Respecto de los tratamientos complementarios con fungicida ms biocontroladores,
solamente uno de los tratamientos que incluy biocontroladores bacterianos en mezcla,
Triadimenol + P. aurantiaca PDAS7-8 + P. fluorescens SACTS16-5, logr aumentar
significativamente el rendimiento en una de las localidades (Quino), en comparacin al
fungicida solo. Los tratamientos con biocontroladores fungosos ms fungicida a la semilla,
no lograron superar a los que slo incluyeron fungicida a la semilla. Lo anterior podra
deberse a lo menos a dos situaciones: la primera es que el significativo efecto de los
desinfectantes de semilla enmascar la actividad protectora de los biocontroladores. La
segunda, es que a pesar de la alta tolerancia de los biocontroladores fungosos a ambos
fungicidas, stos pudieron ser afectados en parte por los productos qumicos, no as los
organismos bacterianos.
Respecto de los resultados obtenidos con mezclas de biocontroladores bacterianos, es
importante considerar que el mejor efecto logrado respecto del obtenido en forma individual
por cada uno de ellos, puede deberse en parte a la mayor dosis de biocontroladores totales
empleada en la mezcla. Existen pocos antecedentes sobre la actividad complementaria de
96

agentes de control biolgico y fungicidas. Hornby (1998) seala la baja efectividad del uso
combinado de triadimenol+fuberidazole con bacterias antagonistas, en la disminucin del
dao por la enfermedad en Inglaterra. Wong y Worrad (1989), sealan una moderada
efectividad de aplicaciones al suelo de Gaeumannomyces graminis var, graminis (Ggg), un
antagonista de Ggt, junto con aplicaciones de triadimenol y triticonazole al suelo, producto
probablemente de la alta susceptibilidad de Ggt a ambos fungicidas.
Los estudios y resultados presentados en este captulo concluyeron con la
identificacin de suelos supresivos a la pudricin radical del trigo, causado por el hongo
ascomycete Gaeumannomyces graminis var. tritici, en suelos agrcolas del sur de Chile.
Esta informacin constituye la primera referencia para el pas sobre la existencia de suelos
con propiedades de inhibicin natural de esta enfermedad. La posterior caracterizacin
microbiolgica de suelos con propiedades supresivas y conductivas a la enfermedad,
corrobor la naturaleza biolgica de este fenmeno y permiti aislar, evaluar y seleccionar
microorganismos fungosos y bacterianos con potencial biocontrolador del hongo patgeno.
Si bien los diferentes biocontroladores de Ggt evaluados bajo condiciones controladas de
invernadero en suelo estril y natural, demostraron una notable capacidad para inhibir la
infeccin radical llegando incluso hasta un 100% de control, las posteriores evaluaciones en
campo resultaron con magnitudes de control variables e inconsistentes. Al seleccionar
dentro de estos mismos biocontroladores, aquellos que posean altos niveles de tolerancia a
dos fungicidas comnmente empleados como desinfectantes de semilla de trigo, triadimenol
y triticonazole, para ser empleados como tratamientos complementarios en campo, los
resultados fueron de impacto relativo y baja consistencia, no logrando los antagonistas
igualar o superar a los tratamientos con fungicida a la semilla, excepto cuando se emple
una mezcla de biocontroladores bacterianos complementariamente al tratamiento con
triadimenol a la semilla.
Independiente de lo anterior, este extenso estudio abre nuevas lneas de investigacin
y expectativas sobre el control biolgico de esta severa enfermedad del trigo. Aspectos
como la formulacin, concentracin, distribucin y mezcla de agentes de control biolgico,
deben ser abordados con mayor persistencia y profundidad. Dilucidar el fenmeno de la
supresividad biolgica natural de los suelos, es otro aspecto que aparece como evidente y
prioritario de investigar, para poder desarrollar una estrategia ms eficaz que contribuya a
disminuir el impacto de la pudricin radical del trigo.

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99

CONTROL BIOLGICO EN ESPECIES FORESTALES


100
101

CONTROL BIOLGICO EN ESPECIES FORESTALES EN CHILE


Biological control of forest species in Chile

Eugenio Sanfuentes V.S.1, Gastn Gonzlez V.2, Salom Zalda F.1


1
Laboratorio de Patologa Forestal, Facultad de Ciencias Forestales, Centro de
Biotecnologa, Universidad de Concepcin. 2Biocaf Ltda.
E-mail: esanfuen@udec.cl

Resumen
La investigacin en Control Biolgico en la produccin forestal en Chile est recin
comenzando y se ha enfocado exclusivamente a patologas que ocurren en viveros
forestales. Sin embargo, los primeros resultados experimentales confirman que con la
aplicacin de agentes de biocontrol se puede lograr alcanzar una eficacia similar a la
obtenida con productos qumicos, posicionndolos como una alternativa para incluirlos en
programas de manejo integrado de enfermedades, con los consecuentes beneficios
ambientales.

Summary
Research on biological control in forest production in Chile has begun recently, being
mainly focussed to pathologies that occur in forest nurseries. Preliminary experimental
results confirm that the use of biocontrol agents could show similar efficacies that those
obtained with chemical products, thus providing an alternative for their use in integrated
disease management programs with consistent environmental benefits.

Introduccin
La actividad forestal constituye la tercera fuente de ingresos del pas, situada slo
despus de la minera e industria, con exportaciones de US$ 4.955.000 constituidas
fundamentalmente por celulosa, tableros y chapas, madera elaborada y madera aserrada
(INFOR 2011). Esta gran actividad ha sido sustentada por plantaciones exticas de rpido
crecimiento, con 2,12 millones de hectreas, correspondiendo aproximadamente al 14% de
la superficie de bosques del pas. Entre las especies ms importantes se encuentran Pinus
radiata, Eucalyptus globulus, y E. nitens, en menor extensin Atriplex spp., Populus spp.,
Pseudotsuga menziesii y Acacia melanoxylon, y entre las especies nativas se destacan
algunas plantaciones puras o mixtas con Nothofagus alpina.
Las plantaciones forestales comenzaron a fines del siglo XIX, aunque tuvieron un gran
impulso desde el ao 1974, con la dictacin del D.L 701 de fomento a la forestacin.
Coincidiendo con el aumento sostenido de las plantaciones forestales, se comenz a
detectar una gran variedad de plagas y enfermedades, principalmente exticas, causando
prdidas de diferentes magnitudes, despertando el inters entre los profesionales del sector
para iniciar estudios referentes a la etiologa y alternativas control para los problemas
sanitarios detectados. Entre los patgenos de mayor relevancia que han sido descritos en
las plantaciones se encuentran Dothistroma septospora (Gibson 1979), Diplodia pinea
(Gonzlez y Jorquera 1997) Fusarium circinatum (Wingfield et al. 2002), Phytophthora
102

pinifolia (Duran et al. 2008) y Neonectria fuckeliana (Morales 2009) en pino radiata,
Mycosphaerella spp. (actualmente algunas especies clasificadas en Teratosphaeria spp.)
(Ahumada 2003) y hongos basidiomicetes causando pudricin central en especies de
eucalipto (Opazo 2003) y Melampsora spp., en especies de lamo (Mujica et al. 1980).
El aumento de las plantaciones forestales, consecuentemente ha estado acompaado
por el incremento sostenido en la produccin de plantas, con la finalidad de abastecer los
programas de forestacin, alcanzando el ao 2010 sobre 193 millones de plantas, en cerca
de 200 viveros localizados en todo el pas (INFOR 2011). Semejante a los cultivos anuales,
la produccin de plantas para la mayora de las especies forestales son afectadas por una
diversidad de patgenos, de ocurrencia comn, generalmente, necrtrofos y polfagos. Entre
estos patgenos se pueden mencionar especies de los gneros Pythium, Phytophthora y
Fusarium, Rhizoctonia solani todos agentes causales de damping-off, Macrophomina
phaseolina, Phytophthora spp. y Fusarium oxysporum, causando pudriciones de races,
Botrytis cinera provocando tizn apical y foliar, F. circinatum causando cancros en cuello,
adems, de otros patgenos causantes de una variedad de manchas foliares, pudriciones
de estacas y races, aunque de menor impacto en la produccin.
Debido a las caractersticas del cultivo forestal, con largas rotaciones y abarcando
extensas superficies, es que en los ltimos aos el control de las enfermedades en
plantaciones se ha direccionado a resistencia gentica y algunas prcticas silvcolas, siendo
infrecuente la aplicacin de fungicidas. En el caso de los viveros forestales, el control de
enfermedades contina basndose en la aplicacin de varios grupos de fungicidas, aunque
progresivamente se han ido incorporando medidas culturales y de higiene que visan
disminuir la incidencia de enfermedades. En estos dos escenarios, plantaciones y viveros,
es donde el control biolgico (CB) de enfermedades se vislumbra como una medida de
control, especialmente al considerarla dentro de una estrategia de manejo integrado.
Considerando las particularidades de la produccin forestal, es factible plantearse la
interrogante existen antecedentes que indiquen la posibilidad de xito del control biolgico
en especies forestales? Aunque no es posible realizar comparaciones con los sistemas
agrcolas, en donde son mltiples los ejemplos, aparecen en la literatura casos de gran xito
en el control de enfermedades forestales. Entre los casos histricos y ms destacables, fue
el control de Armillaria mellea (sensu lato) en bosque naturales en el Este de frica, basado
en las observaciones de Wallace en 1935 y luego desarrollado por Leach en 1939. Este
mtodo de control consista en prevenir el ataque del patgeno, en donde previo a la tala de
los bosques, los rboles son descortezados un ao antes, provocando una muerte rpida de
las races, favoreciendo la colonizacin de hongos saprfitos antes de la llegada de A.
mellea (Garret 1956).
Casos ms recientes han sido control por el basidiomicete Peniophora gigantea contra
Heterobasium annosus (=Fomes annosus), en donde el antagonista es aplicado en tocones
de pinos, luego despus de la tala, impidiendo la colonizacin del substrato por el patgeno
(Schroth & Hancock 1981). Actualmente, cada ao en los en bosques de Europa son
tratados tocones con P. gigantea en ms de 200.000 hectreas. El control del patgeno
Cryphonectria parastica en plantaciones de castao en varios pases de Europa, mediante
la inoculacin de rboles en campo utilizando aislamientos hipovirulentos de la misma
especie del patgeno (Heineger y Rigling 1994).
Para las enfermedades que ocurren en viveros forestales es donde se han efectuado
la mayor cantidad de estudios en CB, con las primeras referencias a partir de la segunda
dcada del siglo XX y direccionndose a enfermedades del tipo damping-off, moho gris,
pudriciones de races, tanto en especies de conferas como latifoliadas y utilizando especies
103

de hongos y bacterias (James et al. 1993, Reglinski y Dick 2005, Mousseaux et al. 1998,
Zhang et al. 1994, Ocamb et al. 1996, Reddy et al. 1994).
En Chile, la posibilidad del usar el control biolgico en los cultivos forestales, se ha ido
incrementando paulatinamente en los ltimos aos, primero por la dificultad de control de los
productos qumicos para ciertos patgenos, especialmente aquellos que atacan las races
de la planta; problemas debido a la reduccin de la sensibilidad o resistencia de los
patgenos a ingredientes activos, en condiciones de aplicaciones repetitivas; y a los
conocidos efectos negativos sobre las personas y animales. Sin embargo, el principal
impulso que viene a la implementacin del CB en el sector forestal son los procesos de
certificacin de bosques y sistemas productivos, bajo normas tcnicas, laborales y
especialmente aquellas de carcter ambiental, como la norma FSC-Chile (Forest
Stewardship Council-Chile, 2012), que restringe la aplicacin de una amplia variedad de
pesticidas, usados tradicionalmente en el control de patgenos.
Considerado la relevancia del cultivo forestal en Chile, sumado a la oportunidad que
se est presentando para el CB debido a las restricciones ambientales, este trabajo tuvo
como objetivo recopilar investigaciones sobre CB y analizar algunas posibles aplicaciones
de este tipo de control en plantaciones y viveros forestales.

Control biolgico en especies forestales


El control biolgico puede ser definido como la reduccin de la densidad de inculo o
de las actividades determinantes de la enfermedad provocada por un patgeno o parsito en
sus estados de actividad o dormancia, por uno o ms organismos, realizado naturalmente o
a travs de la manipulacin del ambiente, hospedero o antagonista, o por la introduccin en
masa de uno o ms antagonistas (Baker & Cook 1974). Desde un punto de vista ms
operacional el control biolgico es posible realizarlo mediante dos estrategias. La primera
sera a travs de prcticas culturales, en donde se incluyen medidas como, rotacin y
mtodos de cultivos, enmiendas orgnicas, irrigacin, solarizacin, entre otras, las que
mejoren el estado de la planta o reduzca la severidad de la enfermedad (Homechin 1991).
En esta estrategia, son influenciadas comunidades de microorganismos e inclusive a la
poblacin del patgeno (Bettiol 1991). La segunda estrategia, ms atractiva desde el punto
de vista comercial y tericamente ms fcil de manejar, es la introduccin de organismos
especficos, empleados en forma semejante al pesticida tradicional.

Control Biolgico (CB) en plantaciones forestales


De acuerdo a las estrategias mencionadas, en plantaciones forestales no existen
antecedentes documentados sobre la aplicacin del CB para patgenos que causan
enfermedades. Sin embargo, es posible especular que varias de las medidas de manejo
aplicadas en las plantaciones, especialmente en el establecimiento (fertilizaciones, control
de malezas, uso de gel en races, preparacin de suelo, etc.), puedan tener un efecto directo
sobre el patgeno (principalmente de suelo) o la biota antagonista, aunque no se han
realizado los estudios que lo demuestren.
Aunque el CB en plantaciones va orientado a la aplicacin de microorganismos
seleccionados presenta varias restricciones, aparecen algunas patologas como
susceptibles en ser enfrentadas utilizando CB. As por ejemplo, enfermedades causadas
por patgenos que ingresan a los rboles mediante heridas causadas por las podas. En este
tipo de patgenos se encuentran N. fuckeliana que causa el revirado en P. radiata
104

(Morales 2009) y para varias especies de hongos basidiomicetes que provocan pudricin
central en E. nitens (Opazo 2003).
En el momento del establecimiento de las plantaciones es donde existe una de las
mayores oportunidades para el CB. La estrategia consistira en la aplicacin de
microorganismos (hongos o bacterias), que promuevan el crecimiento de las plantas y
adicionalmente proporcionen defensa contra el ataque de patgenos, durante el primer o
segundo ao despus de establecidas las plantas. En especies como Pinus sylvestris, P.
banksiana, P. contorta, Picea mariana, P. glauca, Pseudotsuga menziesii, Tsuga
heterophylla mediante la aplicacin de bacterias PGPR (Plant Growth Promoting
Rizobacteria) se increment la biomasa area y de races, no solo durante la etapa de
viverizacin sino que el efecto se mantuvo hasta el primer ao de la plantacin (Reddy et al.
1994; Chanway 1997). Aunque la mayora de los estudios con PGPR se han enfocado en el
efecto en crecimiento de las plantas, el CB de patgenos, especialmente aquellos
denominados como patgenos menores, se mencionan entre los posibles mecanismos
asociados a la promocin de crecimiento (Tyler et al. 2008).
Una vez efectuada la tala de la plantacin, el manchado de la madera es uno de los
problemas que enfrenta la industria forestal. Aunque no constituye formalmente una
patologa, causa una descalificacin del producto y consecuentemente una prdida de valor.
El manchado es causado principalmente por especies de Ophiostoma, Ceratocystis y
D. pinea (Butin y Peredo 1986, Zhou et al. 2004). Tradicionalmente el control del manchado
ha est basado en el uso de compuestos qumicos, los que estn cada vez ms
cuestionados ambientalmente.
En los ltimos aos, la investigacin de CB en hongos manchadores se orient a la
utilizacin de cepas albinas de Ophiostoma spp., llegndose a desarrollar un producto
comercial, denominado Cartapip TM (AgraSol Inc. Raleigh, North Carolina). El producto
biolgico, a base de una cepa albina de O. piliferum, es capaz de prevenir las prdidas
ocasionadas por los hongos manchadores, adems de mejorar la eficiencia del proceso de
pulpaje en P. taeda y P. virginiana (Farrell et al. 1993). Estos resultados, generaron el
inters de investigadores en Nueva Zelanda y Chile por utilizar cepas albinas nativas de
Ophiostoma spp., para la aplicacin en P. radiata (Blanchette et al. 2000). En Chile, cepas
albinas de O. piliferum, obtenidas de cruzamientos entre cepas colectadas desde diferentes
localidades, alcanzaron proteccin de al menos 70% durante ocho semanas, en piezas de
madera aserrada mantenidas a la intemperie (Navarrete et al. 2008). Estos primeros
resultados indican el potencial de uso del CB del manchado de madera mediante
aislamientos albinos de Ophiostoma.
En trminos generales, las alternativas de CB ms viables en esta etapa de la
plantacin forestal, aparecen aquellas en las que la aplicacin del agente o tratamiento
(bioestimulador, bioprotector, inductor de resistencia u otros) est direccionada a la planta y
su entorno inmediato, durante el establecimiento y primer ao de plantacin. Como se ha
mencionado anteriormente, es importante la bioproteccin de heridas (podas) y madera
recin cortada. Aplicaciones de agentes de BC en plantaciones adultas en grandes
superficies, para patgenos foliares como P. pinifolia y D. septospora, que causan
enfermedades policclicas, no parecen por el momento recomendables, aunque el
descubrimiento del rol de microorganismos endfitos podra proporcionar nuevas
alternativas de control en rboles de mayor edad en plantaciones.
105

CB en viveros forestales
Es en este ambiente de viveros donde el CB ofrece las mayores expectativas de xito,
debido a la menor superficie a tratar, y posibilidad de manejo de algunos factores (riego,
fertilizaciones, tipos de substratos, etc.), especialmente en produccin de plantas en
invernadero. La aplicacin de los agentes de biocontrol podra estar direccionada al
tratamiento de las semillas, rganos de propagacin vegetativa, substrato y eventualmente
suelo natural. La incorporacin de antagonistas seleccionados a un substrato, como es el
caso del compost de corteza de pino, permitira generar substratos supresivos a diferentes
patgenos (Hoitink et al. 1999).
En Chile, el estudio del CB para patgenos en especies forestales se ha centrado
exclusivamente en viveros forestales. Las investigaciones de CB se iniciaron en la dcada
pasada, para las patologas causadas por Macrophomina phaseolina, B. cinerea y
recientemente F. circinatum. En los ltimos aos, tambin se estn efectuando estudios con
la finalidad de promover crecimiento y/o enraizamiento en P. radiata y especies de
Eucalyptus, mediante la aplicacin de hongos (Donoso et al. 2008) y bacterias (Daz et al.
2009), los cuales han mostrado resultados promisorios para esas variables, aunque su
efecto como agentes de CB es desconocido.
Actualmente, las empresas forestales e instituciones que poseen produccin propia de
plantas, estn progresivamente demostrando un inters en incorporar el CB para los
principales problemas patolgicos que poseen. Es as que, algunas de las empresas ya
aplican operacionalmente productos biolgicos disponibles en el mercado, como tambin
algunos microorganismos que han seleccionado en investigacin propia. Sin embargo, se
desconocen los resultados obtenidos referente a los niveles de control, el efecto de otros
patgenos diferentes al objetivo y sobre las plantas.

a) CB de Macrophomina phaseolina
M. phaseolina ha sido detectado en los principales viveros forestales que producen
P. radiata a raz desnuda, ocasionando la enfermedad Pudricin carbonosa de la raz (Butin
y Peredo 1986). El control del patgeno slo ha sido exitoso mediante el fumigante bromuro
de metilo (Barnard 1994); sin embargo, su uso ha sido prohibido de acuerdo a lo establecido
en el Protocolo de Montreal (Karliner 1997). La falta de un control eficaz de la enfermedad
ha viabilizado la estrategia de CB. Estudios efectuados in vitro, con hongos y bacterias
rizosfricas y del suelo, permitieron seleccionar varios aislamientos con capacidad
antagnica al patgeno. Luego, ensayos en condiciones de vivero, durante dos temporadas,
constataron la eficacia de algunas bacterias en el control de la pudricin carbonosa,
logrando niveles de control entre 58-45%. Entre las bacterias con capacidad de CB
destacaron aislamientos de Bacillus subtilis, Bacillus sp. y uno no identificado (Valiente et al.
2008, Gacita et al. 2009). El resultado positivo alcanzado por especies de Bacillus, estara
relacionado con la capacidad de estas bacterias (poseen esporas de resistencia) para
resistir condiciones de altas temperaturas, coincidentes con aquellas que existen en los
suelos arenosos de los viveros en que predomina la pudricin carbonosa.
Para esta misma enfermedad en cultivos agrcolas se ha indicado que ciertos tipos de
enmiendas orgnicas, aparte de mejorar las caractersticas del suelo podran suprimir
patgenos de suelo (Stone et al. 2004). En algunos viveros que producen plantas a raz
desnuda, se ha utilizado la rotacin de cultivo de avena, e incorporada al suelo, con la
finalidad de aumentar la materia orgnica, sin tener antecedentes de sus efectos en
patgenos. En un estudio efectuado en invernadero fueron probados diferentes tipos de
106

abono verde (alfalfa, avena y trigo), compost de corteza de pino y estircol de pollo en un
suelo arenoso de un vivero, infestado artificialmente con 250 esclerocios/g del patgeno.
Despus de tres meses de incorporados los abonos y cinco meses de sembrado P. radiata,
la aplicacin de estos abonos redujeron la densidad de inculo de M. phaseolina hasta 140
esclerocios/g en el caso de la aplicacin estircol y entre 170-200 esclerocios/g para avena,
trigo y compost de corteza, aunque el mayor nivel de control fue obtenido por la aplicacin
de trigo, al reducir la mortalidad de plntulas, desde 29% en el control a 7% (Gacita et al.
2010). Esta estrategia de CB parece posible incorporarla dentro del manejo general de un
vivero forestal, aunque los resultados pueden ser ms lentos comparados con otros
mtodos. Es perfectamente factible perfeccionar este mtodo de control, combinado con
otras estrategias como es la aplicacin de antagonistas seleccionados a los restos de cultivo
antes de su incorporacin al suelo, proporcionndoles a los antagonistas una fuente de
alimento para mantener su poblacin en el suelo y su actividad supresora.

b) CB de Botrytis cinerea
B. cinera es el agente causal de la enfermedad moho gris, siendo el patgeno foliar
ms importante en la produccin de plantas en especies de Eucalyptus (Butin y Peredo
1986, Gonzlez 1996, Escobar 2007). El moho gris ha sido detectado en la mayora de los
viveros, llegando a ocasionar elevadas prdidas en plntulas originadas por semillas, y en
los ltimos aos, constituyndose en un serio problema causando pudricin en macro y
miniestacas de eucalipto. Durante los ltimos diez aos, han sido seleccionados dos
aislamientos de Clonostachys rosea eficaces en el control de B. cinerea en plntulas de
Pinus radiata y E. globulus (Molina et al. 2006) y en mini-estacas de E. globulus (Zalda y
Sanfuentes 2010). En ensayos en vivero, los antagonistas redujeron la incidencia de B.
cinerea en plantas de E. globulus desde 83,3% a 8,3-12,5%, dependiendo del antagonista
utilizado (Molina et al. 2006). En ensayos operacionales con miniestacas de la misma
especie, la eficacia de control alcanz para un aislamiento de Clonostachys de 71%
(incidencia del B. cinera de 50% a menos del 15%), siendo semejante 61% de control de los
fungicidas. Adicionalmente, con la aplicacin de los antagonistas se observ un mayor
desarrollo de las races, aspecto que merece ser estudiado con mayor profundidad (Zalda y
Sanfuentes 2010). Estudios posteriores ratificaron esta capacidad biocontroladora para
estos dos antagonistas, y demostraron el carcter inocuo de estos agentes (Figura 1), ya
que no alteraron algunos procesos fisiolgicos de las plantas, como la conductividad
electroltica (CE), contenido de clorofila y eficiencia fotoqumica del FSII (Fv/Fm) (Zalda
2012).
Las investigaciones en CB de B. cinerea tambin han estado direccionadas al uso de
extractos de plantas y cepas bacterianas que reduzcan la adhesin (tipo dbil y fuerte) a la
superficie del hospedero. Los primeros bioensayos fueron efectuados utilizando ptalos de
rosa. La adhesin dbil fue reducida entre 92-98% por la aplicacin de extractos de Boldo,
Peumo y Salvia negra, junto con dos aislamientos bacterianos no identificados y con los
extractos de Avellano, Boldo, y otros dos aislamientos de bacterias, inhibiendo la adhesin
fuerte entre 92-96%. Adems, los extractos de Boldo, Canelo, Peumo y Radal, y una
bacteria, inhibieron in vitro completamente la germinacin de B. cinerea.
107

Figura 1. Ensayo control biolgico de Botrytis cinerea en miniestacas y plantas de


Eucalyptus globulus. Plantas control (A y C) y plantas tratadas con aislamiento de
Clonostachys seleccionado (B y D).

c) CB de Fusarium circinatum
En Chile, se report la presencia de F. circinatum por primera vez en el ao 2001 en
viveros forestales de P. radiata (Wingfield et al. 2002). Hasta la fecha el patgeno slo se ha
detectado atacando plntulas en viveros y no causando el tpico sntoma de cancro resinoso
en plantaciones. La importancia de este hongo patgeno radica en su carcter de plaga
cuarentenaria decretado por el Servicio Agrcola y Ganadero (SAG).
Una de las investigaciones recientes demostr la posibilidad de controlar a
F. circinatum en substrato de produccin de plantas. Fueron utilizados hongos con actividad
antagnica comprobada contra M. phaseolina (Valiente et al. 2006) y luego seleccionados
en ensayos in vitro. En un ensayo efectuado en invernadero cuarentenario, bajo condiciones
controladas, dos aislamientos de Trichoderma spp. y dos de Clonostachys spp. redujeron la
mortalidad post-emergencia de plntulas de P. radiata en 91100% y 7891%,
respectivamente. El control de la F. circinatum slo se obtuvo cuando los antagonistas
fueron aplicados al substrato antes que el patgeno. Sin embargo, slo una cepa de
Clonostachys increment la supervivencia de plntulas (Moraga et al. 2011). Actualmente,
se contina la investigacin en CB de este patgeno, a travs de un proyecto financiado por
el estado (Innova Bo-Bo), en el que participan adems las principales empresas forestales.
Los resultados parciales demuestran el efecto de supresin de hongos y bacterias,
alcanzando niveles de control de 100%, en diferentes tipos de substrato, tanto estril como
natural.
108

Figura 2. Ensayo de control biolgico de Fusarium circinatum en plntulas de Pinus radiata,


mediante la utilizacin de hongos y bacterias antagonistas, efectuado en invernadero
cuarentenario. Substrato sin patgeno/antagonista (A), substrato con hongo antagonista (B)
y substrato solo con F. circinatum (C).

La recopilacin de informacin desde publicaciones cientficas y congresos, indica que


la investigacin en CB en la produccin forestal en Chile est recin comenzando y se ha
enfocado exclusivamente a patologas que ocurren en viveros forestales. Sin embargo, los
primeros resultados experimentales confirman que con la aplicacin de agentes de
biocontrol se puede lograr alcanzar una eficacia similar a la obtenida con productos
qumicos, posicionndolos como una alternativa para incluirlos en programas de manejo
integrado de enfermedades, con los consecuentes beneficios ambientales.
Las actuales restricciones a la aplicacin de varios pesticidas, incluidos en las
certificaciones internacionales, generan una importante oportunidad para que la
investigacin en CB sea incrementada en el corto plazo.
Los pasos siguientes, una vez obtenidos los agentes de biocontrol eficaces, es
profundizar en estudios de ecologa microbiana y mecanismos de antagonismo, y
especialmente sobre aspectos asociados a tecnologa de formulacin, que permitirn llegar
a formular un producto de biocontrol comercial.
EL CB entrega adems una importante va para desarrollar una nueva industria
nacional, de carcter tecnolgico, que proporcione soluciones eficaces a los principales
problemas patolgicos del sector, aprobado ambientalmente y que permitira generar nuevos
empleos a la economa. Es factible pensar en esto? Las experiencias internacionales lo
avalan, con un importante nmero de productos biolgicos registrados y comercializados,
como tambin la incipiente experiencia nacional, como el ejemplo del desarrollo de
Trichonativa y Nacillus para el control de enfermedades en cultivos agrcolas.
109

Literatura citada
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112
113

CONTROL BIOLGICO EN DIFERENTES ESPECIES


MEDIANTE EL USO DE BACTERIAS
114
115

BIOCONTROL DE ENFERMEDADES BACTERIANAS MEDIANTE LA


UTILIZACIN DE BACTERIAS
Biocontrol of bacterial diseases with bacteria

Jaime R. Montealegre A1., Luz M. Prez R2.


1
Departamento de Sanidad Vegetal, Facultad de Ciencias Agronmicas, Universidad de
Chile. Santa Rosa 11315, La Pintana. Santiago-Chile. E-mail: jmonteal@uchile.cl
2
Asesoras e Inversiones Biostrategy Ltda.

Resumen
Este captulo entrega informacin sobre el uso de bacterias como agentes de
biocontrol de bacterias fitopatgenas en Chile.

Summary
This chapter provides information on the use of bacteria as biocontrol agents of
pathogenic bacteria in Chile.

Introduccin
La investigacin para el uso de bacterias como biocontroladoras de bacterias
fitopatgenas se inici en Chile a fines de la dcada de los 70 (DAngelo y Latorre 1980 a y
b) con la introduccin de Agrobacterium (Rhizobium) radiobacter K84 para su utilizacin en
el control de Rhizobium radiobacter (Agrobacterium tumefaciens) en frutales de carozo. La
introduccin de este biocontrolador bajo el nombre comercial de Biobacter 84, ha significado
su utilizacin hasta el da de hoy para el control de las Agallas del cuello o de la corona en
frutales de carozo y en otras especies de frutales (DAngelo y Latorre 1980 a y b,
Montealegre 2005). Adicionalmente, estimul en Chile la investigacin sobre el uso de
bacterias para el control de otras enfermedades bacterianas.

Control mediante Bacillus subtilis


Se ha investigado el uso de Bacillus subtilis (Carrin 2007, Nissen et al. 2008) para
el control de Pectobacterium carotovorum (Erwinia carotovora sbsp. carotovora) en
Zantedeschia spp. (Cala), encontrndose un buen efecto biocontrolador. Sin embargo, los
resultados obtenidos por estos investigadores difieren de los de Mller-Holtkamp (2009) y de
los de Soriano (2011) quienes utilizando B. subtilis en experimentos realizados en
invernadero y campo no encontraron diferencias significativas entre los tratamientos.
Tambin existen antecedentes de evaluaciones in vitro de cepas de Bacillus sp. en
el biocontrol de Clavibacter michiganensis subsp. michiganensis (Flores 2004).

Control mediante Pseudomonas


La investigacin sobre el biocontrol de enfermedades bacterianas de la papa y el
tomate se ha circunscrito a la evaluacin de bacterias del gnero Pseudomonas para el
116

control de Ralstonia solanacearum (Ciampi-Panno et al. 1989 y Ciampi-Panno et al. 1996),


sin llegar a resultados positivos que permitieran su aplicacin a nivel de campo.
Adicionalmente, tambin existen resultados in vitro y en invernadero para el control
de Clavibacter michiganensis subsp. michiganensis con bacterias del gnero Pseudomonas
(Casanova 2002).
Finalmente, el nico biocontrolador que se utiliza comercialmente para controlar
bacterias fitopatgenas en Chile, corresponde a Rhizobium radiobacter K84 que se aplica
para Rhizobium radiobacter que produce las Agallas del cuello en frutales.

Literatura citada
Carrin J. 2007. Evaluacin de cepas de Bacillus subtilis para biocontrolar Erwinia
carotovora subsp. carotovora en cala (Zantedeschia spp.) Memoria de Titulo Ing.
Agrnomo. Universidad Austral de Chile, Facultad de Ciencias Agrarias, Escuela de
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Titulo Ing. Agrnomo. Universidad Austral de Chile, Facultad de Ciencias Agrarias,
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Agrobacterium tumafaciens en frutales de carozo. Santiago, Chile, Facultad de
Ciencias Agronmicas, Universidad de Chile. http://mazinger.sisib.uchile.cl/repositorio/
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Nissen J, Carrin J, Ciampi P.L, Collado L, Costa M, Fuentes R, Schbitz R. 2008.
Biocontrol de Erwinia carotovora en cala (Zantedeschia spp.). Agro Sur 36(2):59-70.
117

Soriano V. 2011. Frecuencia de aplicacin de una cepa de Bacillus subtilis en Zantedeschia


spp. para el control biolgico de Pectobacterium carotovorum (Wal.). Memoria de Titulo
Ing. Agrnomo. Universidad Austral de Chile, Facultad de Ciencias Agrarias, Escuela
de Agronoma. Valdivia, Chile. 84 p.
118
119

MERCADO, LEGISLACIN Y NORMATIVAS


120
121

SITUACIN DEL CONTROL BIOLGICO EN CHILE: MERCADO,


LEGISLACIN Y PERCEPCIN DE LOS AGRICULTORES
Biological control situation in Chile: market, legislation and farmers
perception

Eduardo Donoso C.
Escuela de Agronoma, Facultad de Ciencias Agrarias y Forestales Universidad Catlica del
Maule, Campus San Isidro Km 6 Los Niches, Curic - Chile.
E-mail: edonoso@bionativa.cl

Resumen
Este captulo detalla la situacin en que se encuentra el control biolgico en Chile,
considerando las exigencias internacionales y el mercado, la regulacin, la legislacin y la
percepcin de los agricultores en Chile.

Summary
This chapter details the situation of biological control in Chile, considering the
international requirements and the market, regulation, legislation and farmers perception in
Chile.

Introduccin
Chile, como pas exportador que busca transformarse en potencia agroalimentaria,
paulatinamente ha debido transformar su sistema productivo agrcola, incorporando nuevas
variedades, nuevas prcticas de manejo y tcnicas de produccin y procesos de
certificacin. Esto ha llevado a la utilizacin de nuevas tecnologas a fin de satisfacer las
necesidades de control de plagas y enfermedades, fertilizacin y otros aspectos de la
produccin, as como la demanda de los consumidores y muy en especial del retail. Dentro
de los requerimientos establecidos, se encuentra la utilizacin de insumos menos
contaminantes, que generen menos residuos, amigables con el medioambiente, que no
constituyan un riesgo para la salud de los trabajadores agrcolas y que el producto final
producido sea de calidad, lo que junto a niveles de eficacia e informacin de uso, ha
permitido incrementar el uso de controladores biolgicos, en especial microbiolgicos, en el
manejo de enfermedades.
Adicionalmente, el incremento en el uso de estos productos, est relacionado con la
demanda de los consumidores, lo que ha resultado en una estrategia de brand protection
por parte del retail. Lo anterior ha significado que aumenten las exigencias de los
consumidores, para reducir los niveles de tolerancia de plaguicidas impuestas por los
estados, lo que no siempre se sustenta en datos cientficos. En los ltimos aos la oferta de
productos para el control biolgico se ha profesionalizado, a travs de la creacin de
empresas dedicadas especficamente al desarrollo y produccin de estos organismos. Se
han establecido alianzas entre empresas y Universidades y se han generado unidades de
negocio biolgicas, dentro de las grandes empresas tradicionales de pesticidas. A su vez se
ha implementado una investigacin de respaldo seria y profunda, en especial despus de la
122

masificacin de tcnicas moleculares, mejoras en los sistemas de produccin y formulacin,


y muy especialmente, a la segmentacin de problemas a resolver por este tipo de productos.
Estos hechos han permitido la migracin del uso de controladores microbiolgicos desde la
agricultura orgnica o biolgica a la convencional, permitiendo crecer en varios ordenes de
magnitud el mercado potencial, lo que sumado a los menores costos y tiempos de
desarrollo, explica el inters de las grandes transnacionales.
Dentro de los aspectos que aun limitan el desarrollo de los biocontroladores, se
encuentran legislaciones imperfectas, que generan una barrera de entrada muy alta, con
exigencias similares a la de los plaguicidas qumicos, e inexistencia de homologaciones en
los aspectos ecotoxicolgicos. Adems, existen vacos legales que permiten la venta de
estos biocontroladores como bioestimulantes, sin necesidad de registro, lo que genera
heterogeneidad entre los productos existentes en el mercado, producindose una
competencia desleal para las empresas que realizan inversiones para obtener los registros
como plaguicidas.
As, este captulo pretende abordar la situacin de mercado, oferta y legislacin
relacionada al uso de controladores microbiolgicos, en base a datos verificables y estudios
comparativos entre legislaciones y percepcin de los agricultores.

Demanda mundial
La evolucin del los insumos agrcolas entre el 2007 y 2017 se muestra en la Figura 1.
Es posible observar un crecimiento de los biopesticidas, encontrndose entre 5-10 billones
bajo el sector de agroqumicos. El crecimiento de los plaguicidas qumicos de bajo riesgo se
debe principalmente a demandas de los consumidores, y a la revisin de las regulaciones y
alimentos con baja o sin presencia de residuos. Por su parte, el crecimiento de los
agroqumicos se debe principalmente al aumento de la poblacin, tierras arables limitadas y
escasos recursos hdricos.

Figura 1. La Evolucin del los Insumos Agrcolas entre el 2007 y 2017 (billones de US$).
(Meadows-Smith, 2009).

El mercado global de biopesticidas se est expandiendo rpidamente, se estima para


los prximos 10 aos un aumento de 150 a 300% (ver Cuadro 1). Los productos biolgicos
son ms econmicos y fciles de entrar a comercializar en los mercados agrcolas. Los
costos de desarrollo de pesticidas sintticos son de US$ 150-240 millones versus US$ 10-25
millones de los biolgicos; mientras que para entrar al mercado de EE.UU, a un pesticida
123

sinttico le toma de 5 a 7 aos, a uno biolgico de 2 a 3 aos (Meadows-Smith 2009). A esto


se suma, los niveles de xito de ingredientes activos evaluados, versus los que llegan a
comercializacin, y el bajo nivel de exigencias en cuanto a toxicologa y ecotoxicologa
(Cuadro 1).

Cuadro 1. Comparacin de desempeo de control qumico y biolgico.

Control Qumico Control Biolgico


Ingredientes evaluados > 3,5 millones 2,000
Tasa de xito 1 : 200,000 1 : 10
Costo de desarrollo 150 millones US$ 2 millones US$
Tiempo de Desarrollo 10 aos 10 aos
Razn beneficio/costo 2:1 20 : 1
Riesgo de resistencia Alto Bajo
Efectos indeseados Muchos Pocos
Fuente: McSpadden B. 2009.

El mercado mundial de plaguicidas, tanto para cultivos como para la salud pblica, se
aproxima a los US$ 33.000 millones anuales, donde los agentes de control biolgico
representan menos del 1%. Esto puede explicarse por la concentracin del uso de
biopesticidas en el control de plagas y patgenos, siendo herbicidas la mitad de los
plaguicidas comercializados a nivel mundial.
En 2006, Arysta LifeScience estim el mercado mundial de biopesticidas en
aproximadamente US$ 541 millones. En 2008, Global Industry Analysts, Inc. (GIA)
determin que los biopesticidas representan un 3% del Mercado mundial (US$ 750 millones)
y proyectaban US$ 1 billon para 2010, lo mismo fue reportado en 2009 por Frost &
Sullivan. Esto basado en el incremento de inversiones en investigacin y desarrollo de estos
productos y una mayor penetracin de manejo integrado de plagas y buenas prcticas en
agricultura convencional y un incremento de la superficie bajo certificacin orgnica. La
estimacin de mercado por regin se encuentra en el Cuadro 2.

Cuadro 2. Estimaciones de mercado por regin (en millones de dlares).

Amrica
Europa Nafta frica Asia Oceana Total
Latina
Macroorganismos 70 100 15 8 30 20 243
Microorganismos
Bacterias 15 80 10 5 20 30 160
Virus 10 15 10 2 5 10 42
Hongos 25 45 20 3 15 20 128
Total 50 140 40 10 40 60 330
Bioracionales
Naturales 30 70 25 10 40 15 180
Semioqumicos 40 80 20 10 30 20 200
Total 70 150 45 20 70 35 390
Total 190 390 100 38 140 115 973
(Donoso et al. 2011)

El uso de los biopesticidas se ha centrado en cultivos de especialidad, estimndose


que durante 2006, el 55% de este tipo de productos fue utilizado en huertos frutales. Otros
demandantes importantes de biopesticidas son forrajeras, maz y soya. Tambin son los
124

productos priorizados en programas de salud humana y silvicutura (BBC Research


Corporation, 2006 citado por (Donoso et al. 2011).
Las empresas que producen biopesticidas son empresas medianas a pequeas,
altamente especializadas, con ventas que van de US$ 500.000 a 100 millones (Figura 2), en
muy pocos casos con ms de 10 aos de existencia, tambin hay compaas generadas de
transnacionales, empresas qumicas lderes, que en los ltimos aos han comprado muchas
empresas pequeas que producen insumos ecolgicos o que distribuyen insumos
ecolgicos, en general el 40-50% de los productos que comercializa una Qumica, provienen
de proveedores externos a la empresa.

Figura 2. Desarrollo global de biopesticidas (Marrone 2008, citado por Donoso et al. 2011).

Control biolgico en Chile


El esfuerzo realizado por el Estado Chileno se ha focalizado principalmente en la
introduccin de enemigos naturales durante el siglo XX, lo que ha significado que en la
produccin agrcola se ahorren anualmente ms de 30 millones de dlares, ya sea por la no
aplicacin de pesticidas o medidas de control alternativas, o bien, por la reduccin de daos
causados por los insectos, lo que incrementa la calidad y cantidad de los productos
comerciables. Adems se ha ganado en aspectos difciles de evaluar, como son la calidad
de vida rural, la proteccin del medio ambiente, de insectos benficos y del ecosistema,
entre otros (Gerding [s.a]). El Cuadro 4 seala las principales diferencias que existen entre
el control qumico y el control biolgico.
En Chile, se han introducido ms de 150 especies de insectos para controlar un
nmero mayor de insectos plagas. El gran ahorro que se ha producido en el sector agrcola
demuestra el xito del control biolgico. Sin embargo, falta an ms inters real del sector
privado para incrementan su utilizacin (Gerding [s.a]). A partir de 1990, se han ido
financiando iniciativas aisladas de desarrollo de controladores microbiolgicos para el
manejo de enfermedades.
El ao 2006, se present a INNOVA Chile-CORFO el proyecto denominado Centro
Tecnolgico de Control Biolgico (CTCB); con este financiamiento el ao 2007 se establece
el primer centro tecnolgico con dedicacin exclusiva al control biolgico de plagas y
125

enfermedades en el pas, que forja una alianza macro entre una entidad de investigacin
como el Instituto de Investigaciones Agropecuarias (INIA) con el sector pblico y con las
empresas demandantes de estas tecnologas. El objetivo del CTCB es fortalecer el
desarrollo de tecnologas de produccin masiva de agentes de control de plagas,
enfermedades y malezas basadas en el uso de organismos vivos, contribuyendo al xito
comercial de las empresas proveedoras de insumos biolgicos para la agricultura nacional y
poniendo a su disposicin procesos productivos industriales validados (Loyola et al. 2007).
Durante el ltimo tiempo, se ha observado un incremento en la demanda del mercado
de controladores biolgicos, la que actualmente est superando la oferta. En Chile, el INIA,
las universidades y empresas privadas han desarrollado tecnologas apropiadas para utilizar
un control biolgico efectivo de plagas y enfermedades. Empresas como Biogram ubicada
en la Regin Metropolitana ha instalado infraestructura para atender 7.000 hectreas de
plagas de suelo, Bio Insumos Nativa ubicada en la Regin del Maule con cuatro
formulaciones comerciales abarca 14.500 hectreas, Xilema y Biocontrol ubicadas en la
Regin de Valparaso tienen una capacidad para cubrir 1.200 hectreas. Biocaf Ltda
ubicada en la Regin del Bo Bo lleg a cubrir 6.000 hectreas de pino con una liberacin
de Trichogramma en la temporada. En la misma regin Biomycota produce Trichoderma
(Loyola et al. 2007). Por su parte, INIA dispone de tecnologa y protocolos de crianza para
Hongos entomopatgenos (HEP), Trichogramma, Chrysopa, Coccinelidos, Nemtodos
entomopatgenos, caros depredadores, Parasitoides de pulgones y Parasitoides de larvas
(Gerding 2007).

Regulaciones de Plaguicidas en Chile


El Decreto Ley N 3557 de 1980 del Ministerio de Agricultura, define plaguicida como
compuesto qumico, orgnico o inorgnico o sustancia natural que se utilice para combatir
malezas, enfermedades o plagas, potenciales capaces de causar perjuicios en organismos u
objetivos (Correa 2007).
En Chile est permitido fabricar, importar, distribuir, vender o aplicar plaguicidas de uso
en agricultura si stos cuentan previamente con la autorizacin del Servicio Agrcola y
Ganadero (SAG), de acuerdo a la Resolucin N3.670 de 1999, que establece las normas
para la evaluacin y autorizacin de plaguicidas. Esta regulacin tiene como objetivo que
Chile cuente con plaguicidas eficaces para el fin que estn destinados y que produzcan el
menor efecto posible sobre la salud humana, animal y el medioambiente.
En Chile existe una amplia utilizacin de plaguicidas en todo el territorio nacional,
principalmente en actividades agrcolas, veterinarias, domsticas, salud pblica, entre otras.
Adems, de acuerdo a datos del MINSAL 2007, se presenta una creciente utilizacin de
estas sustancias, duplicndose la importacin entre el ao 1998 y el 2008, con cifras de
54.980 toneladas para este ltimo ao (SAG 2012).
La evaluacin de plaguicidas en Chile es realizada por el sistema de identidad, donde
cada producto es nico. El usuario que tenga la intencin de registrar un plaguicida en el
pas debe presentar informacin asociada a certificados de composicin del ingrediente
activo y del producto formulado, toxicidad (aguda, subcrnica, crnica y otras), ecotoxicidad,
medioambiental, metodologas analticas, residualidad, eficacia, entre otras. Una vez
finalizada la evaluacin, la solicitud del producto podr ser denegada o autorizada por
resolucin, donde la etiqueta es parte integral de sta y la cual debe contener la informacin
ms relevante presente en el dossier del producto, para un uso y manejo seguro (Figueroa
2010).
126

Una vez obtenida la autorizacin, se deben realizar una serie de actividades post-
registro como: fiscalizacin de la internacin y formulacin nacional de plaguicidas;
fiscalizacin del uso y comercio de plaguicidas, de acuerdo a lo establecido por la normativa
vigente y para dar cumplimiento a lo indicado en la etiqueta de un plaguicida; renovacin de
la autorizacin y modificaciones del registro originalmente autorizado. Adicionalmente,
existen actividades asociadas a compromisos adquiridos por Chile ante organismos y
convenios internacionales como la FAO, Codex Alimentarius, OCDE, Estocolmo, Montreal y
Rtterdam, cuya ejecucin es trabajada en mesas interinstitucionales, pblico-privadas
(Figueroa 2010).
A pesar de lo anterior, el uso de plaguicidas en hortalizas y verduras constituye una
seria amenaza para los consumidores nacionales. El ltimo anlisis de conocimiento pblico
sobre productos frescos, Estudio de residuos de plaguicidas en alimentos realizado por el
ISP en 2009, y dado a conocer a mediados del 2010, arroj resultados alarmantes: una de
cada tres muestras revel residuos de plaguicidas y el 16% sobrepas los lmites mximos
residuales (LMR), segn la ltima resolucin N 33 de marzo de 2010. La lechuga, la coliflor
y el repollo tuvieron residuos de Fosmet por hasta 0,15 miligramos por kilo, cuando lo
autorizado es 0,05; el zapallo italiano y el brcoli tambin tenan residuos de Malatin y
Tetraconazol hasta tres veces superiores a lo autorizado por los estndares nacionales. Por
esta razn, varias organizaciones como Rapal-Chile, Olca, Ecocanos y las organizaciones
de consumidores como La Liga Ciudadana y Conadecus han presionado para que se legisle
a favor de los chilenos y chilenas y proteger a los trabajadores y a la poblacin de los
efectos de los pesticidas. El ao 2007 se presenta un proyecto de ley que prohbe el uso de
los plaguicidas ms dainos para la salud humana y el medio ambiente, el que fue aprobado
en la Cmara de Diputados. El ao 2010 se establece una resolucin que actualiza los
niveles de residuos de pesticidas mximos permitidos para algunos pesticidas en frutas y
verduras, cuyos valores estn basados fundamentalmente en los establecidos por el Codex
Alimentarius.
No obstante, Correa (2010) seala que an existen materias pendientes que deben ser
abordadas, si el pas quiere otorgar mayor proteccin a las personas, el medioambiente y la
forma en el uso de plaguicidas. Dos de ellas, factibles de ser exploradas se relacionan con
la complementacin del actual sistema de autorizacin de plaguicidas:
La implementacin de una evaluacin de riesgo basada en el principio de mnimo riesgo
para las personas;
La adopcin del riesgo de plaguicidas por equivalencia.

Ambas materias son actualmente parte estructural del proceso de autorizacin de


plaguicidas en los pases ms avanzados y por lo tanto, un desafo tcnico que Chile debe
asumir (Correa 2010).
Por su parte, Andrade (2010) seala que algunos de los problemas relacionados con
el registro, comercializacin y uso de plaguicidas estn relacionados con al menos tres
aspectos susceptibles de ser revisados y mejorados en nuestra normativa de pesticidas
agrcolas:
Requisitos para la ejecucin de experimentos y elaboracin de informes tcnicos sobre
la eficacia de los pesticidas comercializados en Chile.
Transparentar la informacin sobre la eficacia relativa de cada ingrediente activo o
productos comercial.
Regular la venta de pesticidas con el apoyo de personal capacitado.
127

En el ao 2008 se vendieron un total de 1.012 productos comerciales, de ellos la


mayora corresponde a Fungicidas y Bactericidas con un 56%, seguido de Insecticidas,
Rodenticidas y Acaricidas con un 20% (SAG 2012).

Descripcin y clasificacin de Insumos Ecolgicos presentes en Chile


A nivel nacional ha aumentado el volumen de biocontroladores utilizados en el sector
agrcola, principalmente en agricultura convencional destinada al mercado exportador,
considerando que aproximadamente slo un 5% de la venta se utiliza en agricultura
orgnica, lo que hace que la agricultura convencional sea el mayor demandante de este tipo
de control. La utilizacin de estos insumos se debe principalmente por un tema de inocuidad
alimentaria por parte del retail, aumento de la superficie certificada con normas de calidad,
restriccin de uso de plaguicidas txicos, efectividad, recomendacin de uso por parte de los
asesores, entre otros motivos.
A nivel nacional, el SAG dispone en su pgina web de un listado de insumos
autorizados para ser utilizados en agricultura orgnica. La informacin oficial sobre ventas
de plaguicidas en Chile, se genera en funcin de las declaraciones de venta en cantidad,
siendo el dato ms actual el del ao 2008 (Cuadro 3).
En funcin de la clase de aptitud de uso tenemos que los insecticidas, rodenticidas,
acaricidas (serie 1000) corresponden a un 20%, un 56% a fungicidas y bactericidas; un 14%
a herbicidas y un 10% a miscelneos (Figura 3).

Cuadro 3. Volumen de venta de plaguicidas segn serie, durante el ao 2008.

Serie Tipo de plaguicida Total (kg/l)


1000 Insecticidas, Rodenticidas, Acaricidas 10.736.840,99
2000 Fungicidas, Bactericidas 30.889.679,01
3000 Herbicidas 7.623.451,97
4000 Miscelneos 5.730.149,72
Total general 54.980.121,69
Fuente: Sag, 2012

Figura 3. Distribucin porcentual de plaguicidas, fertilizantes y miscelneos autorizados para


su uso en agricultura ecolgica en Chile en 2008 (SAG 2012).
128

De un total de 1078 nombres comerciales de plaguicidas registrados en el SAG, lista


de plaguicidas con autorizacin vigente a abril de 2012, slo 25 corresponden a
biocontroladores, de los cuales 8 son insecticidas o nematicidas y 17 fungicidas o
bactericidas no existiendo ninguno para control de malezas, lo que corresponde a un 2% del
total de nombres comerciales presentes en dicha lista. De estos organismos el 62% del
volumen vendido corresponde a Bacillus thuringiensis enfocado principalmente en el control
de lepidpteros, seguidos de Bacillus subtilis para el control de oidio y Botrytis cinerea. Pese
a que los volmenes son bajos, hay que mencionar que normalmente los valores de venta
de estos productos son medios a altos, por lo que al llevar las ventas a dinero, se estima
que estaran representando entre un 4 y 5% del mercado total de plaguicidas en Chile
(Cuadro 4).

Cuadro 4. Controladores microbiolgicos comercializados durante 2008 y su participacin en


el mercado total.

Porcentaje del
Porcentaje
Aptitud de Volumen de Porcentaje total de
Agente de control (i.a) de
uso venta (KG/L) de la serie plaguicidas
biolgicos
comercializados
Serie 1000: Bacillus thuringiensis 63.975,000 0,60% 62,5% 33%
Insecticida / Paecelomyces lilacinum 16.399,500 0,15% 16,0% 9%
Myrothecium verrucaria 15.791,500 0,15% 15,4% 8%
Nematicida
Metarhizium anisopliae / 18,000 < 0.01% < 0.01% 3%
Beauveria bassiana /
Paecilomyces lilacinus
Virus de la granulosis 6.215,000 0,06% 0,01% 0,00%
Total Serie 102.399,000 0,95% 53% 0,19%
Serie 2000: Bacillus subtilis 37.620,600 0,12% 20% 0,07%
Bacillus subtilis + S 11.564,000 0,04% 6% 0,02%
Fungicidas/
Agrobacterium radiobacter 20.571,250 0,07% 11% 0,04%
Bactericidas
Trichoderma spp. 17.286 0,06% 9% 0,03%
Bacillus spp. 3.030,000 0,01% 2% 0,01%
Lactobacillus acidofilus 219,000 0,00% 0% 0,00%
Total Serie 90.290,850 0,29% 47% 0,16%
Total
192.689,850 0,35%
biolgicos
Fuente: declaracin de SAG, 2012

El uso de biocontroladores en Chile se inserta dentro de un mercado que incluye varios


tipos de productos, en especial aceptados por la agricultura orgnica, de acuerdo a las listas
de insumos compatibles con agricultura ecolgica de las empresas certificadoras BCS Chile
Ltda., IMO Chile S.A. y Ceres Ltda. Del total de 159 nombres comerciales de plaguicidas,
slo 83 tienen registro SAG, los restantes 76 no cuentan con tal registro, y entre stos estn
los comercializados como bioestimulantes pero que corresponden a biocontroladores (SAG
2012).
Los principales ingredientes activos de los 159 plaguicidas naturales corresponden a
extractos de origen vegetal (extractos de ctricos, de semillas de Neem, etc.),
microorganismos (Trichoderma spp., Bacillus spp., Beauveria bassiana, Metarhizium spp.
etc.), azufre, cobre (oxicloruro de cobre, hidrxido de cobre, sulfato de cobre, etc.), entre
otros (Cuadro 5).
129

Cuadro 5. Ingredientes activos de los plaguicidas utilizados en agricultura


ecolgica (Donoso et al. 2011).

Ingredientes activos Total


Microorganismos 45
Extractos de origen vegetal 51
Azufre 17
Cobre 22
Aceite mineral 8
Otros* 6
Jabn potsico 6
s/r 4
Total 159
*Otros: cal, aceite parafnico, etc.

De acuerdo a la informacin rescatada de las empresas certificadoras, existen ms de


41 empresas distribuidoras de plaguicidas ecolgicos. Las 17 principales se presentan en el
Cuadro 6 y representan la venta y distribucin del 64% de los plaguicidas ecolgicos en
Chile.
Como se puede observar en el Cuadro 6, la empresa Iberfol S.L., de origen espaol,
presenta el mayor nmero de insumos presentes en las listas de IMO y BCS, pero ninguno
de estos insumos tiene registro SAG, del mismo modo la Empresa Jos Morera S.L.,
tambin de origen espaol, no cuenta con registro SAG en ninguno de sus insumos.

Cuadro 6. Principales empresas distribuidoras/fabricadoras de insumos ecolgicos en Chile


(Donoso et al. 2011).

N de insumos Insumos con


N Distribuidor/Titular autorizado
Ecolgicos registro SAG
1 IBERFOL, SL 15 0
2 QUIMETAL INDUSTRIAL S.A. 14 12
3 AGRICOLA NACIONAL S.A. 10 8
4 SOCIEDAD AGRCOLA LOS MAITENES LTDA. 10 1
5 ARYSTA LIFESCIENCE CHILE S.A. 7 6
6 CHEMIE CHILE S.A. 7 5
7 MARKETING ARM INTERNATIONAL 5 3
8 BASF CHILE S.A. 5 5
9 DROPCO S.A. 4 2
10 JOSE MORERA S.L. 4 0
11 BIO INSUMOS NATIVA LTDA. 3 3
12 PRINAL S.A. 3 3
13 BIOMYCOTA 3 0
14 BIOGRAM 3 2
15 AGROSPEC S.A. 3 3
16 VALENT BIOSCIENCES DE CHILE S.A. 3 2
17 AVANCE BIOTECHNOLOGIES, CHILE 2 2
Total 101 57
130

Estudio comparativo de la legislacin


En cuanto a normativas sobre bioplaguicidas, feromonas y reguladores de crecimiento,
se aprecia una tendencia a la generacin de normas especficas, segn naturaleza del tipo
de producto. As en Europa se presenta una directiva especfica para extractos vegetales y
otra para microorganismos, y el resto de los productos se regulan con la normativa
tradicional para plaguicidas y miscelneos qumicos. La directiva CEE 1107/2009 estableci
criterios para aceptacin de organismos que no posean riesgos inaceptables para la salud
humana, estableciendo la definicin de productos de bajo riesgo y otorgando tiempo
express para registro en 120 das, dando prioridad a productos que reemplacen a los
qumicos de alta toxicidad. En el caso de Italia, la agricultura convencional utiliza entre un
80-90% de bioplaguicidas.
En Estados Unidos, por su parte se gener la divisin de Biopesticidas de la EPA, la
que revisa y registra productos para su uso, siendo la mayora usados en frutales y
hortalizas, aun cuando algunos se aplican en cultivos, para uso forestal y uso domstico.
Desde 1996, ms de 250 productos han sido registrados para su uso: 78 pesticidas en base
a microorganismos, 160 pesticidas bioqumicos y 22 protectores de plantas. Tambin
existen 25 microorganismos registrados y comercializados para el control de patgenos de
plantas en los EE.UU.
La Agencia de Proteccin Ambiental de Estados Unidos (EPA) form en 1994 la
Divisin de Prevencin de Contaminacin y Biopesticidas (BPPD), generando el listado de
pesticidas de mnimo riesgo, que una vez ingresados al pas, pueden ir directo al mercado.

Figura 6. Cuadro comparativo de legislaciones sobre insumos agrcolas (Donoso et al.


2011).

La Figura 6 muestra que en Chile existe un vaco en lo que se refiere al tema


fertilizantes, lo que slo ha sido reglamentado por algunas normativas del Ministerio de
Defensa, para fertilizantes nitrogenados, por temas de seguridad. Pero en el resto slo se
exige informar los tipos y volmenes de fertilizantes vendidos. En Chile se cuenta con una
norma sobre la produccin de compost (NCh 2.880/2004), pero el resto de los
131

biofertilizantes no estn bajo ninguna norma especfica, lo que se presenta como un riesgo,
especialmente en la reutilizacin de residuos y en procesos de fermentacin, representando
un peligro para la inocuidad de los cultivos en los que se utilizan, dada la naturaleza de los
compuestos y procesos, en los que existen riesgos de contaminacin con patgenos
humanos (Escherichia coli, Salmonella sp., entre otros).

Registro de productos
Desde el 2001 existe la BioPesticide Industry Alliance, desarrollando estndares de
calidad para los productos de origen biolgico. Sirviendo tambin como foro de debate para
la promocin y desarrollo de la industria de bioplaguicidas.
En Chile, adems de la norma chilena de produccin de compost (NCh 2.880/2004), la
Resolucin 3670 del ao 1999, regula el registro de productos para control de plagas o
enfermedades, ajustndose a los estndares internacionales sobre registro de este tipo de
productos, siendo este el procedimiento que ms han utilizado las empresas internacionales
para el registro de bioplaguicidas, para la comercializacin de insumos importados. Las
empresas formuladoras chilenas lo han utilizado menos debido a su incapacidad financiera y
tcnica. Frente a esto se han generado variantes de esta resolucin, que establece
regulaciones especficas para productos basados en microorganismos y otras para extractos
vegetales. Estas variantes no han sido utilizadas por las grandes empresas, debido a que no
cuentan con la experiencia de manejo de productos biolgicos y les resulta ms fcil,
registrar un bioplaguicida como un plaguicida qumico.
Por otra parte, existe una resolucin emitida por el SAG en el ao 2001 (Resolucin
2229), que instaura normas de ingreso de material biolgico, y en sus artculos 15 y 16,
establece que los organismos que puedan reproducirse por s mismos en la naturaleza, no
requieren ajustarse a la Resolucin N 3.670 y slo requieren enviar al Servicio la etiqueta
del producto. Art. 15 Los biopesticidas que presenten agentes exticos de control biolgico
sin capacidad de multiplicacin, se evaluar de acuerdo a las condiciones establecidas en la
Resolucin N 3.670 de 1999, del Servicio Agrcola y Ganadero. Art. 16 Los agentes de
control biolgico que sean comercializados en el pas, debern venderse con una etiqueta
que seale el nombre cientfico del agente, plaga objetivo de control, contenido, fase de
desarrollo del agente a liberar, cantidad, forma de uso o liberacin, condicin de
almacenamiento y tiempo de viabilidad.
Las empresas con baja capacidad tcnica y que no funcionan con las grandes
distribuidoras, se acogen a esta resolucin, generando un riesgo para la industria dado que
esta normativa no requiere estudio toxicolgico, ecotoxicolgico ni de ensayos de
efectividad. Se generan, entonces, riesgos de inocuidad y de imagen por falta de respaldo
tcnico producindose una competencia asimtrica con las empresas que se ajustan a la
Resolucin 3670.

Frente a este escenario, entre los desafos que se presentan estn:


Armonizacin de normas tanto internas del SAG, con ISP y Ministerio de Medio
Ambiente.
Generacin de base de datos de ingredientes activos y formulados de baja toxicidad.
132

Percepcin de Agricultores sobre el uso de bioplaguicidas


El Ministerio de Agricultura y la Fundacin para la Innovacin Agraria (FIA) contrataron
los servicios de asesora del Banco Mundial para apoyar el desarrollo de una estrategia de
largo plazo para la innovacin agroalimentaria y forestal en el pas. Dentro de este contexto
se elabor el documento Desarrollo Tecnolgico y Adopcin de Insumos Ecolgicos: Lnea
base 2010 y Prospectiva 2030 (Donoso et al. 2011), del que se extrae una encuesta
realizada a agricultores y asesores chilenos, sobre el uso de insumos ecolgicos, entre los
que se consideran a los biocontroladores.
Los productores consultados cultivan: frutales, vides para vino, hortalizas, berries,
praderas naturales, y cereales. Tambin se dedican a la ganadera y a la produccin de
plantas. El 100% de los productores y asesores consultados usa productos ecolgicos. Los
insumos mas utilizados por los encuestados y sus % se sealan en la Figura 7.

Figura 7. Insumos ecolgicos utilizados por productores o asesores consultados (Donoso et


al. 2011).

El detalle de los insumos ecolgicos ms utilizados o conocidos por los productores o


asesores, se encuentra en el Cuadro 7.

Cuadro 7. Insumos ecolgicos ms utilizados o conocidos por aptitud de uso. (Donoso et al.
2011).

Insumo Nombre comercial


Fungicidas/Bactericida Azufre
Trichonativa, BC-1000
Nacillus, Polisulfuro de Calcio
Insecticidas Dipel
Neem
Hongos entomopatgenos
Acaricidas Aceite mineral
Acarofin
133

Feromonas Isomate
Check mate
Trampas
Nematicidas Compost, Dazitol, Ditera, QL Agri 35, Guano
Inoculante Micorrizas especficas, Microorganismos, Preparados
biodinmicos, Rizofix

La motivacin para el uso de insumos ecolgicos, en orden decreciente son:


tolerancias, carencias y residuos, certificacin, calidad, precio, formulacin del producto,
disponibilidad en el mercado y categora de uso (Figura 8).

Figura 8. Razones de utilizacin de insumos ecolgicos segn nivel de importancia (Donoso


et al. 2011).

A su vez, el 38% de las decisiones sobre el insumo a utilizar las realiza el asesor
(Figura 9); un 14% se toma entre el asesor y el agricultor, igual relacin se realiza entre el
asesor y el administrador del campo; y un 9% seala que la decisin la toma el
administrador del campo, y en el mismo % el agricultor. Finalmente, un 5% de los
encuestados seala que la decisin la toma el asesor en conjunto con el jefe de produccin;
el gerente agrcola; el asesor, administrador de campo y el agricultor; asesor y el gerente
agrcola.
El cuestionario tambin inclua una pregunta sobre la certificacin: el 18,9% del total de
consultados no manifiesta inters por algn tipo de certificacin, el 10,8% seala
certificacin orgnica, el 5,4% seala contar con alguna de las siguientes certificaciones:
ARGENCERT, BCS, GLOBAL GAP, DEMETER, TESCO. Un 2,7% seala cumplir con
alguna de las siguientes normativas: JAS, NOP, CEE, DS 17, USDA, APL, CERES,
EUREPGAP, FORLIFE, ISO 14001, Comercio Justo, BPA.
Los productores y asesores encuestados fueron consultados sobre la percepcin sobre
los insumos ecolgicos, de ellos el 63% tiene una apreciacin clasificada como buena, un
23% como muy buena y un 14% como regular.
134

Figura 9. Decisin de utilizacin de insumos ecolgicos (Donoso et al. 2011).

Consideraciones finales
La tendencia a nivel mundial, impulsada principalmente por los consumidores, es
exigir alimentos sanos, de alta calidad, que su produccin no constituya un peligro para la
salud humana, para la salud animal ni para el medio ambiente. Una de las maneras de
satisfacer estos requerimientos es la utilizacin de insumos ecolgicos en los diversos
sistemas productivos, es decir, la utilizacin de insumos que tienen como caracterstica bajo
impacto ambiental, bajas carencias y toxicidad, cuyo uso no se limita a agricultura orgnica.
Por otra parte, los costos de producir agroqumicos han ido en aumento, por lo que
grandes empresas qumicas estn incursionando en el mercado de los biopesticidas, el cual
se est expandiendo rpidamente y se estima para los prximos 10 aos un aumento de
150 a 300%.
Considerando los resultados obtenidos en las encuestas el 100% de los productores y
asesores, estn optando por utilizar e incorporar a sus planes de manejo la utilizacin de
insumos ecolgicos, principalmente por motivos de certificacin; tolerancias, carencias y
residuos; precio, calidad de producto; disponibilidad en el mercado y formulacin del
producto. Dentro de los aspectos que favorecen su utilizacin se encuentran su eficacia y
bajo impacto sobre el medioambiente. Tambin sealaron que el alto precio,
desconocimiento, poca disponibilidad, certificacin y la falta de apoyo tcnico post-aplicacin
constituyen alguno de los problemas que enfrentan en el uso de insumos ecolgicos.
En nuestro pas existe investigacin en control biolgico e insumos ecolgicos
realizada por Centro Tecnolgico de Control Biolgico del INIA, Universidad Austral de
Chile, Universidad de Chile, Pontificia Universidad Catlica de Chile, Universidad Catlica de
Valparaso, Universidad de Concepcin, Universidad de Talca y Bioinsumos Nativa Ltda.,
quienes son los que cuentan con productividad cientfica y tecnolgica comprobable.
Muchas de las empresas nacionales adems de realizar la investigacin, distribuyen sus
insumos, mientras que otras han entregado la distribucin a cadena de comercializacin
establecidas a travs de distribuidores de insumos agrcolas, lo que permite dar a conocer
estos productos.
135

Sin embargo, existen normativas contradictorias, Resolucin 2229 v/s Resolucin


3670, Ingreso de material biolgico y Registro de productos para el control de plagas o
enfermedades, respectivamente que deben ser modificadas, debido a que muchas
empresas con baja capacidad tcnica se acogen a la Resolucin 2290, normativa que no
exige estudio toxicolgico, eco toxicolgico ni ensayos de efectividad, lo que genera riesgos
de inocuidad y riesgo de imagen por falta de respaldo tcnico, adems de generar
competencia asimtrica con las empresas que se ajustan a la Resolucin 3670.
En cuanto a la estructuracin de la agricultura chilena, se puede concluir que en Chile
existen dos realidades contrastantes:
Agricultura extensiva y para mercado interno
o Uso basado en mejor desempeo de los insumos ecolgicos y problemas no
resueltos qumicamente (patgenos de suelo, bacterias, fertilizantes de lenta
entrega)
o Incremento de exigencias en retail y agroindustria.
o Reduccin de insumos disponibles, pero sin diferenciacin en la venta y sin
sobreprecio o mejores condiciones de comercializacin.
o Baja inversin en I+D+i en insumos especficos
o Inversin en tecnologas complementarias (principalmente mejoramiento
gentico).
Agricultura de exportacin
o En total sintona con tendencias mundiales.
o Se suma complejidad por tiempos de almacenaje y post cosecha.
o Respuesta de la cadena de comercializacin y sobreprecio o mejores
condiciones de comercializacin
o Inversin en I+D+i en insumos ecolgicos.
o Inversin en tecnologas complementarias (monitoreo, deteccin temprana,
desarrollo varietal).

En primer lugar se plantean las acciones que debe realizar en forma obligatoria el
estado, siendo uno de las debilidades ms sentidas por la industria de insumos ecolgicos el
tema de legislacin. En este aspecto se detectaron como puntos crticos, la existencia de
normativas contradictorias, que generan confusin entre los agricultores y permite el ingreso
al mercado de productos, sin la necesidad de establecer con base cientfica, la calidad,
inocuidad y eficacia de los insumos. La complejidad de registro de insumos con capacidad
de control, al parecer pasa ms por un tema de capacidad tcnica y financiera de las
empresas, para poder generar la informacin necesaria y efectuar el registro. Aqu se
genera una asimetra con empresas internacionales, ya que buena parte de la informacin
que aborda los temas de toxicidad, ecotoxicidad y caractersticas fsico qumicas, as como
la determinacin de formas de accin, sirven para obtener registro prcticamente en
cualquier pas, lo que genera una asimetra entre empresas nacionales y transnacionales, ya
que las ltimas pueden prorratear la inversin en un mercado mucho mayor que las
empresas slo presentes en Chile.
Dentro de este mbito, se postula equiparar la legislacin Chilena, con lo que se utiliza
en la Unin Europea y EE.UU, a travs de la generacin de una resolucin, que contenga
una lista de insumos de mnimo riesgo, que facilite y acelere el registro de insumos
ecolgicos. Esto implica la generacin de informacin bsica en los temas de ecotoxicidad,
136

en la generacin de capacidad instalada para la realizacin de estos anlisis y en el


fortalecimiento del subdepartamento de plaguicidas y fertilizantes del SAG. Esto tambin
debera considerar la homologacin de las normativas chilenas, con las de los pases
vecinos, de forma que sea fcil la expansin de productos desarrollados en Chile en pases
como Argentina, Brasil, Per y Ecuador.
El otro mbito en que el estado debe intervenir, es la integracin de la pequea
agricultura al uso de estos insumos, como manera de incrementar la inocuidad y
sustentabilidad de esta forma de produccin. Esto se plantea realizar a travs de la
generacin de campaas de diferenciacin de los alimentos producidos con el uso de estos
insumos, tanto para la exportacin como para el mercado interno. Tambin se plantea incluir
aspectos de inocuidad, sustentabilidad y participacin de la pequea agricultura en las
compras que realice el estado, tanto en alimentos como en insumos. Por ltimo, la pequea
agricultura requiere apoyo tanto en la adopcin de estos insumos, como en soporte tcnico
especializado, lo que debe ir asociado a tecnologas complementarias, como son monitoreo
de plagas, uso de mallas, uso de modelos climticos, sistemas de riego y de aplicacin de
insumos. Y finalmente apoyar la generacin de estrategias, de administracin, marketing y
comercializacin para este tipo de agricultores, de manera de rentabilizar la adopcin de las
tecnologas ya mencionadas.
Dentro de las debilidades detectadas en los insumos presentes en Chile, estn los
aspectos de calidad y formulaciones, lo que requiere que los programas I+D+i de estos
insumos, deban considerar el desarrollo de lneas de produccin, formulacin y controles de
calidad, que permitan que estos productos respondan a las exigencias del mercado y
faciliten la internacionalizacin de estos insumos. Esto genera la necesidad de incluir
estrategias de proteccin intelectual.
Dentro del desarrollo de insumos, se ve con alto potencial de crecimiento el estudio de
los problemas fitosanitarios y de fertilizacin, que no han sido resueltos por la industria
qumica, de forma que facilitar la insercin de estos productos.
Por ltimo, existen mbitos que son de directa responsabilidad de la industria, entre los
que destacan estandarizacin de la produccin de insumos, obtencin de certificaciones de
calidad, generacin de informacin de respaldo con peso cientfico, que aseguren la eficacia
y nivel de confiabilidad en el uso de estos insumos.
Logrando superar estos desafos, es altamente esperable lograr una industria nacional
relevante a nivel mundial, en el desarrollo de insumos ecolgicos con beneficios como
reduccin en el costo de uso de insumos por parte de los agricultores, generacin de un
polo de desarrollo en investigacin y tecnologa e inversin empresarial semejante al
desarrollo farmacutico y qumico que se gener en Suiza durante el siglo pasado, en el que
estos rubros pasaron a ser una de las principales fuentes del PIB de ese pas. Chile con el
nivel de biodiversidad, endemismo y capacidades de recursos humanos y costos de
investigacin, se presenta con alta potencialidad para generar un desarrollo similar en el
aspecto biotecnolgico, enfocado en insumos ecolgicos. Ya existiendo algunos ejemplos
como los de Natural Response con extractos de Quillay y Bio Insumos Nativa, con su lnea
de productos.

Literatura citada
Andrade O. 2010. Algunos Aspectos Susceptibles de Revisar en la Actual Normativa de
Registro y Empleo de pesticidas Agrcolas en Chile. Departamento de Recursos
137

Naturales, Escuela de Agronoma. Universidad Catlica de Temuco. XIX Congreso


Sociedad Chilena de Fitopatologa. Pucn, 9-12 de nov. 2010. Libro de resmenes.
CCO y FIA. 2008. Catlogo de insumos utilizados para la nutricin de cultivos en agricultura
orgnica disponibles en Chile. Santiago de Chile.
Correa A. 2007. Plaguicidas en Chile. Maco Normativo. Divisin proteccin Agrcola.
Disponible en internet: http://www.inia.cl/alternativasbromurometilo2/Arica/ACorrea_2.pdf
Correa A. 2010. Anlisis de Riesgo y Equivalencia: Desafos para el Sistema de Autorizacin
de Plaguicidas en Chile. Centro Regional INIA La Platina. XIX Congreso Sociedad
Chilena de Fitopatologa. Pucn, 9-12 de nov. 2010. Libro de resmenes.
Donoso E, Tobar B y Jimnez MA. 2011. Estudio: Desarrollo tecnolgico y adopcin de
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encargado por Fundacin para la Innovacin Agraria.
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Congreso Sociedad Chilena de Fitopatologa. Pucn, 9-12 de nov. 2010. Libro de
resmenes.
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internet http://www.faceaucentral.cl/pdf/ecoengen-02/eco-p04-05.pdf. Fecha visita 20 de
enero de 2011.
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Loyola R., Avils R. y Gerding M. 2007. Centro Tecnolgico de Control Biolgico. Chile.
Meadows-Smith M. 2009. Perspectives and challenges for the biopesticide industry.
AGRAQUEST. ABIM, Lucerne, October 19, 2009.
McSpadden B. 2009. Biological control: Current and future market demands. Departament of
Plant Pathology. The Ohio State University.
Servicio Agrcola y Ganadero (SAG). 2012. Divisin de Proteccin Agrcola. Subdeparta-
mento de Plaguicidas y Fertilizantes. Declaracin de venta de plaguicidas ao 2012.

Literatura consultada
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Gobierno de Chile.
Instituto de Salud Pblica. 2010. Estudio de Residuos de Plaguicidas en Alimentos ao
2008. Disponible en internet: http://www.ispch.cl/sites/default/files/documento_tecnico/
2010/08/residuos%20de%20plaguicidas %20en%20alimentos%202008.pdf
Liga ciudadana de defensa de los consumidores. 2010. Informe final proyecto de evaluacin
de residuos de pesticidas en alimentos procesados. Diciembre 2010.
Monje G. 2010. Inocuidad Alimentaria en vegetales de exportacin. Servicio Agrcola y
Ganadero (SAG). Divisin de Proteccin Agrcola y Forestal. Disponible en internet:
http://www.inofood.cl/neo_2010/pdf/presentaciones_2010/santiago/jueves/11%20GRISE
L%20MONJE%20-%20SAG.pdf enero de 2011.
138
139

MARCO NORMATIVO DE REGISTRO DE PLAGUICIDAS DE USO


AGRCOLA Y FORESTAL EN CHILE
Regulatory frameworh for agricultural and forestry plaguicides

Ignacio Figueroa C.
Servicio Agrcola y Ganadero, Divisin de Proteccin Agrcola y Forestal, Santiago - Chile
E-mail: plaguicidas@sag.gob.cl

Resumen
Este captulo contiene un listado de las leyes, decretos, resoluciones y el proceso de
registro de plaguicidas de uso agrcola y forestal en el pas.

Summary
This chapter contains the list of laws, decretes, resolutions and the process for register
of agricultural and forestry plaguicides.

Introduccin
La normativa nacional de uso y manejo de plaguicidas de uso agrcola y forestal en el
pas est conformada por disposiciones establecidas a travs de decretos, leyes y
resoluciones exentas emitidas para estos efectos y de esa forma poder realizar los
correspondientes seguimientos a los productos fitosanitarios que son autorizados por el
Servicio Agrcola y Ganadero (SAG), para la mantencin y proteccin del patrimonio
fitosanitario y de los cultivos, bajo condiciones que permitan un uso y manejo seguro de
stos, para la salud de las personas, de los animales y del medio ambiente.
La normativa chilena se basa en las directrices establecidas por FAO en materias de
plaguicidas, y en forma particular en lo dispuesto en su Cdigo Internacional de Conducta en
la Distribucin y Utilizacin de Plaguicidas.

Cuerpos legales
Los siguientes son los cuerpos legales, que entregan al SAG, las facultades para
controlar a los plaguicidas de uso agrcola y forestal:

Ley N 18.755 (7-01-1989) Orgnica del Servicio Agrcola y Ganadero, modificada


por Ley N 19.283 de 5-01-1994 y Ley N 20.161 de 9-03-2007.
La Ley Orgnica del Servicio Agrcola y Ganadero, en su artculo tercero, letras e), m)
y q), establece las atribuciones respecto a control obligatorio de plagas y enfermedades
(control oficial) que a juicio del Servicio puedan incidir en forma importante en la produccin
silvoagropecuaria nacional; aplicacin y fiscalizacin de normativa sobre produccin y
comercio de plaguicidas; y restringir de conformidad a la normativa el uso o aplicacin de
140

agroqumicos en determinadas reas de zonas agroecolgicas, cuando perjudique la salud


animal, vegetal o los recursos naturales renovables.

Decreto Ley N 3.557 (Servicio Agrcola y Ganadero 29-12-1980; D.O. 09-02-1981).


ste establece disposiciones sobre proteccin agrcola, en su ttulo III Fabricacin,
comercializacin y aplicacin de plaguicidas y fertilizantes, prrafo 1: de los Plaguicidas,
artculos trigsimo segundo (32) a trigsimo sexto (36), establece las principales
condiciones, prohibiciones, plazos para sanciones por perjuicios y las atribuciones del
Servicio respecto a los plaguicidas.

Ley N 20.308 (03-12-2008 D.O. 27-12-2008) sobre proteccin a los trabajadores en


el uso de productos fitosanitarios.
Modifica el DL 3.557, aumentando algunos requerimientos en el etiquetado y en las
facultades del Servicio Agrcola y Ganadero. Adems, modifica el Cdigo Sanitario y
modifica el Cdigo del Trabajo, respecto a aspectos de seguridad y resguardos para los
trabajadores. Refuerza las indicaciones para la eliminacin de los envases vacos y las
precauciones a adoptarse e incorpora el tiempo de reingreso a reas tratadas para las
personas y los animales.
Los siguientes son los cuerpos legales relacionados con la autorizacin de
plaguicidas, ingreso de organismos que puedan daar las plantas y el medio ambiente,
muestras de plaguicidas para experimentacin:

Resolucin N 3.670 de 1999 y su modificacin, la Resolucin N 5.551 de 2011


(Servicio Agrcola y Ganadero).
Esta resolucin exenta, establece normas para la evaluacin y autorizacin de
plaguicidas para uso en la agricultura.
El proceso, mediante el mecanismo de adaptabilidad para los requisitos tcnicos,
solicita un conjunto de estudios, ensayos y entrega de informacin de identidad,
fisicoqumicos, analticos, de seguridad, toxicolgicos, ambientales, ecotoxicolgicos, de
envasado, y de eficacia extranjera y nacional, que permiten respaldar la informacin de la
etiqueta con la que se expender el plaguicida, sea ste sinttico, natural, biolgico o un
coadyuvante.
Para el caso de la sustancia activa, grado tcnico con la que se formula el producto,
son requisitos ambientales indicar el comportamiento en el suelo, en aguas y en el aire; en
el caso de los aspectos ecotoxicolgicos, se contemplan toxicidad aguda y en algunos casos
toxicidad crnica, efectos en reproduccin y en el crecimiento, para aves, organismos
acuticos, artrpodos benficos, lombrices, microorganismos de suelo y abejas. Para el
caso del producto formulado, se contemplan aspectos como la toxicidad aguda para
organismos acuticos, organismos de suelo, aves y abejas. En este ltimo caso, estos
aspectos son considerados en la seccin de precauciones y advertencias de la etiqueta.
De acuerdo a esta normativa existen dos tipos de autorizaciones:
- Autorizacin Definitiva, en la que se evala previamente la eficacia por estudios
nacionales en estaciones experimentales reconocidas por el Servicio, bajo la Resolucin
N 92 de 2002. El proceso consta de dos etapas sucesivas (Verificacin Documental y
Evaluacin Tcnica).
141

- Autorizacin de Plaguicidas para Uso en Control Oficial, establecida en el Numeral 8


Inciso 1 de la Resolucin Exenta 3.670 de 1999, que faculta para que en caso de
emergencia, el Servicio autorice mediante resolucin fundada el uso de un plaguicida
que no cuente con las autorizaciones y registro correspondientes.

Resolucin N 2.229 de 2001 (Servicio Agrcola y Ganadero)


Esta Resolucin establece la prohibicin de ingreso al pas de organismos que
puedan daar a las plantas o el medioambiente y establece las normas de ingreso de
material biolgico de carcter benfico, detallando los requisitos que se deben cumplir
cuando se desea realizar el ingreso al pas de agentes de control biolgico, polinizantes
(excepto abejas), organismos para uso cientfico o de ornamentacin, con capacidad de
multiplicacin.
En relacin a la comercializacin de los controladores biolgicos en el pas, la
resolucin N 2.229 de 2001, en el numeral 16, indica que todo producto que se comercialice
en el pas debe tener una etiqueta con informacin sobre la identidad y fase del agente de
control biolgico, almacenamiento, viabilidad y uso.
A travs de esta normativa el Servicio autoriza, por ejemplo, el ingreso de organismos
de control biolgico y de otros insectos benficos para investigacin (Ej. Drosophila
melanogaster).
En el numeral 15 se establece que los plaguicidas biolgicos que presenten agentes
exticos de control biolgico sin capacidad de multiplicacin, debern ser evaluados de
acuerdo a las condiciones establecidas en la Res. 3.670 de 1999.

Resolucin N 92 de 2002 (Servicio Agrcola y Ganadero)


Esta resolucin establece normas para las Muestras de Plaguicidas para
Experimentacin, detallando los requisitos necesarios y la extensin total, que no debe
sobrepasar las cuatro hectreas en cada temporada de investigacin, as como lo que se
debe hacer con los productos tratados y los remanentes del producto utilizado, para su
utilizacin en ensayos nacionales. Entre los antecedentes requeridos est la informacin
sobre identidad, composicin y formulacin de plaguicidas, usos, antecedentes
toxicolgicos, antecedentes ecotoxicolgicos, precauciones de uso, informaciones mdicas,
hoja de seguridad e informacin sobre detalles del ensayo. Para el caso de la informacin
ecotoxicolgica se solicita lo disponible.
Existen otras regulaciones relevantes que se encuentran en las siguientes
resoluciones del Servicio Agrcola y Ganadero, las que norman otros aspectos como la
internacin y fabricacin, etiquetado, la venta y la aplicacin de plaguicidas de uso agrcola:
- Resolucin N 6.666 de 2009, que establece disposiciones para autorizar el uso de
plaguicidas en cultivos menores.
- Resolucin N 1.038 de 2003, que aprueba procedimientos de internacin y
formulacin nacional de plaguicidas de uso agrcola, y deroga resolucin exenta del
Servicio Agrcola y Ganadero N 3.671 de 1999.
- Resolucin N 386 de 1983, que fija tolerancia para la interpretacin de los anlisis
de contenido de plaguicidas.
- Resolucin N 1.404 de 2003, que establece normas para el ingreso de patrones
analticos de plaguicidas cuya regulacin competa al Servicio Agrcola y Ganadero.
142

- Resolucin N 2.195 de 2000, que establece los requisitos que deben cumplir las
etiquetas de los envases de los plaguicidas de uso agrcola.
- Resolucin N 2.196 de 2000, que establece clasificacin toxicolgica de los
plaguicidas de uso agrcola.
- Resolucin N 5.392 de 2009, que establece denominacin y cdigos de
formulaciones de plaguicidas y deroga Resolucin N 2.197 de 2000.
- Resolucin N 2.147 de 2002, que instituye reconocimiento de aplicadores de
plaguicidas ante el Servicio Agrcola y Ganadero.
- Resolucin N 5.846 de 2011, que seala requisitos para reconocer idoneidad de las
Estaciones Experimentales destinadas a probar plaguicidas y deroga Resolucin N
19 de 1985.
- Resolucin N 2.410 de 1997, que establece obligacin de declarar las ventas de
plaguicidas de uso agrcola.
- Resolucin N 1.899 de 1999, que establece la obligacin de declarar al Servicio
Agrcola y Ganadero la existencia de plaguicidas caducados.

Las resoluciones que prohben o restringen el uso de plaguicidas corresponden a las


siguientes:
- Resolucin N 1.720 de 1982: prohbe importacin, fabricacin y uso del
monofluoroacetato de sodio o compuesto 1080.
- Resolucin N 639 de 1984: prohbe la importacin, fabricacin, venta, distribucin y
uso del plaguicida DDT.
- Resolucin N 107 de 1985: prohbe el uso de dibromuro de etileno en fumigacin de
productos hortofrutcolas.
- Resolucin N 1.437 de 1986: fija nivel mximo de residuos de plaguicidas clorados
en empastadas para efectos sancionatorios.
- Resolucin N 2.142 de 1987: prohbe la importacin, fabricacin, venta, distribucin
y uso del plaguicida dieldrin, endrin, heptacloro y clordn.
- Resolucin N 2.003 de 1988: prohbe la importacin, fabricacin, venta, distribucin
y uso del plaguicida aldrin.
- Resolucin N 1.573 de 1989: prohbe la importacin, venta, distribucin y uso del
fitorregulador daminozide.
- Resolucin N 996 de 1993: prohbe la importacin, fabricacin, venta, distribucin y
uso de plaguicidas agrcolas que contengan sales orgnicas o inorgnicas de
mercurio.
- Resolucin N 3.195 de 1994: prohbe la importacin, fabricacin, venta, distribucin
y uso del plaguicida mevinfos.
- Resolucin N 2.179 de 1998: prohbe la importacin, fabricacin, venta, distribucin
y uso de los plaguicidas 2, 4, 5-T, clordimeform, toxafeno o canceclor.
- Resolucin N 2.180 de 1998: prohbe la importacin, fabricacin, venta, distribucin
y uso del plaguicida lindano.
- Resolucin N 312 de 1999: prohbe la importacin, fabricacin, venta, distribucin y
aplicacin de plaguicidas de uso agrcola formulados en base a paratin etilo y
metilo.
143

- Resolucin N 909 de 2001: restringe el uso y manejo de todas las formulaciones de


plaguicidas agrcolas que contengan paraquat como ingrediente activo.
- Resolucin N 3.191 de 2001: modifica resolucin N 909 de 2001 que restringe el
uso y manejo de plaguicidas que contengan paraquat como ingrediente activo.
- Resolucin N 90 de 2002: prohbe la importacin, fabricacin, venta, distribucin y
aplicacin de plaguicidas de uso agrcola que contengan hexaclorobenceno.
- Resolucin N 91 de 2002: prohbe la importacin, fabricacin, venta, distribucin y
aplicacin de plaguicidas de uso agrcola que contengan mirex.
- Resolucin N 78 de 2004: prohbe la importacin, fabricacin, venta, distribucin y
aplicacin de plaguicidas de uso agrcola que contengan pentaclorofenol y sus sales.
- Resolucin N 8.231 de 2011: prohbe la fabricacin, importacin, exportacin,
distribucin, venta, tenencia y uso de plaguicidas con clordecona, alfa-HCH, beta-
HCH, pentaclorobenceno, endosulfn, alacloro y aldicarb.

Proceso de Registro
La normativa vigente establece el sistema de evaluacin y autorizacin de plaguicidas
en el pas, de acuerdo al Sistema por Identidad, bajo el cual todo producto es evaluado caso
a caso. Por lo tanto, la informacin que debe ser presentada por las empresas y usuarios
que quieran registrar un plaguicida en el pas, debe corresponder a la totalidad de la
documentacin tanto para el ingrediente activo como para el producto formulado.
Esta normativa permite evaluar cada uno de los diferentes tipos de productos que
pudieran ser presentados para su evaluacin, los que podran corresponder a plaguicidas de
origen sinttico o a productos naturales. En estos ltimos, existe una amplia variedad de
tipos de productos entre los cuales se pueden mencionar a los derivados de extractos
vegetales, biocontroladores, feromonas y repelentes.

Consideraciones finales
El proceso de registro de plaguicidas en Chile est basado en directrices FAO, por lo
que la normativa nacional cuenta con un respaldo reconocido internacionalmente en su
elaboracin.
La evaluacin y anlisis de la normativa nacional de plaguicidas corresponde a una
labor realizada en forma continua por el Servicio Agrcola y Ganadero, para contar con
productos plaguicidas que entreguen al usuario la seguridad en su uso y manejo, y de esta
manera proteger la salud de la poblacin, de los animales y del medioambiente. Al tratarse
de un tema altamente dinmico, el SAG debe necesariamente realizar esta accin, para
apoyar el desarrollo de la agricultura nacional, e implementar procesos que permitan que el
pas se convierta en una potencia agroalimentaria.
Este sistema ha colaborado en el desarrollo agrcola nacional y en el reconocimiento
internacional, como pas exportador de productos silvoagropecuarios, trabajados y
elaborados con los correspondientes estndares de inocuidad, que entregue la tranquilidad
necesaria al consumidor final.
144
145

ndice de Microorganismos Biocontroladores

Agrobacterium radiobacter, 14, 15, 16, 128


Agrobacterium radiobacter cepa K84, 14, 16, 115
Aureobasidium, 39
Aureobasidium pullulans, 38, 51
Aureobasidium pullulans aislados ca80 y me99, 52
Aureobasidium pullulans 174b1, 51
Bacillus, 13, 18, 37, 39, 62, 70, 74, 95, 105
Bacillus amyloliquefaciens, 38
Bacillus brevis, 16
Bacillus licheniformis, 15, 16, 38
Bacillus megaterium, 38
Bacillus pumilus, 38
Bacillus sp., 18, 91, 105, 115
Bacillus spp., 15, 35, 40, 128
Bacillus subtilis / Azufre, 16
Bacillus subtilis cepa QST713, 16
Bacillus subtilis, 15, 16, 38, 46, 61, 62, 63, 69, 71, 105, 115, 128
Bacillus thuringiensis, 128
Beauveria bassiana, 128
Candida oleophila, 38
Candida saitoana, 51
Candida sake, 51
Chryseobacterium indologenes (syn Flavobacterium indologenes), 38, 93
Clonostachys rosea (=Gliocladium roseum), 38, 93, 106
Clonostachys sp., 106, 107
Cryptococcus albidus (syn. Rhodotorula albida), 15, 16, 38
Cryptococcus laurentii (syn. Rhodotorula laurentti), 38
Didymella, 91
Enterobacter cloacae, 38
Flavobacterium indologenes, 38, 93
Fusarium semitectum, 38
Gliomastix, 91
Klebsiella movilis (syn. Enterobacter aerogenes), 38
Lactobacillus acidophilus, 15, 16, 38, 128
Metarhizium anisopliae, 128
Metarhizium spp., 128
Metschnikowia fructicola, 51
Mucor sp. PDASTS10-4, 93, 94
Myrothecium roridum, 66
Myrothecium verrucaria, 128
Ophiostoma piliferum cepa albina, 104
Ophiostoma spp. cepas albinas, 104
Paecelomyces lilacinum, 128
Paecilomyces, 81 - 91
Paecilomyces lilacinus, 128
Paenibacillus, 62
Paenibacillus lentimorbus, 26, 61, 62, 63
Penicillium, 66, 91, 93
Penicillium sp. MALTS7-3, 93, 94
Penicillium sp. MS7-3, 94
Peniophora gigantea, 102
146

Phialophora, 91
Phialophora sp., 95
Phragmidium violaceum, 14
Pichia, 39
Pichia anomala (syn Hansenula anomala), 39
Pichia guilliermondii aislado m11, 52
Pichia guilliermondii, 39
Pseudmonas, 91, 95, 115, 116
Pseudomonas aurantiaca PDAS7-8, 94, 95
Pseudomonas fluorescens, 14
Pseudomonas fluorescens cepa 2-79, 92
Pseudomonas fluorescens SACTS16-5, 94, 95
Pseudomonas putida, 38
Pseudomonas syringae, 38, 51
Rahnella aquatilis, 38
Rhodococcus erythropolis, 93
Rhodotorula glutinis, 39
Rhodotorula mucilaginosa, 39
Saccharomyces boulardii, 39
Saccharomyces cerevisiae, 39
Saccharomyces, 39
Schizosaccharomyces pombe (syn Saccharomyces pombe), 39
Serratia liquefaciens, 38
Stenotrophomonas maltophilia (syn Pseudomonas maltophilia, Xanthomonas maltophilia), 38
Trichoderma, 13, 18, 25, 37, 39, 53, 62, 66, 70, 71, 73, 74, 75, 76, 80, 81, 82, 91
Trichoderma asperellum, 66
Trichoderma atroviridae, 38
Trichoderma hamatum cepa Tubo, 81
Trichoderma harzianum, 15, 16, 17, 23, 24, 25, 26, 38, 39, 40, 45, 61, 62, 63, 66, 69, 70, 71,
75, 76
Trichoderma harzianum cepa 22, 15, 61, 63
Trichoderma harzianum cepa ATTCC 20847-T22, 15, 17
Trichoderma harzianum cepa mutante Th11A40.1, 66
Trichoderma harzianum cepa mutante Th11A80.1, 62
Trichoderma harzianum cepa mutante Th12A10.1, 46, 62
Trichoderma harzianum cepa mutante Th12A40.1, 62
Trichoderma harzianum cepa mutante Th12C40.1, 62
Trichoderma harzianum cepa mutante Th291A40.1, 66
Trichoderma harzianum cepa mutante ThF2-1, 46, 62, 67, 71
Trichoderma harzianum cepa Queule, 53, 81
Trichoderma harzianum cepa T-22, 17, 76
Trichoderma harzianum cepa T3 Los Robles, 15, 17
Trichoderma harzianum cepa Th11, 25, 66, 69, 70, 71
Trichoderma harzianum cepa Th11C80.3, 67
Trichoderma harzianum cepa Th12, 69, 70, 71
Trichoderma harzianum cepa Th15, 70
Trichoderma harzianum cepa Th16, 70
Trichoderma harzianum cepa Th21, 70
Trichoderma harzianum cepa Th291, 66, 67, 69, 71
Trichoderma harzianum cepa Th34, 66
Trichoderma harzianum cepa Th650, 69, 71
Trichoderma harzianum cepa ThF4-4, 69, 71
Trichoderma harzianum cepa ThF5-8, 67
Trichoderma harzianum cepa ThV, 66, 71
Trichoderma harzianum cepas 82, 83, 84, 85, 46
147

Trichoderma harzianum Th650-NG7, 26, 62


Trichoderma koningii, 70, 92, 93, 95
Trichoderma koningii PDARVS10-6, 93, 94
Trichoderma longibrachiatum, 15, 38, 66
Trichoderma longibrachiatum cepa Soto, 81
Trichoderma longibratum, 17, 76
Trichoderma parceramosum, 17, 76
Trichoderma parceramosum (syn T. atroviride Bissett), 38
Trichoderma parceramosum cepa Trailes, 81
Trichoderma polysporum, 15, 16, 38, 61, 62, 63, 75, 76
Trichoderma sp., 18, 46, 62, 81, 93,
Trichoderma spp., 15, 26, 35, 39, 40, 74, 76, 93, 107, 128
Trichoderma virens, 17, 38, 76
Trichoderma virens cepa Sherwood, 81, 82
Trichoderma viride, 15, 17, 38, 76
Ulocladium atrum, 38
Verticillium, 93