Disusun oleh :
2
PERNYATAAN
Saya menyatakan bahwa Laporan Praktik Kerja Mandiri ini tidak terdapat
bagian yang pernah digunakan untuk publikasi sebelumnya dan diterbitkan orang
lain, kecuali yang secara tertulis diacu dalam naskah ini dan disebutkan dalam
daftar pustaka. Saya memperbolehkan sebagian pengutipan karya ini sebagai
materi praktikum setelah penerbit karya ini.
3
HALAMAN PENGESAHAN
LAPORAN PRAKTIK KERJA MANDIRI
PEMANFAATAN ECENG GONDOK (Eichornia crassipes)
SEBAGAI BAHAN DASAR BIOETANOL
Mengetahui, Menyetujui
Ketua Program Studi DIII Analis Kimia Pembimbing/Penguji
4
KATA PENGANTAR
Bissmillahirahmanirrahim.
Assalamualaikum.wr.wb.
Puji syukur kehadirat Allah SWT yang telah melimpahkan rahmat dan
karunia-Nya, shalawat dan salam senantiasa tercurah kepada Nabi Agung
Muhammad SAW dan para sahabat yang senantiasa istiqomah menjalankan
agama-Nya. Berkat pertolongan dan rahmat Allah SWT penulis dapat
menyelesaikan Laporan Praktik Kerja Mandiri yang menguraikan tentang
penelitian Eceng Gondok untuk dibuat menjadi Bioetanol.
Praktik Kerja Mandiri (PKM) merupakan mata kuliah wajib bagi
mahasiswa semester V Program Studi DIII Analis Kimia FMIPA Universitas
Islam Indonesia untuk memenuhi persyaratan pengajuan PKL. Oleh karena itu,
laporan Praktik Kerja Mandiri ini disusun untuk membahas hasil terkait penelitian
yang dilakukan.
Pada kesempatan ini penulis mengucapkan terima kasih kepada:
1. Bapak Drs. Allwar, M.Sc. Ph.D. selaku Dekan Fakultas MIPA UII.
2. Bapak Thorikul Huda, M.Sc. selaku Ketua Program Studi DIII Analis Kimia.
3. Ibu Puji Kurniawati, S.Pd.Si.,M.Sc. selaku Dosen Pembimbing Akademik dan
Dosen Pembimbing Praktik Kerja Mandiri.
Penulis menyadari bahwa laporan ini masih jauh dari kata sempurna, oleh
sebab itu penulis mengharapkan arahan, bimbingan, kritik dan saran yang
membangun demi terciptanya laporan yang lebih baik untuk kedepannya. Semoga
laporan ini dapat bermanfaat bagi penulis maupun semua pihak yang terkait.
Wassalamualaikum, wr.wb.
Yogyakarta, 19 Januari 2017
Penulis
5
DAFTAR ISI
SAMPUL...............................................................................................................i
LEMBARAN PENGESAHAN ............................................................................ii
PERNYATAAN.....................................................................................................iii
HALAMAN PENGESAHAN...............................................................................iv
KATA PENGANTAR ...........................................................................................v
DAFTAR ISI .........................................................................................................vi
DAFTAR GAMBAR ............................................................................................viii
DAFTAR TABEL..................................................................................................ix
DAFTAR LAMPIRAN..........................................................................................x
INTIS
BAB I PENDAHULUAN........................................................................................1
1.1. Latar Belakang.........................................................................................1
1.2. Rumusan Masalah....................................................................................2
1.3. Tujuan Penelitian.....................................................................................2
1.4. Manfaat Penelitian...................................................................................3
BAB II DASAR TEORI..........................................................................................4
2.1. Eceng gondok...........................................................................................4
2.2. Fermentasi................................................................................................6
2.3. Rayap.......................................................................................................7
2.4. Bioetanol................................................................................................12
2.5. Gas Chromatography (GC)....................................................................13
BAB III METODOLOGI.......................................................................................15
3.1. Alat.........................................................................................................15
3.2. Bahan.....................................................................................................15
3.3. Cara Kerja..............................................................................................15
Y3.3.1 Perlakuan pendahuluan terhadap eceng gondok................................ 15
3.3.2 Perlakuan Hidrotermal.......................................................................15
3.3.3 Filtrasi................................................................................................16
3.3.4 Analisa Kadar Gula Metode Luff Schoorl.........................................16
3.3.5 Analisa Kandungan Selulosa dan Lignin Dengan Metode Chesson..16
3.3.6 Fermentasi..........................................................................................17
3.3.7 Penyulingan........................................................................................17
3.3.8 Pengujian Kadar Etanol Dengan Gas Cromatography......................17
BAB IV HASIL DAN PEMBAHASAN...............................................................18
Y4.1 Preparasi Sampel................................................................................... 18
4.2 Perlakuan Hidrotermal...........................................................................19
4.3 Standardisasi Na2S2O3............................................................................20
4.4 Penentuan Gula Metode Luff Schoorl...................................................20
4.5 Penentuan Selulosa dan Lignin Metode Chesson..................................22
4.6 Tahap Fermentasi...................................................................................22
4.6.1 Hasil Fermentasi dengan Variasi Waktu.............................................24
4.6.2 Hasil Fermentasi dengan Variasi Massa Rayap.................................25
4.7 Optimasi Gas Chromatography.............................................................26
BAB V KESIMPULAN DAN SARAN.................................................................26
Y5.1. Kesimpulan............................................................................................ 27
6
5.2. Saran.......................................................................................................27
DAFTAR GAMBA
7
Gambar 2.1 Habitat eceng gondok (Villamagna, 2009..........................................5
Gambar 2.2 Saccharomyces cerevisiae pembesaran 10 x 40 (Ahmad, 2005).......7
Gambar 2.3 Struktur etanol..................................................................................12
Gambar 2.4 Rangkaian alat GC...........................................................................14
Gambar 4.1 Lokasi eceng gondok........................................................................18
Gambar 4.2 Eceng gondok kering yang dihaluskan............................................19
Gambar 4.3 Grafik kadar gula berdasarkan variasi waktu dan suhu...................21
Gambar 4.4 Reaksi pada saaat fermentasi (Ahmad 2005)...................................23
Gambar 4.5 Hasil variasi waktu terhadap kadar etanol.......................................24
Gambar 4.6 Hasil variasi masa rayap terhadap kadar etanol...............................25
8
DAFTAR TABEL
Tabel 2.1 Hasil analisis komposisi eceng gondok (mahamilia, 2015).....................5
Tabel 4.1 Hasil Kadar Gula Metode Luff Schoorl.................................................19
Tabel 4.2 Hasil Standardisasi Na2S2O3...................................................................20
Tabel 4.3 Hasil penentuan gula..............................................................................21
Tabel 4.4 Hasil fermentasi berdasarkan waktu......................................................24
Tabel 4.5 Hasil fermentasi berdasarkan massa rayap.............................................25
9
DAFTAR LAMPIRAN
Lampiran 1. Standarsisasi Na2S2O3........................................................................31
Lampiran 2. Analisis Gula Metode Luff Schrool...................................................32
Lampiran 4. Analisis selulosa dan lignin...............................................................34
Lampiran 5. Kromtogram analisis GC..................................................................35
Lampiran 6. Penentuan konsentrasi etanol dalam sampel.....................................40
10
PEMANFAATAN ECENG GONDOK (Eichornia crassipes)
SEBAGAI BAHAN DASAR BIOETANOL
Slamet Ludi Hartono
Program studi DIII Analis Kimia
Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam
Universitas Islam Indonesia
INTISARI
Telah dilakukan penelitian tentang pemanfaatan eceng gondok (Eichornia
crassipes) sebagai bahan dasar bioetanol. Penelitian ini bertujuan untuk
memanfaatkan eceng gondok sebagai bahan dasar pembuatan bioetanol. Penelitian
ini menggunakan ragi sebagai mikroorganisme yang membantu proses fermentasi
dan rayap yang digunakan untuk mengkonversi kandungan selulosa menjadi gula.
Melalui proses hidrolisis, selulosa pada batang eceng gondok dikonversi
menjadi glukosa yang difermentasi menjadi etanol. Proses hidrolisis optimum
terjadi pada waktu 30 menit dengan suhu pemanasan 120 oC dan di dapatkan kadar
gula sebesar 0,48%. Umumnya, selulosa ada dalam kombinasi dengan lignin dan
hemiselulosa membentuk komplek lignoselulosa sehingga selulosa sulit
mengalami hidrolisis secara enzimatik. Kadar selulosa dan lignin yang di
dapatkan dengan metode Cheson adalah 79,27% dan 20,35%. Untuk memudahkan
hidrolisis selulosa ditambahkan rayap untuk mengkonversi menjadi gula. Dalam
proses fermentasi dilakukan variasi waktu fermentasi 1, 2, 3 dan 5 jam untuk
menentukan waktu optimum dan variasi massa rayap yang digunakan yaitu
0,0178; 0,0300; 0,462; dan 0,0568 gram. Hasil penelitian di dapatkan waktu
fermentasi optimum yaitu selama 1 jam dengan jumlah rayap optimum adalah
0,0568 g.
Produk bioetanol yang dihasilkan kemudian uji kualitas, yaitu kadar
etanol. Uji kadar etanol ini menggunakan alat yaitu GC. Waktu retensi etanol
standar dan etnaol sampel yaitu di 0,4-0,5 detik. Sehingga dapat disimpulkan
bahwa produk yang dihasilkan mengandung etanol.
11
BAB I
PENDAHULUAN
1
Dalam usus rayap terdapat mikroba Sporocytophaga sp dan Staphyococcus sp.
Sporocytophaga sp mampu mendegradasi ligninselulosa, selain itu juga
Staphyococcus sp yang dapat mendegradasi senyawa organik yang mengandung
selulosa. Didalam usus rayap juga memiliki enzim selulase yang merubah
selulosa menjadi gula (Aini, 2015).
Fermentasi merupakan proses produksi energi dari mikroorganisme dalam
kondisi anaerobik (tanpa udara). Mikroorganisme yang melakukan fermentasi
etanol harus dapat memfermentasi semua monosakarida yang terkandung dalam
media. Penelitian ini menggunakan dua mikroorganisme, yaitu Saccharomyces
cerevisiae. Ragi S. cerevisiae dapat memfermentasi substrat glukosa, fruktosa,
galaktosa, sukrosa dan pati (Wachid, 2013).
2
1.4 Manfaat Penelitian
Manfaat dari penelitian ini adalah:
1. Diharapkan dapat mengurangi konsumsi BBM dan beralih menggunakan
bioetanol yang lebih ramah lingkungan.
2. Mengurangi tingkat pencemaran pada ekosistem perairan akibat
banyaknya eceng gondok.
3
BAB II
DASAR TEORI
4
tumbuhan air lainnya. Eceng gondok di perairan menjadi sumber makanan hewan
unggas, hewan air, dan juga hewan ternak.
5
sampai 8 meter di bawah permukaan air masih mampu menyerap sinar matahari
serta zat-zat yang larut di bawah permukaan air. Akar, batang, dan daunnya juga
memiliki kantung-kantung udara sehingga mampu mengapung di air.
Keunggulan lain dari eceng gondok adalah cepat menyerap senyawa
nitrogen dan fosfor dari air yang tercemar, berpotensi untuk digunakan sebagai
komponen utama pembersih air limbah dari berbagai industri dan rumah tangga.
Karena kemampuannya yang besar, tanaman ini diteliti oleh NASA untuk
digunakan sebagai tanaman pembarsih air di pesawat ruang angkasa (Little, 1979;
Thayagajaran, 1984). Menurut Zimmel (2006) dan Tripathi (1990) eceng gondok
juga dapat digunakan untuk menurunkan konsentrasi COD dari air limbah
(Ratnaini, 2013).
2.2 Fermentasi
Fermentasi merupakan proses mikrobiologi yang dikendalikan oleh manusia
untuk memperoleh produk yang berguna, dimana terjadi pemecahan karbohidrat
dan asam amino secara anaerob. Peruraian dari kompleks menjadi sederhana
dengan bantuan mikroorganisme sehingga menghasilkan energi (Wachid, 2013).
Beberapa spesies mikroba dari kelompok yeast/khamir, bakteri dan fungi
dapat memfermentasi karbohidrat menjadi ethanol dalam kondisi bebas oksigen.
Reaksi yang terjadi dalam proses fermentasi pembuatan etanol adalah sebagai
berikut:
khamir
C6H12O6 2 C2H5OH + 2 CO2 (Nurfiana dkk, 2009)
Metode fermentasi untuk gula C6 telah diketahui dengan baik sejak paling
tidak 6000 tahun yang lalu, ketika orang-orang Sumeria, Babylonia, dan Mesir
mulai membuat bir dari nira (Widiastuti, 2013). Misalnya S. Cerevisiae adalah
mikroorganisme khamir sejati yang tergolong dalam ekuariot yang berbentuk
bulat lonjong, ouval, silindris, atau bulat telur yang dipengaruhi oleh strainnya
seperti pada gambar 2.2. Mikroba ini dapat berkembang diri dengan mmbelah diri
melalui budding cell (Ahmad, 2005). Taksonomi S. Cerevisiae menurut Sanger
(2004) dalam Ahmad (2005), sebagai berikut:
Super Kingdom : Eukaryota
6
Phylum : Fungi
Subphylum : Ascomycota
Class : Saccharomycetes
Order : Saccharomycetales
Family : Saccharomycetaceae
Genus : Saccharomyces
Species : Saccharomyces cerevisiae
2.3 Rayap
Rayap merupakan bagian yang sangat penting di dalam daur ulang nutrisi
tanaman melalui proses disintegrasi dan dekomposisi material organik dari kayu
dan serasah tanaman. Namun demikian, rayap seringkali juga merusak kayu
sebagai bagian dari konstruksi bangunan dan material berselulosa lainnya di
dalam bangunan gedung atau menyerang pohon dan tanaman hidup sehingga
menjadi hama yang potensial (Subekti dkk, 2008).
Rayap juga merupakan serangga yang memiliki peran sebagai degradator
primer di alam. Umumnya rayap tidak menyerang pohon atau tanaman hidup,
kecuali kebanyakan genus Coptotermes. Proses degradasi oleh rayap mampu
mendegradasi lignoselulosa lebih optimal dari proses degradasi organisme
lainnya. Rayap merupakan organisme pertama yang mencerna lignoselulosa
menjadi molekul yang lebih kecil sebelum organisme lain seperti cacing dan
bakteri tanah berperan dalam memaksimalkan proses degradasi material organik
menjadi unsur-unsur penyusun tanah. Degradasi selulosa oleh rayap diperankan
7
oleh enzim yang diproduksi oleh rayap itu sendiri dan mikroorganisme di dalam
ususnya. Degradasi selulosa oleh rayap dilakukan oleh mikroorganisme yang
terdapat di usus rayap yaitu Sporocytophaga sp dan Staphyococcus sp. (Aini,
2015).
Rayap tanah dapat dideskripsikan berdasarkan ciri fisik rayap menurut
Akhmad (1959) dalam Kadarsah (2005), yaitu:
a. Mandibula tipis; basis konkaf; antenna 12-15 ruas; spesies berukuran
kecil; rayap prajurit lebih kecil daripada rayap pekerja. Dari ciri-ciri di atas
termasuk dalam genus Microtermes.
b. Mandibula tebal; basis tidak konkaf; mandibula kiri mempunyai satu gigi;
antenna 15-19 ruas. Dari ciri-ciri diatas termasuk dalam genus
Odontotermes.
c. Ujung labrum mempunyai lapisan hyalin; meso dan metanotum meluas ke
lateral; prajurit dimorfis; caput gelap; kedua sisi bertemu di anterior;
antenna 16- 17 ruas; mandibula tidak punya gigi; spesies berukuran besar.
Dari ciri-ciri diatas termasuk dalam genus Macrotermes.
d. Kepala tanpa penonjolan dari bagian depan ; mandibula asimetris; bagian
tengah mandibula kiri sangat melengkung; ujung mandibula kiri meluas;
tidak menekuk,seperti bentuk kait. Dari ciri-ciri diatas berdasarkan
termasuk dalam genus Capritermes.
Selain ciri fisik, rayap juga dikelompokan berdasarkan kasta menurut Iswanto
(2005), yaitu:
a. Kasta prajurit, kasta ini mempunyai ciri-ciri kepala yang besar dan
penebalan yang nyata dengan peranan dalam koloni sebagai pelindung
koloni terhadap gangguan dari luar. Kasta ini mempunyai mandible yang
sangat besar yang digunakan sebagai senjata dalam mempertahankan
koloni.
b. Kasta pekerja, kasta ini mempunyai warna tubuh yang pucat dengan
sedikit kutikula dan menyerupai nimfa. Kasta pekerja tidak kurang dari 80-
90 % populasi dalam koloni. Peranan kasta ini adalah bekerja sebagai
pencari makan, memberikan makan ratu rayap, membuat sarang dan
8
memindahkan makanan saat sarang terancam serat melindungi dan
memelihara ratu.
c. Kasta reproduktif, merupakan individu-individu seksual yang terdiri dari
betina yang bertugas bertelur dan jantan yang bertugas membuahi betina.
Ukuran tubuh ratu mencapai 5-9 cm atau lebih.
Dalam kehidupan rayap ada beberapa sifat penting yng perlu diperhatikan
menurut Iswanto (2005), yaitu:
a. Sifat trophalaxis, yaitu sifat rayap untuk berkumpul saling menjilat serta
mengadakan pertukaran bahan makanan.
b. Sifat cryptobiotic, yaitu sifat rayap yang menjauhi cahaya.
c. Sifat canibanism, yaitu sifat rayap untuk memakan individu sejenis yang
lemah atau sakit. Sifat ini lebih menonjol dalam keadaan kekurangan
makanan.
d. Sifat necrophagy, yaitu sifat rayap untuk memakan bangkai sesamanya
Tambunan dan Nandika (1989) dalam Iswanto (2005).
Jenis-jenis rayap kayu di Indonesia termasuk dalam famili Kalotermitidae,
Rhinotermitidae, dan Termitidae menurut Iswanto (2005) dapat dijelaskan sebagai
berikut:
a. Famili Kalotermitidae
Jenis-jenis rayap ini merupakan jenis rayap yang paling primitif.
Koloninya tidak terdapat kasta pekerja. Tugas mengumpulkan makanan
dan merawat sarang dilakukan oleh larfa dan nimfa yang telah tua. Cara
hidupnya di bagi atas 3 golongan :
Rayap kayu lembab (Glyptoternes spp).
Rayap pohon (Neotermes spp).
Rayap kayu kering (Cryptotermes spp).
9
b. Famili Rhinotermitidae
Famili ini mempunyai sarang di bawah atau di atas tanah. Jenis-jenis yang
terpenting adalah Coptotermes curvignathus dan Coptotermes travian.
Organisasi dari famili ini sedikit lebih maju dari famili Kalotermitidae.
c. Famili Termitidae
Famili ini memiliki organisasi yang lebih sempurna dari famili
Kalotermitidae. Rayap ini kebanyakan hidup di dalam tanah. Genus yang
terkenal antara lain Odontotermes, Microtermes, Macrotermes.
Ada dua kelompok rayap yang lazim menyerang kayu. Kelompok pertama
adalah rayap kayu kering dan kelompok kedua adalah rayap tanah atau
subteranean termites. Kedua kelompok tersebut memerlukan kondisi lingkungan
yang berbeda beda bagi perkembangan dan pertumbuhannya.
Berdasarkan lokasi sarang utama atau tempat tinggalnya, rayap perusak kayu
dapat digolongkan dalam tipe-tipe berikut menurut Kadarsah (2005):
a. Rayap pohon, yaitu jenis-jenis rayap yang menyerang pohon yang masih
hidup, bersarang dalam pohon dan tak berhubungan dengan tanah.
Contoh yang khas dari rayap ini adalah Neotermes tectonae (famili
Kalotermitidae), hama pohon jati.
b. Rayap kayu lembab, menyerang kayu mati dan lembab, bersarang dalam
kayu, tak berhubungan dengan tanah. Contoh : Jenis-jenis rayap dari
genus Glyptotermes (Glyptotermes spp, famili Kalotermitidae).
c. Rayap kayu kering, seperti Cryptotermes spp. (famili Kalotermitidae),
hidup dalam kayu mati yang telah kering. Hama ini umum terdapat di
rumah-rumah dan perabot-perabot seperti meja, kursi dsb. Tanda
serangannya adalah terdapatnya butir-butir ekskremen kecil berwarna
kecoklatan yang sering berjatuhan di lantai atau di sekitar kayu yang
diserang. Rayap ini juga tidak berhubungan dengan tanah, karena
habitatnya kering.
d. Rayap subteran, yang umumnya hidup di dalam tanah yang mengandung
banyak bahan kayu yang telah mati atau membusuk, tunggak pohon baik
yang telah mati maupun masih hidup. Di Indonesia rayap subteran yang
paling banyak merusak adalah jenis-jenis dari famili Rhinotermitidae.
Terutama dari genus Coptotermes (Coptotermes spp) dan
10
Schedorhinotermes. Perilaku rayap ini mirip rayap tanah seperti
Macrotermes namun perbedaan utama adalah kemampuan Coptotermes
untuk bersarang di dalam kayu yang diserangnya, walaupun tidak ada
hubungan dengan tanah, asal saja sarang tersebut sekali-sekali
memperoleh lembab, misalnya tetesan air hujan dari atap bangunan yang
bocor. Coptotermes pernah diamati menyerang bagian-bagian kayu dari
kapal minyak yang melayani pelayaran Palembang-Jakarta. Coptotermes
curvignathus Holmgren sering kali diamati menyerang pohon Pinus
merkusii dan banyak meyebabkan kerugian pada bangunan.
e. Rayap tanah. Jenis-jenis rayap tanah di Indonesia adalah dari famili
Termitidae. Mereka bersarang dalam tanah terutama dekat pada bahan
organik yang mengandung selulosa seperti kayu, serasah dan humus.
Contoh-contoh Termitidae yang paling umum menyerang bangunan
adalah Macrotermes spp. (terutama M. gilvus), Odontotermes spp dan
Microtermes spp. Jenis-jenis rayap ini sangat ganas, dapat menyerang
obyek-obyek berjarak sampai 200 meter dari sarangnya. Untuk mencapai
kayu sasarannya mereka bahkan dapat menembus tembok yang tebalnya
beberapa cm, dengan bantuan enzim yang dikeluarkan dari mulutnya.
Macrotermes dan Odontotermes merupakan rayap subteran yang sangat
umum menyerang bangunan di Jakarta dan sekitarnya.
Rayap termasuk ke dalam Ordo Isoptera yang terdiri atas enam family, yaitu
Mastotermitidae, Kalotermitidae, Hodotermitidae, Rhinotermitidae,
Serritermitidae, dan Termitidae. Rayap mampu mendegradasi selulosa karena
pada saluran pencernaannya terdapat mikroorganisme simbion seperti bakteri dan
protozoa. Bakteri simbion yang paling banyak ditemukan pada usus belakang
rayap pekerja C. curvignathus Holmgren yakni dari genera Flavobacterium dan
Enterobacter (Antriana, 2014).
Seperti pada rumen ruminansia, keberadaan mikroorganisme di dalam usus
rayap merupakan suatu bentuk interaksi yang menguntungkan (simbiosis
mutualisme). Rayap memberikan perlindungan berupa tempat yang anaerob dan
makanan bagi mikroorganisme. Di lain pihak mikroorganisme menyumbang
11
enzim selulase untuk pencernaan rayap. Namun masing-masing mikroorganisme
mempunyai peran yang berbeda dalam mencerna selulosa tergantung kepada kelas
rayap, dimana mikroorganisme tersebut berdiam. Pada rayap kelas tinggi bakteri
menjadi mikroba dominan dalam mencerna pakan (Antriana, 2014).
Saluran pencernaan rayap terdiri atas usus depan, usus tengah, dan usus
belakang. Usus belakang merupakan tempat bagi sebagian besar simbion Rayap
bergantung pada mikroorganisme usus untuk pencernaan selulosanya.
Mikroorganisme yang bersimbiosis dalam usus rayap memainkan fungsi fisiologis
utama seperti pencernaan selulosa dan hemiselulosa, asetogenesis, hidrogenesis,
metanogenesis, reduksi sulfat, dan fiksasi nitrogen. Selain itu, mikroba usus
menciptakan kondisi yang sesuai untuk bersimbiosis melalui produksi nutrisi dan
pemeliharaan pH serta kondisi anaerobik dalam usus (Antriana, 2014).
2.4 Bioetanol
Bioetanol merupakan bahan bakar yang bersih, hasil pembakaran
menghasilkan CO2 dan H2O. Penambahan bahan yang mengandung oksigen pada
sistem bahan bakar akan mengurangi emisi gas CO yang sangat beracun dari sisa
pembakaran. Aditif Methyl Tertiary Buthyl Ether (MTBE) pada mulanya
dipergunakan untuk meningkatkan nilai oktan, namun saat ini dilarang
dipergunakan. MTBE dapat dideteksi dan menyebabkan pencemaran pada air
tanah sehingga alkohol merupakan alternatif yang menarik untuk mengurangi
emisi gas CO (Shintawaty, 2006).
12
Bioetanol merupakan etanol yang diperoleh melalui proses fermentasi biomassa
dengan bantuan mikroorganisme. Selain bioetanol dikenal pula gasohol, yang
merupakan campuran bioetanol dengan premium. Misalnya gasohol E10
mengandung bioetanol 10% dan sisanya premium. Bioetenol yang mengandung
35% oksigen dapat meningkatkan efesiensi pembakaran dan mengurangi emisi
gas rumah kaca. Keuntungan lain dari bioetanol adalah nilai oktannya lebih tinggi
dari premium sehingga dapat menggantikan fungsi bahan aditif seperti MTBE dan
Tetraethyl Lead (TEL). Bioetanol dapat langsung dicampur dengan premium pada
berbagai komposisi sehingga dapat meningkatkan efesiensi dan emisi gas buang
yang lebih ramah lingkungan (Anggoro, 2009).
Pada dasarnya bioetanol dapat diperoleh dari alam. Misalnya dari tumbuhan
dan makanan yang mengandung selulosa dan pati. Tanaman yang mengandung
selulosa misalnya pada tanaman eceng gondok, jerami padi, rumput, kayu, dan
lain sebagainya. Kemudian dari makanan yang mengandung pati misalnya ubi-
ubian (Amata, 2009). Dari bahan-bahan tersebut dapat digunakan untuk
memperoleh bioetanol dengan cara fermentasi menggunakan mikroorganisme
yang mampu memproduksi bioetanol.
13
kondisi yang tepat. Waktu retensi adalah waktu yang menunjukkan berapa lama
suatu senyawa dapat melewati kolom (Panangan, 2011).
Fase diam pada kromatografi gas dapat berupa zat padat yang dikenal sebagai
kromatografi gas-padat (GSC) dan zat cair sebagai kromatografi gas-cair (GLC).
Keduanya hampir sama kecuali dibedakan dalam hal cara kerjanya. Pada GSC
pemisahan dilakukan berdasarkan adsorpsi sedangkan pada GLC berdasarkan
partisi. Kromatografi gas digunakan untuk analisa kualitatif terhadap cuplikan
yang komponen-komponennya dapat menguap (Panagan, 2011).
Recorde /
Tempat memasukan
sampel perekam
(Komputer)
Tekanan detektor
gas
Laju Alir
gas Tempat
mengatur suhu
Tempat gas
oven
Kolom
14
BAB III
METODOLOGI
3.1 Alat
Alat utama yang digunakan pada penelitian ini adalah: alat glass beaker,
pengaduk kaca, neraca analitik (AND GR-200), pompa vakum (Buchi Var-V 500),
oven (Memmert), pH-meter (Horiba pH meter F-52), mikropipet (Eppendorf
Research),dan furnace. Alat yang digunakan untuk analisis GC (BUCK
Scientific).
3.2 Bahan
Bahan utama yang digunakan pada penelitian ini adalah : Eceng gondok,
H2SO4 (Merck), CuSO4 (Merck), CH3COOH (Merck), CH3COONa (Merck), KI
(Merck), Amilum (Merck), Akuades, Na2S2O35 H2O (Merck).
15
ada/tanpa penambahan larutan buffer (10 g eceng gondok dalam 500 ml buffer
asetat).
3.3.3 Filtrasi
Tahap berikutnya adalah menyaring hidrolisat yang diperoleh dengan
dibantu oleh kerja pompa vakum. Analisa dilakukan di awal maupun diakhir.
16
e. Dikeringkan hingga berat konstan (berat c).
f. Ditambahkan 100 ml H2SO4 72 % dan membiarkan selama 4 jam pada
suhu kamar. Menambahkan 150 ml H2SO4 1 N dan merefluks pada suhu
100oC selam 1 jam.
g. Disaring dan padatan dicuci dengan aquadest sampai netral,
mengeringkan di dalam oven pada suhu 105oC selama 24 jam sampai
diperoleh berat konstan (berat d).
h. Selanjutnya diabukan di dalam tanur pada suhu 800oC selama 8 jam.
i. Didinginkan dalam eksikator dan menimbangnya (berat e).
cd
selulosa= x 100
a
de
Lignin= x 100
a
3.3.6 Fermentasi
a. 1 gram eceng gondok dicampur dengan buffer asetat pH 4,6 sebanyak 50
mL dalam labu alas bulat.
b. Ditambahkan 3 ekor rayap yang sudah digerus, dan ditambahkan 1gram
ragi.
c. Ditutup labu alas bulat dengan plastik wrap dan diberi sedikit lubang.
d. Dimasukan labu kedalam tempat gelap dan biarkan selama 2 jam.
3.3.7 Penyulingan
Untuk mendapatkan etanol hasil fermentasi perlu dilakukan pemisahan
yaitu dengan cara penyulingan atau distilasi pada suhu 80oC dan suhu ini harus
dipertahankan, karena etanol sendiri menguap pada suhu tersebut. Uap etanol
yang dihasilkan kemudian dikembalikan ke fase cair dengan cara kondensasi
sehingga didapatkan etanol.
3.3.8 Pengujian Kadar Etanol Dengan Gas Cromatography
a. Alat dinyalakan dan ditunggu hingga 10-15 menit.
b. Dipipet standar etanol 1% dengan alat syrine lalu dimasukan ke alat
injeksi GC dan menekan tombol sambil menunggu pembacaan kadar
etanol pada komputer.
17
c. Hal sama dilakukan untuk sampel tersebut.
BAB IV
HASIL DAN PEMBAHASAN
lokasi
18
Setelah mengambil eceng gondok di Kali Kuning, eceng gondok
dibersihkan dan dicacah kecil-kecil. Kemudian setelah tercacah direndam selama
3 hari dengan air bersih dan air cucian diganti setiap 24 jam. Setelah 3 hari eceng
gondok dapat dijemur sampai kering atau langsung dioven untuk menghilangkan
kadar air maupun zat organik lain yang dapat menguap pada suhu 100 oC.
Pengeringan dengan oven dilakukan sampai kira-kira sampel kering dan siap
untuk dihancurkan menjadi lebih kecil dengan blender. Setelah kering eceng
gondok dihancurkan sampai benar-benar halus.
19
4 1,00 150 60 9,70 11,00 0,24
5 1,00 170 30 10,00 11,00 0,24
6 1,00 170 60 10,50 11,00 0,24
4.3 Standardisasi Na2S2O3
Tahap sebelum melakukan penentuan kadar gula yaitu standardisasi.
Standardisasi bertujuan untuk menentukan konsentrasi titran yang sebenarnya.
Standardisasi dilakukan ketika titran tersebut akan dipakai. Biasanya hasil
standardisasi dipakai dalam perhitungan, tetapi untuk penelitian ini standardisasi
digunakan untuk menentukan kelayakan larutan standar Na 2S2O3 karena hasil
standardisasi digunakan untuk mengkonversi volume titrasi menjadi kadar gula
invers. Konsentrasi Na2S2O3 didapat adalah 0,1015 N. Hasil tersebut mendekati
nilai teoritis 0,1 N seingga larutan Na2S2O3 masih baik dan layak untuk digunakan.
Tabel 4.2 Hasil Standardisasi Na2S2O3
No Massa KBrO3 (g) Massa KI (g) V titrasi (mL) N Na2S2O3 (N)
1 0,0071 0,5001 2,0 0,1063
2 0,0071 0,5002 2,2 0,0966
X 0,1015
20
Analisis gula dengan metode Luff Schoorl menggunakan variasi waktu 30
dan 60 menit, dengan variasi suhu 120oC, 150oC, dan 170oC. Hasil yang didapat
dapat dilihat tabel dan grafik berikut:
0.6
0.5
0.48
0.4
0.1
0
120 150 170
Suhu (oC)
Gambar 4.3 Grafik kadar gula berdasarkan variasi waktu dan suhu.
Dari grafik diatas dapat dilihat bahwa hasil yang paling optimum yaitu
pada waktu 30 menit dengan suhu 120oC yaitu dengan kadar gula 0,48%. Hasil
tersebut didapat dengan menimbang massa sampel 1 gram. Hasil pengamatan
yang telah dilakukan pada saat analisis gula yaitu ada beberapa faktor yang
mempengaruhi hasil karena analisisi ini menggunakan metode titrasi balik. Faktor
yang mempengaruhi hasil anatara lain yaitu: pereaksi Luff Schoorl, proses
reduksi, dan indikator. Pereaksi yang digunakan harus diketahui terlebih dahulu
21
konsentrasi logam yang ada dalam pereaksi karena dapat mempengaruhi hasil
titrasi. Proses reduksi juga dapat mempengaruhi hasil titrasi pada saat pemanasan,
suhu yang digunakan harus diawasi terus menerus. Kemudian indikator yang
dikunakan harus dalam keadaan baru, karena sifat indikator amilum yang tidak
bertahan lama.
22
suatu mikroorganisme yaitu S. cerevisiae. Mikroorganisme yang nantinya akan
memproduksi gula menjadi etanol.
Setelah diperoleh hasil yaitu dari perlakuan hidrotermal dan analisis lignin
dan selulosa, dipilih rayap untuk mendegradasi ligninselulosa didalam sampel,
sehingga kandungan gula menjadi semakin lebih besar. Dalam penelitian ini juga
jumlah rayap kita variasi, pada saat melakukan variasi, jenis dan tempat rayap kita
ambil di tempat yang sama dalam waktu yang sama. Proses fermentasi yang
dilakukan harus dalam ruang yang gelap, karena mikroorganisme Sporocytophaga
sp dan Staphyococcus sp dalam usus rayap akan bekerja pada ruang gelap. Karena
kadar gula yang semakin tinggi menghasilkan bioetanol semakin banyak.
Untuk fermentasinya digunakan ragi tape dan untuk merubah selulosa
menjadi glukosa, pada penelitian ini memanfaatkan enzim selulase yang ada
diusus rayap. Ragi tape akan mengubah senyawa gula menjadi senyawa alkohol,
salah satunya adalah etanol. Hasil fermentasi ragi yang paling banyak adalah
etanol dibandingkan dengan alkohol lain. Dapat kita lihat juga ketika manusia
mengkonsumsi tape, apabila ragi tersebut menghasilkan metanol, maka orang
yang mengkonsumsi akan keracunan dan untuk kadar tertentu dapat menyebabkan
mabuk darat. Reaksi yang terjadi yaitu:
sporocytophaga sp
+
enzim selulase
+
ragi
+ NH3 + H2O + H
etanol
23
Pada reaksi di atas, pembentukan selulosa terjadi ketika ditambahkan
rayap yang telah digerus. Bakteri pada rayap yitu Sporocytophaga sp dan
Staphyococcus sp mendegradasi lignin selulosa sehingga menghasilkan produk
selulosa. Selulosa yanng telah dihasilkan oleh Sporocytophaga sp dan
Staphyococcus sp kemudian di belah lagi menjadi glukosa oleh enzim selulase
yang ada dalam usus rayap kemudian difermentasi oleh ragi menjadi etnol.
Produk yang dihasilkan oleh ragi tidak hanya etanol, banyak produk sampingnya
seperti gas NH3, gas H2, dan air.
Dalam melakukan fermentasi, penelitian ini memfariasi waktu fermentasi dan
jumlah rayap untuk fermentasi. Tujuannya untuk mengetahui waktu dan jumlah
rayap optimum. Variasi waktu yang digunakan yaitu 1, 2, 3, dan 5 jam ,
sementara untuk veriasi rayap yaitu 3, 4, 5 dan 7 ekor rayap. Berikut hasil dari
penelitian yang telah dilakukan:
4.6.1 Hasil Fermentasi dengan Variasi Waktu
Tabel 4.4 Hasil fermentasi berdasarkan variasi waktu
N Luas keterang Kadar Massa Jumla Waktu
o area an etanol rayap h fermenta
sampel (%) berdasark rayap si (jam)
an jumlah
rayap (g)
1 9643,28 Standar 1,0000 - - -
26 0
2 251,456 Sampel 3 0,0074 0,0462 5 2
4 8
3 347,553 Sampel 5 0,0360 0,0462 5 1
2 0
4 45,5671 Sampel 6 0,0047 0,0462 5 3
3
5 52,5399 Sampel 7 0,0054 0,0462 5 5
5
24
0.04
0.04 0.04
0.03
0.03
0.02
kadar etanol %
0.02
0.01
0.01
0.01 0 0.01
0
0.5 1 1.5 2 2.5 3 3.5 4 4.5 5 5.5
waktu (jam)
Dilihat dari hasil yang didapatkan yaitu waktu optimum untuk fermentasi
adalah 1 jam dengan perolehan % etanol 0,0036. Hasil tersebut menunjukan
bahwa waktu sangat berpengaruh terhadap hasil fermentasi. Hasil yang memiliki
perbedaan secara signifikan berdasarkan waktu fermentasi. Etanol adalah suatu
senyawa yang volatil pada suhu ruang, sehingga ketika waktu fermentasi yang
digunakan terlalu lama, etanol yang telah dihasilkan dapat menguap karena sifat
dasarnya yaitu volatil. Jumlah rayap yang digunakan dalam variasi waktu adalah 5
ekor rayap.
25
0.04
0.03 0.03
0.02
kadar etanol %
0.01
0.01 0.01
0.01
0
0.02 0.02 0.03 0.03 0.04 0.04 0.05 0.05 0.06 0.06
Massa rayap (g)
26
FID karena sampel di dalam kolom akan mengalami ionisasi dengan terbakarnya
sampel didalam kolom.
27
BAB V
KESIMPULAN DAN SARAN
5.1 Kesimpulan
Berdasarkan hasil penelitian yang telah dilakukan dapat disimpulkan bahwa
kadar etanol tertinggi adalah 0,036% dengan waktu fermentasi 1 jam, dan jumlah
rayap optimumnya yaitu 0,0568 gram dengan kadar etanol yang dihasilkan
0,0299%.
5.2 Saran
Perlu dilakukan penelitian lagi untuk menentukan pH, suhu, waktu optimum
dalam perlakuan hidrotermal dan menentukan jumlah ragi untuk fermentasi.
28
DAFTAR PUSTAKA
Ahmad, R. Z. (2005). Pemanfaatan khamir Saccharomyces cerevisiae untuk
ternak. Wartazoa, 15(1), 49-55.
Hambali, E., Mujdalifah, S., Tambunan, A. H., Pattiwiri, A. W., & Hendroko, R.
(2007). Teknologi bioenergi. AgroMedia.
Hasanah, A. N., Nazaruddin, F., Febrina, E., & Zuhrotun, A. (2011). Analisis
kandungan minyak atsiri dan uji aktivitas antiinflamasi ekstrak rimpang
kencur (Kaempferia galanga L.). Jurnal Matematika & Sains, 16(3), 147-152.
Lela Lailatul, K., Kadarohman, A., & Eko, R. (2010). Efektivitas biolarvasida
ekstrak etanol limbah penyulingan minyak akar wangi (Vetiveria zizanoides)
terhadap larva nyamuk Aedes aegypti, Culex sp., dan Anopheles
sundaicus. Jurnal Sains dan Teknologi Kimia, 1(1), 59-65.
29
Mahmilia, F. E. R. A. (2014). Perubahan nilai gizi tepung eceng gondok
fermentasi dan pemanfaatannya sebagai ransum ayam pedaging. JITV, 19(3).
McNair, H. M., & Bonelli, E. J. (1988). Dasar Kromatografi Gas. ITB, Bandung.
Panagan, A. T., Yohandini, H., & Gultom, J. U. (2011). Analisis kualitatif dan
kuantitatif asam lemak tak jenuh omega-3 dari minyak ikan patin (Pangasius
pangasius) dengan metoda kromatografi gas. Jurnal Penelitian Sains, 14(4),
38-42.
Ratnani, R. D., Hartati, I., & Kurniasari, L. (2013). Pemanfaatan Eceng Gondok
(Eichornia Crassipes) Untuk Menurunkan Kandungan COD (Chemical
Oxygen Demond), Ph, Bau, Dan Warna Pada Limbah Cair Tahu. LAPORAN
PENELITIAN DAN PENGABDIAN MASYARAKAT.
Subekti, N., Duryadi, D., Nandika, D., Surjokusumo, S., & Anwar, S. (2008).
SEBARAN DAN KARAKTER MORFOLOGI RAYAP TANAH Macrotermes
gilvus Hagen DI HABITAT HUTAN ALAM (Distribution and Morphology
Characteristic of Macrotermes gilvus Hagen in The Natural Habitat). Jurnal
Ilmu dan Teknologi Hasil Hutan, 1(1), 27-33.
Supriyati, T. P., Hamid, H., & Sinurat, A. (1998). Fermentasi bungkil inti sawit
secara substrat padat dengan menggunakan Aspergillus niger. JITV, 3(3),
165-170.
Tanti, Y. A., Jayanti, Y. R., Prima, K. A., & Girisuta, B. (2011). Fermentasi
hidrolisat eceng gondok menjadi bioetanol menggunakan Pichia stipitis. In
Prosiding Seminar Nasional Teknik Kimia Kejuangan.
30
Tarumingkeng, R. C. (2001). Biologi dan perilaku rayap. Program Studi Ilmu
Hayati Institut Pertanian Bogor, Bogor(diakses online dari www. rudyct.
com/biologi_perilaku_rayap. htm).
Wachid, M. (2013). Potensi Bioethanol Dari Limbah Kulit Ari Kedelai Limbah
Produksi Tempe. Jurnal Gamma, 6(2).
Widiastuti, D., & Pramesti, E. (2013). Proses Pembuatan Anggur dari Buah
Rambutan. Fakultas Teknik. Jurusan Teknik Kimia. Universitas Diponogoro.
Tembalang.
31
LAMPIRAN
ANALISA DATA
m KBr O 3
N Na2S2O3 = BE KBr O3 x V Na 2 S 2 O3
7,1 mg
mg
= 167 mmol
x 2,1 mL
5
=0,1012N
32
Lampiran 2. Analisis Gula Metode Luff Schrool
No Massa Suhu Waktu Volume Volume Kadar
eceng (oC) (menit) Titrasi titrasi gula
gondok Sampel Blanko (%)
(g) (mL) (mL)
1 1,00 120 30 9,50 11,00 0,48
2 1,00 120 60 10,00 11,00 0,24
3 1,00 150 30 10,10 11,00 0,24
4 1,00 150 60 9,70 11,00 0,24
5 1,00 170 30 10,00 11,00 0,24
6 1,00 170 60 10,50 11,00 0,24
0.6
0.5
0.48
0.4
0
120 150 170
Suhu (oC)
33
Lampiran 3. Tabel Konversi Gula Invers
Na2S2O3 0,1N Glukosa, fruktosa Laktosa (mg) Maltosa (mg)
(ml) gula invers (mg)
1 2,4 3,6 3,9
2 4,8 7,3 7,8
3 7,2 11,0 11,7
4 9,7 14,7 15,6
5 12,2 18,4 19,6
6 14,7 22,1 23,5
7 17,2 25,8 27,5
8 19,8 29,5 31,5
9 22,4 33,2 35,5
10 25,0 37,0 39,5
11 27,6 40,8 43,5
12 30,3 44,6 47,5
13 33,0 48,4 51,6
14 35,7 52,2 55,7
15 38,5 56,0 59.8
16 41,3 59,9 63,9
17 44,2 63,8 68,0
18 47,1 67,7 72,2
19 50,0 71,1 76,5
20 53,0 75,1 80,9
21 56,0 79,8 85,4
22 59,1 83,9 90,0
23 62,2 88,0 94,6
34
Lampiran 4. Analisis selulosa dan lignin
( 1,00370,2110 ) g
%selulosa= x 100
1,000 g
%selulosa=79,27
( 0,21100,0075 ) g
%lignin= x 100
1,000 g
%lignin=20,35
35
Lampiran 5. Kromtogram analisis GC
a. Kromatogram standar etanol 1 %
36
d. Kromatogram Sampel 2 dengan 7 ekor rayap
37
f. Kromatogram Sampel 4 dengan 4 ekor rayap
38
g. Kromatogram Sampel 5 dengan 1 jam fermentasi (5 ekor)
39
i. Kromatogram Sampel 7 dengan 5 jam fermentasi (5ekor)
40
Lampiran 6. Penentuan konsentrasi etanol dalam sampel
cstd x Aetanol
%etanol = Astd
0.04
0.04 0.04
0.03
0.03
0.02
kadar etanol %
0.02
0.01
0.01
0.01 0 0.01
0
0.5 1 1.5 2 2.5 3 3.5 4 4.5 5 5.5
waktu (jam)
41
Grafik kadar etanol (%) dengan perbedaan waktu.
0.04
0.03 0.03
0.03
0.02
kadar etanol % 0.02
0.01
0.01 0.01
0.01 0.01
0
2.5 3 3.5 4 4.5 5 5.5 6 6.5 7 7.5
jumlah rayap
42