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Pregunta 1

Qu ocurri al aadir el perxido de hidrogeno? Ocurri para todas


las muestras?

Tubo hgado Al momento de agregar perxido de


1 hidrogeno
1 cocido No se observ burbujeo abundante, pero si algo
de burbujeo.
2 Con HCL No se observ burbujeo.
3 Con etanol Se observ abundante burbujeo.
4 Sin ninguna Se observ un gran burbujeo.
alteracin.
Tubo papa Al momento de agregar perxido de
2 hidrogeno
1 cocido No se observ burbujeo abundante.
2 Con HCL No se observ burbujeo.
3 CON alcohol Se observ abundante burbujeo y fue muy rpido
(pareca espuma).
4 Sin ninguna Se observ un gran burbujeo pero era constante.
alteracin.

Pregunta 2
Despus de comenzar a observar cierta efervescencia dentro del tubo
de reaccin a qu se debe la produccin de burbujas?
El perxido de hidrgeno es uno de los productos del metabolismo celular en
diversos organismos, pero dada su potencial toxicidad, es transformado
enseguida por la enzima catalasa, entonces podemos decir que la produccin
de burbujas se debe al desprendimiento de oxigeno por la reaccin realizada
por la enzima catalasa presente en el tejido del hgado que reacciono con el
perxido.

2 H2O2 2 H2O + O2

Pregunta 3
Explicar el efecto del cido clorhdrico y de la temperatura alta sobre
la actividad enzimtica.
En relacin a la temperatura, Qu le sucede a las enzimas cuando se
exponen a temperaturas extremas muy fras?
Con la realizacin de esta prctica pudimos darnos cuenta de los cambios que
puede sufrir la actividad enzimtica a causa de la variacin de pH y los
cambios de temperatura.
Temperatura
La elevacin de la temperatura incrementa la velocidad de una reaccin
catalizada por enzimas. Al principio la velocidad de reaccin aumenta cuando
la temperatura se eleva debido al incremento de la energa cintica de la
energa de las molculas reactantes.
Sin embargo, al final, la energa cintica de la enzima excede a la barrera
energtica para romper los enlaces dbiles de hidrogeno que conservan su
estructura secundaria y terciaria.
A esta temperatura predomina la desnaturalizacin con prdida precipitada de
la actividad cataltica. Por tanto las enzimas muestran una temperatura ptima
de accin. Los lmites de actividad para la mayor parte de las enzimas tiene
lugar entre los 10C y 50C; la temperatura ptima para las enzimas en el
cuerpo se hall alrededor de 37C.
El factor por el cual un proceso biolgico aumenta para un incremento de
temperatura de 10C es el coeficiente de temperatura o Q10. El Q10 para la
mayor parte de las enzimas vara entre 1.5 y 3.

pH
La intensidad mxima de la actividad de la enzima, ocurre en el pH ptimo, con
rpida disminucin de la actividad a cada lado de este valor de pH. La actividad
ptima generalmente se observa entre los valores de 5 y 9.
El pH ptimo de una enzima puede guardar relacin con cierta carga elctrica
de la superficie, o con condiciones ptimas para la fijacin de la enzima a su
sustrato. Cuando hay un exceso de iones hidrogeno, las enzimas los unen a sus
molculas y ante un dficit los ceden.
Este cambio tiene una doble consecuencia sobre la molcula. Como todas las
protenas, las enzimas desempean su funcin por los residuos de
aminocidos; algunos confieren a su superficie una distribucin de cargas
elctricas.
Cuando la concentracin de iones hidrogeno es muy baja en comparacin con
la concentracin optima, la molcula los cede desapareciendo cargas positivas
o apareciendo cargas negativas en su superficie. Ante una concentracin
elevada de iones hidrogeno, algunos se fijan a la molcula desapareciendo
cargas (-) o poniendo cargas (+) que no existan.
As mismo al cambiar las cargas elctricas en los residuos de aminocidos se
alteran los lazos de unin dentro de la molcula variando su acomodo
tridimensional con recuperacin de la actividad de la enzima.
Qu le sucede a las enzimas cuando se exponen a temperaturas
extremas muy fras?
Las bajas temperaturas afectan la velocidad de las reacciones catalizadas por
las enzimas, ya sea porque el movimiento de las molculas es ms lento y
menos probable que los movimientos aleatorios las pongan en contacto con el
sitio activo de una enzima apropiada; o tambin pueden inhibirse.

Pregunta 4
Cul es el efecto del etanol sobre la actividad enzimtica?
La catalasa en presencia de perxido de hidrogeno, cataliza la oxidacin de
etanol a acetaldehdo (Keilin y Hartree, 1936, 1945)
CH3CH2OH + H2O2 CH 3CHO + 2H2O
De ubicacin en los peroxisomas celulares, utiliza el perxido de hidrogeno
generado en las reacciones catalizadas por enzimas unidas al metabolismo de
acetaldehdo, como son la xantino oxidasa y la aldehdo oxidasa (Rajapolan et
al., 1964) o por la NADPH- oxidasa, de localizacin microsmica, que oxida al
etanol mediante combinacin de su propia reaccin con la catalasa (Abdulla y
Badawy, 1979):
NADPH +H +O2 NADP + H 2O2
La presencia de catalasa en el organismo humano, especialmente en el hgado,
rin y eritrocitos, junto con la existencia de diversos sistemas generadores de
perxido de hidrogeno, podra parecer que desempeara in vivo una funcin
activa en el metabolismo del etanol. Adems en condiciones normales es
probable que la oxidacin del etanol dependiente de la catalasa tenga mucho
significado in vivo por el hecho de que el ndice de generacin de perxido de
hidrogeno en el hgado es escaso en relacin al ndice metablico del etanol
(Boveris et al., 1972; Abdulla y Badway, 1979).
No obstante, se ha sugerido que la catalasa, en condiciones de aporte
prolongado de etanol, pudiera estar comprometida en el metabolismo in vivo
del alcohol (Hawkins y Kalant, 1972).
Las investigaciones de los efectos psicofarmacolgicos del etanol realizadas en
los ltimos aos han puesto de manifiesto la presencia de generacin de H2O2
en tejido cerebral de rata y la posibilidad de oxidacin del etanol en el cerebro
por accin de la catalasa, lo que permitira comprender el posible papel del
acetaldehdo en los mecanismos de aversin al consumo de alcohol. (Aragn et
al., 1985 y 1991; Hunt, 1996).
En recientes anlisis efectuados con homogeneados cerebrales humanos
mediante la adicin de etanol se ha observado una elevada actividad de la
catalasa y un incremento del nivel de acetaldehdo en relacin con los grupos
control (Hamby-Mason, 1997; Hamby-Mason et al., 1997).
Tambin, algunos de los efectos sobre el sistema nervioso central del alcohol,
al menos en animales, pueden ser disminuidos mediante el pre tratamiento con
el inhibidor de la catalasa, el 3- amino 1.2.4 triazol, o aumentados por accin
del acetato de plomo, inductor de la misma (Correa et al., 1998).
Como la oxidacin de etanol que ocurre en los peroxisomas a travs de la
actividad de la catalasa requiere la presencia de un perxido de hidrgeno
(H2O2), cuando el hgado que estuvo expuesto al alcohol se le suministra
perxido entonces la catalasa que proporciona el hgado al estar en un medio
adecuado actu y se produjo el intenso burbujeo que se vio en la
experimentacin. Esto prueba la capacidad del peroxisoma para realizar la
detoxificacin celular con la ayuda de la catalasa.

Pregunta 6
Describir las caractersticas estructurales de la catalasa. De acuerdo
al tipo de reaccin que cataliza A qu grupo de enzimas pertenece la
catalasa? Fundamente su respuesta
La catalasa es una enzima proteica de estructura cuaternaria, teniendo cuatro
monmeros y un grupo prosttico HEMO. La estructura de estos monmeros y
el grupo HEMO varan en las catalasas, ya que hay unas ms pequeas que
otras y que tienen distintos componentes en su estructura
En catalasas pequeas como la de los humanos, la masa molecular es
aproximadamente 60 kDa, los monmeros ms pequeos, resisten menos a la
desnaturalizacin, usan NADPH y tienen grupo HEMO b
En catalasas ms grandes, la masa molecular es mayor a 80 kDa, tienen un
dominio extra terminal en el C-terminal que es semejante a la flavodoxina,
presenta enlaces covalentes inusuales cercanos al sitio activo y son resistentes
a la desnaturalizacin y a concentraciones molares de perxido de hidrogeno,
adems presentan grupo HEMO d
La catalasa pertenece a la familia de las OXIDOREDUCTASAS pues cataliza una
reaccin de xido reduccin con el perxido de hidrogeno como sustrato,
teniendo dos etapas de reaccin, donde se oxida en la primera y se reduce en
la segunda.

Enz (Por-FeIII) + H2O2 Compuesto I (Por+-FeIV-O) + H2O


Compuesto I (Por+-FeIV-O) + H2O2 Enz (Por-FeIII) + H2O + O
Pregunta 7
En base a sus resultados, indique cules seran las conclusiones de la
prctica realizada.
Qued demostrada la actividad enzimtica de la catalasa en tejidos animales
y vegetales tras la observacin de burbujeo en el hgado y en la papa, lo que
indica la presencia de oxgeno.
Existen agentes fsicos que alteraron la accin de la enzima catalasa. La
temperatura en los tejidos redujo la actividad de la catalasa. Con el HCl la
actividad enzimtica se redujo an ms al igual que con el alcohol

Bibliografia:
- DIAZ A. La estructura de las catalasas Departamento de Bioquimica
Instituto de Fisiologia celular, UNAM, Mexico, 2002
- Audesirk Ty Audesirk G. 1996. Biologa, la vida en la Tierra. 4a. ed.
Prentice-Hall Hispanoamericana, S.A. Mxico. Pag.35,36.
- MATHEWS, C. K. Y VAN HOLDE, K. E. Bioqumica, McGraw Hill
Interamericana, 2. Ed., Espaa, 1998.
- WHITE, A., HANDLER, P., SMITH, E., HILL, R., LEHMAN, R. Principios de
Bioqumica, McGraw Hill, 1989.
- Garca, Jos; Lpez, Carmen. Manual de estudios sobre el alcohol. 2001.
Edicin N1. Editorial EDAF, Mxico. Captulo 10. Enzimas del
metabolismo del etanol: su posible contribucin a la predisposicin
gentica del alcoholismo. 10.4 Catalasa. 320 pg.
- Haiver, Jhon. PROPIEDADES CATALTICAS DE LA CATALASA,
DESNATURALIZACIN DE LALECHE Y CUANTIFICACIN DE PROTENAS.
http://es.scribd.com/doc/74577665/PROPIEDADES-CATALITICAS-DE-LA-
CATALASA

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