TEMA:

MICROBIOLOGIA ALIMENTARIA
(CRECIMIENTO BACTERIANO
AGAR NUTRITIVO)
CARRERA: CIENCIAS FARMACEUTICAS Y BIOQUIMICA

CURSO: TECNOLOGIA ALIMENTARIA

DOCENTE: Dr. ANTONIO QUESADA

CICLO: IX

AUTORES

ARZAPALO ALANIA ANA AMELIA

ANTONIO SINCHE DOMITILA
FERNANDEZ ENCARNACION PATRICIA
GOMEZ HINOSTROSA EDITH
ROJAS GABRIEL LUCY
COLUCHE BEATRIZ

LIMA PERU

JULIO 2016
DEDICATORIA

Este trabajo est

dedicado a nuestros
padres por su gran
esfuerzo que nos apoyan
en nuestros estudios y a
nuestros maestros por
 INDICE

Dedicatoria

INTRODUCCIN 1
I. MARCO TERICO 2
1. MICROBIOLOGIA ALIMENTARIA 2
2. CRECIMIENTO MICROBIANO DE LOS ALIMENTOS 3
3. ALIMENTOS CONTAMINADOS
CON ENFERMEDADES MICROBIOS 3
4. LOS MEDIOS DE CULTIVO EN MICROBIOLOGA 4
5. CONDICIONES GENERALES PARA EL CULTIVO DE
MICROORGANISMOS 4
6. DISPONIBILIDAD DE NUTRIENTES ADECUADOS 5
7. LA EVOLUCIN DE LOS MEDIOS DE CULTIVO

II. PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA 7

III. HIPOTESIS 13
IV. OBJETIVOS 13
V. PARTE EXPERIMENTAL 14
VI. PROCEDIMIENTO 17
VII. RESULTADOS 21
VIII. CONCLUSIONES 22
IX. BIBLIOGRAFA 23
X. ANEXOS 24
 INTRODUCCION

La microbiologa Alimentaria. Esta disciplina asume el anlisis de aspectos positivos

que tienen los microorganismos sobre los alimentos, como la produccin de
alimentos gracias a microorganismos y tambin de aspectos negativos que tienen
los microbios sobre los alimentos, como la descomposicin de productos
alimenticios y la causa de enfermedades haca las personas que consumen
alimentos contaminados con microorganismos.

Los microorganismos, se encuentran en varios hbitats, ya sea en nuestro cuerpo,

alimentos, el suelo, las plantas, el aire y en toda superficie a nuestro alrededor, es
decir los alimentos no son totalmente estriles, debido a que los microorganismos
son omnipresentes, aunque no sean visibles al ojo humano. Gran parte de las
enfermedades que son proporcionadas a causa de alimentos contaminados con
microorganismos, se deben a la inoculacin de microorganismos ajenos a los
microbios comunes de un alimento. Cuando los alimentos poseen microorganismos
de manera natural, el conjunto de microorganismos dispuestos en el alimento, se le
conoce como flora normal, la cual es proveniente del suelo, aire o agua, y cuando
los alimentos contienen microorganismos que han sido incorporados por nosotros o
por alguna superficie con la que han entrado en contacto (no usuales en los
alimentos).

El crecimiento microbiano que se da en los alimentos es debido al valor nutricional

que tienen muchos de los alimentos, sin embargo no todos los alimentos resultan ser
un buen medio para el desarrollo de microorganismos, debido al pH, Temperatura y
la humedad

1
 I. MARCO TEORICO:

I.1. MICROBIOLOGIA ALIMENTARIA

La microbiologa de alimentos es una rama de la microbiologa que se encarga del

anlisis de la composicin microbiana de los alimentos, mediante tcnicas
estandarizadas que permiten la deteccin de diferentes agentes microbianos. Esta
disciplina asume el anlisis de aspectos positivos que tienen los microorganismos
sobre los alimentos, como la produccin de alimentos gracias a microorganismos y
tambin de aspectos negativos que tienen los microbios sobre los alimentos, como
la descomposicin de productos alimenticios y la causa de enfermedades haca las
personas que consumen alimentos contaminados con microorganismos.

Los microorganismos, como ya lo han fundamentado, tericos especialistas en la

microbiologa, se pueden encontrar en varios hbitats, ya sea en nuestro cuerpo,
alimentos, el suelo, las plantas, el aire y en toda superficie a nuestro alrededor, es
decir los alimentos no son totalmente estriles, debido a que los microorganismos
son omnipresentes, aunque no sean visibles al ojo humano. Gran parte de las
enfermedades que son proporcionadas a causa de alimentos contaminados con
microorganismos, se deben a la inoculacin de microorganismos ajenos a los
microbios comunes de un alimento. Cuando los alimentos poseen microorganismos
de manera natural, el conjunto de microorganismos dispuestos en el alimento, se le
conoce como flora normal, la cual es proveniente del suelo, aire o agua, y cuando
los alimentos contienen microorganismos que han sido incorporados por nosotros o
por alguna superficie con la que han entrado en contacto (no usuales en los
alimentos). La flora que posee un alimento se puede clasificar de acuerdo al tipo de
microorganismo que contenga en: beneficiosos, como la flora microbiana del yogur;
de deterioro como los lcteos descompuestos por bacterias; y patgenos como la
flora patgena en los alimentos, ejemplo es la estafiloccica provocadora de
toxiinfeccin alimentaria.1

2
2.2. CRECIMIENTO MICROBIANO DE LOS ALIMENTOS

El crecimiento microbiano que se da en los alimentos es debido al valor nutricional

que tienen muchos de los alimentos, sin embargo no todos los alimentos resultan ser
un buen medio para el desarrollo de microorganismos, en los alimentos que se
produce el crecimiento microbiano se debe a que el alimento es un buen medio de
cultivo para el desarrollo de microorganismos. En los alimentos el crecimiento de
microorganismos est determinado por factores intrnsecos, vinculados con el
alimento, y con factores extrnsecos, relacionados donde se guarda el alimento. Los
factores intrnsecos estn relacionados con la composicin del alimento, si la
composicin del alimento contiene principalmente carbohidratos el tipo crecimiento
microbiano vara el tipo de crecimiento que se produce en un alimento constituido
principalmente por lpidos o por protenas.

El pH, la existencia y disponibilidad de agua y el potencial de oxidacin-reduccin de

los alimentos son tambin factores intrnsecos que afectan el crecimiento de
microorganismos. Varios alimentos presentan sustancias antimicrobianas naturales
como por ejemplo inhibidores qumicos y enzimas complejas. Las verduras, las
frutas, la leche de vaca y los huevos contienen acciones microbianas. Las frutas y
verduras contienen pieles externas que cumplen una funcin de proteccin.

Dentro de los factores extrnsecos se encuentra la temperatura y la humedad.

Cuando hay humedades relativas elevadas, el desarrollo microbiano comenzar ms
veloz. Si alimentos secos se alojan en ambientes hmedos, puede que se produzca
una filtracin de la humedad en la superficie del alimento, posibilitando que se lleve
a cabo el crecimiento microbiano. Otro factor extrnseco es la atmsfera a la que se
almacenan los alimentos, ya que si los alimentos estn expuestos al dixido de
carbono, oxgeno u otros factores intrnsecos presentes en la atmsfera, condicionan
el crecimiento microbiano.2

3.3. ALIMENTOS CONTAMINADOS CON ENFERMEDADES MICROBIOS

Los alimentos contaminados con microbios que causan enfermedades se pueden

clasificar en tres tipos: alimentos que causan infecciones, intoxicaciones y
toxiinfecciones.), para que se genere una infeccin, debe haber una ingestin de
microbios que se multiplican en el hospedero y que las intoxicaciones se generan
por la ingestin de alguna toxina generada por un microorganismo dispuesta en un
alimento. Staphylococcus aureus y Clostridium botulinum son ejemplos de bacterias
que producen toxinas que causan intoxicaciones al ingerirlas junto con los alimentos.
Bacterias como Salmonella, Escherichia coli, Bacillus cereus y Vibrio cholerae son
microorganismos que se encargan de generar infecciones por la ingesta de

3
alimentos contaminados con este tipo de bacterias. En el caso de la infeccin por
Salmonella puede causar enterocolitis, bacteriemia o fiebre entrica. Las
toxiinfecciones son una combinacin intermedia de las dos clasificaciones
mencionadas antes, debido a que se necesita ingerir el microorganismo y que dentro
del hospedero libere su toxina, para que se presente el cuadro de enfermedad.
Clostridium perfringens produce toxiinfecciones por las exotoxinas que produce,
Bacillos cereus tambin puede producir toxiinfecciones caracterizadas por vmitos y
nuseas.

4.4. LOS MEDIOS DE CULTIVO EN MICROBIOLOGA:

Uno de los sistemas ms importantes para la identificacin de microorganismos es

observar su crecimiento en sustancias alimenticias artificiales preparadas en el
laboratorio. El material alimenticio en el que crecen los microorganismos es el Medio
de Cultivo y el crecimiento de los microorganismos es el Cultivo. Se han preparado
cultivo. Para que las bacterias crezcan adecuadamente en un medio de cultivo
artificial debe reunir una serie de condiciones como son: temperatura, grado de
humedad y presin de oxgeno adecuado, as como un grado correcto de acidez o
alcalinidad. Un medio de cultivo debe contener los nutrientes y factores de
crecimiento necesarios y debe estar exento de todo microorganismo contaminante.

La mayora de las bacterias patgenas requieren nutrientes complejos similares en

composicin a los lquidos orgnicos del cuerpo humano. Por eso, la base de
muchos medios de cultivo es una infusin de extractos de carne y Peptona a la que
se aadirn otros ingredientes.

El agar es un elemento solidificante muy empleado para la preparacin de medios

de cultivo. Se lica completamente a la temperatura del agua hirviendo y se solidifica
al enfriarse a 40 grados. Con mnimas excepciones no tiene efecto sobre el
crecimiento de las bacterias y no es atacado por aquellas que crecen en l. La
Gelatina es otro agente solidificante pero se emplea mucho menos ya que bastantes
bacterias provocan su licuacin.

5.5. CONDICIONES GENERALES PARA EL CULTIVO DE MICROORGANISMOS:

El desarrollo adecuado de los microorganismos en un medio de cultivo se ve

afectado por una serie de factores de gran importancia y que, en algunos casos, son
ajenos por completo al propio medio.

4
6.6. DISPONIBILIDAD DE NUTRIENTES ADECUADOS

Un medio de cultivo adecuado para la investigacin microbiolgica ha de contener,

como mnimo, carbono, nitrgeno, azufre, fsforo y sales inorgnicas. En muchos
casos sern necesarias ciertas vitaminas y otra sustancia inductoras del
crecimiento. Siempre han de estar presentes las sustancias adecuadas para ejercer
de donantes o captadores de electrones para las reacciones qumicas que tengan
lugar. Todas estas sustancias se suministraban originalmente en forma de
infusiones de carne, extractos de carne o extractos de levadura. Sin embargo, la
preparacin de estas sustancias para su aplicacin a los medios de cultivo
provocaba la prdida de los factores nutritivos lbiles. Actualmente, la forma ms
extendida de aportar estas sustancias a los medios es utilizar peptona que, adems,
representa una fuente fcilmente asequible de nitrgeno y carbn ya que la mayora
de los microorganismos, que no suelen utilizar directamente las protenas naturales,
tienen capacidad de atacar los aminocidos y otros compuestos ms simples de
nitrgeno presentes en la peptona. Ciertas bacterias tienen necesidades nutritivas
especficas por lo que se aade a muchos medias sustancias como suero, sangre,
lquido asctico, etc. Igualmente pueden ser necesarios ciertos carbohidratos y sales
minerales como las de calcio, magnesio, manganeso, sodio o potasio y sustancias
promotoras del crecimiento, generalmente de naturaleza vitamnica. Muy a menudo
se aaden al medio de cultivo ciertos colorantes, bien como indicadores de ciertas
actividades metablicas o bien por sus capacidades de ejercer de inhibidores
selectivos de ciertos microorganismos.

6.6.1. Consistencia adecuada del medio:

Partiendo de un medio lquido podemos modificar su consistencia aadiendo

productos como albmina, gelatina o agar, con lo que obtendramos medios en
estado semislido o slido. Los medios solidificados con gelatina tienen el gran
inconveniente de que muchos microorganismos no se desarrollan adecuadamente a
temperaturas inferiores al punto de fusin de este solidificante y de que otros tienen
la capacidad de licuarla. Actualmente los medios slidos son de uso universal, por
su versatilidad y comodidad, pero hay tambin gran cantidad de medios lquidos
cuyo uso est ampliamente extendido en el laboratorio.

6.6.2. Presencia (o ausencia) de oxgeno y otros gases:

Gran cantidad de bacterias pueden crecer en una atmsfera con tensin de

oxgeno normal. Algunas pueden obtener el oxgeno directamente de variados
sustratos. Pero los microorganismos anaerobios estrictos slo se desarrollarn
adecuadamente en una atmsfera sin oxgeno ambiental. En un punto intermedio,
los microorganismos microaerfilos crecen mejor en condiciones atmosfricas
parcialmente anaerobias (tensin de oxgeno muy reducida), mientras los

5
anaerobios facultativos tienen un metabolismo capaz de adaptarse a cualquiera de
las citadas condiciones.

6.6.3. Condiciones adecuadas de humedad:

Un nivel mnimo de humedad, tanto en el medio como en la atmsfera, es

imprescindible para un buen desarrollo de las clulas vegetativas microbianas en los
cultivos. Hay que prever el mantenimiento de estas condiciones mnimas en las
estufas de cultivo a 35-37C proporcionando una fuente adecuada de agua que
mantenga la humedad necesaria para el crecimiento de los cultivos y evitar as que
se deseque el medio.

6.6.4. Luz ambiental:

La mayora de los microorganismos crecen mucho mejor en la oscuridad que en

presencia de luz solar. Hay excepciones evidentes como sera el caso de los
microorganismos fotosintticos.

6.6.5. pH:

La concentracin de iones hidrgeno es muy importante para el crecimiento de los

microorganismos. La mayora de ellos se desarrollan mejor en medios con un pH
neutro, aunque los hay que requieren medios ms o menos cidos. No se debe
olvidar que la presencia de cidos o bases en cantidades que no impiden el
crecimiento bacteriano pueden sin embargo inhibirlo o incluso alterar sus procesos
metablicos normales.

6.6.6. Temperatura:

Los microorganismos mesfilos crecen de forma ptima a temperaturas entre 15 y

43C. Otros como los psicrfilos crecen a 0C y los temfilos a 80C o incluso a
temperaturas superiores (hipertemfilos). En lneas generales, los patgenos
humanos crecen en rangos de temperatura mucho ms cortos, alrededor de 37C, y
los saproftos tienen rangos ms amplios.

6.6.7. Esterilidad del medio:

Todos los medios de cultivo han de estar perfectamente estriles para evitar la
aparicin de formas de vida que puedan alterar, enmascarar o incluso impedir el
crecimiento microbiano normal del o de los especimenes inoculados en dichos
medios. El sistema clsico para esterilizar los medios de cultivo es el autoclave (que
utiliza vapor de agua a presin como agente esterilizante).

6
2.2. LA EVOLUCIN DE LOS MEDIOS DE CULTIVO:

Podemos decir que la microbiologa empieza su verdadero desarrollo como ciencia

en el momento en que se descubre el microscopio y comienza la observacin de los
primeros microorganismos, pero es indudable que la puesta a punto de los medios
de cultivo y la utilizacin del agar como solidificante, marcan dos importantes puntos
de inflexin en su evolucin. La primera noticia de la utilizacin de medios de cultivo
nos llega del miclogo Brefeld, que consigui aislar y cultivar esporas de hongos en
medios slidos realizados a base de gelatina. Sin embargo este sistema no era
adecuado para las bacterias (por su menor tamao) y no fue hasta el ao 1878
cuando Lister populariz un mtodo enfocado al cultivo puro basado en diluciones
seriadas en un medio lquido. Koch realiz sus investigaciones utilizando en un
primer momento rodajas de patata como soporte nutritivo slido, ro no tard en
recurrir al caldo de carne.

2.2.1. Tipos bsicos de medios de cultivo:

Medios de cultivo: Slido y Lquido Una forma muy til de poder aislar, identificar y
conservar los microorganismos es mediante el uso de medios de cultivo,
inicialmente ideados por Pasteur

Como ya sabemos se considera el padre de la microbiologa), quien se dio cuenta

que los microorganismos podan crecer en soluciones que tuvieran azcar y una
fuente de nitrgeno. De ese tiempo hasta ac, ha pasado mucha agua debajo del
puente y actualmente existen medios muy especializados para microorganismos
muy exigentes. La forma ms sencilla de clasificar los medios de cultivo es por su
consistencia. De factores indispensables para el crecimiento de microorganismos
exigentes.

2.2.2 SEGN SU ORIGEN:

a) NATURALES: son los preparados a partir de sustancias naturales de origen

animal o vegetal como ser extractos de tejidos o infusiones y cuya composicin
qumica no se conoce exactamente.

b) SINTTICOS: son los medios que contienen una composicin qumica definida
cuali y cuantitativamente. Se utilizan para obtener resultados reproducibles.

c) SEMISINTTICOS: son los sintticos a los que se les aaden factores de

crecimiento bajo una forma de un extracto orgnico complejo, como por ejemplo
extracto de levadura.

7
 i. AGAR MACCONKEY

Es un medio selectivo diferencial utilizado para el aislamiento y diferenciacin de

bacilos Gram negativo fermentadores y no fermentadores de lactosa. Se utiliza con
frecuencia para el aislamiento de coliformes.

Lac + Lac -

ii. IMPORTANCIA

En la actualidad, existen numerosos medios de cultivo para aislamiento, cultivo e

identificacin de Enterobacteriaceae y determinados organismos no fermentadores.
Uno de los primeros fue desarrollado por MacConkey y publicado en 1900 y 1905.
Esta frmula fue diseada sabiendo que las sales biliares precipitan por accin de
cidos y determinados microorganismos entricos fermentan la lactosa, mientras
que otros no presentan dicha capacidad. Posteriormente, este medio fue modificado
varias veces. El agar MacConkey es slo ligeramente selectivo, dado que la
concentracin de sales biliares, que inhiben los microorganismos Gram positivos, es
baja en comparacin con otros medios en placa entricos. Se recomienda el uso de
este medio en muestras clnicas con posible flora microbiana mixta, tal como

8
procedentes de la orina, del sistema respiratorio, de heridas y otras, porque permite
la agrupacin preliminar de bacterias entricas y otras bacterias Gram negativas en
organismos fermentadores y no fermentadores de lactosa. El agar MacConkey
tambin se utiliza en el examen microbiolgico de alimentos. La frmula del agar
MacConkey II se dise para mejorar la inhibicin del agrupamiento dinmico de la
especie Proteus, lograr una diferenciacin ms definitiva de los organismos
fermentadores y no fermentadores de lactosa y alcanzar un crecimiento superior de
las bacterias entricas. En BD MacConkey II Agar, las peptonas proporcionan los
nutrientes. Cristal violeta inhibe las bacterias Gram positivas, en especial los
enterococos y estafilococos. La diferenciacin de los microorganismos entricos se
logra mediante la combinacin de lactosa y el indicador de pH rojo neutro. Se
producen colonias incoloras o de color de rosa

iii. COMPOSICIN
Digerido pancretico de gelatina 17,0 g
Digerido pancretico de casena 1,5 g
Digerido pptico de tejido animal 1,5 g
Lactosa 10,0 g
Mezcla de sales biliares 1,5 g
Cloruro de sodio 5,0 g
Agar 13,5 g
Rojo neutro 30,0 mg
Cristal violeta 1,0 mg
Agua destilada 1.000 mL
pH final 7,1 0,2

iv. PRECAUCIONES

Solamente para uso profesional. No utilizar las placas si muestran evidencia de

contaminacin microbiana, decoloracin, deshidratacin, agrietamiento o cualquier
otro signo de deterioro. Consultar los procedimientos de manipulacin asptica,
riesgos biolgicos y eliminacin del producto usado en el documento Instrucciones
generales de uso.

v. USOS

9
Sirve como un indicador visual de pH, distinguiendo as las bacterias Gram
negativas que pueden fermentar la lactosa (Lac+) y las que no pueden (Lac-).

Lac+

Al utilizar la lactosa en el medio, bacterias Lac+ como Escherichia coli, Enterobacter

y Klebsiella producen acidez, lo cual baja el pH bajo 6,8 lo que tiene como
consecuencia la aparicin de colonias de color rosadas o rojas. Algunas bacterias
en cambio fermentan la lactosa de manera lenta, estas siguen siendo Lac+ por
ejemplo: Serratia y Citrobacter.

Lac-

Bacterias que no fermenten la lactosa como Salmonella, Proteus y Shigella

utilizaran peptona en su lugar, formando amoniaco, lo cual incrementa el pH del
agar, formando colonias blancas o incoloras.

vi. APLICACIONES:

1.-Es muy importante para saber si el alimemto esapto para el consumo humano.

2.- para saber si el conservadorpuede actuar.

3.- para cuidar el medio ambiente.

vii. ALMACENAMIENTO Y VIDA UTIL

Al recibir las placas, almacenarlas en un lugar oscuro a una temperatura entre 2 y 8

C, envueltas en su envase original, hasta justo antes de usarlas. Evitar la
congelacin y el calentamiento excesivo. Las placas pueden inocularse hasta su
fecha de caducidad (ver la etiqueta en el paquete) e incubarse durante los perodos
de incubacin recomendados. Las placas de grupos de 10 placas ya abiertos
pueden usarse durante una semana siempre que se almacenen en un lugar limpio a
una temperatura entre 2 y 8 C.

CONTROL DE CALIDAD

Inocular muestras representativas con las cepas siguientes (para obtener los
detalles, vase el documento instrucciones generales de uso). Incubar las placas

10
a 35 2 C en una atmsfera aerobia. Examinar las placas despus de 18 24 h
para comprobar la extensin del crecimiento, el tamao de las colonias, la
pigmentacin y la selectividad.

Las colonias de los microorganismos fermentadores de lactosa (coliformes) en agar

MacConkey son de color rojo ladrillo, eventualmente rodeadas de bilis precipitada.

ORGANISMOS RESULTADOS DEL RECIMIENTOS

E.coli Colonias de color de rosa a rojo (pueden estar

rodeadas de una zona con precipitacin de bilis)

Enterobacter, Klebsiella Colonias mucoides de color rosa

Proteus Colonias incoloras, inhibicin de agrupamiento

dinmico alrededor de colonias aisladas
Salmonella, Shigella Colonias incoloras. Color del medio: Anaranjado a
mbar
Pseudomonas Colonias irregulares, de incoloras a color rosa

Inhibicin entre parcial y completa de bacterias Gram positivas.

11
ii. AGAR NUTRITIVO:

El Agar nutritivo es un medio de cultivo usado normalmente como rutina para todo
tipo de bacteria. Es muy til porque permanece solido incluso a relativas altas
temperaturas. Adems, el crecimiento bacteriano en este agar lo hace en la
superficie, por lo que se distinguen mejor las colonias pequeas. En un caldo de
nutrientes, la bacteria crece en el lquido, y aparece como una sustancia espesa,
con colonias difcilmente observables.

El agar nutritivo contiene normalmente (w/v).

0.5 % Peptona

0.3 % extracto de carne/extracto de levadura

1.5 % agar

0.5% NaCl

Agua destilada

pH casi neutro (6.8) a 25

12
 II. PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA

Que se produce el crecimiento microbiano se debe a que el alimento es un buen

medio de cultivo para el desarrollo de microorganismos. En los alimentos el
crecimiento de microorganismos est determinado por factores intrnsecos,
vinculados con el alimento, y con factores extrnsecos, relacionados donde se
guarda el alimento

III. HIPOTESIS

Se observara en la muestras que es la palta analizado la proliferacin de

microorganismos.

IV. OBJETIVOS

El objetivo es adquirir conocimientos suficientes para estar en condiciones de

poder discernir los riesgos microbiolgicos potenciales en los distintos tipos de
alimentos y de establecer las medidas pertinentes de modo que se asegure la
calidad del producto.

Comprender el significado de Calidad de alimentos desde el punto de vista

microbiolgico

Conocer los microorganismos, alterantes y patgenos, que se enfrentan a la

calidad microbiolgica de alimentos

13
 Conocer los microorganismos fermentadores y su participacin en la produccin
de alimentos.

Conocer las bases de funcionamiento y de acreditacin de un laboratorio de

control microbiologa de alimentos.

V. PARTE EXPERIMENTAL

4.1. Materiales y reactivos

Placa Petri

Recipientes para la
preparacin de medios
de cultivo slidos

Aza de siembra

Se utilizan para
sembrar. Pueden ser
metlicas o de
plstico, curvas o
Probeta rectas (para la siembra
por picadura).

Son recipientes graduados,

cilndricos, con una base para la
sujecin en la parte de abajo, se
utiliza para medir volmenes
que precisan poca precisin.
Tubo de ensayo

Son unos vasos tubulares que

sirven para calentar, hacer
reacciones en ellos, y los
puede haber de muchas formas
14
Balanza

Sirve para medir masas de

sustancias slidas

Refrigeradora

Su funcin consiste en mantener, en un

ambiente controlado (espacio
refrigerado) diversos fluidos y sustancias, para
que los mismos se conserven en buenas
condiciones (mientras ms baja sea
la temperatura, menor actividad qumica y
biolgica).

Mechero Es un instrumento utilizado

en laboratorios para calentar muestras y
sustancias qumicas. El mechero bunsen
est constituido por un tubo vertical que va
enroscado a un pie metlico con ingreso
15 para el flujo de gas, el cual se regula a
travs de una llave sobre la mesa de
trabajo.
Gradilla

Es una herramienta que forma parte del

material de laboratorio (principalmente
en laboratorios de biologa molecular,
gentica y qumica) y es utilizada para
sostener y almacenar gran cantidad de
tubos de ensayo o tubos eppendorf.

Reactivos

Alcohol etlico 70 %
Agar MacConkey
Agua destilada

VI. PROCEDIMIENTO

PREPARACIN DEL AGAR

Se esterilizo la placa Petri con alcohol de 70% con el mechero se lleg a

secar.

16
Luego se agreg el agar nutritivo en la placa Petri.

Se cierra la placa
Petri y guardamos
durante 10 min en la
nevera (4C) para
permitir que el agar superior se endurezca.

17
 El agar nutritivo ya endurecido lo tapamos con el papel graf y lo llevamos a la
refrigeradora.

SIEMBRA

Esterilizar con el fuego el asa siembra para poder sembrar

18
 En
el

agar poner la siembra del queso se vuelve a estilizar con el fuego

En la otra mitad de la placa Petri se hace la siembra de la gelatina se vuelve a

esterilizar con el fuego

19
En el agar se pone a sembrar yogurt Y se vuelve a esterilizar con el fuego

En la otra mitad de la placa Petri se siembra el Quaker

20
VII. RESULTADOS

Las colonias de los microorganismos fermentadores de lactosa (coliformes)

en agar MacConkey son de color rojo ladrillo, eventualmente rodeadas de bilis
precipitada.

Muestra problema Resultados

Queso Positivo

Gelatina Negativo

Yogurt positivo

Palta Negativo

ORGANISMOS RESULTADOS DEL RECIMIENTOS

21
 E.coli Colonias de color de rosa a rojo
(pueden estar rodeadas de una zona
con precipitacin de bilis)
Enterobacter, Colonias mucoides de color rosa
Klebsiella
Proteus Colonias incoloras, inhibicin de
agrupamiento dinmico alrededor de
colonias aisladas
Salmonella, Colonias incoloras. Color del medio:
Shigella Anaranjado a mbar
Pseudomonas Colonias irregulares, de incoloras a
color rosa

VIII. CONCLUCIONES

Medio acido de lactosa

Lactosa positiva en MacConkey
Coliforme en queso y yogurt
Mala calidad de la materia prima (leche)
Condiciones de almacenamiento inadecuado (queso y yogurt)

22
 Manipulacin indebida

BIBLIOGRAFIA

1) https://es.wikipedia.org/wiki/Microbiolog%C3%ADa_de_los_alimentos
2) https://libroslaboratorio.files.wordpress.com/2012/09/medios-de-cultivo-en-un-
laboratorio-de-microbiologc3ada.pdf

23
 3) http://www.microinmuno.qb.fcen.uba.ar/SeminarioMedios.htm
http://claudiazambrano.wordpress.com/2011/05/25/medios-de-cultivosolido-y-
liquido/
4) http://perso.wanadoo.es/sergioram1/medios_de_cultivo.htm 5
5) http://es.wikipedia.org/wiki/Agar_nutritivo 6
6) http://www.google.es/imgres?hl=es&client=firefoxa&hs=nnD&sa=X&rls=org. 7
7) http://www.google.es/imgres?
hl=es&client=firefoxa&hs=CAt&sa=X&rls=org.mozilla: 8
8) http://www.google.es/imgres?
hl=es&client=firefoxa&hs=7qD&sa=X&rls=org.mozilla:esES:official&biw=1138
&bih=520&tbm=isch&prmd=imvnsb&tbnid=aq5lz
Up4PTZ5LM:&imgrefurl=http://microblog.me.uk/268&imgur. 9
9) http://www.britanialab.com.ar/esp/produ

ANEXOS

PREPRACION DEL AGAR

1. Suspender los ingredientes en el agua destilada.

24
 2. Calentar agitando frecuentemente y dejar hervir hasta disolver
completamente.

3. Esterilizar en autoclave a 121C (15 lb de

presin) durante 15 minutos.

25
4. Se debe evitar el sobrecalentamiento.

5. Enfriar entre 45C y 50C, colocar 20 mL de medio por cada placa y dejar
solidificar.

26
27