INGENIERA EN BIOTECNOLOGA

BIOQUMICA I

Integrantes: Michelle Rojas

Jhonny Lanchimba
Jos Nivela

TEMA DE LA PRCTICA: Titulacin de aminocidos

1. NMERO DE LA PRACTICA: 1

2. INTRODUCCIN

Los aminocidos, son formaciones de molculas elementales que toman diferentes

formas secuenciadas como de ladrillo. stos, poseen una estructura poliamida lineal y
complementan las protenas. Pueden adoptar estructuras tridimensionales muy complejas
al momento de realizar sus procesos funcionales. Existe acerca de 300 aminocidos
identificados en los organismos vivos, sin embargo, tan solo 20 son sintetizados por el
ADN (Baynes, 2015).

A pesar de que los aminocidos adoptan estructuras muy complejas, mas no es el caso
de la glicina, ya posee la estructura ms simple, adems es diprtico, es decir, formado
por un grupo carboxilo y amino. De manera clara es considerado apolar, sin embargo, su
corta cadena lateral no interviene en las interacciones hidrofbicas (Lehninger, 2015).

Como ya se mencion, la glicina posee un grupo amino con carcter bsico, por lo que
fcilmente puede recibir protones, por otro lado, el grupo carboxilo con representacin
cida, es capaz de donar protones. Cuando est en un medio muy cido, la glicina se
encuentra totalmente protonada, pero al momento de aumentar su pH, ya sea por agregar
una base como el NaOH, pierde su primer protn en el grupo carboxilo y por ltimo en el
grupo amino, llegando as a desprotonarse completamente, de esta manera se realiza la
curva de titulacin (Feduchi, 2011).

Para saber el pH en el que se desprotonan, es indispensable el uso de las constantes de

equilibrio para la ionizacin de los grupos respectivos. Para el grupo carboxilo, se utilizar
el PKa1 y para el amino el PKa2 respectivamente, esto se puede medir mediante clculos
tericos o directamente por equipos como el potencimetro, que es un sensor muy til en
la medicin del nivel de acidez, luego de haber agregado NaOH (Quesada, 2014).

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3. OBJETIVO GENERAL

Construir una curva de titulacin del aminocido glicina a partir de datos

experimentales.

4. OBJETIVOS ESPECFICOS

Comparar los resultados experimentales con los tericos obtenidos en la titulacin

de la glicina.
Conocer la funcin principal del potencimetro en esta prctica.
Calcular los puntos de equivalencia de la curva de titulacin.

5. MATERIALES Y MTODOS

Tabla1. (Materiales , reactivos y equipos empleados)

Materiales Reactivos Equipos

Matraz 100 ml NaOH 1M Potencimetro
Soporte universal Agua destilada 200 ml
Bureta con llave 25 ml Glicina 50 ml
Embudo
Recipiente plstico
Papel

Mtodos

Con la ayuda del embudo se coloc 20 ml de NaOH en la bureta con llave que
previamente se coloc en el soporte universal, se ajust correctamente para no tener
complicaciones durante la titulacin. Luego, se coloc en el matraz de 100 ml, 50 ml de
glicina. Se ajust y se calibr el potencimetro, se lav sobre el recipiente plstico con
agua destilada y se sec con papel para evitar errores durante el muestreo. Esto se
realiz constantemente para eliminar los residuos del sensor de vidrio para pH y obtener
buena efectividad. Consecuentemente, se coloc debajo de la bureta con llave el matraz
con la glicina, se abri la llave y se titul con 0.3 ml de NaOH, se anot el pH experimental
y terico, se limpi el sensor de vidrio como se indic anteriormente para cada estancia,
este proceso se repiti con otro 0.3 ml, es decir se solt hasta ese entonces 0.6 ml de
NaOH, despus 0.4 para llegar a 1 ml, de nuevo 1 ml para llegar a 2 ml, etc. Hasta
terminar los 20 ml de NaOH predispuestos. Se titul de esta manera para constatar el
cambio, es decir, cuando se aadi poca cantidad de base en la glicina, ste cambi su
pH constantemente.

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7. RESULTADOS

Tabla2. (pH terico calculado)

NaOH (1M)Volumen Total(l) pH terico calculado

0 1,32
0,0003 0,81
0,0006 1,11
0,001 1,34
0,002 1,64
0,003 1,81
0,004 1,94
0,005 2,03
0,006 2,11
0,007 2,18
0,008 2,24
0,009 2,29
0,01 5,97
0,0103 9,64
0,0106 9,67
0,011 9,70
0,0113 9,73
0,0116 9,76
0,012 9,83
0,013 9,94
0,014 10,05
0,015 10,17
0,016 10,33
0,017 10,53
0,018 10,86
0,019 10,88
0,02 11,65

Tabla3. (Rango de region tamponante )

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Parametro Tipo Valor Rango regin tamponante

Experimental 2,34 3,34 1,34

pK1 Calculado 1,32 2,32 0,32

Experimental 9,60 10,60 8,60

pK2 Calculado 11,65 12,65 10,65

Experimetal 5,97 6,97 4,97

Pi Calculado 5,97 6,97 4,97

8. DISCUSIN

Los resultados obtenidos de la glicina dan lugar a cierta curva que se puede observar en
el grafico 7. , en donde el volumen en el eje x, el pH experimental se encuentra en el eje
y; en la misma se puede observar que la glicina posee un carcter anfotrico lo que
significa que el grupo amino que contiene esta ionizado y se comporta como un cido,
por otro lado si el carboxilo se ioniza se comporta como una bases se comporta como
cido y el carboxilo en esta ionizado se comporta como base. (Abreu, 2017)Tambin se
puede inferir que los grupos por los cuales est formado en este caso el amino, y el
carboxilo estn totalmente protonados, lo que significa que las molculas se presentan en
forma de cationes. (Abad, 2013)

Con la grfica tambin se puede demostrar Luego de observar los resultados se procedi
a comparar con documentos de internet , y se puede decir que los resultados son
ptimos debido a las coincidencias que existen, como el valor de PI, esto se debe a que
no existen variaciones en la frmula empleada y a que se hizo un anlisis completo en el
que se puede mencionar que el valor de pH en el cual el 100% del aminocido se
presenta como dipolo, se llama punto isoelctrico, en este lugar la molcula es
elctricamente neutra. (Gonzalez, 2013)

Asimismo se verifico con un prctica encontrada en internet, la variacin de resultados al

calcular el pH experimental, en la figura antes mencionada se puede ver a simple vista
que entre el primer punto de equivalencia, el PI y el punto final existen saltos, esto se
produce por el cambio de pH. Si el pH aumenta, habr un valor para el cual el 50% de
estar como ion positivo y el otro 50% como dipolo. (Lpez & Rodrguez, 2014), lo que

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esto nos quiere decir es que el pH cambia de bsico a acido; pero no todo tiene que ver
con eso, tambin se debe a las cantidades de NaOH que se le agregaron.

La variacin de los resultados obtenidos tambin pudo ser ocasionada por errores del
equipo como su calibracin, adems de esto tambin intervienen los errores sistemticos
como el manejo incorrecto del potencimetro, estas fallas pueden ocurrir si se sumerge
por demasiado tiempo el electrodo, o se saca el electrodo inmediatamente. (Francoi,
2016)

9. CONCLUSIONES

Los pH experimentales comenzaron con una cantidad alta con respecto al terico,
pero al llegar al primer punto de equivalencia estos pH cambian, los tericos son
mayores al de los experimentales. Estos pH mantienen una tendencia de valores
menores a mayores.
En esta prctica la funcin principal del potencimetro es medir el pH mediante su
electrodo de vidrio.
Los puntos de equivalencia se obtuvo mediante el siguiente clculo: Primer punto
de equivalencia o tambin conocido como punto isoelctrico
0,8 mol de Gly 1 mol NaOH 1000 ml NaOH
20 ml =10 ml NaOH y el
1000 ml 1 mol de Gly 1 mol de NaOH

segundo punto de equivalencia fue:

0,8 mol de Gly 2 mol NaOH 1000 ml NaOH
20 ml =20 ml NaOH
1000 ml 1 mol de Gly 1 mol de NaOH

10. RECOMENDACIONES

No dejar los electrodos del potencimetro por ms de 2 a 3 minutos en el

aminocido glicina.
Al titular, el pico de la bureta tiene que estar en el centro y dentro del vaso para
que la gota de NaOH entre en contacto con la glicina.
Lavar con agua destilada el electrodo, despus de utilizar en la medicin del pH de
cada sustancia titulada.

11. BIBLIOGRAFA

Abad, A. (05 de 2013). Scribd. Recuperado el 11 de 04 de 2017, de Scribd:

https://es.scribd.com/doc/141971272/INFORME-BIOQUIMICA-
AMINOACIDOS

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Abreu, G. (03 de 2017). Scribd . Recuperado el 11 de 04 de 2017, de

https://es.scribd.com/doc/49829356/Curvas-de-Titulacion-de-
Aminoacidos

Baynes, J. (2015). Bioqumica Mdica. Barcelona: ELSEVIER SAUNDERS.

Feduchi, E. (2011). Bioqumica: Conceptos esenciales. Madrid: MDICA

PANAMERICANA.

Francoi, D. (2016). "Physical Chemistry, Ed. John Willey and Sons. Recuperado
el 11 de 04 de 2017, de "Physical Chemistry, Ed. John Willey and Sons.:
http://campus.usal.es/~quimfis/apoyo/Felipe/practicas/GLICINA.PDF

Gonzalez, V. (2013). Departamento de bioquimica y biologia molecular.

Recuperado el 11 de 04 de 2017, de Departamento de bioquimica y
biologia molecular: http://ocw.usal.es/ciencias-biosanitarias/bioquimica-
ph-equilibrios-acido-2013-base/contenidos/4.%20Curvas%20de
%20titulacion%20de%20aminoacidos.pdf

Lehninger, A. (2015). Principios de la Bioqumica. Barcelona: OMEGA.

Lpez, C., & Rodrguez, M. (2014). Scribd. Recuperado el 11 de 04 de 2017, de

Scribd: https://es.scribd.com/doc/168372954/Titulacion-de-La-Glicina

Quesada, S. (2014). Manual de Experimentos de Laboratorio para Bioqumica.

San Jos: UNIVERSIDAD ESTATAL A DISTANCIA.

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12. ANEXOS

Grfico 1. Medicin del pH inicial

Grfico 2. Titulacin de glicina con NaOH en el potencimetro

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Grfico 3. Medicin del primer punto de equivalencia

Grfico 4. Medicin del segundo punto de equivalencia

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Grfico 5. Hoja de datos que se obtuvo en la prctica.

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pH Experimental
14.00

12.00

10.00

8.00

6.00 pH Experimental

Axis Title

4.00

2.00

0.00

Grfico 7. Curva experimental

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Clculos

0,5 mol 1 molNaOH 1000 mlNaOH

20 ml . . . =10 mlNaOH
1000 ml 1molGly 1 molNaOH

0,5 mol 2 molNaOH 1000 mlNaOH

20 ml . . . =20 mlNaOH
1000 ml 1 molGly 1molNaOH

1
pH= . log [ 2,34log ( 0,54)]
2

pH =1,32

[1 mol /l(3 x 104 )]

pH=2,34+ log
[ 0,5 mol /l (0,02)] [1mol /l(3 x 104 )]

pH=0,83

[1 mol /l( 6 x 104 )]

pH=2,34+ log
[ 0,5 mol /l(0,02)] [1mol / l(6 x 104 )]

pH=1,14

[1 x 103 ]
pH=2,34+ log
(0,011 x 103 )

pH =1,38

[2 x 103 ]
pH=2,34+ log
( 0,012 x 103 )

pH =1,73

[3 x 103 ]
pH=2,34+ log
(0,013 x 103 )

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pH =1,97

[4 x 103]
pH=2,34+ log
( 0,014 x 103 )

pH=2,16

[5 x 103 ]
pH=2,34+ log
( 0,015 x 103 )

pH =2,34

[6 x 103 ]
pH=2,34+ log
( 0,016 x 103)

pH =2,52

[7 x 103 ]
pH=2,34+ log
( 0,017 x 103 )

pH =2,71

[8 x 103 ]
pH=2,34+ log
( 0,018 x 103)

pH =2,94

[9 x 103 ]
pH=2,34+ log
( 0,019 x 103)

pH =3,29

[10 x 103 ]
pH=2,34+ log
( 0,0110 x 103 )

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pH =5,97

[0,0103]
pH=9,60+ log
2 [ ( 0,6 ) ( 0,02 ) ] [0,0103]

pH=9,63

[0,0106]
pH=9,60+ log
[0,020,0106]

pH=9,65

[0,011]
pH=9,60+ log
[0,020,011]

pH=9,69

[0,0113 ]
pH=9,60+ log
[0,020,0113]

pH=9,71

[0,0116 ]
pH=9,60+ log
[0,020,0116]

pH=9,79

[0,012]
pH=9,60+ log
[0,020,012]

pH=9,78

[0,013]
pH=9,60+ log
[0,020,013]

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pH =9,86

[0,014 ]
pH=9,60+ log
[0,020,014]

pH =9,97

[0,015]
pH=9,60+ log
[0,020,015]

pH =10,07

[0,016]
pH=9,60+ log
[0,020,016]

pH =10,20

[0,017]
pH=9,60+ log
[0,020,017]

pH=10,35

[0,018]
pH=9,60+ log
[0,020,018]

pH=10,55

[0,019]
pH=9,60+ log
[0,020,019]

pH =10,88

( 0,3 )( 0,020 )
[ ]
(0,02)( 20)
pH=14+ 9,60+log
2

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pH =11,50

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