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Prctica N 2

OSMOSIS EN SISTEMAS BIOLGICOS

1.1 OBJETIVO:
Es demostrar al estudiante el fenmeno de smosis que ocurre en los seres vivos mediante
experimentos sencillos. As como los efectos que la clula presenta frente a un estrs osmtico
mediante la adicin de sales y azcares en el agua.

1.2 INTRODUCCIN:
Los fenmenos de difusin son muy importantes en los procesos vitales de los seres vivos.
Por ejemplo, (i) ellos hacen posible la utilizacin del oxgeno (O2 ) y la eliminacin del gas
carbnico (CO2 ) en la respiracin celular, (ii) ellos explican el paso de sustancias que nece-
sita la clula (hacia adentro o afuera de ella) para llevar a cabo toda una serie de funciones
encaminadas a mantener al ser vivo en perfecto funcionamiento. Entre estas funciones se
puede mencionar fenmenos como la asimilacin, digestin y la excrecin, que en conjunto se
conoce como metabolismo celular y que depende de gran parte de los fenmenos de difusin.

La smosis es un proceso de difusin simple en el cual la sustancia que se transporta es el

agua. En dicho proceso, el agua pasa a travs de una membrana semipermeable, como la
membrana celular, de un medio de menor concentracin de soluto a otro de mayor con-
centracin de soluto. As, las clulas intercambian agua con su entorno con el fin de regular
el equilibrio osmtico.

De acuerdo al tipo de medio o entorno en que la clula se encuentre, la smosis vara experi-
mentando la clula estrs osmtico. Hay tres tipos de medios (soluciones) en donde la clula
est sumergida. Siendo estos:

Solucin hipertnica, cuando la solucin posee una concentracin de sustancia (soluto)

ms elevada que el interior de la clula, trayendo como consecuencia que la clula
pierde agua a travs de la membrana y por ende, la clula se deshidrata.

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Solucin hipotnica, cuando su concentracin de sustancia (soluto) es menor que la del

interior de la clula, en este caso el agua ingresa dentro de la clula y por lo tanto, la
clula se hincha.

Solucin isotnica, tienen igual concentracin de sustancias que el interior de la clula,

en este caso el agua ingresa y sale de la clula con la misma velocidad.

Por ello, la smosis del agua es un fenmeno biolgico de suma importancia para el metabolismo
celular de los seres vivos, cuya funcin es de mantener hidratada la membrana celular. Adi-
cionalmente, a nivel industrial, esta propiedad de disminucin del agua en las soluciones es
la base de algunos sistemas de conservacin de alimentos.

Esta prctica de laboratorio tiene como finalidad demostrar el proceso de smosis mediante
experimentos sencillos e identificar, con ejemplos sencillos, en que tipos de industria se em-
plean este proceso. Asimismo, estudiar los efectos de las clulas vegetales y humanas en
diferentes tipos de soluciones (isotnicas, hipotnicas e hipertnicas). Previamente, a la
observacin de las muestras en el microscopio se debe haber ledo el ANEXO,
para el buen manejo y uso de ste.

1.3 PARTE EXPERIMENTAL:

1.3.1 MATERIALES
Luna de reloj

Placa Petri

Jeringas estriles con aguja

Pipeta Pasteur y goma

Cuchillo, Pelador

Algodn

1.3.2 REACTIVOS
Solucin de NaCl 0.1%

Solucin de NaCl 10%

Suero fisiolgico (NaCl 0.9%)

Glucosa 10%

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Glucosa 1%

Alcohol antisptico

1.3.3 EQUIPOS
Microscopio ptico

Portaobjetos

Cubreobjetos

1.3.4 MUESTRAS BIOLGICAS

Papa cruda

Papa cocida

Elodea (planta acutica)

Sangre humana

1.3.5 PROCEDIMIENTO
smosis en membranas vegetales

a. Traer dos papas, una cocida y la otra cruda, y pelar ambas papas.

b. Con un cuchillo, cortar la papa cruda y cocida a la mitad (en dos partes iguales).

c. Tomar un trozo de cada papa y cortar la parte redonda del extremo.

d. Hacer un agujero pequeo en el punto medio de cada mitad de la papa, sin llegar al fondo,
usando un pelador.

e. Verter agua, en proporciones iguales, en dos placas Petri.

f. Poner las bases de la mitad de cada papa en las placas Petri con agua.

g. Poner la mitad de una cucharita de sal de mesa en el agujero de cada papa.

h. Dejar la muestra reposar por dos horas.

i. Dibujar (si fuera el caso) y anotar las observaciones en la Tabla 1.1 para cada caso. En
la discusin de resultados, explicar que ocurre.

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Efecto de la concentracin del medio sobre clula vegetal y humana.

CLULA VEGETAL

a. En tres lunas de reloj (limpios y bien etiquetados), adicionar 2 ml de agua de pecera,

agua desionizada y solucin NaCl 10% respectivamente.

b. Con la mano, sacar tres hojas pequeas y finas de la planta acutica Elodea y agregarlas
a cada luna de reloj.

c. Dejar en reposo por espacio de 20 minutos.

d. Extraer la muestra con una pinza y colocarla en el portaobjeto, encima de sta se coloca
el cubreobjeto, y ver las muestras en el microscopio ptico.

e. Dibujar la forma de la clula vegetal y anotar las observaciones para cada caso en la Tabla
1.2. Explicar que efectos la solucin produce a la clula.

CLULA HUMANA

f. Para obtener la sangre, hay que utilizar la aguja de una jeringa estril y nueva (para evitar
contaminacin o infeccin). Primero, desinfectar con alcohol la yema del dedo, enseguida
pinchar la yema con la aguja y haciendo presin poner una gota de sangre en el portaobjeto
(extremo inferior) y hacer una extensin (frotis), como lo indicar la profesora.

f. En el centro del portaobjeto, adicionar 1 a 2 gotas de las soluciones de suero fisiolgico,

NaCl 0.1% y NaCl 10 %, y dejar reposar por espacio de 20 minutos.

f. Dibujar la forma de los glbulos rojos y anotar las observaciones para cada caso. En la
parte de discusin de resultados, explicar que efectos la solucin produce a la clula.

f. Finalmente, hacer el mismo procedimiento con solucin de glucosa para la clula vegetal
y humana, anotar las observaciones microscpicas en laTabla1.2.

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1.4 ANLISIS Y OBSERVACIONES DE LOS RESUL-

TADOS

Table 1.1: Identificacin del fenmeno de smosis

PAPA CRUDA PAPA COCIDA

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Table 1.2: Efecto de la concentracin del medio sobre la clula

PLANTA ELODEA PLANTA ELODEA PLANTA ELODEA

NaCl 0.1% muestra original NaCl 10%

PLANTA ELODEA PLANTA ELODEA PLANTA ELODEA

Glucosa 1% muestra original Glucosa 10%

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ANEXO

MICROSCOPIO PTICO

El microscopio ptico y compuesto es un aparato que aumenta la imagen de los objetos y

nos permite observar lo que es invisible para el ojo humano. Su funcin es de amplificar la
imagen del objeto, para analizar la estructura, forma y tamao de diferente tipo de muestras.
Tiene dos partes: una ptica que sirve para observar y la otra mecnica que sostiene a la
parte ptica (Figura 1).

La parte ptica del microscopio consta de:

Ocular, es una lente o en algunos casos son dos lentes (una para cada ojo) situada
cerca del ojo del observador, cuya funcin es visualizar la muestra.

Objetivo, es una lente situada cerca del objeto que se quiere observar, cuya funcin es
aumentar el tamao de la muestra a observar.

Condensador, es un dispositivo que capta los rayos de luz y los concentra sobre la
muestra.

Diafragma, es un dispositivo que est unido al condensador, cuya funcin es graduar

la entrada de la luz que llega al condensador.

Foco de luz o espejo, como su nombre lo dice puede ser un foco o espejo cuya funcin
es iluminar la muestra.

La parte mecnica del microscopio consta de:

Tubo ptico, donde se encuentra ubicado el ocular.

Brazo o asa, parte que sostiene el tubo ptico.

Revlver, parte mvil o giratoria que sostiene el objetivo.

Platina, superficie que soporta el portaobjetos.

Pie o soporte, sirve como base del microscopio.

Tornillo macromtrico, sirve para obtener un primer enfoque de la muestra, permi-

tiendo desplazamientos rpidos de las lentes.

Tornillo micromtrico, sirve para obtener enfoques precisos de la muestra, permitiendo

desplazamientos suaves de las lentes.

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Figure 1.1: Partes del microscopio ptico

LIMPIEZA, MANEJO Y USO DEL MICROSCOPIO

Acudir a la sala donde se ubican los microscopios, mirar el microscopio asignado a

usted, ubicar y describir las partes que lo conforman (Figura 1).

Verificar si el microscopio sobre la mesa de trabajo presenta alguna irregularidad (mal

estado del cable, falta de objetivos, etc.) y si fuera el caso, notificarlo a la profesora.

Comprobar que las lentes del ocular y de los objetivos estn limpios. Si no fuera el
caso, limpiar cuidadosamente con papel especial para ptica o un bulbo inyector de
aire. NO TOCAR las lentes con los dedos.

Limpiar la parte mecnica con un pincel de cerdas gruesas.

Conectar el microscopio a la toma de corriente, con el objetivo de menor aumento en

posicin de empleo.

Colocar la preparacin de la muestra sobre la platina y sujetarla con las pinzas.

Enfocar de la siguiente manera:

a. Acercar al mximo la lente del objetivo a la preparacin de muestra, empleando

para ello el tornillo macromtrico. No realizar dicha operacin mirando por
el ocular, pues se corre el riesgo de clavar el objetivo en la preparacin con el
consiguiente destrozo de ambos.

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b. Luego, con el tornillo micromtrico, aqu si se gira el tornillo observando por el

ocular hasta obtener un enfoque ntido de la imagen.

Una vez, enfocado la imagen, pasar al objetivo de mayor aumento (por ejemplo: 40x).
Subir ligeramente el condensador. La imagen debe estar casi enfocada, afine el foco con
el tornillo micromtrico. Si la imagen no est ni medianamente enfocada, es preferible
volver a un enfoque con el objetivo de menor aumento.

Empleo del objetivo de inmersin (100x):

a. Girar el revlver hacia el objetivo de inmersin dejndolo a medio camino entre

ste y el objetivo de 40x.
b. Colocar una gota de aceite de inmersin sobre el cubreobjetos (si la muestra es
un extendido fijado, coloque la gota de aceite directamente sobre la lmina).
c. Terminar de girar el revlver hasta la posicin del objeto de inmersin (100x),
asegurarse de que ste no toque la preparacin.
d. Enfocar cuidadosamente con el tornillo micromtrico. Recuerde que la distan-
cia entre el objetivo y la preparacin es mnima.
e. Una vez que se ha puesto el aceite de inmersin sobre la preparacin de la muestra
ya no puede volver a colocar los objetivos de menor y mayor aumento (10x,
40x) sobre ese campo. Por lo tanto, si desea enfocar otro campo, debe retirar
el objetivo de inmersin girando el revlver hacia el objetivo de menor aumento,
seleccionando otro campo y empezando a enfocar desde ste ltimo.
f. Al finalizar la observacin de una preparacin, y antes de retirarla de la platina,
se debe colocar el objetivo de menor aumento. Nunca retire la preparacin
con el objetivo de inmersin en posicin de observacin.
g. Retirar la preparacin y limpie el objetivo de inmersin cuidadosamente con un
papel especial para ptica. Comprobar tambin que el objetivo de 40x est limpio.

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