Practica 13: MTODOS DE COLORACIN PARA

PROTOZOARIOS, Coloracin de hematoxilina

frrica de Heidenhain.

EQUIPO 2

ALUMNO: David Espinosa Camacho.

MAESTRA: Q.F.B Teresa De Jess Narro Villa Seor.

Materia: Parasitologa.
Objetivo:

Realizar de la manera adecuada el mtodo de Coloracin de hematoxilina

frrica de Heidenhain.

Fundamento:

Colorea protozoarios, principalmente amebas y flagelados. El mtodo de M.

Heidenhain, de coloracin con hematoxilina frrica, que tuvo su precursor en el de
Benda (1S86), es indudablemente superior a cuantos se han ideado con miras a la
tincin de los ncleos de las clulas, puesto que la laca frrica, adems de
colorear estos corpsculos con precisin y limpieza incomparables, sirve tambin
para poner de manifiesto otras muchas estructuras celulares, sea cual fuere el
procedimiento de fijacin empleado. Por estas razones, el citado proceder
constituye, como dice Langeron, el mtodo cardinal de la Citologa y de la
Protistologa. A l lado de estas evidentes ventajas, el mtodo de Heidenhain
presenta algunos inconvenientes, entre los cuales figura el de ser precisa una
prolongada permanencia de las preparaciones en el mordiente y en el colorante si
se desea lograr coloraciones irreprochables. Pero la ms grave desventaja de este
mtodo estriba en la dificultad de su ejecucin; sabido es, en efecto, cuan
variables son los resultados que se obtienen en relacin con el espesor de las
secciones, con la exposicin ms o menos larga de stas a la accin del colorante
y con la duracin del proceso diferenciador.

Materiales:
- Lminas portaobjetos.
- Laminillas cubreobjetos.
- Frasco coplin o placas Petri.
- Estilete o pinza curva.
- Colorante de hematoxilina (Anexo C).
- Cytoseal o blsamo de Canad.
- Alcoholes 50%, 70%, 85%, 95% y
absoluto en placas petri.
- Solucin Schaudinn (Anexo C).
- Solucin mordiente de sulfato de fierro
y amonio (Anexo C).
- Tintura de yodo (Anexo C).
- Solucin fisiolgica (Anexo C).
- Microscopio binocular.

Procedimiento:

-Preparar un set de placas petri 100 x 150 mm o el frasco Coplin con los reactivos
correspondientes, y con ayuda de un estilete o pinza curva hacer un frotis fino en
la lmina o la laminilla, esta ltima sujeta al porta-laminilla.

- Si la muestra es dura, hacer una emulsin previa en solucin fisiolgica, realizar

el frotis y pasar en solucin Schaudinn por 3 a 5 minutos.

- Pasar por alcohol 70% ms 1 a 2 gotas de tintura de yodo por 5 minutos.

- Pasar por alcohol 70% y 50% de 5 a 10 minutos cada vez.

- Pasar por agua corriente por 5 a 10 minutos.

- Pasar por la solucin mordiente 2% de 5 a 10 minutos

y enjuagar con agua corriente.

- Pasar por colorante por 5 a 10 minutos (1 mL de

solucin colorante hematoxilina y 9 mL de agua).

- Lavar con agua y pasar por una segunda solucin de mordiente al 2% para
decolorar, observando la intensidad de la coloracin.

- Lavar con agua corriente a chorro continuo de 10 a 15 minutos.

- Deshidratar pasando por alcohol 70%, 85%, 95% y absoluto, de 10 a 15 minutos
cada uno.

- Aclarar con xilol agitando el frotis, montar con cytoseal o blsamo de Canad y
observar al microscopio.

Observaciones:

En el examen macroscpico se observo comida sin

digerir, moco, color caf oscuro y olor ftido.

Mientras que en el examen microscpico se descarta la

presencia de protozoarios; como amebas o parsitos flagelados.

Resultado:

Presencia de bacterias y nula presencia de parsitos.

Conclusin:

Se enfatiza una posible infeccin intestinal por bacterias, deduciendo que

dichas bacterias son las causantes de la consistencia de las heces. Se descarta
una posible infeccin por parsitos. Se recomienda realizar otro frotis para
descartar infeccin parasitaria o por bacterias.