Monografia - Karine Da Silva Carvalho PDF

UNIVERSIDADE ESTADUAL DO SUDOESTE DA BAHIA
DEPARTAMENTO DE ESTUDOS BSICOS E INSTRUMENTAIS

COLEGIADO DO CURSO DE CINCIAS BIOLGICAS
AVALIAO DA ATIVIDADE INSETICIDA DE EXTRATOS DE

Croton linearifolius MULL. ARG. (EUPHORBIACEAE) E DO
LEO ESSENCIAL DE Croton tetradenius BAILL.
(EUPHORBIACEAE) SOBRE Aedes aegypti (DIPTERA:
CULICIDAE)
KARINE DA SILVA CARVALHO
ITAPETINGA BA
SETEMBRO, 2013.
2
KARINE DA SILVA CARVALHO
AVALIAO DA ATIVIDADE INSETICIDA DE EXTRATOS DE

Croton linearifolius MULL. ARG. (EUPHORBIACEAE) E DO
LEO ESSENCIAL DE Croton tetradenius BAILL.
(EUPHORBIACEAE) SOBRE Aedes aegypti (DIPTERA:
CULICIDAE)
Monografia apresentada
Universidade Estadual do Sudoeste
da Bahia - UESB/Campus de
Itapetinga, para aprovao na
disciplina Iniciao Pesquisa II do
curso de Bacharelado em Cincias
Biolgicas.
Orientador: Sandra Lcia da Cunha

e Silva
Co-orientador: Simone Andrade
Gualberto
ITAPETINGA BA
SETEMBRO, 2013.
3
632.9 Carvalho, Karine da Silva.

5
C751a Avaliao da atividade inseticida de extratos de Croton
linearifolius Mull. Arg. (Euphorbiaceae) e do leo essencial de
Croton tetradenius Baill. (Euphorbiaceae) sobre Aedes aegypti
(Diptera: Culicidae). / Karine da Silva Carvalho
. - Itapetinga: UESB, 2013.
55f.
Monografia apresentada Universidade Estadual do

Sudoeste da Bahia UESB Campus de Itapetinga para
obteno do ttulo de Bacharel em Cincias Biolgicas. Sob a
orientao da Profa. D. Sc. Sandra Lcia da Cunha e Silva e co-
orientao da Profa. D. Sc. Simone Andrade Gualberto.
1. Extratos de Croton - Inseticidas botnicos - Aedes aegypti.

2. Dengue - Aedes aegypti. 3. Plantas medicinais -
Biodiversidade. I. Universidade Estadual do Sudoeste da Bahia.
Campus de Itapetinga. II. Silva, Sandra Lcia da Cunha. III.
Gualberto, Simone Andrade. IV. Ttulo.
CDD (21): 632.95
Catalogao na fonte:
Adalice Gustavo da Silva CRB/5-535
Bibliotecria UESB Campus de Itapetinga-BA
ndice Sistemtico para Desdobramento por Assunto:
1. Extratos de Croton - Inseticidas botnicos - Aedes

aegypti
2. Dengue - Aedes aegypti
3. Plantas medicinais - Biodiversidade

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UNIVERSIDADE ESTADUAL DO SUDOESTE DA BAHIA UESB

COLEGIADO DO CURSO DE CINCIAS BIOLGICAS
DECLARAO DE APROVAO
Ttulo: Avaliao da atividade inseticida de extratos de Croton linearifolius Mull.

Arg. (Euphorbiaceae) e do leo essencial de Croton tetradenius Baill.
(Euphorbiaceae) sobre Aedes aegypti (Diptera: Culicidae)
Autor: Karine da Silva Carvalho
Aprovada como parte das exigncias para aprovao na disciplina de Iniciao

a Pesquisa II, pela Banca Examinadora:
__________________________________________
Profa. D.Sc. Sandra Lcia da Cunha e Silva UESB
Orientador(a)
__________________________________________
Prof. D.Sc. Simone Andrade Gualberto UESB
Orientador(a)
__________________________________________
Mestranda Gledna Pereira de Oliveira UESB
3 Membro
Data de realizao: 06 de setembro de 2013.

5
Dedico a minha me Ilza da Silva

Lobo Carvalho, pelo amor
incondicional. As minhas irms
Kristiane da Silva Carvalho, Lais da
Silva Carvalho e Laiane da Silva
Carvalho, pelo apoio e carinho.
6
Valeu a pena? Tudo vale a pena

Se a alma no pequena.
Quem quer passar alm do Bojador
Tem que passar alm da dor.
Deus ao mar o perigo e o abismo deu,
Mas nele que espelhou o cu
(Fernando Pessoa)
7
AGRADECIMENTOS
A Deus, pela vida e seu amor infinito. Pela proteo e onipresena, iluminando
o meu caminho e me carregar em seus braos, nos momentos mais difcies.
Aos meus pais, Ilza da Silva Lobo Carvalho e Antnio Carlos de Souza
Carvalho, e minhas irms Kristiane da Silva Carvalho, Lais da Silva Carvalho e
Laiane da Silva Carvalho pelo amor, dedicao, confiana e apoio em prol dos
meus estudos. A vocs serei eternamente grata, por tudo.
A minha av Adelina Joviniana da Silva, pelo amor, conselhos e incentivo. Aos
tios, primos e demais familiares, pela preocupao e carinho.
A Rmulo Carlos Dantas da Cruz, pelo amor, companheirismo, cumplicidade e
pacincia em todos os momentos, compreendendo meus estresses e
limitaes.
A orientadora Prof. Dra. Sandra Lcia da Cunha e Silva, pela orientao,
conversas e amizade. Agradeo-a tambm pelos conselhos. A sua contribuio
estendeu-se alm do papel de orientador, contribuindo no s para minha
formao acadmica, como tambm na minha vida pessoal.
A co-orientadora Prof. Dra. Simone Andrade Gualberto, pela orientao, auxlio
para execuo deste trabalho, amizade e carinho.
A Ivonira Oliveira dos Santos, pela ateno, longas e divertidas conversas, as
quais me proporcionam muita alegria. muito bom saber que sempre posso
contar com voc.
A Quesia Santos Amorim, pela amizade e incontavis momentos de apoio,
descontrao e diverso.
A todos os membros do Laboratrio de Pesquisa de Inseticidas Naturais
(LAPIN) e do Laboratrio de Pesquisa de Produtos Naturais (LAPRON),
especialmente para Gledna Pereira de Oliveira e Thaimara Gomes Costa, pelo
auxlio prestado e a amizade.
As amigas de repblica, pelos momentos de descontrao e carinho.
Aos colegas de sala, pelo convvio dirio nos estudos e amizade
demonstrados.
A Fundao de Amparo Pesquisa do Estado da Bahia (FAPESB) pela
concesso da bolsa de estudo no perodo de agosto de 2010 a julho de 2011.
Ao Conselho Nacional de Desenvolvimento Cientfico e Tecnolgico (CNPq)
pela concesso da bolsa de estudo no perodo de agosto de 2011 a julho de
2012.
Universidade Estadual do Sudoeste da Bahia, pela concesso da bolsa de
estudo no perodo de agosto de 2012 a julho de 2013, bem como a realizao
deste trabalho.
Meus sinceros agradecimentos.
8
RESUMO
Carvalho, K. S. Avaliao da atividade inseticida de extratos de Croton

linearifolius Mull. Arg. (Euphorbiaceae) e do leo essencial de Croton
tetradenius Baill. (Euphorbiaceae) sobre Aedes aegypti (Diptera:
Culicidae). 2013. 55 f. Monografia (Graduao em Cincias Biolgicas),
Universidade Estadual do Sudoeste da Bahia-UESB, Itapetinga/Ba, 2013.
As plantas produzem uma diversidade de constituintes qumicos, o que permite

o seu uso na produo de frmacos e/ou inseticidas, sendo uma alternativa
para o controle de insetos, como o Aedes aegypti, visto ser esse o principal
vetor do dengue. Espcies vegetais, a exemplo do gnero Croton so
promissoras, por possurem diferentes classes de metablitos secundrios.
Sendo assim, o objetivo desse estudo foi avaliar a propriedade inseticida de
extratos e leo essencial obtidos de Croton linearifolius e Croton tetradenius,
respectivamente, sobre Aedes aegypti. Como metodologia, inicialmente o
extrato etanlico foi obtido dos caules de C. linearifolius e, o leo essencial foi
extrado das folhas de C. tetradenius, atravs do processo de hidrodestilao, e
posteriormente, realizaram-se os bioensaios com larvas de terceiro nstar e
ovos do Aedes aegypti, respectivamente. A partir do fracionamento do extrato
etanlico, foram obtidos as fraes hexnica, diclorometnica, acetato de etila,
e hidrolcoolica, as quais subsequentemente tambm foram submetidos
avaliao larvicida. Em seguida, realizou-se a prospeco fitoqumica do
extrato etanlico dos caules de C. linearifolius. A frao diclorometnica de C.
linearifolius demonstrou uma maior atividade larvicida, obtendo-se, aps 24
horas de observao, o percentual de mortalidade das larvas significativamente
maior na concentrao de 13,3 mg/mL, quando comparada as demais
concentraes e ao grupo controle, apresentando CL50 de 1,135 mg/mL. Em
relao ao ensaio ovicida preliminar, do leo essencial de C. tetradenius, o
percentual de ecloso das larvas, aps o 6 dia de observao, na
concentrao de 60 mg/mL (92%), no diferiu significativamente do grupo
controle (96%), o que indicou uma alta concentrao a ser usada na avaliao
ovicida, tornando esta invivel. A prospeco fitoqumica, do extrato etanlico
do caule de C. linearifolius permitiu propor a presena de cidos fixos fortes,
alcalides, catequinas, esterides livres, flavononas, flavonis, resinas, taninos
condensados e xantonas. Diante disso, percebe-se a potencialidade como
larvicida, do caule de C. linearifolius, bem como a necessidade de dar
continuidade aos estudos, visando identificao do(s) metablito(s)
responsvel(is) pela ao inseticida. Entretanto, o leo essencial, obtido a partir
das folhas de C. tetradenius no apresentou atividade ovicida sobre Aedes
aegypti.
Palavras-chave: Biodiversidade, Inseticidas botnicos, Plantas medicinais.

y
9
ABSTRACT
The plants produce a variety of chemical constituents, which allows its use in
the production of drugs and / or insecticides, being an alternative for the control
of insects such as Aedes aegypti, seen to be the main vector of dengue. Plant
species, such as the genus Croton are promising, because they have different
classes of secondary metabolites. Thus, the aim of this study was to evaluate
the insecticidal properties of extracts and essential oil obtained from Croton
linearifolius and Croton tetradenius respectively on Aedes aegypti. As
methodology, initially the ethanol extract was obtained from the stems of C.
linearifolius, and essential oil was extracted from the leaves of C. tetradenius,
through the process of steam distillation, and subsequently, bioassays were
performed with third instar larvae and eggs of Aedes aegypti, respectively. The
fractionation of the ethanol extract, hexane fractions were obtained,
dichlorometanic , ethyl acetate , and water-alcohol , which subsequently also
underwent evaluation larvicide. Then there was the phytochemical screening of
ethanol extract of the stems of C. linearifolius. The fraction of dichlorometanic
C. linearifolius demonstrated greater larvicidal activity, obtaining, after 24 hours
of observation, the mortality of larvae significantly higher concentration of 13.3
mg/mL, compared to other concentrations and the control group, with LC50 of
1.135 mg/ml. For the test ovicidal primary , essential oil of C. tetradenius, the
percentage of larvae hatching after the 6th day of observation at a
concentration of 60 mg/mL (92%) did not differ significantly from the control
group (96%), which indicated a high concentration to be used in assessment
ovicidal , making this impractical. The phytochemical screening of ethanol
extract of the stem of C. linearifolius us to propose the presence of strong fixed
acids, alkaloids, catechins, steroid free, flavanones, flavonols, resins, tannins
and xanthones. Thus, we see the potential as larvicide, the stem of C.
linearifolius as well as the need to continue the studies for the identification (s)
metabolite (s) responsible (s) for the insecticide action. However, the essential
oil obtained from the leaves of C. tetradenius showed no ovicidal activity on
Aedes aegypti.
Keywords: Biodiversity , botanical insecticides , medicinal plants .

10
LISTA DE FIGURAS
Figura 1. Ciclo de vida do Aedes aegypti, a: Ovos, b: larvas, c: pupas

e d: adulto............................................................................... 16
Figura 2. Croton linearifolius.................................................................. 25
Figura 3. Croton tetradenius................................................................... 26
Figura 4. Caules de Croton linearifolius................................................. 28
Figura 5. Folhas de Croton tetradenius.................................................. 28
Figura 6. Evaporador rotatrio utilizado para eliminao dos solventes 29
Figura 7. Fluxograma do processo empregado para avaliao da

atividade larvicida do extrato etanlico dos caules de Croton
linearifolius, bem como do seu fracionamento........................ 30
Figura 8. Aparelho tipo Clevenger modificado, utilizado para

hidrodestilao do leo essencial de C.
tetradenius.............................................................................. 31
Figura 9. Repasto sanguneo das fmeas de Aedes

aegypti................................................................................... 32
Figura 10. Avaliao da atividade ovicida preliminar do leo essencial

de Croton tetradenius sobre Aedes aegypti............................ 33
Figura 11. Avaliao da atividade larvicida dos extratos de Croton

linearifolius sobre Aedes aegypti............................................ 34
11
LISTA DE TABELAS
Tabela 1. Percentual de ecloso das larvas de Aedes aegypti, cujos

ovos foram submetidos a diferentes concentraes do leo
essencial, obtido das folhas de Croton tetradenius.................. 37
Tabela 2. Percentual de mortalidade de larvas de terceiro nstar de

Aedes aegypti, em relao ao tempo de exposio s
diferentes concentraes do extrato etanlico dos caules de
Croton linearifolius.................................................................. 38

diferentes concentraes da frao diclorometnica obtida a
partir do fracionamento do extrato etanlico dos caules de

diferentes concentraes da frao hexnica obtida a partir
do fracionamento do extrato etanlico dos caules de Croton
linearifolius.............................................................................. 40

diferentes concentraes da frao hidroalcolica obtida a

diferentes concentraes da frao acetato de etila obtida a
Tabela 7. Concentrao Letal 50 do extrato etanlico dos caules de

Croton linearifolius, bem como das fraes obtidas do
mesmo, sobre larvas de terceiro instar de Aedes aegypti,
com 24 horas de observao.................................................. 43
Tabela 8. Prospeco fitoqumica do extrato etanlico obtido dos

caules de Croton linearifolius.................................................. 44
12
SUMRIO
1. INTRODUO.................................................................................... 13
2. REVISO DE LITERATURA............................................................... 15
2.1 Aedes aegypti, Linnaeus 1762, (Diptera, Culicidae)...................... 15
2.1.1 Morfologia geral e taxonomia.................................................. 15
2.1.2 Ciclo de vida e transmisso.................................................... 16
2.1.3 Distribuio geogrfica e ocorrncia....................................... 19
2.1.4 Importncia sanitria............................................................... 19
2.2 Gnero Croton............................................................................... 21
2.2.1 Croton linearifolius Mull. Arg. ................................................. 24
2.2.2 Croton tetradenius Baill. ......................................................... 25
3. MATERIAIS E MTODOS.................................................................. 28
3.1 Plantas............................................................................................ 28
3.1.1 Procedncia............................................................................. 28
3.1.2 Processamento do material vegetal......................................... 28
3.1.3 Preparao dos extratos.......................................................... 29
3.1.4 Extrao do leo essencial...................................................... 30
3.2 Ensaio biolgico............................................................................ 31
3.2.1 Estabelecimento e manuteno da colnia............................. 31
3.2.2 Avaliao da atividade inseticida - Teste preliminar................ 32
3.2.3 Ensaio da atividade larvicida................................................... 34
3.3 Prospeco fitoqumica.................................................................. 35
4. RESULTADOS E DISCUSSO.......................................................... 36
5. CONCLUSES................................................................................... 49
6. REFERNCIA BIBLIOGRFICA........................................................ 50
y
13
1 INTRODUO y
As plantas so indispensveis vida na terra. Elas transformam gs

carbnico em oxignio, so produtoras de molculas orgnicas, convertem
energia luminosa em qumica e habilmente podem ser usadas no combate aos
males que afligem aos humanos.
A seleo de espcies vegetais para o tratamento das molstias
realizada desde a antiguidade. Em tempos remotos, poderes sobrenaturais
foram atribudos aos primitivos que detinham esse conhecimento, os quais
ganharam ttulos de mgicos curandeiros ou feiticeiros. No obstante, alguns
cientistas desmistificaram a existncia desses Deuses, sobretudo quando
Hipcrates (460-377), mdico grego, descreveu inmeros medicamentos
incluindo o uso de vegetais para a cura de enfermidades (MIGUEL; MIGUEL,
1999).
Assim, o homem estabelece uma estreita relao com as plantas,
fazendo uso dos benefcios proporcionados pelas mesmas. Todavia, alm das
plantas benvolas, foram descobertas as nocivas, capazes de matar e produzir
alucinaes (MIGUEL et al., 2002; DEVIENNE et al., 2004).
A partir dos resultados empiricamente desvendados, sobre o uso de
plantas medicinais, a Cincia, com intuito de conhecer e aprimorar cada vez
mais a sua utilizao, teve como base a constatao do perfil de vegetais,
identificao dos princpios ativos e a determinao da ao farmacolgica e
distino das propriedades txicas. As descobertas de substncias ativas nos
vegetais se devem ao avano tecnolgico, tanto para o isolamento e
elucidao estrutural, alm do rpido desenvolvimento na rea de
biotecnologia, bem como a utilizao dos bioensaios (SIMES et al., 2001).
No Brasil, o conhecimento das plantas medicinais baseou-se nas
diferentes culturas: indgena, africana e europia. Os ndios que aqui viviam
desfrutavam diretamente da natureza, ampliando cada vez mais o uso de
vegetais no tratamento de enfermidades e, portanto as eficcias foram
transmitidas s geraes posteriores por intermdio dos pajs. Os escravos
africanos traziam consigo as plantas da frica, as quais eram utilizadas em
rituais religiosos e, tambm, para o alvio de suas injrias. Os europeus,
14
sobretudo os portugueses, assim que chegaram ao Brasil, tiveram a

necessidade de aproveitar os remdios indgenas, ora, para o suprimento da
ausncia de medicamentos na Europa, ora pela abundncia e diversidade
encontrada no Novo mundo, iniciando assim uma vasta explorao da flora
medicinal brasileira (MARTINS et al., 2000; VEIGA JUNIOR; PINTO, 2002;).
Diante desse conhecimento sobre as plantas medicinais, estas se
mostram eficientes no controle de pragas, que desde muito tempo vem sendo
uma grande preocupao da humanidade, fomentando assim a produo dos
inseticidas botnicos. Vale destacar que o Brasil possui a maior biodiversidade
vegetal do mundo, o que estimula cada vez mais o desenvolvimento de
pesquisas relacionadas a estes inseticidas naturais (BARRETO, 2005;
CASTRO et al., 2006).
De acordo com esse cenrio, a descoberta de inseticidas que atuem no
controle de mosquitos, como o Aedes aegypti, torna-se essencial, visto ser uma
espcie de grande relevncia epidemiolgica, o principal vetor do vrus da
dengue e tambm do vrus amarlico.
Atualmente, atravs do uso abusivo dos inseticidas convencionais, estes
vm selecionando populaes resistentes, alm de representarem prejuzos
sade de outros seres. Desse modo, o desenvolvimento de inseticidas naturais
extremamente importante, sendo estes biodegradveis, de baixo impacto
ambiental e menor custo econmico, quando comparados aos inseticidas
tradicionais (BRAGA; VALLE, 2007; VIEGAS JUNIOR, 2003).
Dentre os inmeros vegetais destacam-se os do gnero Croton,
pertencente famlia Euphorbiaceae, o qual possui elevada diversidade de
espcies, alm de algumas destas apresentarem propriedades farmacolgicas,
como, antibacteriana, antifngica e, at mesmo, pesticida podendo ser,
portanto, promissoras no que diz respeito ao potencial inseticida (RANDAU et
al., 2004).
Neste sentido, o objetivo desse estudo foi avaliar a propriedade larvicida
de extratos obtidos dos caules de Croton linearifolius, e ovicida do leo
essencial obtido das folhas de Croton tetradenius, sobre Aedes aegypti.
15
2 REVISO DE LITERATURA
2.1 Aedes aegypti (Linnaeus, 1762) (Diptera: Culicidae).
O Aedes aegypti considerado o principal transmissor do vrus da

dengue e tambm do vrus amarlico. Atualmente, esta espcie apresenta uma
ampla disperso e adaptao ao ambiente urbano, bem como hbito diurno e
antropoflico, o que favorece cada vez mais a sua proliferao neste meio
(SILVA et al., 2004).
A crescente urbanizao ocasionada pela grande densidade
populacional e xodo rural, tem influenciado diretamente o crescimento de
favelas e periferias nas metrpoles. Estas periferias, na maioria das vezes, so
desprovidas de saneamento bsico, ocorrendo emisso incorreta de lixos, e m
distribuio de gua, e, por conseguinte, favorecendo os criadouros
preferenciais de Aedes aegypti.
Alm disso, a constante produo de automveis podem favorecer a
disseminao desse vetor, atravs do destino inadequado de pneus usados, o
que ocasiona grandes criadouros, pois as fmeas tm preferncia em
ovipositar locais escuros e na presena de gua parada, resultante do acmulo
provenientes das chuvas (TAUIL, 2001; REITER, 2007).
2.1.1 Morfologia geral e taxonomia
O Aedes aegypti possui menos de um centmetro de comprimento e

apresenta colorao escura, com manchas brancas pelo corpo. O corpo destes
visivelmente dividido em cabea, trax e abdome. Onde na cabea
encontram-se os rgos do sentido, palpos e antenas. No trax esto
presentes os apndices, asas e patas. E, finalmente no abdome os rgos
internos do aparelho reprodutor, excretor e digestivo (CONSOLI; OLIVEIRA,
1994).
O Aedes aegypti, pertence ao filo Arthropoda, classe Hexapoda , ordem
Diptera, com um par de asas anterior funcional e um par posterior transformado
em halteres, famlia Culicidae, gnero Aedes e tribo Aedini.
16
2.1.2 Ciclo de vida e transmisso
O Aedes aegypti, holometablico, ou seja, possui metamorfose

completa, distinguindo em quatro fases: ovo, larva, pupa e adulto (Figura 1).
Sendo que as fases de larva e pupa se desenvolvem em meio aqutico.
Figura 1. Ciclo de vida do Aedes aegypti, a: Ovos, b: larvas, c: pupas e d:

adulto.
Foto: Carvalho, K. S. (2013).
As fmeas fixam-se seus ovos em paredes midas, mais precisamente

na superfcie lquida. Para tanto, elas necessitam do repasto sanguneo,
preferencialmente do sangue humano, enfatizando seu carter antropoflico. O
comprimento dos ovos de 1 mm, no momento da oviposio apresentam uma
cor branca e, posteriormente adquirem colorao negra brilhante (FORATTINI,
1965). A fecundao se d durante a postura e o desenvolvimento do embrio
se completa em 48 a 72 horas, desde que haja favorveis condies climticas.
Uma vez completado o desenvolvimento embrionrio, os ovos so
competentes de resistir a longos perodos de dessecao, que podem
prolongar-se por mais de um ano. A capacidade de resistncia dos ovos de
Aedes aegypti dessecao o principal fator para a sua disperso atravs de
ventos, e tambm serem transportados a longas distncias, o que contribui
para a sua difcil erradicao (FUNASA, 2001).
17
As larvas so morfologicamente vermiformes, alongadas, de vida

aqutica e compreendem o perodo de alimentao. O corpo dividido em
cabea, trax e abdmen. Sendo que, os dois primeiros tagmas so mais
globosos e o ltimo tem formato cilndrico e dividido em oito segmentos. O
corpo destas composto de inmeras cerdas que tem a funo sensorial e
permitem a flutuao. O segmento posterior e anal do abdmen tem quatro
brnquias lobuladas para regulao osmtica e um sifo ou tubo de ar para a
respirao na superfcie da gua. Para respirar, a larva vem superfcie, onde
fica em posio quase vertical. Movimenta-se em forma de serpente, fazendo
um S em seu deslocamento (CONSOLI; OLIVEIRA, 1994).
A durao da fase larvria tambm dependente das condies
climticas, densidade das larvas no criadouro e disponibilidade de alimentos.
Em boas condies o perodo entre a ecloso e a pupao no chega h
exceder cinco dias. Representam nessa fase 4 estgios ou instares (L1-4). O
primeiro instar (L1) rompe o ovo atravs de um dente quitinoso, existente
somente nessa fase. A larva no quarto instar (L4), estando na sua fase final de
desenvolvimento, cessa a alimentao em virtude da sua metamorfose ao
prximo estgio de vida, a pupa. (CONSOLI; OLIVEIRA, 1994; FUNASA,
2001).
Para a mudana de fase, a larva se prepara de modo a se afastar das
outras, e depois comea a contrao do seu corpo aproximando a cabea em
direo ao final do abdome medida que libera um exoesqueleto, at tornar-se
pupa e obter o formato de vrgula. Nessa fase elas no se alimentam, obtendo
a energia da fase larvria.
A pupa o estgio de vida que representa a transio do perodo
aqutico para o terrestre. Apresenta o corpo dividido em cefalotrax e
abdmen. Possuem um par de tubos respiratrio que cortam a superfcie
aqutica permitindo assim, a respirao e tambm tem preferncia em ficar nas
laterais do recipiente, e mais tempo na superfcie aqutica do que a fase
anterior. Aps dois ou trs dias emerge o adulto (REY, 1991).
Aps a emergncia do mosquito, este necessita de um extenso perodo
que permita o endurecimento do exoesqueleto e as asas e no caso dos
machos, a rotao da genitlia em 180 (DGALLIER, 1996).
18
Aps 24 horas pode voar e acasalar, o acasalamento acontece

geralmente durante o vo, mas tambm pode ser em superfcies horizontais ou
verticais. O adulto atinge um tamanho de cinco milmetros, apresentando cor
amarronzada com anis brancos nas pernas e escamas branco-prateadas no
corpo. O macho se diferencia da fmea por possuir antenas plumosas e palpos
mais longos, alm de apresentar um tamanho menor, quando comparado
fmea (FUNASA, 2001).
Ambos, machos e fmeas se alimentam das seivas das plantas,
carboidratos extrados destas, como fonte de nutriente. Contudo, as fmeas
necessitam de protenas presentes no sangue, para a deposio dos ovos,
sendo que, algumas vezes o repasto sanguneo torna-se suficiente para a
obteno de energia das fmeas (CLEMENTS, 2000).
O modo de transmisso mais comum da dengue atravs do mosquito
Aedes aegypti, podendo ser transmitida tambm por Aedes albopictus, cujo
agente etiolgico o vrus da famlia Flaviridae, com quatro sorotipos
antigenicamente distintos, DEN-1, DEN-2, DEN-3 e DEN-4. A transmisso se
caracteriza pela picada da fmea infectada, a partir de um repasto sanguneo
com quantidades suficientes de partculas virais. Desse modo, o vrus no
interior do vetor enfrenta obstculos, para sua sobrevivncia, como ter que
obrigatoriamente, atravessar o lmen do intestino mdio. Assim, vencendo
esse obstculo o vrus multiplica-se e migra para outros rgos. Finalmente,
afeta as glndulas salivares e, ento, transmitido mediante novos repastos
sanguneos (BARRETO, 2008; BOSIO et al., 2000).
Nas ltimas dcadas, acreditava-se que o vrus da dengue no causava
alterao no modo de vida do mosquito. Todavia, pesquisas recentes
demonstraram que a fmea uma vez infectada, com o sorotipo DEN-2,
apresenta modificaes na sua atividade locomotora, passando esta a ser mais
veloz, variando de 10% a 50% em relao a sua movimentao normal. Sendo
assim, a infeco pelo vrus afeta bastante o sistema nervoso de Aedes
aegypti, pois esse sistema, em dpteros, est diretamente relacionado
atividade de locomoo (LIMA-CAMARA et al., 2011).
Como esclarece Natal (2002), a fmea ao picar uma pessoa possui
muita agilidade, uma vez perturbada, cessa a sua alimentao e instantes
depois retorna ao mesmo ou outro indivduo de modo a concluir o seu repasto.
19
Vale salientar que no h transferncia de uma pessoa infectada para

outra sadia por contato direto, ou pela ingesto de gua e/ou mesmo alimento
(BRASIL, 2006).
2.1.3 Distribuio geogrfica e ocorrncia
O Aedes aegypti originrio da frica, e difundiu-se para sia e

continente americano, este ltimo, por intermdio das embarcaes que
aportaram no Brasil para o trfico de escravos. Originalmente na frica vivia
em tocos das rvores e escavaes das rochas. Ainda nesse ambiente
primrio desenvolveu elevado grau de sinantropia, o que resultou na sua
marcante caracterstica, a antropofilia, passando, ento, a realizar uma
migrao permanente com o homem, vivendo em reas urbanas onde as
alteraes realizadas pelo mesmo sustentaram a sua proliferao (PENNA,
2003; BRAGA; VALLE, 2007).
O Aedes aegypti encontrado nas faixa tropical e subtropical da terra,
limitada pela temperatura de 10C, na altitude aproximada de 1000 metros. A
sua ocorrncia registrada em todos os pases da Amrica, exceto Canad.
No Brasil, esta espcie localizada em todo territrio (FUNASA, 2001). Esse
sucesso adaptativo em diversos ambientes deve-se ao filo Arthropoda, ao qual
o Aedes aegypti pertence, uma vez que, o Brasil oferece um clima bastante
variado e, predominantemente tropical, que por sua vez favorece a
disseminao desse vetor.
2.1.4 Importncia sanitria e mtodos de controle
O Aedes aegypti de importncia sanitria por, principalmente,

transmitir o vrus causador da dengue. Alm do mais, ele pode aumentar a sua
densidade em determinadas regies e pocas. Como asseguram Braga e Valle
(2007), quanto maior a presena e densidade desse vetor maior a ocorrncia
de epidemia da dengue.
Em sua trajetria evolutiva o Aedes aegypti ampliou o seu
comportamento sinantrpico, destacando entre os culicdeos a espcie que
mais est associada ao homem. Esse comportamento verificado quando
20
espcies que possuem hbito diurno apresentam colorao viva, brilhante,

enquanto o Aedes aegypti, mesmo tendo hbito diurno, contm uma cor
discreta, escura com manchas brancas, essa colorao permite a hematofagia
humana, fator que impede o homem de v-lo e ento elimin-lo (NATAL, 2002).
visto tambm como forma de grande associao humana, que o
Aedes aegypti deposita seus ovos em artefatos que acumulam gua, como
latas, vidros, cacos de garrafa, pratos de vasos de plantas e vasos de
cemitrio, uma vez que as outras espcies de culicdeos realizam a oviposio
em ambientes naturais como hastes de vegetais ou mesmo beira dos rios
(REITER, 2007).
O aperfeioamento das condies sanitrias, atravs da abolio dos
locais de criao, seria o mtodo de controle ideal do principal vetor do dengue.
Todavia, essa eliminao no dever apenas da sade pblica, e sim de toda
a sociedade e autoridades. Polticas urbansticas devem se preocupar quanto
eliminao de criadouros nas grandes edificaes com seus entulhos e
recipientes e, tambm, a drenagem de lages. Destino adequado para os pneus,
estes que fomentam os pequenos criadouros, juntamente com ralos de pias e
vasos de plantas, e, principalmente, a preocupao com poas em lages de
empresas, que resultam em macro criadouros. Para tanto, vale salientar a
indispensvel investigao sobre a ecologia do vetor, sendo este o pilar central
da vigilncia entomolgica, a qual resultar em mais informaes do Aedes
aegypti e, conseqentemente, melhor desenvolvimento de estratgias para o
controle desse vetor (DONALSIO; GLASSER, 2002; PENNA, 2003).
Mtodos de controle de insetos desde h muito que vem sendo
amplamente utilizados j que ainda no existem vacinas e medicamentos
efetivos relacionados dengue. possvel distinguir trs modos de controle, o
fsico, o biolgico e o qumico, sendo este ltimo o atualmente mais usado
(PIZARRO et al., 1999).
O controle fsico est relacionado implementao de fatores fsicos
como elevar a temperatura da gua a 45C ou a insero de uma pelcula
monomolecular sobre a gua, o que seria fatal para a fase larvria de Aedes
aegypti (BRAGA; VALLE, 2007).
O controle biolgico faz uso da predao, parasitismo, competio e de
agentes patgenos a esse vetor. Os predadores so peixes larvfagos, que
21
so adquiridos facilmente e recomendados, sobretudo, em fontes ornamentais,

e piscinas abandonadas. A bactria Bacillus thuringiensis, variedade israelense
(Bti) tambm largamente utilizada por liberar uma toxina nociva s larvas de
Aedes aegypti, como tambm a inmeras larvas de culicneos. Em Nova York,
as autoridades recomendam usar essa bactria na gua, uma vez que ela no
representa perigo sade humana, com o intuito de controlar o mosquito
transmissor da encefalite. Entretanto, o controle biolgico encontra empecilhos
no seu uso em grande escala, devido ao alto custo e baixo efeito residual
(FUNASA, 2001; PENNA, 2003).
O controle qumico constitui-se do uso de larvicida, principalmente o
termefs. Para o controle qumico de adulticidas pode ser utilizado a borrifao
de inseticida residual ou a aplicao espacial de inseticida a ultra baixo volume
(UBV). Entretanto o uso extensivo desses inseticidas resulta no efeito seletivo
de exposio dosagem com a seleo de cepas resistentes, sendo essa
caracterstica gentica, que pode ser herdada at a dcima gerao dos
mesmos (PENNA, 2003; ACIOLE, 2009).
Diante desses obstculos em relao aos diferentes tipos de controle,
faz-se necessrio uma vasta explorao e busca por inseticidas naturais,
base de extratos vegetais, e ento, a partir deles extrair metablitos
secundrios que, garantam o seu alto e confivel potencial inseticida.
2.2 Gnero Croton
Croton o segundo maior gnero da famlia Euphorbiaceae que

contm mais de 1200 espcies distribudas predominantemente em regies
tropicais. O Brasil possui aproximadamente 400 espcies, sendo um dos
principais centros de diversidade desse gnero, alojados nos mais diversos
ambientes, sobretudo no cerrado, caatinga e campos rupestres (BERRY et al.,
2005).
Mediante a sua exacerbada diversidade, Croton considerado o gnero
problema, detentor de inmeras espcies, o que resulta no difcil
estabelecimento de sua classificao taxonmica. Alm da diversidade, h
grande proliferao de nomes e dificuldades em acessar diversos herbrios do
mundo (LIMA; PIRANI, 2008).
22
Em um estudo realizado por Berry et al. (2005), h uma comprovao de

que Croton no seria um grupo monofiltico, como antes defendido por
Webster em 1993. Esse estudo realizou-se atravs de dados moleculares das
regies ITS, do DNA ribossmico e trnL-F, do DNA plastidial. Segundo Berry et
al. (2005), Croton s seria monofiltico, desde que haja a incluso de
Moacroton croizat e a excluso de Croton seo Astrea (Klotzsch) Baill, que
restabeleceria o gnero Astrea Klotzsch. Portanto, evidente quo imenso o
gnero Croton e detentor de elevada diversidade morfolgica.
Croton representa grande importncia ecolgica, atuando na
recuperao das matas ciliares, clareiras nas matas, colonizao de beiras de
estradas e restaurao de florestas degradadas. Toda essa importncia deve-
se a produo massiva de flores e frutos durante a maior parte do ano,
sobretudo na restaurao de reas degradadas (LIMA; PIRANI, 2008). Alm
disso, a madeira de vrias espcies utilizada como matria-prima na
construo civil e, tambm, no fornecimento de lenhas (SMITH, 2002).
Vrias espcies de Croton produzem leos essenciais e constituintes
ativos como terpenodes, flavonides, alcalides, antocianinas, taninos, cidos
fixos fortes, dentre outros. A partir desses metablitos secundrios, o gnero
Croton detm elevada importncia econmica, no que diz respeito sua
utilizao pela indstria farmacutica. Vrias espcies possuem propriedades
teraputicas comprovadas (SOUZA et al., 2006; PALMEIRA JUNIOR et al.,
2006; PERAZZO et al., 2007; TORRICO et al., 2007; COSTA et al., 2008).
Croton zehntneri uma planta utilizada na medicina popular como
sedativo e estimulante de apetite, a qual conhecida popularmente como
canela-brava, canelinha ou canela de cunh. Em um estudo realizado com
o leo essencial obtido de suas folhas, verificou-se a atividade antibacteriana
frente as bactrias Shigella flexneri, Escherichia coli, Sthaphylococcus aureus e
Streptococus haemolyticus. Neste mesmo estudo, tambm foi constatado a
presena de metablitos sesquiterpenides e monoterpenides, tendo sido
marjoritria a presena de estragol, no leo essencial das folhas de C.
zehntneri (COSTA et al., 2008).
O Croton cajucara, conhecido vulgarmente por sacaca, utilizado na
medicina popular contra as diversas doenas como diabete, diarria, dores
estomacais e problemas de rins. A partir de seu leo fixo, obtido da casca do
23
caule, obtido mediante a percolao e, seguido de cromatografia, foi analisada

a propriedade fungicida sobre os fungos fitopatognicos Fusarium oxysporum,
Rhizoctonia solani e Sclerotium rolfsii. Nesse leo fixo foram encontrados
sesquiterpenos, e minoritariamente a presena de linalol (SOUZA et al., 2006).
Por meio da prospeco fitoqumica, realizada com a espcie Croton
sellowii pde-se detectar a presena de fitoesterides, triterpenos, flavonides
e fenilpropanides. Vale salientar que esses metablitos secundrios so os
principais encontrados no gnero Croton (PALMEIRA JNIOR et al., 2006).
Perazzo et al. (2007), a partir da casca do caule de Croton cajucara,
obtiveram distintas classes de diterpenos, a exemplo do CTN, DCTN e AAA,
por meio da avaliao fitoqumica. Posteriormente, comprovaram a eficincia
desses trs diterpenos, CTN e AAA em conjunto com DCTN, como
antinociceptivo e anti-inflamatrio. Vale ressaltar que algumas substncias anti-
inflamatrias vem acompanhadas de dores gstricas. Entretanto, os
diterpenos CTN e DCTN, alm das atividades anti-inflamatria e
antinociceptivos apresentam como vantagem o efeito de no causar nenhum
dano gstrico e tambm ser antiulcerognica.
A partir do extrato aquoso da casca do caule Croton cuneatus, foi
verificada a atividade antidiabtica em modelos com animais hiperglicmicos,
sendo esses animais ratos que adquiriram diabete por estreptozocina. A
administrao crnica do extrato ocorreu durante 22 dias, que resultou na
reduo dos nveis de glicose sangunea. Alm do mais, realizou-se uma
comparao entre o extrato e a droga de referncia glibenclamida, cujo
resultado do extrato diante da droga foi equivalente, o que comprovou mais
uma vez o seu efeito anti-hiperglicmico (TORRICO et al., 2007).
O gnero Croton, alm de possuir excelentes propriedades teraputicas
tambm detentor de caractersticas inseticidas. Como elucida Yang e Tangs
(1988) citado por Silva (2007), h intensa relao entre plantas medicinais e
plantas com propriedades inseticidas. Assim, a escolha de espcies com
conhecimento prvio de seu uso na medicina popular, auxilia na busca por
espcies que possuam componentes bioativos com propriedades inseticidas.
O Croton cajucara, tambm apresenta propriedades inseticidas sobre
formigas da espcie Cylas furmicarius, alm de seu uso na medicina popular
24
contra diversas doenas, tais como febre, inflamaes do fgado dentre outras
(VIEGAS Junior, 2003; SOUZA et al., 2006).
Croton argyrophylloides, Croton nepetaefolius, Croton sonderianus e
Croton zehntneri so exemplos de Croton, detentores de atividade larvicida.
Atravs de solues aquosas do leo essencial (hidrolatos) de seus caules e
folhas, usadas sobre as larvas do terceiro nstar de Aedes aegypti. E como
compostos bioativos foram detectados sesquiterpenos, monoterpenos e
fenilpropanodes, tendo esse ltimo maior potencial larvicida, devido a sua
maior afinidade com a gua (LIMA et al., 2006).
Contudo, ainda so encontrados poucos estudos e pesquisas
relacionadas a atividade inseticida do gnero Croton, sobretudo sobre o Aedes
aegypti, uma vez que este apresenta uma acentuada importncia sanitria.
2.2.1 Croton linearifolius Mull. Arg.
uma espcie de ampla distribuio no Brasil, conhecida popularmente

como velame pimenta, devido ao seu aroma caracterstico, similar ao da
pimenta (Figura 2). encontrada geralmente no bioma Caatinga, embora na
regio Sul do pas, nos estados Santa Catarina e Paran tambm ocorram em
locais com baixa drenagem, como reas prximas a brejo e em bordas de
matas degradadas a 750 metros de altitudes (LIMA; PIRANI, 2008).
Segundo Lima e Pirani (2008) Croton linearifolius Mull. Arg. um arbusto
com 0,5-2,0 m de altura, monico, apresentando caule lepidoto e folhas
discolores. Floresce nos meses de janeiro, fevereiro, abril, outubro e novembro,
e frutifica somente no ms de abril. Alm disso, essa espcie possui hbito
muito semelhante Croton burchellii, diferenciando somente pela face adaxial
de suas folhas serem completamente glabra.
25
Figura 2. Croton linearifolius.
Conforme Brito et al. (2011), essa espcie possui excelente adaptao a

deficincia hdrica, devido a sua anatomia foliar, consistindo de tricomas
tectores estrelados-rotados com interconexo entre as faces da folha atravs
de escleredes, bem como as drusas. Silva et al. (2010), demonstraram a
atividade inseticida do extrato etanlico do caule de Croton linearifolius frente a
Cochliomyia macellaria, na fase adulta, obtendo o conhecimento dessa espcie
e seu respectivo uso por meio do levantamento etnobotnico. Todavia, os
dados sobre Croton linearifolius na literatura so raros, sendo indispensveis
pesquisas para se conhecer suas caractersticas.
2.2.1 Croton tetradenius Baill.
Essa espcie endmica da regio Nordeste do Brasil, ocorrendo nos

estados de Alagoas, Bahia, Cear, Paraba, Pernambuco, Rio Grande do Norte
e Sergipe (CARNEIROTORRES, 2009), popularmente conhecida como
velame do campo (Figura 3). encontrada, frequentemente na vegetao de
caatinga e florestas pereniflias sobre o solo arenoso ou pedregoso, embora
26
tambm ocorra com pouca frequncia, em capoeiras, brejos de altitudes (PE) e

reas antropizadas (SILVA et al., 2009).
Figura 3. Croton tetradenius.
Segundo Silva et al. (2009) , Croton tetradenius Baill. um arbusto de 1-

1,2 m, monico, aromtico e detentor de ltex translcido. Flores foram
observadas nos meses de fevereiro, maro, maio e setembro e frutos em
fevereiro e maio. As folhas so predominantemente alternas, s vezes opostas,
pecioladas com quatro a seis nectrios cilndricos, sendo esta ltima
caracterstica, essencial para o seu reconhecimento. Alm disso, estes
nectrios situam-se na superfcie superior do pecolo, permitindo a reduo de
perda de nctar por volatilizao, propiciando maior disponibilidade para as
formigas mutualistas, ocorrncia descrita por Paiva e Machado (2006) em
indivduos de Hymenaea stigonocarpa Mart. ex Hayne. Nessa espcie, os
nectrios florais ocorrem na face abaxial das folhas conferindo proteo ao
nctar, principalmente ao excesso de vento e a radiao ultravioleta.
Santana (2011), identificou no leo essencial, obtido a partir das folhas
de Croton tetradenius, a presena de terpenides, monoterpnicos e
sesquiterpnicos, tendo como componentes majoritrios os monoterpenos.
27
Para Viegas Junior (2003), os terpenides atuam como importantes metablitos

envolvidos na defesa das plantas, o que pode resultar, nesse sentido, a um
possvel potencial inseticida para a espcie Croton tetradenius.
Os dados bibliogrficos de Croton tetradenius so ainda mais escassos,
quando comparados aos de Croton linearifolius, demonstrando assim, a
importncia de estudos que visem avaliar suas diversas propriedades.
28
3 MATERIAIS E MTODOS
3.1 Plantas
3.1.1 Procedncia
Foram utilizadas no experimento espcies de Croton linearifolius e

Croton tetradenius. A identificao das espcies foi realizada por um
especialista e, posteriormente, a exsicata da primeira depositada no herbrio
da Universidade Estadual de Feira de Santana, e da segunda, no herbrio da
Universidade Estadual do Sudoeste da Bahia, sob os registros HUEFS 146620
e HUESB 3521, respectivamente.
As coletas de Croton linearifolius e Croton tetradenius foram realizadas
nos meses de novembro de 2010 e de abril de 2011, respectivamente, no
perodo matutino, na unidade de conservao Floresta Nacional Contendas do
Sincor, localizada no municpio de Contendas do Sincor, Bahia. Da pimeira
espcie citada foram coletados os caules, para posterior processamento e
obteno de extratos (Figura 4). Da segunda coletaram-se as folhas, tambm
para posterior extrao (Figura 5).
Figura 4. Caules de Croton linearifolius. Figura 5. Folhas de Croton tetradenius.
Fonte: Carvalho, K. S. 2013. Fonte: Carvalho, K. S. 2013.
3.1.2 Processamento dos materiais vegetais
Os caules de Croton linearifolius e as folhas de Croton tetradenius foram

pesados em uma balana semi-analtica e, posteriormente, levados para a
29
estufa de circulao de ar a 50C, durante 48 horas. Em seguida, com o caule,

procedeu-se a moagem atravs do moinho de facas, e com as folhas realizou-
se a triturao manualmente.
3.1.3 Preparao dos extratos
A partir do material modo do caule de Croton linearifolius, iniciou-se a

extrao com o Etanol P.A.1 a 95%. O extrato obtido, aps a filtrao foi
concentrado em evaporador rotatrio (Figura 6), e colocado em recipiente
aberto, temperatura ambiente at a completa evaporao do solvente.
Posteriormente, foram realizados os ensaios biolgicos.
Figura 6. Evaporador rotatrio utilizado para eliminao dos solventes.
Fonte: Carvalho, K. S. 2013.
Para a realizao do fracionamento do extrato etanlico dos caules de

Croton linearifolius partiu-se do extrato etanlico seco, o qual foi ressuspenso
em etanol e gua deionizada (7:3) e submetido partio lquido-lquido com
solventes de menor polaridade (hexano, diclorometnico e acetato de etila).
Aps a obteno de cada uma das fraes (hexnica, diclorometnica, acetato
de etila e hidroalcolica), as mesmas foram ensaiadas sobre larvas de terceiro
estdio de Aedes aegypti. Aps a extrao procedeu-se a realizao dos
ensaios biolgicos (Figura 7).
1,
Vetec Qumica Fina Ltda, Brasil.
30
Figura 7. Fluxograma do processo empregado para avaliao da atividade

larvicida do extrato etanlico dos caules de Croton linearifolius, bem como do
seu fracionamento.
CAULES
PERCOLAO
EXTRATO
ETANLICO
PROSPECO AVALIAO DA
FITOQUMICA ATIVIDADE LARVICIDA
FRACIONAMENTO
HEXNICA DICLOROMETNICA ACETATO HIDROALCOLICA

DE ETILA
AVALIAO DA
ATIVIDADE LARVICIDA
3.1.4 Extrao do leo essencial
O leo essencial foi extrado a partir das folhas de Croton tetradenius

(180,0 g) secas e trituradas, submersas em 2 litros de gua deionizada, por
hidrodestilao em um aparelho do tipo Clevenger modificado (Figura 8), na
temperatura de ebulio da gua, durante aproximadamente 3 horas.
31
Posteriormente, o leo foi seco atravs da adio de sulfato de sdio anidro

para retirar o excesso de gua e transferido, com o auxlio de uma pipeta
Pasteur, para frasco de vidro mbar e armazenado em freezer, para evitar
possveis perdas dos constituintes volteis, at o momento das anlises.
Figura 8. Aparelho tipo Clevenger modificado, utilizado para hidrodestilao do

leo essencial de C. tetradenius.
3.2 Ensaio biolgico
3.2.1 Estabelecimento e manuteno da colnia
Os ovos de Aedes aegypti foram obtidos atravs do Laboratrio de

Fisiologia e Controle de Artrpodes Vetores (LAFICAVE), da Fundao
Oswaldo Cruz (FIOCRUZ). Esses ovos foram depositados em vasilhas
plsticas (15,0 cm X 5,7 cm), cuja tampa era coberta por uma tela, contendo
gua deionizada na proporo, aproximadamente de 1000 ovos para 1 L de
gua deionizada e 1 g de alimentao (rao para peixe).
Posteriormente, acondicionados em cmara climatizada regulada a 27C
1C, com fotoperodo de 12 horas dirias. Aps algumas horas, era possvel
32
analisar a presena de larvas que, aps o quinto dia de vida, atingiram a fase
de pupa, as quais foram coletadas e transferidas para pequenos recipientes
plsticos e esses recipientes, por sua vez foram abrigados em gaiolas (26,0 cm
X 33,5 cm), para posterior emergncia.
Aps a emergncia dos adultos, machos e fmeas alimentaram-se com
soluo aucarada a 10%, sendo que uma vez na semana, as fmeas eram
alimentadas com sangue caprino, sob a temperatura de 37C (Figura 9),
atravs de uma fina membrana de silicone. Este sangue fora extrado e
armazenado em um vacutaneir que possua como anticoagulante, o citrato de
sdio. No terceiro dia aps o repasto sanguneo era estimulada a oviposio.
Figura 9. Repasto sanguneo das fmeas de Aedes aegypti.
3.2.2 Avaliao da atividade inseticida Teste preliminar
Com o objetivo de verificar potencial das espcies de Croton

linearifolius e Croton tetradenius, bem como a partir do resultado positivo
eleger as concentraes que seriam analisadas, realizou-se um pr-teste. Para
realizao da avaliao da atividade larvicida do extrato etanlico do caule de
Croton linearifolius, utilizou-se larvas de terceiro nstar. O Etanol foi usado
como solvente para solubilizao, juntamente com a gua deionizada na
proporo 6:4. Para o grupo controle usou-se etanol e gua deionizada na
proporo 6:4.
Nos ensaios biolgicos da atividade larvicida utilizou-se as
concentraes de 100 mg/mL, 50 mg/mL, 30 mg/mL, 20 mg/mL e 10 mg/mL,
33
obtidas a partir de uma soluo estoque de 1000 mg/ml. Foram utilizados no

pr-teste, duas repeties por tratamento, com dez larvas por repetio. As
observaes da mortalidade das larvas foram realizadas nos intervalos de 0,5,
1, 2, 4, 8, 16 e 24 horas, aps o incio do experimento. As larvas foram
consideradas mortas quando havia ausncia total de movimentos, mesmo
expostas a um estmulo mecnico.
Para a realizao da avaliao preliminar da atividade ovicida do leo
essencial, obtido a partir das folhas de Croton tetradenius, utilizou-se trs
concentraes 60,0 mg/mL, 30,0 mg/mL, e 15,0 mg/mL (Figura 10).
Figura 10. Avaliao da atividade ovicida preliminar do leo essencial de

Croton tetradenius sobre Aedes aegypti.
Foram utilizados 5 ovos por repetio, totalizando 5 repeties por

tratamento. Em cada tratamento, os ovos foram expostos s diferentes
concentraes do leo, por um perodo de 1 hora. Aps esse perodo, os ovos
foram retirados e lavados com 10 mL de gua deionizada, por 3 vezes e, ento,
distribudos em vasilhames plsticos (3,0 cm x 4,2 cm), contendo 5 mL de gua
deionizada, sendo o suficiente para encobrir os ovos.
Como solvente para solubilizao do leo essencial foi usado uma
soluo de Tween 80 e gua deionizada a 50%. Essa mesma soluo tambm
foi utilizada para o grupo controle. As observaes de ecloso das larvas foram
realizadas a cada 24 horas, durante 10 dias.
Os dados experimentais relativos ao percentual de ecloso das larvas
foram submetidos ao teste de Tukey, ao nvel de 5% de probabilidade.
34
3.2.3 Ensaio da atividade larvicida
Na avaliao da atividade larvicida do extrato etanlico e das fraes

obtidos a partir desse extrato foram utilizados cinco concentraes de 13,3
mg/mL, 6,7 mg/mL, 4,0 mg/mL, 2,0 mg/mL e 0,7 mg/mL, obtidas a partir de
uma soluo estoque de 400 mg/mL (Figura 11).
Figura 11. Avaliao da atividade larvicida dos extratos de Croton linearifolius

sobre Aedes aegypti.
Foram utilizadas 30 larvas por repetio, totalizando quatro repeties

por tratamento. As observaes da mortalidade das larvas foram realizadas
nos intervalos de 4 h, 8 h, 16 h e 24 h, aps o incio do experimento.
Como solventes para a solubilizao do extrato etanlico, e tambm
para o grupo controle, utilizou-se etanol e gua deionizada na proporo de
6:4. Para as fraes de acetato de etila, diclorometano, hexano e
hidroalcolica, bem como dos seus respectivos grupos controle, utilizou-se
dimetilsulfxido e gua deionizada, nas propores de 4:6, 4:6, 7:3, e 6:4,
respectivamente.
Os dados obtidos relativos ao percentual de mortalidade em relao ao
ensaio biolgico foram submetidos ao teste de Tukey, ao nvel de 5% de
probabilidade. Para a avaliao da Concentrao Letal 50 (CL50) foi utilizada a
anlise Probit. A comparao da CL50 do extrato etanlico e das fraes
obtidas do mesmo, foi realizada atravs do intervalo de confiana ao nvel de
95% de significncia.
35
3.3 Prospeco Fitoqumica
Para a realizao da prospeco fitoqumica do extrato etanlico de

Croton linearifolius, seguiu-se a metodologia preconizada por Matos (1988),
visando verificar, sobretudo, a presena dos seguintes metablitos: taninos,
antocianidinas, antocianinas, flavonides, leucoantocianidinas, catequinas,
flavonas, heterosdios cianognicos, flavonis, flavononis, xantonas,
flavononas, esterides, triterpenides, saponinas, cidos fixos fortes, resinas,
alcalides e bases quaternrias.
36
4 RESULTADOS E DISCUSSO
O peso fresco do caule de Croton linearifolius foi de 1.133 g e aps a

secagem foi de 1.030,5 g. Aps a extrao com o etanol a 95% obteve-se
167,0 g de extrato. Os pesos das fraes hexnica, diclorometnica, acetato de
etila, e hidroalcolica, obtidas a partir do extrato etanlico, foram 6,6 g, 4,5 g,
4,2 g e 10,3 g, respectivamente.
Quanto ao pr-teste realizado com o extrato etanlico do caule de
Croton linearifolius, ficou demonstrado o potencial txico do caule dessa
espcie sobre larvas de Aedes aegypti, bem como a necessidade de dar
prosseguimento aos ensaios biolgicos, com vistas obteno da
concentrao letal.
Nos testes da avaliao da atividade larvicida preliminar, aps 24 horas
de observao, as concentraes de 100 mg/mL e 50 mg/mL, apresentaram
um percentual de mortalidade de 100,0%. J na concentrao de 30mg/mL,
apresentou um percentual de mortalidade de 85,0%. Nas concentraes de
20mg/mL e 10mg/mL, as porcentagens de mortalidade foram de 50,0%, para
ambas. No grupo controle ocorreu 5,0% de mortalidade.
Em relao avaliao da atividade inseticida preliminar do leo
essencial, obtido a partir das folhas de Croton tetradenius, ficou evidenciado a
no atividade inseticida do leo essencial dessa espcie sobre os ovos de
Aedes aegypti. Assim, no foi dada continuidade avaliao ovicida.
As observaes da avaliao da atividade ovicida preliminar, revelaram
que nos trs primeiros dias, ocorreu um atraso significativo na ecloso das
larvas, quando comparadas as diferentes concentraes utilizadas com o grupo
controle. No quarto e quinto dias de observao, o percentual de ecloso larval,
na concentrao de 60 mg/mL, foi de 44,0% e 52,0%, respectivamente,
atuando de forma significativa, quando comparada com o grupo controle
(92,0% e 92,0%), sendo que as concentraes de 30 mg/mL (60,0% e 60,0%)
e 15 mg/mL (60,0% e 68,0%) no diferiram do grupo controle. Do sexto ao
dcimo dia no se observou diferena significativa entre as concentraes e
destas em relao ao grupo controle (Tabela 1).
37
Tabela 1. Percentual de ecloso das larvas de Aedes aegypti, cujos ovos foram
submetidos a diferentes concentraes do leo essencial, obtido das folhas de
Croton tetradenius.
CONCENTRAES Percentual de ecloso das larvas/dia de observao1
(mg/mL)
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10
60 0,0a 24,0a 32,0a 44,0a 52,0a 60,0a 68,0a 72,0a 84,0a 84,0a
30 4,0a 32,0a 40,0a 60,0ab 60,0ab 64,0a 68,0a 68,0a 76,0a 76,0a
15 0,0a 20,0a 28,0a 60,0ab 68,0ab 72,0a 72,0a 72,0a 76,0a 80,0a
CONTROLE 36,0b 84,0b 92,0b 92,0b 92,0b 92,0a 92,0a 92,0a 96,0a 96,0a
1
Mdias seguidas pela mesma letra, nas colunas, no diferem significativamente
pelo teste de Tukey, ao nvel de 5% de probabilidade.
Fonte: Carvalho, K. S. (2013).
Dessa forma, a avaliao ovicida preliminar indicou que seria necessria

uma concentrao elevada do leo essencial, superior a 60mg/mL, para se
alcanar um efeito considerado desejvel sobre os ovos de Aedes aegypti, o
que demandaria uma quantidade considervel de planta para se obter o leo
essencial.
Os resultados da avaliao da atividade ovicida preliminar, foram pouco
expressivos, possivelmente, em funo do ovo, representar a fase do ciclo
biolgico com maior resistncia s adversidades do meio, de modo a
necessitar de uma concentrao superior as utilizadas nos estgios larvais,
para obter um efeito ovicida, o que no impede, nesse sentido, a possvel
eficcia do leo essencial de Croton tetradenius, em outra fase do ciclo de vida
do Aedes aegypti. Para Rezende et al. (2008), essa caracterstica de
resistncia do ovo, deve-se presena de uma cutcula serosa, constituda de
quitina e lipdeos, os quais garantem a impermeabilidade do mesmo.
Vale ressaltar, que a coleta da planta realizou-se na Floresta Nacional
Contendas do Sincor, uma unidade de conservao de uso sustentvel, e a
demanda por uma quantidade significativa do vegetal, resultaria em uma
extrao impactante, do ponto de vista ambiental, tendo em vista que, a
mesma no produzida para tal fim.
Destaca-se tambm, que, o bioma Caatinga, local onde est inserida
essa unidade de conservao, vem sofrendo constantemente o processo de
38
degradao ambiental, em funo de diversos fatores tais como, prticas

agrcolas inadequadas, desmatamentos e processo erosivos (BRASILEIRO,
2011). Esse bioma o nico genuinamente brasileiro, e ao contrrio do que
se acreditava, possui uma grande biodiversidade, com alta taxa de endemismo,
sendo esta a mais rica do mundo, quando submetida s mesmas condies
edafoclimticas (SILVA et al., 2004). Assim, medidas de conservao da
biodiversidade da Caatinga devero ser tomadas, as quais no incluem a
retirada desmedida da vegetao nativa.
No que tange avaliao da atividade inseticida, com o extrato etanlico
do Croton linearifolius, sobre larvas de Aedes aegypti, realizada a partir da
confirmao, no pr-teste, da toxicidade do caule dessa espcie sobre larvas
de Aedes aegypti, essa demonstrou que o percentual de mortalidade das
larvas, com 4, 8, 16 e 24 horas de observao, foi significativamente maior na
concentrao de 13,3 mg/mL, tendo 11,67%, 24,17%, 43,33% e 65,0%,
respectivamente, no havendo diferena significativa nas demais
concentraes e no grupo controle, o qual no obteve mortalidade (Tabela 2).
Tabela 2. Percentual de mortalidade de larvas de terceiro nstar de Aedes

aegypti, em relao ao tempo de exposio s diferentes concentraes do
extrato etanlico dos caules de Croton linearifolius.
CONCENTRAES MORTALIDADE (%)1
(mg/mL)
4h 8h 16h 24h
13,3 11,67a 24,17a 43,33a 65,00a
6,7 3,33b 6,66b 10,83b 27,50b

4,0 1,66b 0,83b 5,00b 12,50bc
2,0 0,83b 0,00b 3,33b 9,16bc
0,7 0,83b 2,50b 10,83b 22,49bc
CONTROLE 0,00b 0,00b 0,00b 0,00c
1
Mdias seguidas pela mesma letra, nas colunas, no diferem
significativamente pelo teste de Tukey, ao nvel de 5% de probabilidade.
39
Este resultado similar aos obtidos por Silva et al. (2010), ao relatarem
que o extrato etanlico dos caules de Croton linearifolius, ocasionou 63,75% de
mortalidade em indivduos adultos de Cochliomyia macellaria, diferindo
significativamente do grupo controle. Tambm, Torres et al. (2001), obtiveram
63,3% de mortalidade das larvas de Plutella xylostella, quando alimentadas
com folhas de couve tratadas com extrato aquoso das folhas de Croton sp,
comprovando assim, a propriedade inseticida dessa espcie.
Lima et al. (2006), avaliando o potencial inseticida dos hidrolatos obtidos
da extrao do leo essencial dos caules e das folhas das espcies Croton
argyrophylloides, Croton nepetaefolius, Croton sonderianus e Croton zehntneri,
sobre larvas do terceiro estdio de Aedes aegypti, aps 24 horas do incio do
experimento, constataram que os hidrolatos de C. zehntneri e C. nepetaefolius
ocasionaram 100% de mortalidade das larvas, enquanto C. sonderianus e C.
argyrophylloides apresentaram variao quanto aos seus hidrolatos, um
percentual de 54% e 8%, para o caule, respectivamente, e para os hidrolatos
de folha foram 100% e 52%, respectivamente.
Aps o fracionamento do extrato etanlico percebeu-se um aumento na
efetividade da planta nas fraes diclorometnica e hexnica (Tabelas 3 e 4).
As fraes acetato de etila e hidroalcolica no se mostraram promissoras no
que diz respeito a sua eficcia sobre o Aedes aegypti (Tabelas 5 e 6).
Com relao a frao diclorometnica, com 4 e 8 horas de observao,
o percentual de mortalidade das larvas foi significativamente maior na
concentrao de 13,3 mg/mL, obtendo 16,67% e 44,17%, respectivamente
quando comparado as demais concentraes e ao grupo controle. Aps 24
horas de observao, no houve diferena significativa entre as concentraes,
6,7 mg/mL (95,00%) e 13,3 mg/mL (99,17%) sendo que a concentrao de
13,3 mg/mL foi significativamente mais ativa, quando comparada as
concentraes de 4,0 mg/mL (83,35%), 2,0 mg/mL (77,5%) e 0,7 mg/mL
(30,0%) e o grupo controle, no qual no houve mortalidade (Tabela 3).
No que diz respeito frao hexnica, a porcentagem de mortalidade
das larvas com 4, 8, 16 e 24 horas de observao foi significativamente maior
na concentrao de 13,3 mg/mL, (17,50%, 31,67%, 47,50% e 69,16%,
respectivamente), no havendo diferena significativa entre as demais
concentraes e o grupo controle, onde no houve mortalidade (Tabela 4).
40

aegypti, em relao ao tempo de exposio s diferentes concentraes da
frao diclorometnica obtida a partir do fracionamento do extrato etanlico dos
caules de Croton linearifolius.
(mg/mL)
FRAO
DICLOROMETNICA 4h 8h 16h 24h
13,3 16,67a 44,17a 87,50a 99,17a
6,7 6,67b 21,66b 69,17ab 95,00ab

4,0 1,67b 8,34bc 44,17bc 83,35bc
2,0 0,83b 3,33c 22,50cd 77,50c
0,7 0,00b 0,83c 10,00d 30,00d
CONTROLE 0,00b 0,00c 0,00d 0,00e
1
Mdias seguidas pela mesma letra no diferem significativamente pelo teste
de Tukey, ao nvel de 5% de probabilidade.

frao hexnica obtida a partir do fracionamento do extrato etanlico dos
(mg/mL)
FRAO HEXNICA
4h 8h 16h 24h
13,3 17,50 31,67a 47,50 69,16
6,7 5,00b 10,00b 17,50b 27,50b

4,0 3,33b 11,67b 18,33b 25,83b
2,0 3,33b 4,17bc 11,67bc 17,50b
0,7 1,67b 1,67c 3,33cd 5,83c
CONTROLE 0,00b 0,00c 0,00d 0,00c
1
Mdias seguidas pela mesma letra nas colunas, no diferem
Em relao a frao hidroalcolica, houve mortalidade das larvas

somente a partir das 16 horas. No houve diferena significativa no percentual
de mortalidade aps 16 horas de observao, entre as concentraes de 13,3
mg/mL (3,33%) e 6,7 mg/mL (0,83%), contudo a concentrao de 13,3 mg/mL
41
foi significativamente mais efetiva em comparao com as concentraes 4,0

mg/mL, 2,0 mg/mL, 0,7 mg/mL e o grupo controle, nos quais no apresentaram
mortalidade larval. Aps 24 horas de observao, as concentraes de 13,3
mg/mL (5,83%), 6,7 mg/mL (5,00%) e 4,0 mg/mL (5,00%), e 2,0 mg/mL
(2,50%), no diferiram significativamente entre si, mas a concentrao de 13,3
mg/mL foi significativamente mais ativa quando comparada a concentrao de
0,7 mg/mL e ao grupo controle, nos quais no houveram mortalidade (Tabela
5).

frao hidroalcolica obtida a partir do fracionamento do extrato etanlico dos
(mg/mL)
FRAO
HIDROALCOLICA 4h 8h 16h 24h
13,3 0,00 0,00 3,33 5,83
6,7 0,00 0,00 0,83ab 5,00ab
4,0 0,00 0,00 0,00b 5,00ab
2,0 0,00 0,00 0,00b 2,50ab
0,7 0,00 0,00 0,00b 0,00b
CONTROLE 0,00 0,00 0,00b 0,00b

1
Mdias seguidas pela mesma letra nas colunas, no diferem
A frao de acetato de etila no apresentou percentual de mortalidade

nos primeiros horrios (4, 8 e 16 horas) de observao. Aps 24 horas, no
houve diferena significativa entre as concentraes de 13,3 mg/mL (20,84%) e
6,7 mg/mL (9,17%), entretanto a concentrao de 13,3 mg/mL foi
significativamente maior quando comparada as concentraes de 4,0 mg/mL
(7,50%), 2,0 mg/mL (1,67%), 0,7 mg/mL (2,50%) e ao grupo controle (0,0%)
(Tabela 6).
42

frao acetato de etila obtida a partir do fracionamento do extrato etanlico dos
(mg/mL)
FRAO ACETATO
DE ETILA 4h 8h 16h 24h
13,3 0,00 0,00 0,00 20,84
6,7 0,00 0,00 0,00 9,17ab
4,0 0,00 0,00 0,00 7,50b
2,0 0,00 0,00 0,00 1,67b
0,7 0,00 0,00 0,00 2,50b
CONTROLE 0,00 0,00 0,00 0,00b

1
Mdias seguidas pela mesma letra, nas colunas, no diferem
Como explanado por Dutra et al. (2011), a realizao do fracionamento

do extrato etanlico obtido das folhas de Croton urucurana, demonstrou
diferentes propriedades. As fraes hexnica e acetato de etila apresentaram
atividade citotxica, frente ao microcustceo Artemia salina, alm da atividade
antibacteriana ou antifngica, enquanto, a frao de diclorometano exibiu
atividade tripanomicida.
Silva et al. (2009), verificaram que as fraes diclorometnica e acetato
de etila obtidas a partir do fracionamento do extrato metanlico da casca do
caule de Croton urucurana, quando incorporadas na dieta das larvas de
Anagasta kuehniella causaram 65% e 100% de mortalidade, respectivamente.
Contudo, o extrato metanlico no influenciou na taxa de sobrevivncia das
mesmas.
Sendo assim, conforme Shaalan et al. (2005), fraes isoladas de um
mesmo extrato podem ter diferentes atividades biolgicas, pois contm
diversos princpios ativos. No entanto, alguns compostos, quando testados de
forma isolada, so pouco eficientes, indicando efeito sinrgico entre os
componentes presentes no extrato, sugerindo que a associao destas
substncias a responsvel pela mortalidade obtida nos testes realizados.
43
Segundo Roel (2001), esse sinergismo de substncias vantajoso pois, para

os insetos, torna o processo de resistncia lento.
A anlise da concentrao letal das fraes diclorometnica e hexnica,
e do extrato etanlico, demonstraram que aps 24 horas de observao, com
uma concentrao de 1,135 mg/mL, 9,585 mg/mL e 17,423 mg/mL,
respectivamente obtm-se uma mortalidade de 50% de larvas de Aedes
aegypti (Tabela 7).
Tabela 7. Concentrao Letal 50 do extrato etanlico dos caules de Croton

linearifolius, bem como das fraes obtidas do mesmo, sobre larvas de terceiro
nstar de Aedes aegypti, com 24 horas de observao.
CONCENTRAO LETAL 50 (mg/mL)
FRAES E EXTRATO - 24 horas de observao -
CL Intervalo de Confiana
Diclorometnica 1,135 1,028 - 1,241
Hexnica 9,585 8,546 - 10,936
Etanlico 17,423 13,693 - 23,889
Quanto a sobreposio dos valores do intervalo de confiana

determinado para cada extrato e frao, verificou-se que o intervalo de
confiana da frao diclorometnica no sobrepe o da frao hexnica nem o
do extrato etanlico, destacando assim, o seu potencial larvicida quando
comparado aos demais.
Resultados semelhantes foram observados por Silva & Cmara (2007),
que constataram a eficincia inseticida de duas espcies do gnero Croton
sobre larvas de Plutella xylostella, aps 72 horas de observao. A partir do
extrato etanlico do caule de Croton jacobinensis e Croton sellowii obtiveram
uma concentrao letal mdia (CL50), com valores de 0,116 e 1,252 mg/mL,
respectivamente.
Embora a concentrao letal mdia da frao diclorometnica tenha
sido a melhor em relao s demais, CL50 menores foram encontradas para
outras espcies pertencentes famlia Euphorbiaceae. Rahuman et al. (2008),
constataram uma CL50 de 0,00879 mg/mL e 0,00425 mg/mL para Jatropha
curcas e Euphorbia tirucalli, respectivamente.
44
Vale ressaltar, que a Fundao Nacional de Sade, recomenda o uso

de 0,1 mg/mL do produto Abate 1G, para o controle larval do Aedes aegypti,
que se comparado a concentrao letal mdia das fraes obtidas, a
diclorometnica (1,135 mg/mL), embora tenha sido mais baixa, esta ainda
elevada. Entretanto, trata-se de um extrato bruto e no de uma substncia pura
como o temefs, ingrediente ativo presente no Abate 1G.
A prospeco fitoqumica realizada com o extrato etanlico obtido caule
de Croton linearifolius, revelou a presena de cido fixo forte, alcalides,
catequinas, esterides livres, flavonis, flavononas, resina, taninos
condensados e xantonas, bem como a ausncia de antocianidinas,
antocianinas, aglicona esteride e triterpenides, bases quaternrias,
cumarina, flavononis, heterosdios cianognicos, quinonas, saponinas e
triterpenodes (Tabela 8).
Tabela 8. Prospeco fitoqumica do extrato etanlico obtido dos caules de

Croton linearifolius.
Metablito Secundrio Extrato Etanlico

cidos fixos fortes +
Aglicona esteride e triterpenides -
Alcalides +
Antocianidinas -
Antocianina -
Bases quaternrias -
Catequinas +
Cumarina -
Esterides livres +
Flavonis +
Flavanonis -
Flavanonas -
Flavonas +
Heterosdeo cianognicos -
Leucoantocianidinas -
Quinonas -
Resina +
Saponinas -
Taninos condensados +
Triterpenides -
Xantona +
1
Resultado positivo (+), Resultado negativo (-).
45
Esses dados corroboram com o estudo realizado por Silva et al. (2010),
nos extratos diclorometnico e hexnico do caule de Croton linearifolius,
obtidos a partir do fracionamento do extrato etanlico, nos quais foi detectada a
presena de substncias secundrias como esterides, bem como somente na
frao diclorometnica, identificaram alcalides, flavonides e taninos, o que
pode est contribuindo para a eficaz atividade larvicida das mesmas, sobretudo
da frao diclorometnica.
Os alcalides constituem em um vasto grupo de compostos
nitrogenados, com grande diversidade estrutural, possuindo atividades
biolgicas, tais como antioxidante e antiinflamatria (SHAHEEN et al., 2005).
Segundo Chiesa e Moyna (2004), os alcalides esteroidais, frequentemente
so substncias txicas os quais apresentam efeito fagoinibidor em diversos
insetos.
As flavononas e flavonis, encontrados no extrato etanlico dos caules
de C. linearifolius desse estudo, representam subclasses de flavonides que
compreendem os compostos fenlicos, de baixo peso molecular, os quais
detm de propriedade antiparasitria que pode ser atribuda a alteraes na
atividade de vrias enzimas e/ou nos processos metablicos dos parasitos
(ROTELLI et al., 2003; KERBOEUF et al., 2008).
Estudos recentes mostram tambm a propriedade antiviral dos flavonis
de modo a agirem com um evento no incio do ciclo de vida do vrus
(MALHOTRA et al., 1996). Enquanto, as flavononas possuem atividade
antifngica, praguicida e antibacteriana alm de proporcionarem proteo
planta contra os raios ultravioleta (HARBONE; WILLIAMS, 2000).
Os taninos so compostos fenlicos, solveis em gua, e capazes de
precipitar protenas. Conforme Simes et al. (2001), os taninos condensados
apresentam atividade txica para os insetos, devido habilidade de ligar-se s
protenas digestivas e outras macromolculas, como tambm citado por Aerts
et al. (1991), e tambm propiciam efeito antimicrobiano e antifngico. Nas
plantas e frutos, os taninos proporcionam sabor adstringente, o que lhes
garante um mecanismo de defesa contra os fitfagos, tornando-se frutos e
folhas impalatveis para os mesmos (MONTEIRO et al., 2005).
As descarboxilaes precursoras dos triterpenos, os quais representam
outra classe de metablitos secundrios, produzem os esterides livres que
46
possuem carter lipoflico. Eles apresentam atividades farmacolgicas, assim

como o efeito antiinflamatrio e o analgsico (SILVA, 2005). Alm disso, os
esterides so utilizados na indstria farmacutica para confeco de
medicamentos com propriedades anticoncepcionais, esteroidais e
anabolizantes (OLIVEIRA; OLIVEIRA, 2012).
Os cidos fixos fortes so representados, sobretudo, por cidos graxos
que exibem propriedades inseticidas e antibiticas sobre formigas e seu fungo
simbionte, respectivamente (FERNANDES et al., 2002).
Dentre as substncias pertencentes ao grupo de polifenis, destacam-se
as catequinas, que so compostos incolores e hidrossolvis, os quais
oferecem amargor e adstringncia. So conhecidas devido ao seu efeito
quimioprotetor, alm de possurem atividades antioxidantes, anticarcinognicas
e antitumorais (HO et al., 1992; MATSUBARA; AMAYA, 2006).
As resinas apresentam importantes propriedades farmacolgicas como
laxante e purgativo em priso de ventre e constipao crnica. Alm disso,
resinas e diterpenos presente em Croton conhecido como sacaca, utilizado
na terapia do cncer (LIMA et al., 2006; HIRUMA- LIMA et al., 2002).
Metablitos secundrios derivados da dibenzopirona envolvem as
substncias xantonas. Elas possuem inmeras atividades farmacolgicas
potentes e relevantes, sobretudo antidepressivas. Alm disso, xantonas
possuem atividades antibacteriana, antifngica e antimalrica. Tambm exibem
atividades hepatoprotetora e hipoglicmica (ROCHA et al., 1994; BASNET et
al., 1994; FERNANDEZ et al., 1995).
Diversos autores ressaltam a riqueza da famlia Euphorbiaceae, em
relao diversidade na produo de metablitos secundrios, tais como os
terpenos, flavonides, alcalides, cumarinas, glicosdeos cianognicos e
taninos (BITTNER et al., 2001). As atividades biolgicas descritas para
espcies dessa famlia so as mais variadas.
Os constituintes qumicos encontrados no gnero Croton so os mais
diversos, como alcalides, terpenides (LIMA; PIRANI, 2008), flavonides,
(RANDAU et al., 2004), saponinas (VERA et al., 1990) e taninos (MATIAS et
al., 2010). Conforme Salatino et al. (2007), os terpenides so abundantes no
gnero, sobretudo os diterpenos os quais possuem atividade biolgica, e
47
constituem prottipos para a sntese de compostos bioativos, a exemplo dos

diterpenos casbanos, que exibem atividade anticancergena e antibacteriana.
A abundncia de distintas classes de alcalides, confere a esse gnero
grande importncia mdica e torna-o fonte promissora para estudos
fitoqumicos e farmacolgicos (XU et al., 1998). Alm disso, o isolamento e a
elucidao dessas substncias ativas podem auxiliar no discernimento de
espcies do gnero Croton, haja vista que, o mesmo possui numerosas
similaridades, bem como o grande nmero de espcies (RANDAU et al., 2004).
No que tange ao efeito inseticida do presente gnero, Lima et al. (2006),
comprovaram atividade larvicida de hidrolatos de quatro espcies de Croton
contra larvas de Aedes aegypti. Os autores detectaram a presena de
fenilpropanides hidrossolveis em duas das espcies que apresentaram maior
atividade. Alm disso, Croton zenhtneri demonstrou elevada atividade contra
larvas de Aedes aegypti, cujo constituinte bioativo foi o anetol, um
fenilpropanide (MORAIS et al., 2006).
A caracterstica inseticida do gnero Croton, segundo Almeida et al.
(1999), est nas suas sementes. Silva et al. (2010), demonstraram efeito
inseticida, sobre indivduos adultos de Cochliomyia macellaria, a partir do
extrato etanlico de Croton linearifolius, no qual foi identificado a presena de
esterides, bases quaternrias, taninos e acares redutores.
Alexander et al. (1991), isolaram de Croton linearis, diterpenos, os quais
apresentaram efeito inseticida contra o gorgulho da batata-doce, Cylas
formicarius elagantulus, causando sintomas tpicos de inseticidas neurotxicos,
uma vez que, os terpenides, conforme Viegas Junior (2003), exibem notvel
potencial inseticida.
Os compostos cis-dehidrocrotonina e trans-dehidrocrotonina, os quais
representam subclasses de terpenides, foram isoladas de Croton cajucara
tendo os mesmos apresentado atividade contra o crescimento da lagarta-
rosada Pectinophora gossypiela (Saunders) e da lagarta-da-ma Heliothis
virescens (Fabricius), em dieta artificial (KUBO et al., 1991).
Assim, diversos estudos comprovam a atividade inseticida das espcies
pertencentes ao gnero Croton, bem como a associao dessa atividade, com
os metablitos secundrios, produzidos pelas mesmas. Ressaltando que, no
presente estudo foi realizada apenas uma prospeco fitoqumica preliminar de
48
Croton linearifolius, e que a realizao futura de um estudo fitoqumico, tanto

com o extrato etanlico, bem como das suas diferentes fraes, poder
conduzir a identificao dos constituintes qumicos e correlacionar suas
estruturas com a atividade larvicida.
49
5 CONCLUSES
O leo essencial obtido a partir das folhas de Croton tetradenius no

apresentou atividade inseticida sobre os ovos de Aedes aegypti. O extrato
etanlico do caule de Croton linearifolius, apresentou efeito txico sobre as
larvas do Aedes aegypti.
A partir do fracionamento do extrato etanlico, a frao diclorometnica
apresentou-se potencialmente promissora no que diz respeito formulao de
um larvicida alternativo para o controle do Aedes aegypti, sendo perceptvel a
necessidade de dar prosseguimento aos estudos, visando identificao do(s)
metablito(s) responsvel (is) pela ao inseticida.
A prospeco fitoqumica permitiu detectar a presena de cidos fixos
fortes, alcalides, catequinas, esterides livres, flavonis, flavononas, resinas,
taninos condensados e xantonas no extrato etanlico.
50
6 REFERNCIA BIBLIOGRFICA
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UNIVERSIDADE ESTADUAL DO SUDOESTE DA BAHIA

DEPARTAMENTO DE ESTUDOS BSICOS E INSTRUMENTAIS

AVALIAO DA ATIVIDADE INSETICIDA DE EXTRATOS DE

KARINE DA SILVA CARVALHO

KARINE DA SILVA CARVALHO

AVALIAO DA ATIVIDADE INSETICIDA DE EXTRATOS DE

Orientador: Sandra Lcia da Cunha

632.9 Carvalho, Karine da Silva.

. - Itapetinga: UESB, 2013.

Monografia apresentada Universidade Estadual do

1. Extratos de Croton - Inseticidas botnicos - Aedes aegypti.

CDD (21): 632.95

Adalice Gustavo da Silva CRB/5-535

Bibliotecria UESB Campus de Itapetinga-BA

ndice Sistemtico para Desdobramento por Assunto:

1. Extratos de Croton - Inseticidas botnicos - Aedes

2. Dengue - Aedes aegypti

3. Plantas medicinais - Biodiversidade

UNIVERSIDADE ESTADUAL DO SUDOESTE DA BAHIA UESB

Ttulo: Avaliao da atividade inseticida de extratos de Croton linearifolius Mull.

Aprovada como parte das exigncias para aprovao na disciplina de Iniciao

Data de realizao: 06 de setembro de 2013.

Dedico a minha me Ilza da Silva

Valeu a pena? Tudo vale a pena

Carvalho, K. S. Avaliao da atividade inseticida de extratos de Croton

As plantas produzem uma diversidade de constituintes qumicos, o que permite

Palavras-chave: Biodiversidade, Inseticidas botnicos, Plantas medicinais.

Keywords: Biodiversity , botanical insecticides , medicinal plants .

Figura 1. Ciclo de vida do Aedes aegypti, a: Ovos, b: larvas, c: pupas

Figura 2. Croton linearifolius.................................................................. 25

Figura 3. Croton tetradenius................................................................... 26

Figura 4. Caules de Croton linearifolius................................................. 28

Figura 5. Folhas de Croton tetradenius.................................................. 28

Figura 6. Evaporador rotatrio utilizado para eliminao dos solventes 29

Figura 7. Fluxograma do processo empregado para avaliao da

Figura 8. Aparelho tipo Clevenger modificado, utilizado para

Figura 9. Repasto sanguneo das fmeas de Aedes

Figura 10. Avaliao da atividade ovicida preliminar do leo essencial

Figura 11. Avaliao da atividade larvicida dos extratos de Croton

Tabela 1. Percentual de ecloso das larvas de Aedes aegypti, cujos

Tabela 2. Percentual de mortalidade de larvas de terceiro nstar de

Tabela 3. Percentual de mortalidade de larvas de terceiro nstar de

Tabela 4. Percentual de mortalidade de larvas de terceiro nstar de

Tabela 5. Percentual de mortalidade de larvas de terceiro nstar de

Tabela 6. Percentual de mortalidade de larvas de terceiro nstar de

Tabela 7. Concentrao Letal 50 do extrato etanlico dos caules de

Tabela 8. Prospeco fitoqumica do extrato etanlico obtido dos

2.1 Aedes aegypti, Linnaeus 1762, (Diptera, Culicidae)...................... 15

2.1.1 Morfologia geral e taxonomia.................................................. 15

2.1.2 Ciclo de vida e transmisso.................................................... 16

2.1.3 Distribuio geogrfica e ocorrncia....................................... 19

2.1.4 Importncia sanitria............................................................... 19

2.2 Gnero Croton............................................................................... 21

2.2.1 Croton linearifolius Mull. Arg. ................................................. 24

2.2.2 Croton tetradenius Baill. ......................................................... 25

3.1.2 Processamento do material vegetal......................................... 28

3.1.3 Preparao dos extratos.......................................................... 29

3.1.4 Extrao do leo essencial...................................................... 30

3.2 Ensaio biolgico............................................................................ 31

3.2.1 Estabelecimento e manuteno da colnia............................. 31

3.2.2 Avaliao da atividade inseticida - Teste preliminar................ 32

3.2.3 Ensaio da atividade larvicida................................................... 34

3.3 Prospeco fitoqumica.................................................................. 35