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Transcripcin y Traduccin en Procariontes vs.

Eucariontes
Estructura del RNA mensajero: Procariontes vs. Eucariontes

Alberts et al., 3rd ed., p.237


Etapas de la traduccin

vIniciacin
vElongacin
vTerminacin
Inicio

subunidades separadas del ribosoma


mRNA
tRNAi-met
factores de inicio
GTP
Para el inicio de la traduccin:

v Las subunidades ribosomales deben estar separadas


v La subunidad pequea debe reconocer al mRNA
v El tRNA aminoacilado (fmet-tRNAmet o met-tRNA) debe colocarse en
la posicin P de la subunidad ribosomal pequea
v Debe ocurrir el reconocimiento codn-anticodn de inicio
v Ocurre hidrlisis de al menos una molcula de GTP

Factores de iniciacin de la traduccin IFs (bacteria)


o eIFs (eucariontes)
Existen dos tRNAs para Metionina, uno iniciador y
otro elongador

El fMet-tRNA iniciador tiene


caractersticas especiales

En la mitad de los casos, la


metionina es removida de
Reconoce los codones AUG GUG
la protena
INICIO DE LA TRADUCCIN PROCARIONTE

IF1
50S IF2
IF3
30S
[Mg2+]
+ 3
3

fMet GTP
1 + 2
GDP
2
Shine-Dalgarno
3 fMet GTP
fMet fMet GTP
1 2
2
3 1 3 1
AUG AUG

complejo de
inicio de la
traduccin
FACTORES DE INICIO DE LA TRADUCCIN (PROCARIONTES)

Factor Funcin
IF1 Previene la unin de tRNAs en el
sitio A de la subunidad 30S
IF2 GTPasa que interacciona con 3
componentes claves durante
iniciacin: la subunidad 30S, IF1,
y fMet-tRNAif-Met)
IF3 Se une a 30S y evita re-asociacin
con 50S. Participa en el
reconocimiento codon-anticodon

f-met

aa-tRNA
IF3 IF1

5 3
E P A
INICIO DE LA TRADUCCIN EUCARIONTE

60S eIF1A
eIF2
40S
eIF3
eIF4
[Mg2+]
+ eIF5
3
Met 3
4
Met GTP
AUG 1A + 2

4
5 Met GTP
1A 2
GDP
Escaneo para
3 1A
2 buscar el AUG Met GTP
5 2
3 4 3 1A
Met GTP
5 2 AUG
4 3 1A
AUG complejo de
inicio de la
traduccin
Se forma un complejo circularizado con los extremos 5 y 3
del mRNA

Los factores eIF4 NO existen en bacteria


Interacciones en el complejo de inicio de la traduccin

Ocurre un escaneo de la regin 5 no traducible hasta
encontrar el primer AUG en contexto apropiado

eIF4A: helicasa; utiliza


ATP para deshacer
estructura secundaria en
el mRNA y permitir paso
de 40S
Para regenerar eIF2GTP que se une a tRNA-met para
iniciar traduccin, se requiere el factor eIF2B

eIF2B
intercambia
GDP x GTP
en eIF2

eIF2GDP
Resumen inicio de la traduccin en eucariontes

Complejo 43S

eIF3-eIF4G
Complejo 48S
Traduccin dependiente de CAP: Los mRNA eucariontes tienen CAP en el
extremo 5, por lo que su traduccin es CAP dependiente y requiere a eIF4E

Traduccin independiente de CAP: Muchos virus que infectan clulas


eucariontes tienen genoma de RNA que es traducido dirctamente. Estos virus
NO portan CAP en su extremo 5 y NO requieren a eIF4E. Su traduccin inicia en
un sitio interno ro arriba del AUG llamado IRES (Internal Ribosome Entry Site). El
IRES es reconocido por algunos de los eIFs celulares para reclutar la subunidad
ribosomal 40S

Rhinovirus
Poliovirus
Hepatitis A Virus
Encephalomyocarditis Virus
Foot and Mouth Disease Virus
eIF4G: una protena de anclaje que es blanco de
los virus IRES-dependientes
2Apro
PABP eIF4E eIF4A eIF4A
eIF3
132 572 642 1046 1201 1411 1560
Porcin utilizada para la traduccin
independiente de Cap

PABP eIF4E eIF4A eIF4A


eIF3
132 572 642 1046 1201 1411 1560

Ya no funciona en X TRADUCCIN DEPENDIENTE DE 5 CAP


traduccin Apoptosis
Infeccion viral
Ciertos puntos del ciclo celular
Elongacin
ribosoma
mRNA
tRNAs-aa
factores de elongacin

GTP

GTP
x aa
Factores de
elongacin
Bacteria Eucariontes
EF-Tu eEF-1
EF-Ts eEF-1
EF-G eEF-2

1. Posicionamiento del aa-tRNAaa


elongador correcto (EF-Tu/eEF-1)
2. Hidrlisis de GTP y cambio
conformacional.
Para regenerar EF-TuGTP se
requiere EF-Ts
Formacin del enlace
peptdico
Bacteria Eucariontes

Actividad peptidil transferasa del


RNAr 23S/28S (Bases conservadas
en todos los organismos)

3. Ataque nucleoflico amino del aa2 al


carboxilo del aa1
4. Posicionamiento del pptido sobre
el tRNA del sitio A
Translocacin

Bacteria Eucariontes
EF-Tu eEF-1
EF-Ts eEF-1
EF-G eEF-2

5. Entrada de EF-G/eEF-2
6. Hidrlisis de GTP
7. Cambio conformacional y
desplazamiento
ciclos de elongacin
Terminacin
ribosoma
mRNA
factores de terminacin

GTP protena

subunidades ribosoma
mRNA
tRNA libre
Factores de
terminacin

Bacteria Eucariontes

RF1 eRF1
RF2
RF3 eRF3

RRF
IF3
EF-G
eRF1 utiliza agua para hidrolizar el pptido

El gasto energtico del proceso de traduccin

Se hidrolizan 2 GTPs por cada aminocido incorporado



La hidrlisis promueve cambios conformacionales





Cargado de tRNA con su aminocido

1 ATP /aa



TRADUCCION

Iniciacin 1 GTP (1er aminocido)

Elongacin 2 GTPs /aa

Terminacin 1 GTP



Resumen RIBOSOMA

Centro peptidil transferasa (PTC)

A: aceptor
P: peptidil
E: salida (exit)

Centro activador
de GTPasa

Centro decodificador

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