DEDICATORIA

El presente trabajo va dedicado para todas las personas que

cuidan el medio ambiente y tambin es dedicada para personas que
por desconocimiento daan el medio ambiente sin querer.

En el presente trabajo de investigacin se hablara sobre la

biorremediacin y la contaminacin del medio ambiente, las causas,
las consecuencias, y todas las posibles soluciones que se les puede
dar a la contaminacin con ayuda de la biorremediacin
INDICE

INTRODUCCIN.............................................................................................................1
SUELO, SUBSUELO Y ACUIFERO...............................................................................2
QU ES EL SUELO? QU ES EL SUBSUELO?....................................................2
QU ES UN ACUFERO?..........................................................................................2
RESUMEN........................................................................................................................3
BIOREMEDIACION COMO TRATAMIENTO ALTERNATIVO..................................4
ORGANISMOS QUE INTERVIENEN EN LA BIORREMEDIACION.........................5
QUE TIPOS DE CONTAMINANTES SE PUEDE ELIMINAR POR LA
BIORREMEDIACION......................................................................................................7
TIPOS DE CONTAMINANTES Y SU BIODEGRADACIN....................................7
ESTRUCTURA QUMICA DE LOS CONTAMINANTES.........................................8
BIODEGRADACIN DE CONTAMINANTES..........................................................9
CONTAMINACIN.......................................................................................................10
CONTAMINACIN DEL SUELO, SUBSUELO Y LOS ACUFEROS...................10
LIMPIEZA DE SUELOS................................................................................................11
QU PUEDE HACERSE CON UN SUELO CONTAMINADO?............................11
BIORREMEDIACION....................................................................................................12
HISTORIA...................................................................................................................12
DEFINICION...............................................................................................................14
MICROORGANISMOS..........................................................................................15
FUNCION DE LA BIORREMEDIACION.................................................................16
PRINCIPIO DE LA BIORREMEDIACION...............................................................17
VENTAJAS Y DESVENTAJAS DE LA BIORREMEDIACION..............................17
PROCESOS DE LA BIOREMEDIACION.................................................................18
FACTORES DE INCIDEN EN LA BIOREMEDIACION.........................................19
a) FACTORES FISICOQUMICOS.....................................................................19
b) FACTORES AMBIENTALES..........................................................................21
c) FACTORES BIOLGICOS:............................................................................22
TIPOS DE BIORREMEDIACION.............................................................................23
DEGRADACIN.ENZIMTICA...........................................................................23
REMEDIACIN MICROBIANA...........................................................................24
REMEDIACIN CON PLANTAS (FITORREMEDIACIN)..............................25
 METODOLOGIAS DE TRATAMIENTO..................................................................27
TIPOS DE METODOLOGIAS...................................................................................28
TCNICA IN SITU:................................................................................................28
TCNICA EX SITU................................................................................................28
TIPOS DE TRATAMIENTO DE BIORREMEDIACION..........................................29
TRATAMIENTO ANAROBIO................................................................................29
TRATAMIENTO AEROBIO...................................................................................29
CAMPOS DE APLICACIN......................................................................................32
CONCLUSIONES...........................................................................................................33
BIBLIOGRAFIA.............................................................................................................34
 INTRODUCCIN

La biorremediacin es una tcnica para limpiar suelos contaminados de una forma muy
prctica ya que se usan a los mismos microorganismos que viven en el suelo y el
subsuelo. El suelo y el subsuelo estn constituidos por partculas inorgnicas, materia
orgnica, agua, aire y microorganismos.

La generacin de impactos ambientales adversos en los diferentes compartimentos

ambientales constitutivos de un entorno a causa de aportes intencionales y no
intencionales (incidentes y accidentes) con fugas y derrames de hidrocarburos, as como
afloramientos naturales, se constituyen en uno de los problemas ambientales ms
importantes para el recurso suelo (Verma et al., 2006). En la actualidad, de la evaluacin
de los suelos potencialmente contaminados, los que tienen presencia de hidrocarburos
representan cerca del 70% del total de los suelos potencialmente impactados (Cuevas,
2005). Los hidrocarburos son uno de los grupos de sustancias potencialmente
contaminantes ms importantes, por su abundancia, por su distribucin espacial en
entornos urbanos y por su persistencia en distintos sectores ambientales. (Vias, 2005).
Se considera que son los compuestos dominantes del crudo (petrleo) representando
entre el 50 y el 98% en peso del contenido total. Estos son mezclas complejas de
diferentes molculas, y pueden agruparse en 4 clases: saturados, hidrocarburos
aromticos, hidrocarburos asfltenos y resinas, en donde cada uno difiere
significativamente respecto a su susceptibilidad frente a posibles procesos de
biodegradacin (Colwell y Walker, 1977; Atlas, 1981). Para su mineralizacin, estos
compuestos requieren la accin de ms de una especie microbiana, pues cada
microorganismo individualmente tiene una capacidad limitada para degradar las
diferentes molculas que los conforman; por el contrario, los consorcios microbianos, al
estar compuestos por varias cepas de diferentes gneros, poseen la capacidad enzimtica
necesaria para transformar las diferentes molculas constitutivas de los hidrocarburos,
transformando las molculas con caractersticas de peligrosidad (inflamabilidad,
toxicidad, ecotoxicidad, volatilidad) en subproductos y metabolitos que pueden ser
reincorporados a los ciclos biogeoqumicos naturales, generando un menor impacto al
ambiente y a la salud humana (Mohamad F, et al., 2004).
La biorremediacin es una tecnologa que utiliza el potencial metablico de los
microorganismos (fundamentalmente bacterias, pero tambin hongos y levaduras) para
transformar contaminantes orgnicos en compuestos ms simples poco o nada
contaminantes, y, por tanto, se puede utilizar para limpiar terrenos o aguas
contaminadas (Glazer y Nikaido, 1995). Su mbito de aplicabilidad es muy amplio,
pudiendo considerarse como objeto cada uno de los estados de la materia (Atlas y
Unterman,)

1
 BIORREMEDIACION

SUELO, SUBSUELO Y ACUIFERO

Sabemos que en la actualidad hay mucha contaminacin en el aire, en los ros y lagunas,
y hasta el agua de lluvia se contamina antes de llegar al suelo. Tambin el suelo y el
subsuelo se contaminan.

QU ES EL SUELO? QU ES EL SUBSUELO?

El suelo es la primera capa que va desde la superficie del terreno hasta

aproximadamente 30 cm de profundidad y se define como:
Material compuesto por partculas inorgnicas, materia orgnica, agua, aire y
microorganismos. El subsuelo es la materia que est por abajo del suelo, y tiene
caractersticas muy parecidas a las del suelo.
El suelo y el subsuelo pueden estar formados por rocas muy slidas o por capas de
arenas, arcillas, limos, etc., que tienen caractersticas diferentes.

QU ES UN ACUFERO?

Si hacemos una excavacin observamos que el suelo est hmedo, pero en algunos
sitios, al excavar a ms profundidad, empieza a escurrir ms agua. Esto quiere decir que
el suelo est saturado; es decir, que entre los granitos de suelo hay agua, como se ve en
la figura.

2
Cuando el suelo est saturado, se tiene un acufero y entonces se pueden instalar pozos y
extraer agua para el uso de las personas. Esto es lo que se hace en la Ciudad de Mxico
y en muchas otras ciudades del pas.

RESUMEN

La demanda de mayores cantidades de combustibles, as como el desarrollo de nuevos

qumicos han conducido a la contaminacin de aire, suelos y acuferos en todo el
mundo, siendo una de las mayores preocupaciones actuales. Esto junto con la creacin
de leyes ambientales, son factores que han impulsado al tratamiento de contaminantes,
ms que a su disposicin. La contaminacin de suelos tradicionalmente se ha tratado de
solucionar con el uso de procesos fsico y qumicos. Sin embargo, estos pueden ser muy
costos o parcialmente efectivos.

Una alternativa ms econmica y ambientalmente ms segura, es el uso de mtodos

biolgicos (remediacin), en los cuales los contaminantes son destruidos o
transformados y generalmente no requieren de tratamientos adicionales. El
aprovechamiento de las habilidades bioqumicas de los micro-organismos, es la
estrategia actualmente ms popular para el tratamiento de suelos y acuferos
contaminados. Aunque no todos los compuestos orgnicos son biodegradables, los
procesos de biorremediacin se han usado con xito en suelos, lodos y sedimentos
contaminados con hidrocarburos, solventes, explosivos, pesticidas, herbicidas y
conservadores de madera. Si bien el uso de la biorremediacin puede implicar ciertos
riesgos, es importante conocerlos, para as reducirlos o evitarlos. El trabajo compara las
aplicaciones, limitaciones y costos de algunas de las tecnologas de biorremediacin in
situ y ex situ ms comunes.

3
BIOREMEDIACION COMO TRATAMIENTO ALTERNATIVO

Cualquier tecnologa de remediacin debe cumplir algunos de los siguientes objetivos

sobre los contaminantes:

Separarlos del suelo, agua u otro medio

Aislarlos o inmovilizarlos
Destruirlos

El aprovechamiento de las habilidades bioqumicas de los microorganismos, es la

estrategia actualmente ms popular para el tratamiento de suelos y acuferos
contaminados. Los microorganismos, ms que cualquier otro organismo tiene la
habilidad nica de interactuar qumica y fsicamente con una enorme variedad de
compuestos antropognicos y naturales, provocando cambios estructurales o su
completa degradacin. El termino biorremediacin se utiliza para describir una variedad
de sistemas que utilizan organismos vivos (plantas, hongos, bacterias, etc) para
degradar, transformar o remover compuestos orgnicos txicos a productos metablicos
menos txicos. Esta estrategia depende de las actividades catablicas de los organismos
y por consiguiente de la utilizacin de los contaminantes como fuente de alimento y
energa.

La biorremediacin puede emplear organismos autctonos (nativos del sitio) o exgenos

(de otros sitio), y puede realizarse in situ o ex situ en condiciones aerobias o anaerobias.

Aunque no todos los compuestos orgnicos son susceptibles a la biodegradacin, los

procesos de biorremediacin se han usado con xito para tratar suelos, lodos y
sedimentos contaminados con hidrocarburos del petrleo, solventes, clorofenoles,
pesticidas, conservadores de madera e hidrocarburos aromticos policclicos.

La meta final de la biorremediacin es la mineralizacin del contaminante. La

mineraliz.

4
ORGANISMOS QUE INTERVIENEN EN LA BIORREMEDIACION

Se pueden emplear diversos organismos en los procesos de biorremediacin. Los mas

usados son los microorganismos (tanto bacterias, como algas y hongos) y las plantas (en
procesos llamados fitorremediacion), pero tambin se pueden utilizar otros seres vivos
tales como los nematodos (vermiremediacion)

Se han identificado bacterias que podran usarse para remover residuos de pesticidas del
suelo.

Tambin se emplean bacterias como detectores de solucin y para el monitoreo de

residuos txicos. Estos biosensores bacterianos permiten medir los niveles de toxicidad
en muestras de agua y tierra.

Existe la posibilidad de usar plantas modificadas genticamente (GM) junto con

bacterias para remediar residuos persistentes, tales como los residuos de explosivos.

Un elevado nmero de bacterias existen naturalmente en los suelos y sitios destinados a

los residuos. Algunas de ellas degradan lentamente los diferentes tipos de
contaminantes.

Todos los organismos vivos ya sean bacterias, levaduras, plantas o animales, comparten
una serie de caractersticas comunes. Todas ellas, con la excepcin de los virus, tienen
una composicin comn que contiene: cido desoxirribonucleico (ADN), cido
ribonucleico (ARN), y protenas.

La molcula de ADN es la que fabrica los genes, los cuales a su vez contienen toda la
informacin requerida para la fabricacin y el control de los organismos. La
informacin contenida en el ADN es transferida al resto de los genes justo para actuar

5
como una informacin almacenada en un disco de computadora y que tiene que ser
leda. El flujo de informacin desde el ADN al resto de la clula est controlado por
molculas de ARN, las cuales eventualmente se dirigen a la sntesis de protenas, las
cuales, como componentes estructurales
o como enzimas, dirigen y controlan muchas de las funciones que tiene el organismo. El
proceso de transferencia de informacin gentica de las molculas de ADN a las de
ARN se conoce como transcripcin y la transferencia de informacin de las molculas
de ARN a las protenas se conoce como translacin

Los procesos de biorremediacin requieren de un conocimiento general sobre la vida del

o los microorganismos que van a participar en el proceso de limpieza. Desde el punto de
vista prctico, y en un intento por facilitar el entendimiento de la aplicacin de
microorganismos en los proceso de biorremediacin, se dice que el estudiante debe
conocer el currculum vitae del microorganismo, el cual se aprecia en la Figura 2 del
crecimiento microbiano.

6
QUE TIPOS DE CONTAMINANTES SE PUEDE ELIMINAR POR LA
BIORREMEDIACION

Todos aquellos contaminantes que puedan ser degradados o transformados por los seres
vivos son susceptibles de ser eliminados mediante procesos debiorremediacin. Los
compuestos orgnicos suelen ser degradados total o parcialmente y eliminados por
completo del ecosistema. Por ejemplo, compuestos contaminantes tales como el
tolueno, el fenol o los polibifenilos clorados (PCBs) pueden ser utilizados como fuente
de carbono por bacterias, tanto en condiciones aerbicas como anaerbicas. Bacterias de
los gneros Pseudomonas, Ralstonia, Burkholderia o Mycobacterium pueden eliminar
hidrocarburos aromticos como el tolueno o el naftaleno, pesticidas como las atrazinas,
aditivos de la gasolina como el tricloruro de etilo o sustancias venenosas como el
cianuro potsico, tanto de ambientes slidos (suelos) como lquidos.
Pero, adems muchas bacterias son capaces de modificar sustancias qumicas
peligrosas, transformndolas en otras menos txicas. As, algunas bacterias pueden
reducir la biodisponibilidad (hacerla menos accesible y por tanto menos txica) de
metales pesados tales como el mercurio, el arsnico, el cromo, el cadmio, el zinc o el
cobre. Los mecanismos por los cuales las bacterias son capaces de degradar o
transformar estas sustancias sern captulo de un prximo artculo.

TIPOS DE CONTAMINANTES Y SU BIODEGRADACIN

Los compuestos qumicos pueden clasificarse en orgnicos e inorgnicos. Los primeros,

se componen bsicamente de molculas con una elevada proporcin de carbono, y
pueden ser de origen atropogenico o natural. Los compuestos inorgnicos, en cambio,
no contienen tomos de carbono ( con excepcin del cianuro) Y comnmente incluyen

7
metales(Sellers, 1999). Los contaminantes orgnicos, pueden clasificarse a su vez en
seis grupos:

1) Compuestos orgnicos voltiles (COVS) no halogenados;

2) COVS halogenados;
3) Compuestos orgnicos semivolatiles (COSS) no halogenados
4) COSS halogenados
5) Combustibles
6) Explosivos (Van Deuren, 1997).

Independientemente de la naturaleza del compuesto, su estructura qumica determina su

prioridad, solubilidad, volatilidad y capacidad para reaccionar con otras sustancias. Por
consiguiente, las propiedades del contaminante, determinan la tecnologa de
biorremediacin a utilizar (Sellers, 1999).

La transformacin de un contaminante puede ocurrir como resultado de un proceso

fsico, qumico o biolgico. Los procesos de transformacin ms importantes en el
suelo, incluyen la biodegradacin, la pudricin natural, la degradacin natural y la
degradacin qumica (reacciones fotoqumicas, de oxidacin-reduccin y de hidrolisis)
(Col, 1998)para los fines de esta revisin , solamente se presentan las reacciones de
transformacin biolgicas.

ESTRUCTURA QUMICA DE LOS CONTAMINANTES

La estructura qumica de un contaminante puede afectar su biodegradacin en dos

sentidos : (i) la molcula puede contener grupos o sustituyentes que no pueden
reaccionar con las enzimas presentes (ii) la estructura puede ser tal , que el compuesto
se encuentre en un estado fsico en el que la biodegradacin no ocurra fcilmente (riser-
roberts, 1998).a continuacin se resumen algunas generalizaciones (vlidas para
sistemas aerobios) acerca de la influencia de la estructura en un contaminante en su
biodegradabilidad (Alexander,1994 y col, 1997)

El aumento en el tamao, peso molecular y complejidad en la estructura de un

compuesto, provoca una disminucin en la velocidad de degradacin. El aumento en el
numero anillos aromticos disminuye la biodegradabilidad del compuesto.

El tipo de sustituyentes en una molcula afecta su biodegradabilidad.

Compuestosorgnicos normalmente mineralizarles, pueden volverse parcial o

8
completamente resistentes a esta, por la presencia de sustituyentes llamados xenfobos
(CI, NO2 SO3H, Br,CN o CF3).Por otra parte, la presencia de OH , COOH , o grupos
funcionales como amidas, esteres o anhdridos , pueden estimular la degradacin.

La posicin y nmero de xenfobos en la molcula tiene una fuerte influencia en la

degradacin. La presencia de ramificaciones de asocia con la presencia de hidrocarburos
y alcoholes alifticos y otros qumicos. Generalmente, las molculas no ramificadas son
ms biodegradables.

BIODEGRADACIN DE CONTAMINANTES

Las rutas de biodegradacin de los contaminantes orgnicos, varan en funcin de la

estructura qumica del compuesto y de las especies microbianas degradadoras. El
proceso de biorremediacin incluye reacciones de xido reduccin, procesos de sorcion
e intercambio inico, y reacciones de acomplejamiento y quelacion que resultan en la
inmovilizacin de metales (Ewis y col, 1998)

En algunos casos, los producto de la biodegradacin, son ms reactivos para

transformaciones subsecuentes y pueden ser mineralizados, mientras que otros son
susceptibles a unirse con la materia orgnica del suelo quedando inaccesibles (semple y
col...2001). para ciertos qumicos es posible tambin una transformacin muy diferentes
a la mineralizacin el cometabolismo. Durante este proceso, los microorganismos
utilizan como fuente de carbono y energa y compuesto, produciendo enzimas capaces
de transformas bioqumicamente otro compuesto sobre el cual no pueden crecer
(Alexander, 1981).

Un contaminante puede ser degradado a productos intermedios o finales que pueden ser
menos, igual o mstxicos que el contaminante original (semple y col., 2001). Sin
embargo, el papel ms importante de los microorganismos en la transformacin de un
contaminante, es su habilidad para producir su detoxificacion. La detoxificacion de un
compuesto, se refiere a un cambio estructural que lo haga menos peligroso hacia una o
ms especies susceptibles (humanos, animales, plantas u otros microorganismos). A
continuacin se mencionan y describen brevemente algunos de los procesos que pueden
conducir la detoxificacion de un contaminante (Alexander, 1994)

9
Hidrolisis: la ruptura de un enlace por adicin de agua, es una va enzimtica comn
para la inactivacin de compuestos txicos.

Hidroxilacion: la insercin de un grupo OH en molculas aromticas o alifticas puede

disminuir su toxicidad

Deshalogenacion: muchos pesticidas y desechos industriales nocivos contienes cloro u

otros halgenos. La remocin del halgeno, generalmente convierte al toxico en un
producto inocuo

Desmetilacion o desalquilacion: Muchos pesticidas contienen sustituyentes alquilo

unidos a NuO.

Metilacin. La reaccin contraria a la anterior (adicin de un grupo metilo) puede

inactivar fenoles txicos (penta y tetraclorofenoles).

Nitro-reduccin: los compuestos nitrados, nocivos para mucho organismo, pueden

transformarse en compuestos menos txicos por la reduccin del grupo NO2 (nitro) a un
grupo NH2 (amino).

Conjugacin: Es la reaccin entre un metabolito natural y una molcula sinttica toxica.

El producto de esta unin, generalmente es menos toxico.

CONTAMINACIN

CONTAMINACIN DEL SUELO, SUBSUELO Y LOS ACUFEROS

Hay muchas formas de contaminar los suelos y los acuferos. Por ejemplo, si el drenaje
que lleva el agua sucia de nuestras casas tiene fugas, el agua sucia se va ir hacia abajo,
hacia el subsuelo, y puede llegar al acuferos y contaminarlo.(Arguelles, 2010)

Los plaguicidas que se usan en el campo para eliminar la fauna nociva de los cultivos
estn hechos con compuestos qumicos que en su mayora son txicos y se deben usar
solo en las dosis requeridas. Pero, por lo general, se aplican en cantidades mayores que
las requeridas y entonces, al regar los cultivos, estos qumicos ingresan al suelo, al
subsuelo y pueden llegar al acuferos. Lo mismo sucede con los fertilizantes, que
aunque son buenos para estimular el crecimiento de los cultivos, estn hechos con

10
nitrgeno, fosforo, potasio y otros elementos que tambin pueden contaminar los suelos
si se aplican en cantidades mayores de lo necesario.(Arguelles, 2010)

Las industrias utilizan gran cantidad de compuestos qumicos, metales, plsticos,

disolventes, etc. Cuando las industrias no trabajan adecuadamente o tienen accidentes,
pueden tener derrames de alguna de estas sustancias que va directamente a contaminar
el suelo. La mgnitud de la contaminacin depende de los compuestos que se derramen,
pero tambin de la cantidad derramada y del tipo de suelo que se contamine.

Los suelos como se vio antes, pueden ser de diferentes tipos; unos dejan pasar
msfcilmente el agua y se llaman de alta permeabilidad. Pero los contaminantes
tambin son distintos y tiene propiedades diferentes. Esto hace que unos lleguen antes
que otros al acufero, o que algunos contaminen ms que otros. Por ejemplo, los
contaminantes viajan ms rpido en unsuelo arenoso que en uno arcilloso, porque el
arenoso es ms permeable, y tanto el agua como los contaminantespasanms fcilmente.

Una de las formas de evitar la contaminacin de los suelos depende del tipo de
contaminantes que se derrame en el suelo y las sustancias que lleguen.

Lo mejor es no contaminar, y para esto se requiere que cada sector sea cuidadoso en las
diferentes prcticas que le corresponden. Las industrias pueden evitar los derrames de
sus productos mediante sistemas adecuados de control y supervisin peridica de cada
instalacin. Asimismo es muy importante que las industrias cuiden los sitios de
almacenamiento de sus residuos. Para esto existen normas que, al cumplirlas, se evita en
gran medida la posibilidad de derrames que contaminen los suelos.(Iturbe, 2006)

LIMPIEZA DE SUELOS

QU PUEDE HACERSE CON UN SUELO CONTAMINADO?

Debido a prcticas inadecuadas, sobre todo en ao pasado, cuando no existen leyes y

reglamentos para evitar la contaminacin de los suelos y acuferos, se contaminaron el
suelo y el subsuelo de muchos sitios, as como acuferos(Arguelles, 2010).

La industria petrolera es una de las que ms contamino en el pasado, ya sea en muchas

de sus instalaciones o bien a lo largo de los ductos que atraviesas todo el pas.

11
La contaminacin por hidrocarburos puede deberse a gasolina, disel, combustible,
petrleo crudo, o mezcla de aceites.

Cuando se toma la decisin de limpiar una extensin de terreno que se contamino, lo

primero que debe hacerse es conocer la magnitud de la contaminacin y para esto hay
un procedimiento que se llama Caracterizacin del sitio contaminado y despus se
propone una tcnica de remediacin (as se llama al trmino para limpiar suelos
contaminados en Mxico) (Iturbe, 2006)

Una de las tcnicas para limpiar los suelos contaminados es la biorremediacin.

BIORREMEDIACION

HISTORIA

A mediados del siglo XX se desarrollaron las primeras investigaciones encaminadas a

estudiar el potencial de los microorganismos para biodegradar contaminantes (Zobell,
1946; Davis, 1956). Este uso intencionado recibi entonces el nombre de
biorremediacin ("bioremediation"). Las primeras tcnicas que se aplicaron fueron
similares al "landfarming" (labranza) actual y sus actores, lgicamente, compaas
petrolferas.

Grueso, S. (2004).Stories of the chapapote. [Figura]. Recuperado de http://www.steph.es

Las primeras patentes, fundamentalmente para remediacin de vertidos de gasolina,

aparecen en los aos 70. En los aos 80 se generaliz el uso del aire y perxidos para
suministrar oxgeno a las zonas contaminadas mejorando la eficiencia de los procesos

12
degradativos. Durante los aos 90 el desarrollo de las tcnicas de "air sparging"
(burbujeo de oxgeno) hizo posible la biorremediacin en zonas por debajo del nivel
fretico. Al mismo tiempo, la implementacin en la prctica de aproximaciones
experimentales en el laboratorio permiti el tratamiento de hidrocarburos clorados, los
primeros intentos con metales pesados, el trabajo en ambientes anaerobios, etc.
Paralelamente, se desarrollaron mtodos de ingeniera que mejoraron los rendimientos
de las tcnicas ms populares para suelos contaminados ("landfarming", "composting",
etc.) (Riser-Roberts, 1998).

Principales medidas de biorremediacin. [http://apuntesbiotecnologiageneral.pe]

En el presente se enfrenta un nuevo reto que pasa por convencer poco a poco a las
empresas y a los organismos oficiales del potencial de la biorremediacin. En algunos
pases se puede ya afirmar sin lugar a dudas que la biorremediacin, que una vez fue
una tcnica marginal y que generaba demasiadas dudas, ha pasado a ser una verdadera
industria. Esta industria busca hoy por hoy seguir mejorando en unas lneas,
decididamente interdisciplinares, que se pueden resumir en los siguientes puntos:

Desarrollo de tcnicas rpidas de biologa molecular que permitan caracterizar

las poblaciones indgenas de los emplazamientos contaminados as como su
potencial enzimtico (Theron y Cloete, 2000; Watanabe, 2001).
Integracin en el proceso de tcnicas innovadoras (por ejemplo geofsica de
superficie) que ayuden a comprender y controlar los fenmenos de transporte de
nutrientes y otros posibles aditivos.
Exploracin de las implicaciones del concepto de biodisponibilidad
("bioavailability") definido por las propiedades fsico-qumicas de los

13
 contaminantes. Se trata de un factor que en muchos casos est limitando la
biodegradacin y en otros reduciendo la toxicidad de los contaminantes.
Desarrollo definitivo de tcnicas de bioaumentacin realmente tiles (Major et
al., 2002).

DEFINICION

La biorremediacin es una tecnologa que utiliza el potencial metablico de los

microorganismos (fundamentalmente bacterias, pero tambin hongos y levaduras) para
transformar contaminantes orgnicos en compuestos ms simples poco o nada
contamiantes, y, por tanto, se puede utilizar para limpiar terrenos o aguas contaminadas
(Glazer y Nikaido,1995).

Tambin podemos definirla como la tcnica para limpiar suelos contaminados de una
forma muy prctica ya que se usan a los mismos microorganismos que viven en el suelo
y el subsuelo. Hay que recordar que al principio se dijo que el suelo y el subsuelo estn
constituidos por partculas inorgnicas, materia orgnica, agua, aire y microorganismos.

Bio Remediar = usar organismos biolgicos para resolver un problema.

Es un concepto que no debemos confundir con depuracin. La depuracin es la

eliminacin, ya sea por mtodos fsico/qumicos o biolgicos, de un contaminante antes
de que este alcance el medio ambiente. Cuando la contaminacin ya se ha producido, se
precisa restaurar el ecosistema contaminado, para lo que se pueden utilizar diversas
estrategias, una de ellas es la biorremediacin.

En la actualidad existe una corriente cada vez ms importante en el sentido de utilizar

microorganismos, en especial bacterias y hongos, para ayudar a la descontaminacin y
recuperacin de ambientes naturales y para el tratamiento de afluentes industriales o
municipales.

Se estima que los mejores microorganismos para la eliminacin de txicos presentes en

un medio son en principio aislados del propio ambiente de donde han sido

14
seleccionados naturalmente, aunque en una segunda instancia la manipulacin gentica
de los mismos puede fortalecer considerablemente su capacidad. Ello est sustentado en
la observacin de que los microorganismos capaces de habitar en un medio
contaminado, (y por ende realizar las funciones vitales), poseen en su metabolismo
celular dispositivos sumamente efectivos para realizar descontaminacin.

De conocerse en detalle estos mecanismos, podran ser aprovechados para purificar el

agua, como por ejemplo empleando principalmente bacterias capaces de recoger
metales pesados, sobre su propia pared celular que, al descamarse, podra retenerse en
filtros.

Zona recuperada a travs de la biorremediacin. [http://biologiademicroorganismoos.pe

MICROORGANISMOS
Son organismos muy pequeos que existen en toda la naturaleza. Adentro del cuerpo
humano, en las plantas, en el agua, en la tierra y en el aire. En todas partes existen
microorganismos.

Aqu vamos a referirnos nicamente a los microorganismos del suelo. Microorganismo

significa organismo unicelular, del tamao promedio de una micra (la milsima parte de
un milmetro).

En un gramo de suelo existen desde miles hasta millones de ellos. Los microorganismos
del suelo son en su mayora bacterias, protozoos, actinomicetos, hongos y algas.

15
 Bacterias del suelo. [http://runrun.es/wp-content/uploads/2011/09/PBUT_LR.jpg]

La biorremediacin usa a los microorganismos para que degraden los compuestos. Esto
quiere decir que a los microorganismos que viven en el suelo les gusta comer algunos
compuestos qumicos que son txicos para la naturaleza, por ejemplo hidrocarburos
(gasolina, petrleo, etc). Cuando se da la degradacin completa el hidrocarburo se
convierte en agua y bixido de carbono.

Para que los microorganismos puedan comer eficientemente el compuesto y

degradarlo, es necesario que se cumplan ciertas condiciones:

La temperatura debe ser la adecuada

Agua suficiente
Debe existir una cantidad adecuada de nutrientes
Cantidad de oxgeno suficiente (para microorganismos aerobios)

Estas condiciones permiten que los microorganismos crezcan y se multipliquen y

entonces requieren mayor cantidad de sustancias qumicas para comer y la
biodegradacin es ms eficiente. Si estas condiciones no se cumplen, los
microorganismos no crecen lo suficiente y mueren.

FUNCION DE LA BIORREMEDIACION

La naturaleza tiene una cierta capacidad de limpieza de los elementos contaminantes.

Microorganismos como levaduras, hongos o bacterias degradan una gran cantidad de
sustancias txicas, reduciendo su carcter nocivo o incluso volvindolas inocuas para el
ambiente y la salud humana. La funcin de la biorremediacin consiste en acelerar este
proceso natural para mitigar la contaminacin ambiental.

16
 Microbiologa. [http://microbiologiaumh.blogspot.pe]

PRINCIPIO DE LA BIORREMEDIACION

La biorremediacin se basa en la idea de que los organismos son capaces de tomar cosas
del ambiente y usarlas para su crecimiento. En esta caracterstica se fundamenta el
principio de la biorremediacin; usar organismos para que tomen sustancias
contaminadas del medio ambiente y las conviertan en una forma no toxica.

VENTAJAS Y DESVENTAJAS DE LA BIORREMEDIACION

La biorremediacin ofrece varias ventajas sobre los tratamientos fsicos y qumicos

usados para el tratamiento de suelos y acuferos contaminados (Eweis y col., 1998;
Alexander, 1981).

Es una tecnologa relativamente simple, comparada con la mayora de las otras.

Puede considerarse una estrategia efectiva y ambientalmente amigable, ya que
biotransforma, parcial o completamente, los contaminantes hasta biomasa y
productos estables e inocuos.
Los costos de la biorremediacin se encuentran entre 100 y 250 USD/m3,
mientras que las tecnologas ms convencionales, como la incineracin o
rellenos sanitarios seguros, pueden costar entre 250 y 1000 USD/m3.
Se enfoca en la biodegradacin y detoxificacin de contaminantes peligrosos,
mientras que otras tecnologas (adsorcin del carbn activado,
solidificacin/estabilizacin, lavado y disposicin en rellenos sanitarios),
simplemente transfieren los contaminantes a un medio o lugar diferente.
Una consecuencia comn de la actividad microbiana, es la detoxificacion de
qumicos originalmente txicos.

Sin embargo, existe un nmero de desventajas asociadas con la aplicacin de la

biorremediacin para el tratamiento de sitios contaminados (Van Deuren y col., 1997;

17
Eweis y col., 1998).

Es difcil predecir la eficiencia del tratamiento, as como el escalamiento de una

prueba de laboratorio o de escala piloto.
El xito del proceso depende de la capacidad para crear y mantener las
condiciones ambientales necesarias para el crecimiento microbiano. Una
disminucin en la degradacin y aumenta el periodo del tratamiento.
Compuestos originalmente inocuos, pueden ser convertidos a productos dainos
para una u otra especie.
Generalmente se requiere de mayores tiempos que los tratamientos fsicos y
qumicos.
Las concentraciones altas de contaminantes pueden resultar toxicas e inhibir la
biodegradacin.

Aunque las tecnologas de biorremediacin presentan ventajas sobre otros mtodos

usados tradicionalmente para la remediacin de suelos (fsicos y qumicos), tambin
representan una serie de desventajas. Cualquier nueva tecnologa, como lo es la
biorremediacin, puede implicar ciertos riesgos. Sin embargo, reconocer los factores de
riesgo es un primer paso para reducirlos o evitarlos.

PROCESOS DE LA BIOREMEDIACION

1.- Los microbios producen enzimas que rompen la molcula contaminante en partes
digeribles

2.- El contaminante es ingerido y digerido por la clula como nutriente junto con otras
fuentes de energa.

Objetivo. - Convertir sustancias que son peligrosas para los organismos vivos a
productos inertes de manera que solo se queden desechos inofensivos de dichas
sustancias.

18
FACTORES DE INCIDEN EN LA BIOREMEDIACION:
a) FACTORES FISICOQUMICOS:
Incluyen propiedades del contaminante como del suelo.

_Estructura del contaminante: Cada compuesto qumico posee caractersticas

nicas que dictan el mecanismo o combinacin de ellos y que controlan su
movimiento y biodegradabilidad. Este parmetro es uno de los factores mas
importantes en la biodegradacin (Alexander,1994)

Solubilidad: La biodegradabilidad de un compuesto depende de su solubilidad.

En general, al aumentar la solubilidad, la disponibilidad para los
microorganismos aumenta. (Reddy y col., 1982; Singer y Finnerty, 1984).
Difusin: La velocidad de movimiento de un contaminante a travs del suelo, es
proporcional a su concentracin y a su coeficiente de difusin. La difusin de un
contaminante hacia adentro y hacia afuera de los poros del suelo es un
importante factor que controla la biodegradacin. Es uno de los procesos
abiticos que compite ms efectivamente con los microorganismos por el
sustrato (Alexander,1994; Riser-Roberts,1998)

Sorcin: La sorcin de un compuesto qumico tiene un gran impacto en su

biodegradacin, e involucra procesos de adsorcin y absorcin.

19
 La adsorcin, es la retencin del compuesto en las superficies del material
slido. Afecta la volatilizacin y difusin del contaminante.
En la absorcin, el contaminante es retenido dentro de la masa del slido.
(Alexander,1994; Riser-Roberts,1998).

Volatilizacin: Es el proceso en el que un compuesto qumico se mueve de una

fase lquida o slida a la gaseosa, como resultado de su difusin molecular. La
velocidad de volatilizacin de un compuesto en el suelo es en funcin de su
concentracin, su presin de vapor y su solubilidad.
(Eweis y col., 1998).

Densidad: La migracin de un compuesto inmiscible depende de su densidad y

viscosidad. La densidad determina donde se quedar concentrado el compuesto.
(Bouwer y Zehnder,1993).

b) FACTORES AMBIENTALES:
Son aquellos que afectan directamente el crecimiento y actividad de los
organismos que llevan a cabo la biodegradacin.

Temperatura: La temperatura del sitio influye directamente en la actividad

microbiana. Un descenso en la temperatura provoca una disminucin en la
velocidad de degradacin.
Mientras que las altas temperaturas pueden perjudicar la actividad de algunos
organismos. (Alexander,1994)

20
 Biodisponibilidad: El contaminante debe estar accesible al organismo.

La persistencia de contaminantes en ambientes en que las especies degradadoras

estn presentes, se debe a que el contaminante no est accesible. (Bouwer y
Zehnder,1993).

Nutrientes: Para que un microorganismo pueda crecer, adems de un compuesto

orgnico que sirva como fuente de carbono y energa, se requiere de nutrientes y
de un aceptor de electrones. Se ha demostrado que la adicin de fuentes de
carbono de fcil asimilacin (glucosa y cidos orgnicos) puede promover e
incrementar la degradacin de contaminantes. (Singleton,1995)

Disponibilidad de oxgeno: Los contaminantes orgnicos pueden ser

biodegradados bajo condiciones aerobias o anaerobias. Aunque algunos
contaminantes pueden ser metabolizados bajo condiciones anaerobias, la gran
mayora son susceptibles al ataque de microorganismos aerobios.
(Alexander,1994).

Humedad: Los microorganismos requieren una humedad adecuada para su

crecimiento y actividad. El agua sirve como medio de transporte para nutrientes
y constituyentes orgnicos hacia la clula microbiana, y de productos de desecho
hacia AFUERA DE LA CLULA. (VAN DEUREN Y COL., 1997).

21
 Concentracin: Muchos compuestos xenobiticos extraos a los organismos
vivos que son tolerados a bajas concentraciones, pueden ser txicos para los
microorganismos a concentraciones mayores. (Alexander,1994).

Toxicidad: El factor clave para decidir la remediacin de un sitio contaminado,

es la toxicidad para los seres vivos. La descarga de qumicos txicos a un suelo
implica, que son generalmente resistentes a la biodegradacin. Si el
contaminante como tal no es txico, algunos de sus componentes pueden resultar
txicos o inhibitorios para ciertos microorganismos, retardando o impidiendo la
biodegradacin de otros contaminantes degradables.

c) FACTORES BIOLGICOS:
Los factores biolgicos se refieren a la presencia de organismos con rutas
metablicas capaces para degradar los compuestos de inters, y a la aclimatacin
o induccin de enzimas que catalicen las reacciones necesarias en la poblacin
microbiana. La persistencia de un agente qumico en el suelo puede ser el
resultado de diferentes tipos de interacciones biolgicas. (Riser-Roberts, 1998).

Las propiedades biocidas de ese qumico hacia los microorganismos del

suelo.
Inhibicin directa de las enzimas de los microorganismos degradadores.
Inhibicin en los procesos de propagacin de los microorganismos
efectivos.
Tiempo insuficiente para que las rutas metablicas involucradas
degraden el contaminante.
Aclimatacin o induccin de las enzimas que catalizan las reacciones de
biodegradacin

TIPOS DE BIORREMEDIACION

22
DEGRADACIN.ENZIMTICA
Este tipo de degradacin consiste en el empleo de enzimas en el sitio
contaminado con el fin de degradar las sustancias nocivas. Estas enzimas se
obtienen en cantidades industriales por bacterias que las producen naturalmente,
o por bacterias modificadas genticamente que son comercializadas por las
empresas biotecnolgicas. Por ejemplo, existe un amplio nmero de industrias
de procesamiento de alimentos que producen residuos que necesariamente deben
ser posteriormente tratados. En estos casos, se aplican grupos de enzimas que
hidrolizar (rompen) polmeros complejos para luego terminar de degradarlos con
el uso de microorganismos (ver en la prxima seccin). Un ejemplo lo
constituyen las enzimas lipasas (que degradan lpidos) que se usan junto a
cultivos bacterianos para eliminar los depsitos de grasa procedentes de las
paredes de las tuberas que transportan los efluentes.
Otras enzimas que rompen polmeros utilizados de forma similar son las
celulosas, proteinasas y amilasas, que degradan celulosa, protenas y almidn,
respectivamente. Adems de hidrolizar estos polmeros, existen enzimas
capaces de degradar compuestos altamente txicos. Estas enzimas son utilizadas
en tratamientos en donde los microorganismos no pueden desarrollarse debido a
la alta toxicidad de los contaminantes. Por ejemplo, se emplea la enzima
peroxidasa para iniciar la degradacin de fenoles y aminas aromticas presentes
en aguas residuales de muchas industrias.

23
REMEDIACIN MICROBIANA
En este tipo de remediacin se usan microorganismos directamente en el foco de
la contaminacin. Los microorganismos utilizados en biorremediacin pueden
ser los ya existentes (autctonos) en el sitio contaminado o pueden provenir de
otros ecosistemas, en cuyo caso deben ser agregados o inoculados (ver Cuaderno
N46). La descontaminacin se produce debido a la capacidad natural que tienen
ciertos organismos de transformar molculas orgnicas en sustancias ms
pequeas, que resultan menos txicas. El hombre ha aprendido a aprovechar
estos procesos metablicos de los microorganismos. De esta forma, los
microorganismos que pueden degradar compuestos txicos para el ambiente y
convertirlos en compuestos inocuos o menos txicos, se aprovechan en el
proceso de biorremediacin. De esta forma, reducen la polucin de los sistemas
acuticos y terrestres. La gran diversidad de microorganismos existente ofrece
muchos recursos para limpiar el medio ambiente y, en la actualidad, esta rea
est siendo objeto de intensa investigacin. Existen, por ejemplo, bacterias y
hongos que pueden degradar con relativa facilidad petrleo y sus derivados,
benceno, tolueno, acetona, pesticidas, herbicidas, teres, alcoholes simples, entre
otros. Los metales pesados como uranio, cadmio y mercurio no son
biodegradables, pero las bacterias pueden concentrarlos de tal manera de
aislarlos para que sean eliminados ms fcilmente. Las actividades microbianas
en el proceso de biorremediacin se pueden resumir en el siguiente esquema:

24
 FIG 2: METABOLISMO MICROBIANO. Los microorganismos ingieren contaminantes como fuente de
carbono y algunos nutrientes como fsforo y nitrgeno. La digestin de este compuesto en sustancias ms simples
como parte del metabolismo del microorganismo, puede resultar en la degradacin del compuesto en forma
parcial (transformacin) o total a dixido de carbono (CO2) y agua (H2O).

REMEDIACIN CON PLANTAS (FITORREMEDIACIN)

La fitorremediacin es el uso de plantas para limpiar ambientes contaminados.

Aunque se encuentra en desarrollo, constituye una estrategia muy interesante,
debido a la capacidad que tienen algunas especies vegetales de absorber,
acumular y/o tolerar altas concentraciones de contaminantes como metales
pesados, compuestos orgnicos y radioactivos. La fitorremediacin ofrece
algunas ventajas y desventajas frente a los otros tipos de biorremediacin:

VENTAJAS:
Las plantas pueden ser utilizadas como bombas extractoras de bajo
costo para depurar suelos y aguas contaminadas.
Algunos procesos degradativos ocurren en forma ms rpida con
plantas que con microorganismos.
Es un mtodo apropiado para descontaminar superficies grandes o
para finalizar la descontaminacin de reas restringidas en plazos largos.

LIMITACIONES:
El proceso se limita a la profundidad de penetracin de las races o aguas poco

25
 profundas.
Los tiempos del proceso pueden ser muy prolongados.

La biodisponibilidad de los compuestos o metaleses un factor limitante

de la captacin.

Las plantas pueden incorporar las sustancias contaminantes mediante distintos

procesos que se representan en la siguiente ilustracin y se explican en la tabla
que contina:

FITORREMEDIACIN: Tipos de fitorremediacin, en donde se indica la zona de la

planta en donde ocurre el proceso.

26
Fuente (http://porquebiotecnologia.com.ar/index.php?
action=cuaderno&opt=5&tipo=1&note=36)

METODOLOGIAS DE TRATAMIENTO

Tenemos:

aerobias (ex situ, e in situ)

bioventeo.
Bioaumentacin
Bioestimulacin
LandfarmingCompostaje
en fase lquida
en fase de lechada
en fase slifermentacin

27
TIPOS DE METODOLOGIAS

TCNICA IN SITU:
Son las aplicaciones en las que el suelo contaminado es tratado, o bien,
contaminantes son removidos del suelo contaminado, sin necesidad de excavar
el sitio. Es decir, se realizan en el mismo sito en donde se encuentra la
contaminacin.

En esta tcnica se practican las siguientes tecnologas

Bioventeo
Bioaumentacion
Bioestimulacion
Biolabranza
Atenuacin natural
Fitorremediacion

TCNICA EX SITU:

La realizacin de este tipo de tecnologas, requiere de excavacin, dragado o

cualquier otro proceso para remover el suelo contaminado antes de su tratamiento
que puede realizarse en el mismo sitio (on site) o fuera de l (off site).

Camposteo
Biorreactores
Biodegradacin por hongos

28
TIPOS DE TRATAMIENTO DE BIORREMEDIACION

TRATAMIENTO ANAROBIO: En ausencia de oxgeno, produce gases indeseables

como: metano, amonaco, gas sulfhdrico, mercaptanos.

Bacterias fermentadoras estrictas, metabolismo exclusivamente fermentativo. Grupo

filogentico independiente

Bacterias reductoras del azufre (sulfatorreductoras) estrictos. Obtienen su energa

mediante respiracin anaerobia (utilizan SO42- o S0 como aceptor de e-). Incluidas en las
proteobacterias.

TRATAMIENTO AEROBIO. En presencia de oxgeno, produce gas carbnico, vapor

de agua y compuestos simples inertes.

Consta de:

COMPOSTAJE
Proceso biolgico controlado, por el cual pueden tratarse suelos y sedimentos
contaminados con compuestos orgnicos biodegradables, para obtener
subproductos inocuos estables. El material contaminado se mezcla con agentes
de volumen que son sustancias orgnicas slidas biodegradables, adicionadas
para mejorar el balance de nutrientes, as como para asegurar una mejor
aireacin y la generacin del calor durante el proceso.

BIOPILAS.

Son una forma de composteo en el cual, adems de agentes de volumen, el

sistema se adiciona con agua y nutrientes, y se coloca en reas de tratamiento
(que incluyen alguna forma de aireacin y sistemas para colectar lixiviados). Las
pilas de suelo generalmente se cubren con plstico para controlar los lixiviados,
la evaporacin y la volatilizacin de contaminantes, adems de favorecer su
calentamiento.

BIOVENTEO
Estimula la biodegradacin natural de cualquier compuesto biodegradable en
condiciones aerobias. El aire se suministra en el sitio contaminado a travs de
pozos de extraccin, por movimiento forzado (extraccin o inyeccin), con bajas

29
velocidades de flujo, con el fin de proveer solamente el oxgeno necesario para
sostener la actividad de los microorganismos degradadores.

Landfarming en plataforma cubierta

Sistema aerbico de tratamiento biolgico de residuos, que puede emplear dos

procesos:

BIOESTIMULACIN
Implica la circulacin de soluciones acuosas (que contengan nutrientes y/u
oxgeno) a travs del suelo o sustrato contaminado, para estimular la actividad
de los microorganismos autctonos, y mejorar as la biodegradacin de
contaminantes orgnicos o bien, la inmovilizacin de contaminantes inorgnicos
in situ

BIOAUMENTACIN
Consiste en la adicin de microorganismos vivos, que tengan la capacidad para
degradar el contaminante en cuestin, para promover su biodegradacin o su
biotransformacin. El tamao del inculo a utilizar, depende del tamao de la
zona contaminada, de la dispersin de los contaminantes y de la velocidad de
crecimiento de los microorganismos degradadores.

30
La superficie del suelo contaminado es tratado en el mismo sitio por medio del
arado. El suelo contaminado se mezcla con agentes de volumen y nutrientes, y
se remueve peridicamente para favorecer su aireacin. Las condiciones del
suelo (pH, temperatura, aireacin) se controlan para optimizar la velocidad de
degradacin y generalmente se incorporan cubiertas u otros mtodos para el
control de lixiviados.

FITORREMEDIACIN
Proceso que utiliza plantas para remover, transferir, estabilizar, concentrar y/o
destruir contaminantes (orgnicos e inorgnicos) en suelos, lodos y sedimentos,
y puede aplicarse tanto in situ como ex situ. Los mecanismos de
fitorremediacin incluyen la rizodegradacin, la fito-extraccin, la
fitodegradacin y la fitoestabilizacin.

REACTORES
Para tratar suelos heterogneos y poco permeables, o cuando es necesario
disminuir el tiempo de tratamiento, ya que es posible combinar controlada y
eficientemente, procesos qumicos, fsicos y biolgicos, que mejoren y aceleren
la biodegradacin. En el biorreactor de lodos, la degradacin ocurre en fase
acuosa, por m/o suspendidos o impregnados en la fase slida.

31
CAMPOS DE APLICACIN

o Tratamiento de residuos industriales

o Tratamiento de metales pesados
o Minera
o Tratamiento de suelos contaminados con pesticidas e hidrocarburos.
o Tratamiento de residuos agroindustriales.
o Generacin de energa.
o Tratamiento de aguas residuales urbanas

CONCLUSIONES:

32
 Se necesita ms investigacin.

Muchos factores influencian la eficacia de la biorremediacin dependiendo

del sitio de la contaminacin( consorcios hechos a medida

Hay que desarrollar mtodos a gran escala para lograr una mayor
eficiencia del proceso de biorremediacin de modo de solucionar el
problema y no alterar el ecosistema

BIBLIOGRAFIA

Eweis, J.B.; Ergas, S.J.; Chang, D.P y Schroeder, E.D. 1998. Bioremediation Principles.
McGraw-Hill InternationalEditions. 296 pp.

33
Alexander, M. 1981. Biodegradation of chemicals of environmental concern. Science,
211: 132-138.
Van Deuren, J.; Wang, Z. y Ledbetter, J. 1997. Remediation Technologies Screening
Matrix and Reference Guide. 3ra Ed. Technology Innovation Office, EPA.
Glazer, A. N. y Nikaido, H. (1995). Microbial Biotechnology: Fundamentals of Applied
Microbiology. W. H. Freeman and Company, New York.
Major et al. (2002). Field Demonstration of Successful Bioaugmentation To Achieve
Dechlorination of Tetrachloroethene To Ethene. EnvironmentalScience & Technology.
36: 5106-5116.

Theron, J. y Cloete, T.E. (2000). Molecular techniques for determining microbial

diversity and community structure in natural environments. Critical Rev. Microbiol. 26:
37-57.
Riser-Roberts, E. (1998). Remediation of petroleum contaminated soils. CRC Press.
Lewis publishers.
Zobell, C.E. (1946). Action of microorganisms in hydrocarbons. Bact. Rev. 10:1-49.

34