http://www.ipadews.

com/01-11-2012/traductor-gratuito-para-safari-ipadiphone/

http://publish.uwo.ca/~jkiernan/filelist.htm#HISTOFILES
Ciencias Bsicas

1) Enlaces qumicos
Solemos pensar de los diferentes tipos de bonos como entidades discretas. Esta
no es la forma en que debe ser visto. Los enlaces inicos y covalentes son los
extremos opuestos de un continuo. Los bonos que son 100% 100% inica o
covalente no son lo habitual. La mayora de los elementos que se combinan lo
hacen en algn tipo de mezcla de caractersticas inicas y covalentes. Puesto que
son los extremos de un mismo proceso, el punto de divisin es en el
50%. Cuando un enlace es ms de 50% inica se hace referencia como un enlace
inico, a pesar de que puede tener carcter sustancial covalente. Del mismo
modo, cuando un enlace es ms de 50% covalente, se hace referencia como un
enlace covalente, a pesar de que puede tener carcter sustancial inica.

Estas medidas son, por supuesto, hecho por los qumicos fsicos.

En la prctica, la aplicacin histolgico es que la mayora de los colorantes se

unen a los componentes del tejido por enlaces inicos. Los enlaces covalentes
son mucho menos importantes, excepto en mordiente tinte junto con enlaces
coordinados.

Inicos bonos
Sinnimos

Bonos electrovalente
Unin electrosttica
Bonos Coulombic
Sal vinculacin

Los enlaces inicos dependen de la transferencia de un electrn de un tomo a

otro. El tomo que pierde el electrn a continuacin, se convierte en un ion
cargado positivamente. El tomo que recibe el electrn se convierte en un ion
cargado negativamente. Los iones con cargas opuestas se atraen entre s, y los
cargos son los que mantienen a los tomos.

La capacidad de un elemento para atraer electrones se

llama electronegatividad . La electronegatividad de los elementos se expresa
como un nmero de hasta 4,0. Cuanto mayor sea la diferencia entre las
electronegatividades de dos elementos, los compuestos ms probables formados a
partir de ellos son de naturaleza inica.

La reaccin fundamental entre colorantes y componentes de tejidos es la

atraccin inica entre las cargadas carboxilo grupos de uno con las
cargadas amino grupos de la otra. Ambos tintes y tejidos pueden tener grupos
carboxilo y / o amino, por lo que es aplicable desde ambas perspectivas.

Aunque la atraccin inica entre los grupos carboxilo cargados negativamente y

los grupos amino cargados positivamente es la de mayor importancia, atracciones
inicas entre amino e hidroxilo , entre amino y fosfato , y entre amino y
sulfnico tambin son frecuentemente presentes. Otras reacciones inicas
tambin es posible (y probable), pero son de baja importancia global, excepto en
circunstancias muy especficas.

Grupo qumico No ionizado Ionizado Tipo

Amino -NH 2 -NH 3 + Catinico

Carboxyl -COOH -COO - Anionic

Hidroxilo -OH -O - Anionic

Sulfnico -SO 3 H -SO 3 - Anionic

Enlace covalente
Cuando la disparidad entre las electronegatividades de los dos tomos no es lo
suficientemente grande como para dar lugar a la transferencia de un electrn, el
efecto es que ambos tomos comparten los electrones que participan. Los
electrones pasan tiempo asociado con ambos de los tomos. Dependiendo de la
diferencia especfica electronegatividad, los electrones pueden estar asociados
con uno de los tomos ms que con el otro. Esto se conoce como la polaridad, y
compuestos que exhiben que se llama polares compuestos. Slo en el caso de
exactamente iguales electronegatividades qu compuestos se convierten en
completamente no polar. Esto se observa cuando los tomos son del mismo
elemento, como en los gases elementales como el hidrgeno (H 2 ) y oxgeno
(O 2 ).

Coordinar bonos
Sinnimos
 Coordinar enlace covalente
Covalencia dativo

Enlaces coordinados son similares a los enlaces covalentes. La diferencia est en

la fuente de los electrones que forman el par de unin. En enlaces covalentes
cada tomo de participar en los bonos dona un electrn, ambos de los cuales son
entonces compartida por los dos tomos.Con enlaces coordinados, slo uno de
los tomos dona electrones (dos de ellos), los cuales estn compartidos por
ambos de los tomos que participan en el enlace. Un compuesto formado por
enlaces coordinados se llama un compuesto de coordinacin .

A excepcin de mordientes, enlaces covalentes y coordenadas son de poca

importancia en la tincin. La gran mayora de la tincin es de naturaleza inica.

2) Dipolos
Hay dos tipos de interacciones dipolo-dipolo. El ms fuerte de los dos es el
enlace de hidrgeno. Cuanto ms dbil es la fuerza de van der Waals. Ambas
interacciones dependen de la misma causa fundamental, la carga de electrones, y
la forma en que los resultados en la atraccin y la repulsin a un nivel atmico.

Fuerzas de van der Waal

La estructura de un tomo tiene un ncleo central compuesto de protones
cargados positivamente y neutrones sin carga rodeados por un nmero variable
de electrones cargados negativamente. Los electrones giran alrededor del
ncleo. Como lo hacen por lo que hay variaciones menores en la expresin de su
carga. En el punto alrededor del tomo de que el electrn ocupa por lo que la
expresin instante de su carga negativa se incrementa, y en el punto opuesto a
que, cuando su influencia es la menos importante, la expresin de la carga
positiva del protn se incrementa del mismo modo.

Por supuesto, no se trata de dos tomos individuales. Miles de millones estn

involucrados en cualquier interaccin entre los compuestos. En todo momento
habr muchos casos de molculas que tienen una distribucin de carga temporal
que se traduce en una atraccin para otra molcula. Casos individuales no son
importantes. Un gran nmero de casos de este tipo de atracciones muy dbil y
fugaz, sin embargo, puede dar lugar a la unin sustancial entre los
compuestos. Es el gran nmero de casos involucrados que es importante, no la
naturaleza de la atraccin.

Dos tomos interactan debido a la influencia de sus electrones (los puntos

rojos). Uno se muestra con un electrn estacionaria para ilustrar la forma en su
posicin relativa tanto a los electrones y los protones del otro tomo afecta a la
relacin entre los dos.

Hydrogen Bonds
Los enlaces de hidrgeno son un poco ms fuertes que las fuerzas de van der
Waals, y requieren de dos componentes: - un grupo de donantes y un grupo
aceptor. El grupo de donantes se compone de hidrgeno y un tomo
electronegativo. El grupo aceptor es otro tomo electronegativo que tiene
electrones disponibles.

Cuando el hidrgeno y el otro elemento electronegativo se combinan en

un enlace covalente los electrones en la molcula resultante pueden ser atrados
lejos de la de hidrgeno al otro elemento a nivel local y aumentan su carga
negativa. El tomo de hidrgeno se desarrolla una carga positiva
correspondiente. Las cargas alrededor de la molcula son desiguales y una parte
tiene una mayor carga negativa y el otro tiene una mayor carga
positiva. Molculas como sta se denominan polares compuestos. Los elementos
son comnmente oxgeno, nitrgeno, azufre, halgenos o de carbono.

La imagen de la izquierda muestra la polaridad de una molcula de agua. El electrn de

cada uno de los tomos de hidrgeno (amarillo) se adjunta y compartida por el tomo de
oxgeno (azul claro). Debido a la diferencia significativa en las electronegatividades de los
dos tomos, los electrones son atrados ms al oxgeno que a la de hidrgeno y tienden a
ser desplazados, ms o menos permanentemente, lejos del tomo de hidrgeno. El
resultado final es una molcula cargada positivamente en un lado (hidrgeno), y cargado
negativamente en el otro (oxgeno).

Debido a su polaridad, muchos donantes de enlaces de hidrgeno tambin son

aceptores, pero esto no siempre es necesariamente as. Las molculas comunes
que tratamos en histotecnologa frecuencia no contienen los donantes y
receptores, sin embargo. Estas molculas incluyen agua, alcoholes, fenoles,
cidos carboxlicos y aminas. Algunos compuestos no actan como donantes ni
aceptores, y stos incluyen algunos hidrocarburos saturados. La fuerza de un
enlace de hidrgeno individuo es variable debido a que las electronegatividades
del elemento en particular al que se une el hidrgeno pueden variar. Esto da lugar
a diferentes grados de polaridad dependiendo de los tomos particulares
implicados. A veces podemos utilizar estas diferencias en el grado de polaridad
para controlar el proceso de tincin. Un ejemplo sera el uso de etanol como
disolvente en lugar de agua en la tincin con rojo congo amiloide.

El principio bsico detrs de enlace de hidrgeno es que el tomo de hidrgeno

deficiente en electrones de una molcula polar es atrado hacia el lado rico de
electrones de otra molcula polar. Una de hidrgeno deficiente en electrones
tambin puede ser atrado a un tomo de electrones ricos en la misma molcula
en algunos compuestos tales como polipptidos. Mientras que el desplazamiento
de los electrones en molculas polares es esencialmente permanente y la
atraccin de hidrgeno rico protn para los tomos ricas en electrones es similar
permanente, son las fuerzas ms dbiles. Por esa razn los enlaces de hidrgeno
individuales no son permanentes y estn continuamente rompiendo y reformar
como consecuencia del movimiento normal de las molculas en solucin.

Esta ilustracin muestra cmo el lateral cargada

positivamente de una molcula de agua es atrado por el
lateral cargada negativamente de otra molcula de agua.De
esta forma el tomo de hidrgeno es un puente, que une
dos tomos de oxgeno juntos, y las molculas de agua
tambin. Este es el principio fundamental detrs de los
enlaces de hidrgeno. En el caso de muchas molculas de
agua pueden participar, y cada uno de los tomos de
hidrgeno (amarillo) se pueden unir dos tomos de oxgeno
(azul claro).

3) Benceno
El benceno es el compuesto de origen de todos los compuestos aromticos. Se
ilustra generalmente como un hexgono con sus puntos que representan cada uno
de seis tomos de carbono. Si no hay otros tomos se muestran como estando
unido a cada punto del hexgono, se supone entonces un tomo de hidrgeno que
se adjunta. Cada uno de los tomos de carbono se ilustra como que se unen a sus
dos vecinos por cualquiera de una sola o una lnea doble.Estas lneas representan
enlaces simples y dobles respectivamente. Dos arreglos alternos de estos bonos
son posibles.
El concepto de la estructura de benceno como se ha descrito anteriormente, fue
propuesta por Kekul en 1872. Se sugiri que estos enlaces simples y dobles
alternados cambian continuamente de posicin unos con otros muy rpidamente,
causando la molcula para que vibre. Esta vibracin era tan rpido que no se
pudo detectar.

La teora de Kekul se considera ahora obsoleto y fue reemplazado por otro que
hace hincapi en que ninguna de las posibles estructuras con alternancia de
enlaces simples y dobles era correcta, y que ni la estructura existi en
realidad. Rapid vibracin entre ellos no se produjo en absoluto, y la estructura
real estaba en algn lugar entre las dos estructuras suplentes establecida en los
diagramas. Estas dos estructuras alternativas no eran ms que las comodidades
para explicacin y fueron llamados hbridos de resonancia .

De la misma manera, se debe recordar que las frmulas estructurales de los

productos qumicos son slo por conveniencia. Las diferentes configuraciones
que se muestran para el benceno (y otros compuestos) son representaciones
convenientes solamente y no son la realidad. No describen necesariamente
la verdadera estructura.

La explicacin actual de la estructura del benceno es el que los enlaces entre los
tomos de carbono del benceno son todos iguales. Cada tomo de carbono est
unido a su vecino con un electrn de cada tomo. Puesto que cada tomo tiene
dos vecinos, este utiliza dos electrones de cada tomo. Otro electrn de cada
tomo de carbono se utiliza para unir el hidrgeno unido a l. Los seis electrones
rbita restante los ncleos atmicos en ngulo recto con el plano del anillo y
tambin se superponen entre s, por consiguiente, difuminar sus rbitas tanto por
encima como por debajo del anillo. Como resultado, los electrones son
compartidos por igual entre los tomos de carbono y existir como dos nubes, uno
por encima y otro por debajo del plano del anillo de carbono. Dado que estos
ltimos seis electrones no se limitan a tomos de carbono especficos, que se dice
que estn deslocalizados . Esto normalmente se representa en las frmulas
estructurales como un hexgono con un crculo en el centro para representar la
naturaleza compartida de los electrones.
 La estructura de electrones deslocalizado de benceno

En general, la explicacin anterior es adecuada. Opinin moderna es que los

electrones que participan en los enlaces que forman benceno (y otros
compuestos) no estn restringidos a los tomos individuales. Ms bien, ellos
estn asociados con tomos particulares para un porcentaje del tiempo. En el caso
de los enlaces carbono-carbono, el porcentaje es extremadamente alta, como lo es
con los electrones que forman los enlaces entre el carbono y tomos de
hidrgeno.Todos los electrones, sin embargo, pasar algn tiempo asociado con
otras partes de la molcula, como la nube de electrones deslocalizados. Del
mismo modo, los electrones en el estado deslocalizada pasarn una pequea
fraccin de su tiempo localizada con tomos individuales.

Como no se requiere energa para mantener los electrones cerca de protones en

los ncleos atmicos, esta nube de electrones debe contener la energa necesaria
para mantenerlo donde est. Es esta energa que es fundamentalmente
responsable de la absorcin de la radiacin y, finalmente, el fenmeno que
conocemos como color. Esto es debido a un proceso llamadoresonancia . No se
debe confundir este proceso de resonancia con el trmino hbrido de
resonancia que se utiliza para describir la estructura de benceno. Recuerde que
no existen hbridos de resonancia.

La resonancia es la induccin de una respuesta en un sistema de energa de otro

sistema de energa en estrecha proximidad, la cual est operando al mismo nivel
de energa. En este caso los dos sistemas son la energa en la nube de electrones y
la radiacin electromagntica.

Por definicin, los colorantes son compuestos aromticos. Esto significa que
deben tener por lo menos un arilo de anillo (a menudo llamado un anillo fenilo o
benceno) en su estructura. Los electrones deslocalizados en este anillo de arilo es
la causa fundamental de la absorbancia de la luz en estos compuestos orgnicos,
y por lo tanto la aparicin de color en el tintes. s benceno absorbe a
aproximadamente 200 nm. Esto est fuera del rango que los seres humanos
pueden percibir, que est a unos 400 a 700 nm. Para nosotros, por lo tanto, el
benceno parece ser incolora.
Referencia
Gran parte de los datos de esta pgina fue extrado, con autorizacin,
de TheMeter Tabla peridica Alessandri, Stefano Tabla peridica de los
elementos TheMeter sitio web en Internet.

Fessenden RJ y Fessenden JS, (1990) Qumica Orgnica , 4 ed., Brooks / Cole

Publishing Company, Pacific Grove, California, EE.UU.

Casi cualquier texto de referencia qumica orgnica moderna utilizada para

primero o segundo ao universitario cursos de qumica orgnica contendra la
misma informacin.

4) Estructura Dye y Color

Los componentes que intervienen en la tincin histolgica son colorantes y

protenas. El proceso fundamental implicado es la unin qumica entre los grupos
carboxilo de uno y los grupos amino de la otra. Los bonos ms comunes
implicados son enlaces inicos, aunque hay excepciones, especialmente en el
caso de la tincin nuclear de ADN.

El uso del color para identificar los componentes individuales de las secciones de
tejido se lleva a cabo principalmente con tintes qumicos, aunque a veces se usan
otros medios.Colorantes, sin embargo, son el grupo ms grande que podemos
manipular.
Qu son los tintes
En resumen, los colorantes son compuestos orgnicos coloreados, ionizantes,
aromticas.

Debemos ser conscientes de que son sustancias qumicas individuales, y al igual

que todos los productos qumicos, que son similares en sus reacciones a otros
productos qumicos, y muy diferente de los dems. Puede parecer que esto es una
declaracin de lo obvio, pero a veces nos parece ver tintes como algo distinto de
los productos qumicos comunes, y quiero hacer hincapi en que las mismas
reglas que se aplican al cloruro de sodio, cido actico, bencidina y una serie de
otros tambin se aplican a los tintes. Esto incluye la posibilidad de que son
txicos. Ellos pueden ser cancergenos o mutagnicos o perjudiciales para su
salud de alguna otra manera.

El hecho de que llamar a las cosas por un nombre atractivo y porque tiene un
color atractivo, no por ello es menos daino. Maneje colorantes con
cuidado! Ponga su propia seguridad primero!

De qu color es
tintes son compuestos orgnicos aromticos, y como tal, se basa
fundamentalmente en laestructura del benceno. Para nosotros, benceno parece ser
un lquido incoloro. De hecho, absorbe la radiacin electromagntica como tintes
hacer, pero lo hace a alrededor de 200 nm por lo que no vemos.

La percepcin del color es la capacidad de algunos animales, incluyendo seres

humanos, para detectar algunas longitudes de onda de la radiacin
electromagntica (luz) de manera diferente de otras longitudes de onda. Luz del
da normal, o la luz blanca, es una mezcla de todas las longitudes de onda a la
que podemos responder y algunos a los que no podemos, en particular, los rayos
infrarrojos y ultravioleta. Respondemos a longitudes de onda entre
aproximadamente 400 a 700 nm. Cuando un objeto absorbe parte de la radiacin
dentro de esa gama, vemos las ondas que quedan, y el objeto aparece de color.En
realidad este rango vemos constituye slo una fraccin muy pequea del espectro
electromagntico.
En trminos cientficos, no hay nada especial acerca de las longitudes de onda en
el rango visible, aparte de ser los principales componentes de la luz del sol que
no se eliminan por la atmsfera de la tierra. Su especial importancia se basa
exclusivamente en la capacidad de las retinas humanas para responder a ellas, y
para discriminar entre ellos en un grado significativo. Estas discriminaciones son
lo que llamamos color.

Las longitudes de onda justo fuera del rango visible se considera incolora, a pesar
de que no existe una diferencia sustancial entre ellos y las longitudes de onda
dentro del rango lmite. Algunos animales (abejas, por ejemplo) se pueden ver
estas otras longitudes de onda, pero, porque los seres humanos no lo hacen, los
consideramos incoloro. El punto es que el color es un fenmeno subjetivo, y
pensando en el color como algo objetivo es engaoso. Por esa razn, debemos
referirnos a las longitudes de onda involucradas en lugar de describir la respuesta
humana a ellos.

Cuando algunas de las longitudes de onda que se encuentran en la luz blanca se

absorben, entonces vemos lo que queda como la luz de color. El color que vemos
es referido como el color complementario del color que se elimin. Por ejemplo,
si los rayos rojos se eliminan de la luz blanca, el color que detectamos es de color
azul-verde. Azul-verde es complementaria a rojo, y rojo es complementario al
azul-verde.

Colores complementarios

Eliminado Observado Eliminado Observado

Violeta Amarillo-verde Amarillo-verde Violeta

Azul Amarillo Amarillo Azul

 Cian Naranja Naranja Cian

Azul-verde Rojo Rojo Azul-verde

Verde Prpura Prpura Verde

La absorcin de la luz que sale el color complementario

La percepcin del color es simplemente una adaptacin evolutiva humana a la

ausencia de algunas longitudes de onda en la luz blanca. Supongamos sin
embargo, que lo mismo sucede fuera de la gama a la que nuestros ojos
responden. Supongamos que un producto qumico elimina la radiacin que tiene
una longitud de onda de aproximadamente 200 nm, como benceno hace. Es este
color?

Bueno, obviamente no lo es. No ha habido ningn impacto en las longitudes de

onda de luz blanca, por lo que no es de color. Sin embargo, lo que le ha sucedido
a la radiacin ultravioleta que fue absorbido por el benceno no es diferente a lo
que ocurre con la radiacin azul que se retira cuando miramos a travs de una
solucin de fucsina cida. La diferencia es nicamente si se puede detectar
visualmente. El color no es un fenmeno objetivo, que es la
humana deteccin y la percepcin de la radiacin electromagntica.

Por qu tintes son de color

del color en los tintes invariablemente se explica como una consecuencia de la
presencia de un cromforo . Dado que, por definicin, colorantes son
compuestos aromticos su estructura incluye anillos de arilo que se han
deslocalizado sistemas de electrones. Estos son responsables de la absorcin de la
radiacin electromagntica de longitudes de onda variables, dependiendo de la
energa de las nubes de electrones. Por esta razn, cromforos no hacen tintes de
color en el sentido de que les confieren la capacidad de absorber la
radiacin. Ms bien, cromforos funcionan mediante la alteracin de la energa
en la nube de electrones deslocalizados del colorante, y esta alteracin da como
resultado la absorcin de radiacin compuesto desde dentro de la gama visible en
lugar de fuera de ella. Nuestros ojos detectan que la absorcin, y responden a la
falta de una completa gama de longitudes de onda por ver el color.

Los cromforos son configuraciones atmicas que pueden alterar la energa en

los sistemas deslocalizados. Ellos se componen de tomos unidos en una
secuencia compuesta de alternancia de enlaces simples y dobles. Los dobles
enlaces en los compuestos orgnicos pueden ser de dos tipos. Si los tomos con
enlaces dobles no son adyacentes, que se denominan aisladas dobles enlaces, y
existen independientemente de otros dobles enlaces en la misma molcula. Si los
tomos adyacentes tienen dobles enlaces se denomina conjugados dobles enlaces
y los enlaces interactuar unos con otros.Configuraciones cromforo menudo
existen como mltiples unidades, con dobles enlaces conjugados, y son ms
eficaces cuando lo hacen. Esto es debido a la interaccin entre los dobles enlaces,
lo que provoca la deslocalizacin parcial de los electrones que participan en los
enlaces. En este caso, a pesar de tomos especficos estn involucrados en los
bonos, los electrones se distribuyen sobre un rea ms grande que los tomos
especficos y tambin implican tomos adyacentes que tienen dobles enlaces.

El punto de esto es que los sistemas conjugados han deslocalizado parcialmente

electrones, y la energa de estos electrones deslocalizados pueden influir en la
energa de los electrones deslocalizados del compuesto aromtico progenitor
mediante la ampliacin del nmero de electrones que participan en el sistema y la
energa necesaria para mantener todo el sistema en su lugar.

Dobles enlaces conjugados (rojo)

Otro cromforo comn es el grupo nitro. Este cromforo es un nitrgeno con dos
tomos de oxgeno unidos. Uno de oxgeno se muestra unido con un enlace
sencillo, el otro con un doble enlace. De hecho, como los tomos de carbono en
benceno, estos dos tomos de oxgeno estn unidos al nitrgeno con bonos de
igual fuerza. Los electrones adicionales que estn deslocalizados entre los tres
tomos.
 Grupo nitro

El anillo quinoide se encuentra en muchos colorantes. Se trata de una estructura

de anillo con dos puntos en los que pueden adherirse las cromforos. Debe ser
considerado como un sistema cerrado de dobles enlaces conjugados. La unin de
las configuraciones que aaden electrones deslocalizados en el sistema en un
momento dado, y la unin de las configuraciones que se extienden a los tomos
implicados en la deslocalizacin en el otro, causa cambios muy dramticos en las
longitudes de onda que estos compuestos absorben.Por esta razn,
configuraciones de anillo quinoides se considera que son cromforos sumamente
potentes, produciendo compuestos muy intensamente coloreadas.

Orto-y para-cromforos anillo quinoides

Para resumir esto, cromforos son configuraciones atmicas que contienen

electrones deslocalizados. Por lo general, se representan como nitrgeno,
carbono, oxgeno y azufre que tienen enlaces simples y dobles alternos. Mediante
la incorporacin de los electrones deslocalizados en estas configuraciones en los
electrones deslocalizados en los anillos de arilo de compuestos aromticos, la
energa contenida en la nube de electrones puede ser modificado. Si se cambia la
energa incorporado en la nube de electrones, a continuacin, la longitud de onda
de la radiacin que se absorbe tambin cambiar. Si este cambio en la longitud de
onda para ser absorbida es suficiente para causar ninguna absorcin a todo dentro
de la gama visible, a continuacin, el compuesto ser de color.

A continuacin se presentan los cromforos comn que se encuentra en los tintes

histolgicos: -

-C = C- -C = N- -C = O-
-N = N- -NO 2 Anillos quinoide

Otros efectos
No es ms que uno de los efectos que los grupos qumicos unidos a anillos
arilo.Cualquier electrones deslocalizados y su energa simplemente se pueden
aadir a la ya presente, por lo tanto aumentarla. Adems, los electrones
deslocalizados puede ser compartida por ms tomos que los de la estructura
original, mediante la adicin en el sistema deslocalizado los tomos en el
cromforo y los modificadores que pueden estar presentes. Ya sea que estos
efectos se producen en forma conjunta o por separado, el impacto final es una
alteracin en la energa total de la nube de electrones con un efecto posterior en
la longitud de onda de radiacin a la que reacciona todo el sistema molecular.

Otra posibilidad es que los electrones pueden ser removidos de la nube de

electrones, y esto puede resultar en la prdida de color. La eliminacin de
electrones puede hacer que los electrones restantes vuelven a rbitas locales. Un
buen ejemplo sera el reactivo de Schiff . Cuando el cido sulfuroso reacciona
con pararosanilin, un grupo sulfnico se une al tomo de carbono central del
compuesto. Esto interrumpe el sistema de doble enlace conjugado del anillo
quinoide, haciendo que los electrones se localizan y el anillo de dejar de ser un
cromforo. Por consiguiente, el colorante se vuelve incolora.

Auxochrome
Abajo estn los auxochromes habituales en colorantes histolgicos: -

-NH 3 -COOH -HSO 3 -OH

Auxochromes son grupos que se unen a compuestos no ionizantes sin embargo,

mantener su capacidad para ionizar. Aunque esta definicin es en gran medida
correcta, sino que tambin es inadecuada. Esto se debe a que restringe la
definicin del auxochrome de ionizacin, y no hace comentarios sobre el efecto
de auxochromes en la absorbancia del compuesto resultante.

La palabra auxochrome se deriva de dos races. El prefijo AUXO es de auxein ,

y significa aument. La segunda parte, cromo significa color, por lo que el
significado bsico de la palabra auxochrome es aumentador de color. Esta
palabra fue acuada, ya que se observ inicialmente que la adicin de grupos
ionizantes dio lugar a una profundizacin y la intensificacin del color de los
compuestos.

Color potenciando, por un auxochrome

A la izquierda es naftaleno , un compuesto

incoloro.

La adicin de un nico grupo hidroxilo a la naftalina

produce 1-naftol , que es tambin un compuesto
incoloro, pero que puede ionizar.

Si en lugar de un grupo hidroxilo se aade el grupo

nitro, que es un cromforo, se obtiene el
compuesto2,4-dinitronaftaleno . La adicin de este
cromforo ha provocado que se convierta en color
amarillo plido.

Si en lugar de un grupo hidroxilo o grupos

nitro, tantoun hidroxilo y se agregan los grupos
nitro, se obtiene el colorante de color amarillo
oscuro, amarillo Martius.

La adicin de tanto un auxochrome y un cromforo da como resultado

una alteracin mucho ms fuerte del mximo de absorcin del
compuesto.El grupo hidroxilo debe haber profundizado el color,
mostrando que auxochromes tambin son cromforos.

A veces el trmino auxochromophoric se utiliza para denotar la accin de un

auxochrome que modifica el color, as como permitiendo ionizacin. Este
trmino se infiere que la modificacin de color efectos de auxochromes son raros,
pero esto no es el caso. El efecto sobre la absorcin no debe ser considerada
como un aspecto incidental de la accin del auxochrome, sino una parte
integrante y fundamental de la misma. La palabra auxochromophoric es
redundante.

Edward Gurr propuso los trminos colligator y no colligator distinguir entre

ionizantes auxochromes y efectos modificadores de color.
Auxochromes son de dos tipos. Ellos pueden tener una carga positiva como el
grupo amino y sus variantes sustituidas. O pueden estar cargadas negativamente
como los grupos carboxilo e hidroxilo, y el grupo sulfnico. Esta ltima se utiliza
comnmente para convertir colorantes bsicos para colorantes cidos. Tanto
cargados negativamente y auxochromes cargados positivamente pueden estar
presentes en una sola molcula.

Resonancia
El proceso por el cual los electrones son estimulados por la radiacin es la
resonancia .Debe quedar claro desde el principio que la resonancia no es la
misma que la vibracin.

La resonancia es la induccin de una respuesta en un sistema de energa de otro

sistema de energa en estrecha proximidad, la cual est operando al mismo nivel
de energa (frecuencia). En los compuestos orgnicos aromticos, incluyendo
tintes, los dos sistemas de energa son la radiacin electromagntica , y la nube
de electrones deslocalizados .No se debe confundir resonancia con los
imaginarios hbridos de resonancia se utilizan en una explicacin ms antigua
para la estructura de benceno.

La absorcin de benceno en comparacin con algunos de los colorantes

Modificadores de
Color modificadores tales como grupos metilo o etilo alteran el color de los
colorantes mediante la alteracin de la energa en los electrones
deslocalizados. Por s solos no pueden hacer lo suficiente para hacer que la
absorcin en el rango visible, pero pueden afectar a la sombra de manera
significativa cuando la absorcin ya est en ese rango. La adicin de ms de un
modificador de resultados particulares en una alteracin progresiva del color. Los
compuestos que difieren unos de otros en este tipo de forma regular se
denominan homlogos . Un muy buen ejemplo es visto con la serie violeta de
metilo.

Alteracin del color por los modificadores

Sin ningn grupo metilo el

tinte padre se
llamapararosanilin y es
rojo.

Cuando se aaden cuatro

grupos metilo se obtiene el
tinte prpura rojizo violeta
de metilo .

A medida que se agregan

ms grupos metilo se
obtiene el colorante azul
prpuravioleta cristal ,
que cuenta con seis de
estos grupos.

Si se aade un grupo
metilo sptimo, el colorante
resultante es verde de
metilo.

El Color
El color del colorante es causada por la absorbancia de la radiacin
electromagntica. Nos hemos referido constantemente a la longitud de onda que
es absorbida en singular, sino un simple escaneo de una solucin de colorante
con un espectrofotmetro muestra que los colorantes no eliminan una sola
longitud de onda. Ms bien que absorben la radiacin a cada lado de la longitud
de onda ms completamente eliminado (el mximo de absorcin).Trazado de la
longitud de onda absorbida con el grado de absorcin por lo general resulta en
una pantalla parecida a una campana de Gauss. Si cualquier parte de esta curva
est en el rango visible, el colorante aparecer coloreada.

La luz blanca es una mezcla de longitudes de onda. Algunos de estos tienen una
relacin de la energa en la nube de electrones deslocalizados de la molcula de
colorante. Por el proceso de resonancia, se ha descrito anteriormente, la nube de
electrones responder a la energa contenida en la radiacin que mediante la
absorcin, y de sacarlo del espectro.Como consecuencia, la luz blanca dejar de
ser en blanco y mostrar los colores de las longitudes de onda de sobra. La luz
transmitida tendr el color complementario a las longitudes de onda eliminado.

El Efecto
Cuando la luz ilumina un colorante, parte de ella es absorbida como
energa. Dado que la energa no se destruye, algo debe suceder a
continuacin. Podramos usar una analoga de agua caliente - aumenta la
temperatura del agua, el aumento de las vibraciones moleculares. Sin embargo,
no vemos nada, ya que el agua slo se sienta all es agua.

Lo mismo puede ocurrir con los tintes, es posible que no observamos algo en
particular que el efecto puede ser a nivel atmico. Hay varias posibilidades, sin
embargo.

A. El nivel de energa de los electrones en un colorante no afectada se llama

el estado fundamental. Cuando la radiacin electromagntica, como la
energa ligera, se absorbe los electrones vuelven con ms energa.

B. Con la mayora de los colorantes, hay entonces una decadencia gradual y

los electrones vuelven al estado fundamental. No vemos nada. Sin
embargo, algo puede suceder que no vemos. Posiblemente hay un aumento
de la temperatura, o se producen algunos cambios qumicos que
interrumpen la estructura del colorante y hacer que se pierda el color
- decoloracin .

C. Otra posibilidad es que el retorno al estado fundamental no es gradual,

pero repentina. Si esto se acompaa de la emisin de cualquier energa
residual en forma de luz, se observa que el colorante brillante
- fluorescencia . Dado que la luz emitida siempre debe contener menos de
energa que la luz absorbida, ya que algunos se utiliz para energizar los
 electrones, la radiacin emitida est siempre en longitudes de onda ms
largas que la radiacin absorbida. Mediante la manipulacin de la luz
disponible, podemos hacer que la luz ultravioleta para ser absorbida y la
luz visible que se emitan.

D. Una tercera posibilidad es que los electrones estabilizan en su estado

recin energizado. Despus de un paso de tiempo que a continuacin,
vuelven al estado fundamental. Si esto ocurre gradualmente, podemos
observar nada, con las mismas posibilidades en cuanto a la decoloracin y
el aumento de temperatura como antes.

E. Si el retorno al estado fundamental ocurre de repente, y la energa residual

se emite en forma de luz, vemos una vez ms resplandeciente que el
colorante -fosforescencia . Al igual que con la fluorescencia, la luz
emitida es siempre una longitud de onda ms larga que la luz absorbida,
pero la disparidad es mayor con la fosforescencia debido a la mayor
energa consumida en mantener los electrones en el estado excitado.

Tenga en cuenta que la diferencia entre la fluorescencia y fosforescencia es en si

los electrones estabilizan en el estado excitado antes de volver al estado
fundamental. Con un poco de estabilidad, no importa el tiempo (o corta), se
considera fosforescencia.

Conclusin
La explicacin de la relacin entre la estructura y el color depende de la
estructura atmica bsica del anillo de arilo, y los electrones compartidos o
deslocalizada que esta disposicin atmica tiene. La capacidad para absorber la
radiacin es inherente a esta estructura. El efecto de otras configuraciones
atmicas es modificar la energa contenida en la nube de electrones
deslocalizados manera que el compuesto absorbe la radiacin electromagntica a
una longitud de onda en el rango visible. Algunos tambin ionizan, permitiendo
el compuesto para reaccionar qumicamente con grupos ionizantes tejido.

Color, decoloracin, fluorescencia y fosforescencia son vistos a ser diferentes

efectos de la misma proceso fundamental.

Referencias Fessenden RJ y Fessenden JS, (1990), Qumica Orgnica, 4

ed., Brooks / Cole Publishing Company, Pacific Grove, California Casi cualquier
texto de referencia qumica orgnica moderna utilizada para primero o segundo
ao universitario cursos de qumica orgnica contendra la misma informacin.

Burstone, MS
Histoqumica enzima y su aplicacin al estudio de las neoplasias
Academic Press, Nueva York, NY, EE.UU.

5) Estructura de la Protena
La estructura bsica de las protenas es una secuencia de aminocidos , llamados
as porque contienen tanto un grupo amino y un grupo carboxilo (cido IC) en la
misma molcula.Protenas humanas estn compuestas de cidos alfa-
aminocidos, alfa es el nombre griego de "", la primera letra en el
alfabeto. Un grupo -amino por lo tanto, se une al primer tomo de carbono al
lado del punto de referencia, que es el grupo carboxilo terminal.

Los aminocidos se combinan para formar compuestos ms complejos. Si dos se

unen entre s un dipptido se forma, tres hacen un tripptido , y si ms de que se
llama un polipptido .Estos pueden ser muy largo. Los diversos aminocidos se
combinan a travs de un enlace peptdico . El grupo -amino de un aminocido
reacciona con el grupo carboxilo terminal de otro aminocido, la liberacin de
una molcula de agua y la unin de los aminocidos juntos a travs de-NH-, o un
enlace peptdico. Esto se ilustra a continuacin, con el enlace peptdico se
muestra en rojo.

Los polipptidos pueden estar compuestos de diferentes aminocidos en

combinacin, y dibujando las frmulas estructurales repetidas ocasiones sera
confuso y redundent. Por lo tanto un sistema de taquigrafa ha sido ideado para
mostrar secuencias de aminocidos. Este sistema se basa en un cdigo de 3 letras
para cada aminocido. La secuencia de aminocidos se compone de los cdigos
individuales conectados con un guin. Hay un segundo sistema que se compone
de una sola letra, pero se usa menos comnmente como algunos aminocidos que
difieren slo ligeramente tiene la misma letra del cdigo. Los cdigos para
algunos aminocidos comunes se enumeran a continuacin.

Aminocido Cdigos Aminocido Cdigos

Alanina ala un La leucina leu L

Arginina arg r Lisina lys k

Asparagina asn n Metionina conocido m

El cido asprtico spid d Fenilalanina phe F

Cistena cys c Proline pro p

Glutamina gln q Serina servicios s

cido glutmico glu e Treonina THR T

Glicina gli g Triptfano trp w

Histidina su h Tirosina tyr y

Isoleucina ile yo Valina val v

Las imgenes a continuacin muestran compuestos de la aminocido ms simple,

la glicina, por separado, como un dipptido y como cuatro glicina
polipptido. Aunque para fines de ilustracin se muestra glicina, cualquiera de
los aminocidos podran ser sustituidos en cualquier orden. La secuencia
particular de aminocidos es la estructura primaria de las protenas.

Glicina
gli
2 glicina dipptido
Gly-Gly

4 glicina polipptido
Gly-Gly-Gly-Gly

Se puede ver en la ilustracin que la molcula tiende a curvarse. Esto se ve ms

claramente en el diagrama de cuatro glicinas, en la secuencia de azul, verde, rojo
y marrn. El punto que se ilustra es que los cidos como ms aminocidos se
unen, el polipptido resultante crece de un modo general en espiral. Esta espiral
se mantiene en posicin por enlaces de hidrgeno entre el hidrgeno amida (NH)
y los grupos carbonilo (C = O) (ilustrado con un punto negro), causando la
formacin de una bobina de las agujas del reloj, o de hlice alfa (-hlice), que
es laestructura secundaria de las protenas.

En esta bobina de los grupos secundarios tienden a estar en el exterior de la

hlice. Algunos de ellos se sienten atrados el uno al otro, haciendo que la espiral
de doblar y doblar, estos pliegues estn sujetos por lugares de inters como
enlaces disulfuro, enlaces inicos, enlaces de hidrgeno y fuerzas de Van der
Waals. Esta es la estructura terciaria de las protenas. Elcuaternario estructura
es que hace cuando estos polipptidos se unen para formar grandes
macromolculas.

Este complejo de plegamiento de los polipptidos y la formacin de la

macromolecular protenas resulta en muchos de los grupos laterales son el
interior de los pliegues, con otras partes de la molcula que actan como una
barrera para que se bloquean fsicamente de reaccionar con los colorantes y otros
productos qumicos.

Las protenas tambin son anfteros. Es decir, que contienen tanto grupos
laterales cargados negativamente y cargado positivamente. El nmero especfico
y la frecuencia de cada dependern de la secuencia de aminocidos, por lo que
puede variar para cada protena. En general, sin embargo, a un pH particular, toda
la molcula tendr una carga positiva o negativa.A este pH, los grupos laterales
cargadas individuales se cancelan entre s, y la molcula no tendrn ningn cargo
en absoluto. Esta es la protena isoelctrica punto. A menudo alteran el pH de
soluciones de tincin para tomar ventaja de este efecto, ya sea la intensificacin
de tincin, al igual que con la adicin de cido actico a las soluciones de
colorantes utilizados en las tcnicas de tricrmico, o la inhibicin de la tincin, al
igual que con la adicin de hidrxido de sodio en los mtodos de amiloides con
rojo congo y tintes similares. Reactivos utilizados de esta manera se
denominan accentuators .

Otras estructuras
Aunque la -hlice es la estructura ms comn, hay otras dos maneras en las que
pueden formar molculas de protena. Se trata de la bobina de azar y las
estructuras de lmina plegada beta (-plegada).

La estructura espiral al azar es algo explica por s mismo. No hay una estructura
organizada en particular, y la cadena de aminocidos se pliega simplemente al
azar cuando los grupos secundarios son atrados el uno al otro.

La hoja de -plegada se encuentra ms comnmente en las plantas que en las

personas, pero la tincin altamente selectivo de amiloide se cree que es debido a
este tipo de protena. En lugar de flexin en un crculo, los aminocidos se
alinean en una serie concertina de pliegues, formando as una hoja en lugar de
una bobina. Se cree que durante la tincin de los colorantes utilizados para
adjuntar amiloide a lo largo de estos pliegues, la formacin de una seudo-
cristalde molculas de colorante alineados y causar algunos efectos pticos
inusuales.

Protenas conjugadas
Las protenas pueden ser combinados con otros materiales. Estos se
denominan protenas conjugadas . El material unido puede ser un metal, en cuyo
caso se denomina unmetalloprotien , podra ser un lpido como en las
lipoprotenas , un hidrato de carbono como en mucoprotena y glicoprotena ,
grupos fosfato como en fosfoprotena , o un cido nucleico como
en nucleoprotena .

Debe tenerse en cuenta para la nucleoprotena que la tincin de la cromatina

puede llevarse a cabo a travs de cualquiera del cido nucleico o a travs del
resto de la protena. Ambos pueden ser responsables en algn grado, y los
vnculos protena-colorante explicar por qu el ncleo puede ser demostrado con
algunos de los colorantes despus de que el ADN se ha eliminado.

7) Los hidratos de carbono

Aunque una parte importante de histotecnologa se basa en la tincin de las

protenas de una manera u otra, las protenas no son el nico material biolgico
con el que nos ocupa. Tanto los carbohidratos y los lpidos son importantes en los
estados sanos y la enfermedad, y es importante que su manifestacin sea
confiable. Antes de que es posible una comprensin de la naturaleza de los
materiales es necesario. Esta pgina discute la estructura de los hidratos de
carbono que se relacionan con la histologa humana. No es una explicacin
exhaustiva, sino que proporcionar el fondo para la demostracin de estos
materiales.

Los hidratos de carbono son compuestos de carbono con hidrgeno y oxgeno en

una proporcin de 2:1, de la que se deriva el nombre, es decir, de carbono
acuosa o de carbono hidratado . La relacin de hidrgeno a oxgeno 2:01 es, por
supuesto, H 2 O, la frmula para el agua. El trmino hidrato de carbono tambin
se utiliza para referirse a compuestos derivados de stos por la oxidacin o la
reduccin, mediante la adicin de grupos amino, carboxilo y fosfato, o por su
reparto con las protenas y los lpidos.

Los monosacridos
La unidad bsica para los carbohidratos es un azcar . Hay numerosos ejemplos
de azcares, que son llamados ms propiamente monosacridos y tienen la
frmula general C n (H 2 O) n .El prefijo mono significa "uno" o "nico", mientras
que la palabra sacrido significa que es un azcar, es decir, que es un compuesto
formado por un azcar simple. El fin ide en este contexto significa "en la clase
de", por lo que un monosacrido es un compuesto formado por una sola molcula
de azcar y clasificado como un hidrato de carbono.

Adems de "mono", otros prefijos que denotan nmeros se pueden encontrar. El

prefijo disignifica dos, por lo que un disacrido es un carbohidrato compuesto de
dos molculas de azcar, y tri denota hidratos de carbono con tres molculas de
azcar es decir, un trisacrido .La palabra oligosacrido significa "unos
azcares" y se refiere a los hidratos de carbono con varias molculas de
azcar. polisacrido significa "muchos azcares" y se refiere a los hidratos de
carbono compuestos por un gran nmero de molculas de azcar, tales como
glucgeno, celulosa o almidn.

Los nombres de los hidratos de carbono por lo general terminan con osa , por
ejemplosacarosa, que es ms comnmente conocida como azcar de mesa o de
caa de azcar, y es un disacrido compuesto por una molcula de glucosa y una
molcula de fructosa. Debido al hecho de que contienen grupos hidroxilo,
azcares se refieren a veces como alcoholes o ols .
Si se hace pasar la luz a travs de una solucin de un monosacrido, ser girado a
la derecha o la izquierda. Si a la derecha se le designa con el signo + o
minsculas d . Si a la izquierda, el signo menos - o minsculas l se utiliza. La
minscula "d" es la abreviatura de "dextro", que significa "derecho" y la "l" es la
abreviatura de "levulo" o "laevulo", que significa "izquierda". El prefijo "dextro"
dio origen al trmino "dextrosa" de la forma ms comnmente encontrado de la
glucosa, dextrgiro D glucosa , ilustrado por encima. Del mismo modo, el prefijo
"levulo" dio origen al nombre de "levulosa" para la fructosa o azcar de la
fruta. Aunque a veces visto, tanto "dextrosa" y "levulosa" como la identificacin
de nombres para la glucosa y la fructosa estn en desuso y deben ser evitados en
uso cientfico.

Formas del anillo

Adems de la proyeccin de Fischer para ilustrar la estructura de los hidratos de
carbono, ilustraciones utilizando anillos se ven con frecuencia. Conocida como la
proyeccin de Haworth, que son comnmente encontrados. Hay dos tipos de
frmula anillo, los basados enpiranosa , que tiene un anillo de seis miembros (5
carbonos y un oxgeno), y los basados enfuranosa , que tiene un anillo de 5
miembros (4 carbonos y un oxgeno).
 D-glucosa D-glucopiranosa D-glucofuranosa

Como puede verse, un anillo de piranosa se forma a partir del hidroxilo del
carbono 5 reaccionar con el aldehdo de carbono 1 formando un hemiacetal . En
el caso de la furanosa, la reaccin es entre el aldehdo de carbono 1 y el hidroxilo
del carbono 4. El grupo hidroxilo en el carbono 1 de glucopiranosa, llama
la glicosdico hidroxilo , es reactivo y puede formar compuestos con otros
monosacridos y alcoholes. Estos son llamados disacridos si con otro
monosacrido o un glicsido si con un no-ol hidratos de carbono, por ejemplo
metanol.

-D-glucopiranosa -D-glucopiranosa

Dos molculas de piranosa diferentes se pueden formar a partir de glucosa,

dependiendo de si el hidroxilo junto al oxgeno est en el lado opuesto de la
molcula como el CH 2 OH, en cuyo caso se conoce como -D-glucopiranosa (la
frmula en la a la izquierda), o en el mismo lado, cuando se conoce como -D-
glucopiranosa (la frmula a la derecha).

Compuestos similares para ceto azcares se muestran a continuacin, utilizando

fructosa como un ejemplo.

-D-fructopiranosa
-D-fructofuranosa

Hay una forma alternativa de sacar los anillos de monosacridos, que se muestra
en el diagrama de la izquierda, abajo. Esto a veces se llama la estructura "silla", y
que est diseado para mostrar las relaciones entre los ngulos de enlace con
mayor claridad. Es de la misma -D-glucopiranosa se muestra en el diagrama de
al lado. El tercer diagrama, a la derecha, da la secuencia de numeracin habitual
para los anillos de monosacridos.

anillo de -D-
silla de -D-glucopiranosa glucopiranosa Numeracin

Tenga en cuenta que cuando se utiliza el trmino "glucosa" en patologa

anatmica por lo general se refiere a la -D-glucopiranosa, ya que es la forma
ms comn encontrado.

Disacridos
monosacrido unidades pueden combinarse entre s para formar disacridos, "di"
significa "dos". Probablemente la ms conocida ser la sacarosa o azcar de caa,
y la lactosa o azcar de la leche. La sacarosa se ilustra como un producto de -D-
glucosa y -D-fructosa, lactosa y se ilustra como un producto de -D-galactosa y
-D-glucosa.

La sacarosa Lactosa

Los polisacridos
en el tejido humano del polisacrido encontrado es el glucgeno. En los tejidos
vegetales que es el almidn y la celulosa. Algunos animales y hongos contienen
quitina. Todos son diferentes tipos de polisacridos. El glucgeno, almidn y la
celulosa son polmeros de glucosa, mientras que la quitina es un polmero de N-
acetilglucosamina, una glucosa modificada.

El polisacrido que es ms importante en la patologa anatmica es glucgeno ,

un polisacrido muy similar al almidn. Se compone de muchas unidades de
glucosa, tal vez un cuarto a la mitad de un milln o ms. Estos se unieron en
largas cadenas de 1-4 enlaces glucosdicos, es decir, que estn unidas entre s en
los tomos de carbono 1 y 4 de la glicosdico hidroxilo. Cada diez o ms
unidades de glucosa hay un enlace glucosdico 1-6 que hace que la cadena de
glucgeno en rama.

El glucgeno

Uno de los principales los polisacridos que se encuentran en las plantas

es almidn , que incluye dos compuestos ligeramente diferentes. Uno de ellos
es amilosa , un polisacrido no-ramificacin compuesta de un gran nmero de 1-
4 unidades de glucosa enlazadas. La otra es la amilopectina , un polisacrido
ramificado similar en estructura al glucgeno, pero con menos 1-6 ramas
vinculadas y de dos a tres veces ms unidades de glucosa entre las ramas. La
amilopectina se utiliza a veces como una seccin adhesiva.

La celulosa es otro polisacrido de glucosa encontrada en las plantas. Este es un

material muy ampliamente distribuido, ya que constituye una parte importante de
la estructura de las plantas.Tambin es un polmero no ramificado de unidades de
glucosa unidas mediante enlaces 1-4, pero en este caso son enlaces -glicosdicos
en lugar de los enlaces -glucosdicos de glucgeno y almidn (ver los diagramas
anteriores de -D-glucopiranosa y -D-glucopiranosa). Polmeros de celulosa
contienen varios cientos a varios miles de unidades de glucosa con enlaces de
hidrgeno entre las unidades que estabilizan la estructura y hacen que sea ms
rgida.

La quitina es un polisacrido que se encuentra en los hongos, las conchas de

crustceos y algunos otros animales. Es un polmero compuesto de N-
acetilglucosamina en lugar de la glucosa. Las unidades de N-acetilglucosamina
estn vinculados a travs de 1-4 -glicosdicos similares a la celulosa.

Todos estos polisacridos se pueden encontrar en la patologa anatmica, ya sea

como un componente natural del tejido, como consecuencia de la enfermedad
(quitina en las paredes celulares de los hongos), la contaminacin de los guantes
de ltex (grnulos de almidn) o por azar (astillas de madera, residuos de
alimentos ). Afortunadamente, todos ellos tienen un aspecto diferente al
microscopio por lo que aunque todos ellos pueden ser PAS positivo, su aspecto
visual hace que sean fciles de identificar.

La presencia de N-acetilglucosamina en quitina destaca el hecho de que los

grupos no sean otros monosacridos se puede unir a un monosacrido. Un
material comnmente encontrado compuesta de una molcula de glucosa con un
grupo amino unido es la glucosamina , un suplemento diettico tomado a
menudo por las personas con artritis y un componente comn de las mucinas,
glicolpidos y glicoprotenas. Si el grupo amino en s tiene un grupo carboxilo
unido (N-acetil-) el compuesto formado es N-acetilglucosamina . Como se ha
sealado, el polmero de este compuesto es el polisacrido quitina.

La glucosamina N-acetilglucosamina

Un grupo comn de compuestos son la sialo-mucinas , ampliamente distribuido

como componentes de mucinas epiteliales. Sialomucinas contienen cidos
silicos (cidos neuramnicos), que son nueve amino azcares de carbono que
contienen grupos carboxilo. Dos de ellos, los cidos N-acetil-y N-glicoloilo-
neuramnico, se ilustran a continuacin y la numeracin de los nueve carbonos se
muestra a la izquierda.

Numeracin
cido N-acetil-neuramnico cido N-glicoloilo-neuramnico

Los grupos carboxilo no son los nicos grupos cidos que pueden formar
compuestos con monosacridos. Los compuestos con grupos fosfato son bastante
comunes. glucosa-1-fosfato yglucosa-6-fosfato son ejemplos. La diferencia entre
estos dos compuestos es que el carbono se ha unido el grupo fosfato. Ambos son
importantes en el metabolismo celular, de almacenamiento de energa, etc .
Asimismo, no es un caso de cualquiera de un grupo o de otro grupo unido a un
monosacrido.Puede ser fcilmente un caso de un grupo y otro. Un ejemplo de
ello es la N-acetilglucosamina-6-fosfato , es decir, la glucosa con un grupo
amino y carboxilo unido en el carbono 2, y un grupo fosfato en el carbono
6. Comparacin de la frmula para N-acetilglucosamina y la frmula para la
glucosa-6-fosfato a continuacin.

La glucosa-1-fosfato La glucosa-6-fosfato N-acetilglucosamina-6-fosfato

Adems de la adicin de grupos carboxilo de la molcula, tanto el terminal de

aldehdo de la aldosa azcares y el hidroxilo terminal puede ser oxidado a un
grupo carboxilo. Esto da tres posibilidades. Si se cambia el aldehdo terminal de
solo forma un cido aldnico . Si se cambia el terminal hidroxilo que forma
un cido urnico . Si los dos se cambian se denomina aric ocido
sacrico . Estos se ilustran a continuacin con la glucosa.

cido glucnico cido glucurnico cido Glucarico

El cido glucurnico es un constituyente comn de las mucinas. As es la N-

acetilglucosamina.Juntos forman el disacrido hyaluranon , tambin conocido
como cido hialurnico con los dos monosacridos unidos por enlaces que se
alternan entre las posiciones 1-3 y 1-4. El polmero de este compuesto, en
combinacin con la protena, forma la base de cido hialurnico que contiene
mucopolisacridos cidos. Otra clase de mucopolisacridos cidos son los
sialomucinas, ya mencionados.
 Hyaluranon

Adems de mucopolisacridos cidos carboxilados hay mucopolisacridos

sulfatados. Estos se forman a partir de monosacridos que contienen grupos
sulfato. Sulfatos de condroitina son ejemplos, y contienen galactosaminas
sulfatados en conjuncin con el cido glucurnico.condroitina-4-
sulfato y condroitin-6-sulfato son ejemplos que difieren en la que el carbono
tiene el grupo sulfato. Condroitina-4-sulfato de condroitina se llama sulfato de
tipo A y condroitina-6-sulfato es tipo C. Chondoitin sulfato se encuentra en el
cartlago, y se utiliza como un suplemento diettico para personas con
artritis. sulfato de dermatn es similar pero contiene cido idurnico en lugar de
cido glucurnico, y se encuentra en la piel. heparina es tambin un compuesto
relacionado que contiene cido idurnico y es ms fuertemente sulfatado. Es un
anticoagulante que se encuentra en los mastocitos y, a menudo utilizado para su
demostracin. Como sulfatos de condroitina y sulfato de dermatn, heparina es
fuertemente metacromtica con los azules y tintes relacionados.

Condroitina-4-sulfato Condroitina-6-sulfato

Dermatn sulfato Heparina

Azcares pentosa
Hasta ahora la discusin se ha centrado en hexosas, en particular glucosa y cmo
se modifica para diferentes propsitos. Hay otro grupo de compuestos que son
muy importantes, pero se basan en los azcares
pentosa, ribosa y desoxirribosa . desoxirribosa tiene un grupo
hidroxilo de la ribosa menos, con hidrgeno que lo sustituya. Esto se muestra en
los siguientes diagramas. La ribosa y desoxirribosa se muestran ambos, ya que
suelen estar representados y al lado de las mismas molculas que se muestra con
los tomos de hidrgeno incluidos explcitamente para enfatizar el oxgeno que
se ha eliminado en desoxirribosa en el carbono 2. El esquema de numeracin se
muestra a la izquierda.

La ribosa La ribosa-explcita Deoxyribose Deoxyribose explcito

Tanto ribosa y desoxirribosa son importantes ya que son la base de ARN (cido
ribosenucleic) y ADN (cido deoxyribosenucleic) respectivamente. Sin embargo,
esa no es su nica funcin.Ellos tambin son importantes en la transferencia de
energa y la respiracin celular.

Referencia
Casi cualquier texto de referencia qumica orgnica moderna contendra la misma
informacin.

Diem, K. y Lentner, C. , (1970) Mesas Cientficas Ciba-Geigy, Basilea, Suiza.

Nucleic Acids
Los cidos nucleicos son compuestos formados a partir de los dos azcares
pentosa ribosa ydesoxirribosa . Desoxirribosa tiene un grupo hidroxilo menos de
ribosa, con hidrgeno sustituya, es decir, que ha perdido a uno de oxgeno, de ah
el nombre. Esto se muestra en los siguientes diagramas. La lnea superior muestra
la ribosa y la lnea inferior muestra desoxirribosa. Las frmulas de la derecha
muestran los tomos de hidrgeno para enfatizar el oxgeno que se ha eliminado
en desoxirribosa en el carbono 2. El esquema de numeracin se muestra a la
izquierda.
 La ribosa

Deoxyribose

La ribosa y desoxirribosa son la base de ARN (cido ribosenucleic)

y ADN (cido deoxyribosenucleic), respectivamente, aunque tambin son
importantes como fuente de energa y la participacin en la respiracin
celular. La estructura subyacente es la formacin de unnuclesido . Los
nuclesidos son compuestos formados entre uno de los azcares y uno de cinco
bases, se muestra a continuacin como estar en dos grupos, uno de los
dos purinas o uno de los tres pyrimadines .

Adenina Guanina

Purines

Citosina Uracil Timina

 Pyrimadines

Cada una de las pentosas puede combinar con las bases para formar diferentes
nuclesidos, se ilustran a continuacin con el nuclesido adenosina y citidina su
complemento. Todos los nuclesidos se forman de manera similar, con adenina
dando lugar a la adenosina, guanina a guanosina, citosina a citidina, uridina a
uracilo y timina a 5-metiluridina. Nuclesidos similares forman con
desoxirribosa.

La adenosina Citidina

Los nucletidos difieren de nuclesidos en que tienen grupos fosfato

unidos. Esto es comnmente en el carbono 5, donde dice CH 2 OH en las
frmulas anteriores. Ms de un grupo fosfato se adjunta para que pudiramos
tener la adenosina monofosfato, adenosina difosfato y trifosfato de adenosina,
por ejemplo. El ltimo, trifosfato de adenosina , tambin se conoce como ATP y
es un compuesto importante para el suministro de energa en el metabolismo
celular. Otros nucletidos se forman a partir de nuclesidos de ribosa y
desoxirribosa tanto en forma similar.

El monofosfato de adenosina El trifosfato de adenosina, ATP

Los cidos nucleicos estn compuestos de mltiples unidades de nucletidos,
unidos a travs de sus grupos fosfato, es decir, que son polmeros, unos a veces
muy largas compuestas de millones de pares de bases. Ellos existen como una
hebra doble helicoidal, similar a una escalera con las bases como los peldaos y
los grupos fosfato como los montantes. Las cadenas dobles se producen porque
las bases del par de nucletidos de hasta uno con el otro, cada uno que liga a una
base especfica, complementaria. En ambos ADN y ARN guanina siempre se
empareja con la citosina, mientras que en el ADN la adenina se aparea con la
timina en el ARN y la adenina se aparea con uracilo. El vnculo entre las bases se
debe a enlaces de hidrgeno. Es la secuencia de bases que determina el
"significado" en los cidos nucleicos.

Secuencia de ADN

Sera muy tedioso para dibujar las frmulas estructurales de una secuencia de
cido nucleico, por lo que un sistema de taquigrafa se ha descrito. Las bases se
asignan cada uno una letra y estas cartas se dan como la secuencia. Es de
entenderse que cada base de una letra representa est adherido a la ribosa o
desoxirribosa como el caso puede ser, y la base complementaria se une a la
especificada.

Base Smbolo RNA ADN

De bases complementarias

Adenina La U T
Citosina C T T
Guanina T C C
Timina T - La
Uracil U La -
Los tres componentes principales de cidos nucleicos,es decir , azcares de
pentosa, fosfato y bases, son importantes desde un punto de vista histolgico. Los
azcares de pentosa pueden usarse para demostrar especficamente ADN por
hidrlisis cida de la desoxirribosa para formar un aldehdo, que reacciona con el
reactivo y colores de rojo de Schiff. Los grupos fosfato se han demostrado estar
involucrados en la tincin nuclear con hemalumbre y colorantes bsicos, y las
bases pueden estar involucrados con la fijacin de colorantes cidos, adems de
ser capaz de formar enlaces de hidrgeno que, junto con las fuerzas de van der
Waal, que se conoce a ser un factor en la tincin nuclear.

A pesar de hacer una gran parte del ncleo, los cidos nucleicos no son el nico
componente.Tambin hay un poco de protena asociada a ella. Esto se conoce
como nucleoprotena , y tambin puede estar implicada en la tincin
nuclear. Esta protena incluye las histonas, que son protenas altamente alcalinos
o estrechamente asociados con el ADN. Puede haber otros, las protenas no
histonas presentes tambin. ADN-histonas complejos se denominan ahora
comocromatina . Este trmino originalmente entr en uso a finales de 1800 antes
de que se conoce la estructura del ADN y se utiliza para referirse a la parte del
ncleo que se tie con colorantes.Ahora se utiliza para referirse al complejo
ADN-histona. Sin embargo, la palabra "cromatina" todava puede ser encontrado
en los contextos que se refieren a cualquiera de los significados, especialmente en
textos ms antiguos.

Por lo tanto, la tincin nuclear puede ser debido a: -

Deoxyribose aldehdo
Colorantes bsicos vinculados a grupos fosfato
Lagos vinculados a grupos fosfato
Colorantes bsicos inherentes a la protena nuclear
Los tintes cidos correspondientes a las protenas nucleares
Los tintes cidos correspondientes a los grupos bsicos nucleares
El enlace de hidrgeno a partir de bases
El enlace de hidrgeno de otras fuentes
fuerzas de van der Waals

Es este gran diversidad de causas que explica por qu la estructura nuclear puede
demostrarse despus de cidos nucleicos se han eliminado de los tejidos, ya sea
deliberadamente o de dejar en un cido descalcificacin durante demasiado
tiempo, y por qu los colorantes cidos se han utilizado para teir los ncleos en
algunos antiguas tcnicas de tricrmico. Por desgracia, la determinacin de cul
de estos factores es en juego en un mtodo de tincin en particular no es un
asunto sencillo. La realidad es que puede que no sea una simple o / o explicacin
y mltiples factores pueden estar involucrados, como parece ser el caso con
alumbre hematoxilina tincin de los ncleos.

Los hidratos de carbono

En histotecnologa la palabra lpidos se refiere a toda la grasa y la grasa
similares, o sustancias que contengan grasa. Esto incluye triglicridos, cidos
grasos, lipoprotenas y glicolpidos.Tambin sera incluir cualquier material que
tiene un material de grasa o graso como un componente, independientemente de
la cantidad. En otras palabras, se trata de una, trmino general que abarca todo
con poca especificidad. Cuando se requiere una referencia ms especfica para
estos materiales es habitual el uso de un trmino que describe el tipo particular de
lpidos en discusin. El trmino grasa se utiliza a menudo en la misma manera
que "lpido".

Hay una dificultad con la demostracin de los lpidos histolgicamente. Es que se

disuelven en los disolventes utilizados para el procesamiento de parafina y, en
menor grado, en el procesamiento de celoidina. Eso significa que pueden no estar
presentes en las secciones de parafina, despus de haber disuelto a cabo. Por esa
razn, se pueden requerir las secciones congeladas. Cabe sealar, sin embargo,
que no todos los lpidos se eliminan por los disolventes utilizados durante el
procesamiento de parafina y cantidades significativas de algunos lpidos puede
estar an presente. Generalmente, estos son los lpidos unidos a otros materiales,
tales como lipoprotenas, lipofuscinas y de la mielina. Los triglicridos siempre
se eliminan por completo en bloques adecuadamente despejadas y infiltrado, y la
declaracin de que las grasas se eliminan por el procesamiento de parafina es una
referencia principalmente a este.

Una gran cantidad de lipoprotena est presente en las membranas celulares y,

aunque esto no se elimina por disolventes de parafina, no es por lo general
demonstable con mtodos normales de lpidos. A menudo se refiere a la
utilizacin del trmino no especfico de lpidos enmascarados , agrupando junto
con otros, sin precisin, materiales.
Triglicridos

grasas ordinarias son steres de glicerol y cidos grasos. El glicerol se

muestra a la derecha. Se puede combinar con tres molculas de cidos grasos, si
todos el mismo o diferentes. Los compuestos resultantes son los triglicridos y
son muy comunes. Son por lo general lo que se quiere decir cuando las
referencias de lo contrario no calificados se hacen a las grasas. Los aceites son
casi de la misma, siendo la diferencia que las grasas son slidas a temperatura
ambiente, mientras que los aceites son lquidos. Cabe sealar que en este
contexto la palabra "aceite" se refiere a los aceites vegetales y animales. No se
refiere al material bombeado desde el suelo. As como los triglicridos, glicerol
puede formar monoglicridos con un cido graso y diglicridos con dos.

El segundo componente de triglicridos es los cidos grasos . Estos son cadenas

de tomos de carbono unidos entre s y que termina con un grupo carboxilo. El
ms simple es el cido actico, pero los que participan en la formacin de
triglicridos tener muchos ms tomos de carbono que el cido actico. El cido
palmtico tiene 16 tomos de carbono, mientras que el cido esterico tiene 18, al
igual que el cido oleico. Los tres son cidos grasos comunes en los
triglicridos. La diferencia entre el cido esterico y cido oleico, ambos de los
cuales tienen longitudes de cadena de carbono de 18, es que el cido esterico
est saturado mientras que el cido oleico es insaturado. En otras palabras, el
cido esterico saturado tiene tantos tomos de hidrgeno unidos a sus tomos de
carbono como sea posible, mientras que el cido oleico insaturado que tiene
menos que el nmero mximo y los tomos de carbono implicados tienen un
enlace adicional entre s. La frmula inferior derecha de los que acaban de
muestra de forma explcita y la de su izquierda muestra que la forma en que
normalmente se representa. El cido oleico tiene un solo doble enlace, pero otros
cidos grasos puede tener ms de una. Aceites lquidos tienden a tener ms
cidos grasos insaturados que las grasas slidas.

El cido palmtico cido esterico

 El cido oleico
El cido oleico, explcita

Un triglicrido se muestra a continuacin utilizando los tres cidos grasos cuyas

frmulas estn indicadas anteriormente. Se debe tener en cuenta que hay muchos
ms cidos grasos que estos tres y que puede formar triglicridos en muchas
combinaciones, haciendo que el nmero de posibles compuestos muy
grandes. Ellos pueden existir en forma de mezclas, pero histolgicamente que no
son individualmente demostrable. Estos compuestos son las "grasas" que las
manchas de grasa, como aceite rojo O demuestran disolviendo en ellos.

Triglicridos

A pesar de que no es posible identificar los cidos grasos individuales, es posible

demostrar los cidos grasos libres como un grupo. Los mtodos depende de la
reaccin entre una sal de cobre con el cido graso, a continuacin, la tincin de
cobre para dar la ubicacin de la cido graso, o en la tincin selectiva de los
cidos grasos en un color que contraste con los triglicridos usando una solucin
del colorante Azul de Nilo que tiene una cantidad significativa del producto de
degradacin del Nilo rojo. Los mtodos no tienen la reputacin de ser totalmente
convincente.

Fosfolpidos

Los cidos grasos no son los nicos cidos que se pueden combinar
con glicerol.El fosfato es muy comn tambin. Si uno de los cidos grasos se
sustituye con cido fosfrico, los compuestos resultantes se denominan
colectivamentefosfolpidos . En la ilustracin a la derecha de este prrafo, R 1 y
R 2 se refieren a los cidos grasos. Adems, otros grupos pueden estar unidos al
fosfato, fosfatidilcolina, un constituyente principal de la lecitina, por ejemplo, ha
de colina unido al fosfato. Hay compuestos similares con inositol, serina,
etanolamina, etc .

Estos compuestos se encuentran ampliamente en los tejidos como un componente

de varias membranas, ya que son hidrfobos en un extremo de su molcula
hidrfila y en el otro. Cuando se orienta en la misma direccin, las membranas
que incorporan ellos pueden formar una barrera que permite que los materiales
solubles en agua a enfoque en un lado, pero mantiene constituyentes solubles en
agua pase a travs de la barrera de la otra. Fosfatidilcolina se muestra a
continuacin. Otros fosfolpidos tienen frmulas similares, pero con la colina que
aparece en la parte inferior derecha, - (CH ) N (CH ) , sustituido por el grupo
2 2 3 3

correspondiente.

Fosfatidilcolina

Los esfingolpidos
glicerol no es el nico material que se puede combinar con cidos grasos para
formar los lpidos. Sphyngosin tambin puede hacerlo producir esfingolpidos ,
que son los principales componentes de la mielina. Un cido graso se puede unir
al grupo amino de sphyngosin, produciendo una ceramida , la segunda frmula
ilustra a continuacin con cido palmtico.Otros grupos pueden estar unidos
tambin, incluyendo fosfato, y para los grupos fosfato otros grupos, tales como la
colina pueden adjuntar, tanto como con fosfolpidos. Estos compuestos se
denominan colectivamente como la esfingomielina, que es la tercera frmula
siguiente, ilustrado con fosfato y colina. Si, en lugar de fosfato y colina, se
adjunta un monosacrido el compuesto resultante se conoce como
un cerebrsido , ilustrado como la cuarta frmula a continuacin. Si el azcar
unido es un oligosacrido, el compuesto resultante se denomina ganglisidos . Se
diferencia de la cerebrsido por el nmero de molculas de azcar unidos. No es
una ilustracin de un ganglisido en Wikimedia Commons. Ambos cerebrsidos
y ganglisidos tambin se clasifican como glicolpidos . Los azcares en estos
compuestos tambin pueden ser sulfatados, en cuyo caso se les llama sulftidos ,
ilustrado como el quinto diagrama de abajo. Wikimedia Commons tiene una
ilustracin de un sulftido tambin.

Esfingosina

Ceramide

Esfingomielina

Cerebrsido

Sulftido
La diversidad entre los esfingolpidos y los fosfolpidos explica la amplia gama
de mtodos de tincin que pueden demostrar la mielina, de la que son los
componentes principales. Los azcares de cerebrsidos y ganglisidos pueden ser
oxidable a aldehdos y teidos con el reactivo de Schiff. El fosfato puede
participar en manchas de tinte, y puede facilitar el teido con mordiente, que es
tan comnmente utilizado para demostrar la mielina con hematoxilina
frrica. Del mismo modo, los componentes de los compuestos de colina,
etanolamina y similares pueden estar implicados en la tincin de colorante, al
igual que el sulfato de sulftidos.Adems, la estructura fundamental es la de
cualquiera de los cidos grasos unidos al glicerol, o cido graso unido a la
esfingosina, que es en s mismo un hidrocarburo de cadena larga. Estos factores
permiten disolvente teido con colorantes tales como el aceite rojo O y Sudn
negro B. esfingosina tambin tiene grupos hidroxilo y amino unido que puede ser
capaz de participar en tinte de unin. Por desgracia, con todas las posibilidades,
es difcil saber con precisin lo que sucede.

Lipoprotenas
complejos lpido-protena son ms de un grupo anmalo. Cualquier lpidos ligado
de ninguna manera a una protena que normalmente se conoce como lipoprotena
histolgicamente. Por desgracia, una parte importante de la lipoprotena en el
tejido no se puede demostrar. Los lpidos que se encuentran en las membranas
celulares de diversos tipos estn generalmente unidos a la protena, tanto es as
que el componente lipdico no se puede teir por separado por los mtodos de
tincin habituales. En muchos casos las lipoprotenas funcionan para el
transporte de los lpidos en todo el cuerpo, por lo que no se pueden localizar en
los componentes del tejido en particular. Los que son se puede demostrar a travs
de su contenido de grasa. Uno de ellos es lipofuscina o pigmento de
"desgaste". Cuando se form por primera vez que tiene un contenido de grasa
superior despus de que ha existido por algn tiempo, y para que los resultados
de la tincin razn puede variar.

Una caracterstica de estos compuestos grasos es que son resistentes a la

extraccin de forma variable mediante el procesamiento de disolventes. Xileno
extraer todas triglicridos en el tiempo por lo general permitido para el
procesamiento de parafina, pero parte de la grasa que se encuentra en la mielina y
lipofuscina no puede ser eliminado y todava puede dar algunas manchas de
luz. Los ms resistente es probable que sean aquellos con componentes no
lipdicos importantes y que estn unidos a las protenas del tejido. Ciertamente,
restos suficientes para demostrar la mielina en secciones de parafina bastante
bien, y un mtodo estndar para la lipofuscina es un aceite rojo O tincin en una
seccin de parafina.
 COLORANTES

Accin de la masa
Cuando hablamos de las maneras tintes y tejidos reaccionan entre s, a menudo
hablamos de molculas individuales. En realidad, por supuesto, una sola
molcula de reaccionar con otro nos muestran precisamente nada, ya que es muy
poco probable que cualquier sistema que usamos podra detectarlo. Reacciones
histolgicas requieren de millones, quizs miles de millones de molculas de
participar y dar un efecto observable.

Un segundo factor es la variabilidad de los tejidos. No se trata de un material

homogneo.Como un ejemplo, los tejidos predominantemente bsicos
reaccionarn con colorantes cidos, pero puede haber diferentes grados de bsico
que tena en el tejido, En otras palabras, algunos tejidos tendrn grupos amino
disponibles ms que otros y pueden atraer a diferentes cantidades de colorante
cido. Hay varios otros factores.

Debido a estos tenemos que modificar nuestra comprensin de las reacciones

fundamentales implicados. Si bien es simple para indicar que los grupos amino
en el tejido se unen a los grupos carboxilo en los tintes, los grupos carboxilo
deben primero llegar a los grupos amino para poder adjuntar.

La accin de masas es una manera de mirar en reacciones qumicas sobre la base

de un gran nmero de molculas en su conjunto en lugar de en las reacciones
entre las molculas individuales. En lugar de ver una reaccin entre dos entidades
como un solo evento inmutable, se ve la qumica como un proceso
dinmico. Tiene que ver tanto con el proceso de llegar a la meta qumica deseada,
ya que el objetivo en s.

Muchas reacciones qumicas son reversibles. Como consecuencia, los resultados

de estos son a menudo una mezcla de los productos qumicos originales y sus
productos de reaccin en equilibrio. Si la izquierda para ir hasta el final, los
productos presentan dependen de la cantidad de cada reactivo inicial.

Los puntos clave en el prrafo anterior son los siguientes: -

reversible
equilibrio
si la izquierda para ir a la finalizacin
cantidad de cada reactivo originales

La accin de masas es a menudo representada por la ecuacin: - A + B <=> C +

D. Los compuestos originales estn representados por A y B, y sus productos
estn representados por C y D. Inherente a esto es que los productos C y D
pueden interactuar para producir A y B, una vez ms. Esto va en forma continua,
de modo que todos los cuatro compuestos estn presentes en todo momento una
vez que se alcanza el equilibrio. La cantidad de cada uno de los cuatro
compuestos presentes (es decir, cuando se produce el equilibrio) depende de la
cantidad de A y B que estaban presentes originalmente. Para cambiar el punto de
equilibrio, entonces, es simplemente una cuestin de cambiar la cantidad de uno
de los reactivos originales. Esto alterar no slo su propia presencia, pero la
presencia de los productos derivados de ella. El equilibrio tambin puede estar
sesgado por la interrupcin del proceso y la eliminacin de uno de los reactivos o
productos de la misma. Esto puede ocurrir automticamente si uno de los
productos es insoluble, pero es ms comn en la tincin histolgica quitar
simplemente el reactivo inicial.

En la tincin histolgica de los reactivos originales (A y B) son los grupos de

tejidos complementarios con los que puede reaccionar tinte y. Tambin podra
incluir colorantes ya unidos a estos grupos de tejidos. Los productos (C y D) son
el complejo formado entre el colorante radical de color y los grupos de tejidos, y
un compuesto del componente no-color de los tomos de colorantes o tintes y
desplazados del grupo de tejido. Tincin histolgica prejuicios fuertemente este
proceso en favor de uno de los componentes a la vez mediante la aplicacin de
soluciones fuertes (tinte) por un tiempo limitado, la eliminacin de ellos y luego
aplicar otras soluciones en una serie de eventos temporizados sesgadas. El
equilibrio no tienen la oportunidad de desarrollarse y no se suele alcanzar, con la
posible excepcin de las soluciones complejas de varios colorantes (uno tricomas
paso), aunque incluso stas estn estrictamente programados.

El equilibrio, en este contexto, sera teido total del tejido debido a la exceso de
tinte que se aplica invariablemente. Por lo general, el proceso no va a terminar
porque se limita el tiempo durante el cual se aplica el tinte, y retrela cuando
conseguimos el grado de tincin que queremos. En muchos casos, nos
consideramos el equilibrio para ser bruto overstaining . El carcter reversible del
proceso es a veces difcil de ver, pero un ejemplo sera eosina lavando con agua
despus de una ligera overstaining. Aqu podemos reducir la cantidad de uno de
los reactivos originales (eosina) y el sesgo de la reaccin en contra de ella, el
resultado es una reduccin en la cantidad de sus productos (profundidad de
manchas).

El punto de hablar de este tema es hacer hincapi en que el proceso de tincin es

ms que una reaccin obligatoria entre dos molculas discretas. Es un proceso
dinmico que puede ser manipulada de varias maneras para lograr metas
sorprendentemente complejos.

Solventes
Los colorantes se aplican invariablemente en solucin. Por consiguiente, el
propio disolvente puede ser otra manera de manipular el proceso de tincin. La
eleccin del disolvente puede tener un impacto significativo sobre la actividad
del colorante.

Los disolventes son de dos tipos, polares y no polares . En la mayora de los

casos podramos utilizar un disolvente polar para la tincin, aunque podramos
ajustar el grado de polaridad de alguna manera. Los disolventes no polares son de
poco uso en la tincin, y son ms comnmente utilizados para asegurar que el
proceso de tincin se detiene por completo. Es por eso que utilizamos resinas
disueltas en xileno o tolueno (ambos son solventes no polares) como medio de
montaje. Reacciones inicas dejan en gran parte bajo tales condiciones y las
preparaciones son, a todos los efectos, permanente.

Agua
El disolvente ms simple es el agua, y es sin duda el ms utilizado. Otros
productos qumicos pueden ser aadidos a ella para alterar sus caractersticas de
alguna manera, el pH siendo ms comn.

El agua es un disolvente fuertemente polar. Es esta caracterstica que lo hace tan

valioso. Polaridad deriva de la distribucin desigual de las cargas en la molcula
de agua. Los electrones de los dos tomos de hidrgeno estn desplazadas en la
medida desde el tomo de oxgeno como sea posible. Este causado un lado de la
molcula a ser cargado ms positivamente y el otro cargado ms
negativamente. Por consiguiente, las molculas de agua atraen a los iones
cargados negativamente a un lado y los iones cargados positivamente a la otra,
mejorar la solucin.

Etanol
El etanol es el siguiente disolvente ms utilizado. Es similar al agua en que es
polar, pero en un grado significativamente menor. Por lo tanto, es que, si bien la
tincin inica se puede lograr a partir de una solucin de etanol, los resultados
son a menudo ms plido y toman ms tiempo para llevar a cabo.

A veces, el etanol y el agua se mezclan para ajustar la polaridad, por lo que un

tipo particular de tincin se puede realizar con mayor eficacia. El enlace inico se
lleva a cabo ms eficazmente a partir de disolventes fuertemente polares. En los
casos en que un colorante puede enlace tanto inicamente y a travs de
interacciones dipolo, la reduccin de la polaridad del disolvente puede disminuir
la unin inica y acentuar las interacciones dipolo-dipolo. Un ejemplo de ello es
la demostracin de amiloide con rojo congo usado de solucin alcohlica.

Lisocromos
El trmino lysochrome es el nombre tcnico de lo que se llama ms
claramente las manchas de grasa , colorantes tales como sudn III , aceite rojo
O y sudan negro . La mayora de estos son los colorantes azoicos que debido a su
estructura han sido sometidos a cambio molecular hacindolos incapaces de
ionizante.

La base de estos colorantes para colorear grasas es que se disuelven en

ella. Desde otra perspectiva, la grasa es un disolvente para el tinte. El liso parte
de lysochrome tiene el significado de la solucin, y el cromo parte se refiere al
color. Por tanto, la palabra significadisolver colourer .

Lisocromos son en su mayora insolubles en disolventes fuertemente polares,

tales como el agua, y algo ms en disolventes menos polares, tales como
etanol. Son muy fuertemente soluble en disolventes no polares, tales como
xileno. Los triglicridos, siendo los compuestos no polares, las disuelve bastante
bien. Otros lpidos, que tienen componentes grasos, tambin pueden
disolverlos. Ellos se pueden utilizar para los lpidos compuestos de color como
lipofuscinas y cerebrsidos.
Se aplican de disolventes en los que son poco solubles, o a partir de mezclas
coloidales. A medida que entran en contacto con materiales en los que estn
fuertemente soluble, transfieren a ellos de manera significativa, a menudo
colorearlas con ms fuerza que el disolvente original, un proceso
llamado solubilidad preferencial .

Los medios de aplicacin comunes son: -

Etanol al 70%
Fluido de Herxheimer (partes iguales de 70% de etanol y acetona)
Isopropanol
polietilenglicol
Soluciones acuosas de gelatina

Los tres primeros disolventes son adecuados para secciones flotantes libres. Los
dos ltimos son miscible en agua, y son valiosos ya que permiten el uso de
secciones de criostato que ya estn conectados a las diapositivas o secciones de
parafina, sin la probabilidad de obtener grandes cantidades de colorante
precipitan en todo el tejido.

Desde lisocromos son solubles en disolventes no polares, incluyendo xileno y

tolueno, y tambin en etanol, estos fluidos no deben ser puestos en las secciones
despus de grasas han sido teidos o el colorante se disolvi a cabo. Esto
significa que los medios de montaje resinosos no se pueden utilizar. En su lugar,
se requieren medio de montaje acuoso.

Aunque lisocromos tien mediante la disolucin de los lpidos en ellos, al menos

un lysochrome (negro Sudn B) tambin puede manchar los materiales
inicamente. En este caso alguna tincin de fondo es de esperar, y la
interpretacin de las secciones teidas con ella debe tener esto en cuenta.

Accentuator
Un accentuator es cualquier producto qumico que facilita el proceso de
tincin.Normalmente, el objetivo es intensificar la tincin, y la acentuacin con
este significado es, obviamente, la derivacin del trmino. Sin embargo, cabe
sealar que la inhibicin de la tincin tambin puede acentuar una estructura en
comparacin con la tincin de fondo. La inhibicin y la acentuacin de la tincin
son slo dos caras de una moneda, y se discutirn juntos.

Accentuators se dividen en tres grupos: - control de pH, sales y fenol.

control de pH
de tincin depende en gran medida de la fijacin de los tintes a las
protenas. Estos tienen tanto positiva como grupos cargados negativamente. En
las protenas que nos ocupa grupos carboxilo e hidroxilo con carga positiva
grupos amino y con carga negativa. Adems, los grupos fosfato del ADN son
importantes en la tincin nuclear. Los colorantes tambin tienen los mismos
grupos como las protenas, pero pueden incluir el grupo sulfnico as. Cul de
estos grupos est involucrado en cualquier caso particular depende de las
circunstancias, incluyendo el pH de la solucin de tincin.

Aunque las protenas tienen ambos grupos positiva y negativamente cargadas,

generalmente predomina uno y tendrn una negativa general o una carga positiva
en general (ya sea un cido o una protena bsica). Estos cargos pueden, sin
embargo, el equilibrio entre s hasta cierto punto. A un pH particular, cada
protena tendr una carga global de cero. Esto es diferente para cada protena, y
es su punto isoelctrico .

Si el pH se eleva por encima del punto isoelctrico, a continuacin, se reduce el

nmero de grupos de aminocidos cargados y el nmero de grupos carboxilo e
hidroxilo cargados aumenta provocando que se comporte como una protena de
cido. A medida que el pH se reduce desde el punto isoelctrico el nmero de
grupos amino cargados aumentar y el nmero de grupos carboxilo e hidroxilo
cargados disminuir haciendo que la protena se comporte como una protena
bsica.

Si estos cambios de pH se llevan al extremo la situacin se plantea cuando (a

niveles de pH cido) No hay cargado grupos carboxilo o hidroxilo, y (en los
niveles de pH alcalino) No hay cargado grupos amino.
Hay cuatro posibilidades con respecto al ajuste del pH menor de edad, dos
acentuar y dos inhiben la tincin.

cido colorante cido aadi Aumento de la tincin

cido colorante Base aadi Disminucin de la tincin

Tinte bsico cido aadi Disminucin de la tincin

Tinte bsico Base aadi Aumento de la tincin

En la mayora de los casos, el ajuste del pH es relativamente menor. La

acidificacin de soluciones generalmente se realiza con cido actico al 1% - 2%
de concentracin. El pH final es por lo general aproximadamente 4, dependiendo
de la capacidad de amortiguacin de otros ingredientes. Esto aumenta la
ionizacin de los grupos amino del tejido. Del mismo modo, los ajustes de menor
importancia para hacer soluciones ms alcalino se puede hacer con compuestos
tales como tetraborato de sodio (brax) o carbonato de sodio. A un pH de
aproximadamente 8, stos aumentan la ionizacin de los grupos carboxilo.

Ejemplos de ajuste del pH para aumentar la intensidad de la tincin se encuentra

en el uso de cido actico en combinacin con colorantes cidos en tricrmico de
Masson, y la adicin de brax a azul de metileno. Tanto aumentar la intensidad
de la tincin.

Un ejemplo de ajuste de pH para inhibir la tincin se encuentra en la prctica de

la adicin de una cantidad muy pequea de cido actico al 1% soluciones
acuosas de rojo neutro con el fin de afinar la tincin nuclear. Esta pequea
cantidad de cido inhibe ligeramente la tincin inica de tejidos de fondo,
haciendo que la tincin nuclear inica gran parte no afectados aparece ms
prominente.

Si se ajusta el pH fuera del rango de cerca de 4 - 8, a continuacin, algunos

grupos dejan de ionizar por completo, y su tincin se inhibe casi
completamente. A un pH de alrededor de 10 grupos amino no estn
disponibles. Para los grupos carboxilo el pH es de aproximadamente 4 relevante
y por debajo. Estos nmeros de pH no son absolutos. A medida que el pH se
altera, hay un impacto en la tincin, pero el impacto es gradual. Tambin hay que
sealar que los tintes que utilizamos son efectuados por los cambios de pH, pero
estn presentes en cantidades tan grandes en comparacin con los grupos de
tejidos implicados, que el efecto en ellos se puede descartar en gran medida.
Ciertamente, cuando el pH es 1,5 en ninguno de los grupos carboxilo estn
implicados con la tincin. Sin embargo, los radicales fosfato son todava
ionizable en el que el pH y la tincin nuclear todava se puede hacer, aunque
tiende a ser altamente selectiva. Para ver esto, reemplazar el cido ctrico en
hemalum de Mayer con ml de cido clorhdrico concentrado 1.Comparar la
tincin.

Tambin se utiliza con buenos resultados en la demostracin de amiloide con rojo

Congo y colorantes cidos similares. Hidrxido de sodio (o un tampn) se aade
a la solucin de tincin.El pH de este tipo de solucin est por encima de 10, y
tiene el efecto de inhibir la tincin inica tanto como sea posible. Como
consecuencia, la tincin significativamente ms ligero debido al enlace de
hidrgeno se hace ms prominente en lugar de ser eclipsado por la tincin inica
ms intensa.

Sales
El valor de sales qumicas radica en sus compuestos inicos que son. Cuando se
disuelve, se producir tanto en forma negativa y los iones cargados positivamente
solucin. No estamos aqu hablando de las sales que se utilizan como mordientes,
sino ms bien lo que a veces se llaman sales indiferentes . Estos son compuestos,
como el cloruro de sodio, que parecen tener ningn papel que desempear en el
proceso de tincin.

Cuando se aplica una solucin con una sal de indiferente en conjuncin con un
colorante al tejido, los iones cargados negativamente en solucin son atrados a
grupos de tejidos cargados positivamente. Del mismo modo, los iones cargados
positivamente son atrados hacia los grupos de tejidos cargados
negativamente. Normalmente esto no tendra sentido, ya que nos gustara que un
in colorante cargado positivamente a ser atrado hacia un componente de tejido
con carga negativa, y adherir.

A veces, sin embargo, la unin no inico es la meta, y lo que se quiere demostrar

un material con carga negativa con un tinte de carga negativa. La presencia de
iones cargados positivamente de una sal de indiferente puede satisfacer la
atraccin inica del grupo de tejido cargado negativamente, y en el proceso de
la repulsin inica ser eliminado que dos iones con carga negativa exhiben. El
resultado es que un colorante cido puede acercarse a un material de cido lo
suficientemente cerca que las fuerzas de enlace de hidrgeno o de van der Waal
pueden obligar a ellos.
El escenario anterior no es, de hecho, hipottico. Es la explicacin de la inclusin
de cloruro de sodio en soluciones de etanol de rojo congo para la demostracin
de amiloide. Su inclusin permite un mayor grado de unin de hidrgeno que de
otro modo sera el caso. Por consiguiente, la sal es una accentuator en el sentido
de aumento de la tincin.

Existe una aplicacin similar en la concentracin de electrolito crtico mtodo

(CCA) para la diferenciacin de mucopolisacridos cidos. Los
mucopolisacridos son complejos inicos y reaccionan con azul alcin
inicamente. La adicin de magnesio como una sal inica preferentemente inhibe
la tincin con el colorante por compitiendo con ella por la carga negativa en la
mucosubstance. Puesto que los diferentes mucopolisacridos cidos requieren
diferentes concentraciones de iones de magnesio para superar la atraccin entre el
azul alcin y la mucosubstance, que se puede utilizar para diferenciar entre ellos.

Fenol
Cmo fenol tincin acenta an no est completamente claro. Las explicaciones
tienden a ser especulativo, y no son particularmente convincente.

Se ha sugerido que la acidez suave producido por las soluciones de fenol es la

causa de la tincin intensificado, y la adicin de fenol es fundamentalmente el
control del pH. Si este fuera el caso, el patrn de tincin esperado sera que los
colorantes cidos se mancha con mayor intensidad, y los tintes bsicos se mancha
con menor intensidad, ya que eso es lo que la adicin de cido para soluciones de
tincin normalmente realiza. De hecho, el uso ms comn de acentuacin fenol
es en carbolfucsina, que utiliza un colorante bsico. Tambin se intensifica
soluciones de colorantes cidos, visto con cromotropo fenicada. Puesto que
ambos colorantes bsicos y colorantes cidos se pueden intensificar con fenol, es
muy poco probable que su acidez suave es la causa.

La segunda explicacin depende del lpido enmascarado limitacin en la tincin

acuosa. Esta explicacin dice que los lpidos asociados con la protena inhiben el
enfoque de soluciones acuosas, ya que son moderadamente hidrfobo. Esto
reduce la integridad de la tincin de la solucin acuosa. Fenol reduce la tensin
superficial de las soluciones acuosas, lo que permite el agua para humedecer el
tejido ms a fondo. Esto, a su vez, permite que el tinte disuelto en ponerse en
contacto ms a fondo las protenas y de los bonos para los grupos ionizados
disponibles.
Una variacin de la segunda explicacin es que los usally dada en cuanto a por
qu carbolfucsina demuestra organismos cido resistentes. Micobacterias
contienen cidos grasos (cidos miclicos) en sus paredes celulares y son
hidrfobos. El efecto hidrfobo se supera con fenol, ya que disminuye la tensin
superficial que permite a los lpidos para ser mojados por el carbolfucsina, pero a
temperatura ambiente, el colorante no es capaz todava de penetrar en el cido
graso. Cuando se calienta, el cido graso se ablanda y el medio de contraste entra
en la clula. Cuando se enfra el medio de contraste se encuentra atrapado en el
interior del organismo y el alcohol cido no se puede quitar.

Tambin se ha explicado sobre la base del fenol que permite que el tinte se
disuelve en realidad en los cidos miclicos. La razn es que el fenol compite
con el anin colorante (ion acetato) y libera el catin (base libre fucsina
bsica). Es a continuacin, debe entenderse que esta es soluble en lpidos, y
cuando el lpido se funde por el calor suave aplicada, la base tinte libre se
disuelve en ella. Cuando el lpido se enfra, el colorante no es capaz de ser
extrado. La dificultad con esta explicacin es que lo que normalmente liberar un
catin (base de colorante) mediante la adicin de un catin que compiten para
combinar preferentemente con el anin (acetato). El fenol no sera combinar
normalmente con acetato de, a pesar de que podra sustituir a l, formando de
fenolato de fucsina bsica. El fenolato a continuacin, podra actuar como un
portador para el tinte. Esta explicacin es muy especulativa, y por lo tanto poco
fiable, como es manifiesto.

Referencia R. D. Lillie. manchas biolgicas de Conn Williams & Wilkins,

Baltimore, MD., EE.UU.

Baker, John R., (1958) Principios de la biolgica microtcnica Methuen,

Londres, Reino Unido.

Mordientes
Mordientes son indispensables en microtcnica histolgico. Nuestros mtodos de
tincin ms comunes no seran posibles sin ellos, la H & E es un buen ejemplo. A
pesar de su importancia a veces hay cierta confusin en cuanto a lo mordientes
son, o no lo son. El trmino se aplica a menudo a los agentes que son, de
hecho, no es cierto mordientes .
Un mordiente es un metal con una valencia de al menos dos. Los dos metales
ms comunes utilizados en histotecnologa son el aluminio y el hierro frrico,
tanto con valencias de tres. La unin de mordientes para tintes es por medio de
un covalente y un enlace coordinado. Esto es conocido como quelacin , y es un
fenmeno relativamente comn. Detencin de la coagulacin mediante la
eliminacin de los iones de calcio con EDTA sangre es un ejemplo. La
palabra quelacin es al parecer deriva del nombre de la gran garra, o chela , de
una langosta.Agarrando un tomo de metal por dos enlaces diferentes tiene un
parecido descabellado presas de agarre con dos partes de la ua.

Un mordiente puede ser definido como: -

Un ion metlico polivalente apartada forma complejos de coordinacin con

ciertos tintes.

El quelato formado a partir de un tinte mordiente y un metal se llama

un lago . Este trmino se deriva de lac , un tinte mordiente obtiene a partir de un
insecto en la India, y de la que se obtiene la goma laca. Con el tiempo el
trmino lac ha cambiado al lago y se ha convertido en el trmino genrico para
todos los complejos de tinte mordiente.

Un lago se puede definir como: -

Un complejo de coordinacin formado entre un in de metal polivalente y

ciertos tintes .

Cmo se forman los lagos

Dos tipos de enlaces estn implicados en la reaccin fundamental entre un tinte
mordiente y mordiente. Uno de ellos es un enlace covalente con un oxgeno del
hidroxilo. El otro es un enlace coordinado con otro de oxgeno (el donador de
electrones).

En la tabla de abajo son las cuatro configuraciones ms comunes que se

encuentran en los tintes mordientes. Hay otros, en particular en la industria textil,
pero casi todos los tintes mordientes utilizados en tincin biolgica tener una o
ms de estas configuraciones. Tenga en cuenta que en cada caso se trata de un
oxgeno unido doble y un grupo hidroxilo (o un grupo carboxilo).
Las formas de enlace covalente entre el oxgeno del hidroxilo y el metal.
Las formas enlace coordinado entre el oxgeno unido doble y el metal.

Estructura Lago Estructura Lago

Puesto que el aluminio y el hierro frrico tanto tienen valencias de tres, es posible
que tres molculas de colorante pueden adjuntar a cada tomo del metal
mordiente. En la prctica, es poco probable que esto sucede, ya que la unin a los
tejidos es tambin por medio de el metal mordiente. La variacin de la cantidad
de mordiente presente con el colorante es una manera de ejercer cierto control
sobre las caractersticas de tincin de algunos lagos. Esto es muy eficaz con
soluciones de hematoxilina de alumbre. Formulaciones regresivos por lo general
tienen grandes cantidades de colorante presente en comparacin con
formulaciones progresivas. En otras palabras, la cantidad de mordiente a
disposicin de cada molcula de colorante es menor.

Es posible, sin embargo, que puede formar la formacin de complejos de tinte

mordiente que implican varias molculas de colorante. Esto podra ocurrir si un
tinte tena ms de un punto quelante, como carmn , y fue capaz de formar
mltiples molcula - complejos de quelatos mltiples. Tales complejos grandes
pueden explicar algunas caractersticas de tincin de lagos particulares, por
ejemplo, la selectividad de mucicarmn para mucinas.
 Quelato Triple

A menudo se seala que la adicin de un mordiente a un apropiados resultados de

la solucin de tinte en un cambio muy repentino, dramtico en el color. Esto es
debido a la incorporacin del tomo de metal en el sistema de electrones
deslocalizados del colorante. Los metales tienen niveles de energa relativamente
bajos, por lo que su incorporacin en una deslocalizados sistema resulta en una
disminucin de la energa total. La absorbancia del lago, por lo que sucolor de ,
est relacionado con esto.

Cmo mordientes se adhieren al tejido

La fijacin del metal mordiente al tejido es esencialmente por el mismo
mecanismo que causa fijacin al colorante. Eso es por quelacin - formacin de
enlaces covalentes y de coordenadas.

Grupos hidroxilo de fosfato de los cidos nucleicos proporcionan medios para la

unin covalente, y otros tomos en la vecindad pueden donar electrones para el
enlace coordinado. La cadena de ADN que tiene una secuencia repetitiva de
fosfato y desoxirribosa con una base unida, las bases de emparejamiento en una
forma complementaria de la guanina con la citosina, adenina y timina con, y la
formacin de la doble hlice. Para la tincin histolgica de las bases no son
significativos, pero los grupos fosfato son de importancia fundamental. La unin
de colorante de mordentado es debido a la formacin de un quelato de mordiente
con un fosfato hidroxilo y otro tomo de una manera muy similar a la que existe
entre el mordiente y el colorante. Aunque el diagrama de abajo muestra la fuente
de electrones para la unin de coordenadas a ser tambin un oxgeno fosfato, esto
es slo por conveniencia.
Es un caso similar con las protenas, ya que hay muchos grupos hidroxilo y
carboxilo disponibles. Cabe sealar que la cromatina nuclear contiene ambos
componentes de las protenas y el ADN, de modo que dos eventos separados de
tincin que puede estar ocurriendo al mismo tiempo. Es por eso que algunos
mtodos de tincin pueden demostrar todava la estructura nuclear, incluso
despus de todo el ADN se ha eliminado.

Uso de lagos
y colorantes mordientes se puede aplicar de tres maneras. Los trminos utilizados
se definen a continuacin. El sufijo -cromo en estos trminos se refiere al cromo,
que es un mordiente comn en la industria textil teido. Los trminos son
tomados de esa industria. En histotecnologa cromo es rara vez utilizado, pero los
trminos se siguen utilizando.

Onchrome
El mordiente se aplica primero, seguido por el tinte.
hierro hematoxilina de Heidenhain es un ejemplo clsico.

Metachrome
mordiente y el tinte se mezclan entonces aplicada.
soluciones de hematoxilina Alum se aplican de esta manera. Es probablemente la
forma ms comn de usar colorantes para mordiente en histotecnologa.

Cromotrpicos
El tinte se aplica primero, seguido por el mordiente.
Esto casi nunca se hace en histotecnologa, aunque Lillie utiliza el tinte oscuro
phenocyanin TC seguido de un Ferr ous mordiente de esta manera.

Referencia
Baker, John R., (1958) Principios de la biolgica microtcnica Methuen,
Londres, Reino Unido.

Agentes de trampeo
Agentes captadores son sustancias qumicas que inhiben la eliminacin de tintes
de los tejidos.En lugar de retiro parada del colorante del todo, el objetivo comn
es para bajar la velocidad para que los tejidos que se tien ms intensamente an
conservan grandes cantidades de tinte cuando el fondo se ha decolorado. De esta
manera contraste se puede mejorar.

A menudo se confunden con mordientes , aunque su funcin es completamente

diferente.

Agente de captura Mordaz

Normalmente no metales. Los metales con una valencia mnimo de dos.

Ningn tipo de reaccin. Formar compuestos de coordinacin con los

tintes.

Por lo general se utiliza con colorantes Se utiliza con colorantes cidos especficos.
bsicos.

Por lo general, se aplica despus de la Normalmente se aplica antes o con el

tintura. colorante.

No es necesario para completar las No se tincin posible si no se utiliza.

manchas.

Inhibe la eliminacin de tinte. puede ser utilizado para eliminar tinte.

Con mucho, el ejemplo ms comn de un agente de captura es de yodo en una

tincin de Gram. cido pcrico tambin se ha utilizado para este fin en el mtodo
de Gram-Weigert, y cloruro de sodio se ha utilizado en un gramo de
sal tcnica. Tambin hay mtodos para otras estructuras que utilizan tanino o
cido tnico como agentes de captura, pero no son muy comunes.

Con yodo, la sal y cido pcrico el principio bsico es que el agente de captura
forma un compuesto insoluble con el colorante ( violeta cristal ) que precipita
dentro de una estructura, tal vez en combinacin con algn componente de los
tejidos. Un disolvente se aplica en la que el colorante precipitado es soluble. El
colorante se disuelve con facilidad en la mayora de las reas, pero su disolucin
es resistido por alguna razn en otras estructuras. El disolvente se elimina antes
de que estas reas resistentes se ven afectados. A continuacin, aparecen de color
violeta oscuro sobre un fondo relativamente incoloro.

Estas tcnicas no se utilizan exclusivamente para las bacterias. Tambin son

adecuados para la demostracin de la fibrina, la queratina, y otras estructuras si el
decolorante se elige con cuidado. Para las bacterias, acetona se utiliza por lo
general, ya que elimina el colorante muy rpida y completamente. Para las
demostraciones no bacterianas, anilina-xileno se utiliza a menudo, ya que es un
disolvente suave que extrae colorante ms lentamente que la acetona y es
como. Esto da ms control sobre el proceso y permite otras estructuras a ser
demostrados.

Las razones para la retencin del colorante pueden variar. Ha habido un cierto
desacuerdo en cuanto a la base de Gram tincin de bacterias. Con otras
estructuras, tales como fibrina o queratina, sin embargo, parece ser slo que ms
colorante est presente en ellos que en otros tejidos. Por lo tanto, toma ms
tiempo para eliminar todo. Slo podemos dejar de extraer tinte cuando la tincin
es satisfactoria. Un agente de captura en combinacin con un disolvente lento
simplemente acenta esta disparidad.

Diferenciacin
La diferenciacin es el proceso de eliminar el exceso de tinte de los tejidos con el
fin de acentuar una estructura que retiene el colorante mientras a su alrededor
estn perdiendo la suya.Es similar a decolorante , pero infiere un alto grado de
selectividad. La diferencia entre la diferenciacin y decolorante es que
decolorante es no selectivo y elimina casi todo el tinte de una seccin no
selectivamente. Aparte de esto, los dos procesos son esencialmente los mismos.

Hay un nmero limitado de formas en que la diferenciacin se puede

lograr. Estos son: -

Solventes de control de pH Mordientes oxidantes Otros colorantes

Disolventes
Cuando estamos utilizando una solucin simple de un colorante para teir el
tejido, que por lo general es factible para eliminar el exceso de tinte de la tisuue
por lavado en el disolvente . En su forma ms simple esto es visto con la tincin
de eosina Y acuosa en un H & E. Es habitual para diferenciar ligeramente la
eosina mediante el lavado con agua del grifo durante un corto perodo de tiempo
para eliminar el exceso de tinte y obtener el efecto diferencial de los cuales
eosina Y es capaz. Un segundo ejemplo se encuentra en la tincin de la grasa con
un colorante tal como aceite rojo O, que a menudo se diferenci con 70% de
etanol, un disolvente estndar para ese tinte.

Diferenciacin disolvente funciona debido a la naturaleza de los disolventes. En

el caso de eosina un disolvente polar, el agua, se utiliza. Disolventes polares
tienen una atraccin para los compuestos que pueden ionizar y tiende a
disolverlos. Los iones de carga del colorante son atrados a la carga
complementaria en el lado apropiado de la molcula de agua y se eliminan del
tejido. Por supuesto, esto est lejos de instantnea. El colorante se une bastante
fuertemente a los tejidos, y esto debe ser superada antes de que el medio de
contraste puede disolver en el disolvente. En un momento dado se eliminarn
slo unas pocas molculas, por lo que es un proceso lento en comparacin con
algunos otros. Cuando est extendido, sin embargo, que todos pueden, pero
decolorise una seccin. Adems, el agua, en particular, a menudo tiene
cantidades significativas de sustancias disueltas. Estos pueden tener un impacto
en el proceso de decoloracin, a menudo porque cambian el pH (ver ms abajo).

Los disolventes no polares tambin pueden eliminar el material a partir del

tejido. En el caso del aceite rojo O se mencion anteriormente, el tinte puede
disolverse en el disolvente (etanol 70%). Desde lisocromos tien por la
solubilidad preferencial, sera de esperar que la aplicacin de un disolvente
adecuado sera extraer algunos tinte simplemente en virtud de ser un disolvente.

La eficacia de la diferenciacin de disolvente depende de un gran efecto en la

fuerza con la que el colorante se une al tejido, el tipo de enlace implicado, el
grado de atraccin entre el disolvente y el colorante, el volumen del disolvente y
el tiempo durante el cual que se aplica.

control de pH
Esto es realmente slo una forma elegante de decir que los cidos y bases
diluidos, y es probablemente el mtodo ms comn para la diferenciacin. Cabe
destacar que la diferenciacin con cido diluido no es la nica diferenciacin pH
manera se puede hacer. Diluir lcalis (bases) tambin se puede utilizar, como
puede tamponar soluciones. Los cidos se utilizan para eliminar colorantes
bsicos o lagos, y diluir bases de quitar tintes cidos.

La accin de los cidos en este contexto es muy similar a su efecto

como accentuators , pero a la inversa. Un pH cido provoca al mismo tiempo un
aumento de la ionizacin de los grupos amino y una reduccin en la ionizacin
de los grupos carboxilo e hidroxilo. Esto se aplica a ambos grupos de tejidos y
aquellos en el colorante. En efecto, el cido usado para diferenciar competir con
los aniones de los tejidos para los cationes de tinte. Dado que el cido
diferenciacin se elige deliberadamente para ser un anin fuerte que los grupos
de tejidos, que se disociar ms a fondo y, invariablemente, ganar la
competencia. El resultado es que el tinte se elimina preferentemente a partir del
tejido mediante su disolucin a cabo.

Bases trabajan de la misma con colorantes cidos. Compiten con cationes de

tejidos para los aniones de colorantes e interrumpen su fijacin al tejido. El
colorante se elimina por disolucin en la solucin de diferenciacin.

El control de este proceso es bastante simple. La rapidez con la que se elimina el

medio de contraste se puede ajustar cambiando la concentracin del cido (o
base) en el principio de las soluciones ms dbiles que toman ms
tiempo. Alternativamente, un cido ms dbil que se disocia menos podran ser
sustituidos. Del mismo modo, un disolvente menos polar tender a disminuir la
diferenciacin debido a la menor ionizacin del cido. Por ltimo, cuando un
nmero suficiente de colorante se ha eliminado, simplemente eliminar el cido y
reemplazar con un disolvente. Sin embargo, el tiempo y la concentracin son los
dos factores ms importantes.

El cido clorhdrico al 1% en etanol al 70% es probable que la nica solucin

ms utilizada de este tipo, sobre todo debido a su importancia en la
diferenciacin regresivas manchas hematoxilina alumbre. Baker, mostr que en
el caso de mordiente teido, tal como con hematoxilina, el cido altera el tejido -
mordiente enlace en lugar de la mordiente - colorante enlace.

Aunque tampones se podran utilizar para este fin, que muy rara vez son. El
proceso es tan sencillo de controlar que el ajuste de pH preciso es de ningn
beneficio real en la prctica.

Mordientes
En los casos en que un mordiente se ha utilizado en combinacin con un
colorante para teir los tejidos, el mordiente tambin se puede usar para eliminar
el exceso de tinte. Esto se logra mediante la aplicacin de una solucin del
mordiente a la seccin teida. El mordiente en solucin tendr la misma afinidad
por el colorante como el mordiente unido al tejido tiene. De esta manera, el
exceso de mordiente en solucin compite con mordiente unida al tejido de la
limitada cantidad de colorante. Desde el mordiente en solucin es en exceso
considerable, que gana la competencia y elimina lentamente el colorante del
tejido. Es posible eliminar por completo todos colorante a partir de secciones de
esta manera. El ejemplo clsico de este tipo de diferenciacin es el hierro
hematoxilina de Heidenhain.

En contraste con la diferenciacin de los lagos con cidos, que interrumpen el

tejido - mordiente enlace, diferenciacin mordiente sale del mordiente unido al
tejido. Slo se elimina el tinte. As, las secciones se pueden restained por
inmersin en una solucin de slo el colorante.

El proceso se puede controlar mediante el ajuste de la concentracin del

mordiente, y limitando el tiempo durante el cual se aplica. La desventaja de esta
tcnica es que algunos mordiente - combinaciones de colorantes producir
resultados poco definidos. Un ejemplo de ello sera el uso de soluciones de
alumbre de potasio para diferenciar las manchas hematoxilina alumbre. Esto se
logra ms fcilmente con alcohol cido, y los resultados son ms ntidas y
definidas con ms claridad. Aunque el hierro hematoxilina de Heidenhain
tradicionalmente se diferencia de esta manera, tambin se puede hacer con el
alcohol cido ms rpidamente.

Oxidantes
La mayora de los colorantes pierden su color cuando se oxida (blanqueada). A
pesar de que por lo tanto es posible diferenciar las secciones teidas con agentes
oxidantes, que rara vez se utiliza en la prctica porque la mayora de los agentes
de blanqueo son demasiado fuerte y difcil de controlar, produciendo resultados
desiguales. Bastante se necesitan agentes oxidantes suaves, pero esto puede
tomar un poco ms largo que otros mtodos de diferenciacin.

El ejemplo clsico se encuentra en la demostracin de la mielina mediante la

Weigert - Pal tcnica y sus variaciones. Despus de la tincin, la diferenciacin
se logra con un permanganato de potasio - cloro cido oxlico, y / o un
blanqueador ferricianuro brax, dependiendo de la variacin particular utilizado.
Otros colorantes
Esto a veces se llama desplazamiento y se refiere a procesos en los que uno
reemplaza tinte (odesplaza ) otros. Se basa en el principio de que los compuestos
con estructuras similares pueden sustituir uno por el otro. Cuando la similitud es
los grupos carboxilo o amino del colorante, a continuacin, colorantes cargados
de manera similar pueden sustituir entre s.

Si se utiliza un tinte cido para teir el tejido, a continuacin, se lava y se aplica

un medio de contraste de color cido, poco a poco se reemplazar el primer
tinte. Este es el principio subyacente de muchos mtodos de tincin, en
particular, los diversos secuenciales tricrmicomtodos.

Referencia

Baker, John R., (1958) Principios de la biolgica microtcnica Methuen,

Londres, Reino Unido.

METODOS

Formular hematoxilina Alum

Probablemente, el nico tinte ms utilizado en histotecnologa es hematoxilina o
hematena , principalmente utilizado para demostrar la morfologa nuclear. Tales
soluciones generalmente contienen hematoxilina y un alumbre, y se
llaman Hemalumbre o hematoxilina de alumbresoluciones. Muchas frmulas se
han sugerido. Este sitio, por ejemplo, listas de ms de 50
hemalum soluciones. Ellos varan en la cantidad de hematoxilina, la cantidad y el
tipo de sales de aluminio, disolventes, agentes oxidantes y estabilizadores. Las
variaciones son, a veces, casi contradictorias y los principios subyacentes en la
que estas soluciones se basan difcil hacer clara.

En su mnimo, hay tres elementos necesarios para producir una tincin con
hematoxilina de alumbre nuclear efectiva. Estos son: -

Hematoxilina o hematena, como el colorante.

Una sal de aluminio, como el mordiente.
Un disolvente, siendo el ms simple agua.
Adems de estos tres elementos, se pueden aadir otros ingredientes. Estos no
son esenciales, pero modifican el comportamiento de alguna manera. Estos
incluyen: -

Agentes oxidantes para convertir hematoxilina (el precursor de colorante), a

hematena, (el medio de contraste).
Los cidos para ajustar el pH, principalmente para extender la vida til de la solucin,
pero que puede, dependiendo de la solucin, tambin afectan a la selectividad de la
tincin.
Estabilizadores para inhibir la oxidacin adicional una vez que el hematena se ha
formado, ya que esto puede acortar la vida tincin y producir ncleos mal definida.
Las adiciones al disolvente tambin son comunes, a menudo para inhibir la
evaporacin o precipitacin.

Debido a su importancia, la oxidacin o la maduracin , de hematoxilina de

hematena es objeto de una discusin por separado. Los principios implicados en
la unin de mordientes a algunos tintes es tambin objeto de una discusin por
separado, aunque la aplicacin especfica para hematena se menciona
brevemente. Esta pgina se centrar en la relacin entre el colorante y el
mordiente, y el efecto de la adicin de cido.

Hematoxilina

Hematoxilina Hematena

A partir de las dos frmulas estructurales anteriores se puede observar que

hematoxilina y hematena difieren por un solo tomo de hidrgeno. La
eliminacin de este hidrgeno a partir de hematoxilina se lleva a cabo bien de
forma natural por el oxgeno atmosfrico o mediante el uso de agentes oxidantes
suaves, y los resultados en un compuesto con un grupo hidroxilo adyacente a un
grupo carbonilo. Esta configuracin es la que facilita la formacin de complejos
de coordinacin con metales incluyendo, pero no limitado a, de aluminio. As, el
aluminio puede ser percibido como un vnculo, o puente, entre el colorante
aninico hematena y un grupo fosfato cargado negativamente nuclear.
 Hidroxilo y carbonilo adyacentes Compleja coordinacin entre
grupos de hematena hematena y aluminio

Complejos de coordinacin de este tipo se forman con un enlace covalente entre

el aluminio y el oxgeno del grupo hidroxilo, y un enlace coordinado entre el
oxgeno del carbonilo y el mismo tomo de aluminio. De esta manera, el
aluminio est firmemente unido a la molcula por un proceso llamado quelacin,
por lo tanto, el compuesto se denomina a veces un quelato. Sin embargo, desde
un colorante est involucrado, que es ms comnmente llamado un lago. Es el
lago que es el componente de tincin de soluciones hemalum. El punto de vista
ms simple es que reacciona como un catin y se adhiere a los aniones de tejidos,
tales como los grupos fosfato del ADN y los grupos carboxilo de las
protenas. Una vista ms completa es que el archivo adjunto, por lo menos a
ADN, es tambin por medio de unin covalente y de coordenadas.

La cantidad de hematoxilina en las diversas soluciones vara ampliamente de

alrededor de 1 gramo por litro en de Mayer solucin, a veinte veces mayor que
en de Masson . Obviamente, el contenido real de colorante debe tener un efecto
en las propiedades de tincin, y se puede observar que cuanto ms concentrada
contenido de colorante lo ms probable es que las manchas solucin
regresiva. Soluciones ms progresistas tienen alrededor de 1 gramo por litro, o un
poco ms, y las soluciones regresivas tienen 4 o ms gramos por litro. Sin
embargo, el contenido de colorante no determina esta caracterstica. Tanto la
cantidad de mordiente presente y el pH tambin tienen una influencia. En
general, sin embargo, si la concentracin de mordiente se mantiene constante,
una solucin con un contenido de colorante inferior probablemente ser ms
selectiva nuclear de que con un mayor contenido. Esto se puede demostrar con
bastante facilidad mediante la adicin de cantidades crecientes de una solucin
alcohlica de hematoxilina madurado 10% a 5 ml de una solucin al 10% de
alumbre, a continuacin, ajustar el volumen a 10 ml con agua.

Mordiente
El mordiente habitual para la tincin nuclear con hemalum es un alumbre o
sulfato doble de aluminio. Sulfatos de amonio o de potasio de aluminio son los
ms comunes, aunque no hay ninguna razn en absoluto por qu no se debe
utilizar sulfato de sodio y aluminio. La explicacin habitual para el uso de ex-
alumnos es que se dispona de buena pureza a finales de 1800, cuando se estn
introduciendo estas soluciones. Por lo tanto, era una simple conveniencia para
utilizarlos en preferencia a otras fuentes de aluminio. Por supuesto, el segundo
metal en el sulfato doble no debera ser capaz de actuar como un mordiente.

Tambin se han especificado otras sales de aluminio. Ejemplos son acetato de

aluminio enHaug de frmula, o nitrato de aluminio en Rawitz ' 1909 variante. El
ms moderno de Gillhemalums utilizar sulfato de aluminio. A partir de estos
ejemplos, parece que la fuente de la que el aluminio no es crtico en la
prctica. Adems, la cuestin de la pureza ya no es una preocupacin.

En la prctica las soluciones de alumbre modernas de alrededor de 50 gramos a

un litro de disolvente, en su mayora agua, es bastante tpico. Los puntos de
saturacin de alumbre de amonio y alumbre de potasio son 142 gramos y 139
gramos por litro, respectivamente, en agua.Las frmulas se han publicado con
cantidades de alumbre que van de 6 gramos por litro hasta 142 gramos por litro
(una especifica 300 gramos, pero las cantidades que excedan el punto de
saturacin se pierden). Un cuadro comparativo muestra el contenido de la
mayora hemalum tinte y mordiente frmulas.

Cuando alumbre y hematena se combinan se forma un lago. A veces se utiliza

calor para acelerar el proceso, pero con el tiempo ocurre independientemente de
que. Este lago es un compuesto distinto, y en las formulaciones slidas cualquier
exceso puede precipitar como un lodo oscuro, tal vez debido a la continua
oxidacin de hematoxilina. Tambin hay que sealar que hematena contina
para oxidar a otros componds, y estos tambin puede precipitar fuera de la
solucin junto con alumbre. En trminos prcticos, esto significa que las
soluciones hemalum deben filtrarse peridicamente, y que hacerlo es ms
importante para las formulaciones ms fuertes.

La relacin de colorante a mordiente tiene un efecto significativo sobre las

caractersticas de tincin de las distintas frmulas. As como la alteracin del
contenido de colorante mientras se mantiene constante la concentracin de
alumbre puede tener una influencia sobre la selectividad nuclear de las
soluciones, por lo que puede aumentar la concentracin de alumbre mientras se
mantiene constante la concentracin de colorante. En general, cuanto mayor sea
el contenido de alumbre, es probable que sea el ms nuclear selectiva la
solucin. Una vez ms, esto se demuestra fcilmente haciendo una serie de
soluciones de alumbre de 0,1% a 10% y la adicin de 0,1 ml de madurado 10%
hematoxilina a 10 ml de cada uno de ellos.
La explicacin habitual para este fenmeno es que en accin de masas sistemas
hay una "competencia" para el tinte mordiente entre unido al tejido y mordiente
todava en solucin.Hay una tendencia a que el medio de contraste para
equilibriate entre los dos, de modo que cuando hay un alto contenido de
colorante, es decir, la relacin de mordiente para tinte es baja, el equilibrio
favorece el tejido. Cuando el mordiente para teir relacin es alta debido a una
concentracin de colorante inferior, entonces el equilibrio favorece la solucin y
menos colorante se une al tejido.

Acids
soluciones Alum son cidas, una solucin molar (5,16%) 0,2 de alumbre de
potasio tiene un pH de 3,3, por ejemplo. Esto es muy cercano a los 50 gramos por
litro de uso comn. A este pH del lago es soluble. Como se utiliza la solucin
alcalina y agua del grifo se introduce en la solucin, el pH se eleva hasta el lago
comienza a precipitar. Esto se demuestra por un cambio de color de rojo cereza a
rojo prpura. No se necesita demasiada contaminacin del agua del grifo para
que esto suceda, y hemalums no acidificados no tienen una vida til muy
larga.Cuando no se utiliza cido, es ventajoso para enjuagar las secciones con
agua destilada antes de ponerlos en la Hemalumbre a fin de reducir cualquier
alcalina a travs.

Se ha convertido en prctica comn la adicin de pequeas cantidades de cidos

de soluciones hemalum, inicialmente para extender su vida til. cido actico al
2-5% es probablemente el ms comn, aunque se han utilizado otros, 0,1% de
cido ctrico en Langeron de frmula 1942, por ejemplo, una solucin por lo
general hace referencia errneamente como Hemalumbre "de Mayer". Las
soluciones que contienen cido aadido tienen una vida til mucho ms larga, y
cuando finalmente no comienzan a cambiar de color, pueden ser rejuvenecidos
por la adicin de una pequea cantidad adicional de cido. Hay un lmite, por
supuesto, con el nmero de veces que se puede hacer. Es obvio, sin embargo, que
la vida til de hemalums est ms estrechamente relacionado con el agotamiento
del contenido de cido de al agotamiento del contenido de colorante. Esto es
especialmente as con la ms fuerte, regresiva, frmulas donde el contenido de
colorante es tan alta que tomara meses de continua, intensiva, utilizar para que
pueda ser reducido de manera significativa por las pequeas cantidades
eliminadas mediante la unin a ADN. Una vez ms, el enjuague con agua o con
cido diluido del tipo de los utilizados para acidificar la Hemalumbre, es
ventajosa en la reduccin alcalina llevan sobre y se extiende la vida til de la
solucin.

Un efecto observado de la adicin de cido es que la tincin nuclear es a veces

ms selectivo.Esto se muestra ms claramente con los hemalums tener un
contenido de colorante inferior. De hecho, algunos de tipo ms fuerte,
como Ehrlich o Lillies " , no muestran ninguna diferencia significativa. Coles de
1943 frmula, sin embargo, tiene un aspecto notablemente diferente, con mucha
mayor selectividad nuclear. Unacidified, y se aplic en una mancha progresiva
durante unos diez minutos, esta solucin se asemeja a un diferenciada regresiva
mancha. Si se acidifica y se aplica de manera similar, es nuclear selectivamente
con tincin citoplsmica notablemente menos. Este es uno de los mejores
ejemplos de cmo una pequea cantidad de cido puede mejorar la selectividad
nuclear.

La selectividad mejorada nuclear es probablemente debido a una ligera

disminucin del pH cuando se aade cido adicional. Esto puede ser suficiente
para eliminar algunas de las reacciones con grupos cidos de las protenas
citoplasmticas. En cuanto a por qu no hacerlo con frmulas ms fuerte, es
posible que el alto contenido de colorante slo hace que sea ms probable que los
grupos citoplasmticos reaccionaran. Tambin debe mencionarse que hematena
puede participar en la unin no inico de colorante a los tejidos, y la presencia de
sales puede promover estas interacciones dipolo-dipolo. Hematena puede, de
hecho, ser utilizado en el procedimiento de un mejor tipo de carmn para
demostrar glucgeno, un mtodo que se cree que es dependiente de enlaces de
hidrgeno.

Dado que la reduccin del pH puede hacer tincin nuclear ms selectiva, reducir
lo suficiente como para inhibir completamente la tincin de los grupos carboxilo,
dejando slo fosfato nuclear para teir, que parece tener sentido. Krutsay
de hemalum es tal solucin. Contiene cido clorhdrico y es muy altamente
selectiva para los ncleos con un fondo muy limpio, sin teir. Puede ser el
selectiva, progresiva Hemalumbre ms nuclear de todos ellos. Sin embargo, dan
por lo general consiste en tomar, y la desventaja es que los resultados de pH muy
bajos en la eliminacin de depsitos de calcio con ninguna indicacin de su
ubicacin, y la presencia de pequeos depsitos de calcio pueden ser un
indicador til.

El efecto de la adicin de cido a las soluciones de hemalum se puede ver

mediante la repeticin de los dos ejercicios descritos anteriormente con la adicin
de 0,2 ml de cido actico glacial o una gota de cido clorhdrico concentrado a
cada solucin.

Diferenciacin de
tejidos teidos regresiva por lo general requieren la eliminacin de una parte del
material azul.La cantidad depende de las caractersticas particulares de la frmula
utilizada, sino tambin de la preferencia personal del patlogo que se viendo las
diapositivas. Este ltimo puede variar de manera significativa, que van desde casi
cero a grados muy importantes de diferenciacin. No hay ninguna medida
"correcta". Algunos patlogos prefieren un fondo oscuro teido para que puedan
detectar la sustancia fundamental y mucinas, que se encuentran tiles para llegar
a una conclusin. Otros prefieren un fondo limpio con tincin nuclear clara y
ntida.

Mordentado hematoxilina puede ser extrado de los tejidos en varias formas . Los
dos ms comunes, sin embargo, son la extraccin de cidos y mordientes. El
primero normalmente utiliza cido clorhdrico 0,5% o 1% en 70% de etanol
(alcohol de cido), mientras que el ltimo normalmente se limita a la tincin de
hematoxilina de hierro de la Heidenhain tipo y utiliza el mordiente a una
resistencia reducida. En general se considera que el alcohol cido que produce la
delimitacin ntida nuclear, particularmente con mordientes de
alumbre. Mordiente diferenciacin de hemalums produce definicin indistinta y
se debe evitar.

Resumen
Los tres factores ms influyentes que determinan el tipo de manchas que se
espera de hemalums individuales son: -
1. la cantidad de colorante en la solucin,
2. la cantidad de mordiente, y la relacin entre el colorante y mordiente, y
3. el pH.
A estos hay que aadir tambin, tal vez, el tiempo durante el cual se aplica la
solucin.

En la aplicacin prctica, las frmulas que son ms populares parecen caer en dos
grupos. El primero es los que tienen 1 gramo de colorante junto con 50 gramos
de alumbre, ms o menos, y que mancha progresivamente. El segundo es los que
tienen 5 gramos de colorante con 50 gramos de alumbre, ms o menos, y que
manchan regresiva. Las proporciones son 1:50 y 1:10, respectivamente, y son
como adecuados para usar como puntos de referencia para la comparacin como
cualquier otro.

Dicho esto, una frmula muy popular cae fuera de ella. Hemalum Harris tiene 5
gramos de colorante con 100 gramos de alumbre (1:20). Curiosamente, esta
solucin es a menudo dice que es regresiva y sin cido y progresiva con
cido. Esto puede ser exagerada, ya que tambin requiere un tiempo de tincin
corto de menos de un minuto y le da un fondo azul notablemente, pero sirve para
ilustrar el punto. Sin embargo, las caractersticas de tincin de una frmula
probada hemalum se pueden estimar con bastante precisin al ver estas
cantidades y proporciones.
Aunque la mayora de las frmulas estn destinados claramente para ser utilizado
ya sea progresivamente (1 o 2 gramos de tinte por litro) o regresivamente (5-6
gramos por litro) unos pocos no son claramente uno o el
otro. Estos intermedia Hemalumbre frmulas tienen entre 2 y 4 gramos por litro
con mucho la misma concentracin de alumbre como los otros tipos. Su
coloracin tambin se encuentra entre, dando oscuro manchado nuclear con ms
antecedentes de tincin dada por una frmula progresiva, obviamente.

Tal vez, en lugar de pensar en soluciones hemalum como caer en uno de dos
grupos definidos, debemos considerar las diversas frmulas para representar un
continuo de caractersticas de tincin que van desde la tincin ntidos y muy
selectiva obtenido con Hemalumbre Carrazzi a la densa overstaining de una
frmula tal como Lillie o de Ehrlich, con una continua oscurecimiento de la
tincin como los tintes aumenta el contenido, modificada por las cantidades de
alumbre y cido.

Tambin debera ser posible para un Hemalumbre personalizado para ser

formulado en base a estos principios. Ajuste de las cantidades de tinte y
mordiente para aumentar o disminuir la selectividad nuclear debe permitir un
Hemalumbre progresiva para ser hecho que da el grado deseado de tincin
nuclear y el fondo que un trabajador individual encontrara ms til. Aparte de la
adaptacin de la apariencia por esta razn, tambin es un ejercicio til para hacer
simplemente por s mismo, ya que ensea el control del proceso de tincin H &
E. Este mtodo es de tal importancia que todos los tcnicos deben tener un
conocimiento profundo de los principios involucrados y ser capaz de manipular
la apariencia final segn sea necesario.

Estos principios tambin se aplican a otros mordientes, como metachrome

colorantes de hematoxilina de hierro, aunque la aplicacin es menos
sorprendente. La relacin entre el tinte y mordiente es tambin un factor con
otros colorantes, incluyendo al menos un sustituto Hemalumbre. Mordiente azul
3 , en particular, responde de manera similar. En el uso prctico, se obtiene
tincin progresiva ms ntida con mordiente azul 3 como la cantidad de
mordiente disminuye, mientras que con hematoxilina selectividad mejora a
medida aumenta la cantidad de mordiente.

Tambin hay un debate sobre la tincin hematoxilina en otro sitio

histotecnologa, guardado porRoy Ellis .
Referencia Baker, John R., (1958) Principios de la biolgica
microtcnicaMethuen, Londres, Reino Unido.

Susan Budavari, Editor, (1996) El ndice Merck, Ed. 12 Merck & Co., Inc.,
Whitehouse Station, NJ, EE.UU.

Baker, JR, (1962), Experimentos en la accin de mordientes: 2. Aluminio-

haematein. Revista Trimestral de Ciencia microscpico, v . 103, pt. 4, pp 493-
517.

Hematoxilina y Eosina
La hematoxilina y eosina tincin ( H & E ) tambin puede ser el mtodo de
tincin histolgica ms utilizado de todos. Tambin puede ser el ms mal hecho,
y el ms mal entendido. Ciertamente, la calidad vara considerablemente de un
laboratorio a otro. Esto es lamentable, ya que una seccin de H & E manchadas
bien puede producir una sorprendente cantidad de informacin.

Cualquier preparacin histolgica de alta calidad depende de la manipulacin

inicial. Tejido mal fijado y procesado nunca se manchar de manera ptima. Por
desgracia, las limitaciones modernas en un entorno clnico, donde el nfasis est
en el diagnstico rpido y de gran volumen, a menudo impiden el uso de los
procedimientos que conducen a la preparacin de alta calidad. En otras palabras,
la tendencia moderna para la fijacin y el procesamiento de trabajos rpidos
contra alta calidad H & E tincin. Esto no es una cuestin de la competencia, que
es una limitacin debido a los procesos utilizados.

Unas pocas horas en 10% neutros formalina tamponada es inadecuado para las
protenas que reaccionan adecuadamente con el fijador. Del mismo modo, la
prctica de la deliberada bajo-deshidratacin como un medio de enmascarar
fijacin inadecuada se debe evitar si la tincin de alta calidad se ha de lograr. El
etanol es un fijador, y si la fijacin inicial es insuficiente, el etanol seguir para
fijar el tejido, mientras que deshidratante. Puesto que el etanol es un pobre fijador
cuando se utiliza solo, tejidos deben ser frgiles y encogida, con una tendencia a
romperse durante el corte y tendr tincin ms pobre. Sera mucho mejor cambiar
a una rpida fijacin y aplique el tiempo suficiente para que complete su trabajo,
entonces deshidratar correctamente antes de borrar y la infiltracin.

Una calificacin adicional se har tambin. Lo que constituye un "buen" H & E

difiere de persona a persona. Esto es as en parte debido a la aplicacin - un
anatomista podra estar interesado nicamente en una ilustracin limpia de la
estructura, por ejemplo, y apreciar ncleos azules con el fondo rosado limpio,
mientras que un patlogo puede estar interesado en ver ARN celular oscura
manchada como una ayuda para el diagnstico . Tambin puede haber diferencias
en las preferencias dentro de la misma institucin entre patlogos. No hay bien o
mal acerca de esto. Preferencias varan, y es la obligacin del histotecnlogo para
teir preparaciones constantemente a los criterios preferidos.

En lugar de decir arbitrariamente un aspecto particular constituye un "buen" H &

E o la forma de lograr el "mejor" de tincin, este artculo se centrar en cmo
lograr la apariencia deseada tincin. En otras palabras, ser, espero, ayudar en la
comprensin de cmo modificar la coloracin y la forma de conseguir que se vea
de cierta manera.

Esto plantea un punto, sin embargo. El histotecnlogo debe ser consciente de lo

que quiere el espectador apariencia final. A menudo, esto no se ha
especificado. A menudo el aspecto objetivo de ha surgido por un proceso de
seleccin, las diapositivas se rechaz, restained o criticado, por ejemplo. Slo
rara vez la mancha histotecnlogo una serie de secciones adyacentes para mostrar
progresivamente diferentes apariencias y tienen el espectador seleccione
definitiva que la apariencia es ms til. Recomiendo fuertemente esto se haga de
forma peridica. La placenta es un tejido adecuado.

Aunque se ha usado como una sola mancha, hay dos componentes distintos a la
misma, y cada uno deben ser dirigidas por separado. Estos son

La hematoxilina
La eosina

Haga clic en una imagen en miniatura para ver una foto ms grande.

Coloraciones tricrmicas
Aunque la palabra tricromo realidad significa tres colores , ya no tiene ese
significado especfico. El trmino se usa ahora para describir esos mtodos de
tincin que utilizan dos o ms colorantes cidos de colores contrastantes para
diferentes componentes del tejido de colores bsicos selectivamente. Ms
comnmente se utilizan para demostrar colgeno, a menudo en contraste con el
msculo liso, pero tambin se pueden usar para enfatizar fibrina en contraste con
eritrocitos. Otros componentes tambin se pueden demostrar de forma selectiva.

La base ms amplia aceptacin de estos mtodos es una aplicacin de la accin

de masas , junto con las observaciones sobre las propiedades fsicas de los
distintos componentes del tejido y su impacto en la tincin. En primer lugar, debe
quedar claro que los mtodos de control de la forma en colorantes cidos
ionizados reaccionan con los tejidos bsicos ionizados. Ese es el principio
fundamental del que dependen, y la explicacin es slo acerca de cmo esa
reaccin fundamental puede ser manipulado.

Hay varios factores que intervienen en la determinacin de colorante cido que se

une a la que componente de tejido. Algunos de estos factores implican el tejido y
algunos el colorante, y los tricomas ms tradicionales de tipo Masson tambin
incorporan lo que se refiere a menudo comopolicidos . Estos factores son todos
activos simultneamente, pero en una circunstancia dada un factor individual
pueden ser ms o menos importante. Por esta razn, las explicaciones de los
mtodos de pasos mltiples y de un solo paso difieren ligeramente, a pesar de
que no dependen esencialmente en el mismo proceso.

Los factores son: -

El estado del tejido

El estado de tinte
Los policidos y el desplazamiento

Los factores comunes

posteriores a la fijacin y el procesamiento adecuado, secciones dentro del
intervalo de aproximadamente 3-8 micras se cortan. El espesor de corte puede
tener un efecto sobre los resultados, pero dentro de ese rango es generalmente
satisfactoria. Se cuecen al horno en las diapositivas, y cuando est listo para teir
son llevados al agua de la manera habitual.

Mtodos tricrmico invariablemente utilizan colorantes en disolventes de pH

cido, generalmente cido actico acuoso diluido. Por lo general, la
concentracin de cido actico coincide con la concentracin de colorante (1% de
colorante en cido 1%, 2% de colorante en cido 2%, etc). Esto no es necesario,
pero es una prctica comn. El propio pH cido es necesario para maximizar la
cantidad de colorante que se adhiera a los grupos amino del tejido, es decir, es
un accentuator .

Este pH bajo tiene un efecto sobre la tincin nuclear con hematoxilina de

alumbre, que, o bien se elimina o aparece de color rojo. Esto se supera mediante
el uso de mordentado frrico hematoxilina, que se resiste a la eliminacin por los
cidos mejores que las soluciones de mordentado de aluminio. Probablemente las
dos tcnicas ms comunes son hematoxilina de Weigert y la secuencia hemalum
azul celestina.

Estas tcnicas generalmente citoplasma se tien con un colorante rojo, que se

llama a menudo el plasma de mancha. El colgeno es por lo general teirse con
un colorante verde o azul que puede ser llamado la fibra de mancha. Pequeos
peso colorantes amarillos moleculares se incluyen a veces para teir los
eritrocitos por lo que contrastan con los componentes de tincin de color rojo,
que pueden incluir la fibrina. Para mantener la coherencia, me referir a ellos
como el eritrocito mancha.

Vase tambin una explicacin de yellowsolve mtodos.

Mtodos de pasos mltiples

tcnicas multi-paso incluyen mtodos tales como el tricrmico de Masson, que se
utiliza para diferenciar entre las fibras musculares lisas y el colgeno, o para
demostrar un cambio en la cantidad de colgeno presente. Otros mtodos, tales
como de Lendrum Picro-Mallory se pueden utilizar para demostrar la fibrina en
agudo contraste con eritrocitos y otros tejidos. En estos mtodos los colorantes se
aplican de forma secuencial, y la tincin se optimiza en cada paso.

Para la tincin selectiva eritrocitos, colorantes cidos de bajo peso molecular,

tales como amarillo cido pcrico y amarillo de Martius se disuelven en
etanol. Un policido puede ser incluido tambin. La solucin se aplica por un
perodo y luego las secciones se lavaron en agua, por lo general el agua del grifo,
para eliminar el exceso de coloracin amarilla de los tejidos. La membrana
limitante de eritrocitos permite la entrada de agua. Esto diluye el etanol de
polaridad creciente, y los resultados en el aumento de tamao del agregado
colorante, atrapando as el colorante dentro de los eritrocitos. Este paso es
opcional, y muchas tcnicas no incorporarlo. En aquellos casos en los eritrocitos
se tien del mismo color que citoplasma.
A continuacin se aplica el segundo tinte (la mancha de plasma). Este es
generalmente de color rojo, y de peso molecular intermedio. Se aplica durante el
tiempo suficiente para teir profundamente todo el tejido, incluyendo citoplasma,
msculo y colgeno. Si los eritrocitos han sido pre-teidos con tintes amarillos,
se resisten a la tincin con este medio de contraste durante algn tiempo. De lo
contrario, tambin se tien con ella.

A continuacin se aplica El policido. Esto tiene una molcula grande, y elimina

(diferencia) el plasma de manchas de tejidos. Las primeras estructuras afectadas
son el colgeno y hueso.Cuando se ha aplicado durante el tiempo suficiente, estos
componentes del tejido macroscpicamente parecen mucho ms plido que las
fibras musculares o citoplasma.

Despus de la policido, se aplica el colorante de contraste (mancha de la

fibra). Esto tiene un peso molecular mayor que el plasma mancha, pero
considerablemente menor que el policido.El tinte se aplica durante el tiempo
suficiente para teir fibras de colgeno fuertemente sin principio para reemplazar
la tincin con rojo de otros componentes.

El patrn de tincin ms comn es: -

Eritrocitos - amarillo (o rojo)

Citoplasma, la fibrina, msculo - rojo
El colgeno, huesos - verde o azul

En algunos mtodos de tincin con la fibra mancha se acenta para aumentar el

contraste del elemento de destino, por lo general de fibrina, causando muscular y
el citoplasma a aparecer teida de azul. Tambin hay mtodos con un patrn de
color diferente a la anterior, colgeno amarilla por ejemplo, fibrina o azul oscuro.

Mtodos de un paso
de un solo paso los mtodos de tincin de tricrmico son aquellos que combinan
todos los tintes y otros reactivos en una nica solucin, que se aplica durante un
tiempo especificado. Los diversos componentes del tejido son de este modo de
color diferencialmente. Estos mtodos incluyen mtodos van Gieson de Gomori
y de.

Uno mtodos de paso dependen tcnica. Ellos trabajan satisfactoriamente

siempre que todo est estandarizado. Este incluye un espesor de la fijacin, el
procesamiento y la seccin, as como la formuation de la solucin de tincin y la
longitud de tiempo durante el cual se aplica. Mientras que las tcnicas
individuales pueden ser ms o menos tolerantes a los cambios de menor
importancia, en general, el cambio de cualquiera de los parmetros se requiere
que el procedimiento de tincin sea restandardised para consistencia de los
resultados. En otras palabras, uno mtodos de paso funcionan bien ha
proporcionado no cambie el procedimiento en absoluto.

Mediante la incorporacin de todos los reactivos en una sola solucin de los

diversos factores que interactan simultneamente que resulta en varios
componentes del tejido tincin con diferentes colorantes. La base es la tendencia
hacia la consecucin de equilibrio causado por los productos de reaccin que
participan en una reaccin de tipo de accin de masas. Es por esta razn que los
mtodos de un solo paso deben ser tan normalizado, como el cambio de uno
cualquiera de los parmetros puede dar lugar a un equilibrio diferente.

En la prctica, no dejamos que se alcanza el equilibrio. Esto casi siempre

favorece mancha de la fibra y en general, sera indeseable. En cambio, el proceso
se interrumpe mediante la eliminacin de la solucin cuando se obtienen los
resultados deseados. Este perodo de tiempo es uno de los factores
normalizados. Coloracin adecuada se obtiene mediante la interrupcin de la
marcha hacia el equilibrio en un punto repetible especificado.

Uno mtodos de paso se pueden ajustar mediante la alteracin de cualquiera de

varios factores.Sin embargo, esto es generalmente una cuestin de prueba y
error. Cambiar slo un factor a la vez y mantener un registro cuidadoso.

En general, se encontr que el aumento del tiempo se aplica el sesgo de tincin

en favor de la fibra mancha. Tambin puede aumentar la intensidad de la
mancha. Disminuir el tiempo, sin embargo, ser tincin sesgo a favor de la
mancha de plasma. Tincin eritrocitos suele ser menos afectados. Tambin puede
reducir la intensidad de la mancha.

El aumento de la concentracin de un colorante y mantener la constante del

tiempo de la tincin sesgo a favor de que tinte, mientras que la disminucin de la
tincin de los otros colorantes. En el caso del colorante de eritrocitos, esto a
menudo resultar en teida de amarillo o naranja citoplasma. Si se trata de la
mancha de plasma, tincin ser ms intensa en el citoplasma y puede resultar en
algunos colgeno rojo. Tambin podr invadir los eritrocitos causando que se
tien de naranja, o ser incompatible color. Si se aumenta la fibra mancha, ser
invadir estructuras citoplasmticas, pero no afectar generalmente tincin
eritrocitos.
La disminucin de la concentracin de un colorante mientras se mantiene la
constante de tiempo reducir la tincin por que tinte y aumentar el efecto de los
otros colorantes. Si se reduce el tinte de eritrocitos, el plasma mancha
invariablemente manchar los eritrocitos en cierto grado, incluso oscureciendo
tincin por el tinte de eritrocitos completamente. Si la mancha de plasma se
reduce puede haber un poco de colorante amarillo en algunas estructuras, como la
fibrina o muscular, y puede haber algo de infiltracin de la fibra mancha en otras
estructuras tales como el citoplasma y el msculo. Si se reduce demasiado, una
mancha de color amarillo y azul, con un ocasional resultados mancha roja, que es
particularmente atractivo. La reduccin de la mancha de fibra disminuye la
tincin de colgeno, dejando a menudo con un tinte rojo.

La alteracin de la cantidad de otros ingredientes (tipo y cantidad de policido,

tipo y concentracin de disolvente) tambin tendr un impacto. Estos deben ser
evaluados cuidadosamente, ya que pueden ser incompatibles.

Yellowsolve Stains
Una variacin sobre el tema de la tincin tricrmica son lo Lendrum y sus
compaeros de trabajo denominado Yellowsolve mtodos. Estos son mtodos en
los que un pequeo a mediano peso molecular colorante rojo se utilizan para teir
el tejido, a continuacin, la seccin se deshidrata y se aplica un gran peso de
colorante amarillo molecular disuelto en un disolvente no acuoso y reemplaza el
colorante rojo progresivamente. El disolvente que utilizaron fueCellosolve (2-
etoxi-etanol). El nombre que se aplica a los mtodos se deriva de cellosolve
amarilla .

Estos mtodos se derivan de HES de Masson (hematoxilina, eritrosina, azafrn)

mancha, una tcnica que utiliza soluciones acuosas de eritrosina B y azafrn para
obtener citoplasma de color rosa en contraste con colgeno amarilla. Esto dio
lugar a la HPS (hematoxilina Floxina, azafrn) mtodo, en el que se aplic el
azafrn en solucin etanlica anhidro. An as, los resultados fueron citoplasma
de color rosa en contraste con colgeno amarilla. Ambos mtodos eran manchas
generales de supervisin, diseado para competir con H & E.

Lendrum a continuacin, utiliza este mismo principio de un colorante en un

disolvente anhidro para diferenciar y tincin de colgeno con la tartrazina
floxina mtodo para cuerpos de inclusin de virus acidfilas y grnulos de
clulas de Paneth. Ms involucrados son mtodos como elSlidders 'fucsina-
Miller para la fibrina y el yellowsolve I y II yellowsolve mtodos Lendrum et
al. para la fibrina e inclusiones citoplasmticas respectivamente.
Los mtodos ms complejos pueden incluir desengrase , tratamiento con
solventes fuertes grasa, tales como tricloroetileno y tetracloroetileno por perodos
de hasta 48 horas. En los mtodos yellowsolve estos son un componente integral
de las tcnicas. La accin de los disolventes se explica inadecuadamente, pero
por lo general se considera que es debido a la eliminacin de todas las protenas
plasmticas o los lpidos asociados, permitiendo de este modo una interaccin
ms ntima entre los colorantes y las protenas.

Algunos de estos mtodos pueden incorporar un policido (por lo general

fosfotngstico) para diferenciar el tinte rojo antes de aplicar el tinte amarillo
anhidro, la mejora del contraste y tal vez la profundidad de la tincin. La
inclusin de la policido muestra claramente la relacin entre estos y los mtodos
de base acuosa ms comunes tricrmico mtodos, como el principio fundamental
es esencialmente el mismo, que un colorante cido puede desplazar
progresivamente otra y lo hace con las visitada ms fcilmente materiales, tales
como colgeno, primero.

El propsito del disolvente colorante es para ralentizar el proceso de

desplazamiento. Los disolventes utilizados son de baja polaridad que el agua es
as, mientras que la actividad inica todava se lleva a cabo, lo hace a un ritmo
ms lento. Esto permite un montn de tiempo para la eliminacin de los reactivos
deteniendo as el desplazamiento cuando se ha alcanzado el grado deseado de
color.

Aunque el ms comn disolvente utilizado es 2-etoxi-etanol, no hay ninguna

razn por qu otros no podran emplearse. De hecho, el mtodo inicial (HPS)
utiliza etanol absoluto. Sin embargo, es importante que el disolvente sea
anhidro. Todos los rastros de agua deben ser eliminados. Es importante, por lo
tanto, no slo para garantizar que el propio disolvente no contiene nada de agua,
pero tambin para asegurar que la seccin es completamente deshidratado antes
de colocarlo en la disolucin de colorante y que la humedad no se acumula
durante la propia tincin. Por estas razones, el colorante amarillo se aplica por lo
general en una jarra de Coplin o en otro recipiente en lugar de en un dispositivo
de tincin sobre un fregadero hmedo. En algunos mtodos, es incluso necesario
para sellar el recipiente en el que se aplica la solucin para inhibir cualquier
posibilidad de absorcin de la humedad de alta humedad. La razn de esta
preocupacin acerca de un disolvente anhidro es que las trazas de agua alteran su
polaridad, y pueden causar el desplazamiento inadecuada como consecuencia.

Por ltimo, tal vez debe tenerse en cuenta que, desde la ltima tinte se aplica en
un disolvente anhidro, ni se requiere un lavado final con agua ni
deshidratacin. Un simple enjuague con el disolvente para eliminar el exceso de
tinte, seguido de intercambio de informacin es todo lo que se requiere. En
efecto, la introduccin de un enjuague de agua puede as eliminar la mayor parte
de la tincin de color amarillo casi instantneamente.

Clasificacin por Materias Schiff (solo los link llevan

pg)
Teora Cul es el reactivo de Schiff? Reaccin de PAS
Reaccin Nucleal Reaccin plasmal
Reaccin de protenas Bloques aldehdo

Schiff reactivos Alejandro Barger y de Lamater

Coleman de Tomasi
Feulgen y Rossenbeck Galassi
Itikawa y Oguru Kasten & Burton
Lillie tradicional Lillie del fro
Menzies Schiff de originales

Pseudo-Schiff Fluorescente

cido peridico Norma PAS Hotchkiss PAS alcohlica

Corto PAS de Lillie Largo PAS de Lillie
McManus PAS PAS diastasa
Doble Schiff oxidacin Fluorescente PAS

El cido crmico Bauer (glucgeno) Gridley (hongos)

Nucleal Feulgen Fluorescente

Alternativas
Amiloide
Virchow acu el nombre de amiloide en un material que se observa en los
tejidos. Este trmino significa almidn como , y es una referencia a los primeros
mtodos utilizados para demostrar su presencia. El mtodo clsico para detectar
el almidn es tratar con una solucin de yodo, cuando se vuelve de color
azul. Amiloide inicialmente manchas de color marrn oscuro con una solucin de
yodo, pero esto se vuelve azul despus del tratamiento con cido sulfrico
concentrado. Esto es en realidad ms cerca de celulosa de al almidn, pero en el
momento en referencia a un material de origen animal como siendo el mismo que
un material vegetal no era aceptable, por lo que fue nombrado como almidn en
lugar de celulosa como (celuloide, ahora se utiliza para otro material derivado de
celulosa).

Amiloide es un acidfilo, material de hialina (vtreo), es decir, que se tie por

colorantes cidos y es de color rosa plido en un H & E, aunque su aspecto no es
suficientemente distintos para identificar definitivamente, y se requieren
tinciones especiales. La mayora de ellos dependen de una caracterstica de
amiloide que causa que los tintes para fijar en un patrn molecular regular,
formando una pseudocrystal . Esta palabra significa cristal falso , y describe las
propiedades pticas de amiloide que son similares a las mostradas por algunos
cristales, y que son atribuibles a su estructura molecular muy regular.

Amiloide es en gran medida de protena, pero puede contener otros

materiales. Por eso a veces se tie mediante mtodos de hidratos de carbono (azul
alcin, PAS). De hecho, esto pone de relieve el punto de que el amiloide se
identific invariablemente en la microscopa de luz de acuerdo con sus
caractersticas de tincin en lugar de su morfologa. En la microscopa de
electrones que tiene una ultraestructura fibrilar particular que identifica de forma
especfica, pero esto no puede ser visto con un microscopio de luz.

Wolman dio diez criterios para determinar si un material debe ser identificada
como amiloide o alguna otra cosa, y agreg que su estndar azul de
toluidina mtodo de tincin (STB) tambin debe ser positivo.

1. Es acidfilo en un H & E tincin.

2. No mancha el colgeno con Van Gieson picro-fucsina o tricomas.
3. Es dbilmente basfilo con azul alcin y azul de toluidina.
4. Tie metacromticamente con cristal violeta y azul de toluidina.
5. Tie con rojo congo y sirius F3B rojo.
6. Rojo Congo y sirius rojo amiloide teido muestran birrefringencia verde.
7. Se puede teir con azul de tripano.
 8. Es positiva con el (DMAB) tcnica de p-dimetilaminobenzaldehdo para el
triptfano.
9. Se presenta fluorescencia cuando se tien con tioflavina T y tioflavina S.
10.Tiene una ultraestructura fibrilar en particular.

La variabilidad de la tincin
Hay un cierto desacuerdo en cuanto a que los mtodos de tincin son los ms
adecuados para determinar si un material es amiloide o algo ms. Drury y
Wallington describen amiloide como eosinfilos, moderadamente PAS positivo,
variable con Van Gieson y azul o verde con un tipo de tricrmico de Masson, en
desacuerdo con Wolman, quien dijo que el amiloide no se mancha como el
colgeno (es decir, azul o verde) en una tricrmico . Otros requieren diferentes
resultados de la tincin para una identificacin positiva, tales como una tincin
positiva con rojo congo en conjuncin con la prueba de nitrito de DMAB para
triptfano, o cristal violeta metacromasia en conjuncin con birrefringencia verde
despus de tincin con rojo Congo.

Estas diferencias de opinin en cuanto a lo que constituye resultados de la tincin

definitivas de amiloide estn enraizados en la variabilidad inherente del propio
material. Hay muchos ejemplos de amiloide se cumplen los criterios establecidos,
pero no es de ninguna manera inusual para los ejemplos particulares a manchar
de acuerdo con un patrn diferente. Por ejemplo, durante la carrera del autor que
ha tenido por lo menos tres ejemplos en los que los resultados de la tincin
confusin causada. En uno, el rojo congo mancha (Highman de) fue positiva,
pero sirius rojo (Llewellyn) no pudo mancharlo. En otro, la tincin se invirti,
con el rojo congo no manchar con un positivo rojo sirius. En el tercero, tanto rojo
congo y rojo sirio fueron negativos, al igual que cristal violeta metacromasia,
pero Vassar y de Matanza tioflavina T fue dbilmente positivo. El material se
confirm ms tarde a ser amiloide por microscopa electrnica.

El punto es que el amiloide es un material variable y la tincin puede ser variable

tambin. Los ejemplos particulares de amiloide pueden manchar con un mtodo
particular o no, y el fracaso para teir no puede significar que un material
particular no es definitivamente amiloide. En la prctica, cada laboratorio debe
poner a disposicin varios mtodos de tincin, por lo que los resultados negativos
que se esperaban para demostrar amiloide se puede comprobar con los
procedimientos alternativos, o, como ltimo recurso, enviados por microscopa
electrnica.Sugiero sea rojo congo o sirius rojo como mtodo inicial de tincin,
seguido de cualquiera de los dos no se utiliz inicialmente, junto con tioflavina T.
Adems, el cristal violeta metacromasia, azul de toluidina estndar, alcian azul y
la prueba de nitrito DMAB tambin debe estar disponible para aquellas
ocasiones en que estos mtodos iniciales son inesperadamente xito.
Triptfano
Tanto amiloide y fibrina tienen niveles elevados de triptfano, por lo que ambos
materiales se tieron por la prueba de nitrito de DMAB. Esto significa que la
tcnica no se puede utilizar como un mtodo de tincin primaria para amiloide,
desde hialino teido positivamente podra ser cualquiera de amiloide o fibrina,
pero puede ser utilizado como una mancha de confirmacin cuando otros
mtodos de tincin son positivos.

Carbohidratos
amiloides menudo con manchas alcian azul, lo que indica la presencia de
mucopolisacridos cidos. Ambos tipos sulfatados y no sulfatados se han
sugerido, y es muy posible que ambos puedan estar presentes. Aunque amiloide
es metacromtica con azul de toluidina y cristal violeta, la metacromasia puede
ser dependiente de una caracterstica del material que no sea el contenido de
mucopolisacridos ( es decir, su estructura), y por lo tanto la metacromasia es un
indicador fiable de contenido de cido mucopolisacrido sulfatado en este caso
particular . Por otra parte, a veces se hace la suposicin de que la tincin de azul
alcin es simplemente un reflejo de los mucopolisacridos en la sustancia
fundamental es poco probable, ya que amiloide se tie ms oscuro que la
sustancia fundamental, que indica que tiene un contenido ms alto.

Lendrum, Slidders y Fraser observaron que la tincin de azul alcin es ms

intensa en nuevos depsitos de amiloide, lo que sugiere que el material de tincin
con azul alcin puede ser bloqueado o eliminado como las edades de
amiloide. En el mismo trabajo, estos autores tambin comentan sobre la variable
de tincin amiloide con un PAS. Observaron que el amiloide se PAS inicialmente
negativa, entonces se convierte en positivo, una vez ms se convierte en negativo
a medida que el depsito. Utilizaron esta progresin y la variabilidad con azul
alcin para apoyar su argumento de que el amiloide se somete a cambios en la
composicin qumica y por lo tanto en la tincin con el envejecimiento de
depsito. Sin embargo, esta variabilidad de azul alcin y tincin de PAS subraya
una vez ms la dificultad inherente en la recomendacin de un nico mtodo de
tincin para identificar el material.

EM apariencia
Como se seal anteriormente, la nica manera definitiva para identificar
amiloide es por su apariencia bajo el microscopio electrnico. Cohen & Calkins y
Gueft y Ghidoni describieron como fibras extracelulares, a menudo en pequeos
paquetes. Cada fibrilla es de 75 de ancho y consta de tres bandas lineales, cada
uno de 25 Angstroms de ancho. Las fibrillas se rebordearon a intervalos de 100
Angstrom.
 hoja de -plisada
La selectividad de los muchos mtodos para amiloide parece depender de dos
cosas: enlaces de hidrgeno y la forma en que sus aminocidos se pliegan. En la
mayora de las protenas de los aminocidos se pliegan en una forma helicoidal ,
que gira alrededor de un punto central, entonces la deformacin de la bobina
como diversos grupos expuestos entran en contacto y se influyen mutuamente, ya
sea por fuerzas inicos o no inicos. Amiloide tiene una estructura diferente,
llamado una hoja plegada beta ( -hoja plisada), que se compone de pliegues

regulares como una concertina. Esto es similar a una hoja de

papel plegada longitudinalmente en direcciones alternas haciendo un zig-zag
cuando se ve en final (vase a la derecha). El colorante es a menudo situado
dentro de los pliegues de los pliegues, la produccin de una alineacin regular de
molculas de colorante (se muestra en rojo), al igual que un cristal tendra. Esta
disposicin se conoce como un pseudocrystal , debido a que causa amiloide
exponer algunas de las propiedades pticas de un cristal, tales como dicrosmo y
birrefringencia dicroico. Tambin puede explicar el metacromasia con cristal
violeta.

Qu causa el amiloide
Antes se pensaba que el amiloide fue causada por algn componente del plasma
extrusin en los tejidos, al igual que la fibrina se forma a partir de fibringeno en
el plasma. A continuacin, se considera que los resultados de las reacciones entre
antgenos y anticuerpos, que, por alguna razn, se depositaron en los tejidos en
lugar de ser eliminado. A partir de los vnculos de la tabla a continuacin, parece
que puede haber varias causas para la deposicin de protenas anormales como
amiloide, incluyendo la presencia de genes especficos. No es una sola sustancia
y no hay una sola causa para ello, pero un hilo comn es que las protenas de
amiloide es un -hoja plegada en lugar del ms habitual -hlice. El sujeto puede
ser investigado por las bsquedas en Internet sobre temas de amiloide , la
amiloidosis , y el individuo tipos de amiloide en la lista de abajo. Se invita al
lector a hacerlo ya que es un tema muy amplio y muy complicado. Hay una
visin moderna en Medscape.

Clasificacin de amiloide
Los nombres de los tipos de amiloide por lo general comienzan con la letra
"A". La siguiente lista de los tipos ms comunes se hace mezclando las dos listas
en los artculos de la Wikipedia hace referencia ms adelante y aadir algunos
enlaces. La lista no es exhaustiva.

Abreviatura Tipo amiloide / gen Descripcin

Alabama cadena ligera amiloide Amiloidosis AL / mieloma mltiple. Contiene las cadenas ligeras de inmunoglobulina-(, )
derivadas de clulas plasmticas.

AA SAA Amiloidosis AA, la artritis reumatoide

Ap amiloide /APP Encontrado en el Alzheimer lesiones cerebrales enfermedad.

Ap 2 M 2microglobulina La hemodilisis amiloidosis asociada.

ATTR transtirretina /TTR Polineuropatas amiloides familiares, amiloidosis sistmica senil, amiloidosis
leptomenngea.

AIAPP amilina / IAPP Amiloide de pncreas en la diabetes tipo 2.

Agel Gelsolina,GSN Amiloidosis tipo finlands.

AApoA1 APOA1 Amiloidosis visceral familiar, la aterosclerosis.

Fib FGA Amiloidosis visceral familiar.

Alys LYZ Amiloidosis visceral familiar.

ABri ITM2B Angiopata amiloide cerebral, de tipo britnico

Adan ITM2B Angiopata amiloide cerebral, de tipo dans.

ACyS CST3 Angiopata amiloide cerebral, islands-tipo.

APro La prolactina Prolactinoma.

AKer Keratoepithelin Lattice distrofia corneal.

Acal La calcitonina El carcinoma medular de la tiroides.

AANF factor natriurtico Amiloide senil de aurculas del corazn, arritmias cardacas.
auricular

Amed Medin Amiloide artica medial.

- OSMR Amiloidosis cutnea primaria.

- Alfa-sinuclena La enfermedad de Parkinson.

- Huntingtin La enfermedad de Huntington.

APRP Protenas Prion Los depsitos en las enfermedades prinicas pueden parecerse a los de amiloide, es
decir, en la enfermedad de Creutzfeldt-Jakob, Kuru, la EEB y la tembladera.

Desde el punto de vista histolgico la clasificacin es mucho ms simple, ya que

los mtodos utilizados slo pueden mostrar la presencia de amiloide en general
en lugar de los tipos individuales de color selectiva. Para los limitados
diferenciaciones posibles entre los distintos tipos es necesario para bloquear la
reaccin de tincin y comparar la tincin de una seccin teida no
bloqueado. Las posibilidades que se dan en la siguiente tabla.

Tratamiento Amiloide afectados

Autoclave a 120 C durante 30 min. AA ya no manchas con rojo congo.

Autoclave a 120 C durante 2 horas. AL dejado manchas con rojo congo.

amiloide relacionada Pre-albmina muestra ningn cambio.
La oxidacin de permanganato de potasio. AA y 2-microglobulina ya no amiloide tincin con rojo Congo.

Guanidina alcalina durante 1 minuto. AA ya no manchas con rojo congo

Guanidina alcalina durante 2 horas. AL y amiloide senil sistmica ya no mancha con rojo congo.
protena amiloide familiar retiene tincin con rojo congo

La inmunohistoqumica es el mtodo ms definitivo para la clasificacin de los

tipos de amiloide mediante la identificacin de su protena
predominante. Fibrillas de amiloide tambin se pueden solubilizarse y se
identificaron en solucin, a pesar de que est fuera del alcance de S tains F ile.

Los mtodos utilizados para la demostracin de amiloide se enumeran a

continuacin. De stos, la prueba de nitrito DMAB es un mtodo histoqumico
para el triptfano usando p-dimetilaminobenzaldehdo. Las impregnaciones
metlicas se usan muy poco. Con mucho, el mtodo ms comn y algo de una
norma, si esa palabra se puede aplicar a la tincin de amiloide, es utilizar el
colorante directo algodn, rojo congo, con la birrefringencia verde por lo general
imparte.

El trmino colorante directo algodn se utiliza en la industria textil para referirse

a aquellos colorantes que pueden algodn de color sin necesidad de un
mordiente, es decir, por coloracin directa. Por lo general son colorantes
cidos. En el Colour Index su nombre funcional es "nmero directo + Color
+ ". Algunos colorantes directos algodn son adecuados para la tincin amiloide,
especialmente rojo congo ( roja directa 28 ) y sirius F3B roja ( roja directa
80 ). Otros colorantes directos de algodn, tales como benzo escarlata 4BNS ,
que se vende bajo el nombre comercial "amiloide rojo" ( rojo directo 72 ),
tambin pueden tener xito. Me gustara recordarles que cualquier mtodo de
tincin de amiloide puede ser incorrecta, y que se aplica a rojo congo y otros
colorantes directos algodn tambin.

Para obtener ms informacin sobre la estructura del amiloide consulte

este artculo en lnea .

Los mtodos de tincin

Alcian azul
Azul de toluidina birrefringencia
Crystal violet metacromasia
Rojo Congo y sirius F3B rojo
Tioflavina T y S
DMAB-nitrito de triptfano
 Impregnaciones metlicas

grficos se mezclan y se reproducen bajo la licencia Creative

Commons .Wikipedia

Amiloidosis http://emedicine.medscape.com/article/335414-overview . Medscape

Carleton, HM, y Leach, EH, (1938). tcnica histolgica. , Ed. 2. Oxford

University Press, London, England.

Cohen, AS, y Calkins, E, (1959). Observaciones microscpicas de electrones en

un componente fibroso de amiloide de orgenes diversos Naturaleza, v 183 :
p. 1202-03.

Drury, RA, y Wallington, EA, (1967). tcnica histolgica de Carleton. ,

Ed. 4. Oxford University Press, London, England.

Elstico
Elstico es el nombre dado a algunas fibras que se distribuyen ampliamente por
todo el cuerpo, tales como la piel, arterias y venas, pulmn, etc . En general, se
encuentran en donde se requiere un cierto movimiento del tejido implicado y,
como el nombre implica, que ayudan a restaurar el tejido despus del
movimiento. Ellos pueden ser aumentadas o disminuidas en cantidad debido a la
enfermedad y que pueden ser necesarias para demostrar que por esa razn, pero
su manifestacin es muy a menudo usados para mostrar que una estructura es un
vaso sanguneo, ya que ambas arterias y las venas tienen un anillo de elstico
fibra en su pared.Wikipedia tiene un artculo sobre las fibras elsticas y otro
sobre " las arterias elsticas ".

A veces, la palabra "elastina" se utiliza para estas fibras. Estrictamente hablando,

esto es incorrecto, ya que la elastina es el nombre de un componente proteico
principal de la elstica.Las propias fibras se conocen como "fibras elsticas".

Las fibras son resistentes a la autolisis y se fijan con bastante facilidad. La

mayora de los fijadores de preservarlos, y las variantes de formalina estndar
funcionan bien. Bajo la luz ultravioleta pueden tener una fluorescencia verde y
azul-blanco, el color en funcin de los filtros particulares usados. Las fibras ms
gruesas a menudo se puede ver en H & E manchadas secciones como un material
de color rosa suave y plida, pero las fibras finas son mucho ms difciles o
imposibles de ver y de sus mtodos de tincin selectiva de identificacin
inequvocos son necesarios. Ellos no se ven con poca frecuencia en las secciones
teidas con tintes de amiloide algodn directos, como el rojo congo y sirius F3B
rojo. Esto se debe tanto a amiloide y fibras elsticas se tieron a travs de fuerzas
no polares probable.

Los mtodos para la demostracin de las fibras elsticas son de varios tipos, que
se enumeran a continuacin. La mayora de estos mtodos son satisfactorios en la
prctica. Sin embargo, cabe sealar que las fibras elsticas varan en su tamao y
espesor. Las grandes arterias tales como la aorta, por ejemplo, pueden tener fibras
muy gruesas de elstico bastante grueso en la pared arterial, mientras que el
tejido que rodea los alvolos en el pulmn puede tener, finas fibras muy
pequeas. Esta diferencia fsica puede afectar a la eleccin de los mtodos
utilizados para demostrar las fibras.

Ha habido una evolucin en las explicaciones de la selectividad de los mtodos

de elstico. Se utiliza para ser explicada sobre la base de la tincin inica, y los
mtodos que overstained se diferenciaron para eliminar tinte de los tejidos menos
densamente manchado. Entonces se dio cuenta de que las fuerzas no polares
juegan un papel y la explicacin se bas en los enlaces de hidrgeno. Se
demostr entonces que las fibras todava manchadas cuando se utilizaron algunos
de los colorantes no capaces de formar enlaces de hidrgeno. Sin embargo, todos
estos colorantes tenan mltiples anillos aromticos y eran todos capaces de
unin por las fuerzas de Van der Waal. Que ahora es la explicacin ms
comnmente dada, que los tintes se unen preferentemente a las fibras elsticas,
debido a las fuerzas de van der Waals. La explicacin parece ser vlida para
todos los tipos de mtodos.

Oxitaln y elaunin fibras

oxitaln fibras se cree que son las fibras elsticas inmaduras. Despus de la
oxidacin con cido peractico, cido perfrmico o pemanganate de potasio que
pueden demostrarse por aldehdo fucsina, pero al parecer no se tien con
hematoxilina de Verhoeff. Se definen en el diccionario MediLexicon como:

Un tipo de fibra de tejido conectivo que representa una etapa temprana en la

formacin de las fibras de elastina y se ha encontrado en todo el cuerpo,
particularmente en el ligamento periodontal y la enca.
Fibras Elaunin se definen en el mismo diccionario como:
Un componente de las fibras elsticas formadas a partir de un depsito de
elastina entre las fibras oxitaln; encontrado en el ligamento periodontal y en el
tejido conectivo de la dermis, en particular en asociacin con las glndulas
sudorparas.
Bancroft seala que las fibras elaunin pueden ser teidas con orcien, aldehdo
fucsina y hierro-resorcina-fucsina, pero no se tien con hematoxilina de Verhoeff
ni con orcinol-nueva fucsina.

Los mtodos de tincin

Orcien
Iron-resorcina-fucsina
Aldehdo fucsina
Hierro hematoxilina
Diverso

Referencia Baker, John R., (1958) Principios de la biolgica

microtcnicaMethuen, Londres, Reino Unido.

Bancroft, JD y Stevens, A. (1982) Teora y prctica de las tcnicas histolgicas ,

Ed. 2Churchill Livingstone, Edimburgo y Londres, Reino Unido.

Fibrin
Fibrin is a protein material derived from the fibrinogen in blood plasma. Its
primary function is to stop bleeding from cuts and abrasions both internally and
externally. The process is well documented, having been extensively studied for
bleeding disorders. For those interested in the clotting process, during which
fibrin is formed, a good hematology reference text would be the best place to
start. Very briefly, the process is that a cut or an abrasion to a blood vessel occurs
which cause blood platelets to react and initiate a process whose function is to
convert fibrinogen to fibrin. The fibrin forms a meshwork which traps materials
and forms a blood clot which plugs the cut and stops the bleeding.

For more detailed explanations see the Wikipedia articles on fibrin and
on coagulation
Fibrin is an acidophil material, that is, it is stained by acid dyes and is pink in an
H & E. From the histological perspective, blood clots are pretty obvious in most
cases, and the fibrin can often be seen in an H & E as distinctly pink but less
brilliant than the erythroctes. There are some diseases, though, which produce
small amounts of fibrin within the tissues, perhaps in conjunction with a few
erythrocytes, perhaps alone. These fine fibrin deposits can be in the form of
fibres, small plates or granules, and it is often important for a pathologist to
identify them as an aid to diagnosis. Renal biopsies, as an example, will often be
stained to demonstrate fibrin deposits within the glomeruli. These may be about
the size and shape of erythrocytes which may also be present, so it becomes
important to be able to identify which material is an erythrocyte and which is a
fibrin deposit. There is a similar difficulty if the fibrin deposit is a fine fibre.
Collagen may also be present as fine fibres, and in an H & E it may be difficult to
reliably differentiate between the two. Fortunately, staining methods are available
to colour these three materials in different colours and clearly identify them.

The older methods for fibrin do not differentiate between fibrin and erythrocytes
particularly well. Both fibrin and erythrocytes are likely to be blue stained
with phosphotungstic acid hematoxylin (PTAH). If the PTAH is applied for a
short period, perhaps 15 minutes or so, the fibrin may be blue and the
erythrocytes unstained. This is not reliably so, however. The method is more
successful with larger deposits of fairly fresh fibrin than fibrin the size of an
erythrocyte that may be encountered in renal biopsies. The other tradional
technique is the Weigert Gramstain variant. This is a Gram stain which is
differentiated with aniline-xylene and is often done after prestaining with eosin or
some other red counterstain. Fibrin retains the crystal violet, appearing deep blue
on a pink background. Again, this technique is more successful with larger
deposits than the erythrocyte sized ones sometimes encountered. In practice,
these older methods are not often used any more and have been superseded by
the trichrome staining methods introduced by Lendrum and his coworkers.

Lendrum proposed that fibrin deposits stained differently depending on their age
since being formed. The freshest fibrin stains with the smallest molecular weight
dyes, much like erythrocytes, then progressively with larger molecular weight
dyes until it is indistinguishable from collagen. He proposed several staining
techniques to identify fibrin at different stages in this aging process. Still, many
of the methods demonstrate fibrin at ages between extremely fresh and very old,
so for practical purposes most of the fibrin will be seen with these methods, and
only rarely are the other methods required.

Perhaps the "type" trichrome method, as far as fibrin is concerned, is the Picro-
Mallory. This technique uses three staining solutions and a polyacid to produce
yellow erythrocytes, red fibrin and blue collagen. Unfortunately, the full method
is time consuming and requires some experience to produce optimal results. It is
unsurpassed when it does so. There is a simpler variant of the method which can
give very acceptable results for most practical purposes but which still requires
some experience.

Perhaps the most popular trichrome is the Martius, Scarlet and Blue (MSB). This
method has become popular as it is less dependent on the skill of the technologist
and the extended fixation that is desirable with the Picro-Mallory, and may be
done quite adequately on formalin fixed tissues with secondary fixation of
sections for an hour at 60C in either Bouin's fluid or saturated aqueous picric
acid. It demonstrates most fibrin red, although it should be noted that the freshest
fibrin is yellow and very old fibrin is blue. This is likely the most appropriate
technique for routine use in diagnostic settings.

For special cases the Masson 44/41 (so called because it uses acid red 44 and
acid blue 41) demonstrates older fibrin than the Picro-Mallory and MSB, and the
Obadiah technique (so called from an acronym of Orange, Blue, Direct
Red OBDR) demonstrates the oldest fibrin of all, when it otherwise is
indistinguishable from collagen. These two methods would not usually be used
routinely.

Other techniques have been recommended, but they tend to be fairly complex and
require considerable experience. Slidders' Fuchsin-Miller is
a yellowsolve method that demonstrates most fibrin bright red against a yellow
background and can be quite striking. It is very effective for colour photography.
The yellowsolve I technique may also be used, but is not popular.

Fibrinoid is a material resembling fibrin. The ending -oid means "like", as in

"similar to", sofibrinoid means like fibrin. Fibrinoid is a hyaline material seen in
some diseases, often autoimmune, which stains like fibrin but has other staining
reactions different from fibrin. It is now generally accepted that fibrinoid is fibrin
that is mixed with or which has trapped other materials which alter its staining
reactions.

Reference
Lendrum A C, Fraser D S, Slidders W and Henderson R. (1962)
Studies on the character and staining of fibrin.
Journal of clinical pathology, v. 15, p. 401.
McManus, J.F.A. and Mowry, R.W., (1960),
Staining methods, histologic and histochemical,
Harper & Row, New York, NY, USA.

Histological demonstration techniques, (1974)

Cook, H C.
Butterworths, London, England

Tincin de Gram
La tincin de Gram es una parte fundamental de la manifestacin y la
clasificacin de las bacterias. A pesar de que se ha utilizado durante ms de cien
aos, su mecanismo ha sido objeto de desacuerdo casi continua. Los desacuerdos
giran en torno a las explicaciones de por qu algunas bacterias se reservan el
violeta de metilo y otros no, y cul es la relacin entre el colorante, agente de
captura, la pared celular bacteriana y el contenido de clulas bacterianas.

La teora sostenida ms comnmente se dice que el cristal violeta unido al

cido nucleico bacteriano, a menudo identificado especficamente
como ribonucleate magnesio . Cuando se aade el yodo, un compuesto no
especificado se forma entre los tres componentes que resiste la disolucin en
disolventes. Aplicacin de un disolvente por lo tanto, elimina tinte de los
tejidos en general, pero deja este complejo dentro del organismo.

La explicacin menos bien aceptado tiene el tinte de unin a los

componentes de cido en la clula bacteriana, como lo haran los colorantes
bsicos. La adicin de yodo hace que el colorante para formar un complejo
con ella, que tiene una molcula ms grande que los espacios dentro de la
pared celular bacteriana. Cuando se aplica un disolvente disuelve el
complejo, pero se restringe fsicamente de pasar a travs de la pared celular
debido a su tamao. As, el organismo se tie cuando se decolor el resto del
tejido.

Popescu y Doyle extendieron las explicaciones

considerablemente. Explican que el tinte y yodo forman un complejo dentro
de la clula bacteriana sin ninguna referencia a la composicin qumica de
los contenidos de la celda. Cuando se aplica el disolvente, el complejo se
disuelve, pero es retenido dentro de la clula de paredes
gruesas bacterias. La pared celular gruesa resiste el dao del disolvente,
retener el colorante. Bacterias Gram negativas, con paredes celulares ms
delgadas, no resisten el dao tan bien como lo hacen los organismos Gram
 positivos, por lo tanto se elimina el tinte. Sealan que las bacterias Gram
positivas tienen paredes celulares de 10-15 veces ms gruesos que los
organismos Gram negativos. Tambin comentan que los organismos pueden
ser bacterias Gram negativo no slo debido a que las paredes de las clulas
se daan fcilmente, pero tambin porque la pared celular pueden ser tan
gruesa que inhibe el cristal violeta de entrar en el primer lugar.

Referencias Popescu, A., Doyle, RJ. , (1996) la tincin de Gram despus de ms

de un siglo y Biotechnic Histoqumica, v.71, n 3, pp.145