Efecto del tratamiento con UV sobre la capacidad antioxidante, la actividad

enzimtica antioxidativa y la senescencia en la fruta de la fresa

RESUMEN

Los cambios en la capacidad antioxidante, actividad enzimtica antioxidativa y el desarrollo de la

senescencia en la fresa (Fragaria x ananassa Duch.) fueron investigados mediante la iluminacin
con diferentes dosis de UV-C, a travs de tres dosificaciones con iluminacin UV-C; 1, 5 y 10 min,
(0,43, 2,15 y 4,30 kJ/m2). Se pudo comprobar que la capacidad antioxidante y la actividad
enzimtica antioxidativa redujeron significativamente la severidad del deterioro durante el
almacenamiento a 10 C, en comparacin con la muestra control, no expuesto a UV-C. La
evaluacin despus de 15 das iluminados con UV-C para 5 y 10 min durante el almacenamiento
mostraron mejores resultados para mejorar la capacidad antioxidante, expresadas como radicales de
oxgeno con capacidad de Absorcin (ORAC) Estos tratamientos tambin mejoraron las actividades
enzimticas antioxidativas que incluyen: la glutatin peroxidasa (GSH-POD), glutatin reductasa
(GR), superxido dismutasa (SOD), ascorbato peroxidasa (AsAPOD), peroxidasa de guayacol (G-
POD), monodeshidro ascorbato reductasa (MDAR), y reductasa dehidroascorbato (DHAR). Los
componentes no enzimticos tales como glutatin reducido (GSH) y glutatin oxidado (GSSG)
tambin se incrementaron por la exposicin UV-C. Todas las dosis de UV-C aumentaron el
contenido fenlico de frutos de fresa. El contenido total de antocianinas se increment durante el
almacenamiento en todos los tratamientos. Sin embargo, la muestra control mostr poco efecto
sobre la acumulacin de antocianinas. Todas las dosis de UV-C retardaron el desarrollo de la
decadencia comparando con la muestra control, pero 5 y 10 min iluminados con UV-C dieron la
mejor inhibicin de decadencia. 2007 Elsevier B.V. Todos los derechos reservados.
 1. INTRODUCCION

En los ltimos aos, los consumidores han tomado atencin en el aspecto de la salud y nutricin
(contenido de vitaminas, elementos minerales, antioxidantes, etc.) de productos hortcolas (Scalzo
et al., 2005). Las frutas y verduras contienen niveles significativos de componentes biolgicamente
activos que imparten beneficios para la salud ms all de los nutrientes bsicos (Oomah y Mazza,
2000). El alto consumo de frutas y verduras se ha asociado con una menor incidencia de
enfermedades degenerativas como el cncer, enfermedad cardaca, la inflamacin, la artritis, el
deterioro del sistema inmunolgico, disfuncin cerebral y cataratas (Leong y Shui, 2002).

La fresa es una de las fuentes ms ricas de antioxidantes naturales entre las frutas (Wang et al,
1996;. Wang y Zheng, 2001).Adems de los nutrientes usuales, tales como vitaminas y minerales,
las fresas tambin son ricas en antocianinas, flavonoides, y compuestos fenlicos (Heinonen et al.,
1998). Las fresa tienen una alta capacidad de captacin de los radicales peroxilo (ROO *), los
radicales superxido (O2* -), perxido de hidrgeno (H2O2), el radical hidroxilo (OH *) y el
oxgeno (O2) (Wang y Zheng, 2001). Adems de ser secuestrantes de radicales libres, estos
antioxidantes en las fresas son capaces de actuar como perxido descomponedores, simple y triplete
desactivadores de oxgeno, inhibidores y sinergismo enzimatico (Larson, 1988).

El inters en el papel de los antioxidantes en la salud humana ha promovido la investigacin en el

campo de la horticultura y la ciencia de los alimentos para evaluar antioxidantes de frutas y
vegetales y para determinar cmo su contenido y la actividad se pueden mantener o incluso
mejoraron a travs de la mejora de cultivos, las prcticas culturales y el manejo postcosecha y el
procesamiento (Ayala-Zavala et al., 2004). El contenido de antioxidantes se est convirtiendo en un
parmetro cada vez ms importante con respecto a la calidad de las frutas y hortalizas, es de gran
inters evaluar los cambios en el estado antioxidante durante el almacenamiento poscosecha de
cultivos hortcolas. La iluminacin con UV-C como un tratamiento despus de la cosecha ha
demostrado beneficioso para retrasar la senescencia de la fruta de y especialmente el control de la
decadencia en diferentes especies de frutas y hortalizas (Maharaj et al., 1999; Barka et al., 2000;
Erkan et al., 2001; Marquenie et al., 2003; Allende y Artes, 2003; Allende et al., 2006).

La exposicin a UV-C retrasa ablandamiento de la fruta, que es una de las principales factores que
determinan la vida postcosecha de frutas (Pan et al., 2004). Barka et al. (2000) encontraron que la
radiacin UV-C se redujo la actividad de enzimas implicadas en la degradacin de la pared celular
de tomate y el retraso el ablandamiento de la fruta. Reduccin de la fruta de la fresa por
ablandamiento aplicando UV-C (Baka et al., 1999).
Sin embargo, hay poca informacin disponible sobre el efecto de la iluminacin UV-C
en el sistema antioxidante en fruta de la fresa. Por lo tanto, El propsito de este estudio fue
determinar los cambios en la capacidad antioxidante y la actividad enzimtica de la fruta de la fresa
iluminado con UV-C en diferentes duraciones de iluminacin y dosis. El efecto de la iluminacin
UV-C de la decadencia en la fresa Tambin se examin la fruta.
 2. MATERIALES Y METODOS

2.1. QUIMICOS
Ascorbato, cido clorognico, B-caroteno, histidina, perxido de hidrgeno (30%, w / w),
clorhidrato de hidroxilamina, N, N dimethyl- p-nitrosoanilina, xantina, xido de xantina, ascorbato
oxidasa, ditiotreitol (DTT), el glutatin (forma oxidada), glutatin (GSH, forma reducida), glutatin
reductasa, guayacol, nicotinamida adenina dinucletido (-NADH, reducido formulario),
nicotinamida adenina dinucletido fosfato (- NADPH, forma reducida), nitro azul tetrazolio (NBT),
Chelex 100, y FeSO4 se adquirieron de Sigma Chemical Co. (St. Louis, MO). 6-hidroxi-2,5,7,8-
tetrametilcroman-2- cido carboxlico (Trolox), y el tocoferol, y tricloroactico cido se adquirieron
de Aldrich (Milwaukee, WI). 2, 2 Azobis (2-amidinopropano) (AAPH) se adquiri de Wako
Chemicals EE.UU. Inc. (Richmond, VA).

2.2. MANIPULACIN DE LAS MUESTRAS DE FRUTA Y LA ILUMINACIN CON UV-

C
Las fresas (Fragaria x ananassa cv. Allstar) utilizadas en este estudio se cultivaron a una granja
cerca de Beltsville, Maryland, EE.UU. y fueron cosechadas a mano en una etapa madura comercial,
se deshech productos daados, arrugado, y fruto verde, y seleccionados por tamao y color
uniforme. Las fresas seleccionadas fueron aleatorizados para los experimentos. Despus de la
clasificacin, la fruta se sometieron a tres duraciones de iluminacin UV-C (1, 5 y 10 min) con
dosis (0,43, 2,15 y 4,30 kJm-2) usando lmpara (Modelo UVLMS-38: EL 3UV Series, 8W, LW /
MR / SW, Upland California, EE.UU.) equipado con un filtro (98-0016-02,Upland, California) para
tener una sola longitud de onda a 254 nm con una intensidad de 3WM-2 a una distancia de 15 cm.
La intensidad de la lmpara de UV-C se determin con un fotmetro Blak Ray-J-225. Fruit se
colocaron en una red de poliestireno e iluminado con UV-C desde ambos lados superior e inferior.

Luego de la iluminacin con UV-C, el control y las frutas tratadas son colocados en contenedores
y aislados, posteriormente los recipientes se almacenaron a 10 C. Son ocho los contenedores que
se utilizaron para cada tratamiento. Las frutas de control fueron manejadas de manera similar con la
excepcin de la iluminacin UV-C. Las muestras se tomaron inicialmente y en 5, 10 y 15 intervalos
de das durante el almacenamiento. Las muestras se almacenaron a -80C hasta que se analizaron la
capacidad antioxidante y la actividad enzimtica. El desarrollo de la decadencia causada por hongos
tambin se evalu y despus de 5, 10, 15 y 20 das y expresan como porcentaje de deterioro que
presenten por cualquier hongo.

2.3. ILUMINACIN con UV-C

El dispositivo de iluminacin UV-C consisti en dos orillas 15 reflectores de acero inoxidable con
emisor de germicida sin filtrar lmparas (lmpara germicida FG15T8-15W T8 120V GRM-0152,
Atlanta bombillas Inc., Tucker, Georgia, EE.UU.) situado a 15 cm encima y debajo del recipiente de
la radiacin. Las intensidades UV-C de las lmparas que emiten se determinaron mediante el uso de
un Blak-ray J-225 fotmetro (productos ultravioleta, Inc., de San Gabriel, California, ESTADOS
UNIDOS). Aunque una pequea cantidad de radiacin infrarroja fue Tambin emitida, el 98,7% de
la luz total emitida estaba en el UVC (220 a 290 nm, con radiacin pico a aproximadamente 254
nm). Las lmparas UV-C, reflectores, y la zona de tratamiento son encerrados en una caja de
madera cubierta con papel de aluminio y soportado por un marco de metal para proporcionar una
proteccin para los operadores. Se obtuvieron las diferentes dosis de iluminacin UV-C mediante la
alteracin de la duracin de la exposicin a la distancia fija. Antes de su uso, las lmparas UV se les
permitieron estabilizar girando en al menos 15 min. Tres UV-C duraciones de iluminacin y las
dosis fueron aplicadas a la fresa. Estas duraciones eran 1, 5 y 10 minutos. Estas duraciones de
iluminacin eran igual a 0,43 (1 min), 2,15 (5 min) y 4,30 (10 min) kJm-2 a cada lado del producto.
Las fresas no iluminadas se consideraron como el tratamiento de control.

2.4. ANTOCIANINA TOTAL, EL CONTENIDO DE FENOLES TOTALES

Fruta de la fresa se extrajeron con 80% de acetona que contiene 0,2% de cido frmico usando un
Polytron (Brinkmann Instruments, Inc., Westbury, NY). Las muestras homogeneizadas de acetona
se centrifugaron a 14.000 xg durante 20 min a 4 C. Los sobrenadantes se transfirieron a viales, se
almacenaron a 80 C, y posteriormente utilizado para antocianinas, fenoles totales, enzimas y
antioxidantes anlisis.

Se determin el contenido de antocianinas totales en extractos de frutas utilizando el mtodo de

diferencia de pH (Cheng y Breen, 1991). Se midi la absorbancia en un espectrofotmetro himadzu
(Shimadzu UV-160) a 510 y 700 nm en tampones a pH 1,0 y 4.5, usando A = [(A510 -A700) pH 1,0
- (A510 -A700) pH 4,5] con una coeficiente de extincin molar de cianidina-3-galactsido.
resultados se expresaron como equivalentes de cyanidan-3-galactsido en un fresco base de peso,
mg kg-1. Se determinaron los fenoles solubles totales en los extractos de frutas con Folin-Ciocalteu
por el mtodo de Slinkard y Singleton (1977), utilizando cido glico como un estndar.
Los resultados se expresaron como equivalentes de cido glico sobre una base de peso en fresco, g
kg-1.

2.5. CAPACIDAD DE ABSORCIN DE RADICALES DE OXGENO (ORAC) DE ENSAYO

El ensayo ORAC se llev a cabo usando un alto rendimiento plataforma de instrumento que
consiste en un lquido de ocho canales robtico sistema de manipulacin y un lector de
fluorescencia de microplacas (Huang et al., 2002). Se realiz la preparacin de muestras
automatizado utilizando un instrumento de precisin 2000. La dilucin serie de muestras secuencia
fue programado y controlado por la precisin software de poder. Los valores ORAC se
determinaron mediante el clculo del rea neta bajo la curva (AUC) de las normas y muestras. La
curva estndar se obtuvo representando grficamente Trolox Las concentraciones contra las AUC
neta media de las dos medidas para cada concentracin. valores ORAC finales fueron
calculado utilizando la ecuacin de regresin entre la concentracin de Trolox y las AUC red y se
expresaron como milimoles equivalentes de Trolox por kilogramo de peso fresco.

2.6. MEDICIONES DE ENZIMAS ANTIOXIDANTES

2.6.1. LA GLUTATIN PEROXIDASA (GSH-POD) Y GLUTATIN REDUCTASA (GR)

Cuatro gramos de tejido de la fruta, el peso fresco, se homogeneizaron en 4 ml 0,1 mol L-1 tampn
Tris-HCl (pH 7,8) que contiene 2 mmol L-1 EDTA-Na, 2 mmol L-1 de ditiotreitol (DTT). Los
homogeneizado se centrifug a 20.000 g durante 30 min a 4 C, y el sobrenadante se utiliz para
los ensayos de GSH-POD y GR. Se determin la actividad de GSH-POD usando el mtodo
de Tappel (1978) con una ligera modificacin. La reaccin mezcla contena 0,1 mol L-1 tampn
Tris-HCl (pH 8,0), 0,4 mmol L-1 EDTA, 1,0 mmol L-1 NaN3, 1,0 mmol L-1 H2O2, 1,0 mmol L-1
de glutatin (GSH), 0,15 mmol L-1NADPH, 1 unidad de enzima glutatin reductasa y 100 _L
extraer. El volumen de reaccin total fue de 1.0 mL. La reaccin fue iniciada por la adicin de
H2O2. Se determin la actividad de GSH-POD por la tasa de oxidacin de NADPH a 340 nm por
medio de un espectrofotmetro (Shimadzu UV-160A, Shimadzu Scientific Instruments,
Columbia,MD). actividad GR se ensay de acuerdo con Smith et al. (1988). La actividad de GR se
determin por monitorizacin glutathionedependent oxidacin de NADPH a 340 nm. La reaccin se
inici mediante la adicin de GSSG y la velocidad de oxidacin se calcul utilizando el coeficiente
de extincin de NADPH (0,622 mol L-1 m-1).

2.6.2. LA SUPERXIDO DISMUTASA (SOD)

Tejido de la fruta (4 g) se pulveriz en un mortero fro y mano de mortero con tampn K-fosfato de
4 ml (0,1 mol L-1, pH 7,3) que contiene 1 mmol L-1 EDTA, 2 mmol L-1 de la TDT. El
homogeneizado se tensas a travs de cuatro capas de Miracloth y se centrifug a 12.000 g durante
10 min a 4 C. El sobrenadante se utiliz para ensayo de la actividad de la enzima SOD. La
actividad total de SOD fue ensay fotoqumicamente (Monk et al, 1987;. Thayer, 1990).
Una unidad de SOD se defini como la cantidad de enzima que produce una inhibicin del 50% de
la reduccin de NBT en condiciones de ensayo.

2.6.3. ASCORBATO PEROXIDASA (ASA-POD) Y GUAYACOL PEROXIDASA (G-

POD)
Tejido de la fruta (4 g) se pulveriz en un mortero fro y mano de mortero con tampn K-fosfato de
4 ml (0,1 mol L-1, pH 7,3) que contiene 1 mmol L-1 EDTA, 2 mmol L-1 de la TDT. El
homogeneizado se se centrifug a 12.000 g durante 10 min a 4 C. El sobrenadante se utiliz para
la ASA-POD, y los ensayos G-POD. Actividad ASA-POD se ensay de acuerdo con el mtodo de
Amako et al. (1994). La reaccin se inici mediante la adicin de H2O2. La mezcla de ensayo G-
POD contena 0,1 mol L-1 de fosfato tampn (pH 6,1), 4 mmol L-1 guayacol como donante, 3
mmol L-1 H2O2 como sustrato y el extracto de enzima en bruto 1,0 ml. El total volumen de
reaccin fue de 3,0 mL. La velocidad de cambio en la absorbancia a 420 nm se midi, y el nivel de
actividad de la enzima era expresado como la diferencia en la absorbancia (OD).

2.6.4. REDUCTASA DEHIDROASCORBATO (DHAR)

actividad DHAR se ensay midiendo la tasa de la oxidacin de NADPH a 340 nm (Shigeoka et al.,
1980). Los mezcla de reaccin contena 50 mmol de fosfato de L-1 de potasio, pH 6,1, 0,2 mmol L-
1 NADPH, 2,5 mmol L-1 deshidroascorbato, 2,5 mmol L-1 glutatin, 0,6 unidad de glutatin
reductasa (GR; de la espinaca, EC 1.6.4.2) y 0,1 ml de fruta diluido zumo (zumo de 2 ml se diluy
con 2 ml 50 mmol L-1 de potasio fosfato, pH 6,1). La reaccin se inici mediante la adicin de
dehidroascorbato.

2.6.5. MONODESHIDROASCORBATO REDUCTASA (MDAR)

actividad MDAR se ensay midiendo la tasa de NADH la oxidacin a 340 nm (Nakagawara y

Sagisaka, 1984). Los mezcla de reaccin contena 1 mmol L-buffer 50 K-fosfato (PH 7,3), 0,2
mmol L-1 NADH, 1,0 mmol L-1 ascorbato, 1,0 unidad de ascorbato oxidasa y 0,1 ml de 50 mM de
K-fosfato tampn (pH 7,3) diluido de zumo de fruta (dilucin de 2 veces) en un volumen total de
1,0 ml. La reaccin se inici mediante la adicin de ascorbato oxidasa (de Cucurbita, EC 1.10.3.3).
 2.7. MEDICIONES DE COMPONENTES NO ENZIMTICAS

2.7.1. EL GLUTATIN REDUCIDO (GSH) Y GLUTATIN OXIDADO (GSSG)

Por triplicado 4 g de muestras de frutas de fresa se homogeneizaron en 8,0 ml de hielo-fro,

desgasificado 7,57 mmol ascorbato de sodio L-1 solucin enfriada con mortero y una maja bajo N2
a 0 C. los homogeneizado se filtr a travs de cuatro capas de Miracloth (Calbiochem, La Jolla,
Calif.) Y se centrifug a 30.000 g durante 15 min a 0 C. El sobrenadante se dsproteinizo en
ensayo de vidrio tubos de incubacin en un bao de agua a 100 C durante 3 minutos y luego se
centrifug a 15.000 g durante 15 min a 0 C. los sobrenadantes se utilizaron para los ensayos de
GSH y GSSG. GSH y GSSG eran ensayada mediante el mtodo descrito por Castillo y Greppin
(1988). GSSG se determin por sustraccin de GSH de total glutatin.

2.8. ANLISIS ESTADSTICO

Los experimentos se realizaron de acuerdo con un diseo factorial. Los datos se analizaron por
medio de un ANOVA de una va. En el caso de un valor F significativo, las medias se compararon
por lo menos diferencia significativa (LSD) de prueba a un nivel de significacin de 0,05.

3. RESULTADOS

3.1. CONTENIDO DE ANTOCIANINAS TOTALES

El contenido total de antocianinas a partir de diferentes dosis de iluminacin con UV-C s se muestra
en la Fig. 1A. contenido de antocianinas inicial de fresas fue 390,8 mg kg-1. El contenido de
antocianinas de las fresas se increment durante el almacenamiento en la radiacin UV-C
iluminada y frutos control. Sin embargo, poca diferencia en el contenido de antocianinas se
observ entre los distintos tratamientos durante el almacenamiento a 10 C (Fig. 1A).

Fig. 1. antocianinas totales (A), fenoles totales (B), y los valores totales de ORAC (C) en la fruta de
la fresa ilumina con diferentes duraciones UV-C. Las barras verticales representan el error estndar.
 3.2. CONTENIDO DE FENOLES TOTALES

Contenido de fenoles totales de diferente iluminacin UV-C las dosis se muestra en la Fig. 1B.
contenido fenlico inicial de las fresas fue 1.083 g kg-1. Fruta de la fresa iluminado con 5 min UV-
C tuvo el mayor contenido de fenoles totales, seguido de 1 min y 10 min UV-C iluminacin. frutos
control tena el total ms bajo contenido fenlico. contenido de fenoles totales de fruta de la fresa
para todos iluminaciones y control del tratamiento UV-C aument durante 15 das perodo de
almacenamiento. Sin embargo, este incremento fue relativamente menor en frutos control cuando se
compara con la fruta iluminada.

3.3. VALORES ORAC

La capacidad antioxidante de las fresas se expresaron como un valor ORAC (Fig. 1C). Los valores
ORAC de fresas en todos los tratamientos incrementaron durante 15 das de almacenamiento a 10
C. Sin embargo, este aumento fue relativamente menor en los frutos control cuando se compara a
las frutas iluminadas. Los valores ORAC iniciales de las fresas (TE, peso del producto fresco)
fueron 21.11 mmol kg-1. La fruta de la fresa iluminado con 5 min UV-C y almacenado durante 15
das tena el ms alto valor total de ORAC (32.21 mmol kg-1), seguido de 1 min (30,33 mmol kg-1)
y 10 min (29,65 mmol kg-1) UV-C iluminacin. frutos control tuvo el valor total ms bajo de
ORAC fue 27,17 mmol kg-1.

3.4. ENZIMAS ANTIOXIDANTES

3.4. ENZIMAS ANTIOXIDANTES

GSH-POD y GR actividades de extracto de fresa para almacenar 15 das se variaron entre los
tratamientos y la duracin de almacenamiento como se muestra en la Fig. 2A y B. Despus de 15
das de almacenamiento, fresa extraer de 10 min UV-C tratamiento iluminado tuvo el mayor
ocupaciones. extractos de fresa de Control y 1-C minUV iluminacin haban actividades ms bajos
en comparacin con los de 5 y 10 min UV-C iluminacin. Despus de 15 das de almacenamiento,
las muestras del tratamiento de control tena las actividades ms bajas de GR y 1 min UV-C de
iluminacin tena las actividades ms bajos de GSH-POD.

3.4.2. LA SUPERXIDO DISMUTASA (SOD)

Extractos de fresa tomada despus de 5 das de almacenamiento tuvieron mayor SODactivities que
las tomadas despus de 10 y 15 das de almacenamiento como se muestra en la Fig. 3A. La
actividad de SOD de la fresa se mantuvo estable durante los primeros 5 das de almacenamiento y
luego disminuy durante el resto de almacenamiento a 10 C. Despus de 15 das de
almacenamiento, fresa extractos de todas las frutas tratadas UV tenan actividades de SOD ms
altos que los de fruta control.

3.4.3. ASCORBATO PEROXIDASA (ASA-POD) Y GUAYACOL PEROXIDASA (G-

POD)
ASA-POD y G-POD actividades de extracto de fresa iluminados con UV-C aument inicialmente
luego disminuy durante el almacenamiento a 10 C (Fig. 3B y C). Despus de 15 das de
almacenamiento, mientras 10 min UV-C de iluminacin tena las ms altas actividades ASA-POD
en el extracto de fresa, 5 min UV-C de iluminacin tuvo el mayor actividades de G-Pod. Mientras
que el extracto de fresa de 1 min UV-C iluminacin tena las actividades ms bajas de ASA-POD, el
control tratamiento tuvo las actividades ms bajas G-POD.
Fig. 2. La glutatin peroxidasa (GSH-POD) (A) y la glutatin reductasa (GR) (B) las actividades de
las frutas de fresa iluminados con diferentes duraciones UV-C.
Las barras verticales representan el error estndar.

3.4.4. MONODESHIDROASCORBATO REDUCTASA (MDAR) Y REDUCTASA

DEHIDROASCORBATO (DHAR)

MDAR actividades y Dhar extracto de fresa para variar entre los tratamientos. MDAR aument
mientras que se redujo DHAR durante el almacenamiento a 10 C (Fig. 4A y B). Despus de 15 das
de almacenamiento, mientras que el 10 min UV-C de iluminacin tuvo el mayor MDAR
actividades en el extracto de fresa, 5 min UV-C tena iluminacin las ms altas actividades Dhar.
extracto de fresa del control frutos tenan las actividades ms bajas para ambos MDAR y DHAR.

3.5. COMPONENTES NO ENZIMTICAS

3.5.1. EL GLUTATIN REDUCIDO (GSH) Y GLUTATIN OXIDADO (GSSG)

Las cantidades de GSH vari de 37.17 a la 26.56 mol kg-1 bayas frescas y GSSG oscilaron desde
21,73 hasta 14,71 kg mol-1 pesos frescos como se muestra en la fig. 5A y B. GSH inicial y GSSG
actividades de las fresas fueron 26,56 y 14,71 kg mol-1 fresca pesos, respectivamente. Durante los
15 das de almacenamiento a 10 C, actividades de GSSG y GSH de los extractos de fresa
aumentaron y luego disminuyeron. Despus de 15 das de almacenamiento, 10 min UV-C
iluminacin tena las ms altas actividades de GSSG y GSH en la fresa extraer (Fig. 5A y B).
 Fig.. superxido 3. dismutasa (SOD) (A), ascorbato peroxidasa (ASA-POD) (B), y peroxidasa
guaicol (G-POD) (C) en las actividades de fruta de fresa iluminado con diferentes duraciones UV-C.
Las barras verticales representan el error estndar.

3.6. EVALUACIN DE LA DISMINUCION

Se evalu la descomposicin de la fruta durante 20 das a 10 C. Todo UVC Las dosis ensayadas en
este estudio redujeron la decadencia en las fresas durante el almacenamiento (Fig. 6). No se observ
el desarrollo de la decadencia en todos los tratamientos, incluyendo frutas de control durante los
primeros 5 das de almacenamiento. La decadencia controlar el tratamiento ms efectivo fue
iluminacin de las fresas durante 10 minutos. Porcentaje de decaimiento fue 27,98 despus de 20
das de Almacenamiento en este tratamiento. UV-C de iluminacin de 5 y 1 min seguido este
tratamiento y la decadencia porcentaje fue de 29.6 y 49.64, respectivamente. el desarrollo de la
caries fue la peor en frutos control despus de 20 das de almacenamiento con 89,98%.
 Fig. 4. Monodehydroascorbate reductasa (MDAR) (A) y dehidroascorbato reductasa (DHAR) (B)
las actividades en las frutas de fresa iluminadas con diferentes duraciones UV-C. Las barras
verticales representan el error estndar.

Fig. 5. El glutatin reducido (GSH) (A) y glutatin oxidado (GSSG) (B) actividades en las frutas de
fresa iluminadas con diferentes duraciones UV-C. Vertical barras representan el error estndar.
Fig. 6. Los efectos de diversas duraciones UV-C de iluminacin sobre el desarrollo de la caries de la
fruta de la fresa durante el almacenamiento a 10 C. Las barras verticales representan las normas
error.
4. DISCUCION

Los antioxidantes se encuentran naturalmente en las plantas. Estos antioxidantes incluyen

compuestos fenlicos y antocianinas. Varios estudios anteriores han demostrado que las fresas son
tambin una buena fuente de antioxidantes naturales (Wang et al, 1996;. Wang y Lin, 2000; Wang y
Zheng, 2001). Compuestos fenlicos en frutas y verduras puede producir los efectos beneficiosos de
eliminacin de los radicales libres (Chun et al., 2003). Por lo tanto, los compuestos fenolicos
pueden ayudar a proteger las clulas contra el dao oxidativo causado por los radicales libres (Wada
y Ou, 2002). Las antocianinas se producen casi universalmente, y son en gran medida responsables
del color rojo de las fresas maduras (Ayala-Zavala et al., 2004). En nuestro estudio, el contenido de
fenoles totales y antocianinas totales eran variable en extracto de fresa tratado con diferente
iluminacin UV-C dosis. Las fresas almacenadas a 10 C durante 15 das tenan un contenido
fenlico total mayor que las fresas almacenadas durante 5 y 10 das. Este aumento de la duracin de
almacenamiento se produjo en todos los tratamientos UV-C. En el control de la fruta, el contenido
fenlico aument durante los primeros 10 das de almacenamiento luego disminuy despus de 15
das de almacenamiento. Estudios anteriores han demostrado que la cantidad de total de contenido
fenlico en las fresas depende de la temperatura de almacenamiento y composiciones atmosfricas
(Ayala-Zavala et al., 2004; Cordenunsi et al., 2005; Wang y Zheng, 2001).
Las principales caractersticas relacionadas con la calidad de fruta madura de la fresa son la textura,
sabor y contenido de antocianinas (Cordenunsi et al., 2003). Las antocianinas son un grupo de
fenlico compuestos responsables del color rojo-azul de muchos frutas y verduras, y proporcionar
efectos beneficiosos para la salud humana salud (Garc'a-Alonso et al., 2004). La cantidad de
antocianina es importante para las evaluaciones atractivo y la madurez de fresas tambin. En
nuestro estudio, el contenido de antocianina en fresa tratados con tres dosis de iluminacin UV-C
oscil entre 390,8 y 513,4 mg kg-1. El contenido de antocianinas aument en todos los tratamientos
durante el perodo de almacenamiento. Eso significa que el fresas se hicieron ms oscura con el
almacenamiento como avanza la maduracin.

Nuestros resultados mostraron que la radiacin UV-C iluminacin tuvo poco efecto en antocianina
en las fresas. Sin embargo, varios informes han indicado que la sntesis de antocianinas
exposiciones UV-C promovido en otras frutas, incluyendo manzanas (Dong et al., 1995), cerezas
dulces (Kataoka et al., 1996), uvas (Kataoka et al., 2003), y moras (Vicente et al., 2004). Por otra
parte, el retraso en la acumulacin de antocianina por iluminacin con UV-C y la actividad
antioxidante en equivalentes de Trolox (TE) en una peso del producto fresco vari de 21.11 a 32.21
mmol kg-1 en fruta de la fresa iluminado con tres dosis diferentes de UV-C. extracto de fresa de 5
min UV-C de iluminacin tuvo el mayor valores ORAC en comparacin con otros iluminacin UV-
C duraciones (1 y 10 min) y el tratamiento de control. Por lo tanto, la ORAC evaluo y se
correlacionaron positivamente con el contenido de fenoles totales, pero no con antocianina en este
estudio. Kalt et al. (2003).Tambin encontrado una relacin similar entre ORAC, fenoles totales
contenido y antocianinas en los arndanos arbustos altos durante la maduracin y el
almacenamiento. Adems, a pesar de que la actividad antioxidante fue alta en 10 C, esta
temperatura elevada puede no ser ptima para manteniendo la mejor calidad de la fruta de la fresa
durante el almacenamiento (Galletta y Bringhurst, 1990).

La forma reducida de glutatin, GSH, es el principal no proteico tiol en la mayora de las especies
de plantas. GSH tiene una importante funcin en el mantenimiento del estado redox celular
(Rennenberg,1980). El producto de oxidacin primaria de GSH es su disulfuro, GSSG, que puede
ser reducida de nuevo a GSH por la glutatin reductasa (GR) en la ofNADPH gasto (Ric Devos et
al., 1994). Los mayora de glutatin en las clulas se mantiene en el reducido Estado (Kosower y
Kosower, 1978). En nuestro estudio, iluminacin UV-C a 2.15 y 4.30 kJm-2 mejorado el aumento
de GSH en fruta de la fresa durante el almacenamiento. Esta forma reducida de glutatin desempea
un papel importante en la estabilizacin de muchas enzimas. Eso tambin sirve como un sustrato
para DHAR y reacciona directamente con conexin radicales incluyendo radical para evitar la
inactivacin hidroxilo de enzimas por oxidacin del grupo tiol esencial (Ziegler,1985).

GR actividad aument por primera vez durante los primeros 10 das de la fresa fruta luego
disminuy despus de 15 das de almacenamiento. 5 min UV-C iluminacin tuvo la mayor actividad
de GR. GR es una ubicua enzima dependiente de NADPH. Se aade ion hidrgeno a la oxidada
glutatin para regenerar glutatin reducida. A diferencia de a los recursos genticos, la actividad de
GSH-POD disminuy durante el perodo de almacenamiento.
Sin embargo, despus de 15 das de almacenamiento, 10 min UV-C iluminacin tuvo la mayor
actividad de GSH-POD. Esta enzima glutatin peroxidasa utiliza glutatin reducida para eliminar
hidrgeno perxido y convertirla en agua inocua. La actividad de GSHPOD depende de la
disponibilidad de la ascorbato reducida y GSH que son mantenidos por enzimas, tales como GR,
DHAR, y MDHAR usando NADPH como donante de electrones (Roxas et al.,2000).

El guayacol de peroxidasa (G-POD) y ascorbato peroxidasa (ASA-POD) son enzimas peroxidasa

que se encuentran en animal, planta y tejidos de microorganismos, que puede catalizar xido-
reduccin entre el perxido de hidrgeno (H2O2) y varios reductores (Hiraga et al., 2001). ASA-
POD, implicado en la desintoxicacin de H2O2, utilizan dos molculas de ascorbato para reducir
H2O2 al agua (Noctor y Foyer, 1998). Mientras que 5 min UV-C de iluminacin pueden observar
las actividades ms altas en el G-POD (5das despus del almacenamiento), 10 min UV-C
mostraron la mayor iluminacin las actividades en ASA-POD (10 das despus del
almacenamiento). Los frutos testigo tenido las actividades ms bajas de G-POD y 1 min UV-C de
iluminacin tenido las actividades ms bajas de ASA-POD. Dado que la funcin biolgica del G-
POD y ASA-POD es para la eliminacin de H2O2 y otros hidroperxidos, mayores actividades de
G-POD y ASA-POD en las fresas con tratamiento UV-C seran beneficiosas para la proteccin
hidroperxidos contra la peroxidacin de lpidos y ADN en la fruta (Chaudiere y Ferrari-Iliou,
1999).
Superxido dismutasa (SOD), es una clase de protenas que contiene metales, que catalizan la
reaccin de dismutacin del radical superxido en aniones en H2O2 y oxgeno molecular
(Scandalios, 1993). SOD elimina el oxgeno simple, previene la formacin de hidroxilo radicales y
se ha implicado como una defensa esencial contra la potente toxicidad de oxgeno (Fridovich, 1986;
McCord, 1979). Hay tres tipos diferentes de SOD en funcin de su cofactor de metal: Cu / Zn (Cu /
Zn-SOD), Mn (Mn-SOD), y Fe (Fe-SOD) (McKersie et al., 1993). Sin embargo, en este estudio nos
slo la actividad SOD total determinado en las fresas tratada con differentUV-C iluminaciones. Los
resultados mostraron que SOD actividades disminuyeron en todos los tratamientos durante el
almacenamiento a 10 C. Sin embargo, despus de 15 das de almacenamiento, toda la iluminacin
UV-C tratada fruta de la fresa tena actividades SOD superiores al controlFruta.

Control y la iluminacion con UV-C de la fruta no mostraron ninguna visible infeccin durante los
primeros 5 das de almacenamiento. Sin embargo, el porcentaje de la decadencia lleg a 89.98 en
las frutas de control en 20 das a 10 C. El tratamiento de 10 min UV-C iluminacin dio los mejores
resultados para el control de la caries y despus de 20 das de almacenamiento el porcentaje de
descomposicin en este tratamiento fue slo 27.98. Esta podra ser un resultado de la inhibicin
directa del crecimiento microbiano por UVC iluminacin (Allende et al., 2006). Tambin se puede
explicar que los diferentes tipos de estrs, tales como UV-C iluminacin puede activar las
respuestas de defensa de las frutas y as contribuir a aliviar y reducir la colonizacin de tejidos por
patgeno (Pan et al., 2004).Nigro et al. (2000) y Marquenie et al. (2003) Botrytis inoculado esporas
en las fresas y se encontr una reduccin de la caries en UV-C ilumina la fruta, lo que indica que las
respuestas defensivas fruta podra ser activado. Tambin es posible que la radiacin UV-C
iluminacin induce y activa los mecanismos de decaimiento de resistencia por el aumento
la expresin de genes antifngicos y compuestos en la cscara de la fruta.

En conclusin, este estudio demostr que las fresas iluminados con UV-C tienen una mayor
capacidad antioxidante y actividad enzimtica y menos decadencia que los frutos control. Estos
resultados sugieren que los tratamientos UV-C puede ser tratamientos no-qumico til de tal forma
se mantiene la calidad de fruta de la fresa y la ampliacin de su la vida postcosecha. Se necesita
ms investigacin para dilucidar la relacin subyacente entre la iluminacin UV-C y antioxidante la
capacidad de las fresas.